Бесплатный автореферат и диссертация по сельскому хозяйству на тему

Генетические маркеры в селекции крупного рогатого скота на устойчивость к заболеванию бруцеллезом

ВАК РФ 06.02.01, Разведение, селекция, генетика и воспроизводство сельскохозяйственных животных

Автореферат диссертации по теме "Генетические маркеры в селекции крупного рогатого скота на устойчивость к заболеванию бруцеллезом"

ВСЕРОССИЙСКИЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ ПЛЕМЕННОГО ДЕЛА (ВНИИплем)

На правах рукописи

СЕМЕНДЕЕВА Ларпса Анатольевна

ГЕНЕТИЧЕСКИЕ МАРКЕРЫ В СЕЛЕКЦИИ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА НА УСТОЙЧИВОСТЬ К ЗАБОЛЕВАНИЮ БРУЦЕЛЛЕЗОМ

Специальность 06.02.01 — Разведение, селекция н воспроизводство сельскохозяйственных животных

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на сопсканпе ученой степени кандидата сельскохозяйственных наук

Лесные цоляны, Московской обл..

1994 г,

Работа выполнена в лаборатории селекции сельскохозяйственных животных по устойчивости к болезням Всероссийского научно-исследовательского института племенного дела.

Научные руководители:

доктор сельскохозяйственных наук, профессор БОРОЗДИН Э. К.,

доктор ветеринарных наук РОМАХОВ В. А.

Официальные оппоненты:

доктор биологических наук, профессор ЛЕБЕНГАРЦ Я. 3.,

кандидат сельскохозяйственных наук, доцент КРАКОСЕВИЧ А. Н.

Ведущее учреждение: Московская ветеринарная академия им. К. И. Скрябина.

Защита состоится «.»/.......ъЯ&КШгрА.АШк г. в Ж часов

на заседании специализированного Совета К 120.63.01 Всероссийского научно-исследовательского института племенного дела.

Адрес института: 141212, Московская область, Пушкинский район, п. Лесные поляны, ВНИИплем.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке института.

Автореферат разослан .МШб/^ЛШк г.

Ученый секретарь специализированного Совета, кандидат сельскохозяйственных наук В. А. ЕПИШИН

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

1.1. Актуальность темы. Несмотря на проводимые профилактические и лечебные санитарно-ветеринарные мероприятия, бруцеллез остается одной из наиболее распространенных и опасных болезней сельскохозяйственных животных. На борьбу с ней ежегодно расходуются огромные средства, значительные убытки хозяйства несут в результате снижения' продуктивности животных и их вынужденной выбраковки, однако эффективность принимаемых мер недостаточна и источники заражения бруцеллезом продуктивных животных и людей во многих хозяйствах сохраняются многие годы. Это вызывает необходимость поиска ранних прогнозирующих тестов, в основе которых лежит генетическая обусловленность устойчивости к данному заболеванию и оценка иммунологического статуса животных.

1.2. Цель и задачи исследований. Целью работы являлось изучение генетической обусловленности иммунологической решсгивности крупного рогатого скота в раннем возрасте и определение возможности испсльзо-вания генетических мвркеров для отбора *нвотных с высоким иммунным статусом и устойчивых к заболеванию бруцеллезом.

Для достижения поставленной цели были сформулированы следующие задачи:

1. Изучить уровень иммунного ответа у телок после вакцинации.

2. Выявить относительное количество телок с низким уровнем иммунного ответа, т. е. с признаками иммунодефицита.

3.Установить возможную связь уровня специфического иммунного ответа с эритроцитарными антигенами, аллелями групп крови и некоторых полиморфных белковых систем.

4. Изучить связь специфического иммунного ответа с гуморальными факторами естественной резистентности.

5. Выявить связь гуморальных факторов естественной резистентности с отдельными эритроцитарными антигенами, аллелями групп крови и полиморфными белковыми системами сыворотки крови (трансферринами и посттрансферринами).

5. Установить степень влияния тех или иных генетических систем на уровень специфического иммунного ответа и гуморальных факторов естественной резистентности.

Научная новизна Впервые выявлена связь специфического иммунного ответа с аллелямии и генотипами полиморфных систем крови, что ¡указывает на возможность прогнозирования ■ специфических иммунологи-

ческих реакций. Показано, что уровень гуморальных факторов естественной резистентности не связан с интенсивностью и сроками развития специфического иммунного ответа.

Практическая ценность. Результаты исследований показали возможность раннего прогнозирования устойчивости крупного рогатого скота к бруцеллезу. Установлена возможность выявления животных, обладающих иммунологическим дефицитом. Найдены генетические маркеры , которые могут быть использованы в селекции крупного рогатого скота на устойчивость к бруцеллезу.

На защиту выносится:

1. Метод оценки иммунного статуса крупного рогатого скота в воз расте 4-6 месяцев по выраженности иммунологических реакций на введе ние противобруцеллезной вакцины из штамма 19.

2. Доказательство того, что до 35% телок имеют низкий уровень иммунного ответа на вакцинацию, свидетельствующий о наличии у них иммунной недостаточности.

3. Установленные различия по отдельным эритроцитарным антигенам аллелям групп крови и генотипам полиморфных белковых систем у живот ных с высоким и низким специфическим иммунным ответом на вакцинацик

4. Выявленные различия по отдельным эритроцитарным антигенам аллелям групп крови и генотипам полиморфных белков у животных с раз ным уровнем гуморальных факторов естественной резистентности.

5. Возможность генетического маркирования отдельными алледямк групп крови и полиморфных белковых систем устойчивости крупного рогатого скота к заболеванию бруцеллезом.

Апробация диссертации. Материалы диссертации доложены на: всесоюзном совещании по проблеме повышения резистентности сель скохозяйственных животных (г. Кострома,1988 г.);

совещании-семинаре "Селекция сельскохозяйственных животных на устойчивость к болезням, повышение резистентности и продуктивного долголетия" (г. Сумы, 1992 г., сентябрь);

семинаре-совещании сотрудников Всероссийского НИИ племенного дела (1994 г.).

Основные положения диссертации опубликованы в 5 статьях.

Объем работы. Диссертация изложена на 131 странице машинописногс текста и состоит из введения .обзора литературы, собственных исследований, заключения, выводов, предложений производству, библиографического списка. Работа иллюстрирована 26 таблицами и 5 рисунками. Библиографический список содержит 165 наименований, в том числе 4? источников на иностранных языках.

2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Работа проводилась в 1985-90 годах в хозяйствах Моздокского района Северной Осетии на полукровных телках (черно-пестрая х голш-тинская породы). В колхозе им. Кирова в эпизоотическом очаге в 1985-1987г.г. были выявлены животные, больные бруцеллезом и животные, остававшиеся здоровыми.

В период с 1987 по 1990 годы были поставлены 2 опыта по вакцинации животных против заболевания бруцеллезом. В первом опыте телки из колхоза Кирова в количестве 146 голов были привиты в возрасте 4-б месяцев вакциной из штамма 19. До постановки опыта .животные не подвергались никакой вакцинации. Через год после первичной вакцинации все телки были ревакцинированы, наблюдение за телками осуществлялось е течение 1,5 лет. Второй опыт был проведен в 1989г. в колхозе "Украина" на 82 телках, они были вакцинированы противобруцел-лезнсй вакциной из штамма 19. До постановки опыта этих телок вакцинировали разными вакцинами, согласно ветеринарного законодательства. Опыт продолжался 6 месяцев.

Напряженность иммунитета определяли через 15, 45дней, 3. 6. 12 месяцев после иммунизации. Степень специфического гуморального иммунного ответа устанавливали но наличию специфических антител в сыворотке крови телок с помощью реакции агглютинации (РА) в пробирках; р?ацяк связывания комплемента на холоде (РДСК), пластинчатой реакции агглютинации с роз-бенгал антигеном (РБП).

Уровень специфических иммуноголобулинов Ig М и Ig G классов определяли с помощью реакции агглютинации с применением меркаптоэта-нола.

Неспецифическую резистентность у телок определяли по лизоцим-ной и бактерицидной активности сыворотки крови (BACK), а также р- лизину общепринятыми методами.

Полиморфизм белков сыворотки крови Tf и Ptf был определен методом электрофореза в полиакриламидном геле.

Статистическую обработку проводили по методикам М. Е. Усцелемо-ва (1989), Л А. Животовского, А. М. Машурова (1974)

Биометрическую обработку проводили по общепринятым методикам (Е. К Меркурьева, 1963; Е А. Плохинский, 1969, Г.Г. Щесь, 1978; С. X. Ларцева, М. К Муксинов, 1985.).

- 5 -

Схема и объемы экспериментальных исследований

Виды исследований ХоЕ зяйства и группы животных

К-з им. Кирова, коровы К-з им. Кирова, телки I опыт К-з "Украина", телки II опыт Всего учтено голов

Исследование иммунологической реактивности животных 2800* 292 (1606) 82 (492) 3174 (2098)

Исследования групп

крови 695* 146 82 923

Исследование полиморфных белковых

систем 309 146 82 537

3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Иммунологическая реактивность телок после вакцинации против бруцеллеза.

Через 15 дней после вакцинации наиболее интенсивно проявляется реакция агглютинации. Роз бенгал проба (РБП) и реакция связывания комплемента (РСК) выражены значительно хуже. В этот период у 23,4% животных наблюдается низкий иммунный ответ. Через 45 дней после иммунизации показания РБП и РСК более выражены, в то время как интенсивность реакции агглютинации несколько снижается. К животным, обладающим низким уровнем иммунологического ответа можно отнести уже 35,5% телок. Через 3 месяца после вакцинации только у 9,9% животных общий уровень можно условно считать высоким.

После реиммунизации, проведенной через год, иммунный ответ в целом был ниже первоначального. Из общего числа животных 34,7% практически не реагировали в серологических реакциях с бруцеллезным антигеном, или уровень этих реакций не превышал сомнительных показателей. У 12,24% животных специфические антитела появились только в крови, взятой через 45 дней. Роз бенгал проба наиболее выражена через 45 дней после ревакцинации. Уровень комплементсвя-зующих антител был достаточно интенсивен через 15 дней после ре-

- б -

иммунизации.

Количество Ig М класса во все сроки было очень низким, только у отдельных животных их уровень превышал 50 ME/мл. Уровень igG класса наоборот, был достаточно высоким. Так уже при первом исследовании в сыворотке крови более 27% животных выявляли IgG класса в титрах, выше 50 ME/мл. Полученные результаты являются подтверждением того, что такой характер иммунологических реакций закономерен для вторичного иммунного ответа.

Иммунный ответ на введение вакцины против бруцеллеза во втором опыте оказался значительно сильнее и нарастание специфических антител в сыворотке крови происходило более интенсивно. Через 15 дней после иммунизации более чем у 98 % животных отмечали интенсивную положительную реакцию по РБП, заметное снижение наблюдалось только через 90 дней. Аналогичная динамика титра антител была отмечена и в PCR. У большинства животных в сыворотке крови уровень агглютининов составил от 200 до 400 ME/мл. Через 90 дней после вакцинации в сыворотке крови 75% подопытных животных обнаруживали показания РА в низких титрах. Иммуноглобулинов IgM класса через 15 дней после иммунизации не имели 10% телок. У 31,1% животных этот класс иммуноглобулинов выявлялся в количестве от 100 до 200 МЕ/мл, у 29,5%- от 200 до 400 ME/мл. Через 45 дней иммуноглобулины класса М отсутствовали у 46 %животных, а через 90 дней - у 58,7 %. Таким образом, иммунный ответ на бруцеллезную вакцину быстро появлялся и довольно быстро затухал. Количество ! gG класса в организме иммунизированных телок нарастало несколько медленнее, но сохранялось значительно дольше, чем IgM.

Исследование связи интенсивности иммунного ответа с полиморфными локусами.

На основании данных серологических реакций зсе животные были разделены на 8 групп (табл.1), как по силе иммунного ответа после первичной и вторичной иммунизации, так и по взаимосвязи этих реакций после обеих иммунизаций.

Большинство животных после первичной иммунизации дали сильный иммунный ответ, а после вторичной иммунизации - наоборот, у значительного количества телок иммунные реакции были слабыми.

Наиболее существенные генетические различия установлены у животных 1, 2 и 5,6 групп.

В табл. 2 представлены результаты, полученные при исследовании алллелей В-локуса групп крови у телок с разным уровнем иммунного ответа.

Таблица 1.

Группировка подопытных телок по силе иммунного ответа (опыт N 1)

Иммунизация

Сила иммунного ответа

N группы

Первичная Высокий 1

Низкий 2

Вторичная Высокий 3

Низкий 4

Связь пер- Высокий-высокий 5

вичной и Низкий- низкий 6

вторичной Высокий-низкий 7

Низкий-высокий 8

Количество животных,%

65,0 35,0 34,7 65,3

23.2

26.3 38,9 11,6

Таблица 2,

Частота встречаемости аллелей В-локуса групп крови у иммунизированных телок (опыт N1)

Аллели Частота встречаемости по группам

1 2 5 6

в^Е'О' 0,208*** 0,081*** 0,125*** 0,031***

У, А' 0,139 0,130 0,150** 0,094**

ОЕ* 0' 0,042 0,048 0,025* 0,063

В, У, А'Б'?; (76- '0,083 0,081 0,050* 0,094

0, 0,014* 0,065* 0,025* 0,063*

Б' Е' Г В' 0* 0,055* 0,032* 0,050 0,063

УД'. 0,028* 0,048* 0,050 0,063

У, А' В' У 0,042 0,032 0,025* 0,063*

0' 0,028* 0,065* - 0,031

в, у, а- гр;о' 0,042 0,048 0,025* 0,063*

"б" 0,167** 0,113** 0,025 0,031

Примечание: * - Р> 0,95, ** - Р> 0,99, *** - Р> 0,999

Самый распространенный в стаде аллель б^Е'С!' достоверно чаще стречается у животных с высоким иммунным ответом. То же самое относится к аллелям и В^А'ГР^С!'. Только у животных с высоким иммунным ответом встречаются аллели В^У^'Б" и А* 0'. Одновременно аллели ОЕ'СГ, 0Г, (3*, В, ОДУ,, А' 0', 1; и В^У, В' в более высоких концентрациях присутствуют в группах животных со слабым иммунным ответом. В таблице 3 представлены данные исследования транс-ферринового локуса у телок с разным уровнем иммунного ответа. Для животных с высоким иммунным ответом характерно снижение частоты встречаемости аллеля ТГ и гомозиготного генотипа ТГ 00. У телок с низким иммунным ответом на вакцинацию снижается частота аллеля Т^ и гомозиготного генотипа ТГ АА.

Таблица 3.

Частота встречаемости аллелей и генотипов трансферрина у иммунизированных телок (опыт N 1)

N группы Аллели трансферрина Генотипы трансферрина

л гь 0 АА АО 00

1 0,548 0,452 0,269 0,558 0.173

о 0,483 0,517 0,233 0,500 0,267

3 0,588 0,442 0,346 0,423 0,231

л 0,474 0,526 0,153 0,619 0,218

5 0,694 0,306 0,500 0,389 0,111

б 0,588 0, 412 0,353 0,473 0,174

7 0,375 0,625 0,125 0,500 0,375

8 0,375 0,625 0,050 0,650 0,300

Ео втором опыте животные были разделены на 2 группы: с высоким и низким иммунным ответом, в каждой из которых расчитывалась частота встречаемости отдельных эритроцитарных антигенов и В-аллелей групп крови. Обращает на себя внимание более широкий спектр аллелей В-сиетемы у животных с высоким иммунным ответом. У этих животных частота встречаемости аллеля В^А'1'Р'0' достоверно выше, а у телок с низким иммунным ответом достоверно выше встречаемость аллелей О, А'ЛаК'О' и 0'.

Между животными первой и второй опытных групп выявлены не полные соответствия в маркерном эффекте отдельных аллелей. Если по аллелям в 2 Хг Е' 0', В, 1гУ/6' В", А' 0", 0, А' £ К' 0', 0* и В^А'ГР'СГ маркерный эффект совпадает, то по таким аллелям, как

ХгА'> СЕ'и Т, он изменился на противоположный. Однако, учитывая, что маркерный эффект больше совпадает, чем различается ( соотношение аллелей, примерно, 2:1), использование для прогноза силы иммунного ответа вариантов аллелей групп крови вполне оправдано.

Группировка животных на больных и здоровых позволила сравнивать частоту встречаемости наиболее распространенных В-алллелей у тех и других особей (табл. 4).

Таблица 4.

Чатота встречаемости аллелей В-локуса групп крови у больных и здоровых животных

Группы крови и контролирующие их аллели частота встречаемости

у здоровых животных п=245 у больных животных п=162

0,195*** 0,091***

У2А' 0,111* 0,087*

А' ГР'СГ 0,095** 0,049**

В^А'б'Р' О'С 0,042* 0,075*

СГ 0,021* 0,063*

"Ь" 0,091*** 0,185***

Среди здоровых животных значительно чаще встречаются носители аллелей е^Е'О', У А', В^А'ГР'СГ, У,А'В'Г, А'0' и В^У^'б".

В то же время, среди больных - гораздо больше носителей аллелей , О', 0,, О^А'Д^К'О' и негативного ("Ь"). Данные по аллелям групп крови, помимо их высокой достоверности, поддаются проверке тестом на аддитивный эффект. Сгруппировав животных в 2 группы - с генотипом В-локуса, состоящими только из плюс аллелей (маркирующих устойчивость к бруцеллезу), и только из минус аллелей (маркирующих восприимчивость к бруцеллезу), определили долю больных и здоровых животных в каждой из этих групп ( табл.5).

Подавляющее преобладание +/+ генотипов в группе здоровых животных и -/- генотипов в группе больных указывает на неслучайный характер выявленных связей. Обращают на себя внимание существенные совпадения в маркировании аллелями Е'СГ .В^ Уг А* ГР^СГ, У^ А', А'0' и В^иУ^Б'З" устойчивости к заболеванию бруцеллезом и интенсивного иммунного ответа у телок первого опыта Одновременно противоположные качества маркируют аллели О, А' У, К' О', 0^ и СЗ*.

Таблица 5.

Распределение маркированных генотипов В-локуса у здоровых и больных животных

Комбинация аллелей в генотипе Соотношение маркированных генотипов

среди здоровых животных (%) среди больных животных (X)

66 1

3 69

остальные комбинации 31 30

У исследованного скота выявлены аллели трансферрина А, В, Е , причем аллель Е встречается довольно редко. У больных животных с наибольшей частотой встречается гетерозиготы АО, а у здоровых - гомозиготы АА.

Исследование связи факторов естественной резистентности с генетическими особенностями животных.

Для анализа связи факторов естественной резистентности с группами крови и с отдельными эритроцитарными антигенами были взяты наиболее значимые аллели и антигенные факторы крови. Самый высокий показатель бактерицидной активности имеют животные - носители антигена Б', маркирующего высокий иммунный ответ (плюс-антиген), а самый низкий - носители антигена Б, маркирующего низкий иммунный ответ (минус-антиген). Самый высокий уровень БАСК имеют животные -носители аллеля 0,А*£К'0' и самый низкий - у носителей аллеля О'.

Уровень ^-лизина находится в пределах 23,4-52,3 у животных, имеющих плюс-антигены, и в пределах 41,3-46,2 у животных с минус-антигенами. Самый высокий уровень лизина отмечен у носителей аллеля В^ А' Г £,'(3', а самый низкий - у носителей аллеля О/А'У^К'О'.

Уровень лизоцима в группе животных -носителей плюс аллелей по иммунному ответу составляет от 2,98 до 4,84 у животных -носителей минус аллелей - от 4,74 до 6,73. Разница в среднем уровне лизоцима между группами статистически достоверна. Средний уровень лизоцима у животных с плюс-аллелями по интенсивности иммунного ответа составляет 4,46, а у животных с минус -аллелями -5,28. Прослеживается четкая обратная зависимость между интенсивностью специфического им-

мунного ответа и уровнем лизоцима. Создается впечатление, что высокий уровень лизоцима является свойством организма компенсировать недостаточную силу специфического иммунитета.

По локусу трансферрина телки с наиболее часто встречающимся генотипом Tf DD имеют самый высокий уровень бактерицидной активности сыворотки крови (45,7%) и JJ-лизина (62,8%), но самый низкий уровень лизоцима (4,3 мкг/мл)у животных с генотипом Tf АА, уровень SACK только на 5% ниже, чем у телок с генотипом Tf DD, уровень J3~лизина на 17% ниже. Активность лизоцима на 25% выше у телок с генотипом Tf АА, чем у телок с генотипом Tf DD. Рассматривая связь с отдельными аллелями, отметим, что животные -носители аллеля Tf D имеют высокий уровень^- лизина и наиболее низкий уровень лизоцима, у телок-носителей аллеля Tf А уровень JJ-лизина существенно ниже, а уровень лмизоцима - существенно ьыше (Р>0,05).

Рассматривав уровень неспецифического гуморального иммунитета у животных разных генотипов по пострансферрину, можно констатировать, что различия между группами совершенно отсутствуют по уровню бактерицидной активности сыворотки крови. Уровень ^-лизина самый высокий у телок с генотипом Ptf АА (46,7%), у животных с генотипом Ftf ВБ уровеньJS-лкзина самый низкий (ниже в 2,1 раза). Телки с гетерозиготным генотипом Ptf АВ имеют промежуточное значение уровня J3-лизина (35,7%).

Активность лизоцима наиболее высокая у телок с генотипом Ptf АА и Ptf ВВ , у животных с генотипом Ptf АВ активность лизоцима на 29% ниже, чем у телок с генотипом Ptf АА..

В целях установления доли влияния отдельных антигенов, аллелей и генотипов различных полиморфных систем на уровень факторов естественной резистентности был проведен соответствующий дисперсионный анализ (табл. 6).

Самая высокая доля влияния обнаруживается при статистическом анализе связей аллелей В-системы групп крови с уровнем факторов естественной резистентности, которая колеблется от 7,0% по лизоциму, до 17% по J3-лизину. При этом, по БАСК и JB-лизину она статистически достоверна. Доля влияния отдельных эритроцитарных антигенов значительно ниже. Доля влияния генотипа трансферрина и посттрансфер-рина аналогична таковой по эритроцитарным антигенам.

Таблица 6.

Доля влияния полиморфных систем крови на уровень факторов естественной резистентности

Факторы резистентности Результаты статистической обработки

Нобщ. Мэбщ. ^ общ. 55 ост. V' ] р

Аллели групп крови

БАСК, % 46 60,4 9,9 9,7 12 0,1 **

лизин, % 46 42,5 20,3 19,4 17 0,1 **

Лизоцим, мкг/мл 46 4,9 2,2 2,2 7 0,1

Эритроцитаркые антигены

БАСК, % 136 61,4 14,1 14,5 7 0,1 --

лизин, % 132 42,7 19,7 20,5 3 0,1 -

Лизоцим, мкг/мл 141 4,7 2,2 2,3 9 од -

Генотипы транеферрика

БАСК, X 58 60,1 10,7 10,5 6 0,03 -

^Г лизин, % 58 44,0 21,2 21,4 1 0,04 -

Лизоцим, мкг/мл 43 4,8 2,4 2,3 8 0,1 -

Генотипы пострансферрина

БАСК, % 38 62,7 7,3 7,5 - - -

лизин, % 29 37,0 22,4 20,7 9 0,1 -

Лизоцим, мкг/мл 27 5,0 2,3 2,2 3 0,1 -

выводы

1. Эффективной оценкой иммунологического статуса крупного рогатого скота в возрасте 4-6 мес. можно считать интенсивность иммунного ответа на введение противобруцеллезной вакцины из штамма 19.

2. При обработке скота противобруцеллезной вакциной из штамма 19 в организме животных, как при первичном, так и вторичном иммунном ответе, вырабатываются, в основном, иммуноглобулины класса М. У 9-10 % животных иммуноглобулины класса 6 вообще не вырабатываются. Это указывает на то, что показателем степени иммунореактивности животных при вакцинации препаратами из штамма 19 можно считать силу первичного иммунного ответа.

3. В исследованных хозяйствах до 35% животных являются иммуно-дефицитными, что служит одной из причин широкого распространения бруцеллезной инфекции.

4. Степень выраженности иммунного ответа зависит от генетических особенностей животных. Эта зависимость установлена по В-локусу групп крови и локусу трансферрина. Во всех случаях аллели 0' и

О,А'];К'0' оказались маркерами слабого иммунного ответа, а аллели ЙД^Е'СУ, В^У А'1'Р'СГ, А*О' и сильного иммунного от-

вета. По локусу трансферрина депрессирующее влияние на иммунореак-тивность оказывает аллель ТГ Б.

5. Динамика факторов естественной резистентности не связана с интенсивностью иммунного ответа на введение противобруцеллезной вакцины из штамма 19. В первые 3 месяца после вакцинации организм животного реагирует на бруцеллы выработкой специфичесих антител. По мере затухания специфического иммунитета, факторы защиты активизируются, за исключением лизоцима, содержание которого выше у животных со слабым иммунным ответом, что указывает на его компенсирующую роль в иммунной защите.

6. Доля влияния отдельных генетических факторов на бактерицидную активность крови варьирует от 0 до 12%. на уровень лизина от 1 до 17%, на активность лизоцима -от 3 до 9%. Это свидетельствует о том, что влияние генетических особенностей животных на уровень факторов естественной резистентности довльно значительно, при этом, влияние аллельных вариантов групп крови статистически достоверно.

7. Генетическими маркерами устойчивости к заболеванию бруцеллезом являются В- аллели: 0Д,Е'<3\ У., А', В^А'ГР'О*, В, ^У^'Б" , А'0', УуА'В'У*. Маркерами восприимчивости к бруцеллезу - Аллели

в,у, к' 6' Р' о' &', о', о,, I, о,. А' ]; к' о' и "Ь".

8. Аллели В-локуса Е'СГ , В, А'1'Р'О' и трансферринового локуса ТГ А являются маркерами как устойчивости к заболеванию бруцеллезом, так и высокого иммунного ответа. В-аллель и ТГ Ю связаны с восприимчивостью к бруцеллезу и слабым иммунным ответом. Это указывает на наличие связи устойчивости к заболеванию бруцеллезом с силой иммунного ответа и позволяет использовать его интенсивность в качестве прогнозирующего показателя.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ 1. В комплекс мероприятий по борьбе с бруцеллезом крупного рогатого скота следует включать селекционно-генетические меры, в которых предусматривается отбор животных желательных генотипов, имеющих плюс-аллели полиморфных систем крови по устойчивости к бруцеллезу.

2. Не допускать для племенного использования животных с аллелями В-локусе групп крови 0', В, ^ А' 6' Р* С' 6" , 0,, О, А'Х'К'О' и "Ь", а тага© с аллелем В трансферринового локуса. На племпредприя-тиях, обслуживающих эти зоны, следует избегать использования производителей, имеющих указанные аллели.

3. С целью раннего прогнозирования устойчивости крупного рогатого скота к бруцеллезной инфекции предлагаем проводить оценку на устойчивость животных к данному заболеванию в возрасте 4-6 месяцев при их вакцинации противобруцеллезной вакциной из штамма 19 . При этом следует учитывать показатели серологических реакций (РБП, РСК и РА), а также уровень специфических антител классов 6 и М через 15 и 45 дней после вакцинации. Животные, показавшие слабый иммунный ответ, оцениваются как особи с повышенным риском заболевания.

СПИСОК РАБОТ ПО МАТЕРИАЛАМ ДИССЕРТАЦИИ

1. Семендеева Л. А., Джахаев С. Д. Изучение иммунного' ответа у телок после вакцинации. // Селекция сельскохозяйственных животных на устойчивость к болезням и повышение естественной резистентности . Сборник трудов ВНИИплем. -М. -1989. - С. 89-92.

2. Семендеева Л. А., Джахаев С. Д. Генетическая обусловленность иммунного ответа у телок после введения бруцеллезной вакцины штамма 19. // Генетические методы в селекции сельскохозяйственных животных. Сборник трудов ВНИИплем. -М. -1990. -С. 31-39.

3. Семендеева Л. А., Джахаев С. Д., Шишлянников В. М. Генетическая обусловленность специфического иммунного ответа // Вопросы генетики сельскохозяйственных животных. Сборник трудов ВНИИплем. -Е-1591. -С. 62-57.

4. Бороздин 3. II, Семендеева Л А. Статистический анализ иммунных реакций . // Вопросы генетики сельскохозяйственных .тавотных . Сборник трудов ВНМКплем. -М. -1991. -С. 68-74.

5. Семендеева Л. А. , Джахаев С. Д,, Шишлянников В. М. Сила иммунного ответа у телок разных генотипов по группам крови // Селекция сельскохозяйственных тавотных на устойчивость к болезням, повышение резистентности и продуктивного долголетия. Бюллетень ВНИИплем. -Выи, 9, -М. -1992. -С. 77-78.