Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Индикация возбудителя сапа в объектах ветеринарного надзора иммуноферментным анализом

ВАК РФ 03.00.07, Микробиология

Содержание диссертации, кандидата ветеринарных наук, Зинатуллин, Рамиль Рафаилевич

ВВЕДЕНИЕ ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ Биология возбудителя сапа Антигенная структура возбудителя сапа Лабораторная диагностика сапа

Иммуноферментный анализ для диагностики и индикации возбудителей особо опасных болезней СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ Материалы и методы

Изучение основных культур штаммов возбудителя сапа 1. Разработка способа получения антигена возбудителя сапа Разработка способа получения диагностических антител к антигену возбудителя сапа 1. Выделение и очистка противосапных иммуноглобулинов сыворотки крови кроликов

Изготовление иммунопероксидазных конъюгатов к возбудителю сапа

Индикация возбудителя сапа в патологическом материале Индикация возбудителя сапа в объектах внешней среды ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ ВЫВОДЫ

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ ПРИЛОЖЕНИЯ

Введение Диссертация по биологии, на тему "Индикация возбудителя сапа в объектах ветеринарного надзора иммуноферментным анализом"

Актуальность темы. В настоящее время сап на территории России полностью ликвидирован. Отдельные спорадические случаи инфекции среди лошадей не представляют реальной угрозы конепоголовью. В то же время, расширяющиеся в последние годы торговые контакты с зарубежными странами и регистрация единичных случаев заболевания у экспортируемых в Россию лошадей, дают основание ветеринарной службе страны регулярно обследовать конепоголовье на сап (Я.Е. Коляков, 1959; Г.Ф. Епифанов, 1968).

По данным ФАО/ВОЗ (1996) сап регистрируется в ряде стран Восточной Европы, Азии, Африки и широко распространен в Бирме, Монголии и Китае. Согласно отчетам МЭБ в период с 1990 по 1997 год сап был зарегистрирован в странах Европы - в Латвии и Беларуси, в странах Азии - в Индии, Индонезии, Китае, Лаосе, Монголии, Бирме и Пакистане, в странах Африки - в Анголе, Камеруне, Эритрее и Эфиопии.

В качестве прижизненной диагностики сапа у лошадей в ветеринарной практике используют маллеиновую пробу и серологические реакции (РСК, РА). Однако эффективность методов для массовых исследований лошадей оставляет желать лучшего (Н.К. Букова, 1999). Это продиктовано большими экономическими затратами и отсутствием экспрессности ожидаемых результатов, что обуславливает необходимость внедрения в ветеринарную практику современных, надежных и стандартизированных средств и методов диагностики сапа.

В последнее время биологическая наука обогатилась рядом современных ускоренных методов иммунохимического анализа: РИГА, ИФА, РИА, МФА, ДНК-ДНК-гибридизации, ПЦР, биосенсорная технология, иммуноблот и т.д., которые могли бы повысить эффективность мероприятий, направленных на недопущение и распространение сапа на территории России и СНГ. Имму-нохимические методы обеспечивают быстрый результат при минимальных за5 тратах средств и времени, удобны для контроля и повседневного анализа большого количества проб. Отвечающим всем этим вышеперечисленным требованиям является иммуноферментный анализ.

Важным условием для постановки ИФА является наличие молекул белка, обеспечивающих специфическое взаимодействие антигена с антителами. В этой связи одним из больших достижений биотехнологии является разработка моноспецифических сывороток. Однако для индикации возбудителя сапа в объектах ветеринарного надзора такая технология не разработана. Поэтому для решения данного вопроса требуется изыскание методов разработки и получения высокоспецифических антител и антигенов к возбудителю сапа с целью создания диагностических тест-систем.

Цель и задачи исследований. Целью исследований являлась разработка тест-системы иммуноферментной для индикации возбудителя сапа в объектах ветеринарного надзора.

Для выполнения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:

- изучить антигенные свойства возбудителя сапа;

- разработать технологию получения высокоспецифических антигенов и антител для создания тест-системы иммуноферментной;

- усовершенствовать методику подготовки проб из объектов ветеринарного надзора для индикации возбудителя сапа в ИФА;

- разработать НТД на тест-систему иммуноферментную для индикации возбудителя сапа в объектах ветеринарного надзора.

Научная новизна. Изучены антигенные свойства возбудителей сапа, мелиоидоза, синегнойной инфекции методами иммунохимического и серологического анализа. По результатам этих исследований разработаны методы получения антигенов и антител.

Впервые в ветеринарной практике разработана технология изготовления тест-системы иммуноферментной для индикации возбудителя сапа, способная 6 выявлять возбудителя в патологическом материале и воде - 1000 м.к./мл, а в почве и зерне - 10000-100000 м.к./г.

Разработан способ подготовки проб с объектов ветеринарного надзора для ранней экспресс-индикации возбудителя сапа иммуноферментным анализом (ИФА).

Научно-практическая ценность работы. Применение тест-системы иммуноферментной позволит быстро и достоверно определить наличие возбудителя сапа в исследуемом материале, способствуя предотвращению распространения и быстрой ликвидации его в случае появления.

Результаты исследований вошли в НТД (комплект) - " Тест-система им-муноферментная для выявления антигенов-возбудителей сапа и мелиоидоза", утвержденную Департаментом ветеринарии МСХ РФ 26 июня 2001г. Внедрены в производство - Наставление по применению тест-системы иммуноферментной для выявления антигенов - сапа и мелиоидоза, ТУ 9388-022-0049247400.

Апробация работы. Результаты выполненных исследований доложены и обсуждены на ежегодных отчетных сессиях Всероссийского научно-исследовательского ветеринарного института (г. Казань). А также основные положения диссертации доложены на второй республиканской конференции молодых ученых "Молодые ученые - агропромышленному комплексу" (Казань, 2000 г.); на Всероссийской научно-практической конференции "Научные основы производства ветеринарных биологических препаратов", посвященной 30-летию института (Щелково, 2000 г.); на юбилейной научной конференции "Контроль, стандартизация и сертификация ветеринарных препаратов", посвященной 70-летию ВГНКИ (Москва, 2001 г.); на научно-производственной конференции по актуальным проблемам ветеринарии и зоотехнии (Казань, 2001 г.).

Публикация. По материалам диссертации опубликовано 7 научных работ.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 95 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения, выводов, практических предложений, списка использованной литературы. Работа иллюстрирована 15 таблицами и 1 рисунком. Список используемой литературы включает 141 наименований, из них 95 источников отечественных авторов, 46 - зарубежных.

Заключение Диссертация по теме "Микробиология", Зинатуллин, Рамиль Рафаилевич

выводы

1. Проведен серологический и иммунохимический анализ антигенного состава возбудителя сапа. Установлено, что в процессе длительного хранения и культивирования на искусственных питательных средах штаммы теряют антигенную активность и специфичность.

2. Ежегодное пассирование штаммов возбудителя сапа через организм хомячков обеспечивает сохранность ими вирулентных свойств. Утрата вирулентности возбудителем сапа сопровождается изменением биохимических и антигенных свойств микроба.

3. Антиген возбудителя сапа, полученный путем воздействия гамма-излучения в дозе 2,5 МГр на бактериальную клетку, обладает высокой серологической и специфической активностью в иммуноферментном анализе.

4. Разработана схема гипериммунизации кроликов, заключающаяся в пятикратном внутрикожном введении корпускулярного антигена в нарастающих дозах с полным и неполным адъювантом Фрейнда, обеспечивающая получение высокоактивной диагностической сыворотки, используемой в качестве технологического сырья при конструировании противосапного иммунофер-ментного конъюгата для тест-системы иммуноферментной.

5. Методом хроматографирования на колонке с ДЭАЭ-целлюлозой осуществлена очистка гипериммунной сыворотки. На основе этого принципа разработана технология получения очищенных поликлональных антител к корпускулярному антигену и создана тест-система иммуноферментная.

6. Впервые в ветеринарной практике методом иммуноферментного анализа разработан способ обнаружения антигена сапа в патологическом материале, обеспечивающий ускоренную диагностику и индикацию возбудителя сапа.

80

7. Подготовка проб с концентрированием возбудителя сапа на мембранных фильтрах, позволяет выявлять их наличие в воде, почве и зерне в концентрации 103-105 м.к./г (мл) иммуноферментным анализом.

81

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. Система поддержания производственного штамма 5584 возбудителя сапа.

2. Применение тест-системы иммуноферментной для индикации возбудителя сапа и мелиоидоза регламентирует "Временное наставление по применению тест-системы иммуноферментной для выявления антигенов-возбудителей сапа и мелиоидоза (САП-МЕЛИОИДОЗ-ИФА)", утвержденное ДВ МСХ РФ 26.06.01г., изготовление и контроль противосапного иммуноферментного конъюгата - ТУ 9388-022-00492474-00 и "Временная инструкция по изготовлению и контролю тест-системы иммуноферментной для выявления антигенов-возбудителей сапа и мелиоидоза (АНТИ-ИФА:САП-МЕЛИОИДОЗ)", утвержденная директором ВНИВИ (г. Казань) 21.07.00г.

82

Библиография Диссертация по биологии, кандидата ветеринарных наук, Зинатуллин, Рамиль Рафаилевич, Казань

1. Адамов А.К. Метод быстрого обнаружения патогенных микробов посредством ализариновых суспензионных антител // ЖМЭИ.-1961.-№3.-С.84.

2. Адамов А.К., Карпузиди К.С., Акулова М.Ф. Антигенное строение возбудителей сапа и мелиоидоза // Генетика, биохимия и иммунохимия особо опасных инфекций.-Ростов-на Дону.-1967.-С.335-339.

3. Адимов Л.Б. Сап // Лабораторная диагностика особо опасных и малоизвестных бактерийных инфекций.-Ростов-на-Дону.-1963.-С.284-289.

4. Алексеев В.В., Рыбкин B.C., Вязьмина Т.Н. Лабораторная диагностика легочной формы сапа // Ветеринария.-2001.-№1.-С.20-23.

5. Антонов В.А., Тимошин В.Б. Получение группоспецифического зонда для идентификации возбудителей сапа и мелиоидоза // Сб. научн. тр. ВНИПИ.-1992.-С.9.

6. Барков A.M., Ларионов Г.М., Дунаев Г.С., Лобанов Л.Н. Использование РПГА для диагностики сапа и мелиоидоза // Сб. научн. тр. ВНИПИ.-1990.-С.200-201.

7. Беляков В.Д., Ряпис Л.А., Илюхин В.И. Сап // Псевдомонады псевдомоно-зы.-Москва.-1990.-С. 178-195.

8. Бочарова Н.Г., Быченко Б.А., Лысенко A.A. и др. Обнаружение столбнячного анатоксина при помощи реакции энзим-меченных антител // ЖМЭИ.-1979.-№8.-С.47-50

9. Буерова C.B., Галиуллин А.К., Хаертынов К.С. Получение и оценка перок-сидазных конъюгатов на основе Р(аЬ)2-фрагментов иммуноглобулинов // Ветеринарный врач.-2001.-№3.-С.85-87.

10. Букова Н.К. Сапной эмульсин-антиген для сенсибилизации животных и получения позитивной сыворотки // Сб. научн. тр. ВГНКИ.-1995.-С.100-106.83

11. Букова H.K. Культуральные и ферментативные свойства производственного штамма P.mallei № 5584 возбудителя сапа// Тез. докл. научн. конференции.-Щелково.-1996.-С. 134-135.

12. Букова Н.К. Сап: разработка, изготовление, контроль и стандартизация ди-агностикумов // Автореф. дис. . доктора биологических наук.-Москва. -1999.-С.40.

13. Букова Н.К., Безгин В.М., Ничвеева Л.Д., Суханов В.П. Стандартные образцы сапных диагностикумов // Тез. докл. научн. конференции.-Щелково.-1996.-С.136-137.

14. Букова Н.К., Файзуллин A.A., Галиуллин А.К. и др. Уточнение диагноза у лошадей, подозреваемых в заражении сапом // Ветеринария.-1997.-№1.-С.17-19.

15. Булава Г.В., Ермолин Г.А. Получение антисывороток к антигенам синег-нойной палочки и протеин для проведения иммуноферментного анализа в клинической практике // ЖМЭИ.-1985.-№1.-С.51-55.

16. Валиев М.В., Захаров И.А. и др. Эпизоотологическая характеристика стада крупного рогатого скота по туберкулезу при помощи кожноаллергических проб в ИФА // Тез. докл. Всесоюзной конференции по эпизоотологии.-Казань.-1991.-С.128.

17. Волина Е.Г., Бычкова Б.Д., Бочарова Н.Г. Применение реакции энзимме-ченных антител для диагностики лептоспироза // ЖМЭИ.-1981.-№10.-С.45-48.

18. Волков Е.А., Рыбкин B.C., Локтионов A.M. и др. Активность сывороток, полуденных по различным схемам иммунизации // Сб. научн. тр. ВНИПИ.-1980.-С.14-15.84

19. Вязьмина Т.Н., Алексеев В.В., Курилов В.Я., Савченко С.Т. Морфогенез мелиондоза и сапа у линейных мышей BALB/c при аэрогенном заражении в сравнительном аспекте // Сб. научн. тр. ВНИПИ.-1992.-С.58.

20. Вязьмина Т.Н., Тихонов Н.Г., Фарбер С.М., Лесовой B.C. Патоморфология молниеносной формы сапа у мышей линии СВА // Сб. научн. тр. ВНИПИ.-1992.-С.58-59.

21. Голубинский Е.П., Рудник B.C., Рудник М.П. и др. Обнаружение фракции 1 чумного микроба ферментно-иммунологическим методом // Проблемы изучения механизма энзоотии чумы. Сб. научн. тр. Саратов.-1980.-С.9-12.

22. Гольдберг A.M., Ширяев Д.Т. Диагностика особо опасных инфекций // Ростов-на-Дону.-1968.-С.52.

23. Гольдберг A.M., Ширяев Д.Т. Диагностика особо опасных инфекций // Рос-тов-на-Дону.-198 8 .-С.52-53.

24. Горбачев E.H. Изучение иммуного ответа у больных и переболевших Ку лихорадкой при использовании ИФА // ЖМЭИ.-1995.-№3.-С.99-102.

25. Гутира Ф., Марек И., Маннингер Р., Мочи И. Частная патология и терапия домашних животных // Москва.-1961 .-С.291-323.

26. Детерман Г. Гель-хроматография // Москва.-1970.-С.274.

27. Дзантиев Б.Б., Егоров A.M. Современное состояние и перспективы развития иммуноферментного анализа // Ж. Всес. Хим. 0-ва.-1982.-№4.-С.442-449.

28. Домарадский И.В. Проблемы перекрестного иммунитета // Москва.-1973.-С.136.

29. Дунаев Г.С., Лобанов A.C., Ларионов Г.М. и др. Использование иммуноферментного анализа для выявления антител к возбудителям сапа и мелио-идоза//Клин. лаб. диагностика.-1992.-Т. 11-12.-С.16-19.

30. Дядищев Н.Р., Воробьев A.A., Захаров C.B. Патоморфология и патогенез сапа у лабораторных животных // ЖМЭИ.-1997.-№2.-С.60-64.

31. Егоров A.M., Осипов А.П., Дзантиев Б.Б., Гаврилова Е.М. Теория и практика иммуноферментного анализа // Москва.-1991 .-С.288.85

32. Епифанов Г.Ф. Сап // Сборник научных работ СНИВИ.-Омск.-1968.-С.15.

33. Замараев B.C., Илюхин В.И., Саямов С.Р. и др // Микробиологический жур-нал.-1987.-№3.-С.91-95.

34. Замарин А.Е., Пивень H.H., Мананков В.В. и др. Поиск оптимального набора антигенов возбудителей сапа и мелиоидоза, пригодных для получения высокоэффективных группоспецифических антисывороток // Сб. научн. тр. ВНИПИ.-1990.-С.23 0-233.

35. Зыкин Л.Ф., Яковлев А.Т., Рыбкин B.C. и др. Иммуноферментный метод диагностики бруцеллеза // Тезисы докладов 5 Всероссийского съезда микробиологов и эпидемиологов. Москва.-1985.-С.225-226.

36. Илюхин В.И. и др. Сап // Псевдомонады и псевдомонозы.-М.-1990.-С.178-180.

37. Карпузиди К.С., Акулова М.Ф., Адамов А.К. // Диагностика особо опасных инфекций .-Ростов-на Дону. -1968. -С. 3 7.

38. Киршин Б.А., Мельникова Л.А. Свойство штаммов P.mallei // Ученые записки КВИ.-1980.-С.123-126.

39. Киршин Б.А., Мельникова Л.А., Алексеева И.И. К вопросу о поддержании штаммов возбудителя сапа // Тез. докл. науч. конф.-Москва.-1981.-С.18-19.

40. Ковалев Г.К. Сап // ЖМЭИ.-1971.-№1.-С.63-70.

41. Коляков Я.Е. // Труды Военно-ветеринарных научно-исследовательских учреждений РККА.-Л.-1930.-Ч. 1.-С.106. (Цитировано по Ковалеву Г.К.,1971).

42. Коляков Я.Е. // Ветеринария.-1959.-№7.-С.84. (Цитировано по Ковалеву Г.К.,1971).86

43. Коровенков А.И., Нехуров JI.H. Новое в диагностике сапа лошадей // Сб. научн. тр. БГСА.-1995.-С.174.

44. Кравченко А.Т., Руднев Г.П. Руководство по микробиологии, клинике и эпидемиологии инфекционных болезней // М.-1966.-Т. 7.-С.327-345.

45. Лобанов А.Н., Ларионов Г.М., Британова А.Л., Барков A.M. Использование твердофазного иммуноферментного анализа для обнаружения иммунных комплексов при сапе и мелиоидозе // Сб. научн. тр. ВНИПИ.-1992.-С.96-97.

46. Лобанов А.Н., Ларионов Г.М., Британова А.Л., Барков A.M. Применение адсорбированного ОН-мелиоидозного антигена для дифференциальной лабораторной диагностики сапа и мелиоидоза // Сб. научн. тр. ВНИПИ.-1992.-С.97.

47. Лысенко А.Я., Ермолин Г.А., Цветков B.C. Реакция энзиммеченных антител в иммунодиагностике паразитарных болезней // Мед. паразитология,-1978.-№4.-С.39-46.

48. Манзенюк И.Н. и др. Изучение иммуно- и патогенеза сапа и мелиоидоза. Гетерологичные вакцины // Антибиотики и химиотерапия.-1999.-№6.-С.21-26.

49. Маренникова С.С., Хабахпашева H.A., Мальцева H.H. Получение и сравнительная оценка пероксидазных конъюгатов на основе чистых антител и F-аЬ-фрагмента Ig G // ЖМЭИ.-1982.-№9.-С.99-109.

50. Мельникова Л.А., Матросова В.Р., Хасанов Ч.Г. Диагностика сапа и мелиоидоза // Мат. научно-производственной конференции по проблемам ветеринарии и животноводства.-Казань.-1995.-С.373.

51. Меркулова Е.К. Биометрия в селекции и генетике сельскохозяйственных животных // Москва.-1970.-С.423.87

52. Монанков В.В., Зыкин Л.Ф., Яковлев А.Т., Напалкова Г.М. Применение авидин-биотиновой системы МФА для диагностики чумы, сапа, мелиоидо-за, туляремии и бруцеллеза // Сб. научн. тр. ВНИПИ.-1992.-С.114.

53. Напалкова Г.М., Яковлев А.Т., Зыкин Л.Ф., Корсакова И.И. Оценка возможности иммуноблотинга для лабораторной диагностики сапа и мелиоидоза // Сб. научн. тр. ВНИПИ.-1992.-С. 116-117.

54. Новикова О.Д. // Автореф. дис. . кандидата биол. наук.-Москва.-1986.

55. Новицкая И.В., Храпов Н.П. Моноклональные антитела в ранней диагностике сапа и мелиоидоза в эксперименте // Актуальные проблемы ветеринарии. Мат. Международной конференции.-1995.-С.89.

56. Пивень H.H. Антигенный анализ возбудителей мелиоидоза и сапа в аспектах идентификации, диагностики и патогенности // Автореф. дис. . доктора мед. наук.-Волгоград.-1997.-С.32.

57. Пивень H.H., Смирнова В.И., Подзолкова Г.Г., Васильев В.В. Некоторые иммунобиологические свойства антигенов возбудителей сапа и мелиоидоза // Сб. научн. тр. ВНИПИ.-1992.-С.120.

58. Покровский В.И., Семенов Б.Ф. Проблемы современной медицины и иммунохимии // Ж. Всес. Хим. 0-ва.-1982.-№4.-С.457-463.88

59. Попов С.Ф., Курилов В .Я., Мешкова Л.Ю. Ультраструктурный аспект пара-зитирования возбудителя сапа в клетках хозяина // Сб. научн. тр. ВНИПИ.-1992.-С.121.

60. Попов С.Ф., Курилов В.Я., Яковлев А.Т. Pseudomonas pseudomallei и Pseudomonas mallei капсулообразующие бактерии // ЖМЭИ.-1995.-№5.-С.3236.

61. Попов С.Ф., Курилов В .Я., Яковлев А.Т. Изучение локализации общих поверхностных антигенов у возбудителей сапа и мелиоидоза // Сб. научн. тр. ВНИПИ.-1992.-С. 122-123.

62. Попов С.Ф., Тихонов Н.Г., Пивень H.H. и др. Роль капсулообразования у Burkholderia mallei для его персистенции in vivo // ЖМЭИ.-2000.-№3.-С.73-75.

63. Рубан Е.Л. Физиология и биохимия представителей рода Pseudomonas // Москва: Наука.-1986.-С.200.

64. Рыбкин B.C., Черченко И.И., Зыкин Л.Ф. и др. Методы иммуноферментного анализа в практике эпизоотологического обследования природного очага чумы // ЖМЭИ.-1986.-№5 .-С. 107-108.

65. Ряпис Л.А. Некоторые вопросы азотистого обмена возбудителей сапа и мелиоидоза // Автореф. дис. . кандидата мед. наук.-Саратов.-1968.

66. Ряпис Л.А., Гольдберг A.M. Сап // Биохимия, генетика и иммунология (особо опасные инфекции).-Ростов-на-Дону.-1968.-С.12.

67. Салмаков K.M., Хамзин К.А. Повышение чувствительности ИФА при бруцеллезе // III эпизоот. конференция.-Новосибирск.-1991.-С.180.

68. Сергеев A.A., Павлова И.П., Шаханина К.Л. и др. Результаты применения твердофазного иммуноферментного анализа для диагностики лептоспироза89

69. Актуальные вопросы иммунодиагностики особо опасных инфекций. Тез. докл. научн. конференции.-Ставрополь.-1986а.-С.93-96.

70. Спиридонов Г.Н., Гаффаров Х.З. Оценка наборов для диагностики туберкулеза крупного рогатого скота ИФА // Науч. производ. конф. по проблемам ветеринарии и животноводства.-Казань.-1995.-С.6.

71. Стоев Г.К., Захаров H.A., Шаханина K.JI. Получение моноспецифических сывороток к Ig Е человека, меченные пероксидазой // Лаб. дело.-1981.-С.357-359.

72. Стукалова Н.В., Карабак В.И., Алексахина H.H. и др. Выделение и изучение липополисахарида Klebsiella pneumoniae вакцинного штамма 204 // ЖМЭИ.-1997.-№1.-С.39-42.

73. Супотницкий М.В., Кравец И.Д., Новикова О.Д. Специфическая профилактика экспериментального сапа порином из Pseudomonas mallei // Ветеринария.-1995 .-№3 .-С.24-27.

74. Тимаков В.Д. Микробиология // Москва.-1973.-С.432.

75. Фарбер С.М., Тихонов Н.Г., Рыбкин B.C. и др. Изменение структуры возбудителей сапа и мелиоидоза под влиянием гуморальных факторов // Сб. научн. тр. ВНИПИ.-1992.-С.196-197.

76. Фарбер С.М., Ломова Л.В., Тихонов Н.Г. О перекрестном иммунитете между псевдомонадами//Сб. научн. тр. ВНИПИ.-1992.-С.197.

77. Ферстер Л.Н., Курилов В.Я. //Арх. пат.-1982.-№>11.-С.24-30.

78. Хамзин К.А., Салмаков K.M. Сравнительное изучение ИФА конъюгатов при индикации бруцеллезного антигена//Тез. докладов.-Казань.-1991.-С.22.

79. Хисматуллина H.A., Курбанова И.А., Макачев Н.З. Получение диагностических сывороток при лихорадке Ку животных // Тез. докл. научно-производ. конференции.-Казань.-1992.-С.49.

80. Цветков Н.Е, Черняк В.З. Сап //М.-Л.,1947.-С.258.

81. Цэгмэд Г., Ипатенко Н.Г. Изучение культурально-морфологических и вирулентных свойств B.mallei // Ветеринария.-1967.-№3.-С. 114-117.90

82. Шаров А.Н., Букова Н.К., Коровенков А.И. Пластинчатая РА при диагностике сапа // Ветеринария.-1998.-№8.-С.19.

83. Шаров А.Н., Букова Н.К., Попова Г.Г. Стандартизация антигенов для РСК // Сб. научн. тр. ВГНКИ.-1994.-С.110-116.

84. Ширяев Д.Т., Гольдберг A.M. Возбудитель сапа // Бактериологическая разведка и индикация бактериальных (биологических) средств.-Москва.-1971.-С.72-73.

85. Юсупов Р.Х., Хисматуллина H.A., Курбанова Э.А. Диагностика лихорадки Ку животных с применением моноклональных антител // Тез. научно-производ. конференции.-Казань.-1995.-С.61.

86. Яковлев А.Т., Зыкин Л.Ф., Рыбкин B.C. Иммуноферментный анализ в микробиологии // Саратов.-1990.-С.112.

87. Яковлев А.Т., Зыкин Л.Ф., Журавлев В.И. и др. Использование иммунофер-ментного метода для диагностики некоторых природноочаговых инфекций // Тезисы док. Всесоюзной научно-практической конференции.-Ставрополь.-1983.-С.361-362.

88. Яковлев А.Т. Дот-вариант ИФА для лабораторной диагностики особо опасных заболеваний // Сб. научн. тр. ВНИПИ.-1992.-С.201-202.

89. Якупов Т.Р., Хазипов Н.З. и др. ИФА для выявления туберкулеза крупного рогатого скота // Мат. конфер. по проблемам ветеринарии и животноводст-ва.-Казань.-1992.-С.57.

90. Barrett Т., Snyder I.D., Blake P.A. et al. Enzyme-linked immunosorbent assay for detection of Salmonella typhi Vi antigen in urine from typhoid patients // J. Clin. Microbiol.-1981 .-Vol. 15.-№2.-P.235-237.91

91. Batko U. Uber Rotzfalle beim Menschen // W. kl. W.-1898.-P.97-134.

92. Benvery G.C., Van Rossum F., Lanwers S. et al. Comparison of counter-immunoelectrophoresis and ELISA for diagnosis of bacterial meningitidis // Lan-cet.-1979.-№l.-P.208.

93. Berdal B.P., Farshy C.E., Felley J.C. Detection of Legionella pneumophilia antigen in urine by enzyme-linked immunosorbent assay // J. Clin. Microbiol.-1979.-Vol. 9.-№5.-P.575-578.

94. Berdal B.P., Olguik O., Omland T. A sandwich ELISA method for detection of Staphylococcus aureus enterotoxins // Acta pathol., microbiol. Scand. Sect. B.-1981.-Vol. 89.-№6.-P.411-415.

95. Blancou J. Early methods for the surveillance control of glanders in Europe // Rev Sei Tech.-1994.-№13.-P.545-576.

96. Blancou J. Les anciennes methodes de surveillance et de controle de la morve //Bull. Soc. Veter. Prat. Fr.-1994.-№l.-P.35-54.

97. Boyden S.V. // Prac. Soc. Exp. Biol.-1950.-V. 73.-P.289.

98. Brindle C.S., Cowan S.T. //J. Path. Bact.-1951.-Vol. 63.-P.571.

99. Buchman T.M. Antigen-specific serotyping of Neisseria gonorrhoeae // J. Infect. Dis.-1978.-№138.-P.319-325.

100. Carlsson H.E., Lindberg A.A. Enzyme-linked immunosorbent assay for immu nological diagnosis of human tularemia// J. Clin. Microbiol.-1975.-Vol. 10.-№5.-P.615-621.

101. Clarke D.R., Harper I.A. The detection of E. coli heat-labile enterotoxin by enzyme-linked immunosorbent assay//J. Infect.-1984.-Vol. 9.-№3.-P.244-251.

102. Cook I. // Med. J. Aust.-1962.-V. 2.-P.627/

103. Cravitz L., Miller W. // J. infect. Dis.-1950.-Vol. 86.-P.46.

104. Crosson F.J., Winkelstein J.A., Moxan E.R. Enzyme-linked immunosorbent assay for detection and quantitation of capsular antigen of Hemophilus influenzae type B // Infect. Immun.-1978.-№22.-P.617-619.92

105. Drow D.L., Manning D.O. Indirect sandwish enzyme-linked immunosorbent assay for rapid detection of Staphylococcus pneumoniae type 3 antigen // J. Clin. Microbiol.-1980.-Vol. 116.-P.641-645.

106. Gilardi G.L. Pseudomonas aeruginosa // Ed. L. D. Sabath.-1980.-P.25-30.

107. Hill H.R., Matsen J.M. Enzyme-labelled immunosorbent assay and radioimmunoassay in the serologic diagnosis of infectious diseases // J. Infect. Dis.-1983.-Vol. 147.-№2.-P.256-263.

108. Ito I.I., Wunderlich A.C., Lyons J. et al. Role of magnesium in the enzyme-linked immunosorbent assay for lipopolysaccarides of rough E. coli strain 15 and N. gonorrhoea // J. Infect. Dis.-1978.-№138.-P.319-325.

109. Katz J., Dewald R., Nicholson J. Procedurally similar competitive immunoassay systems for the serodiagnosis of Babesia equi, Babesia caballi, Trypanosoma equiperdum, and Burkholderia mallei infection in horses // J Vet Diagn Invest.-2000.-P.46-50.

110. Knigge K.M., Babb I.L., Firca I.R. et al. Enzyme immunoassay for the detection of group A streptococcal antigen // J. Clin. Microbiol.-1984.-Vol. 20.-№4.-P.735-741.

111. Laemmli U.K. //Nature.-1970.-V. 227.-P.680-685.

112. Mattingly J.A., Gehle W.D. An improved enzyme immunoassay for the detection of Salmonella // J. Food Sci.-1984.-Vol. 49.-№3.-P.807-809.

113. Miller W.R. et al. // Am. J. Bact.-1948.-V. 55.-P.115.

114. Minnich S.A., Hartman P.A., Heinich R.C. Enzyme immunoassay for the detection of Salmonella in foods // Appl. and Envmron. microbmol.-1982.-Vol. 43.-№7.-P.877-883.

115. Moody M.D. et al. // J. Bact.-1956.-V. 72.-P.357.

116. Morita T.N., Woodburn M.J. Homogeneous enzyme immunoassay for Staphylococcus enterotoxin B // Infect. Immun.-1978.-Vol. 21.-P.666-668.93

117. Morrow D.L., Kline I.B., Douglas S.D. et al. Rapid detection of group B streptococcal antigen by monoclonal antibody sandwich enzyme assay // J. Clin. Microbiol.-1984,-Vol. 19.-P.460-463.

118. Notermans S. Detection of Staphylococcal enterotoxins with special reference to the enzyme-linked immunosorbent assay // Isol. Identification methods food poison organisms. London.- 1982.-P. 199-209.

119. Pini A. // Arch. Vet. Ital.-1957.-V. 8.-P.103.

120. Ribly C.E. Enzyme-linked immunosorbent assay for detection of Salmonella lipopolysaccaride in poultry specimens // Appl. and Envmron. microbmol.-1984.-Vol. 47.-№6.-P. 1327-1330.

121. Robbins S.L. Textbook of Pathology // Philadelphia.-1957.-P.326.

122. Rubrik J.K., A Waller J.M., Britt E.M. Efficiacy of an enzyme immunoassay with uncentrifugen first-voided urine for detection of gonorrhea in males // J. Clin. Microbiol.-1984.-Vol. 20.-№>3.-P.577-578.

123. Sippel I.E., Voller A. Detection of N. meningitidis cell envelope antigen by enzyme-linked immunosorbent assay in patients with meningococcal disease // Trans. R. Soc. Trop. Med. Hyg.-1980.-Vol. 74.-№5.-P.644-648.

124. Sobezak H., Degner-Harms I., Krause H. Comparison of microscopy, culture and enzyme immunoassay for the detection of N. gonorrhaeae in urogenital specimens // J. Med. Microbiol.-1984.-№18.-P.271-276.

125. Stalon B., Mercenier A. // J. gen. Microbiol.-1984.-№l.-P.69-76.

126. Stanton D.Y., Fletcher A.H. // Presse med.-1925.-Vol. 24.-P.263.

127. Svensson S., Larsen K. An enzyme-linked immunosorbent assay ELISA for the determination of diphteria toxin antibodies // J. Immunol, methods.-1977.-№ 17.-P.249-256.

128. Thoen C.O., Tietz D.E., Armbrust A.L. et al. Enzyme immunoassay for detection Brucella antibodies in cows milk // J. Clin. Microbiol.-1979.-Vol. 10.-№2.-P.222-225.94

129. Thompson M.R., Brandwein H., Labihe R.M. et al. Simple and reliable enzyme-linked immunoassay with monoclonal antibodies for detection of E. coli heat-labile enterotoxin// J. Clin. Microbiol.-1984.-Vol. 20.-№l.-P.59-64.

130. Verma R.D., Venkateswaran K.S., Sharma J.K., Aqarwal G.S. Potency of partially purified malleo-proteins for mallein test in the diagnosis of glanders in equines // Veter. Microbiol.-1994.-№4.-P.391-397.

131. Wilson X., Nacane P. Imunnofluorescence and related staining technigues // Biomedical Press.- 1978.-P.215-224.

132. Yamada J.K., Nanomura I., Hayashis S. et al. Immunoperoxidase technigue for identification of M.gallisepticum and M.sinoviable // Nat. Inst. Anim. Hlth Guart.-1979.-Vol. 19.-№l-2.-P.40-46.

133. Yolken R.H. Davis D., Winkelstein I. et al. Enzyme immunoassay for the detection of pneumococcal antigen in cerebrospinal fluid // J. Clin. Microbiol.-1984.-Vol. 20.-№4.-P.802-805.

134. Yolken R.H., Greenberg H.B., Merson M.H. ELISA for the detection of E. coli heat-labile enterotoxin // J. Clin. Microbiol.-1977.-№6.-P.439-444.

135. Yolken R.H., Leister F.L. Comparison of fluorescent and colorogenic substrates for ELISA//J. Clin. Microbiol.-1982.-№5.-P.757-760.95