Гистохимические основы нитрооксидергической регуляции пищевода и кишечника

Романова, Наталья Евгеньевна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Гистохимические основы нитрооксидергической регуляции пищевода и кишечника
ВАК РФ 03.00.25, Гистология, цитология, клеточная биология

Автореферат диссертации по теме "Гистохимические основы нитрооксидергической регуляции пищевода и кишечника"

На правах рукописи

РОМАНОВА Наталья Евгеньевна

ГИСТОХИМИЧЕСКИЕ ОСНОВЫ НИТРООКСИДЕРГИЧЕСКОЙ РЕГУЛЯЦИИ ПИЩЕВОДА И КИШЕЧНИКА

03.00.25 — гистология, цитология, клеточная биология

"тш

На правах рукописи

РОМАНОВА Наталья Евгеньевна

ГИСТОХИМИЧЕСКИЕ ОСНОВЫ НИТРООКСИДЕРГИЧЕСКОЙ РЕГУЛЯЦИИ ПИЩЕВОДА И КИШЕЧНИКА

03.00.25 - гистология, цитология, клеточная биология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Владивосток - 2004

гЩ&Ш

Работа выполнена во Владивостокском государственном медицинском

университете

Научный руководитель:

доктор медицинских наук Елисеева Екатерина Валерьевна

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор Красников Юрий Александрович кандидат медицинских наук Бородай Светлана Витальевна

Ведущая организация:

Российский государственный медицинский университет

Защита состоится «/.9» 2004 г. в/^часов на заседании

диссертационного совета Д 084.24.01 при Владивостокском государственном медицинском университете по адресу: 690600, г. Владивосток, пр. Острякова, 2.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Владивостокского государственного медицинского университета.

Автореферат разослан «ъА

г.

Ученый секретарь диссертационного совета, доктор медицинских наук, профессор

РОС. НАЦИОМчСлКН^Я

ЬИВ,"Н ( РКА С Й' ||-)м"|ург

Рева Г. В.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность работы

За последние пятнадцать лет в медицине и биологии произошло событие, позволяющее по-новому понять регуляцию внутриклеточного метаболизма. Оказалось, что практически все клетки и ткани животных и человека образуют оксид азота (N0), - который вовлекается в регуляцию множества функций: циркуляция крови и лимфы, иммунные реакции, заживление ран, передача нервных импульсов, дыхание, выделение, репродуктивные процессы [Jgnarro et al, 1987; Palmer et al, 1988; Nijkamp, Folkerts, 1994; Невзорова и др., 1997, Мотавкин и др., 1998,1999,2000, Реутов, 2000, Ashutosh, 2000, Елисеева, 2001]. Благодаря широчайшему спектру физиологических и патологических процессов, регулируемых NO, интерес исследователей к этому уникальному соединению не ослабевает. Изучение нитрооксидергической регуляции висцеральных функций является одним из самых приоритетных научных направлений. Подобные исследования были предприняты прежде всего в отношении роли оксида азота в регуляции дыхания и работы сердечнососудистой системы [Barnes, 1994, 1995, Nijkamp, Folkerts, 1994, Зуга, 1997, Невзорова, 1998, Мотавкин, Зуга, 1998, Мотавкин, Гельцер 1998].

al., 2001, Dick et al., 2002], то роль последнего в регуляции пилорического жома не доказана. Недостаточно сведений, касающихся NO-продуцирующей функции интрамуральных нейронов желудочно-кишечного тракта за пределами сфинктерных образований, а сравнительная характеристика активности фермента в данных клетках в пищеводе, тонком и толстом кишечнике отсутствует.

Jîe вызывает сомнений тот факт, что эффекты N0 тесно связаны или опосредуются другими биологически активными веществами. В числе последних холецистокини, цинк- и медьсодержащие соединения, СО [Miller et al., 2001, Colpaert et al., 2002, West et al., 2003]. В то же время не хватает данных о местной нитрооксидергической регуляции мышечных клеток, железистых образований и кровеносных сосудов микроциркуляторного русла. Сведений, касающихся особенностей синтеза NO в эпителии, гладких миоцитах различных отделов ЖКТ у человека и животных, мы не нашли.

Цель и задачи исследования.

Цель: установить локализацию и активность нитрооксидсинтазы в интрамуральных нейронах, эпителиоцитах и гладкомышечных клетках различных отделов желудочно-кишечного тракта (пищевод, кишечник) у человека и животных.

Для достижения цели в работе решались следующие задачи:

1. Изучить топографию нитрооксидергических нейронов ауэрбахова сплетения пищевода, 12-перстной и прямой кишки человека, кошки и крысы.

2. Определить активность NOS в интрамуральных нейронах, выстилающих эпителиоцитах и гладких миоцитах указанных органов.

3. Исследовать отношение нитрооксидергических аксонов к мышечным, железистым клеткам и кровеносным сосудам микроциркуляторного русла.

Научная новизна

Получены новые сравнительные данные об интрамуральных нитрооксидергических нейронах пищевода, двенадцатиперстной и прямой кишки у человека, кошки и крысы. Доказано, что оксид азота синтезируют преимущественно нейроны первого типа. Их аксоны взаимодействуют с мышечными, железистыми клетками и иннервируют микрососуды слизистой оболочки. Изучены особенности гистохимической локализации NOS в эпителиоцитах и гладких миоцитах указанных отделов ЖКТ.

Теоретическое значение работы

Установленные в работе факты расширяют представление о механизмах регуляции органов желудочно-кишечного тракта, и об участии в этих механизмах оксида азота. N0, регулируя секреторную и моторную функции оказывает на слизистую оболочку протекторное действие, поддерживает на нормальном уровне пищеварительную функцию. В условиях диспепсического синдрома оксид азота работает как цитотоксический фактор, углубляя дисфункцию перистальтики и угнетая выделение пищеварительных секретов.

Полученные в работе данные могут быть использованы в лекционном курсе и при проведении практических занятий по гистологии и цитологии у студентов медицинских вузов.

Основные положения, выносимые на защиту

Оксид азота с помощью ауто- и паракринного механизмов участвует в регуляции основных функций пищевода, 12-перстной и прямой кишки -моторике, секреции, примембранном пищеварении и всасывании.

Апробация работы

Основные положения диссертационной работы были доложены и обсуждены на 67-й Республиканской итоговой научно-практической

2 Заказ 509$ 5

конференции студентов и молодых ученых Республики Башкортостан «Вопросы теоретической и практической медицины» (Уфа, 2002); П1-Й Тихоокеанской научно-практической конференции с международным участием "Актуальные проблемы экспериментальной, профилактической и клинической медицины" (Владивосток, 2002); 67-й межвузовской научной конференции студентов и молодых ученых (Курск, 2002); Второй межвузовской конференции «Актуальные медико-биологические проблемы» (Ижевск, 2002); Медицинская конференция студентов и молодых ученых с международным участием «Научное студенческое сообщество и современность» (Анталья, 2003); (Сочи, 2003); (Хургада, 2003).

Публикации

По материалам диссертации опубликовано 11 печатных работ.

Структура и объем диссертации

Диссертация изложена на 162 страницах машинописного текста и состоит из введения, материалов и методов исследования, трех глав собственных данных, заключения и выводов. Список литературы включает 346 источников, из них 124 работы отечественных и 222 - зарубежных авторов. Работа иллюстрирована 57 рисунками (из них 50 микрофотографий) и 7 таблицами.

СОДЕРЖАНИЕ ДИССЕРТАЦИИ

Материалы и методы исследования

Для определения локализации и группировки нитрооксидергическчх нейронов, нейро-мышечных, нейро-железистых и нейро-сосудистых отношений в качестве объектов исследования нами были выбраны пищевод и прямая кишка, нейроциты которых получают центральную парасимпатическую иннервацию через преганглионарные волокна. Кроме того, проведены

наблюдения на двенадцатиперстной кишке, где нас интересовала нитрооксидсинтаза крипт и особенно ворсинок, имеющих отношение к процессам всасывания.

Исследование выполнено на белых половозрелых нелинейных крысах-самцах (массой 170-195 грамм), содержавшихся в стандартных условиях вивария. (п=9), кошках (п=12) и аутопсийном материале (п=12).

Эвтаназию крыс проводили путем декапитации; материал обрабатывали в течение 15 минут после забоя. Изымался пищевод на всем его протяжении и 12-перстная кишка для изготовления продольных и поперечных срезов.

Забор материала у кошек проводился не позднее 6 часов после смерти. Исследования проводили на животных, погибших от травм или во время операций и не имевших к моменту смерти патологии органов пищеварения. Возраст животных составлял 4-7 лет. Из 12-перстной и прямой кишки вырезали кусочки 1,0-1,2 см для изготовления продольных и поперечных срезов.

Аутопсийный материал получен при судебно-медицинской экспертизе (п=16), от умерших или погибших в возрасте 31-59 лет от случайных причин, не связанных с патологией органов пищеварения. Из пищевода (верхняя, средняя и нижняя части), 12-перстной и прямой кишки вырезали кусочки до 1,5 см для изготовления продольных срезов.

Исследования проведены с помощью комплекса методических приемов, включающих общеморфологический, гистохимический, морфометрический и статистический анализ материала.

Для светомикроскопических наблюдений исследуемый материал фиксировали 10% нейтральным формалином и обрабатывали по общепринятым методикам с последующей заливкой в парафин. Исследования проводились на серийных срезах толщиной 10-12 мкм, окрашенных гематоксилином и эозином, толуидиновым синим по Нисслю.

При исследовании нервной ткани мы использовали гистохимический метод на NADPH-диафоразу Hope, Vincent (1989), основанный на образовании нерастворимого осадка диформазана в присутствии косубстрата - NADPH и

экзогенного субстрата - нитросинего тетразолия (НСТ). Этот метод позволяет диагностировать морфологию нейронов за счет выявления их тел и отростков. В основе этой реакции лежит диафоразная активность NOS [Норе et al., 1991, Hassal et al., 1992]. В исследованиях Furukawa et al., 1995, Bassoulett et al., 1996, показано, что NADPH-диафораза солокализована со всеми тремя изоформами фермента. В связи с этим реакция на NADPH-диафоразу позволяет нам судить о гистохимической локализации NOS.

Изучение состояния фермента проводилось на серийных продольных срезах - пищевода, 12-перстной и прямой кишке человека, а так же на серийных продольных и поперечных срезах пищевода и 12-перстной кишке крысы, и 12-перстной и прямой кишке кошки. Кусочки исследуемого материала погружали в охлажденный 4% раствор параформальдегида, приготовленный на 0,1 M фосфатном буфере (рН 7,4), который из всего класса диафораз сохраняет активность только NADPH-диафоразы; два часа фиксировали при температуре 4°С, затем сутки промывали при той же температуре в 15% растворе сахарозы. Из замороженных в криостате образцов изготавливали срезы толщиной 15 мкм, которые монтировали на предметные стекла и высушивали в токе холодного воздуха, подаваемом вентилятором. Высушенные срезы помещали в инкубационную среду, состав и конечная концентрация которой составляли: 50 мМ трис-буфер (рН 8,0), 1 мМ NADPH («Sigma», США), 0,5 мМ нитросинего тетразолия («Sigma», США), и 0,2% тритон Х-100 («ISN», США). В течении 60 минут проводили инкубацию в термостате при температуре 37°С, после чего срезы 3-х-кратно промывали в дистиллированной воде, обезвоживали в спиртах и заключали в бальзам.

Морфометрическая характеристика нейронов пищевода, 12-перстной и прямой кишки проводилась с ломощью светового микроскопа «Carl Zeiss», к окуляру которого закрепляли насадку со встроенной линейкой. Для оценки результатов в каждом гистохимическом препарате выбирали срез стандартной толщины. Размеры профильного поля нейронов (площадь перикареона) определяли как произведение двух диаметров. В зависимости от величины

профильного поля нейроны дифференцировали как малые (100-300 мкм), средние (300-600 мкм) и крупные (600 и более мкм).

Визуализацию изображений всех микропрепаратов на компьютере получали с помощью видеосистемы, смонтированной на микроденситометре Vickers М-85. Цифровая обработка проводилась с помощью программы Adobe Photoshop 5.0 и Microsoft Excel 97. Активность фермента определяли по плотности гистохимического преципитата и выражали в единицах оптической плотности (ЕОП).

Математическая обработка данных проводилась на персональном компьютере IBM PC AT при использованием пакета статистических программ BIOSTAT. С помощью двухвыборочного t-теста с различными дисперсиями мы определяли: среднюю арифметическую (X), стандартную ошибку средней арифметической (х), критерии существенности различий (t). На основе доверительного коэффициента t, используя число наблюдений или число степеней свободы, по таблицам Стьюдента-Фишера определяли коэффициент вероятности ошибки (р). Разницу между средними арифметическими считали достоверной при значении р<0,05.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИСВСЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

При относительно небольшом морфологическом разнообразии, интрамуральные нейроны энтеральной нервной системы нейрохимически имеют значительные различия. Среди них установлены клетки с классическими медиаторами, такими как ацетилхолин, норадреналин, пурины, серотонин, а так же, совместно с ними и самостоятельно - нейроны, содержащие регуляторные пептиды: вазоинтестинальный пептид, соматостатин, Y-пептид, холецистокинин. К этим разнообразным по химической структуре и направленности действия веществом, присоединился оксид азота. Как показывают наши исследования, он, видимо, содержится в нейронах I типа Догеля у человека и животных во всех исследованных нами органах. Как

известно, эти нейроны являются холинергическими, иннервирующими в пищеварительной системе гладкую мышечную ткань и железистый аппарат пищевода и кишечника. Секреция NO происходит при непременном участии ацетилхолина, который рассматривается как важнейший триггер нитрооксидергической системы [Rast, 2001; Takahashi, 2003]. Подобный холинергический механизм высвобождения оксида азота имеет место в интрамуральных нейронах других внутренних органов. Например, все нейроны первого и отчасти второго типа бронхов и трахеи, являясь холинергическими, синтезируют NO [Андреева, 1999, 2000]. Следовательно, образование оксида азота интрамуральными холинергическими нейронами является присущим им свойством. Это отличает их от не синтезирующих NO адренергических нейронов. В ганглиях пограничного симпатического ствола оксид азота образуют небольшое количество холинергических нейронов, иннервирующие придатки кожи и её гладкую мышечную ткань [Мотавкин, Гельцер, 1998].

Нервный аппарат органов пищеварения, начиная с пищевода и заканчивая прямой кишкой, локализован в двух энтеральных сплетениях -межмышечном - Ауэрбаха, и, более слабо развитом подслизистом - Мейснера. Отметим, что в последнем присутствуют небольшой величины нитрооксидергические нейроны. Наше внимание было сосредоточено на количественных исследованиях межмышечного сплетения, нейроны которого реакцией на НАДРН-диафоразу выявлялись постоянно и с большой ферментативной активностью. Заметим, что приводимые в работе цифры не соответствуют абсолютному содержанию нейронов в органе, а учтены только те, что были обнаружены в наших препаратах. Прежде всего, нас интересовало соотношение нитрооксидергических нейронов к общему числу замеченных нервных клеток.

У человека в пищеводе относительное число нейронов синтезирующих NO оказалось 80±6,4 %, а у крысы немного больше - 89±7,1 % (рис. 1). Однако размеры ганглиев, величина нейронов человека превосходили соответствующие показатели для крысы.

200 150 100 50 0

Рис. 1. Содержание нитрооксидергических нейронов в межмышечном сплетении пищевода у человека и крысы.

Нейроны с максимальным профилем поля от 1066 мкм2 до 1371 мкм2 зарегистрированы только у человека. Самые крупные нейроциты крыс имели профильное поле в размере 700-900 мкм2. У человека не встречались нервные клетки размером поля меньше 250 мкм2, в то время как у крысы нейроны малой величины не редко имели профильное поле в пределах 149-166 мкм2.

В 12-перстной кишке относительное число нитрооксидергических нейронов составило: у человека - 70±4,4%, кошки - 77±5,6 %, крысы - 67±4,1% (рис. 2). Подавляющее число нейронов у всех исследованных видов имели профильное поле средней (400-600 мкм2) и малой (150-300 мкм2) величины. Однако у всех видов замечены единичные нейроны величиной 1099-1296 мкм2.

250 200 150 100 50 0

человек кошка крыса

Sобщее число нейронов ■нейроны, содержащие NO-синтазу

Рис. 2. Содержание нитрооксидергических нейронов в межмышечном сплетении 12-перстной кишки у человека, кошки и крысы.

человек крыса

И общее число нейронов ■ нейроны, содержащие ЫО-синтазу

В прямой кишке у человека найдено 74±5,3 %, а у кошки - 67+3,8 % нитрооксидергических нейронов (рис. 3). У человека размеры нейронов прямой кишки примерно соответствовали размерам их в пищеводе. У кошки нейроцитов с большим профильным полем не оказалось. Преобладали клетки средней величины.

Подавляющее большинство выявленных нитрооксидергических нейронов следует отнести к первому типу, имеющему короткие дендриты и длинный аксон, который иногда удавалось проследить до иннервируемого объекта. В меньшем числе отмечены клетки второго типа, и главным образом в 12-перстной кишке, где, согласно морфологическим исследованиям, они имеются в подавляющем количестве [Лаврентьев, 1931, 1946,1983].

человех иш

0 обеде чисто налога ■ ЫОб-тишвньЕ нзфоны

Рис. 3. Содержание нитрооксидергических нейронов в межмышечном сплетении прямой кишки у человека и кошки.

Как уже отмечено, в органах исследованных видов встречалось много мелких нейронов, которые по современной классификации относятся к VI типу [Stach, 1983], мининейронам [Brehmer et al., 1999] и нитевидным нейроцитам [Messenger et al., 1994].

В кишечнике свиней и морских свинок только клетки VI типа и мининейроны являются нитрооксидергическими и рассматриваются как моторные [Timmermans et al., 1994, Brehmer, Stach, 1997], в то время как нитевидные клетки оксид азота не синтезируют. Мы полагаем, что самые мелкие нитрооксидергические нейроны человека, кошки и крысы с

профильным полем менее 300 мкм2 так же следует отнести к VI типу и мининейронам, обеспечивающим подвижность гладких миоцитов кишечника.

Нейроны - это клетки, синтезирующие конститутивную форму нейрональной нитрооксидсинтазы. Во всех нейроцитах исследованных органов её активность достаточно высока. В пищеводе самая высокая активность фермента отмечена у человека, в 12-перстной и прямой кишке - у кошки. Однако достоверные различия в содержании фермента имеются только между человеком и крысой в пищеводе, крысой с кошкой и человеком в двенадцатиперстной кишке (рис. 4).

250 200

150 100 50 0

пищевод 12-персгная к-ка пряодя к-ка ■ кошка 0 человек □ крыса

Рис. 4. Активность NO-синтазы в нейронах пищевода, 12-перстной и прямой кишки у человека, кошки и крысы.

Аксоны нитрооксидергических нейронов из Ауэрбахова сплетения поднимаются вверх до уровня t. propria слизистой оболочки, местами достигают базальной мембраны и стелются по основанию эпителиоцитов эпителиального пласта. Роль оксида азота может быть разнообразной: от поддержания структурно-функциональной целостности эпителиоцитов до регуляции их специфических функций [Brzozowska et al„ 2002, Xu et al., 2002, Phillipson et al., 2003].

Нитрооксидергические аксоны иннервируют железистый эпителий. Они располагаются на стенках простых трубчатых желез слизистой оболочки

пищевода и Либерюоновых крипт тонкого и толстого кишечника, контактируя веретеновидными утолщениями с бокаловидными клетками, апикально-зернистыми клетками Панета и базально-зернистыми эндокриноцитами Кульчицкого. Особенно доказательна нитрооксидергическая иннервация крипт прямой кишки, стенка которых сплошь выстлана бокаловидными слизистыми клетками покрытыми веретеновидными аксонами. Мы считаем, что нитрооксидергический аксон секретирует оксид азота не только в местах веретеновидных утолщений, но и на всем своем протяжении. Подобным же образом иннервированы секреторные клетки желез подслизистой оболочки пищевода и двенадцатиперстной кишки.

Оксид азота ограничивает гиперсекрецию гидрокарбонатов [Ивашкин, Драпкина, 2001], регулирует продукцию слизи, дипептидаз кишечника, поддерживает морфологическую целостность слизистой оболочки, определяет абсолютную защиту мукозы в реакциях воспаления. Однако его протекторная роль будет зависеть от множества факторов: характера внешних воздействий, а так же от эффектов воспалительных медиаторов [СаЫауис! е1 а1., 2001, Киш, 2001].

Ворсинка - основная структурно-функциональная единица тонкой кишки, определяющая её пищеварительную и всасывательную функцию. В её составе имеется собственное микроциркуляторное русло и собственная нервная сеть. Наши исследования показывают, что нитрооксидергические аксоны проникают в ворсинку на всю глубину и стелются вдоль её микрососудов. Нитрооксидергический нервный фактор оказывает влияние на циклический процесс притока и оттока крови, а возможно, и движение лимфы, хотя прямых данных о нитрооксидергической иннервации лимфатического капилляра ворсинки у нас нет.

сосудов диагностируется с большой наглядностью. Необходимо отметить, что эндотелиоциты так же способны продуцировать оксид азота. Как известно, релаксация кровеносных сосудов и была первым, реально установленным фактором влияния N0 на функции органов [Рагзе£оЛ, , 1980]. В

желудочно-кишечном тракте оксид азота, контролируя сосуды микроциркуляторного русла, обеспечивает нормальное кровообращение особенно на высоте пищеварения, когда приток крови необходим для снабжения работающих клеток кислородом и трофическими материалами. Оптимальный приток особенно важен в период активного всасывания мономеров и как уже указывалось выше для эффективной работы ворсинок кишечника [КопШгек Б., КопШгек Р., 1995].

Таким образом, кровеносные сосуды пищевода, двенадцатиперстной и прямой кишки получают оксид азота, по меньшей мере, из двух источников. Одним из них является собственный эндотелий, другим - аксоны нитрооксидергических нейронов. Последние, как и аксоны другого функционального профиля, преформированных синапсов на гладких мышечных клетках не образуют [Мотавкин, Гельцер, 1980], и оказывают свое влияние путем диффузной или объемной нейротрансмиссии [Мотавкин, 2003].

Оксид азота способны синтезировать клетки как экто-, так и энтодермального происхождения [Елисеева, 2001]. Этим свойством обладают многослойный плоский эпителий пищевода. В последнем N0 секретирует весь эпителиальный пласт. В двенадцатиперстной кишке высокая активность диафоразы сосредоточена всецело в апикальной части столбчатых эпителиоцитов, главным образом по линии расположения щеточной каёмки. Именно в области последней совершается мембранное пищеварение. Эта же область кишки ответственна и за процессы всасывания, а так же за синтез триглицеридов.

Количественные исследования выявили некоторые различия в содержании фермента в органах у изученных видов. Например, в пищеводе активность НАДРН-диафоразы у крысы в два раза выше, чем у человека. В то

время как в двенадцатиперстной кишке наблюдаются обратные соотношения. Содержание диафоразы у крыс достоверно ниже на 15 %. У человека и кошки показатели активности фермента в эпителиоцитах ворсинки не различаются. В прямой кишке диафораза исследована нами только у кошки и человека. У последнего активность энзима достоверно выше на 27 % (рис. 5). Имеющиеся различия не следует, очевидно, считать видовыми. Скорее всего, они являются функциональными и временными, и, по всей вероятности, отражают разный уровень работы изученных отделов пищеварительного аппарата.

250 -200 150 -100 -50 -0 -

Рис. 5. Активность NO-синтазы в эпителиоцитах пищевода, 12-перстной и прямой кишки у человека, кошки и крысы.

пищевод 12-перстная к-ка прямая к-ка

■ кошка ES человек □ крыса

терминалей на гладких мышечных клетках нами не зарегистрировано. Вероятно, для всех клеток этого типа существует диффузная (объемная) нейротрансмиссия. Однако в регуляции тонуса гладких мышечных клеток принимает, кроме паракринного, и аутокринный нитрооксидергический механизм. Гладкие миоциты дают положительную реакцию на нитрооксидсинтазу. Её активность имеет видовые отличия. Наиболее высокой активностью обладают миоциты человека в двенадцатиперстной и прямой кишке. Содержание фермента в миоцитах прямой кишки кошки ниже, чем у человека, примерно на половину (рис. 6). Результаты морфометрии миоцитов крысы свидетельствуют о наименьшей NO-синтазной активности в сравнении с активностью соответствующих клеток человека и кошки. У последнего вида активность фермента в лейомиоцитах двенадцатиперстной кишки оказалась выше, чем в тех же клетках прямой.

140

120 100

80 60 40 20 0

Рис. 6. Активность NO-синтазы в гладких миоцитах пищевода, 12-перстной и прямой кишки у человека, кошки и крысы.

Наружная мышечная оболочка верхней трети пищевода образована из поперечно-полосатых волокон, часть которых присутствуют и в среднем отделе органа. Несмотря на то, что по структуре они имеют полное сходство со скелетным волокном, функционально отличаются от последнего. Это непроизвольная мышца, сокращение которой не подчинено сознанию человека, т.к. она иннервирована нейронами вегетативной нервной системы.

пищевод 12-перстная к-ка прямая к-ка

■ кошка В человек □ крыса

Нитрооксидергическую иннервацию мышечные волокна верхней трети пищевода получают от нейронов Ауэрбахова сплетения. В отличие от лейомиоцитов поперечно-полосатые волокна пищевода имеют нервные терминали имеющие сходство с двигательной бляшкой. Однако наличия в них глиальной подушки обязательной для скелетного волокна нами не установлено.

При идентификации диафоразы мышечное волокно пищевода приобретает поперечную исчерченость за счет наличия черных полос, указывающих на локализацию NO-синтазы. При этом белая негативная полоса имеет ширину около 2,5-2,7 мкм. т.е. равную величине саркомера. Из этого следует, что NO-синтаза, возможно, соответствует впячиванию сарколеммы, входящему в состав триады. Известно, что ацетилхолин из нервных терминалей поступает в этот трубчатый туннель, с чего начинается цепь реакций приводящих к сокращению волокна. В качестве промежуточного звена между ацетилхолином и выходом Ca'1"1' из цистерн L-системы может служить оксид азота. Иначе говоря, механизм возбуждения мышечного волокна в этом случае сходен с механизмом возбуждения лейомиоцита стенки кровеносного сосуда, установленного Farchgott et Zawadsky (1980). Локализация NO-синтазы в составе саркомера указывает на участие оксида азота в двигательных актах поперечно-полосатых мышечных волокон пищевода человека и исследованных нами животных.

Согласно полученным нами и литературными данным, весь мышечный аппарат пищеварительного канала (не только в изученных органах), имеет ауто- 4

и паракринный механизмы нитрооксидергической регуляции [Rast, 2001].

При изучении значения оксида азота в регуляции моторики пищевода получены данные, прямо указывающие на N0, как фактор, влияющий на состояние мышечной ткани. Внутривенное введение нитроглицерина больным с диффузным спазмом пищевода восстанавливает его нормальное перистальтическое сокращение. Спазм в нижнем пищеводном сфинктере успешно снимается внутривенным введением L-аргинина, ингибитора NOS [Reyak et al., 2000]. Сходный механизм релаксации мышц установлен и во

внутреннем анальном сфинктере [Bêlai, Burnstock, 2000]. Все это доказывает ведущую роль, которую играет оксид азота в моторике пищевода и прямой кишки.

Таким образом, проведенные нами исследования установили, что пищевод, 12-перстная и прямая кишка имеют нитрооксидергическую регуляцию, которая участвует в основных функциях этих органов - моторике, секреции и процессах примембранного пищеварения и всасывания. Эта нитрооксидергическая регуляция обеспечивается авто- и паракриновым механизмом за счет синтеза оксида азота: интрамуральными нейронами энтеральной нервной системы, эпителием, выстилающим исследованные органы, клетками мышечной ткани.

ВЫВОДЫ

1. В пищеводе, двенадцатиперстной и прямой кишке человека и исследованных животных, наличие NO-синтазы (NOS) установлено в интрамуральных нейронах энтеральной нервной системы, эпителии и клетках мышечной ткани.

2. В Ауэрбаховом сплетении пищевода и прямой кишки оксид азота (N0) образуют преимущественно нейроны I типа Догеля. Их относительное число в пищеводе человека составляет 80±6,4 %, крысы - 89±7,1 %; в прямой кишке человека - 74±5,3 %, кошки - 67±3,8 %.

3. В межмышечном сплетении 12-перстной кишки идентифицированы преимущественно нейроны II типа. У человека их относительное число составило - 70±4,4 %, у кошки - 77±5,6 %, крысы - 67±4,1 %.

4. Нитрооксидергические аксоны нейронов первого типа иннервируют железы, поперечно-полосатые мышечные волокна, кровеносные сосуды слизистой и подслизистой оболочек пищевода. В кишечнике мишенью NO-позитивных нервных волокон являются гладкие миоциты, кровеносные сосуды,

железистые клетки, ворсинки и крипты слизистой, подслизистой и мышечной оболочек.

5. Активность нитрооксидсинтазы имеет видовые и органные различия. У человека и кошки наибольшая активность NOS обладают эпителиоциты прямой кишки, у крысы - эпителиоциты пищевода. NOS-позитивные нейроны межмышечного сплетения с наивысшей активностью энзима зарегистрированы у человека и крысы в пищеводе, у кошки - в прямой кишке. Гладкие миоциты у человека и кошки имеют наибольшую активность NOS в тонком кишечнике, у крысы - в пищеводе.

6. Наличие нитрооксидсинтазы в нейронах, миоцитах и эпителиоцитах свидетельствует о том, что секретируемый ими оксид азота участвует в ауто-и паракринной регуляции основных функций пищевода, 12-перстной и прямой кишки.

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. Романова Н.Е., Вавилова И.И. Нитрооксидергические нейроны пищевода человека и крысы // Актуальн. проблемы эксперим., профилакт. и клинич. медицины: Тезисы докл. Ш-й Тихоокеанской науч.-практич. конф. -Владивосток. -2002. -С. 21.

2. Романова Н.Е., Мищенко И.В. Нитрооксидергические нейроны желудка и тонкого кишечника // Актуальн. проблемы эксперим., профилакт. и клинич. медицины: Тезисы докл. Ш-й Тихоокеанской науч.-практич. конф. -Владивосток. -2002. -С. 22.

3. Елисеева Е.В., Романова Н.Е., Баранов В.Ф., Мотавкин П.А. Нитрооксидсинтаза нейронов дорсального ядра и узловатого ганглия блуждающего нерва и ее состояние при ингаляциях ацетилхолина в норме и при экспериментальной бронхиальной астме // Морфология. -2002. -Т. 122. -№4.-С. 32-36.

4. Романова Н.Е. Нитрооксипродуцирующая функция нейронов ауэрбахова сплетения пищевода человека // Вопросы теоретич. и практич. медицины: Материалы 67-й Республ. итоговой науч.-практич. конф. -Уфа. -2002. -С.26-27.

5 Романова Н.Е. Образование оксида азота интрамуральными нейронами пищевода, желудка и кишечника крысы // Актуальные проблемы медицин, и фармацевтич. науки: Материалы 67-й межвузовской науч.-практич. конференции. -Курск. -2002. -С. 280-281.

6 Романова Н.Е. NO-синтаза нейронов пищеварительного тракта человека // Здравоохранение Башкортостана. -2002. -№ 3. -С.95-96.

7 Романова Н.Е. Интрамуральные нитрооксидергические нейроны пищеварительного тракта крысы И Актуальные медико-биологические проблемы: Материалы второй межвузовской конференции. -Ижевск. -2002. -С. 73.

8. Романова Н.Е., Воронцова Е.М. NO-ергическая иннервация пищеварительного тракта крысы // Успехи современного естествознания. -2003. -№7. -С. 119.

9. Романова Н.Е., Вавилова И.И. Особенности NO-продуцирующей функции эпителия и нервного аппарата пищевода у крысы и человека // Успехи современного естествознания. -2003. -№7. -С 120.

Ю.Романова Н.Е., Елисеева Е.В., Вавилова И.И. Морфологические основы NO-ергической регуляции органов желудочно-кишечного тракта // Успехи современного естествознания. -2003. -№10. -С. 96.

П.Андреева H.A., Романова Н.Е. NO-позитивные нейроны пищеводно-трахеального комплекса // Успехи современного естествознания. -2003. -№11. -С. 41-42.

Романова Наталья Евгеньевна

ГИСТОХИМИЧЕСКИЕ ОСНОВЫ НИТРООКСИДЕРГИЧЕСКОЙ РЕГУЛЯЦИИ ПИЩЕВОДА И КИШЕЧНИКА

Автореферат

ЛР 020277 от 18.02.1997. Подписано в печать 03.02.2004. Формат 60x84/16. Усл. печ.л. 1,28. Уч. - изд. Л. 1,0 Зак. 5095. Тираж 100 экз.

Отпечатано в ОАО «Приморский полиграфкомбинат», 690600, г. Владивосток, Океанский пр-т, 69, тел. 45-07-33

РНБ Русский фонд

2006-4 7318

V-

1 $ 7П

Содержание диссертации, кандидата медицинских наук, Романова, Наталья Евгеньевна

ВВЕДЕНИЕ.

Глава I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1. Общая характеристика вегетативной нервной системы.

1.1. Интрамуральные ганглии.

1.2. Нервные волокна и их разновидности.

1.3. Нейроны и их морфологическая классификация.

1.4. Особенности иннервации органов пищеварения.

2. Роль оксида азота в регуляции органов пищеварения.

2.1. NO-синтаза.

2.2. Свойства и функции оксида азота.

2.3. Оксид азота в пищеварительной системе.

Глава П. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

1. Общеморфологические методы исследования.

2. Гистохимический метод на NADPH-диафоразу.

3. Морфометрическая обработка данных.:.

4. Статистические методы.

Глава III. СОБСТВЕННЫЕ ДАННЫЕ

1. Нитрооксидергические структуры пищевода.

1.1. Нитрооксидергические нейроны.

1.2. NO-ергическая иннервация поперечно-полосатых мышц.

1.3. Нитрооксидергическая иннервация микроциркуляторного русла.

1.4. Нитрооксидсинтаза эпителиоцитов.

2. Нитрооксидергические структуры двенадцатиперстной кишки.

2.1. Нитрооксидсинтаза нейронов.

2.2. NO-синтаза подслизистого нервного сплетения.

2.3. Нитрооксидергическая иннервация эпителия.

2.4. Иннервация гладких миоцитов.

3. Нитрооксидергические структуры прямой кишки.

3.1. NO-синтаза нейронов.

3.2. Нитрооксидсинтаза эпителиоцитов.

3.3. Особенности нитрооксидергической иннервации гладких миоцитов.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Гистохимические основы нитрооксидергической регуляции пищевода и кишечника"

Актуальность работы. За последние пятнадцать лет в медицине и биологии произошло событие, позволяющее по-новому понять регуляцию внутриклеточного метаболизма. Оказалось, что практически все клетки и ткани животных и человека образуют оксид азота (N0), - который вовлекается в регуляцию множества функций: циркуляция крови и лимфы, иммунные реакции, заживление ран, передача нервных импульсов, дыхание, выделение, репродуктивные процессы [Jgnarro et al, 1987; Palmer et al, 1988; Nijkamp, Folkerts, 1994; Невзорова и др., 1997; Мотавкин и др., 1998, 1999, 2000; Реутов, 2000; Ashutosh, 2000; Елисеева, 2001]. Благодаря широчайшему спектру физиологических и патологических процессов, регулируемых NO, интерес исследователей к этому уникальному соединению не ослабевает. Изучение нитрооксидергической регуляции висцеральных функций является одним из самых приоритетных научных направлений. Подобные исследования были предприняты прежде всего в отношении роли оксида азота в регуляции дыхания и работы сердечно-сосудистой системы [Barnes, 1994, 1995; Nijkamp, Folkerts, 1994; Зуга, 1996; Зуга, Мотавкин, 1997, 1998; Мотавкин, Гельцер 1998; Невзорова и др., 1998].

Исследуется биологическая роль оксида азота в органах пищеварения. Доказана локализация нитрооксидсинтазы (NOS) и значение NO в работе желез и возможном повреждении слизистой желудка, взаимодействие NO и VIP при регуляции тонуса гладких миоцитов и нарушениях моторики данного органа [Mashimo et al., 2000; Calatayud et al., 2001; Ergun, Ogulener, 2001; Fan et al., 2001; Premaratne et al., 2001]. Особый интерес исследователей привлекает участие NO в работе сфинктеров, активно обсуждается роль NO в патогенезе пищеводной ахалазии [Watanade et al., 2002]. Следует отметить, однако, что полученные данные носят весьма противоречивый характер. Так, если нижний сфинктер пищевода и прямой кишки работают при прямом участии NO [Storr et al., 2001; Dick el al., 2002], то роль последнего в регуляции пилорического жома не доказана. Недостаточно сведений, касающихся NO-продуцирующей функции интрамуральных нейронов желудочно-кишечного тракта за пределами сфинктерных образований, а сравнительная характеристика активности фермента в данных клетках в пищеводе, тонком и толстом кишечнике отсутствует.

Не вызывает сомнений тот факт, что эффекты N0 тесно связаны или опосредуются другими биологически активными веществами. В числе последних холецистокинин, цинк- и медьсодержащие соединения, СО [Miller et al., 2001; Colpaert et al., 2002; West et al., 2003]. В то же время не хватает данных о местной нитрооксидергической регуляции мышечных клеток, железистых образований и кровеносных сосудов микроциркуляторного русла. Сведений, касающихся особенностей синтеза NO в эпителии, гладких миоцитах различных отделов ЖКТ у человека и животных, мы не нашли.

Цель исследования заключалась в том, чтобы установить локализацию и активность нитрооксидсинтазы в интрамуральных нейронах, эпителиоцитах и гладкомышечных клетках различных отделов желудочно-кишечного тракта (пищевод, кишечник) у человека и животных.

Для достижения цели в работе решались следующие задачи:

Научная новизна. Получены новые сравнительные данные об интрамуральных нитрооксидергических нейронах пищевода, двенадцатиперстной и прямой кишки у человека, кошки и крысы. Доказано, что это нейроны первого типа Догеля. Их аксоны взаимодействуют с мышечными, железистыми клетками и иннервируют микрососуды слизистой оболочки. Изучены особенности гистохимической локализации NOS в эпителиоцитах указанных отделов ЖКТ.

Теоретическое и практическое значение. Установленные в работе факты расширяют представление о механизмах регуляции органов желудочно-кишечного тракта, и об участии в этих механизмах оксида азота. NO, регулируя секреторную и моторную функции, оказывает на слизистую оболочку протекторное действие, поддерживает на нормальном уровне пищеварительную функцию. В условиях диспепсического синдрома оксид азота работает как цитотоксический фактор, углубляя дисфункцию перистальтики и угнетая выделение пищеварительных секретов.

Апробация работы. Основные положения диссертационной работы были доложены и обсуждены на 67-й Республиканской итоговой научно-практической конференции студентов и молодых ученых Республики Башкортостан «Вопросы теоретической и практической медицины» (Уфа, 2002); Ш-й Тихоокеанской научно-практической конференции с международным участием "Актуальные проблемы экспериментальной, профилактической и клинической медицины" (Владивосток, 2002); 67-й межвузовской научной конференции студентов и молодых ученых (Курск, 2002); Второй межвузовской конференции «Актуальные медико-биологические проблемы» (Ижевск, 2002); Медицинская конференция студентов и молодых ученых с международным участием «Научное студенческое сообщество и современность» (Анталья, 2003); (Сочи, 2003); (Хургада, 2003).

Заключение Диссертация по теме "Гистология, цитология, клеточная биология", Романова, Наталья Евгеньевна

ВЫВОДЫ

5. Активность нитрооксидсинтазы имеет видовые и органные различия. У человека и кошки наибольшей активностью NOS обладают эпителиоциты прямой кишки, у крысы - эпителиоциты пищевода. NOS-позитивные нейроны межмышечного сплетения с наивысшей активностью энзима зарегистрированы у человека и крысы в пищеводе, у кошки - в прямой кишке. Гладкие миоциты у человека и кошки имеют наибольшую активность NOS в тонком кишечнике, у крысы - в пищеводе.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Энтеральная нервная система человека содержат около ста миллионов нейронов. При относительно небольшом морфологическом разнообразии, интрамуральные нейроны, нейрохимически имеют значительные различия. Среди них установлены клетки с классическими медиаторами, такими как ацетилхолин, норадреналин, пурины, серотонин, а так же совместно с ними и самостоятельно, нейроны содержащие регуляторные пептиды: вазо-интестинальный пептид, соматостатин, у-пептид, холецистокинин. К этим разнообразным по химической структуре и направленности действия веществ, присоединился оксид азота. Как показывают наши исследования, он, видимо, содержится в нейронах I типа Догеля у человека и животных во всех исследованных нами органах. Как известно, эти нейроны являются холинергическими, иннервирующими в пищеварительной системе гладкую мышечную ткань и железистый аппарат пищевода и кишечника. Секреция N0 -происходит при непременном участии ацетилхолина, который рассматривается как важнейший триггер шггрооксидергической системы [Rast, 2001; Takahashi, 2003]. Подобный холинергический механизм высвобождения оксида азота имеет место в интрамуральных нейронах других внутренних органов. Например, все нейроны первого и отчасти второго типа, бронхов и трахеи, являясь холинергическими, синтезируют NO [Андреева, 2000]. Следовательно, образование оксида азота интрамуральными холинергическими нейронами является присущим им свойством. В ганглиях пограничного симпатического ствола оксид азота образуют небольшое количество холинергических нейронов, иннервирующих придатки кожи и её гладкую мышечную ткань [Мотавкин, Гельцер, 1998].

Нервный аппарат органов пищеварения, начиная с пищевода и заканчивая прямой кишкой, локализован в двух энтеральных сплетениях -межмышечном - Ауэрбаха, и, более слабо развитом подслизистом - Мейснера. Отметим, что в последнем присутствуют небольшой величины нитрооксидергические нейроны. Наше внимание было сосредоточено на количественных исследованиях межмышечного сплетения, нейроны которого реакцией на NADPH-диафоразу выявлялись постоянно и с большой ферментативной активностью. Заметим, что приводимые в работе цифры не соответствуют абсолютному содержанию нейронов в органе, а учтены только те, что были обнаружены в наших препаратах. Прежде всего, нас интересовало соотношение нитрооксидергических нейронов к общему числу замеченных нервных клеток.

У человека в пищеводе относительное число нейронов синтезирующих N0 оказалось 80%, а у крысы немного больше - 89%. Однако размеры ганглиев, величина нейронов человека превосходили соответствующие показатели для крысы.

2 2

Нейроны с максимальным профилем поля от 1066 мкм до 1371 мкм зарегистрированы только у человека. Самые крупные нейроциты крыс имели профильное поле в размере 700-900 мкм2. У человека не встречались нервные клетки размером поля меньше 250 мкм , в то время как у крысы нейроны малой величины нередко имели профильное поле в пределах 149-166 мкм2.

В 12-перстной кишке относительное число нитрооксидергических нейронов составило: у человека - 70%, кошки - 77%, крысы - 67%. Подавляющее число нейронов у всех исследованных видов имели профильное поле средней (400-600 мкм2) и малой (150-300 мкм2) величины. Однако у всех видов замечены единичные нейроны величиной 1099-1296 мкм2.

В прямой кишке у человека найдено 74%, а у кошки 67% нитрооксидергических нейронов. У человека размеры нейронов прямой кишки примерно соответствовали размерам их в пищеводе. У кошки нейроцитов с большим профильным полем не оказалось. Преобладали клетки средней величины.

Подавляющее большинство выявленных нитрооксидергических нейронов следует отнести к первому типу, имеющему короткие дендриты и длинный аксон, который иногда удавалось проследить до иннервируемого объекта. В меньшем числе отмечены клетки второго типа, и главным образом в 12перстной кишке, где, согласно морфологическим исследованиям, они имеются в подавляющем количестве [Лаврентьев, 1931, 1946, 1983].

В кишечнике свиней и морских свинок только клетки VI типа и мининейроны являются нитрооксидергическими и рассматриваются как моторные [Timmermans et al., 1994; Brehmer, Stach, 1997], в то время как нитевидные клетки оксид азота не синтезируют. Мы полагаем, что самые мелкие нитрооксидергические нейроны человека, кошки и крысы с профильным полем менее 300 мкм2 так же следует отнести к VI типу и мининейронам, обеспечивающим подвижность гладких миоцитов кишечника.

Нейроны - это клетки, синтезирующие конститутивную форму нейрональной нитрооксидсинтазы. Во всех нейроцитах исследованных органов её активность достаточно высока. В пищеводе самая высокая активность фермента отмечена у человека. В 12-перстной и прямой кишке у кошки. Однако достоверные различия в содержании фермента имеются только между человеком и крысой в пищеводе, человеком, кошкой и крысой в двенадцатиперстной кишке.

Аксоны нитрооксидергических нейронов из Ауэрбахова сплетения поднимаются вверх до уровня tunica propria слизистой оболочки, местами достигают базальной мембраны и стелются по основанию эпителиоцитов эпителиального пласта. Роль оксида азота может быть разнообразной: от поддержания структурно-функциональной целостности эпителиоцитов, до регуляции их специфических функций.

Нитрооксидергические аксоны иннервируют железистый эпителий. Они располагаются на стенках простых трубчатых желез слизистой оболочки пищевода и Либеркюновых крипт тонкого и толстого кишечника, контактируя веретеновидными утолщениями с бокаловидными клетками, апикальнозернистыми клетками Панета и базально-зернистыми эндокриноцитами Кульчицкого. Особенно доказательна нитрооксидергическая иннервация крипт прямой кишки, стенка которых сплошь выстлана бокаловидными слизистыми клетками покрытыми веретеновидными аксонами. Следует считать, что нитрооксидергический аксон секретирует оксид азота не только в местах веретеновидных утолщений, но и на всем своем протяжении. Подобным же образом иннервированы секреторные клетки желез подслизистой оболочки пищевода и двенадцатиперстной кишки.

Ворсинка - это основная структурно-функциональная единица тонкой кишки, определяющая её пищеварительную и всасывательную функцию. В её составе имеется собственное микроциркуляторное русло и собственная нервная сеть. Наши исследования показывают, что нитрооксидергические аксоны проникают в ворсинку на всю глубину и стелются вдоль её микрососудов. Нитрооксидергический нервный фактор оказывает влияние на циклический процесс притока и оттока крови, а возможно, и движение лимфы, хотя прямых данных о нитрооксидергической иннервации лимфатического капилляра ворсинки у нас нет.

Нитрооксидергические волокна иннервируют микроциркуляторное русло всех исследованных органов, что установлено на основе прямых связей аксона, берущего начало от нейрона и оканчивающегося на артериоле. Подобные связи имеют место в слизистой и подслизистой оболочках, где сеть кровеносных сосудов диагностируется с большой наглядностью. Необходимо отметить, что эндотелиоциты так же способны продуцировать оксид азота. Как известно, релаксация кровеносных сосудов и была первым, реально установленным фактором влияния N0 на функции органов [Furchgott, Zawadsky, 1980]. В желудочно-кишечном тракте оксид азота, контролируя сосуды микроциркуляторного русла, обеспечивает нормальное кровообращение особенно на высоте пищеварения, когда приток крови необходим для снабжения работающих клеток кислородом и трофическими материалами. Оптимальный приток наиболее важен в период активного всасывания мономеров и, как уже указывалось выше, для эффективной работы ворсинок кишечника [Konturek S., Konturek P., 1995].

Таким образом, кровеносные сосуды пищевода, двенадцатиперстной и прямой кишки получают оксид азота, по меньшей мере, из двух источников. Одним га них является собственный эндотелий, другим — аксоны нитрооксидергических нейронов. Последние, как и аксоны другого функционального профиля, преформированных синапсов на гладких мышечных клетках не образуют [Мотавкин, Гельцер, 1980], и оказывают свое влияние путем диффузной или объемной нейротрансмиссии [Мотавкин, 2003].

Все клетки экто- и энтодермального происхождения способны синтезировать оксид азота [Елисеева, 2001]. Этим свойством обладают многослойный плоский эпителий пищевода, в котором NO секретирует весь эпителиальный пласт. В двенадцатиперстной кишке высокая активность диафоразы сосредоточена всецело в апикальной части столбчатых эпитслиоцитов, главным образом по линии расположения щеточной каемки. Именно в области последней совершается мембранное пищеварение. Эта же область кишки ответственна и за процессы всасывания, а так же за синтез триглицеридов. В прямой кишке, наоборот, NO-синтаза сосредоточена в базальной части бокаловидных клеток крипт, т.е. там, где располагается аппарат, обеспечивающий образование мукоидного секрета.

Количественные исследования, выявили у изученных видов в содержании фермента, в органах, некоторые различия. Например, в пищеводе активность NADPH-диафоразы у крысы в два раза выше, чем у человека. В то время как в двенадцатиперстной кишке наблюдаются обратные соотношения. Содержание диафоразы у крыс достоверно ниже на 15%. У человека и кошки показатели активности фермента в эпителиоцитах ворсинки не различаются. В прямой кишке диафораза исследована нами только у кошки и человека. У последнего его активность достоверно выше на 27%. Имеющиеся различия не следует, очевидно, считать видовыми. Скорее всего, они являются функциональными и временными и, по всей вероятности, отражают разный уровень работы изученных отделов пищеварительного аппарата.

Органы пищеварительной системы, в том числе и те, что изучены нами, обладают высокой подвижностью, для чего имеют по всей длине пищеварительного канала наружную мышечную оболочку и мышечную пластинку в слизистой. Последняя, как tunica muscularis externa нижней трети пищевода, двенадцатиперстной и прямой кишки, образована из гладких миоцитов. Все эти клетки получают обильную нитрооксидергическую иннервацию, главным образом за счет аксонов нейронов I типа Ауэрбахова сплетения. Терминальные отделы аксонов усеяны мелкими, интенсивно окрашенными на диафоразу веретеновидными утолщениями, заключающими миоциты в широко петлистую сеточку. Преформированных эффекторных терминалей на гладких мышечных клетках нами не зарегистрировано. Вероятно, для всех клеток этого типа существует диффузная (объемная) нейротрансмиссия. Однако в регуляции тонуса гладких мышечных клеток принимает, кроме паракринного, и аутокринный нитрооксидергический механизм. Гладкие миоциты дают положительную реакцию на нитрооксидсинтазу. Её активность имеет видовые отличия. Наиболее высокой активностью обладают миоциты человека в двенадцатиперсгной и прямой кишке. Содержание фермента в миоцитах кошки ниже, чем у человека в прямой кишке, примерно наполовину. Результаты морфометрии миоцитов крысы свидетельствуют о наименьшей NO-синтазной активности в сравнении с активностью соответствующих клеток человека и кошки. У последнего вида активность фермента в лейомиоцитах двенадцатиперстной кишки оказалась выше, чем в тех же клетках прямой.

Наружная мышечная оболочка верхней трети пищевода образована из поперечно-полосатых волокон, часть которых присутствует и в среднем отделе органа. Несмотря на то, что по структуре они имеют полное сходство со скелетным волокном, функционально отличаются от последнего. Это непроизвольная мышца, сокращение которой не подчинено сознанию человека, т.к. она иннервирована нейронами вегетативной нервной системы. Нитрооксидергическую иннервацию мышечные волокна верхней трети пищевода получают от нейронов Ауэрбахова сплетения. В отличие от лейомиоцитов поперечно-полосатые волокна пищевода имеют нервные терминали, имеющие сходство с двигательной бляшкой. Однако наличия в них глиальной подушки, обязательной для скелетного волокна, нами не установлено.

При идентификации диафоразы мышечное волокно пищевода приобретает поперечную исчерченость за счет наличия черных полос указывающих на локализацию NO-синтазы. При этом белая негативная полоса имеет ширину около 2,5-2,7 мкм. т.е. равную величине саркомера. Из этого следует, что NO-синтаза заключена в Z-полоске и, возможно, соответствует впячиванию сарколеммы, входящему в состав триады. Известно, что ацетилхолин из нервных терминалей поступает в этот трубчатый туннель, с чего начинается цепь реакций, приводящих к сокращению волокна. В качестве промежуточного звена между ацетилхолином и выходом Са** из цистерн L-системы может служить оксид азота. Иначе говоря, механизм возбуждения мышечного волокна в этом случае сходен с механизмом возбуждения лейомиоцита стенки кровеносного сосуда, установленного Furchgott et Zawadsky (1980).

Однако полной уверенности, что NO-синтаза локализована именно в Z-полоске у нас нет. Возможно, фермент находится в связи с миозином толстых миофиламентов и участвует в акте сокращения другим способом. Тем не менее, локализация NO-синтазы в составе саркомера указывает на участие оксида азота в двигательных актах поперечно-полосатых мышечных волокон пищевода человека и исследованных нами животных.

Согласно полученным нами и литературными данным, весь мышечный аппарат пищеварительного канала (не только в изученных органах), имеет ауто-и паракринный механизмы нитрооксидергической регуляции [Rast, 2001].

При изучении значения N0 в регуляции моторики пищевода получены данные прямо указывающие на газ как фактор, влияющий на состояние мышечной ткани. Внутривенное введение нитроглицерина больным с диффузным спазмом пищевода восстанавливает его нормальное перистальтическое сокращение. Спазм в нижнем пищеводном сфинктере успешно снимается внутривенным введением L-аргинина, ингибитора NOS [Reyak et al., 2000]. Сходный механизм релаксации мышц установлен и во внутреннем анальном сфинктере [Belai, Burnstock, 2000]. Все это доказывает ведущую роль, которую играет оксид азота в моторике пищевода и прямой кишки.

Таким образом, проведенные нами исследования установили, что пищевод, 12-перстная и прямая кишка имеют нитрооксидергическую регуляцию, которая участвует в основных функциях этих органов - моторике, секреции и процессах примембранного пищеварения и всасывания. Эта нитрооксидсргичсская регуляция обеспечивается ауто- и паракриновым механизмом за счет синтеза оксида азота: интрамуральными нейронами энтеральной нервной системы; эпителием, выстилающим исследованные органы; клетками мышечной ткани.

130

Библиография Диссертация по биологии, кандидата медицинских наук, Романова, Наталья Евгеньевна, Владивосток

1. Амвросьев А.П. Анатомия афферентных систем пищеварительного тракта // Минск: Наука и техника. 1972. - 233с.

2. Андреева Н.А. Нитрооксидергическая иннервация пищевода животных и человека // Морфология. 1998. - Т. 113. - С. 16.

3. Андреева Н.А., Дюйзсн И.В. NO-сргичсская иннервация кровеносных сосудов пищевода крыс // Владивосток. — 1998. — С. 48.

4. Андреева Н.А., Щава С.П. Гатаротопические нитрооксидергические нейроны трахеи // Владивосток. 1999. - С. 73.

5. Андреева Н.А. Интрамуральные нитрооксидергические нейроны органов дыхания // Автореф. дис. канд. мед. наук. Владивосток. — 2ООО.

6. Бабминдра В.П. Афферентная иннервация верхнего шейного ганглия человека //ДАН СССР. 1957 -Т. 113,№1.-С. 187-190.

7. Бабминдра В.П. Структурная пластинчатость межнейронных синапсов // Л.: Изд-во ЛГУ. 1972. - 176с.

8. Бабминдра В.П. Нейронная организация вегетативных ганглиев // Физиология вегетативной нервной системы. Л.: Наука. 1981. - С. 22-30.

9. Бабский Е.Б. Вегетативная нервная система // Большая Медицинская энциклопедия. 2001.

10. Баженов Д.В. Морфологические особенности строения поперечнополосатой мышечной ткани пищевода // Арх. анат. 1979. - №1. - С. 26-29.

11. Баженов Д.В. Особенности двигательной иннервации исчерченной мышечной ткани пищевода // Арх. анат. 1986. - №11. - С. 18-22.

12. Баженов Д.В. Гистогенез поперечнополосатой мышечной ткани пищевода человека // Арх. анат. 1989. - №6. - С. 87-91.

13. Баженов Д.В., Блинова Н.В. Двигательная иннервация поперечнополосатых мышц внутренних органов человека // Актуаль. вопр. экспер. и клинич. морфологии. Выпуск 2. Томск. 2002. - С. 26-27.

14. Бондарчук А.Н. Регуляция вегетативных функций у человека // М.: Медицина. 1977. - 208с.

15. Булыгин И.А. Замыкательная и рецепторная функция вегетативных ганглиев // Минск: Наука и техника. 1964. — 164с.

16. Булыгин И.А. Рефлекторная функция вегетативных ганглиев // Минск: Наука и техника. 1976. — 140с.

17. Быков К.М., Шевелева B.C. О неоднократности перерыва невронов в симпатической нервной системе // ДАН ССР. 1955. - Т. 102. - С. 1122-1125.

18. Ванин А.Ф. Оксид азота в биомедицинских исследованиях // Вестник РМАН. 2000. - №4. - С. 3-5.

19. Виноградов Н.А. Многоликая окись азота // Российский журнал гастроэнтерологии, гспатологии, колопроктологии. 1997. - №2. - С. 6-11.

20. Воробьев B.C. Межнейрональные связи интрамурального ганглия амфибий // В кн.: Внутриузловые межнейрональные связи и нейротканевые взаимоотношения. JI.: Наука. 1975. - С. 43 - 47.

21. Вшивцева В.В. Афферентная иннервация вегетативных ганглиев взрослой овцы //Ленинград. 1969. - С. 144-146.

22. Гельгорн Э. Регуляторные функции автономной нервной системы // Пер. с анг. М.- 1948.-214с.

23. Голуб Д. М. Некоторые вопросы развития и строения вегетативной нервной системы // Труды VI Всесоюз. съезда анат., гистол. и эмбриологов. Киев. -1958. Т.1. - С. 209-212.

24. Горрен А.К.Ф., Майер Б. Комплексная энзимология синтазы оксида азота // Биохимия. 1998. - №7. - С. 870-880.

25. Гуревич К.Г., Шимановский Н.Л. Оксид азота: биосинтез, механизм действия, функции // Вопросы биологич. медиц. и фарм. химии. 2000. - №4. -С. 16-22.

26. Турин А.В. Функциональная роль оксида азота в центральной нервной системе // Успехи физиологических наук. 1997. - Т. 28. - С. 53-60.

27. Турин А.В., Кульчицкий С.В., Чумак А.Г. Роль монооксида азота в процессах жизнедеятельности // Мн.: Полибиг. — 1998. 245с.

28. Дельцов А.Д. К вопросу об адренергической иннервации кровеносных сосудов пищевода кошки // Морфогенез и регенерация. Труды Крымского мед. инст. 1975. - Т. 60. - С. 41-42.

29. Елисеева Е.В. Нитрооксидсинтаза эпителия бронхов при введении адреноагонистов и гуанинтрифосфата // Морфология. 2000. - №3. - С. 44.

30. Елисеева Е.В. Нитрооксидергическая регуляция легких // Влад.: Примор. полиграф, комбинат. 2001. - 178с.

31. Жаботинский Ю.М. Нормальная и патологическая морфология вегетативных ганглиев // М. Изд-во АМН СССР. 1953. - 244с.

32. Журавлева И.А., Мслснтьсв И.А., Виноградов Н.А. Роль оксида азота в кардиологии и гастроэнтерологии // Клин. Мед. 1997. - Т. 75, № 4. - С. 1821.

33. Зеленин К.Н. Оксид азота (II): Новые возможности давно известной молекулы // Соровский Образовательный Журнал. 1997. - № 10. - С. 105110.

34. Зенков Н.К., Меныцикова Е.Б., Реутов В.П. NO-синтазы в норме и при патологии различного генеза // Вестник РАМН. 2000. - №4. - С. 30-34.

35. Зефиров A.JL, Халиуллина P.P., Анучин А.А., Яковлев А.В. Влияние эндогенного оксида азота на функцию нервно-мышечного синапса // Российский физиологич. журнал им. И.М. Сеченова. 2001. - Т. 87, № 4. - С. 499-506.

36. Зуга М.В. Нитрооксидсинтаза легких и значение NO-ергического механизма в регуляции проходимости бронхов // Автореф. дис. кан. мед. наук. -Владивосток. -1996.

37. Зуга М.В., Мотавкин П.А. Морфологические основы холинореактивности тучных клеток органов дыхания // Морфология. 1997. - № 6. - С. 46-52.

38. Зуга М.В., Мотавкин П.А. NO-синтаза нейронов блуждающего нерва животных и человека // Тез. докл. IV конгр. междунар. ассоц. морфолог. // Морфология. 1998. - Т. 113, № 3. - С. 51.

39. Ивашкин В.Т., Дралкин О.М. Оксид азота в регуляции функциональной активности физиологических систем // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. 2000. - № 4. - С. 16-21.

40. Ивашкин В.Т., Дралкин О.М. Клиническое значение оксида азота и белков теплового шока // М.: ГЭОТАР-МЕД. 2001. - 88с.

41. Кнорре А.Г., Лев И.Д. Вегетативная нервная система // JL: Медицина. -1977. 120с.

42. Кнорре А.Г., Суворов JI.B. Основные этапы дифференцировки нейронов // Арх. анат. 1959. -№ 7. - С. 3-18.

43. Кнорре А.Г., Суворов Л.В. Развитие вегетативной нервной системы в эмбриогенезе позвоночных и человека // М.: Медицина. 1984. - 272с.

44. Колосов Н.Г. Материалы по автономной иннервации пищеварительного тракта у некоторых позвоночных // Труды Татарск. инст. теорет. и клинич. мед. Казань. 1935. - вып. 2. - С. 18-71.

45. Колосов Н.Г. Некоторые вопросы морфологии автономной нервной системы позвоночных // Тез. докл. V Всесоюз. съезда анатомов, гистологов и эмбриологов. Л. 1949. - С. 133-135.

46. Колосов Н.Г. Иннервация внутренних органов и сердечно-сосудистой системы // М.: Изд-во АН СССР. 1954. - 240с.

47. Колосов Н.Г. Нервный аппарат пищевода человека // Вестн. ЛГУ. 1956. -Т. 15.-С. 73-90.

48. Колосов Н.Г. Развитие нервного аппарата пищеварительного тракта человека в эмбриональном периоде // Вестн. ЛГУ. 1958. - Т. 21. - С. 43-56.

49. Колосов Н.Г. Афферентные приборы в ганглиях вегетативной нервной системы // ДАН СССР. 1960. - Т. 133, № 3. - С. 177-179.

50. Колосов Н.Г. Нервная система пищеварительного тракта позвоночных и человека // Л.: Наука. 1968. - 198с.

51. Колосов Н.Г. Вегетативный узел // JL: Наука. 1972. - 52с.

52. Колосов Н.Г., Хабарова А.Я. Структурная организация вегетативных ганглиев // Л.: Наука. 1978. - 72с.

53. Колосова С.И. Возрастная морфология нервного аппарата пищеварительного тракта человека // Вопросы морфологии. М. — 1953. — с. 54-58.

54. Колосова С.И. Развитие афферентной иннервации пищевода человека // Арх. анат. 1954. - Т. 31. - С. 44-49.

55. Коновко О.О. NO-ергические механизмы алкогольной зависимости И Владивосток. 2003. - 150с.

56. Косырь А.Г., Лев И.Д. Вегетативная нервная система // М.: Медицина. -1977.-119с.

57. Корнев М.А., Моисеева М.Л., Щелкунов Н.В. Вегетативная нервная система //Периферическая нервная система. Ч.З. СПб.: Изд-во СПбГПМА. 1999. с.45.

58. Корочкин Л.И. Дифференцировка и старение вегетативного нейрона // М,-Л: Изд-во АН СССР. 1965. - 178с.

59. Кошев В.И. Полиморфизм интрамуральных афферентных нейронов и особенности их распределения по длине пищеварительного тракта млекопитающих//Автореф. дис. канд. мед. наук. Куйбышев. 1970.

60. Кошев В. И. Полиморфизм клеток II типа Догеля и особенности распределения их по длине пищеварительного тракта кошки // В кн.: Внутриузловые межнейрональные связи и нейротканевые взаимоотношения. Л.: Наука.- 1975.-С. 83-90.

61. Кулешова Т.Ф. Об афферентных и эфферентных окончаниях в вегетативных ганглиях // ДАН СССР. 1965. - Т. 160, № 2. - С. 140-144.

62. Куприянов В.В. Морфология автономной нервной системы // М.: Наука. -1981.-246с.

63. Лаврентьев Б.И. Морфология антагонистической иннервации в автономной нервной системе и методы её исследования // В кн.: Морфология автономной нервной системы. М.: Медгиз. 1946. - С. 13-83.

64. Лаврентьев Б.И. Морфология чувствительной и эфферентной иннервации интрамуральных ганглиев пищевода млекопитающих животных // Арх. анат. 1963.-№9.-С. 44-50.

65. Лаврентьев Б.И. Теория строения вегетативной нервной системы // М.: Медицина. 1983. - 256с.

66. Лев И.Д. О межнейронных связях в вегетативных ганглиях // Арх. анат. -1956.2.-С. 73-78.

67. Ливен А.Н. К сравнительной и возрастной морфологии чувствительной иннервации пищевода // Труды VI всес. съезда анат. 1958а. - Т. I. - С. 829830.

68. Ливен А.Н. Материалы к вопросу об иннервации пищевода позвоночных животных и человека // Авторсф. дис. док. мед. наук. Ленинград. 19586.

69. Лобко П.И., Мельман Е.П., Денисов С.Д., Пивченко П.Г. Вегетативная нервная система // Мн.: Выс. шк. 1988. - 271с.

70. Лукашин В.Г. Межнейрональные взаимоотношения в интрамуральных ганглиях //В кн.: Внутриузловые межнейрональные связи и нейротканевые взаимоотношения. Л.: Наука. 1975. - С. 47-52.

71. Макаров А.К., Брук Г.Д. Вегетативная нервная система человека // Иркутск: Изд. Иркутский госмединститут. 1989. - 52с.

72. Малкоч А.В., Майданник В.Г., Курбанова Э.Г. Физиологическая роль оксида азота // М.: НИИ ПХД МЗ РФ. 2001.

73. Малышев И. Ю. Введение в биохимию оксида азота: роль оксида азота в регуляции основных систем организма // Рос. журн. гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. 1997. -№ 1. - С. 49-55.

74. Маслюков П.М., Маслюкова Е.А., Стрелков А.А. и др., Эфферентная иннервация пищевода у кошек в постнатальном онтогенезе // Морфология. -2000. № 3. - С. 77-78.

75. Мельман Е.П. Функциональная морфология иннервации органов пищеварения // М.: Медицина. 1970. - 328с.

76. Милохин А.А. Чувствительная иннервация вегетативных нейронов // JI.: Наука.-1967.-146с.

77. Михайлов С.Е. Микроскопическое строение ганглиев солнечного сплетения и других ганглиев пограничного ствола симпатического нерва // Невролог, вестник. 1909. - Т. 16. - С. 320-335.

78. Мотавкин П.А., Гельцер Б.И. Клиническая и экспериментальная патофизиология легких // М.: Наука. 1998. - 366с.

79. Мотавкин П.А., Андреева Н.А., Шуматова Т.А., Баранов В.Ф. Нитрооксидсинтаза поврежденного чувствительного нейрона // Бюлл. эксперим. биолог, и мед. 1999. - Т.28, № 10. - С. 463-465.

80. Мотавкин П.А., Андреева Н.А., Шуматова Т.А., Тиханский С.Н. Образование оксида азота нормальными и поврежденными нейронами узловатого ганглия и дорсального ядра блуждающего нерва // Цитология. -2000. Т. 42, № 2. - С. 170-175.

81. Невзорова В.А., Гельцер Б.И., Елисеева Е.В. Нитрооксидергические механизмы регуляции брохов при бронхиальной астме и хроническом бронхите // VIII Национальный Конгресс по болезням органов дыхания. Москва. 1998.-С. 38.

82. Невзорова В.А., Зуга М.В., Гельцер Б.И. Роль оксида азота в регуляции легочных функций // Тер. архив. 1997. - Т. 64, № 3. - С. 68-73.

83. Недоспасов А.А. Биогенный NO в конкурентных отношениях // Биохимия. -1998.-Т. 63,№7.-С. 881-904.

84. Недоспасов А.А. Биогенный оксид азота: десять лет второго пришествия, предыстория открытия аргининзависимого биосинтеза NO // Биоорганич. химия. 1999. - Т. 25, №6. - С. 403-411.

85. Никонов А.П. К вопросу о чувствительной иннервации интрамуральных нервных узлов пищевода собаки // Арх. анат. 1959. - №5. - С. 96-98.

86. Ноздрачев А.Д. Кортикостероиды и симпатическая нервная система // JI.: Наука. 1969. - 146с.

87. Ноздрачев А.Д. Вегетативная рефлекторная дуга // JL: Наука. 1978. - 160с.

88. Ноздрачев А.Д. Физиология вегетативной нервной системы // JL: Медицина. -1983.-296с.

89. Ноздрачев А.Д., Пушкарев Ю.П. Характеристика медиаторных превращений. Л.: Наука. 1980. - 124с.

90. Ноздрачев А.Д., Филиппова Л.В., Шерман Н.О., Панасюк Н.В. Интерлейкин-1 в оказывает стимулирующее действие на интероцепторы тонкой кишки // Доклад РАН. 2001. - Т. 376, № 1. - С. 124-126.

91. Овсянников В.И. Интеграция нейромедиаторов и гормонов в пищеварительной системе // Вестник РАМН. 1996. - № 1. - С. 33-36.

92. Оленев С.Н. Конструкция мозга // М.: Медицина. 1987. - 208с.

93. Петренко Ю.М., Шашурин Д.А., Титов В.Ю. Новые источники окиси азота, их возможная физиологическая роль и значение // Эксперимен. и клинич. фармакология. 2001. - Т. 64, №2. - С. 72-80.

94. Проскуряков С.Я., Коноплянников А.Г., Иванников А.И., Скворцив В.Г. Биология оксида азота // Успехи соврем, биологии. 1999. - Т.119. - С. 380395.

95. Проскуряков С .Я., Коноплянников А.Г., Иванников А.И., Скворцив В.Г., Цыб А.Ф. Оксид азота в неопластическом процессе // Вопросы онкологии. — 2001.-Т. 47, №3.-С. 257-269.

96. Реутов В.П. Цикл окиси азота в организме млекопитающих // Успехи биол. хим.-1995.-Т. 35.-С. 189-228.

97. Реутов В.П. Медико-биологические аспекты циклов оксида азота с суперкосидного анион-радикала // Вестник РАМН. 2000. - №4. - С. 35-41.

98. Реутов В.11., Каюшин Jl.ll., Сорокина Н.Г. Физиологическая роль цикла оксида азота в организме человека и животных // Физиология человека. — 1994. Т. 20, № 3. - С. 165-174.

99. Реутов В.П., Косицын Н.С., Сорокина Е.Г. Почему оксид и диоксид азота увеличивают содержание бежа в примембранной области // В кн.: Мат. Ш междунар. конф. С-Пб. 1997. - С. 77.

100. Реутов В.П., Орлов С.Н. Физиологическое значение гуанилатциклазы и рольоксида азота и нитросоединений в регуляции активности этого фермента // Физиология человека. 1993. - Т. 19, № 1. - С. 124-135.

101. Реутов В.П., Сорокина Е.Г., Охотин В.Е., Косицын Н.С. Циклическое превращение оксида азота в организме млекопитающих // М.: Наука. 1998. - 159с.

102. Ромейс Б. Микроскопическая техника // М. 1953. - 718с.

103. Росин Я.А. Физиология вегетативной нервной системы // М. 1965. - 168с.

104. Рыжов А.И., Байтингер В.Ф. Функциональная морфология нервного аппарата верхнего пищеводного и кардиального сфинктеров // Бюлл. сибирск. отдел. АМН СССР. 1989. - №1. - С. 33-37.

105. Рыжов А.И., Храпов А.П. Особенности строения интрамурального нервного аппарата толстого кишечника белки // Акт. вопр. экспер. и клинич. морфологии. Вып.2. Томск. 2002. - С. 62-63.

106. Самосудова Н.В., Реутов В.П., Ларионова Н.П. Оксид азота как модулятор контрастности основных элементов цитоскелета // Цитология. 2000. - Т. 42, №1. - С. 74-78.

107. Сахаров Д.А. Множественность нейротрансмиттеров и их функциональное значение //Журн. эвол. биох., физиол. 1990. - Т. 26, - №5. - С. 733-741.

108. Северина И. С. Растворимая форма гуанилатциклазы в молекулярном механизме физиологических эффектов окиси азота и в регуляции процесса агрегации тромбоцитов // Бюлл. эксперим. биологии и медицины. 1995. -№3.-С. 230-235.

109. Семенов С.П. Морфология вегетативной нервной системы и интерорецепторов // Л.: ЛОЛГУ. 1965. - 160с.

110. Смирнов В.М., Иванченко Л.М., Кромин А.А. Механизм торможения сокращений тонкой кишки, возникающего при раздражении блуждающего нерва // Авиакосм, и экол. медиц. 2001. Т.35, №6. - С. 53-57.

111. Сосунов А.А. Оксид азота как межклеточный посредник // Соросовский Образовательный Журнал 2000. - Т. 6, № 12. - С. 27-34.

112. Сперанская Е.Н. Вопросы физиологии вегетативного отдела нервной системы // М.-Л. 1961. - 146с.

113. Сторожук В.М. Функциональная организация нейронов соматической коры // Киев: Наукова думка. — 1974. 272с.

114. Суворова JT.B. Сопоставление развития некоторых интрамуральных нервных элементов с развитием остальных тканевых компонентов пищевода кролика// Арх. анат. 1963. - № 9. - С. 31-43.

115. Сухоруков A.M., Киргизов И.В., Горбунов Н.С. Особенности строения соединительно-тканного остова и гладкой мускулатуры толстой кишки человека // Сиб. мед. журнал. 1997. - № 3. - С.27-30.

116. Швалев В.Н. Вегетативная нервная система // Руководство по гистологии. -2001.-Т. 2. С. 598-611.

117. Швалев В Н , Рейддер Р. М., Мингазова И. В. Этапы формирования вегетативной нервной системы в связи с возникновением ее основных медиаторов в эмбриогенезе // Арх. анат. 1972. - № 8. - С. 48-66.

118. Швалев В. Н., Стропус Р. А. Медиаторный этап функционирования вегетативной нервной системе в пре- и постнатальном онтогенезе и значение его исследования для клиники // Арх. анат. 1979. - № 5. - С. 5-20.

119. Шульговский В.В. Основы нейрофизиологии // М.: Аспект Пресс. 2000. -277с.

120. Шульпин Г.В. Возрастная морфология афферентной и эфферентной иннервации вегетативных ганглиев млекопитающих // Авторсф. дис. канд. мед. наук Д. 1967.

121. Шуматова Т.А. Значение нитрооксидергических механизмов в развитии респираторного дистресс-синдрома у взрослых // Автореф. дис. док. мед. наук. Владивосток. 2000.

122. Хабаров А.Я. Афферентная иннервация сердца // M.-JI.: Издательство АН СССР. 1961. - 180с.

123. Хауликс И. Вегетативная нервная система // Бухарест: Медицинское изд. -1978.-352с.

124. Хонин Г.А., Шведов С.И., Лебедев В.Л., Теленков В.Н., Овчинников Д.К. Иннервация органов пищеварения у пушных зверей клеточного содержания // Актуаль. вопр. экспер и клинич. морфологии. Вып.2. Томск. 2002. - С. 267.

125. Черниговский В.Н. Афферентные проводники симпатической нервной системы // Труды ВММА. 1944. - Т. 4, ч. I. - С. 97-129.

126. Черниговский В.Н. Нейрофизиологический анализ кортико-висцеральной рефлекторной дуги // Л.: Наука. 1967. - 228с.

127. Adcock I.M., Brown C.R., Know O.G., Barnes P.J. Oxidativ stress induces NF-kappa-B DNA-binding and inducible NOS messenger-RNA in human epithelial cells // Biochem. alid Biophys. Res. Commun. 1994. - Vol.199, № 3. - P. 15181524.

128. Adeghate E., al-Ramadi В., Saleh A.M. et al. Increase in neuronal nitric oxide synthase content of the gastroduodenal tract of diabetic rats // Cell Mol. Life Sci. -2003.-Vol. 60, №6.-P. 1172-1179.

129. Aimi Y., Kimura K., Kinoshita T. et al. Histochemical localization of nitric oxide synthase in rat enteric nervous system // Neuroscience. 1993. - Vol. 53. -P. 553-560.

130. Asano K., Chee C.B., Gaston B. et al. Constitutive and inducile nitric oxide synthase gene-expression, regulation and activity in human lung epithelial cells // Proc. Nat. Acad. Sci. US. 1994. - Vol. 91, № 21. - P. 10089-10093.

131. Ashutosh K. Nitric oxide and asthma: a review // Curr. Opin. Pulm. Med. -2000.-Vol. 6, №1.-P. 21-25.

132. Bachmann S., Mundel P. Nitric oxide in the kidney: synthesis, localization, and function // Am. J. Kidney Dis. 1994. - Vol. 24. - P. 112-129.

133. Barnes P.J., Liew F.Y. Nitric oxide and asthmatic inflammation // Imm. Today. 1995.-Vol. 16, № 3. - P. 128-130.

134. Bassoulet C., Lonchampt M.s Canet E. Differential immunolocalization of type I, II, III nitric oxide synthase isoforms in marine lung epithelium // Europ. Respirat. J. 1996. - Vol. 9. - P. 123-124.

135. Battish R., Cao G.Y., Lynn R.B. et al. Heme oxygenase-2 distribution in anorectum: colocalization with neuronal nitric oxide synthase // Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver. Physiol. 2000. - Vol. 278, № 1. - P. 148-55.

136. Belai A., Burnstock G. Pattern of distribution and co-localization of NOS and ATP in the myenteric plexus of human fetal stomach and intestine // Neuroreport -2000.-Vol. 17, №11.-P. 5-8.

137. Belvisi M.G., Barnes P.J., Larkin S. et al. Nitric oxide synthase activity in elevated in inflammatory lung disease in humans // Eurup. J. Pharmacol. 1995. -Vol. 283, №1/3.-P. 255-258.

138. Berridge M.J. Inositol triphosphate and calcium signalling // Nature. 1993. -Vol. 361.-P. 315-325.

139. Bcrthoud H.R., Ncuhubcr W.L. Functional and chcmical anatomy of the afferent vagal system // Auton. Neurosci. 2000. - Vol. 85, № 3. - P. 1-17.

140. Beyak M.J., Xue S., (Tollman P.I. et al. Central nervous system nitric oxide induces oropharyngeal swallowing and esophageal peristalsis in the cat // Gastroenterology 2000. - Vol. 119, № 2. - P. 377-385.

141. Bogdan C., Rollinghoff M., Diefenbach A. The role of nitric oxide in innate immunity // Immunol. Rev. 2000. - Vol. 173. - P. 17-26.

142. Bonthius D.J., Tzouras G., Karacay B. Deficiency of neuronal nitric oxide synthase (nNOS) worsens alcohol-induced microenceephaly and neuronal loss in developing mice // Brain Res. Dev. Brain Res. 2002. - Vol. 138, № 1. - P.45-59.

143. Botar J., The autonomic nervous system, Bdpst, 1966.

144. Bredt D.S., Hwang P.M., Glatt C.E. et al. Cloned and expressed nitric oxide synthase structurally resembles cytochrome P-450 reductase // Nature. 1991. -Vol. 351.-P. 714-718.

145. Bredt D.S., Hwang P.M., Snyder S.H. Localization of nitric oxide synthase indicating a neural role for nitric oxide // Ibid. 1990. - Vol. 47. - P. 768-770.

146. Bredt D.S., Snyder S.H. Isolation of nitric oxide synthase, a calmodulin-requiring enzyme // Proc. Nat. Acad. Sci. US. 1990. - Vol. 87. - P. 682-685.

147. Brehmer A., Beleites B. Myenteric neurons with different projections have different dendritic tree patterns: a morphometric study in the pig ileum // J. Auton. Nerv. Syst. 1996. - Vol. 61. -P. 43-50.

148. Brehmer A., Schrodi F., Neuhber W., Timmermans J-P Comparison of enteric neuronal morphology as demonstraed by Dil-tracing under different tissue handling conditions //Anat. Embryol. Germany. 1999a. - Vol. 199. - P. 57-62.

149. Brehmer A., Schrodi F., Neuhber W. Morphological classifications of enteric neurons 100 years after Dogicl // Anat. Embryol. Germany. - 1999b. - Vol. 200. -P. 125-135.

150. Brehmer A., Stach W. Morphological classification of NADPH-positive and -negative myenteric neurons in the porcine small intestine // Cell Tissue Res.1997.-Vol. 287.-P. 127-134.

151. Brehmer A., Stach W. Regional structural differences in the neuronal composition of myenteric ganglia along the pig small intestine // Anat. Rec.1998.-Vol. 250.-P. 109-116.

152. Brehmer A., Stach W., Krammer H.J., Neuhber W. Distribution, morphology and projections of nitrcrgic and non-nitrcrgic submucosal neurons in the pig small intestine //Histochem. Cell. Biol. 1998. - Vol. 109. - P. 87-94.

153. Brzozowska I., Konturek P.C., Brzozowska T. et al., Role of prostaglandins, nitric oxide, sensory nerves and gastrin in acceleration of ulcer healing by melatonin and its precursor, L-tryptophan // J. Pineal. Res. 2002. - Vol. 32, №3. -P. 149-162.

154. Burn J.H., The autonomic nervous system // Oxford. 1965.

155. Burnstocr G. Neural nomenclature.//Nature. 1971. - Vol. 29. - P. 282-283.

156. Burnstock G., Costa M. Adrenergic Neurons. London. Chapman and all. 1975.

157. Busse R., Mulsch A. Induction of nitric oxide synthase by cytokines in vascular smooth muscle cells // FEBS Lett. 1990. - Vol. 275. - P. 87-90.

158. Cabrera C., Bohr D. The role of nitric oxide in te central control of blood pressure // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1995. - Vol. 206. - P. 77-81.

159. Cajal у Ramon S. Histologic du systeme nerveux du I'homme et des vertebres // Paris, Maloine. -T. 1-2.-P. 1909-1911.

160. Calatayud S., Barrachina D., Esplugues J.V. Nitric oxide: relation to integrity, injury, and healing of the gastric mucosa // Microsc. Res. Tech. 2001. - Vol. 53. №5.-P. 325-335.

161. Cao B.H., Mortensen K., Tornehave D., Larsson L.I. Apoptosis in rat gastric antrum: evidence that regulation by food intake depends on nitric oxide synthase // J. Histochcm. Cytochcm. 2000. - Vol. 48, № 1. -P. 123-131.

162. Castro F. de. Nota sobre cietas terminationes nerviosas en el ganglion cervicalsuperior sympatico humano // Bol. Soc. espanola Biol. Madrid. 1918. - Vol. 4. i1. P. 34-37.

163. Castro F. de. Sympathetic ganglia normal and pathological // Trab. Labor. Rech. biol. Univ. Madrid. 1923. - Vol. 20. - P. 113-208.

164. Castro F. de. Recherches sur degeneration et la regeneration du systeme nerveux sympathique // Trav. Labor. Rech. Biol. Univ. Madrid. 1930. - Vol. 26. - P. 357456.

165. Castro F. de. Sympathetic ganglia normal and pathological // In: Cytology cellular pathology or nervous system. Vol. I. New York. 1932. - P. 317-384.

166. Castro F. de. Aspects anatomiques de la transmission synaptique ganglionnaire chez les mammiferes // Arch, intern. Physiol. 1951. - Vol. 59. - P. 479-513.

167. Chino Y., Fujimura M., Kitahama K., Fujimiya M. Colocalization of NO and VIP in neurons of the submucous plexus in the rat intestine // Peptides. 2002. -Vol. 23, № 12. - P. 2245-2250.

168. Clere N., Furness J.B., Bornstein J.C., Kunze W.A. Correlation of electrophysiological and morphological characteristics of myenteric neurons of the duodenum in the guinea-pig // Ncuroscicncc. 1998. - Vol. 82. - P. 899-914.

169. Colpaert E.E., Timmermans J.P., Lefebvre R.A. Influence of antioxidant depletion on nitrergic relaxation in the pig gastric fundus // Br. J. Pharmacol. -2002.-Vol. 135, №4. -P. 917-926.

170. Cullotta E., Koshland D. E. NO news is good news // Science. 1992. - Vol. 258.-P. 1862-1865.

171. Daniel E.E., Jury J., Salapatek A.M. et al. Nitric oxide from enteric nerves acts by a different mechanism from myogenic nitric oxide in canine lower esophageal sphincter // J. Pharmacol. Exp. Ther. 2000. - Vol. 294, № 1. - P. 270-279.

172. Dick J.M., Lefebvre R.A. Interplay between nitric oxide and vasoactive intestinal polypeptide in the pig gastric fundus smooth musclc // Eur. J. Pharmacol.- 2000. Vol. 397, № 3. - P. 389-397.

173. Dick J.M., Van Geldre L.A., Timmermans J.P., Lefebvre R.A. Investigation of the interaction between nitric oxide and vasoactive intestinal polypeptide in the guinea-pig gastric fundus // Br. J. Pharmacol. 2000. - Vol. 129, № 4. - P. 751763.

174. Dick J.M., Van Mollc W., Brouckacrt P., Lefebvre R.A. Relaxation by vasoactive intestinal polypeptide in the gastric fundus of nitric oxide synthase-deficient mice // J. Physiol. 2002. - Vol. 538, № l.-P. 133-143.

175. Dinh-Xuan А.Т., Cremona G., Higenbottam T.W. Endothelial disfunction and remodeling of the pulmonary circulation in chronic hypoxic pulmonary-hypertension // Appl. Cardiopulmonary Pathophysiol. 1994. - Vol. 5, № 2. - P. 93-99.

176. Dogiel A. S. Zur Frage uber den feineren Bau des sympathischen Nervensystems bei den Saugetieren // Arch, mikrosk. Anat. u. Entwicklungsgesch.- 1895. Vol. 46. - P. 305-344.

177. Dogiel A. S. Zwei Arten sympathischer Nervenzellen // Anat. Anz. 1896a. - P. 679-687.

178. Dogiel A. S. Ueber den Bau der Ganglien in den Geflechten des Darmes und der Gallenblase des Menschen und der Saugethiere // Arch. Anat. Physiol. Leip. Ariat. 18966.-P. 130-158.

179. Dogiel A. S. Der Bau der Spinalganglien des Menschen und Saugetiere // Jena. -1908.

180. Dong W.G., Mei Q., Yu J.P. et al. Effects of melatonin on the expression of iNOS and COX-2 in rat models of colitis // World. J. Gastroenterol. 2003. - Vol. 9, №6. -P. 1307-1311.

181. Eccles J. C. The action potential of the superior cervical ganglion // J. Physiol. Lodon. 1935. - Vol. 85. -P. 179-206.

182. Eggermont J.A., Racymacker L. Castells R. Ca2+-transport by smooth muscle membranes and its regulation // Biomed. et biochim. acta. 1989. - Vol. 48, № 56. -P. 370.

183. Ekblad E., Mei Q., Sundler F. Innervation of the gastric mucosa // Microsc. Res. Tech. 2000. - Vol. 48, № 5. - P. 241-257 .

184. Ergun Y., Ogulener N. Evidence for the interaction between nitric oxide and vasoactive intestinal polypeptide in the mouse gastric fundus // J. Pharmacol. Exp. Thcr.-2001.-Vol. 299, № 3. P. 945-950.

185. Esveld L.W. van Uber die nervosen Elemente in der Darmwand // Mikrosk Anat Forsch. 1928. - Vol. 15. - P. 1-42.

186. Faber-Zuschratter H., Gerald W. IJltrastructural distribution of NADFH-diaphorase in cortex synapses // Neuro Rep. 1994. - Vol. 5, № 16. - P. 20292032.

187. Fan Y.P., Chakder S., Gao F., Rattan S. Inducible and neuronal nitric oxide synthase involvement in lipopolysaccharide-induced sphincteric dysfunction // Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol. -2001. Vol. 280, № l. p. 32-42.

188. Felier E., Altdorfer K., Donatli Т., Felier J. Electronmicroscopical localization of nitric oxide synthase-containing nerve elements in cat pylorus // Eur. J. Morphol. — 2001.-Vol. 39,№2.-P. 121-126.

189. Forstermann U., Closs E. I., Pollock J. S. et al. Nitric oxide synthase isozymes, characterization, purification, molecular cloning and function // Hypertension. -1994.-Vol. 23.-P. 1121-1131.

190. Freeman B.A. Nitric oxide: A central regulatory species in pulmonary oxidant reactions // Amcr. J. Physiol. Lung Cell, and Mol. Physiol. - 1995. - Vol. 268. -№ 12.-P. 1697-1698.

191. Furakawa K., Harrison D.G., Saleh D. et al. Expression of nitric-oxide syntase Hyman nasal-mucosa // Amer. J. Respirat. and Crit. Care. Med. 1996. - Vol. 153, №2.-P. 847-850.

192. Furchgott R.F., Zawadski J. The obligatory role of endothelial cclls in the relaxation of arterial smooth muscle by acetylcholin // Nature. 1980. - Vol. 288. -P. 373-376.

193. Furness J.В., Bornstein J.C., Trussell D.C. Shapes of nerve cells in the myenteric plexus or the guinea-pig small intestine revealed by the intracellular injection of dye // Cell Tissue Res. 1988. - Vol. 254. - P. 561-571.

194. Garthwaite J. Neural Nitric Oxide Signalling // Trends. Neurosci. 1995. - Vol. 18.-P. 51-56.

195. Garthwaite J. Boulton C.L. Nitric oxide signalling in the central nervous system // Ann. Rev. Physiol. 1995. - Vol. 57. - P. 683-706.

196. Gaston В., Drazen J.M., Jansen A. et al. Relaxation of human bronchial smooth muscle by S-nitrothiols in vitro // J. Pharmacol, and Exp. Therapeut. 1994a. -Vol. 268, №2.-P. 978-984.

197. Gaston В., Drazen J.M., Loscalzo J., Stamler J.S. The biology of nitrogen oxides in the airways //Amer. J. Respirat. and Crit. Care Med. 1994b. - Vol. 149. - P. 538-551.

198. Gellhorn E. Principles of autonomic-somatic integrations // Minneapolis. -1967.

199. Gerlach M., Blum-Degen D., Ransmayr G. Expression, but not activity, of neuronal nitric oxide synthase is regionally increased in the alcoholic brain // Alcohol Alcoholism. 2001. - Vol. 36, №1. - P.60-67.

200. Gershon M.D. The enteric nervous system // Ann. Rev. Neurosci. 1981. - № 4. -P. 227-272.

201. Gorren A.C., Schrammel A., Schmidt K., Mayer B. Effects of pH on the structure and function of neuronal nitric oxide synthase // Biochem. J. 1998. -Vol. 331, (Pt 3).-P. 801-807.

202. Gow Andrew J., Ischiropoulos H. Nitric oxide chemistry and cellular signaling // J. Cell. Physiol. 2001. - Vol. 187, № 3. - P. 277-282.

203. Greenberg S.S., Ouyang J., Zhao X., Giles T.D. Human and rat neutrophils constitutively express neural nitric oxide synthase mRNA. // Nitric Oxide. 1998. -Vol. 2, № 3. - P. 203-212.

204. Greving R. Histologische Studien am Plexus myentericus des Magens. 1. Der Plexus nyentericus und seine Zelltypen // Dtsch Z Nervenheilk 1951a. - Vol. 165.-P. 622-643.

205. Greving R. Histologische Studien am Plexus myentericus des Magens. 2. Das Problem der Ganglienzellfortsatze // Z Anat Entwicklungsgesch 1951b. - Vol. 115.-P. 541-554.

206. Grinder J.R. Interplay of VIP and nitric oxide in regulation of the descending relaxation phase of peristalsis // Amcr. J. Physiol. 1993. - Vol. 264. - P. 334340.

207. Grongnet J.F., David J.С. Reciprocal variations of nNOS and HSP90 are associated with fasting in gastrointestinal tract of the piglet // Dig. Dis. Sci. 2003. -Vol. 48, №2.-P. 365-372.

208. Gupta S.K., Fitzgerald J.F., Chong S.K. et al. Expression of inducible nitric oxide synthase (iNOS) mRNA in inflamed esophageal and colonic mucosa in a pediatric population // Am. J. Gastroenterol. 1998. - Vol. 93, № 5. - P. 795-798.

209. Gutierrez H.H., Pitt B.R., Schwarz M. et al. Pulmonary alveolar epithelial inducible NO synthase gene expression: Regulation by inflammatory mediators // Amer. J. Physiol.-Lung Cell, and Mol. Physiol. 1995. - № 3. - P. L501-L508.

210. Haddad I.Y., Crow J.P., Hu P. et al. Concurrent generation of nitric-oxide and superoxide damages surfactant protein-A // Amer. J. Physiol. 1994. - Vol. 267, № 3. - P. L242-L249.

211. Haddad I.Y., Ischiropoulos H., Holm B.A. et al. Mechanisms of peroxynitrite-induced injury to pulmonary surfactants // Ibid. 1993. - Vol. 265, № 6. - P. L555-L564.

212. Harting K. Uber die feinere Innervation der extrahepatischen Gallenwege. I. Uber die mikroskopische innervation der Gallenblase // Zellforsch Vol. 12. - P. 518-543.

213. Hassall C.J.S., Saffrey M.J., Belai A. et al. Nitric oxide synthase-immunorcactivity and NADPH-diaphorasc activity in a subpopulation of intrinsic neurones of the guinea-pig heart // Neurosci. Lett. 1992. - Vol. 143. - P. 65-68.

214. Heinzel В., John M., Klatt P. et al. Ca-calmodulin-dependent formation of hydrogen peroxidase by brain nitric oxide synthase // Biochem. J. 1992. - P. 627630.217. Hervonen A. et al., 1981

215. Hibbs J.D., Taintor R.R., Vavrin Z., Rachlin E.M. Nitric oxide: a cytotoxic activated macrophage affector molecule // Biochem. Biophys. Res. Commun. -988.-Vol. 157.-P. 87-94.

216. Hibbs J.D., Westenfelder С., Taintor R.R. et al. Evidence for cytokine-inducibie nitric oxide synthesis from L-arginine in patients receiving interleukin-2 therapy. J. Clin. Invest. 1992. - Vol. 89. - P. 867-877.

217. Hill C. J. A contribution to our knowledge of the enteric plexuses // Philos Trans R Soc Lond В Biol Sei 1927. - Vol. 215. - P. 355-387.

218. Hisa Y., Koike S., Bamba H. et al. Involvement of carbon monoxide in the innervation of the canine cervical esophagus and trachea // Ann. Otol. Rhinol. Laryngol.-2000.-Vol. 109.-№2.-P. 133-135.

219. Hope B.T., Michael G.J., Knigge K.M., Vincent S.R. Neuronal NADPH-diaphorasc is a nitric oxide synthase // Proc. Nat. Acad. Sci. US. 1991. - Vol. 88. -P. 2811-2814.

220. Hope V.T., Vincent S.R. Histochemical characterization of neuronal NADPH-diaphorase // J. Histochem. Cytochem. 1989. - Vol. 37. - P. 653-661.

221. Hunley Т.Е., Iwasaki S., Homma Т., Коп V. Nitric oxide and endothelin in pathophysiological settings. Pediatr. Nephrol. 1995. - Vol. 9, № 2. - P. 235-244.

222. Hyland N.P., Abrahams T.P., Fuchs K. et al. Organization and neurochemistry of vagal preganglionic neurons innervating the lower esophageal sphincter in ferrets // J. Сотр. Neurol. 2001. - Vol. 430, №2. - P. 222-234.

223. Ignarro I.J., Buga J.M., Wood K.S. et al. Endothelium-derived relaxing factor produscd and released from artery and vein is nitric oxide // Prog. Natl. Acad. Sci. 1987. - Vol. 84. - P. 9265-9269.

224. Ignarro L.G., Kadowitz P.J. The pharmacological and physiological role of cyclic GMP in vasculare smooth muslce relaxation // Annu. Rev. Pharmacol, and Toxicol. 1985. - Vol. 25. -P. 171-191.

225. Ignarro J. Biosynthesis and metabolism of endothelium-derived nitric oxide // Ann. Rev. Pharmacol. Toxicol. 1990. - Vol. 30. - P. 535-560.

226. Jabonero V. Mikroskopische Studien uber die Innervation des Verbauungstraktes //1. Osophagus. Acta Neuroveg 1958. - Vol. 17. - P. 308353.

227. Jabonero V. Uber die feinere Innervation der menschlichen Gallenblase // Acta Neuroveg 1960. - Vol. 20. - P. 109 - 154.

228. Jimenez D., Martin M.J., Pozo D. et al. Mechanisms involved in protection afforded by L-arginine in ibuprofen-induced gastric damage: role of nitric oxide and prostaglandins // Dig. Dis. Sci. 2002. - Vol. 47, № 1. - P. 44-53.

229. Kang J.L., Lee K., Castranova V. Nitric oxide up-regulates DNA-binding activity of nuclear factor-kappaB in macrophages stimulated with silica and inflammatory stimulants //Mol. Cell. Biochem. 2000. - Vol. 215. - P. 1-9.

230. Kclm M., Fcclisch M., Spahr R. et al. Quantitative and kinetic characterization of nitric oxide and EDRF released from cultured endothelial cells // Biochem. and Biophys. Res. Commun. 1988. - Vol. 154. - P. 136-244.

231. Khan M.T., Furchgott R.F. Additional evidence that endothelium-derived relaxing factor is nitric oxide // Pharmacology. N.Y. 1987. - P. 341-344.

232. Kim H., Hwan Kim K. Role of nitric oxide and mucus in ischemia/reperfusion-induced gastric mucosal injury in rats // Pharmacology 2001. - Vol. 62, № 4. - P. 200-207.

233. Knowles R.G., Moncada S. Nitric oxide synthases in mammals // Biochem J. — 1994.-Vol. 298.-P. 249-258.

234. Kobzik L.,Rcid M.B., Brcdt D.S., Stamlcr J.S. Nitric oxide in skeletal muscle // Nature. 1994. - Vol.372. - P. 546-549.

235. Koelliker A. Handbuch der Gewebelehre des Menschen // Engelmann. Leipzig. 1896.

236. Kolb H., Kolb-Bachofen V. Nitric oxide in autoimmune disease: cytotoxic or regulatory mediator? // Immunol. Today. 1999. - Vol. 19. - P. 556-562.

237. Konig P., Dedio J., Muller-Esterl W., Kummer W. Distribution of the novel eNOS-interacting protein NOSIP in the liver, pancreas, and gastrointestinal tract of the rat // Gastroenterology. 2002. - Vol. 123, № 1. - P. 314-324

238. Konturek S., Konturek P. Role of nitric oxide in the digestive systems // Digestion. 1995. - Vol. 56. - P. 1-13.

239. Kooy N.W., Royall J.A., Ye Y.Z. et al. Edidence for in vivo peroxynitrite production in human acute lung injury // Amer. J. Respirat. and Crit. Care Med. -1995. Vol. 151, № 4. -P. 1250-1254.

240. Koshland D.E. Molecule of the Year (editorial) // Science. 1992. - Vol. 258. -P. 1861.

241. Kradin R., Bloch K., Anand A. Nitric oxide secretion by alveolar macrofages is effectively inhibited by anticellular adhesion molecule // Eur. Res. J. 1996. -Vol. 9, №23.-P. 14s.

242. Langley J. N. On the union of cranial autonomic (visceral) fibres with the nerve cclls of the superior ccrvical ganglion // J. Physiol. London. 1898. Vol. 23, № 3. -P. 240-270.

243. Langley J. N. The autonomic nervous system // Cambridge. 1903.

244. Lawrentjew B.T. Experimentell-morphologische Studien uber den feineren Bau des autonomen Nervensystems. I. Die Beteiligung des Vagus an der Herzinnervation // Z. mikr.-anat. Forsch. 1929a. -Bd 16. №> 3-4. - P. 383-411.

245. Lawrentjew B.I. Zur Lehre von der Cytoarchitektonik des peripherischen autonomen Nervensystems. I. Die Cytoarchitektonik der Ganglien des Verdauungskanals beim Hunde // Z. mikr.- anat. Forsch. 1931. - Bd 23. № 4. -P. 527-551.

246. Lawrentjew B.I. Experimentell-morphologiche Stufien uber den feineren Bau des autonomen Nervensystems. IV. Weitere Untersuchungen uber Degeneration und Regeneration der Synapsen // Z. Mikr. anat. Forsch. - 1934. - Bd 35. № 1-4. -P. 71-118.

247. Leone A.M., Palmer R.M., Knowles R.G. et al. Constitutive and inducible nitric oxide synthases incorporate molecular oxigen into both nitric oxide and citrulline // Ibid. 1991. - Vol. 266. -P. 23790-23795.

248. Liu Q, Chan ST, Mahendran R. Nitric oxide induces cyclooxygenase expression and inhibits cell growth in colon cancer cell lines // Carcinogenesis. 2003. - Vol. 24, №4.-P. 637-642

249. Loesch A., Belai A., Burnstock G. Ultrastructural localization of NADPH-diaphorase and colocalization of nitric oxide synthase in endothelial cells of the rabbit aorta // Cell and Tissue Res. 1993. - Vol. 274. - P. 539-545.

250. Lowenstein C.J., Glatt C.S., Bredt D.S., Snyder S.H. Cloned and expressed macrophage nitric oxide synthase contrasts with the brain enzyme // Proc. Nat. Acad. Sci. US. 1992. - Vol. 89. - P. 6711-6715.

251. Lowenstein C.J., Dinerman J.L., Snyder S.H. Nitric oxide: a physiologic messengers //Ann. intern. Med. 1994. - Vol. 120. - P. 227-237.

252. Lyons C.R., Orloff G.J., Cunningham J.M. Molecular cloning and functional expression of an inducible nitric oxide synthase from a murine macrophage cell line // J. Biol. Chem. 1992. - Vol. 267. - P. 63-70.

253. Mashimo H., Kjellin A., Goyal R.K. Gastric stasis in neuronal nitric oxide synthase-deficient knockout mice // Gastroenterology. 2000. - Vol. 119, № 3. -P. 766-773.

254. Matsumoto M., Furihata M., Kurabayashi A. et al Association between inducible nitric oxide synthase expression and p53 status in human esophageal squamous cell carcinoma // Oncology. 2003. - Vol. 64, № 1. - P. 90-6.

255. Mayer В., John M., Bohme E. Purification of a Ca2+/calmodulin-dependent nitric oxide synthusc from porcine cerebellum: Cofactor-role of tetrahydrobiopterin // FEBS Lett. 1990. - № 277. - P. 215-219.

256. Mayer В., John M., Heinzel B. et al. Brain nitric oxide synthase is a biopterin-and flavin-conlaining multi-functional oxido-reductase // Ibid. 1991. - № 288. -P. 187-191.

257. Meli R., Ferrante M.C., Raso G.M. et al. Effect of fumoiiisiii B1 on inducible nitric oxide synthase and cyclooxygenase-2 in LPS-stimulated J774A. 1 cells // Life Sci. 2000. - Vol. 67, № 23. - P. 2845-2853.

258. Messenger J.B., Bornstein J.C., Furness J.B. Electrophysiological and morphological classification of myenteric neurons in the proximal colon of the guinea-pig // Neuroscience. 1994. - Vol. 60. - P. 227-244.

259. Michailow S.E. Die feinere Struktur der sympathischen Ganglien der Harnblase bei den Saugetieren // Arch. mikr. Anat. 1908. - Vol. 72. - P. 554-574.

260. Miller R.T., Martasek P., Roman L.J., et al. Involvement of the reductase domain of neuronal nitric oxide synthase in superoxide anion production // Biochemistry. 1997. - Vol. 36 . - P. 15277-15284.

261. Miller S.M., Rccd D., Sarr M.G. ct al., Hacm oxygenase in cntcric nervous system of human stomach and jejunum and co-localization with nitric oxide synthase // Neurogastroenteroi. Motil. 2001. - Vol. 13, № 2. - P. 121-131.

262. Moncada S., Higgs A. Mechanisms of disease: the L-arginine nitric oxide pathway // New Engl. J. Med. - 1993. - Vol. 329. - P. 2002-2012.

263. Moncada S., Palmer R.M.J., Higgs E.A. Netric Oxide: physiology, pathophysiolocy and pharmacology // Pharmacol. Rev. 1991. - Vol. 43. - P. 109142.

264. Mule F., Vannucchi M.G., Corsani L. et al. Myogenic NOS and endogenous NO production are defective in colon from dystrophic (mdx) mice // Am. J. Physiol. Gastrointcst. Liver. Physiol. 2001. - Vol. 281, № 5. - P. 1264-1270.

265. Muller E. Uder bas Darmnervensystem // Ups. Lakaref. Forh. Vol. 26: XXII. -P. 1-22.

266. Nakaki T. Physiological and clinical significance of NO (nitric oxide) -a review // Keio J. Med. 1994. - Vol. 43. - P. 15-26.

267. Nathan C. Nitric oxide synthases: roles, tolls and controls // Cell. 1994. - Vol. 79.-P. 915-918.

268. Nijkamp F.P., Folkerts G. Nitric-oxide and bronchial reactivity //Clin. And Exp. Allergy. 1994. - Vol. 24, № 10. - P. 905-914.

269. Nijkamp F.P., Van der Linde H., Folkeits G. Nitric oxide synthase inhibitors induce airway hyperresponsiveness in the guinea pig in vivo and in vitro // Amer. Rev. Respirat. Diseas. 1993. - Vol. 148. - P. 727-734.

270. Nishizaki K., Nakao K., Ishii H. et al., Induction of neuronal nitric oxide synthase by sympathetic denervation is mediated via alpha 2-adrenoceptors in the jejunal myenteric plexus // Brain Res. 2003. - Vol. 965, № 1-2. - P. 121-129.

271. Nozoe Т., Yasuda M., Honda M. et al. Immunohistochemical expression of cytokine induced nitric oxide synthase in colorectal carcinoma // Oncol. Rep. -2002. Vol. 9, № 3. - P. 521-524.

272. Nussler A.K., Di Silvio M., Billiar T.R. et al. Stimulation of the nitric oxide synthase pathway in human hepatocytes by cytokines and endotoxin // J. Exp. Med. 1992. - Vol. 176. - P. 261-264.

273. Oae S., Shinchama K. Organic thionitrites and related substances // Org. Prep. Proc. Intern. 1983. -№ 15. - P. 65-198.

274. Ogura H., Cioffi W.G., Offher P.J. et al. Effect of inhaled nitric oxide on pulmonary function after sepsis in a swine model // Surgery. 1994. - Vol. 166, № 2.-P. 313-321.

275. Okamura C. Uber die Darstellung des Nervenapparates in der Magen-Darmwand mittels der Vergoldungsmethode // Mikrosk. Anat. Forsch. Vol. 35. -P. 218-253.

276. Olesen M., Middelveld R., Bohr J. et al. Luminal nitric oxide and epithelial expression of inducible and endothelial nitric oxide synthase in collagenous and lymphocytic colitis // Scand. J. Gastroenterol. 2003. - Vol. 38, №1. - P. 66-72.

277. Oshima D. Uber die innervation des Darmes // Anat. Entwicklungsgesch. -1929.-Vol. 90.-P. 725-767.

278. Palmer R.M.J., Ashton D.S., Moncada S. Vascular endothelial cells synthesize nitric oxide from L-arginin // Nature. 1988. - Vol. 333. - P. 664-669.

279. Palmer R.M.J., Ferrige A.G., Moncada S. Nitric oxide accounts for the biological activity of endothelium derived relaxing factor // Ibid. 1987. - Vol. 327.-P. 524.

280. Peng X., Feng J.B., Yan H. et al. Distribution of nitric oxide synthase in stomach myenteric plexus of rats // World. J. Gastroenterol. 2001. - Vol. 7, № 6. - P. 852-854.

281. Persson M.J., Cederqvist В., Wiclund C.U., Gustafsson L.E. Etanol caunol causes decremens in airway excretion of endogenous nitric-oxide in humans // Eur. J. Pharmacol. Inv. Toxicol. Pharmacol. Section. 1994. - Vol. 204, № 4. p. 273278.

282. Phillipson M., Hcnriksnas J., Holstad M. ct al. Inducible nitric oxide synthase is involved in acid-induced gastric hyperemia in rats and mice // Am J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol. 2003. - Vol. 285, № 1. - P. 154-62.

283. Pollock J.S., Forstermann IJ., Mitchell J.A. et al. Purification and characterization factor synthase from cultured and native bovine aortic endothelial cells // Proc. Nat. Acad. Sci. US. 1991. - Vol. 88. - P. 10480.

284. Portbury A.L., Pompolo S., Furness J.B. et al. Cholinergic, somatostatin-immunoreactive intemeurons in the guinea pig intestine: morphology, ultrastructure, connections and projections // J. Anat. 1995. - Vol. 187. - P. 303321.

285. Prcmaratnc S., Xuc C., McCarty J.M. ct. al. Neuronal nitric oxide synthase: expression in rat parietal cells // Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol. -2001. Vol. 280, № 2. -P. 308-313.

286. Raqib R., Mia S.M., Qadri F. Innate immune responses in children and adults with Shigellosis // Infect. Immun, 2000. - Vol. 68, № 6. - P. 3620-3629.

287. Ramis I., Lorente J., Rosellocatafau J. et al. Differential activity of nitric-oxide synthase in human nasal-mucosa and polyps // Rurop. Respirat. J. 1996. - Vol. 9, № 2. - P. 202-206.

288. Rand M.J., Li C.G. Nitric oxide as a neurotransmitter in peripheral nerves: nature of transmitter and mechanism of transmission // Ann. Rev. Physiol. 1995. -Vol. 57.-P. 659-682.

289. Rast G.F. Nitric oxide induces centrally generated motor patterns in the locust suboesophageal ganglion // J. Exp. Biol. 2001. - Vol. 204, (Pt 21). - P. 37893801.

290. Rees D.D., Palmer R.M.J., Schulz R. et al. Characterization of three inhibitors of endothelial nitric oxide synthase in vitro and in vivo // Br. J. Pharmacol. 1990. -Vol. 101.-P. 746-752.

291. Robbins R.A., Springall D.R., Warren J.B. Inducible nitric oxide synthase is increased in murine lung epithelial ccll by cytokine stimulation // Biochcm. Biophys. Res. Commun. 1994. - Vol. 198. - P. 835-843.

292. Saffrey M. Polak J. M., Burnstock G. Distribution of VIP-, substance P-, enkephalin- and neurotensin-like immunoreactive nerves in the chick gut // Neuroscience. 1982. - Vol. 7, № 1. - P. 279-293.

293. Salvemini D., Misko M.P., Masferrer J.L. et al. Nitric oxide activates cyclooxygcnasc enzymes // Proc. Nat. Acad. Sci. US. 1993. - Vol. 90. - P. 72407244.

294. Saur D., Neuhuber W.L., Gengenbach B. et al. Site-specific gene expression of nNOS variants in distinct functional regions of rat gastrointestinal tract // Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol. 2002. - Vol. 282, № 2. - P. 349-358.

295. Schicho R., Schemann M., Holzer P., Lippe I.T. Mucosal acid challenge activates nitrergic neurons in myenteric plexus of rat stomach // Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver. Physiol. 2001. - Vol. 281, № 5. - P. 1316-1321.

296. Schicho R., Schemann M., Pabst M.A. et al. Capsaicin-sensitive extrinsic afferents are involved in acid-induced activation of distinct myenteric neurons in the rat stomach // Neurogastroenterol Motil. 2003. - Vol. 15, № 1. - P. 33-44

297. Schini V.B., Vanhoutte P.M. Inhibitors of calmodulin impair the constitutive but not the inducible nitric oxide synthase activity in the rat aorta // .T. Pharmacol. Ecp. Ther. 1992. - Vol. 261. - P. 553-558.

298. Sengupta J.N. Electrophysiological recording from neurons controlling sensory and motor functions of the esophagus // Am. J. Med. 2001. - Vol. 3, № 111. - P. 169-173.

299. Shah S., Hobbs A., Singh R. et al. Gastrointestinal motility during pregnancy: role of nitrergic component of NANC nerves // Am. J. Physiol. Regul. Integr. Сотр. Physiol. -2000. Vol. 279, -№ 4. - P. 1478-1485.

300. Shibuki K., Okada D. Endogenous nitric oxide release required for long term synaptic depression in the cerebellum // Nature. 1991. - Vol. 349. - P. 326-328.

301. Smid S.D., Blackshaw L.A. Vagal ganglionic and nonadrenergic noncholinergic neurotransmission to the ferret lower oesophageal sphincter // Auton. Neurosci. -2000. Vol. 28, № 86. - P. 30-36.

302. Smith V.C., Dhatt N., Buchan A.M. The innervation of the human antro-pyloric region: organization and composition // Can. J. Physiol. Pharmacol. 2001. - Vol. 79, № 11. — P. 905-918.

303. Sokolowa M.L. Zur lehre von der cytoarchitektonik des peripherischen autonomen nervensystems. II. Die architekturder intramuralen ganglien des verdauungstrakts des rindes // Mikrosk. Anat. Forsch. Vol. 23. - P. 552-570.

304. Spina D. Epithelium smooth muscle regulation and interactions // Am. J. Respir. Crit. Care. Med. 1998. - Vol. 158, № 5, (Pt 3). -P. 141-145

305. Stach W. Zur neuronalen organisation des plexus myentericus (Auerbach) im Schweinedunndarm. I. Тур I-Neurone // Mikrosk. Anat. Forsch. 1980. - Vol. 94. -P. 833-849.

306. Stach W. Zur neuronalen organisation des plexus myentericus (Auerbach) im Schweinedunndarm. И. Тур II-Neurone // Mikrosk. Anat. Forsch. 1981. - Vol.95.-P. 161-182.

307. Stach W. Zur neuronalen organisation des plexus myentericus (Auerbach) im Schweinedunndarm. III. Тур Ill-Neurone // Mikrosk. Anat. Forsch. 1982a. - Vol.96.-P. 497-516.

308. Stach W. Zur neuronalen organisation des plexus myentericus (Auerbach) im Schweinedunndarm. IV. Тур IV-Neurone // Mikrosk. Anat. Forsch. 1982b. -Vol. 96.-P. 972-994.

309. Stach W. Uder morphologisch defmierte vertikale Verbindungen innerhalb des Darmwandncrvcnsystcms im Schweinedunndarm // Vcrh. Anat. Gcs. 1983. -Vol. 77.-P. 577-578.

310. Stach W. Zur neuronalen organisation des plexus myentericus (Auerbach) im Schweinedunndarm. V. Тур V-Neurone // Mikrosk. Anat. Forsch. 1985. - Vol. 99.-P. 562-582.

311. Stamler J.S., Singel D.J., Loscalzo J. Biochemistry of nitric oxide and its redox-activated forms // Science. 1992. - Vol. 258. - P. 1898-1902.

312. Stewart A.G., Tomlinson P.R., Fernaiides D.J. et al. Tumor-necrosis-factor-alpha modulates mitogenic responses of human cultured airway smooth muscle // Amer. J. Respirat. Cell, and Mol. Biol. 1995. - Vol. 12, № 1. - P. 110-119.

313. Stohr P. Mikroskopische Studien zur innervation des Magen-Darmkanales // Zellforsch. 1949. - Vol. 34. - P. 1-54.

314. Storr M., Geisler F., Neuhuber W.L. et al. Characterization of vagal input to the rat esophageal muscle // Auton. Neurosci. 2001. - Vol. 13, № 91(1-2). - P. 1-9.

315. Stumm M.M., D'Orazio D., Sumanovski L.T. et al. Endothelial, but not the inducible, nitric oxide synthase is detectable in normal and portal hypertensive rats // Liver. 2002. - Vol. 22, № 6. - P. 441-450

316. Syapin P.J. Alcohol and nitric oxide production by cells of the brain // Alcohol. 1998.-Vol. 16, №2.-P. 159-165.

317. Takahashi T. Pathophysiological significance of neuronal nitric oxide synthase in the gastrointestinal tract // J. Gastroenterol. 2003. - Vol. 38, № 5. - P. 421430.

318. Takeuchi K., Kagawa S., Mimaki H. et al. COX and NOS isoforms involved in acid-induced duodenal bicarbonate secretion in rats // Dig. Dis. Sci. 2002. - Vol. 47, №9. -P. 2116-2124.

319. Tannenbaum S. R., Fett D., Young V.R. et al. Nitrite and nitrate are formed by endogenous synthesis in the human intestine // Scicncc. 1978. - Vol. 200. - P. 1487-1488.

320. Temesrekasi D. Die Synaptologie der Dunndarmgeflechte // Acta. Morph. Acad. Sci. Huhg. 1955. -№ 5. - P. 53-69.

321. Timmermans J.P., Barbiers M., Scheuermann D.W. et al. Distribution pattern, neurochemical features and projections of nitrergic neurons in the pig small intestine //Ann. Anat. 1994. - Vol. 176. - P. 515-525.

322. Tonini M., De Giorgio R., De Ponti F. et al. Role of nitric oxide- and vasoactive intestinal polypeptide-containing neurones in human gastric fundus strip relaxations // Br. J. Pharmacol. 2000. - Vol. 129, № 1. - P. 12-20.

323. Vail Ginneken С., Van Meir F., Sys S., Weyns A. Developmental changes in heme-oxygenase-2 and bNOS expression in enteric neurons in the pig duodenum // Auton. Neurosci. 2001. - Vol. 13, № 91(1-2). - P. 16-25.

324. Vincent S.R. Nitric oxide: a radical neurotransmitter in the central nervous system // Progr. Neurobiol. 1994. - Vol. 42. - P. 129-160.

325. Waldman S.A., Murad F. Cyclic GMF synthesis and function // Pharmacol. Rev. 1987.-Vol. 39.-P. 163-196.

326. Wang Y., Marsden P.A. Nitric oxide synthases: biochemical and molecular regulation. Curr. Opin. Nephrol. Hypertens. 1995. - Vol. 4. - P. 12-22.

327. Watanabe Y., Ando H., Seo T. et al. Attenuated nitrergic inhibitory neurotransmission to interstitial cells of Cajal in the lower esophageal sphincter with esophageal achalasia in children // Pediatr. Int. 2002. - Vol. 44, № 1. - P. 145-148.

328. West S.D., Helmer K.S., Chang L.K. et al. Cholecystokinin secretagogue-induced gastroprotection: role of nitric oxide and blood flow // Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol. 2003. - Vol. 284, - № 3. - P. 399-410.

329. Wolf G., Wurdig S., Shunzel G. Nitric oxide synthase in rat brian is predominantly located at neuronal cndoplasmatis rcticuium: An electron microscope demonstration of NADPH-diaphorase activity // Neurosci. Lett. -1992.-Vol. 147. -P.63-66.

330. Wu G., Morris S. Arginine metabolism: nitric oxide and beyond // Biochem. J. -1998.-Vol. 336.-P. 1-17.

331. Xu D.Z., Lu Q., Deitch E.A. Nttnc oxide directly impairs intestinal barrier function // Shock. 2002. - Vol. 17, № 2. - P. 139-145

332. Yoneda S., Suzuki H. Nitric oxide inhibits smooth muscle responses evoked by cholinergic nerve stimulation in the guinea pig gastric fundus // Jpn. J. Physiol. -2001. Vol. 51, № 6. - P. 693-702.

333. Zhang J., Snyder S.H. Nitric oxide in the nervous system // Ann. Rev. Pharmacol. Toxicol. 1995. - Vol. 35. - P. 213-233.

334. Zhang X., Renehan W.E., Fogel R. Vagal innervation of the rat duodenum // Auton. Nerv. Syst. 2000. - Vol. 14, № 79 (1). P. 8-18.

Информация о работе

Романова, Наталья Евгеньевна
кандидата медицинских наук
Владивосток, 2004
ВАК 03.00.25

Диссертация

Гистохимические основы нитрооксидергической регуляции пищевода и кишечника - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы