Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Функция лимфотоксина в организации вторичных лимфоидных органов мыши

ВАК РФ 03.00.03, Молекулярная биология

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Туманов, Алексей Валерьевич

Введение.

Обзор литературы. Роль JIT и ФНО цитокинов в развитии и функционировании вторичных лимфоидных органов.

Вторичные лимфоидные органы.

LT и ФНО - многофункциональные цитокины.

1. Роль JIT и ФНО в развитии вторичных лимфоидных органов.

1.1. Развитие лимфатических узлов.

1.2. Развитие MLN.

1.3. Развитие пейеровых бляшек.

1.4. Роль ФНО в развитии ЛУ и ПБ.

1.5. Механизмы развития CD3-CD4+ клеток.

1.6. Развитие лимфоидной ткани, ассоциированной со слизистой носоглоточной полостью (NALT).

1.7. Развитие селезенки.

2. Роль JIT и ФНО в поддержании упорядоченной структуры вторичных лимфоидных органов во взрослом организме.

2.1. Структура вторичных лимфоидных органов во взрослом организме пластична и зависит от системы ФНО-ЛТ

2.2. Роль ФНО/JIT цитокинов в организации структуры маргинальной зоны.

2.3. Какие клетки, экспрессирующие J1T и ФНО, нужны для поддержания правильной структуры вторичных лимфоидных органов?.

2.4. Поддержание упорядоченной структуры селезенки, ЛУ и ПБ поразному регулируется ФНО и ЛТ.

2.5. Хемокины как посредники ЛТ и ФНО в организации структуры лимфоидных органов.

Материалы и методы исследований

Конструирование нокаутирующего вектора для гена ЛТ(3.

Культивирование и трансфекция ES клеток. Анализ гомологичной рекомбинации в ES клетках. Получение нокаутных мышей.

Клонирование cDNA хемокинов CXCL13, CCL21, CCL19. Выделение

Анализ РНК экспрессии методом РНК-протекции. Радиоактивное мечение проб и гибридизация.

Проточная цитометрия.

Мыши. Анализ тимусзависимого иммунного ответа. Пересадки лимфоцитов и клеток костного мозга.

In situ гибридизация.

Иммуногистология.

Выделение DC из селезенки.

Результаты и обсуждение

1. При помощи метода кондиционного генетического нокаута получены мыши с инактивацией гена JITp специфично в Т и В клетках.

2. Лимфотоксин, экспрессирующийся на поверхности В лимфоцитов, необходим для поддержания упорядоченной структуры селезенки.

3. Поддержание упорядоченной структуры ЛУ и ПБ, в отличие от селезенки, не зависит от экспрессии ЛТ комплекса на В клетках.

4. Экспрессия ЛТ на поверхности В клеток не существенна для регуляции ЛТ зависимых генов хемокинов BLC, SLC, ELC.

5. Экспрессия ЛТ на поверхности В клеток не существенна для миграции DC и NK в селезенку.

6. Т и В клетки, экспрессирующие ЛТ комплекс, кооперируют в поддержании упорядоченной структуры селезенки.

7. Нарушенный гуморальный иммунный ответ на тимус-зависимые антигены в В-ЛТр КО и Т,В-ЛТР КО мышах.

8. Другие сигналы с В и Т лимфоцитов кооперируют в развитии FDC в ЛУи ПБ.

Выводы.

Таблица 1.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Функция лимфотоксина в организации вторичных лимфоидных органов мыши"

Изучение механизмов развития и функционирования вторичных лимфоидных органов является важным направлением современной иммунологии и имеет большое значение разработки наиболее эффективных методов иммунокоррекции. Основная функция вторичных лимфоидных органов - обеспечение оптимального микроокружения для взаимодействия антиген-презентирующих клеток с редкими антиген-специфичными лимфоцитами для формирования эффективного иммунного ответа. Нарушение структуры вторичных лимфоидных органов приводит к нарушению иммунного ответа к различным антигенам. В последние годы, с появлением новых методов манипуляции над геномом лабораторных животных, в частности метода генетического нокаута (КО), удалось выявить ключевые гены, необходимые для развития и функционирования вторичных лимфоидных органов.

Неожиданно оказалось, что одним из основных факторов, участвующих в процессах лимфоидного органогенеза, являются Лимфотоксины (LT) альфа и бета и Фактор Некроза Опухолей (ФНО), входящие в состав суперсемейства ФНО/ЛТ и родственных цитокинов. Так, при инактивации гена ЛТа у мыши не образуются лимфатические узлы (ЛУ) и пейеровы бляшки (ПБ), а также нарушена структура селезенки и гуморальный иммунный ответ. Многочисленные исследования показали, что ЛТ и ФНО принимают участие не только в развитии вторичных лимфоидных органах в эмбриогенезе, но также играют важную роль в поддержании их структуры во взрослом организме. Изучение роли ФНО и ЛТ в развитии и функционировании вторичных лимфоидных органов является непростой задачей. Во-первых, ФНО и ЛТ экспрессируются различными типами клеток: ЛТ продуцируется клетками лимфоидного происхождения: Т, В лимфоцитами, NK клетками, в то время как ФНО способны экспрессировать многие клетки организма. Кроме того, получение однозначно интерпретируемой информации затруднено из-за высокой степени избыточности взаимодействия лигандов и рецепторов в системе ФНО/ЛТ, так как один и тот же лиганд может взаимодействовать с несколькими рецепторами (LTa -ФНОР1, ФНОР2, HVEM рецептор) и, наоборот, один и тот же рецептор может принимать сигнал от нескольких лигандов (ФНОР1 - ФНО, ЛТа3, ЛТр,ЬТа2; ЛТ(ЗР -ЛТочЬТрг, LIGHT). Основные лиганд-рецепторные взаимодействия в системе ФНО/ЛТ показаны на рис. 1. Один из подходов для преодоления этих проблем- это изучение химерных мышей, полученных при трансплантации костного мозга или клеток из лимфоидных органов, взятых от мышей, дефицитных по ЛТ/ФНО, в иммунодефицитных реципиентов. Несмотря на важные результаты, полученные при помощи этого метода, он имеет ряд очевидных недостатков. В настоящей работе мы осуществили альтернативный подход, основанный на современных методах генетического нокаута, использующих систему Сге-loxP рекомбинации фага Р1. При помощи этого метода были получены мыши с инактивацией генов ЛТ и ФНО специфично в В или Т лимфоцитах, а также в Т и В клетках одновременно.

Настоящая работа посвящена изучению физиологической роли ЛТ и ФНО в развитии и функционировании вторичных лимфоидных органов мыши.

LT-TNF Ligand Subfamily

ГЙ-ttt

TNF3 LTa, LTft LTa, i.

TNFRII TNFRI v

LT/3R HVEM

LT-TNF Receptor Subfamily

Рис. 1. Основные лиганд-рецепторные взаимодействия в системе ФНО/ЛТ.

Обзор литературы.

Роль JIT и ФНО цитокинов в развитии и функционировании вторичных лимфоидных органов.

Вторичные лимфоидные органы.

Вторичные лимфоидные органы названы так в противопоставление первичным лимфоидным органам (костный мозг, тимус), однако их функциональное значение не менее важно, так как именно в пределах вторичных лимфоидных органов, благодаря их высоко организованной структуре, происходит формирование эффективного иммунного ответа, то есть селекция антиген-распознающих клеток, повышение аффинности антител посредством соматических гипермутаций и рекомбинаций, формирование клеток памяти и клеток, продуцирующих антитела. В отличие от первичных лимфоидных органов, где происходит первичная дифференцировка и обучение Т и В клеток при встрече со "своим" или, образно говоря, "виртуальным", антигеном, в пределах вторичных лимфоидных органов происходит распознавание реального чужеродного антигена, который может быть захвачен специализированными клетками в пределах органа или же принесен из периферии антиген-презентирующими клетками. Вторичные лимфоидные органы располагаются на стратегически важных путях попадания антигена в организм, таким образом, позволяя быстро и качественно реагировать на вторжение чужеродных антигенов.

К вторичным лимфоидным органам относятся: селезенка, лимфатические узлы (ЛУ), пейеровы бляшки (ПБ) и организованные лимфоидные структуры, ассоциированные со слизистыми поверхностями желудочно-кишечного, дыхательного и мочеполового трактов. Наиболее хорошо изучены селезенка, ЛУ и ПБ. Однако в последние годы были также охарактеризованы специализированные органы, ассоциированные со слизистой желудочно-кишечного и дыхательного трактов, для которых пока не существует устоявшихся русскоязычных терминов: cryptopatches (CP), nasopharyngeal-associated lymphoid tissue (NALT) и isolated lymphoid follicles (ILF). Также иногда выделяют третичные лимфоидные органы, которые не являются стабильно организованной лимфоидной тканью, а развиваются преимущественно в нелимфоидных органах при различных патофизиологический ситуациях. В применении к третичных лимфоидных органов также употребляют термин "лимфоидный неоорганогенез" (Ruddle, 1999).

Несмотря на разное внешнее проявление и различные механизмы развития, вторичные лимфоидные органы обладают сходными чертами: это четкая компартментализация Т и В клеточных зон, а также существование специализированного стромального микроокружения, которое не только поддерживает правильную структуру органа, но и обеспечивает молекулярные сигналы, способствующие оптимальной миграции и активации лейкоцитов крови. При отсутствии или нарушении структуры вторичных лимфоидных органов нарушается ответ на некоторые антигены, вирусы и бактериальные патогены (Karrer et al., 1997; Fu and Chaplin, 1999; Muller et al., 2002; Lucas et al., 1999), нарушается контактная гиперчувствительность к эпидермальным гаптенам (Rennert et al., 2001), а также не происходит отторжения аллогенных трансплантатов сердца (Lakkis et al., 2000).

LT и ФНО - многофункциональные цитокины.

Лимфотоксин (LT) и фактор некроза опухолей (ФНО) принадлежат к суперсемейству цитокинов ФНО. Эти цитокины объединяются с семейство на основании структурного сходства их внеклеточных С-концевых доменов, которые взаимодействуют с рецепторами комплементарного суперсемейства ФНО-рецепторов. Считается, что большинство лигандов и рецепторов являются тримерами. Члены суперсемейства цитокинов ФНО участвуют в регуляции важных биологических функций в организме, таких как регуляция клеточной смерти и пролиферации, миграция лейкоцитов, воспалительные реакции, развитие вторичных лимфоидных органов и других сложных клеточных структур (см обзоры: (Locksley et al., 2001; Ware et al., 1995)).

Гены, кодирующие три члена этого семейства ЛТа, JIT(3 и ФНО, генетически сцеплены и находятся в пределах 15 кб в локусе ФНО внутри локуса, кодирующего гены главного комплекса гистосовместимости на хромосоме 17 мыши (Nedospasov et al., 1986). ЛТр, в отличие от ЛТа и ФНО, не имеет растворимой формы, но образует мембранные комплексы с ЛТа состава ЛТо^ЬТРг и ЛТа2ЬТр1 (Browning et al., 1993; Browning et al., 1995)(см также рис. 1). Наиболее хорошо изученным является мембранный комплекс ЛТсцЬТРг, который взаимодействует со специфичным для него (и для другого лиганда, см. ниже) ЛТр рецептором (LT[3P), экспрессирующимся преимущественно клетками нелимфоидного происхождения (Crowe et al., 1994; Murphy et al., 1998; Browning and French, 2002). Секретируемые формы ЛТа и ФНО являются растворимыми гомотримерами и взаимодействуют с рецепторами ФНО типа I (р55 или р60) и II (р75 или р80) (Ware et al., 1995). В отличие от ФНО, который может экспрессироваться многими видами клеток в организме, ЛТ экспрессируется преимущественно клетками лимфоидного происхождения (Ware et al., 1992). В 1994 году при анализе мышей с инактивацией гена ЛТа (LTa КО) были получены сенсационные результаты: у мышей отсутствовали лимфатические узлы (ЛУ), пейеровы бляшки (ПБ), а также была нарушена структура селезенки и гуморальный иммунный ответ (De Togni et al., 1994; Banks et al., 1995). Дальнейшие исследования показали, что фенотип ЛТрР КО мышей был во многом похож на фенотип ЛТа КО мышей (Futterer et al., 1998; Futterer et al., 1998; Roach et al., 2001; Engwerda et al., 2002; Suresh et al., 2002). Инактивация гена ФНО или ФНОР1 также приводит к дефектам структуры вторичных лимфоидных органов, однако менее серьезным, чем в ЛТа КО или ЛТрР КО (Pasparakis et al., 1996; Pfeffer et al., 1993; Pasparakis et al., 1997). В отличие от ЛТ, ФНО играет существенную роль в иммунном ответе на многие патогены (Derouich-Guergour et al., 2001), хотя на некоторых моделях были также получены указания и на роль мембранного и растворимого JIT (Roach et al., 2001; Engwerda et al., 2002; Lucas et al., 1999)

В настоящем обзоре будут обсуждены новые литературные данные о роли JIT/ФНО в органогенезе вторичных лимфоидных органов и обозначены моменты, требующие дальнейшего изучения. Некоторые хорошо установленные факты будут описаны кратко, но они подробно освещены в следующих обзорах: (Fu and Chaplin, 1999; Mebius, 2003; Vinuesa and Cook, 2001; Ansel and Cyster, 2001; Cyster, 1999a; Cupedo et al., 2002a; Matsumoto, 1999; Ware et al., 1995).

Многочисленные исследования показали, что JIT и ФНО принимают участие не только в развитии вторичных лимфоидных органах в эмбриогенезе, но также играют важную роль в поддержании их структуры во взрослом организме. Поэтому в дальнейшем мы рассмотрим раздельно механизмы, отвечающие за эти два разных функциональных аспекта.

Заключение Диссертация по теме "Молекулярная биология", Туманов, Алексей Валерьевич

Выводы.

1. При помощи метода генетического нокаута получены мыши с модифицированным геном ЛТр, подготовленным к тканеспецифической делеции, и мыши с делециями генов ЛТр и ФНО специфично в В клетках, в Т клетках, а также в В и Т клетках одновременно. Эти мыши представляют собой in vivo модели для изучения биологической роли ЛТ и ФНО, экспрессируемых В и Т лимфоцитами.

2. Показана роль мембранного ЛТ, экспрессируемого В лимфоцитами, для поддержания упорядоченной структуры селезенки, в частности: В клеточных фолликулов, развития кластеров фолликулярных дендритных клеток (FDC), формирования герминативных центров, маргинальной зоны и развития гуморального иммунного ответа на Т клеточно-зависимые антигены.

3. Установлено, что экспрессия ЛТ на поверхности В клеток не существенна для экспрессии ЛТ зависимых генов хемокинов BLC, SLC, ELC и миграции DC и NK клеток в селезенку. При этом Т клетки, экспрессирующие мембранный ЛТ комплекс, играют вспомогательную, но существенную роль в организации структуры селезенки и иммунном ответе.

4. В отличие от селезенки, поддержание упорядоченной структуры ЛУ и ПБ не зависит от экспрессии ЛТ на В клетках. В клетки и Т клетки совместно участвуют в развитии FDC в ЛУ. лиганд или рецептор структура селезенки в фол маргинальная зона т/в зоны GC FDC DC NK Хем ТР7

МММ MZM MS в

JITa/JlTpP КО • • • • • • • э э э лтр КО • • • • • э • • о э э

ФНО/ФНОР1 ко • о о • о о • • о э э лтр КО/ФНОР1 ко • • • • • о • •

ЛТр/ФНО ко • • • • • э • • о э э

ЛТа/ЛТр/ФНО КО • • • • • • • • э • • в-лтр ко э о о о (3 (3 т,в-лтр ко • э э о о • • э

В-ФНО ко э о о э э • э т-лтр ко о о о о о о о о

Т-ФНО ко о о о о о о о о

В,Т-ФНО ко • э э э э • • о

Light КО о о о о о о о о о о о

LIGHT KO/ЛТР КО • • • • э о • •

LIGHT tg/ЛТа КО э • • • О э о

ФНОР-И КО о о о о о о о о о о о

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Туманов, Алексей Валерьевич, Москва

1. Сапин,М.Р. и Этинген,Л.Е. (1996). Иммунная система человека. М.:Медицина, 304 с.

2. Adachi,S., Yoshida,Н., Honda,К., Maid,К., Saijo,K., Ikuta,K., Saito,T., and Nishikawa,S.I. (1998). Essential role of IL-7 receptor alpha in the formation of Peyer's patch anlage. Int Immunol 10, 16.

3. Adachi,S., Yoshida,H., Kataoka,H., and Nishikawa,S. (1997). Three distinctive steps in Peyer's patch formation of murine embryo. Int Immunol 9, 507-514.

4. Akazawa,H., Komuro,I., Sugitani,Y., Yazaki,Y., Nagai,R., and Noda,T. (2000). Targeted disruption of the homeobox transcription factor Bapxl results in lethal skeletal dysplasia with asplenia and gastroduodenal malformation. Genes Cells 5, 499-513.

5. Alcamo,E., Hacohen,N., Schulte,L.C., Rennert,P.D., Hynes,R.O., and Baltimore,D. (2002).

6. Requirement for the NF-kappaB family member RelA in the development of decondary lymphoid organs. J Exp Med 195, 233-244.

7. Alexopoulou,L., Pasparakis,M., and Kollias,G. (1998). Complementation of lymphotoxin alpha knockout mice with tumor necrosis factor-expressing transgenes rectifies defective splenic structure and function. J Exp Med 188, 745-754.

8. Ansel,K.M. and CysterJ.G. (2001). Chemokines in lymphopoiesis and lymphoid organ development. Curr Opin Immunol 13, 172-179.

9. Ansel,K.M., McHeyzer-Williams,L.J., Ngo,V.N., McHeyzer-Williams,M.G., and CysterJ.G. (1999). In vivo-activated CD4 T cells upregulate CXC chemokine receptor 5 and reprogram their response to lymphoid chemokines. J Exp Med 190, 1123-1134.

10. Ansel,K.M.,Ngo,V.N., Hyman,P.L., Luther,S.A., Forster,R., Sedgwick,J.D., Browning,J.L.,1.pp,M., and CysterJ.G. (2000). A chemokine-driven positive feedback loop organizes lymphoid follicles. Nature 406, 309-314.

11. Balogh,P., Aydar,Y., TewJ.G., and Szakal,A.K. (2001). Ontogeny of the follicular dendritic cell phenotype and function in the postnatal murine spleen. Cell Immunol. 214, 45-53.

12. Banks,T.A., Rouse,B.T., Kerley,M.K., Blair,P.J., Godfrey,V.L., Kuklin,N.A., Bouley,D.M.,

13. ThomasJ., Kanangat,S., and Mucenski,M.L. (1995). Lymphotoxin-alpha-deficient mice. Effects on secondary lymphoid organ development and humoral immune responsiveness. J Immunol 155, 1685-1693.

14. Becker-Herman,S., Lantner,F., and Shachar,I. (2002). Id2 negatively regulates В cell differentiation in the spleen. J Immunol 168, 5507-5513.

15. Bergmann,C.C., Ramakrishna,C., Kornacki,M., and Stohlman,S.A. (2001). Impaired T cell immunity in В cell-deficient mice following viral central nervous system infection. J Immunol 167, 1575-1583.

16. Bowman,Е.Р., Campbell,J.J., Soler,D., Dong,Z., Manlongat,N., Picarella,D., Hardy,R.R., and Butcher,E.C. (2000). Developmental switches in chemokine response profiles during В cell differentiation and maturation. J Exp Med 191, 1303-1318.

17. Breitfeld,D., Ohl,L., Kremmer,E., Ellwart,J., Sallusto,F., Lipp,M., and Forster,R. (2000). Follicular В helper T cells express CXC chemokine receptor 5, localize to В cell follicles, and support immunoglobulin production. J. Exp. Med. 192, 1545-1552.

18. Browning,J.L. and French,L.E. (2002). Visualization of Lymphotoxin-beta and Lymphotoxin-beta Receptor Expression in Mouse Embryos. J Immunol 168, 5079-5087.

19. Butcher,E.C., Williams,M., Youngman,K., Rott,L., and Briskin,M. (1999). Lymphocyte trafficking and regional immunity. Adv. Immunol. 72, 209-253.

20. Cariappa,A., Tang,M., Parng,C., Nebelitskiy,E., Carroll,M., Georgopoulos,K., and Pillai,S. (2001). The follicular versus marginal zone В lymphocyte cell fate decision is regulated by Aiolos, Btk, and CD21. Immunity 14, 603-615.

21. Church,G.M. and Gilbert,W. (1984). Genomic sequencing. Proc Natl Acad Sci U S A 81, 19911995.

22. Chvatchko,Y., Hoogewerf,A.J., Meyer,A., Alouani,S., Juillard,P., В user,R., Conquet,F.,

23. Proudfoot,A.E., Wells,T.N., and Power,C.A. (2000). A key role for CC chemokine receptor 4 in lipopolysaccharide-induced endotoxic shock. J. Exp. Med. 191, 1755-1764.

24. Crowe,P.D., VanArsdale,T.L., Walter,B.N., Ware,C.F., Hession,C., Ehrenfels,B., Browning,J.L., Din,W.S., Goodwin,R.G., and Smith,C.A. (1994). A lymphotoxin-beta-specific receptor. Science 264, 707-710.

25. Csencsits,K.L., Walters,N., and Pascual,D.W. (2001). Cutting Edge: Dichotomy of Homing

26. Receptor Dependence by Mucosal Effector В Cells: alpha(E) Versus L-Selectin. J Immunol 167, 2441-2445.

27. Cupedo,T., Kraal,G., and Mebius,R.E. (2002a). The role of CD45+CD4+CD3- cells in lymphoid organ development. Immunol. Rev. 189, 41-50.

28. Cupedo,T., Rennert,P., Kraal,G., and Mebius,R.E. (2002b). Formation of В cell follicles by lymphotoxin+CD4+CD3- cells. 14 Germinal Center Conference, Groningen, The Netherlands.

29. CysterJ.G. (1999a). Chemokines and cell migration in secondary lymphoid organs. Science 286, 2098-2102.

30. CysterJ.G. (1999b). Chemokines and the homing of dendritic cells to the T cell areas of lymphoid organs. J Exp Med 189, 447-450.

31. CysterJ.G. (2000). В cells on the front line. Nat Immunol 1, 9-10.

32. CysterJ.G., Ansel,K.M., Reif,K., Ekland,E.H., Hyman,P.L., Tang,H.L., Luther,S.A., and Ngo,V.N. (2000). Follicular stromal cells and lymphocyte homing to follicles. Immunol Rev 176, 181-193.

33. Dai,Z. and Lakkis,F.G. (2001). Cutting edge: Secondary lymphoid organs areessential for maintaining the CD4, but not CD8, naive T cell pool. J Immunol 167, 67116715.

34. Debard,N., Sierro,F., Browning,J., and KraehenbuhlJ.P. (2001). Effect of mature lymphocytes and lymphotoxin on the development of the follicle-associated epithelium and M cells in mouse Peyer's patches. Gastroenterology 120, 1173-1182.

35. Dejardin,E., Droin,N.M., Delhase,M., Haas,E., Cao,Y., Makris,C., Li,Z.W., Karin,M., Ware,C.F., and Green,D.R. (2002). The Lymphotoxin-beta receptor induces different patterns of gene expression via two NF-kappaB pathways. Immunity 17, 525.

36. Derouich-Guergour,D., Brenier-Pinchart,M.P., Ambroise-Thomas,P., and Pelloux,H. (2001). Tumour necrosis factor alpha receptors: role in the physiopathology of protozoan parasite infections. Int J Parasitol 31, 763-769.

37. Dohi,T., Rennert,P.D., Fujihashi,K., Kiyono,H., Shirai,Y., Kawamura,Y.I., Browning,J.L., and McGhee,J.R. (2001). Elimination of colonic patches with lymphotoxin beta receptor-Ig prevents Th2 cell-type colitis. J Immunol 167, 2781-2790.

38. Dong,C., Juedes,A.E., Temann,U.A., Shresta,S., Allison,J.P., Ruddle,N.H., and Flavell,R.A. (2001). ICOS co-stimulatory receptor is essential for T-cell activation and function. Nature 409, 97-101.

39. Drayton,D.L., Chan,K., Lesslauer,W., Lee,J., Ying,X.Y., and Ruddle,N.H. (2002). Lymphocyte traffic in lymphoid organ neogenesis: differential roles of Ltalpha and LTalphabeta. Adv. Exp. Med. Biol. 512, 43-48.

40. Dummer,W., Ernst,В., LeRoy,E., Lee,D., and Surh,C. (2001). Autologous regulation of naive T cell homeostasis within the T cell compartment. J. Immunol. 166, 2460-2468.

41. Engel,I. and Murre,C. (2001). The function of E- and Id proteins in lymphocyte development. Nature Rev. Immunol 1, 193-199.

42. Engwerda,C.R., Mynott,T.L., Sawhney,S., de Souza,J.B., Bickle,Q.D., and Kaye,P. (2002). Locally up-regulated lymphotoxin-alpha, not systemic tumor necrosis factor-alpha, is the principle mediator of murine cerebral malaria. J Exp Med 195, 1371-1377.

43. Ettinger,R., Mebius,R., Bro wning, J.L., Michie,S.A., van Tuijl,S., Kraal,G., van Ewijk,W., and McDevitt,H.O. (1998). Effects of tumor necrosis factor and lymphotoxin on peripheral lymphoid tissue development. Int Immunol 10, 727-741.

44. Fan,L., Reilly,C.R., Luo,Y., Dorf,M.E., and Lo,D. (2000). Cutting edge: ectopic expression of the chemokine TCA4/SLC is sufficient to trigger lymphoid neogenesis. J Immunol 164, 3955-3959.

45. Finke,D., Acha-Orbea,H., Mattis,A., Lipp,M., and Kraehenbuhl,J. (2002). CD4(+)CD3(-) cells induce Peyer's patch development. Role of alpha4betal integrin activation by CXCR5. Immunity 17, 363.

46. Force,W.R., Walter,B.N., Hession,C., Tizard,R., Kozak,C.A., Browning,J.L., and Ware,C.F. (1995). Mouse lymphotoxin-beta receptor. Molecular genetics, ligand binding, and expression. J Immunol 155, 5280-5288.

47. Forster,R., Mattis,A.E., Kremmer,E., Wolf,E., Brem,G., and Lipp,M. (1996). A putative chemokine receptor, BLR1, directs В cell migration to defined lymphoid organs and specific anatomic compartments of the spleen. Cell 87, 1037-1047.

48. Forster,R., Schubel,A., Breitfeld,D., Kremmer,E., Renner-Muller,!, Wolf,E., and Lipp,M. (1999). CCR7 coordinates the primary immune response by establishing functional microenvironments in secondary lymphoid organs. Cell 99, 23-33.

49. Fu,Y.X. and Chaplin,D.D. (1999). Development and maturation of secondary lymphoid tissues. Annu Rev Immunol 17, 399-433.

50. Fu,Y.X., Huang,G., Matsumoto,M., Molina,H., and Chaplin,D.D. (1997b). Independent signals regulate development of primary and secondary follicle structure in spleen and mesenteric lymph node. Proc Natl Acad Sci U S A 94, 5739-5743.

51. Fu,Y.X., Huang,G., Wang,Y., and Chaplin,D.D. (1998). В lymphocytes induce the formation of follicular dendritic cell clusters in a lymphotoxin alpha-dependent fashion. J Exp Med 187,10091018.

52. Fu,Y.X., Molina,H., Matsumoto,M., Huang,G., Min,J., and Chaplin,D.D. (1997a). Lymphotoxin-alpha (LTalpha) supports development of splenic follicular structure that is required for IgG responses. J Exp Med 185, 2111-2120.

53. Fukuyama,S., Hiroi,T., Yokota,Y., Rennert,P.D., Yanagita,M., Kinoshita,N., Terawaki,S.,

54. Shikina,T., Yamamoto,M., Kurono,Y., and Kiyono,H. (2002). Initiation of NALT organogenesis is independent of the IL-7R, LTbetaR, and NIK signaling pathways but requires the Id2 gene and CD3(-)CD4(+)CD45(+) cells. Immunity /7, 31-40.

55. Futterer,A., Mink,K., Luz,A., Kosco-Vilbois,M.H., and Pfeffer,K. (1998). The lymphotoxin beta receptor controls organogenesis and affinity maturation in peripheral lymphoid tissues. Immunity 9, 59-70.

56. Georgopoulos,K., Bigby,M., Wang,J.H., Molnar,A., Wu,P., Winandy,S., and Sharpe,A. (1994). The Ikaros gene is required for the development of all lymphoid lineages. Cell 79, 143-156.

57. Georgopoulos,K., Winandy,S., and Avitahl,N. (1997). The role of the Ikaros gene in lymphocyte development and homeostasis. Ашш. Rev. Immunol. 15:155-76,155-176.

58. Golovkina,T.V., Shlomchik,M., Hannum,L., and Chervonsky,A. (1999). Organogenic Role of В Lymphocytes in Mucosal Immunity. Science 286,1965-1968.

59. GommermanJ.L., Mackay,F., Donskoy,E., Meier,W., Martin,P., and Browning,J.L. (2002). Manipulation of lymphoid microenvironments in nonhuman primates by an inhibitor of the lymphotoxin pathway. J. Clin. Invest 110, 1359-1369.

60. Gonzalez,M., Mackay,F., Browning,!L., Kosco-Vilbois,M.H., and Noelle,R.J. (1998). The sequential role of lymphotoxin and В cells in the development of splenic follicles. J Exp Med 187, 997-1007.

61. Grayson,M.H., Chaplin,D.D., Karl,I.E., and Hotchkiss,R.S. (2001). Confocal fluorescent intravital microscopy of the murine spleen. J. Immunol. Methods 256, 55-63.

62. Gu,H., Zou,Y.R., and Rajewsky,K. (1993). Independent control of immunoglobulin switchrecombination at individual switch regions evidenced through Cre-loxP-mediated gene targeting. Cell 73, 1155-1164.

63. Gunn,M.D., Kyuwa,S., Tam,C., Kakiuchi,T., Matsuzawa,A., Williams,L.T., and Nakano,H. (1999). Mice lacking expression of secondary lymphoid organ chemokine have defects in lymphocyte homing and dendritic cell localization. J Exp Med 189, 451-460.

64. Gunn,M.D., Tangemann,K., Tam,C., Cyster,J.G., Rosen,S.D., and Williams,L.T. (1998). A chemokine expressed in lymphoid high endothelial venules promotes the adhesion and chemotaxis of naive T lymphocytes. Proc Natl Acad Sci U S A 95, 258-263.

65. Guo,Z., Wang,J., Meng,L., Wu,Q., Kim,0., Hart,J., He,G., Zhou,P., Thistlethwaite,J.R.J.,

66. Alegre,M.L., Fu,Y.X., and Newell,K.A. (2001). Cutting edge: membrane lymphotoxin regulates CD8(+) T cell-mediated intestinal allograft rejection. J Immunol 167, 4796-4800.

67. Hargreaves,D.C., Hyman,P.L., Lu,T.T., Ngo,V.N., Bidgol,A., Suzuki,G., Zou,Y.R., Littman,D.R., and Cyster J.G. (2001). A coordinated change in chemokine responsiveness guides plasma cell movements. J Exp Med 194, 45-56.

68. HasboldJ., Johnson-Leger,C., Atkins,С J., Clark,E.A., and Klaus,G.G. (1994). Properties of mouse CD40: cellular distribution of CD40 and В cell activation by monoclonal anti-mouse CD40 antibodies. Eur. J Immunol 24, 1835-1842.

69. Hashi,H., Yoshida,H., Honda,K., Fraser,S., Kubo,H., Awane,M., Takabayashi,A., Nakano,H., Yamaoka,Y., and Nishikawa,S. (2001). Compartmentalization of Peyer's patch anlagen before lymphocyte entry. J Immunol 166, 3702-3709.

70. Hedrick,J.A. and Zlotnik,A. (1997). Identification and characterization of a novel beta chemokine containing six conserved cysteines. J. Immunol. 159, 1589-1593.

71. Hjelmstrom,P„ Fjell,J., Nakagawa,T., Sacca,R., Cuff,C.A., and Ruddle,N.H. (2000). Lymphoid tissue homing chemokines are expressed in chronic inflammation. Am J Pathol 156, 1133-1138.

72. Kim,C.H., Rott,L.S., Clark-Lewis,I., Campbell,D.J., Wu,L., and Butcher,E.C. (2001).

73. Subspecialization of CXCR5+ T cells: В helper activity is focused in a germinal center-localized subset of CXCR5+ T cells. J Exp Med 193, 1373-1381.

74. Koni,P.A. and Flavell,R.A. (1998). A role for tumor necrosis factor receptor type 1 in gut- associated lymphoid tissue development: genetic evidence of synergism with lymphotoxin beta. J Exp Med 187, 1977-1983.

75. Koni,P.A. and Flavell,R. A. (1999). Lymph node germinal centers form in the absence of follicular dendritic cell networks. J Exp Med 189, 855-864.

76. Koni,P.A., Sacca,R., Lawton,P., Browning,J.L., Ruddle,N.H., and Flavell,R.A. (1997). Distinct roles in lymphoid organogenesis for lymphotoxins alpha and beta revealed in lymphotoxin beta-deficient mice. Immunity 6, 491-500.

77. Kontgen,F., Suss,G., Stewart,C., Steinmetz,M., and Bluethmann,H. (1993). Targeted disruption of the MHC class II Aa gene in C57BL/6 mice. Int Immunol 5, 957-964.

78. Kuper,C.F., Koornstra,P.J., Hameleers,D.M., Biewenga,J., Spit,B.J., Duijvestijn,A.M., Breda Vriesman,P.J., and Sminia,T. (1992). The role of nasopharyngeal lymphoid tissue. Immunol. Today 13, 219-224.

79. Ma,A., PenaJ.C., Chang,В., Margosian,E., Davidson,L., Alt,F.W., and Thompson,C.B. (1995). Bclx regulates the survival of double-positive thymocytes. Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A 92,4763-4767.

80. Ma,Q., Jones,D., and Springer,T.A. (1999). The chemokine receptor CXCR4 is required for the retention of В lineage and granulocytic precursors within the bone marrow microenvironment. Immunity 10, 463-471.

81. Mabbott,N.A., Mackay,F., Minns,F., and Bruce,M.E. (2000). Temporary inactivation of follicular dendritic cells delays neuroinvasion of scrapie. Nat Med 6, 719-720.

82. Mackay,F. and Browning,J.L. (1998). Turning off follicular dendritic cells. Nature 395, 26-27.

83. Mackay,F., Browning,J.L., Lawton,P., Shah,S.A., Comiskey,M., Bhan,A.K., Mizoguchi,E.,

84. Terhorst,C., and Simpson,S.J. (1998). Both the lymphotoxin and tumor necrosis factor pathways are involved in experimental murine models of colitis. Gastroenterology 115,1464-1475.

85. Mackay,F., Majeau,G.R., Lawton,P., Hochman,P.S., and Browning,J.L. (1997). Lymphotoxin but not tumor necrosis factor functions to maintain splenic architecture and humoral responsiveness in adult mice. Eur J Immunol 27, 2033-2042.

86. Marino,M.W., Dunn,A., Grail,D., Inglese,M., Noguchi,Y., Richards,E., Jungbluth,A., Wada,H., Moore,M., Williamson,В., Basu,S., and Old,L.J. (1997). Characterization of tumor necrosis factor-deficient mice. Proc Natl Acad Sci U S A 94, 8093-8098.

87. Martin,F. and Kearney,J.F. (2000). Positive selection from newly formed to marginal zone В cells depends on the rate of clonal production, CD19, and btk. Immunity 12, 39-49.

88. Martin,F. and Kearney,J.F. (2002). Marginal-zone В cells. Nature Rev. Immunol 2, 323-335.

89. Matsumoto,K., Yoshitomi,H., RossantJ., and Zaret,K.S. (2001). Liver organogenesis promoted by endothelial cells prior to vascular function. Science 294, 559-563.

90. Matsumoto,M. (1999). Role of TNF ligand and receptor family in the lymphoid organogenesis defined by gene targeting. J. Med. Invest 46, 141-150.

91. Mazzucchelli,L., Blaser,A., Kappeler,A., ScharliJP., Laissue,J.A., Baggiolini,M., and Uguccioni,M. (1999). BCA-1 is highly expressed in Helicobacter pylori-induced mucosa-associated lymphoid tissue and gastric lymphoma. J Clin Invest 104, R49-R54.

92. McAdam,A.J., Greenwald,R.J., Levin,M.A., Chernova,T., Malenkovich,N., Ling,V., Freeman,G.J., and Sharpe,A.H. (2001). ICOS is critical for CD40-mediated antibody class switching. Nature 409, 102-105.

93. Mebius,R.E. (2003). Organogenesis of lymphoid tissues. Nature Rev. Immunol 3, 292-303.

94. Mebius,R.E., Rennert,P., and Weissman,I.L. (1997). Developing lymph nodes collect CD4+CD3-LTbeta+ cells that can differentiate to APC, NK cells, and follicular cells but not T or В cells. Immunity 7, 493-504.

95. Melchers,F., Rolink,A.G., and Schaniel,C. (1999). The role of chemokines in regulating cell migration during humoral immune responses. Cell 99, 351-354.

96. Montrasio,F., Frigg,R., Glatzel,M., Klein,M.A., Mackay,F., Aguzzi,A., and Weissmann,C. (2000). Impaired prion replication in spleens of mice lacking functional follicular dendritic cells. Science 288, 1257-1259.

97. Moser,B., Schaerli,P., and Loetscher,P. (2002). CXCR5(+) T cells: follicular homing takes center stage in T-helper-cell responses. Trends Immunol. 23, 250-254.

98. Muller,S., Hunziker,L., Enzler,S., Buhler-Jungo,M., Di Santo,J.P., Zinkernagel,R.M., and Mueller,C. (2002). Role of an intact splenic microarchitecture in early lymphocytic choriomeningitis virus production. J Virol. 76, 2375-2383.

99. Murphy,M., Walter,B.N., Pike-Nobile,L., Fanger,N.A., Guyre,P.M., Browning,J.L., Ware,C.F., and Epstein,L.B. (1998). Expression of the lymphotoxin beta receptor on follicular stromal cells in human lymphoid tissues. Cell Death. Differ. 5, 497-505.

100. Nakano,H., Tamura,T., Yoshimoto,T., Yagita,H., Miyasaka,M., Butcher,E.C., Nariuchi,H., Kakiuchi,T., and Matsuzawa,A. (1997). Genetic defect in T lymphocyte-specific homing into peripheral lymph nodes. Eur. J. Immunol. 27, 215-221.

101. Nedospasov,S.A., Hirt,B., Shakhov,A.N., Dobrynin,V.N., Kawashima,E., Accolla,R.S., and

102. Jongeneel,C.V. (1986). The genes for tumor necrosis factor (TNF-alpha) and lymphotoxin (TNF-beta) are tandemly arranged on chromosome 17 of the mouse. Nucleic Acids Res. 14, 7713-7725.

103. Neumann,В., Luz,A., Pfeffer,K., and Holzmann,B. (1996). Defective Peyer's patch organogenesis in mice lacking the 55-kD receptor for tumor necrosis factor. J Exp Med 184, 259-264.

104. Ngo,V.N., Cornall,RJ., and CysterJ.G. (2001). Splenic T zone development is В cell dependent. J Exp Med 194, 1649-1660.

105. Ngo,V.N., Tang,H.L., and CysterJ.G. (1998). Epstein-Barr virus-induced molecule 1 ligandchemokine is expressed by dendritic cells in lymphoid tissues and strongly attracts naive T cells and activated В cells. J Exp Med 188, 181-191.

106. Niiro,H. and Clark,E.A. (2002). Decisionmaking in the Immune System: Regulation ofB-cell fate by antigen-receptor signals. Nat. Rev. Immunol. 2, 945-956.

107. Nishikawa,S., Honda,K., Hashi,H., and Yoshida,H. (1998). Peyer's patch organogenesis as a programmed inflammation: a hypothetical model. Cytokine Growth Factor Rev 9, 213-220.

108. Ohl L., Henning G., Krautwald S., Lipp M., Hardtke S., Bernhardt G., Pabst O., Forster R. (2003). Cooperating mechanisms of CXCR5 and CCR7 in development and organization of secondary lymphoid organs. J Exp Med 197, 1199-1204.

109. Okada,T., Ngo.V.N., Ekland,E.H., Forster,R., Lipp,M., Littman,D.R, and CysterJ.G. (2002).

110. Chemokine requirements for В cell entry to lymph nodes and Peyer's patches. J Exp Med 196, 6575.

111. Pabst,O., Forster,R., Lipp,M., Engel,H., and Arnold,H.H. (2000). NKX2.3 is required for

112. MAdCAM-1 expression and homing of lymphocytes in spleen and mucosa-associated lymphoid tissue. EMBO J. 19, 2015-2023.

113. Pokholok,D.K., Maroulakou,!G., Kuprash,D.V., Alimzhanov,M.B., Kozlov,S.V.,

114. Novobrantseva,T.I., Turetskaya,R.L., Green,J.E., and Nedospasov,S.A. (1995). Cloning and expression analysis of the murine lymphotoxin beta gene. Proc Natl Acad Sci U S A 92, 674-678.

115. Randolph,D.A., Huang,G., Carruthers,C.J., Bromley,L.E., and Chaplin,D.D. (1999). The role of CCR7 in TH1 and TH2 cell localization and delivery of В cell help in vivo. Science 286, 21592162.

116. Reif,K., Ekland,E.H„ Ohl,L., Nakano,H., Lipp,M., Forster,R., and Cyster,J.G. (2002). Balanced responsiveness to chemoattractants from adjacent zones determines B-cell position. Nature 416, 94-99.

117. Rennert,P.D., Browning,J.L., and Hochman,P.S. (1997). Selective disruption of lymphotoxin ligands reveals a novel set of mucosal lymph nodes and unique effects on lymph node cellular organization. Int Immunol 9, 1627-1639.

118. Rennert,P.D., Browning,J.L., Mebius,R., Mackay,F., and Hochman,P.S. (1996). Surfacelymphotoxin alpha/beta complex is required for the development of peripheral lymphoid organs. J Exp Med 184, 1999-2006.

119. Rennert,P.D., Hochman,P.S., Flavell,R.A., Chaplin,D.D., Jayaraman,S., Browning,J.L., and Fu,Y.X. (2001). Essential role of lymph nodes in contact hypersensitivity revealed in lymphotoxin-alpha-deficient mice. J Exp Med 193, 1227-1238.

120. Rennert,P.D., James,D., Mackay,F., Browning,J.L., and Hochman,P.S. (1998). Lymph node genesis is induced by signaling through the lymphotoxin beta receptor. Immunity 9, 71-79.

121. Rickert,R.C., Roes,J., and Rajewsky,K. (1997). В lymphocyte-specific, Cre-mediated mutagenesis in mice. Nucleic Acids Res 25 , 1317-1318.

122. Roach,D.R., Briscoe,H., Saunders,В., France,M.P., Riminton,S., andBritton,W.J. (2001). Secreted Lymphotoxin-alpha Is Essential for the Control of an Intracellular Bacterial Infection. J Exp Med 193, 239-246.

123. Roberts,C.W., Shutter, J.R., and Korsmeyer,S.J. (1994). Hoxll controls the genesis of the spleen. Nature 368, 747-749.

124. Roberts,C.W., Sonder,A.M., Lumsden,A., and Korsmeyer,S.J. (1995). Development expression of Hoxll and specification of splenic cell fate. Am. J. Pathol. 146, 1089-1101.

125. Ruddle,N.H. (1999). Lymphoid neo-organogenesis: lymphotoxin's role in inflammation and development. Immunol Res 19, 119-125.

126. Ruuls,S.R., Hoek,R.M., Ngo,V.N., McNeil,Т., Lucian,L.A., Janatpour,M.J., Korner,H.,

127. Scheerens,H., Hessel,E.M., Cyster,J.G., McEvoy,L.M., and Sedgwick,J.D. (2001). Membrane-bound TNF supports secondary lymphoid organ structure but is subservient to secreted TNF in driving autoimmune inflammation. Immunity 15, 533-543.

128. Sacca,R., Turley,S., Soong,L., Mellman,I., and Ruddle,N.H. (1997). Transgenic expression of lymphotoxin restores lymph nodes to lymphotoxin-alpha-deficient mice. J Immunol 159, 42524260.

129. Schaerli,P., Willimann,K., Lang,A.B., Lipp,M., Loetscher,P., and Moser,B. (2000). CXC chemokine receptor 5 expression defines follicular homing T cells with В cell helper function. J. Exp. Med. 192, 1553-1562.

130. Schaniel,C., Melchers,F., and Rolink,A.G. (2000). The cluster of ABCD chemokines which organizes T cell-dependent В cell responses. Curr. Top. Microbiol. Immunol. 251, 181-189.

131. Schaniel,C., Rolink,A.G., and Melchers,F. (2001). Attractions and migrations of lymphoid cells in the organization of humoral immune responses. Adv. Immunol. 78, 111-168.

132. Schluns,K.S., Kieper,W.C., Jameson,S.C., and Lefrancois,L. (2000). Interleukin-7 mediates the homeostasis of naive and memory CD8 T cells in vivo. Nat. Immunol. 1, 426-432.

133. Searcy,R.D., Vincent,E.B., Liberatore,C.M., and Yutzey,K.E. (1998). A GATA-dependent nkx-2.5 regulatory element activates early cardiac gene expression in transgenic mice. Development 125, 4461-4470.

134. Shakhov,A.N.,Lyakhov,I.G., Tumanov,A.V., Rubtsov,A.V., Drutskaya,L.N., Marino,M.W., and Nedospasov,S.A. (2000). Gene profiling approach in the analysis of lymphotoxin and TNF deficiencies. J Leukoc Biol 68, 151-157.

135. Shroff,K.E. and Cebra,J.J. (1995). Development of mucosal humoral immune responses in germ-free (GF) mice. Adv. Exp. Med. Biol. 371A, 441-446.

136. Soto,H., Wang,W., Strieter,R.M., Copeland,N.G., Gilbert,D.J., Jenkins,N.A., Hedrick,J., and Zlotnik,A. (1998). The CC chemokine 6Ckine binds the CXC chemokine receptor CXCR3. Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A 95, 8205-8210.

137. Stein,J.V., Rot,A., Luo,Y., Narasimhaswamy,M., Nakano,H., GurmJVLD., Matsuzawa,A.,

138. Stewart,C.L. (1993). Production of chimeras between embryonic stem cells and embryos. Methods Enzymol. 225, 823-855.

139. Sun,Z., Unutmaz,D., Zou,Y.R., Sunshine,M.J., Pierani,A., Brenner-Morton,S., Mebius,R.E., and Littman,D.R. (2000). Requirement for RORgamma in thymocyte survival and lymphoid organ development. Science 288 , 2369-2373.

140. Suresh,M., Lanier,G., Large,M.K., WhitmireJ.K., Altman,J.D., Ruddle,N.H., and Ahmed,R. (2002). Role of lymphotoxin alpha in T-Cell responses during an acute viral infection. J Virol. 76, 39433951.

141. Takemura,S., Braun,A., Crowson,C., Kurtin,P.J., Cofield,R.H., 0'Fallon,W.M., Goronzy,J .J., and Weyand,C.M. (2001a). Lymphoid neogenesis in rheumatoid synovitis. J Immunol 167,10721080.

142. Takemura,S., Braun,A., Crowson,C., Kurtin,P.J., Cofield,R.H., 0'Fallon,W.M., GoronzyJ.J., and Weyand,C.M. (2001b). Lymphoid neogenesis in rheumatoid synovitis. J. Immunol. 167, 10721080.

143. Tan,J.T., Dudl,E., LeRoy,E., Murray,R., Sprent,J., Weinberg,K.I., and Surh,C.D. (2001). IL-7 is critical for homeostatic proliferation and survival of naive T cells. Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A 98, 8732-8737.

144. Vassileva,G., Soto,H., Zlotnik,A., Nakano,H., Kakiuchi,T., Hedrick,J.A., and Lira,S.A. (1999). The reduced expression of 6Ckine in the pit mouse results from the deletion of one of two 6Ckine genes. J Exp Med 190, 1183-1188.

145. Vinuesa,C.G. and Cook,M.C. (2001). The molecular basis of lymphoid architecture and В cell responses: implications for immunodeficiency and immunopathology. Curr. Mol. Med. 1, 689725.

146. Vissers,J.L., Hartgers,F.C., Lindhout,E., Figdor,C.G., and Adema,G.J. (2001). BLC (CXCL13) is expressed by different dendritic cell subsets in vitro and in vivo. Eur J Immunol 31, 1544-1549.

147. Vivien,L., Benoist,C., and Mathis,D. (2001). T lymphocytes need IL-7 but not IL-4 or IL-6 to survive in vivo. Int. Immunol. 13, 763-768.

148. Wagner,N., Lohler,J., Kunkel,E,J., Ley,K., Leung,E., Rrissansen,G., Rajewsky,K., and Muller,W. (1996). Critical role for beta7 integrins in formation of the gut-associated lymphoid tissue. Nature 382, 366-370.

149. Wang,J., Chun,Т., Lo,J.C, Wu,Q., Wang,Y., Foster,A., Roca,K., Chen,M., Tamada,K., Chen,L., Wang,C.R., and Fu,Y.X. (2001a). The critical role of light, a tnf family member, in t cell development. J Immunol 167, 5099-5105.

150. Wang,J.H., Nichogiannopoulou,A., Wu,L., Sun,L., Sharpe,A.H., Bigby,M., and Georgopoulos,K. (1996). Selective defects in the development of the fetal and adult lymphoid system in mice with an Ikaros null mutation. Immunity 5, 537-549.

151. Wang,Y, Wang,J., Sun,Y., Wu,Q., andFu,Y.X. (2001b). Complementary effects of TNF and lymphotoxin on the formation of germinal center and follicular dendritic cells. J Immunol 166, 330-337.

152. Ware,C.F., Crowe,P.D., Grayson,M.H., Androlewicz,M.J., and Browning,J.L. (1992). Expression of surface lymphotoxin and tumor necrosis factor on activated T, B, and natural killer cells. J Immunol 149, 3881-3888.

153. Ware,C.F., VanArsdale,T.L., Crowe,P.D., and Browning,J.L. (1995). The ligands and receptors of the lymphotoxin system. Curr. Top. Microbiol. Immunol. 198, 175-218.

154. WigleJ.T., Harvey,N., Detmar,M., Lagutina,!., Grosveld,G., Gunn,M.D., Jackson,D.G., and Oliver,G. (2002). An essential role for Proxl in the induction of the lymphatic endothelial cell phenotype. EMBO J. 21, 1505-1513.

155. WigleJ.T. and Oliver,G. (1999). Proxl function is required for the development of the murine lymphatic system. Cell 98, 769-778.

156. Winoto,A. and Littman,D.R. (2002). Nuclear hormone receptors in T lymphocytes. Cell 109 Suppl, S57-S66.

157. Wu,Q., Salomon,В., Chen,M., Wang,Y., Hoffman,L.M., Bluestone,J.A., and Fu,Y.X. (2001). Reversal of spontaneous autoimmune insulitis in nonobese diabetic mice by soluble lymphotoxin receptor. J Exp Med 193 , 1327-1332.

158. Wu,Q., Wang,Y., Wang,J., Hedgeman,E.O., Browning,J.L., and Fu,Y.X. (1999). The requirement of membrane lymphotoxin for the presence of dendritic cells in lymphoid tissues. J Exp Med 190, 629-638.

159. Wu,X., Jiang,N., Fang,Y.F., Xu,C., Mao,D„ Singh,J., Fu,Y.X., and Molina,H. (2000). Impaired affinity maturation in Cr2-/- mice is rescued by adjuvants without improvement in germinal center development. J Immunol 165, 3119-3127.

160. Yang,X.D., Michie,S.A., Mebius,R.E., Tisch,R., Weissman,L, and McDevitt,H.O. (1996). The role of cell adhesion molecules in the development of UDDM: implications for pathogenesis and therapy. Diabetes 45 , 705-710.

161. Yilmaz,Z.B., Weih,D.S., Sivakumar,V., and Weih,F. (2003). RelB is required for Peyer's patch development: differential regulation of p52-RelB by lymphotoxin and TNF. EMBO J. 22,121130.

162. Yokota,Y. (2001). Id and development. Oncogene 20, 8290-8298.

163. Yokota,Y., Mansouri,A., Mori,S., Sugawara,S., Adachi,S., Nishikawa,S., and Gruss,P. (1999). Development of peripheral lymphoid organs and natural killer cells depends on the helix-loop-helix inhibitor Id2. Nature 397, 702-706.

164. Yoshida,H., Honda,K., Shinkura,R., Adachi,S., Nishikawa,S., Maki,K., Ikuta,K., and Nishikawa,S.I. (1999). IL-7 receptor alpha+ CD3(-) cells in the embryonic intestine induces the organizing center of Peyer's patches. Int Immunol 11, 643-655.

165. Yoshida,H., Naito,A., and Nishikawa,S.I. (2002b). The distinct cellular and molecular mechanism in lymph node and Peyer's patch development. 14 Germinal Center Conference, Groningen, The Netherlands.

166. Yoshida,K., Kaji,M., Takahashi,T., van den Berg,Т.К., and Dijkstra,C.D. (1995). Host origin of follicular dendritic cells induced in the spleen of SCID mice after transfer of allogeneic lymphocytes. Immunology 84, 117-126.

167. Zhuang,Y., Soriano,P., and Weintraub,H. (1994). The helix-loop-helix gene E2A is required for В cell formation. Cell 79, 875-884.

168. Zuercher,A.W., Coffin,S.E., Thurnheer,M.C., Fundova,P., and CebraJ.J. (2002). Nasal-associated lymphoid tissue is a mucosal inductive site for virus-specific humoral and cellular immune responses. J Immunol 168, 1796-1803.1. Благодарности

169. Настоящая диссертация является результатом совместной работы многих людей.

170. Я благодарен Наталье Владимировне Энгельгардт и Борису Владимировичу Пинегину за любезное предоставление необходимого оборудования.

171. Я благодарен моему другу Рою Мичуму за всестороннюю поддержку во время моей работы в США

172. Я глубоко благодарен моей жене Екатерине Королевой и моим родителям, без постоянной поддержки которых настоящая работа не могла быть выполнена.

173. Я обязательно отвечу на все вопросы по теме диссертации: tumanov@imb.ac.ru; tumanovOO@yandex.ru