Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Гистохимическая характеристика наружных мышц глазного яблока

ВАК РФ 03.00.25, Гистология, цитология, клеточная биология

Автореферат диссертации по теме "Гистохимическая характеристика наружных мышц глазного яблока"

На правах рукописи

Шамшурина Ирина Владимировна

ГИСТОХИМИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА НАРУЖНЫХ МЫШЦ ГЛАЗНОГО ЯБЛОКА

03.0 0.2 5 - гистология, цитология, клеточная биология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Работа выполнена в государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Ижевская государственная медицинская академия» Министерства здравоохранения Российской Федерации на кафедре анатомии человека.

Научный руководитель:

доктор медицинских наук,

профессор Виктор Михайлович Чучков

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор

доктор медицинских наук, профессор

Евгений Ростиславович Павлович Ирина Петровна Степанова

Ведущее учреждение: государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Тверская государственная медицинская академия» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Саратов.

Защита диссертации состоится 2004 г. в •

час. на заседании Диссертационного Совета Д 212.117.01 при государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования Мордовском государственном университете им. Н.П. Огарева Министерства здравоохранения Российской Федерации по адресу: 430000, г. Саранск, ул. Большевисткая, 68.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования Мордовском государственном университете им. Н.П. Огарева Министерства здравоохранения Российской Федерации

Автореферат разослан и^'фФЭ^у- 2004 г.

Ученый секретарь диссертационного совета:

доктор биологических наук, профессор

П.П. Кругляков

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность исследования. Исследование иннервации скелетной мускулатуры, связи между строением и функцией как нервного, так и мышечного компонентов системы "нервное волокно - мышечное волокно" с применением различных методологических подходов продолжается и в настоящее время (Шамарина Н.М., 1971; Загребин A.M., 1972; Женевская Р.П., 1974; Чучков В.М., 1991; Waerhaug О., Lomo Т., 1994). Среди гистохимических интересной представляется методика с использованием тиоуксусной кислоты в модификации Николаева - Шилкина (1983), позволяющая выявить активность истинной холинэстеразы (ХЭ) в постси-наптической части нейромышечного синапса (НМС). Изучена область НМС различных скелетных мышц в разные возрастные периоды постнатального онтогенеза и при некоторых экзогенных воздействиях, в частности на примере деэфферента-ции, деафферентации и химической десимпатизации, а также в условиях различной функциональной активности (Филимонов В.И., 1992, 1998; Шилкин В.В., Филимонов В.И., 1997; Сабельников Н.Е., 2000; Ковригина Т.Р., 2001; Ардашев А.Е., 2001; Огнетов С.Ю., 2002). Интересными являются работы по установлению типов мышечных волокон (MB), составляющих ту или иную скелетную мышцу (Мавринская Л.Ф., Резвяков Н.П., 1978; Гарифьянова М.Б., 1996, 1997; Филимонов В.И., 1998; Шумихина Г.В., 2000). В результате проведенных исследований были получены новые данные о преобразованиях фермен-тоактивных зон (ФАЗ) НМС скелетных мышц в зависимости от возраста животного (Сабельников Н.Е., 2000; Ардашев А.Е. 2001), от происхождения мышцы (Огнетов С.Ю., 2002), установлена связь между типом MB и характеристикой ФАЗ НМС (Филимонов В:И., 1998; Огнетов С.Ю. с соавт., 2002). Тем не менее, гистохимическая характеристика системы "двигательное окончание - мышечное волокно" исчерченной мускулатуры глазного яблока не проводилась.

Цель и задачи исследования. Целью настоящего исследования является установление гистохимической характеристики области нейромышечного синапса и типов мышечных волокон наружных мышц глазного яблока.

В ходе исследования в соответствии с поставленной целью были определены следующие задачи:

1. Описать гистохимическую характеристику области нейромышечных синапсов прямых и косых

ка в ключевые периоды постнатального онтогенеза.

2. Определить морфометрические показатели ферменто-активных зон нейромышечных синапсов исследуемых мышц.

3. Установить гистохимический профиль мышечных волокон по активности СДГ в исследуемых мышцах глазного яблока .

4. Изучить зависимость гистохимической картины области нейромышечного синапса исследуемых мышц от типа мышечных волокон.

Научная новизна. Впервые проводится качественный и морфометрический анализ ФАЗ НМС прямых и косых мышц глазного яблока с использованием гистохимической методики Николаева - Шилкина (1983) и морфометрических методов. Полученные результаты сопоставляются с типом мышцы, определенному по активности СДГ.

В результате проведенного исследования получены новые данные о преобразованиях ФАЗ НМС прямых и косых мышц глазного яблока в пубертатном, репродуктивном периодах и периоде первой зрелости. Установлены основные возрастные изменения двигательных окончаний данных скелетных мышц.

Научно-практическая ценность. Работа имеет важное теоретическое значение для морфологии опорно-двигательного аппарата и нейроморфологии. Полученные новые данные по гистохимической характеристике системы "двигательное окончание - мышечное волокно" наружных мышц глазного яблока могут быть использованы в учебном процессе морфологических курсов при изучении мышечной ткани и нервной системы. Помимо теоретического интереса, данная работа может иметь выход в практическую медицину. Особенности организации НМС мышц глазного яблока должны учитываться в таких специальностях, как неврология и офтальмология.

Положения, выносимые на защиту.

1. Качественная характеристика ферментоактивных зон нейромышечных синапсов прямых и косых мышц глазного яблока значительно отличается от других скелетных мышц.

2. Характеристика ферментоактивных зон нейромышечных синапсов зависит от типа мышечных волокон, входящих в состав мышцы.

3. В процессе постнатальной жизни в наружных мышцах глазного яблока наблюдаются определенные качественные и морфометрические изменения фрементоактивных зон нейромышечных синапсов, адекватные изменениям, наблюдаемым в прочих

скелетных мышцах.

Апробация работы. Основные положения работы доложены и обсуждены на III Межвузовской конференции молодых ученых и студентов (Ижевск, 2003); на Всероссийской научной конференции "Гистологическая наука России в начале XXI века: итоги, задачи, перспективы" (Москва, 2003); на заседании Удмуртского отделения ВрНОАГЭ (Ижевск, 2004).

Реализация результатов исследования. По материалам диссертации опубликовано 7 работ.

Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 100 страницах машинописного текста и включает 8 таблиц, 84 микрофотографию. Список литературы (на 15 страницах) представлен 154 источниками из них: 92 отечественных 62 иностранных авторов.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Объектом исследования служили прямые и косые мышцы глазного яблока белой беспородной крысы. Изучены конструкции ФАЗ НМС следующих мышц: дорсальной, латеральной, вентральной и медиальной прямых и дорсальной и вентральной косых мышц глазного яблока (mm. rectus dorsalis, rectus lateralis, rectus ventralis, rectus medialis, obliqus dorsalis, obliqus ventralis bulbi oculi) (Гамбарян П.П., Дукельская Н.М., 1955). Наружные мышцы глазного яблока являются производными головных миотомов. Как известно, дорсальная, вентральная и медиальная прямые и вентральная косая мышцы глазного яблока получают двигательные волокна в составе глазодвигательного нерва, дорсальная косая мышца иннервируется за счет блокового, а латеральная прямая - за счет отводящего нервов.

Сроки забоя животных соответствуют пубертатному (3 месяца), репродуктивному (6 месяцев) и периоду первой зрелости (1 год) - по периодизации В.И. Махинько и В.Н. Никитина (1975). В каждой возрастной группе изучены мышцы от 5 животных.

Согласно данным литературы (Филимонов В.И., 1992, 1998) о влиянии способа умерщвления животного на выявление ХЭ-активности, предварительно наркотизированных гексеналом животных декапитировали.

Для данного исследования использовалась методика выявления ХЭ в зоне НМС тиоуксусной кислотой в модификации Г.М. Николаева и В.В. Шилкина (1983).

После забоя животного мышцы забирались через 30 минут, это время обеспечивало необходимую миорелаксацию. Материал фиксировался в течение 18-24 часов в охлажденном растворе 10% формалина (рН 6,8 - 7,0). Срезы, толщиной в 40 мкм, изготовлялись на замораживающем микротоме. В дальнейшем срезы помещались на 15 - 18 минут в инкубационную среду, которая имела следующий состав:

0.1М цитратный буфер рН 6,2 20 мл,

0,5% раствор нитрата свинца 0,5 мл,

тиоуксусная кислота 0,03 мл.

После инкубации срезы промывались в дистиллированной воде в течение 1,0 - 1,5 часов, а затем заключались в глицерин-желатин.

Данная методика выявления активности специфической ХЭ в зоне НМС основана на гидролизе тиоуксусной кислоты АХЭ. Достаточная простота и высокая скорость проведения, воспроизводимость эксперимента и четкие критерии оценки реакции, разработанные авторами, позволили использовать данный метод в нашей работе.

Полученные микропрепараты оценивали методами качественного и количественного анализа. Качественными критериями являлись: выраженность активности ХЭ; характер отложения продукта реакции и топография ФАЗ НМС; наличие или отсутствие околосинаптической активности фермента; количество ФАЗ, приходящихся на одно MB. Количественный анализ проводился согласно принципам непрямой морфометрии (Автандилов Г.Г., 1990). В исследовании использовался микроскоп МБИ-3 с бинокулярной насадкой (1,5х, объектив 40х, окуляр 7х). Для подсчета использовалась окулярная сетка с равноудаленными узлами пересечения.

Характеристика сетки:

- площадь сетки - 59040 мкм2,

- число узлов пересечения - 528,

- расстояние между линиями сетки ф) - 11,9 мкм,

- площадь, соответствующая одному узлу пересечения -111,9 мкм2,

- длина стороны сетки - 246 мкм.

На стандартной площади среза мышцы, ограниченной сторонами сетки ("накиде"), определялись следующие показатели:

- общее количество ФАЗ НМС,

- количество НМС с простой конструкцией ФАЗ,

- количество НМС со сложной конструкцией ФАЗ,

- количество MB.

Обработка данных производилась по оригинальной методике, разработанной и апробированной в ЯГМА (Шилкин В.В. с соавт., 1992; Шилкин В.В., Филимонов В.И., 1997; Филимонов В.И., 1998). Морфометрия области НМС заключалась в определении количества узлов пересечения сетки, падающих на область НМС и количества пересечений контура области НМС с линиями сетки (для простых и сложных форм ФАЗ НМС); количества узлов пересечения сетки, падающих на ФАЗ НМС (для сложных форм ФАЗ НМС). Определялось также количество MB в "накиде". Результаты заносились в протокол отдельно по каждому "накиду". Далее определялись средние показатели по каждому "накиду" отдельно.

Преобразование относительных единиц в общепринятые стандартные единицы измерения производили по формулам:

1. Площадь сечения области НМС (для простых и сложных форм ФАЗ) и площадь ФАЗ НМС со сложной конструкцией -S=111,9xX (мкм2);

где X - количество узлов пересечений сетки, падающих на область НМС; S мкм2 - площадь, соответствующая одному узлу пересечения сетки.

2. Длина сечения области НМС - (.=(пД/4)х7; где п -число "пи", константа равная 3,14; А - расстояние между линиями сетки; Z - число пересечений линий сетки с контуром объекта. Таким образом, L=(3,14x11,9/4)xZ, т.е. 1_=9,34хг.

3. Диаметр МВ рассчитывался по формуле: О =иЛмв, где /_ - длина стороны сетки, £мв - количество МВ на площади среза, ограниченной сеткой.

Определялись следующие производные от первичных данных:

1. Отношение площади сечения сложной ФАЗ к площади сечения области НМС (доля ФАЗ на площади сечения области НМС, Б^/З^);

2. Форм-фактор сечения области НМС (РТНМС), рассчитывающийся по формуле С.А. Салтыкова (1958): Р(=4,511/Х/21 где 4,51 - расчетный коэффициент, X - количество узлов пересечения линий сетки, падающих на объект; Z - число пересечений линий сетки с контуром исследуемого объекта. При значении форм-фактора больше 0,65 объект имеет форму круга, а при значении 0,65 и менее - форму овала или

вытянутую форму.

3. Совокупное количество ФАЗ в расчете на 1 MB - ХНМС/ MB и совокупная площадь сечений ФАЗ в расчете на 1 MB -XS„„c/ivib. Эти показатели позволяют характеризовать систему двигательное окончание - мышечное волокно.

Полученные данные по отдельным "накидам" суммировались для получения средних значений показателей изученных 300 объектов. Статистическая обработка данных включала нахождение средних значений каждого параметра, коэффициента репрезентативности, t-критерия Стьюдента. Анализ проводился с использованием программ Microsoft Excel '97 и Biostatistics V4.03.

Микрофотосъемка выполнялась на микроскопе МБИ-3, объектив 40х, окуляр 10х. Фотопечать производилась при постоянном увеличении.

Выявление СДГ. Исследование проведено на мышцах глазного яблока 3-х месячного животного (5 крыс). Активность СДГ определялась методом с нитросиним тетразолием (Пирс А., 1962). Исследовалась средняя треть мышцы, срезы брались серийно. Криостатные срезы толщиной 12 мкм подсушивали на предметных стеклах и помещали в инкубационную среду следующего состава: в 5 мл 0,1 М фосфатного буфера с рН 7,5 растворяли 5 мг нитросинего тетразолия и 13,5 мг сукцината натрия. Инкубация проводилась в течение 30 - 60 минут при 37°С. Далее срезы отмывали большим количеством дистиллированной воды и после обезвоживания заключали в бальзам. В каждой мышце обсчитывали от 350 до 750 мышечных волокон.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

В результате гистохимического исследования ФАЗ НМС исчерченных мышц глазного яблока во всех изученных возрастных группах была установлена следующая топография расположения двигательных нервных окончаний. В прямых и косых мышцах глаза НМС определяются по неровной линии, расположенной перпендикулярно ходу MB примерно в средней трети мышцы, достаточно компактными группами по краям и отдельными конструкциями в средней части мышцы. От 3-х до 12-ти месяцев на стандартной площади среза (в "накиде") встречаются от 1 - 2 до 10 - 13 конструкций, чаще - от 3 до 6. Во всех мышцах в изученные возрастные периоды обнаруживается двойная иннервация MB. Две ФАЗ НМС на одном MB

обнаруживаются примерно в 1 - 3 % случаев.

Несмотря на большое разнообразие форм ФАЗ НМС можно выделить две крайние - гомогенную (простую) ФАЗ, лишенную какой бы то ни было ФНЗ, и сложную ФАЗ, имеющую более или менее выраженную ФНЗ (Шилкин В.В., Филимонов В.И., 1997; Огнетов СЮ. с соавт., 2002 и др.). В изученных мышцах глазного яблока типичные сложные трабекулярные конструкции встречаются крайне редко и не являются характерными формами. Ферментативная активность в области НМС со сложными конструкциями чаще представлена скоплением глобул с неоднородной активностью ХЭ, ФНЗ определяется в виде просветленных участков, тем не менее, нередко имеющих незначительную активность ХЭ. В некоторых случаях подобные глобулярные конструкции с чередованием ферментопозитив-ных и ферментонегативных участков, имеющие достаточную протяженность по ходу MB, нами описывались как "гроздье-видные" сложные и простые ФАЗ НМС. Наибольшее содержание таких форм во всех изученных мышцах отмечалось в возрасте 12-ти месяцев.

Во всех мышцах на протяжении изученного периода пост-натальной жизни животных отмечается значительной преобладание сложных конструкций (от 77,49% в возрасте 12-ти месяцев в вентральной косой мышце до 95,76% в возрасте 3-х месяцев в вентральной прямой мышце). Четкой динамики в изменении процентного соотношения простых и сложных конструкций в зависимости от мышцы или возрастного периода не отмечается, но прослеживается некоторое снижение процентного содержания сложных конструкций в 6-ти месячном возрасте в сравнении с 3-х месячными животными, и некоторое увеличение данного показателя к 12-ти месяцам. Заметное исключение составляет вентральная косая мышца глаза, где к годовалому возрасту продолжает наблюдаться снижение содержания сложных ФАЗ НМС.

Характерной особенностью сложных конструкций ФАЗ НМС мышц глазного яблока является отсутствие типичного трабе-кулярного рисунка (Шилкин В.В., Филимонов В.И., 1997; Сабельников Н.Е., 2000; Ардашев А.Е., 2002 и др.). Сложные ФАЗ представлены, как правило, скоплением ХЭ-позитив-ных глобул и гранул, имеющих различную активность фермента. О степени активности АХЭ можно судить по выраженности окраски конечного продукта реакции - от желто-коричневых до практически черных оттенков. Участки ферментативной

активности перемежаются ХЭ-негативными зонами. ФНЗ чаще не имеет четких границ, иногда в области ФНЗ отмечается некоторая активность фермента, что проявляется в окрашивании MB.

При формировании ФАЗ НМС по типу сложной трабекуляр-ной конструкции наблюдаются следующие особенности. Трабе-кулы редко имеют равную толщину, четкий контур и одинаковую активность АХЭ. Чаще трабекулы носят четкообразный или глобулярный характер. Нередко можно наблюдать неравномерное снижение ферментативной активности, изменение площади ФНЗ как с ее увеличением, так и уменьшением.

Отличительной особенностью скелетных мышц глазного яблока является также наличие "гроздьевидных" конструкций ФАЗ НМС. Данные формы ФАЗ представлены отдельными мелкими глобулами, расположенными на достаточно большом протяжении MB. Среди "гроздьевидных" ФАЗ преобладают вытянутые по форме конструкции, хотя реже встречаются округлые, овальные или неправильные. Активность фермента образующих данные ФАЗ глобул, как правило, ниже, чем в области НМС с другими формами сложных конструкций. Увеличение количества "гроздьевидных" ФАЗ наблюдается в период первой зрелости, их соотношение с другими ФАЗ НМС составляет от 14,95% в латеральной прямой мышце до 40,40% в дорсальной прямой мышце глаза. Располагаются "гроздьевидные" конструкции преимущественно по краям мышц.

Во все изученные возрастные периоды в мышцах глазного яблока отмечаются явления около- и внесинаптической активности фермента. Чаще можно видеть формирование отдельных ХЭ-позитивных зерен или глобул вблизи от области НМС, а также окрашивание прилежащего участка MB. В репродуктивный период (6 месяцев) и, в меньшей степени, в период первой зрелости (12 месяцев) во всех мышцах глазного яблока можно наблюдать неупорядоченную активность фермента. Данная активность проявляется в виде формирования на MB "сгустков" или "хлопьев" светлого коричневато-желтоватого цвета как вблизи от области НМС, так и на достаточно большом расстоянии от них.

Гомогенные ФАЗ НМС в мышцах глазного яблока встречаются сравнительно редко. Форма их варьирует от вытянутой веретенообразной до округлой с преобладанием последней. Границы ХЭ-позитивной зоны простых конструкций редко бывают ровными и четкими. Иногда в области НМС с простыми

ФАЗ отмечается околосинаптическая активность. В период первой зрелости, помимо типичных гомогенных конструкций появляются глобулы с высокой активностью фермента. Такие глобулы могут быть расположены вблизи НМС со сложной ФАЗ, иногда глобулы располагаются изолированно или образуют цепочки на большом протяжении MB.

Морфометрические показатели, характеризующие систему "двигательное окончание - мышечное волокно" свидетельствуют об определенных изменениях, происходящих в мышцах глазного яблока в период с 3-х до 12-ти месяцев. Площадь НМС со сложными ФАЗ во всех мышцах достоверно увеличивается к 6-ому месяцу постнатальной жизни; к 12-му в латеральной и медиальной прямых, дорсальной и вентральной косых также достоверно увеличивается. Наибольшая площадь НМС со сложными ФАЗ наблюдается у косых мышц - в дорсальной 419,70±14,20 мкм2, в вентральной - 423,00±23,08 мкм2. В дорсальной и вентральной прямых достоверного увеличения площади НМС со сложными ФАЗ к 12-ти месяцам не отмечается. С изменениями площади НМС сопоставимы изменения площади ФАЗ. Во всех мышцах, за исключением дорсальной и вентральной прямых, наблюдается достоверное увеличение площади ФАЗ сначала к 6-ти, затем к 12-ти месяцам. В дорсальной и вентральной прямых мышцах площадь сложных ФАЗ увеличивается к 6-ому месяцу, а к 12-му несколько уменьшается. О соотношении площади НМС и площади ФАЗ сложных конструкций, а также площади ФНЗ свидетельствует показатель Sфаз/ SHMC. В прямых мышцах отмечается увеличение этого показателя к 6-ти и уменьшение к 12-ти месяцам. В медиальной прямой мышце данный показатель не изменяется на протяжении исследованного периода онтогенеза, а в косых мышцах отмечается некоторое снижение площади ФАЗ по отношению к площади НМС в период с 3-го по 12-ый месяц жизни животного .

Показатели площади и периметра НМС с простыми ФАЗ во всех мышцах увеличиваются начиная с 3-го месяца и до конца первого года жизни. Наибольших показателей площадь НМС с простыми ФАЗ достигает в вентральной и медиальной прямых мышцах глаза и составляет соответственно 177,20+30,36 и 177,50+15,42 мкм2.

Показатель фактора формы, свидетельствующий о форме конструкции, достоверно снижается во всех мышцах к концу первого года жизни. Это указывает на тенденцию к увеличе-

нию числа вытянутых конструкций.

Диаметр MB во всех изученных мышцах изменяется незначительно (от 19,61 ±0,13 мкм в вентральной прямой мышце в 3 месяца до 24,16±0,13 мкм в вентральной косой мышце в 12 месяцев), как правило, достигая наибольших значений к 12-ти месяцам. Степень иннервированности MB, определяемая показателем ?нмс/МВ, свидетельствует о некотором уменьшении числа НМС, приходящихся на одно MB, с 3-го по 12-ый месяц в латеральной, вентральной прямых и дорсальной косой мышцах и увеличении данного показателя к 6-ти и уменьшения к 12-ти месяцам в дорсальной и медиальных прямых и вентральной косой мышцах. Тем не менее, суммарная площадь НМС, приходящейся на одно MB имеет общую тенденцию к увеличению с возрастом, варьируя от 35,29±2,98 мкм2 в вентральной прямой мышце до 50,84±2,48 мкм2 в вентральной косой мышце. Особенностью иннервации MB в скелетных мышцах глаза можно также считать и достаточно часто встречающуюся двойную иннервацию MB ( 1 - 3 % во всех мышцах на протяжении всего изученного периода онтогенеза).

В результате определения типов MB по активности СДГ прямые и косые мышцы глазного яблока можно отнести к смешанным со значительным преобладанием (примерно 2:1 -3:1) волокон с оксидативным типом метаболизма. Наибольшее процентное содержание темных волокон можно видеть в латеральной прямой мышце (77,02%), наименьшее - в дорсальной прямой и дорсальной косой (61,39 и 61,67% соответственно). Промежуточные, оксидативно-гликолитические волокна составляют примерно 1/4 - 1/3 от общего количества. Наибольшее значение отмечается в дорсальной косой мышце (37,36%), а наименьшее - в латеральной прямой (21,12%). Волокна с гликолитическим типом метаболизма для наружных мышц глазного яблока не характерны. Их доля незначительна и составляет от 0,40% в вентральной прямой до 3,09% в медиальной прямой мышцах.

Распределение MB с тем или иным типом метаболизма во всех мышцах идентично. В наружных, периферических отделах располагаются преимущественно темные волокна сравнительно малого диаметра. Во внутренней части промежуточные и темные волокна чередуются. Диаметр темных волокон внутренней части мышцы визуально превалирует над диаметром MB, расположенных по периферии. Активность СДГ несколько ниже у волокон С-типа, расположенных во внутренней обла-

сти мышцы. Единичные светлые волокна могут быть обнаружены в любой части мышцы, но несколько чаще встречаются во внутренней. Диаметр их, как правило, несколько превосходит диаметр волокон С- и В-типов.

Таким образом, проведенное исследование ФАЗ НМС, системы "двигательное окончание - мышечное волокно" и определение типов MB, составляющих наружные мышцы глаза позволяет сделать некоторые обобщения.

Волокна, входящие в состав прямых и косых мышц глазного яблока по метаболизму являются в большей степени оксидативными. MB типа С, определяемые по активности СДГ составляют приблизительно от 60 до 80%. Эти данные вполне согласуются с данными других исследователей, определяющих наружные мышцы глаза как тонические (Матюшкин Д.П., 1961, 1963; Hess A., 1961; Улумбеков Э.Г., Челышев Ю.А., 2001).

По данным литературы (Шилкин В.В., Филимонов В.И., 1997; Сабельников Н.Е., 2000; Огнетов С.Ю., 2002 и др.) было установлено, что ФАЗ НМС исчерченных мышц различной топографии и происхождения в возрасте 3 - 6 месяцев приобретают типичную для данной мышцы картину. Сложные конструкции, как правило, трабекулярного характера, имеют петлистый или сетевидный рисунок трабекул. Число гомогенных конструкций незначительно. В это же время появляются первые признаки естественных возрастных дегенеративных изменений, выражающихся в формировании четкообразных трабекул, их истончении и увеличении площади ФНЗ. В период первой зрелости продолжают нарастать дегенеративные процессы. Естественные возрастные регенераторные явления, которые можно наблюдать в данном возрасте, выражаются в виде спраутинга. Процесс спраутинга заключается в формировании отдельных глобул небольших размеров с высокой активностью ХЭ. Характерной особенностью сложных конструкций ФАЗ НМС мышц глазного яблока является отсутствие типичного трабекулярного рисунка. Сложные ФАЗ представлены, как правило, скоплением ХЭ-позитивных глобул и гранул, имеющих различную активность фермента. На протяжении изученного периода онтогенеза в области НМС скелетных мышц глаза наблюдаются естественные возрастные дегенеративные и регенераторные процессы. Такие явления, как неравномерное снижение активности фермента и увеличение площади ФНЗ указывает на дегенеративные изменения в области НМС. Формирование глобул малого размера около НМС или

выстраивающихся в цепочки, что наблюдается в изученных мышцах в период с 6-го по 12-ый месяцы, свидетельствует о разрастании нервной терминали - явлении "спраутинга" -естественной регенерации НМС.

Во все изученные возрастные периоды в мышцах глазного яблока отмечаются явления около- и внесинаптической активности фермента. Эти явления проявляются в виде отдельных ХЭ-позитивных зерен или глобул вблизи от области НМС, а также окрашивания прилежащего участка MB. В 6 и 12 месяцев во всех мышцах глазного яблока наблюдается неупорядоченная активность фермента в виде формирования на MB "сгустков" или "хлопьев" светлого коричневато-желтоватого цвета как вблизи от области НМС, так и на достаточно большом расстоянии от них. Наблюдаемое явление может быть объяснено с точки зрения А.Г. Гинецинского (1970), который указывал на возможность локализации АХЭ за пределами нервного окончания на протяжении MB, и в частности тонических волокон. Другие исследователи также указывают на более высокую активность ХЭ и большее содержание ацетил-холина в тонических мышцах (Португалов В.В., 1955; Шама-рина Н.М., 1971; Сагдеев Р.Б., 1971). Об этом также свидетельствует некоторая активность в области ФНЗ НМС изученных мышц, незначительная в сравнении с областью ферме-топозитивного участка.

Отличительной особенностью скелетных мышц глазного яблока является также наличие "гроздьевидных" конструкций ФАЗ НМС. Данные формы ФАЗ представлены отдельными мелкими глобулами, расположенными на достаточно большом протяжении MB. Среди "гроздьевидных" ФАЗ преобладают вытянутые по форме конструкции, ориентированные по длине MB. Активность фермента образующих данные ФАЗ глобул, как правило, ниже, чем в области НМС с другими формами сложных конструкций. Подобные конструкции, по-видимому, соответствуют гроздьевидному типу двигательных нервных окончаний, характерных для тонических MB амфибий и рептилий (Аристова Н.К., 1952; Мавринская Л.Ф., 1962; Coers С, 1967; Hess А., 1970; Наследов ГА., 1981; Carry M., Morita M., 1984). Гроздьевидные окончания характерны и для тонических мышц млекопитающих (Hess A., 1961; Матюшкин Д.П., 1961, 1963; Fernand V.S.V., Hess A., 1969). Увеличение количества "гроздьевидных" ФАЗ наблюдается в период первой зрелости, в возрасте с 6 по 12 месяцев их соотношение с другими

формами ФАЗ НМС составляет от 15 до 40%. Возможно, это связано не только с возрастными преобразованиями НМС, но и с продолжающимся до 5 - 6 месяца становлением типов MB и изменением профиля с окислительно-гликолитического и гликолитического на окислительный (Тамбовцева Р.В., 1988; Тамбовцева Р.В., Корниенко И.А., 1988). Располагаются "гроз-дьевидные" конструкции преимущественно по краям мышц. Наблюдая расположение темных MB в наружных частях изученных мышц, а переходных - во внутренней области, можно предположить, что "гроздьевидные" ФАЗ НМС как раз являются эффекторным аппаратом медленных, оксидативных волокон. Единичные ФАЗ НМС, имеющие трабекулярный характер отложения конечного продукта реакции, соответствуют волокнам типа А - гликолитическим. Таким образом, подтверждаются данные о том, что для белых MB характерны крупные концевые пластинки, имеющие сложное строение, на красных MB концевые пластинки - маленькие, с менее сложной структурой, слаборазвитым субсинаптическим аппаратом (Padykula H.A., Gauthier G.F., 1970; Митин К.С, Секамова СМ., 1973; Ogato Т., 1988; Томилин Н.В. с соавт., 1990).

В ходе исследования было установлено, что особенностью иннервации MB в скелетных мышцах глаза является достаточно часто встречающаяся двойная иннервация MB (1 - 3 % во всех мышцах на протяжении всего изученного периода онтогенеза). Согласно данным литературы (Мавринская Л.Ф., 1962; Жуков Е.К., 1969; Шамарина Н.М., 1971; Carry M., Morita М., 1984; Балезина О.П., 1989, 1990) фазные MB имеют, как правило, одно, реже - два, двигательных окончания (одиночная иннервация). Тонические же MB имеют много НМС, разбросанных по всей длине волокна (множественная иннервация). У млекопитающих полинейрональный тип иннервации отмечен в голосовых мышцах, наружных мышцах глаза, двубрюшной мышце шеи, икроножной мышце (Матюшкин Д.П., 1961, 1963; Rossi G., Cortesina G., 1965; Teravainen H., 1968; Hess A., 1970; Балезина О.П., Посконова М.А., 1990; Филимонов В.И., 1992; Данилов Р.К., 1996). В мышцах пояса и свободной передней конечности, в жевательных мышцах (Сабельников Н.Е., 2000; Ардашев А.Е., 2002; Огнетов С.Ю., 2002) двойная иннервация MB в условиях нормы практически не отмечается. Тем не менее, по данным О.П. Балезиной (1989), число фазных MB у человека и млекопитающих с множественной иннервацией не превышает 1 - 3%, что соот-

ветствует нашим данным для тонических наружных мышц глаза.

Таким образом, гистохимическая характеристика области НМС, типов МВ, входящих в состав наружных мышц глаза и системы "двигательное окончание - мышечное волокно" позволило выявить ряд существенных особенностей, присущих исчерченной мускулатуре глазного яблока.

выводы

1. Область нейромышечных синапсов наружных мышц глазного яблока характеризуется двумя типами ферментоактивной зоны простой гомогенной, лишенной ферментонегативных участков, формой и сложной, имеющей ферментонегативную зону. Все переходные формы можно отнести к одному из основных типов.

2. Ферментоактивная зона нейромышечных синапсов прямых и косых мышц глазного яблока отличается рядом специфических качественных характеристик. К ним можно отнести формирование сложных конструкций за счет скопления ХЭ-позитивных глобул и гранул, имеющих различную активность фермента; частые явления внесинаптической активности хо-линзстеразы, иногда на большом удалении от области нервного окончания. Типичные трабекулярные сложные ФАЗ ней-ромышечных синапсов для мышц глаза не характерны.

3. В процессе постнатальной жизни животного в наружных мышцах глазного яблока можно наблюдать естественные возрастные дегенеративные (неравномерное снижение активности фермента, увеличение ферментонегативной зоны нейро-мышечного синапса) и естественные возрастные регенеративные (процесс спраутинга - формирование отдельных глобул с высокой активностью фермента и дальнейшая трансформация данных глобул в сложные формы) процессы.

4. Исчерченная мышечная ткань прямых и косых мышц глаза представлена мышечными волокнами оксидативно-гли-колитического и оксидативного типа (по активности СДГ) в соотношении 1.2 - 1.3. Таким образом, наружные мышцы глаза являются медленными (тоническими) мышцами.

5. Как следствие большого количества медленных мышечных волокон, отличительная особенность наружных мышц глазного яблока заключается в формировании "гроздьевидных" форм ферментоактивных зон нейромышечных синапсов, увеличение числа которых наблюдается с 6-го месяца (репродук-

тивный период) постнатального развития.

6. Морфометрические параметры системы "двигательное окончание - мышечное волокно" сопоставимы как между отдельными мышцами в данной анатомической группе мышц, так и по возрастной динамике, что подтверждает общие закономерности качественных изменений, происходящих в мышечном волокне и нервном окончании наружных мышц глазного яблока в изученные возрастные периоды.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Данные диссертационного исследования указывают на необходимость учитывать специфику организации системы «двигательное окончание - мышечное волокно» при лечении заболеваний глазодвигательного аппарата глаза.

2. Результаты исследования являются теоретическим обоснованием корректив, вносимых в лечение, в зависимости от принадлежности больного к конкретной возрастной группе.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Шамшурина И.В., Чучков В.М. Гистотопография и качественная характеристика ферментоактивных зон нейромы-шечных синапсов некоторых мышц глазного яблока // "Морфологические ведомости". -Москва - Минск, 2002. №3-4. -С.66-67.

2. Шамшурина И.В., Сабельников Н.Е., Чучков В.М. Гистохимическая характеристика нейромышечных синапсов дорсальной прямой мышцы глаза в онтогенезе // "Морфологические ведомости". -Москва - Минск, 2003. №1-2. -С.47-49.

3. Шамшурина И.В. Качественная и морфометрическая характеристика ферментоактивных зон нейромышечных синапсов латеральной прямой мышцы глаза // "Морфологические ведомости". -Москва - Минск, 2003. №3-4. -С.49-50.

4. Шамшурина И.В. Характеристика ферментоактивных зон нейромышечных синапсов латеральной прямой мышцы глаза белой крысы // В сб.: "Актуальные медико-биологические проблемы". Матер. II! межвуз. конф. мол. ученых и студ. Ижевск, "Экспертиза", 2003, С.78-79.

5. Шамшурина И.В., Чучков В.М., Сабельников Н.Е. и др. Возрастные преобразования нейромышечного синапса скелетных мышц // В сб.: Труды Ижевской гос. мед. акад. Т^. Ижевск, "Экспертиза", 2003, С.39-42.

6. Шамшурина И.В., Чучков В.М., Сабельников Н.Е., Милехина Н.В., Рахимов И.Ш. Возрастные преобразования фер-ментоактивной зоны нейромышечного синапса некоторых скелетных мышц крысы // В сб.: "Гистологическая наука России в начале XXI века: итоги, задачи, перспективы". Матер. Всерос. науч. конф., М., 2003, С.139-141.

7. Шамшурина И.В. Гистохимическое определение типов мышечных волокон наружных мышц глаза по активности СДГ / / В сб.: "Актуальные медико-биологические проблемы". Матер. IV межвуз. конф. мол. ученых и студ. Ижевск, "Экспертиза", 2004, С.75-77.

ПРИНЯТЫЕ СОКРАЩЕНИЯ:

АХЭ - ацетилхолинэстераза СДГ - сукцинатдегидрогеназа МВ - мышечное волокно НМС - нейромышечный синапс ФАЗ - ферментоактивная зона ФНЗ - ферментонегативная зона ХЭ - холинэстераза

Издательство «Экспертиза» ЛУ №066 от 05.04.1999 г. 426009, г. Ижевск, ул. Ленина, 87-а, тел. 75-24-93

18 стр. тираж 100 экз. Подписано в печать 26 02.2004

Р- 570 5

Содержание диссертации, кандидата медицинских наук, Шамшурина, Ирина Владимировна

I. ВВЕДЕНИЕ

И. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

III. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

IV. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

4.1. Гистохимическая характеристика области нейромышечного синапса мышц глазного яблока

4.1.1. Гистохимическая характеристика ферментоактивных зон нейромы-шечных синапсов дорсальной прямой мышцы глаза

4.1.2. Гистохимическая характеристика ферментоактивных зон нейромы-шечных синапсов латеральной прямой мышцы глаза

4.1.3. Гистохимическая характеристика ферментоактивных зон нейромы-шечных синапсов вентральной прямой мышцы глаза

4.1.4. Гистохимическая характеристика ферментоактивных зон нейромы-шечных синапсов медиальной прямой мышцы глаза

4.1.5. Гистохимическая характеристика ферментоактивных зон нейромы-шечных синапсов дорсальной косой мышцы глаза

4.1.6. Гистохимическая характеристика ферментоактивных зон нейромы-шечных синапсов вентральной косой мышцы глаза • - - - '

4.1.7. Резюме

4.2. Определение типа мышечных волокон мышц глазного яблока по активности сукцинатдегидрогеназы

4.2.1. Определение типа мышечных волокон мышц глазного яблока по активности сукцинатдегидрогеназы

4.2.2. Резюме

Введение Диссертация по биологии, на тему "Гистохимическая характеристика наружных мышц глазного яблока"

Исследование иннервации скелетной мускулатуры, связи между строением и функцией как нервного, так и мышечного компонентов системы «нервное волокно - мышечное волокно» с применением различных методологических подходов продолжается и в настоящее время (Шамарина Н.М., 1971; Загребин A.M., 1972; Женевская Р.П., 1974; Чучков В.М., 1991; Waerhaug О., Lomo Т., 1994). Среди гистохимических интересной представляется методика с использованием тиоуксусной кислоты в модификации Николаева - Шилкина (1983), позволяющая выявить активность истинной холинэстеразы (ХЭ) в постсинаптической части нейромышечного синапса (НМС). Изучена область НМС различных скелетных мышц в разные возрастные периоды постнатального онтогенеза и при некоторых экзогенных воздействиях, в частности на примере деэфферентации, деафферентации и химической десимпатизации, а также в условиях различной функциональной активности (Филимонов В.И., 1992, 1998; Шилкин В.В., Филимонов В.И., 1997; Сабельников Н.Е., 2000; Ковригина Т.Р., 2001; Ардашев А.Е., 2001; Огнетов Ю., 2002).Интересными являются работы по установлению типов мышечных волокон (MB), составляющих ту или иную скелетную мышцу (Мавринская Л.Ф., Резвяков Н.П., 1978; Гарифьянова М.Б., 1996, 1997; Филимонов В.И., 1998; Шумихина Г.В., 2000). В результате проведенных исследований были получены новые данные о преобразованиях ферментоактивных зон (ФАЗ) НМС скелетных мышц в зависимости от возраста животного (Сабельников Н.Е., 2000; Ардашев А.Е. 2001), от происхождения мышцы (Огнетов Ю., 2002), установлена связь между типом MB и характеристикой ФАЗ НМС (Филимонов В.И., 1998; Огнетов СЮ. с соавт., 2002). Тем не менее, гистохимическая характеристика системы «двигательное окончание - мышечное волокно» исчерченной мускулатуры глазного яблока не проводилась.Цель и задачи исследования. Целью настоящего исследования является установление гистохимической характеристики области неиромышечного синапса и типов мышечных волокон наружных мышц глазного яблока.В ходе исследования в соответствии с поставленной целью были определены следующие задачи: 1. Описать гистохимическую характеристику области нейромышечных синапсов прямых и косых мышц глазного яблока в ключевые периоды постнатального онтогенеза.2. Определить морфометрические показатели ферментоактивных зон нейромышечных синапсов исследуемых мышц.3. Установить гистохимический профиль мышечных волокон по активности СДГ в исследуемых мышцах глазного яблока.4. Изучить зависимость гистохимической картины области неиромышечного синапса исследуемых мышц от типа мышечных волокон.Научная новизна. Впервые проводится качественный и морфометрический анализ ФАЗ НМС прямых и косых мышц глазного яблока с использованием гистохимической методики Николаева Шилкина (1983) и морфометрических методов. Полученные результаты сопоставляются с типом мышцы, определенному по активности СДГ. В результате проведенного исследования получены новые данные о преобразованиях ФАЗ НМС прямых и косых мышц глазного яблока в пубертатном, репродуктивном периодах и периоде первой зрелости.Установлены основные возрастные изменения двигательных окончаний данных скелетных мышц.Научно-практическая ценность. Работа имеет важное теоретическое значение для морфологии опорно-двигательного аппарата и нейроморфологии. Полученные новые данные по гистохимической характеристике системы «двигательное окончание — мышечное волокно» наружных мышц глазного яблока могут быть использованы в учебном процессе морфологических курсов при изучении мышечной ткани и нервной системы. Помимо теоретического интереса, данная работа может иметь выход в практическую медицину. Особенности организации НМС мышц глазного яблока должны учитываться в таких специальностях, как неврология и офтальмология.Положения, выносимые на защиту.1. Качественная характеристика ферментоактивных зон нейромышечных синапсов прямых и косых мышц глазного яблока значительно отличается от других скелетных мышц.2. Характеристика ферментоактивных зон нейромышечных синапсов зависит от типа мышечных волокон, входящих в состав мышцы.3. В процессе постнатальной жизни в наружных мышцах глазного яблока наблюдаются определенные качественные и морфометрические изменения фрементоактивных зон нейромышечных синапсов, адекватные изменениям, наблюдаемым в прочих скелетных мышцах.Апробация работы. Основные положения работы доложены и обсуждены на III Межвузовской конференции молодых ученых и студентов (Ижевск, 2003); на Всероссийской научной конференции «Гистологическая наука России в начале XXI века: итоги, задачи, перспективы» (Москва, 2003); на заседании Удмуртского отделения ВрНОАГЭ (Ижевск, 2004).Реализация результатов исследования. По материалам диссертации опубликовано 7 работ.Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 100 страницах машинописного текста и включает 8 таблиц, 84 микрофотографию. Список литературы (на 15 страницах) представлен 154 источниками из них: 92 отечественных 62 иностранных авторов.

Заключение Диссертация по теме "Гистология, цитология, клеточная биология", Шамшурина, Ирина Владимировна

1. Область нейромышечных синапсов наружных мышц глазного яблока характеризуется двумя типами ферментоактивной зоны: простой гомогенной, лишенной ферментонегативных участков, формой и сложной, имеющей ферментонегативную зону. Все переходные формы можно отнести к одному из основных типов.2. Ферментоактивная зона нейромышечных синапсов прямых и косых мышц глазного яблока отличается рядом специфических качественных характеристик. К ним можно отнести формирование сложных конструкций за счет скопления ХЭ-позитивных глобул и гранул, имеющих различную активность фермента; частые явления внесинаптической активности холинэстеразы, иногда на большом удалении от области нервного окончания. Типичные трабекулярные сложные ФАЗ нейромышечных синапсов для мышц глаза не характерны.3. В процессе постнатальнои жизни животного в наружных мышцах глазного яблока можно наблюдать естественные возрастные дегенеративные (неравномерное снижение активности фермента, увеличение ферментонегативной зоны нейромышечного синапса) и естественные возрастные регенеративные (процесс спраутинга -

формирование отдельных глобул с высокой активностью фермента и дальнейшая трансформация данных глобул в сложные формы) процессы.4. Исчерченная мышечная ткань прямых и косых мышц глаза представлена мышечными волокнами оксидативно-гликолитического и оксидативного типа (по активности СДГ) в соотношении 1:2 - 1:3. Таким образом, наружные мышцы глаза являются медленными (тоническими) мышцами.5. Как следствие большого количества медленных мышечных волокон, отличительная особенность наружных мышц глазного яблока заключается в формировании «гроздьевидных» форм ферментоактивных зон нейромышечных синапсов, увеличение числа которых наблюдается с

6-го месяца (репродуктивный период) постнатального развития.6. Морфометрические параметры системы «двигательное окончание - мышечное волокно» сопоставимы как между отдельными мышцами в данной анатомической группе мышц, так и по возрастной динамике, что подтверждает общие закономерности качественных изменений, происходящих в мышечном волокне и нервном окончании наружных мышц глазного яблока в изученные возрастные периоды.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата медицинских наук, Шамшурина, Ирина Владимировна, Саранск

1. Гарифьянова, М.Б. Морфогистохимический анализ мимических мышц кролика / М.Б. Гарифьянова // Прикладные аспекты исследования скелетных, сердечных и гладких мышц: Тез. докл. Всероссийской конференции. -Пущино, 1996. -С.55.

2. Гарифьянова, М.Б. Вторичная контрактура мимической мускулатуры (клинические, нейрофизиологические и морфогистохимические аспекты. Патогенез. Лечение.): Автореф. дисс.... докт. мед. наук.- Казань, 1997. -46с.

3. Гамбарян, П.П. Крыса / П.П. Гамбарян, Н.М. Дукельская. -М.: Советская наука, 1955. -246с.

4. Гинецинский, А.Г. Химическая передача нервного импульса и эволюция мышечной функции / А.Г. Гинецинский. -Л.: Наука, 1970.-203с.

5. Гинецинский, А.Г. Холинэргическая структура мышечного волокна / А.Г. Гинецинский // Физиол.журн. СССР им. И.М.Сеченова, -1947. -т.ЗЗ, -№4, -С.413-428

6. Гинецинский, А.Г. Электрический и химический факторы в процессе нервно-мышечного проведения / А.Г. Гинецинский // Физиол.журн. СССР им. И.М.Сеченова, -1947. -т.ЗЗ, -№6, -С.763-

7. Глебов, Р.Н. Функциональная биохимия синапсов / Р.Н. Глебов, Г.Н. Крыжановский. -М.: Медицина, 1978. -326с.

8. Гранит, Р. Основы регуляции движений / Р. Гранит. М.: Мир, 1973.-367 с.

9. Данилов, Р.К. Выявление нервно-мышечных синапсов на изолированных мышечных волокнах / Р.К. Данилов, А.Г. Маннапов, З.Б. Ишмеева // Архив анат., гистол. и эмбриол., -1989. -№4,-С.81-83

10. Данилов, Р.К. Гистогенетические основы нервно-мышечных взаимоотношений / Р.К. Данилов. -СПб, 1996. -132с.

11. Епхиева, Х. Ранний постнатальный гистогенез и регенерация мышц и их нервных приборов у неполовозрелых крыс: Автор. дис....канд. мед. наук, Смоленск, 1973. -22с.

12. Женевская, Р.П. Нервно-трофическая регуляция пластической активности мышечной ткани / Р.П. Женевская. -М: Наука, 1974. -239с.

13. Жуков, Е.К. Очерки по нервно-мышечной физиологии / Е.К. Жуков. -Л.: Наука, 1969. -287с.

14. Жуков, Е.К. О тетаническом и тоническом компоненте в рефлекторной реакции скелетной мышцы лягушки / Е.К. Жуков, Г.А. Наследов // Бюлл.эксп.биол. и мед., -1952. -№5, -С.30-33

15. Загребин, A.M. Организация нервного аппарата скелетной мускулатуры и его динамика при некоторых экстремальных воздействиях: Автор. дис....док. мед. наук, Куйбышев, 1972. -32с.

16. Кибяков, А.В. Современное состояние теории химической передачи возбуждения / А.В. Кибяков // Усп.совр.биол., -1959. -т.47, -№3, -С.265-276

17. Клишов, А.А. Гистогенез соматической мускулатуры и ее нервных элементов: Автор. дис....канд. мед. наук, -Л., 1961. -19с.

18. Клишов, А.А. Эмбриогенез нервных элементов соматической мускулатуры человека / А.А. Клишов // Архив анат.,гистол. и эмбриол., -1960. -т.39, -№8, -С.76-87

19. Ковешникова, А.К. К вопросу об иннервации статических и динамических мышц / А.К. Ковешникова // Известия естест.-науч. ин-та им. П.Ф.Лесгафта. М., -1954. -т.26, -С. 172-189

20. Ковешникова, А.К. Постэмбриональное развитие двигательных нервных окончаний человека и животных / А.К. Ковешникова, Е.С. Яковлева // Проблемы функциональной морфологии двигательного аппарата. М.: Медгиз, 1956. -С. 135-146

21. Ковригина, Т.Р. Энзимохимическая характеристика нейромышечного синапса икроножной мышцы деафферентированной белой крысы: Автор. дис....канд. мед. наук, -С.-Петербург, 2001. -23 с.

22. Лавдовскии, М.Д. Новые данные для гистологии, истории развития и физиологии периферических нервов и нервных концевых приборов; П. О нервных окончаниях мышц и кожного снаряда / М.Д. Лавдовскии // Военно-медицинский журн., -1884. -ч.151,-кн.11,12

23. Лаврентьев, Б.И. Морфология антагонистической иннервации в автономной нервной системе и методы ее исследования / Б.И. Лаврентьев // Морфология автономной нервной системы. -М.: 1939.

24. Маврина, Р. А. Влияние колхициновой блокады аксонного транспорта на постнатальную дифференцировку быстрой и медленной мышц крысы: Автор. дис....канд. мед. наук, Казань, 1984. -21с.

25. Мавринская, Л.Ф. Возрастные изменения двигательных нервных окончаний в скелетных мышцах человека / Л.Ф. Мавринская // Тр.Куйбыш.мед.ин-та. Куйбышев, -т. 11, -1960. -С. 182-191

26. Мавринская, Л.Ф. Гистохимическое изучение холинэстеразы в процессе развития соматической мускулатуры плодов человека / Л.Ф. Мавринская // Архив анат.,гистол. и эмбриол., -1962. -№3, -С.30-43

27. Мавринская, Л.Ф. Мотонервные окончания у позвоночных / Л.Ф. Мавринская // Тр. V Всесоюз. съезда анат., гистол. и эмбриол. -Л.: Медгиз, -1951. -т.1, -С. 515-517

28. Мавринская, Л.Ф. Эволюционно-морфологические изменения мионеврального синапса в ряду позвоночных / Л.Ф. Мавринская // Архив анат., гистол. и эмбриол., -1962. -№12, -С. 3-22

29. Мавринская, Л.Ф. Экстрафузальные мышечные волокна, их типы и биологическая характеристика / Л.Ф. Мавринская, Н.П. Резвяков // Архив анат., гистол. и эмбриол., -1978. -№11, -С.23-40

30. Манолов, Холинэстеразная активность и чувствительные нервные окончания в поперечнополосатой мускулатуре / Манапов // Архив анат., гист. и эмбр., -1965. -№11, -С. 19-22

31. Матюшкин, Д.П. Две моторные системы в глазодвигательном аппарате у высших животных / Д.П. Матюшкин // Физиол. ж. СССР. -1963. -Т.49, -С.600-608

32. Матюшкин, Д.П. О наличии фазных и тонических нейромоторных единиц в глазодвигательном аппарате кролика / Д.П. Матюшкин // Физиол. ж. СССР. -1961. -Т.47, -С.960-976

33. Махинько, В.И. Константы роста и функциональные периоды развития в постнатальной жизни белых крыс / В.И. Махинько, В.Н. Никитин // Молекулярные и физиологические механизмы возрастного развития. Киев: Наукова Думка, 1975. -С.308-326

34. Махмудов, А. Сравнительное и экспериментальное исследование строения и гистохимии двигательных и чувствиетльных приборов в скелетной мускулатуре: Автор. дис....канд. мед. наук, Андижан, 1967.-18с.

35. Митин, К.С. Ультраструктура аксомышечных синапсов человека / К.С. Митин, СМ. Секамова // Архив анат.,гистол. и эмбриол., -1973. -T.LXV, -№8, -С.39-45

36. Наследов, Г.А. Тоническая мышечная система позвоночных /Г.А. Наследов. Л.: Наука, 1981. -187с.

37. Николаев, Г.М. Изменение активности ацетилхолинэстеразы в моторных окончаниях поперечнополосатой мускулатуры при гипоксической гипоксии / Г.М. Николаев // Архив патологии, -1970.-№3,-С.61-65

38. Николаев, Г.М. Опыт определения активности ацетилхолинэстеразы в структурах периферической нервной системы / Г.М. Николаев, В.В. Шилкин // Проблемы морфогенеза периферических нервов: Сб. науч.тр. ЯГМИ. -Ярославль, 1983. -С.64-72

39. Огнетов, СЮ. Возрастная морфология нейромышечных синапсов скелетных мышц производных висцеральных дуг и вентральных миотомов: Автор. дис....канд. мед. наук, -Саранск, 2002. -20 с.

40. Огнетов, СЮ. Нейромышечный синапс: органная характеристика, возрастные преобразования (гистоэнзимохимическое исследование) / С Ю . Огнетов, Н.Е. Сабельников, В.М. Чучков; Под ред. В.В. Шилкина. -Ижевск, 2002. -163 с.

41. Пирс, Э. Гистохимия: Теоретическая и прикладная / Э. Пирс; Под ред. проф. В.В. Португалова. -М.: Изд. Иностранной литературы, 1962. -962с.

42. Поздняков, О.М. Электронно-гистохимическое исследование холинэстразы в нервно-мышечном синапсе крысы / О.М. Поздняков // Бюлл.экспер.биол. и мед., -1968. -№8, -С.112-115

43. Португалов, В.В. Очерки гистофизиологии нервных окончаний / В.В. Португалов. -М.: Медгиз, 1955. -224с.

44. Португалов, В.В. Локализация холинэстеразы в поперечнополосатых мышцах /В.В. Португалов, В.А. Яковлев // Доклады АН СССР, новая серия, -1951, -№5, -С. 1021-1024

45. Посконова, М.А. Формирование нервно-мышечного контакта / М.А. Посконова, О.П. Балезина // Нервный контроль структурно-функциональной организации скелетных мышц, -Л.: Наука, 1980. -С52-68

46. Радзюкевич, Т.Л. Взаимоотношение пре- и постсинаптических элементов в нервно-мышечных окончаниях разного функционального профиля у лягушки Rana temporaria / Т.Л. Радзюкевич // Журн.эвол.биох. и физиол., -1994. -т.ЗО, -№3, -С.420-423

47. Резвяков, Н.П. Морфометрическое и гистохимическое изучение «трофического» влияния нервов на скелетные мышцы и вкусовые луковицы: Автор. дис....канд. мед. наук, 1973. -22с.

48. Фалин, Л.И. Об изменении моторных нервных окончаний при экспериментальной атрофии поперечнополосатой мышцы. Сообщение 2. / Л.И. Фалин // Архив биол.наук, -1938. -т.ХЫХ, -вып.З.,-С. 134-146

49. Филимонов, В.И. Закономерности постнатальной дифференцировки ХЭ-позитивной зоны нейромышечного синапса и ее преобразования после хирургической денервации и шва нерва: Автор. дис....канд. мед. наук, -Ярославль, -1992. -21с.

50. Филимонов, В.И. Конструкция ферментоактивной зоны нейромышечного синапса и ее преобразования в эксперименте: Автор. дис....док. мед. наук, Москва, 1998. -38с.

51. Худорожева, А.Т. Функциональные свойства нервно-мышечного прибора в онтогенезе / А.Т. Худорожева // Физиол.журн. СССР им. И.М.Сеченова, -1947. -т.ЗЗ, -№5, -С.637-650

52. Черногрядская, Н.А. Сравнительно-гистологическое исследование двигательных нервных окончаний в соматической мускулатуре позвоночных: Автор, дис.. .канд. биол. наук, Ленинград, 1952. -23с.

53. Чирьев, 1879; по данным: Шамарина, Н.М. Синаптическая передача в тонических и нетонических мышцах / Н.М. Шамарина. -М.: Наука, 1971.-283с.

54. Чучков, В.М. Возрастная морфология проводникового аппарата мышечных нервов (морфо-экспериментальное исследование): Автор, дис...док. мед. наук, Москва, 1991. -49с.

55. Шамарина, Н.М. Синаптическая передача в тонических и нетонических мышцах / Н.М. Шамарина. -М.: Наука, 1971. -283с.

56. Шилкин, В.В. Морфометрический анализ нейромышечного синапса /В.В. Шилкин, И.Д. Емельянов // Проблемы морфогенеза периф. нервов: Сб.науч.тр.ЯГМИ. -Ярославль, 1983. -С.73-77

57. Шилкин, В.В. Изменения АХЭ-позитивной зоны нейромышечного синапса после реиннервации мышцы / В.В. Шилкин, В.И. Филимонов, В.А. Кривов, СВ. Рицков // Актуальные вопросы медицинской морфологии. -Ижевск, 1992. -С.141-145

58. Шилкин, В.В. Возможности структурной перестройки нейро- мышечного синапса / В.В. Шилкин, В.И. Филимонов // Рос. морфол. ведомости, -М., -1997. -№1(6), -С. 153-159

59. Шилкин, В.В. Закономерности конструкции нейро-мышечного синапса некоторых скелетных мышц белой крысы / В.В. Шилкин, В.И. Филимонов // Рос. морфол. ведомости, -М., -1997. -№1 (6), -С.159-165

60. Шилкин, В.В. Возрастные, дистрофические и регенераторные изменения нейромышечного синапса (НМС) по данным гистохимического анализа / В.В. Шилкин, В.И. Филимонов, В.А. Кривое // Морфология, -1993. -№7-8, -С.59

61. Шишова, Л.И. Гистотопография двигательных нервных окончаний разных групп скелетных мышц / Л.И. Шишова, Н.Е. Сабельников, А.Е. Ардашев // Рос. морфол. ведомости, -М., -1999. -№1-2,-С. 168

62. Шумахер, Г.Х. К функциональному строению наружных глазных мышц человека / Г.Х. Шумахер, И. Фангхэнель, В. Бринкман, Р. Фангхэнель // Архив анат., гистол. и эмбриол. 1971. -Том LX, -вып. 5, -С. 89-93

63. Шумихина, Г.В. Морфологическая характеристика голосовой мышцы гортани человека в онтогенезе / Г.В. Шумихина // Рос. морфол. ведомости, -М., -1997. -№1 (6), -С. 166-167

64. Шумихина, Г.В. Иммуногистохимический профиль мышц гортани при десимпатизации / Г.В. Шумихина, В.Н. Ярыгин, В.М. Чучков // Рос. морфол. ведомости, -М., -1998. -№3-4, -С.96-98

65. Шумихина, Г.В. Типы мышечных волокон в голосовой мышце гортани человека / Г.В. Шумихина // Рос. морфол. ведомости, -М., -1999.-№3-4,-С. 182-186

66. Шумихина, Г.В. Активность АТФ-азы миозина в дилятаторах гортани у новорожденных и детей до года / Г.В. Шумихина, В.В. Валиуллин // Рос. морфол. ведомости, -М., -1999. -№1-2, -С. 171

67. Шумихина, Г.В. Мышцы гортани человека в онтогенезе: Автор. дис....док. мед. наук-Ижевск, 2000. -32 с.

68. Экклс, Дж. Физиология синапсов / Дж. Экклс. _М.: Мир, 1966.

69. Юркянец, Е.А. Исследование симпатических структур интра- и экстрафузальных мышечных волокон лягушки / Е.А. Юркянец // Бюлл.экспер.биол. и мед., -1980. -№8, -С.235-238

70. Bewick, G. Characteristics of end plates formed in mouse sceletal muscles reinnervated by their own or by foreign nerves / Bewick G., Tonge D. // Anat.Rec. -1991. -V.230, -№2, -273-282

71. Birks, R.I. A method for locating the cholin esterase of a mammalian myoneural junction by electron microscopy / Birks R.I., Brown L.M. // J. Physiol., -1960. -V.152, -5-7

72. Blanco, C.E. Quantitative histochemical determinantion of succinic dehydrogenase activity in skeletal muscle fibres / Blanco C.E., Sieck G.C., Edgerton V.R. // Histochem.J. -1988.-V.20, -№4.-P.230-243

73. Boecke, J. Nerve endings, motor and sensory / Boecke J. // Cytology and cellular pathology of the nervous system. N.-Y., -1932. -V.l, -243-315

74. Boylan, K. Autosomal dominant distal spinal muscular atrophy in four generations / Boylan K., Cornblath D., Glass J., et al. // Neurology. -1995. -V.45, -№4,-699-704

75. Callaway, E. Differential loss of neuromuscular connections according to activity level and spinal position of neonatal rabbit soleus motor neurons / Callaway E., Soha J., Van Essen D. // J. Neurosci. -1989. -V.9.-№5,-P.1806-1824

76. Carry, M. Structure and morphogenesis of the neuromuscular junction / Carry M., Morita M. // The Neuromuscular Junction. -N.Y.: Futura, 1984. -P.25-64

77. Close, R.I. Dynamic properties of mammalian skeletal muscles / Close R.I. //Physiol. Rev.- 1972.-V.52. -P. 129-197

78. Coers, C. Structure and organization of the myoneural junction / Coers С // Internat. Rev. Cytol., -1967. -V.22, -239-267

79. Cole, W.V. Structural variations of nerve endings in the striated muscle of the rat / Cole W.V. // J. Compar. Neurol., -1957. -V.108, -№3, -445-463

80. Colman, H. Interactions between nerve and muscle: synapse elimination at the developing neuromuscular junction / Colman H., 1.ichtman J. // Dev.Biol. -1993. -V.156, -№1, -1-10

81. Couteaux, R. Localization of cholinesterases et neuromuscular junction / Couteaux R. // Internat. Rev. Cytol., -1955, -V.4, -355-375

82. Couteaux, R. Motor end-plate structure / Couteaux R. // Structure and function of muscle. -V.l, -N.Y.-London, -Acad. Press, -1960. -337-380

83. Csillik, B. Functional structure of the post-synaptic membrane in the myoneural junction / Csillik B. // Acad. Kiado Publ. House Hung. Acad. Sci. -Budapest, -1967.

84. Csillik, B. Submicroscopic organization of the postsynaptic membrane in the myoneural junction. A polarization optical study / Csillik B. // J. Cell. Biol., -1963. -V.17, -№3, -571-586

85. Davies, A. Relationship between the topographical disposition of motor terminals and fibre types in the toad glutaeus muscle / Davies A., Everett A.W., Bennett M.R. // Proc. Austral. Physiol, and Pharmacol. Soc, -1988. -54

86. Fernand, V.S.V. The occurrence structure and muscle fibers in the tensor tympani and stapedius of the cat / Fernand V.S.V., Hess A. // J. Physiol. (London). -1969. -V.200, -P.547-554

87. Fontaine, B. Localization of nicotinic acetylcholine receptor a-subunit transcripts during myogenesis and motor endplate development in the chick / Fontaine Bertrano, Changeux Jean-Pierre // J. Cell. Biol., -1989. -V.108, -№3, -1025-1037

88. Galvas, P. Direct correlation of histochemical profile the ultrastructure of single myofibres and their neuromuscular junctions from a mixed muscle / Galvas P., Neaves W., Gonyea W. // Anat. Rec, -1982. -V.203,-№1,-1-17

89. Gannet, A. Variations in the distribution of motor end-plates in the avian pectoralis / Gannet A., Gans C. // J.Morphol. -1993. -V.215, -№1,-65-88

90. Gerlach, I. Das Verhaltniss der Nerven zu den Muskeln / Gerlach I. 1.eipzig, 1874.

91. Gomori, G. Histochemical demonstration of sites of cholinesterase activity / Gomori G. // Proc. Soc. Exper. Biol. a. Med., -1948. -V.68, -№2

92. Gray, E.G. The fine structure of nerve / Gray E.G. // Сотр. Bioch. Physiol., -1970. -V.36, -413-446

93. Green, H. A composition of two ATPase based schemas for histochemical muscle fibre typing in various mammals / Green H., Reichmann H., Pette D. // Histochemistry, -1982. -V.76, -№1, -21-31

94. Green, H. Inter- and intraspecies comparisons of fibre type distribution and of succinate dehydrogenase activity in type I, II A and II В fibres of mammalian diaphragms / Green H., Reichmann H., Pette D. // Histochemistry, -1984. -V.81, -№1, -67-73

95. Grinnell, A. Dynamics of nerve-muscle interaction in development and mature neuromuscular junctions / Grinnell A. // Physiol.Rev. -1995. -V.75, -№4, -789-834

96. Hess, A. The sarcoplasmic reticulum, the T-system and the motor terminals of slow and twitch muscle fibers in the garter snake / Hess A. // J. Cell. Biol., -1965. -V.26, -№2, -767-476

97. Hess, A. The structure of extrafusal muscle fibres in the frog and their innervation studied by the cholinesterase technique / Hess A. // Amer. J. Anat., -1960. -V.107, -129-152

98. Hess, A. The structure of slow and fast extrafusal muscle fibers in the extraocular muscles and their nerve endings in guinea pigs / Hess A. // J. Cellular, and Compar. Physiol., -1961. -V.58, -63-80

99. Hess, A. Two kinds of motor nerve endings on mammalian intrafusal muscle fibres revealed by the cholinesterase technique / Hess A. // Anat. Rec, -1961. -V.139, -173-184

100. Hess, A. Vertebrate slow muscle fibers / Hess A. // Physiol. Rev., - 1970.-V.50,-№1,-40-62

101. Ishihara, A. Histochemical differentation of fibers in the rat slow and fast twitch muscles / Ishihara A., Taguchi S. // Jap. J. Physiol., -1991. -V.41,-№2,-251-258

102. Kawabuchi, M. Morphological features of collateral innervation and supernumerary innervation in skeletal muscles of presenile rats / Kawabuchi M , Zhon C , Nakamura K., Hirata K. // Anat.Anz. -1995. -V.177, -№3,-251-265

103. Koelle, G. The histochemical differentiation of types of cholinesterases and their localisation in tissues of the cat / Koelle G. // Journ. Pharmac. a. Exper. Therapie., -1950. -V.100, -№2

104. Koelle, G. A histochemical method for localising cholinesterase activity / Koelle G., Friedenwald J. // Proc. Soc. Exper. Biol. a. Med., -1949.-V.70,-№4

105. Kuhne, W. Untersuchungen tibe motorische Nervenendingung / Kuhne W.//J.Biol.,-1887.-23,-1-148

106. Langley, J.N. On the reaction of cells and of nerve endings to certain poisons, chiefly as regards the reaction of striated muscle to nicotine and curare / Langley J.N. // J.Physiol., -1905. -33, -374

107. Langley, J.N. On nerve endings and special exitable substances in cells / Langley J.N. // Proc.Roy.Soc.Biol., -1906. -78, -170-184

108. Maltin, C. Fiber-type composition of nine rat muscles. I. Changes during the first year of life / Maltin C , Delday M., Baillis A. et al. // Amer. J. Physiol., -1989. -V.257, -№6, -Pt.l, -823-827

109. Miledi, R. The acetylcholine sensitivity of frog muscle fibers after complete and partial denervation / Miledi R. // J. Phisiol., -1960. -V.151,-1-23

110. Miledi, R. Neural control of acetylcholine-sensitivity in rat muscle fibers / Miledi R., Stefani E., Zelena J. // Nature, -1968. -V.220, -497-

111. Murata, F. The ultrastructure of neuromuscular functions of human red, white and intermediate striated muscle fibres / Murata F., Ogata T. // Tonoku J. Exp. Med., -1969. -V.99, -289-301

112. Nachmansohn, D. Chemical and molecular basis of nerve activity / Nachmansohn D. //N.Y., London, Acad. Press, -1959.

113. Ogata, T. Structure of motor endplates in the different fiber types of vertebrate skeletal muscles / Ogata Takuro // Arch. Histol. and Cytol., -1988.-V.51,-№5,-385-424

114. Padykula, H.A. The ultrastructure of the neuromuscular junction of mammalian red, white and intermediate skeletal muscle fibres / Padykula H.A., Gauthier G.F. // J. Cell. Biol., -1970. -V.46, -27-41

115. Rash, John E. Structural and functional correlates of synaptic transmission in the vertebrate neuromuscular junction / Rash John E.,Walrond John P.,Mortia Michio // J. Electron. Microsc. Techn., -1988.-V.10,-№2,-153-185

116. Robertis, E. de. Submicroscopic morphology of the synapse / Robertis E. de. // Internat. Rev. Cytol., -1959. -V.8, -61-96

117. Rossi, G. Morphological study .of the laryngeal muscles in man / Rossi G., Cortesina G. // Acta Otolaryngol. -1965. -V.59, -P.579-592

118. Rossi, G. Multi-motor endplate muscle fibres in the human vocalis muscle / Rossi G., Cortesina G. // Nature (Engl). -1965. -V.206, -№4984, -P.629-630

119. Rowlerson, A. Muscle-spindle distribution in relation to the fibre-type composition of masseter in mammals / Rowlerson A., Mascarello F., Barker D., Saed H. // J. Anat, -1988. -V.161, -37-60

120. Rowlerson, A.M. Histochemical and immunohistochemical properties of skeletal muscle fibres from Rana and Xenopus / Rowlerson A.M., Spurway N.C. // Histochem. J., -1988. -V.20, -№12, -657-673

121. Stein, J.M. Histochemical classification of individuial skeletal muscle fibers of the rat / Stein J.M., Padycyla H.A. // Amer. J. Anat.- 1962.-V.110,-P.103-124

122. Tabuchi, M. Histochemistry of acetylcholine receptors and acetylcholinesterase during the formation of neuromuscular junction in the urodele Hynoblus nigrescens / Tabuchi M., Fujikura K., Inone S. // J.Morphol. -1991. -V.207, -№ 1, -1 -8

123. Teravainen, H. Electron microscopic and histochemical observation on different types of nerve endings in the extraocular muscles of the rat / Teravainen H. // Z. Zellforsch. -1968. -V.90, №3, -P.372-388

124. Teravainen, H. Localization of acetylcholinesterase in the rat myoneural junction / Teravainen H. // Histochem., -1969. -V.17, -162-

125. Tomasi, J. Size-related differences in the branching pattern of the motor nerve terminals in trangularis sterni muscle of the mouse / Tomasi Josep, Fenol Rosa, Santafe Manel, Mayayo Emili // Biol. Cell., -1989.-V.65,-№3,-271-280

126. Van der Laarse W.J. Relationship between myoglobin and succinate dehydrogenase in mouse soleus and plantaris muscle fibres / Van der 1.aarse W.J., Maslam Suharti, Diegenbach P.C. // Histochem. J., -1985. -V.17, -№1,-1-11

127. Waerhaug, O. Factors causing different propertties at neuromuscular junctions in fast and slow rat skeletal muscles / Waerhaug O., Lomo T. // Anat.Embriol.Berl. -1994. -V.120, -№2, -113-125

128. Yamashita, K. Creatin Kinase isoenzymes in different types of rat single muscle fibers / Yamashita K., Watanabe M., Yoshioka T. // Jap.J. Physiol.- 1990. -V.40,- Suppl.l, -P.245

129. Zacks, S.I. The fine structure of neuromuscular junction in mouse and human intercostal muscle with observations on the localization of acetylcholinesterase / Zacks S.I., Blumberg G.M. // J. Histochem. Cytochem., -1960. -V.8, -337-345