Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Функциональное состояние лейкоцитов в условиях адаптации организма к метаболитам плесневых грибов

ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Функциональное состояние лейкоцитов в условиях адаптации организма к метаболитам плесневых грибов"

6 ОД МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ „„ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН

6 АПР 1333 ____

СЕМИПАЛАТИНСК!«! ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИИ ИНСТИТУТ

На правах рукописи УДК 6ШШ>17.4:615.91&532.28.123Л

ГЛАДЙНЕЦ Анна Михайловна

ФУНКЦИОНАЛЬНОЕ СОСТОЯНИЕ ЛЕЖОЦИТОВ В УСЛОВИЯХ АДАПТАЦИИ ОРГАНИЗМА . К МЕТАБОЛИТАМ ПЛЕСНЕВЫХ ГРИБОВ

ОЗ. 00. 13 - Физиология человека н'гивотиых

АВТОРЕФЕРАТ диссертации иа соискание ученой степени кандидата биологических наук

Семипалатинск -1993

Работа выполнена В' Семипалатинском государственном медицинском институте на кафедре нормальной физиологии

НАУЧНЫЙ РУКОВОДИТЕЛЬ:

доктор .медицинских наук, профессор

Т.О. Шевченко

ОФИЦИАЛЬНЫЕ ОППОНЕНТЫ:

доктор биологических наук кандидат биологических наук

Т.П. Генинг Н.К. Гайнанова

ВЕДУЩЕЕ УЧРЕЖДЕНИЕ:

Научный центр региональных проблем питания Национальной Академии наук Республики Казахстан

Зацита диссертации состоится 1993г.

на заседании специализированного совета К-079.06.02. при Семипалатинской государственном медицинском институте, (490019, г. Семипалатинск, ул. Абая, 103)

Р.вторефзрат разослан 1993 г.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Семипалатинского государственного медицинского, института.

Нченнй секретарь специализированного Совета, кандидат биологических надк,

доцент - ■ Т.А. Хлебутина

-t-

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Проблема микотоксинов в продуктах питания остается одной из наиболее актуальных и является составной частью глобальной проблемы загрязнения биосферы ( Т.Е. Ларманов и соавт.,1984;В.А.Тутельян,Л.В.Кравченко,1985:И,В.Дмитриев. 1991;R.R.Dalvi.D.К.Salunkne,1990;H.P. van Egmond.i99i).

Значительная распространенность микотоксинов в окружающей среде приводит к периодическому их поступлению в организм человека и животных (й.Н.Сергеев и соавт.,1990;П.С.Ников и соавт. 1991 ;Н.С.Югай и соавт., 1991 ;H.Autrup, 1989;ft.К.Abdelhaaid, 1990). Так, S.Tsuboi et al.С1984),определял содервание микотоксинов в сыворотке крови g лвдей, обнаружили увеличение афлатокскна В1 после яриема пици в 21 - 59 раз у 36,2 7. обследуемых.

Проблема загрязненности микотоксинами пищевых продуктов и корнов осложняется отсутствием достаточно эффективных средств их детоксикации (О.Б.Минскер и соавт..1986; O.L.Blanco et aí., 1988;Н.Kami mura,i 989;S.Kaya,1989,*Р.M.Scott,1989 ).

Известно, что используемая радиационная обработка зерна с целью его стерилизации приводит к усиленному синтезу иикотоксинов (J,Lacey,1989). Данный факт свидетельствует о тон, что проблема загрязнения лицевых продуктов микотоксинами в условиях Нашего региона приобретает особув значимость, в связи с длительный функционированием Семипалатинского ядерного полигона.

Наиболее часто в продуктах питания встречайся токсичные ие-таболиты гриба Aspergillus flavus (В.А.Тутельян,Л.В.Кравченко. 1985;П.С.Ников и соавт.,1988;M.Bekhet et al.,1987;C.L.Berry, 1988;M.H.Sinz,H.Tb;Shier..1991), которым принадленит ведущая роль в развитии алиментарных никотоксикозов у человека и животных. (В.А.Тутаельян,1983;K.D.Friedberg,,198S; G.H.Francis,1988; ti.ü.Tandon,B.N.Tandon,1989). Токсичные метаболиты гриба Aspergillus flavus довольно часто обсеменяют самке различные пище-ре продукты: зерно, хлеб,-мясо, молоко, овощи, фрукты и другие {О.Б.Минскер и соавт.,1986; Н.Т.Амреева и соавт.,1990; П.С.Пиков и соавт,.1991:A,UecchIo,198?;L.Adensan¡.H.Lebedova.l991).

Изучение химической структуры и биологических свойсти токсичных метаболитов плесневых грибов впервые начато с 19[>1 года (K.Sargeant et al..1961). В настоящее время установлено, что ркотоксины гриба Aspergillus flavus обладают мутагенным действием, которое вырааается в нарастании числа хромосомных аберраций (Т.иарманов и соавт.,1986;T.S.Uulor et al.,1985), вы-

раженным гепатотропннм и канцерогенным действием (Л.П.Крыстев и соавт.,1984:C.L.Berry,1988: K.G.Botton et al.,1991). Показана связь первичного рака печени g человека с загрязнением пищи аолатоксином В1 (R.C.Garner.1989;D.P.H.Hsieh,198S ). Особенно высок риск злокачественных опухолей у лиц, занятых переработкой сельскохозяйственной продукции (Е.Oldenburg.5.Breves,1989; F.X.Bosch.F.Peers,1991). Обсуадается роль микотоксинов как промоторов канцерогенеза (ft.Chu Fun,1991). Достоверно установлено тератогенное действие афлатоксинов, усугубляющееся тропностьп к тканям плода (S.M.Maxwell et al.,1989; D.И.Denning et al., 1990). Микотоксины ингибируют биосинтез ДНК, РНК, глобулинов и иммуноглобулинов (Ц,Е.Ко1Ь,1984; G.E.Neal,,1984; D.P.H.Hsleh,. Y.Ueno,1936). Они также способны изменять свойства микробов, усугубляя течение инфекционного процесса (С.Lowers et al.,1983; D.R.Denning,1987;3.S,Uirrtl et al.,1989). Определенный иатерес представляет гипотеза о роди кйкотоксийов в этиологии синдрома приобретенного иммунодефицита CR.D.Elchner.fi.Kullbacher,1984; S.Oust-Nubling et al.,1990), что связано с установленным ик-гибирующим влиянием афлатоксина В1 на некоторые показатели им- мунитета (В.А.Тутельян,Л.В.Кравченко,1985;С.З.На1зМ.В,8осНпе, 1989;0.L;He.ldon-0rtiz,М.ft.Qureshi, 1991).

Следовательно, попадая в организм и являясь для него-.чужеродным веществом, микотоксины активно влияют на состояние внутренней среды организма и в конечном итоге ногут стать причиной того или иного заболевания. Вместе с тем, одной из главных задач физиологии и медицины является изучение возмоаностей орга-•низма адаптироваться к либым воздействиям и,.в частности, к. длительному поступлении в организм метаболитов плесневых грибов. В связи с этим, изучение иммунологических проявлений адаптации при длительном- поступлении микотоксинов в организм экспериментальных нивотных икеет не только научное, но и практическое значение.

Настоящая работа посвящена исследовании функционального состояния лейкоцитов в различные фазы адаптационного процесса, раскрытии механизмов действия этих токсинов на гомеостаз организма и проявлении первых признаков микотоксикоза..

Цель исследования. Целью работы явилось изучение влияния токсичных метаболитов гриба Aspergillus fiavus на функциональное состояние лейкоцитов при длительном перорильном их поступлении в организм.

Задачи исследования. Для достижения указанных ' целей стави-

лись 'следующие задачи: '

1. Изучить динамику количества лейкоцитоз и их клеточного состава, функционального состояния при длительном поступлении в организм токсичных метаболитов гриба Йзрегд111и5 Иаииз.

2. Изучить динамику показателей неспецифического иммунитета Н экспериментальных, яивотних (актизность- базального и стимулированного Фагоцитоза,-фагоцитарное число» резервной потенциал фагоцитирушвкх клеток.,

3. Изучить состояние показателей Т'- клеточного иммунитета д экспериментальных животных при длительном поступлении метаболитов гриба йгрегдШиг Пауиз я определить наиболее уязвимое им-мунорегулаторное звено.

4. Изучить состояние специфического антителогенеза у экспериментальных зивотинх.

5. На основании сопоставления получениях зкспериконтальшгх данннх проследить процесс адаптации животных б ответ на поступление в организм метаболитов гриба йгрзгдШиэ Пауиз.

0. Разработать способ определения степени интоксикации организма при длительном поступлении метаболитов гриба Язрегд!'Лиг Паииз в организм.

Лгкяокенид. икс, си мне на зэцктц,

1. йетаболитн плесневого гриба ЯзрегзШиз Пачиз влиявт на Функциональное состояние лейкоцитов периферической крови, характеризующееся изменением их количественного состава, способностью к хемотаксису, захвату чуаеродннх частиц, формирование реакции гиперчувствительности замедленного типа, к антителооб-рлзозанкв, косящими вирахенчкЛ адаптиз'ний характер.

2. Б основе лейкопенического эффекта метаболитов гриба Ая-регдШиэ Иаииз при пероральком поступлении леаит. по-видимому, их токсическое действие на костномозговое кроветворение.

3. При длительном поступлении метаболитов гриба Йгрего! Пня Паииз у экспериментальная жиг.отнях развивается имнунолефицит-ное состояние, •■гопропочг.аЕцзчс«! дефицит ой специфического (клеточной, гуморалькай) и кеспецйфического (фагоцитоз) иммунитета.

4. Динамика формирования иммунодефяциткого состояния носит фазный характер, проявлявшийся на первом этапе возникновением глубоких изменений показателей, на втором этапе их частичной компенсацией, сменяющейся декомпенсацией, приводящей к гибели экспериментальных яивотнах.

Научная новизна работы.

1. Впервые обнаруаенн Фазные изыенения функциональной активности лейкоцитов в процессе адаптации организма к метаболитам гриба йзрегдШиз Начи^.

2. Впервые показано непосредственное ингибируещеб действие токсичных метаболитов гриба йзрегдШиз Паииз на процессы мие-лопоэза, а именно на его нейтрооильный росток.

3. Впервые установлено, что снинение показателей Т -клеточного иммунитета при длительном пероральнои поступлении метаболитов гриба йзрегдШцБ Пауиз обусловлено преимущественным угнетением Т - хелперного звена.

4. Впервые установлено, что в основе гуморального иммунодефицита, сопрсвойдающего цлительное поступление метаболитов гриба Й5регд1Низ Паук, лекит угнетение специфического антитело-генеза.

Практическая значимость работа.

1. Разработан доступный для осуществления в клинических ла-бсраториях способ опраделенич степени интоксикации срганизиа.

2. Предложенный способ нонет быть использован для прогнозирования течения заболевания, назначения адекватного лечения и суждения.об его эффективности,

3. Одновременное'угнетение всех показателей системы иммунитета при длительном поступлении кетаболктов гриба Аэрегд!!1иэ Па^аз в организн диктует необходимость комплексного про&сдения иммуностимулирующей терапии.

. Апробация работы.

Материалы работы докладыЕал/.сь на конференциях молодых ученых СГМЙ (1989,1990), были обсуждены на заседании общества физиологов (1989), представлены на итоговой научно-практической конференции молодых ученых, специалистов Дагестана (Махачкала, 1989), на республиканской научно-практической конференции молодых ученых и специалистов "Актуальные проблемы охраны и укрепления здоровья населения Казахстана" (Алма-Ата,1990), на 2-ой Всероссийской учебно-методической и научно-практической конференции (Барнаул,1992), на неккафедральнои заседании и проблемной комиссии Семипалатинского государственного медицинского института ( 1993). ,

Публикации. По теме диссертации опубликовано- 9"работ.

Пути реализации работы.

Результаты исследований внедрены в центральной научно-исследовательской лаборатории СГМИ, используются в..работе инкуно-

- fi -

логических лабораторий города Семипалатинска, внедрены в лечебную практику хирургических отделений центральной .городской больницы, 1-ой городской больницы, областной клинической больницы, областной детской больницы, войсковой части, отделенческой больницы станции города Семипалатинска, центральной городской больницы города Талды-Кургана, изданы в видр 3 информационных листков. В ходе работы оформлено 4 рационализаторах предлояений: 1."Способ определения токсигениости гриба Aspergillus flavus",N 1258 от 11.12,87; ¿."Способ Енделения лии-Фоцитов кз частично свернувшейся крози",Я 1415 от Э.08.09: 3."Способ повышения внхода лиифоцитпз при разделении клеток периферической крози",!* 1418 от 9,06.83; 4. "Способ определения степени интоксикаций организма",N 1417 от 9.Об.89. Получено положительное реаенкз о в«даче авторского свидетельства на "Способ диагностики характера зоспалнтельного процесса",4915305/14 1018232 ).

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на ___

страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литература, 4 глав собственных исследований, заклвчекия,•экво&ов, практических рекомендаций, указателя литературы С121? отечественных и 222 иностранных работ-); документирована '6 таблицами и иллюстрирована 9 рисунками.

ИЙТЕРИаЛН К НЕТОЛЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Настоящее исследование было проведено на 100 кролика/ породи винрилла; массой 3,0 - 3,5 кг, которые использовались для основного эксперимента и 100 белых нелинейных нивах, кассой 20 -25 г, на которых определяли степень токсичности фильтрата. Животные d период исследований содержались в одинаковых условиях вивария, получали полноценное питание, все манипуляции проводили, учитывая влияния суточных биоритмов.

Для изучения влизния метаболитов плесневых грибов на организм животных бил использован втамн гриба Aspergillus flavus F - 1118, полученный из лаборатории живых культур грибов Всероссийского центра по глубоким микозах города Санкт-Петербурга. Грибы выращивали в колбах с жидкой средой Сабуро. Культивирование проводили в течение 10 суток. Культуральнуи жидкость фильтровали. В опытах использовали дозу фильтрата, соответствующую минимальной смертельной дозе (DLH), введение которой визы-

- - ? - , '

вало гибель 10QZ лыией в течение 24 часов и составляло 1,5 мл.

Выбор для исследований иыенно фильтрата определялся содер-канием в нем всего набора токсинов и кислот, которые может продуцировать гриб Aspergí 1lus flavus и которые одновременно поступают с пищей в организм человека и аивотных.

Животным опытной группы (50 кроликов) ежедневно вводили через ротовуд полость 1 DLM 10-дневного фильтрата на килограмм массы тела при помощи шприца с длинным тупым наконечником^ Контрольным животным (50'кроликов) вводили стерильнуи среду Сабуро в те se сроки я в тех se количествах для ксклвчения влияния ее на ход зксперимекта. В опытах использовали наиболее физиологичный способ введения фильтрата гриба - пероральный, Shbothks находились в эксперименте з течение 5 месяцев. Выполнение работы осуществлялось на кафедре нормальной физиологии Семипалатинского государственного медицинского института.

Для оценки функционального состояния лейкоцитов подсчитывали обцее количество лейкоцитов, соотношение форменных элементов, используя счетчик микрочастиц "Picoscale PS-4" фирмы "Medicor" (Венгрия), изучали ииелограыыу, определяли показатель созревания нейтрофилов. Согласно критериям Л.Х.Гаркавк и соавт.( 1979 ), оценивали адаптационные реакции и неспецифическую резистентность организма.- О функциональном состоянии фагоцитирующей системы судили по результатам базального и стимулированного'фагоцитоза,используя тест-система, предложенную НПКО "Реакомплевс". По соотношению показателей - фагоцитарной активности при стимуляции липополисахаридом-продигиозаном к показателям фагоцитарной активности в базальных условиях, определяли резервную возможность фагоцитарной реакции.

Количественную оценку Т- и В-лимфоцитов проводили по методу Б.В.Пинегина (1987), Для выявления Т-лимфоцитов использовалась реакция спонтанного рояеткообразованмя с эритроцитами мыши. Субпопуляционнуа принадлеяность иммуноре.гуляторных клеток изучали по их способности образовывать розетки в присутствии тео-филлина (Р.В.Петров и соавт.,1984). Функциональную активность клеточного иммунитета оценивали по лимфокинобразущей способности клегок периферической крови. Изучали частоту достоверного тормонения миграции лейкоцитов в РТМЛ по методу Р.ртемоза ( 1973 ) на Конкак:валин A (Con ft), бруцеллин и стафилококк. Подсчет В-клеток осуществляли по выявления рецепторов к третьему компоненту СЗ комплемента, где в качестве индикатора использовался зимозан. Функциональная активность В-лимфоцитов-.. уценивалась по

- Б -

определении титра противобруцеллезнкх антител в РПГй tso Бойдену.

Для определения степени интоксикации организма использовали разработаннр] нами методику, положительное решение о выдаче авторского свидетельства на изобретение Н 4915305/14 (018232).

Полученные результаты обрабатывали при помощи общепринятых методов статистического анализа с' вычислением критерия достоверности различий t Стыодента (Г.Крамер,1975).

РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ 05СЗЕДЕШ1Е

Анализ динамики количества лейкоцитов периферической крови у экспериментальных яивотных показал наличие 3-х фаз изменений этого показателя. Так, в течение первой недели от начала .кормления фильтратом гриба Aspergillus flavus, формировалась абсолютная лейкопения - 2,С±0,1*10г/л, Р < 0,001,' затем она перерастала в лейкоцитоз с максимальной внраненностьн от шестой до двенадцатой недель (10Л±0,2*10э/л - 13.7±0,3*!0?/лЧ в дальнейшем опять происходило формирование лейкопении к четырнадцатой неделе (7,0+0,3*109/л.'Рс 0,01).Количество лейкоцитов у контрольных кизотних составляло, в среднем, 3,1±0,2*10р/л (табл.1). По накеяу .мнению, указанное волнообразное изменение количества лейкоцитов отранает динамику компенсаторных функций организма нивотных. При этом повыаение количества лейкоцитов ногет явиться следствием процессов гиперксмпенсации, а их падение отражает истощение компенсаторных механизмов. Полученные данные в значительной степени объясняют существовавшую ранее . противоречивость сообщений различных исследователей, изучавших вопросы влияния мнкотпксинов гриба Aspergillus flavus на общее количество лейкоцитов у экспериментальных животных. Ряд авторов (.И.9.Нулик,1957; И.Е.Елистратов.й.С.Тиш-:ов,197?; R.B.H-Tves; et al.,1988; R.J.Uerna. et al.,199i) указывали на выраженный лейкоцитоз у подопытных кивотпнх. напротив, другие авторы (К.А.йх-метели ,19?5;Н.1!.ЗайкоЛ 986) сообщали о формировании, лейкопении при хроническом воздействии на организм иккотоксииов. Разноречивость полученных .авторами данных объясняется, видимо, тем, что использовались неравные условия эксперимента (различные дозы, способы, сроки воздействия микотоксикпв, разные виды ни-вотных), изучали действие отдельных Франций микотоксинов. а . также в приведенных исследованиях не изучалась динамика клеточ-

Таблица 1

Яинаника.количества лейкоцитов, нейтрофилов,.ЛИПФОНИТОО при длительном поступлении в организм иатаболитов гриба Дерегд111ив г'1ауи5

Количество Сроки наблюдений (в нояелвн) Контроль

1 г 4 & . в 10 12 14

лейкоцитов, 105/л * г,ь + 0, 1 : * 3,9 + о, г а,з + о, г * 10, 1 ± • 10,0 ♦ 0,1 * 13,7 + " • 0,3 . * 12, в ± о,е » 7,0 ± 0,3 в, 1+0,2 .

с/я нейтре^илов, 10&/п' ♦ 4,3 + 0,2 » 5, 8 ♦ • 0,4 *» в, 4 ± 0,4 « ■ 13, е + 0,7 * 12, 7 ± О, 6 * в, а ± О, 3 * в, 9 + 0,4 . * в, 1 . ± ■ 0,4 26, 6+0,4

ЛИМФОЦИТОВ, 10-9/л » £0,9 + о, а; 43,9 + »И * 65,8 + 1,6 • 79,6 + 1,8 * 07,4 + 1,5- » 113,9 + г, 7 * 101,7 + 1,в~ 51,9 + 2,5 .46,3+0,6

Примечание« Р., { 0,001| ■ ** - Р < 0,01} »»» - Р > 0,1

ного -состава крови экспериментальных животных.

Таким образом, снена абсолвтной лейкопении лейкоцитозом с повторным формированием лейкопения обнаругена нами впервые.

Количество сегкентоядерных нейтрофилов оставалось на низком уровне на всем протяжении наблюдений (табл. 1). Я контрольных кивотных количество сегментоядерных нейтрофилов в периферической составило 28,6+0,4*10э/л. через недела после начала кормления фильтратом количественное содеряанне этих клеток снизилось в 6,7 раза, составив 4,3±0,2*10 ( Р < 0,001). Незначительный под-ъен количества сегментоядерных нейтрофилов на шестой и восьмой неделях от начала эксперимента был нияе уровня.контрольных показателей в 2,1 и 2,4 раза, что составило 13,6+0,7* 109/л и 12,7±0.6*10г/л, соответственно (Р < 0,001). Однако, данные о том, что на четырнадцатой неделе содержание нейтро-фильных гранулоцитов было выше, чем на десятой неделе в 1,2 разг. позволяет предполоЕкть, что эти клетки не играли ведущей роли б формировании деяомпенсированного вторичного иммунодефи-

ц'лтного состояния.

Выяснение механизмов формирования лейкопении и нейтропении позволило впервые установить непосредственное ингкбирукщее влияние рильгратэ гриба АррегзШаз Пзуо? ка процессы киедопозза к особенно на нейтрос-ильний росток. Пероральное поступление метаболитов гриба в течение двух недель приводило ..к снияенип индекса созревания нейтрофилов на 432, что составило 0,4±0,02 от исходного уровня (0,?4+0,02).(Р < 0,001). Через шесть ;-.едель индекс созревания нейтрофилов несколько увеличивался, но оставался ниже уровня контроля на 267. (0-,55±0,03),(Р < 0,001). В последующие сроки наблюдений отмечалось дальнейшее достоверное .уменьшение индекса: через восемь недель на 45'.72 (0,38+0.02), через десять недель на 71 У. (0,2+0,02). На- двенадцатой неделе зарегистрировано незначительное, статистически достоверное (Р < 0,001), увеличение индекса созревания нейтрофилов - 0,44±0,02, однако это било ниже исходного уровня на 377.. Повниение индекса было непродолжительном и в последующие недели он снова начал снижаться. Повышение индекса созревания нейтрофилов, по-видимо-иу, отражает процесс адаптации костного мозга к длительному пероральному воздействии микотоксинов.

Количественное содержание лимфоцитов периферической крови -изменялось в соответствии с теми же закономерностями, которые были-установлены для динамики количественного содержания лейкоцитов (табл. 1); В ее основе также лежали компенсаторные меха-

низны адаптации. Изменения отражали 3-х Фазную смену адаптационных реакций. Снигение количества лимфоцитов в 2,2 раза у подопытных животных на первой неделе (20,9±0,8*10р/л),(Р < 0,0011, с дальнейшим Формированием абсолютного лимфоцитоза до 113;9± 2,7*109/л, (Р < 0,001) на десятой неделе и последующим их снижением на четырнадцатой неделе до 51,9±2,5*10э/л,(Р > 0,1), Повышение уровня количества лимфоцитов в. периферической крови на второй - двенадцатой неделях опыта можно объяснить компенсаторной гипертрофией лимфатических дзлов и интенсивной миграцией этих клеток, возионно. из центральных органов иммунитета. (Е.Д.Гольдберг й соавт.,1983).

Для выяснения физиологической значимости формирования лимфоцитоза и изучения протективной роли лимфоцитов было проведено исследование динамики количества Т-лимфоцитов у экспериментальных животных (табл.2). Результаты исследований показали, что происходило выраженное снижение относительного содержания Т-лимфоцитов. Абсолютное содераание изменялось иначе: до десятой недели от начала вскармливания фильтратом происходило- нарастание Т-лимфоцитов до'4439,?±108.4 в 1 мкл при контрольно« значении - 2357±55.9 в 1 мкл, затем формировалась Т-лимфопения. На-четырнадцатой неделе . количество Т-лимфоцитов снизилось до 1733,3±78,1 в 1 мкл (при контроле - 2462,5±31,5 ь 1 мкд). Р < 0,001. Возможно, сникениеи количества Т-лимфоцитов в крови объясняется формирование иимунодефицитного состояния при длительном поступлении в организм микстоксинов.

Для уточнения • механизма' Формирования иммунодефицита была ' изучена динамика иымунорегуляторных изменений .субпопуляций Т-клеток. В наиболыгей степени у экспериментальных яивотных снижалось содержание Т-клеток с фенотипом хелперов.. К четырнадцатой неделе количество теофиллинрезистентных Т-лимф.оцитов сни- -зилось до 15,6±0,4Х при показателе контроля - 34,7±0,4%, Количество теофиллинчувствительных клеток.-являющихся преимущественно Т-супрессорами, достоверно не изменялось. В связи с этим происходило постепенное снижение хелперно-супрессорнсгс индекса. На четырнадцатой неделе индокс был ниже контрольного в 2,0 раза, значение его у подопытных животных-составило 0,9±0,1, при контроле - 1,8+0,09 (табл.2). ; .-<•

Таким образом, иммунодефицитное состояние, развивающееся при длительном поступлении в организм токсичных .метаболитов гриба АзрегеШиз Пауиз, напоминает синдром приобретенного иммунодефицита, для которого наиболее характерно уменьшение лимфоцитов

Таблица а

Динамика показателей клеточного иинуни+ета при длительном поступлении в организм метаболитов гриба 05регд1Х1и5 Оауиз

Понаэатели Срони наблюдений (в неделях) Контроль

г .4 " 6 а 10 1г 14

Е - РОК, X ЕО, 1 + о, г * 4£,7 + о, г * за, э + 0,4 * 39, г ± 0, 3 * за, з +. 0, 3 * 25,5 + 0, 3 * 33, 5 + 0,4 40, 5+0, 3

е - рок, 1 мкл. * * £450,1 + 73, 7 * 2813, 1 + 71, & * 3110, 7+ 70, 5 3409,6+ вг, 5~ 443Э,7 + 100, 4 * 361&,0 + 78, 1 * 1733,3+ 7В, 1 гзгг, 4+34,3

ТФР-Е-РОК, X . *** зг,о ± о,а * аь, 6 + 0, 3 * 22, В + 0, 3 # £1, БЗ + 0,г ~ # 13, а + 0,3 * 17,5 + 0,3 « 15,6 + 0,4 34, 7±0, 4

ТФЧ-Е-РОК, * »** 13,0 ± 0,3 * 15, 4 + * 15, г + 0,2 « 17,7 ± О, 3 " »* 18,3 + 0, 3 * 17,5 + 0, 3 *' 17,3 + . 0, з" 1э,г+о, г

Хелперно — супрессорный индекс, * г, о + 0, 1 *** ' 1,9 + 0, 1 «** 1,5 + 0, 1 * ■1,а ± о,1 * 1,1 + 0, 00 « о, оэ * 0,9 + оп 1,8+0,09

1 .

ГО I

Примечание! » - Р < 0,001) ** - р ( 0,01} »»» - Р ) 0,1

за счет субпопуляции Т-хелперов при сохранении исходного количества субпопуляции Т-супрессоров (А.Е.Вершигора,1990).

Снижение количества Т-лиыфоцитав и их иммунорегулдторных субпопуляций сопровождалось также снижением гиперчувствительности замедленного типа in vitro, что было обнаружено при изучении индекса торможения миграции лейкоцитов на Con А, бруцеллезный антиген и антиген стафилококка. Частота достоверного тормокения миграции' лейкоцитов в РТМЛ на Con А у контрольных животных колебалась с 80 до 902. 9 аивотных опытной группы у^е на второй'неделе от начала эксперимента, частота положительных результатов PTM/I на Con А составила 60%, что'было в 1,4 раза pese, чем у контрольных, однако, данное различие не было статистически достоверно (Р > 0,1). На четвертой неделе частота достоверного тормоаения миграции лейкоцитов' у животных' опытной группы была ниже показателя контроля в 1,3 раза С66,82), на шестой - в 1.4 раза (55,52), на . восьмой - в' 1.3 раза (63,6%). Указанные различия показателей такае не были статистически достоверными. Лишь начиная с десятой недели, отмечена статистически достоверная частота тормоаения миграции лейкоцитов в РТМЛ на Con А у животных опытной группы. Снижение частоты тормоаения составило на десятой наделе 33,3+15,72, что было в 2,7 раза ниае, чем показатель контроля (Р < 0.001). На двенадцатой не&еле частота достоверного тормоаения . миграции лейкоцитов в РТМЛ на Con А удерживалась на прежнем уровне, составив 33,37., что было, в 2.4 раза наве показателя^контроля (£ < 0,02). Наиболее низкими были показатели у аивотных опытной группы, обследованных на-четырнадцатой неделе, g которых частота достоверного тормоаения лейкоцитов составила 30.0+14,52, что было в 3.0 раза pese, чем у контрольных аивотных (Р < О.СП. По-видимому, на исходе второго месяца от начала вскармливания подопытных животных фильтратом гриба Aspergillus flavus происходило истощение компенсаторных резервов Функциональной активности клеточного иммунитета.

• Для изучения динамики формирования иммунного ответа к Т-за-висимому антигену бруцеллину все животные предварительно были сенсибилизированы к бруцеллину однократным подкояным введением бруцеллезной вакцины. ВА - 19 из расчета 2 млрд.м.т. на один килограмм массы тела;. . ,

До третьей недели у животных контрольной группы сенсибилизация к антигену бруцеллина не выявлялась, на третьей неделе у 30% аивотных отмечалось наличие достоверного, торможения мигра-

-

ции лейкоцитов. В дальнейшем частота обнаруяения сенсибилизации повышалась, достигнув максимума на десятой неделе от момента сенсибилизации, когда показатель составил 70%. После десятой недели происходило постепенное снижение частоты выявления положительных результатов РТМЛ на бруцеллин. У подопытных животных положительные результаты РТМЛ на бруцеллин впервые были выявлены лишь на пятой неделе от момента сенсибилизации. Причем, показатель составил лишь 20'/.. На шестой неделе частота достоверного торможения миграции лейкоцитов составила 22,22, что было в 2,0 раза меньше показателя животных контрольной группы. К воськой неделе частота полозительных реакций РТМЛ на бруцеллин возросла до 33,3%, к десятой до 40%, к двенадцатой достигла Максимума, составив 45,4%. К четырнадцатой неделе началось угасание сенсибилизации к бруцеллину у аивотных опытной г'руппн. Таким образом,.под влиянием иетаболитов гриба Aspergillus flavus снизадась частота положительных результатов на бруцеллин и задерживалось развитие сенсибилизации организма подопытных жибоТных. Первые полоаительные результаты были выявлены лизь на пятой неделе от момента сенсибилизации. В связи с этим mosho предположить, что фильтрат гриба способствует угнетению как неспецифической функциональной активности клеточного иммунитета, так и специфической Т-клеточной сенсибилизации.

Изучение частоты достоверного тормоаения миграции лейкоцитов в РТМЯ на стафилококк у контрольных животных выявило наличие сенсибилизации узе к концу второй недели,, при этом частота положительных результатов достигала 18,2±11,6%. В дальнейшем частота полозительных результатов прогрессивно нарастала, достигая максимума на восьмой - десятой неделях от начала эксперимента, когда • более чем у 50% животных наблюдалась сенсибилизация к стафилококку. После десятой недели частота полояительных результатов реакции начала снижаться, однако, даже после четырнадцатой недели сенсибилизация в РТМЛ на стафилококк обнаруживалась более чем у трети обследованных животных (37,5+17,1%), Кривая нарастания частоты сенсибилизации в РТМЛ на стафилококк •у подопытных животных существенно отличалась от кривой у контрольных животных. Во-первых,*наличие сенсибилизации клеточного типа к антигену стафилококка у подопытных аивотных удавалось обнаружить лишь на четвертой неделе от начала вскармливания их фильтратом гриба. Во-вторых, максимальная частота положительных результатов . выявлялась лишь на двенадцатой неделе от начала эксперимента, т.е.« формирование реакции гиперчувствительности

замедленного типа (ИТ) у подопытных еивотных было замедлено. Кроме того, эти,показатели были почти в 2,0 раза низе, чем у контрольных ■ животных. Данные свидетельствуют о том, что длительное поступление в организм животных метаболитов гриба ЙБрегеШиэ Пауиг ингибирует формирование клеточных иммунных реакций, необходимых для защиты организма от патогенных возбудителей инфекционных процессов. Снивение реакции ГЗТ также, возможно, объясняет формирование имыунодефицитного состояния при длительном поступлении в организм токсичных, метаболитов гриба ОзрегдШиг Пауиэ.

Ко второй'неделе от начала эксперимента у подопытных животных отмечалась тенденция к формирование! абсолютного Б-лимфоци-тоза (1073,5±40,1 в 1 мкл),это превыиало показатель контрольной группы в 1.2 раза (табл.3). К четвертой неделе превышение абсолютного количественного содержания В-лимфоцитов составило в

1.3 раза, к шестой - 1,3 раза, к восьмой - 1,6 раза, к десятой - 2.1 раза, к двенадцатой - 1.5 раза, к четырнадцатой -

1.4 раза. Наибольшая выраженность абсолютного 3-лиифоцитоза отмечалась на втором, третьем месяцах.'Вероятно. формирование В -лимфоцитоза также следует объяснить компенсаторной реакцией, интенсивность которой постепенно истощалась. Относительное количественное содержание Б-линфоцитов у животных опытной группк изменялось волнообразно, статистически достоверно не отличаясь от показателей контрольной группы. (Р < 0.001).

Если при длительном поступлении фильтрата гриба в организм опытных животных количественное содержание В-лимфоцитов увеличивалось, то их функциональная активность заметно снижалась. Метаболиты гриба йзреггШиз ПауиБ .оказывали ингибирующее действие на выработку специфических противобруцеллезных антител. У контрольных гивотных среднее геометрическое титров (,1/1в.) составило 2,3+0,0? усл.ед.. при этом ни в.одном случае не было обнаружено отрицательных результатов реакции агглютинации. У животных опытной группы титр противобруцеллезных- антител прогрессивно снижался (табл.3). На второй неделе 1 /1 в титров составило 1,6+0.18 усл.ед. (Р < 0,001). На четвертой неделе -1,2±0,03 усл.ед., на шестой - 1,0±0,1 усл.ед. Б эти сроки отрицательных результатов реакции агглютинации обнаружено не.было. К восьмой неделе 1/1д титров составило 0,7_+0,1 усл.ед. При этом, в 202 случаев результаты реакции агглютинации были отрицательными. На десятой неделе титр снизился до 0,Н+0,2 усл.ед., количество отрицательных результатов составило 33,32.

.Таблица 3

Динамика показателей гуморального иммунитета при длительном поступлении в организм ме+айолитов гриба Й£регд111ие Оауиз

Показатели Сроки наблюдений (с недалям) Контроль

£ 4 6 а 10 12 14

ЕЯС - РОК, X. * 21,Э + 0,7 » 19,0 + 0,6 * 1Э, 9 + 0,7 * 13,0 + о, а * 17,5 + о, а * Хь, 0 + 0, 6 * 16, д + о,а 1в,Е+0,5

. ЕЙС - РОК, 1 мкл *** 1073,5 ± 40, 1 * 1159,7 + 49, 2 * 1211,6+ 49, 4 » 1435,а+ 46, 3 * 1а17,а + 49, 1 * 1269,2 + 35,7 * 995,0 + 32,4 372,В+29,7

Среднее геометрическое титров п/бруц.а/т,1/1д *« 1,6 + «¿2 * 1.2 + . 0, оэ * 1,0 + 0,Г * 0,7 + 0, 1 * 0, в + 0,2 * О, в + 0,2 * 0,4 + 0, 1 2, 3+0,07

с» I

Примечание» * - р < 0,001} ** - Р < 0,01-, *** - Р < 0,03; **** - р > 0,1

На двенадцатой неделе титр составил 0,6+0,2 дел.ед..количество отрицательных реакций - 33,3%. Значительное сникекие количества антител приходилось на четырнадцатую недели до 0,4*0,1 усл.ед. Отрицательные результаты реакции агглютинации были отмечены у 55.экспериментальных животных. Это совпадало с началом падежа подопытных животных. Результаты опытов позволили предпологить, что ингибиция гуморального .иммунитета, являлась одной из вакнейших причин формирования вторичного иммунодефицита при алиментарном поступлении метаболитов.в организм нивотных и косвенно подтвердить мнение D.M.Hilliams et al.(1981) о про-тективной роли гуморального иммунитета при афлатоксикозе. Полученные данные согласуются с данными 3IP..Thurston et a I., 1384; 1986: P.fl.Greenberger et al.. 1989, изучавших иммунодефицктные состояния при афлатоксикозах.

Исходя из собственных данных, механизм формирования, гуморального иммунодефицита можно объяснить дефицитом Т-хелперов, так как известно, что.на ряд антигенов В-ликфоцитм отвечают выработкой антител только -с..участием субпопуляции Т-лимфоци-ов-хелперов (П.Д.Горизонтов,1981), а антиген возбудителя бруцелле-" за является Т-зависимым.

Известна определявшая роль фагоцитирующих клеток е защите от грибов рода Aspergillus ГА.R.Waldorf et al1984; 1985 ). В собственных исследованиях впервые была изучена динамика показателей фагоцитоза при длительном поступлении в организм экспериментальных животных фильтрата гриба Aspergillus flavus. Результаты показали (табл.4), что фильтрат не только приводил к сни-гению количества нейтрофилоь в кроЕИ, но и ьлиял на показатели активности фагоцитоза, в частности, изменял поглотительную способность нейтрофилов. Изучение .динамики активности базального и стимулированного фагоцитоза свидетельствовало о том, что оба показателя у подопытных животных были достоверно снижены. На второй неделе эксперимента' активность базального фагоцитоза ■составила 14,Ot.l,при контроле 31.Oil.82 (Р < 0,001). Активность стимулированного фагоцитоза в этот же срок составила 23.8± 1,3'/., при контроле - 44,0+0,92 ГР < 0,001). Однако, изменения оказались фазными и на восьмой неделе активность .базального Фагоцитоза повысилась до 29,9+2,1%, что достоверно не отличалось от показателя контрольных аивотных и. вероятно, было вызвано относительной компенсацией Фагоцитарной активности ней-'..троФилов. Стимуляция фагоцитоза вызывала более продолжительную- _ активацию данного процесса до десятой недели, когда показатель

Таблица 4

Динамика понлаатепаЛ неспеци*ической резистентности организма г1ри длительном поступлении в организм метайопитов грийа ЙБрегд^Пие ^аучэ

. ' Понааатели Сроки наблюдений (о неделям) Кон троль

1 2 4 6 в 10 12 14

Активность базального Фагоцитоза, 54 * 14,0 + 1,0 * 21, 1 +■ 1,3 * £3, 6 + 1,6 £9,9 + £, 1 *** £6, £ + 2,0 * 15,0 + Ь7 * 9, 1 + 0,9 31, 0+1, 8

Активность стимулированного Фагоцитоза, "А • * 23, а + 1,3. * £6,9 + . 1,2 * га, е + 1,3 » гэ, а + 1,3 * 22, 0 + 1,0 * 26,0 + 1,0 * 17,8 + 0,9 44, 0+0, 9

фагоцитарное число, усл. ед. * о,оа * 0, 7 + 0,08 * 1,0 + 0,1 ****■ 2, 0 + 0, 1 ** 1,6 + 0, Г ** 1.4 + 0, 1 * 0,7 + 0, 09 2,2+0, 1

ЛимФоцитарно— нейтроеильный индекс, 34 * 4, 8 + 0,2 * 8, 5 + * 7,8 + 0,2 * 5, а + 0, 3 * 6,7 + 0,2 * 16, г + 0,4 * 4,£ + 0, 1 * 3,3 + 0,2*"" 1,6+0,02

Коэффициент распада лейкоцитов, "Л * £5,4 * 1,8 * 74,6 + 1,6 * 46, В + £, 5 * 37, 0 + 3,0 * 36, 1 + 1.9 * 64,6 + 2,4 * 71,1+. 5, 0 * 81,4 + 4,9 а, 4+0,2

Примечание; * - Р < 0,001; ** - Р ( 0,01! **<• - Р < 0,05) **** - Р > 0,1

активности стимулированного фагоцитоза, повышался до 32,0±1,0% СР < 0.001). Зто, вероятно, било связано с использованием резервных возможностей кейгрофилов. В то же время расходование резервных возможностей клеток приводило к более выраженному ис-тоаению их активности. Так, активность стимулированного фагоцитоза к четырнадцатой "неделе снизилась до 17.8t0.SZ (Р < 0,001). Активность базального фагоцитоза в этот ие срок снижалась до 9.{¿0,9%. что бкло в 3,4 раза нияе, чем показатель контрольных кивотнкх, Микотоксины ингибировали и захват возбудителей фагоцитирующими клетками, что выражалось в изменении Фагоцитарного числа. В динамике его изменений такге отмечалась снене 3-х фаз адаптационного процесса. Снижение фагоцитарного числа на четвертой недоле до 0,7±0,08, при контроле - 2,2а0,12, с последующим увеличением- захвата возбудителей на восьмой - двенадцатой' неделях, в среднем до 1,6±.0,1 и истечением компенсаторных механизмов к четырнадцатой неделе. Фагоцитарное число ка четырнадцатой неделе вновь снизилось до 0,7±0,09. По времени это соответствовало началу падвка экспериментальных животных. Таким образом, на четырнадцатой неделе от начала эксперимента токси-гекные продукты визнедеятельности гриба.АзрегдШиз Наииз ин-гйбировали все виды иммунного ответа.

йкалкз проведенных исследований показал, что .Фильтрат играет роль химического стрессорного фактора. Первоначальная реакция организма ка введение фильтрата гриба является стресс-реакцией к сопровождается угнетением функционального состояния лейкоцитов. Зто, по—видимому, связано с выбросом 5 кровь большого количества глвкокортикоидоз, которые подавляют деятельность защитных систем организма, а такие с большим расходом энаргии, которая мобилизуется за счет распада жиров, углеводов и белков лимфоидной ткани (Л.Х.Гаркави и соавт.,1990). При дальнейшем поступлении фильтрата развиваются специфические защитно-адаптационные реакции, направленные ка поддержание постоянства внутренней среды организма экспериментальных животных и формируется резистентность организма к токсическому воздействию метаболитов. Такой переход от угнетения защитных систем организма к их резистентности, по мнении П.Х.Гаркави и соавт.С 1990). связано с развитием в ЦНС запредельного торможения. Понижается чувствительность организма к продолжающемуся действию раздражителя. Погашение количества лейкоцитов в периферической крови, соответствуйте этому периоду, возникает в результате выброса гра-нулоцитов не только из депо, но и из костного мозга, т.к. б зто

'ае время повышается индекс созревания нейтроФилов." А зто ведет к усилении защитных свойств крови. В частности, за счет процессов фагоцитоза. По мнению П.Д.Горизонтова С 1988 ), подобные реакции протекают при участии симпатической нервной системы. Однако, дальнейшее поступление микотоксинов в организм экспериментальных иивотных приводит к истощении компенсаторных механизмов и развивается, деадаптация, которая ведет к гиг.е.:и экспе-.риментальннх животных.

Развитие адаптационной реакции и формиоование неспецифической резистентности организма било подтверждено вычислением лим-фоцитарно-нейтрофильного индекса по Л.Х.Гаркави и соавт.С 1979). Так, з стадии мобилизации адаптационного процесса (первая неделя от начала кормления фильтратом) лимфоцитарно-нэДтрофильннй индекс составил 4,3+0,2%. 3 стадии активации адаптационной реакция, в среднем, составил 16,1±0,4%, что соответствовало второй - десятой неделям о- начала эксперимента. В период истощения адаптационных механизмов на четырнадцатой нздэле индекс снияалса до 3,3±0,2% (Р < 0,001).

Как известно, во время стресс-реакции происходит, усиление активации перекисного окисления липидов. При этом увеличивается количество'гидроперекисей и образуются свободные радикалы ,что способствует повреждении клеточных мембран (П.Л-Горизонтов и созвг.,!933). Возможно, этим объясняется наблидаемое нами явление распада лейкоцитов при длительном поступления а организм микотоксинов. Причем, наиболее высокие цифры коэффициента распада лейкоцитов приходились на начальную и конечнуш фазы адаптации — 74,6+1,6% и 81,4+4,9%, соответственно. Снижение ае ко-.эффициента распада лейкоцитов совпадало со стадией резистентности и объяснялось компенсаторными механизмами адаптации. На этой закономерности основан предложенный нами способ определения степени интоксикации организма к длительному токсическому воздействии метаболитов гриба. Степень интоксикации определяли путем подсчета количества лейкоцитов сразу же после взятия крови и через 3 часа после инкубации в физиологическом растворе. Находили отношение разности полученных показателей к количеству лейкоцитов до инкубации и выраяали в процентах. По уровни указанного отношения (коэффициент распада лейкоцитов) определяли степень токсического действия на организм метаболитов гриба. Вычисление коэффициента распада лейкоцитов для реие-. ниА вопроса о степени токсического действия на организм микотоксинов является более чувствительным и информативным, чем

обычный подсчет общего количества лейкоцитов. Так на четырнадцатой неделе, после которой наступала гибель экспериментальных еиботных, количество лейкоцитов составило 7,0±С,3*10 /л, что было близким к норме - 8.5±0,1*!0 /л. В зтот же срок коэффициент распада лейкоцитов был наиболее вырагген и достигал 8'.,4+ 14,32 распада, при контрольном значении - 8,4±0,22.

Снияекие устойчивости лейкоцитов, их усиленный распад, в нашем эксперименте нокно объяснить следующими Факирами. Во-первых. изменением функционального состояния костномозгового кроветворения, так как ингибиркацее действие• нетаболитов гриба на нкелопозз, б частности снижение индекса созревания кейтрзфилоз до 0,2±0,02, приводит к тому, что пополнение периферической крови сегментоядернаки нейтрофилами происходит за счет выброса их из кровяных депо, где находятся старые малорезистентные Формы лейкоцитов. Во-вторых, связано с качественными изменениями лейкоцитов в периферической крови. Под действием фильтрата значительно увеличивается количество поврежденных лейкоцитов, у которых устойчивость клеточках мембран такге значительно снинс-на. Критерием повреждения таких клеток является изменение структуры ядра, внкод его за предел« цитоплазмы, распад клетки на фрагменты. В-третьих, непосредственно связано с изменением их функционального состояния, в частности с изменением поглотительной Функции нейтрофилов периферической крови. Саны?; низкий показатель фагоцитарного числа (0,7+0,00 усл.ед.) набдвдался на четырнадцатой неделе эксперимента, когда коэффициент распада лейкоцитов был наиболее высоким - 8Г.4±4,9Х. В-четвертых, с нарушением функции печени, о такге диспротеиненией, которая сопровождает микотоксикозы (В.А.Тутельяк.Л.В.Кравченко,1385). Данная закономерность не является- специфичной и поэтому мояет применяться для решения вопроса о' тааести 'с ас таяния организма при других воздействиях, в том числе нонет быть использована для определений характера воспалительного процесса.

Следовательно, по наоенд мнении, выявленное в эксперименте волнообразное изненгние Функционального состояния лейкоцитов отражает динаиикд компенсаторна* функций. При этом повышение-показателей Функционального састояния.лейкоцитов монет явиться следствием процессов, гиперкомпенсации, а понижение показателей Функционального состояния отражает истощение компенсаторных механизмов. Полученные нами данные укладываются в общую картину адаптационного синдрома: первая стадия тревоги, или мобилизации защитных сил организма; вторая - резистентности; третья - исто-

' пения.

Таким образом, возможна адаптация организма к длительному пероральному поступлении токсичного фильтрата гриба ЯзрегдШиз 'Пачиз. Однако, итогом такого воздействия является развитие синдрома вторичного иммунодефицита. Это, по-видимому, и язляет-ся причиной падежа сельскохозяйственных животных и птица, з кормах которых находятся иикотоксиня этого гриба.

заводи

t. Длительное поступление в организм экспериментальных яиьотчах токсичного фильтрата гриба Aspergillus flavus вызывает 3-х фазное изменение количества лейкоцитов в периферической крот: 1-я неделя - абсолятная лейкопения, 4-12 недели - абсолютный лейкоцитоз, 14-я' неделя - лейкопения.

2. Лейкопения, развивавшаяся, в основной, за счет сникення количества ссгчентоядерннх нейтрофилоз, обусловлена непосредственным ингкбиругдим действием метаболитов гриба PLspargi 1 lus flavus на процессы'лейкопоэза.

3. Длительное поступление в организм подопытных животных Фильтрата гриба .AsperjUlus flavus сникает показатели процесса Фагоцита с последующей относительной компенсацией на 8-ой -10-ой нчдзлях и повторным угнетение!! Фагоцитоза после 10-ой недели. _

4.-Клеточный иммунодефицит, развивающийся у экспериментальных вивотных, сопровождается сменой фаз иммунных адаптационных реакций - острой декомп°чсации (1 неделя), относительной компенсацией (2-я - 12-я недели), окончательной и необратимой декомпенсацией (14-я неделя). В наибольшей" степени наблвдается угнетение количества Т-клеток с фенотипом 'хелперов.

5. Токсичный фильтрат гриба ftsperglllus flavus вызывает снижение специфического • антителогенеза у подопытных животных, что выражается в резком снижении титра антител (0,4+0,1), наиболее выраженном на четырнадцатой неделе эксперимента.

6. При длительном пероральном введении фильтрата гриба fi$-perglllus flavus понижается резистентность лейкоцитов периферической крови, причем коэффициент распада лейкоцитов коррелирует со стзпэнью интоксикации организма экспериментальных животных.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Наличие 3-х фаз формирования иииунодефицитного состояний при длительной пероральнои поступлении в организм метаболитов гриба ЙзрегдШиэ Пауиз Сострая начальная'декомпенсация, относите пьная компенсация, необратимая декомпенсация) диктует необходимость ранней диагностики интоксикации с целью профилактики ее трансформирования в необратимую фазу.

2. Эффективность диагностики степени -интоксикации организма под влиянием метаболитов гриба АзрэгдШиз Паук, прогнозирование течения . заболевания и коррекция лечения повышается при использовании способа определения степени интоксикации организма, V

СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ, ОТРАЖАЮЩИХ СОДЕРЖАНИЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Показатели клеточного иммунитета у экспериментальных ви-вотних иккункзированнкх антигенами бруцелл и стафилококков нэ фоне хронической интоксикации фильтратся гриба йгрегдШи* Г!е-ииг.//Программа конференции молодых ученик.-Семипалатинск, 1983. -С.19-19.

2. Влияние метаболитов плесневых грибов на показатели фагоцитарной системы экспериментальных нивотных.//Тезисы 32-й итоговой научной конференции.-Семипалатинск.1989.-С.20-21.

3. Реакция крови на поступление ч организм метаболитов плесневых грибов.//Тезисы докладов итоговой научно-практической конференции молодых ученых, специалистов Дагестана.-Махачкала, 1989,-С.51-52 (соавт. Н.А.Крнкунова).

4. Экспериментальное изучение влияния метаболитов плесневых грибов на лейкоциты.//Сборник конференции "Современные проблемы гигиенического реглакентироваккЁ.-Пернь,!ЗВ9.-С,!02-103.

5. Динамика изменений показателей клеточного иммунитета у кроликов при экспериментальном хроническом микотоксикозе.//Аннотированная программа конференции молодых ученых.-Семипалатинск. 1990.-С.38-38.

6. Влияние пищевых ксенобиотиков на лейко-и эритропоэтичес-кие свойства костного мозга.//Тезисы докладов Республиканской научно-практической конференции молодых ученых и специалистов "Актуальные проблемы охраны и укрепления здоровья населения Ка-

эахстана.-Алма-Ята, 1990.-С.52-54' (соавт. Й.С.Хлебутин).

7. Состояние лейкоцитов при вскармливании животных метаболитами плесневых грибсв.//Патологическая физиология и экспериментальная терапия. -1990.-N4.-С.63-53. Рукопись деп. в ВИНИТИ ll.09.89.fi 5773-В.

8. Динамика изменений клеточного иммунитета у кроликов при хроническом алиментарном дикотоксикозе.//Маиериалн 2-й Всерос. учебно-методической и научно-практической конференции.-Москва -Барнадл, 1332.-С. 191-1.32.

9. Динамика адаптационно-приспособительных механизмов у кроликов при экспериментальном микотоксикозе.//Тезисы докладов 2-го съезда физиологов Республики Казахстан.-Караганда,1992,-Т.2.-С.32-32.