Иммуногистохимический анализ эпителиальных клеток молочной железы при опухолевом росте в условиях Республики Саха (Якутия)

Кириллина, Мария Петровна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Иммуногистохимический анализ эпителиальных клеток молочной железы при опухолевом росте в условиях Республики Саха (Якутия)
ВАК РФ 03.03.04, Клеточная биология, цитология, гистология

Автореферат диссертации по теме "Иммуногистохимический анализ эпителиальных клеток молочной железы при опухолевом росте в условиях Республики Саха (Якутия)"

На правах рукописи

005049221 Кириллина Мария Петровна

ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ ЭПИТЕЛИАЛЬНЫХ КЛЕТОК

МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ ПРИ ОПУХОЛЕВОМ РОСТЕ В УСЛОВИЯХ РЕСПУБЛИКИ САХА (ЯКУТИЯ)

03.03.04 — клеточная биология, цитология, гистология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Новосибирск - 2012

005049221

Работа выполнена в ФГБУ «Якутский научный центр комплексных медицинских проблем» СО РАМН (Якутск) и в ФГБУ «Научно-исследовательский институт региональной патологии и патоморфологии» СО РАМН (Новосибирск)

Научный руководитель:

доктор биологических наук, профессор

Официальные оппоненты:

доктор биологических наук, профессор

Лушникова Елена Леонидовна

Гуляева Людмила Федоровна

заведующая лабораторией молекулярных механизмов канцерогенеза ФГБУ «НИИ молекулярной биологии и биофизики» СО РАМН

Торнуев Юрий Васильевич

главный научный сотрудник лаборатории функциональной морфологии ФГБУ «НИИ региональной патологии и патоморфологии» СО РАМН

Ведущая организация:

ФГБУ «Научный центр клинической и экспериментальной медицины» СО РАМН (Новосибирск)

Защита диссертации состоится «¿Я^^-^/ъ/ 2012 г. в /¿^час. на заседании Совета по защите докторских и кандидатских диссертаций Д 001.037.01 в ФГБУ «НИИ региональной патологии и патоморфологии» СО РАМН по адресу: 630117, Новосибирск, ул. Тимакова, 2.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГБУ «НИИ региональной патологии и патоморфологии» СО РАМН.

Автореферат диссертации разослан « » 2012 г.

Ученый секретарь Совета по защите докторских и кандидатских диссертаций Д 001.037.01

Молодых Ольга Павловна

доктор биологических наук, профессор

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. В настоящее время одной из актуальнейших проблем не только онкологии, но и здравоохранения в целом является профилактика рака молочной железы (РМЖ), что обусловлено быстрым, неуклонным и повсеместным ростом заболеваемости данной формой рака, вышедшей на первое место в структуре заболеваемости женщин злокачественными новообразованиями (Писарева Л.Ф. и др., 2006). Связано это с лидирующим положением данной опухоли у женщин, опережающим по частоте встречаемости другие злокачественные новообразования (Семиглазов В.Ф., 2004; Давыдов М.И., Аксель Е.М., 2005; IARC, 1997,2001). Несмотря на большое количество исследований, посвященных совершенствованию методов диагностики и лечения РМЖ, результаты далеко не всегда остаются удовлетворительными. На сегодняшний день при оценке особенностей клинического течения, возможного исхода заболевания и выбора наиболее адекватной тактики лечения во внимание принимают такие клинико-морфологические параметры, как возраст, размеры первичного опухолевого очага, гистологический тип опухоли и степень ее злокачественности, наличие метастазов в аксиллярных лимфатических узлах и ряд других показателей (Тюляндин С .А., 2003; Божок A.A. и др., 2005; Писарева Л.Ф. и др., 2010,2012).

Не вызывает сомнения тот факт, что обнаружение РМЖ на ранних стадиях способствует улучшению отдаленных результатов лечения. Вместе с тем, индивидуальная оценка прогноза РМЖ, даже на ранней стадии опухолевого процесса, считается крайне актуальной. По данным ряда исследователей, выявить больных РМЖ с высокой вероятностью раннего рецидива на ранней стадии позволяет изучение показателей экспрессии некоторых молекуляр-но-биологических маркеров в первичных опухолях (Герцггейн Е.С., Кушлинский Н.Е., 2002; Кушлинский Н.Е., Герштейн Е.С., 2002; Toi М. et al., 1994; Beenken S.W., Bland K.I., 2002).

определенными органами, тканями, типами клеток, специфической функцией, пролиферативной активностью, внеклеточным магриксом и т.д. При этом к наиболее важным биологическим характеристикам опухолей, имеющим значение в прогнозе болезни, относят про-лиферативную активность (ПА) (по антигену Ki-67) опухолевых клеток, уровень их дифференцировки, гормонально-рецепторный статус, интенсивность апоптоза (по маркерам bcl-2 и р53), которые определяются с помощью иммуногистохимических методов (Ferrara N., 1995; Adams J. et al., 2000; Biroccio A. et al., 2000).

Несмотря на широкое внедрение иммуногистохимических методик в диагностику онкозаболеваний, следует отметить, что в данной области все еще происходит накопление знаний об изменении экспрессии тех или иных маркеров пролиферации, дифференцировки и гибели клеток. В большинстве исследований оценивается экспрессия ограниченного числа маркеров, что не позволяет выделить наиболее информативные предикторы усиления малигнизации. Важно также отметить необходимость проведения диагностических исследований с учетом этнической принадлежности, поскольку для многих видов злокачественных опухолей, в том числе, и для рака молочной железы установлена существенная роль этнических и генетических факторов (Берштейн JI.M., 2005).

Цель исследования - изучить особенности экспрессии молекулярных маркеров в эпителиальных клетках молочной железы при опухолевом росте в зависимости от возраста и этнической принадлежности на примере Республики Саха (Якутия).

Задачи исследования:

1. Изучить содержание и уровень экспрессии рецепторов эстрогена (ER) и прогестерона (PgR) в эпителиальных клетках рака молочной железы в зависимости от возраста.

2. Изучить и выявить особенности маркеров апоптоза и пролиферации в эпителиальных клетках рака молочной железы (Ki-67 р53, bcl-2).

3. Провести сравнительный анализ «иммуногистохимических фенотипов» эпителиальных клеток молочной железы при РМЖ в зависимости от возраста, размера опухоли, степени гистологической злокачественности.

4. Провести сравнительный анализ молекулярно-биологических свойств эпителиальных клеток молочной железы при РМЖ в зависимости от этнической принадлежности.

Научная новизна. Впервые проведено комплексное иммуно-гистохимическое исследование эпителиальных клеток молочной железы при опухолевом росте у женщин разной этнической принадлежности в Республике Саха (Якутия). Впервые установлены особенности экспрессии маркеров пролиферативной активности, дифференцировки и апоптоза в зависимости от возраста, этнической принадлежности, характера роста и степени злокачественности опухолей.

Впервые, поданным клинико-морфологического анализа, установлено, что рак молочной железы развивается чаще у представительниц некоренных национальностей Республики Саха (Якутия) (60%), чем у представительниц коренной национальности (40%). Заболевание раком молочной железы с наибольшей частотой регистрируется у женщин коренной и некоренных национальностей в возрастных группах 50 - 59 лет (32,6%) и 60 - 69 лет (21,8%). У женщин некоренных национальностей опухоли с распространением в грудную стенку и кожу развиваются в 2 раза чаще (15,9% случаев), чем у женщин коренной национальности (6,8% случаев).

Впервые показано, что вне зависимости от этнической принадлежности наиболее распространенной гистологической формой рака молочной железы у женщин Республики Саха (Якутия) является инфильтративный протоковый рак (65,3%). В общей группе обследованных преобладают клинические варианты течения ИА и ПБ стадий (58,5% случаев), в то время как у пациенток до 39 лет - НТК стадия (43,2%).

Впервые при проведении иммуногистохимического анализа показано, что в общей группе обследованных преобладают опухоли молочной железы, в которых эпителиоциты экспрессируют рецепторы эстрогена и прогестерона (64,9% случаев). Установлено увеличение с возрастом доли рецептор-содержащих опухолей молочной железы. Рецептор-отрицательный профиль рака молочной железы во всех возрастных группах встречается реже вне зависимости от этнической принадлежности. Впервые показано, что у женщин некоренных национальностей повышение уровня экспрессии рецепторов эстрогена с возрастом статистически достоверно, в то время как у представительниц коренной национальности такая закономерность отсутствует. Увеличение доли рецептор-положительных опухолевых клеток с возрастом в большей степени выражено для рецепторов эстрогена, чем прогестерона.

Впервые установлено, что между размерами опухолей и уровнем экспрессии рецепторов эстрогена и прогестерона существует отрицательная корреляционная связь. Опухоли с высокой степенью злокачественности характеризуются низкой экспрессией рецепторов эстрогена и прогестерона. Впервые выявлено, что степень гистологической злокачественности опухолей молочной железы положительно коррелирует с экспрессией антигенов Кл-67 и р53 и отрицательно - с экспрессией антигена Ьс1-2.

В качестве наиболее информативных критериев повышения злокачественности опухолей молочной железы предложено рассматривать понижение экспрессии рецепторов эстрогена и прогестерона, повышение экспрессии Кл-67 и р53 и уменьшение экспрессии Ьс1-2.

Теоретическая и практическая значимость. Выявленные новые сведения об иммуногистохимических особенностях эпителиальных клеток при раке молочной железы могут быть использованы в практическом здравоохранении для прогнозирования течения болезни и оптимизации терапевтических подходов, индивидуализации химио-, гормональной, таргетной и лучевой терапии у больных РМЖ. Установленные особенности иммуногистохимических свойств эпителиальных клеток молочной железы при РМЖ позволят дополнить фундаментальные представления о канцерогенезе и позволят улучшить качество и достоверность морфологической оценки степени экспрессии онкомаркеров.

Внедрение результатов исследования в практику. Результаты исследования используются в практической работе патологоана-томического отдела Национального центра медицины ГБУ РС (Я) «Республиканская больница №1 - Национальный центр медицины», в учебном процессе на кафедрах гистологии, цитологии и эмбриологии, нормальной и патологической анатомии Медицинского института Северо-Восточного Федерального университета.

Основные положения, выносимые на защиту.

1. РМЖ чаще имеет рецептор-положительный статус (64,9%). У женщин некоренных национальностей с возрастом происходит повышение уровня экспрессии рецепторов эстрогена, у женщин коренных национальностей такая закономерность отсутствует.

2. Прогностические факторы РМЖ-степень пролиферации (Кл-67), экспрессия р53 и Ьс1-2 - имеют достоверную связь со степенью гистологической злокачественности.

3. У женщин коренных национальностей частота выявления

гормонозависимых опухолей при РМЖ не зависит от возраста; имеется связь между ПА и уровнем экспрессии гена-супрессора р53.

2009), Республиканской научно-практической конференции «Медицина в современном мире: взгляд научной молодежи» (Якутск,

2010), XVIII межрегиональной научно-практической конференции онкологов Якутии «Современное состояние и перспективы развития онкологической помощи в различных климатогеографических зонах» (Якутск, 2012), межлабораторной научной конфренции в ФГБУ «НИИ региональной патологии и патоморфологии» СО РАМН (Новосибирск, 2012).

Публикации. По теме диссертации опубликована 21 работа, в том числе 3 в журналах, рекомендованных ВАК для публикации материалов диссертационных исследований.

Структура и объем работы. Диссертация изложена на 122 страницах машинописного текста, иллюстрирована 32 рисунками (17 фотографиями), содержит 12 таблиц. Состоит из введения, обзора литературы, описания материала и методов исследования, главы собственных исследований, обсуждения результатов, выводов, практических рекомендаций, списка использованной литературы. Список литературы включает 277 источников, из них 161 - отечественных авторов и 116 - зарубежных.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Общая характеристика клинического материала. Объектом исследования послужили фрагменты тканей молочной железы, по-

лученные от 294 женщин, которым были проведены оперативное лечение и/или пункционные биопсии в Якутском Республиканском онкологическом диспансере и 2-м хирургическом отделении Клинического центра ГБУ Республики Саха (Якутия) «Республиканская больница № 1 - Национальный центр медицины». В проводимом исследовании коренными жителями считали якутов, эвенов и эвенков, некоренными - всех лиц других национальностей, в различные сроки прибывших из регионов России и стран СНГ. По этнической принадлежности женщин коренных национальностей было 118 (40,1%), женщин некоренных национальностей -176 (59,9%). Вся выборка представлена 294 патологоанатомическими исследованиями. Все исследования проведены с одобрения Локального комитета по биомедицинской этике ФГБУ «Якутский научный центр комплексных проблем» СО РАМН.

Диагноз рака молочной железы устанавливали согласно «Гистологической классификации опухолей молочной железы» (ВОЗ, 2003). Распространенность заболевания определяли согласно международной классификации по системе TNM (2002). Степень злокачественности (Grade) определяли по параметрам Elston & Ellis (Elston C.W., Ellis I.O, 1991).

Морфологические (цитологические, гистологические и нм-муногистохимнческие) методы исследования. В исследование вошли данные морфологического исследования операционного материала: удаленная молочная железа с подмышечно-подклю-чично-подлопаточной клетчаткой - при выполнении радикальной мастэктомии и сектор молочной железы с опухолью с подмышеч-но-подключично-подлопаточной клетчаткой - при выполнении радикальной резекции. В ткани молочной железы измеряли размер опухоли, подсчитывали и измеряли лимфатические узлы. Материал фиксировали в 10% нейтральном формалине в течение 24 ч. Далее фрагменты молочной железы обрабатывали по стандартной методике для получения парафиновых срезов.

Иммуногистохимическое исследование проводили на серийных парафиновых срезах. После демаскировки антигенных детерминант окрашивание проводили непрямым иммунопероксидазным методом. Срезы инкубировали 40 - 60 мин с первичными моноклональными антителами к антигенам эстрогена (ER), прогестерона (PgR), Ki-67, р53, bcl-2 (использованы RTU-ER-6F11, RTU-PGR-312, RTU-Ki-67-ММ1, RTU-p53-D07, RTU-bcl-2/100/D5, «Novocastra», Велико-

британия). Окрашивание выполняли в соответствии с инструкцией фирмы-производителя.

При оценке результатов исследования для ER и PgR проводили определение доли окрашенных клеток в баллах (Петров C.B., 2004; Leake R.et al., 2000): 0 - полное отсутствие ядерного окрашивания, 1 - до 10% клеток в исследуемом препарате с ядерным окрашиванием, 2 - до 1/3 клеток с ядерным окрашиванием, 3 - от 1/3 до 1/2 клеток с ядерным окрашиванием, 4 - от 1 /2 до 2/3 клеток с ядерным окрашиванием, 5 - от 2/3 до 100% клеток с ядерным окрашиванием. Определение интенсивности экспрессии антител также выполняли в баллах: 0 - полное отсутствие экспрессии в ядрах клеток опухоли, 1 - слабое ядерное окрашивание, 2 - умеренное ядерное окрашивание, 3 - сильное ядерное окрашивание. При получении суммарного результата, который был меньше или равен 2, реакция считалась негативной (-), 3 и более - позитивной (+).

Индекс Ki-67-положительных клеток (пролиферативную активность - ПА) определяли при анализе не менее 100 ядер по формуле:

число Ki-67 положительных клеток X 100

ПА=---

общее количество клеток

Низкая ПА соответствовала индексу Ki-67 менее или равному 15%; высокая ПА - при индексе Ki-67 более 15%. Низкая экспрессия р53 регистрировалась при наличии экспрессии в менее чем 25% клеток; высокая экспрессия р53 - при наличии экспрессии в более чем 25% ядер опухолевых клеток (ядерное окрашивание).

Низкая экспрессия bcl-2 регистрировалась при наличии экспрессии в менее чем 25%; высокая экспрессия bcl-2 - при наличии экспрессии в более чем 25% опухолевых клеток (цитоплазматиче-ское окрашивание).

Статистическая обработка полученных данных. Статистический анализ данных проводили с помощью статистического пакета SPSS STATISTICS 17.0 (SPSS Inc.). Проверка нормальности распределения количественных признаков проведена с использованием критерия Колмогорова-Смирнова с поправкой Лиллиефорса и критерия Шапиро-Уилка. При сравнении независимых групп по количественным признакам применяли непараметрические критерии Манна-Уитни и Краскела-Уоллиса. Сравнение групп по качественным признакам проводили с использованием таблиц сопряженности с определением критерия X2 и точного критерия Фишера.

Для анализа взаимосвязи между анализируемыми признаками применяли ранговый корреляционный анализ по Спирмену. Выборочные параметры, приводимые далее в таблицах, имеют следующие обозначения: n-объем анализируемой подгруппы; М- среднее значение; SD - стандартное отклонение; Ме (25 и 75%) - медиана и меж-квартильное распределение; р - достигнутый уровень значимости. Критическое значение уровня значимости принималось равным 5%.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Средний возраст прооперированных женщин составил 54,2±12,1 года. Женщин коренных национальностей (118 случаев) было меньше, чем некоренных национальностей (176 случаев) (р=0,0005). Большинство обследованных составили женщины возрастной группы 50 - 59 лет - 96 человек (32,6%), в возрасте 60 - 69 лет были 64 женщины (21,8%), в возрасте от 40 - 49 лет- 60 женщин (20,4%), до 3 9 лет - 3 7 женщин (12,6%), в возрасте 70 лет и старше - 3 7 женщин (12,6%). Несмотря на то, что РМЖ чаще встречается в возрасте 55 - 65 лет, в последние годы наблюдается тенденция к возрастанию доли молодых женщин по отношению ко всему массиву больных РМЖ (Закиряходжаев А.Д., 2007).

Эта тенденция прослеживается и в нашем исследовании. Среди женщин в возрасте до 39 лет 5 женщин (1,7%) были в возрасте от 20 до 29 лет, от 30 до 39 лет - 32 случая (10,9%). Эти результаты сопоставимы с показателями экономически развитых стран, где примерно 75% случаев РМЖ приходится на женщин в постменопаузе (Anderson W.F. et al., 2002). Полученные нами результаты подтверждают общепринятое мнение, что возраст женщины с РМЖ является одним из прогностических критериев.

Преимущественной гистологической формой РМЖ у обследованных женщин был инфильтративный протоковый РМЖ, который выявлен у 192 (65,3%) женщин. Вторым по частоте встречаемости был смешанный рак (инфильтративный протоково-дольковый) (11,2%), на третьем месте - инфильтративный дольковый рак (7,8%). В 15 (5,1%) случаях был диагностирован нейроэндокринный рак, в 7 (2,4%) случаях был диагностирован инвазивный рак без уточнения формы ввиду выраженности лечебного патоморфоза и в 6 (2,0%) случаях - рак Педжета. Другие формы рака (медуллярный,

тубулярный, папиллярный и др.) составили 6,8% (20 случаев).

В нашем исследовании преобладали опухоли размерами от 2 до 5 см -185 случаев (62,9%). Сравнение по этнической принадлежности показало, что у женщин некоренных национальностей опухоли с распространением в грудную стенку и кожу были выявлены в 28 (15,9%) случаях, тогда как у женщин коренных национальностей - в 8 (6,8%) случаях (х2=4,66, (1Г=1, р=0,03).

Нами установлена также зависимость между размерами первичной опухоли и количеством пораженных метастазами лимфатических узлов (р=0,001), которая может рассматриваться в качестве критерия неблагоприятного клинического течения РМЖ. Оценка распространенности заболевания, согласно международной классификации по системе "ШМ (2002 г.), показала, что у 26 (8,8%) женщин с РМЖ была зарегистрирована I стадия заболевания, у 122 (41,5%) - НА стадия, у 50 (17,0%) - ПБ стадия, у 20 (6,8%) -ША стадия, у 75 (25,5%) - 1ПБ стадия и у 1 (0,3%) женщины - IV стадия. В возрастной группе женщин до 39 лет наиболее часто регистрировался РМЖ П1Б стадии, тогда как в других возрастных группах чаще отмечалась НА стадия РМЖ (х2=5,7, <31=1, р=0,01). В совокупных показателях в группах коренных и некоренных женщин при РМЖ выявлено, что в обеих этнических группах наиболее часто встречался РМЖ 11А стадии (52/44,1% и 70/40% соответственно) 0с2=6,2, сН=5, р=0,28).

Полученные данные свидетельствуют о том, что у молодых женщин (до 39 лет) отмечалась более высокая частота выявления РМЖ на поздних стадиях (ШБ), что можно объяснить низкой клинической настороженностью и тем, что данная возрастная группа не входит в программу скрининга заболеваний молочной железы, в которую в Республике Саха (Якутия) включены женщины в возрасте 40 лет и старше.

Исследование гистологической степени злокачественности РМЖ установило, что большинство больных относились к группе с в2 опухолями (49,6%). Статистически значимые взаимосвязи установлены между размерами опухолей и степенью злокачественности. Так, опухоли Т4 достоверно чаще характеризовались степенью гистологической злокачественности вЗ (19,2%), чем (%2= 4,6, сИ=1, р=0,03). Также установлена зависимость между наличием метастазов в лимфатических узлах и степенью злокачественности. Так, при вЗ у 61,5% женщин выявлены метастазы в регионарные

до 39лет 40-49 50-59 60-69 старше70 R+ МИД!« R-Линейная (R+) ------Линейная (R-)

Рис. 1. Динамика изменения рецепторного статуса РМЖ в зависимости от возраста.

лимфатические узлы, в то время как при G1 - в 40,6% (%2=z 5,1, df== 1, р,_2= 0,02), а при G2 - в 41,1% случаев (х2= 5,6, dfM, р2.3=0,01).

При иммуногистохимическом анализе экспрессии ER и PGR в эпителиоцитах молочных желез нами были сформированы 4 группы с различной комбинацией стероидных рецепторов в опухолевых клетках: ER+/PGR- (7,8%), ER-/PGR+ (5,4%), ER-/PGR- (35%), ER+/PGR+ (51,7%). В совокупности рецептор-положительных опухолевых клеток при РМЖ было достоверно больше, чем рецептор-отрицательных (р<0,05) - 191 случай (64,9%) от общего числа исследований: в возрастной группе до 50 лет - 60 случаев (31,4%), старше 50 лет - 131 случай (68,6%). Эти данные несколько меньше, чем полученные другими исследователями в развитых странах (80%) (Anderson W.F., 2002). Анализ динамики изменения рецепторного статуса РМЖ в зависимости от возраста не выявил статистически достоверных различий (р=0,14), но установлена тенденция к увеличению частоты (доли) рецептор-положительных РМЖ с увеличением возраста. Так, в группе до 39 лет они составили 56,7%, а в группе старше 70 лет - 75,6% (рис. 1).

При этом в обеих группах преобладал рецептор-положительный профиль РМЖ (соответственно 48,3 и 54% случаев у коренных и некоренных жительниц); рецептор-отрицательный профиль РМЖ встречался реже (соответственно 38,1 и 32,9% случаев). Установлена связь между возрастом пациенток и экспрессией ER (р=0,03) (рис. 2). Если в возрасте до 39 лет средний суммарный балл оценки

до39лет 40-49 50-59 60-69 старше70 ■ ЕЕ вРйК

Рис. 2. Изменение уровня экспрессии ЕЯ и при РМЖ в зависимости от возраста.

доли положительных клеток и интенсивности уровня экспрессии ЕЯ был равен 3,2, то в последующих возрастных группах отмечено неуклонное повышение этих показателей до 3,7 баллов у больных РМЖ старше 70 лет. При оценке изменений уровня экспрессии PgR подобной линейной связи не выявлено (р=0,54).

При статистическом анализе данных в соответствии с этнической принадлежностью нами выявлены различия среди женщин коренной и некоренной национальностей. У коренных женщин с возрастом наблюдалась тенденция к незначительному увеличению уровня экспрессии ЕЙ, в то время как у женщин некоренных национальностей повышение уровня экспрессии ЕЯ было статистически достоверным (г=0:20, р=0,01). Другие авторы также отмечали различия в содержании гормонов в крови у женщин разных этнических групп в регионах Сибири, в частности, более высокий уровень эстрадиола у представительниц коренных народов (тувинок, хакасок, буряток) при меньшей частоте заболеваемости РМЖ (Писарева Л.Ф. и др., 2011). С учетом вышесказанного можно сделать предположение, что одним из последствий этнических различий в особенностях биосинтеза стероидов (конкретно ЕЯ) могут быть и различия в частоте «использования» различных механизмов канцерогенеза со сдвигом к более высокой частоте гормон-индуцированных повреждений ДНК у европеоидов по сравнению с представителями азиатской расы. К тому же более высокий уровень этих гормонов у

коренных народов может отражать разные адаптивные программы к условиям внешней среды и не служить значимым фактором риска развития РМЖ (Писарева Л.Ф. и др., 2011).

Нами установлена отрицательная статистически значимая связь между размером опухоли и уровнем экспрессии ЕЯ (г= -14,1, р=0,01б) и Р§Я (г= -20,5, р<0,001), т.е. чем выше был уровень экспрессии рецепторов, тем меньше оказывался размер опухоли.

Статистический анализ сопоставления степени злокачественности опухолей с наличием ЕЯ и Р§Я выявил корреляцию между степенью гистологической злокачественности РМЖ и рецепторным профилем клеток опухоли (х2=20,40, <11=6, р=0,002). Опухоли с высокой степенью гистологической злокачественности характеризовались низкой экспрессией ЕЫ и PgR (р<0,05). При увеличении степени злокачественности статистически значимо чаще наблюдались рецептор-отрицательные опухоли, а частота рецептор-положительных - снижалась (р<0,05).

Пролиферативная активность опухолевых клеток молочной железы определялась с помощью универсального маркера пролиферации Кл-67, который экспрессируется практически во всех фазах митотического цикла и отражает величину пролиферативного пула опухоли (Пожарисский К.М., Леенман Е.Е., 2000). В нашем исследовании в 272 случаях (92,5%) экспрессия Кл-67 была выявлена в менее чем 15% опухолевых клеток (низкая ПА). Экспрессию Ю-67 в более чем 15% опухолевых клеток (высокая ПА) мы наблюдали у 22 женщин (7,5%). Ввиду значительного количества отрицательных результатов при выявлении маркера Кь67 (экспрессия была равна «0») и большой вероятности ложноотрицательного результата, нами было принято решение провести анализ с учетом значений индекса больше 1%, для исключения статистических погрешностей.

Анализ характера экспрессии К1-67 в зависимости от возраста показал, что уровень экспрессии антигена К1-67 не зависел от возраста (х2= 4,1, сН=4, р=0,39). Высокая ПА опухолевых клеток встречалась как у пациенток пожилого, так и более молодого возраста. В совокупных показателях в группах коренного и некоренного населения при РМЖ статистически значимых корреляций ПА с этнической принадлежностью установлено не было (х.2=1,6, (Н=1, р=0,20). Многочисленные исследования показали, что ПА опухолевых клеток при РМЖ прямо коррелирует со степенью гистологической злокачественности (Упоров А.В. и др., 2000; Keshgegian А. е! а1., 1995).

Полученные в нашем исследовании результаты свидетельствуют о том, что уровень экспрессии антигена Ki-67 статистически значимо различался при разных гистологических вариантах РМЖ (-/2= 3,58, df=l, р=0,05): наблюдалась тенденция к увеличению степени гистологической злокачественности при увеличении экспрессии Ki-67. Эти результаты не противоречат данным литературы об антигене Ki-67 как маркере неблагоприятного исхода заболевания (Choi D.H., 2005; Costarelli L. et al., 2005; Kronqvist P. et al., 2004).

Важно отметить, что ПА опухолевых клеток служит независимым прогностическим показателем возникновения рецидива, общей и безрецидивной выживаемости (Honkoop А.Н. et al., 1998; Imamura H. et al., 1997; Pietilainen T. et al., 1996), а также предсказательным фактором для определения чувствительности к лучевой и химиотерапии (Rozan S. et al., 1998). Проведенный нами анализ подтвердил зависимость между степенью злокачественности и пролиферативной активностью опухолей, что доказывает необходимость учета ПА опухолевых клеток в оценке злокачественного потенциала и прогноза РМЖ.

При анализе взаимосвязи с другими молекулярными маркерами мы установили, что имеются статистически значимые связи между ПА (по маркеру Ki-67) и уровнем экспрессии мутантного гена-супрессора р53 (г=0,33, р<0,001) в группе коренных женщин. По данным А.В.Упорова и др. (2000), возможно это связано с мутациями супрессорного гена р53, по современным представлениям, играющего ведущую роль в регуляции клеточного деления.

При иммуногистохимическом исследовании мутантного гена-супрессора р53 его низкая экспрессия (в менее чем 25% опухолевых клеток) наблюдалась в 197 (67,0%) случаях, в то время как высокая экспрессия (более 25% опухолевых клеток) - в 97 (33,0%) случаях. При анализе данного показателя с учетом этнической принадлежности нами установлено, что у коренных женщин существует статистически значимая слабая положительная корреляция (г=0,21, р=0,02) между возрастом и экспрессией р53. Низкая экспрессия р53 у представительниц коренного населения достигала максимальных значений в возрасте 40 - 49 лет (27,2%), а у некоренных - в возрасте 50 - 59 лет (36,7%). В совокупных показателях в обеих группах статистически значимых возрастных различий не выявлено (х2= 1,8, df=4, р=0,76). Установлена положительная зависимость между уровнем экспрессии р53 и увеличением степени гистологической

шЖШШШ Wm

Iii (Ö.fi

< : , ЩрВШШ • " 1 «ЙаЯИ

Gl; 803

швшт G2; 25.7

Gl; 19,7 <33; 34,4

в более25% в мснее25%

Рис. 3. Зависимость между экспрессией Ьс)-2 и степенью гистологической злокачественности опухолей молочной железы.

злокачественности опухоли (х2=7,9, df=2, р=0,01), что доказывает необходимость учета выраженности процесса апоптоза клеток в оценке злокачественного потенциала опухоли и прогноза РМЖ.

При иммуногистохимическом исследовании экспресси антиапо-птотического гена-супрессора bcl-2 нами выявлена низкая экспрессия bcl-2 в 142 случаях (48,3%), высокая экспрессия - в 152 случаях (51,7%). Анализ данных с учетом этнической принадлежности не выявил различий в частоте встречаемости случаев с низкой и высокой экспрессией bcl-2 (х2=0,23, df=l, р=0,64). Низкая экспрессия bcl-2 у коренных и некоренных женщин наиболее часто регистрировалась в возрасте 50 - 59 лет (соответственно 33,9 и 36,1%). Высокая экспрессия bcl-2 у коренных наблюдалась чаще в возрасте 60 - 69 лет (27,1%), у некоренных - в возрасте 50 - 59 лет (37,6%).

По данным литературы, bcl-2 является опухолевым геном-су-прессором, влияющим на механизмы клеточной смерти, подавляя апоптоз (Jacobson M.D. et al., 1993). Как считают многие авторы, повышенная экспрессия bcl-2 ассоциируется с увеличением выживаемости пациенток после проведения адъювантной терапии. Возможно, это объясняется тесной связью между экспрессией bcl-2 и экспрессией ER и PgR, а также низкой ПА. Однако bcl-2 не является независимым прогностическим фактором (Buchholtz Т.А. et al., 2003; Pusztai I., 2004). Нами установлена отрицательная корреляция между экспрессией антигена bcl-2 и степенью гистологической злокачественности опухолей (г=-12,9, р=0,03), т.е. опухоли с высокой

степенью злокачественности характеризовались низкой экспрессией bcl-2 (рис. 3), которая характеризует сохранение регуляции апоптоза на уровне нормы.

При оценке уровня экспрессии гена-ингибитора bcl-2 с фенотипом ER-/PgR- выявлены статистически значимые различия между низкой и высокой экспрессией bcl-2 (р<0,05): при дважды отрицательном рецепторном профиле РМЖ низкая экспрессия bcl-2 встречалась в 1,5 раз чаще, чем высокая (соответственно 60 и 42 случая). При дважды-положительном профиле РМЖ (ER+/PgR+), наоборот, в 1,5 раза чаще регистрировался высокий уровень bcl-2, чем низкий (соответственно 92 и 61 случай). То есть при высокой экспрессии bcl-2 статистически значимо чаще наблюдались рецептор-положительные опухоли, а частота рецептор-отрицательных снижалась (р<0,05). Следовательно, такой прогностический благоприятный критерий РМЖ, как наличие ER и PgR, сочетался с достоверно более высоким уровнем bcl-2.

Наши данные также подтверждают исследования многих авторов, утверждающих, что интенсивность реакции при оценке bcl-2 и ее распространенность коррелирует с наличием рецепторов ER и PgR и низкой степенью злокачественности опухолей. Следовательно, такой прогностический благоприятный критерий РМЖ, как наличие ER и PgR на опухолевых клетках, сочетался с достоверно более высоким уровнем экспрессии bcl-2. Таким образом, экспрессия bcl-2 связана с факторами, указывающими на благоприятный прогноз противоопухолевой терапии (Leek R.D. et al, 1994; Silvestrini R. et al., 1994).

Изучение уровня экспрессии bcl-2 позволяет отнести данный показатель к маркерам биологического поведения опухоли и прогноза РМЖ. Кроме того, по данным некоторых исследователей (Владимирская Е.Б. и др., 1997; Лихтенштейн А.В. и др, 1997), резистентность опухолей к воздействию противоопухолевых препаратов и облучению может быть обусловлена повышенной экспрессией bcl-2, поскольку гибель опухолевых клеток при этих воздействиях происходит по механизму апоптоза (Levine A.J. et al, 1991). Исходя из этого, можно сделать вывод, что экспрессия bcl-2 имеет непосредственное отношение и к эффективности химиотерапии (Eliopoulus A.G. et al, 1995). Однако bcl-2 не является независимым прогностическим фактором (Buchholtz Т.A. et al, 2003; Pusztai I, 2004).

выводы

1. По данным клинико-морфологического анализа, рак молочной железы развивается чаще у представительниц некоренных национальностей Республики Саха (Якутия) (60%), чем у представительниц коренных национальностей (40%). Заболевание раком молочной железы с наибольшей частотой регистрируется у женщин коренных и некоренных национальностей в возрастных группах 50 - 59 лет (32,6%) и 60 - 69 лет (21,8%). У женщин некоренных национальностей опухоли с распространением в грудную стенку и кожу развиваются в 2 раза чаще (15,9% случаев), чем у женщин коренных национальностей (6,8% случаев).

2. Преимущественной гистологической формой рака молочной железы у женщин Республики Саха (Якутия) является инфильтра-тивный протоковый рак (65,3%). В общей группе обследованных преобладают клинические варианты течения НА и ОБ стадий (58,5% случаев), в то время как у пациенток до 39 лет - ШБ стадия (43,2%). В обеих этнических группах наиболее часто встречается рак молочной железы ПА стадии (44 и 40% соответственно некоренных и коренных национальностей).

3. По данным иммуногистохимического анализа, в общей группе обследованных преобладают опухоли молочной железы, в которых эпителиоциты экспрессируют рецепторы эстрогена и прогестерона (64,9% случаев): в возрастной группе до 50 лет - 31,4% случаев, старше 50 лет — 68,6% случаев. Рецептор-отрицательный профиль рака молочной железы во всех возрастных группах встречается реже вне зависимости от этнической принадлежности. Увеличение доли рецептор-положительных опухолевых клеток с возрастом в большей степени выражено для рецепторов эстрогена, чем прогестерона. У женщин некоренных национальностей повышение уровня экспрессии рецепторов эстрогена с возрастом статистически достоверно, в то время как у представительниц коренных национальностей такая закономерность отсутствует.

4. Между размерами опухолей и уровнем экспрессии рецепторов эстрогена и прогестерона существует отрицательная корреляционная связь (г = -14,1, р=0,016 иг — -20,5, р<0,001 соответственно). Опухоли с высокой степенью злокачественности характеризуются низкой экспрессией рецепторов эстрогена и прогестерона (р<0,05). Уровень экспрессии антигена Ьс1-2 и его распространенность поло-

жительно коррелируют с наличием рецепторов ER и PgR на опухолевых клетках и низкой степенью злокачественности опухолей.

5. Степень гистологической злокачественности опухолей молочной железы положительно коррелирует с экспрессией антигенов Ki-67 и р53 и отрицательно - с экспрессией антигена bcl-2 fr=-12 9 р=0,03).

6. Наиболее информативными критериями повышения злокачественности опухолей молочной железы являются понижение экспрессии рецепторов эстрогена и прогестерона, повышение экспрессии Ki-67 и р53 и уменьшение экспрессии bcl-2.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. С учетом территориальных особенностей, малой плотности населения в Республике Саха (Якутия), ростом заболеваемости РМЖ в молодом возрасте, в целях ранней диагностики РМЖ необходима организация скринингового обследования женского населения в более раннем возрасте (с 30 лет).

2. Кроме определения ER, PgR, Her-2/neu, необходимо включение в стандарты диагностики РМЖ также маркеров биологической активности (Ki-67, р53, bcl-2), что в конечном итоге является определяющим звеном в оптимизации терапевтических подходов, индивидуализации химио-, гормональной, таргетной и лучевой терапии у больных РМЖ, основанных на результатах исследования маркеров биологической активности опухоли.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Лоскутова К.С., Иннокентьева A.C., Кириллина М.П., Сивцева Т.П., Аргунов В.А. Особенности экспрессии рецепторов эстрогена и прогестерона клетками рака молочной железы // Материалы 16-й межрегиональной конференции онкологов «Актуальные вопросы маммологии на Севере». - Якутск, 5-6 июня 2008. - С.41-42.

2. Лоскутова К.С., Иннокентьева A.C., Кириллина М.П., Сивцева Т.П., Аргунов В.А. Определение Нег-2 статуса при раке молочной железы // Материалы 16-й межрегиональной конф. онкологов «Аетуаль-

ные вопросы маммологии на Севере». - Якутск, 5-6 июня 2008.-С.42-43.

3. Лоскутова К.С., Аргунов В.А., Иннокентьева A.C., Сивцева Т.П., Кириллина М.П. Иммуноморфологическая характеристика гормонального статуса первичного рака молочной железы в Республике Саха (Якутия) // Якутский медицинский журнал. - 2009. - № 1. - С. 46-49.

4. Лоскутова К.С., Иннокентьева A.C., Сивцева Т.П., Кириллина М.П., Аргунов В.А. Экспрессия Нег-2 опухолевыми клетками рака молочной железы // Материалы III съезда Российского общества патологоанатомов. - Самара, 26-30 мая 2009. -Т.2. - С. 610-611.

5. Лоскутова К.С., Аргунов В.А., Иннокентьева A.C., Сивцева Т.П., Кириллина М.П. Рецепторный статус рака молочной железы в Якутии // Материалы III съезда Российского общества патологоанатомов. - Самара, 26-30 мая 2009. - Т.2. - С. 611-614.

6. Лоскутова К.С., Аргунов В.А., Иннокентьева A.C., Кириллина М.П., Сивцева Т.П., Труфанов A.C. Новые технологии в онкомор-фологии: иммуногистохимическое определение HER2/neu при раке молочной железы // Материалы XVI межрегиональной научно-практ. конф. онкологов с междунар. участием «Актуальные вопросы пре-канцерогенеза и злокачественных опухолей в различных климато-географических зонах». - Якутск, 15 октября 2009.-С. 139-140.

7. Кириллина М.П., Лоскутова К.С., Аргунов В.А., Иннокентьева A.C., Сивцева Т.П., Труфанов A.C. Новые технологии в онкоморфо-логии: иммуногистохимическое определение гормонального статуса рака молочной железы // Материалы XVI межрегиональной научно-практ. конф. онкологов с междунар. участием «Актуальные вопросы преканцерогенеза и злокачественных опухолей в различных клима-тогеографическихзонах». — Якутск, 15 октября 2009.-С. 140-142.

8. Лоскутова К.С., Кириллина М.П., Иннокентьева A.C., Сивцева Т.П., Аргунов В.А. Иммуногистохимический профиль рака молочной железы в Республике Саха (Якутия) // Материалы Всероссийской конференции с международным участием посвященной 100-летию Российского общества патологоанатомов. - Санкт-Петербург, 9-10 октября 2009. - С. 196-198.

9. Кириллина М.П., Панова Е.В. Современные методы морфологической диагностики рака молочной железы в Якутии // XV Международная научно-практическая конференция студентов, аспирантов и молодых ученых «Современные техника и технологии». - Томск, 4-8 мая 2009.-С. 560-561.

10. Лоскутова К.С, Иннокентьева А.С, Аргунов В.А, Сивцева Т.П., Кириллина М.П. Иммуноморфологическое определение Нег2/ neu (рецептора 2 типа эпидермального фактора роста человека) при раке молочной железы в Республике Саха (Якутия) // Якутский медицинский журнал. - 2009. - № 4. - С. 24-26.

11. Кириллина М.П, Сивцева Т.П. Иммуногистохимическое исследование рецепторов эстрогенов и прогестерона в раке молочной железы // Материалы республиканской научно-практической конференции «Медицина в современном мире: взгляд научной молодежи» - Якутск, 25 марта 2010. - С. 52-53.

12. Кириллина М.П, Сивцева Т.П. Иммуноморфологическое определение Her2/neu (рецептора 2 типа эпидермального фактора роста человека) при раке молочной железы в Республике Саха (Якутия) // Результаты исследований получателей грантов Президента Республики Саха (Якутия) и государственных стипендий Республики Саха (Яку1га)за2010год.-Якутск: ООО «Издательство Сфера»,

13. Кириллина М.П. Иммуногистохимический анализ эпителиальных клеток молочной железы при опухолевом росте в условиях Республики Саха (Якутия) // Результаты исследований получателей грантов Президента Республики Саха (Якутия) и государственных стипендий Республики Саха (Якутия) за 2011 год. - Якутск: ООО «Издательство Сфера», 2012. - С. 178-181.

14. Макарова У.Е, Лоскутова К.С, Кириллина М.П. Иммуногистохимический метод в диагностике туберкулезного лимфаденита // Якутский медицинский журнал. - 2012. - № 1. - С. 53-54.

15. Николаева Т.М, Иванов П.М, Лоскутова К.С, Иннокентьева A.C. Кириллина М.П. Значение патоморфологических и иммуно-гистохимических факторов прогноза при раке молочной железы // Материалы XVIII межрегиональной научно-практ. конф. онкологов Якутии «Современное состояние и перспективы развития онкологической помощи в различных климатогеографических зонах». -Якутск, 30 мая 2012. - С. 64-68.

16. Николаева Т.М, Иванов П.М, Лоскутова К.С, Иннокентьева A.C. Кириллина М.П. Патоморфологическая характеристика рака молочной железы // Материалы XVIII межрегиональной научно-практ. конф. онкологов Якутии «Современное состояние и перспективы развития онкологической помощи в различных климатогеографических зонах». - Якутск, 30 мая 2012. - С. 77-81.

17. Лоскутова К.С, Иннокентьева A.C., Кириллина М.П. Пер-

вичный эндокринный рак молочной железы: вопросы иммуноги-стохимической диагностики // Материалы XVIII межрегиональной научно-пракг. конф. онкологов Якутии «Современное состояние и перспективы развития онкологической помощи в различных кли-матогеографических зонах». - Якутск, 30 мая 2012. - С. 105-108.

18. Кириллина М.П., Лоскутова КС. Иммуногистохимический анализ эпителиальных клеток молочной железы при опухолевом росте в условиях Республики Саха (Якутия) // Материалы XVIII межрегиональной научно-пракг. конф. онкологов Якутии «Современное состояние и перспективы развития онкологической помощи в различных климатогеографических зонах». -Якутск, 30 мая 2012. - С. 121-125.

19. Лоскутова К.С., Кириллина М.П., Иннокентьева А;С., Аргунов В.А. Иммуногистохимическая диагностика первичного ней-роэндокриннош рака молочной железы // «Современные проблемы доступности и качества высокотехнологической медицинской помощи населению Республики Саха (Якутия)»: Сборник научных трудов республиканской научно-практ. шнф. —Якутск, 15 июня 2012. - С. 91-93.

20. Лоскутова К.С., Кириллина М.П., Иннокентьева A.C., Аргунов В.А., Сивцева Т.П. Иммуноморфологическое исследование гормонального статуса первичного рака молочной железы в Республике Саха (Якутия) // «Современные проблемы доступности и качества высокотехнологической медицинской помощи населению Республики Саха (Якутия)»: Сборник научных трудов республиканской научно-практ. конф. - Якутск, 15 июня 2012. - С. 94-101.

21. Кириллина М.П., Лоскутова КС. Иммуногистохимический анализ эпителиальных клеток молочной железы при опухолевом росте в условиях Республики Саха (Якутия) // «Актуальные проблемы лабораторной диагностики и биотехнологии»: Сборник тезисов. - Кемерово, 13-14 сентября 2012. - С. 45-46.

Соискатель М.П.Кириллина

Подписано в печать 09.11.2012. Формат 60x84/16. Гарнитура Тайме. Бумага Zoom plus. Усл. печ. л. 1,0.

_ Тираж 100 экз. Заказ № 26._

Отпечатано в типографии ОАО "НИИ систем" Новосибирск-58, ул. Русская, 39. т. 306-67-39

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Кириллина, Мария Петровна

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Глава 1. КЛИНИКО-МОРФОЛОГИЧЕСКАЯ

И МОЛЕКУЛЯРНО-БИОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА

РАКА МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ В СОВРЕМЕННЫХ УСЛОВИЯХ.

1.1. Эпидемиология рака молочной железы и факторы, способствующие его развитию.

1.2.Эколого-эпидемиологические особенности заболеваемости раком молочной железы в Республике Саха (Якутия).

1.3. Морфологические особенности рака молочной железы.

1.4. Факторы прогноза при раке молочной железы.

1.5. Резюме.

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ. ' I Л < «м '»

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИИ.

3.1 Морфологические и прогностические характеристики рака молочной железы.

3.2. Иммуногистохимическая характеристика рецепторов эстрогенов и прогестерона в клетках рака молочной железы.

3.3. Иммуногистохимическое определение экспрессии антигена Кі-67 в клетках рака молочной железы.

3.4. Иммуногистохимическое определение маркеров апоптоза р53.

3.5. Иммуногистохимическое определение маркеров Ьс1-2.

ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ.

ВЫВОДЫ.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Иммуногистохимический анализ эпителиальных клеток молочной железы при опухолевом росте в условиях Республики Саха (Якутия)"

На сегодняшний день при оценке особенностей клинического течения, возможного исхода заболевания и выбора наиболее адекватной тактики ле-,»' чения во внимание принимают такие клинико-морфологические параметры, как возраст, размеры первичного опухолевого очага, гистологический тип опухоли и степень ее злокачественности, наличие метастазов в аксиллярных лимфатических узлах и ряд других показателей (Тюляндин С.А., 2003; Божок A.A. и др., 2005; Писарева Л.Ф. и др., 2010, 2012).

Не вызывает сомнения тот факт, что обнаружение РМЖ на ранних стадиях способствует улучшению отдаленных результатов лечения. Вместе с тем, индивидуальная оценка прогноза РМЖ, даже на ранней стадии опухолевого процесса, считается крайне актуальной. По данным ряда исследователей, выявить больных РМЖ с высокой вероятностью раннего рецидива на ранней стадии позволяет изучение показателей экспрессии некоторых моле-кулярно-биологических маркеров в первичных опухолях (Герштейн Е.С., Кушлинский Н.Е., 2002; Кушлинский Н.Е., Герштейн Е.С., 2002; Toi М. et al., 1994; Beenken S.W., Bland K.I., 2002).

Иммуногистохимия (ИГХ) - метод выявления точной локализации того или иного клеточного или тканевого антигена, позволяющий проводить иммунологический анализ срезов тканей в условиях сохранения морфологии клеток. ИГХ-идентификация опухолей основана на выявлении в ткани с помощью различных моно- и поликлональных антител экспрессии тех или иных белков, связанных с определенными органами, тканями, типами клеток, специфической функцией, пролиферативной активностью, внеклеточным матриксом и т.д. При этом к наиболее важным биологическим характеристикам опухолей, имеющим значение в прогнозе болезни, относят пролифера-тивную активность (ПА) (по антигену Ki-67) опухолевых клеток, уровень их дифференцировки, гормонально-рецепторный статус, интенсивность апопто-за (по маркерам bcl-2 и р53), которые определяются с помощью иммуноги-стохимических методов (Ferrara N., 1995; Adams J. et al., 2000; Biroccio A. et al., 2000).

Несмотря на широкое внедрение иммуногистохимических методик в диагностику онкозаболеваний, следует отметить, что в данной области все л еще происходит накопление знаний об изменении экспрессии тех или иных маркеров пролиферации, дифференцировки и гибели клеток. В большинстве исследований оценивается экспрессия ограниченного числа маркеров, что не позволяет выделить наиболее информативные предикторы усиления малиг-низации. Важно также отметить необходимость проведения диагностических исследований с учетом этнической принадлежности, поскольку для многих видов злокачественных опухолей, в том числе, и для рака молочной железы установлена существенная роль этнических и генетических факторов (Бер-штейн Л.М., 2005).

Задачи исследования:

1. Изучить содержание и уровень экспрессии рецепторов эстрогена (ЕЯ) и прогестерона (РвЯ) в эпителиальных клетках рака молочной железы в зависимости от возраста.

2. Изучить и выявить особенности маркеров апоптоза и пролиферации в эпителиальных клетках рака молочной железы (Кь67, р53, Ьс1-2).

Научная новизна. Впервые проведено комплексное иммуногистохи-мическое исследование эпителиальных клеток молочной железы при опухолевом росте у женщин разной этнической принадлежности в Республике Саха (Якутия). Впервые установлены особенности экспрессии маркеров проли- V феративной активности, дифференцировки и апоптоза в зависимости от возраста, этнической принадлежности, характера роста и степени злокачественности опухолей.

Впервые, по данным клинико-морфологического анализа, установлено, что рак молочной железы развивается чаще у представительниц некоренных национальностей Республики Саха (Якутия) (60%), чем у представительниц коренной национальности (40%). Заболевание раком молочной железы с наибольшей частотой регистрируется у женщин коренной и некоренных национальностей в возрастных группах 50 - 59 лет (32,6%) и 60 - 69 лет (21,8%). У женщин некоренных национальностей опухоли с распространением в грудную стенку и кожу развиваются в 2 раза чаще (15,9% случаев), чем у женщин коренной национальности (6,8% случаев).

Впервые показано, что вне зависимости от этнической принадлежности наиболее распространенной гистологической формой рака молочной железы у женщин Республики Саха (Якутия) является инфильтративный протоковый рак (65,3%). В общей группе обследованных преобладают клинические варианты течения ПА и ПБ стадий (58,5% случаев), в то время как у пациенток до 39 лет - ШБ стадия (43,2%).

Впервые при проведении иммуногистохимического анализа показано, что в общей группе обследованных преобладают опухоли молочной железы, в которых эпителиоциты экспрессируют рецепторы эстрогена и прогестерона (64,9% случаев). Установлено увеличение с возрастом доли рецептор-содержащих опухолей молочной железы. Рецептор-отрицательный профиль рака молочной железы во всех возрастных группах встречается реже вне зависимости от этнической принадлежности. Впервые показано, что у женщин некоренных национальностей повышение уровня экспрессии рецепторов эстрогена с возрастом статистически достоверно, в то время как у представительниц коренной национальности такая закономерность отсутствует. Увеличение доли рецептор-положительных опухолевых клеток с возрастом в большей степени вы- »1 м ражено для рецепторов эстрогена, чем прогестерона.

Внедрение результатов исследования в практику. Результаты исследования используются в практической работе патологоанатомического отдела Национального центра медицины ГБУ РС (Я) «Республиканская больница №1 - Национальный центр медицины», в учебном процессе на кафедрах гистологии, цитологии и эмбриологии, нормальной и патологической анатомии Медицинского института Северо-Восточного Федерального университета. Основные положения, выносимые на защиту. • '

2. Прогностические факторы РМЖ - степень пролиферации (Кл-67), экспрессия р53 и Ьс1-2 - имеют достоверную связь со степенью гистологической злокачественности.

3. У женщин коренных национальностей частота выявления гормоно-зависимых опухолей при РМЖ не зависит от возраста; имеется связь между ПА и уровнем экспрессии гена-супрессора р53.

Апробация работы. Основные положения диссертации были представлены на 16-й межрегиональной конференции онкологов «Актуальные вопросы маммологии на Севере» (Якутск, 2008), на III съезде Российского общества патологоанатомов (Самара, 2009), XVI межрегиональной научно-практической конференции онкологов с международным участием «Актуальные вопросы преканцерогенеза и злокачественных опухолей в различных климато-географических зонах» (Якутск, 2009), на Всероссийской конференции с международным участием, посвященной 100-летию Российского общества патологоанатомов» (Санкт-Петербург, 2009), на XV Международной научно-практической конференции студентов, аспирантов и молодых ученых «Современные техника и технологии» (Томск, 2009), Республиканской научно-практической конференции «Медицина в современном мире: взгляд научной молодежи» (Якутск, 2010), XVIII межрегиональной научно-практической конференции онкологов Якутии «Современное состояние и перспективы развития онкологической помощи в различных климатогеографических зонах» (Якутск, 2012), межлабораторной научной конференции в ФГБУ «НИИ региональной патологии и патоморфологии» СО РАМН (Новосибирск, 2012).

Публикации. По теме диссертации опубликованы 21 работа, в том числе 3 в журналах, рекомендованных ВАК для публикации материалов дис- " сертационных исследований.

2. Лоскутова К.С., Иннокентьева A.C., Кириллина М.П., Сивцева Т.П., Аргунов В.А. Определение Нег-2 статуса при раке молочной железы // Материалы 16-й межрегио-наль-ной конференции онкологов «Актуальные вопросы маммологии на Севере». -Якутск, 5-6 июня 2008. - С.42-43.

3. Лоскутова К.С., Аргунов В.А., Иннокентьева A.C., Сивцева Т.П., Кириллина М.П. Иммуноморфологическая характеристика гормонального статуса первичного рака молоч-ной железы в Республике Саха (Якутия) // Якутский медицинский журнал. - 2009. -№ 1. - С. 46-49.

6. Лоскутова К.С., Аргунов В.А., Иннокентьева A.C., Кириллина М.П., Сивцева Т.П., Труфанов A.C. Новые технологии в онкоморфологии: иммуногистохимическое определение HER2/neu при раке молочной железы // Материалы XVI межрегиональной научно-практ. конф. онкологов с междунар. участием «Актуальные вопросы преканцеро-генеза и злокачественных опухолей в различных климатогеографических зонах». -Якутск, 15 октября 2009. - С. 139-140.

7. Кириллина М.П., Лоскутова К.С., Аргунов В.А., Иннокентьева A.C., Сивцева Т.П., Труфанов A.C. Новые технологии в онкоморфологии: иммуногистохимическое определение гормонального статуса рака молочной железы // Материалы XVI межрегиональной научно-практ. конф. онкологов с междунар. участием «Актуальные вопросы пре-канцерогенеза и злокачественных опухолей в различных климатогеографических зонах». -Якутск, 15 октября 2009. - С. 140-142.

10. Лоскутова К.С., Иннокентьева A.C., Аргунов В.А., Сивцева Т.П., Кириллина М.П. Иммуноморфологическое определение Her2/neu (рецептора 2 типа эпидермального фак-тора роста человека) при раке молочной железы в Республике Саха (Якутия) // Якутский медицинский журнал. - 2009. - № 4. - С. 24-26.

П.Кириллина М.П., Сивцева Т.П. Иммуногистохимическое исследование рецепторов эстрогенов и прогестерона в раке молочной железы // Материалы республиканской науч-но-практической конференции «Медицина в современном мире: взгляд научной мо-лоде-жи» - Якутск, 25 марта 2010. - С. 52-53.

12. Кириллина М.П., Сивцева Т.П. Иммуноморфологическое определение Her2/neu (рецептора 2 типа эпидермального фактора роста человека) при раке молочной железы в Республике Саха (Якутия) // Результаты исследований получателей грантов Президента Республики Саха (Якутия) и государственных стипендий Республики Саха (Якутия) за 2010 год. -Якутск: ООО «Издательство Сфера», 2011. - С. 31-33.

13.Кириллина М.П. Иммуногистохимический анализ эпителиальных клеток молочной железы при опухолевом росте в условиях Республики Саха (Якутия) // Результаты исследований получателей грантов Президента Республики Саха (Якутия) и государственных стипендий Республики Саха (Якутия) за 2011 год. - Якутск: ООО «Издательство Сфера», 2012.-С. 178-181.

И.Макарова У.Е., Лоскутова К.С., Кириллина М.П. Иммуногистохимический метод в диагностике туберкулезного лимфаденита // Якутский медицинский журнал. - 2012. -№ 1. - С. 53-54.

15.Николаева Т.М., Иванов П.М., Лоскутова К.С., Иннокентьева A.C. Кириллина М.П. Значение патоморфологических и иммуногистохимических факторов прогноза при раке молочной железы // Материалы XVIII межрегиональной научно-практической конференции онкологов Якутии «Современное состояние перспективы развития онкологической помощи в различных климатогеографических зонах». - Якутск, 30 мая 2012. - С. 6468.

16. Николаева Т.М., Иванов П.М., Лоскутова К.С., Иннокентьева A.C. Кириллина М.П. Патоморфологическая характеристика рака молочной железы // Материалы XVIII межрегиональной научно-практической конференции онкологов Якутии «Современное состояние перспективы развития онкологической помощи в различных климатогеографических зонах». - Якутск, 30 мая 2012. - С. 77-81.

17. Лоскутова К.С., Иннокентьева A.C., Кириллина М.П. Первичный эндокринный рак молочной железы: вопросы иммуногистохимической диагностики // Материалы XVIII межрегиональной научно-практической конференции онкологов Якутии «Современное состояние перспективы развития онкологической помощи в различных климатогеографических зонах». - Якутск, 30 мая 2012. - С. 105-108.

18. Кириллина М.П., Лоскутова К.С. Иммуногистохимический анализ эпителиальных клеток молочной железы при опухолевом росте в условиях Республики Саха (Якутия) // Материалы XVIII межрегиональной научно-практической конференции онкологов Якутии «Современное состояние перспективы развития онкологической помощи в различных климатогеографических зонах». - Якутск, 30 мая 2012. - С. 121-125.

19.Лоскутова К.С., Кириллина М.П., Иннокентьева A.C., Аргунов В.А. Иммуноги-стохимическая диагностика первичного нейроэндокринного рака молочной железы // «Современные проблемы доступности и качества высокотехнологической медицинской помощи населению Республики Саха (Якутия)»: Сборник научных трудов республиканской научно-практической конференции. - Якутск, 15 июня 2012. - С. 91-93.

20.Лоскутова К.С., Кириллина М.П., Иннокентьева A.C., Аргунов В А., Сивцева Т.П. Иммуноморфологическое исследование гормонального статуса первичного рака молочной железы в Республике Саха (Якутия) // «Современные проблемы доступности и качества высокотехнологической медицинской помощи населению Республики Саха (Якутия)»: Сборник научных трудов республиканской научно-практической конференции. -Якутск, 15 июня 2012. - С. 94-101.

21.Кириллина М.П., Лоскутова К.С. Иммуногистохимический анализ эпителиальных клеток молочной железы при опухолевом росте в условиях Республики Саха (Якутия) // «Актуальные проблемы лабораторной диагностики биотехнологии» Сборник тезисов. -Кемерово, 13-14 сентября 2012. - С. 45-46.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение Диссертация по теме "Клеточная биология, цитология, гистология", Кириллина, Мария Петровна

ВЫВОДЫ

2. Преимущественной гистологической формой рака молочной железы у женщин Республики Саха (Якутия) является инфильтративный протоковый рак (65,3%). В общей группе обследованных преобладают клинические варианты течения ПА и ПБ стадий (58,5% случаев), в то время как у пациенток до 39 лет - ШБ стадия (43,2%). В обеих этнических группах наиболее часто встречается рак молочной железы ПА стадии (44 и 40% соответственно некоренных и коренных национальностей).

3. По данным иммуногистохимического анализа, в общей группе обследованных преобладают опухоли молочной железы, в которых эпителио-циты экспрессируют рецепторы эстрогена и прогестерона (64,9% случаев): в возрастной группе до 50 лет - 31,4% случаев, старше 50 лет - 68,6% случаев. Рецептор-отрицательный профиль рака молочной железы во всех возрастных группах встречается реже вне зависимости от этнической принадлежности. Увеличение доли рецептор-положительных опухолевых клеток с возрастом в большей степени выражено для рецепторов эстрогена, чем прогестерона. У женщин некоренных национальностей повышение уровня экспрессии рецепторов эстрогена с возрастом статистически достоверно, в то время как у представительниц коренных национальностей такая закономерность отсутствует.

4. Между размерами опухолей и уровнем экспрессии рецепторов эстрогена и прогестерона существует отрицательная корреляционная связь (г=-14,1, р=0,016 и г=-20,5, р<0,001 соответственно). Опухоли с высокой степенью злокачественности характеризуются низкой экспрессией рецепторов эстрогена и прогестерона (р<0,05). Уровень экспрессии антигена Ьс1-2 и его распространенность положительно коррелируют с наличием рецепторов ЕЯ и на опухолевых клетках и низкой степенью злокачественности опухолей.

5. Степень гистологической злокачественности опухолей молочной железы положительно коррелирует с экспрессией антигенов Кі-67 и р53 и отрицательно - с экспрессией антигена Ьс1-2 (г=-12,9, р=0,03).

6. Наиболее информативными критериями повышения злокачественности опухолей молочной железы являются понижение экспрессии рецепторов эстрогена и прогестерона, повышение экспрессии Кі-67 и р53 и уменьшение экспрессии Ьс1-2.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. С учетом территориальных особенностей, малой плотности населения в Республике Саха (Якутия), ростом заболеваемости РМЖ в молодом возрасте, в целях ранней диагностики РМЖ необходима организация скри-нингового обследования женского населения в более раннем возрасте (с 30 лет).

2. Необходимо внедрение в стандарты диагностики РМЖ, кроме определения ЕЯ, PgR, Нег-2/пеи, также включение иммуногистохимического исследования маркеров биологической активности (Кл-67, р53, Ьс1-2), что в конечном итоге является определяющим звеном в оптимизации терапевтических подходов, индивидуализации химио-, гормональной, таргетной и лучевой терапии у больных РМЖ, основанных на результатах исследования маркеров биологической активности опухоли.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Кириллина, Мария Петровна, Якутск, Новосибирск

1. Абашин С.Ю. Неоадъювантная системная терапия в комплексном лечении местнораспространенного рака молочной железы // Современная онкология. 2000. - № 4. - С. 133 - 135.

2. Авцын А.П., Жаворонков A.A., Марачев А.Г., Милованов А.П. Патология человека на Севере. М.: Медицина, 1986. - 416 с.

3. Александрова С.Н. Якутия XX век в зеркале статистики. Якутск, 2001.-125 с.

4. Артамонова Е.В., Тупицын H.H., Кадагидзе З.Г., Летягин В.П., Ермилова В.Д., Огнерубов H.A., Паниченко A.B., Рязанцева С.Н. Роль эпителиальных антигенов в диагностике и стадировании рака молочной железы // Архив патологии. 2002. - № 6. - С. 13-15.

5. Абраменко И.В., Фильченков A.A. Оценка параметров апоптоза в диагностике онкологических заболеваний, их прогнозе и оптимизации схем терапии // Вопросы онкологии. 2003. - Т. 49, № 1. - С. 21 - 29.

6. Агаджанян H.A. Физиологическое обоснование «экологического портрета человека» и пути оптимизации адаптации // Материалы VII Все-рос. симпозиума «Эколого-физиологические проблемы адаптации». Москва, 26-28 апр. М., 1994. - С. 5 - 8.

7. Агаджанян H.A., Гичев Ю.П., Торшин В.И. Экология человека. М.: Новосибирск, 1997. - 355 с.

8. Агаджанян H.A., Егорова Г.А., Куприянова Н.С. Эколого-эпидемиоло-гические особенности онкологической заболеваемости в Республике Саха (Якутия) // Экология человека. Якутск. - 2005. - № 1. - С. 4 - 7.

9. Адамян А.Т. Пушкарев С.В., Слонимская Е.М. Возможности использования неоадъювантной химиотерапии в лечении больных раком молочной железы // Актуальные проблемы современной онкологии. -Томск: Изд-во Том. ун-та, 1991. Вып. 8. - С. 144 - 150.

10. Аксель Е.М., Двойрин В.В. Статистика злокачественных новообразований: заболеваемость, смертность, тенденции, социально-экономический ущерб, продолжительность жизни. М., 1992.

11. Аксель, Е.М. Злокачественные новообразования в России и странах СНГ / Е.М. Аксель, М.И. Давыдов // Вестник РОНЦ им. Н.Н.Блохина РАМН. М., 2002. - С.

12. И.Акуленко Л.В. Принципы идентификации и генетического прогнозирования наследственных форм рака органов женской репродуктивной системы //1 съезд онкологов стран СНГ. М., 1996. - Ч. 1. - 98 с.

13. М.Арзуманов A.C. Современная лучевая диагностика и комплексное лечение больных раком молочной железы с высоким риском прогресси-рования: Автореф. дис. . д-ра мед. наук. СПб., 2002.-25 с.

14. Архипова, И.В. Психогенные факторы и рак молочной железы / И.В.Архипова, Н.П.Кокорина, Ю.А.Магарилл // Актуальные проблемы рака молочной железы. Кемерово, 2003. - Вып. 7. - С.7-8.

15. Баишева, С.А. Содержание рецепторов эстрогенов в опухолях молочной железы: роль этнических факторов / С.А. Баишева, О.Г. Хан, З.И. Тогайбаева, А. Н. Баймахашева // Вопросы онкологии. 2001. - Т. 47, № 2.-С. 201-208.

16. Бассалык JI. С. Рецепторы стероидных гормонов в злокачественных опухолях молочной железы у человека / JI.C. Бассалык, Н.И. Муравьева, 3. В. Кузьмина // Вестник АМН СССР. 1981. - №12. - С.19-23.

17. Белоусова A.K. Загадки гена опухолевого супрессора р53 // Экспер. он-кол. 1996. -№ 18.-С. 197-208.

18. Берштейн JI.M., Santen RJ. Молекулярные механизмы резистентности к тамоксифену // Вопросы онкологии. 2002. - Т. 48, № 1. - С. 17-23.

19. Берштейн Л.М. Современная эндокринология гормонзависимых опухолей // Вопросы онкологии. 2002. - Т.48, № 4. - С. 496 - 503.

20. Борисов, В.И. Аримидекс: новые возможности в лечении генерализованного рака молочной железы / В.И.Борисов // Современная онкология.- 2001.- № 4.- С. 169-170.

21. Бохман Я.В., Бахидзе Е.В., Максимов С.Я. Фертильность и рак // Актуальные вопросы онкологии. СПб., 1996. - С. 62 - 63.

22. Валдина Е.А. Рак щитовидной железы в сочетании с другими гормоно-зависимыми опухолями // Системный патогенетический подход к профилактике, ранней диагностике и лечению гормонозависимых опухолей у женщин. JL, 1988. - 14с.

23. Варенов, Б.М. Некоторые данные эпидемиологического изучения рака молочной железы у женщин / Б.М.Варенов, А.М.Лебедев, Е.П.Куликов // Рак молочной железы. М., 1991. - С.24-25.

24. Васильев Д. А. Эстрогензависимая пероксидаза и гормональный канцерогенез текст. / Д. А. Васильев, И. Г. Коваленко, Л. М. Берштейн // Вопросы онкологии. 1999. - № 4. - С. 355-360.

25. Владимирская, Е.Б. Апоптоз и его роль в развитии опухолевого роста / Е.Б.Владимирская, А.А.Масчан, А.Г.Румянцев //Гематол.трансфузиол.- 1997. №42. - С.4-9.

26. Возный Э.К. Применение бисфосфонатов в клинической практике // Современные тенденции развития лекарственной терапии опухолей: Материалы II Российской онкологической конференции. М., 1998. -С. 12-15.

27. Возный Э.К. Адъювантная химиотерапия рака молочной железы: от алкилирующих препаратов и антиметаболитов к антрациклинам и так-санам // Современная онкология. 2001. - № 2. - С. 72-73.

28. Волченко H.H. Морфологические факторы прогноза при раке молочной железы: Автореф. дис. д-ра мед. наук. М., 1998. - 23 с.

29. Волченко H.H., Завалишина Л.Э., Шимберева И.Б., Франк Г.А. Имму-номорфологическая характеристика первичных и рецидивных опухолей молочной железы // Архив патологии. 1998. - № 4. - С. 4 - 7.

30. Волченко H.H., Завалишина Л.Э., Шимберева И.Б. Рецепторы эстрогенов в инвазивном раке молочной железы // Российский онкологический журнал. 1999.-№3.-С. 10-11.

31. Волченко H.H. Морфологические факторы прогноза при раке молочной железы // Российский онкологический журнал. 2000. - № 3. - С. 49 -53.

32. Волченко H.H. Редкие формы рака молочной железы // Российский онкологический журнал. 2002. - № 1. - С. 45 - 46.

33. Волченко H.H. Инвазивный протоковый рак с преобладанием внутри протокового компонента // Российский онкологический журнал. 2002.- № 2. С. 12-14.

34. Высоцкая, И.В. Лечение рака молочной железы 0-IIa стадий: Автореф. . д-ра мед.наук / И.В Высоцкая. М., 1999. - 25с.

35. Вторушин C.B. Особенности экспрессии рецепторов половых гормоновпри инфильтрирующем протоковом раке молочной железы: Автореф. дис. канд. мед. наук. Томск, 2006. - 20 с.

36. Габуния, М.С. Состояние молочных желез при заместительной гормональной терапии / М.С.Габуния, Т.А.Лобова, Л.Г.Егорова // Акушерство и гинекология. № 2. - С.50-53.

37. Ганцев, Ш.Х. Фоновая патология рака молочной железы / Ш.Х.Ганцев, М.Г.Галеев, Э.А.Харипова, А.А.Галлямов // Актуальные вопросы маммологии / Под ред. В.П.Харченко. М., 2001. - С.43-44.

38. Ганина, К.П. Роль генетического компонента в подверженности к развитию рака органов репродуктивной системы женщин Киевского региIона / К.П.Ганина, Л.З.Полищук, Л.А.Налескина и др. // I съезд онкологов стран СНГ. M., 1996. - Ч. 1. - 100с.

39. Гаврилова, М.К. О районировании Севера России по дискомфортности проживания /М.К.Гаврилова, Е.Н.Федорова, О.А.Лазебник// Наука и образование. Якутск, 2003. - С. 16-24.

40. Герштейн, Е.С. Тканевые маркеры как факторы прогноза при раке молочной железы / Е.С.Герштейн, Н.Е.Кушлинский // Практ. онкология. -2002. Т.З, № 1. - С.З 8-44.

41. Гольберт, З.В. Дольковая карцинома in situ и дольковый рак (лобуляр-ная карцинома) молочной железы / З.В. Гольберт, Э.Е. Сорокин // Архив патологии. 1977. - №7. - С. 81-89.

42. Годорожа Н.М. Аспекты профилактики рака молочной железы: Автореф. дис. .канд. мед. наук. -М., 1991. -47с.

43. Головин Д.И. Ошибки и трудности гистологической диагностики опухолей. Д.: Медицина, 1982. - 304 с.

44. Голубев O.A. Морфометрические и иммуногистохимические маркеры прогрессии рака молочной железы / O.A. Голубев, С.Ю. Абросимов, O.A. Шистерова // Архив патологии. -2001. №4. - С . 57-60.

45. Гнатышак, А.И. Некоторые критерии гормонозависимости рака молочной железы / А.И. Гнатышак, В.И. Дрыжак // Экспериментальная онкология. 1991. - Т. 13, №5. - С. 3-8.

46. Глухова Е.И. Экспрессия белков, контролирующих апоптоз, при раке молочной железы: Автореф. дис. канд. мед. наук. М., 2003. - 23 с.

47. Глущенко, С.А. Морфоклинические особенности мультицентрическо-го/ мультифокусного рака молочной железы: Автореф. дис. .канд. мед. наук. Томск, 2009. - 20 с.

48. Гуляк Н.С., Волченко H.H., Славнова E.H., Сергеева Н.С., Франк Г.А. Сравнительная оценка пролиферативной активности и других морфологических характеристик инвазивного рака молочной железы // Российский онкологический журнал. 1996. - № 1. - С. 41 - 43.

49. Даниленко В.И. Варианты морфогенеза рака молочной железы // Вопросы онкологии. 1984. - Т. 30, № 6. - С. 74 - 78.

50. Давыдов, М.И., Аксель Е.М. Статистика злокачественных новообразо-ванийв России и странах СНГ. М., 2005. - 268 с.

51. Двойрин В.В., Медведев А.Б. Роль состояния репродуктивной функции женщины в возникновении рака молочной железы // Методы и итоги исследований эпидемиологии рака молочной железы / Ин-т эксперим. и клин, медицины МЗ ЭССР. Таллин, 1978. - С. 53 - 63.

52. Делекторская, В.В. Рак молочной железы с нейроэндокринной диффе-ренцировкой /В.В. Делекторская, В.Д. Ермилова, A.B. Смирнов // Архив патологии. 1997. - Т. 59, №2. - С. 53 - 57.

53. Довгалюк А.З. Рак молочной железы. СПб., 2001. - 203 с.

54. Ермоленко JI.M. Митотический режим в первичном и метастатическихузлах рака молочной железы и шейки матки // Архив патологии. 1979. -№ 8.-С. 550-53.

55. Ермилова В.Д., Крылова М.О. Слизистый рак молочной железы (кли-нико-морфологическая характеристика) // Архив патологии. 1989. -Т. 51, №7.-С. 38-44.

56. Ермилова В.Д. Роль современной патоморфологии в характеристике рака молочной железы // Практическая онкология. 2002. - Т. 3, № 1. -С. 15-20.

57. Ермилова, В.Д. Сравнительное иммуногистохимическое и биохимическое изучение рецепторов эстрогена в раке молочной железы текст. / В.Д. Ермилова, J1.B. Литвинова, Л.С. Бассалык, З.В. Кузьмина// Архив патологии. -1989. Вып. 2.- С. 60-63.

58. Иванов В.Г. Эпидемиологические факторы риска, ранняя диагностика рака молочной железы // Практическая онкология. 2002. - Т. 3, № 1. -С. 1-5.

59. Иванов, П.М. Злокачественные новообразования в Республике Саха (Якутия) / П.М.Иванов, Ф.Г.Иванова, Г.П.Упхолов. Якутск, 2000. -170с.

60. Иванов П.М., Иванова Ф.Г. Злокачественные новообразования на Крайнем Севере и их социально-экономические последствия. Якутск, 2003.-204 с. ' 1 , 1 1

61. Иванова Ф.Г., Николаева Т.Н., Горбунова В.А. Изучение эффективности и токсичности стандартной схемы химиотерапии при раке молочной железы // Сибирский онкологический журнал. 2009. - № 5 (35). -С. 56-59.

62. Измеров Н.Ф. Социально-гигиенические аспекты охраны атмосферного воздуха в условиях научно-технического прогресса // Методологические вопросы клинического нормирования производственных факторов.-М., 1976.-С. 57-83.

63. Каневцов B.B. Оптимизация подходов к диагностике и лечению заболеваний молочной железы / В. В. Каневцов. М.: Военная книга, 2001.

64. Кампова-Полевая Е.Б. Рак молочной железы у молодых женщин: Авто-реф. дис. . канд. мед. наук. М., 1975. - 26 с.

65. Кеттайл, В.М. Патофизиология эндокринной системы / В.М.Кеттайл, Р.А.Арки // Под ред. акад. Ю.В.Наточина. М.: BINOM; СПб.: Невский диалект, 2001. - С. 305-306.

66. Кира, Е.Ф. Влияние препаратов гестагенного ряда на морфофункцио-нальное состояние молочных желез / Е.Ф.Кира, C.B.Бескровный, А.Б.Ильин и др. // Журнал акушерства и женских болезней. 2000. -Т.49, №2. - С.75-84.

67. Коган И.Ю. Молекулярно-биологические маркеры пролиферации и апоптоза в эпителии молочной железы // Молекулярная медицина. -2008. -№ 1. — С. 23-27.

68. Коростелева, JI.H. Характеристика эндогенных факторов риска разви1.,тия рака молочной железы у женщин Якутии /Л.Н.Коростелева, З.Д.Гурьева, Д.С.Коростелев // Материалы XII межрегион, конф. онкологов. Якутск, 2007. - 148с.

69. Копнин Б.П. Опухолевые супрессоры и мутаторные гены // Канцерогенез. Под ред. проф. Д.Г.Заридзе. М.: Научный мир, 2000. - С. 75 - 91.

70. Коростелева, Л.Н. Эндогенные факторы риска рака молочной железы у женщин Якутии /Л.Н. Коростелева, З.Д.Гурьева// Якутский медицинский журнал. 2010. -№4. - С.49-51.

71. Крючков А.Н., Фрейнд Г.Г. Возрастные особенности инвазивной про-токовой карциномы молочной железы // Архив патологии. 1991. - № 6.-С. 15-17.

72. Кукленко Т.В., Важенин A.B., Войтаник Г.Ф., Семенов В.А. Морфологические аспекты оккультного рака молочной железы, представленного подмышечными метастазами // Сибирский онкологический журнал.2010.-№3(39).-С. 25-27.

73. Кулаков В.И., Тохиян A.A. Проблемы злокачественных новообразований репродуктивной системы в практике гинеколога // Журнал акушерства и женских болезней. 2001. - Т. 30, № 1. — С. 9 - 12.

74. Кушлинский, Н.Е. Современные возможности молекулярно-биохими-ческих методов оценки биологического «поведения» рака молочной железы / Н.Е.Кушлинский, Е.С.Герштейн // Вестн. РАМН. 2001. - №9. - С.65-70.

75. Кушлинский, Н. Е. Роль фактора роста эндотелия сосудов при раке молочной железы / Н. Е. Кушлинский, Е. С. Герштейн // Бюл. эксп. биол. и мед. 2002. -Т. 13, №1. - С. 604-612. ' Í

76. Кушлинский Н.Е. Общие представления о клеточных маркерах // ООО «Журнал Медицинская кафедра». № 5. - 2005. - С. 98 - 21.

77. Левшин, В.Ф. Оценка влияния отдельных факторов на риск развития рака молочной железы / В.Ф.Левшин // Вопросы онкологии. 1988. -Т.34, №9. -С.1055-1058.

78. Летягин В.П. Органосохраняющие методы лечения больных первичным раком молочной железы (состояние и перспективы развития) // VIII Российский онкологический конгресс. М., 2004. - С. 67.

79. Летягин В.П. Современные подходы к лечению первичного рака молочной железы // Материалы III съезда онкологов и радиологов СНГ. -Минск, 2004.-С. 103-110.

80. Летягин В.П. Стратегия лечения больных ранним раком молочной железы (По материалам Европейской школы онкологии, Москва 2005г.) //

81. Маммология. 2006. - №1. - С. 86 - 87.

82. Лобода В.И. Прогностическое значение степени злокачественности рака молочной железы // Клиническая онкология. 1985. - № 5. - С. 37 -40.

83. Лихтенштейн A.B. Опухолевый рост: ткани, клетки, молекулы // Пат. физиол. 1997. - № 3. - С. 35 - 48.

84. Лоскутова К.С., Аргунов В.А. и др. Иммуноморфологическая характеристика гормонального статуса первичного рака молочной железы в Республике Саха (Якутия) // Якутский медицинский журнал. 2009. -№ 1.-С. 46-49.

85. Лукьянова, Н.Ю. Роль генов р53 и bcl-2 в апоптозе и лекарственной резистентности опухолей / Н.Ю.Лукьянова, Г.И.Кулик, В.Ф.Чехун // Вопросы онкологии. -2000. -Т.46, №2. С. 121-128.

86. Лукашина М.И., Жукова Л.Г., Глухова Е.И., Озерова O.A., Ермилова

87. B.Д., Болатырев В.Н., Барышников А.Ю. Сравнение иммуноцитохими-ческого и иммуногистохимического методов определения биомаркеров при раке молочной железы // Клиническая лабораторная диагностика. -2002. -№ 8. С. 37 -41.

88. Магомедов О.М. Выявляемость рака молочной железы в Республике Дагестан // Сибирский онкологический журнал. 2010. - № 2 (38). - С. 59-62.

89. Макаренко, Н.П. Рак молочной железы (новые возможности терапии) // Современная онкология. Экстравыпуск. MEDIA MEDICA, 2007.1. C. 35-50.

90. Михайлов Э.А., Голубева Е.А. Изучение влияния семейного фактора на заболеваемость женщин раком молочной железы // Актуальные вопросы онкологии. СПб., 1996. - С. 78 - 79.

91. Методическое руководство по лечению рака груди Электронный ресурс. / Под ред. В.И. Тарутинова. Электрон, дан. - Режим доступа:http://mammolog.narod.ru/tamtinov2002.htm

92. Морозова Т.М., Меркулова Т.Н., Салганик Р.И. Молекулярные механизмы регуляции роста опухолеймолочной железы эстрогенами // Экспериментальная онкология. 1982. - Т. 4, № 5. - С. 33 - 37.

93. Ю5.Мосеенко В.М., Семиглазов В.Ф., Тюляндин С.А. Современное лекарственное лечение местнораспространенного и метастатического рака молочной железы. СПб.: Грифон, 1997. - 254 с.

94. Николаева, Т.И. Заболеваемость злокачественными новообразованиями женского населения Якутии / Т.И.Николаева, В.В.Остобунаев, Н.Н.Макарова, Т.Н.Жарникова // Матер.Ш съезда онкологов и радиологов СНГ. Ч. 1. - Минск, 2004. - С.241.

95. Петров C.B., Райхлин Н.Т. Руководство по иммуногистохимической диагностике опухолей человека. Казань, 2004. - 452 с.

96. Ю.Петрова П.Г., Кульберг А.Я., Воложин А.И., Захарова Ф.А. Здоровье населения и экология Республики Саха (Якутия). М., 1995. - 86 с.

97. Переводчикова Н.И. Новое в терапии рака молочной железы. М.: Медицина, 1998.-91 с.

98. Переводчикова Н.И. Место ингибиторов ароматазы в современной гормонотерапии рака молочной железы Фемара (летрозол) // Современная онкология. - 2000. - № 4. - С. 100-103.

99. Писарева Л.Ф., Бояркина А.П., Панферова Е.В., Ананина O.A., Одинцова И.Н. Заболеваемость раком молочной железы женского населения Иркусткой области. Факторы риска // Сибирский онкологический журнал. 2012. - № 5 (53). - С. 12 - 17.

100. М.Писарева Л.Ф., Одинцова И.Н., Ананина O.A., Муранова О.Ю., Турина Л.И. Эпидемиология рака молочной железы в Приморском крае // Сибирский медицинский журнал. 2010. - № 1 (37). - С. 50 - 55.

101. Писарева Л.Ф., Одинцова И.Н., Шивит-оол A.A., Сиразитдинова А.К. Эпидемиологические особенности злокачественных новообразований молочной железы в регионе Сибири и Дальнего Востока. Томск: ИздIво Том. ун-та, 2006. 10 с. 1

102. Писарева Л.Ф., Одинцова И.Н., Иванов П.М., Николаева Т.И. Особенности заболеваемости раком молочной железы коренного и пришлого населения Республики Саха (Якутия) // Сибирский онкологический журнал. 2007. - № 3. - С. 69 - 72.

103. Портной С.М. Рак молочной железы (факторы прогноза и лечение): Автореф. дис. д-ра мед. наук. М., 1997. - 40 с.

104. Пожарисский K.M., Леенман Е.Е. Значение иммуногистохимических методик для определения характера лечения и прогноза опухолевых заболеваний // Архив патологии. 2000. - № 5. - С. 3 - 11.

105. Попова Г.Н. К вопросу о диагностике рака молочной железы // Актуальные проблемы современно онкологии. Томск, 1991. - Вып. 9. - С. 84-88.

106. Пурде М.К. Эпидемиология рака молочной железы // Эпидемиологиярака в СССР и США / Под ред. Н.Н.Блохина, М.А.Шнейдермана. М.: Медицина, 1979. - С. 328 - 340.

107. Розен, В.Б. Основы эндокринологии. М.: Изд-во Моск. ун-та. 1994. -383с.

108. Руководство по патологоанатомическои диагностике опухолей человека / Под ред. H.A. Краевского, А.З. Смолянникова, Д.С. Саркисова. -М: Медицина, 1993. Т.2 - 688 с.

109. Сан-Антонио 2000: роль прогностических и предсказывающих факторов в лечении рака молочной железы Электрон, ресурс. / О.Б. Кар-мановская. Электрон, дан. - Режим доступа: http://www.rosoncoweb.ru1.j h

110. Hbrarv/sanantonio/00/04.htm 1 '

111. Семенова, A.A. Функциональное состояние яичников у коренных жительниц Севера с трубно-перитонеальным бесплодием: Автореф. дис. . канд. мед. наук / Семенова A.A. Пермь. - 2012. - 23с.

112. Семиглазов В.Ф. Профилактика и раннее выявление опухолей молочной железы / В.Ф. Семиглазов. Л.: Знание, 1990. - 40с.

113. Семиглазов, В.Ф. Минимальный рак молочной железы (профилактика, выявление, лечение) / В.Ф.Семиглазов, А.Г.Веснин, В.М. Моисеен-ко. СПб.: Гиппократ, 1992. - 240с.

114. Семиглазов В.Ф. Оценка эффективности адъювантной системной терапии в органосохраняющем лечении рака молочной железы T12N0M0 / В.Ф. Семиглазов, C.B. Канаев, И.Л. Бугрова, А.Н. Власов // Вопросы онкологии. 1999. - Т. 45. - №5. - С . 516-519. 1

115. Семиглазов В.Ф. Значение прогностических и предсказывающихфакторов при выборе лечения у больных метастатическим раком молочной железы / В.Ф. Семиглазов // Практическая онкология. 2000. -№2 (июнь). - С. 26-30.

116. Семиглазов, В.Ф. Современные подходы к гормонотерапии рака молочной железы как отражение патогенеза заболевания / В.Ф. Семиглазов // Вопросы онкологии. 2001. - Т.47. - С.195-199.

117. Семиглазов, В.Ф. Значение прогностичесих и рпедсказывающих факторов при выборе лечения у больных метастатическим раком молочной железы / В.Ф.Семиглазов // Практ. онкология. 2002. - №2. - С.26-30.

118. Семиглазов, В.Ф. Опухоли молочной железы (лечение и профилактика) / В.Ф.Семиглазов, К.Ш.Нургазиев, А.С.Арзуманов. Алматы, 2001. -344с.

119. Семиглазов, В.Ф. Новый взгляд на неоадъювантную химиотерапию рака молочной железы (роль навельбина) / В.Ф.Семиглазов, A.C. Ар-зуманов, А.А.Божок и др. // Современная онкология.- 2003.- № 3.-С.102-107. '

120. Семиглазов, В.Ф. Карцинома in situ молочной железы морфологические и клинические проблемы / В.Ф.Семиглазов // Практическая онкология. - 2004. - С.51-63.

121. Семиглазов, В.Ф. Эндокринотерапия диссеминированного рака молочной железы в менопаузе: обсуждение I-II линии / В.Ф.Семиглазов // Материалы VIII Российского онкологического конгресса. М., 2004.-С.46-51.

122. Семиглазов В.Ф., Семиглазов В.В., Клетсель А.Е. Адъювантная эндокринотерапия больных раком молочной железы в пременопаузе // Материалы II международной ежегодн. конф.: Проблемы диагностики и лечения рака молочной железы. СПб, 2005. - С. 65 - 78.

123. Сережин Б.С. Слизеобразующая перстневидноклеточная апудома молочной железы // Архив патологии. 1986. - Т. 48, № 7. - С. 15 - 19.

124. Сидоренко Ю.С., Шелякина Т.В., Титова Е.В., Гатагашева З.М. Проблемы первично-множественных процессов у больных раком молочной железы // Сибирский онкологический журнал. 2010. - № 1 (37). - С. 18-22.

125. Сильченко, С.А. Морфологические особенности клеток рака молочной железы в оценке степени дифференцировки опухоли текст. / С.А. Сильченко, В.И. Лобода, Л М. Исакова // Архив патологии. 1991. - Т. 53, №4.-С. 25-28.

126. Стенина М.Б. Рак молочной железы: некоторые важные научные события и выводы последних лет // Практическая онкология. 2005. - № 1.-С. 26-32.

127. Стенина, М.Б. Гормонотерапия диссеминированного рака молочной железы / М.Б.Стенина // Практическая онкология,- 2000.- № 2.- С. 11-18.

128. Стуконис, М.К. Эпидемиология и профилактика рака / М.К. Стуко-нис. Вильнюс: Мокслас, 1984. - 163с.

129. Терещенко, И.В. Формирование группы риска по наследственной подверженности раку молочной железы / И.В.Терещенко, Е.М. Слонимская // Актуальные проблемы клинической онкологии. Улан-Уде,1999.-С. 63-65.

130. Трапезников H.H., Аксель Е.М. Статистика злокачественных новообразований в России и странах СНГ // Стат. сб. М., 2001. - 72 с.

131. Трапезников H.H., Аксель Е.М. Заболеваемость злокачественными новообразованиями и смертность от них населения стран СНГ в 1996 г. // М.: ОНЦ РАМН, 1997. 302с.

132. Упоров A.B. Иммуногистохимическое изучение клеток рака молочной железы с использованием разных маркеров пролиферации / A.B. Упоров, В.Ф. Семиглазов, K.M. Пожарисский // Архив патологии.2000. -№2.- С. 26-30.

133. Федосов, A.B. Прогестины: молекулярные механизмы контроля пролиферации и апоптоза клеток чувствительных тканей / А.В.Федосов, А.В.Семейкин // Вопросы онкологии. 2003. - Т.49, №1. - С.9-20.

134. Франк, Г. А. Тубулярный рак молочной железы / Г.А. Франк, H.H. Волченко // Вопросы онкологии. 1985. - Т. 31. - №5. - С.15 - 21.

135. Франк, Г. А. Медуллярный рак молочной железы / Г.А. Франк, H.H. '1 * „', Волченко // Советская медицина. 1986. - №8. - С. 37-40.

136. Франк, Г.А. Прогностическое значение гистологических форм рака молочной железы / Г.А. Франк, В.П. Демидов, В.В. Старинский, H.H. Волченко // Факторы прогноза в онкологии. М, 1994. - С. 105-108.

137. Фролов, Г.Ф. Интенсивность процессов перекисного окисления липи-дов печени в условиях экспериментального злокачественного роста: Автореф. дис. . канд. биол. наук / Г.Ф.Фролов. Томск, 1997. - 25с.

138. Хинт, Э.К. Разработка системы своевременного выявления рака молочной железы: Автореф. дис. . д-ра мед. наук / Э.К.Хинт. -М., 1990. -44с.

139. Холдин С.А. Профилактика рака молочной железы // Профилактика1.! ' > iзлокачественных опухолей. Л.: Медицина, 1974. - С. 176 - 197. 157.Часовникова О.Б., Митрофанов Д.В., Демченко Д.О., Сидоров C.B.,

140. Францкевич О.З., Коваленко С.П. Анализ встречаемости девяти мутаций в генах BRCA1 и BRCA2 у больных раком молочной железы в Сибирском регионе // Сибирский онкологический журнал. 2010. - № 5 (41).-С. 32-35.

141. Чиссов В. И. Избранные лекции по клинической онкологии / В.И. Чиссов, C.JI. Дарьялова. М., 2000. - 736 с.

142. Чиссов В.И. Злокачественные новообразования в России в 2003 году / В.И.Чиссов, В.В.Старинский, Г.В.Петрова. М., 2005. - 242с.

143. Ярилин А.А. Апоптоз. Природа феномена и его роль в целостном организме // Пат. физиол. 1998. - № 2. - С. 38 - 48.

144. Aaltomaa, S. Proliferating cell nuclear antigen (PC 10) immunolabelling and other proliferationas prognostic factors in breast cancer / S: Aaltomaa, P. Lipponen,S. Papinaho, K. Syrjanen // J. Cancer Res. Clin. Oncol. 1993. — Vol.119.-P. 288-294.

145. Adams, J. Vascular endothelial growth factor (VEGF) in breast cancer: comparison of plasma, serum and tissue VEGF and microvessel density and effects of tamoxifen / J.Adams, P.J.Carden, S.Downey et al. // Cancer Res. -2000. Vol.60 (11). - P.2898-2905.

146. Albain, K.S. Breast cancer outcome and predictors of outcome: are there age differentials /K.S.Albain, D. Allred, G.M. Clark // Natl. Cancer Inst Monogr. 1994. - Vol.16. - P.35 - 42.

147. Allred, D.C. Prognostic and predictive factors in breast cancer by im-munohistochemical analysis / D.C.Allred, J.M.Harvey, M.Berardo, G.M.Clark//Mod.Path. 1998. - Vol.11. -P.155-168.

148. Amstrong, K. Evaluer le risqué de cancer du sein / K.Amstrong, F.Eisen,

149. B.Weber // Energ. Sante. - 2000. - Vol.11, № 6. - P.517-519.

150. Aupperlee, M.D. Differential hormonal regulation and function of progesterone receptor isoforms in normal adult mouse mammary gland / M.D.Aupperlee, S.Z. Haslam // Endocrinology. 2007. - Vol.148, №5. -P.2290-2300.

151. Anderson, W.F. Estrogen receptor breast cancer phenotypes in the Surveillance, Epidemiology, and the Results database / W.F.Anderson, N.Chatterjee, W.B.Ershler // Brawley Breast cancer Res.Treat. 2002-Vol. 76. -P.27-36.

152. Bottini, A. p53 but not bcl-2 mmunostaining is predictive of poor clinical complete response to primary chemotherapy in breast cancer patients / A.Bottini, A.Berruti, A.Bersiga et al. // Clin.Cancer Res. 2000. - Vol.6. -P.2751 -8.

153. Berchuk, A. Biomarkers in the ovary. / A. Berchuk //J. Cell. Biochem. -1995.-Vol. 23.-P. 223-226.

154. Bergh, J. Importance of p53 in the diagnosis and treatment of cancer / J. Bergh // 23 ESMO congress. 1998. - P. 179 - 186.

155. Berardo, M.B. Bcl-2 and apoptosis in lymph node positive breast carcinoma / M.D.Berardo, R.M.Elledge, C.de Moor // Cancer. 1998. - Vol.82. -P. 1296-1302.

156. Bernoux,A. Estrogen receptor negative and progesterone receptor positive primary breast cancer: pathological characteristics and clinical outcome /

157. A.Bernoux., P.de Cremoux., C.Laine-Bidron et al.// Breast Cancer Res. Treat. 1998. - Vol.49. -P.219-225.

158. Berry, D.A. HER-2/neu and p53 Expression Versus Tamoxifen Resistance in Estrogen Receptor-Positive, Node-Positive Breast Cancer / D. A. Berry, H. B. Muss, A. D. Thor // J. Clin. Oncol. 2000. -Vol. 18. P. 3471-3479.

159. Beenken, S.W. Biomarkers for breast cancer / S.W.Beenken, K.I.Bland // Minerva Chir. 2002. - Vol.57, №4. - P.437-448.

160. Buerger, H. Ductal invasive G2 and G3 carcinomas of the end stages of at least two different lines of genetic evolution / H. Buerger, E.C. Mommers, R. Littmann, R. Simon // J.Pathol. 2001. - Vol. 194(2). - P. 165-170.

161. Buchholtz, T.A. Chemotherapy-induced apoptosis and bcl-2 levels correlate with breast cancer response to chemotherapy / T.A.Buchholtz, D.W.David, D.J.McConcey et al. // Cancer. 2003. - Vol.9/ - P.33-41.

162. Boyle, P. Epidemiology of breast cancer / P. Boyle // Baillieres Clinical Oncology. 1988. - Vol. 2. - P. 1-57.

163. Branchini, G. Progesterone receptors A and B and estrogen receptors alpha expression in normal breast tissue and fibroadenomas / G. Branchini, L.Schneider, R.Cericatto // Endocrine. 2009. - Vol.35, №3. - P.459-466.

164. Cancer Incidence in Five Continents / Eds D.M.Parkin et al. // IARC Sci.Publ. Lyon: IARC, 1997. - №143.

165. Cancer Incidence in Five Continents / Eds D.M.Parkin et al. // Lyon: IARC Scientific publications, 2001. №120. - Vol.6. - P. 1992.

166. Contesso, G. The importance of histologic grade in long-term prognosisiof breast cancer: a study of 1,010 patients, uniformly treated at the Institut Gustave-Roussy / G.Contesso, H. Mouriesse, S. Friedman., J. Genin. et al.

167. J. Clin. Oncol. 1987. - Vol. 5(9). - P.1378 - 1386.

168. Cordon-Cardo, C. Cooperative effects of p53 and pRb alterations in primary superficial bladder tumors / C.Cordon-Cardo, Z.-F.Zhang, G.Dalbagni et al. // Cancer Res. 1997. - Vol.57. - P. 1217-1221.

169. Costarelli, L. Hormone-dependence and C-ERBB2: relationship between estrogen receptor expression, estrogen-regulated proteins, and C-ERBB2 in breast carcinoma / L. Costarelli, F.R. Piro, L. Fortunato //Suppl Tumori. -2005.-Vol.4.- P.171.

170. Chen, Y.Y. Prognostic factors for patients with breast cancers 1cm and smaller / Y.Y. Chen, S.J. Schnitt // Breast Cancer Res Treat. 1998.- Vol. 51(3).-P.209 - 225.

171. Choi, D.H. Immunohistochemical biomarkers in patients with early-onset breast carcinoma by tissue microarray / D.H. Choi, S.Kim, D.L. Rimm et al.// Cancer J.- 2005.- Vol.ll(5).- P.404-411.

172. Crowe, Jr.J.P. Estrogen receptor determination and long term survival of patients with carcinoma of the breast / JrJ.P.Crowe, N.H.Gordon, C.A.Huday et al. // Surg. Gynecol.Obstet. 1991. - Vol.173. -P.273-278.

173. Depinto, R.A. The age of cancer / R.A.Depinto // Nature. Gr.Brit., 2000. - Vol.408, № 6809. - P. 248-254.

174. Donn, A.S. Breast cancer: epidemiology and risk factors / A.S.Donn, C.S.Muir // Cancer prevention in development countries: Proc.2nd UICC Conf., Nagoya-shi, 1985. Oxford, 1986. - P. 155-166.

175. Elston, C.W. Pathological prognostic factors in breast cancer. I. The value of histological grade in breast cancer: experience from a large study with long-term follow-up // C.W. Elston, I.O. Ellis // Histopathology, 1991; 19:403 -410

176. Eliopoulus, A.G. The control of apoptosis and drug resistance in ovarian cancer: influence of p53 and bcl-2 // A.G.Eliopoulus, D.G.Kerr, J.Hered et al.//Oncogene.-1995.-Vol. 11.-P.-1217- 1228.

177. Ellis, I. О. Pathological prognostic factors in breast cancer. II. Histological type. Relationship with survival in a large study with long-term follow-up / I. O. Ellis, M. Galea, N. Broughton // Histopathology. 1992. - Vol. 20. - P. 479-489.

178. Elwood V.E. The Estrogen Receptor: A Model for Molecular Medicine / V.E.Elwood, V.J.Craig // Clinical Cancer Research. 2003. - Vol.9. -P.1980-1989.

179. Erickson K.L. The role of dietary far in mammary tumorigenesis / K.L.Erickson, I.K.Thomas // Food Technol. 1985. - Vol.39, - Vol.39, №2. -P. 69-73.

180. Ferrara, N. The role vascular endothelial growth factor in pathological an-giogenesis / N. Ferrara // Breast Cancer Res. Treast. -1995. Vol.36, №36, №2.-P. 127-137.

181. Ferlay, J. Cancer Incidence, Mortality and Prevalence Worldwide / J.Ferlay, F.Bray, P.Pisani, D.M.Parkin // Pathology and Genetics of Tumors of the Breast and Female genital organs. Ed. By Tavassoli F.A. 2003. -IARC Press, Lyon.

182. Fitzgibbons P.L., Prognostic factors in breast cancer. College of American

183. Pathologists Consensus Statement 1999 / P.L.Fitzgibbons, D.L. Page, D. Weaver, A.D. Thor et al. // Arch. Pathol. Lab. Med. 2000. - Vol. 124 (7).- P.966 978.

184. Gao Yu-Tang. Association of menstrual and reproductive factors with breast cancer risk: Results from the Shanghai breast cancer study / Yu-Tang Gao, Xiao-Ou Shu, Qi Dai // Int. J. Cancer. 2000. - Vol.87, №2. - P. 295300.

185. Gerber, B. Einfluss von Umwelt, Ernährung und Lebensstil auf das Brustkrebsrisiko / B. Gerber // Dtsch. Arztebl. 2001. - Vol. 98, № 24. - P. 1286-1292.

186. Goodson, W.H. In vivo measurement of breast cancer growth rate / W.H.Goodson, Ljung B., Waldman F.et al. // Arch.Surg. 1991. - Vol.126.-P. 1220-1224

187. Goodson ,W.H. The prognostic value of proliferation indices: a study with in vivo bromodeoxyuridineand Ki-67 / W.H. Goodson, D.H. Moore, B.M. Ljung, K.Chew // Breast Cancer Res Treat. 2000. - Vol. 59(2). - P. 113123.

188. Gonzalez-Campora, R. Apoptosis in breast carcinoma / R. Gonzalez-Campora, M. R. Galera Ruiz, F. Vazques Ramirez // Pathol. Res. Pract. -2000.-Vol. 196.-P. 164-174.

189. Graham J. D. Nuclear receptor conformation, coregulators and tamoxifen-ressiisstant cancer / J. D. Graham, D. L. Bain, J. K. Richter et al. // Steroids.- 2000. Vol.65. - P. 579-584.

190. Griffith, C D. Density of lymphocytic infiltration of primary breast cancer does not affect short-term disease-free interval or survival / CD. Griffith, I.O. Ellis, J. Bell // J. R. Coll. Surg. Edinb. 1991. - Vol. 35. - P. 289-292.

191. Harris, C. Structure and function of the p53 tumor suppressor gene: Clues for rational cancer therapeutic strategies / C. Harris // J. Nat. Cancer. Inst. -1996. Vol.88. - P. 1442 - 1455.

192. Hansen, R.K. Tissue archistructure and breast cancer: the role of extracellular matrix and steroid hormones / R.K.Hansen, M.J.Bissell // Endocrine-Related Cancer. 2000. - №7. - P.95-113.

193. Hamada, N. Primary toremifene treatment for elderly postmenopausal women with breast cancer / N. Hamada, Y. Ogawa, A. Nishioka et al. // Oncol. Rep. 2004. - N 2. - P.365-370.

194. Hankinson, S.E. Alcohol, height, and adiposity in relation to estrogen and prolactin levels in postmenopausal women / S.E.Hankinson, W.C.Willett, J.E.Manson et al. // J. Nat. Cancer Inst. 1995. - Vol.87. - P. 1297-1302.

195. Hallberg, G. Effects of pre- and postmenopausal use of exogenous hormones on receptor content in normal human breast tissue: a randomized study / G.Hallberg, I.Persson, T.Naessen et al. // Gynecol. Endocrinol. -2008.-Vol.24.-P.475-480.

196. He, Q. Cytosolic thymidine kinase is a specific histopathologictumour marker for breast carcinomas / Q. He, Y. Mao., J. Wu., C. Decker, M.Merza., N. Wang., S. Eriksson., J. Castro., S. Skog.// Int.J.Oncol. 2004.-Vol.25(4).- P.945-953.

197. Hoonkop A.H., van-Diest P.J., de Jong J.S. et al. Prognostic role of clinical, pathological and biological characteristics in patients with locally advanced breast cancer // Br. J. Cancer. 1998. - Vol.77. - P. 621 - 626.

198. Igarashi N., Takahashi M., Ohkubo H. et al. Predictive value of Ki-67, p53 protein, and DNA content in the diagnosis of gastric carcinoma // Cancer. -1991.-Vol.86.-P. 1449-1454.

199. Imamura, H. MIB 1 determined proliferative activity in intraductal com-ponentsand prognosis of invasive ductal breast carcinoma / H.Imamura, S.Haga, T.Shimizu et al. // Jpn. J. Cancer Res. 1997. - Vol. 88. - P. 1017 -1023.

200. Immunohistochemical detection of steroid receptors in breast cancer: a working protocol. UK Receptor Group, UK NEQAS. The Scottish Breast

201. Cancer Pathology Group, and The Receptor and Biomarker Study Group of the EORTC/ Leake R. et al. // J. Clin. Pathol.-2000.-Vol.53, №8.-P.634-635.

202. Jacobson M.D. Bcl-2 blocks apoptosis in cells lacking mitochondrial DNA / M.D.Jacobson, J.F.Burne, M.P.King et al.// Nature. 1993. - Vol.361. -P.365 -368.

203. Jensen, M.L. Prognostic comparison of threeclassifications for medullary carcinomas of the breast / M.L. Jensen, H.Kiaer, J. Andersen et al. //Histopathology.-1997.-Vol.30(6).-P.523-532.

204. Khan, S. A. Estrogen receptor expression in begin breast epithelium and breast cancer risk / S. A. Khan, M.A.M. Rogers, K. K. Khurana // J. Nat. Cancer Inst. 1998. - Vol. 90. - P. 37-42.

205. Kastan, M.B. A mammalian cell cycle check-point pathway utilizing p53 and GADD 45 is defective in ataxia-telangiestasia / M.B. Kastan, Q.Zhan,

206. W.S.El-Peiry et al.// Cell. 1992. - Vol.71. - P.587 - 597.' , 1 » ■>< 1

207. Kim S., Han S., Kang'S. et al. A phase II study of neoadjuvant docetaxelplus doxorubicin in stage II, III breast cancer: A preliminary report (KBCS-01) // The Breast. 2005. - Vol. 14, Suppl. 1. - P. S42.

208. Kinney A.Y. Millikan R.C., Lin Y.H. et al. Alcohol consumption and breast cancer among black and white women in North Carolina (United States) // Cancer Causes and Contr. 2000. - Vol. 11, № 4. - P. 345 - 357.

209. Keshgegian A., Cnaan A Proliferation markers in breast carcinoma: mitotic figure count, S-phase fraction, proliferating cell nuclear antigen, Ki-67 and MIB-1 // Am. J. Clin. Pathol. 1995. - Vol. 104. - P. 42 - 49.

210. Kronqvist P., Kuopio T., Nykanen M., Helenius H. Predicting aggressive outcome in TINOMO breast cancer // Br. J. Cancer. 2004. - Vol. 91 (2). -P. 277-281.

211. Law, M.R. The importance of age in screening for cancer / M.R.Law, J.K.Morris, N.J.Wald // J. Med. Screen. 1999. - №6. - P. 16-20.

212. Lee, A.K. DNA ploidy proliferation and neo-oncogene protein overexpression in breastcarcinoma text. / A.K. Lee, B. Wiley, M. Loda, S. Bosari // Mod Pathol. 1992.-5(1).-P. 61-67.

213. Levine A.J. Momand J. et al. The p53 tumor suppressor gene // Nature. -1991. Vol.351. - P. 453-456.

214. Leek L.D., Kaklamanis L., Pezzella F. et al. Bcl-2 in normal human breast and carcinoma, associated with oestrogen receptor-positive, epidermal growth factor receptor-negative tumors and in situ cancer // Brit. J. Cancer. -1994.-Vol.69.-P.135-139.

215. Lieberman D.A. Hoffman B., Steinman R.A. Mollecular control of growth arrest and apoptosis: p53-dependent and independent pathways // Oncogene. 1993.-Vol. 11.-P. 199-210.

216. Lowe S.W., Bodis S., McClatchey A, et al. p53 status and the efficacy of cancer therapy in vivo // Science. 1994. - Vol. 266. - P. 807 - 810.

217. Maier W.P., Rosemond G.P., Goldman L.I. A ten year study of medullary carcinoma of the breast // Surg. Gynecol. Obstetric. 1977. - Vol. 144 (5). -P. 695-698.

218. Meirik, O. Relation between induced abortion and breast cancer / O. Me-irik, H.-O.Adami, G.Eklund // J. Epidemiol. Community Health. 1998. -Vol. 52, №3.-P. 209-211.

219. McManus, D.T. P53 expression mutation in ovarian cancer / D.T. McManus, E.P.N.Yaps, P.Maxwell et al. // J. Path. 1994. - Vol.174. - P. 159-168.

220. McLaughlin, R. Prognostic implications of p53 and bcl-2 expression in108 women with stage two breast cancer / R. McLaughlin, D. O'Hanlon, T. McHale // Int. J. Med. Sci. 2001. - X° 170 (1). - P. 11-23.

221. Miki, Y. Strong candidate for the breast and ovarian cancer susceptibility gene BRCA 1 / Y.Miki, J.Sirensen, D.Shattuck-Eidens et al. // Science. -1994.-P. 266.

222. Narod S.A. Tumor size predicts long-term survival among women with lymph node-positive breast cancer // Curr. Oncol. 2012. - Vol. 19 (5). - P. 249-253.

223. Nixon, A.J. Relationship of patientage to pathologic features of the tumor and prognosis for patients with stage lor II breast cancer /A.J.Nixon, D.Neuber,D.F.Hayes, R.Gelman et al. //J.Clin.Oncol.-1994.- Vol. 12(5).-P. 888-894.

224. Ollonen, P. Psychosocial risk factors in breast cancer / P.Ollonen, M. Es-kelinen, J.Lehtonen //Anticancer Res. 1998. - Vol.18. - № 6. - 4924p.

225. Pestell, K.E. Characterisation of the p53 status, bcl-2 expression and radiation and platinum drug sensitivity of a panel of human ovarian cancer cell lines / K.E.Pestell, S.J.Medlow, J.S.Titley et al. // Int. J. Cancer. 1998. -Vol.77.-P. 913-918.

226. Pietilainen, T. The important prognostic value of Ki-67 expression as determined by image analysis in breast cancer / T. Pietilainen, P.Lipponen, S.

227. Aaltomaa et al. // J. Cancer Res. Clin. Oncol. 1996. - Vol.122. - P. 687i692.

228. Pike, M.C. Oral contraceptive use and early abortion as risk factors forbreast cancer in young women / M.C.Pike, J.T.Henderson, J.T.Casagrande et al. //Br. J. Cancer. 1981. - Vol. 43, №1. -P.72-76.

229. Plunkett, W. Apoptosis / W. Plunkett // Oxford: CBC, 1995. 35p.

230. Papantoniou, V.J. Relationship of cell proliferation (Ki-67) to 99mTc-(V)DMSA uptake in breast cancer./ V.J. Papantoniou, M.A.Souvatzoglou, V.J Valotassiouet et al. // Breast Cancer Res. 2004. - Vol. 6 (2). - P. 56-62.

231. Pusztai, I. Expression of BAG-1 and BCL-2 proteins before and after neoadjuvant chemotherapy of locally advanced breast cancer / I.Pusztai, S. Krishnamurthy, J.Perez-Cardona et al. // Cancer Invest. 2004; in press.

232. Poelman, S.M. Human breast cancer susceptibility to paclitaxel therapy is independent of bcl-2 exspression / S.M. Poelman, M.O. Adeyanju, M.A. Robertson et al. // Clin. Cancer Res. 2000. - Vol.6. - P.4043 - 8.

233. Potzlaw, H. Expression of estrogen receptor beta in human breast tumors / H. Potzlaw, E. Leygue, P. H. Watson, L. C Murphy // J. Clin. Endocrinol.1997. Vol. 82. - P. 2371-2374.

234. Ravdin, P. Should estrogen receptor (ER) negativity alone be an indication' * <!ifor chemotherapy in TINO breast cancer? / P.Ravdin, I.A.Olivotto, C.Speers et al. // Ibid. 2003. - Vol. 22 (abstr.55).

235. Righetti, S.C. A comparative study of p53 gene mutations, protein accumulation, and response to cisplatin-based chemotherapy in advanced ovarian carcinoma / S.C.Righetti, G.D.Torre, S.Pilloti et al. // Cancer Res. 1996. -Vol.56.-P. 689-693.

236. Rozan, S. No significant predictive value of c-erbB-2 or p53 expression regarding / S.Rozan, A. Vincent-Salomon, B.Zafrani et al. // Int. J. Cancer.1998.-Vol.79.-P.27-33.

237. Sato, S. Chemosensitivity and o53-dependent apoptosis in epithelial ovarian carcinoma // S.Sato, J.Kigawa, Y.Minagawa et al. // Cancer/ 1999. - ( Vol.86.-P.1307-1313.

238. Silverstrini, R. The bcl-2 protein: A prognostic indicator strongly related top53 protein lymph node-negative breast cancer / R.Silvestrini, S.Veneroni, M.G.Diadone er al. // J. Nat. Cancer Inst. 1994. - Vol. 86. - P. 499-504.

239. Speirs, V. Coexpression of estrogen receptors alpha and beta: poor prognostic in human breast cancer / V. Speirs, A. T. Parkes, M. Kerin, S. L. At-kin // Cancer Res. 1999. -Vol.59. - P. 525 - 28.

240. Steele, R.J.C. Blood monocytes and tumor infiltrating macrophages in human breast cancer: differences in activation level as assessed by lysozyme content / R.J.C.Steele, O.Eremin, M.Brown // J.Nat.Cancer Inst. 1983. -Vol. 5.-P. 941-945.

241. Steele, R.J.C. Characterization of macrophages infiltrating mammary carcinomas / R.J.C Steele, M. Brown, O. Eremin // Brit. J. Cancer. 1985. -Vol. 1 -P. 135-138.

242. Susan, G. Hilsenbeck. Significance of Axillary Lymph Node Metastasis in Primary Breast Cancer / G. Hilsenbeck Susan, Gary M. Clark, C. Kent Osborne // J. Clin. Oncol. 1999. - Vol. 17. - P. 2334 - 2340.

243. Shoker, B.S. Estrogen receptor expression in the normal and pre-cancerous breast / B.S Shoker, C. Jarvis, D.R. Sibson // J. Pathol. 1999. - Vol. 88. - P. 237-244.

244. Szabo, B.K. Invasive breast cancer: correlation of dynamic MR features with prognostic factors / B.K.Szabo, P.Aspelin, M. Kristoffersen Wiberg, T. Tot et al. // Eur. Radiol. 2003. - Vol. 13 (II). - P. 2425-2435.

245. Stevart ,T.H. The possible role of stromal cell stimulation in worsening the prognosis of a subset of patient with breast cancer / T.H. Stevart, S.C. Tsai // Clin. Exp. Metastasis. 1993. - Vol. 11. - P. 295 - 305.

246. Tang P., Kacinski B., Validire P. Oncogene amplification correlates with dense lymphocyte infiltration in human breast cancer: a role for hematopoietic growth factor release by tumor cells // J. Cell. Biochem. 1990. - Vol. 44.-P. 189-198.

247. Thore, S.M. Steroid hormone receptors as prognostic ondicators in primarybreast cancer / S.M.Thore, B.B.Rasmussen et al. // Breast cancer Res. Treat. 1986.-Vol.7.-P. 91-98.

248. Toi, M. Association of vascular endothelial growth factor expression with tumor angiogenesis and with early relapse in primary breast cancer / M.Toi, S.Hoshina, T.Takayanagi, T.Tominaga // Jpn. J. Cancer Res. 1994. - Vol. 85. -P.1045-1049.

249. Vargas, M.P. Adrenocortical neoplasms: relationship of prognostic markers MIB-1, p53 and RB // M.P.Vargas, H.I. Vargas, D.E.Kleiner, M.J.Merino // Amer.J.Surg.Path. 1997. - Vol.21. - P.556 - 562.

250. Versone, S.M. Proliferation index as a prognostic marker in breast cancer / S.M.Versone, M.Gambacorta, O.Gottardi et al. // Cancer (Philad.). 1993. -Vol. 71.-P. 3926-3931.

251. Von Kleist, S. Immunohistological analysis of lymphocytes subpopulations infiltrating malignant and benign breast lesion: relevance for survival / S. Von Kleist, G. Berling, W. Bohle, C Wettekind // Patologia Polska. 1991. -Vol. 42.-P. 32.

252. Weinstein I.B. Diet and breast cancer: Is there a link? / I.B.Weinstein, P.Lhou, E.K., H.Kan et al. // J. Biomol. Struct. Dun. 1998. - Vol. 16, №1. -P. 184-185.

253. Wintzer H.-O., Zipfel I., Schulte-Monting J. et al. Ki-67 immunostaining in human breast tumors and its relationship to prognosis // Cancer. 1991. -Vol. 67.-P. 421 -428.

254. Winchester, D.P. The national cancer database report on breast carcinoma characteristics and outcome in relation to age / D.P.Winchester, R.T.Osteen, H.R.Menck // Cancer. 1996. - Vol.78, № 8. - P. 1638-1643.

255. WHO. Pathology and Genetics of Tumors of the Breast and Female genital organs. Ed. By Tavassoli F.A. 2003. - IARC Press, Lyon.

256. Zaridze, D. Diet, alcohol consumption and reproductive factors in a case-control study of breast cancer in Moscow / D.Zaridze, Y.Lifanova, D. Max-imovitch et al. // Int. J. Cancer. 1991. - Vol. 48. - P. 493-501.

257. Zamazami, N. Mitochondrial control of apoptosis // South West Cancer News.-1997. Vol. 10.-P. 4-5.

Информация о работе

Кириллина, Мария Петровна
кандидата биологических наук
Якутск, Новосибирск, 2012
ВАК 03.03.04

Диссертация

Иммуногистохимический анализ эпителиальных клеток молочной железы при опухолевом росте в условиях Республики Саха (Якутия) - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Иммуногистохимический анализ эпителиальных клеток молочной железы при опухолевом росте в условиях Республики Саха (Якутия) - тема автореферата по биологии, скачайте бесплатно автореферат диссертации

Похожие работы