Бесплатный автореферат и диссертация по сельскому хозяйству на тему

Характеристика Т- и В-систем иммунитета у свиней в постнатальном онтогенезе

ВАК РФ 06.02.01, Разведение, селекция, генетика и воспроизводство сельскохозяйственных животных

Автореферат диссертации по теме "Характеристика Т- и В-систем иммунитета у свиней в постнатальном онтогенезе"

РГ6 ол

1 з вив да

На правах рукописи

ЕФАНОВА • НИНА ВЛАДИМИРОВНА

ХАРАКТЕРИСТИКА Т- И В-СИСТЕМ ИММУНИТЕТА У СВИНЕЙ В ПОСТНАТАЛЬНОМ ОНТОГЕНЕЗЕ

06.02.01.- Разведение, селекция, генетика и воспроизводство сельскохозяйственных животных 03.00.13.- Физиология человека и животных

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

НОВОСИБИРСК 1995

Работа выполнена в лаборатории кафедры физиологии и би< химии животных Новосибирского государственного аграрного ую верситета.

Научный руководитель: кандидат биологических наук,

доцент Бакшеев А.Ф.

Официальные оппоненты: доктор биологических наук,

профессор Айзман Р.И.

кандидат биологических наук, доцент Устинова 6. И.

Ведущее учреждение: Сибирский научно-исследовательский и проектно-технологический институт животноводства СО РАСХН

Защита состоится 199^г. в ^ час.

заседании диссертационного совета Д 120.32.02. в Новое бирском государственном аграрном университете (630039, г. ^ восибирск-39, ул.Добролюбова, 160.)

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Новое бирского государственного аграрного университета.

Автореферат разослан

Ученый секретарь __. #

диссертационного совета _ Кочнев Н,

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Современные знания о параметрах имму-ологического интерьера свиней носят фрагментарный характер, озтому до сих пор не существует целостного представления об ммунном статусе этого вида животных.

До настоящего времени у свиней чаще всего определялась озрастная динамика общего количества Т-, В-лимфоцитов и имму-оглобулинов классов М, Б, А (Анисимова Н.В, 1988; Горский :.В.,1982; Заика Л.А, 1988; Фесенко И.Д., 1980 и др.).' Коли-ественный состав Т-хелперов и Т-киллеров-супрессоров изучался ■ поросят в первые 4-6 недель жизни (Пивовар Л.М. и др, 1982), . ' супоросных свиней (Говалло В.И., 1987) и у поросят в услови-[X высокогорья (Бердиев Н.Б. и др., 1990). У свиней сибирского ■ипа скороспелой мясной породы субпопуляционный состав лиыфо- _ , датов и концентрация иммуноглобулинов не определялись вообще.

Необходимость исследований в области иммунсмодуляции обгоняется тем, что в условиях современного свинолодства живот-ше нередко находятся в состоянии низкого иммунного статуса и ■ «устойчивы к различного рода заболеваниям. Наличие широкого :пектра высокоэффективных иммуномодулируших средств позволяет эсуществлять правильный подбор модулятора для проведения имму- . яокоррекции. К таким препаратам относится и белково-липидный концентрат из копрофагов (БЖ).

Иммуностимулирующие качества ЕЛК были доказаны на свиньях до и после огьемз, в 3-х - 5-и месячном возрасте, в период су-поросности, и на лабораторных животных (Бакшеев А.Ф. и др., 1983, 1985, 1986, 1989,1991, 199"; тюньков И.В.,1981 и др.). Возникла необходимость определить, влияние БЛК на иммунный ста- ; туе поросят-сосунов, матери которых получали препарат перед опоросом, чтобы при наличии положительного эффекта рекомендовать данное средство для профилактики у них иммунодефицитов. .

Цель и задачи исследования. Целью работы явилось изучение возрастных особенностей Т- и В-звеньев иммунитета у свиней сибирского типа скороспелой мясной породы и выявление влияния ■ БЖ на иммунный статус потомства, матери которых получали препарат. В связи с этим были"поставлены следующие задачи:

1. Изучить у свиней сибирского типа скороспелой мясной

породы в период с рождения и до 240 дня жизни •физиологические параметры и динамику :

- общего количества лейкоцитов и лимфоцитов.

- состояние Т-клеточного звена иммунитета по общему количеству Т-лимфоцитов, предтимических, тимических, ранних пост-тимических Т-лимфоцитов, Т-индукторов-хелперов, Т-килле-ров-супрессоров и активированных Т-лимфоцитов.

количества В-лимфоцитов и содержания сывороточных и

1ее. • •

2. Исследовать влияние ЕЖ, скармливаемого супоросным и подсосным свиноматкам на иммуный статус их потомства.

Научная новизна и практическая значимость работы. Впервые на основании комплексных исследовании по количеству и составу периферических Т-лимфоцитов дана характеристика клеточного звена иммунитета у свиней сибирского типа скороспелой мясной породы в постнатальном онтогенезе . С учетом степени дифферен-цировки и функциональной принадлежности определены физиологические параметры и возрастная динамика общего количества Т-лимфоцитов, предтимических Т-лимфоцитов, тимических, ранних посттимических Т-лимфоцитов, Т-индукторов-хелперов, Т-килле-ров-супрессоров, активированных Т-лимфоцитов. Изучено состояние гуморального иммунитета по содержанию В-лимфоцитов и иммуноглобулинов классов М и 6 и определено влияние БЖ на некоторые продуктивные качества свиноматок, рост, развитие и состояние иммунной системы их потомства.

Результаты работы можно использовать, в качестве учебногс материала для студентов ВУЗов биологического профиля, специалистам в области животноводства и ветеринарной медицины с целью оценки состояния иммунного статуса свиней и выявления 5 них иммунопатологии. Кроме того, даны рекомендации по применению БЖ супоросным свиноматкам с целью повышения иммунноп статуса их потомства.

Апробация работы. Материалы диссертации представлены н. научно-практических конференциях НГАУ (Новосибирск,1991 1993), Всероссийской научной конференции (Новосибирск,1993) конференции молодых ученых и аспирантов НГАУ (1994), науч но-практической конференции ученых НГАУ и Гумбольдтского уни верситета (Новосибирск,1995).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 8 работ.

Структура и объем работы. Текст диссертации изложен на 167 страницах и включает введение, обзор литературы, материалы и методы исследования, результаты собственного исследования, обсуждение, выводы, практические предложения, рукопись содержит 18 таблиц. Список литературы включает 346 источников, в том числе 89 иностранных. 1

2. МАТЕРИМ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Работа по изучению возрастных особенностей иммунного статуса свиней выполнена на поголовье животных сибирского типа скороспелой мясной породы. Эксперименты проводили в 1990-1991гг на базе учхоза Тулинское Новосибирского ГАУ. При подборе групп учитывали происхождение (семейство Снегурки, линия Сатурна), здоровье и живую массу свиней. Кормление в хозяйстве осуществляется по нормам , разработанным ВНИИЖ. Отъем -поросят проводят в 60-дневном возрасте.

Иммунологическому обследованию животные подвергались в 6-часовом, суточном возрасте, в 7, 14, 21, 30, 60, 90, 120, 150, 180, 240 дней жизни. В разные возрастные периоды была обследована кровь от 20 до 50 голов.

Исследование иммуномодулирующих свойств БЛК проводили на основных•супоросных и подсосных свиноматках и их потомстве. Опыт проходил в зимний период 1992-1993гг. Из свиноматок были сформировано три группы животных по 15- 17 голов в каждой. В дополнение к основному рациону супоросным маткам первой группы за 7-10 дней до опороса включалась добавка БЛК из расчета 0,3г на 1 кг живой массы. Свиноматки второй группы получали БЛК в •той же дозе за 7-10 дней до опороса и еще в течение 7-ми дней после опороса. Животные контрольной группы БЛК не получали.

Из потомства контрольных и опытных свиноматок были сформированы соответственно три группы по 8-10 голов в каждой. За поросятами осуществлялся иммунологический контроль в суточном возрасте, в 7, 14, 21 и 30 дней жизни. Кроме того, изучали рост, развитие поросят и продуктивные качества маток.

Концентрацию гемоглобина, содержание эритроцитов, лейко-

цитов и лейкоформулу определяли общепринятыми методами (Никитин В.Н.,1956). Идентификацию субпопуляций Т-звена иммунитета осуществляли при помощи спонтанного розеткообразования лимфоцитов с эритроцитами бадана (Е-РОК) с использованием разных режимов инкубации. Количество общих Т-лимфоцитов определяли методом тЕ-РОК, Т-индукторов-хелперов - рЕ-РОК, Т-килле-ров-супрессоров - вЕ-РОК, активированных Т-лимфоцитов 6Е-Р0К, тимических Т-клеток - сЕ-РОК, посттимических малодиф-ференцированных Т-лимфоцитов - аЕ-РОК. По разности процента розеток, полученных методом комплексных Е-РОК (кЕ-РОК) и методом тЕ-РОК определяли количество предшественников Т-клеток (Лозовой В.П.и др.,1986). Для определения В-лимфоцитов применяли метод спонтанного розеткообразования лимфоцитов с эритроцитами мыши (ЕМ-РОК) (Бабаян В.А. и др.,1988). Концентрацию 1БМ и в сыворотке крови устанавливали методом простой радиальной иммунодиффузш (Фримель Г.,1987).

3.РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

1.1. Возрастная динамика общего количества лейкоцитов и лимфоцитов у свиней

Возрастные изменения общего количества лейкоцитов почти аналогичны динамике абсолютного числа лимфоцитов. В периоды с 6-го часа по 7-й день жизни и с 21-х по 120-е сутки эксперимента общее количество лейкоцитов увеличивается соответственнс с 9,62+0,34х109/л до 13,89+0,66х109/л клеток (Р<0,001) и с 8,19+0,22х109/л до 18,67+0,67х109 /л клеток (Р<0,001), а абсолютное значение лимфоцитов соответственно с 6,17+0,26х109/л дс 7,22+0,ЗЗх109/л клеток (Р<0.05) И с 6,67+0,19х109/л дс 13,96+0,56x1О9/л клеток (Р<0.001).

Затем рост числа лейкоцитов наблюдается со 180-го пс 240-е сутки (Р<0,01), а лимфоцитов со 150-го по 240-й деш жизни поросят соответственно с 15,09+0,34х109/ дс 17,11+0,47х109/л и с 9,70+0,22х109/л до 11,13+0,31х109/л клеток (Р<0.05). В промежутках между указанными возрастными интервалами численные значения изучаемых показателей снижаются.

3.2. Возрастные изменения общих Т- и В-лимфоцитов

У новорожденных поросят показатели тЕ-РОК и ЕМ-РОК составляют соответственно 2,23+0,09х109/л и 0,33+0,02хЮ9/л кле-,ток. В связи с периодом адаптации к новым условиям жизни на 7-й день опыта концентрация тЕ-РОК достигает 4,29+0,17х109/л (Р<0.001),.. а ЕМ-РОК 0,92+0,02х109/л клеток (Р<0,001). К 14-му дню наблюдения уровень тЕ-РОК снижается на 27% (Р<0,001), а уровень ЕМ-РОК на 56,61 (Р<0.001).

Следующий период увеличения количеств тЕ-РОК и ЕМ-РОК соответственно с 3,13+0,12х109/л до 7,04+0,22хЮ9/л клеток (Р<0,001). и с 0,40+0,02х109/л до 1,20+0,03х109/л клеток (Р<0,001) отмечается с 21-х по 60-е сутки постнатального онтогенеза и обусловлен выходом собственной иммунной системы на новый уровень развития. В результате отъема к 90-му- дню наблюдения численные значения тЕ-РОК уменьшаются на 4,2% (8,12+0,36х109/л), а ЕМ-РОК на 15% (1,11+0,06х109/л) (Р<0.001). Однако в 120-дневном возрасте показател тЕ-РОК и вырастает и превышает значение предыдущего исследования на 16,9% (Р<0.001).

После этого динамика тЕ-РОК отличается от динамики ЕМ-РОК, что, вероятно, зависит от различной' чувствительности данных популяций клеток к гормональной перестройке, происходящей вследствие полового созревания. Так, если к 180-м суткам наблюдения величина тЕ-РОК уменьшается до 5,41+0,16х109/л (Р<0.001), то число ЕМ-РОК повышается до 1,45+0,21х109/л клеток. К 240-му дню жизни свиней наоборот количество тЕ-РОК увеличивается и составляет 6,55+0,20х109/л клеток (Р<0,001), а концентрация ЕМ-РОК снижается до.1,15+0,04х109/л клеток.

Изменения относительного числа тЕ-РОК не совпадает с динамикой их абсолютного количества в периоды с 21-го по 60-й и с 120-го по 180-й дни наблюдения. Для ЕМ-РОК такой период соответствует 90-150 суткам опыта. /

3.3. Динамика предшественников Т-лимфоцитов, тимических и ранних посттимических Т-лимфоцитов

Абсолютное число предшественников Т-лимфоцитов (табл.1) у

суточных поросят составляет 0,47+0,09х109/л клеток, что на 14,72 ниже показателя 6-го часа жизни новорожденных и на 27,71 ниже уровня 7-го дня жизни поросят. На 14-е сутки опыта концентрация предшественников уступает показателю предыдущего возраста на 43Х (Р<0,001). К 60-му дню эксперимента уровень предшественников Т-лимфоцитов увеличивается до 0,95+0,06х109/л клеток (Р<0,001). К 90-м суткам жизни животных уровень предшественников снижается на 31,62 (Р<0,001). В последующие дни исследовании данный показатель неустойчив.

Таблица 1

Динамика предшественников Т-лимфоцитов, тимических и и ранних посттимических Т-лимфоцитов, х109/л

Возраст, ДНИ Предшественники-Т-лимфоцитов СЕ-РОК аЕ-РОК

0 0.55+0.04 0.03+0.01 0.17+0.02

1 0.47+0.09 0.62+0.03 0.30+0.02

7 0.65+0.04 1.44+0.05 0.46+0.04 ^

14 0.37+0.04 0.98+0.03 0.31+0.02

21 0.41+0.07 0.47+0.02 0.29+0.03

30 0.47+0.04 0.59+0.02 0.70+0.02

60 0.95+0.06 0.87+0.02 0.90+0.02

90 0.65+0.06 0.66+0.02 1.18+0.04

120 0.77+0.06 1.07+0.07 1.67+0.04

150 0.55+0.04 0.93+0.22 0.97+0.02

180 1.08+0.10 1.17+0.03 0.89+0.05

240 0.76+0.10 0.81+0.02 0.90+0.03

Возрастные изменения процентного показателя предшественников Т-лимфоцитов в большинстве случаев повторяют изменения абсолютного числа этих клеток. Исключение составляют 30-й день опыта и период с 120-х по 150-е сутки.

Количество сЕ-РОК и аЕ-РОК, начиная с 6-часа и до 7-го дня жизни поросят увеличивается (Р<0,001; Р<0,001). Затем до 21-го дня опыта величины сЕ-РОК и аЕ-РОК снижаются (Р<0,001; Р<0,001). На 30-й день жизни свиней уровни сЕ-РОК и аЕ-РОК

опережают показатели предыдущего возраста соответственно на 20,4% (Р<0,001)и 58,6% (Р<0,001). На 60-й день эксперемента значение сЕ-РОК составляет 0,87+0,02х109/л клеток (Р<0,001). К 90-му дню опыта концентрация сЕ-РОК уменьшается до 0,бб+0,02х109/л (Р<0,001). В последующие возрастные периоды показатель сЕ-РОК неустойчив. Уровень аЕ-РОК растет до 120-го дня наблюдения (Р<0,^01), но к 150-му дню снижается на 41,2% (Р<0,001) и стабилизируемся.

Изменения относительных значений сЕ-РОК и аЕ-РОК совпадают с динамикой их абсолютных показателей за исключением в случае с сЕ-РОК интервала с 21-х по 30-е сутки эксперимента, а в случае с аЕ-РОК промежутка с 30-го по 60-е сутки опыта.

3.4. Динамика Т-индукторов-хелперов, Т-киллеров-супрессоров и активированных Т-лимфоцитов

У новорожденных поросят на 6-м часу жизни чгсленное преимущество среди функционально зрелых лимфоцитов принадлежит вЕ-РОК (табл.2). Соотношение между рЕ-РОК и вЕ-РОК у суточных поросят перераспределяется в пользу рЕ-РОК. На 7-й день жизни число рЕ-РОК повышается до 2,39+0,11х109/л клеток (Р<0,001), 6Е-Р0К до 1,37+0,05х109/л клеток (Р<0,001), а количество вЕ-РОК снижается до 0,9+0,03х109/л клеток (Р<0,001).

В последующем возрастная динамика рЕ-РОК и 6Е-Р0К отличается от динамики вЕ-РОК. К 14-му дню опыта концентрация рЕ-РОК уменьшается до 2,04+0,08х109/л клеток (Р<0,01), 6Е-Р0К до 0,82+0,03х109/л клеток (Р<0,001), а значение вЕ-РОК вырастает до 1,17+0,03х109/л клеток (Р<0,001). Интенсивный рост содержания рЕ-РОК зарегистрирован с 21- до 60-дневного возраста поросят (Р<0,001), а бЕ-РОК с 21-го по 30-е сутки жизни (Р<0,001).

С 90-го по 60-й ден наблюдения число рЕ-РОК уменьшается (Р<0,05) и остается на таком же уровне до конца опыта.

Концентрация 6Е-Р0К к 90-му дню опыта уменьшается на 27,3% (Р<0,00). Однако к 120-м суткам наблюдения численное значение 6Е-Р0К повышается до 1,29+0,09х109/л клеток . В последующем снижение этого показателя чередуется с его увеличением.

Рост концентрации вЕ-РОК происходит с 7-х суток жизни и до 120- дневного возраста поросят (Р<0,001). К 150-му дню экс-

перимента концентрация вЕ-РОК снижается до 2,02+0,06x1О9 клеток (Р<0,001).

Таблица

Динамика Т-индукторов-хелперов, Т-киллеров-супрессоров и активированных Т-лимфоцитов, х109/л

Возраст, дни рЕ-РОК ВЕ-РОК 6Е-Р0К

0 0.05+0.01 . 1.25+0.05 0.02+0.006

1 1.87+0.08 0.83+0.03 0.60+0.02

7 2.39+0.11 0.90+0.03 1.37+0.05

14 2.04+0.08 1.17+0.03 0.82+0.03

21 2.20+0.08 1.24+0.04 0.81+0.04

30 3.12+0.09 1.68+0.05 1.62+0.05

60 4.36+0.12 2.37+0.06 1.63+0.04

90 3.46+0.10 2.58+0.08 1.18+0.03

. 120 3.31+0.20 3.69+0.17 1.29+0.09

150 2.77+0.06 2.02+0.06 1.19+0.03

180 2.96+0.08 2.20+0.08 1.24+0.05

240 2.98+0.08 2.14+0.06 1.14+0.03

Периоды несоответствия динамики относительных и абсолки ных величин для рЕ-РОК зафиксированы с 7-го по 14-й дни опыта для вЕ-РОК с 21-го По 30-й день опыта, а для 6Е-Р0К такие пе риоды совпадают с30-б0ис 90 - 150-ми днями жизни поросят

3.5. Содержание сывороточных 1(£М и у свиней в онтогенезе

Через 6 часов после рождения уровень 1дМ в крови порося составляет 1,71+0,04 г/л (табл.3). К 7-му дню опыта показател 1еМ увеличивается до 2,42+0,14 г/л (Р<0,001). Рост концентра ции продолжается до 60-го дня наблюдения (Р<0,001).

Динамика 1еБ характеризуется тем, что на 6 часу жизни по росят его концентрация составляет 31,89+0,53 г/л. К суточном возрасту показатель снижается (Р<0,001).

Уменьшение его уровня продолжается до 21-го дня опыт

;р<0,001).

Таблица 3

Содержание IgM и IgG у свиней в онтогенезе, г/л

Возраст, IgM IgG

дни

0 1.71+0.04 31.89+0.53

1 1.64+0.06 . 28.00+0.58

7 2.42+0.14 14.37+0.59

14 2.72+0.09 8.72+0.77

21 3.24+0.05 7.52+0.77

30 3.55+0.10 7.81+0.30

60 4.70+0.11 14.00+0.38 •

90 4.68+0.17 17.00+0.53

120 4.81+0.11 ' 21.30+0.37

150 4.81+0.09 22.21+0.30

180 6.50+1.01 25.04+0.74

240 4.81+0.16 15.30_0.65

С 30-го дня опыта содержание этого иммуноглобулина посте-1енно увеличиваетсяи и в 180 дней жизни поросят составляет 25,04+0,74 г/л (Р<0,001). К 240 суткам наблюдения показатель IgG снижается на 39,8% (Р<0,001).

4. ИЗУЧЕНИЕ ИММУНОМОДУЛИРУКЩХ СВОЙСТВ БЛК

4.1. Содержание гемоглобина и эритроцитов у поросят в эксперименте

Анализ результатов исследования показывает, что по содержанию гемоглобина молодняк первой группы имеет преимущество над контрольной в 7-ми -7,5% (Р<0,01), 14-ти - 42,6% (Р<0,01) и 21-дневном -4,4% (Р<0,05) возрасте, по уровню эритроцитов на 14-й -26,3% (Р<0,001) и 21-й -5,4% (Р<0,05) дни наблюдения. Поросята второй группы превосходят контрольные величины гемоглобина на 14-й - 41,8% (Р<0,01), 21-е - 10,4% (Р<0,05) и 30-й -13% (Р<0,05) дни жизни, а количество эритроцитов только на 14-е - 24,7% (Р<0,001) сутки эксперимента. Контрольный молод-

няк приобретает высокий уровень эритроцитов в суточн» (Р<0,001; Р<0,05), а гемоглобина в 30-дневном возрас (Р<0,001; Р<0,01).

Сравнением показателей опытных групп установлено, что первый день наблюдения животные второй группы по числу эритр< цитов опережают первую на 12,82 (Р<0,05).

■

4.2. Показатели общего количества лейкоцитов и их форм у поросят в эксперименте

♦ По общему количеству лейкоцитов и абсолютному числу лю

фоцитов молодняк контрольной группы имеет превосходство нг поросятами первой.группы в суточном -29,32 (Р<0,01), 7-ми 35,82 (Р<0,001) и 21-дневном возрасте - 20,52 (Р<0,05), а содержании лимфоцитов на 7-й - 21,62 (Р<0,01) и 14-й - 14,£ (Р<0,05) дни наблюдения. Отставание второй группы от контрола ной менее выражено и статистически достоверно только по общек количеству лейкоцитов на 7-е сутки опыта - 21,62 (Р<0,05).

По количеству палочкоядерных и сегментоядерных нейтроф* лов контрольные поросята опережают молодняк первой группы у 7-й (Р<0,01; Р<0,05) и 21-й (Р<0,01; Р<0,001) дни зкепериме* та,а молодняк второй группы на 21-е сутки и только по ypoBí сегментоядерных гранулоцитов (Р<0,01). На 14-й день наблюден* у молодняка первой и второй групп уровень палочкоядерных нет рофилов выше контрольного значения на 722 (Р<0,01) и 72,7 (Р<0,01), а уровень сегментоядерных гранулоцитов соответствен но на 37,82 (Р<0,05) и 37,12 (Р<0,05). В 30-дневном возраст контрольные поросята отстают от первой группы по концентраци сегментоядерных нейтрофилов (Р<0,05), но содержат более высс кие значения палочкоядерных гранулоцитов (Р<0,01).

Сравнение изучаемых показателей опытных животных выявилс что в первый день наблюдения поросята второй группы имеют пре имущества над первой в содержании общего количества лейкоците - 19,82 (Р<0,05) и абсолютного числа лимфоцитов - 19,0 (Р<0,05). В 7т-дневном возрасте превосходят их по концентраци палочкоядерных нейтрофилов (Р<0,05), а на 30-е сутки жизни п числу сегментоядерных гранулоцитов (Р<0,05).

4.3. Содержание общих Т-лимфоцитов и В-клеток у поросят в эксперименте

В содержании абсолютных чисел тЕ-РОК и ЕМ-РОК статисти-' чески достоверные различия между группами обнаружены на 7-й и 21-й дни эксперимента. Так в 7-дневном возрасте у контрольного молодняка показатели тЕ-РОК и ЕМ-РОК соответственно на 20,31 (Р<0,001) и 65,5% (Р<0,001) выше, чем в первой и на 14,9% (Р<0,05) и 38,4% (Р<0,01) выше, чем во второй группе. Вторая группа на 44% (Р<0,01У опережает поросят первой группы. К 21-му дню по количеству тЕ-РОК контрольные поросята уступают первой на 25,4 (Р<0,01) и второй на 27,6% (Р<0,01) группам, но по-прежнему превосходят их по числу ЕМ-РОК соответственно на 33,8% (Р<0,001) и 27,3% (Р<0,001).

В содержании относительного количества тЕ-РОК поросята первой группы имеют преимущество над контрольной (Р<0,001) на 14-й день опыта. На 21-е сутки жизни контрольные животные отстают как от первой (Р<0,001), так и от второй (Р<0,001) групп.

4.4. Содержание предшественников Т-лимфоцитов, тимических и ранних посттимических у поросят в эксперименте

На 21-й день наблюдения количество предшественников Т-лимфоцитов в контрольной группе на 50% (Р<0,05) выше, чем в первой и на 53% (Р<0,05) выше, чем во второй группах. Контрольный показатель абсолютного числа предшественников Т-лимфоцитов отстает от показателя первой группы на 30-й день эксперимента. Разница составляет 62%,(Р<0,05).

Сравнение значений первой и второй групп показало, что в 14-дневном возрасте преимущество в содержании предшественников Т-лимфоцитов имеет вторая группа поросят - 47,5% (Р<0,01), а на 30-е сутки жизни первая группа - 61,3% (Р<0,01).

По уровню сЕ-РОК молодняк второй и первой групп опережает контрольный только на 14-й день жизни соответственно на 55% (Р<0,01) и 54% (Р<0,01). В суточном и 7-суточном возрасте численное превосходство по данному значению принадлежит контрольным животным. Преимущество второй группы над первой по числу сЕ-РОК зафиксированно только на 1-е - 47,3% (Р<0,05) и • 7-е

- 56,8% (Р<0,05) сутки наблюдения.

. По количеству аЕ-РОК поросята первой и второй групп опережают контрольный молодняк на 1-й (Р<0,001; Р<0,001),7-й (Р<0,001; Р<0,01), 14-Й (Р<0,01; Р<0,01) и 30-и (Р<0,001; Р<0,01) сутки эксперимента.

Сравнивая относительные и абсолютные показатели предшественников Т-лимфоцитов, сЕ-РОК и аЕ-РОК, нами установлено отставание контрольного молодняка от первой и второй групп по процентному содержанию предшественников Т-лимфоцитов на 7-е сутки жизни (Р<0,05; Р<0,05).

4.5. Влияние EJK на. содержание Т-индукторов-хелперов, Т-киллеров-супрессоров и Т-активированных лимфоцитов у поросят

Результаты исследования показали, что по абсолютному числу рЕ-РОК поросята первой и второй групп практически не уступают контрольным в течение всего эксперимента (табл.4). Животные второй группы но сравнению с первой содержат более высокую концентрацию рЕ-РОК на 1-й - 18,2% (Р<0,01) и 7-й - 9,7% (Р<0,05) дни эксперимента.

В суточном возрасте поросята первой группы имеют низкий уровень 6Е-Р0К - 0,44+0,03х109/л клеток. Это на 25,5% (Р<0,05) ниже контрольного значения и на 30% (Р<0,05) ниже величины второй группы.

Результаты 14-го дня свидетельствуют, что по количеству 6Е-Р0К молодняк первой и второй групп опережают контрольных соответственно на 31% (Р<0,01) и 29,7% ..(Р<0,05), .а по числу вЕ-РОК на 25,6% (Р<0,01) и 12,5%. На 21-й день жизни поросят контрольные показатели 6Е-Р0К и вЕ-РОК отстают от данных значений первой группы соответственно на 20% (Р<0,05) и 15,8% (Р<0,05), а от второй группы на 28% (Р<0,01) и 21,6% (Р<0,05).

При сравнительной оценке относительных и абсолютных показателей основные различия зафиксированы на 1, 7, 14 и 21-е сутки исследования. В 7-дневном возрасте контрольная относительная величина рЕ-РОК на 10,9% (Р<0,05) и 11% (Р<0,01) отстает от показателей первой и второй групп, а на 14-й день эксперимента соответственно на 21,4% (Р<0,001) и 19,8% (Р<0,01).

Таблица 4

Динамика индукторов-хелперов, киллеров-супрессоров и активированных Т-лимфоцитов у поросят в эксперименте, х 109/л

Группа День рЕ-РОК вЕ-РОК 6Е-Р0К

опыта

Контрольная 1 1.68+0.16 0.79+0.07 0.59+0.06

Опытная I 1 1.49+0.08 0.70+0.08 0.44+0.03

Опытная II 1 1.82+0.11 0.85+0.07 0.63+0.06

Контрольная 7 2.45+0.20 0.78+0.04 1.42+0.09

Опытная I 7 2.25+0.08 0.76+0.10 1.27+0.11

Опытная II 7 2.49+0.04 0.78+0.03 1.28+0.11

Контрольная 14 2.17+0.10 1.05+0.04 0.76+0.03

Опытная I 14 2.04+0.15 1.41+0.09 1.10+0.06

Опытная II 14 2.05+0.17 1.20+0.12 1.08+0.11

Контрольная 21 2.13+0.23 0.80+0.04 0.72+0.04

Опытная I 21 1.83+0.09 0.95+0.03 0.90+0.04

Опытная II 21 1.98+0.16 1.02+0.07 1.00+0.08

Контрольная 30 2.97+0.09 . 1.64+0.04 2.18+0.15 Опытная I 30 2.86+0.20 1.12+0.07 1.80+0.21 Опытная II 30 2.77+0.18 1.21+0.12 1.73+0.19 По процентному количеству вЕ-РОК у молодняка первой группы преимущество над контрольным обнаружено уже на 7-е сутки жизни (Р<0,01), а у поросят второй только в 14-дневном возрасте (Р<0,001). Вторая группа получает превосходство над первой (Р<0,01) на 14-й день эксперимента.

4.6. Влияние БЛК на содержание 1бМ И в крови поросят

Анализ полученных данных свидетельствует что, в суточном возрасте контрольный молодняк имеет самую низкую концентрацию (табл.5). Его отставание по этому показателю от первой

группы равно 53% (р<0,001), а от второй 45,5% (Р<0,001). Различия между группами по количеству 1еМ в этот период недостоверны. Затем опытный молодняк первой и второй групп по содержанию 1бМ опережает контрольных животных на 7 (Р<0,01;Р<0,01), 14 (Р<0,001; Р<0,001), 21 (Р<0,01; Р<0,05) и 30-й (Р<0,05; Р<0,05) дни эксперимента.

Таблица 5

Содержание 1еМ и 1е£5 у поросят в эксперименте, г/л

Группа День 1ем

опыта

Контрольная Опытная I • Опытная II

1.78+0.25 1.64+0.26 1.44+0.08

20.79+0.77 44.18+0.65 38.12+2.87

Контрольная Опытная I Опытная II

7 7

2.75+0.03 3.10+0.11 3.20+0.11

12.67jjD.35 11.21+0.40 11.29+0.38

Контрольная Опытная 1 Опытная II

14 14 14

2.59+0.01 3.35+0.12 3.23+0.12

7.10+0.17 8.88+0.23 9.00+0.16

Контрольная Опытная I Опытная II

21 21 21

3.14+0.09 3.47+0.08 3.42+0.07

7.70+0.19 10.60+0.07 10.96+0.21

Контрольная 30 3.00+0.06 8.55+0.06

Опытная I 30 3.58+0.20 11.50+0.32

Опытная II 30 -3.56+0.21 11.62+0.36

Снижение концентрации 1еС в опытных группах происходит интенсивнее, чем в контрольной. Вследствие этого на 7-й день наблюдения контрольный показатель- превышает показатели

первой и второй групп соответственно на 11,4% (р<0,05) и 11% (р<0,05). Однако с 14-х суток жизни поросята первой и второй групп вновь получают преимущество над контрольными животными

по содержанию (Р<0,001; Р<0,001) и сохраняет его в 21 (Р<0,001; Р<0,001) и 30 (Р<0,001; Р<0,001) дней жизни.

Сравнение первой и второй групп выявило превосходство второй над первой на 14-е (Р<0,001) сутки наблюдения, и первой над второй на 21-й день жизни (Р<0,001).

4.7. Влияние ЕЛК на продуктивность маток, рост и развитие их потомства

Результаты эксперимента показывает, что введение БЛК супоросным свиноматкам до и после опороса благотворно влияет на их продуктивность, рост и развитие поросят. Так в контрольной группе матерей молочность и масса гнезда в 60 дней составляет соответственно 61,33+4,85кг и 171,1+8,93кг, в первой группе -69,04+4,97кг И 189,9+10,Окг, ВО второй - 70,0+3,70кг и 190,1+10,9кг. В 60-дневном возрасте живая масса одного поросенка, подученного от контрольных каток на 5,4 - 5,52 уступает показателям первой и второй групп. Абсолютный и среднесуточный прирост контрольных поросят соответственно на 4 и 3,82 ниже показателей первой группы и на 4,7 и 52 отстает от показателей второй группы. Сохранность контрольного молодняка в этот период составляет 83,95+3,722, животных первой группы 92,45+4,972, поросят второй группы 90,87+2,022-

ВЫВОДН

1. В первые шесть часов жизни поросята имеют низкий уровень лейкоцитов, димфоцитов, тЕ-РОК, рЕ-РОК, 6Е-Р0К, сЕ-РОК, аЕ-РОК, ЕМ-РОК, но высокую концентрацию предшественников Т-лимфоцитов, вЕ-РОК, да.да. Соотношение между рЕ-РОК и вЕ-РОК перераспределено в пользу вЕ-РОК, так как Иммунная система поросят находится еще на первом уровне супрессии.

2.Под воздействием экзогенных факторов у суточных поросят активизируются процессы лейкопоэза и иммуногенеза. В крови молодняка увеличивается количество лейкоцитов^ лимфоцитов, ЕМ-РОК. Активизация процессов дифференцИровки Т-к^еМк бой^Ь-вождается снижением числа предшественников Т-лимфоцитов ^ одновременный "повьшением количества тЕ-РОК, сЕ-РОК, аЕ-РОК,

рЕ-РОК и 6Е-РОК. Уменьшается доля вЕ-РОК, 1еМ и 1^3. Происходит отмена первого уровня иммуносупрессии и соотношение _ между рЕ-РОК й вЕ-РОК перераспределяется в пользу рЕ-РОК.

3.Рост общего количества лейкоцитов, лимфоцитов, ЕМ-РОК, тЕ-РОК, сЕ-РОК, аЕ-РОК, рЕ-РОК продолжается до 7-го дня жизни поросят. Увеличение концентрации предшественников Т-лимфоцитов к этому возрасту является следствием компенсаторной реакции органов кроветворения в ответ на предшествующую стимуляцию процесса дифференцировки Т-клеток. В результате развития второго уровня иммуносупресии к 14-м суткам жизни поросят повышается концентрация вЕ-РОК-и снижаются численные значения остальных клеточных показателей.Однако в этот период повышается доля лимфоцитов и рЕ-РОК.

4.На фоне снижения количества лейкоцитов, : сЕ-РОК ,аЕ-РОК и абсолютного .числа лимфоцитов к 21-му дню жизни поросят происходит усиленное образование Ш-РОК,предшественников Т-лимфоцитов, тЕ-РОК и зрелых субпопуляций Т-лимфоцитов. Активность функционально зрелых Т-клеток остается на прежнем уровне. Рост количественных величин 6Е-Р0К продолжается до 30-го, а ЕМ-РОК, предшественников Т-лимфоцитов, тЕ-РОК,рЕ-РОК, сЕ-РОК, аЕ-РОК, вЕ-РОК, числа лейкоцитов, абсолютного числа лимфоцитов до 60-го дня жизни поросят. Процентные значения лимфоцитов, ЕМ-РОК, предшественников Т-лимфоцитов,6Е-РОК к 60-му дню эксперимента уменьшаются, а тЕ-РОК практически не изменяются.

5.Вследствие послеотъемного стресса, к 90-му дню жизни, в крови поросят снижается содержание ЕМ-РОК, предшественников Т-лимфоцитов, рЕгРОК,бЕ-РОК и сЕ-РОК. К 120-му дню жизни поросят концентрация предшественников Т-лимфоцитов, тЕ-РОК, сЕ-РОК, аЕ-РОК, вЕ-РОК и 6Е-Р0К вырастает, однако число рЕ-РОК продолжает снижаться.Соотношение между рЕ-РОК и вЕ-РОК перераспределяется в пользу вЕ-РОК.

6.В результате наступления периода полового созревания, к 150-му дню жизни поросят численные значения всех клеточных показателей, за исключением ЕМ-РОК, снижаются. Относительные величины тЕ-РОК, предшественников Т-лимфоцитов и 6Е-Р0К возрастают. Соотношение между рЕ-РОК и вЕ-РОК перераспределяется в пользу рЕ-РОК. К 180-му дню жизни концентрация лимфоцитов, предшественников Т-лимфоцитов, рЕ-РОК, вЕ-РОК, 6Е-Р0К,' сЕ-РОК

и ЕМ-РОК увеличивается, в то время как. уровень лейкоцитов, тЕ-РОК и аЕ-РОК продолжает уменьшаться.Доля лимфоцитов и тЕ-РОК в этом возрасте снижается.

7.С завершением процесса полового созревания, к 240-м суткам жизни свиней стабилизируется показатель рЕ-РОК, вЕ-РОК, аЕ-РОК, повышается количество лейкоцитов,лимфоцитов, тЕ-РОК, понижается число предшественников Т-лимфоцитов, 6Е-Р0К, сЕ-РОК и ЕМ-РОК.

8.Возрастная динамика содержания иммуноглобулинов крови имеет свои закономерности. Высокие концентрации 1еМ и в крови новорожденных поросят созданы колостральными антителами. Рост уровня 1еМ наблюдается в период с первого по 60-е сутки жизни. Концентрация снижается до 21-го дня эксперимента, после чего уровень 1бО увеличивается включительно до 180-го дня жизни поросят. К 240-м суткам наблюдения количество и

в крови поросят снижается.

9.БЛК стимулирует деятельность иммунной системы свиноматок, что способствует созданию у новорожденных высоких уровней

и аЕ-РОК. Однако,по сравнению с потомством контрольных свиноматок, поросята, матери которых получали БЛК за 7-10 дней до опороса имеют низкий уровень эритроцитов, лейкоцитов, 6Е-Р0К и сЕ-РОК.

10.По сравнению с контрольными поросятами у молодняка опытных групп к 7-му дню жизни наблюдается резкое снижение концентрации и интенсивный аутосинтез 1ёМ. Контрольные поросята отстают от животных первой и второй групп по абсолютному значению аЕ-РОК, процентному количеству лимфоцитов, а от молодняка первой группы еще и по относительному количеству вЕ-РОК. Поросятам второй группы уступают по уровню гемоглобина.

11. На фоне снижения концентрации у опытных поросят обеих групп к 14-му дню эксперимента активизируются процессы гемопозза и иммуногенеза.В результате этого в первой и второй группах уровни гемоглобина, эритроцитов, абсолютных и относительных значений палочкоядерных и сегментоядерных нейтрофилов, вЕ-РОК, 6Е-Р0К, сЕ-РОК, аЕ-РОК , относительного количества рЕ-РОК, 1ёМ выше,чем в группе контрольных животных. Первая группа уступает второй по содержанию предшественников Т-лимфо-

цитов, но превосходит по относительной величине вЕ-РОК и 1еМ.

12. В период с 21-го по 30-й дни наблюдения у опытных поросят активность гемопоэтических и иммунных процессов остается на высоком уровне.Вследствие этого молодняк первой и второй групп на 21-й день жизни сохраняет свои преимущества по количеству гемоглобина, эритроцитов,тЕ-РОК, вЕ-РОК, 6Е-Р0К, процентному содержанию лимфоцитов, 1цМ и ^.а на 30-й день жизни по содержанию сегментоядерных нейтрофилов, аЕ-РОК, 1&Л, и по количеству предшественников Т-лимфоцитов.

13.Скармливание БЛК в дозе 0,3г на 1кг живой массы свиноматкам за 7-10 дней до опороса и в течение 7-ми дней после опороса улучшает продуктивность маток, рост и развитие поросят и обеспечивает более высокую сохранность молодняка к отъему.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

Результаты исследований можно использовать в учебном процессе при рассмотрении соответствующих вопросов по физиологии, иммунологии и разведению сельскохозяйственных животных. Установленные количественные параметры субпопуляций Т-звена иммунитета, В-лимфоцитов и иммуноглобулинов классов М и б рекомендуем применять в качестве интерьерных показателей свиней сибирского типа скороспелой мясной породы , нормативных тестов при оценке иммунного статуса животных и выявления у них имму-нодефицитов.

В качестве средства профилактирующего иммунодефицит у поросят-сосунов предлагаем использовать свиноматкам ЕЛК в дозе 0,3г. на 1 кг. живой массы, как в течение 7-10 дней до опороса, так и в течение 7-10 дней после опороса.

- Список работ опубликованных по материалам диссертации.

1. Бакшеев А.Ф., Ефанова Н.В. Возрастные особенности функционального состояния Т- и В-систем иммунитета у свиней// Проблемы аграрной науки в условиях перехода производства к рынку: Тез. докл. науч.-практ. конф./ Новосибирск,1991.-С.75-77.

2.Бакшеев А.Ф., Ефанова Н.Э. Физиология иммунной системы

у свиней: Лекция. - Новосибирск,1991. - С.23.

3. Ефанова Н.В., Бакшеев А.Ф. Возрастная характеристика субпопуляций Т-лимфоцитов у свиней// Генетика устойчивости животных к заболеваниям /Сб.науч.тр. НГАУ. - Новосибирск,1992. -С.78-85.

4.Бакшеев А.Ф., Ефанова Н.В. Роль зкзоэкологических факторов в формировании Т и B-систем иммунитета у свиней в пост-натальном онтогенезе//Экологические проблемы обеспечения жизнедеятельности человека и животных: Тез. докл. Всероссийской науч. конф. - Новосибирск,1993. - С.39-41.

б.Гудилин И.И., Баяндина Г.В., Бакшеев А.Ф.,Ефанова Н.В.и др.Иммунологическая защита свиней с использованием природных препаратов // Проблемы науки и производства в условиях аграрной реформы: Тез. докл. науч.- практ. конф./ Новосибирск,1993. - С.79-81.

6.Ефанова Н.В. Особенности становления гуморального иммунитета у свиней// Анализ современных аграрных проблем: Сб. тр. молодых ученых и аспирантов. - Новосибирск, 1994. - С.1Б4-167.

7. Ефанова Н.В., Бакшеев А.Ф. Оценка гуморального иммунитета у свиней в постнатальном онтогенезе //Анализ современных аграрных проблем: Тез. докл. науч.-практ. конф./ Новосибирск, 1995. - С.82-83.

8. Jephanova N.V., K.V. Zhuchaev, Knyazev S.P., Baksheev A.F. et al. The dynamics of immunologic traits In goung pigs// Yet. Iirmunol. Symposium, Juli 15-21, 1995. University of California Davis,1995.- P.315.