Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Функционально-метаболический статус нейтрофильных гранулоцитов периферической крови в условиях воздействия экстремальных факторов радиационной природы

ВАК РФ 03.00.01, Радиобиология

Автореферат диссертации по теме "Функционально-метаболический статус нейтрофильных гранулоцитов периферической крови в условиях воздействия экстремальных факторов радиационной природы"

Р Г £ од

з < ШОП 1935

Иа правах рукописи

ГРЕБЕШОК

Александр Николаевич

ФУНКЦИОНАЛЬНО-МЕТАБОЛИЧЕСКИЙ СТАТУС НЕЙТРОФИЛЬНЫХ ГРАНУЛОЦИТОВ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ В УСЛОВИЯХ ВОЗДЕЙСТВИЯ ЭКСТРЕМАЛЬНЫХ ФАКТОРОВ РАДИАЦИОННОЙ ПРИРОДЫ

03.00.01 — радиобиология 14.00.20 — токсикология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

САНКТ-ПЕТЕРБУРГ

1995

Работа выполнена в Военно-медицинской академии.

Научны« (руководители:

член-корреспондент Российской АМН доктор медицинских наук профессор Софронов Г. А.,

кандидат медицинских наук доцент Смирнов Н. А.

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук профессор Легеза В. И.,

доктор медицинских наук профессор Бородавко В. К.

Ведущая организация: Научно-исследовательский институт оннон гигиены МЗ РФ.

Защита диссертации состоится сентября 1995 г. в

сов иа заседании диссертационного совета Д 106.03.08 при Военно-медицинской академии (194175, Санкт-Петербург, ул. Лебедева, 6).

С диссертацией можно ознакомиться в фундаментальной библиотеке В оен.н о -и бдицинской а к адехпш.

Автореферат разослал июля 1995 года.

Ученый секретарь диссертационного совета доктор медицинских наук профессор

Чурсин И. Г.

радиаци-

Лчтуадь:;о<ст. Оценка последстша"! воздействия на организм ионизирующих излучений е малых дозах .шляется одной из наиболее ваглшх и сложных для решевкз проблем современной радио 5иологш (Кудряшоз K).B.,ißSO; Кузин A.M. ,1993; Upton A.C. о.а., 1333).

Существующие в настоящее время оценки риска действия ыашх • доз исгазируквдх излучений базируются^ в основном, на данных," полученных путем экстраполяции из области высоких доз. Однако . правомерность такого подхода не доказана и, более того, полученные подебннм образом сведения зачастую противоречат результатам ■ экспериментальных исследований (Василенко И. Я. ,1993).

Опыт по обеспечению противорадиационной задеты волск, на- : копленный в ходе ликвидации ад арки на Чернобыльский АЭС, . пока- . зал, что далека от разрешения и проблема хкшческой аадаты человека от мальк доз коннзируэда зшг. -чекий. Свахносго донной проблемы гаышается, о одной стороны, г отсутствии надежных.критериев д^ствия малых доз и интерпретации выявляемых эффектов с точки врения оценки степени их вредности для здоровья .^усько^а А. К. ,1393; vicker М.е. o.a. ,1591). С другой стороны, до лаптоп-цего времени не создано единой стройкой теории, объясняющей все' многообразие . механизмов протекторного действия радиозащктньи: лрепаратов (Владимиров В.Г., «(ргеидьюйов й,И'., 1°S4; Ровдест-*., венский Д.М.,1994; Bacq Z.M.,1265; Кипа Р.,1589). По существу даже не решен вопрос о целесообразности применения радиопротекторов для модгфжации биологических аффектов иглах доэ ионизирующих иалучений (Легеза 8.И. и др., 1G92), , ''

Проблема малых доз радиации по-новому предстала и з связи возможностью возникновения комбинированных поражений.. Не исключена вероятность крупномасштайкш химических аварий иа рпдиоак-тивнооагрязяеянЬй местности. Анализ перечня к запасов токсичных веществ ва проиышюнкых объектах показывает, что иаибодыкуй опасность при таких авариах представляют хлор, аяшгл-, оксиды авота (Софрсмгая Г. А, и др. i 1983;'. Ворёдавко O.K. .и i 19&4). »«¡ногочиеяенные расчеты свкдетельствугт о той,,. что именно в области малых доз и янтексивкостеЗ существует иаксимаАлкггя кег.сят-ность сигофгичесчсго эффекта компле^а1 различных ЕредЕых,Факта- < ров зкешкек среды (Барабой 8.А.,1090; ' 'Спитковский ИМ. ,i99vj, -другой стороны., в .экоиершентадёкьк* псслщоьттх куул^слц? агента могут использоваться:' в качеогз*.- свбообра&яого эеяда, по?- '

Еоляюдего оцоккта характер и направленность изменений показателей гомвосгаэа о„'лучашш' лквотккх (Сгватееа Н.В. и др. ,1950.

Все это гегаег цвлеоообраакш кг-учйше биологических аффектов малых-доз иогкзируг&щих излучений, в частности, пострадиационных кэмемевкй со стороны скоты неспсц/фкческой резистентности и иммунитета- (Хамитов Р.И. к- др. ,4993: Yarilin U.U. ,1094).

В услогиах апоптоаа лимфоцитов, как наиболее радиояоразяае-г,2.к клетогс, u-заоснгя нагрузка по сзд-гг? организма от действия экстремальных факторов ввйпшей среды доаятся на нектрошильше грзлудсисты (HP), . ямшдаеся наиболее !<обм.шшг.*л к высокочувствительными элементам;-; -систехи неспаздЬи*; -jciioá рб&истйктности. Нейтро&ш-ниг граяулоцнти •• удивительно быстро сбпогллшдяся система: у чедезека et; сутга: на 1 кг всса Еоаяккае? около 1 миллиарда клеток. S то ке зрема,- функционаяьно-ме'/абоипееккй гро-филь НГ характеризуется крайке низким. уровнем энергообеспечения и отсутствием инициации ароогааштвнх мехапизмов дяя наработки активных фррм кясл^рода и лизогоуаяьнайс ферментов (Маяпский

A. Н,; Маякскми-Д.к.»1983; Marphy R.4£f?6). Влагод£фй сгоему уии-гсш^ному пшгжеиаю в систем? неспеффичсатай резистентности к ншнгчяе рецепторов к огромноыу числу биологически активных субстанций, эти' ¡«пткк быстро реагирую! на. ыалейияе кеме^евка постоянства тяг/тренкей'срезы организма (Бережная Н.Ы, ,1003). При раз-дкушых фивислогкче-oiffi.'.' и патологических процессах резко мйняется не- только количество ИГГ но к.ил функцконакыше свойства, морфологические и биохимические» xapaitTepKc-wii-i. происходит модификация биецнднах к цктотоксических функций этих лязгок (Ко.чрлкоз

B.Н..»1920; iüsbanoff S"., Clark R. Д978). Кроме того, НГ синтезируют и еевр&кгуит в кроюк»: более 1.СО цитоюжш, екаэкьия тй-róar образом рвгулаторлыб вдшшия на рештакши* орган« и система организма (Ыазияг Ю.А.> 1094; Spitznasel J.К.. J59Q).

Эхк обс^оятедьстаа ас8волягат представит* № в качеств? аер-када. гомоостаза или.индикатора сгепоья со-здекстгяя зкегрбмэлыш факторов вяепнзй срсдп на оргачивы- ííooxojjy изучение особенностей этой одной из стиху- мабилзках к. южкг^детвигчтвдх скоте« ери действии" 'на ортааюк пекшфу»:^х кедумняй в ьсашх дозах является весьма елтуавышм нз • только ддя соврзкотаюй радиобиологии, -но икойт-ганке оЗ^ксаогкчаскую ансеталхяь- .

.. {jeíí/ работы'- уотшсй5ить-»1 хертяй? .юашок'.гЛ д-уккагональ-ac^-yiíTséc^^ecRÓrc; -ciarv-rá вейтрс4«аьнух гракудодаов- rrcp;ri.c-pr-

ческой кроки в условиях воздействия кз ергаыюм гкЬтрекалъньк факторов радиационной природы.

Для достижения постазлеиной цели предстояло решить следао-злдуот:

- изучить особеякоста фулигионалыго-иегаболотеского статуса НГ при облучении з мздой доээ;

- исследовать влияние даст&чккй на иорсрбиохимтгееские ар,- ■ ракгеристжи НГ у инталтшх и облученных в юлой дозе жизотных;

- определить вклад, пр"? дварэтельнего сблучекш в малой дОаз а м'дкфикэдшо устойчивости кивоткух к лоследущйму аоздейстаии экстремальные факторов радиационной и химической природн-,

- оценить характер к направленность рза'одта НГ;ири радиационных воздействиях в шярогта! диапазоне дез.

йаучяая Впервые нрог^дена мимадокс^ая оценка сос-

тояния НГ при действии аксгрймашш; ^аоторез' радиационной природа. Установлено, что дучевсе гезцейотвк-з наряду с количествен' цьаш сдвигами хлетск перхфсряческой ■ крови хщзыгае? —¡мененпя фунэднональнсг метаболического статуса КГ,- которые проявляются в примнре-вшип их астетаносги под ыкянием малых дез. и ■ деактивация при действии высотах доз конизпругощ« излучений.' Ешадеиы значимее корреляционные сияви между поглощенной дозой п цитохими-гес-ют.гл показателями КГ. Намечены подхода к реконструкции поглощен-" ной дойы и ярогногировеии» исхода лучевого 'поражения, на: основе ::гполъгозачия морфобиокшичеосях харагсгерисяя* НГ облученных ,жи- ' сохнш. ■ ■ . . ,

Показано, что /иоадгщдомфование НГ, .^зрядус другими процессами, мат дехагь в основе м«шияйа рглиозагоитзюго действия имстамйна. Устааовлей факт стабаигокрущего. ивгаяйа «котаыкна на ссстоянке клеточного звена састеш хесдаадфичеекой рвзисуевтясст те при■обдучбнии■и дозах. .

Получеш новые научные' .яаканв..о';пййааении:..устс1чавос?п предварительно облучевних А .иазой дозе'«иво-гянзг '«оодейогзийм факторов рэдл-здгошгей к/гашесксй.''природ'/'

Практическая ру,у;уу.ос.ть райота зашмаэтея. в том,* .яуо'погу-чсЕкыв. з коде.дисссртационзого 5<ссдедозаниз. дшт;'йогу?.. /послужить •' основанием для', проаедеыя. целенаправленного п6кскй'$адц««?а-ротекторов, э#в1гг'явкых яри, оа?рр£*'сх^ученкй\к мат дозах. Быт явдзнше , зависймосз'и ыеаду. яоглоадонней цовой я' ними. аокгэагедйки КГ лозеаяяод решлашвгэдь ж-

' О ' ■ • .

годы для ранней диагностики степени тяжести и прогнозирования исхода лучевых поражений.

реализация разудьтатса ясследоаания. Рекомендация, разработанные на основании лол/чеиных в коде диссертационного исследования данных, исяользукгся в научной работе, клинической практике и учебноы процессе на кгзфэдрач акушерства и гинекологш, во-енко-поазвоя терапия, военной тонсикоаогш и мединкнелой защиты воежо-медицинской академик. в сроцессе 'выполнения работа подано к йаттаско авторотая свздетельствйми 4 рационализаторски.* дред-

Апро&кзки- работа:' шюеедека на всесо:оз..ой научной конферзч-цик "бкокл.м1'?1 - кедкшше" (ленинград, 1988), всеармейской научной конференции "Соврвкеаяве мвдацлнеки» технология в соверкейс-иговаамм лечебно-эвакуационного обеспечения войск" (Сзккт-петербург 5 1953), ХШП конференции студентов и асшракток норфоло-гическил кафедр и лабораторий Сачкт-пгтербургских вузов и научно-исследовательскую тастизеутов ((>лзгл"-петербург, 1354), к конференции по коампчзокой биологкк i". яей2кс«.\21ч6ск<>й уодшяе' Шоскга» 1994}, второй международной научной "нас31оыо1се1са1 сспзс-оиепсеа о£ 8«с1еаг ассмоглз" (косквл 1934), научно:/ конференции "актуальные вопросы вочйно-юрско?'. гигиены, токсикологии, редиовогик" (Ойникск, 1354), всероссийской научной конференций "Актуальные вопросы гшшякк. днагеостзйй' к лечения" (сазгк-т-изтербург, 1995). яо теш дчссерташюшюх-е исследопания скубдгасойаяо £3 печатных э&иот.

Структура к рабсаи. Диссертация состоит ш введение, 8 глав, ек^лчааа;»'. обгор литература, общую характеристик кате. рназог и мотодез исследования. полученных результатов, оо^укце-няя и выводов. работа ,¡вложена ка 245 странздая. машинописного текста.. содержит о2 рисунка к 18 таблиц. Сяясок литературы состоит кз 300 источников,, из рих 170 отечественных и 130 иностранных а?,тсро£-.

Саговнш пяашаюа, в?лсдкмне иа вьянуу: " 1. лучевое воздействие наряду с ко^ччественкымк сдзяг&ыи клеток иерйшеричэской кропи зы&авает изменения фуяьт^наяььсг-кс-/тайоллческогб статуса нейтрофильных гранулонитов, который проев-лжугся в -аримирозакки »и екгиввоежк под влшшиам мгишх доа и де-актпвации яри.действии Еьйаоя^доз ионизируоди?: ивлученкй.

2. Кснмициоиировайие нейтрефилькзх гралулсцитов, зоэкикая-ir^ee на высоте р^дкозадитного эффекта цисгамкна, наряду с другими процессами, мокет лежать в основе «енаниэма протекторного действий препарата.

МГЕРИДЖ и метода КСШЭЕЗОЗАКЙЯ.

Экспериментальные исследования ькподнеш яа белкх беспородных крыс-ах-самцах массой 100-220 г. Обцее одкояр&ж'кое рентгеновское облучение лизотшх в направлении спина-грудь осуцествля-ли на рентгенстерапевтической установке РУМ-17 (180 кВ, 15 мА, фильтр 0,5 им Си + 1,0 мм А1, когао-фокусное расстояние - 70 мощность дозы 0,25 Гр/мик). Наблюдение- за лштогяши велось.в точении 30 суток после радка'*чснного воздействия.

Цистамик в до»е 90 мг/кг, разведенный ex tempore на физко-'. логическом растворе, вводился .чнугркбрхшвно за 20-ЭЭ минут до облучения в объеме 0,2 мл ка .00 г ь'.ассн крысы. Животным контрольной группы в те ке сроки внутрибршиняо вводился физиологи-^"скип раствор з том ле объеме.

У ответных опытных и ¡соитропьньгх групп изучались гематологические показатели и морфэбкохимические характеристики шйтрс-фклышх гранулоцигов периферической ьрози.

Общее число дайюцитов определяли шдакзкернкм методом с последующим подсчетом клеток в !*амере Горяеза. Для исследования лейкоцитарной формулы применяли способ бустрой окраски каакой краской Романовского по Н.Г. Алексееву (1956).

Суммарное» цитохимическое выявление катионвых . белков з НГ проводили с.использованием лшассомальЕО-катюанаго теста, предложенного З.Е.Пигаревскш (15533). '

Цитохимическое определение миелоперигссидаак (МПО) проводил« по ••гтоду Graham - .(noli в модификации Г.Н.Кузьминской (1992).

Ийтрацеллзолярпое выявление цедочнок фосфагасы (&Ф) превзди-методом азссочетания (Kapler L.3. ,1355) з нааей модификации: а-яр^тилфосфзт нагрпя эакейс-н на иафтол-AS-ES" фосфат, а дкагсль сший "О" •• на прочный сиякй RR; фиксация.мааксв проводилась парах 40% формалина; ядра клеток окрашваг« нейтральным красным.

суямаряоз цитохимическое определение люиедгв в некрофилах проводили о использованием судана черного,3, (Llson 'по .

методу H.J Sheehart и G.W.Storey (1947). "-. ...

• Прсокоидантиая система КГ сушяряо оцекивааай з • ИСТ-м. ie

2з 1014 .

(рагк в.н: ее. а!'. ,195<>)', когорый-йровсудокй ь спонтанном к стл-м5,'г«ров£йна4' гишзаво«!! зеркактах,'.' й'-деттамровадась по изменению аотлвностк ■ мзчбрачосвязаьтах' HkS.ll■ к над5\н-оксидоредугстаз (над.н-сх, н/дф.нгох). к-фуигатск/илно-сая&анкой с ними глзжо-г-о-б-$осфатдегедрогекагн • (г6фдг), • иослзигямфй восстановленная кофэркенг' в. реакциях* гсксозокока^со'рагнйго аукта (ьо^с!а е-.зоз^.

^ктохтикчссхоч выявление' оуг;ц£на?дбгидрогенааы (слг) проводили м^дож олмс£нк^ 5р;шнащйсссйьаа: (1969). йнтрацелимярнув акишносз»' лгкта дёгадрогеаазы щг}' - герминадького фермента анаэробного:, ^зшколпзл,. ма^атдэгзздрогеь'ззы (щг) и цитоалазкатк-чеокой нае-эакюимой": глкцйрол-3-фос|^тдегйдрогеназк (год1), оя-ред&ляхмузй работу челночках'-ыбхзлибмоз^. оценивали с псмодъы ггт-рааолковог.^ метода

гмлроскопкробанлс окраиеякь«. мазков кров;;- "-роводи^-сь с оьеговш' микроскопа ' "¡_'зьоуа1-4"" (оеплёпу).' при1 уйелйченш: ^1000; (объектив 100/1,25;: окулар 10*)-^ при-иелгом'све^офкв&трг;• о использованием ; качосгве иммерсие'кадрового ■ маош.

для■■усгадавлешя'роли;нг! в' фэрляровании резистентности' организма. к- каяш' 5©з8ы.:ионкчирукяцяхлизлучений изучали" бьаявае-моо.тъ и. средни? продолазттелькосгь-ямы:л предварительно облученных «ивэганч * в • узяозиях »огдейсгме;; ачстремааньк факторов ^еди-ацкоявой.и -химической природы, - '

стагические-. затравки жвоткьа проводили в камере из плексигласа озъексх 30 л. подученле '.к -храйанке дксксвда азота к хас-рз проводил» по"к тсдая, . сшсашвд'с.д1 радзйкмш.'(1940). 'длительность •'• иигайяцкоаяого • гсзйе^згзвя 'цуабшнойшбйкачтамк была-подобрала. олотжас .пууеи -к>'-вь оййззяйх.-.; сеояах'- эяскьрййенйов' не яргвшала.- г&.чашуг.'' чксал-айь•

концентрации дко^ида^азота^и-'кжйр&'^пробал:-.воздуха; • зз'йтьк ;й"< к(.-ййрь"-с •исполайдзашюя'^лмз^^ногт/.аркбора зайцева к" вода-аого ь-жиратсра определяли-' яо-' методам в.е. 5а1ьатоп-(1354},. м.прь'£са и к.дкг;-обоа (цат;-по'.-бэхозскал м.с, и др., 19се}.-

иолучоаш& зкспвр!з>ента^:ные. -д£1жыг подвергали стендерггас-к статистической обработке с расчетов: среднего к-;ачекиг, ошбки средней 'к среднего квгдрагкчэсмго откьскшш. оценку-'рагдичий" срэдйих экачёвий проводки с жждебэвг&доы ькри-геркя сте&д^ • та. .вврсн-люсть р ••< о.ио очкта;:« .цоетшочисй для вывода о с-у-десгзевностй рааличий данник, нссучснаых з гчй^срш^нте.. обоа-

ботга репу штагов прозод;лась ид пепсснаЕькск гампъютеро "15¡-í PC/AT - 48G с и юльзоьанке« пакета. лржладни .программ RMCP й на ыккрокалкуляторе Í-G'-S?, (Иванов Ю.И., Погорелг/л О. И. ,'i99u).

ГЕГ"'ЛЬТА1й НСССЖОВ/ШЙ И SIX ОйСЗЭДГН&Е. 1. &/н.ч1у«кально-н€та0олкчсский егэтус кейтрофяльных граяуггаргеш при облучепм л иадС'й ( Tl.ZU Г? ) дозе. Изучение гематологических показателе;"! и цнтсхих~л:эских .характеристик кейтрс|шьньк гранулодатоз периферической крови -у животных опытней м контрарной групп проведши до облучения, на 1 и 5 суткя после радиационного воздействия.

В результате провезенных исследований установлено, . что о5-щее число лейкоцатов кропи черб_ 1 сутки после радиационного ; воздействия имело тенденции к сиихзни», достигая исходного уровня к 5 суткам. У гжотнах ойъггнгй группы разлэтке этого показателя на 1 сутки по сравнении с* фоноььмк значениями -было .доохэ-верньм (р < 0,05). . На 5 сутки после ооцгагаха .абсилхшюе :каш--честно не "трофияов статистически гпапимо лрёвытаго' :как .исходные данные.. , так и показатели контрольной группы. :В эти «а сроки абсолютное количество моноцетоз ззноодтеяь». «сходного уровня скй-.зкааось. более чем е два раза;; ■раядичке етого показателя по epas-яешгз с контролем *ыло дссгогеранм (р < 0,05). •

Лучение лейкоцитарной $армулы доказало, что судеотаенных оаадзчкй по сразнешю с контроле;« к ■ исходная данкьму, на. 1 сутки после радиационного восд-ейсузиа не наоллгаюи. Л&кенеш!л в формуле крови на 5 сутки происходил га счет огкосительеого увеличения содержания НГ к анюуэьия колетьстэа мочсцигоб-

Нал спадетЕЛьствуют дшаич» предогавл&зны* ъ мйлкце 1, уже цяр&й .сутки носле осгрохо .о&гуч&ная крыс в дозе с, 26 Гр в ней?-рф'даяьэ'. уранулса?• "Д» -озмечалось преходяцеэ снижение активности .ВДР, - Ш, ШШ, МАЛФ.Л-ОХ » укеаквзяме осд^ркакж ка-

-•-юкл.ч.ч Ое^кор. Ршг ксаг>честза иейтрофияси в по^я-

ферачеда« кроги да 5 сутки яоеяе радиационного всадейстаяя -сок- . роврляавд усйлезием в отх яреяееооь энергообеспечения и утял«-•эациа гдагаы в реакциях гексозо^онофосфгзтиого гаунта. . 8 то ¿э время .активность кйедородзазизимой МПО-сястсы е. рочние после острого облучат в-дозе 0,25 Гр достоверно превышала .ас-казагеди контроля.- .'

. изменения нетасол>гческой активности кзе-ток, названкыу .5v* >-'-.

г*. . •

таблица 1.

метаболический статус нейтрс-филыгн)! гракулоцихов ннтактних и облученных а дозе 0,25 гр крыс.

каимсковаиие |---

показателя ! дс облучекин

сроки исследования

----

л л г, у.е.1 2,03 1 о,л6 I ( 0,20 )

пл'ле облучения

1 сутки

5 сутки

1,69 ± | 1,38 * 0,05

( 0,13 ) | ( 0,16 )

с л г, у-е.| 1,78 ± 0,04 1 ( 0,11 }

м д г, у.е.1 1,85 ± 0.03 I С 0,09 )

1,37 * 0,03*й| 1,56 ± 0,02ч

(0,09.) | (0,03) ----

1,61 ± 0;05**| 3.11 ± с,03* ( 0,15 > ! ( 0,09 )

н

мп.о, у.е.! 1,26 ± 0,05 " i ( 0,15 )

2,02 ± с,04**| 1,53 ± 0,02м* ( 0,14 ) | ( 0,07 )

щ $>, у.е.i 1,бо ± 0,14 ! \ 0,45 >

1,04 ± 0,09* \ 1,74 ± 0,10 ( 0,31 ) | ( 0,30 )

катиокные ! 1,10 ± 0,03 белки, у.е.| ( 0,03 )

0,93 ± 0,02* | 1,0? ± 0,02' ( 0,08 ) ! { 0,07 )

г5эд£\ у.е. i 2,19 ± 0,14

i с 0,44 >

1,67 ± 0,13* i 2,59 ± о,и* ( 0.« > 1 ( 0,35 )

на&ф.н-ох, | 2.11 ± 0,03 у.е.! ( 0,10 )

гфдг 1,13 ±0,07

! < 0,22 }

1,90 ± 0,02" 1 ± 0,03*

с с,с7 ) | < 0,03 ) +

-1

нон-ох, | 1,84 ь 0,03 у.е.1 с одо ;

1,41 ± 0.с5 '! 1,23 ± 0,07 ' 0,14 ) | ( 0,22 ) -Г

2.60 ^ 0,03- | 1,81 * 0,01 ( 0,09 ) | ( 0,05 )

-(--

лшзды, I г, 13 1 о,оз . у.е.! ( 0,09 )

2,22 а 0,03 ! 2,80 ± 0,04* ( 0,09 > I ( 0,12 )

различие с контролем достоверно ( р <■ 0,05 ), л* - разлжке о коптро^л достоверно ( р < 0,01 ); п - 10. „данные в таблицах представлены в вкяе: к 4 х ( б ) , "где: к - среднее значение; х- озшбка средней; б среднее квадраткческоз опдекекай.

тинем pan»£.4Ki, сопровождались кодифккациой функционального потенциала иейтр ¿ашш гра /лоцэтоя, оцененного в нот-тесте. ток, облучы»:е в лозе 0,25 гр стпмуи'росато фагоцитарнуо актив-ность пейтроаклсв. •>остйге©иуя максимальной вкраненност» па g сутки после „•;>> ¿того воздействия. /^лчглкрук'щий эффект радиации проявлялся б росте числа шт-п08ктивкык клеток п г/о!сачателя hct (за счет увеличения рзвчероз ¿л^ормазановыя отложений s ¿аголи-с-осоках нептрстллов) 2 йгзалшом аарканта теста. зидозап оказывал ькрайеиг.с& сигг/жсруйцее действие яа иг как интактлых, так и сбдучесшь'х kîibothux, приводя к достоверному возрастаний фагоцл-тараого регерва кзеток на 1 <р<0,01) я на s "утки <р<0,05) tir-yse рачвакионного воздейстекя.

вияодяпше язкенекия л''нкц!!сна.йко-1.'.етаболическсго статуса ¡г, шипасаащив после облучения эксперилентальних кттшх з дозе 0,25 гр, носят, на наа взгляд, адаантннй характер. прл этом, •юстрэдкационноо лршкроваин «ейтрофилов шкет рассматриваться •йзк один из меяашгыов иеспецп$нческо<1 ресистеьтности, напраи--пншй ¡.j только im поддершио нарушенного гсмеосгаза, по ¡5 г-3есиешш£ин5кй повышение устойчивости орг~ш;«мл к действа s;сс-трсгашж факторов виеяней сред;! (рлн'сго-o.e., 1988).

2. «у1ицноналг>но-метз0{5л;;':ес!с!й статус кеягрофпрэдих ГрЭЯуЛСгфЖЮ яри ДсПСШ'З* Г.П(Г£ИНПиа.

введение пнтскгяьзл jcsbowow цкстахкна шзпяпло характерце шженения как количественного сеотона клетск нер^ер^ч^ской sipo -»и, так и клчесггешюго сестолнкл hp. обследование к:пк>vaux ('■•¡нтролыгон и опытной групп проводилось до введения нрепаоатл, f't высоте аедатиого оффокта (20-33 кинут), ка 1 и 5 сутга поело • ведения радиопротектора.

действия цист .«та, в отлично о? облучения, сонрспоялалос*. толдопщшй к новшешя» общего числа дг^коиитов, достйгавиого .„акоимума па 1 сутки после введения прогпчктгл, в ото? срок иссо-тог'ое количество нейтрофялышх гралулоцг.тоз почти в два раза зревьашь кек исходные дашше, так ;; показатели мснтролы'чй группы (р<0,05). ни на высоте защитного эффекта, ни «а 5 сутки тссле введения радиопротектора статистически shfw.wux различий показателей перк-тюрчческоп крови по сравнении с контролен с-гл:а-jyneüo не било.

при изучении фор?.^'лн крови установлено, что m высоте р? д-3 , Oí?

Таблица

5»&я©5азкч&ский статус аейтрфшшк граиуяоцктоа ккга»та.« к получавших цжяжш крас.

йашгаозкашг г---

покааателк (до введений

сроки исследования

Т

после зведшк ------.-----_.„.„, __---

20 мину? | 1 суткл | б сугкь

,2 л г, у.-?. |£,04 ± с,04 { С О.И )

1,53±0,04*' ( 0,13 )

1,804 0,0-142.02; £ 0,0 ( 0,12 ) | ( 0,1Э )

О £ Г. у.е.¡1,76 ± 0,02 ! ( 0,07 )

111зо±0,сзг!''1 С 0,10 )

1,554 о,03*11,24*0,00*

(■0.09 ) | ( 0,10 >

у л г, ± 0,03

I ( 0,08 )

1,47±0,02 ( 0,06 )

1,87 *

( о,ое ) I с ода }

м л о» у.е.11,51 ± 0,05 ! С 0,17 )

2,5410,07^

( 0,28 )

2,20г0,08*к11,60*0,02"

{ 0,26 ) ? (од! 5 —------>_—-------

у.е.11,77 * 0,17

I ( 0,53 )

1,08*0,1.3*' . ( од:: )

1,54 ± 0.10|1,?2 £ с,о ( } [ ( оде ,

катионнаэ !'1а04 £ 0,02 белки, у.е.} ( 0.0'/ }

0,65= 0,02*

( о.: з )

1,05 3 0,02(1,09 й 0,0 < 0.07 ) 1 ( 0,11 }

гаег, у.<е.|2Д0 одд

i ( 0,46 >

5,2320 Д2** (с 33 )

1,85 1 0,11 ¡2,50:10,1:к ( 0,53 ) ( ( 0,34 }

йж5.н-05» £ 0,03

у.е. 5 ( 0,ой )

2„51±0,04 ( 0,13 )

**

0,03й!£,00ь о,ос ( 0,10 ) | 0,03 )

щтг. у.е. 11,53 ± 0,05 ! ( 0,19 )

1,41 * 0,09 ( О,ЕЙ )

1,634 0,05"¡1.43 * 0,0 С 0,20 > \ ( 0,28 )

ндд.в-ох, ц,ео 4 о,оз у.е.! (0,10)

1 ^¿0,02'" ( 0,0-5 )

1,82 ± 0,Ой!1.80 ± о,С

( 0,05 ) ( ( 0,03 )

липклн, |2,26 ± 0,02 у.е.| ( 0,10 )

2,27 1 0,03 ( оде 5 1

2,31д 0,02" 14.1 :-0,0 £ * .( 0,07 ) | < 0,11 )

* - рааллчиь с контролем достоверно

- различие с контролем досгоаерко

( р < 0,05

( р < 0,01 ); п ^ 1.

защитного действий адотгыкка $тшш явжяевиА ©адераегт раз-ш-ах г.'.гссоз лейкоцитов кэ проксиодяло« На 1 -зуг-сз даоа» ззе-58йл препарата определялась отеюсительгая дкхфолвзкя за слег зглкчезкй чксаа кейтрсфиов к йонэд?тгэ, К 5 оузкзи энспортаев-а кабетда-яасъ тенденция s яессгзгэыевгез жойпоакгвряой Формула

1'ñSKO ССКреха&СЯ ОГКССИТйЛ&ЖЙ ГраиуЛОЦйХОс? СО ОДВЛГОЙ 103И Е-Л&ВО.

Как свздетеластзукз? данные,, аредставленныг з гай,;ице r¿( «а ¿соте 54фег:ха аисгяшша (2Q-S0 минут) s нейтро-

швкк rpsHyoscisíTas зс-щф^ртесьюп крови наблюдалось сяиженив «тлвкссти ДДГ, СДГ'г МЗГг ЩФ я гктивгцкя MIO, Г6СДГ» НйДФ.Н-ох. J2S3 суткк го~ле введения препарата отмэчадасъ текдегаш? ч гсстаноажсггл», а « 3 суткам происходила норкадйзацкг бодысиио-dc газсгедузкых Однако, к «зяцу наС\»од«шя остава-

5S5 soBbESísíoS аагсзисегь ШО и Г0ДГ9 возрастала, утилизация в раакцияас гекоовшоясфосфатасго шунта. 3 этот период s г-;;фгркчес:?ой кроэи лояшнмюзь большое число шых и яалочкоя-«йтрсфш», что сопровождалось росток активности »гггшдрагшш фераентоз СДР и ЩГ во есей аюпуляции щеток.

Введеянз хшзогкым ц$:стамяка сопровоэдалось не только аеме-ектгв?!?зс5й мэтаболкчзскях процессов, яо и зыраженшя» ssmpjs «окгмжзвгй йунгхт^онаг'эяото пстепШ'&ча KI'., Tat» т ла-37? редасэа^гпюго зЗфгжта иргплрата гтри стимуляции гимозаном г-зтсдарко (8<0»0i) зогр?о?г-ло ччсдо йст-йозйтиэяьх гаеток »•■ар ррапуд дкфсрмага^гз1 погадеяшх кайтрсфяйом. Таю® гову->лк» резервных зсшкжйсстей Клети: заряду л отсутствием к яоказатзлей НРТ-уеста а бааадько« варили® приводило я «с-нйс индекса отимующив в í.,35 раза (р<0.01). юссбностй яейтрофияов &цс больсе возрастала на i сутки поож--$зд«ш радиопротектора,, что проявлялось э росте телкчестза Л'-¡го&йтиеных клеток п показателя HCT з с.кмулировйниоч вариан-теста и, как следстгйе г,тог с, в максимальном увеличении иа-üíca стшугяции, более чем в 1,5 раза аревоеходкдаи исзс диай юпень (р<0,0i). К ü еуттаг ксследозаиия иайлэдасась тенденция лс/рмалкуацьм функционального пстенцилла нейтрофилъных гракуло-ST03, однако показатели стодулкровайзого варианта КСТ-fecra вое зе яргвшали как показателя контрольно;! группы» тч ' йсхсдик» шьнэ rp<o,cs;.

Слелует on-'етить, что peaiapo« ЯГ на взедееке щ«.ог0>,ю:а я ка

г»-

облучение в малой дозе характеризовались. однонаправленностью выявленных изменений показателей функцнональко-метаболического статуса клеток. Однако выраженность этих сдвигов была большей пря действия- радиопротектора. (габлида î,2>. Ирг, этом, кондиционирование HP',, возяйкахзщее е- сигнет на- изделие цисткиина, неспе-щфшпо и универсалию- и>, наряду- с- другими интегральными обдеОк ологг- есквш- процессами- (иарувепне ' проницаемости неточных мемь pau, .'tU тестзенные к- качественные изменения клеточного пула ра-дночу^хвктелый _ тканей-, повышение миграционной способное» стесдобшс. элементов костного мозга, гормональные сдвагк и т.п.), можезг рассматриваться, па- «нению В.Г.Владимирова и И.И.Красиль вихова (1994), одно из- проявлений третьей стадии в развитии к. фсршрог тни1Г- защитного aç.veraa- радиопротекторе-..

статус гранула л с.-;

fif«& uoj^ssfjpixstsimouf цкохашлоы обвдч&кж; £ кадей (0,25 Г;-.)

Оценку гематологически,1;. к. хрвдшмпзескя» гго::йзаге,;;еГ: у «к-вотша: опытней! и контроль soir групп, црэводияи до сблуч-яйа, пг 1 м- 6- сутки после радиационного- воздействии. Iwnzcœ & досс СП МГ/iîF В30Д!МСЯ' КИгОТКШ- CKUÎ'SJÎOflMîpynB.t Sic; EO'-SÛ- ДС .'./■i'.vo-

го- воздействия.. Яивогнш. конхрэ5ы:оЛ rpjmnir в- те :»о s-.v

днлея фиштох!йчес;ааг- раствор-», после чего- о*--.: кедеергалко лсл-пому обдучешао- код; аппаратом- 1?Уг.М7 с- таяеэадяйой- т^ч'.-

кой'.

Защитил"! эфНит цястздикс щж. острой- в дозе 0,'-'

Гр проявлялся n стаЗнлгаацг.:! cir го- лс-вкс.ц тчлз,. сбголли'А'--

го голкчасгва ^оакпоЪллон, ломлцлгл., л л-.^оц.-тс::"

в i£or«i,v.r itpoei? КйрЁКТо^всэваг:'.,:* iv-**---..t.iv, :. еннаеюяо огножгашюп? содо^йтш лл-.;-оц;:усу ь.-сг^ч.л.олон.... не&грофплезо:.:, коториг на5ледаи:с.. ло ¿ог с*;х.»;> t-rcsci-u:,.".;,«: :;еслл глодиглздровапкого ойг/чзакл в ;ллл>.; СО-.2Ь Г.гЛ

дозо. "эзтойершг; лелг-з.п'^ркол ç ;р;.у//;

с коитояеу пли- ;:.■«,nrsf гглвл-^.о г.з лил--.

доге 0,25 Гр пр^водглэ saii-v; к етлил.;лл-.:: ï.d ¡ифекгерлоткк ИГ,. Ерльл.гяс-Г-с.т и с.vay'iCïii;лл-рлл.л !!•.:>. члезза» .-ле.} ерллпе::;-": с ¡::л;тьо'

(ггбгипг. И). L* ¡;г.-г:-м, ¿1.ш?зл;,;й Wi.-ч-л-:--'. ->.'0 пг^.-л--:.-." !-F ii услоппл); :.!:;:,..: .. .л; ,..

Tc&suna 3.

М^хаболгчэскин с-ravyc Еейгрсфяяьвь>у. грану.чкзпоя '.»'тснто.ги и

! пахичиоьгх'лу. ¡ пигазатадл

! Л Я Г. у.с

I С Л Г, у. t. i

h----—---------

! M Л Г,, у•'"'■■

; !• П Ü, у.

! "î

i бv...

1 Г^'Л!1. У.с.

i г-';л\ v.o. í

í.................-

! !!/,:{.Я--.-:.

лпяйг:*,

из i-ояс «яг'яи шот&\:;н,*ем в ,-.ot>o 0.55 Гр

сроки нсследоезния

по сЗлучеп'ш

—Î

П0СЛ0 ('f5;rv4?i::í!;

! :¡. c/ïi'.it ! D сутки i

¡S,05 0,05 Í 1.ПЗ ¿ 0,Ou ! Й.О4 i 0,0: ¡ ( 0,15 ; i ( 0,15 ) ! ( O.iK i !

í ,77 ± 0.00 ! 1.72 ï 0,03 ¡ :,Vi - O.í. ■ j

i ojn ) i í o,íi?, ) ! ?; 0,01 ) i

1,94 i 0.0': I l.-'.-.i ; ГУ.СЗ ' ü.CR I

{ 0,0'.: ; ; o.-.yj ) i Í о.-ъ :

o.in i i о.:;; ;

V

i ,rf! -■• r..c? ; i,--"- i f.\K ' > i '.:/ ; o.:-/; / , ( - ; ; o,-;; ;

o,»/ - î у : • jy (•>,..::;

( П.С"* ) ! ; •".:■.. '.) ) : :

П.СЗ i C.io ; i, "¡ ■ O, : I • ^Vi i

УУ- ",i¡3 ¡

■ !Í,C:í ; Í.. ■ o.c-'

.': o.o? ; - 1 o,; ■ j

( o,:y;-> ¡: : ! i

; . n,i.Vj i

i. ¿ í),f'~

( C'.j; n.r,v ) i { од.} ) i

; : ¿ ysü i •: 0,03 : ■:■,'> o,o~> i

{ O"7 ; : í ■■,<7.1 ) • ' V 0,10 5 í

•■iv - DÍ ."':vo •■..*; ' p < 0,0! ;; •• !0.

- н -

лей довк облучения была более шракека, чек злотом радкацк-оакоя воздействуй? гага введений редкояротегсссра вкгевкааг Ефшех, 3 » усяовиах ка фоке практически гсянсгс стсутетз»:* сдвагоз» зьаалаешх в базаяьньве условиях НСТ-тесз?&, резко гозрзатаяа зе~ личина фагоцитарного ргзерза каэток ври стимуляций кззезгвем. Гас ка первые суткя после модкфкзщюагзкого облг^ггш чкедо неетрофилов. йассгзназлизаздгх кктрате?рззагле£кй сйкй& при ек-тизациё липопогч»сох£ф;щои, увеяггоазаоо з ЗД8 ргв&„ & га. 5 суте? гтот показа?ель- псчз?к а 1,5 раза й£©вхкодйд дглкыэ кокт-рсм»я. При это« огаечалса к? только рсс^т «\слг, кшдагрэгетж кдето«., ко и увсличение разаера д^ергжзекозыя згеичевкй, вэгдо-цзнных не&троф;;лом, что отрглг-лось г дозтозернэ Золзэ значениях показателя НС? ко сргБК&ш» с контроле:,; как гэрзые (р<0,01Ь тек « ка 5 сутка аооле .»г^эдровгнзого рафгзе^озкзге •воздействия (р<0,05). Н&ташальккй уроззль фагецйтарлего р-гаеува кейтрофккма« гракухоютез стыгчзлсз через сугки пезз© ээвйзйо-твкя; в зго» период индекс оижулздга кейтрофклоз з ожггЕсй грубое е 1,6 раза гзрогушзл показглглг козкролл (р<0001}, этой, васс;«ё показатели функционального ко~ек?д>;ела вдагге«-гиг яри колкфки;;ро££Нйс;.; «котамшюа сбаучезвя £ ¿:алол дог о, йогу? свидетедьстзоваа», пс шези» МЛ-^Ьрогогой с согвтарачз (1294). о аыачйтелаион вклада радкояротекаора а секраззкк* & аормагшваюс процессе фагоцитоза.

4.,. свсхтлзккэ сра а&г/квят

з ггирехем ягз.

для оцекз* состсззкя КГ в шит пэряферггчбекой креэк крас:, е&г/чеканх £ ^штоке доз о? 0.25 Гр ко 8,00 Гр» о покоз&я ай-эхиойтеекку иетодоБ прогсдилось иктредэзеззяряого со-

дериашге катеониых беллоз я лзшэдоз, Обожгдозааав йкьсишк ош-зр* ной к койтро-гько4 групп Броаодклось до облучения, кг 1, 5 к 30 сутет после рздшцкэнкого везде йстз/ш,

Б результате вроведвялых исследований усявжждвго, что лучевое хоздействке з диапазоне от 0»25 Гр до 4.С0'Гр пз зьшааяо гибели экспериментальный кквотньм. Прк облучения з до&е 3,00 Гр летав&кссть •составила 44,4% .. а при 8,00 Гр - 5.001. средняя продолзштельгюсть хдокк погибших юзотнкч - 20,2 "к 14,6 суток соответственно. ...

Кек свадетельствуэт дгшные, предстазленные.в таблице 4, об-

- í.5 -

Таблица А.

Ooj&'pzsswâ ут-т.:стгл óe-л:.'оз л нейч^-гаьа®: гранулошят i/:7s;í-rrrti;* ойку^кнх в згоскг?! доа крьо.

срз:с: :1ССл<г:;озайнг

i кссс f-----—

i СОЛy-'ÜKK';, ! "О

I ïp ! c5.rf::sr:

r.OJ.K ссечен:::;

i сутк:1

: ;0,8g ¿ 0,0310,83 ¿ о, од

: ( 0,0? ) i Г 0,12 )

0.20 10,62 S 0»0',iÖ,Pi? 2 0,Ой \ i 0,16 ) i С O.rr j

■j оуккт ! so cyî'îîf

0.9< O.OÍjO.G? ± .j,or-<: : G,CG i ¡ • f\Oí i ;

"..•iOtO.Oi"'' i:, 12^0,05" ( OJG i ! í 0,15 i ■

0,50 10/'! C.ODIO.ÎD. - O.Oo'l/'^o.O""/!

i ■ o.?/ ) ; ( o.cr ) ; ( o.iij ! ( c;í:o •

1.G0 ¡0,SS i 0,05! G,O? Ji 0,0310,sai 0,Q.-* ií„Í3¿i'\0';"" : ' 0,14 î í ( 0,10 j ! ( o,is ¡ î ( o.ov

i 2,00 i 0,80 i 0,0211.023 0,04"|c,04 i 0,02! 1, ís±0,0: ! i с 0,05 l i ( 0,12 ) ¡ i 0,0/ ) ; ( о.гс

4.СО ¡0,0". i 0,0210,93 i 0,0010,27 = 0,021 aj3iO.C3' ; с 0,05 -, j • ( D.09 ) I • 0,05 ) i ( 0.20 1

■4-

C\QU 10,6? ± 0.03|ltCSi ü,03" 10.99 * 0,02ll,24íC.C'¿",!: i f 0,09 ) ! . ( 0.-03 } ! ( 0,07 ) ! ( o,ps ) ¡

e.oo [0,20 ¿ 0,03jD,S9- ü:02/ ! í c,03 ) ! ( 0,00 ) i

!

* - различие с контролем достоверно ( р < 0,05 ), -«-л - различна с контроле« достоверно ( р < 0,01 п « 3.

дучеюк» в ыаадх дозах (0,25 и 0,50 Гр) соорожздашсь тенденцией к нарастание количества кзгионвых белков в НГ, достигавшей к 5 суткам значений, достоверно (р<0,01) отдичавшнхоя от контооля. Радиационное воздействие в диапазоне сублетаяьиых (1,00; '¿.,00 и 4,00 Г" ) н леташш (6,00 и 8,00 Гр) такхе вызывало повышение уровня »реформированных бноцкдкьк субстанций в клетке, более blí-рэвсеииое, однако, на 1 сутгл после облучения. К. концу наблюдения (SO сутки) внутриклеточное солорлан'ло катионннх белков во всех группах было мексакадышм, доетоь-фьо (р<0,01) отличаясь как от показателей контроля, так н от исходных данных.

Кожкчество лкпя^оз л гаетке тгтс<;е изменялось а зависимости от л'* yj облучекяа и сроков исследования (.таблица 5). Так, на 1 сутки после радиационного воздействия в доза; от 0,25 до 2,00 Гр содержание лдагидоз имело тенденция к нэрасташ», достигая ксмси-калькж шшиешй при облучении в' дсаах 1,00 Гр (р<0,01) и 2,00 Гр (р<0,05). При дальнейшей увеличекии доеы количество липкдов в клетке спивалось и при дове 0,00 Гр составляло лио> 85% от уровня контроля (р<0,05). Еце более тиракенное уменьшение числа ли-пидо'з определялось на Б сутнл после лучевого воздействия, когда во ссех опытных группах зтог вонаоатель был достоверно ниже ка; контрольных шлр,, таи и неходких данных. К 20 суткаа у гашотшх, подвергнутых лучевому вовдейстккж б диапазоне шлык ¡г сублетаиь-шдх доз, содержание аннидов иориашювааоса», а у вшивших после облучения в полудетаяьной дозе животных авблидалась тенденция к Еосстедовлевио этого показателя.

Профилактическое применение цистаьгииа для модификации биологических 5ф1;о;стов ойлученш приводило к снижеяко пострадиационной летадыюстк экспериментальных даотиых. Так, при кодкфици-роаакном радиовротектс po;,í облучении в дозах от 8,25 Гр до 6,00 Гр при 20 суточной наблюдении гибели давотшдх не отмечалось. При радиационной воздействия з дозе в,00 Гр введение цистаынна приводило ]•; скихенпя детальности до 22% и увеличению средней г.ро-доляительности низки штивок животных до 21,5 суток.

•>, Радиогфоте.чтор скааьшем защитное действие и на показатели Функвювально-метабодичосхого статуса НГ. Так, кратковременное достоверное (р<0,05) у. здичение числа катконнкх белков в ранние срони после модофнцировгшюго лучевого поражения отмечалось ликь на 1 суя® после оЗлучекпл в дозе 6,00 Гр. К 50 суткам набаодаг-сл статистически сначяиыз! рост уровня каткошшх белхсв в НГ, что

Таблица 5.

Содержание липидоз э нейтро$илькых гракулоцчтах интакткых и облученных в широком диапазоне доз крыс.

1

| . сроки исследования доза [--1--

облучения, | до ! после облучения 1

Гр ! облучения !--1-----т------!

I | 1 сутки ! 5 сутки | 30 сутки |

---г----1----г------1

контроль ¡2,24 £ 0,03¡2,23 = 0,С4|2,25 ± 0,04)2,22 ± 0,05| | ( 0,09 } ! ( 0,12 ) | ( 0,11 ) ' ( 0,15 ) ■

---1-:-1----л----(.----1

0,25 12,19 ± 0,0312,22 ± 0,СЗ|2,£8 ± 0,04|2,21 .+ 0,03| I ( 0,09 ) | ( 0,09 ) Г ( 0,11 ) ! < 0,08 ) !

О,¡30 ¡2,24 ± 0,0142,30 ± 0,0511.93* 0.07*12,11 ± 0,071 | ( 0,16 ) I ( 0,15 ) | ( 0,21 ) | ( 0,16 ) I

---,---.---г----!-------(

1,00 |2,18 ± 0,0712,43±0,05")!!1,£3±0,05'<,,!;2>14 ± 0,04!

| ( 0,21 ) | С 0,15 } 1 ( 0,15 ) | ( 0,10 ) !' ----1---1---1----1-г---I

2,00 12,30 ± 0,05 41* 0,03" 11,971 0,0ЭИ|2.£2 ± 0.03!

| ( 0,14 ) | ( 0,25 ) | ( 0,08 ) 1 ( 0,18 ) !

---—,-----,-------,--г-------1

4,00 12,31 ± 0,081.2,23 ± 0,Ш{1182±0,05',,Ч£:,04± 0,08;';

| ( 0,23 ) I ( 0,15 ) 1 ( 0,15 ) | ( 0,15 ) | -1--(--.1---1-----!

6,00 ¡2,25 ± 0.1Ц2.21 ± 0,05|1,85ад,05"ч|2,02± 0,1,3*1 | ( 0,32 } | ( 0,15 ) | ( 0.16 ) | ( 0,18 ) !

------1----}---;--—г------1

8,Г) ¡2,13 * 0,03)1,011 0,С*! I 1

| | ( 0,28 ) | ( 0,21 ) | I I

л - различие с контролем достоверно < р < 0,05 },

** - различие с контролем достоверно ( р < '0,01 ); п » 9.

- 1S -

сопровождалось появлением в периферической крови яаяочкоядерньи и юных форм клеток о макскьзлькой окраской прочным з&деньм. Количество лкпвдов з клетке через.сутки после лучевого поражения на фон? Еаздаты циста\сжом возрастало, достигая максимальных значений рок облучен»: в дозе о,ОС Гр. У&з к 5 суткам после модифицированного радиационного воздействия оти&чалась тендзкция к восстановлению данного . показателя, а на 80 сутки происходила нормализация внутриклеточного метаОолияма жиров.

Таким обраеом, полученные на\а регультаты свхдетадьстзувт о высокой устойчивости организма к'облучению в условиях модификации, что проявлялось«и в стабилизации ксрфзбиохищгаеских характеристик НГ. С другой сторона, адаптивная направленность изменений функциспаяько-метаболтческого станса 1С при введении циста-мльа, как к сохранение постоянства состояния нейтрсфилов в условиях модифицированного радиационного зсздейстзия, могут свидетельствовать об участии этих клеток в формировании к. реализации зацктных эффектов радиопротекторов 'СЛукаиин'В-П.' и др., 1034).

Необходимо заметить, что игыенезта среднего .цкгохщщео.щио коэффициента содержания каиювннх бедиов -я- дипндов в .Щ* ¡©дай, на радиационное воздействие происходи.^ 'sa сче,? кия в периферической tpcm .вдадрк

субстанций. При проведениистатастдеч^йкоД ..обработки полуцеякых результатов били выявлены вначише '. хэрродац»:оиаие связи. между дозой обгучеи.чя'и числом. Щ\ сэдедзедр джред ценный уровень ка-< тионных белков, и лютидоа, ' что позволяет рекоадпдовзгь цгаохюга-ческхе характеристики фагоцитов в .качестве исходных данных дяч реконструкции поглощенной дозу и рропювщрвшця дохода лучевого поражения. '..."•■'.'....''•,"- ' ■

5. Устсйчздазсхь продзаригельш сблучешцх в иалой <0,25 Гр) «озс жвехиых к »кстраиальнзи возд&ймзкта! факторов радкацишшей к гяаической пркроди.

На 1, Б и Ю сутки после острого облучения в дезе 0,25 Гр экспериментальных животных подвергали.рздиадионнЬму воздействию в диапазоне доз от 4,00 до Ю,00 Гр, статической затравке ЛК50 и ЛКбо диоксида азота илп я~тра. В качестве критерия »юдафтвдру»-ш.?го эффекта малой (0,25 Гр) дози ионизирующего, излучения- ис-. пользовался фактор изменения дозы (ФЩ), : 'рассчитываемый как от- ' псиение доз,, в^зывазщях гибель -60%. облученных животных (ЛЕзо/зо^

- 19 -

в опытной и контрольной группах.

В результате проведена исследований установлено, что на 1 сутки после облучения с дозе 0,25 Гр не откечалссг изменении устойчивости экспериментальных животных :: повторному рапианконном/ воздействию или токсически.; эф^гктал пульхенотаетканто^.

Лучевое воздействие з доее 4,00 Гр на 5 суткк после поедва-рителвнсгс облучении в малой дссе приводила к росту летальности к укеньвешо средней продолжительности жканк погибших яквогахх*, что приводило к .снжеяш рабаткой мявшажаой летальной лезь1 (ЛДаб/зо) з 1,38 раза по сравнения о контролем. Е то ;*.е ыземл наблюдалось увеличение ваишаемссти к рост средней нродох ностк яизни при облучении «квотных огштяой группы в догах 5,00 -8,00 Гр и более поздняя г:йель предварительно облученных з «атей дозе-'крыс гтссло радиационного воадойстки с абсолютно смертельной дозе (10,00 Гр). При этом с 1,8 раза шг-^асгала расчете.-« микчмальнал гбсоготяо сязртельнгл доза (ЛДз4/зо). а --- ;,-':?.

Кегиачателыюе уменьшение легальности хиостких саюяоб группы яра ватравке ЛКцс дксксяяз агота ¡га Б сутки йссгс радк«-циокяой нагрузки сспрсвокадлос:; тенденцией »; аойлпеяк» ¿/Щ дс 1,04. Предварительно* облучение прпвоягло ?а.<«е- к подозекко. :: 1,1. раза пс сравнению с контроле:,: расчетной митнгмальной смертельной концентрации (Ж1е) пулкспотажикавта (г> < 0,05).

Дсстозерящ различий устойчивости :.н?аитних и нрэдваритель-но облученных в к&той (0-.25 Гр) дозе крш к токсическому зффгкту хлора на 5.суй« весле радкацшяшого воздействия не выявлено.

Радиационная травка, нанесенная па Ю- сутки'после предвари-тельного облучения в ¡,¿¡¡9 0,25 Гр, • сопрозб^злайь • укеньиенпем лотагьяоеги и ростом ' опытных групп,

лем з 1,35 раза раэтёткой маншззызей летальной дс2ы (.Щ^Нс) •» в' 1,05 рада расчетной иивикалыюй еЯсозхпио смертельной (ЛД54/зо).При атом ШЯ состав!« 1,10.

Пр.. затравке. ?ч?нс.диоксидом азота на 10 сутки после прел-* в&рителввого облуч'етия отмечалась более поздняя гкбехь йзбсткьж-'-опытной групп! по оргшиех?» с контролем. В. зтих 'условия/. считалась детальность сблу^е.;:«« кокс кэк' аегге воздействия ЛК;;о пулыюко1-«!сил£Вта,' так и,.'особенно, после ттргвга » иглпзть-

•лсй абслнотпс детзльчо'г ьх>пцз!п'р8*лп?.'- "Пр:? -г.-гом рас^-тй«* л.<<х1 » спн ней группе з 1,28 раз кресшало а::слс-;г ..:'й кжгчгсх- кон--

роля (р < 0,01). При предварительном облучении животных в г.:алоз1. дове отмечалось снижение расчетной минимальной смертельной концентрации Шгб) до 69% от уровня контроля (р < 0,05). В целой, модифицирующий эффект малой дозы на 10 сутки после облучения проявиться в тенденции к увеличению устойчивости крыс к ток,си чеокому действий диоксида азота (ФИД = 1,08).

Повьагение выживаемости экспериментальных животных отмечеи также при затравке ЛК50 хдорз на 10 сутки после предшествующей-облучения з дозе 0,25 Рр. При атом ¿ЯД составил 1,07 , а расчет-нал минимальная детальная концентрация хлора для опытной групдь в 1,14 раза превьшзла^локагатели контроля (р < 0,05),

ВЫВОДЫ

1. Через сутки после острохр облучения крыс в дозе 0,25 Г: в иейтрсфкдьных гранулоцктах отмечается преходящее снижение активности ЛД\ СДГ, МДГ, !ДФ, Г6ФДГ, НАД$.Н~ох и уменьшение содер жанкя катиоинык белков. Рост абсолютного количества нейтрофию; в периферической крови на 5 сутки после радиационного воздействия сопровождается усилением в них пооцессов знергообеспечещ;;. и утилизации глюкоза в реакциях гексозомокофосфатного иуагё. Несмотря на фааовыз изменения метаболизма ¡слеток, функциональна потенциал нейтрсфидьных грану ловдгоэ, оцененный в НОТ--тесте, активность кислородзависимой ШО-систеш в ранние срстш посд*-острого облучения в дозе 0,25 Гр достоверно прокапают шлсазате,*;; контроля.

2. На высоте родиозаэдтного аффекта цистамина (20-30 минут-) в нейтрофильных гранулоцитах периферической крови наблюдаете^ снижение активности ЛДГ, СДГ/ г,{ЦТ, ЩФ, . активация МШ, Г6ФДГ, НАДФ. Н-ох у. рост фушац экапьного потенциала фагоцитов, оцепенно* го в НСТ-тесте. Через сутки после введения препарата отвечаете;! тенденция к восстаноадению, а и 5 суткам происходит нормааиаеци§ исследуемых показателей.

3. Реа1оди нейтрофидьных грануяоцитов на облучение е малой дове и на введение радиопротектора характеризуются неспециф:и-нестьв и однонааразлзнностью изменений показателей функционально-метаболического статус а. ...

•1. Профилактическое введение цистамина при остром облучении в лове 0,25 Тр приводит-к стабилизации морфобиохимическж каран-' теркстик нейтрофильню? граиулецигоа, - пооякдяяяейся ь отсутствии

с

достоверных изменений показателей метаболизма кветок по сравнении с контролем. В то же время, ектйващаз йуикщючелького nove;;-циана иейтрсфйвыок гргнулоцитсв s условиях ущя&жяуяг ном биологические эффектов малой дозы об.дучен;:л более въ;ргжеиг, чем при чистом рздиацйоаяок воздействии или Екедекки радиояоз-теэтора лнтгктиым крысам.

5« Острое облучение в летальных дозач (6,00 -у. 2,00 Го) чрк-водлт к деактивации яейтрофяльннх грезулопатоз, дфоявхявцейся снижении содержания катонных Селгеов л -гипидов s ранние (1 П сутки) срока после радиационного яоздекотзин дли'"олъке;.; .чссо-танозленкк srir.Y показателей у аччжгк.ч отеле лучевого .ас jímíothbk,

6, Моди£кгкруший г^зкг острота еблучепия р цоэе fp проявляется в увеличении на 5 и 10 с*.тк-; усто:'Р;ивсстх я?$орж>р-н"х гзвохтле к повторному радиационному воздейств»-, и те.-леишк: к пезылекил резгсгектасстя гредагрпт^ьна í.

39 ионе к 'гс:-:с:жсж< а^гвктам д:юкс::ла ascv г» к

1. Вуослгп ш$ормг?жшоссь, прссто'.'й з ::0~у.2>;0йке рраг.гг;, быстрота. получения результат ^■мекдолл:«

чееккэ ьлюлы кссдедошгяа кроз^ длк о-схо-

клеточйсго звеьа системь: иссгеим^^ос^сй сп

ганиз^а. 1>1:~ хестег; -.спгсяочло ^.л;<сгс •

та, ке требуетсл дополнительной олсл1::а.\ь;гоЛ псдгг'Т0ь:-31 кого персонзиа. Малое количество кселедуомс:"; 100

на весь спектр цктохижческ!» него,-':«) «о гребуег яенегзу.ч:;::;^ »: позволяет проязеодать вяЗс? юстериздй одноерэыенпо со »экг:**4: общеклинлче-сьхго ёиалхса ¡еров::, Волх-ашеуго врезд&геегка ко» тодсв не требует спецкальксго сборудсзангл " ж'з? легко воскро-тгаводйтьс:г в В5»кш»-дяап10сгп'хсс15<н лоборзхорлпк.

2. Морфологической основой устсйчтоости слс-уег'ы кеспздлЗ. > омской резистентно зги к дейстзяа гкетрема^аых -Авторов рэдкгяи-

окноА пркроди является ¿уждакшлмка иесдяороднссть яегсу.тгала кейтрофклылй грзнулощтоз периферической крови, что позггаяе? рекомендовать цйгояхашсскяе характеристики фагсцитсв з ка-;ест£с исходных данных для реконструкции 'поглощенной дозы и прогнозирования исхода лучевого порахеккя.

; СПИСОК Wuàïl 6©Б&2Ш/ШИЖ ПО ХЕКЕ ДЙЙЕРТАЦЗШ

1. Значены дагосомзлъно-кйтионкого геста да оценки радиорезистентности нейтрсфияов /7 Биохимия - медицине :Тез. докл. нгуч. козф. Я., ■ 1988 .- С. 178. (созвт. Смирнов H.à,, Поддуб-CIOSÄ Г.А., Севрукй.А.). . • '

2. 2унюжона.Ш1о-метаболический статус кейтрсфилък.чх лешсо-цитов при облучении в иедых дозах.// 1 Бсесоаз. радкобкол. сгезд :Тез. докл. Т.Б M..10S9 СЛ159-1160. (соавт. Сшрнов H.A.).

3. Значение оценки функ^он^но-ыэтЕбодического состояния кейтрофилов человека м аквогных дм характеристики влияния малых доз ионизируют« излучений // ает/Екый статус человека к радиация : Тез. дзкд. Всесоюз. -игуч. конф...- М., 1991 .- С.81. (соавт. Смирнов H.A.).

4. Состошге клеточного звзяа системы неспецифической резистентности яри действии низко1штексйв:ш факторов радиационной природы // Актуальные проблемы инфекционной патологии :Сб. докл., кауч.-лрач?. копф. Г.З.- Л., 1993 С.20.(соавт. Смирнов H.A.).

5. Епоцвдность нейтрофилышк траиулоцятсэ при действии цкс-?а.\<лна я np;i сблучеики в малой дозе // Радиобиологический съезд : Тез. ДОКХ ТЛ .- Пувдо, 103-3 С.244-245.

<з. Применение 1#г.охимяческих методов исследования крови на этапах кздкцинской эвакуации // Совреыеянwe медицинские технологии s совзрзенствозании дечебно-евакуахсйонкого обеспечения войск :Тез. докл. кь/ч. гокф. .- О.Ш., 1993 С.21. ■ -

7. Течение икфзкцкоктого процесса вирусной этиологии у облученных яивоанах // Итоговая кауч.- конф. слушателей 1 факультета ВМедА: Tea. до.-u.- С.ГО. ,1S94' .- C.V7. (соазт. Оаиаенко Л.Н.).

8, Исследование нейтрофкдьккх грдаулоцитов периферической крови при действий . экстремальных факторов внесшей среды // KKKVII кснф. студентов и аспирантов морфологических кафедп и да-Сорзторш'! С.Пб. вузов и НИИ: Tee. докл. С.Пб., 1994 С.21-22. (соавт. Ромакенко О.Й.,'Парамонова Н.М.).

3. Бкохк&меск^е кехахвгзкы адаптации кейтрс^кла к действию калих доз Брнизируэдях -излучений // ' бкадого-йкзиодогкческие проблемы аданедпи: л- Tee. дока. V Всероо. -симпозиума (с участием стрвк diD) M.» ISC» С, 148., Смирнов H.A.). Л

'10.'Энергетика нейтрсфила..;пря облучении в малой ' дозе .// X кодфг по кэсиическсй .биологии и авиь«смической медицине-. Тез.! дсклГ,.-.М, , '1994 Ç.£â?-283. (соазт.-'Скараоъ H.A.).",

11. Некоторый гематолсг/Исс:®е показатели при остром и хроническом облучении низкой интенсивности // X пс космической биологии и азиахосггееской медицине: Тез. дохл. ■ - М., 1904

С.277-278. (соазт! Онвденко А.II.).

12. Динйиккс цитохимических показателей,- кейтрофилов крови при облучения в малой дозе • // Морской мод. г. .- 1994 .- Т.2, >->' 2-3 .- С.28-23. (соавт. Сурков H.A.).

13. Реагкишность яейтрофялоз в усдозкях модифицированного зучевого поражения // Актугльнке вопросы обдей и корабельной гоксикологки: Матер, науч.-лракт. г.опф. . - С.Пб., 7534 .- 0.03. (ссавт. Смирнов H.A.).

14. Резистентность предварительно селучен"чх яивотккх п гоксилосжл^у действ!» диоксида с-гота // Актуальные sc,ipocu общей ч корабельной тс-ксжолсгаи: Натер, кауч.-практ. иоиф. .-С.Ш., [Г94 .- С. 133-134. (созвг. Пресбратенс;'^:-: Т.Н.). .

15. О роли нейтрофилов в реализации з&тнгн^х эффектов р?,чк-)протекторог // Актуальные' проблема разработки медицине«:«:? ;редстз к методов сохранения и восстаясвлеапл боесасссбнсот;: ¡ючкего состава Всорукенних Сил: ' Тез. дач*. науч. конф. 335.,1994 .-- С.25-26. (соавт. Лукавнн Б.П., Смирнов H.A.).

15. Содержание липндоз в иейтрсфш>нь/. гргнулоцптах перифе-«ческой кр»/зи при действии на сргааисм еистремазьЕйч факторов »адиэциопкой природы ,'/ Ахтуглькие вопросы военно-морской гигие-:ы, то1ссико£'згки» радиологии: Тез. докл. науч. конф. .- ОЗникск, 994 .- С.91-52.

17. Влияние малых доз ис-нпзнруюцих излучений на фуккцио-!зльйо-метаболическии стагус кеитрофилоз // Ачгу-зл ня-и вопроса оенко- морской гигкеяы,. тохеикшкгин, радиологии: Теь. докл. ка-Ч. конф. .- 05Н1ЖСК, 1994 .- С.61-92. (соавт. См::р»оз H.A.).

IS. Peripheral blood neutrophils states after the cystamin ¿ministration // 26th Meeting of the European, Society for adtatim Biology end European Society for Hyperthermic tocology Abstracts Ansterdan, iGSd P.КО. («ith Snirnov ¡i.A.).

19. Snail doses of radiation and neutrophil // 20th Meeting f the European. Society for Radiation Biology aid European ociety for Hyperthermic Oncology. Abstracts Amsterdaa, 1994 - P.2S9. (with Smimov -¡.A.).

20. lh& influence of the organism basic status on small doses cf the ionizing radiation effects // 2th International Conference "Radiobiological Consequences of Nuclear Accidents": Abstracts, Part II.- Mo.sco»,i9S4 P.257. (with Prokopchuk B.I., Smirnov N.A.). ,

21. Resistance-of X-rayed in small doss animals to extreme environmental factors :action // 2th International Conference "Radiobiological Consequences of Nuclear Accidents": Abstracts, Part II.- Moscow,1994 F.212. (with Preobraznenskaya T.K., Onischenko A.N.).

22. Prodaction of the oxy radicals by neutrophils as the «ay of forming the body resistance // XXXV1 Symposium of the Society for Histochemistry "Oxy Radicals. The role of reactive txygen species including JiO in health sciences and thier histo-and cytcchemical detection"; Abstracts Heidelberg, 1994

P. US. (with Smirnov N. A.). r

23. Role of histochemical methods in the estimation of cell factors of the ha..eostatical regulation // Internat, Symposium "Progress in ' Basis, Applied and Diagnostic Histochemistry"; Abstracts Olomouc, 1994 .-P.S6. (»ith Smirnov N. A.).

24. The some' Mechanisms of antiinfectlonal defence status in the X-rayed animals // 7th European Congress of Clinical Microbiology and Infectious Diseases: Abstracts Vienna, 1995

P.97. (with Smirnov K.A., Onischenko A.N.).,

25. '-he neutrophils status after irradiation in seal 1 dose modificated by cystsinin // Rontgen Centenary Congress end Historical Exhibition: Abstracts .- Birmingham, 1S95 .- P. 153. (viith Smirnov N.A.).

26. The status of cell components oi the nonspecific resistance system after X-ray action // Rontgen Centenary Congress and Historical Exhibition: Abstracts .- Birmingham, i««5 P.154. (with Smirnov N.A.).