Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Фосфофруктовиназа при старении эритроцитов

ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Смолина, Елизавета Викторовна

ВВЕДЕНИЕ. '

Часть I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

ГЛАВА I. НЕКОТОРЫЕ АСПЕКТЫ МЕТАБОЛИЗМА ЭРИТРОЦИТОВ.

1.1. Свойства фосфофруктокиназы.^з

1.2. Аллостерические эффекторы фосфофруктокиназы

1.3. Кинетика фосфофруктокиназной реакции.

1.4. Энергетический обмен эритроцитов и ретикуло-цитов.

1.5. Метаболизм АТ$ в эритроцитах .;

1.6. Старение эритроцитов.

Часть II.:'СОБСТВЕННЫЕ ЖСЛВДВАНИЯ

ГЛАВА 2. МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

2.1. ^акционирование эритроцитов

2.2. Подсчет ретикулоцитов.

2.3. Определение активности <ШС.

2.4. Определение кинетических параметров ШК

2.5. Определение содержания АТФ.

2.6. Определение содержания АДР

ГЛАВА 3. АКТИВНОСТЬ, КИНЕТИЧЕСКИЕ ПАРАМЕТРЫ ФОСШРУКТО-КИНАЗЫ, СОДЕРЖАНИЕ АТФ И АД£ ПРИ СТАРЕНИИ ЭРИТРОЦИТОВ, ПРОЕЦИРОВАННЫХ В УСЛОВИЯХ НОРМАЛЬНОГО ЭРИТР0П0ЭЗА

3.1. Активность и кинетические свойства ФФК

3.2. Содержание АТФ и

ГЛАВА 4. АКТИВНОСТЬ, КИНЕТИЧЕСКИЕ ПАРАМЕТРЫ ФОСФОФРУКТОКИНАЗЫ, СОДЕРЖАНИЕ АТФ И АДФ ПРИ СТАРЕНИИ ЭРИТРОЦИТОВ, ПРОДУЦИРОВАННЫХ В УСЛОВИЯХ НАПРЯЖЕННОГО ЭРИТРОПОЭЗА.

4.1. Активность, кинетические свойства ФФК, содержание АТФ и АДФ на 7 сутки после кровопотери

4.2, Активность, кинетические свойства ШС, содержание А

§ и АДФ на 20 сутки после кровопотери.

4.3, Активность, кинетические свойства Ф® на

30 сутки после кровопотери. Ti

Введение Диссертация по биологии, на тему "Фосфофруктовиназа при старении эритроцитов"

Актуальность темы. Одной из важнейших проблем биологии и медицины является проблема старения. Удобным и информативным объектом исследования процессов старения на клеточном и молекулярном уровнях служат эритроциты млекопитающих - высокоспециализированные безъядерные клетки, не способные к биосинтезу белка. Особые преимущества эритроцитов связаны также с их легкой доступностью и возможностью разделения на возрастные группы.

Знание механизмов старения и разрушения эритроцитов в физиологических условиях, а также при выведении системы крови из равновесия открывает возможность правильной интерпретации нарушений в системе крови при различных заболеваниях (25, 52, 98, 100, 102, 112, 113, 115, 120, 121, 125, 126).

Основным энергетическим процессом и единственным путем ресинтеза АТФ в зрелых эритроцитах является гликолиз, регулируемый координирующим действием гексокиназы, фосфофруктоки-назы и в меньшей степени пируваткиназы (7, 17-23, 205, 207, 263).

Согласно исследованиям ряда авторов (7, 14, 144-148, 107, 160, 163, 169, 193, 212, 296), ведущим звеном в цроцес-се старения эритроцитов является снижение интенсивности гликолиза (87, 88, 132, 146, 161, 171, 205, 237, 250), вызывающее уменьшение уровня АТФ в клетке, что, в свою очередь, обусловливает цепь последовательно развивающихся событий : нарушение работы ионных насосов (9, 10, 166, 171), повышение о. внутриклеточной концентрации Са (70, 135, 167, 238, 293, 295), вызывающее агрегацию мембранных белков (36, 41, 55, 83,

174, 238, 293), активацию фосфолипазы Ag (44, 159, 266) и . накопление лизофосфатидов (3, 4, 34, 43). Нарушается синтез низкомолекулярных соединений - глютатиона, фосфорибозилпи-рофосфата, НАД4" (28, 38, 46, 62). При снижении конденсации АТФ происходит дефосфорилирование спектрина, вызывающее структурные перестройки мембраны, гликопротеидного спектра, что приводит к изменению антигенной структуры эритроцитов и обеспечивает селективную элиминацию из кровеносного русла старых клеток (1Г, 85, 136-140, 150, 151, 157, 199, 200, 203, 213, 217*219, 239, 240, 286, 207).

Б основе снижения интенсивности гликолиза лежит уменьшение активности ферментов этого метаболического цикла (25, 8, 9, 10, 87, 88, 143-, 144, 145, 160, 193, 198). При старении эритроцитов существенно снижается активность гексокиназы, фермента, характеризующегося наименьшей активностью в процессе гликолиза (8, 129, 226, 241, 242, 247, 256, 274, 275). Поведение второго лимитирующего фермента гликолитического пути - фосфофруктокиназы - при старении эритроцитов остается недостаточно изученным. Нет единого мнения относительно изменения активности фосфофруктокиназы (40, 190, 226, 153, 246, 268, 274, 275), не исследованы кинетические свойства этого фермента.

Фосфофруктокиназа (АТФ: d-фруктозо-б-фосфат I фосфо-трансфераза 2.7.1. II.Ш(), катализирующая образование фруктозо-1,6-дифосфата, перенося фосфатный остаток с АТФ на фруктозо-6-фосфат, является вторым лимитирующим ферментом гликолиза (168, 202, 290, 317). $iK - поливалентный аллостерический фермент, активность которого может варьировать в широких цределах, поскольку на активность фермента оказывает существенное влияние целый ряд эффекторов и, в первую очередь, АТФ (72, 132, 133, 211, 223-225, 245), являющаяся одновременно субстратом фосфофруктокиназной реакции и аллостерическим ингибитором ФФК (72, 93, 96, 132, 133, 190, 225-224).

На чувствительность фосфофруктокиназы к АТФ оказывают большое влияние положительные эффекторы ФФК, одним из важнейших аллостеричееких активаторов является АДФ. Чувствительность аллостерического центра фосфофруктокиназы к АТФ, а также к действию эффекторов может меняться при старении эритроцитов.

Важное значение при оценке роли фосфофруктокиназы в поддержании определенного уровня АТФ может иметь сопоставление концентраций АТФ, вызывающих ингибирование Ш£, с внутриклеточным содержанием этого косубстрата, а также влияние эффекторов на фосфофруктокиназцую реакцию.

Подходом к изучению механизмов старения и значения роли ФЗК в поддержании уровня АТФ может быть сравнительное изучение динамики активности, кинетических параметров ФЖ, а также содержания АТФ и АДФ при старении эритроцитов, продуцированных в условиях нормального и напряженного эритро* поэза.

Эритроциты, образованные в условиях напряженного эрит-ропоэза, характеризуются укороченным сроком жизни, рядом метаболических особенностей, физико-химическими свойствами (6, 12, 13, 14, 26, 27, 31, 33, 34, 37, 45, 133, 287, 314, 301). Скорость гликолиза в них первоначально значительно выше, чем в эритроцитах, продуцированных в условиях нормального эритропоэза, но при старении этих клеток наблюдается более быстрое, чем в норме, снижение глиполитической активности (I—14, 33, 37, 119, 120, 274-280, 243, 206).

Поведение фосфофруктокиназы при старении эритроцитов, продуцированных в условиях напряженного эритропоэза, не изучено.

Цель работы и задачи исследования. Исследовать активность и кинетические свойства фосфофруктокиназы при старении эритроцитов, продуцированных в условиях нормального и напряженного эритропоэза. Оценить роль ФШК в поддержании .уровня АТФ при старении эритроцитов.

Исходя из этого, в задачи исследования входило:

- изучение динамики активности и кинетических параметров фос*» фофруктокиназы при старении эритроцитов (на фракциях молодых, старых клеток и общей эритроцитарной массы у интактных кроликов и на 7 или 20 или 30 сутки после кровопотери);

- исследовать содержание -АТФ и АДФ в тех же фракциях у интактных кроликов и в различные сроки после кровопускания;

- сопоставить ингибирующие концентрации АТФ с внутриклеточным содержанием этого косубстрата;

- исследовать влияние АДФ на кинетику фосфофруктокиназной активности при старении эритроцитов, продуцированных в условиях нормального и напряженного эритропоэза.

Научная новизна. Впервые показано, что при старении эритроцитов, продуцированных в условиях нормального эритропоэза, происходит изменение кинетических свойств фосфофрук-токиназы - увеличение В^ для АТФ и фруктозо-6-фосфата и снижение Мм&х ддя обоих субстратов, уменьшение ^ для АТФ. Характер кривой зависимости * от И при старении эритроцитов не меняется как для фруктозо-&-фосфата, так и для АТФ, но при старении эритроцитов наблюдается ингибирование фосфофруктокиназной активности более низкими концентрациями АТФ. При этом снижение ингибирующих концентраций АТФ при старении эритроцитов соответствует уменьшению внутриклеточного содержания этого кофермента. Впервые отмечено, что цри старении эритроцитов наблюдается уменьшение активирующего эффекта АДФ на фосфофруктокиназу эритроцитов. Новым явилось изучение всех перечисленных показателей при старении эритроцитов, продуцированных в условиях напряженного эритропоэза, вызванного острой, одноразовой кровопотерей (60$ всей массы крови). Впервые цроведено комплексное исследование всех перечисленных параметров на о,ином объекте. Обосновано положение о ведущем значении ФФК в уменьшении внутриклеточного содержания АТФ при старении эритроцитов.

Теоретическое значение и практическая денность работы. Результаты работы вносят вклад в понимание механизмов старения эритроцитов, образованных в условиях нормального и напряженного эритропоэза. Обнаруженное изменение кинетических параметров фосфофруктокиназы, снижение концентраций АТФ, вызывающих ингибирование фермента и соответствующее ему снижение внутриклеточного уровня АТФ, изменение чувствительности ФЖ к аденозинтрифосфату при увеличении концентрации АДФ свидетельствует о решающей роли ФФК в снижении уровня АТФ и ограничении скорости гликолиза при старении эритроцитов, образованных в условиях нормального и напряженного эритропоэза.

Определение активности фосфофруктокиназы и содержания АТФ и АДФ может использоваться в гематологической практике дая определения жизнеспособности эритроцитов in vivo , а также при хранении крови in vitro • Выявление факторов, обусловливающих снижение жизнеспособности эритроцитов, открывает возможности коррекции нарушений, возникающих в системе красной крови при различных заболеваниях.

Материалы диссертационной работы используются при чтении спецкурсов биохимии (кинетика ферментативных реакций, энзимология, биохимия крови) студентам биолого-химического факультета Красноярского Государственного университета и на медико-биологическом факультете Томского мединститута.

Методики, изложенные в данной работе, поставлены на кафедре биохимии Красноярского Госуниверситета и выполняются студентами на большом практикуме по биохимии, а также в ходе курсовых и дипломных работ.

Тема диссертационной работы утверждена ученым советом биолого-химического факультета Красноярского Госуниверситета. Работа выполнена в соответствии с планом научных работ кафедры биохимии Красноярского Госуниверситета и является разделом темы "Отражение эволюционных закономерностей эритро-поэза в онто- и филогенезе" Л 8IIQ0927. Тема входит в координационный план научно-исследовательских работ АН СССР на I98I-I985 годы по решению научно-технической проблемы "Физиология человека и животных" - 2.35 и в Программу фундаментальных исследований по проблеме "Гомеостаз".

Основные положения, выносимые на защиту:

I. Старение эритроцитов, образованных в условиях нормального эритропоэза, сопровождается снижением активности фосфофруктокиназы и изменением кинетического поведения фермента (увеличение Км для АТФ и фруктозо-&-фосфата, уменьшение

Чюа* дтщ обоих субстратов, снижение для АТФ, снижение ингибирующих концентраций аденозинтрифосфата, уменьшение активирующего действия Ада; а также снижение уровня АТФ и повышение концентрации АДФ в клетке.).

2. Эритроциты, продуцированные в условиях напряженного эритропоэза, первоначально характеризуются повышенной активностью ФЖ, более высокой 1/тм для АТФ и фруктозо-6~фосфа» та, повышением и^ для АТФ и значительным уменьшением для обоих субстратов. Но старение этих клеток сопровождается более быстрым, чем в норме, изменением этих параметров.

3. «Дднамика концентраций АТФ, вызывающих ингибировнние ФФК, при старении эритроцитов, продуцированных как в условиях нормального, так и нацряженного эритропоэза, соответствует изменению внутриклеточных концентраций АТФ.

Заключение Диссертация по теме "Биохимия", Смолина, Елизавета Викторовна

вывода

1. Зависимость скорости фосфофруктокиназной реакции от концентрации фруктозо-6-фосфата описывается гиперболической кривой, от концентрации АТФ - колоколообразной. Характер кинетической кривой зависимости от й] как для фруктозо--6-фосфата, так и для АТФ при старении эритроцитов не меняется, но наблюдается ингибирование фосфофруктокиназы более низкими концентрациями АТ§.

2. Старение эритроцитов, продуцированных в условиях нормального эритропоэза, сопровождается значительным снижением активности фосфофруктокиназы и изменением кинетических параметров ШК, уменьшением чта* для АТЗ? и фруктозо-6--фосфата и ** для АТФ и повышением Км для обоих субстратов.

3. При старении эритроцитов, образованных в условиях нормального эритропоэза, наблюдается значительное уменьшение внутриклеточного уровня АТФ и повышение содержания АДФ, но при этом активирующий эффект аденозиндифосфата на фосфо-фруктокиназную реакцию резко снижается.

4. Эритроциты, продуцированные в условиях напряженного эритропоэза, первоначально характеризуются повышением активности фосфофруктокиназы, для АТФ и фруктозо-6-фосфата, для АТ#, уменьшением К^ для обоих субстратов. Выраженность изменений зависит от степени напряженности эритропоэза, определяемой временем после кровопотери. Старение этих клеток сопровождается более быстрым, чем в норме, снижением активности Ф£К, изменением кинетических параметров фермента.

5, Эритроциты, образованные в условиях напряженного эритропоэза, обладают более высокой чувствительностью к активирующему действию АДФ, несмотря на снижение его концентрации в клетке.

6. Изменения концентраций АТФ, вызывающих ингибирование фосфофруктокиназы, сопровождается изменением внутриклеточного содержания АТФ эритроцитов, продуцированных в условиях нормального и напряженного эритропоэза, и имеют одинаковую направленность с изменением интенсивности гликолиза.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Эритроциты млекопитающих поступают в кровяное русло в виде ретикулоцитов - безъядерных клеток, содержащих остатки эндоплазматической сети, рибосом, митохондрий (28, 56, 62, 64, 69, 71, 129). Энергетический обмен в этих клетках представлен активно протекающим гликолизом, характеризующимся неполным Пастеровским эффектом и циклом Кребса, сопряженным с дыхательной цепью (125, 129, 152-155, 212, 215, 274-280). Ре-синтез АТФ в ретикулоцитах осуществляется в ходе гликолиза и окислительного фосформирования в дыхательной цепи (200, 280-283).

При созревании ретикулоцитов происходит деградация рибосом, митохондрий, эндоплазматической сети. Основным энергетическим процессом зрелых эритроцитов становится гликолиз, это единственный путь ресинтеза АТФ (7, 17-23, 104, 108, 129, 276-283).

Старение эритроцитов сопровождается уменьшением интенсивности гликолиза и снижением уровня АТФ в клвтке (17, 18, 107, 108, 129). В основе снижения интенсивности гликолиза лежит уменьшение активности ферментов этого процесса (I, 2, 5, 7, 8, 9, 10, 11-14, 87, 141, 142, 145, 167, 188, 193). Отдельные ферменты гликолиза снижаются в различной степени. Работами ряда исследователей (232, 233) показано, что старение эритроцитов сопровождается значительным снижением активности таких ферментов как ГАЗФД, енолазы, ЛДГ (12, 242, 243).

Одним из лимитирующих ферментов гликолиза является фосфо-фруктокиназа - поливалентный аллостерический фермент.

Однако сведения относительно поведения фосфофруктокиназы при старении красных кровяных клеток носят противоречивый характер, особенно это касается степени снижения активности фермента. При старении эритроцитов не исследовано кинетическое поведение #Ж.

Противоречия литературных данных относительно изменения активности фосфофруктокиназы при старении эритроцитов объясняются тем, что в разных работах использовались неодинаковые методы разделения на возрастные группы (17-20, 152, 153, 154, 223-225, 236, 263, 309-312), часто активность фермента сравнивалась с активностью ретикулоцитов или крови, обогащенной ретикулоцитами (309-312, 313, 319, 320), неодинаковой гдубиной кровопотери или введением гемолитических ядов, оказывающих сильное влияние на метаболизм клетки (271-277, 292).

В настоящей работе проводилось исследование активности, кинетических характеристик фосфофруктокиназы, а также концентрации АТ# и АДФ при старении эритроцитов, продуцированных в условиях нормального и напряженного эритропоэза, который достигался одноразовым кровопусканием 60$ всей массы крови кролика.

Исследования проводились на фракциях молодых, старых клеток и общей эритроцитарной массе у интактных кроликов и на 7, 20 и 30 сутки после кровопотери.

Определение активности фосфофруктокиназы во фракциях молодых, старых клеток и общей эритроци тарной массе у интактных кроликов при физиологических концентрациях АТФ и фруктозо-6-фосфата показало, что старение эритроцитов сопровождается значительным снижением активности фосфофруктокиназы. Наибольшая активность ФЖ проявлялась во фракции молодых клеток и составила 5,49 мкмоль-мл*эр. В общей эритроцитарной массе активность фосфофруктокиназы была ниже на 35%9 а во фракции старых клеток - на 60% по сравнению с фракцией молодых клеток.

Данные по активности ЗКЖ в общей эритроцитарной массе согласуются с данными (235, 274) для человеческих эритроцитов и эритроцитов кролика (303, 304).

Возможными причинами возраст-зависимого снижения активности фосфофруктокиназы может быть уменьшение количества молекул работающего фермента в клетке за счет его деградации, а также изменение свойств ФЖ в результате посттрансляционных модификаций, происходящих при старении белковой молекулы, которые могут приводить к определенным конформационным перестройкам белка и изменению его каталитических и регуляторных характеристик. Такие модификации должны сопровождаться изменением кинетических свойств фермента.

Наличие структурно-конформационных изменений при старении эритроцитов отмечено у ряда эритроцитарных ферментов (250, 258, 283). Одним из методических приемов, позволяющих определить наличие конформационных изменений в белковой молекуле (как следствие модификаций), является изучение кинетических параметров в процессе старения: константы Михаэлиса, максимальной скорости реакции, коэффициента Хилла.

В доступной работе нам не встретились работы, в которых было бы проведено исследование кинетических свойств фосфо-фруктокиназы при старении эритроцитов.

Поскольку ШК является двухсубстратным ферментом, для определения ее кинетических свойств исследовалась зависимость скорости реакции как от концентрации фруктозо-6-фосфата, так и АТФ. Результаты исследований показали, что зависимость скорости ферментативной реакции от концентрации фруктозо-6-фосфата описываетя гиперболической кривой и подчиняется кинетике Михаэлиса-Ментен. Такой характер кинетической кривой был описан рядом авторов как для 2ФК эритроцитов (223-225, 319, 320), так и для многих тканей (256, 317, 263).

Гиперболический характер зависимости г^ от [з] подтверждается значением коэффициента Хилла, практически не отличающимся от единицы, а также линейным характером зависимости скорости реакции от концентрации фруктозо-6-фосфата в координатах Лайнуивера-Берка.

При старении эритроцитов характер кинетической кривой зависимости скорости ферментативной реакции от концентрации фруктозо-6-фосфата не меняется. Расчет кинетических параметров для фруктозо-6-фосфата показал, что наименьшая величина константы Михаэлиса и наибольшее значение максимальной скорости реакции соответствует фракции молодых клеток (1,15 мкмоля и 3,7 мкмоля, соответственно). По мере старения эритроцитов происходит увеличение Км и снижение . в общей эритроцитарной массе константа Михаэлиса на 44% выше, а У^с^х на 25% ниже, чем во фракции молодых клеток. Более значительные изменения наблюдались во фракции старых эритроцитов. была увеличена на 148%, максимальная скорость реакции снижена на 46% по сравнению с фракцией молодых клеток.

Известно, что константа Михаэлиса не зависит от концентрации фермента (77, 80, 123) и не изменяется при строго одинаковых условиях проведения эксперимента (концентрация субстрата, кофермента, температура, рН) и может отражать изменения свойств молекулы фермента (77, 80, 123).

Исследование зависимости скорости ШС реакции от кон— центрации АТ<5 ео фракции молодых, старых клеток и общей эритроцитарной массе обнаружило, что .для всех исследованных фракций кривая зависимости ъ- от концентрации АТФ имела колоколообразный характер. Такой же характер кривой описан для фосфофруктокиназы эритроцитов (17-23) и ряда тканей (72 , 93).

Колоколообразный характер кривой зависимости скорости ферментативной реакции от концентрации АТФ обусловлен тем, что фосфофруктокиназа является поливалентным аллостерическим ферментом (80, 93, 106, 123). АТФ одновременно является субстратом реакции и аллостерическим ингибитором. Сродство активного центра• фермента к АТФ значительно выше, чем сродство к АТФ аллостерического центра (80, 93, 124, 125). Поэтому при низких концентрациях АТФ происходит взаимодействие с активным центром МС, и субстрат (фруктозо-6-фосфат) фосфо-рилируется, а при высоких концентрациях АТФ взаимодействует с аллостерическим центром фосфофруктокиназы, вызывая изменение четвертичной структуры фермента, ведущего к .инактивации Ш. (80, 93, 106-108).

При старении эритроцитов колоколообразный характер кривой не меняется, но наблюдается ингибирование фермента при более низких концентрациях АТФ. Оцределение константы Ми-хаэлиса и максимальной скорости ФФК реакции для АТФ при старении эритроцитов показало, что характер изменений этих параметров имеет ту же направленность, что и для фруктозо-6-фосфата. факция молодых клеток имела наименыцую величину Крд (5,3 мкмоля) и наибольшее значение ^та^ (4,60 мкмоля). В общей эритроцитарной массе величина Км составила 0,88 мкМ, Утях - 3,70 . Еще выше константа Михаэлиса была во фракции старых клеток, она составила 1,21+0,05, ^т.««. в этой фракции имела наименьшую величину - 2,80+0,03.

Обработка нисходящий ветви кривой зависимости скорости #Ж реакции от концентрации АТФ методом Курганова (79, 80) показала наличие положительной кооперативности в молекуле фосфофруктокиназы эритроцитов (коэффициент Хилла во всех исследованных фракциях был значительно больше единицы ). моло.дых клеток составил 4,60+0,08. При старении эритроцитов наблюдается существенное уменьшение этой величины - 3,90+ +0,10 для 02М; 3,12+0,06 для фракции старых клеток. Такое изменение коэффициента Хилла свидетельствует о снижении кооперативных свойств фермента при старении эритроцитов.

Таким образом, исследование активности и кинетических параметров фосфофруктокиназы при старении эритроцитов, образованных в условиях нормального эритропоэза, показало, что одной из возможных причин снижения активности при старении эритроцитов является уменьшение сродства фосфофруктокиназы к субстратам реакции и ослабление кооперативных свойств фермента в результате изменения белковой молекулы фермента в процессе функционирования ШС.

Возможными причинами снижения каталитической активности могут быть: окисление Б Н-групп, входящих в состав белковой молекулы фосфофруктокиназы, а также ограниченный протеолиз, деамидирование, связывание низкомолекулярных соединений (55, 92, 259). В результате этих процессов может происходить, вероятно, химическая модификация как групп, непосредственно входящих в активный центр, так и групп, необходимых для пространственной организации его активного и аллостеричес-кого центров (55, 93, 122). Нельзя исключить, что при старении эритроцитов имеет место существование аллостерических переходов между различными конформационными состояниями молекул в результате ассоциативно-диссоциативных процессов (96, 106, 117, 285). Основной формой молекулы фосфофрукто-киназы является тетрамер, который может агрегировать до ок-томера (96, 106), обладающего большей активностью, или подвергаться диссоциации до неактивных димеров.

Резкое снижение концентрации АТФ, вызывающих ингибирова-ние фосфофруктокиназы, свидетельствует о повышении чувствительности аллостерического центра фермента к АТФ в процессе старения. Это может быть одной из важнейших причин снижения интенсивности гликолиза и концентрации АТФ при старении эритроцитов. Одной из причин снижения активности и изменения кинетических свойств фосфофруктокиназы при старении эритроцитов может быть изменение изоферментного спектра. В образовании . ШС принимают участие субъединицы двух типов: М и Е. М-субъе-диница аналогична мышечному типу, а Е - печеночному. Изофер-ментный спектр нефракционированных эритроцитов кролика представлен пятью изоферментами: М4, М2Е2, МдЕр М^д, Е4, на долю Е^ приходится около 40$, М^д - 26$, М^Е^- - 14$, М4 -- 1$ (31, 152-154, 229, 31Э).

Поскольку отдельные изоферменты ЗЗК обладают неодинаковым сродством к субстратам реакции (очищенный изофермент Е4 имеет значительно большую Км, чем М^),можно предполагать, что при старении эритроцитов в кровяном русле происходит избирательное ингибирование или деградация М-субъединицы. Это предположение подтверждается изменением изоферментного спектра фосфофруктокиназы при старении эритроцитов дл va.tr» , при хранении крови (318), когда происходит увеличение абсолютного и относительного количества Е4, исчезает М4, изменяется относительное содержание гибридных изоформ в сторону увеличения ЕдМ-£ и уменьшения Е^Мд.

При старении эритроцитов в кровнном русле изменяется изо-ферментный спектр и других ферментов гликолиза: гексокиназы, лактатдегидрогеназы (8, 12, 14).

Проведенные нами исследования по оцределению содержания АТФ во фракциях молодых, старых клеток и общей эритроцитарной массе показали, что старение эритроцитов сопровождается значительным снижением содержания АТФ в клетке. Обнаружив, что при старении эритроцитов прекращение фосфофруктокиназной реакции происходит при более низких концентрациях АТФ, чем в молодых клетках, мы сопоставили внутриклеточные концентрации АТФ во фракциях молодых, старых эритроцитов и общей эритроцитарной массе с концентрациями аденозинтрифосфата, вызывающими прекращение Ф2ЕС реакции. Было найдено, что во всех исследованных • фракциях концентрации АТФ, вызывающие полное ингибирование фосфофруктокиназной реакции, близки к внутриклеточным.

Поскольку основным положительным эффектором фосфофрукто-киназы является АДФ, было проведено определение концентраций этого метаболита во фракциях молодых, старых эритроцитов и общей эритроцитарной массе, а затем исследовано влияние АДФ на кинетику Было найдено, что при старении эритроцитов концентрация АДФ значительно возрастает, но при этом наблюдаг-ется резкое снижение чувствительности Ф®С к активирующему действию этого эффектора.

Внутриклеточные концентрации АДФ (0,26), обнаруженные во фракции молодых клеток, активируют ФФК молодых клеток в большей степени, чем внутриклеточные концентрации А№ фракции старых клеток (0,50), активирующие фосфофруктокиназу в старых клетках.

Полученные данные позволяют заключить, что изменения активности и кинетических характеристик фосфофруктокиназы лежит в основе снижения интенсивности гликолиза и уменьшения уровня ATФ в клетке при старении эритроцитов. При сопоставлении интенсивности гликолиза и активности ФФК обнаружено, что в общей эритроцитарной массе и во фракции старых клеток интенсивность гликолиза и активность фосфофруктокиназы снижается в одинаковой степени по сравнению с молодыми клетками.

Сравнительное изучение активности и кинетических параметров ФФК, а также определение содержания адениннуклеотидов при старении эритроцитов, образованных в условиях нормального и напряженного эритропоэза, позволяет оценить значение ШС в поддержании определенного уровня АТ# и регуляции гликолиза при старении эритроцитов. >

Эритроциты, продуцированные в условиях напряженного эритропоэза, отличаются от нормальных клеток некоторыми метаболическими особенностями, йазико-химическими и физиологическими свойствами, укороченным сроком жизни (I-II, 224, 225). Эти клетки поступают в кровяное русло с измененным липидным (181, 198, 199,), белковым и гликопротеидным спектром (II, 39, 84, 211, 212, 228, 235). Эритроциты, продуцированные в условиях напряженного эритропоэза, характеризуются повышенной интенсивностью гликолиза, увеличением активности ряца гликолитичес-ких ферментов (гексокиназы, альдолазы, лактатдегидрогеназы, пируваткиназы), но при старении этих клеток интенсивность гликолиза снижается быстрее, чем в норме (I, 2, 5-8, 11-14).

Активность»кинетические свойства фосфофруктокиназы, одного из лимитирующих ферментов гликолиза, при старении эритроцитов, проецированных в условиях напряженного эритропоэза, не изучены.

Наш проводилось сравнительное исследование активности и кинетического поведения фосфофруктокиназы, а также содержания АТФ и АД® при старении эритроцитов, образованных в условиях нормального и напряженного эритропоэза. Напряженный эритро-поэз вызывался массивной кровопотерей, глубина которой строго дозировалась и составляла 60$ от всей массы крови. Исследования проводились у одной группы животных на 7 сутки после кровопо-тери, у второй - на 20 и у третьей группы кроликов - на 30 сутки после кровопотери. Выбор сроков обусловлен тем, что 7 сутки после кровопотери характеризуются высоким ретикулоцито-зом. В кровяном русле циркулирует смешанная популяция эритроцитов, продуцированных как при нормальном, так и при нацряжен-ном эритропоэзе. По данным иммунных эритрограмм (46-51), на 20 сутки эритроциты, образованные до кровопотери, покидают кровяное русло, и в крови циркулируют клетки, продуцированные после кровопотери. На 30 сутки происходит восстановление основных гематологических показателей (46-51),

Исследования фракции молодых эритроцитов на 7, 20 и 30 сутки после стресс-воздействия показало, что молодые клетки, образованные в условиях напряженного эритропоэза, характеризуются повышенной активностью фосфофруктокиназы по сравнению с интактными кроликами. При этом степень напряженности эритропоэза, зависящая от времени после кровопотери, оказывает значительное влияние на активность фермента.

Максимальное увеличение активности ■ЗЯК во фракции молодых клеток при содержании ретикулоцитов, близком к исходному уровню (избыток ретикулоцитов удалялся), наблюдалось на 7 сутки после кровопотери. На 20 сутки увеличение активности ФЗК фракции молодых клеток было менее выражено. На 30 сутки после кровопотери активность фермента практически не отличалась от фоновой величины.

Увеличение активности ФФК сопровождалось значительным изменением кинетических параметров фермента (уменьшением константы Михаэлиса и увеличением v для обоих субстратов реакции, увеличением коэффициента Хилла для АТФ).

Величина отклонения от фоновых показателей зависела от степени напряженности эритропоэза, определяемого временем после кровопотери. Наиболее выраженные изменения всех исследуемых параметров наблюдалось на 7 сутки после кровопотери, а на 30 сутки они существенно не отличались от фоновых величин.

Результаты этих исследований свидетельствуют о том, что одной из причин увеличения активности фосфофруктокиназы в молодых клетках, продуцированных при напряженном эритропоэзе, являются изменения кинетических свойств фермента, свидетельствующие о повышении сродства ШС к субстратам реакции, увеличении кооперативных свойств фермента. Вероятной причиной изменения активности ФФК могут быть особенности эритроцитов, продуцированных при напряженном эритропоэзе, в результате которого наблюдается полная перестройка всего эритропоэтичес-кого процесса, связанная с запуском зарепрессированной в норме программы "резервного" эритропоэза, в процессе реализации которой клетки эритроидного ряда анемизированных животных проходят ускоренный цикл развития (53, 73, 100,112, 113, 114, 115, 281), в результате возможных перескоков делений на ранних стадиях развития эритроидных клеток (73, 114, 115, 116,

119-122). В связи с этим вполне вероятно, что в синтезированных в этот период белках, в том числе и в фасфофруктоки-назе, могут иметь место изменения конформации молекулы фермента при формировании олигомерной структуры, обуславливав щее изменение кинетических параметров фермента.

Нельзя исключить , что в эритроцитах, образованных в условиях напряженного эритропоэза, изменяется изоферментный спектр ШС, увеличивается относительное количество изофер-ментов с преимущественным содержанием М-субъединицы, обладающих более высоким сродством к субстратам реакции, чем изо-формы Е4 и Биосинтез Е и М субъединиц ФЖ кодируется разными генами, хотя биосинтез их на разных стадиях развития костномозговых предшественников эритроцитов не изучен, можно предполагать, что синтез М и Е субъединиц, как и ряда других белков, в том числе и ферментов, а также и субъединиц ферментов при созревании эритроидных клеток происходит асинхронно.

Вызванная кровопотерей усиленная дифференцировка костномозговых эритроидных клеток, снижение пролиферативной активности у ранних эритробластов и появление пролиферации у окситофилышх нормобластов, в норме не делящихся, может приводить к изменению регуляции активности генов, кодирующих образование М и Е субъединиц Ж.

Косвенным подтверждением этого предположения являются исследования Стародуба Н.Ф. о тесной взаимосвязи регуляции скорости биосинтеза отдельных цепей гемоглобина с дифферен-цированностью эритроидных клеток. Формирование популяции эритроцитов с ускоренной и обычной дифференцировкой дает клетки с преимущественным содержанием того или иного типа гемоглобина (114, 115).

Определение уровня концентрации АТФ во фракциях молодых клеток показало значительное увеличение содержания этого метаболита на 7 сутки после кровопотери по сравнению с интактными кроликами, менее выраженное на 20 сутки и отсутствие достоверных различий на 30 сутки после кровопотери.

Сопоставление ингибирующих концентраций АТ# и уровня АТФ во фракции молодых клеток во все сроки после кровопотери обнаружило, что во всех случаях увеличение концентраций АТФ, вызывающих ингибирование фосфофруктокиназы, сопровождается повышением аденозинтрифосфата в клетке, и внутриклеточные концентрации АТ# близки к концентрации аденозинтрифосфата, вызывающие прекращение ШС реакции их. Одной из возможных причин этого может быть резкое увеличение чувствительности фосфофруктокиназы к активирующему действию АДФ.

Увеличение концентрации АТ£> во фракции молодых клеток на 7, 20 сутки после кровопотери сопровождается понижением содержания АДФ, более выраженным на 7 сутки после кровопускания. Однако, изучение влияния АДФ на кинетику фосфофруктокиназной реакции показало резкое усиление активирующего действия АДФ по сравнению с интактными кроликами.

Исследование общей эритроцитарной массы на 7, 20 и 30 сутки после кровопотери показало одинаковую, но менее выраженную,чем во фракции молодых клеток, нацравленность изменений активности и кинетических параметров ШС.

Концентрация АТФ общей эритроцитарной массы на 7 сутки после кровопотери значительно превосходила уровень аденозинтрифосфата у интактных кроликов, была повышенной на 20 сутки и достоверно не отличалась от фо:на-. на 30 сутки после крово-потери. Содержание АДФ на 7 сутки и 20 сутки в ОЭМ было ниже, чем у интакных кроликов. Сопоставление ингибирующих концентраций АТФ с внутриклеточным содержанием аденозинтрифосфата во все сроки после кровопускания свидетельствует о том, что повышение ингибирующих концентраций АТФ сопровождается увеличением содержания АТФ в клетке.

Исследование фракции старых клеток на 20, 30 сутки после кровопотери при значительном омоложении этих фракций (по данным иммунных эритрограмм к 20 суткам после кровопотери клетки, образованные до анемизации животных, покидают кровяное русло, а срок жизни эритроцитов у интактных кроликов составляет 60 дней) свидетельствует о том, что при старении эритроцитов, продуцированных в условиях напряженного эрит-ропоэза, происходит более быстрое, чем в норме, снижение активности, изменение кинетических параметров фосфофруктоки-назы, уменьшение концентрации АТФ и повышение содержания АДФ, уменьшение ингибирующих концентраций аденозинтрифосфата, снижение активирующего действия АДФ.

Таким образом, проведенные исследования показали, что эритроциты, продуцированные в условиях напряженного эритро-поэза, первоначально характеризуются повышенной активностью фосфофруктокиназы, повышением для АТФ и фруктозо-6

-фосфата, большим сродством фермента к субстратам реакции, увеличением концентраций АТФ, вызывающих ингибирование фермента, повышением внутриклеточного содержания АТФ, снижением уровня АДФ, повышением чувствительности фосфофруктокиназы к активирующему действию АДФ. Выраженность изменений всех исследованных параметров зависит от степени напряженности эритропоэза, определяемой временем после кровопотери.

В процессе старения эритроцитов, образованных в ответ на анемизацию и функционирующих при дефиците клеток в кровяном русле, происходит более быстрое, чем в норме снижение активности и изменение кинетических характеристик фосфофрук-токиназы, уменьшение уровня АТФ в клетке, увеличение содержания АДФ.

В настоящее время известно, что лимитирующими ферментами гликолиза являются гексокиназа, фосфофруктокиназа и в меньшей степени пируваткиназа. Наименьшей активностью среди всех ферментов гликолиза обладает гексокиназа, на активность фосфофруктокиназы (несмотря на то, что в оптимальных условиях для фермента активность выше, чем активность гексо-киназы) может варьировать в широких пределах в зависимости от концентрации АТФ. Если изменение внутриклеточных концентраций АТФ не оказывает существенного влияния на гексокиназу, тогда как повышение концентрации АТФ вызывает ингибирование ФЖ.

Доведенные нами исследования показали, что во всех фракциях эритроцитов во все сроки после кровопотери наблюдается соответствие ингибирующих концентраций АТФ и внутриклеточного содержания аденозинтрифосфата.

Обнаруженная нами одинаковая направленность изменений активности, кинетических свойств ФФК, концентраций, вызывающих ингибирование фермента, а также внутриклеточного содержания АТФ и АДФ с интенсивностью гликолиза во фракциях молодых, старых клеток и общей эритроцитарной массе у интактных кроликов и на 7, 20, 30 сутки после кровопотери привела нас к заключению о решающем значении фосфофруктокиназы в поддержании уровня АТФ и ограничении скорости гликолиза при старении эритроцитов, продуцированных в условиях нормального и напряженного эритропоэза.

Изменение активности и кинетического поведения фосфофруктокиназы, снижение уровня АТФ при старении эритроцитов вызывает целый ряд последовательно развивающихся событий: нарушение работы ионных насосов (9, 10, 156, 225, 280, 278), повышение вдуро. риклеточной концентрации Са (70, 152 , 227), вызывающее агрегацию мембранных белков (29, 36, 41, 56, 82), активацию фосфоли-пазы А2 (43, 156, 166, 255) и накопление лизофосфатидов (3, 4, 23, 44): нарушение синтеза глютатиона, фосфорибозилпирофосфата, НАД4" (28, 38, 46, 62, 66, 69). Потеря липидов (2-4, II, 84) и структурные перестройки мембранных гликопротеидов в процессе старения приводят к изменению антигенной структуры эритроцитов и обеспечивает элиминацию старых клеток из кровяного русла (211, 212, 228, 135-139, 160, 203- 211).

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Смолина, Елизавета Викторовна, Красноярск

1. Авраамова T.B. Метаболическая активность и химический состав нри старении эритроцитов, образованных в условиях нормального и напряжённого эритропоэза. Часть 2.- Красноярск, 1978,с.68-69.

2. Авраамова Т.В., Боровкова Г.И. Альдолаза эритроцитов, продуцированных при нормальном и напряжённом эритропоэзе.- В кн.: Биофизика, физиология и патология эритрона. Красноярск, 1974, с.245-249.

3. Авраамова Т.В., Боровкова Г.И., Титова Н.М. Малатдегид-рогеназа эритроцитов, продуцированных в различных условиях кроветворения.- В кн.: Анализ регуляции в системе красной крови. Красноярск, 1975, с.175-180.

4. Авраамова Т.В., Зобова Н.В., Титова Н.М. Гликолитичес-кая активность при старении эритроцитов, образованных в условиях нормального и напряжённого эритропоэза,- В кн.: Нарушения метаболизма. Томск, 1974, с.98-101.

5. Авраамова Т.В., Груздева Е.И. Кинетические характеристики гексокиназы эритроцитов кроликов. В кн.: Химия и биохимия углеводов. Пущино, 1982, с.38.

6. Авраамова Т.В., Романова Е.М. Исследование АТФазной активности при старении эритроцитов.- В кн.: Гуморальная регуляция эритропоэза. Красноярск, 1982, с.81-86.

7. Авраамова Т.В., Романова Е.М. Гликопротеиды эритроцитов, продуцированных в условиях стресс-эритропоэза, вызванного острой одноразовой кровопотерей.- В кн.: Стресс, адаптация и функциональные нарушения. Кишинёв, 1984, с.5.

8. Авраамова Т.В., Титова Н.М., Радионов В.Н. Соотношение изоферментов лактатдегидрогеназы в эритроцитах, образованных в различных условиях эритропоэза.- В кн.: Анализ регуляции в системе красной крови. Красноярск, 1975, с. 181-189.

9. Авраамова Т.В., Титова Н.М. Содержание 2,3-дифосфогли-цериновой кислоты при старении эритроцитов.- В кн.: Гуморальная регуляция эритропоэза. Красноярск, 1982, с.74-80.

10. Авраамова Т.В., Титова Н.М., Зобова Н.В., Горбунова Н. Гликолиз эритроцитов, продуцированных при различных условиях эритропоэза.- Тезисы Ш Всесоюзного биохимического съезда. Рига, 1974, с.258.

11. Арчаков А.Й., Хажлов Э.М., Ли B.C., Сабурова В.й. Изменение микровязкости и липидного состава эритроцитарных мембран при старении эритроцитов кроликов,- Тезисы 17 Всесоюзного съезда геронтологов и педиатров, 1982, с.21.

12. Асатиани B.C. Ферментные методы анализа.- М.: Наука, 1969.- 740 с.

13. Атауллаханов А.И., Атауллаханов Ф.И., Витвицкий В.М., Жаботинский A.M. Связь между скоростью АТФ-потребдшцих процессов и концентрацией АТФ в интактных эритроцитах барана.-Биохимия, 1983, т.48, вып.З, с. 387-391.

14. Атауллаханов Ф.И., Витвицкий В.М., Жабойюкий A.M., Холоденко Б.Н., Эрлих Л.И. Количественная модель гликолиза эритроцита человека. Зависимость стационарной скорости гликолиза от концентрации АТФ.- Биофизика, 1977, т.ХХП, вып.З, с.483-487.

15. Атауллаханов Ф.И., Витвицкий В.М., Жаботинский A.M., Пичугин A.B., Помазанов В.В., Титкова Н.Ф. Влияние гликолиза на метаболизм аденилнтов в эритроцитах человека.- Биохимия, 1984, т.49, вып.1, с.104-110.

16. Ашкинази Д.И. Разрушение эритроцитов.- В кн.: Физиология системы крови. Физиология эритропоэза. Л.: Наука, 1979, с.274-296.

17. Баркова Э.Н. Роль эритропоэтина в регуляции эритропоэза.- В кн.: Физиология системы крови. Физиология эритропоэза. Л.: Наука, 1979, с.97-112.

18. Баркова Э.Н., Петров A.B. Ультраструктура эритрона.- В кн.: Физиология системы крови. Физиология эритропоэза. Л.: Наука, 1979, с.41-67.

19. Белобров П.И. Структурные изменения гемоглобина при длительном функционировании.- В кн. : Анализ регуляции в системе красной крови. Красноярск, 1975, с.150-161.

20. Бергельсон Л.Д. Мембраны, молекулы, клетки,- М. : Наука, 1982.- 183 с.

21. Бойер П.Д., Мелесе Т., Струп С Д., Еуд Д.М., Кандщал Р. П. Экспериментальные оценки механизма синтеза АТФ по типу изменения связывания. Материалы НУ конференции ФЕБО.- М, 1984, с.67.

22. Бойтлер Э. Нарушения метаболизма эритроцитов и гемолитическая анемия.- М.: Медицина, 1984. 254 с.

23. Болдырев A.A. Na-к-вависимая АТФаза как олигомерная система.- Биологическая химия: Итоги науки и техники, 1982, т. 17, с.75-146.

24. Борзова Л.В. Исследование электрофоретической подвижности эритроцитов при различных сроках и режимах хранения крови. Проблемы гематологии и переливания крови.- М.: Медицина, 1978, Л 3, с.40-41.

25. Боровкова Г.И. Содержание холестерина в эритроцитах, образованных в условиях нормального и напряжённого эритропоэза.-В кн.: Механизмы управления размножением и дифференциронкой клеток животных тканей. Красноярск, 1973, с.194.

26. Бриллиант М.Д., Воробьёв А.И. К вопросу о фракционировании эритроцитов по возрастным признакам.- В кн.: Вопросы биофизики, биохимии и патологии эритроцитов. Красноярск, 1961,с.62-65.

27. Брон С. Иммунохимия белков мембраны эритроцита.- В кн.: I Сов.-Швейц. симпоз. Биологические мембраны: структура и функции. Тбилиси, 1979, с.43.

28. Буглов Е.Д., Бондаренко B.C., Довгалев С.И., Борисюк М. В., Горельчик К.И., Клецко А.Д. Биохимические и функциональные особенности сорбентной крови. Проблемы гематологии и переливания крови.- М.: Медицина, 1978 , 3,с.30-33.

29. Еушнева И.А., Иващенко А.Т. Свойства мембраносвязанной НСОз-АТФазн эритроцитов.- Изв.АН КазССР. Сер. биол., 1981, вып.З, 43-46.

30. Бэр И., Хюбнер Д., Коппершлегер Г. Исследование начальной кинетики дрожжевой фосфофруктокиназы.- Материалы НУ конференции ФЕБО, М., I984,c.I5I.

31. Бютикофер П., Отт П., Бродбек У. Высвобождение мембранных везикул из эритроцитов человека.- Материалы Х1У конференции ФЕБО, М., 1984, с.354.

32. Васта В., Фарнараро М., Аллессандро А. Влияние инсулина на уровень фруктозо-2,6-дифосфата в фибробластах человека. -Материалы Х1У конференции ФЕБО, М., 1984, с. 160.

33. Величко Н.М., Фёдорова В.М. Фосфолипидный состав мембран молодых и старых эритроцитов кролика.- Цитология, 1981, т.ХХШ, вып.6, с.714-716.

34. Вельтшцев Ю.Е., Юрьева Э.А., Мусаев M.A., Шеманова Г.Ф. Фосфолилазы человека в норяе и патологии.- Вопр.мед.хим., 1981, т.27, с.441-449.

35. Воробьёв А.И., Бриллиант М.Д. О разных популяциях эритроцитов при некоторых анемических состояниях.- В кн.: Вопросы биофизики, биохимии и патологии эритроцитов. Красноярск, 1961, с.226-234.

36. Гительзон И.И., Гомзякова Н.В. Накопление метгемоглоби-на и возраст эритроцитов.- В кн.: Вопросы биофизики, биохимии и патологии эритроцитов. Красноярск, 1967, с.132-134.

37. Гительзон И.И., Макаров В.П., Нефёдов В.П. и др. Механиз мы управления эритропоэзом в организме.- ХШ Съезд Веес.физиол. об-ва им.И.П.Павлова, Баку, 1979, т.2, с.235-236.

38. Гительзон И.И., Терсков Й.А. Неоднородность эритроцитови её значение для исследования качественного состава красной крови.- В кн.: Вопросы биофизики, биохимии и патологии эритроцитов. Красноярск, i960, с.55-61.

39. Гительзон И.И., Терсков И.А. Распределение эритроцитов по стойкости в связи с физиологическим состоянием системы красной крови.- В кн.: Вопросы биофизики, биохимии и патологии эритроцитов. Красноярск, i960, с.71-84.

40. Гительзон И.И., Терсков И.А. Пути исследования регуляции в системе красной крови.- В кн.: Биофизика, физиология и патология эритрона. Красноярск, 1974, с.3-10.

41. Гительзон И.И., Терсков И.А., Мочкина G.E. Исследование функционального состояния эритрона методом эритрограмм.- В кн.: Вопросы биофизики, биохимии и патологии эритроцитов. Красноярск, i960, вып.2, с.85-89.

42. Горбунова H.A. Продолжительность полужизни эритроцитов сг51 у собак при кровопотерях различной тяжести.- Патол.физи-ол. и эксп.тер., 1968, £ 2, с.58-59.

43. Горизонтов П.Д. Закономерности неспецифической реакции кроветворных органов на действие чрезвычайных раздражителей.-Арх.патол., 1973, т.35, ^ 8, с.З-П.

44. Даум Г., Фелхофер X., Хофер X. Характеристика ферментов, фосфорилирующих и дефосфорилирующих фосфофруктокиназу из мышц.- Материалы НУ конференции ФЕБО, М., 1984, с. 170.

45. Демченко А.П., Орловская H.H. Изменения структуры и функции белков при старении и их возможные механизмы.- Успехи соврем.биол., 1981, т.92, Л 2, с.180-197.

46. Диксон М., Уэбб Э. Фериенты.- М.: Мир, 1982.- III7 с.

47. Иващенко А.Т. Механизмы влияния анионов на активность аденозинтрифосфатаз.-Науч.докл.высш.школы. Биол.науки., 1981, № 7, с. 5-15.

48. Иващенко А.Т. Некоторые свойства аниончувствительной АТФазы эритроцитов.- Вопр.мед. химии, 1980, т.26, $ 5, с.668-671.

49. Иващенко А.Т., Бушнева И.А. Выделение и свойства анион-чувствительной аденозинтрифосфатазы из мембран эритроцитов.-Биохимия, 1981, т.46, с.486-488.

50. Иващенко А.Т. Аниончувствительная АТФаза мембран эритроцитов крысы.- Биохимия, 1978, т.43, № 6, с.1086-1089.

51. Иващенко А.Т. Исследование свойств аниончувствительной АТФазы эритроцитов.- Вестн. АН КазССР, 1977, 'Л 8, с.68-70.

52. Игнатенко Т.В., Поэтова В.Т., Пономаренко Л.Д. Изменение гемоглобина при старении эритроцитов.т В кн.: Анализ регуляции в системе красной крови. Красноярск, 1975, с.168-174.

53. Иржак Л.И. К морфологии эритроцитов млекопитающих в связи с возрастными изменениями красной крови.- В кн.: Вощ&ы биофизики, биохимии и патологии эритроцитов. Красноярск, 1960, с.485-493.

54. Иржак Л.И. Газотранспортная функция эритроцитов в онтогенезе.- В кн.: Физиология системы крови, физиология эритропоэза. Л.: Наука, 1979, с.233-251.

55. Иржак Л.И. К проблеме клеточного полиморфизма.- В кн.: Биофизика, физиология и патология эритрона. Красноярск, 1974, с.3-10.

56. Иржак Л.И. Геиоглобины и их свойства.- М.: Наука, 1975.240 с.

57. Казначеев В.П., Пестовская Л.Г., Скальская Е.А. Изучение гемолиза эритроцитов в связи о влиянием гепарина.- В кн.: Вопросы биофизики, биохимии и патологии эритроцитов. Красноярск, 1960, с.251-261.

58. Канунго М. Биохимия старения.- М.: Мир, 1982.- 294 с.

59. Ковров Б.Г. Свойства гемоглобина как функция его возраста.» В кн.: Вопросы биохимии, биофизики и патологии эритроцитов. Красноярск, 1961, с.65-77.

60. Козлова Н.М., Слобожанина Е.И., Воробей A.B., Черницкий Е.А. Температурные переходы спектрина в растворе и в эритроци-тарных мембранах.- Биофизика, 1979, т.24, № 6, c.IIII-ШЗ.

61. Кольтовер В.К. Надёжность ферментативной защиты клетки от супероксидных радикалов и старение.- Докл. АН СССР, 1981, т.256, В I, с.199.

62. Копершлегер Г., Йохансон Г. Изучение чувствительности к АТФ у фосфофруктокиназы методом аффинного распределения в двухфазной системе С.В.-полиэтиленгликоль/декстран.- Материалы Х1У конференции ФЕБО, М,, 1984, с.151.

63. Корвин-Иавловская Е.Г., Кульминская A.C., Каралова Е.М. и др. Характеристика путей дифференцировки эритроидных клеток птиц в условиях анемии.- Цитология, 1983, т.25, с.148-155.

64. Корниш-Боуден Э. Основы ферментативной кинетики.- М.: Мир, 1979.- 279 с.

65. Костйч М., Зивкович Р., Мойзилович I. Регуляция гликолиза человека циклическими нуклеотидами.- Материалы ФЕБО, М., 1984, с.168.

66. Котык А., Яначек К. Мембранный транспорт.- М.: Мир, 1980.- 341 с.

67. Кулинский В.И., Колесниченко Л.С. Кинетические регуля-торные свойства дисульфидредуктазного фермента из печении мыши.- Биохимия, 1976, т.41, с.276-288.

68. Кунц К., Новакова 0., Мусил Я. Современная биохимия в схемах.- М.: Мир, 1984.- 215 с.

69. Курганов Б.И. Метод расчёта коэффициента Хилла для области ингибирования фермента избытком субстрата. Ингибирование фосфофруктокиназы избытком АТФ.- Биохимия, 1978, т.43, № 3, с.480-485.

70. Курганов Б.И. Аллостерические ферменты.- М.: Наука, 1978. 267 с.

71. Крюковский В.И. Клинические формы повреждения гемоглобина.- I.: Медицина, 1968,- 267 с.

72. Лакин Г.Р. Биометрия,- М.: Высш. школа, 1973.- 343 с.

73. Левин Г.Я., Шереметьев Ю.А. Роль ацетилнейраминовой кислоты и отрицательного заряда эритроцитов в их агрегации. -Проблемы гематологии и переливания крови, 1981, т.26, № 6, с.6-8,

74. Лодиш X., Ротмен Д. Сборка клеточных мембран.- В кн.: Молекулы и клетки.- М.: Мир, 1982, вып.7, с.149-176.

75. Лутц Х.У., Кей М.М. Удаление стареющих эритроцитов человека из кровообращения. Рецепторный белок для аутологичного

76. В кн.: I Сов.-Швейц. симпоз. Биологические мембраны: структура и функции. Тезисы докладов, Тбилиси, 1979, с.46.

77. Медведев Ж.А. Биохимические механизмы старения ядерных и безъядерных эритроцитов.- Цитология, 1973, т.15, с.963-975.

78. Медведев Л.Н., Авраамова Т.В. Содержание к+, яа+ в эритроцитах анемизированных кроликов.- Изв. СО АН СССР, Сер. биол. наук, 1974, вып.З, Л 15, с.155-158.

79. Методы биохимических исследований.- Л.: ЛГУ, 1982.272 с.

80. Мецлер Д. Биохимия.- М.: Мир, 1980.- 487 с.

81. Митропольский A.K. Техника статистических вычислений. -М.: Физматгиз, 1961, с.252-260, 439.

82. Мосягина Е.И., Фёдоров H.A., Гудим В.И. и др. Эритропо-эз.- В кн.: Нормальное кроветворение и его регуляция. М.: Медицина, 1976, с.341.

83. Ньюсхолм Э., Старт К. Регуляция метаболизма.- М.: Мир, 1977.- 407 с.

84. Овчинников Ю.А., Иванов В.Т., Шкроб А.М. Мембраноактив-ные комнлексоны.- М.: Наука, 1974, с.9.

85. Плохинский H.A. Биометрия.- Новосибирск, 1961,- 364 с.

86. Попова C.B., Мякишев A.C. Определение параметров регу-ляторных ферментов из кинетических данных.- Молекулярная биология, 1983, т.17, вып.1, с.93-100.

87. Поэтова В.Т. Изменения в качественном составе эритроцитов, продуцированных при напряжённом эритропоэзе.- Дисс. канд.мед.наук, Красноярск, 1965.- 197 с.

88. Поэтова В.Т., Гительзон И.И., Терсков И.А. Изменения в качественном составе эритроцитов, продуцированных при напряжённом эритропоэзе.- В кн.: Вопросы биофизики, биохимии и патологии эритроцитов, М.: Наука, 1967, с.27-31.

89. Поэтова В.Т., Гительзон И.И., Терсков И.А. К вопросу о механизме имунного гемолиза.- В кн.; Вопросы биофизики, биохимии и патологии эритроцитов. М.: Наука, 1967, с.31-35.

90. Поэтова В.Т., Гительзон И.И., Янкина В.И., Волкова Н.Е. Реакция кроветворной системы на стресс-воздействие.- В кн.: Стресс, адаптация и функциональные нарушения. Кишинёв, 1984, с.181.

91. Пухова Я.И. Механизмы и природа гемолиза в норме и при экстремальных воздействиях.- Красноярск, 1977.- 17 е., препринт.

92. Пухова Я.И. Аутоиммунный клеточный механизм физиологического разрушения эритроцитов,- Новосибирск: Наука, 1979.136 с.

93. Пухова Я.И., Гительзон й.й., Терсков И.А. Аутоиммунный гемолиз как стериотипная физиологическая реакция при эритро-поэзе,- В кн.: Анализ регуляции в системе красной крови. Красноярск, 1975, с.139-145.

94. Духова Я.И. О клеточных факторах аутоиммунитета в механизме регуляции эритропоэза.- В кн.: Радиационная микробиология и иммунология. М.: Наука, 1977, с.57.

95. Пухова Я.И., Гительзон Й.Й., Терсков И.А. О роли аутоиммунных реакций в механизме действия кобальта на эритропоэз.-йзв. СО АН СССР, Сер.биол. наук, 1975, * 5, вып.1, с.114-117.

96. Рапонович Н.И., Цыбанов С.Ж., Радионов Ю.В. Выбор модели ассоциации мышц кролика методом математического моделирования.- Биохимия, 1980, т.45, вып.7, с.1245-1265.

97. Рапопорт С. Белки, ингибирутощие дыхание: принцип регуляции процессов созревания клетки.- Биохимия, 1974, т.39, с. 359-366.

98. Рапопорт С., Марецки Д., Симе В. Баланс и регуляция реакций, приводящих к образованию и использованию АТФ.- Материалы XI7 конференции ФЕБО, М. , 1984, с.

99. Рубина Х.М. Биохимия эритроцитов.- В кн.: Физиология системы крови. Физиология Эритропоэза. I., 1979, с.97-112.

100. НО. Рябов С.И., Шостка Г.Д. Молекулярно-генетические аспекты эритропоэза.- Л.: Медицина, 1973.- 280 с.

101. Симе В., Дубель В., Думдей Р. и др. Оценка зависимых от потребления АТФ процессов в ретикулоцитах кролика.- Материалы Х1У конференции ФЕБО, М., 1984, с.

102. Старинова Т.Т., Доррер Г.А. Закономерности эритропоэзапри острой постгеморрагической анемии,- В кн.: Анализ регуляции в системе красной крови. Красноярск, 1975, с.15-32.

103. Старинова Т.Т., Макаров В.П. Зависимость интенсивности эритропоэза и времени восстановления эритроцитарного уровня от глубины острой кровопотери.- В кн.: Биофизика, физиология и патология эритрона. Красноярск, 1974, с.44-50.

104. Стародуб Н.Ф., Грицак А.Н. Биосинтез фракций гемоглобина крыс в условиях нормального и усиленного эритропоэза.- Биохимия, 1979, т.44, № 8, с.1493-1501.

105. Стародуб Н.Ф. Молекулярные основы дифференцировки эри-троидных клеток.- Успехи совр.биол., 1980, № I, с.124-140.

106. Терентьева Э.И., Фёдоров H.A., Горбунова H.A. Об изменении субмикроскопической организации эритроцитов после острой кровопотери у собак,- Бюлл.экспер.биол. и мед., 1970, № 9, с.106-109.

107. Тодоров И. Клинические лабораторные исследования в педиатрии.- София: Медицина и физкультура, 1968.- 1064 с.

108. Уайт А., Хендлер Ф., Смит Э. и др. Основы биохимии.- М.: Мир, 1981,- 1978 с.

109. Ужанский Я.Г. 0 механизме регенерации эритроцитов.- В кн.: Биофизика, физиология и патология эритрона. Красноярск, 1974, с.35-43.

110. Ужанский Я.Г. Стресс и гемолиз.- Проблемы гематологии и переливания крови, 1973, Л II, с.13-15.

111. Ужанский Я.Г. Физиологические механизмы регуляции эритропоэза.- М.: Медицина, 1968, с.

112. Фёдоров H.A., Горбунова H.A. Изучение продолжительности жизни эритроцитов у собак при острой и хронической кровопоте-ре.- Пат.физиол. и эксп.терапия, 1963, т.7, с.65-67.

113. Фершт Э. Структура и механизм действия ферментов.- М.:1. Мир, 1980,- 432 с.

114. Фрайфелдер Д. Физическая биохимия.- М.: Мир, 1980.- 582с.

115. Хайнрих Р., Дынник В.В., Сельков Е.Е. Математическая модель углеводного энергетического обмена.- Биохимия, 1980, т.45, вып.6, с.963-972.

116. Хрипач Н.Б. Закономерности реакции эритроцитарного звена системы крови на многократные возмущения кровопотерей.- В кн.: Анализ регуляции в системе красной крови. Красноярск, 1975, с.83-89.

117. Хрипач Н.Б., Макаров В.П., Терсков И.А. 0 закономерностях реакции эритроцитарного звена на возмущение кровопотерей. В кн.: Биофизика, физиология ж патология эритрона. Красноярск, 1974, с.55-63.

118. Черницкий Е.А., Воробей А.В. Структура и функции эритро-цитарных мембран.- Минск, 1981.- 215 с.

119. Черняк Н.Б. Биохимические процессы при созревании и старении эритроцитов.- В кн.: Нормальное кроветворение и его регуляция. М.: Медицина, 1976, с.159-186.

120. Якобаш Г., Герт К., Тамм Р. и др. Свойства фосфофрукто-киназы. Материалы Х1У конференции ФЕБО, М., 1984, с. 150.

121. Atgar N.S., Smith I.e. Enzymes and glycolitic intermediates in the rabbit erythrocyte.- Enzyme, 1974, v.17, p.205-209.

122. Ataullakhanov F., Vitvitsky 7., Zhabotinsky A. et al. The Regulation of Glycolysis in Human Erythrocytes. The Dependence of the Glycolytic Flux on the ATP Concentration.- Eur.J. Biochem., 1981, v.115, p.359-365.

123. Atkinson D.e. Adaptation of enzymes for regulation of ca-tabolytic function.- Biochem.Soc.Symp., 1976, v.41, p.205-223.

124. Atkins G.L. A New Technique for Maintaining and Monitoring Conscious, Stress-free Rabbits in a Steady State: Its Use in the

125. Determination of Glucose Kinetics.- Quarterly J. of Exper.Physiol., 1980, v.65, p.63-75.

126. Au K.S. Relationship between rabbit erythrocyte membrane anion-sensitive Mg+-ATPase and (Ca+2 Mg+2)-ATPase.- Int.J.Bio-chem., 1979, v.10, n.8, p.687-689.

127. Balduini C., Brovelli A,, Duini C.L., Airoldi J. Reversible and irreversible structural modification of erythrocyte membrane.- Acta Biol. Med. Germ., 1981, v.40, p.401-408.

128. Balduini C., Sinigaglia P., Ascori E., Balduini C., Behaviour of young and old desialylated rabbit erythrocytes in vivo. Hoppe-Seyler*s Z.Physiol.Chem., 1978, v.359, p.1573-1577.

129. Balduini C., Brovelli A., Balduini C.L., Accari E, Structural modifications in membrane glycoproteins during the erythrocyte life-span.- Ric,Clin.Lab., 1979, v.9, n,1, p. 3-22.

130. Balduini C., Brovelli A., Pallavicini G. In vitro aging of young and old human erythrocytes, Glycoconjugates.- Proc. 5-th Int.Symp., Kiel, Sept., 1979, Stuttgart, 1979, p.469-479.

131. Balduini C.L., Sinigaglia P., Ascari E., Balduini C. Aging of rabbit red cells in vitro: membrane modifications and their possible role in red cell survival in vivo.- Acta Haematol., 1981, v.65, n.4, p.263-269.

132. Ballas S.K. Disorders of the red cell membrane: a reclassification of haemolytic anemias.- Amer.J.Med.Sci., 1978, v.276, n.1, p.4-22.

133. Bartoaz G. Bovine erythrocyte membrane: does not act as a molecular sieve or allow for haemolytic fractionation of red cells according to age.- Comp.Biochem. and Physiol., 1981, v. 369, p.273-275.

134. Bartosz G. Aging of the erythrocyte. VI. On the possible causes of inactivation of red cell enzymes,- Mech. Aging and

135. Develop., 1980, v.13, p.379-385.

136. Bartosz G. Aging of the erythrocyte. IV. Spin label studies of membrane lipids, protein and perneability.- Biochim* et Biophys. Acta, 1981, v.644, n«1, p.69-73.

137. Bartosz G., Grzelinka E., Wagner I. Aging of the erythrocyte. XIV. ATP content does decrease.- Experientia, 1982, v.38. p.575.

138. Bartosz G,, Soszynski M., Wasilewski A. Aging of the erythrocyte. XII. Protein composition of the membrane.- Mech. Aging and Develop., 19,82, v. 19, p.45-52.

139. Bartosz G., Szabo G., Szollosi J., Damjanovieh S. Ageing of erythrocyte. IX. Fluorescence studies on changes in membrane properties.- Mech. Ageing and Develop., 1981, v.16, p.265-274.

140. Baumann R., Dutz H., Graffi A. et al. Einige Eigenschaften der Phosphofructokinase von Ratten Erythrocytes- Acta Biol, et Med.Germ., 1969, v.23, p.1-17.

141. Bennet G.D., Kej M.M.B. Homeostatic removal of senescent murine erythrocytes by splenic macrophages.- Exp.Haematol,, 1981, v.9, n.3, p.297-307.

142. Bennet V., Stenbuck P.I. Human erythrocyre ankirin. Purification and properities.- J.Biol.Chem., 1980, v.255, n.6,p.2540-2548.

143. Beutler E. General aspects of erythrocyte physiology and biochemistry.- Exp. Eye Res., 1971, v.11, p.261-263.

144. Beutler E, Red cell metabolism. A manual of biochemical methods.- Grune Stratton, New-York-San-Francisco-london, 2nd, ed., 1975,- 160pp.

145. Beutler E. Red cell: general considerations.- In: Red Blood Cell and lens Metabolism. (Ed. S.Srivastava). New-York, e.a., 1980, p.11-14.

146. Beutler E., Matsumoto P., Guinto E. The effect of 2,3-DPG on red cell enzymes.- Experientia, 1974, v.30, p.190-192.

147. Bjerrum 0.1., Hawkins M., Swanson P. et al. An immunochemical approach for the analysis by membrane protein alterationp.in Ca loaded human erythrocytes.- J.Supramol.Struct, and Biochem., 1981, v.16, p.17-29.

148. Bladier D.L., Gattengno L., Perret G. et al. Changes in carbohydrate content of the human erythrocyte membrane during ageing in vivo. Glycoconjugates.- Proc. 5th Int.Symp., Kiel, Sept., 1979, Stuttgart, 1979, p.476-477.

149. Bock P.E,, Frieden G. Phosphofructokinase. I. Mechanism of the pH-dependent inactivation and reactivation of the rabbit muscle enzyme.- J.Biol.Chera., 1976, v.251, n.18, p.5630-5636.

150. Van den Bosch A., Arsman A. A review of methods of phos-pholipase determination.- Agents and Actions, 1979, v.9»p. 382389.

151. Bossi V. Determinants of erythrocyte ageing: an appraisal. Brit.J.Haematol., 1981, v.48, n.4, p.515-522.

152. Brewer G.J. Adenosintriphosphate,- In: Biochemical Methods in Red Cell Genetics. (Ed.I.J.Yunis).- New-York, Acad.Press, 1969, p.201-230.

153. Brewer G.J. General red cell metabolism.- In: The Red Blood Cell, Vo3,I. (Ed.D.MacN, Sirgenor). 2nd ed., New-York: Acad. Press, 1974, p.387-433.

154. Brovelli A., Pallaveini G., Airoldi G., Balduini C. Supra-molecular assembly of membrane constituents during in vitro ageing of human erythrocytes.- Proties Biol. Fluids Proc. 29th Gb1-log., Brussels, 1981, v.29, Oxford e.a., 1982, p.337-340.

155. Cabantchik I.L. In vivo implantation of membrane proteins: A new tool in membrane transport research.- Hoppe Seyler*s Z.

156. Physiol.Chem., 1980, v«361, ii.11, p.1611.

157. Cambou B., Laurent M., Her va gault J.-P., Thomas D. Modulation of Pbosphofructokinase behaviour by Chemical Modifications during the Immobilisation Process.- Eur.J.Biochem., 1981,v.121, p.99-104.

158. Cavieres Y.D., Glynn I.M. Sodium-sodium exchange through the sodium pump: the roles of ATP and ADP,- J.Physiol. (Gr.Brit.) 1979, v.297, p.637-645.

159. Chapman R.G., Hennessey M.A., Watersdortph A.M. et al. Erythrocyte metabolism. V. Levels of glycolytic enzymes and regulation of glycolysis.- J.Clin.Invest., 1962, v.41, p.1249-1256.

160. Chapman R.G., Schauburg L. Glycolysis and glycolytic enzyme activity of aging red cells in man.- Brit.3. Haematol.,197$ v.13, p.663-678.

161. Chiba H., Narita H., Yanagawa S. et al. Changes in the enzymes related to 2,3-diphosphoglycerate metabolism in developing erythroid cells.- Acta Biol.Med.Germ., 1981, v.40, p.633-637.

162. Cohen N.S., Elholm I.E., Luthra M.G., Hanahan D.J. Biochemical characterization of density-separated human erythrocytes.-Biochim. et Biophys. Acta, 1976, p.229-242.

163. Choy I.M., Wong S.L., Lee C.L. Changes in surface carbohydrates of erythrocytes during in vivo aging.- Blochem. and Biophys.Res.Commun., 1979, v.91, n.2, p.410-415.

164. Coetzer T., Lail S.S. Cross-linking of membrane proteins of metabolically-depleted and calcium-loaded erythrocytes.- Brit.

165. J.Haematol,, 1979, v.43, p.375-390.

166. Coetzer T., Lail S, Membrane protein complexes in GSH-dep-leted red cells«- Blood, 1980, v.56, n.2, p.159-167.

167. Clari G,, Nuchielin E., Moret V. Interrelationships between protein kinases and spectrin phosphorylation in human erythrocytes.- Biochim et Biophys. Acta, 1981, v.640, n.1, p.240-251.

168. Clari G., Nuchieli E., len S., Moret V. Maturation-related change of the protein kinase activity in the rabbit red blood cells.- Biochim. et Biophys. Acta, 1981, v.677, n.3-4, p.403-407.

169. Grandall E.D., Winter H.F,, Schaeffer J.D., Bidani A. Effect of salicylate on HG0^/C1" exchange across the human erythrocyte membrane.- J. Membrane Biol., 1982, v.65» n.1-2, p.139-145.

170. Debski R., Rynca I. Glucose. ATP and ADP levels in the red blood cells of some domestic animals.- Acta Physiol.Pol,, 1976, v.26, n.6, p.587-590.

171. Davidson W.D., Tanaka K.R. Factors affecting pentosephosphate pathway activity in human red cells.- Brit,J.Haematol., 1972, v.23, p.371-386,

172. Deuticke B. Monocarbox£late transport in erythrocyres.- J. Membrane Biol., 1982, v.70, p.89-103.

173. Deuticke B,, Haest C.W., Fischer T.M. Zell- und Membranphysiologie der Erythrozyten: Facten und Konzepte (Referat).-Anat.Anz., 1980, v.148, Erganzungsch., p.203-219.

174. Deutsch J., Blumenfeld 0.0. Membrane protein synthesis Ijy rabbit reticulocytes.- Biochem. and Biophys,Res.Commun., 1974, v.58, p.454-459.

175. Dubiel W., Müller M., Rathman I. et al. Determination and characteristics of energy-dependent proteolysis in rabbit reticulocytes.« Acta Biol.Med.Germ., 1981, v.40, p,625-628.

176. Duhm J. 2,3-diphosphoglycerate metabolism of erythrocytes and oxygen function of blood»- In: Erythrocytes, thrombocytes, leucocytes. Georg Thime, Stuttgart, 1973, p.149-157.

177. Dundar J.C., Ralston G#B. Hydrodynamic characterization of the heterodimer of spectrin.- Biochim. et Biophys. Acta, 1981, v.667, n.1, p,177-184.

178. Eisinger J., Flores I., Salhany J.M. Assotiation of cyto-sol hemoglobin with the membrane in intact erythrocytes.« Proc. Nat.Acad.Sci. USA, Biol.Sci., 1982, v.79, n.2, p.408-412.

179. Etiemble J., Picat Ch., Blatrix Ch., Boivin P. Inherited Erythrocyte Phosphofructokinase Deficiency: Molecular Mechanism. J. Human Genetics, 1980, v.55, p.383-390.

180. Etiemble J., Simeon J., Picat Ch., Boivin P. Influence of2free Mg on the kinetics of human erythrocyte phosphofructokinase.- Biochimie, 1981, v,63f p.61-65.

181. Faria I.B., El-Dorry H.F.A., Bacila M. Multiple Forms of Phosphofructokinase in Developing Rabbit Heart and Skeletal Muscle.- Ann.Acad.Brasil.Ciens., 1975, v.43, p.547-549.

182. Feo G., Trujillo Y. Activation of Phosphofructokinase by Divalent Anions.- J.Biochem. and Biophys., 1980, v.199, n.1, p.1-6.

183. Feo G., Monandas N. Clarification of role of ATP in red cell morphology and function.- Nature, 1977, v.265, n*5590, 13, p.166-168.

184. Ford D.L., Omachi Akira. Influence of cyclic 3',5'-AMP on glycolysis in human erythrocytes.- Biochim. et Biophys. Acta, 1972, v.279, p.587-592.

185. Fornaini G. Biochemical modifications during the lifespan of the erythrocyte.- Ital.J.Biochem., 1971, v.XVI, n.5, p.257-330.

186. Foxwell B.N.J,, Tanner M.I.A. Synthesis of the erythrocyte anion-transport protein. Immunochemical study of its incorporation into the plasma membrane of erythroid cells.- Biochem.J., 1981, v.195, n.1, p.129-137.

187. Frieden G., Gilbert H.R., Bock P.E. Phosphofructokinase. III. Correlation of the regulatory kinetic and molecular properties of the rabbit muscle enzyme.- J.Biolog. Chem., 1976, v.251, n.18, p.5611-5647.

188. Furuya E., Uyeda K. A Novel Enzyme Catalyzes the Synthesis of Activation Factor from ATP and d-Fructose-6-P.- J.Biol.Chem., 1981, v.256, n.14, p.7109-7112.

189. Gattengo L., Perret L., Fabia F. et al., In vivo ageing of human erythrocytes and cell-surface labelling by D-galactose oxydase and sodium borotritide.- Carbohyd. Res., 1981, v.95, n.2, p.283-290.

190. Gansoni A.M., Barros J.P., Marti H.R. Red cell ageing and death.- Vox.Sang., 1976, v.30, p.161-174.

191. Gross J., Rapoport M., Rosenthal S., Syllni-Rapoport J. Criteria of maturity and age of red blood cells.- Acta Biol.Med. Germ., 1981, v.40, n.4-5, p.665-668.

192. Gummelt M., Unger It,, Schevex C.H., Gever G. Deformability of erythrocytes incubated at various pH-values.- Acta Biol.Med. Germ., 1981, v.40, p.379-383.

193. Harvey I., Kaneko J,J. Metabolism of the erythrocytes.-J.Cell.Physiol., 1976, v.89, n.2, p.219-229.

194. Hegner D. Age-dependence of molecular and functional changes in biological membrane properties,- Mech, Aging and Develop,, 1980, v.14, n.1-2, p.101-118.

195. Heusinkveld R.S., Goldstein D.A., Weed R.S., Jacelle P.L. Effect of protein modification on erythrocyte membrane mechanical properties,- Red Cell Rhed,, Berlin, 1978, p.174-182,

196. Heylen A,, Schaftingen E.V., Hers H.-G. The stimulation of phosphofructokinase from human erythrocytes by fructose 2,6-biphosphate, FEBS letters, 1982, v.143, n.1, p.141-143,

197. Hochman G. Biochemistry of ageing. II.- Int.J.Biochem., v.12, p.515-522.

198. Holman G.D, An allosteric pore model for sugar transport in human erythrocytes.- Biochim, et Biophys. Acta, 1980, v.599» n,1, p.202-213.

199. Hofer H.W., Allen Benja L., Kaeini M.R. et al. Phosphofructokinase from Ascarissuum. Regulatory kinetic studies and activity near physiological condition.- J.Biol.Chem., 1982, n.7,p.3801-3806.

200. Hofer H.W. In vivo phosphorylation of skeleta muskle phosphofructokinase.- Eur.J.Biochem., 1980, p.413-423.

201. Hubbard A.L., Cohn L.A. The enzymatic iodination of the red cell membrane.- 7 Cell Biol,, 1972, n.55, p.380-405.

202. Ingrig M., lindermans-Bânsiger, Arnold T. Van der Steen, Gerard E.I.Staal. Réévaluation of the kinetic data of human erythrocyte phosphofructokinase,- J.Molec. Medicine, 1977, v.1, n.4, p.299-309.

203. Jacobasch G., Minakami S., Rapoport S.M. Glycolysis of the erythrocyte.- In: Cellular and Molecular Biology of Erythrocytes. (Eds. H.Joschikawa, S.M.Rapoport), Tokyo, University Press, 1974, p. 55-92.

204. Jain S.K., Hochstalm P. Polymerization of membrane components in aging blood cells.- Biochem.Biophys,Res.Commun., 1980, v.92, n.1, p.24-7-254.

205. Jaworek D, et al#- In: H.U.Bergmeyeer: Methoden der enzy-matischen Analyse. 3 Auslage. Bd.11, Verlag Chemie, Weinheim, 1974, s.2178.

206. Joshikava H., Minakami S. Regvilation of glycolysis in human red cells.- Polia Haematol., 1968, v.89, p.357-375.

207. Kahn A., Gottreau D., Meinhofer M. Purification of Phosphofructokinase from human platelets and comparison with the other phosphofructokinase forms.- Biochem. and Biophys. Acta,1980, v.611, n.1, p.114-125.

208. Kay N.M.B. Role of physiologic autocentiboby in the removal of senescent human red cells.- J.Supramol., Struct., 1978, v.9, n.4, p.329-341.

209. Kay N.M.B. Role of physiological autoantibody in the removal of senescent human red cell.- J.Supramol.Struct., 1979, v.9, p.555-567.

210. Kay N.M.B. Mechanism of removal of senescent cells by human macrophages.- Proc.Nat.Acad.Sci. USA, 1975, v.72, p,3521-3525.

211. Koerner A.W., Ronald I. Voll Abdel-Latife Ashour, Ezrat S. Gounathan. The fructoso-6-phosphate site of phosphofructokinase.-J. Molecular Med., 1977, v.251, p.2983-2986.

212. Koler R.D., McClung M.R., Peterson L.L., Jones M.B. Physiologic and genetic alterations in human red cell DPGM.- Haemoglobin, 1980, v.4, n.586, p.593-600.

213. Krystek E., Hofer H. Isolation of a phosphorylated peptide from rabbit muscle phosphofructokinase.- Biochem.Soc,Trans.,1981, v.9, n.2, p. 239.

214. Kühn B.I., Jacobsch G. Kinetic properties of the phosphofructokinase from erythrocytes of rats and rabbit.- Eur.J.Biochem. , 1974, v.43, p.437-442.

215. Kühn B.I., Jacobsch G., Rapoport S. Einige Eigenschaften der Phosphofructokinase von Ratten-erythrozyten.- Acta Biol, et Med.Germ., 1969, v.29, p.1-17.

216. Kühn B., Jacobsch G., Rapoport S. Identity of sulfate and phosphate activation of the phosphofructokinase from erythrocytes.- FEBS Letters, 1974, v.38, n.3, p.354-356.

217. Kwitkowska I.J. Rabbit reticulocyte phosphofructokinase purification and some properties.- Biochim. et Biophys. Acta, 1973, v.321, n.2, p.475-483.

218. Kyd Jennelle M., Bagnara Aldo S. Adenosine kinase from human erythrocytes: determination of the conditions required for assay in crude hemolysates.- Clin.Chim. Acta, 1980, v.103, n.2, p.145-153.

219. Lagrange J.L., Meienhofer M.C., Kahn A. Partial proteolysis of human L-type phosphofructokinase.- Enzyme, 1981, v.26, n.6, p.315-320.

220. Layzer R.B., Conway M.M. Multiple isoenzymes of human phosphofructokinase.- Biochem. and Biophys.Res.Commun., 1970, v.40, n.6, p.1259-1261.

221. Layzer R.B., Rowland L.P. Physical and kinrtic properties of human phosphofructokinase from skeletal muscle and erythrocytes." J.Biochem., 1969, v.224, n.14, p.3823-3831.

222. Lichtman M. Does ATP decrease exponentially during red cell aging?- Nauv.Rev.Pranc.Hematol., (1975), 1976, v.15, p.625-632.

223. Light N.D., Tanner M.J.A. Changes in x surface membrane components during the differentiation of rabbit erythroid cells. Biochem.J., 1977, v.164, n.3, p.565-578.

224. Lionetti P. Pentose phosphate pathway in human erythrocytes. In: Cellular and. Molecular Biology of erythrocytes. (Eds. H, Joshikawa, S.Rapoport), Tokyo, University Press, 1974, p. 143166.

225. Liu S.C., Palek J. Metabolic dependence of protein arrangement in human erythrocyte membranes. II. Crosslinking of major protein in ghosts from fresh and ATP-depleted red cells,- Blood, 1979, v.54, n.5, p.117-130.

226. Lilian L. Purification and some properties of phosphofruc-tokinase from human erythrocytes.- Arch, of Biochem. and Biophys. 1972, v.148, n.2, p.607-613.

227. Lodish H., Small B. Membrane propeins synthesized by rabbit reticulocytes.- J.Cell.Biol., 1975, v.65, p.51-64.

228. London J. Metabolism of mammalian erythrocyte.- Bull. New-York Acad.Med., 1960, v.36, p.79-96.

229. Lorand L., Weissmann L. et al. Role of the intrinsic tran-sglutaminase in the Ca -mediated crosslinking of erythrocyte propeins.- Proc.Nat.Acad,Sci. USA, 1976, v.73, p.4479-4481.

230. Lutz H, A cell-age specific antigen on senescent human red blood cells.- Acta Biol.Med.Germ., 1981, v.40, p.393.

231. Lutz H.V., Kay N.M.B. An age-specific cell antigen is present on senescent human red blood membranes. A brief note.-Mech. Ageing and Develop., 1981, v.15, n.1, p.65-75.

232. Magnani M., Piatti E., Dacha M., Pornaini G. Comparative studies of glucose metabolism on mammal's red blood cells.- Corap. Biochem. end Physiol., 1980, v.1367, p.139-142.

233. Magnani M., Stoccki Y., Rossu M. et al. Decay pattern of rabbit erythrocyte hexokinase in cell aging.- Mech. Ageing and Develop., 1979, v.11, p.209-217.

234. Mennecier P., Weber A., Tudury C., Dreyfus I. Modifications of aldolase during in vivo aging of rabbit red cells.- Biochimie, 1979, v.61, p.79-85.

235. Mansour T.E., Wakid N., Sprouse H.M. Purification, visualization and properties of sheep heart phosphofructokinase.- J. Biol.Chem., 1966, v.241, n.7, p.1512-1521.

236. Maretzki D., Klatt D., Reimann B., Rapoport S. ATP-utili-zing reaction of human erythrocyte membranes and the influence of modulator proteins.- Acta Biol.Med.Germ., 1981, v,40, p.479-486.

237. Martensen T.M., Mansour T.E. Studies of Heart Phosphofructokinase. Use of Fructose-6-sulphate as an Alternative Substrate to study the mechanism of Action and Active Site Specificity.-J.Biol.Chem., 1976, v.251, n.12, p.2664-3670.

238. Minakami S, Microcalorimetric studies of red cell glycolysis.» Hemoglobin, 1980, v.4 (56), p.575-579.

239. Minakami S., Joshikawa H. Studies on erythrocyte glycolysis. I. Free energy changes and rate limiting steps in erythrocyte glycolysis.- J.Biochem., 1966, v.59, p.697-702.

240. Mircevova L., Kodicen M. Study of Mg+2-ATPase.- Studia Biophys., 1981, v.85, n.1, p.27-28.

241. Miwa S. Pathological and biochemical observations on the mechanism of red cell destruction due to aging.- Asian Med.J., 1974, v.17, p.489-495.

242. Motthias 0., Reinhart B., Kuhn B., Jacobach G, A mathematical model for the influence of fructose-6-phosphate, ATP, potassium, ammonium, and magnesium of the phosphofructokinase.-Eur.J.Biochem., 1974, v.49, n.1, p.169-178.

243. Miieller E., Franco M.N», Schauer R. Involvement of membrane galactose in vivo and in vitro sequestration of dialyzated erythrocytes.- Hoppe-Seyler's Z.Physiol.Chem., 1981, v.362, n.12, p.1615-1620.

244. Mtiller M., Dabiel W. et al. Determination and characteristics of energy-dependent proteolysis in rabbit reticulocytes. Eur.J.Biochem., 1980, v.109, p.405-410.

245. Nach G.B., Wyard S.C. Erythrocyte membrane elasticity in bio- during ageing,- Biochim. et Biophys. Acta, 1981, v.643, n.2, p.269-275.

246. Nakao M. ATP-requiring phenomena in red cell membranes.-In: Cellular and Molecular Biology of Erythrocytes. (Eds. H. Joshikawa, S.Rapoport), Tokyo, University Press, 1974» p.35-51.

247. Nakao M., Nakajama T., Nagakura K., Ohta H. Some problem on enzyme determination in red cells mainly due to the membrane structure.- Hemoglobin, 1980, v.4, n.5-6, p. 707-715.

248. Nakao M., Nakao T., Nakajama 0?., Nagai F., Dogen M, Further investigation on ATP metabolism and red cell membrane integrity.- Acta Biol.Med.Germ., 1981, v.40, p.1003-1008.

249. Nakashima H., Makino S. Purification and characterization of band 3, the major intrinsic membrane protein of the bovine erythrocyte membrane.- J.Biochem., 1980,- v.84, n.3, p.899-910.

250. Nissler K., Schellenberger W., Wolf I., Hofmann E. The effect of temperature change on the kinetic behaviour of yeast phosphofructokinase.- Acta Biol.Med.Germ.,1976, v.35, p.1273-1277.

251. Ohnishi S.F., Barr I.R. A simplified method of quantita-ting protein using beuret and phenol reagents.- Analyt.Biochem.,1978, v.86, p.193-200.

252. Otto M., Heinrich R., Jacobasch G., Rapoport S., A Mathematical model for the Influence of Anionic Effectors on the phosphofructokinase from Rat Erythrocyte.- Eur.J.Biochem., 1977, v.74, p.413-420.

253. Otto M., Jacobasch G., Svetina S., Properties of the hexo-kinase-phosphofructokinase system on the basis of an extended PFK-model.- Acta Biol.Med.Germ., 1977, v.36, p.581-585.

254. Otto M., Svetina S. A model for the description of allo-sterlc and association features of phosphofructokinase.- J. Studia Biophysica, 1977, v.65, n.1, p.47-54.

255. Pappert G., Schulbert D. Band 3 protein from erythrocyte membranes: Self-association in detergent solution.- Biochem. Soc.Trans., 1981, v.9, n.2, p.249.

256. Parra G., Schewe T., Rapoport S. On the presence of calcium-stimulated phospholipase A in the stroma-free supernatant fluid of rabbit reticulocytes.- Acta Biol.Med.Germ., 1975, v.34, p.1075-1077.

257. Pettigrew D.W., Friden 0. Correlation of kinetic and structural properties of muscle phosphofructokinase.- Washington University School of Medicine, 1980, p.369-376.

258. Phillips D.S., Morrison M. Exposed proteins on the intact human erythrocyte.- Biochemistry, 1980, v.10, p.1766-1771.

259. Pilkis S.G., Maghrabi M.R., Pilkins J. et al., Fructose 2,6-biphosphate. A new activator of phosphofructokinase.- J. Biol.Chem., 1981, v.256, n.7, p.3171-3174.

260. Pinilla M., Lugue L. Antagonistic effect of cAMP and cGMP on the kinetic behaviour of phosphofructokinase from erythrocytes.- Acta Biol.Med.Germ., 1981, v.40, p.707-710.

261. Pinilla M., Lague L. Activation of rat erythrocyte phosphofructokinase by AMP, cyclic AMP.- Mol. and Cell.Biochem., 1977, v.115, n.3, p.219-223.

262. Pontremolli S., Melloni E., Salamino P. et al., Identification of proteolytic activities in the cytosolic of mature human erythrocytes.- Eur.J.Biochem., 1980, v.110, p. 421-430.

263. Quist E.E. Regulation of erythrocyte membrane shape by Ca+2.- Biochem. and Biophys.Res.Commun., 1980, v.92, n.2,p. 631-637t

264. Rapoport S. Regulation of metabolism in red cells.- In: Proc. 11th Gongr.Int.Soc. Blood Transf., Sidney, 1966, p.113-145.

265. Rapoport S. Molecularbiologische Probleme der Reifung von Erythrozyten.- Folia Haematol., 1968, v.89, p.105-121.

266. Rapoport S. The regulation of glycolysis in mammalian erythrocytes.- Essays Biochem., v.4,(Eds. G.Campbell, G.Grevil-le), London-New-York, Acad.Press, 1968, p. 69-103.

267. Rapoport S. On the metabolic regulation of glycolysis in erythrocytes.- Bull.Soc.Chim.Biol., 1970, v.52, n.11, p.1169-1184.

268. Rapoport S. Metabolic pathways in the rabbit reticulocyte. Ergeb.Exp.Med., 1978, v.28, p.9-22.

269. Rapoport J., Rapoport T.A., Rapoport S.M. Analysis of pH-induced changes of the glycolysis of human erythrocytes.- Acta Biol.Med.Germ., 1978, v.37, p.393-401.

270. Rapoport T.A., Otto M., Heinrich R. An eytended model of the glycolysis in erythrocytes.- Acta Biol.Med.Germ., 1977, v.36, p. 461-468.

271. Rapoport S., Dubiel W., Muller M. The mechanism of maturation-dependent breakdown of mitochondria in reticulocytes.-Acta Biol.Med.Germ., 1981, v.40, p.1277-1283.

272. Rapoport S., Miiller M., Dumbey R., Rathmann I. Nitrogen economy and the metabolism of serine and glycine in reticulocytes of rabbit.- Eur.J.Biochem,, 1980, v.108, p.449-455.

273. Rapoport S., Rapoport J,, Schauer M., Heinrich R. The effect of pyruvate on glycolysis and maintenance of adenine nucleotides in red cells.- Acta Biol.Med.Germ., 1981, v.40, p.669-676.

274. Ramjeesingh M., Grinstein S., Rothstein A. Intrinsic segments of band 3 that are associated with anion transport across red blood cell membranes.- J. Membrane Biol., 1980, v.57, n.2, p. 95-102.

275. Reimahn B., Keaff D., Psamaloukas A.G., Maretzki D. Membrane phosphorylation in intact human erythrocytes.- Acta Biol. Med.Germ., 1981, v.40, n.4-5, p.487-495.

276. Rice-Evans C., Chapman D. Red blood cell biomembrane structure and deforaability.- Scand.S.Clin, and Lab. Invest., 1981, v.41, n.156, p.99-100.

277. Richter P.H., Ross J. Obscillations and efficiency in glycolysis.- Biophys.Chem., 1980, v.12, p.255-297.

278. Roberts D., Kellett G.L. The kinetics of effector binding to phosphofructokinase. The influence of effectors on the allosteric conformational transition.- J.Biochem., 1980, v.189, p. 569-579.

279. Roberts D., Kellett G.L. The kinetics of effector bindinggto phosphofructokinase. The binding of Mg-1,N -Ethenoadenosine triphosphate to the catalytic site,- J.Biochem., 1980, v.189, p.561-567.

280. Rose I.A. Regulation of human red cell glycolysis.- Exp. Eye Res., 1971, v.11, p.264-272.

281. Rose I.A,, Warms J.Y.B. Glucose and mannose-1»6-Pg as activators of phosphofructokinase in red blood cells.- Biochem.and Biophys.Res.Commun., 1974, v.59, n.4, p.1333-1340.

282. Sand 0. Kinetic properties of phosphofructokinase from flounder (platichtys flesus G). Comp.Biochem.Physiol., 1981, v.69B, p.435-443.

283. Sarcadi B., Szasz J., Gardos G. Calcium and calmodulin in the regulation of blood cell functions (a mini-review). -Haematologia, 1981, v.14, p.121-136.

284. Van Schaftingen E., Hers H.-G. Phosphofructokinase. 2. The enzyme that forms frueto 2,6-bisphosphate from fructoso-6-phosphate and ATP. Biochem. and Biophys.Res.Commun., 1981, v.101, n.3, p.1078-1084.2+

285. Schatzmann H. Active calcium transport and Ca -activated ATPase in human red cell. In: Current topics in membranes and transport. (Eds. E.Bronner, A.Kleinzeller), New-York, Acad.Press, 1975, p.125-168.

286. Seaman C., Wyss S., Piomelli S. The decline in energetic metabolism with aging of the erythrocyte and its relationship to cell death. Amer.J.Haematol., 1980, v.8, p.31-42.

287. Schewe T., Rapoport S. Role of a cell-specific lipoxigen-ase.in the maturation of reticulocytes. Acta Biol.Med.Germ., 1981, v.40, p.591-596.

288. Sheltz M.P., Casaly I. 2-3-diphosphoglycerate and ATP dissociate erythrocyte membrane skeleton. J.Biol.Chem., 1980, v.255, n.20, p.9955-9960.

289. Shiga T., Maeda N., Suda T. The decreted membrane fluidity of in vivo aged human erythrocytes. A spin label study. -Biochim. et Biophys. Acta, 1979, v.553, n.1, p.84-95.

290. Shigeo H., Adachi K. The nature of the inhibition and activation of epedermal phosphofructokinase: An allosteric enzyme. J. of Invest. Dermatology, 1972, v.52, n.5, p.397-401.

291. Shimada A. A maturation of reticulocytes. II. Life span of red cells originating from stress reticulocytes. Acta Med. Okayama, 1972, v.29, p.283-289.

292. Schröter W. In: Clinical Biochemistry. Principles and Methods, v.2, (Ed. Curtis M. Roth), 1974, p.1178.

293. Siems W., Müller M., Dumney R. et al. Balance of glucose utilization in rabbit reticulocytes. Acta Biol.Med.Germ., 1981, v.40, p.703-706.

294. Siems W., Müller M., Dumney R. et al. Quantification of pathways of glucose utilization and balance of energy metabolism of rabbit reticulocytes. Eur.J.Biochem., 1982, v.124,p.567-576.

295. Sols A., Castano J.C., Aragon J.I. et al. Multimodulation of phosphofructokinases in metabolic regulation. Metab.Inter-convers.Enzym., 1980, p.111-123.

296. Soling H.D., Bernhard G., Kuhn A., Lück Hrl. Inhibition of phosphofructokinase by fructose-1,6-diphosphatase in mammalian systems: Protein-protein interaction of fructose-1,6-di-phosphate trapping? Arch.Biochem. and Biophys,, 1977, v.182, p.563-572.

297. Staal G.E., Koster G.E. Human erythrocytes phosphofructokinase: Its purification and some properties. Biochim. et Biophys. Acta, 1972, v.276, n.1, p.113-123.

298. Stekhoven P.S., Bonting S.L. Transport adenosine triphos-photases. Properties and functions. Physiol.Rev., 1981, v.61, n.1, p.1-76.

299. Tannert Ch., Schmidt G., Klatt D., Rapoport S. Mechanism of senescence of red blood cells. Acta Biol.Med.Germ., 1977, v.36, p.831-836.

300. Tarui S., Kono N., Nasu T. Enzymatic basis for the coexistance in inhereted muscle phosphofructokinase defency. -Biochem. and Biophys.Res.Commun., 1969, v.34, n.1, p.77-83.

301. Tarui S., Kono N. Purification and properties of rabbit erythrocyte. Phosphofructokinase. J.Biol.Chem., 1972, v.249, n.18, p.1231-1240.

302. Tarui S., Kono N., Kuwajiama M., Kitani I. Hereditary and acquired abnormalities in erythrocyte phosphofructokinase activity: The close association with altered 2,3-diphosphoglycer-ate levels. Hemoglobin, 1980, v.4, n.56, p.581-592.

303. Taylor C.B., Baw M. The distribution of two chromotogra-phical forms of phosphofructokinase in the tissues of the rat. Biochem.J., 1970, v.119, n.4, p.1101-1112.

304. Tillmann W., Levin C., Prindull G., Schröter W. Rheologic-al properties of 3'oung and aged human erythrocytes. Klin. Wochenschr., 1980, v.58, n.11, p.569-574.

305. Tornheim K., Lowenstein J.M. Control of phosphofructokinase from rat skeleton muscle. Effects of fructose diphosphate, AMP, ATP and citrate. J.Biol.Chem., 1976, v.251, n,23, p.7322-7328.

306. Troffitt R.T., Sankaran L., Pogell B.M. Specific, reversible inactivation of phosphofructokinase by fructose-1,6-bis-phosphatase. Involvment of adenosine 5-triphosphate, oleate and 3-phosphoglyceiate. Biochemistry, 1976, v.15, n.13, p.2918-2922.

307. Valentine W.N. Metabolism of human erythrocytes. Arch. Intern.Med., 1975, v.135, p.1307-1313.

308. Vora S. Izozymes of human phosphofructokinase in blood cells and cultured cell lines: Molecular and Genetic Evidence for a Trigenic System. Blood, 1981, v.57, n.4, p.724-731.

309. Wenzel K.W,, Gouer J. Evidence for different oligomericforms of human erythrocyte phosphofructokinase. PEBS Lett., 1972, v.19, n.14, p.285-289.

310. Wenzel K.W., Louer J. Purification of the human erythrocyte phosphofructokinase. PEBS Lett., 1972, v.19» n.4, p.281-284.

311. White M.D., Raltson G.B. Purification of a water-soluble Mg -ATPase from human erythrocyte membranes. Biochim. et Biophys. Acta, 1980, v.599, n.2, p.569-579.

312. Zahler P., Kempf Ch., Sigrist H. Topologic aspects of integral membrane proteins. Acta Biol.Med.Germ., 1980, v.40, n.4 - 5, p.357-359.