Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Информационно-морфологический анализ системы эпителий - соединительная ткань на модели опухолевых процессов эндометрия человека

ВАК РФ 03.00.25, Гистология, цитология, клеточная биология

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Прочуханова, Анна Ростиславовна

Список сокращений.

Введение.

Глава 1. Обзор литературы.

1.1 История вопроса.

1.2 Биология развития о взаимодействии эпителиев и соединительной ткани.

1.3 Морфометрический, гистохимический и информационный анализ эпителиев и тканей внутренней среды.

1.4 Теоретическое обоснование возможности количественной оценки состояния системы эпителий - соединительная ткань.

Глава 2. Материал и методика.

Глава 3. Результаты собственных исследований.

Этап 1. Информационная оценка состояния системы "эпителий - соединительная ткань" эндометрия при различных патологических процессах с построением модельной базы данных.

3.1.1. Разработка алгоритма классификации клеток эпителия и стромы эндометрия.

3.1.2. Построение комплекса признаков и анализ их информативности.

3.1.3. Построение модельного варианта базы данных.

Этап 2. Построение диагностической системы на базе клинической лаборатории.

3.2.1. Изменения в алгоритме обработки изображений и в выборе исходных признаков

3.2.2. Анализ информативности нового комплекса признаков и построение диагностикума.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Информационно-морфологический анализ системы эпителий - соединительная ткань на модели опухолевых процессов эндометрия человека"

При всем многообразии взаимоотношений структурных элементов в системе эпителий-соединительная ткань (СЭСТ), данные многих исследователей позволяют наиболее обобщенно осмыслить это многообразие как обмен информацией (Белоусов JI.B. 1987; Чайковский Ю.В. 1990; Ettinger L. et al. 1992; Gordon J.I. et al. 1997). Ha самых ранних этапах первичной дифференцировки тканей организма известны и широко исследуются межтканевые взаимодействия развивающихся эпителиев и мезенхимы (Cunha G. et al. 1989; Sakakura Т. 1991; Гилберт С. 1995; Park et al. 1998). На более поздних этапах онтогенеза позиционная информация (микроокружение) также играет важнейшую роль в формообразовании и поддержании необходимой стабильности жизненных проявлений отдельных клеток и клеточных популяций (Гурвич А.Г. 1944; Заварзин А.А. 1976; Чертков И.Л. 1984; Альберте Б. с соавт. 1996).

Проблема поддержания стабильности клеточных и тканевых взаимоотношений имеют как общебиологический, так и медицинский аспекты, которые теснейшим образом взаимосвязаны. Основы исследования межтканевых взаимодействий были заложены в трудах выдающихся ученых первой половины 20 века - А.А. Заварзина, И.И. Шмальгаузена, В.Г. Гаршина, Н.Г. Хлопина, Ч.Чайльда, П.Вейса.

Работы этих авторов, как и современные клинико-морфологические и экспериментальные данные (Саркисов Д.С. 1977; Прочуханов Р.А. 1985; Aalto M. 1988; Sakakura T. 1991; Рыжавский Б.Я., Ковальский Г.Б. 1992; Naylor M., Balkwill F. 1996), свидетельствуют о том, что дисбаланс во взаимодействии элементов системы эпителий - соединительная ткань (в системе гисто-гематического барьера), у высших позвоночных и человека, может служить одной из главных причин возникновения злокачественных опухолей эпителиального происхождения. Решение проблем ранней диагностики нарушений основных элементов гистогенеза, а именно клеточной пролиферации, дифференцировки, интеграции и их взаимоотношений требует, на наш взгляд, выявления признаков, отражающих степень устойчивости во взаимодействиях компонентов, составляющих систему эпителий - соединительная ткань.

Долгое время понимание необходимости системного анализа взаимоотношений между эпителиями и соединительной тканью в норме и в условиях развития патологических процессов наталкивалось на определенные методические трудности.

Современная информатика, включающая в себя анализ изображений, многомерную статистику в комплексе с гистологией и гистохимией, позволяет морфологам по-новому решать проблемы нормы и патологии онтогенеза (Леонтюк А.С. 1998; Автандилов Г.Г. 1999; Bibbo M. et al. 1986, 1989; Cor A. et al. 1992; Jaggi et al. 1988; Omerod M.G et al. 1992; Polak J.M. 1992; Tandon et al. 1992; Thunnissen F.B. et al. 1992; Wang W. et al. 1992). Применение новых информационных технологий имеет прямой выход в практику в связи с остро стоящими вопросами диагностики опухолей, особенно на ранних этапах их формирования (Baak J. 1991; Susnik В. 1994;

Баженов С.M., Дубенская Л.И. 1999; Гарлоев P.A., Автандилов Г.Г. 2000). Согласно данным литературы (Прочуханов P.A. 1985; Рыжавский Б.Я., Ковальский Г.Б. 1992 ; Прочуханов P.A. 1993; Федосенко К.В. с соавт. 1999), тканевой комплекс - гисто-гематический барьер (ГГБ), который служит структурной основой любого органа и отражает морфологическое единство - целостность организма, может быть представлен в виде "модуля" информации о состоянии органа. Мы полагаем, что подобная информация может быть оценена количественно с помощью комплекса признаков, характеризующего взаимодействия основных компонентов ГГБ -клеток эпителия, свободных клеток стромы и клеток сосудистого эндотелия с точки зрения устойчивости органа как системы.

Эндометрий, по своим биологическим особенностям, является интересным и практически важным объектом для количественного анализа многообразных вариантов взаимоотношений клеток эпителия и соединительной ткани в норме и в условиях развития патологических процессов. На современном этапе развития диагностики в онкоморфологии раннее распознавание злокачественных опухолей остается острой проблемой (Baak J.P.I. 1991; Burger G. et al. 1981; Raikhlin N.T. et al. 1992; Tandon A.K. 1992). Но наметившийся в морфологии интерес к изучению тканей, граничащих с узлом или полем злокачественной опухоли, (зон так называемого "фонового процесса"), в пределах органа, показывает возможность улучшить ситуацию (Finch R.R. 1971; Montag A.G. et al. 1989, 1991; Haroske G. et al. 1990; Ngoi et al. 1990; Susnik et al. 1995). Фоновый процесс проявляется на разных уровнях организации биологической структуры и может по времени сопутствовать или предшествовать возникновению очагов рака. В каждом конкретном случае фоновый процесс может выглядеть по-разному - от морфологически интактных тканей, клетки которых, однако могут быть трансформированы на молекулярном уровне, до картин очевидной гиперплазии или атрофии (Головин Д.И. 1982). Гиперплазия с признаками атипии клеток (дисплазия) большинством авторов трактуется как предрак (Baak J.P.I. 1991; Kochiyama М et al. 1998). Гиперплазия без признаков дисплазии (доброкачественная опухоль) представляет большой интерес с точки зрения прогноза поведения тканевого комплекса ГГБ, то есть с точки зрения устойчивости системы эпителий - соединительная ткань, поскольку может в некоторых случаях трансформироваться в злокачественную опухоль. Диагностика патологических процессов в эндометрии по соскобу полости матки представляет значительные трудности, так как эндометрий является одной их наиболее динамичных структур организма, быстро реагирующей на гормональные влияния изменениями в строении желез. Более того, дисгормональные гиперплазии эндометрия могут обладать разными биологическими особенностями при сходной морфологической картине. При возникновении опухоли на фоне выраженной пролиферации эпителия трудно бывает визуально выделить группы или отдельные малигнизированные клетки (Прянишников В.А. 1979; Ганина К.П. с соавт. 1990). Видимо поэтому, данные литературы по ранней диагностике опухолей эндометрия крайне немногочисленны.

Исходя из изложенных выше положений, можно сформулировать цель и задачи данной работы.

Цель работы:

Изучить и провести информационно-морфологический анализ состояния системы эпителий - соединительная ткань, с точки зрения устойчивости, на модели опухолевых процессов эндометрия человека.

Задачи работы:

1. Разработать алгоритм анализа изображений клеток эпителия и соединительной ткани (стромы) эндометрия.

2. Создать комплекс количественных признаков, содержащий информацию о степени устойчивости системы эпителий - соединительная ткань в эндометрии.

3. Проанализировать информационную ценность, как отдельных признаков, так и комплекса в целом, для классификации состояний гисто-гематического барьера эндометрия.

4. Разработать способ количественного описания состояния гисто-гематического барьера для трех, выбранных в качестве моделей патологических процессов эндометрия: железисто-кистозной гиперплазии, полипов эндометрия и фонового изменения эндометрия при железистом раке.

5. Сформировать модельную базу данных - классификатор, позволяющий диагностировать злокачественные новообразования по состоянию гисто-гематического барьера вне зоны опухоли по фоновому процессу.

Заключение Диссертация по теме "Гистология, цитология, клеточная биология", Прочуханова, Анна Ростиславовна

Выводы

1. Проведенный информационно-морфологический анализ гисто-гематического барьера эндометрия человека показал, что оценка его состояния определяется характером взаимоотношений составляющих его эелементов, в частности эпителиоцитов и разных дифферонов соединительной ткани.

2. Взаимоотношения дифферонов зависят от фаз жизненного цикла входящих в них клеток, а также от их морфологического разнообразия, что может быть описано набором исходных признаков, полученных методами количественной гистохимии и анализа изображений. Такими признаками в частности являются: количество и особенности распределения нуклеиновых кислот в ядрах клеток эпителия и соединительной ткани, форма и площадь клеточных ядер, количество клеток разных морфологических типов.

3. На этапах моделирования системы эпителий - соединительная ткань принципиально важно исследовать три варианта взаимоотношений клеток: внутриэпителиальные, внутристромальные, а также взаимоотношения эпителия и стромы. Способом числового выражения взаимоотношений служат относительные величины, полученные на базе исходных признаков.

4. Способом интегрального описания состояния гисто-гематического барьера эндометрия являются только комплексные признаки, включающие в себя как межклеточные, так и межтканевые взаимоотношения. Такие признаки могут быть получены только в результате применения факторного анализа, в частности метода главных компонент.

5. Для информационной оценки разных состояний системы эпителий-соединительная ткань эндометрия следует использовать комплексные признаки - главные компоненты. В данном исследовании наиболее информативными оказались первые семь главных компонент, при этом наибольшую значимость для их биологической интерпретации имеют признаки, описывающие отношения разных дифферонов соединительной ткани и пролиферирующего эпителия.

86

6. Исследование разных состояний гисто-гематического барьера на баз метода главных компонент и дискриминантного анализа позволило сформировать классификатор железистых гиперплазий, полипов и фоновых изменений эндометрия при железистом раке, позволяющий решать задачи по ранней диагностике эпителиальных опухолей тела матки.

7. Результаты проведенного информационного анализа взаимоотношений эпителия и соединительной ткани в эндометрии подразумевают возможность создания диагностических систем для других органов, как при онкологических заболеваниях, так и при другой патологии человека.

Диаграммы первых 10 главных компонент для комплекса из 30 признаков (см. Табл. 2). По оси X - порядковые номера признаков по таблице 2, по оси У - значения коэффициентов каждого из признаков.

1-я компонента зн.коэф.

•ч-г-опкэсвсмтсо т- т- г- см см см

2-я компонента зн.коэф. зн.коэф.

3-я компонента зн.коэф.

0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 0 И

ЦДДД

4-я компонента зн коэф. зн.коэф.

5-я компонента зн.коэф. зн.коэф.

6-я компонента зн.коэф.

7-я компонента зн.коэф. зн.коэф.

8-я компонента зн.коэф. зн.коэф.

9-я компонента зн.коэф.

0.6 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 о

Г) (О О) я ю со см см

Диаграммы первых 7 главных компонент для комплекса из 17 признаков (см. Табл. 5). По оси X - порядковые номера признаков по таблице 5, по оси У - значения коэффициентов каждого из признаков.

Компонента 1

0.4 0.35 0.3 0.25 0.2 0.15 0.1 0.05 0 зн.коэф. д

Ш зн.коэф.

Компонента 2

0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 0 зн.коэф. лЛ I

ЕЗ зн.коэф. д

Компонента 3

0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 0 Ж зн.коэф. л

Компонента 4 зн.коэф.

- ---- — - — - 1 1 1 п - — ■ - — - I 1 -1 1

- п 1 1

4- + 4 Д+ +п-+ 1 ■+ 1 А

СО 1Л Ь- со со ю N.

Компонента 5 зн.коэф.

Компонента 6 зн.коэф. п зн.коэф. зн.коэф.

Заключение

В результате применения современных методов количественного гистохимического анализа в комплексе с анализом изображений и многомерной статистикой были, прежде всего, еще раз подтверждены представления В.Г. Гаршина об определяющей роли системы эпителий -соединительная ткань в развитии опухолей.

На всех этапах работы были применены элементы информационного подхода к решению поставленных задач. К этим элементам следует отнести:

1. Выделение гисто-гематического барьера в качестве структуры, выражающей информационную сущность взаимодействий в системе эпителий - соединительная ткань - пространственную организацию градиентов.

2. Использование нескольких базовых количественных признаков, имеющих важное смысловое значение для поставленных задач, в качестве своеобразного языка для описания разнообразия форм и состояний клеток системы эпителий - соединительная ткань.

3. Использование информационного критерия - степень разнообразия в качестве одного из ведущих для оценки устойчивости системы эпителий -соединительная ткань.

4. Применение априорных знаний для формирования признаков и последующая количественная оценка информативности отдельных признаков и комплекса в целом.

Информационный подход к решению поставленных задач позволил организовать базу данных таким образом, что она является одновременно и базой знаний для оценки состояния ГГБ эндометрия с точки зрения устойчивости. В результате появилась возможность с довольно высокой точностью диагностировать наличие злокачественного новообразования эндометрия по данным анализа области фонового процесса. Это, в свою очередь, стало предпосылкой перехода от построения модельного классификатора к следующему этапу работы - разработке диагностической системы на лабораторной и приборной базе экспертно-биопсийной группы ГПАБ. Это позволило проверить возможность воспроизведения методологии, отработанной на модели, а также продолжить работу по повышению информативности комплекса признаков, служащих основой диагностики, с помощью методов многомерной статистики.

Сравнение результатов 1-го и 2-го этапов представленной работы, а также данных известной нам литературы, позволило нам сделать следующие выводы.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Прочуханова, Анна Ростиславовна, Санкт-Петербург

1. Абракова Е.Л., Трошин В.П. 1985. Свободные клетки стромы молочной железы и эндометрия при дисгормональном опухолевом росте. В кн.: Нарушение эндокринного и иммунного гомеостаза при важнейших заболеваниях. Л.: Медицина: 49-55.

2. Автандилов Г.Г. 1980. Введение в количественную патологическую морфологию. М.: Медицина: 216 с.

3. Автандилов Г.Г. 1999. Количественная патологическая анатомия важная основа развития диагностической медицины. В сб.: Тезисы 2-го съезда Международного союза ассоциаций патологоанатомов. М.: ММА им. И.Н. Сеченова. С.7.

4. Альберте Б., Брей Д., Льюис Дж., Рэфф М., Роберте К., Уотсон Дж. 1994. Молекулярная биология клетки. М.: "Мир", Т.З.

5. Баженов С.М., Дубенская Л.И. 1999. Паренхиматозно-стромальные отношения в опухоли и общие неспецифические адаптационные реакции больных РМЖ. В сб.: Тезисы 2-го съезда Международного союза ассоциаций патологоанатомов. М.: ММА им. И.Н. Сеченова. С.21.

6. Бауэр Э.С. 1935. Теоретическая биология. Л.: 206 с.

7. Белоусов Л.В. 1987. Биологический морфогенез. М.: Изд-во МГУ: 239 с.

8. Бредбери М. 1983. Концепция гемато-энцефалического барьера. М.: Медицина: 480 с.

9. Бродский В.Я., Урываева И.В. 1981. Клеточная полиплоидия. Пролиферация и дифференцировка. М.: Наука: 243 с.

10. Бучинская Л.Г., Полищук JI.3. 1999. Значение цитогенетических показателей для диагностики рака эндометрия. В сб.: Тезисы 2-го съезда Международного союза ассоциаций патологоанатомов. М.: ММАим. И.Н. Сеченова. М.: С. 43.

11. ГанинаК.П.,. Полищук Л.З., Бучинская Л.Г. 1990. Цитоморфология и цитогенетика железистой гиперплазии и рака эндометрия. Киев, "Наукова думка": 157с.

12. Гарлоев P.A., Автандилов Г.Г. 2000. Морфофункциональная характеристика гиперплазии, дисплазии и карцином прямой кишки. Архив Патологии. 62(1): 17-21.

13. Гаршин В.Г. 1939. Воспалительные разрастания эпителия, их биологическое значение и отношение к проблеме рака. М.-Л.: НКЗ СССР, Медгиз: 129 с.

14. Гилберт С.Ф. 1994. Биология развития. Т. 2. М.: Мир: 115-119.

15. Головин Д.И. 1982. Ошибки и трудности гистологической диагностики опухолей. Л.: "Медицина": 239-247.

16. Горышина E.H., Чага О.Ю. 1990. Сравнительная гистология тканей внутренней среды. Л.: Изд-во ЛГУ: 318 с.

17. Гурвич А.Г. 1944. Теория биологического поля. М.: 156 с.

18. Дьюкар Э. 1978. Клеточные взаимодействия в развитии животных. М.: "Мир": 328 с.

19. Жинкин Л.Н. 1966. Митотические (клеточные) циклы. В кн.: Руководство по цитологии. Т. 2, М: 244.

20. Заварзин A.A. 1967. Синтез ДНК и кинетика клеточных популяций в онтогенезе млекопитающих. Л.: "Наука": 197 с.

21. Заварзин A.A. 1986. Труды по теории параллелизма и эволюционной динамике тканей. JI.: Наука: 195 с.

22. Заварзин A.A. 1976. Основы частной цитологии и сравнительной гистологии. Л.: Наука: 410 с.

23. Заварзин A.A., Харазова А.Д. 1982. Основы общей цитологии. JL: Изд-во ЛГУ: 300 с.

24. Зандриттер В., Кифер Г., Рик В. 1969. Введение в количественную цитохимию. М.: Мир: 240 с.

25. Клишов A.A. 1984.Гистогенез и регенерация тканей. Л.: Медицина: 232 с.

26. Ковальский Г.Б. 1985. Возрастные особенности гисто-гематического барьера яичников при некоторых заболеваниях. В кн.: Нарушения эндокринного и иммунного гомеостаза при важнейших заболеваниях. Л.: Медицина: 86-91.

27. Колтовой H.A. 1999. Новые компьютерные технологии для диагностики: телепатология и компьютерная диагностика. В сб.: Тезисы 2-го съезда Международного союза ассоциаций патологоанатомов. М.: ММА им. И.Н. Сеченова. С. 155.

28. Леонтюк A.C. 1998 Проблемы количественной морфологии развивающегося организма. В кн.: Количественная морфология развивающегося организма. Минск. Министерство здравоохранения республики Беларусь. С. 5-8.

29. Леонтюк A.C., Слука Б.А., Мельников H.A. 1998. Направления математического моделирования гистогенетических процессов. В кн.: Количественная морфология развивающегося организма. Минск. Министерство здравоохранения республики Беларусь. С. 9-15.

30. Любищев A.A. 1963. О количественной оценке сходства. В кн.: Применение математических методов в биологии. Сб.2, Л.: Изд-во ЛГУ: 152-160.

31. Любищев A.A. 1982. Проблемы формы, систематики и эволюции организмов. М.: Наука: 227с.

32. Мамаев H.H., Михайлов A.A., Иржанов С.И., Быховец И.В. 1986. Активность ядрышковых организаторов клеток эпителиальных опухолей толстой кишки. Бюлл.экспер. биологии и медицины. 102(12): 763-765.

33. Прочуханов P.A. 1985. Функционально-морфологическое изучение гомеостаза и его нарушений. В кн.: Нарушение эндокринного и иммунного гомеостаза при важнейших заболеваниях. Л.: Наука: 6-12.

34. Прочуханов P.A. 1993. Биоинформационные основы структурной организации биосистем. В кн.: Теоретическая биология и Эрвин Бауэр. Пущино.: 194-204.

35. Прочуханов P.A., Демеш О.В., Ухин В.А, Прочуханова А.Р. 1993. Принципы "естественной" организации автоматизированных диагностических систем в клинической морфологии. Успехи современной биологии. Т. 113, 4: 425-432.

36. Прочуханов P.A., Демеш О.В., Макулов В.Б., Ухина Н.В. 1994. Автоматизированный анализ изображений в клинической онкоморфологии. Оптический журнал. 12: 39-44.

37. Прянишников В.А. 1979. Функционально-морфологическая модель организации эпителия нормального, гиперплазированного и опухолевого эндометрия. Арх. Патологии. 41(1): 60-65.

38. Рыжавский Б.Я., Ковальский Г.Б. 1992. Старение. Адаптация. Обратимость. Владивосток. Наука: 160 с.

39. Славин М.Б. 1989. Методы системного анализа в медицинских исследованиях. М.: "Медицина": 303 с.

40. Токин Б.П.1966. Общая эмбриология. Л.: Из-во ЛГУ: 454 с.

41. Топчиева О.И.,. Прянишников В. А., Жемкова З.П. 1978. Биопсии эндометрия. М.: "Медицина", 227 с.

42. Федосенко К.В., Прочуханова А.Р., Зуйкова О. Н., Муравьев Е.А. 1998. Экспертные диагностические системы в онкоморфологии. В сб.: Тезисы 17-й научной конференции. Новые методы и разработки в онкоморфологии. М: 73-75.

43. Федосенко К.В., Ковальский Г.Б., Прочуханов P.A. 1999. Экспертные диагностические системы в онкоморфологии. В сб.: Тезисы 2-го съезда Международного союза ассоциаций патологоанатомов. М.: ММА им. И.Н. Сеченова. М.: 312-313.

44. Франкфурт О.С. 1975. Клеточный цикл в опухолях. М.: "Медицина": 170 с.

45. Хлопин Н.Г. 1946. Общебиологические и экспериментальные основы гистологии. Л.: АН СССР: С.12-15.

46. Чайковский Ю.В. 1990. Элементы эволюционной диатропики. М.: Наука: 271 с.

47. Чертков И.Л. 1984. Стволовая клетка и ее микроокружение. М.: Медицина: 250 с.

48. Швембергер И.Н., Ермилов А.Н. 1994. Онкогенез у трансгенных мышей. Цитология. Т. 36, 2: 131-147.

49. Шмальгаузен И.Н. 1982. Избранные труды. Организм как целое в индивидуальном и историческом развитии. М.: Наука: 383 с.

50. Штерн Л.С. 1936. Роль барьеров и постоянство среды в физиологии и патологии животного организма. Фельдшер, 3: 38-42.

51. Элиниди В.Н., Новик В.И., Пожарисский K.M. 2000. Исследование активности ядрышкоорганизующих зон в эпителиальных клетках пригиперплазиях и раке эндометрия с использованием анализа изображения. Вопросы онкологии 46, № 2. - С. 187-190.

52. Aalto M.L. 1988. The prognostic value of quantitative analysis in the endometrial carcinoma. Eur. J. Obstet Gynecol. Reprod. Biol. 29 (2): 159-165.

53. Baak J.P.A. 1991. Manual of quantitative pathology in cancer diagnosis and progosis. Berlin. Springer Verlag: 630 p.

54. Burnet M.F. 1971.Immunological surveillance in neoplasia. Transhlant. Rev. 7(1): 3-25.

55. Bibbo M., В artels P.H., Galera-Davidson H., Dytch H.E., Wild G.L. 1986. Markers for malignancy in the nuclear texture of histologically normal tissues from patients with thyroid tumors. Anal. Quant. Cytol. Histol. 8(1): 167-175.

56. Bibbo M., Montag A.G., Lerma-Puertas E., Leelakusolvong S., Bartels P.H. 1989. Karyometric marker features in tissue adjacent to invasive cervical carcinomas. Anal. Quant. Cytol. Histol. 11(4): 281-285.

57. Burger G., Jetting U., Rodenacker K. 1981. Changes in benign cell populations in cases of cervical cancer and its precursors. Anal. Quant. Cytol. 3: 261-271.

58. Cor A., Pajer Z. 1992. Histochemical and stereological methods for diagnosis of thyroid tumores. Histochem. J. 24 (8): 551.

59. Cunha G.R., Youn G.P., Brody J.R. 1989. Role of Uterine epithelium in the development of myometrial smooth muscle cells. Biol. Reprod. 40: 861— 871.

60. Cunha G.R., Hayward S.W., Horn Y.K., Donjacour A.A. 1998. Growth factors as mediators of stromal-epthelial interactions in steroid hormone target organs. In: Hormones and Growth Factors in Development and Neoplasia. Baltimor, Wiley-Liss.: 207-227.

61. De Potter C.R., Praet M.M. Slavin R.E., Verbeeck R, Roels H.J. 1987. Feulgen DNA content and mitotic activity in proliferative breast disease: A comparison with ductal carcinoma in situ. Histopathology. 11. C. 13071319.

62. Dobrossy L. 1990. DNA ploidy in early diagnosis of breast cancer. Arch. Geschwulst-Forschung 60 (3): 227.

63. Einarson L. 1951. On the theory of gallocyanin-chromalum steining and its application to quantitative estimation of basophilia. Selective staining of exquisite progressivity. Acta patol. et microbiol. Scand. 28: 82-89.

64. Ettinger L., Doljanski F. 1992. The role of fibroblasts in development and regeneration. Biol. Rev. Cambidge Phil. Soc. 67(4): 459-482.

65. Finch R.R. 1971. A classification of nuclear aberation in relation to malignansy associated changes (MAC). Acta Cytol, 15: 553-558.

66. Fu Y.S., Ferenczy A., Huang I., Gelfand M.M. 1988. Digital imaging analysis of normal, hyperplastic and malignant endometrial cells in endometrial brushing samples. Anal. Quant. Cytol. Histol. 10(2): 139-149.

67. Gedes J., Schluter C., Duchrow M., Wohlenberg C. 1992. The proliferation marker Ki-67: Diagnostic and Prognostic Value and Molecular Characterisation. Histochem. J. 24 (8):466.

68. Gordon J.I., Hooper L.V., Mc Nevin M.S. Wong M, Bry L. 1997. Epithelial cell groth and differentiation. Promoting diversity in the intestine: Conversations between the microflora, epithelium and diffuse GALT. Amer.J.Physiol. -273, №3,Ptl.-C. 565-570.

69. Gregoire M., Lieubeau B. 1995. The role of fibroblasts in tumor behavior. Cancer Metastasis Rev. 14 (4): 339-350.

70. Gregory C.D. 1996. Apoptosis: a role in neoplasia? In: Cell Proliferation in cancer. Regulatory mechanisms of Neoplastic cell Growth. Oxford, New York, Tokyo: 344-355.

71. Hall P.A., Coates P.J., Ansari B., Kearsey J., Whitaker J., Sawhney N. 1992. Cell Death and Growth Arrest: Integral Components of Tissue Homeostasis. Histochem. J. 24 (8):476-477.

72. Hanselaar A., Mac Aulay C. Palcic B, Garner D., Le Riche J. 1992. Discrimination between progressive and regressive cervical intraepithelial neoplasia by DNA cytometry. Analyt. Cell. Pathol. 1992. 4: 165.

73. Haroske G., Bergander S, Konig R., Meyer W. 1990. Application of malignancy-associated changes of the cervical epithelium in a hierarchic classification concept. Analyt. Cell. Pathol. 2(1):189-198.

74. Hittelman W.N., Shin D.H., Voravud N., Ro J.Y., Lee J.S., Hong W.K. 1992. Visualising the multistep process of human tumorigenesis by In Situ hybridisation and Immunohistochemistry. Histochem. J. 24 (8): 463.

75. Holm R., Skomedal H., Helland A., Kristensen G., Borresen L., Nesland J. M. 1992., P-53 Protein Overexpression in Normal, Premalignant and Malignant Tissue of the Cervix Uteri. Histochem. J. 24 (8): 480.

76. Hytiroglou P., Harpaz N., Heller D.S, Liu Z.Y., Gil J. 1992. Differential diagnosis of borderline and invasive serous cystadenocarcinomas of the ovary by computerized interactive morphometric analysis of nuclear features. Cancer. 69(4): 988-992.

77. Jaggi B, Poon S.S., Mac Aulay C., Palcic B. 1988. Imaging system for morphometric assessment of conventionally and fluorescently stanecells. Cytometry. 9: 566-572.

78. JerneN.K. 1973. The immune system. Scient.amer. 229: 52-60.

79. Koshiyama M, Konishi I, Fujii S. 1998. Pathology, hormonal aspects and molecular genetics of the two types of endometrial cancer. Cancer J. - 11, № 6- C.277-283.

80. Megyesi J. 1990. DNA ploidy in diagnosis and prognosis of breast cancer Arch.geschwulst-Forschung. 60 (3): 624.

81. Montage A.G., Bartels P.H., Dytch H.E., Lerma-Puertas E., Michelassi F., Bibbo M. 1989. Karyometric marker features in tissue adjacent to in situ cervical carcinomas. Analyt. Quant. Cytol. Histol. 1989. 11: 275-280.

82. Montage A.G., Bartels P.H., Dytch H.E., Lerma-Puertas E., Michelassi F., Bibbo M. 1991. Karyometric features in nuclei near colonic adenocarcinoma: Statistical analysis. Analyt. Quant. Cytol. Histol. 1991. 13: 159-167.

83. Naylor M.S., Balkwill F.R. 1996. The role of cytokines in tumour progression. In: Cell Proliferation in Cancer. Regulatory mechanisms of neoplastic cell Growth. Oxford, New York, Tokyo: 107-130.

84. Ngoi S.S., Staiano-Coico L., Godwin T.A., Wong R.J., De Cosse J.J.1990. Abnormal DNA ploidy and proliferative patterns in superficial colonic epithelium adjacent to colorectal cancer. 66. C. 953-959.

85. Nieburgs H.E. 1968. Resent progress in the interpretation of malignancy associated changes (MAC). Acta Cytol. 12: 445-453.

86. Nordstrom B, Bergstrom R, Strang P. 1998. Prognostic index models in stage 1 and 2 endometrial carcinoma. Anticancer Res. - T. 18, № 5b. - C. 37173724.

87. Oberyszyn T.M., Robertson F.M. 1992. Immunochemical localisation of Integrin Molecules in Cutaneous Tissue during Tumor Promotion. Histochem. J. 24 (8): 479.

88. Ormerod M.G., Sun H.M., Snowden R.T., Cohen G.M. 1992.Characterisation and Quantification of Apoptosis by Flow Cytometry. Histochem. J. 24 (8): 477.

89. Park W.Y., Miranda B., Lebeche D., Hashimoto G., Cardoso W.V. 1998. FGF -10 is a chemotactic factor for distal epithelial buds during lung development. Dev. Biol. -201, № 2. C 125-134.

90. Polak J.M., Bishop A.E. 1992. Modern Microscopical Imaging Methods. Histochem. J. 24 (8): 474.

91. Prochukhanov R., Ravkin I., 1987. Image analysis in morphology. Acta Stereologica. 6. Suppl. 3: 685.

92. Prochukhanov R.A., Agroskin L.S., Makulov V.B. 1992. Quantitative Histochemistry and Image Analysis in Cancer Prognosis Histochem. J. 24 (8): 553.

93. Pusztai L., Cooper K. 1996. Cell proliferation and carcinogenesis. In: Cell Proliferation in cancer. Regulatory mechanisms of Neoplastic cell growth. Oxford, New York, Tokyo.: 3-24.

94. Raikhlin N.T., Petrov S.V., Mazurenko N.N. 1992. Immunohistochemistry of Myc, Ras, and Ets Oncoproteins in Cervical Carcinomas and Premalignant Diseases. Histochem. J. 24 (8): 481-482.

95. Sakakura T. 1991. Epithelium-stroma interactions. Internal Rev. Cytol. 125: 165-179.

96. Schipper N.W., Baak J.P., Smeulders A.W. 1991. Automated selection of the most epithelium-rich areas in gynecologic tumor sections. Anal. Quant. Cytol. Histol. 13 (6): 395-402.

97. Sklarev R.J., Bodmer S.C., Pertschuk L.P. 1990. Quantitative Imaging of Immunocytochemical (PAP) Estrogen Receptor Staining Partterns in Breast Cancer Sections. Cytometry. 11(2): 359-363.

98. Sorbe B., Risberg B., Frankendal B. 1990. DNA ploidy, morphometry, and nuclear grade as prognostic factors in endometrial carcinoma. Gynecol. Oncol. 38 (1): 22-27.

99. Sorrentino V. 1996. The Cell cycle. In: Cell Proliferation in cancer regulatory mechanisms of Neoplastic cell Growth. Oxford, New York, Tokyo.: 27-44.

100. Susnik B., Worth A., Le Riche J., Palcic B. 1995. Malignancy associated changes in the breast. Anal. Quant. Cytol. Histol. 17(1): 62-68.

101. Tandon A.K. 1992. Current and Future Prognostic Factors in breast Cancer. Histochem. J. 24 (8): 481.

102. Takahashi Y. Takano K. 1997. Roles of epithelial-mesenchymal interactions in differentiation and spatial pattern formation of smooth muscle cells. Zool. Sci.- 1997.- 14, Suppl.-C. 71.

103. Thunnissen F.B., Ellis I.A., Burger G. 1992. Interlaboratory Image Analysis Study on DNA Measurements on Behalf of CAAC, Breast Cancer Project Group. Histochem. J. 24 (8): 594.

104. Visakorpi T., Kallioniemi O.P., Koivula T. A., Isola J.J. 1992. P 53, EGFR and ER BB2 Expression in Prostatic Carcinoma. Histochem. J. 24 (8): 482.

105. Wang W., Pan Y., Tribukait W. 1992. Quantitative Immunofluorescence Image Analysis of Prostate Specific Antigen and DNA in Prostate Adenocarcinoma. Histochem. J. 24 (8): 596.

106. Wernert N. 1997. The multiple roles of tumour stroma. Virchows Arch. 430 (6): 433-443.105

107. Автор выражает глубокую благодарность за помощь в подготовке диссертации:

108. Заведующей патологоанатомическим отделением Объединенной детской больницы г. Севастополя Наталье Сауловне Куценог

109. Заведующей патологоанатомическим отделением Санкт-Петербургского Городского Онкодиспансера Наталье Константиновне Воробьевой

110. Руководителю лаборатории анализа изображений ГОИ им. С.И.Вавилова Василию Борисовичу Макулову

111. Научному сотруднику лаборатории анализа изображений ГОИ им. С.И.Вавилова Ольге Вячеславовне Демеш

112. Доценту кафедры вычислительной техники Санкт-Петербургского Морского Технического Университета Евгению Александровичу Муравьеву