Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Гистохимическая характеристика иннервационных структур пищевода

ВАК РФ 03.03.04, Клеточная биология, цитология, гистология

Автореферат диссертации по теме "Гистохимическая характеристика иннервационных структур пищевода"

4858639

На правах рукописи

О

ВАВИЛОВА Ирина Ивановна

ГИСТОХИМИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ИННЕРВАЦИОННЫХ СТРУКТУР ПИЩЕВОДА

03.03.04 - клеточная биология, цитология, гистология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

~ 3 НОЯ 2011

Владивосток 2011

Работа выполнена в государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Владивостокский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения и социального развития РФ

Научный руководитель: доктор медицинских наук, профессор

Мотавкин Павел Александрович

Официальные оппоненты: доктор медицинских наук, профессор

Черток Виктор Михайлович ГБОУ ВПО ВГМУ Минздравсоцразвития России

кандидат биологических наук Пущина Евгения Владиславовна Учреждение Российской академии наук Институт биологии моря им. А.В. Жирмунского ДВО РАН

Ведущая организация: Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Дальневосточный государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения и социального развития РФ

Защита диссертации состоится « Ж (^■-О^й^ЬЛ 2011 года на заседании диссертационного совета Д 208.007.01 при ГБОУ ВПО ВГМУ Минздравсоцразвития России по адресу: 690002, г. Владивосток, пр. Острякова, 2.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Владивостокского государственного медицинского университета по адресу: 690002, г. Владивосток, пр. Острякова, 26.

Автореферат разослан «/¿1л ОЩ^Щ 11

года

Ученый секретарь диссертационного совета доктор медицинских наук, профессор I г.В. Рева

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность исследования. Структурной организации и функциям пищевода посвящено значительное число оригинальных и обзор- -ных работ (Мельман Е.П., 1970; Байтингер М.А., 1988 и соавт.). Тем не менее, интерес к этому органу, занимающему важное место в структуре болезней пищеварительной системы, сохраняется и в последние годы. В оригинальных и итоговых работах важное место занимают исследования мышечной оболочки (Ступикова Е.А., 2001; Мотавкин П.А, 2004 и соавт.). Между тем, весь объем подвижности органа целиком зависит от состояния конечного нервного звена, которым, как известно, является межмышечное или Ауэрбахово сплетение (Чичинадзе К.И., 1960; Байтингер В.Ф., 1988 и соавт.). Кроме перистальтики нервные клетки межмышечного сплетения регулируют секреторную деятельность слизистых (кардиального типа) желез и собственных желез подслизистой оболочки пищевода (Никитюк Р.Б., 1990; Паршин М.М., 1990 и соавт.).

Особое внимание исследователей привлекает структура, функция и иннервация нижнего (диафрагмального) пищеводного сфинтера (Колесников Л.Л., 2000; N.P. Hyland, 2001; и соавт.). Этот орган, обеспечивающий поступление пищи в желудок, на последнем этапе движения препятствует ее возвращению в пищевод (Meitzer S.J., 1998; Jimenes P., 2005). Хотя, в некоторых исследованиях наличие самого сфинктера, как и его роль замка между пищеводом и желудком полностью отрицается -(Brombart M., 1956; Willich Е., 1971).

Не уменьшается интерес к исследованиям оксида азота (NO), как регулятора функции висцеральных систем (Ковалева C.B., 2004; Casseb-branit А., 2005). Подобными исследованиями охвачены фактически все органы пищеварительной системы, в том числе и пищевод (Мотавкин П.А., Романова Н.Е., 2004; Реутов В.П., 2003). Доказана локализация нитрооксидсинтазы (NOS) и значение оксида азота (NO) в работе желез и при регенерации после повреждения слизистой желудка, взаимодействие NO и вазоинтестинального пептида (VIP) при регуляции тонуса гладких мышечных клеток (ГМК) и нарушениях моторики органов пищеварения (Mashimô et al., 2000; Calatayud et al., 2001). Особый интерес исследователей привлекает участие NO в работе сфинктеров, активно

обсуждается роль NO в патогенезе пищеводной ахалазии (Watanade et al., 2002). Не вызывает сомнений тот факт, что эффекты N0 тесно связаны или опосредуются другими биологически активными веществами. В числе последних холецистокинин, цинк- и медьсодержащие соединения, СО (Miller et al, 2001; West et al, 2003).

В то же время не хватает данных о местной нитрооксидергической регуляции мышечных клеток, железистых образований и кровеносных сосудов микроциркуляторного русла (Паршина С.С., 2006; Маев И.В., 2008). Сведений, касающихся особенностей синтеза NO в эпителии, гладких мышечных клетках пищевода у человека и животных, недостаточно. И они не синтезированы и не сопоставлены с топографией и значением других этимологических структур, таких как холин- и моноаминергические образования. В отличие от существующих литературных данных, в представленной работе исследованы каждая из оболочек пищевода в отдельности. Кроме того, самостоятельно рассмотрена иннервация кровеносных сосудов, дана сравнительная характеристика ГМК пшцеводно-желудочного сфинктера и миоцитов среднего отдела пищевода.

Цель и задачи работы. Установить нейрохимическую и ультраструктурную организацию нервного аппарата пищевода в соответствии с наличием в его стенке адвентициальной, мышечной, подслизистой и слизистой оболочек и на этой основе сделать заключение о роли каждой из них в функции пищевода как целостного органа..

В соответствии с целью решались следующие задачи:

1. Изучить цитохимическую и структурную организацию нервного аппарата оболочек пищевода.

2. Дать цитохимическую и структурную оценку организации нервного аппарата кровеносных сосудов пищевода.

3. Установить особенности иннервации нижнего пищеводного сфинктера.

4. В пищеводно-желудочном сфинктере идентифицировать нитроок-сидергические нейроны и показать их количество и связь с мышечными, железистыми эффекторами и кровеносными сосудами.

Научная новизна. Впервые исследована самостоятельно каждая оболочка стенки пищевода и в соответствии с ее функцией установлены особенности иннервации каждой в отдельности. В адвентиции найдены

микроганглии чувствительных нейронов. Установлено, что нервный аппарат средней оболочки не ограничивается иннервацией мышц, его нейроны иннервируют железистый аппарат слизистой и подслизистой оболочек. Микрососудистое русло всех оболочек пищевода имеет эф-фекторную холинергическую/нитрооксидергическую иннервацию, которая осуществляется нейронами Догеля первого типа в основном Ау-

эрбахова сплетения.

Анализ данных литературы показал, что вопросы сравнительной характеристики ГМК пищеводно-желудочного сфинктера и миоцитов среднего отдела пищевода человека изучены недостаточно. Установлено, что концентрация нервных волокон в нижнем пищеводном сфинктере значительно выше других отделов органа, что соответствует уровню развития мышечных элементов данной структуры.

Теоретическое и практическое значение. Полученные сведе- -ния расширяют представление о механизмах регуляции пищевода. Приведенные в работе данные о функциях оболочек пищевода, интегрируемых в его физиологическую деятельность, как целостного органа, посредством местных и центральных механизмов, важны для изучения процессов иннервации и васкуляризации данного органа, а также для исследования патогенетических механизмов при заболеваниях пищеварительной системы. Результаты могут быть использованы в научно-исследовательских работах, лекционном курсе и при проведении практических занятий по гистологии у студентов медицинских вузов.

Апробация работы. Основные положения диссертационной работы были доложены и обсуждены на научной конференции «Успехи современного естествознания», 2003. Тихоокеанских научно-практических конференциях с международным участием студентов и молодых ученых «Актуальные проблемы экспериментальной, профилактической и клинической медицины» III (Владивосток, 2002); V (Владивосток, 2004); IX (Владивосток, 2008); X (Владивосток, 2009); XI (Владивосток, 2010).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 9 работ, . в том числе 1 - в журнале, рекомендуемом ВАК для публикации материалов докторских диссертаций.

Структура и объем диссертации. Работа состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, шести глав, отражающих результаты собственных исследований, обсуждения, выводов и списка литературы, состоящего из 186 источников, в том числе 96 отечественных и 90 зарубежных авторов. Текст иллюстрирован 69 рисунками, 4 таблицами и 3 приложениями.

На защиту выносятся следующие положения:

1. Нейроны адвентиции пищевода, положительно реагирующие на синтазу оксида азота, являются начальным звеном местных рефлексов.

2. В Ауэрбаховом сплетении мышечной оболочки существует прямая связь нитрооксидергических/холинергических аксонов с мышечными волокнами, ГМК, мастоцитами и кровеносными сосудами.

3. Простые трубчатые железы кардиального типа нижней трети пищевода и мышечная пластинка слизистой получают иннервацию от нейронов слизистой оболочки и подслизистой основы пищевода. Дополнительно трубчатые железы и мышечная пластинка пищевода иннерви-руются из Ауэрбахова сплетения аксонами нейронов первого типа.

4. Кровеносные сосуды оболочек пищевода получают двойную нитро-оксидергическую/холинергическую и моноаминергическую иннервацию.

5. Все оболочки пищевода имеют хорошо развитую сенсорную иннервацию. Дендриты протонейронов образуют в основном два вида рецепторов: древовидные окончания с широким ветвлением терминальных ветвей и густые нервные клубочки с высокой концентрацией тончайших нервных волокон.

6. Функция оболочек интегрируется в физиологическую деятельность пищевода, как целостного органа, местными (Ауэрбахово сплетение) и центральными механизмами, главным образом системой блуждающего нерва.

Соответствие диссертации паспорту специальности. Согласно формуле специальности, клеточная биология, цитология, гистология-область науки, занимающаяся исследованием происхождения, строения, развития, функционирования клеток и тканей, их взаимодействия в процессе жизнедеятельности организма как в норме, так и при различных патологических нарушениях. Отраженные в диссертации научные положения соответствуют формуле и области исследования специальности 03.03.04 - клеточная биология, цитология, гистология.

ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Материалы и методы исследования. Иннервация пищевода кошки, крысы и человека изучалась на всем протяжении, включая верхнюю, среднюю и нижнюю трети. Исследование проводилось на белых половозрелых крысах-самцах (массой 150-165 грамм), содержащихся в стандартных условиях вивария (п=17), кошках (п=6) и ау-топсийном материале (п=8). Материал обрабатывали в течение 20 мин после забоя; эвтаназия крыс проводилась путем декапитации. Исследовались кошки, погибшие от травм или во время операций и не имевшие к моменту смерти патологии органов пищеварения. Пищевод изымался на всем протяжении для изготовления продольных и поперечных срезов.

Аутопсийный материал получен при судебно-медицинской экспертизе (п=8), от умерших или погибших в возрасте 32-65 лет от случайных причин, не связанных с патологией органов пищеварения. Из пищевода (верхняя, средняя и нижняя части) вырезали кусочки до 1,5 см для изготовления продольных и поперечных срезов.

В работе использованы морфологические (импрегнация азотнокислым серебром по Кахалю, окраска гематоксилин-эозин, окраска ме-тиленовым синим), гистохимические (ЫАОРН-диафораза, метод Келле, метод Фурнеса и Коста с глиоксиловой кислотой), электронномикро-скопический и морфометрические методы.

1. Морфологические методы. Кусочки пищевода толщиной 0,5 фиксировали в нейтральном формалине и импрегнировали т Ю1о по методу Кахаля и изготовляли срезы толщиной от 25 до 30 мкм. Цитоархи-тектоника и структура нейронов пищевода изучалась с применением окраски гематоксилин-эозином и метиленовым синим; окраска производилась по общепринятой методике (Меркулов, 1968).

2. Гистохимические методы. Холинергические нервные проводники устанавливали на препаратах, приготовленных на криостате по активности ацетилхолинэстеразы тиохолиновым методом Келле. Препараты выдерживали в инкубационной среде, используя в качестве субстрата ацетилтиохолин йодистый. Инкубацию проводили в термостате при постоянной 1°-ре 37°С от 30 мин до 2х часов. Для определения биогенных аминов использовали флуоресцентно-гистохимический метод Фур-

неса и Коста с глиоксиловой кислотой. Флуоресценцию продуктов реакции наблюдали и фотографировали на люминесцентном микроскопе MJI-2 при свете с длиной волны 390 - 410.

NADPH-диафоразу, исследовали методом предложенным Норе, Vincent (1989). Метод позволяет диагностировать морфологию нейронов за счет выявления тел и отростков. Изучение состояния фермента проводилось на срезах, взятых из верхней, средней и нижней частей пищевода. Материал погружали в охлажденный, приготовленный на 0,1 M фосфатном буфере (pH 7,4) 4% параформальдегид, который из всего класса диафораз сохраняет активность только NADPH-диафоразы; два часа фиксировали при температуре 4°С, затем сутки промывали при той же температуре в 15% растворе сахарозы. Из замороженных в криостате срезов изготавливали образцы толщиной 10 мкм, монтировали на предметные стекла и помещали в среду. Инкубацию проводили в течение 60 мин при температуре 37°С, после чего ополаскивали в дистилляте, обезвоживали и заключали в бальзам. Обработку изображения проводили с помощью программ Adobe Photoshop 5.0. Активность фермента выражали в единицах оптической плотности (ЕОП).

3. Электронная микроскопия. Для электронной микроскопии кусочки материала размером 1-2 мм фиксировали в 2-5% растворе глю-таральдегида на 0,1 M фосфатном буфере (ph 7,3) в течение двух часов при t°-pe 4°С. Дофиксацию проводили в 1% 4окси осмия в течение двух часов при той же температуре. Обезвоживали материал в спиртах возрастающей крепости от 70° до 100°. После чего материал заливали в смесь эпона-812 и эралдита. Из блоков изготавливали срезы, которые изучали в электронном микроскопе на базе института микробиологии.

4. Морфометрия. Морфометрическую обработку данных проводили с помощью видеосистемы, смонтированной на микроденситометре Olimpus (видео-тест-5.0) Определяли величину мышечных клеток, количество нейронов, среднюю площадь нейрона, среднюю площадь ядра, толщину аксона; высчитывали среднее арифметическое, стандартную ошибку и критерий различий. Разницу между средними арифметическими считали достоверной при значении р<0,05.

Использованные методы и количество изготовленных препаратов представлено на табл. 1.

Таблица 1

Методы и количество изученных препаратов

Количество изученных препаратов

Методы крыса (п= 17) кошка (п=6) человек(п=8)

ИАОРН-диафоразу 20 10 20

Импрегнация по Кахалю - - 15

Метиленовым синим 12 9 12

Гематоксили-эозин 8 8 8

Келле 10 - -

Фурнеса и Коста 10 - -

Электронная микроскопия 12 - 10

Результаты исследования и их обсуждение

Оболочки пищевода, имея определенную автономность, образуют орган как целое. Орган имеет ключевые нервные механизмы, обеспечивающие его интегративную деятельность. В плане относительной автономности оболочек, особенностей их иннервации и васкуляризации мы подведем некоторые общие итоги наших исследований.

Одной из наиболее заметных структур адвентициальной оболочки пищевода мы считаем наличие в ней небольших групп нейронов. Гетерото-пические псевдоуниполяры установлены у человека, кошки, крысы (табл. 2). Они - постоянные образования адвентиции и являются чувствительным элементом местных рефлексов. В адвентиции пищевода у всех исследованных видов установлены довольно крупные нервы. Они делятся на ветви разной толщины, которые частично пенетрируют мышечную оболочку. В составе нервов имелись как мякотные волокна толщиной 12-18 мкм, так и типичные безмякотные кабельной организации. В цитоплазме одной швановской клетки находилось 10-20 аксонов диаметром от 0,3 до 1 мкм.

Перерезкой блуждающего нерва у крыс установлено, что в нервах адвентиции имеются преимущественно мякотные преганглионарные волокна. В то же время тонкие амиелиновые аксоны молиниформного вида сохраняли анатомическую целостность и, очевидно, были симпатическими. Цитохимическая ревизия нервов показала наличие в них адренергических аксонов и вывод об их симпатической природе не может быть оспорен.

Таблица 2

Морфометрические характеристики чувствительных нейронов адвентиции пищевода

э ш Кол-во нейронов в группе «усл. узле» Ср.Б (в мкм2) нейрона 5 о св о. ч В! ХЛ О. и Оптическая Плотность осадка на ЫАОРН-с! (ЕОП) Активность N0-cинтaзы Примечания

Человек (п=8) 9,0±3,2 732±32,1 168±8,1 0,493±0,2 высокая Спорадические нейроны имеют 8=1641 мкм2 и не реагируют на 1ЧАОРН-с1

(9 ^ й чо § О С, 12±2,1 710±41,2 156±6,9 0,539±0,19 высокая

Крыса (п=17) 10±1,5 705±39,6 170±12,2 0,546±0,3 высокая

Адвентиция пищевода является источником интерорецепторных рефлексов. Толстые мякотные нервные проводники, исключая преганг-лионарные волокна, являются чувствительными, так как образуют в наружной оболочке пищевода типичные по строению древовидные и клу-бочковые рецепторы.

Из трех исследованных нами видов наиболее мощное развитие имеет мышечная оболочка человека. На протяжении оболочки имеется несколько сужений и расширений. В связи с клиническим значением особое внимание получил нижний пищеводный сфинктер. Мышечная оболочка пищевода человека структурно и функционально на протяжении органа заметно меняется. В верхних отделах она состоит из поперечно-полосатой мышечной ткани, а в нижних отделах оболочку формируют гладкие мышечные клетки (ГМК). Однако обе ткани функционально автономны, их работа не контролируется сознанием. У крысы

мышечная оболочка на всем протяжении пищевода образована поперечно-полосатой мышечной тканью. У кошки эта ткань в нижней под-диафрагмальной части полностью заменяется ГМК.

Взаимодействие между нервами и мышечным вооружением пищевода является одной из особо важных проблем. Прямыми микроскопическими наблюдениями нами установлено, что с мышцами взаимодействуют постганглионарные холинергичесике волокна местных нейронов. Таких волокон, как показывают наши исследования, довольно много. Они образуют на мышцах характерные терминала с двигательной функцией. Структура двигательного аппарата лучше определяется импрегнацией материала азотно-кислым серебром. Терминали имели гроздевидный тип и напоминали двигательную бляшку. Сходные терминали установлены нами при исследовании нитрооксидсинтазы.

В циркулярном слое гладких мышц пищевода человека такие гроздевидные аппараты идентифицировались неоднократно, иногда группами на ограниченном участке мышечной ткани. Наличие тер-миналей на мышцах пищевода окончательно доказано электронно-микроскопическими исследованиями. На электроннограммах видны профили холинергических и адренергических окончаний, расположенных от ГМК на расстоянии 250 нм- 1,5 мкм. Однако это не препятствует аксональному комплексу взаимодействовать с мышцами путем объемной нейротрансмиссии.

Мы полагаем, что в регуляции мышц пищевода решающее значение имеют не нервные окончания, а многочисленные варикозные утолщения аксона. Система этих утолщений позволяет вовлекать в рабочий акт одновременно группы мышечных волокон и воздействовать на всем их протяжении.

Между поперечным и продольным мышечными слоями располагаются межмышечное или Ауэрбахово сплетение, которое у животных и человека хорошо развито. Оно состоит из одиночных нейронов, их групп и сетей из нервных волокон, большинство из которых идентифицируется на ЫАЕ)РН-<1. У крысы в межмышечном соединительнотканном интерстиции на всем протяжении пищевода нейроны имеют высокую активность нитрооксидсинтазы. Это в основном клетки первого типа. Очень редко выявлялись мини нейроны, которые характерны для

межмышечного сплетения крысы. Мини нейроны чаще наблюдались в верхней части проксимального отдела пищевода.

Группы нейронов межмышечной локализации нельзя назвать истинными ганглиями. Они не имели капсулы, т.е. не были выделены из межуточной ткани, не имели собственного микроциркуляторного русла; их трофика зависела от интерстициальных капилляров. Группы нейронов включали от 8 до 12 клеток примерно одинаковой величины и формы. Около нервных клеток постоянно выявлялись густые сети из тонких молиниформных нитрооксидергических волокон. Из нервных сетей, а иногда прямо от тел нервных клеток отходили в мышечную ткань аксоны, которые стелились по мышечному волокну, контактируя с ним ве-ретеновидными утолщениями. Связи между нейронами и стенками кровеносных сосудов наблюдались постоянно. В сплетениях из нитрооксидергических волокон у крысы располагались группами тучные клетки диаметром в 15-20 мкм. Аксоны нервных сплетений взаимодействовали с мастоцитами и, вполне вероятно, могли контролировать их функцию с помощью объемной (дистантной) трансмиссии.

У кошки межмышечное сплетение развито несколько лучше, чем у крысы. Отдельные нитрооксидергические нейроны - это довольно редкое явление. Группы клеток состояли из 8-12 нейронов. Нервные сплетения имели густую сеть аксонов, среди которых лежали нейроны различной величины и формы. Из сплетений начинались волокна, которые контурировали ГМК в продольном и циркулярном слоях оболочки.

Довольно крупные ярко окрашенные нервы и отдельные нитрооксидергические веретеновидные волокна десятками присутствовали в циркулярном слое по всей его толщине. По ходу они давали тончайшие коллатерали, которые контактировали утолщениями с оболочкой мышечной клетки, так же плотно, как это мы наблюдали у крысы.

В продольном слое нитрооксидергические нервы шли параллельно пучками из миоцитов и крайне редко обменивались между собой аксонами. Общее построение Ауэрбахова сплетения кошки качественно не отличалось от того, что наблюдалось нами у крысы. Количественные различия, несомненно, были, так как у кошки пищевод больше, чем у крысы и в длину, и в толщину.

Организация Ауэрбахова сплетения пищевода человека в основных своих чертах повторяла организацию его в пищеводе крысы и кош-

ки. Нервные сплетения животных и человека различались, прежде всего, по количественным параметрам, которые соответствовали длине и толщине пищевода, массивностью мышечного вооружения.

В межмышечном сплетении человека формировались нервные ганглии. Они имели тонкую хорошо различимую соединительнотканную оболочку. Ее пенетрировали мелкие кровеносные сосуды, распадавшиеся в узле на капилляры. Узлы имели в длину до 1 мм и в толщину до 0,5-0,6 мм. Их форма разнообразилась от довольно правильной овальной до сильно вытянутой веретеновидной, иногда узел суживался до формы похожей на копье. В срезах узла насчитывалось не менее 10 и очень редко до 15 нейронов. Относительное число нитрооксидергических нейронов у человека составляло 79%; у крысы их содержание поднималось до 89% (рис. 1). Одиночные нейроны встречались редко, то есть большинство их было аккумулировано в ганглии. %

100 90 -80 70 -60 50 40 -30 -20 -10 -0 —

Крыса Кошка Человек

Рис. 1. Относительное число нейронов с положительной реакцией на ИАОРН-с!.

89

77

т79

Большинство нейронов это типичные клетки первого типа. От их тела широким основанием отходили толстые короткие дендриты, заканчивающиеся рецепторными площадками. У человека преобладали нейроциты с профильным полем от 896,68 до 1916,94 мкм2. У крысы по размеру профильного поля преобладали клетки от 213,29 до 916,31; у кошки большинство нейронов имели поле 794,91, а самые крупные клетки уступали по размерам нейронов человека и крысы (рис. 2).

мкм2

1800 1600 -1400 1200 -1000 800 -600 400 200

0

Человек Кошка Крыса

в Крупные нейроны в Средние нейроны □ Малые нейроны Рис. 2. Профильное поле нейронов. Диаграмма составлена согласно табл. 3.

Мы считаем, что территорию Ауэрбахова сплетения нельзя ограничивать межмышечной областью. Оно простирается на всю толщу стенки пищевода и имеет отношение ко всем его клеточным и тканевым структурам. Вероятно, аксоны нейронов Ауэрбахова сплетения составляют не малую долю нервных элементов подслизистой оболочки.

В пищеводе выделяют некоторое число сужений. Однако к типичному сфинктеру относят только один - нижний пищеводный или

пище водно-желудочный, который начинает формироваться у детей 4-5 недель, его организация заканчивается в юношеском возрасте (Еремченко К.В., 2009). У животных, например, крыс характерного сфинктера нет.

Толщина ГМК сфинктера больше толщины клеток средней части пищевода, по активности >Ю-синтазы они не различаются (табл. 3).

Таблица 3

Морфометрия гладких мышечных клеток_

Средний диаметр Плотность осадка

в ядерной части (в мкм) при реакции наИАОРН-с! (ЕОП)

Вид нижний сфинктер средняя часть пищевода нижний сфинктер средняя часть пищевода Активность

ОО Различий в ак-

II з, тивности N0-

м <и д о 3,75±0,01 1,66±0,02 0,279±0,03 0,264±0,04 синтазы между сфинктером и

¡3 средней частью

пищевода нет

я! э ? о с - 1,96±0,03 - 0,238±0,09 -

Примечание: различия в диаметре миоцитов между сфинктером и средней частью пищевода достоверны (р < 0,001). Различия в активности ОДОРЬМ не достоверны (р>0,05).

Вдоль ГМК располагаются тонкие нитрооксидпозитивные аксоны, которые находятся по бокам клеток. Реакция на ацетилхолинэстеразу показала наличие в сфинктере ограниченного числа холинергических нейронов, собранных в группы по периферии пищеводного сужения. Обилие холинергических нервных волокон, сопровождающих ГМК, допускает предположение о том, что часть нервных проводников приходит из других узлов Ауэрбахова сплетения. Количественный анализ аксонов на препаратах, окрашенных на NADPH-диaфopaзy и препаратах, на которых идентифицирована ацетилхолинэстераза, показывает их

примерное равенство (18 против 20, 17 против 19). Это убеждает нас в том, что это один и тот же аксон имеет оба фермента.

Рефлекторная регуляция функций нижнего пищеводного сфинктера всецело зависит от наличия в нем нервных рецепторов, их количества и особенностей структурной организации. Импрегнация соответствующего материала выделила характерные для местного афферентного аппарата структуры. Прежде всего, наличие толстых нервных волокон типа А, для которых характерны многочисленные дихотомии с образованием дочерних веточек. Эти волокна являются дендритами чувствительных клеток узлов блуждающего нерва. Дендриты формировали в пределах сфинктера рецепторы двух видов. Одни из них имели форму рыхлых клубочков и располагались одновременно на стенке артериолы и рядом в интерстиции. Они образованы в большинстве сильно извитыми нервными волокнами. В формировании солитарных нервных клубочков принимали участие иногда несколько чувствительных волокон.

Таким образом, сфинктер имеет афферентные и эфферентные нервные формирования, которые обеспечивают его нервно-рефлекторную регуляцию.

В слизистой и подслизистой основе имеются единичные нейроны, дающие положительную реакцию на ИАОРН-диафоразу. Прямыми микроскопическими наблюдениями установлено, что они имеют отношение к иннервации ГМК слизистой оболочки и простых трубчатых желез. Этих клеток явно недостаточно для полной иннервации железистых и сократительных клеток мышечной пластинки слизистой. Нами замечено, что полнота их иннервации более значительна, чем число местных нейронов. Поэтому иннервацию слизистой оболочки дополняют аксоны клеток межмышечного сплетения, которые поднимаются до базальной мембраны многослойного плоского эпителия и, местами пенетрируя ее, заканчиваются на основании примембранных эпителиоцитов.

Эфферентную нитрооксидергическую иннервацию получают слизистые железы подслизистой пластинки. По внутренней поверхности этих железистых органов циркулярно располагаются сети из нитроок-сидергических аксонов, образующие густые сплетения в основании желез. Оксид азота, триггером которого является ацетилхолин, регулирует секрецию слизи, постоянно покрывающую эпителиальную поверхность

пищевода. Железы подслизистого слоя получают эфферентную иннервацию из мышечного сплетения. Из него начинаются аксоны, объединяющиеся в пучки. Разветвляясь веерообразно, они пронизывают железу от основания до общего протока, тесно с ним контактируя. Слизистая оболочка и подслизистая основа имеют развитую сеть из микрососудов и среди них особо высокую концентрацию капилляров. Вся микроцир-куляторная система обильно иннервирована нитрооксидергическими аксонами.

Слизистая оболочка пищевода чувствительна к температурным и механическим раздражителям, способным вызвать болевые ощущения, в которых принимают участие чувствительные нервы. Мякотные проводники вагуса образуют нервные рецепторы, часть из которых принадлежит нейронам спинномозговых узлов и, вероятно, местным сенсорным нейроцитам (Амвросьев Д.П; Ковик JI.H., 1978). Последних очень мало и охватить весь пищевод чувствительными нервными окончаниями они не в состоянии. Поэтому основная чувствительность тканей пищевода зависит от псевдоуниполярных нейронов верхних грудных ганглиев (Емануйлов А.И., 2004), и, как нами показано ранее, от нейронов блуждающего нерва. Следовательно, в слизистой оболочке и под-слизистой основе имеется свой местный и центральный нервно-рефлекторный аппарат, обеспечивающий весь объем функций этих оболочек. Определяющим трофическим фактором всей деятельности пищевода являются структурно-функциональные составные его сосудистой системы.

В нашей работе показано, что вся микрососудистая сеть оболочек представляет собой терминальные ветвления артерий наружной оболочки пищевода. Распадаясь на ветви, эти сосуды заметнее всего обеспечивают трофику средней оболочки. Ее мышечное вооружение постепенно уменьшается, количество мышечных слоев сокращается до одного на терминальных артериолах. В соответствии с этим изменяется на стенке артерии содержание нервных волокон, количество их на артериолах падает до 3 - 4, иногда собранных в тонкий пучок.

Мы уделили наибольшее внимание нитрооксидергической иннервации сосудов пищевода, прежде всего потому, что, если нервный аппарат органа, особенно Ауэрбахово нервное сплетение, исследовано в многочисленных работах (Колосов Н.Г., 1956; Шугольский В.Ф., 2008),

то кровеносным сосудам уделено недостаточное внимание. Отмечена возможность аксонов клеток I типа вступать в сосудистые периадвенти-циальные нервы. Этот очень важный факт нами подтвержден и зарегистрирован многократно, как свидетельство парасимпатической иннервации кровеносных сосудов пищевода. Исследование ацетилхолинэсте-разы и NADPH- на предмет наличия холинергических/нитрооксидер-гических аксонов и клеток подтверждает это положение. Холинергиче-ские волокна диагностированы и электронномикроскопическими исследованиями. В терминалях аксона установлены электронносветлые си-наптические пузырьки.

Элементы моноаминергической иннервации выявлены в виде довольно густых сетей из веретеновидных ярко люминесцирующих волокон. Их терминала, взаимодействующие с мышечными клетками, заключают синаптические везикулы до 120 нм с электронноп-лотными глобулами или пузырьки 40 - 50 нм с одной точечной гранулой; это, несомненно, моноаминергические аксоны и окончания.

Можно считать, что в иннервации мышечной оболочки артерии принимают участие холин/нитрооксидергические и моноаминергические нервные механизмы. Наиболее яркие доказательства об участии в местной регуляции сосудов и тучных клеток показаны на крысах. На примере многих органов доказано, что холинергическая иннервация обеспечивает выведение из мастоцитов биологически активных веществ в среду, а адренергические нервы стимулируют секреторные процессы в этих клетках. Нитрооксидергические аксоны находятся рядом с мастоцитами и, очевидно, могут считаться по отношению к тучной клетке эффекторными.

Многолетние дискуссии о возможности эффекторной нервной регуляции капиллярного кровотока оказались малорезультативными. Показано, что двигательная иннервация, регулирующая приток крови в капиллярах, заканчивается на терминальных артериолах. В результате поиска капиллярных эффекторов в эндотелии капилляров мозга найдена холинацетилтрансфераза, синтезирующая ацетилхо-лин (Черток В.М., 1980; Мотавкин П.А., 1983). Другой фермент хо-линергической трансмиссии, ацетилхолинэстераза, описана на микрососудах мозга многократно (Furchgott R.F., 1980; Zoccoli G., 2000 et. al.). Совокупность ХАТ и АХ решает одну сторону подвижности

капилляров, например, их дилатацию. Этот механизм взаимосвязан со способностью эндотелия капилляра синтезировать N0. Реакцию капилляра - его сужение, при наличии в эндотелиоцитах активных филаментов, может выполнять эндотелии. В подвижности капилляра играют роль перициты. Капиллярный кровоток зависит, бесспорно, от функций нитрооксидергических нервов. Аксоны идут в пучках и по отдельности, то приближаясь вплотную к стенке сосуда, то удаляясь от нее.. Эти дистанции не превышают 250 нм - 1,5 мкм, а местами аксон прилегает вплотную к стенке капилляра. Обозначенные расстояния не препятствуют аксону взаимодействовать со стенкой микрососуда.

Недавними исследованиями установлено, что капилляры большинства органов, имеют чувствительную иннервацию (Григорьева, 1954). Особого внимания заслуживают нервные рецепторы поливалентного типа, иннервирующие одновременно разные тканевые элементы. Через них возможна интегрированная регуляция оболочек пищевода. Большое значение в интегративной функции принадлежит униполярному нейрону, дендриты которого, широко ветвясь, захватывает всю толщу стенки пищевода, и его значительную территорию по длине. Именно за это свойство акад. Заварзин (1985) назвал чувствительный нейрон поливалентным. Нервные рецепторы этой организации установлены нами во всех оболочках пищевода. Общие принципы организации нервного аппарата у исследованных нами животных и человека в основных своих чертах весьма сходны.

Имеются чисто количественные различия, они связаны с особенностями строения пищевода, его длиной и толщиной стенок. Различия в количестве нейронов в условном нервном узле и в равной единице площади у человека и животных одинаковы. Нейроны статистически не различаются по размерам и активности МАОРН-диафоразы. Надо полагать, что все МО-ергические нейроны с их отростками и окончаниями являются холинергическими. В то же время адренергические клетки не экспрессируют N0.

В наших исследованиях это доказывается весьма наглядно на примере моноаминергических тучных клеток. Их много у крысы, они имеют размеры по диаметру от 15 до 20 мкм; встречаются изредка экземпляры до 30 мкм. Ни в одном случае мы не зарегестрировали в

этих клетках положительную реакцию на 1^1АОРН^. Хотя в условиях патологии, при смене позиционной информации, этот фермент может экспрессироваться (Мотавкин, Гельцер, 1999).

Каждая оболочка пищевода в соответствии со своим положением и структурной организацией имеет заметные различия в содержании нервных элементов. Только в наружной оболочке содержатся нейроны сходные с чувствительными псевдоуниполярами и крупные нервные стволы центрального происхождения.

По количественному содержанию нейронов выделяется мышечная оболочка, где имеются клетки первого и второго типов и мини-нейроны в составе Ауэрбахова сплетения. Установлено твердо, что нейроны его являются в основном холинергическими, а их N0-ергическая характеристика раньше нас была показана в работах Романовой (2004) и Мотавкина (1998, 2000); наши результаты совпадают с данными исследованиями. Нами достоверно установлено, что аксоны первого типа вступают в периферические нервы и иннерви-руют не только мышцы, но и кровеносные сосуды пищевода.

Среди особенностей организации слизистой и подслизистой оболочек следует считать наличие желез и мышечной пластинки. Она хорошо развита в нижних отделах пищевода, но в верхних отделах представлена отдельными мышечными пучками. В подслизистой и слизистой встречаются мини-нейроны. Количество их не велико. Крупные пучки нервов, подходящих к собственной пластинке слизистой оболочки приходят из Ауэрбахова сплетения.

Обильную >Ю-ергическую иннервацию, за счет нервов межмышечного сплетения, получают железы подслизистой и простые трубчатые железы пищевода. Нервы отвечают за секрецию и выделение на поверхность пищевода секрета, увлажняющего его покровный эпителий.

Целостную работу пищевода, связь оболочек в орган обеспечивают два механизма: центральный парасимпатический - блуждающий нерв, участие которого мы показали в эксперименте, и симпатический -адренергические волокна которого постоянно имеются в пищеводе; а также местный механизм, в котором принимают чувствительные и эф-фекторные, в основном холин/нитрооксидергические интрамуральные нейроны и, по всем данным, тучные клетки.

ВЫВОДЫ

1. Исследована структура, цитохимия и энзимохимия нервного аппарата пищевода в соответствии с организацией его стенки из оболочек у человека, кошки, крысы.

2. В адвентиции пищевода установлено наличие местных нейронов с сенсорной функцией, положительно реагирующих на нитрооксид-синтазу. Высказано предположение, что эти нейроны могут быть начальным звеном местных рефлексов.

3. В Ауэрбаховом сплетении мышечной оболочки выявлены нитроок-сидергические/холинергические нейроны, в основном первого типа Догеля. Показаны связи нитрооксидергических/холинергических аксонов с поперечно-полосатыми мышечными волокнами, гладкомы-шечными клетками, мастоцитами и кровеносными сосудами.

4. В слизистой оболочке и подслизистой основе найдено ограниченное число нитрооксидергических/холинергических нейронов, участвующих в иннервации tunica muscularis mucosae и простых трубчатых желез.

5. Железы подслизистой основы иннервируются из Ауэрбахова сплетения нитрооксидергическими/холинергическими аксонами нейронов первого типа. Нервные сплетения охватывают выводные протоки и альвеолярно-трубчатые отделы главных желез.

6. Нижний пищеводно-желудочный сфинктер человека образован из гладкомышечных клеток, имеющих достоверно больший диаметр, чем соответствующие клетки среднего отдела пищевода. Сфинктер иннервируется местными нейронами межмышечного сплетения.

7. Артерии и вены оболочек пищевода получают двойную нитроок-сидергическую/холинергическую и моноаминергическую иннервацию. Капилляры на всем протяжении сопровождаются нитроок-сидергическими аксонами.

8. Все оболочки пищевода имеют хорошо развитую сенсорную иннервацию. Дендриты протонейронов образуют два вида рецепторов: древовидные окончания и густые нервные клубочки с высокой концентрацией нервных волокон.

9. Деятельность оболочек пищевода интегрируется местными (Ауэр-бахово сплетение) и центральными механизмами, главным образом системой блуждающего нерва.

СПИСОК НАУЧНЫХ РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Вавилова И.И. Нитрооксидергические нейроны пищевода человека и крысы // Актуальные проблемы экспериментальной, профилактической и клинической медицины: Тез. докладов III Тихоокеанской науч.-практ. конф. - Владивосток. 2002. - С. 21.

2. Вавилова И.И. Морфологические основы NO-ергической регуляции органов желудочно-кишечного тракта // Успехи современного естествознания. - 2003. -№ 10. - С. 96-98.

3. Вавилова И.И. Особенности NO-продуцирующей функции эпителия и нервного аппарата пищевода у крысы и человека.// Успехи современного естествознания. - 2003. - № 7. - С. 120-123.

4. Вавилова И.И. Нитрооксидергическая иннервация пищевода крысы // Актуальные проблемы экспериментальной, профилактической и клинической медицины: Тез. докладов V Тихоокеанской науч.-практ. конф. - Владивосток. 2004. - С. 19.

5. Вавилова И.И. NO-ергическая иннервация артериол нижнего отдела пищевода // Актуальные проблемы экспериментальной, профилактической и клинической медицины: Тез. докладов IX Тихоокеанской науч.-практ. конф. - Владивосток. 2008. - С. 34-35.

6. Вавилова И.И. Нитрооксидергическая иннервация поперечнополосатых мышц пищевода // Актуальные проблемы экспериментальной, профилактической и клинической медицины: Тез. докладов III Тихоокеанской науч.-практ. конф. - Владивосток. 2009.-С. 23.

7. Вавилова И.И. Местная афферентная иннервация пищевода // Актуальные проблемы экспериментальной, профилактической и клинической медицины: Тез. докладов III Тихоокеанской науч.-практ. конф. - Владивосток. 2009. - С. 24.

8. Вавилова И.И., Андреева H.A., Романова Н.Е. Эффекторная иннервация внутриорганных артериол пищевода // Тихоокеанский медицинский журнал. 2009. № 1. С. 37-39.

9. Вавилова И.И. Нитрооксидергическая иннервация кровеносных сосудов //Актуальные проблемы экспериментальной, профилактической и клинической медицины: Тез. докладов XI Тихоокеанской науч.-практ. конф. - Владивосток. 2010. - С. 26-27.

Вавилова Ирина Ивановна

ГИСТОХИМИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ИННЕРВАЦИОННЫХ СТРУКТУР ПИЩЕВОДА

03.03.04 - клеточная биология, цитология, гистология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Подписано в печать 05.10.2011 Формат 60x90 1/16. Усл. п.л. 1,0. Уч. изд. л. 0,75. Тираж 100 экз. Заказ 676

Отпечатано на участке оперативной полиграфии типографии ООО «Рея» г. Владивосток, ул. Адм. Юмашева, 426

Содержание диссертации, кандидата медицинских наук, Вавилова, Ирина Ивановна

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1.КТУРНАЯ ОРГАНИЗАЦИЯ ПИЩЕВОДА (ОБЗОР

ЛИТЕРАТУРЫ).

1.1 .Общая характеристика вегетативной нервной системы.

1.2. Интрамуральные ганглии.

1.3. Нервные волокна и их разновидности.

1.4. Нейроны и их морфологическая классификация.

1.5. Особенности иннервации пищевода.

1.6. Оксид азота в пищеварительной системе.„

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Морфологические методы исследования.

2.2. Гистохимические методы исследования.

2.3. Методы электронной микроскопии.

2.4. Морфометрические методы исследования.

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ.

3.1. Адвентиция пищевода.

3.2. Мышечная оболочка пищевода.

3.3. Слизистая и подслизистая оболочки пищевода.

3.4. Нижний пищеводный сфинктер.

3.6. Морфологические и гистохимические основы механизмов регуляции капиллярного кровотока.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Гистохимическая характеристика иннервационных структур пищевода"

Актуальность работы. Структурной организации и функциям пищевода посвящено значительное число оригинальных и обзорных работ [54, 9]. Тем не менее, интерес к этому органу, занимающему видное место в структуре болезней пищеварительной системы, сохраняется и в последние годы.

В оригинальных и итоговых работах самое важное место занимают исследования мышечной оболочки, учитывая ее двигательную активность [86, 7, 60]. Между тем, весь объем подвижности органа целиком зависит от состояния конечного нервного звена, которым, как известно, является межмышечное или Ауэрбахово сплетение [94, 3, 81]. Кроме перистальтики нервные клетки межмышечного сплетения регулируют секреторную деятельность слизистых (кардиального типа) желез и собственных желез подслизистой оболочки пищевода [90, 64].

Особое внимание исследователей привлекает структура, функция и иннервация нижнего (диафрагмального) пищеводного сфинктера [67, 79, 31, 9, 133, 182], обеспечивающего поступление пищи в желудок и препятствующего ее возвращению в пищевод. Известно, что желудочно-пищеводным рефлюксом страдает не мало практически здоровых людей [135]. Хотя в некоторых исследованиях наличие самого сфинктера, как и его роль замка между пищеводом и желудком, без каких-либо оснований умалчивается и даже полностью отрицается [40].

За последние двадцать лет возник и не уменьшается интерес к исследованиям оксида азота, как регулятора функций висцеральных систем [90, 113]. Подобными исследованиями охвачены фактически все органы пищеварительной системы, в том числе и пищевод [78, 60, 75].

Доказана локализация нитрооксидсинтазы и значение N0 в работе желез и при регенерации после повреждения слизистой желудка, взаимодействие N0 и

У1Р при регуляции тонуса гладких миоцитов и нарушениях моторики органов пищеварения [150, 113, 120, 166].

Особый интерес исследователей привлекает участие оксида азота в работе сфинктеров, активно обсуждается роль N0 в патогенезе пищеводной ахалазии [37, 182]. Следует отметить, что полученные данные носят весьма противоречивый характер. Так, если нижние сфинктеры пищевода и прямой кишки работают при прямом участии N0 [177, 118], то роль последнего, например, в регуляции пилорического сфинктера, не доказана.

Недостаточно сведений, касающихся ЫО-продуцирующей функции интрамуральных нейронов, а сравнительная характеристика активности фермента в данных клетках в пищеводе мало изучена.

Не вызывает сомнений тот факт, что эффекты N0 тесно связаны или опосредуются другими биологически активными веществами. В числе последних холецистокинин, цинк - и медьсодержащие соединения, СО [50, 70]. В то же время не хватает данных о местной нитрооксидергической регуляции мышечных клеток, железистых образований и кровеносных сосудов микроциркуляторного русла [55].

Сведений, касающихся особенностей синтеза N0 в эпителии, гладких миоцитах пищевода у человека и животных, недостаточно. И они не синтезированы и не сопоставлены с топографией и значением других энзимологических структур, таких как холин - и моноаминергические образования.

Цель и задачи исследования: установить нейрохимическую и ультраструктурную организацию нервного аппарата пищевода в соответствии с наличием в его стенке адвентициальной, мышечной, слизистой и подслизистой оболочек; и на основе этого сделать заключение о роли каждой оболочки в функции пищевода как целостного органа.

В соответствии с целью решались следующие основные задачи:

1. Изучить цитохимическую и структурную организацию нервного аппарата оболочек пищевода.

2. Дать цитохимическую и структурную характеристику организации нервного аппарата кровеносных сосудов пищевода.

3. Установить особенности иннервации нижнего пищеводного сфинктера.

4. В сфинктере пищевода идентифицировать нитроксидергические нейроны, дать их количественную характеристику и показать их связь с мышечными и железистыми эффекторами и кровеносными сосудами.

Научная новизна. Исследована самостоятельно каждая оболочка стенки пищевода и в соответствии с ее функцией установлены особенности иннервации. В адвентиции найдены микроганглии чувствительных нейронов. Нервный аппарат мышечной оболочки не ограничивается иннервацией мышц, его нейроны иннервируют железы слизистой и подслизистой оболочек. Микрососудистое русло всех оболочек пищевода имеет эффекторную холинергическую / нитрооксидергическую иннервацию, которая осуществляется нейронами Догеля первого типа, в основном Ауэрбахова сплетения. Установлено, что концентрация нервных волокон в нижнем пищеводном сфинктере значительно выше других отделов органа, что соответствует уровню развития его мышечных элементов. Эти данные характерны для пищевода человека, так как у животных (кошек и крыс) соответствующее образование отсутствует.

В отличие от существующих литературных данных, в представленной работе исследованы каждая из оболочек пищевода в отдельности. Кроме того, самостоятельно рассмотрена иннервация кровеносных сосудов и нижний пищеводно-желудочный сфинктер.

Теоретическое и практическое значение. Полученные сведения расширяют представление о механизмах регуляции пищевода. Приведенные в работе данные о функциях оболочек пищевода, интегрируемых в его физиологическую деятельность, как целостного органа, посредством местных и центральных механизмов, важны для изучения процессов иннервации и васкуляризации данного органа, а также для исследования патогенетических механизмов при заболеваниях пищеварительной системы.

Результаты могут быть использованы в научно-исследовательских работах, лекционном курсе и при проведении практических занятий по гистологии у студентов медицинских вузов.

Апробация работы. Основные положения диссертационной работы были доложены и обсуждены на научной конференции «Успехи современного естествознания», 2003. Тихоокеанских научно - практических конференциях с международным участием студентов и молодых ученых «Актуальные проблемы экспериментальной, профилактической и клинической медицины» III (Владивосток, 2002); V (Владивосток, 2004); IX (Владивосток, 2008); X (Владивосток, 2009); XI (Владивосток, 2010).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 9 работ, в том числе 1 - в журнале ВАК для публикации материалов кандидатских и докторских диссертаций.

Структура и объем диссертации. Работа состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, шести глав, отражающих результаты собственных исследований, обсуждения, выводов и списка литературы, состоящего из 187 источников, в том числе 97 отечественных и 90 зарубежных авторов. Текст иллюстрирован 69 рисунками, 4 таблицами и 3 приложениями.

Заключение Диссертация по теме "Клеточная биология, цитология, гистология", Вавилова, Ирина Ивановна

выводы

1. Исследована структура, цитохимия и энзимохимия нервного аппарата пищевода в соответствии с организацией его стенки из оболочек у человека, кошки, крысы.

2. В адвентиции пищевода установлено наличие местных нейронов с сенсорной функцией, положительно реагирующих на нитрооксидсинтазу. Высказано предположение, что эти нейроны могут быть начальным звеном местных рефлексов.

3. Ауэрбаховом сплетении мышечной оболочки выявлены нитрооксидергические / холинергические нейроны, в основном первого типа Догеля. Показаны связи нитрооксидергических / холинергических аксонов с поперечно-полосатыми мышечными волокнами, гладкомышечными клетками, мастоцитами и кровеносными сосудами.

4. В слизистой оболочке и подслизистой основе найдено ограниченное число нитрооксидергических / холинергических нейронов, участвующих в иннервации tunica muscularis mucosae и простых трубчатых желез.

5. Железы подслизистой основы иннервируются из Ауэрбахова сплетения нитрооксидергическими / холинергическими аксонами нейронов первого типа. Нервные сплетения охватывают выводные протоки и альвеолярно-трубчатые отделы главных желез.

6. Нижний пищеводно-желудочный сфинктер человека образован из гладкомышечных клеток, имеющих достоверно больший диаметр, чем соответствующие клетки среднего отдела пищевода. Сфинктер иннервируется местными нейронами межмышечного сплетения.

8. Все оболочки пищевода имеют хорошо развитую сенсорную иннервацию. Дендриты протонейронов образуют два вида рецепторов: древовидные окончания и густые нервные клубочки с высокой концентрацией нервных волокон.

9. Деятельность оболочек пищевода интегрируется местными (Ауэрбахово сплетение) и центральными механизмами, главным образом системой блуждающего нерва. цз

Библиография Диссертация по биологии, кандидата медицинских наук, Вавилова, Ирина Ивановна, Владивосток

1. Амвросьев А. П. Адренергическая иннервация пищевода // Известник АН БССР. Серия биол. наук,- 1974.-N2. С. 112-116.

2. Амвросьев Д. П., Ковик Л. Н. Экспериментально-морфологическое исследование источников происхождения чувствительной цереброспинальной иннервации // Известия АН СССР. Серия биол. наук. -1973. -N1.-0. 126-129.

3. Арабменский В.М., Сальман М.Ю. Физиология и патология двигательной функции пищевода. -М.: Наука, 1978. -208 с.

4. Арвеладзе Г.А. Строение сосудов микроциркуляторного русла разных органов у белых крыс в неонатальном периоде онтогенеза // Морфология. -2002.-Т. 121, N1. С.71-74.

5. Бажанов А.И. Структурная и гистохимическая характеристика слизистой оболочки пищевода в онтогенезе и в эксперименте: автореф. диссертации канд. мед. наук. М., 1965. - 23 с.

6. Баженов Д.В. Особенности двигательной иннервации исчерченной мышечной ткани пищевода // Арх. анатомии, гистологии и эмбриологии. 1986. - Т. 91, вып. 2.-С. 18-23.

7. Баженов Д.В., Блинова Н.В. Двигательная иннервация поперечнополосатых мышц внутренних органов человека // Актуальные вопросы экспериментальной и клинической морфологии. Томск, 2002. - вып. 2. - С. 26-27.

8. Баженов Д.В., Никитюк Д.Б. Пищевод человека. Тверь.: Болезни пищевода, -1998. - 162 с.

9. Байтингер В.Ф. Клинические аспекты анатомии нервного аппарата глоточно-пищеводного перехода//Вестн. оториноларингологии. 1991, N3. - С. 1 5-1 9.

10. Белоус Т.А. Пищевод Баррета: морфологичесике основы развития // Рос. журн. гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. 2002. - Т. 12, N5. - С. 63-66.

11. П.Блум С.Р. Ведение. Гормоны желудочно-кишечного тракта и заболевания человека // Физиология и патофизиология желудочно-кишечного тракта. М.: Медицина, 1989.-С. 11-16.

12. Богач П.Г. Механизмы нервной регуляции моторной функции толстого кишечника / Киев: Здоровье, 1961.- 121с.

13. Бордин Д.С. Клиническое значение манометрии пищевода // Эксперимент, и клинич. гастроэнтерология. 2009, N6. - С. 25-34.

14. Быков B.JI. Защитные механизмы покровного эпителия слизистой оболочки пищевода человека // Морфология. 2006. - Т. 130, N6. - С. 12-24.

15. Виноградов H.A. Многоликая окись азота // Росс. Журн. гастроэнт., гепатол., колонопроктол. 1997. N2. - С. 6-10.

16. Виноградов A.B., Журавлева И.А. Методы определения оксида азота в моче // Рос. кардиологический журн. 2003. - N2. - С. 63-66.

17. Витебский Я.Д. Питайтесь рационально. Курган: Б.и., 1991. - 111с.

18. Голуб Д.М, Даниленко Р.В., Ковалева JI.H. Ганглиопексия и реиннервация органов. Минск: Наука и техника, 1986. - 107, 2. с.

19. Горрен А.К. Майер Б. Универсальная и комбинированная энзимология синтазы оксида азота // Биохимия. 1998. - Т. 63, вып. 7. - С. 870-880.

20. Григорьева Т.А. Иннервация кровеносных сосудов. М.: Медгиз, 1954. -373 с.

21. Гуревич К.Г., Шимановский H.JI. Оксид азота: биосинтез, механизм действия, функции // Вопр. Биолог. Мед. и фарм.химии. -2000. -N4. С. 1622.

22. Джафарова У.Т. Микроскопическое строение кардиальных желез пищевода: спец. конф., посвященная 100-тию со дня рождения Д.А. Жданова // Морфология.- 2008. Т. 133, N4. - С. 68.

23. Долго-Сабуров Б.А. Иннервация вен. Экспериментально-морфологическое исследование. — JI: Медгиз. 1958. - 307 с.

24. Драпкина O.M. Пропедевтика заболеваний сердечно-сосудистой системы: -М.: Медицина-Вести, 2003.-С. 188.

25. Елисеева Е.В. Нитрооксидергическая регуляция легких. Владивосток: Примполиграф, 2001. - 178 с.

26. Елисеева Е.В., Шуматов В.Б., Дюйзен И.В. Реактивность NO-ергических нейронов спинно-мозговых узлов при травме // Морфология. 1998. - Т. 113, N3. - С. 135.

27. Емануйлов А.И., Маслюкова Е.А. Афферентная иннервация шейного отдела пищевода и трахеи в раннем постнатальном онтогенезе // Морфология. 2004. -Т. 125, вып. 3,- С. 54-56.

28. Еремченко К.В. Особенности строения пищевода у младенцев // Морфология -2009. -T.136,N4. -С. 55.

29. Заварзин A.A. Основы сравнительной гистологии: Учеб. пособие для спец. «Биология». Л.: Изд-во ЛГУ, 1985. - 400 с.

30. Зенков Н.К., Меныцикова Е.Б., Реутов В.П. NO-синтазы в норме и при патологии различного генеза // Вестник. -2000. N4. - С. 30-34.

31. Зиновьева И.Е. Конституционно-морфологические особенности пищеводно-желудочного перехода // Морфология. 1998. - Т. 113, N3. - С. 51.

32. Закономерности развития венозных сосудов человека. Е.И. Золина, Е.А. Архипов, О.Т. Векрацева и др. // Актуальные вопросы теоретической и практической медицины, сб. тр. Оренбург, 2005. - С. 81-86.

33. Ивашкин В.Т. Болезни пищевода: патологическая физиология, клиника, диагностика, лечение-М.: Триада, 2000. - 145 с.

34. Ивашкин В.Т., Драпкина О.М. Болезни пищевода и желудка: краткое практическое руководство. М.: МЕД пресс информ, - 2002. - 144 с.

35. Исеева Е.А. Морфофункциональные изменения эпителия пищевода при воздействии цитостатика // Морфология. 2006. - Т. 130, N6. - С. 62-67.

36. Ковалева С.В, Рудакова И.П., Исаева И.В. Методы определения азота // Фармация. 2004. - N5. - С. 3-6.

37. Кожевников И.А., Телашвили П.А., Баделяни Е.А. Этапы становления микрососудистых сетей пищевода человека // Морфология,- 2009. Т. 136. N4. - С. 76.

38. Колесников Л. Л. Анатомо-топографические исследования сфинктера пищеводно-желудочного перехода у человека // Арх. анатомии, гистологии и эмбриологии. 1990. - Т. 98, вып. 3. - С. 76-84.

39. Колесников Л.Л. Сфинктерный аппарат человека. СПб.: СпецЛит, 2000. -183 с.

40. Колосов Н.Г. Нервный аппарат пищевода человека // Вестник ЛГУ 1956. -Т. 15. - С.-73-98.

41. Конкин И. Ф. Морфологические изменения в нервном аппарате глотки, пищеводе и желудке кошек после однократно гравитационной перегрузки // Арх. анатомии, гистологии и эмбриологии. 1975.-Т. 69, вып. 7.-С. 33-35.

42. Крагошкин А.И., Дмитриенко С. В., Тольбранх В. Д. Клиническая анатомия пищеварительной и дыхательной систем: учеб пособие. Ростов н/Д: Феникс, 2007.- 108 с.

43. Кривов В.А., Аккуратов Е.Г. Центры и проводящие пути головного и спинного мозга: метод пособие 2-е изд. - Ярославль: Б. и., 1999. - 100 с.

44. Кузин Н.М. Пищевод Баррета проблема медицины XXI века // Рос. журн. гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии: - 2001. - Т. 11, N5. - .С. 710.

45. Куприянов В.В. Караченов Я.Л. Козлов В.К. Микроциркуляторное русло -М.: Медицина, 1975. 216 с.

46. Лаврентьев Б.И. Теория строения вегетативной нервной системы: Изб. М.: Медицина, 1983. - С. 256.

47. Лаврентьева И.Б. Морфология чувствительной и эфферентной иннервации интрамуральных ганглиев пищевода млекопитающих животных // Арх. анатомии, гистологии и эмбриологии. 1963. - №9. - С. 44-50.

48. Ломакин A.B., Мотавкин П.А. Капилляры головного мозга Владивосток: ДВНЦВН, 1983,- 139 с.

49. Маев И. В. Оксид азота и его роль в патогенезе гастроэзофагеальной рефлюксной болезни // Рос. мед. вести. 2008. - Т. 13, N2. - С. 3-10.

50. Малкоч A.B. Физиологическая роль оксида азота в организме // Биоорг. Химия. -2000.-Т. 29, N4.-С. 13-20.

51. Маслюков П.М., Стрелков A.A. Эффекторная иннервация пищевода у кошек в постнатальном онтогенезе // Морфология. 2000. - Т. 117, N3. - С. 77-78.

52. Мелконян H.H., Меликсетян И.Б. Реакция капилляров мозга кошки на гипоксию//Морфология. 2003. - Т. 124, вып. 6. - С. 58-60.

53. Мельман Е. П. Функциональная морфология иннервации органов пищеварения. М.: Медицина, 1970. - 327с.

54. Меныцикова Е.Б. Зенков Н.К., Реутов В.П. Оксид азота и NO-синтазы в организмемлекопитающих при различных функциональных состояниях // Биохимия. 2000. - Т. 65, вып. 4. - С. 485-503.

55. Михайлов A.M., Васильева Л.Ф. Мануальная диагностика и терапия дисфункции внутренних органов: практическое руководство для врачей. -Новокузнецк: Полиграфкомбинат, 2002. 218 с.

56. Молдавская A.A. Васкуляризация производных пищеварительной трубки на этапах онтогенеза. -М.: Академия естествознания, 2007. 143 с.

57. Молдавская A.A. Морфология пищеварительного тракта в эксперименте = Morphology of digestive tract in experiment. Астрахань: Издательство Астрахан гос. университета, 2002. - 187 с.

58. Мотавкин П.А. Ведение в нейробиологию.: учеб. пособие. Владивосток: Медицина ДВ, 2003.-251 с.

59. Мотавкин П.А. Оксид азота в органах пищеварительной системы // Тихоокеанский мед. журн. 2004. - N2. - С. 13-17.

60. Мотавкин П.А., Черток В.М. Гистофизиология сосудистых механизмов мозгового кровообращения. М.: Медицина, 1980. - 200с.

61. Мчедшвили JI.B. Функция сосудистых механизмов головного мозга, их роль в регуляции и в патологии мозгового кровообращения. Л: Наука, 1968. - 176 с.

62. Mäher W., Woodwart E.R. Стриктуры пищевода // Гастроэнтерология 1. Пищевод, желудок. -М. : Медицина. 1988. - С. 11-27.

63. Недоспасов A.A. Биогенный оксид азота: десять лет второго пришествия. Предыстория открытия аргининзависимого биосинтеза NO // Биоорг. Химия. 1999. - Т. 25, N6. - С. 403-411.

64. Никитюк Д.В. Особенности возрастной эволюции желез слизистых оболочек внутренних органов человека // Морфология. 1996. - N2. - С. 75.

65. Никонов А.П. К вопросу о чувствительной иннервации интрамуральных нервных узлов пищевода собаки // Арх. анатомии, гистологии, эмбриологии. -1965.-Т. 36, N5.-С. 96-98.

66. Образование оксида азота нормальными и поврежденными нейронами узловатого ганглия и дорсального ядра блуждающего нерва П.А. Мотавкин, H.A. Андреева, Т.А. Шуматова, С.Н. Тиханский. // Цитология. -2000. -Т.42, N2.-С. 170-175.

67. Павлов И.П. Двенадцатилетний опыт объективного изучения ВНД животных. М.: Наука, 1973. - 289 с.

68. Паршин М. М. Микроциркуляторное русло эпителиального слоя слизистой оболочки пищевода человека в постнатальном онтогенезе // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 1990. - Т. 109, N6. - С. 607-609.

69. Паршин М.М. Функциональная анатомия слизистой оболочки пищевода человека в постнатальном онтогенезе // Бюл. эксперим. биологии и медицины, 1990.-Т. 109, N4.-С. 412-414.

70. Паршина С.С. Современные представления о биологических эффектах оксида азота и его роли в развитии кардиоваскулярной патологии // Кардио-васкулярная терапия и профилактика. 2006. - Т. 5, N1. - С. 88-95.

71. Петренко Ю.М. Новые источники оксида азота. Их возможная физиологическая роль и значение // Эксп. и клин, фармакол. 2001. - Т. 64, N2. - С. 72-79.

72. Петрова М.Б. Сравнительная оценка структуры мышечной оболочки пищевода рыб и млекопитающих // Морфология. 2001. - N2. - С.56-59.

73. Пирс Э. Гистохимия теоретическая и прикладная / под ред. И с предисл. В.В. Португалова. М.: Изд-во иностранной литературы, 1962. - 962 с.

74. Плечкова Е.К. Некоторые вопросы чувствительной иннервации внутренних органов. М: Медгиз. - 1960. - С. 5-43.

75. Проблемы оксида азота в биологии и медицине и принцип цикличности: Ретро анализ идей, принципов и концепций / В.П. Реутов, Е.Г. Сорокина, И.С. Косицин, В.Е. Охотин М.: Едитория УРСС, 2003. - 96 с.

76. Развитие защитных функций пищеварительного тракта у свиней в онтогенезе / Н.В. Келасьева, В.Ф. Сыч, С.М. Слесарев, A.A. Пашина// Вестн. новых мед. технологий. 2007. - Т. 14, N3. - С. 35-37.

77. Ремизова М.И. Роль оксида азота в норме и при патологии // Вестник службы крови России. 2000. - N2. - С. 53-57.

78. Романова Н.Е. Гистохимические основы нитрооксидергической регуляции пищевода и кишечника: автореф. диссертации канд. мед. наук. Владивосток, 2004.-21 с.

79. Рыжов А. И., Байтингер В.Ф. Функциональная морфология нервного аппарата верхнего пищеводного и кардиального сфинктеров // Бюл. Сиб. отделения и АМК СССР. 1989. - N1. - С. 33-37.

80. Сагин М.Р., Никитюк Р.Б. Локальные характеристики и взаимодействия желез с лимфоидными скоплениями в стенке пищевода // Арх. анатомии, гистологии и эмбриологии. 1990. - Т. 99, вып. 8 - С. 58-64.

81. Сакс Ф.Ф., Медведев М.А., Байтингер В.Ф. Пищевод новорожденного (Клиническая и функциональная анатомия, пренатальный онтогенез). -Томск: Изд-во Томского ун-та, 1998. С. 101.

82. Сакс Ф.Ф. Функциональная морфология пищевода. М.: Медицина, 1987. -178 с.

83. Стабольский А.О. Электрические и сократительные свойства гладкомышечных клеток: нижнего пищеводного сфинктера в условиях модификации: автореф. диссертации канд. биол. наук. Томск, 2004. - 220 с.

84. Старостин Б.Д. Пищевод Баррета: выявление, мониторинг, лечение // Рос. журн. гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. 2003. - Том 13, N3.-C. 84-91.

85. Стовичек Г.В. Центры и проводящие пути головного мозга. Ярославль, 1999.- 100 с.

86. Ступникова Е.А. Развитие и морфологическая характеристика мышечной оболочки пищевода человека в области бронхиального сужения: автореф. диссертации канд. мед. наук. Тверь, 1999. - 23 с.

87. Суворова JI.B. Сопоставление развития некоторых интрамуральных нервных элементов с развитием остальных тканевых компонентов пищевода кролика // Арх. анатомии, гистологии и эмбриологии. 1963. - N2. - С. 31-43.

88. Sullivan G. С., Demeesster T.R. // Хирургическое лечение желудочно-пищеводного рефлюкса и эзофагита // Гастроэнтерология. Пищевод, желудок. М.: Медицина, 1988. - С. 28-55.

89. Forstermann U. Nitric oxide synthase isozymes, characterization, purification, molecular cloning and function // Hypertension. 1994. - Vol. 23. -P. 1121-1131.

90. Furchgott R.F., Zawadski J. The obligatory role of endothelial cells in the relaxation of arterial stmooth muscle by acetylcholine // Nature. 1980. - Vol. -288.-P. 373-376.

91. Furukawa K. Expression of nitric oxide synthase in human nasal mucosae // Am. J. Res. Crit. Care Med. 1996.-Vol. 153, N2.-P. 847-850.

92. Gaily J.A., Montague P.R., Reeke G.N., Edelman G.M. The NO hypothesis: Possible effects of a short-lived, rapidly diffusible signal in the development and function of the nervous system // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1990. - Vol. 87. -P. 3547-3551.

93. Gonzalez-Hernandez T., Rustioni A. Expression of three forms of nitric oxide synthase in peripheral nerve regeneration // J. Neurosci. Res. 1999. Vol. 55, N2. P. 198-207.

94. Gow Andrew J., Ischiropoulos H. Nitric oxide chemistry and cellular signaling//J. Physiol.- 2001. -T. 187,N3.-P. 277-282.

95. Grongnet J.F., David J.C. Reciprocal variations of nNOS and HSP90 are associated with fasting in gastrointestinal tract of the piglet // Dig. Dis. Sci. 2003. -Vol. 48, N2.-P. 365-372.

96. Hallerback B., Glise H. Pathophysiology in gastroesophageal reflux disease// Scand. J. Gastroenterol. Suppl. 1996. - Vol. 31. Suppl., N220. - P. 60-62.

97. Hama T. Miyamoto M., Tsukui. Interleukin-6 as a neurotrophic factor for promoting the survival of cultured basal forebrain cholinergic neurons fran pastnatal rats //Neurosci. Lett. 1998. - Vol. 104 P. - 340-344.

98. Hisa Y., Koike S., Bamba H. Involvement of carbon monoxide in the innervation of the canine cervical esophagus and trachea // Ann. Otol. Rhinol. Laryngol. 2000. - Vol. 109, N2.-P. 133-135.

99. Holloway R.H., Penagini R., Ireland A.C. Criteria for objective definition of transient lower esophageal sphincter relaxation // Am. J. Physiol. 1995. - Vol. 268,N1.-P. 128-133.

100. Hope B.Y. Neuronal NADPH-diaphorase is a nitric oxide synthase // Proc. Nat. acad. Sci. USA. 1991. - Vol. 88.-P. 2811-2814.

101. Hyland N.P., Abrahams T.P., Fuchs K. Organization and neurochemistry of vagal preganglionic neurons innervating the lower esophageal sphincter in ferrets // J. Comp. Neurol. 2001. - Vol. 5, N2. - P. 222-234.

102. IL-1 plays animportant role in lipid metabolism by regulating insulin levels under physiological conditions. N. Matsuki, R. Horai, K. Sudo, Y.J. Iwakura// Exp. Med. 2003. - Vol. 198. - P. 877-888.

103. Jimenes D., Martin M.J., Pozo D. Mechanisms involved in protection afforded by L-arginine in ibuprofen-induced gastric damage: role of nitric oxide and prostaglandins // Dig. Dis. Sci. 2002. - Vol. 47, N1. - P. 44-53.

104. Jouzeau J.Y., et. al. Nitric oxide and cartilage metabolism: NO effects are modulated by superoxide in response to IL-1 // Biorheilogy. 2000. - Vol. 39. - P. 201-214.

105. Kang J.L, Lee K., Cfstranova V. Nitric oxide up-regulates DNA-binding activity of nuclear factor-kappa in macrophages stimulated with silica and inflammatory stimulants // Mol. cell, biochem. 2000. - Vol. 215. - P. 1-9.

106. Kapur S., Picard F., Perreault M. Nitric oxide: a new plaer in the modulation of energy metabolism // Int. J. Obes. Relat. Metab. Disord. 2000. 410102-43-9; S 36- S 40.

107. Kideaki Sumiyoshi // Esophageal muscle physiology and morphogenis reguire assembly of a collagen XIX rich basement membrane zone / f. Cell. Bid. - 2004. - Vol. 166, N4. - P. 591 - 600.

108. Kim H., Hwan K. Role of nitric oxide and mucus in ischemia/reperfusion-induced gastric mucosal injury in rats // Pharmacology. 2001. - Vol. 62, N4. - P. 200-207.

109. Knowles R.G., et.al. Formation of nitric oxide from L-arginine in the central nervous system//Proc. natl. acad. USA. 1989. - Vol. 86. - P. 5159-5162.

110. Konig P., Dedio J., Muller-Esterl W. Distribution of the novel eNos-enteracting protein NOS1P in the liver, pancreas, and gastrointestinal tract of the rat // Gastroenterology. 2002. - Vol. 123, N1. - P. 314-324.

111. Konturek S., Konturek P. Role of nitric oxide in the digestive systems // Digestion. 1995. - Vol. 56. - P. 1-13.

112. Lichtenstein G.R., Reynolds J.C., Ogorek C.P. Localization and inhibitory action of galanin at the feline lower esophagueal sphincter // Reul. Pept. -Amsterdam. 1994. - Vol. 50, N3.-P. 312-222.

113. Liu Q., Palmer R.M., Mahendran R. Nitric oxide induces cyclooxygenase expression and inhibits cell growth in colon cancer cell lines // Carcinogenesis. -2003. Vol. 24, N4. - P. 637-642.

114. Londneel E.A. Regurgitation esophagitis // Am. J. Gastroent. 1995. - Vol. 24, N3. - P. 293-304.

115. Magnusson S. Aim P., Kanje M. Inducible nitric oxide synthase increases in regenerating rat ganglia// Neuroreport. 1996. Vol. 7. P. 2046-2050.

116. Mao Y.K., Wang Y.F., Daniel E.E. Distribution and characterization of vasoactive entestinal polypeptide binding in canine lower esophageal sphincter // Gastroenterology.- 1993.-Vol. 105, N5.-P. 1370-1377.

117. Marz P., Cong Cheng, Gadient R. Sympathetic neurons can produced and respond to interleukin 6. Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 1998. - Vol. 95. - P. 32513256.

118. Mashino H., Kjellin A., Goyal R.K. Gastric stasis in neuronal nitric oxide synthase-deficient knochout mice // Gastroenterology. 2000. - Vol. 119, N3. -P. 766-773.

119. Matsumoto M., Furihata M., Kurabayashi A. Association between inducible nitric oxide synthase expression and p53 status in human esophageal squamous cell carcinoma // Oncology. 2003. - Vol. 64, N1. - P. 90-6.

120. Meli R., Ferrante M. C., Raso G. Effect of fumonisin B1 on inducible nitric oxide synthase and cyclooxygenase-2 in LPS-stimulated J774A. cells // Life Sci. -2000. -Vol. 67, N23. P. 2845-2853.

121. Moncada S., Palmer R.M.J., Higgs E.A. Nitric oxide: physiology, pathophysiology and pharmacology //Pharmacol. Rev. 1991. Vol. 43. P. 109-142.

122. Viller S.M., Reed D., Sarr M.G. Haem oxygenase in enteric nervous system of jejunum and co-localization with nitric oxide synthase // Neurogastroenteroi. Motil. -2001.-Vol. 13, N2.-P. 121-131.

123. Mocada S., Higgs A. Mechanisms of desease: the L-arginine nitric oxide pathway//New Engl. J. Med. - 1993. - Vol. - 329. - P. 2002-2012.

124. Mule F., Vannucchi M. G., nCorsani L. Myogenic NOS and endogenous NO production are defective in colon from dystrophic (mdx) mice // Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver. Physiol. 2001. - Vol. 281, N5. - P. 1264-1270.

125. Nakane M. Cloned human brain nitric oxide synthase is highly expressed in skeletal muscle // FEBS Lett. 1993. - Vol. 316. - P. 175-180.

126. Neuhuber J., DRjtsch F. Development of neuromuscular functions in the mouse esophagus: focus on establishment and reduction of enteric co-innervation // J. Anat Embriol 2002. - Vol. 205. - P. 141-147.

127. Nishizaki K., Nakao K., Ishii H. Induction of neuronal of nitric oxide synthase by sympathetic denervation is mediated via alpha 2-adrenoceptors in the jejunal myenteric plexus // Brain res. 2003. - Vol. 965, N1-2. - P. 121-129.

128. Moncada S., Palmer R.M.J., Higgs E.A. Biosynthesis of nitric oxide from L-arginine//Biochem. Pharmacol. 1989,- Vol. 38.-P. 1709-1715.

129. Olesen M., Middelveld R., Bohr J. Luminal nitric oxide and epithelial expression of inducible and endothelial nitric oxide synthase in collagenous and lymphocytic colitis // Scand. J. Gastroenterol. 2003. - Vol. 38, N1. - P. 66-72.

130. Palmer R.M., Ashton D.S., Moncada S. Vascular endothelial cells synthesize nitric oxide from L-arginin // Nature. 1988. Vol. 333. P. 664-666.

131. Patt S., Sampaolo S., Theallier Yanko et. al. Cerebral angiogenesis thiggered by severe chronic hypoxia displays regional defferences // Y. Cereb. Blood Flow Metab. - 1997. - Vol. 17. - P. 801-806.

132. Peng X. Feng J.B. Yan H. Distribution of nitric oxide synthase in stomach myenteric plexus of rats // World J. Gastroenterol. 2001. - Vol. 7, N6. - P. 852854.

133. Phillipson M., Henriksnas J. Holstad M. Inducible nitric oxide synthase is involved in acid-induced gastric hyperemia in rats and mice // Am J. Physiol. Gastrointesy. Liver physiol. 2003. - Vol. 285, N1. - P. 154-162.

134. Premaratne S., Xue C., McCarty J.M. Neuronal nitric oxide synthase: expression in rat pariental cells // Am. J. physiol. Gastrointest. 2001. - Vol. 280, N2.-P. 308-313.

135. Rees D.D., Palmer R.M., Schulz R., et. al. Characterization of three inhibitors of endothelial nitric oxide synthase in vitro and in vivo // Br. J. Pharmacol. 1990. Vol. 101. P. 746-752.

136. Sans. Q. Innervation of the esophagus in mice that lask Mash 1 // Compar. Neurol.-2006.- Vol. 408, N1. P 1-10.

137. Saur D., Neuhuber W.L., Gengenbach B. Site-specific gene expression of nNos variants in distinct functional regions of rat gastrointestinal tract // Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol. 2002. - Vol. 282, N2. - P. 349-358.

138. Schicho R., Schemann M., Holzer P. Mucosal acid challenge activates nitrergic neurons in myenteric plexus of rat stomach // Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver. Physiol. 2001. - Vol. 28, N5. - P. 1316-1321.

139. Schini V.B., Vanhoutte P.M. Inhibitors of calmodulin impair the constitutive but not the inducible nitric oxide synthase activity in the aorta // J. Pharmacol. Ecp. Then 1992.-Vol. 261.-P. 553-558.

140. Sengupta J.N. Electrophysiological fom neurons controlling sensory and motor functions of the esophagus // Am. J. Med. 2001. - Vol. 3, N111. - P. 169173.

141. Seti S., Dikshit M. Modulation of polymorphonuclear leucocytes function by nitric oxide // Thromb. Res. 2000. - Vol. 100, N3. - P. 223-247.

142. Shah S., Hobbs A., Singh R. Gastroitestinal motility during pregnance: role of nitrergic component of NANC nerves // Am. Physiol. Regular. Integr. Comp. Phisiol. 2000. - Vol. 279, N4. - P. 1478-1485.

143. Shaw D.M., Cook I.J., Gabb M. Influence of normal aging oralpharingeal and upper esophageal sphincter function during swallowing //Am. J. Physiol. -1995,- Vol. 268, N3. P. 389-396.

144. Smith V.C., Dhatt N., Buchan A.M. The innervation of the human antro-pyloric region: organization and composition // Can. J. Physiol. Pharmacol. 2001. -Vol. 79, N11.-P. 905-918.

145. Storr M., Geisler F., Neuhuber W.L. Characterization of vagal input to the rat esophageal muscle // Auton. Neurosci. 2001. - Vol. 91, N1 -2. - P. 1 -9.

146. Stumm M.M., D'Orazio., Sumanovski L.T. Endotelial, but not the inducible, nitric oxide synthase is detectable in normal and portal hypertensive rats // Liver. -2002. Vol. 22, N6. - P. 441 -450.

147. Takahashi T. Pathophysiological significance of neuronal nitric oxide synthase in the gastrointestinal tract // J. Gastroenterol. 2003. - Vol. 38, N5. - P. 421-430.

148. Terracol J., Sweet R. Disease of the Esophagus. Philadelphia, London: W.B. Saunders Comp., 1958. - 682 p.

149. Transmitter mechanisms in vagal afferentatin ducend reductions of lower esophagueal sphincter pressure in the cat. H. Kawahara, L.A. Blaclcshaw, V. Nisyrios, J. Dent // J. Auton. Nerv. Syst. 1994. - Vol. 49, N1. - P. 69-80.

150. Watanabe Y., Ando H., Seo T. Attenuated nitrergic inhibitory neurotransmission to interstitial cells of Cajal in the lower esophageal sphincter with esophageal achalasia in children // Pediatr. Int. 2002. - Vol. 44, N1. - P. 145148.

151. Witte M.B. Enhancement of fibroblast collagen synthesis by nitric oxide // Nitric Oxide. 2000. - Vol. 4. - P. 572-582.

152. Zoccoli G., Lucchi M.L., Andreoli E. Density of perfused brain capillaries in the aged rat during the wake-sleep cycle // Exp. Brain Res. 2000. - Vol. 130, N1. - P. 73-77.