Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Функциональная морфология апудоцитов желудка и двенадцатиперстной кишки при воздействии ионизирующей радиации

ВАК РФ 03.00.01, Радиобиология

Автореферат диссертации по теме "Функциональная морфология апудоцитов желудка и двенадцатиперстной кишки при воздействии ионизирующей радиации"

РОССИЙСКАЯ АКАДЕМИЯ МЕДИЦИНСКИХ НАУК

НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ МЕДИЦИНСКОЙ РАДИОЛОГИИ

На правах рукописи

УЛИТИНА Елене Дмитриевна

ФУНКЦИОНАЛЬНАЯ ЮРФОЛОГИЯ АПУДШИТОВ ЖЕЛУДКА И ДВЕНАДЦАТИПЕРСТНОЙ КИШКИ ПРИ ВОЗДЕЙСТВИИ ИОНИЗИРУШЕЙ РАДИАЦИИ

03 OO.OI. - радиобиология U.00.I5. патологическая анатомия

Автореферат диссертации на соисканий ученой степени квндидита мпдицицских' наук

Обнинск - 1992

Работа выполнена в Научно-исследовательском институте медицинской радиологии Российской Академии медицинских наук.

Научные руководители: доктор медицинских наук, профессор А.Г. Коноплянников доктор медицинских наук, профессор И.к. Кветной.

Официальные оппоненты: доктор медицинских наук, профессор Н.Т. Райхлин доктор биологических наук, профессор Н.И. Рябченко.

Ведуиая организация - Ордена Ленина Институт биофизики

Министерства здравоохранения России.

Завита состоится / 1992 года

в Ц часов на заседании специализированного Совета Д 001.II.01. в Научно-исследовательском институте медицинской радиологии Российской Академии наук (249020, г. Обнинск, Калужской обл., ул. Королева, 4).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Научно-исследовательского института медицинской радиологии по адресу: г. Обнинск, Калужской обл., ул. Королева, 4.

Автореферат разослан ¿-¿У/ъ-А^ 1992 г°Да

Ученый секретарь

специализированного совета докт. мед. наук

В.А. Куликов.

• -----1 ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

<

• !

АКТУАЛЬНОСТЬ ПРОБЛЕМЫ. В последние десятилетия значительно возросла вероятность воздействия ионизирующей радиации на человека. После открытия радиоактивных веществ, они широко применяются в различных отраслях промышленности и для научных исследований. Аварии на предприятии "Маяк" и ЧАЭС привели к заражению радионуклидами обширных территорий, на которых проживает несколько миллионов человек. Предварительные результаты диспансерного наблюдения за населением районов,•пострадавших от указанных аварий, свидетельствуют о(5 общем росте заболеваемости, в том числе связанной с патологией желудочно-кишечного тракта и эндокринной системы. Так, у детей и подростков с инкорпорацией радиоцезия в 1,5-2 раза чаде диагностируются хронические гастриты и гастро-дуодениты (Астахова Л.Н. 1591). Все это вызывает необходимость всестороннего экспериментального исследования реакций организма на облучение.

Особое внимание привлекает изучение структурно-функциональной организации регулирующих систем организма в патологических условиях. Важным достижением современной науки является формирование концепции диффузной эндокринной системы (АРТО-систе-мы), интегрирующей местные адаптационные процессы в органах и тканях (Реагие А. 1969. 1977). Перспективно изучение функциональной морфологии структурных элементов диффузной эндокринной системы, расположенных в органах, подвергающихся высокой физиологической антигенной нагрузке. Одной из теких систем является диффузная эндокринная система желудочно-кишечного тракта. Ее роль в патогенезе лучевого поражения желудка и двенадцатиперстной кишки исследована недостаточно.

Морфология эндокринных клеток желудочно-кишечного тракта у облученных животных детально изучена на светооптическом уровне (Талапин В.И. 1971). Ультраструктурные особенности элементов АРШ)-системн в условиях воздействия ионизирующей радиации исследованы неполно. Это ие позволяет всесторонне судить о местной гормональной регуляции процессов пострадиационной репаративной регенерации на клеточном уровне. Мало данних о динамике повреждения АР№-системы квитирующей радиацией п различные периоды лучевой болезни. Известны лиан единичные работы по эксперименталь-

ному моделированию функции клеток АР1ГО-системы биологически активными веществами, вырабатывающимися в ней (Панкратова Г.Г. 1969). Широко исследованы радиопротекторные свойства мексамина и серотонина. Мелатонин. также относящийся к группе индолилалкил-аминов и синтезирующийся в апудоцитах желудочно-кишечного тракта, практически не изучен как радиопротектор. Такое исследование особенно важно, так как мелатонин обладает широким спектром функциональной активности. Он регулирует циркадный ритм, действует как психотропное, антиметаболическое и иммуностимулирующее вещество, т.е. влияет на те функции, которые значительно страдают при лучевой болезни (Васильев С.А. 1979; Кветной И.М., Левин И.11. 1988; Нввоп1 Р. ег а1. 1985; Маев1гоп1 в. 1990). Отсутствуют теоретические и практические предпосылки для построения патогенеза и патоморфологической диагностики радиационной апудопатии и разработки методов ее функционально-морфологической коррекции. Вышеизложенное послужило основой для проведения данной работы.

ЦЕЛЬ РАБОТЫ. Исследование динамики изменений функциональной морфологии апудоцитов желудка и двенадцатиперстной кишки при воздействии ионизирующей радиации.

ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ:

- изучить особенности функциональной морфологии апудоцитов желудка и двенадцатиперстной кивки интактных мышей;

- изучить реакции апудоцитов желудка и двенадцатиперстной кивки на воздействие сублетальной дозы обоего /-облучения;

- провести сравнительный анализ состояния апудоцитов желудка и двенадцатиперстной кивки при костно-мозговой и килечной форме лучевой болезни;

- исследовать особенности функциональной морфологиии аргеитаф-финных клеток желудка и двенадцатиперстной кивки у мыаей, по-лучиьвих сублетальную и летальные дозы обяего однократного у-облучения.

- изучить динамику аргирофильных и аргентаффинных клеток желудка и двенадцатиперстной кивки мывей пря действии различных доз ионизирующей радиации на фоне завиты экспериментальных животных ыелатоншом. •

- А -

НАУЧНАЯ НОВИЗНА. Выделены основные ультраструктурные критерии, позволяющие оценивать функциональную морфологию эндокринных клеток при воздействии ионизирующей радиации. Установлено, что дальнейшее развитие внутриклеточной патологии апудоцитов определяется тяжестью повреждения внутриклеточных мембран. Исследованы особенности апудопатии при различных формах лучевого гастро-дуоденита. Изучено распределение экзогенного мелатонина в тканях. Выявлено его модифицирующее действие на радиационную апудопатию при помощи исследования количественной динамики апудоцитов. Установлена диагностическая значимость количественной оценки ЕС-клеток для определения тяжести радиационной апудопатии.

ПРАКТИЧЕСКАЯ ЦЕННОСТЬ. Результаты исследований позволяют объективно оценить степень поражающего действия ионизирующей радиации на функциональную морфологию АРШ)-системы слизистой оболочки пилоро-дуоденальной области желудочно-кишечного тракта.

Установленные этапы развития радиационной апудопатии могут быть использованы для продолжения разработки механизмов коррекции нарушений местных гомеостатических процессов.

Исследованы радиопротекторные свойства мелатонина на пул аргирофильных и аргентаффинных клеток желудка и двенадцатиперстной кишки, что может способствовать дальнейшему изучению биологически активных веществ эндокринных клеток в качестве радиомодификаторов .

С целью оптимизации отбора ' и обработки материала для злектронно-микроскопического исследования эндокринных клеток предложена модификация метода Гримелиуса на полутонких срезах. Рационализаторское предложение К 1667 от 22.12.1989 г. внедрено в НИИ медицинской радиологии.

АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ. Результаты исследований доложены на заседании отдела патофизиологии НИИ медицинской радиологии (1987 г.): на IV Всесоюзной конференции "Современные методы морфологического исследования в.теоретической и практической онкологии". (Тбилиси. 1988 г.); на межлабораторной научной конференции НИИ медицинской радиологии (1991 г.); на XIII Пленуме правления Всесоюзного общества патологоанатомов по проблеме радиационной патологии.

(Обнинск. 1991 г.). Основные научные результаты исследований представлены в разделах I.I - 1.3; 2.2 отчета лаборатории радиационной патоморфологии НИИ медицинской радиологии АМН СССР за I986-1990 годы "Мэрфологическое обоснование использования ионизирующей радиации и радионуклидных препаратов для гормональной оптимизации диагностики и лечения опухолей". % Государственной регистрации 01.86.0084876.

ПУБЛИКАЦИИ. По материалам диссертации опубликовано ? работ.

ОБЪЕМ И СТРУКТУРА ДИССЕРТАЦИИ. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, результатов собственных исследований, предствленных в 3, 4, 5 и 6 главах; обсуждения результатов и выводов. Диссертация изложена на 195 страницах машинописного текста, содержит 15 таблиц, иллюстрирована 31 рисунком. Указатель литературы содержит 381 источник, из них 16Э отечественных и 212 иностранных авторов.

НА ЗАЩИТУ ВЫНОСЯТСЯ СЛЕДУШИЕ ПОЛОЖЕНИЯ ДИССЕРТАЦИИ:

1. После воздействия ионизирующей радиации у экспериментальных животных развивается радиационная апудопатия.

2. Тяжесть радиационной апудопатии зависит от дозы облучения и периода развития лучевой болезни.

3. Нарушение функциональной морфологии эндокринных клеток APUD-системы связано с повреждением внутриклеточных мембран клеток, изменением компартментализации цитоплазмы, деструкцией эпителиальных и соединительнотканных структурных элементов слизистой оболочки пилоро-дуоденальной области желудочно-кишечного тракта.

4. По патологическим изменениям одного из типов эндокринных клеток, ЕС-клеток, можно судить о состоянии всего пула эндокринных клеток.

5. Мелатонин, секретируемый ЕС-клетками, обладает радиопротекторной способностью в отношении эндокринных клеток и эпителия пилорических желез желудка в крипт двенадцатиперстной кишки.

- 6 -

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Исследования проведены на 375 мышах-самцах (СБА х C57BL5) Ft, массой 18-20 г, содержавшихся в стандартных условиях на адекватном пищевом рационе, со свободным доступом к воде.

Влияние ионизирующей радиации на функциональную морфологию апудоцитов желудка и двенадцатиперстной кишки изучено в широком диапазоне доз облучения (5-20 Гр), вызывающих у мышей костно-моз-говую и кишечную формы острой лучевой болезни. Животных облучали тотально »-квантами *°Со на установке "Garana-Cell" при мощности дозы 2,25 Гр/мин, контрольных мышей подвергали ложному облучению (посадка в контейнер на время экспозиции).

В различные сроки после радиационного воздействия (от 3 час до 4 мес) животных зпгивэли и проводили забор участков ткани пилорического отдела желудка и двенадцатиперстной кишки. Материал фиксировали 2% глютаропым альдегидом, 10% нейтральным формалином и нейтральным раствором Буэна, заливали в парафин и смесь эпоно-вых смол. Срезы окрашивали гематоксилин-эозином, по методу ван Гиэон, аргирофильннм методом по Гримелиусу и аргентаффинным методом по Массой-Гептана, а также 0,2? раствором толуидинового синеги.

ДНК-синтозируюаме клетки метили метил-3Н,-тимидином (внутри-брилинш) за t час до забоя животного, I мкКи/г) с удельной вкгитостыо ИМ мкКи/мл. Для получения автографов использовали фотоэмульсию тина "М". Препараты проявляли стандартным амидэло-вым проявителем, докрашивали гематоксилином Майера или толуидино-вым синим.

Количество меченых эпителиоцитов подсчитывали среди 200 клеток эпителия крипт или пилорических желез в 5 срезах ткани каждого животного.

Количество эндокринных клеток в слизистой оболочке исследуемых, органов оценивали в 0,1 мм2 ткани (желудок) или в одном поперечном срезе (двенадцатиперстная кишка). Исследование ультраструктуры клеток проводили на электронном микроскопе JEM-100S.

- 7 -

Ферыакокинетику ,Н-хелатонина изучали методами тонкослойной хроматографии и радиометрии, используя сцинтилляционный счетчик БЬ-ЗО "Ше^есЬпЦив", Франция.

Статистическую обработку полученных данных проводили с использованием г-критерия Стыодента.

Схема проведенных исследований представлена в таблице I.

Таблица I

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МАТЕРИАЛА

Серии опытов Сроки взятия материала для исследования Количество животных на каждый срок Всего мыией

I 2 3 4

I серия »•-облучение 5 Гр 3 час, I, 3, 7, 21 сут. 4 мес Б 30

2 серия /-облучение Э Гр 3 час, I, 3, 7, 9 сут, 10 сут. 5 30

3 серия >--облучение 16 Гр 3 час, I и 3 сут. Б 15

4 серия /-облучение 20 Гр 3 час, I сут.' 5 10

5 серия Контроль (ложное облучение) 3 час, I, 3, 7, 9 сут, 10, 21 сут, 4 мес. 5 40

6 серия Мелатонин 20 мг/кг 3 час, I, 3, 7, 9 сут, 10, 21 сут, 4 мес. 5 40

7 серия Мелатонин + 6 Гр 3 час, I, 3, 7, 21 сут, 4 мес. 5 30

8 серия Ыэлатонин + 9 Гр 3 час, I, 3, 7, 9, 10 сут. 5 30

- 8 -

\ Продолжение

таблицы I

: I : 2 3 4 :

: 9 серия : : Мзлатонин + 16 Гр 3 час, I, 3 сут. 5 15 :

: 10 серия ¡Растворитель ♦ 5 Гр: 3 час, I, 3, 7, 21 сут 4 мес 5 30 :

: II серия : :Растворитель + 9 Гр: 3 час, I, 3, 7, 9, 10 сут 6 30 :

: 12 серия : ¡Растворитель +16 Гр: 3 час, I и 3 сут Б 15:

: 13 серия : •.Растворитель +20 Гр: 3 час, I сут Б 10 :

: 14 серия : : Мелатонин + 20 Гр: 3 час. I сут. Б 10 :

: 15 серии : : Фармакокинетика : : 'н-мелчтенина : 5, 16, 30 мин, 1,3, 6, 24 часа. Б 35 :

: 16 серия : : Гистотопография : 3Н-мелатонина : 15 мин Б Б :

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

В соответствии с поставленными задачами на первом этапе работы изучена структурно-функциональная организация апудоцитов гелудко и двенадцатиперстной кишки у интактных мышей. Установле-

но, что в слизистой оболочке «елудка этих животных аргирофильнце апудоциты, количество которых составляет 66-72 в 0,1 им2 ткани, представлены всеми типами эндокринных клеток, характерных для отряда грызунов, однако наиболее распространенными являются ЕС-, G-, D-, AL- и ECL-клетки. В двенадцатиперстной кишке из 12 основных типов вргирофильных эндокринных клеток (132 - 147 в одном поперечном срезе) чане других встречаются ЕС-, D-, G и S-клетки.

На следующем этапе работы была изучена функциональная морфология апудоцитов у мышей в различные сроки после тотального ^-облучения в дозах, вызывающих у животных костно-мозговую и кишечную формы острой лучевой болезни. Проведенные исследования показали, что степень повреждения эндокринных клеток пилоро-дуо-денальной области желудочно-кишечного тракта зависит от дозы радиации и времени, прошедшего с момента лучевого воздействия.

Так, при сублетальном облучении в дозе 5 Гр количество арги-рофильных клеток в слизистой оболочке желудка у облученных животных в первые 3 часа после воздействия не отличается от здоровых и снижается через 3 суток на 35SK. В последующие сроки (1-3 неделя) этот показатель повышается до 75% контрольного уровня и нормализуется через 4 месяца посла радиационного воздействия.

При облучении в дозе 9 Гр, вызывающей, по данным литературы, тяжелую форму костно-мозгового синдрома у мышей, характер изменения количества вргирофильных клеток через 3 часа и I сутки после облучения не отличается от вышеописанных. Различие проявляется более выраженным падением количества аргирофильных клеток, примерно в 2 раза, через 3 суток и сохранениием этого уровня вплоть до гибели животных (10 сутки). ■

Наиболее тяжелые изменения зарегистрированы при облучении в дозах 16 и 20 Гр, которые вызывают у мышей кишечную форму острой лучевой болезни. В первом случае количество аргирофильных клеток у облученных животных снижается через 3 часа после радиационного воздействия на 23%, а к моменту гибели (3 сутки) - на 48%. Во втором степень падения составляет 54% и еще более возрастает через I сутки - 68Ж.

Исследование методом световой шгероскопии эндокринных клеток галудка у мыией, облученных в дозе 5 Гр, показало, что в течение первых суток после воздействия апудоцити сохраняют типичную окраску по Гримэлиусу. В период разгара лучевой болезнии (3-7 сутки) для большинства клеток становится характерным гипохромное окрашивание и набухание цитоплазм. В этой {азе лучевой болезни в строке слизистой оболочки желудка регистрируется полнокровие сосудов и нарастание периваскулярного отека с формированием серозного экссудата, а в пилорических железах - очаговое разрушение бпзальной мембраны. В отдаленный период £3 недели - 4 месяца) тинкториалыша свойства цитоплазмы и форма клеток нормализуется, а воспалительная реакция в строме отсутствует.

По сравнению с сублвтальнвм воздействием облучение в дозе Э Гр вызывает более тягселые морфологические изменения в пилоричес-ком отделе келудка, которые, к тому ге, проявляются в более ранние сроки. Так, через 3 часа после радиационного воздействия развивается слабый субэпителиальный и периваскулярный отек, нараст-ние тяжести которого приводит, начиная с третьих суток, к отслоению базальной мембраны эпителия серозной жидкостью и тотальному отеку стромы слизистой оболочки. В терминальном периоде острой лучевой болезни (9-10 сутки) регистрируются периваскулярные кровоизлияния и происходит трансформация серозного экссудата в серозно-геморрагический.

При названной дозе у-радиации типичная окраска эндокринных клеток по методу Гримелиуса имеет место только в ранний срок после облучения (3 часа). В дальнейшем (1-10 сутки) тинкто-риальнне свойства цитоплазмы апудоцитов нарушаются, причем в терминальном периоде лучевой болезни регистрируются клетки как с гипо-, так и с гиперхромным типом окрашивания. Нарушение формы эндокринных клеток происходит через I сутки после облучения и проявляется набуханием, смораиванием и полиморфизмом.

У мышей, облученных сверхлетальными дозами у-квантов, нарушение тинкториальных свойств цитоплазмы апудоцитов развивается в течение первых часов (20 Гр) или суток (16 Гр) после воздействия. В эти сроки и вплоть до гибели животных аргнрофилия эндокринных клеток или ослабляется, или проявляется гиперхромято-

зом, в цитоплазма регистрируется грубая полиморфная зернистость, изменяется форма клеток (набухание, сморщивание, треугольные, цилиндрические и т.п.).

Лучевое воздействие в дозах 16-20 Гр вызывает существенные морфологические изменения эпителия и стромы слизистой оболочки яелудка уже в первые часы после облучения, тяжесть которых нарастает к моменту гибели животных. В частности, пикноз и вакуолизация цитоплазмы эпителиальных клеток сменяется в течение 1-2 суток отеком, мелкими очагами слущивания эпителия, его отслоением от базальной мембраны, повревдением последней. В строме слизистой оболочки - полнокровие сосудов, выраженный периваскулярный и тотальный отек, накопление серозного экссудата, который вскоре трансформируется в серозно-геморрагический и геморрагический.

Таким образом, в результате проведенных исследований установлено, что ионизирующее излучение оказывает выраженное повреждающее действие не эндокринные клетки слизистой оболочки хелудка, вызывая количественный дефицит и морфологические изменения апудоцитов. Вместе с тем необходимо отметить, что в й течение 3 суток после облучения в дозе 5 Гр, I сутки после облучения в дозе 9 Гр и 3 часов после облучения в дозах 16 и 20 Гр 'значительная часть эндокринных клеток, окрашенных по методу Гримелиуса, имеет правильную (или близкую к ней) форму, классическое базальное распределение и нормальное количество секреторных гранул. Наличие такой популяции не позволяет дать однозначное заключение о функциональной полноценности эндокринных клеток у облученных животных, в связи с чем в дополнение к световой микроскопии проведено изучение ультраструктуры апудоцитов.

Установлено, что ^-облучение вызывает деструкцию органелл эндокринных клеток, для которой характерны некоторые закономерности. Во-первых, к ним относится определенная последовательность повреждения органелл при суОлетальной дозе радиации 5 Гр. Во-вторых, расширение ассортимента органелл, повреждаемых в ранние сроки после облучения в летальной (9 Гр) и сверхлетальных (16 и 20 Гр) дозах. И, наконец, нарастание тяжести, поражения в

- 12 -

зависимости от дозы радиации и периода острой лучевой болезни.

Исследование ультраструктуры апудоцитов мышей, облученных в дозе 5 Гр, показало, что первыми из органелл повреждаются митохондрии - через 3 часа после воздействия зарегистрировано их очаговое набухание. В течение I суток процесс усиливается и сопровождается деформацией крист митохондрий. Кроме того, картину лучевого поражения дополняет слабо выраженное расширение канальцев шероховатого и гладкого эндоплазматического ретикулума, мелкоочаговый отек цитоплазмы апудоцитов и, соответственно, мелкоочаговое снижение электронной плотности цитоплазмы эндокринных клеток. В период разгара острой лучевой болезни (3-7 сутки) интенсивность названных повреждений возрастает, вплоть до разрушения митохондрий и деформации мембран шероховатого эндоплазматического ретикулума, в апудоцитах уменьшается количество секреторных гранул, возникают разрывы их мембран, появляются единичные и множественные очаговые дефекты плазмалеммы, в цитоплазме эндокринных клеток накапливается липофусцин и миелиновые структуры.

Через 3 недели после облучения признаки повреждения митохондрий сохраняются в минимальной степени - в виде единичных набуханий, тогда как деформация мембран эндоплазматического ретикулума носит устойчивый характер. В цитоплазме апудоцитов содержится повышенное количество липофусцина и миелиновых структур. В отдаленный срок после облучения (4 месяца), когда происходит восстановление пула эндокринных клеток, все eue сохраняются признаки дистрофического изменения эндоплазматического ретикулума.

Радиационное воздействие в минимальной абсолютно летальной (9 Гр) дозе и сверхлетальных (16-20 Гр) дозах вызывает нарушения ультраструктуры эндокринных клеток, подобные вышеописанным, но отличается большей тяжестью поражения, что проявляется ускоренным развитием деструктивно-некротических процессов и их необратимостью.

Влияние острого /-облучения на количество апудоцитов в двенадцатиперстной кишке характеризуется теми же качественными закономерностями, что и в желудке, однако в количественном отношении выражено несколько слабее (таблица 2). Например, у мышей.

Таблица 2.

КОЛИЧЕСТВО АРГИРОгИЛЫШХ КЛЕТОК В СЛИЗИСТОМ ОБОЛОЧКЕ ПИЛОРО-ДУО-ДЕНАЛЬНОИ ОБЛАСТИ ПОСЛЕ ОБИЕГО ОДНОКРАТНОГО у-ОБЛУЧЕНИЯ (Н ± в) (расчет: желудок - на 0,1 им2, двенадцатиперстная киска - на I поперечный срез органа).

: Время : 3 : I : 3 :Доза: Орган : час : сут : сут 7 сут 9 сут 10 сут 21 сут 4 иге

:Конт: келудок:70,1 :71,7 :70,9 :роль: :¿0,9 :¿0,7 :¿0,8 70,1 ¿1,5 69,5 ±1.0 73,8 ¿1,3 75,0 ¿1,6 69,5 ¿1,2

:»« :I2 п. к.:132,2:137,2:141,6 :о0лу1 :¿3,I :¿3,3 :¿2,0 чени^ ' 141,1 -1,6 139,1 -2,1 143,0 ¿4.2 144,0 ¿4,1 147,1 ¿4,1

; : езлудок:67,8 :64,5a:47,0" : Б : :¿0,7 :¿0,6 :¿0,4 52,5* ¿0,8 - - 56,3* ¿0,8 65,3 ¿3,7

: Гр :12 п. к.:131,0:127,4:97,3 : : :¿I,8 :±3.2 :¿2,0 110,0 -3,3 40,6е -1,2 36,2* ¿1,4 115,4 ¿3,4 102,7 ¿1,5

: : ¡¡олудок:69,1 :64.3'^ЗЗЛ" : 9 : :¿I,5 :¿I,5 :¿0,8 39,4' ¿1.0

: Гр :12 п. к.:I28,3:122,3:615,7 : : :¿2,29:¿2,6 :¿2 0 103,2 ¿I,8 87,0 ¿1,6 70,5 ¿1,3 : - -

: : Еелудок:50,S":ЗЭ,3a:36,6" : 16 : :¿0,9 :¿I,4 :¿I,4 - - - - -

: Гр :I2 п. K.:II0,5:I0S,8:8I,7 : : :-3,I :¿3,0 :¿I,2 - - - - -

: : ¿-йлудок:32,5":23,2": : 20 : :¿I,0 :¿I,2 : ~ - - - - -

: Гр :I2 n. K.:II6.I:65.4 : : : :¿3,8 :¿I,9 : ~ - - - - -

» Достоверное различие с контролем (р <; 0,05).

облученных в дссэ Б Гр, паденке уровня апудоцитов (-313) ¡зарегистрировано только чэрез 3 суток после воздействия. Чарез I неделя количество злдокршпшх клеток возрастает до 78" норми и сохраняется в этих пределах в отдалзнниз срока (3 недели - 4 месяца) поело облучения, из достигая исходного уровня.

Облучение в дозе 9 Гр вызывает снижений количества апудоцитов в течение 3 суток посла воздействия до 61:1 норма, в ¿«шнеЗгеи количество гпдокрининх клеток золнообрезно колеблется я снижается з терчнналькои перлоне лутасол болезни (10 суток) до 43% нор;«.

При кахечноЯ фор».» острой лучевой болезни, визиоаемоЯ у шеей у-облученнем в дозах 16 л 20 Гр, количество апудоцитов через 3 часа енллазтея нззначительно - соответственно до 843 и 833 нор.-п, резко падал к моменту гибели зивотних (1-3 сутки) до 53-483 от уровня здоровых шеей.

При световой микроскопии не выявлено морфологических особенностей реакции лпудоцитоз дсеиадцатиперстной кийки на радиационное воздействие - по характеру изменения, срокам их развитая, сбратишстн (5 Гр) а тяззстя проявлений (9-20 Гр) картина лучевого порагэнял по шостьэ соответствует описанной онпз для "олудка.

Исслодобз.члз слягпстоЗ оболочки двенадцатиперстной к.члкн показало, что з перзяв часи посла облучения в доза 5 Гр некоторые ;;ор*олог'псе::;ю ны'енеияя сш;тал:пли:ня клеток и строга вирагени в саузтио больсой г'эро (вакуолизация иятоплазга и набухание опптелия, пшеноз, очаговнй псрчзаскуляринЯ отек), а отдольние (полнокровие сосудов) проявляются почти на сутки раньте, чем з слизистой оболочке ".злудка. Через I сутки тягэсть воспалительной реакция нарзстзот, очагссчЯ перксаскулярнца отек имеет вирзпекжй характер, пропехоот накоплгннз серозного экссудата, ¡'.паче говоря, по ерзвкзнпэ с тканья ггзлудка, г до от;: признаки регистрируется только через I яохвх» псслэ облученяя. воспаление развевается опс те?яакя. 3 итоге о пер::од

разгара лучевой болеонл (3-7 сутки) в ткзн.ч лпснадцатгтерстноЛ кгозкн происходят серя^зякз "ср^-эл^гическио изменения - сузэнпе просэега крлпт, г.зллчкз пакуслз." в цлтсплзсу.з эпптелпя крипт, укорочение ворегжж, отслоонлз стштеллзлы'ого плзста от базальной

мембраны, разрушение последней и проникновение цитоплазмы эндокринных клеток в окружающую соединительную ткань, наличие пери-васкулярных кровоизлияний, образование серозно-геморрагического экссудата.

Через 3 недели и 4 месяца после радиационного воздействия слизистая оболочка двенадцатиперстной кишки облученных мышей не отличается по морфологической картине от контрольных необлученных животных, за исключением слабого фиброза соединительной ткани в строме между базальными отделами крипт.

Облучение в дозе Э Гр вызывает морфологические изменения двенадцатиперстной кишки, аналогичные вышеописанным, однако основные проявления лучевого поражения развиваются в более ранние сроки и носят необратимый характер, сохраняясь вплоть до гибели животных. Так, субэпителиальное накопление серозной жидкости и отслоение базальной мембраны происходит уже через I сутки после облучения, укорочение ворсинок - через 3 суток, в это же время развивается тотальный отек стромы слизистой оболочки и происходит трансформация серозного экссудата в серозно-геморрагический.

Отличительной особенностью повреждающего действия сверхлетальных доз радиации (16 и 20 Гр) является стремительный характер морфологических изменений двенадцатиперстной кишки и наличие геморрагического экссудата в терминальном периоде лучевой болезни (1-3 сутки).

Таким образом, острое у-облучение в широком диапазоне доз, от сублетальной Б Гр до сверхлетальной 20 Гр, вызывает у мышей менее выраженное снижение количества эндокринных клеток в слизистой оболочке двенадцатиперстной кишки по сравнению с пилорическим отделом желудка. При этом характерно, что несмотря на более высокую радиопоражаемость эпителия и стромы двенадцатиперстной кишки в сравнении с тканью желудка морфологическая картина лучевого поражения апудоцитов обоих органов на свето-оптическом уровне полностью совпадает - как по характеру изменений и срокам их развития, так и по тяжести проявлений. Отсюда вполне закономерно вытекает необходимость изучения морфологии эндокринных клеток двенадцатиперстной кивки у облученных животных на ультраструктурном уровне.

Проведенные исследования показали, что ионизирующее излучение вызывает существенные изменения ультраструктурной организации апудоцитов уке в первые 3 чеса после воздействия, когда методом световой микроскопии нарушения морфологии эндокринных клеток выявить не удается. При этом необходимо отметить,что по спектру патологических изменений, выявляемых на разных стадиях лучевой болезни, срокам их проявления и степени выраженности радиационное поражение ультраструктуры апудоцитов двенадцатиперстной кишки является более тязгелым, чем эндокринных клеток желудка.

Так, через 3 часа после облучения в дозе 5 Гр, когда в апу-доцитах хелудка развивается лишь очаговое набухание митохондрий и минимальные изменения зндоплазматического ретикулума, в апудо-цитах двенадцатиперстной кишки наблюдается картина многообразного пораасениия внутриклеточных структур. Она включает набухание митохондрий очаговое расширение канальцев сероховатого зндоплазматического ретикулума, очаговые дефекты плазмалеммы, внутриклеточный отек базальных отделов апудоцитов и мелкоочаговое снижение электронной плотности цитоплазмы. В течение суток выраженность перечисленных нарушений усиливается, у части апудоцитов появляются признаки коллимационного некроза (на 2 суток раньше, чем в Еелудке). Через 3 суток после облучения спектр ультраструктурных нарушений дополняется снижением количества секреторных гранул в апудоцитах к развитием коагуляционного некроза. Через 7 суток после радиационного воздействия перечисленные проявления лучевого поранения достигают максимальной выраженности, в эндокринных клетках накапливается липофусцин и миелиновие структуры. Через 3 недели после облучения для ультраструктуры апудоцитов характерно лишь набухание митохондрий и умеренное рассирение канальцев эндо-шгазматического ретикулума, а через 4 месяца - очаговое расширение канальцев и наличие ииелиновнх структур в цитоплазме, по остальным параметрам они не отличаются от норет.

Облучение в дозе 9 Гр вызывает аналогичные по характеру нарушения ультраструктура апудоцитов, однако тягесть порагения проявляется уге в раннем постлучевом периоде (3' час). Об этом свидетельствует такие признаки, как очаговый колликвационный

- 17 -

некроз, очаговая деструкция митохондрий, сниганиг количества секреторных гранул и очаговые разрукения плазмалеммы. Нееобходиш отметить, что первый из перечисленных видов патологии развивается в апудоцитах хгэлудка через I сутки после облучения в той га дозе, а все остальные - через 3 суток. В период с I суток до гибели животных (10 сутки) воспалительный процесс и деструктивные явления лавинообразно нарастают от очаговых до тотальных - происходит разрушение митохондрий и плазмалеммы (7 сутки), эндоплазматического ретикулума и мембран секреторных гранул (9 сутки).

Таким образом, /-облучение в дозах 5-20 Гр вызывает у мышей повреждение эндокринных клеток кэлудка и двенадцатиперстной кишки, которое проявляется нарушением структурно-функциональной организации апудоцитов и снижением их количества. Э№жт радиации зависит от дозы облучения и нарастает с развитием клинической картины острой лучевой болезни. При этом характерно, что как при сублетальном радиационном воздействии (5 Гр), повреждающее действие которого носит обратимый характер, так и сверхлетальном (16-20 Гр), вызывающем развитие серозно-геморрагнческого гастро-дуоденита и гибель животных в течение I- 3 суток, патологические изменения во многих аргирофильных клетках методом световой микроскопии не выявляются. Однако при электронной микроскопии тех ео самых клеток определяются ультраструктуркые нарушения, свидетельствующие о резком сннхении Функциональной активности и дата гибели апудоцитов. Следовательно, только комплексный анализ структуры эндокринных клеток на различных уровнях организации позволяет оценить тякесть радиационной опудопатии и степень нарушения функциональной активности апудоцитов. Что касается последнего параметра, то морфологическими признаками нарушения паракринной функции является межклеточный отек, поврэвдение межклеточного вещества и окрухаюцих эпителиальных клеток; эндокринной - повреждение базальной мембраны и капилляров; нейрокринной - отек слизистой оболочки и поврекдение нервных волокон, аутокринной - снизьте количества секреторных гранул, разрувение мембран шероховатого и гладкого эндоплазматического ретикулума, комплекса Гольдки.

Суммируя морфологические проявления радиационного поражения гастро-дуоденальной области желудочно-кишечного тракта, включающие нарушения структуры как эпителия и стромы слизистой оболочки, так и эндокринных клеток (вакуолизация цитоплазмы и набухание эпителия, пикноз, полнокровие сосудов, периваскулярный отек, накопление сероэно-геморрагического экссудата, укорочение ворсинок, отслоение эпителиального пласта от базальной мембраны, повреждение ядерных и плазматических мембран, мембран митохондрий и эндо-плазматического ретикулума, разрушение рибосом, микротрубочек и микрофиламентов, колликваиионный и коагуляционный некроз апудоци-тов и др.), необходимо отметить, что подобные изменения развиваются также при различных инфекциях, интоксикациях, гипоксии (Бонашевская Т.И. 1984, Пташекас Ю.Р. 1987, Харзеишвили О.М. 1988, Яглов В.В. 1977).

Следовательно, по совокупности признаков радиационная апу-допатия, вызываемая у мышей у-облучением в дозах Б-20 Гр, может быть классифицирована как вторичная, неспецифическая, дистрофически-некротическая.

Как ухе отмечалось, в пилоро-дуоденальной области желудочно-кишечного тракта у мышей насчитывается порядка 10 типов эндокринных клеток, различающихся по структурно-функциональным свойствам. Такое разнообразие создает определенные трудности в тех случаях, когда необходима оценка функциональной полноценности АРГО-системы в целом, поскольку идентификация кавдого из типов апудоцитов технически сложна. трудоемка и не всегда доступна. Исходя из этого, била поставлена задача проанализировать возможность такой оценки, в частности при радиационном поражении, по одной из субпопуляций апудоцитов - ЕС-клеток, количество которых в норме составляет около 55$ от числа аргентаффинннх. клеток яелудка и двенадцатиперстной кишки.

Проведенные исследования показали, что динамика количества аргентаффинннх клеток желудка и двенадцатиперстной кишки у облученных животных в основном соответствует закономерностям доза-эффект и время-эффект радиации, выявленным при изучении популяции агирофильных апудсаитов и представленном в предыдущем разделе.

В частности, установлено, что у-облучение в дозе 5 Гр не оказывает влияния на количество аргентаффинных клеток в слизистой оболочке желудка в первые 3 часа после воздействия (таблица 3). Через I сутки количество ЕС-клеток снижается до 67* нормы, максимум падения приходится на 3 сутки (53*), через I неделю этот показатель начинает восстанавливаться (67*), а через 3 недели после облучения нормализуется. В двенадцатиперстной кишке мышей, облученных в той же дозе, количество аргентаффинных клеток снижается через I и 3 сутки соответственно до 82* и 62* от контрольного уровня, в период 1-3 недели составляет 80* и не восстанавливается даже в отдаленный срок после воздействия.

Более выраженное повреждающее воздействие оказывает »—облучение в дозе 9 Гр. Эффект радиации проявляется уже через 3 часа после воздействия - количество апудоцитов в желудке снижается до 62* от уровня необдученных мышей, а в двенадцатиперстной кишке -до 66*. В обоих органах максимум падения зарегистрирован через 3 суток после облучения (соответственно 4Б* и 32*), причем низкий уровень (с небольшими колебаниями) сохраняется до 10 суток, периода гибели животных.

Как и в случае аргирофильных клеток, облучение в дозах 16 и 20 Гр вызывает резкое снижение количесива аргентаффинных клеток в течение 1-3 суток до 37-45* (желудок) и 28-30* (двенадцатиперстная кишка) от исходного уровня.

По данным электронной микроскопии, ^-облучение вызывает в ЕС-клеткех те же самые нарушения ультраструктуры, что и в популяции аргирофильных апудоцитов.

Таким образом, ионизирующая радиация вызывает идентичные повреждения ультраструктуры аргирофильных эндокринных клеток желудочно-кишечного тракта и субпопуляции аргентаффинных ЕС-клеток, а также сходные изменения их количества на разных стадиях острой лучевой болезни. В совокупности с одинаковыми морфологическими признаками секреторной активности апудоцитов первого и второго типов у необлученных мышей полученные данные позволяют придти к заключению о возможности оценки функциональной активности АР№-системы в целом и тяжести радиационной апудопатии по одной из субпопуляций - ЕС-клэток. :

Таблица 3.

КОЛИЧЕСТВО АРГЕНТАФФИННЫХ КЛЕТОК В СЛИЗИСТОЙ ОБОЛОЧКЕ ПИЛОРО-ДУОДЕНАЛЬНОЙ ОБЛАСТИ ПОСЛЕ ОБЩЕГО ОДНОКРАТНОГО у-ОБЛУЧЕНИЯ (М - ш), (расчет: хелудок - на 0,1 мм2, двенадцатиперстная кишка - на I поперечный срез органа)

• Время : 3 : I 3 : 7 9 10 21 : 4

Доза Орган : час : сут сут : сут сут сут сут : мес

Конт: Желудок:35,0 :36,6 роль: :±1,4 :±1,4 38,8 :40,0 ±1,1 :±2,0 :38,5 :± 1,6 43,0 ±2.1 41,2 ±1,7 :40,4 :±1.1

■е. :12 п. к.:73,2 :73,0 овлу + + •■»«и» :-1,8 :-2,5 76,5 :74,3 ±2,6 :±3,9 :73,5 :±2,3 77,4 ±1.9 80,1 :82,& ±2,7 :±3,1

Б Желудок:32,2 :21.0* :-1,б :-2,3 20,4*:26,7*: ±1,8 :±2,0 : " - 38,1 ±1,6 38,3 ±1,6

Гр 12 п. к.:79,0 :60,0* :±2,8 :±2,1 47,8*:59,0* ±3,0 :±2,4 - - 64,2 ±5,0 52,1* ±2,3

9 Желудок:21,7*:20,2* :¿I,4 :±0,8 17,5":16,5" ±0,8 1-1,9 :19,5* .±1,5 20,0 * ±1,6 - -

Гр 12 п. к.:48.0*:47,5* :±3,4 :±2,0 24,5*:26,1* ±2,8 :±2,4 :29,9* :±2,4 23,1 " ±2,1 - -

16 Яелудок:24,0*:22,5* :±1Д ±1.5 14,3": : ±1,1 : . " - - -

Гр 12 п. к.:32,7*:27,7*:21,3*: :±1,2 :±1,6 :±1,4 : - - - -

20 2елудок:20,8*:1е,6*: _ : :±1,0 :±2,1 : . - - - -

Гр 12 п. к.:35,1":21,б*' :±1,4 :-1.6 - ! - - - -

■ Достоверное различие с контролем (р 0,05).

- 21 -

Очередной задачей работы являлось изучение радиозашитной активности мелатонина, который, как известно, в организме млекопитающих образуется из серотонина и метаболизируется через мексамин (Бондаренко Л.А. 1987, Науменко Е.В. 1975), классический радиопротектор из класса индолилалкиламинов. Установлено, что ме-латонин (20 мг/кг за 15 мин до облучения) оказывает в опытах на мышах выраженное радиозаиитное действие в отношении APUD-системы желудочно-кишечного тракта при дозах »—облучения 6-20 Гр. Защитный эффект препарата проявляется повышением индекса тимидиновой метки эпителия пилорических желез желудка и крипт двенадцатиперстной кишки, а также количества эндокринных клеток - как пула аргирофильных, так и субпопуляции аргентаффинных ЕС-клеток. В частности, индекс тимидиновой метки у мышей, облученных в дозах 5 Гр, 9 Гр и 16-20 Гр на фоне завиты мелатонином, превышает в первые 3 суток аналогичные показатели контрольных облученных животных соответственно на 18-701, 28-76% и 40-802.

Другой стороной протекторного действия мелатонина является снижение тяжести постлучевого дефицита эндокринных клеток желудочно-кишечного тракта. Так, количество аргирофильных клеток желудка у защищенных мышей превышает уровень облученного контроля при дозе б Гр в среднем на 9-16% (1-7 сутки), при дозе 9 Гр - на 8-22% (1-3 сутки), а при дозах 16 и 20 Гр - на 13- 27% (1 сутки) (таблица 4). В слизистой оболочке двенадцатиперстной кишки радиопротекторное действие мелатонина проявляется поьышенивм количества аргирофильных клеток в период от 3 часов до I суток после облучения в названных дозах соответственно на 10-13%, 12-14% и 6-72%. Кроме того, предварительноо введение мелатонина повышает у мнгачй, облученных в дозах 5 Гр, 9 Гр и 16-20 Гр, количество вр-гентвЭДинных ЕС-клеток в пилорических железах желудка (таблица Б) соответственно на 17-38% (1-7 сутки), 27.-27% и 20-42% (3 часв-1 сутки), а в криптах двенадцатиперстной кишки - е среднем на 17-24% (1-3 сутки). 34% И 21-33% (3 часа)

Как известно, у мьшей максимум клеток кишечного эпителия, находящихся в S-фпэе митоза, совпадает по времени суток (0-3 чв-

- 22 -

Таблица 4

КОЛИЧЕСТВО АРГИРОФИЛЬНЫХ КЛЕТОК В СЛИЗИСТОЙ ОБОЛОЧКЕ ЖЕЛУДКА МЫШЕИ ПРИ ИЗОЛИРОВАННОМ И СОЧЕТАННОМ ДЕЙСТВИИ МЕЛАТОНИНА И /-ОБЛУЧЕНИЯ (расчет на 0,1 мм2 слизистой оболочки, М ± т)

: Группы Сроки и с с лед о в а н и я

: ЖИВОТНЫХ :3 час :1 сут:3 сут:7 сут:9 сут:10 сут:21 сут:4 мес:

Контроль * ( раствори-* ,т»ль * дог * МО» об луч. > :69,5 : ±1,5 :71,8 :72,0 :±1,0 :±0,Б :7Б,4 :±1,1 74,3 ±1.8 76,0 ±1.1 : 75,3 :±1,Б •70,4 : ±1,9 :

,И» латомим ♦ ложно» Гоб луч«Ии» :74,5* :±1,2 :79,2*:87,2* :±2,б :±3,9 :80,б" :±1,6 82,2* ±2,6 81,0* ±1.8 79,6 ±2,7 64,6 : ±2,3 :

¡Растворитель :«• Б Гр :64,7 :±о,8 :60,1 :44,0 :±1,4 :±0,7 :Б1,0 :±1,5 - - 67,1 ±2,3 66,0 : ±2,5 :

:м» лат о н им :+ 5 Гр :70,5 * :±1,9 :67,4*:50,7* :±2Д :±1,6 :56,6* :±1,4 : _ : 67,4 : : ±3,0 62,7 : ±2,0 :

;Раст•орит» ль :«• 9 Гр : 63,3 :+0,7 :62,0 :34,1 :±1,4 :±1,1 :39,2 :±0,5 44,7 ±1.0 40,3 ±1.5 - - :

IМ»латомин :+ 9 Гр :72,2 " :±2,0 :68,8*:41,5* :±2,2 :±2,0 42,2* ±1.0 43.0 ±1.8 38,6 ±2,2 - - :

|Расткорит »ль :+ 16 Гр :4б,1 : ¿0,7 :36,2 :34,0 :±1,1 :±0,9 - - : - : - - :

Щ» лат о мим 16 Гр :52,2 " :±2,2 :43,7*:39,9* :+1,4 :±2,0 - - ! - ! - - ;

Г Рас т а о рит »ль 29 * 0 :+ 20 Гр :+1,1 :20,1 : :±1,2 : " - - ! - ! - - !

1II» лат он ия 20 Гр :35.1 ' :±1,9 :25,5": :±1,7 : " - - !

• Достоверное различие с соответствующей группой незащищенных мышей (р $0,05)

Таблица 5

КОЛИЧЕСТВО АРГЕНТАФФИННЫХ КЛЕТОК В СЛИЗИСТОМ ОБОЛОЧКЕ «ЕЛУДКА МЫШЕИ ПРИ ИЗОЛИРОВАННОМ И СОЧЕТАННОМ ДЕЙСТВИИ МЕЛАТОНИНА И у-ОБЛУЧЕНИЯ (расчет на 0,1 мм2 слизистой оболочки, М - m )

: Группы : Сроки исследования

¡животных :3 час ¡1 сут ; з сут:7 сут:Э сут:Ю сут:21 сут:4 нес:

ир««вр«-: 3010 : З*'1 : 39'2: 43>7~: 427б~:~41Тз: : ±1.0 : ±1,9 : ±1,4: ±1,9: ±2,1 : ±1,5 : ±2,6:

! :36,4* : 39,9': 44,3*:46,3*: 43,1 :овлу1»ии* .^2,1 : ¿1,9 : ±i,6 :±Г,3 : ±1,Б 45,0 : 41,8 ±2,4 : ±2,4 39,4 ±2,3

ip«T«epu- :28,1 . : 17,0 : 17,3 : 23,4 : '+ Б Гр ''i1'1 s ±1,8 : ±1,0 :±0,7 : : 38,9 : ±1,5 42,1 ±1,6

ш.латони« :32,8* : 23,6*: 21,9*:27,Б\ : + Б Гр :±I,0 : ±0,9 : ±1,3 :±I,3 : : Зв,б : ±1,4 40,3 ±1,9

!P.c».opu- :I7,4 : 17,0 : 16,Б :I7,0 :2I,6 Tf Як 9 Гр :±I,3 : ±0,8 : ±1,0 ¡±1,Б :±2,2 20,0 : ±1,8 : -

tut.»..»« :22,I* : 20,7*: 17,1 :I7,2 : 19,9 i+ 9 Гр :±0,9 : ±1,2 : ±2,4 :±I,7 : ±2,1 20,Б : _ ±2,0 : -

¡p.cr.opu- :1Б,3 : 19,4 : 16,1 : : МбТр ^ tl.* • ±1.9 •• " : : . -

:24,I* : 23,9*: 14,8 : _ : 16 Гр :±2,6 : ±1.1 : ±1,5 : : : - -

¡p.tr.epu- :18,Б : 13,2 : 20*Гр : ±1.1 : - : - ' - -

«•»»а» :22,2* : 18,8*: 20 Гр :*0.Б : +1.6 : - ! - : - -

• Достоверное различие с соответствующей группой незавиден ных животных (р £ 0,05)

са) с пиковым уровнем мелатонина в крови (Кветной И.Ы. 1988, Соловьева И.А. 1981, 131Г1 К. 1990). По-видимому, радиозатитное действие мелатонина в отнооении клеток диффузной эндокринной системы желудочно-кишечного тракта обусловлено задержкой перехода апудоцитов из относительно радиорезистентной Б-фазы в 02- и фазы митоза, отличающиеся более высокой поражаемостью.

ВЫВОДЫ

1. Тотальное у-облучение в дозах 6-20 Гр вызывает у мышей радиационную апудопатию, которая проявляется комплексным повреждением биологических мембран эндокринных клеток желудка и двенадцатиперстной кишки, снижением количества апудоцитов и нарушением их структурно-функциональной организации. По совокупности признаков данная форма апудопатии иогвт быть классифицирована как вторичная, неспецифическая, дистрофически-некротическая.

2. Тяжесть радиационной апудопатии зависит от дозы облучения и нарастает с развитием клинической картины острой лучевой болезни, причем при сублетальном воздействии (5 Гр) повреждающий эффект у-квантов носит обратимый характер, а летальное облучение (9, 16 и 20 Гр) приводит к развитию серозно-геморрагического и геморрагического гастро-дуоденита, вызывает прогрессирующее, необратимое, нарушение ультраструктуры и функции эндокринных клеток, в особенности - двенадцатиперстной кишки.

3. Ионизирующая радиация вызывает идентичные повреждения ультраструктурн пула аргирофильных клеток желудочно-кишечного тракта и субпопуляции аргентаффинных ЕС-клеток, а также сходные изменения их количества на разных стадиях острой лучевой болезни.

4. На основании анализа функциональной морфологии одного из многих типов апудоцитов - ЕС-клеток можно оценить состояние диффузной эндокринной системы в целом и тяжесть радиационной апудопатии. Снижение количества аргирофильных клеток на 40-45*' и аргентаффинных - на 40-50* является показателем необратимой апудопатии и неблагоприятного исхода острой лучевой болезни..

5. Мелатонин (20 мг/кг) оказывает в опытах на мышах радио-зааитное действие в отновения АРГО-системы желудочно-кишечного трзкта при сублетальном (5 Гр), летальном (9 Гр) и сверхлетальном (16-20 Гр) /-облучении. Защитный эффект препарата проявляется по-выпением индекса тимндиновой матки эпителия пилорических желез

желудка и крипт двенадцатиперстной кивки в среднем на 18-80* (1-3 сутки), а также увеличением на 10-25* количества вргиро-фильных эндокринных клеток и на 17-35* - аргентаффинных ЕС-клеток (1-7 сутки).

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ.

1. Бандурко Л.Н., Жук Л.И., Улитина Е.Д., Бродский P.A.. Морфо-функциональные особенности энтерохромаффинных клеток при введении цитостатика винкристина крысам. // В кн: "APUD-система: достижения и перспективы изучения в онкорадиологии и патологии". - Обнинск, 1988. - С. 92-95.

2. Петрова Г.А., Кветной И.К., Улитина Е.Д. и др..Фармакокинетика меченного тритием мелатонина, // Химико-фармацевтический журнал. - 1989.- С. 913-915.

3. Улитина Е.Д., Пжаков В.В. Модификация метода Гримелиуса для идентификации апудоцитов на полутонких срезах. // Архив патологии. 1990,- « 4. - Т. 52. - С. 63-64.

4. Петрова Г.А., Улитина Е.Д. Морфологические исследования опухолевой ткани экспериментальных животных после инъекции мелятони-на. // Материиалы IV Всесоюзн. конф. Современные методы морфологического исследования в теоретической и практической онкологии. Тбилиси, "Мвцниереба".- 1988. - С. II3-II4.

6. Улитина Е.Д. Динамика поведения апудоцитов желудка и двенадцатиперстной кишки при экспериментальном канцерогенезе, // Материалы IV Всесоюзн. конф. Современные методы морфологического исследования в теоретической и практической онкологии. Тбилиси, "Мецниереба". - 1988. - С. I40-141.

6. Улитина Е.Д. Патоморфологические особенности радиационной апудопатии желудка и двенадцатиперстной кишки. // В кн.: "Регуля-торные пептиды и биогенные амины: радиобиологические и онкорадио-логические аспекты". Обнинск, 1992. - С. 100-108.

7. Стоков В.В., Кветной И.К., Улитина Е.Д,, Лепехин В.П.. Эндокринные клетки желудочно-кишечного тракта и поджелудочной железы при действии гамма-облучения я опухолевом росте. // В кн.: "Регу-ляториые пептиды и биогенные амины: радиобиологические и онкора-лио,*огич.?ский аспекты". Обнинск. 1992,- С. 67-82,