Физиологический анализ действия продуктов пчеловодства на систему крови крыс при экспериментальном лучевом поражении

Николаева, Анна Алексеевна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Физиологический анализ действия продуктов пчеловодства на систему крови крыс при экспериментальном лучевом поражении
ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Физиологический анализ действия продуктов пчеловодства на систему крови крыс при экспериментальном лучевом поражении"

На правах рукописи

?ГБ ОД

НИКОЛАЕВА Анна Алексеевна и .

- w Ш

ФИЗИОЛОГИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ ДЕЙСТВИЯ ПРОДУКТОВ ПЧЕЛОВОДСТВА НА СИСТЕМУ КРОВИ КРЫС ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ЛУЧЕВОМ ПОРАЖЕНИИ

03.00.13. - физиология человека и животных

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Нижний Новгород 2000

Работа выполнена на кафедре физиологии н биохимии человека и животных Нижегородского государственного университета им. Н.И. Лобачевского.

Научный руководитель: д.б.н., проф. В.Н. Крылов

Научный консультант: к.б.н., доцент А.С. Коряпш

Официальные оппоненты: д.б.н., проф. Д.Б. Гелашвшш д.м.н., проф. С.П. Перетяган

Ведущая организация: Нижегородская государственная медицинская академия.

úO

Защита состоится 2000 г. в / ■" часов на

заседании диссертационного совета К 063.77.13 Нижегородского государственного университета им. Н.И. Лобачевского (603600, Нижний Новгород, пр. Гагарина, 23).

С диссертацией мохсно ознакомиться в библиотеке университета Автореферат разослан

Ученый секретарь диссертационного совета к.б.н., доц. / Александрова И.Ф.

М) О

Общая характеристика работы

Актуальность проблемы

В настоящее время все большее количество людей сталкивается с ионизирующими излучениями. Испытания новейшего оружия и катастрофы на атомных энергетических станциях, на предприятиях, связанных с использованием атомной энергии, приводят к тому, что значительная часть населения попадает в зону радиоактивного заражения, как показала авария на ЧАЭС и предприятии "Маяк" Челябинской области. Широкое использование энергии излучения в промышленности, сельском хозяйстве и медицине привело к увеличению числа людей, так или иначе имеющих отношение к использованию радиоактивных материалов. В связи с этим, проблема снижения радиочувствительности биологических объектов, в том числе н человека, является одной из центральных в радиобиологии. Поэтому особую актуальность приобретает поиск средств для защиты организма от действия ионизирующих излучений, и, что особенно важно, терапии лучевой болезни.

Современными исследователями установлено радиозащитное действие многих химических соединений, которые, будучи введенными в организм перед облучением, повышают радиорезистентность и облегчают течение лучевой болезни (Бак, 1968; Романцев и др., 1980; Владимиров и др., 1989). Основные недостатки таких препаратов состоят в том, что они эффективны лишь при профилактическом применении перед острым облучением, в течение короткого промежутка времени и в дозах, близких к пределам переносимости. Сравнительно недавно среди профилактических противолучевых средств была выделена группа стимуляторов радиорезистентности, куда относятся вещества, повышающие устойчивость организма к облучению в "сублетальных" дозах, вызывающих костно-мозговую форму лучевой болезни" /¿различных степеней тяжести. Эти вещества проявляют защитные .свойства кате в условиях профилактического, так и лечебного применения; эффективны в условиях острого и хронического облучения. Сюда относятся иммуномодуляторы, гормональные препараты, витамины, адаптогены из растительного сырья, продукты пчеловодства, антиоксиданты ХЛегеза, Владимиров, 1998).

# Продукты пчеловодства - мед, прополис, маточное молочко -многокомпонентные смеси, обладающие широким спектром биологической активности. Многочисленными исследованиями показано, что они обладают общетонизирующим действием, стимулируют энергетические процессы в клетках, активируют процессы биосинтеза (Лудянский, 1994; Крылов и др., 1998). Лучевое поражение организма, напротив, сопровождается угнетением этих процессов, дестаблизацией

мембран (Кудряшов, 1982; Рыскулова, 1986; Коломийцева, 1989), что и обусловило нами выбор продуктов пчеловодства в качестве средств, которые, в силу их биологической активности, должны снижать тяжесть поражения организма.

В радиобиологии весьма перспективным оказалось применение животных ядов в качестве стимуляторов радиорезистентности (Shipman, Cole, 1967; Lang, 1970; Артемов и др., 1975; Орлов, Конькова, 1978). Однако, их влияние на организм в сочетании с действием ионизирующей радиации мало изучено. Практически не исследованы радиозащитные свойства маточного молочка, меда, прополиса, а также препаратов на основе их сочетаний. Очевидно, что для успешной разработки эффективных лекарственных средств защиты организма от лучевого поражения на основе продуктов пчеловодства, необходимо четкое и детальное представление о механизмах их физиологического действия, что и определило задачи настоящей работы.

Цель и задачи исследования

Целью нашей работы ставилось сравнительное изучение радиозащитных свойств продуктов пчеловодства; выявление радиопротекторных и терапевтических свойств пчелиного яда, прополиса, маточного молочка и меда при экспериментальной лучевой болезни различных степеней тяжести.

Для достижения указанной цели были поставлены следующие задачи:

1. Исследовать влияние пчелиного яда на кислотную резистентность эритроцитов, морфологический состав крови, интенсивность свободнорадикального окисления при различных дозах у-облучсния в условиях предварительного введения яда и при лечении экспериментальной лучевой болезни тяжелой и средней степени лабораюрных животных.

2. Выяснить влияние ингаляционного введения препарата на основе прополиса и маточного молочка "Апингалин" на систему крови и кроветворения при моделировании лучевой болезни тяжелой и средней степени.

3. Изучить терапевтические свойства меда и маточного молочка при их пероральном введении в различных комбинациях на состояние периферической крови и костного мозга при костно-мозговой форме острой лучевой болезни.

4. Проанализировать влияние меда, прополиса и маточного молочка при различных способах введения на активность процессов перекисного окисления липидов (ПОЛ) в крови облученных животных.

5. Сравнить эффективность исследуемых продуктов пчеловодства при профилактике и лечении острой лучевой болезни различных степеней тяжести.

Научная новизна

В работе впервые показано, что пчелиный яд при его хроническом введении перед воздействием радиации повышает радиорезистентность организма, что проявляется в уменьшении поражения красной и белой крови и ее более быстром восстановлении после лучевого поражения.

Выявлено, что яд пчелы, вводимый как до, так и после у-облучения, уменьшает повреждающее воздействие радиации на мембрану эритроцитов, нормализуя, в частности, их кислотную резистентность, а также снижает активность свободнорадикального окисления, вызванного лучевым воздействием.

Показано защитное действие ингаляционного препарата на основе маточного молочка и прополиса "Апингалин" на гранулоцито- и лимфопоэз. Выявлено, что мед и маточное молочко при их пероральном введении стимулируют эритропоэз и синтез гемоглобина.

Показано, что продукты пчеловодства влияют на активность свободнорадикального окисления липидов в крови, повышая количество продуктов ПОЛ в начальный период лучевого поражения, и снижая их содержание в дальнейшем, по сравнению с нелеченными животными.

Научно-практическая значимость

Выявленные радиопротекторные и терапевтические свойства пчелиного яда позволяют утверждать, что в терапевтических дозах он является перспективной основой для создания препаратов, повышающих радиорезистентность организма. Обнаруженное противоанемическое действие меда и маточного молочка 'предполагает возможность их использования в терапии различных заболеваний, связанных с ослаблением эритропоэза. Эффективность применения препарата на основе прополиса и маточного молочка "Апингалин" на Гранулоцито- и лимфопоэз позволяет предложить его для применения в лечении последствий облучения и различных видов патологии, сопровождаемых снижением гемопоэтической функции костного мозга. Проведенные исследования показали, что продукты пчеловодства наиболее эффективны при их комплексном использовании.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Пчелиный яд при его курсовом применении до и после у-облучения снижает повреждающее действие радиации на организм,

повышая радиорезистентность и облегчая, тем самым, течение острой лучевой болезни средней и тяжелой степеней тяжести.

2. Прополис, маточное молочко и мед в различных комбинациях обладают выраженными терапевтическими свойствами при лечении экспериментальной лучевой болезни: увеличивают содержание форменных элементов в периферической крови, стимулируют репарационные процессы в костном мозге.

3. Продукты пчеловодства нормализуют процессы перекисного окисления липидов, снижая концентрацию продуктов ПОЛ в крови облученных животных, что приводит к уменьшению повреждающего воздействия радиации на клетки.

Апробация работы

По теме диссертации опубликовано 5 работ. Основные положения доложены на VI международной научно-практической конференции по апитерапии (Рыбное, 1997), VII международной научно-практической конференции по апитерапии (Рыбное, 1999), научной конференции молодых ученых научно-исследовательских учреждений и высших медицинских учебных заведений Поволжья и Северного Кавказа (Нижний Новгород, 2000), на расширенном заседании кафедры физиологии и биохимии человека и животных ННГУ (2000).

Структура и объем диссертации

Материалы диссертации изложены на 152 страницах машинописного текста, иллюстрированы 20 таблицами и 34 рисунками. Работа состоит из введения, обзора литературы, характеристики материалов и методов исследования, глав результатов исследования, обсуждения, заключения, выводов и списка литературы, содержащего 256 источников, из которых 182 на русском и 74 на иностранных языках.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Эксперименты проводились на 402 белых нелинейных крысах. Общее распределение животных по сериям представлено в табл. 1.

Во всех сериях проводилось тотальное однократное у-облучение на терапевтической установке "Агат-С" (Со60) в дозах 3 и 5 Гр, что вызывало развитие костно-мозговой формы острой лучевой болезни средней и тяжелой степени соответственно (Бурназян, 1978). Мощность облучения составляла 1 Гр/мин. Кровь на анализ забиралась из подъязычной вены.

В работе использовали раствор пчелиного яда в дозах 0,1 мг/кг и 0,5 мг/кг; мед полифлерный в дозе 1 г/кг; смесь нативного маточного молочка и меда (8:92) в дозе 1 г/кг; препарат "Апингалин" (дистиллированная вода

- 93%, этиловый спирт (96%) - 4 %, нативное маточное молочко - 2%, прополис - I %) (подана заявка на патент).

Таблица 1.

Общее количество экспериментальных животных и их распределение по сериям опытов._

Этапы исследований Исследуемые показатели Количество животных

1 .Изучение радиопротекторных свойств пчелиного яда (при введении перед облучением). морфологический анализ крови; анализ продуктов ПОЛ; анализ кислотной резистентности эритроцитов 42 42 42

2. Изучение терапевтических свойств пчелиного яда (при введении после облучения). морфологический анализ крови: анализ продуктов ПОЛ; анализ кислотной резистентности эритроцитов 42 42 42

3. Изучение терапевтических свойств меда (при введении после облучения). морфологический анализ крови; анализ продуктов ПОЛ; морфологический анализ костного мозга 15 15 7

4. Изучение терапевтических свойств маточного молочка с медом (при введении после облучения). морфологический анализ крови; анализ продуктов ПОЛ; морфологический анализ костного мозга 15 15 7

5. Изучение терапевтических свойств "Апингалина" (при введении после облучения). морфологический анализ крови; анализ продуктов ПОЛ; морфологический анализ костного мозга 15 15 7

6. Изучение терапевтических свойств "Апингалина" с медом (при введении после облучения). морфологический анализ крови; анализ ПОЛ; морфологический анализ костного мозга 15 15 7

В первой серии экспериментов исследовали радиопротекторные свойства пчелиного яда, вводимого внутрибрюшинно в течение 7 суток в одно и то же время; последнее введение осуществлялось за 1 час до облучения. Контрольная группа получала физиологический раствор в эквивалентном объеме. Затем животных подвергали однократному тотальному у-облучению, что провоцировало развитие костно-мозговой формы острой лучевой болезни средней (3 Гр) и тяжелой (5 Гр) степени. На 1, 7, 14, 21 сутки после облучения в крови оценивали общее количество эритроцитов, ретикулоцитов, лейкоцитов, гемоглобина, а также концентрацию малонового диальдегида (МДА) и кислотную резистентность эритроцитов.

Во второй серии экспериментов оценивали терапевтические свойства пчелиного яда. Пчелиный яд вводился в течение 7 суток после

облучения, контрольная группа получала физраствор. На 1, 7, 14 сутки после окончания курса лечения в крови облученных животных определяли те же показатели, что и в предыдущей серии.

В третьей серии экспериментов изучали терапевтические свойства меда, маточного молочка, прополиса на модели косЬго-мозговой формы острой лучевой болезни средней и тяжелой степени. Мед и смесь маточного молочка с медом крысы получали перорально в одно и то же время в течение 10 суток после облучения. Две экспериментальные группы подвергались ингаляции препаратом "Апингалин" в течение 10 минут в проточной камере с помощью ультразвукового ингалятора ИУП-01М. Крысы одной из групп, кроме ингаляции, получали мед перорально. Эффективность лечения лучевой болезни оценивали на 1, 8, 15 сутки после окончания курса терапии, определяя в крови общее количество эритроцитов, ретикулоцитов, лейкоцитов, гемоглобина. Кроме того, подсчитывали лейкоцитарную формулу. Интенсивность перекисного окисления оценивали по концентрации в крови первичных продуктов (диеновые конъюгаты), вторичных продуктов (триеновые конъюгаты, МДА) и конечных продуктов (основания Шиффа) пероксидации липидов на 1,8, 15 сутки после окончания лечения. После умерщвления животных методом цервикальной дислокации позвонков у экспериментальных крыс из бедренной кости забирался костный мозг для морфологического анализа.

В работе использовали общепринятые методы анализа: унифицированный колориметрический метод определения количества эритроцитов; унифицированный гемоглобинцианидный метод определения количества гемоглобина; определение количества ретикулоцитов методом окрашенных мазков (Кост, 1975); определение содержания гемоглобина в одном эритроците; определение количества лейкоцитов путем подсчета в камере Горяева; анализ процентного соотношения различных форм лейкоцитов (Меньшиков, 1987); определение кислотной резистентности эритроцитов методом кислотных эритрограмм (Терсков, Гительзон, 1969); спектрофотометрическое определение концентрации МДА, основанное на реакции с 2-тиобарбитуровой кислотой (ТЕК) (Владимиров, Арчаков, 1972); спектрофотометрическое определение концентрации диеновых, триеновых конъюгатов и оснований Шиффа спектрофлуориметрическим методом (Fletcher, 1973). Анализ костного мозга проводили в окрашенных по Романовскому-Гимзе мазках, определяли процентное соотношение основных клеточных элементов (Меньшиков, 1987).

Результаты исследований обрабатывали с использованием t-критерия Стьюдента. Обработка данных осуществлялась на персональном компьютере с помощью программы STADIA.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Исследование радиопротекторных свойств пчелиного яда при его профилактическом введении.

Радиопротекторные свойства яда пчелы, вводимого перед облучением в дозах 0,1 мг/кг и 0,5 мг/кг, изучали на модели экспериментальной лучевой болезни, вызванной у-облучением в дозах 3 Гр и 5 Гр.

В ходе эксперимента установлено, что у-излучение незначительно снижало количественные показатели красной крови. Общее количество эритроцитов снижалось на 4,5-13,2%, гемоглобина - на 10,2-34,6% в зависимости от дозы облучения (табл. 2). Предварительное введение экспериментальным животным яда пчелы уменьшало эритропению, вызванную облучением.

Таблица 2.

Изменение показателей крови у облученных животных при предварительном введении пчелиного яда._

Показатель Интактные животные Группы Сутки после облучения

1 7 14 21

гемоглобин (г/л) 3 Гр 128.0±2.3 контроль 0,1 мг/кг 0,5 мг/кг 127.0±2.5 133.0±3.9 125.0±4.6 115.013.0 115.014.3 119.014.6 117.013.7 117.018.7 122.012.3 120.018.9 119.013.1 127.013.0

гемоглобин (г/л) 5 Гр 133.516.9 контроль 0,1 мг/кг 0,5 мг/кг 122.0±2.8 119.0±2.5 127.0±3.4 87.012.2 104.017.3* 104.016.6* 98.018.5 124.515.8* 128.013.4* 109.012.5 123.013.7* 125.015.9*

эритроцит ы(млн/мкл) ЗГр 4.54±0.15 контроль 0,1 мг/кг 0,5 мг/кг 4.22±0.12 4.6410.14* 4.2210.13 4.0810.10 3.8010.20 4.2810.09 4.2810.13 3.8410.17* 4.2010.09 4.0210.26 3.8810.14 4.0410.23

эритроцит ы(млн/мкл) 5 Гр 4.50±0.06 контроль 0,1 мг/кг 0,5 мг/кг 4.3010.17 4.6810.16 4.7010.12 3.6810.07 3.93+0.08 4.2010.10* 3.6410.25 4.3510.19 4.7710.10* 3.9310.36 4.1710.10 4.5310.07*

лейкоциты (тыс/мкл) ЗГр 11.73±0.47 контроль 0,1 мг/кг 0,5 мг/кг 4.4010.46 4.5010.57 4.3010.24 4.8010.35 5.6010.28* 5.1010.25 6.3010.72 6.3010.62 6.8010.69 9.0010.29 8.5010.98 9.5011.22

лейкоциты (тыс/мкл) 5 Гр 13.0511.47 контроль 0,1 мг/кг 0,5 мг/кг 3.84+0.62 3.8810.50 3.9010.35 3.8410.16 3.8510.35 4.24+0.30 6.5210.79 6.0510.54 8.3610.28* 8.5010.59 7.1010.54 10.1510.79*

Примечание: * - р<0,05 по сравнению с контролем.

Как при средней, так и при тяжелой форме лучевого поражения эффект был более выражен в группе, где животные получали пчелиный яд в дозе 0,5 мг/кг: общее количество эритроцитов у крыс этой группы было

на 0,5-25,1% выше контрольных значений. Яд пчелы в дозе 0,5 мг/кг, вводимый перед облучением в 3 Гр и 5 Гр способствовал более быстрому восстановлению общего количества гемоглобина, причем особенно эффективно при тяжелой форме лучевой болезни (на 3,8-22,5%).

Несмотря на тот факт, что на протяжении всего эксперимента количественные показатели красной крови облученных животных несущественно отличались от таковых интактных, повреждающее действие радиации сказывалось на клеточном уровне, что отражалось на устойчивости эритроцитарной мембраны к действию гемолитиков. При дозе излучения 5 Гр мембраны эритроцитов повреждаются сильнее, чем при 3 Гр, что сказывается на их кислотной резистентности, хотя распределение эритроцитов по группам стойкости при средней и тяжелой форме поражения имеет сходную динамику. В контрольной и опытных группах на второй неделе эритрограммы резко смещаются в сторону более устойчивых форм, интервал стойкости уменьшается, а количество разрушенных эритроцитов резко увеличивается (на 16-22%). По всей видимости, эти изменения могут быть связаны с нарушением эритропоэза в костном мозге и с выходом в цирку-ляторное русло большого количество молодых форм и эритроцитов с нарушенными физико-химическими свойствами (Гительзон, Терсков, 1959; Федорова, 1967; Поливода, 1990). Предварительное введение пчелиного яда при профилактике лучевой болезни средней степени тяжести несколько изменяет кинетику гемолиза: эритрограммы опытных групп на первые сутки после облучения смещаются вправо, так же как и в контрольной группе, однако количество разрушенных эритроцитов на 15-20% меньше, чем в контроле, что говорит о защитном действии яда. Эффект более выражен в группе с дозой яда 0,1 мг/кг. Профилактическое введение яда животным, облучаемым дозой 5 Гр оказалось не так эффективно, как при 3 Гр, однако по сравнению с контролем к 21 суткам в крови животных опытных групп уменьшалось количество высокостойких форм, эритро-I раммы смещались б сторону зритрсцптсз нормальной стойкости, т.е. наблюдалась тенденция к стабилизации в качественном составе красной крови.

Как известно, даже малые дозы ионизирующего излучения приводят к лейкопении уже на первой неделе после облучения. На первые сутки общее количество лейкоцитов в контрольной и обеих опытных группах составляло 36,4-38,1% от исходного при дозе облучения 3 Гр и 29,3-29,8% при дозе облучения 5 Гр. Следует отметить, что в группе животных, которым предварительно вводился яд в дозе 0,5 мг/кг восстановление шло несколько быстрее, чем в контрольной группе и при использовании дозы 0,1 мг/кг, что особенно выражено при лечении тяжелой формы лучевой болезни, и общее количество лейкоцитов к окончанию периода наблюдения было выше контроля на 12,6% .

Радиопротекторный эффект пчелиного яда обусловлен, по нашему мнению, несколькими причинами. Во-первых, яд, являясь стресс-агентом, активирует защитные нейроэндокринные механизмы организма, вызывая развитие стресс-реакции. Как известно, общий адаптационный синдром способствует повышению общей резистентности организма (Горизонтов и др., 1983; Меерсон, 1986; Нагнибеда, 1987), в том числе, и радиорезистентности (Ульянова, Будагов, 1997). Активация симпато-адреналовой системы приводит к тому, что в крови повышается концентрация адреналина и норадреналина. Показано, что биогенные амины являются эндогенными радиопротекторами, действие которых основано на гипоксическом эффекте в кроветворных тканях (Гончаренко, 1971; Саксонов и др., 1976; Легеза, Владимиров, 1998). С другой стороны, активация гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковой системы приводит к выделению кортико-стероидов, в частности, глюкокортикоидов, которые угнетают процессы пролиферации в костном мозге (Горизонтов, Протасова, 1968; Вернигоро-ва, Лебедев, 1986). Таким образом, вышеназванные эффекты пчелиного яда приводят к тому, что активность деления клеток костного мозга падает и находится в стадии своеобразного "охранительного торможения", на фоне которого и происходит облучение.

Терапевтические свойства яда пчелы при лучевом поражении.

Пчелиный яд, вводимый после обучения также обладал защитными свойствами на систему крови, хотя и менее выраженными, чем при профилактическом введении. Так, при лечении острой лучевой болезни средней степени тяжести, применение пчелиного яда в дозе 0,1 мг/кг способствовало более быстрому, по сравнению с контролем, восстановлению общего количества гемоглобина (на 8,6%) и эритроцитов (на 8,2%) (табл. 3).

После у-облучения животных дозой 3 Гр наблюдалось изменение кислотной резистентности эритроцитов на протяжении всего эксперимента. Спустя 14 суток после облучения эритрограмма животных контрольной группы была смещена вправо, интервал резистентности увеличивался (4-7 мин.), что может быть связано как с увеличением количества молодых более резистентных клеток, так и с нарушениями структуры мембран, увеличением их вязкости и снижением эластичности (Белоусова и др., 1978). Терапия острой лучевой болезни средней степени тяжести пчелиным ядом приводила к стабилизации качественного состава эритроцитов к концу эксперимента: Эритрограммы опытных групп существенно отличались от контрольных и имели форму, близкую к таковой интактных животных. Следует отметить, что эритрограммы в группе, где животные получали яд в дозе 0,1 мг/кг, были наиболее близки к исходной, а к концу наблюдений полностью повторяли ее форму.

Таблица 3.

Изменение показателей крови у облученных животных при терапевтическом применении пчелиного яда._

Показатель Иитактные животные Группы Сутки после облучения

7 14 21

гемоглобин (г/л) 3 Гр 128.0±2.3 контроль 0.1 мг/кг 0,5 мг/кг 116.013.5 117.014.0 112.511.9 107.016.1 117.014.7 107.016.3 115.014.2 126.016.3 116.017.6

гемоглобин (г/л) 5 Гр 133.516.9 контроль 0.1 мг/кг 0.5 мг/кг 108.0+2.7 113.014.7 112.013.0 101.014.2 104.0+4.5 102.0+5.3 115.013.4 114.014.8 115.013.3

эритроциты (млн/мкл) ЗГр 4.54+0.15 контроль 0.1 мг/кг 0.5 мг/кг 4.06+0.16 4.2810.19 3.6810.08* 3.6610.09 3.9810.11 * 3.8010.15 3.9710.14 4.3410.07* 4.0410.09

эритроциты (млн/мкл) 5Гр 4.5010.06 контроль 0,1 мг/кг 0,5 мг/кг 3.99Ю.22 4.4610.09* 3.9610.15 3.7810.11 4.1910.16 3.9810.14 3.9310.05 4.1810.19 4.0210.16

лейкоциты (тыс/мкл) ЗГр 11.7310.47 контроль 0,1 мг/кг 0,5 мг/кг 5.1010.54 7.4010.37* 5.10+0.41 4.9010.55 6.6010.44* 5.6010.54 8.1010.60 9.4010.71 6.8010.52*

лейкоциты (тыс/мкл) 5 Гр 13.0511.70 контроль 0.1 мг/кг 0.5 мг/кг 3.9610.35 4.0610.13 3.00+0.41 5.8010.50 6.16+065 5.1310.76 7.1610.63 7.6610.61 6.7610.11

Примечание: * ■ р<0,05 по сравнению с контролем.

Облучение дозой 5 Гр сопровождалось более резкими изменениями в качественном составе эритроцитов, терапия пчелиным ядом острой лучевой болезни тяжелой степени не приводила к стабилизации морфо-функционального состояния их мембран.

Динамика изменения общего количества лейкоцитов представлена на таблице 3. Как видно, терапевтическое действие пчелиного яда лучше всего проявлялось при лечении лучевой болезни средней степени, причем более эффективной оказывалась доза 0,1 мг/кг. Показатели в этой группе достоверно выше контрольных на 1 и 7 сутки после окончания курса терапии. В то же время, применение яда в дозе 0,1 мг/кг при лечении тяжелой формы лучевого болезни малоэффективно, а применение дозы 0,5 мг/кг усугубляло тяжесть поражения. По всей видимости, здесь можно говорить о токсическом действии яда, которое "накладывалось" на радиационный эффект.

Рассуждая о возможных механизмах терапевтического действия пчелиного яда, в первую очередь, следует говорить о его неспецифическом действии. С одной стороны, хорошо известны адаптогенные свойства пчелиного яда. (Vick et al., 1972; Шкендеров, 1983; Шкендеров, Иванов, 1985;

Лудянский, 1994). С другой стороны, показано, что пчелиный яд способен непосредственно действовать на мембраны клеток (Демченко, Костржев-ская, 1986; Baker., 1995). Как известно, основными мишенями непрямого действия радиации являются мембраны, повреждающиеся в результате свободнорадикальных процессов. Согласно нашим данным, один из механизмов терапевтического действия яда реализуется именно через снижение активности ПОЛ, которую традиционно оценивали по концентрации в крови ТБК-активных продуктов. Так, применение пчелиного яда при терапии лучевой болезни средней степени способствовало снижению концентрации МДА (рис. 1). В группе, где животные получали яд в дозе 0,1 мг/кг, концентрация МДА на протяжении всего времени наблюдения значимо не отличалась от значений интактных животных (табл. 3).

Применение дозы облучения 5 Гр приводило к повышению активности свободнорадикального окисления. К окончанию эксперимента интенсивность перекисного окисления оставалась высокой во всех группах, и концентрация МДА была достоверно выше по сравнению с необлученны-ми животными на протяжении всего эксперимента.

250

7 14 21

□ контроль ■ пчелиный яд, 0,1 мг/кг Шпчелиный яд, 0,5 мг/кг сутки после облучения

Рис.1. Динамика изменения концентрации ТБК-активных продуктов в крови облученных животных (3 Гр) при терапевтическом применении пчелиного яда.

Примечание: здесь и в остальных рисунках: * - р<0,05 по сравнению с контролем.

Изучение терапевтических свойств продуктов пчеловодства при лучевом поражении.

Влияние продуктов пчеловодства - меда, маточного молочка и прополиса в различных комбинациях и при различных способах введения изучалось на модели средней и тяжелой формы лучевой болезни.

Результаты исследований показали, что все исследуемые продукты в разной степени обладают защитными свойствами на систему красной крови. Во всех опытных группах общее количество эритроцитов и гемоглобина восстанавливалось быстрее, чем в контрольной. При лечении средней

200

Ь-

$150

1100

LJ1

степени радиопоражения эффект был более выражен в группах, где животные ингапировались "Апингалином" и при пероральном введении меда (рис.2). При терапии тяжелой формы лучевой болезни применение меда в отношении красной крови оказалось наиболее эффективным (рис.3).

100

§90

: 85

11 18 25

□ контроль НАпингалин □ маточное молочко с медом О мед сутки после облучения

Рис. 2. Динамика изменения количества эритроцитов в крови облученных животных (3 Гр) при терапевтическом применении продуктов пчеловодства.

130

о 70

□ контроль

□ Апингалин с медом

сутки после облучения

■Апингалин

О маточное молочко с медом Рис. 3. Динамика изменения количества гемоглобина в крови облученных животных (5 Гр) при терапевтическом применении продуктов пчеловодства.

Действительно, согласно литературным данным (Младенов,1962; Андухар, 1982), мед обладает свойством стимулировать эритропоэз. По всей видимости, эффект можно связать с тем, что в состав меда входят различные витамины, в частности, фолиевая кислота, которая, как известно, необходима для синтеза гемоглобина (Макаров, 1984; Моисеева, 1985). Кроме того, известно, что мед стимулирует синтез белков в клетке (Младенов, 1972) и активирует процессы пролиферации (Павлов, Морща-кова, 1987). Стимуляция медом энергетического обмена (Охотский, 1990)

также способствует активации процессов репарации в поврежденных клетках.

Восстановление системы белой крови в группах леченных животных также шло более активно, чем в контрольной. Применение маточного молочка с прополисом ("Апингалин") или с медом способствовало восстановлению общего количества лейкоцитов. При лечении лучевой болезни обеих степеней тяжести "Апингалин" достоверно повышал количество лейкоцитов (на 12,9-27,2%) на протяжении всего периода наблюдений (рис. 4).

100 * * % от исходного

80 60

40 20

rdbm

lurfli

сутки после облучения

□ контроль ■ Апингалин [ЗАпингалин с медом □ маточное молочко с медом В мед

Рис. 4. Изменение общего количества лейкоцитов в крови облученных (5 Гр) животных при терапевтическом применении пчелопродуктов.

Различные формы лейкоцитов обладают разной радиорезистентностью (Белоусова и др., 1978; Umansky, 1982). Для лучевой болезни характерна очень сильно выраженная лимфопения, так как лимфоциты, несмотря на то, что они являются зрелыми элементами, очень чувствительны к воздействию ионизирующего излучения и гибнут в первые же часы после облучения (Жербин, Чухловин, 1980; Хансон, Комар, 1985). Иммунологическая реактивность организма поддерживается за счет более резистентных гранулоцитов, уровень которых повышается в силу созревания неповрежденных клеток в костном мозге и выхода из тканевых депо (Груздев, 1979; Denecamp, Rojas, 1989). Наши экспериментальные данные подтверждают литературные (табл. 4): во всех опытных группах количество лимфоцитов было выше контрольных значений на протяжении всего эксперимента (на 0,2-20,6%), также как и общее количество нейтрофилов (на 14,3%), причем терапевтический эффект был более выражен в группе с ингаляцией. Следует отметить, что основную массу нейтрофилов в этой группе составляли молодые палочкоядерные формы, что свидетельствует об эффективной защите кроветворения от разрушительного действия радиации. При лечении тяжелой формы лучевой болезни ингаляционное

применение смеси маточного молочка с прополисом также способствовало более быстрому восстановлению белой крови.

Таблица 4.

Влияние продуктов пчеловодства на лейкоцитарную формулу облученных животных (3 Гр) при их терапевтическом применении._

Группа Показатель Интактные животные Сутки после облучения

11 18 25

М±гп Ml m Mim М±га

Контроль (нелеченные животные) лимфоциты нейгрофилы (всего): сегментоядерные палочкоядерные 57.4+4.61 39.4+4.45 34.2+4.95 5.2+1.25 50.8+2.059 40.011.82 28.813.93 11.212.06 37.611.72 53.6+1.42 42.311.67 11.311.17 49.2+2.33 44.0+3.16 36.412.31 7.610.6

"Апингалин" лимфоциты нейгрофилы (всего): сегментоядерные палочкоядерные 57.4+4.61 39.414.45 34.2+4.95 5.2+1.25 52.011.41 38.011.09 25.611.12 12.410.98 49.4+2.04* 59.2+1.15* 45.611.6* 13.611.17 56.0+1.17* 45.012.23 34.812.58 10.810.49*

маточное молочко с медом лимфоциты нейтрофилы (всего): сегментоядерные палочкоядерные 57.414.61 39.414.45 34.2+4.95 5.2+1.25 51.811.49 45.6+0.75* 31.210.8 14.4+1.17 37.712.64 59.013.69 48.0+2.58* 11.011.29 52.811.62 38.811.15* 28.411.6* 10.412.48

мед лимфоциты нейтрофилы (всего): сегментоядерные палочкоядерные 57.4+4.61 39.414.45 34.2+4.95 5.2+1.25 50.512.99 41.512.87 29.012.52 12.5+1.5 38.8+1.74 54.6+1.94* 45.611.17 9.0+2.24 51.411.94 33.6+1.6* 23.211.35* 10.4+0.75*

Примечание: * - р<0,05 по отношению к контролю.

Результаты анализа красного костного мозга крыс также свидетельствуют о стимулирующем действии исследуемых продуктов пчеловодства на гемопоэз. Как известно, стволовые и бластные клетки, находящиеся в процессе пролиферации, являются самыми радочувствительными элементами системы крови (Филиппович и др., 1985; Radford, 1986; Мазурик, Михайлов, 1999). При дозе облучения 3 Гр к 10 суткам после воздействия ионизирующего излучения кроветворная функция красного костного мозга во всех группах начинала восстанавливаться. Однако следует отметить, что различные продукты пчеловодства оказывали позитивное влияние на различные ростки кроветворения. Так, мед в большей мере стимулировал эритропоэз, прополис и маточное молочко обладали лейкостимулирую-щим действием, а смесь маточного молочка с медом активировала оба этих ростка кроветворения.

В группе с введением меда количество базофильных, полихромато-фильных и оксифильных нормобластов составляло 78,5%, 92,4%, 120,0% соответственно, что достоверно выше (на 15,1-40,0%) контрольных значе-

ний. Необходимо указать, что в остальных опытных группах эритропоэз также шел несколько интенсивнее, чем в контроле.

Гранулоцитопоэз в группе с "Апингалином" был наиболее интенсивным. В этой группе общее количество гранулоцитарных элементов в костном мозге было на 16,8% выше контрольного значения (р<0,05). В группе, где животных кроме ингаляции кормили медом, этот показатель был на 12,8%, а в группе, где крысы перорально получали смесь маточного молочка и меда - на 5,4% выше, чем в контроле.

Лимфопоэз, по нашим данным, также наиболее эффективно стимулировался "Апингалином". В этой группе общее количество лимфоцитов в костном мозге было на 22,9% выше, чем в контрольной. Как уже говорилось, лимфоциты наиболее чувствительные к радиации клетки: после лучевого поражения их число сокращается ввиду иптерфазной гибели. Поэтому нам представляется важным тот факт, что во всех опытных группах, кроме той, где животные получали мед, лимфопоэз идет более интенсивно, чем в контроле. Этот эффект, по всей видимости, связан с иммуномодули-рующими свойствами прополиса и маточного молочка (Матушевский и др., 1972; Пейчев, Димитров, 1972; Матушевский и др., 1982) Стимуляция лейкопоэза также может быть связана с усилением интенсивности синтеза белка и энергетического обмена (Никулин, Якушева, 1989; Козловцев, 1990).

Одним из механизмов защитного действия продуктов пчеловодства может быть их влияние на перекисное окисление липидов, повышение активности которого - один из основных поражающих факторов при лучевом поражении (Бурлакова и др., 1975; Рыскулова, 1987; Коломийцева, 1989; Поливода и др., 1990). Активность свободнорадикальных процессов во всех группах возрастала в первые сутки после окончания лечения, что выражалось в увеличении количества диеновых (рис. 5), триеновых конъ-югатов, ТБК-активных продуктов и оснований Шиффа (рис. 6). Применение продуктов пчеловодства в терапии лучевой болезни приводило к изменению активности окислительных процессов. Так, ингаляционное введение прополиса и маточного молочка после облучения дозой 3 Гр приводило к увеличению концентрации диеновых конъюгатов в крови на 55,7% в 1 сутки после окончания лечения, по сравнению с нелеченными животными, однако уже к 14 суткам концентрация первичных продуктов была на 32,3% меньше, чем в контроле и к концу эксперимента снижалась до нормальных значений. Сходная динамика изменений характерна и для вторичных продуктов ПОЛ - триеновых конъюгатов и ТБК-активных продуктов.

Накопление в тканях конечных продуктов ПОЛ - оснований Шиффа у животных контрольной группы свидетельствует о серьезном нарушении баланса между прооксидантной и антиоксидантной системами в пользу

первой (Владимиров, Арчаков, 1972; Биленко, 1989). В то же время, в опытных группах концентрация оснований Шиффа в крови на 18 и 25 сутки после облучения была ниже (на 1,8-87,7%), чем у крыс контрольной, что свидетельствует о защитном действии продуктов пчеловодства.

250 * * *

200

4150

«100

сутки после облучения

11 18 □ контроль ЩАпингалин

" маточное молочко с медом 1-1 мед Рис. 5. Динамика изменения концентрации диеновых конъюгатов в плазме облученных животных (3 Гр) при терапевтическом применении продуктов пчеловодства.

зоо

-250

* *

11 18 □ контроль ЯАгшнгалин □ маточное молочко с медом □ мед

Рис. 6. Динамика изменения концентрации с> облученных животных (3 Гр) при терапевтическом применении продуктов пчеловодства.

сутки после облучения

..........1Ч..Л.Л,- --------

(д.11 »ииппи о ПЛИ 1 ¡VI и

Полученные результаты свидетельствуют об индуцируемом прополисом и маточным молочком снижении активности процессов перекисно-го окисления липидов. Начальная активация пероксидации может быть связана как с прямым действием продуктов пчеловодства на мембраны (связанном с наличием в составе маточного молочка ненасыщенных жирных кислот), так и с усилением пролиферации клеток в кроветворных органах, что сопровождается усилением активности ПОЛ. Тот факт, что к концу эксперимента содержание конечных продуктов в опытных группах снижается быстрее, чем первичных и вторичных, свидетельствует, по на-

тему мнению, в пользу предположения об активации антиоксидантных механизмов.

На основании полученных результатов можно заключить, что пчелиный яд, мед, прополис и маточное молочко являются эффективными терапевтическими средствами при действии "сублетальных" доз у-излучения, облегчают течение лучевой болезни, в разной степени влияя как на красную и так и белую кровь. Выраженными защитными свойствами обладают комбинированные препараты: мед с маточным молочком, "Апингалин", "Апингалин" с медом, так как позитивно влияют как на эритро-, так и лейкопоэз.

ВЫВОДЫ

1 .Установлено, что исследуемые продукты пчеловодства - пчелиный яд, мед, прополис и маточное молочко обладают защитным действием на систему крови крыс при их у-облучении в дозах 3 и 5 Гр.

2.Пчелиный яд, при курсовом введении в дозах 0,1 мг/кг и 0,5 мг/кг перед у-облучением повышает радиорезистентность организма, приводя к повышению содержания форменных элементов и гемоглобина в периферической крови, нормализации кислотной резистентности мембран эритроцитов, уменьшению скорости процессов перекисного окисления липи-дов крови.

3.Пчелиный яд в дозах 0,1 мг/кг и 0,5 мг/кг, используемый после облучения, облегчает течение острой лучевой болезни средней степени тяжести, стимулируя восстановительные процессы в системе крови. При лечении лучевой болезни средней степени тяжести применение яда в дозе 0,1 мг/кг приводило к повышению уровня форменных элементов в цирку-ляторном русле крыс и восстановлению функций мембран эритроцитов. Применение дозы яда 0,1 мг/кг при терапии тяжелой формы лучевого поражения оказывает стимулирующее действие только на систему красной крови. Пчелиный яд в дозе 0,5 мг/кг неэффективен при лечении тяжелой формы лучевой болезни.

4.Мед, прополис и маточное молочко при терапевтическом применении обладают более выраженными радиозащитными свойствами на систему крови и кроветворения по сравнению с пчелиным ядом.

4.1.Курсовое введение меда per os (1,0 г/кг) оказывало выраженный эритростимулирующий эффект, повышая содержание гемоглобина, эритроцитов, ретикулоцитов в периферической крови и эритробластических элементов в красном костном мозге у облученных животных по сравнению с контрольными (нелеченными) животными, восстанавливая названные показатели до уровня интактных животных.

4.2.Курсовое применение прополиса и маточного молочка при их ингаляционном введении (препарат "Апингалин") в терапии лучевой бо-

лезни более эффективно стимулирует репарационные процессы в системе белой крови, увеличивая по сравнению с показателями контрольных животных содержание гранулоцитов и лимфоцитов и стимулируя их образование в красном костном мозге.

4.3.Комплексное применение маточного молочка с медом оказывает благоприятное действие как на систему красной, так и белой крови, увеличивая содержание форменных элементов в циркуляторном русле и молодых клеточных форм в костном мозге, по сравнению с нелеченными животными.

5.Продукты пчеловодства - мед, маточное молочко, прополис - оказывают двухфазное действие на активность свободнорадикальных процессов после у-облучения в дозах 3 Гр и 5 Гр, увеличивая содержание первичных, вторичных и конечных продуктов пероксидации липидов в начальный период лучевого поражения и снижая их количество к концу эксперимента, по сравнению с нелеченными животными.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Крылов В.Н., Ошевенский J1.B., Сокольский С.С., Пономаренко A.A. Апингалин - универсальное фармакологическое средство.// Апитерапия сегодня (вып. 6). - Мат. VI международной научно-практической конференции по апитерапии, г. Рыбное Рязанской обл., 14-17 октября 1997г., Рязань, 1997.-С. 151-154.

2. Пономаренко A.A., Улитин И.Б. Влияние пчелиного яда на систему крови при экспериментальной лучевой болезни // Структура и регуляция биосистем: Сборник работ молодых ученых биологического факультета ННГУ. - С. 149-152.

3. Пономаренко A.A., Корягин A.C. Влияние продуктов пчеловодства на систему крови при экспериментальной лучевой болезни // Апитерапия сегодня (вып. 7). - Мат. VII международной научно-практической конференции по апитерапии, г. Рыбное Рязанской обл., 10-13 октября 1999г., Рязань, 1999.-С. 150-153.

4. Корягин A.C., Пономаренко A.A., Ошевенский Л.В., Новиков В.В., Крылов В.Н. К проблеме использования продуктов пчеловодства в радиобиологии // Вестник нижег. отделения РАЕН, Москва-Н.Новгород, вып. 3, 2000, (принято в печать)

5. Николаева (Пономаренко) A.A. Влияние пчелиного яда на морфо-функционапьное состояние эритроцитов при экспериментальной лучевой болезни // Тез. докл. научн. конфер. молодых ученых научн.-иссл. учрежд. и высш. мед. учебн. заведений Поволжья и Северного Кавказа, 15-17 февраля, 2000 г., Н.Новгород., 2000. - С. 152-153.

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Николаева, Анна Алексеевна

ВВЕДЕНИЕ.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Система крови и действие ионизирующих излучений.

1.1.1. Нормальное кроветворение и его регуляция.

1.1.2. Механизмы поражающего действия радиации на организм.

1.1.3. Костно-мозговая форма лучевой болезни.

1.1.4. Терапия и профилактика лучевой болезни.

1.2. Характеристика физико-химических и биологических свойств продуктов пчеловодства.

1.2.1. Маточное молочко.

1.2.2. Прополис.

1.2.3. Мед.

1.2.4. Пчелиный яд.

1.2.5. Использование пчелопродуктов в экспериментальной радиобиологии и медицине.

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Лабораторные методы исследования периферической крови.

2.2. Методы оценки состояния свободнорадикальных процессов.

2.3. Методы исследования кроветворной функции красного костного мозга.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ.

3.1. Исследование защитных свойств пчелиного яда.

3.1.1. Радиопротекторные свойства пчелиного яда.

3.1.2. Терапевтические свойства пчелиного яда.

3.2. Исследование терапевтических свойств меда, прополиса и маточного молочка.

3.2.1. Применение пчелопродуктов при лучевой болезни средней степени.

3.2.2. Применение пчелопродуктов при лучевой болезни тяжелой степени.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Физиологический анализ действия продуктов пчеловодства на систему крови крыс при экспериментальном лучевом поражении"

Актуальность проблемы

В настоящее время все большее количество людей сталкивается с ионизирующими излучениями. Испытания новейшего оружия и катастрофы на атомных энергетических станциях, на предприятиях, связанных с использованием атомной энергии, приводят к тому, что значительная часть населения попадает в зону радиоактивного заражения, как показала авария на ЧАЭС и предприятии "Маяк" Челябинской области. Широкое использование энергии излучения в промышленности, сельском хозяйстве и медицине привело к увеличению числа людей, так или иначе имеющих отношение к использованию радиоактивных материалов. В связи с этим, проблема снижения радиочувствительности биологических объектов, в том числе и человека, является одной из центральных в радиобиологии. Поэтому особую актуальность приобретает поиск средств для защиты организма от действия ионизирующих излучений, и, что особенно важно, терапии лучевой болезни.

Современными исследователями установлено радиозащитное действие многих химических соединений, которые, будучи введенными в организм перед облучением, повышают радиорезистентность и облегчают течение лучевой болезни (Бак, 1968; Романцев и др., 1980; Владимиров и др., 1989). Основные недостатки таких препаратов состоят в том, что они эффективны лишь при профилактическом применении перед острым облучением, в течение короткого промежутка времени и в дозах, близких к пределам переносимости. Сравнительно недавно среди профилактических противолучевых средств была выделена группа стимуляторов радиорезистентности, куда относятся вещества, повышающие устойчивость организма к облучению в "су б летальных" дозах, вызывающих костномозговую форму лучевой болезни различных степеней тяжести. Эти вещества проявляют защитные свойства как в условиях профилактического, так и лечебного применения; эффективны в условиях острого и хронического облучения. Сюда относятся иммуномодуляторы, гормональные препараты, витамины, адаптогены из растительного сырья, продукты пчеловодства, антиоксиданты (Легеза, Владимиров, 1998).

Продукты пчеловодства - мед, прополис, маточное молочко - многокомпонентные смеси, обладающие широким спектром биологической активности. Многочисленными исследованиями показано, что они обладают общетонизирующим действием, стимулируют энергетические процессы в клетках, активируют процессы биосинтеза (Лудянский, 1994; Крылов и др., 1998). Лучевое поражение организма, напротив, сопровождается угнетением этих процессов, дестабилизацией мембран (Кудряшов, 1986; Рыс-кулова, 1986; Коломийцева, 1989), что и обусловило нами выбор продуктов пчеловодства в качестве средств, которые, в силу их биологической активности, должны снижать тяжесть поражения организма.

Цель и задачи исследования

Для достижения указанной цели были поставлены следующие задачи:

1. Исследовать влияние пчелиного яда на кислотную резистентность эритроцитов, морфологический состав крови, интенсивность свободнора-дикального окисления при различных дозах у-облучения в условиях предварительного введения яда и при лечении экспериментальной лучевой болезни тяжелой и средней степени лабораторных животных.

Научная новизна

Показано защитное действие ингаляционного препарата на основе маточного молочка и прополиса "Апингалин" на гранулоцито- и лимфопо-эз. Выявлено, что мед и маточное молочко при их пероральном введении стимулируют эритропоэз и синтез гемоглобина.

Научно-практическая значимость

Выявленные радиопротекторные и терапевтические свойства пчелиного яда позволяют утверждать, что в терапевтических дозах он является перспективной основой для создания препаратов, повышающих радиорезистентность организма. Обнаруженное противоанемическое действие меда и маточного молочка предполагает возможность их использования в терапии различных заболеваний, связанных с ослаблением эритропоэза. Эффективность применения препарата на основе прополиса и маточного молочка "Апингалин" на гранулоцито- и лимфопоэз позволяет предложить его для применения в лечении последствий облучения и различных видов патологии, сопровождаемых снижением гемопоэтической функции костного мозга. Проведенные исследования показали, что продукты пчеловодства наиболее эффективны при их комплексном использовании.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Пчелиный яд при его курсовом применении до и после у-облучения снижает повреждающее действие радиации на организм, повышая радиорезистентность и облегчая, тем самым, течение острой лучевой болезни средней и тяжелой степеней тяжести.

Апробация работы

По теме диссертации опубликовано 5 работ. Основные положения доложены на VI международной научно-практической конференции по апитерапии (Рыбное, 1997), VII международной научно-практической конференции по апитерапии (Рыбное, 1999), научной конференции молодых ученых научно-исследовательских учреждений и высших медицинских учебных заведений Поволжья и Северного Кавказа (Нижний Новго8 род, 2000), на расширенном заседании кафедры физиологии и биохимии человека и животных ННГУ (2000).

Структура и объем диссертации

Материалы диссертации изложены на 154 страницах машинописного текста, иллюстрированы 20 таблицами и 34 рисунками. Работа состоит из введения, обзора литературы, характеристики материалов и методов исследования, глав результатов исследования, обсуждения, заключения, выводов и списка литературы, содержащего 301 источников, из которых 223 на русском и 78 на иностранных языках.

Заключение Диссертация по теме "Физиология", Николаева, Анна Алексеевна

ВЫВОДЫ

2.Пчелиный яд, при курсовом введении в дозах 0,1 мг/кг и 0,5 мг/кг перед у-облучением, повышает радиорезистентность организма, приводя к повышению содержания форменных элементов и гемоглобина в периферической крови, нормализации кислотной резистентности мембран эритроцитов, уменьшению скорости процессов перекисного окисления липи-дов крови.

3.Пчелиный яд в дозах 0,1 мг/кг и 0,5 мг/кг, используемый после облучения, облегчает течение острой лучевой болезни средней степени тяжести, стимулируя восстановительные процессы в системе крови. При лечении лучевой болезни средней степени тяжести, применение яда в дозе 0,1 мг/кг приводит к повышению уровня форменных элементов в циркуля-торном русле крыс и восстановлению функций мембран эритроцитов. Применение дозы яда 0,1 мг/кг при терапии тяжелой формы лучевого поражения оказывает стимулирующее действие только на систему красной крови. Пчелиный яд в дозе 0,5 мг/кг неэффективен при лечении тяжелой формы лучевой болезни.

4.Мед, прополис и маточное молочко при терапевтическом применении обладают более выраженными радиозащитными свойствами на систему крови и кроветворения, по сравнению с пчелиным ядом.

125 нию с контрольными (нелеченными) животными, восстанавливая названные показатели до уровня интактных животных.

4.2.Курсовое применение прополиса и маточного молочка при их ингаляционном введении (препарат "Апингалин") в терапии лучевой болезни более эффективно стимулирует репарационные процессы в системе белой крови, увеличивая, по сравнению с показателями контрольных животных, содержание гранулоцитов и лимфоцитов и стимулируя их образование в красном костном мозге.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В результате проведенного исследования следует заключить, что продукты пчеловодства - пчелиный яд, прополис, маточное молочко и мед - оказывают радиозащитный эффект на систему крови и кроветворения лабораторных крыс при моделировании у них острой лучевой болезни тяжелой и средней степеней тяжести. Согласно полученным результатам, пчелиный яд при внутрибрюшинном введении в дозах 0,1 мг/кг и 0,5 мг/кг обладает радиопротекторным действием, то есть снижает поражающее действие радиации в условиях профилактического введения. Защитное действие яда проявляется в улучшении ряда гематологических показателей. У животных, которым перед облучением вводился пчелиный яд, быстрее восстанавливалось общее количество гемоглобина, эритроцитов и лейкоцитов. Количество ретикулоцитов в опытных группах превышало этот показатель у контрольных животных, что говорит об интенсификации эритропоэза, и, следовательно, об эффективной защите системы кроветворения от повреждения. Следует отметить, что пчелиный яд оказывал радиозащитное действие и на зрелые циркулирующие эритроциты. Известно, что красная кровь сравнительно радиорезистентна, однако, мембраны эритроцитов, также, как и других клеток, повреждаются вследствие первичных радиационно-химических изменений. К ним относятся: нарушение липидного состава мембран, интенсификация свободнорадикальных процессов, накопление токсичных продуктов липопероксидации, что влияет на активность мембраносвязанных ферментов. В результате этих процессов изменяется морфо-функциональное состояние эритроцитов, что отражается на их гемолитической резистентности. Нашими исследованиями установлено, что пчелиный яд, при его введении перед облучением, нормализует устойчивость клеток красной крови к гемолитическому действию кислоты. Следует отметить, что наиболее выраженным радиопротекторным действием обладал пчелиный яд в дозе 0,5 мг/кг при его введении перед облучением, вызывающим тяжелую форму ОЛБ. Защитный эффект пчелиного яда в дозе 0,1 мг/кг на систему крови проявлялся в меньшей степени.

Таким образом, предварительное введение пчелиного яда повышает радиорезистентность организма. Рассуждая о возможных механизмах его радиопротекторного действия, следует говорить, прежде всего, о повышении общей неспецифической резистентности, так как яд, являясь стресс-агентом, активирует защитные нейроэндокринные механизмы, инициируя развитие стресс-реакции. Активация симпато-адреналовой системы приводит к тому, что в крови повышается концентрация катехоламинов, способствуя повышению эндогенного фона радиорезистентности. С другой стороны, активация гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковой системы приводит к выделению глюкокортикоидов, которые угнетают процессы пролиферации в костном мозге, защищая, таким образом, стволовые и бластные клетки в период интерфазы деления - самой "чувствительной" фазы клеточного цикла. Задержка деления обеспечивает сохранность ДНК и создает благоприятные условия для ее постлучевой репарации. Кроме того, возможно, более быстрое восстановление системы крови у животных, которым вводился пчелиный яд, связано с его иммуностимулирующим действием, что крайне важно при развитии ОЛБ, так как она сопровождается резким снижением иммунной реактивности организма, зачастую приводящему к летальному исходу.

В отличие от большинства веществ, используемых в качестве радиопротекторов, пчелиный яд обладает также способностью облегчать течение лучевой болезни при его введении после облучения. Так, в наших экспериментах токсин купировал эритропению, анемию и лейкопению у животных с лучевой болезнью тяжелой и средней степеней тяжести. Введение пчелиного яда в дозах 0,1 мг/кг и 0,5 мг/кг, также, как и при профилактическом его применении, нормализовывало кислотную резистентность эритроцитов. Терапевтическое действие пчелиного яда, по нашему мнению, вероятнее всего, связано с его антиоксидантным действием, что подтверждено в наших исследованиях при помощи ТБК-теста. Согласно полученным результатам, пчелиный яд существенно снижал активность процессов ПОЛ. Механизм антиоксидантного действия токсина, по-видимому, обусловлен как наличием в составе яда существенного количества белков и пептидов с большим количеством БН-групп, так и активностью фосфолипазы А2, которая в первую очередь гидролизует окисленные фосфолипиды, снижая, тем самым, их долю в мембранах. Терапевтическое действие пчелиного яда проявляется лишь при малых дозах облучения и при использовании сравнительно небольших доз токсина. Так, в результате наших исследований, выявлено, что лечение лучевого поражения средней степени наиболее эффективно пчелиным ядом в дозе 0,1 мг/кг, тогда как при тяжелой форме ОЛБ, использование яда малоэффективно, а введение его в дозе 0,5 мг/кг даже усугубляет тяжесть поражения.

Как показали наши исследования, более действенными терапевтическими средствами при терапии ОЛБ тяжелой и средней степени тяжести оказались другие продукты пчеловодства - мед, прополис и маточное молочко. Выявлено, что все исследуемые продукты повышают радиорезистентность организма. Мед при его пероральном введении обладал выраженным эритростимулирующим действием, снижая постлучевую эритро-пению и анемию. Кроме того, у животных, получавших мед, после окончания курса терапии, в красном костном мозге отмечено существенное увеличение числа элементов эритроидного ряда, по сравнению с нелечен-ными животными. Маточное молочко и прополис в большей степени влияли на состояние белой крови. В крови животных, которые получали эти продукты (ингаляционно или перорально), количество лейкоцитов выше, чем в других группах. При анализе костного мозга также отмечается лейкостимулирующее действие этих продуктов, так как процент клеток миелоидного ряда у животных этих групп достоверно выше, чем у контрольных. Сохранение в крови опытных крыс большего, чем в контрольной группе, количества лимфоцитов свидетельствует об активности иммунной системы, что способствует благоприятному исходу лучевой болезни.

Позитивное действие исследуемых продуктов может быть связано с их общетонизирующим действием, способностью активировать биосинтетические и энергетические процессы в клетках. Механизмы терапевтического действия продуктов пчеловодства обусловлены, по нашему мнению, их антиоксидантными свойствами. Как показали результаты, прополис, мед и маточное молочко снижают интенсивность процессов ПОЛ к окончанию эксперимента, что отражает динамика изменения концентрации в крови животных молекулярных продуктов пероксидации. Особенно выражен этот эффект при небольших дозах облучения. В крови крыс уменьшается количество первичных (ДК), вторичных (ТК, МДА) и конечных (ОШ) продуктов ПОЛ. Особенно важным фактом, на наш взгляд, является снижение концентрации шиффовых оснований, которые, как известно, отражают степень повреждения мембран.

Очевидно, что комбинированные препараты на основе продуктов пчеловодства обладают более широким спектром действия. Сочетанное применение маточного молочка с медом, маточного молочка с прополисом и медом, маточного молочка с прополисом оказывалось особенно эффективным. Большого внимания заслуживает новый препарат на основе маточного молочка и прополиса "Апингалин". Он предназначен для ингаляционного введения, следовательно, биологически активные вещества быстрее попадают в кровеносное русло, менее подвержены расщеплению. Гематологические и биохимические показатели животных, которые получали "Апингалин", превосходят таковые не только у контрольных, но и у животных других опытных групп.

Таким образом, в ходе проведенных экспериментов по исследованию влияния пчелиного яда, прополиса, маточного молочка и меда на восстановление системы крови крыс при экспериментальном лучевом поражении, следует заключить, что все исследуемые продукты пчеловодства, в той или иной мере, обладают стимулирующим действием на систему крови и кроветворения, проявляя радиопротекторные и терапевтические свойства.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Николаева, Анна Алексеевна, Нижний Новгород

1. Абрамов М.Г. Клиническая цитология. - М.: Медицина, 1974.- 232 с.

2. Аганин JI.B. Мед и его исследование. Саратов: Изд. Сарат. ун-та., 1985.-98 с.

3. Агафонов В.И. Дыгай A.M., Болдышев Д.А., Хлусов И.А., Гольдберг БД О стимулирующем влиянии сиаловой кислоты на процессы постлучевой регенерации гемопоэза.// Эксперим. и клинич. фармакология. 1995. - Т.58. - №4, С.41-44.

4. Акоев И.Г. Отдаленные последствия облучения в системе крови // Мед. радиобиология. 1976.-Т.13.-№1.- С.21-28.

5. Алексеенко A.B. Роль липидов и продуктов перекисного окисления липидов в биосинтезе и функциональной активности ДНК. М: Наука,1981.-С.З-16.

6. Аллее П.Т., Аллее Г.К. Результаты определения физиологической активности компонентов пчелиного маточного молочка при его хранении // Международный конгресс по пчеловодству (Апимондия), 1982.-С.20-24.

7. Андухар Б.П. Мед в питании грудного ребенка // Международный конгресс по пчеловодству (Апимондия), 1974.- С. 69-70.

8. Антонов В.Ф. Липиды и ионная проницаемость мембран. М.: Наука,1982.- 151 с.

9. Артемов Н.М., Калинина Т.Е., Михайлова Я.В. Влияние пчелиного яда на морфологический состав крови млекопитающих //Уч. зап. горьк. унта. Горький, 1951. - вып. 19. - С. 53-87.

10. Артемов Н.М., Конькова Л.Г. Влияет ли пчелиный яд на радиорезистентность крыс// Уч. записки горьк. ун-та. Горький, 1968. - вып. 90. -С.8-12.

11. Артемов Н.М., Конькова Л.Г., Сергеева Л.М. Радиозащитный эффеккт пчелиного яда.// Механизм действия биологически активных веществ: Межвуз. сб. Горький.- 1973.- С.28-34

12. Артемов Н М. Физиологические основы действия на организм пчелиного яда: Доклад на соиск. уч. степ, д-ра биол. наук. Горький, 1974.56 с.

13. Атясов Н.И., Гусева М.П. Куприянов В.А. Десятилетний опыт применения прополиса при лечении гранулирующих ран в горьковском ВОЦ // Междун. конгресс по пчеловодству (Апимондия), 1972.- С. 46-48.

14. Афанасьев Б.В., Алмазов В.А. Родоначальные стволовые клетки человека. М.: Медицина, 1985.- 168 с.

15. Бажутина Г.А., Романова Е.Б., Суслова H.A. Влияние мелиттина на морфологический состав крови // Механизмы действия зоотоксинов: Межвуз. сб. вып. 4,1976.- С.76-80

16. Бак 3., Александер П. Основы радиобиологии. М.: Атомиздат.-1963.-234 с.

17. Барабой В.А., Брехман И.И., Глотин В.Г., Кудряшов Ю.Б. Перекисное окисление и стресс. Санкт-Петербург: Наука, 1992. - 150 с.

18. Барабой В.А., Орел В.Э., Карнаух И.М. Перекисное окисление липидов и радиация. К.: Наукова думка, 1991.- 197 с.

19. Барабой В.А., Чеботарев Е.Е. Проблема перекисного окисления липидов в радиобиологии // Радиобиология. 1986.-№ 5.-С. 591-595.

20. Бездробная Л.К., Барабой В.А., Дзятковская В.А., Клименко Т.В. Интенсивность перекисного окисления липидов в крови крыс при воздействии малых доз радиации // 1 Всесоюзн. радиобиол. съезд: Тез. докл. -Пущино, 1989. -С.52-53.

21. Белоусова О.И., Горизонтов П.Д., Федотова М.И. Радиация и система крови. М.: Атомиздат, 1979.- 106 с.

22. Биленко M.B. Ишемические и реперфузионные повреждения органов. -М.: Медицина, 1989. 370 с.

23. Богач И.М, Каримова 3.JL. Применение прополиса при различных заболеваниях дыхательной системы // Междунар. симпозиум по применению прод. пчел, в медиц. и ветер.: Сб. научн. тр. 1972.- С.47.

24. Богач П.Г., Курский М.Д., Крученко М.Е., Рыбальченко В.К. Структура и функции биологических мембран. К.: Прогресс, 1981.- 190 с.

25. Богданова П. Антисептические свойства меда // Пчеловодство, 1989.-вып.6.-С.46-47.

26. Бонд В., Флиднер Т., Аршамбо Д. Радиационная гибель млекопитающих. М: Атомиздат, 1971.-110 с.

27. Бонд В., Флиднер Т. Действие излучения на систему кроветворения. Костно-мозговой синдром. М: Атомиздат, 1971.-336с.

28. Бонд В. Радиационная гибель млекопитающих. Нарушение кинетики клеточных популяций. М.: Атомиздат, 1971.-221 с.

29. Брайнес JI.H. Маточное молочко в свете вопросов биологии и медицины // Вестник 5 НИИ пчеловодства РФ.-Рыбное.-вып.5.- 1958.- 51 с.

30. Брайнес JI.H., Вахонина Т.В. О фракциях липидно-жировой компоненты препарата апилак (маточного молочка) // Инф. бюлл. о маточном молочке. Рыбное: изд. НИИ пчеловодства, 1974.-С. 91-97.

31. Бриллиант М.Д., Воробьев А.И. Роль липидов в распределении эритроцитов по кислотной эритрограмме . В кн. Вопросы биофизики, биохимии и патологии эритроцитов. - М.: Наука, 1967.- С. 123-131.

32. Бурлакова Е.Б., Алесенко A.B., Аристархова С.А. Биоантиоксиданты в лучевом поражении и злокачественном росте. М.: Наука, 1975. - 211 с.

33. Бурназян А.И. Радиационная медицина. М.: Атомиздат, 1978.-386 с.

34. Бутомо Н.Ф. Трансплантация костного мозга при лучевых поражениях. Л: Наука, 1970.-287 с.

35. Вавилов Ю.Л. Биохимические компоненты маточного молочка медоносной пчелы и морфологическое действие // Дисс.канд. биол. наук. -Горький, 1971.-203 с.

36. Вагин Г.Е. Пчелы, мед и здоровье человека. -М.: Калита, 1994.- 224 с.

37. Вайтацкий М. Продукты пчел и препараты меда. -Варшава, 1973.- 167 с.

38. Ванг Баолонг, Ши Болун и др. Исследование гамма-глобулина, содержащегося в маточном молочке// Международн. конгресс, по пчеловодству (Апимондия), 1987.- С. 510.

39. Васин М.В, Ушаков И.Б., Суворов H.H. Противолучевая эффективность индралина при локальном у-облучении кожи // Радиационная биология. Радиоэкология, 1996.-№1.-С.42-48

40. Ватанабе Т. Компоненты меда и их лечебная эффективность с позиций восточной медицины // Междунар. конгресс по пчеловодству (Апимондия), 1985.- С.369-375.

41. Вахонина Т.В Пчелиная аптека. Л.: Лениздат, 1992.- 190 с.

42. Вахонина Т.В. Прополис -состав, свойства и возможности практического применения. -М.: Минсельхозиздат, 1976.- 98 с.

43. Вахонина Т.В., Покровский С.А., Левина Л.П., Бондарева Е.М. Стандартизация маточного молочка: протеины и его фракции // Продукты пчеловодства в сельском хозяйстве и медицине: Сб. трудов. Вологда, 1987. - С. 53-54.

44. Вахонина Т.В., Покровский С.А. Природный пчелиный продукт маточное молочко и его биологически активные вещества // Международный конгресс по пчеловодству (Апимондия), 1987.- С. 511-513.

45. Вахонина Т.В., Левина Л.П. Продукт из маточного молочка с добавлением прополиса //Продукты пчеловодства в сельском хозяйстве и медицине: Сб. трудов. -Гомель, 1991.- С.45-48.

46. Вернигорова Л.А., Лебедев В.Г. Радиозащитная эффективность некоторых зоотоксинов // Радиобиология, 1986. Т. 26.-№ 4. - С.532-542.

47. Владимиров В.Г., Джаракян Т.К. Радиозащитные эффекты у животных и человека. М: Атомиздат, 1983.- 206 с.

48. Владимиров В.Т., Красильников И.И., Арапов О.В. Радиопротекторы: структура и функция. К.: Наукова думка, 1989.- 217 с.

49. Владимиров Ю.А. Арчаков А.И. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах. М.: Наука, 1972,- 245 с.

50. Владимирская Е.Б. Костно-мозговое кроветворение // Гематол. и трансфуз. 1993.- №4.- С.4-6.

51. Воробьев А.И. Острая лучевая болезнь // Тер. архив., 1986.- Т. 58.- № 12.- С. 3-8

52. Воробьев O.K., Дризе Н.И., Чертков И.Л. Схема кроветворения // Пробл. гематол.- 1995.- Т. 1.- № 1.- С. 7-14.

53. Гаврилов O.K., Козинец Г.И., Черняк Н.Б. Клетки костного мозга в периферической крови. М.: Медицина, 1976.-69 с.

54. Гаврилов O.K., Козинец Г.И., Черняк Н.Б. Клетки костного мозга в периферической крови (структура, биохимия, функция).- М.: Медицина, 1985. 286 с.

55. Гительзон И.И., Терсков И.А. Эритрограммы как метод клинического исследования. Красноярск: Изд. Красноярск ун-та, 1959.- 246 с.

56. Главинская Т.А., Курникова Г.Ю. Многолетний опыт использования апилака. Клинические, иммунологические и биохимические исследования // Апитерапия. Биология и технология продуктов пчеловодства: Сб. трудов. Днепропетровск, 1988.- ч. 1.- С. 262-269.

57. Гогвадзе В.Г, Брутовецкий Н.Н, Жулова A.A. Участие фосфолипазы А2 в индуцированном продуктами перекисного окисления липидов разобщении митохондрий печени крыс // Биохимия. 1990. - Т.55. - Вып. 12.-С. 2195-2199.

58. Гонне М. Натуральные антибиотические факторы, содержащиеся в меде // Междунар. Конгресс по пчеловодству (Апимондия), 1982.- С. 345346.

59. Гончаренко Е.Н, Кудряшов Ю.Б. Гипотеза эндогенного фона радиорезистентности.- М.: Изд-во МГУ, 1980.- 89 с.

60. Горизонтов П.Д. Радиационная медицина.- М.: Медицина, 1963.- 215 с.

61. Горизонтов П.Д, Белоусова О.И, Федотова М.И. Стресс и система крови. М.: Медицина, 1983.-240с.

62. Горизонтов П.Д, Протасова Т.Н. Роль АКТГ и кортикостероидов в патологии. М.: Медицина, 1968.- 335 с.

63. Гречану А, Йенцу В. антибиотический эффект прополиса, пыльцы и меда// Междунар. конгресс по пчеловодству (Апимондия).- 1982.-С.37-40

64. Гречану А. Натуральные антибиотические факторы, содержащиеся в меде// Междунар. конгресс по пчеловодству (Апимондия).- 1982.-С. 33-37.

65. Груздев Г.П. Проблема поражения кроветворной ткани при острой лучевой патологии. М: Медицина, 1988.- 140 с.

66. Гуськова А.К, Баранова A.B., Друтман Р.Д. Руководство по организации медицинской помощи при радиационных авариях. М.: Медицина, 1985.-98 с.

67. Гуськова А.К, Байсоголов Г.Д. Лучевая болезнь человека. М: Медицина, 1970.- 325 с.

68. Дегтярева И.И. Механизм действия трансплантации костного мозга облученным животным. К.: Здоровья, 1973.- 100 с.

69. Демченко А.Н., Костржевская Е.Г. Мелиттин: структура, свойства, взаимодействие с мембраной // Укр.биох.журн.-1986.-Т.58.-№5.-С.74-90.

70. Деревич А., Попеску A.JL, Попеску И. Новый вклад в исследование биологических свойств прополиса // Международн. конгресс по пчеловодству (Апимондия), 1965.- С.76-77.

71. Дерюгина A.B. Исследование электрофоретической подвижности и аг-регационых свойств эритроцитов при действии пчелиного яда и его препаратов. /Дисс. канд. биол. наук, Н. Новгород, 1998- 126 с.

72. Джарвис Д.С. Мед и другие естественные продукты// Междунар. конгресс по пчеловодству (Апимондия).- 1976.-С.13-23.

73. Егоров А.П., Бочкарев В.В. Кроветворение и ионизирующая радиация. М: Медгиз, 1975.- 256 с.

74. Жербин Е.А., Чухловин А.Б. Радиационная гематология. М.: Медицина, 1989.-298с.

75. Журавлев А.И. Биоантиокислители в регуляции метаболизма в норме и патологии. М.: Наука, 1982.-С. 15-65.

76. Ильин JI.A. Неотложная помощь при острых радиационных воздействиях. М.: Медицина, 1976.- 123 с.

77. Ильюченок Т.Ю. О фармакологических и радиозащитных свойствах мелиттина // Фармакология и токсикология. 1974. - Т.37. - вып. 3. - С. 367-370.

78. Йориш Н. П. Продукты пчеловодства и их использование. -М.: Сель-хозиздат, 1976.-143 е.

79. Кабнев O.K., Балмуханов С.Б. Природные фенолы перспективный класс противоопухолевых и радиопротекторных соединений. М: Энер-гоатомиздат,1975.- 224 с.

80. Каган В.Е., Орлов О.Н., Прилипко JI.JI. Проблема анализа эндогенных продуктов перекисного окисления липидов// Итоги науки и техники. Сер "Биофизика". М.: ВИНИТИ 1986.-Т.6. - 136 с

81. Калинина Т.Е. О действии ядов пчел и других перепончатокрылых на морфологический состав крови // Уч. зап. горьк. ун-та. Горький, 1962. - вып.55. - С. 245-257.

82. Као Жун, Ши Болун, Жанг Нину. Исследование половых гормонов, содержащихся в маточном молочке// Междунар. конгресс по пчеловодству (Апимондия).- 1987.-С. 495.

83. Капульцевич Ю.Г. Количественные закономерности лучевого поражения клеток и радиочувствительность.- М.: Наука, 1978.- 323 с.

84. Каримова 3. Л., Родинова Е.И., Кивалкина В.П. Прополис в комплексном лечении туберкулеза легких и бронхов / Прополис. Сб. трудов -IV изд.-1985.-С.137-139.

85. Квачева Ю.Е., Власов П.А. Патоморфологическая характеристика раннего некробиоза миелокариоцитов при остром лучевом поражении // Радиац. биология. Радиоэкология, 1997.- Т.37., вып. 1- С. 76-80.

86. Кеэп Т.В. Исследование с помощью флуоресцентных зондов перестроек в структуре мембран клеточных ядер при перекисном окислении липидов, вызванном у-облучение// Радиобиология.-1980.-Т.20.-№5.-С.648-653.

87. Кивалкина В.П. Лекарственные формы из прополиса и их антимикробное действие //2 Ленинградск. конф. по примен. продуктов пчеловодства в медицине и ветеринарии: Тез. докл.- 1960.-С.61-62.

88. Кивалкина В.П. К истории изучения прополиса и перспективы его применения // Продукты пчеловодства в сельском хозяйстве и медицине: Сб. трудов. Вологда, 1987.-С.40-41.

89. Кивалкина В.П. Экспериментальное изучение прополиса и его практическое значение //Биологически активные продукты пчеловодства и их использование: Межвуз. сб. научн. трудов. -Горький, 1990.-С.38.

90. Кивалкина В.П. Влияние прополиса на иммунологическую реактивность // Междунар. конгресс по пчеловодству (Апимондия).- 1969.-С.205.27

91. Коггл Дж. Биологические эффекты радиации. М: Энергоатомиздат, 1986.-256 с.

92. Когтева Г.С., Безуглов В.В. Ненасыщенные жирные кислоты как эндогенные биорегуляторы // Биохимия. 1998. - Т.63.- № 1,- С. 25-28.

93. Козинец Г.И., Макаров В.А. Исследование системы крови в клинической практике. М: Триада-Х- 1998.- 480 с.

94. Козинец Г.И. Экология и кроветворение // Гематол. и трансфуз. 1990.-№12.-С. 7-11.

95. Козинец Г.И., Гольдберг Е.Д Кинетические аспекты гемопоэза.- Томск: Изд. Томск, ун-та, 1982.- 178 с.

96. Козинец Г.И., Жиляев Е.Г., Легеза В.И. Клетки периферической крови ликвидаторов аварии на ЧАЭС после пятилетнего наблюдения // Гематол. и трансфуз. 1994. - №2.- С.3-10.

97. Козинец Г.И., Погорелов В.М., Хазем Г.М., Новодержкина Ю.К., Дягилева О.А. Сарычева Т.Г., Федорова И.М. Физиологическая гибель клеток при гемопоэзе // Клинич. лаборат. диагн. 1996.-№2.- С. 37-39.

98. Козловцев Ю.С. Физиологические основы действия на организм маточного молочка и некоторые перспективы его использования // Биологическая активность продуктов пчеловодства и их использование.: Межвуз. сб. тр. 1990. -С.76-84.

99. Коломийцева И.К. Радиационная биохимия мембранных липидов.- М: Наука, 1989. -335 с.

100. ЮО.Коноплянников А.Г. Радиобиология стволовых клеток. М: Наука, 1984.-267 с.

101. Коноплянников А.Г. Стволовые клетки самообновляющихся систем как детерминанты выживаемости животных в острый период лучевого поражения // Итоги науки и техники. Сер. "Радиационная биология". -М.:, 1980.-вып.6.- С. 6-28.

102. Корогодин В.И. Проблема пострадиационного восстановления.: М: Атомиздат, 1984.- 345 с.

103. ЮЗ.Корягин A.C., Улитин И.Б., Сандова О.М., Новиков В.В., Крылов В.Н. Ингаляция продуктов пчеловодства в экспериментальной терапии лучевой болезни // Матер. 6-й научн.-практ. конф. по апитерапии. Рыбное, Рязань, 1998.- С. 82-83

104. Крылов В.Н. Пчелиный яд. Свойства, получение, применение. Н. Новгород: Изд-во ННГУ, 1995.-223 с.

105. Юб.Крылов В.Н., Сокольский С.С. Маточное молочко пчел. Свойства, получение, применение. Краснодар: "Агропромполиграфлист", 2000 .216 с.

106. Крылов В.Н. , Корягин A.C., Ястребова Е В. Пчелиный яд и лучевая болезнь // Пчеловодство. 1994. - №6.-С.7-8.

107. Ксенжек О.С, Гевод B.C. Мелиттин. Поверхностная активность и возможный механизм литического действия // Биол.мемб.-1985.-Т.2.-№4.-С.395-404.

108. Кудрявцева Т.В, Савастьянова ЛИ, Канарейкина JI.M, Использование меда в лечебном питании детей, больных инсулинзависимым сахарным диабетом // Апитерапия сегодня: Сб. трудов НИИ пчеловодства. Рыбное, 1993.-С. 47-48

109. ПО.Кудряшов Ю.Б, Беренфельд Б.С. Основы радиационной биофизики. -М: Изд-во МГУ, 1982.- 456 с.111 .Кудряшов Ю.Б Лучевое поражение и его модификация. М.: Медицина, 1985.- 153 с.

110. Кузин A.M. Структурно-метаболическая теория в радиобиологии. М: Наука, 1986.- 237 с.

111. З.Кузьмина К.А. Лечение пчелиным медом и ядом. Саратов: Изд. Са-рат. ун-та, 1981.- 96 с.

112. Лазарь Е.М. Исследование радиопротекторных свойств продуктов пчеловодства на модели эритроцитов человека// 4 нижегородская сессия молодых ученых. Сб. тез. докл. Н. Новгород, 1999.- С.241-242.

113. Ламберти Х.Р, Корнехо Л.Г. Гамма-глобулин маточного молочка и его фармакологическое применение в восстановительных процессах // Междунар. конгресс по пчеловодству (Апимондия).- 1982.-С.60-62.

114. Лашина В.Л. Функциональное состояние эритроцитов в условиях действия на организм природных биологически активных веществ (зоо-токсинов) /Дисс. .канд. биол. наук. Горький, 1985.- 187 с.

115. Легеза В.И, Владимиров В.Г. Новая классификация профилактических противолучевых средств // Радиационная биология. Радиоэкология. 1998.-Т.38.- №3.- С.416-423.

116. Леонавичяус Р. Лечение пергой гипохромной анемии// Междунар. конгресс по пчеловодству (Апимондия).- 1982.-С. 86-89

117. Ли Д.Э. Действие радиации на живые клетки. М: Атомиздат, 1962.335 с.

118. ЛопуховаВ.В. Физиологические основы адаптации. Томск, 1982.-387 с.

119. Лудянский Э.А. Апитерапия. Вологда: Полиграфист, 1994.- 463 с.

120. Лудянский Э.А. Комплексное применение натуральных продуктов пчеловодства в медицине.// Биологически активные продукты пчеловодства и их использование: Межвуз. сб. научн. тр. Горький, 1990.-С.38.

121. Лупачев Н.Ф. К фармакологии апилака // Апилак (клинические данные), М.: Изд. Медэкспорт. 1996.-С.2-8.

122. Люсов В,А., Мещеряков М.В. Маточное молочко и липидный состав крови больных ИБС // Пчеловодство.-1994. № 6. - с. 6-7.

123. Мазурик В.К., Михайлов В.Ф. О некоторых молекулярных механизмах основных радиобиологических последствий действия ионизирующих излучений на организм млекопитающих// Радиац. биология. Радиоэкология. 1999.- Т.39.- № 1.-С. 89-96.

124. Макаров В П. Эритропоэз и энергообмен организма. Новосибирск: Наука, 1984.- 96с.

125. Маннанова Р.Т., Маннанов А.Н., Кивалкина В.П. Стимулирование ко-стно-мозговой вытяжкой с прополисом специфического иммунитета //Биологически активные продукты пчеловодства и их использование. -Днепропетровск, 1988.- ч. 2.-С.35-36.

126. Матушевский Ж.Е., Колтек А. Иммунорегулирующее действие маточного молочка // Междунар. конгресс по пчеловодству (Апимондия).-1973.- С.431-433.

127. Меерсон Ф.З. Общий механизм адаптации и роль в нем стресс-реакции, основные стадии процесса адаптации // Физиология адаптационных процессов. М.: Наука, 1986. - С. 77-124.

128. Мельниченко А.Н., Вавилов Ю.Л. О содержании нуклеиновых кислот в маточном молочке. // Междунар. конгресс по пчеловодству (Апимон-дия).-1971.- С.226-230

129. Меньшиков В.В. Лабораторные методы исследования в клинике. М.: Медицина, 1987. - 367 с.

130. Мирский В.М. Влияние продуктов гидролиза липидов на активность фосфолипазы А2 в липидном монослое // Биол.мембраны.-1995.-Т. 12.-№2.-С.165-173.

131. Мищенко Е.Д. Опыт применения препарата маточного молочка в терапии некоторых обменных и сердечно-сосудистых заболеваний // Информ. бюлл. о маточном молочке: Рязань. 1960.- вып.2,- с. 22-27.

132. Младенов С. Мед и медолечение. София, 1971.-128 с.

133. Младенов С. Экспериментальное исследование сенсибилизирующего и десенсибилизирующего действия пчелиного меда // Междунар. конгресс по пчеловодству (Апимондия).-1967.- С.76-78.

134. Младенов С. Вопросы медотерапии// Междунар. конгресс по пчеловодству (Апимондия).-1974.- С. 135-136.

135. Младенов С. Вопросы медотерапии, София, 1982.- 214 с.

136. Можеренков В.П. Агафонов Б.В. Применение пчелиного меда в меди-цине//Медсестра.-1982.-№4.- С.51 -53

137. Мозжухин A.C., Рачинский Ф.Ю. Химическая профилактика радиационных поражений. М: Атомиздат, 1979.- 210 с.

138. Моисеева О.И. Физиологические механизмы регуляции эритропоэза.-JL: Наука, 1985.- 184 с.

139. Моничев А Я. Динамика кроветворения. М.: Медицина, 1984.- 176 с.

140. Натан Д.Г., Зифф К.А. Регуляция кроветворения // Гематол. и транс-фуз.- 1994.-№2.- С. 3-10.

141. Никулин A.A., Якушева Е.И. Продукты пчеловодства (маточное молочко, цветочная пыльца, мед) при лечении экспериментально вызванных патологических состояний // Апитерапия. Биология и технология продуктов пчеловодства, Днепропетровск, 1988.- ч.1.-С.8-13.

142. Никулин Н.П., Лупачев Н.Ф. Апилак .- Саранск, 1986.- 88с.146.0вощников В.Н. Биологические свойства компонентов маточного молочка // Биологическая активность продуктов пчеловодства и их использование.: Межвуз. сб. тр. 1990. - С.60-71.

143. Омаров Ш.М. Прополис как ценное лекарственное средство.// Биологическая активность продуктов пчеловодства и их использование.: Межвуз. сб. тр. 1990. - С.34-37.

144. Орлов Б.Н., Гелашвили Д.Б. Зоотоксинология.- М: Высш. школа, 1985.- 280 с.

145. Павлов А.Д., Морщакова Е.Ф. Регуляция эритропоэза: Физиологические и клинические аспекты. М.: Медицина, 1987. - 271 с.

146. Панасенко О.М., Деев А.И., Деева И.Б., Азизова O.A., Владимиров Ю.А. Изучение методом спиновых зондов структурных изменений на различной глубине фосфолипидных мембран после их пероксидации // Биофизика.-1985.-Т.30.-№ 5.-С. 817-821.

147. Панченко Г.Н., Демиевич Л.И. Биологически активные вещества и бактерицидные свойства карпатских медов// Биология и технология продуктов пчеловодства. Мат. конф. по апитерапии, Днепропетровск, 1988.-ч.2.-С. 2-3.

148. Пейчев П., Белева-Стайкова Р., Атанасов Н. Влияние маточного молочка на потребление кислорода и активность аденозинтрифосфатазы в тканях белых крыс // Междунар. конгресс по пчеловодству (Апимон-дия), 1975.-С. 238-241.

149. Переверзев А.Е. Кроветворные колониеобразующие клетки и физические стресс-факторы. Л: Наука, 1986.- 172 с.

150. Петков В., Овчаров Р. О профилактике лучевой болезни пчелоужале-ниями // Совр. медицина. 1969.- Т.21.- №10.- С. 5.

151. Поливода Б.И., Конев В.В., Попов Г.А. Биофизические аспекты радиационного поражения биомембран. М.: Энергоатомиздат, 1990.-154с.

152. Поправко A.C. Методы химического изучения прополиса // Пчеловодство. 1976.-№ 6.- С. 34-36.

153. Поправко А. С. Защитные вещества медоносных пчел. М.: Колос, 1982.-289 с.

154. Починкова П. Пчелиные продукты в медицине. София, 1986.-134 с.

155. Прокоппович И.Н. Биологическое действие прополиса // Пчеловодство. 1957.- №2.-С. 54-55.

156. Пэун К. Воздействие апифитотерапевтических препаратов на биологическую реактивность облученных животных // Междунар. конгресс по пчеловодству (Апимондия), 1977.- С. 255-257

157. Пэун К., Сафте Т., Гыдою Т., Йеркале Е., Олинеску Р., Мунциу М., Пэунеску Т. Воздействие апифито-терапевтических препаратов на биологическую реактивность облученных животных // Междунар. конгресс по пчеловодству (Апимондия), 1976.- С.255-259.

158. Рачков А.К., Вахонина Т.В., Рачкова М.А. Фармакологическая оценка маточного молочка // Пчеловодство. 1993. - №5. - С. 44-45.

159. Рачков А.К., Рачкова М.А. История изучения влияния апилака и других видов маточного молочка на сердце // Апитерапия сегодня, Сб. трудов НИИ пчеловодства- Рыбное. 1993-С.67-71.

160. Реброва Р.Н., Вахонина Т.В., Хохлова A.A. Серебреншикова И.С. Микробиологические исследования маточного молочка // Продуктыпчеловодства в сельском хозяйстве и медицине, Вологда. 1987.- С.61-63.

161. Рембольд Г. Маточное молочко // Междунар. конгресс по пчеловодству (Апимондия), 1981. С. 18-24.

162. Романцев Е.Ф., Блохина В.Д., Жуланова З.И. Коцинко H.H. Биохимические основы действия радиопротекторов. . М: Энергоатомиздат, 1980.-203 с.

163. Романцев Е.Ф. Радиация и химическая защита. -М.: Атомиздат, 1980.248 с.

164. Рыскулова С.Т. Радиационная биология плазматических мембран. -М.: Энергоатомиздат, 1986.- 127 с.

165. Савинов К.В., Якушева Е.И. Сравнительная оценка антианемического эффекта цветочной пыльцы и некоторых традиционных препаратов, стимулирующих эритропоэз // Продукты пчеловодства в сельском хозяйстве и медицине: Сб. трудов. Гомель, 1991. - С. 178-182.

166. Садыков Э. // Узбекск. биол. журнал. 1974. - №1. - С. 57-59.

167. Сакки Р., Бози Н. К вопросу исследования кислот в маточном молочке // XX Юбил. конгресс по пч-ву (Апимондия). 1965. - С. 43-44.

168. Салашинская H.A., Швайденская В.Г. Антимикробная активность меда // Пчеловодство. 1981. - № 9. - С. 26-29.

169. Саркисян Э.А. Влияние апилака (маточного молочка) на содержание нитрата, пирувата, лактата и глюкозы в ткани мозга, печени, сердца и крови. // Фармакол. и токсикол. 1973.-Т. 36.-№ 3.-С.325-327.

170. Сейц И.Ф., Лучанова И.С. Биохимия клеток крови в норме и при лейкозах. -М.: Медицина, 1967.- 616 с.

171. Семина О.В., Селинец Т.Н., Поверенный A.M. Механизмы лимфоид-ной регуляции и радиочувствительность системы кроветворения.// Рад. биология. Радиоэкология.-1992.-Т.32.-№2.- С.225-240.

172. Сергеев П.В. Стероидные гормоны. М.: Наука, 1984. -240с.

173. Сергеева Л.И, Кураева Н.Г, Конькова Л.Г. Изменение кислотной резистентности эритроцитов при действии пчелиного яда // Механизмы действия зоотоксинов: Межвуз. сб. Горький, 1976.-С.85-88.

174. Скулачев В.П. Апоптоз как частный случай феноптоза// Биохимия. -1999.- Т. 64.- №12.- С.1076-1080.

175. Смурова Е.А, Нестерова Л.А. Манухин Б.Н. Действие фосфолипазы А2 на связывание специфического блокатора хинулидинилбензилата М-холинорецепторами коры мозга крыс // Биол. мембр.-1996.-Т.13.-№3.-С. 244-251.

176. Сокольский С.С. Обоснование технологии производства пчелиного маточного молочка на промышленных пасеках и изготовление биологически активных продуктов на его основе. Краснодар: Изд. Адми-нистр. Краснодарского края, 1995.-52 с.

177. Стрелин Н.С. Регенерационные процессы в развитии и ликвидации лучевого поражения. М.: Медицина, 1978.- 208 с.

178. Суворов H.H., Шашков B.C. Химия и фармакология средств профилактики радиационных поражений. М: Атомиздат, 1975.-184 с.

179. Тарусов Б.Н. Первичные процессы лучевого поражения. М: Атомиздат, 1962.-216 с.

180. Терсков И.А, Гительзон И.И. Значение дисперсионных методов анализа эритроцитов в норме и патологии // Вопр. биофиз, биохимии и патологии эритроцитов. Красноярск.: Изд-во АН СССР, 1967. - С. 4148.

181. Тимофеев-Рессовский Н.В, Иванов В.И, Корогодин Н.В. Применение принципа попадания в радиобиологии. М.: Наука, 1968.- 334 с.

182. Тиунов Л.А, Жербин Е.А, Жердин Б.Н. Радиация и яды. М.: Атомиздат, 1977. - 139 с.

183. Туйчибаев М.У., Муксимов Ф.А. Яды перепончатокрылых // Транспорт ионов через биологические мембраны и механизм действия биологически активных веществ. Ташкент: Фан, 1982.- С. 127-142.

184. Тюкавкина H.A., Руленко И.А., Колесник Ю.А. Природные биофлаво-ноиды как пищевые антиоксиданты и биологически активные добавки // Вопр. питания. 1996.- №2.- С. 33-36.

185. Федоров H.A. Регуляция пролиферации кроветворных клеток. М, Медицина, 1977.-160 с.

186. Федоров H.A., Нормальное кроветворение и его регуляция. -. М.: Медицина, 1976.- 544 с.

187. Федорова А.И Влияние ионизирующего излучения на активность эритроцитов к кислотному гемолизу// Вопросы биофизики, биохимии и патологии эритроцитов. Красноярск.: Изд. АН СССР, 1967. -С. 233239.

188. Филипич Б., Ликар М. Противогерпетическое действие прополиса, маточного молочка и интерферона // Междунар. конгресс по пчеловодству (Апимондия), 1985.- С. 97.

189. Филлипович И.В., Сорокина Н.И., Солдатенков В.А. Радиобиология дифференцирующихся клеток млекопитающих //Радиобиология.-1985.-Т.24.-вып. 2.- С.147-154.

190. Фоменко Б.С., Акоев И.Г. Структурные изменения плазматической мембраны под действием ионизирующей радиации // Успехи современной биологии.-М.:Наука, 1982- 320 с.

191. Френкель JI.А. Радиобиология костной ткани. М.: Энергоатомиздат, 1986.-130 с.

192. Фролов В.М., Пересадин H.A. В помощь пострадавшим Чернобыля // Пчеловодство . 1994. - №4. - С. 53-55.

193. Хансон К.П., Комар В.Е. Молекулярные механизмы радиационной гибели клеток. М: Атомиздат, 1985.-98 с.

194. Хуг О., Келлерер А. Стохастическая радиобиология. М: Наука, 1969.256 с.

195. Черный И.И., Сихарулидзе М.Г., Мирский В.Н. Распределение потенциала на бислойной липидной мембране при функционировании фос-фолипазы А2 // Биол. мембраны. 1992.-Т.6.-№ 7.-С. 733-740.

196. Ю.Шапиро A.M., Вальцева И.А., Бажутина Г.А. Действие пчелиного яда на некоторые показатели крови // Мех-мы действия зоотоксинов: Меж-вуз. сб. Горький.: ГГУ, 1976. - вып.4. - С.76-79.

197. Шкендеров С.Т. Фракционирование пчелиного яда и исследование его компонентов в качестве стимуляторов коры надпочечников и анафи-лактогенности // Пчелиный яд ценное естественное терапевтическое средство. - Бухарест: Апимондия, 1985. С. 87-88.

198. Шкендеров С., Иванов Ц. Пчелиные продукты. София: Земиздат, 1985.- 226 с.

199. Шмаров Д.А., Козинец Г.И. Закономерности клеточного цикла гемо-поэтических клеток крови при действии ионизирующей радиации // Гематол. и трансфуз. 1995,- Т. 40.- №6.- С. 25-29.

200. Шмаров Д.А., Козинец Г.И., Кучма Ю.М., Митерев Г.Ю. Закономерности клеточного цикла гемопоэтических клеток крови при действии ионизирующей радиации // Тер. архив. 1992.- Т.68.- №7.- С. 11-14.

201. Шольц К.Ф., Резник Г.И., Соловьева H.A., Снежкова Л.Г., Мирошни-ков А.И., Котельникова A.B. Действие мелиттина и его тетраацильного производного на митохондрии печени крыс //Биохимия.-1982.-Т.54.-№10.-С. 1840-1848.

202. Эйдус Л.Х. Физико-химические основы радиобиологических процессов и защиты от облучений. М.: Энергоатомиздат, 1977.-223 с.

203. Эль-Бамби М.А., Гегази М.Р., Геляк А.Ф. Изнаил A.M. влияние маточного молочка на вес тела и отдельных органов, гормональный уровень и показатели крови белых крыс // Междунар. конгресс по пчеловодству (Апимондия), 1985.- С.32-36.

204. Якуба H.H., Качалай Д.П., Телещук О.П., Дробязина Л.С. Изменение свободнорадикального окисления при лечении рабочих цеха премиксов маточным молочком // Продукты пчеловодства в сельском хозяйстве и медицине: Сб. трудов. -Гомель, 1991.- С. 117-123.

205. Якушева E.H., Никулин A.A. Апилак как биостимулятор // Биологически активные продукты пчеловодства и их использование: Межвуз. сб.-Горький, 1990.- С. 72-75.

206. Якушева E.H., Семенченко М.В. Влияние комбинации продуктов пчеловодства на эритро- и лейкопоэз // Апитерапия сегодня, НИИ пчеловодства. Рыбное, 1993.-С. 77-78.

207. Ярилин A.A., Шарый Н.И. Иммунитет и радиация. Л.: Наука, 1991.212 с.

208. Ярмоненко С.П. Радиобиология человека и животных. М.: Высшая школа, 1988.- 424 с.

209. Ятсунами К., Экито Т. Антибактериальная активность маточного молочка // Междунар. конгресс по пчел-ву (Апимондия).- 1985.-С.432-435.

210. Achong M., Macola S., Giral T. The antimycotic effect of propolis on the gastric acid secretion // XXXIII Congr. int. apicult., Apimondia Beijing, 1993 -P. 501-502.

211. Ancian P., Lambeau G., Lazdunski M. Multifunctional activity of the extracellular domain of the M-Type (180 kDa). Membrane receptor for secretory phospholipases A2 // Biochemistry. 1995. - Vol. 34, № 40. - P. 1314613151.

212. Ardry M. R. Contribution a letude de la gellee royale // Ann. Pharmacol.-1956.-Vol. 5.- P. 97-100.

213. Baker K.J., East J.M., Lee A.G. Mechanism of inhibition of the Ca2+-ATPase by melittin // Biochemistry. 1995. - Vol. 34, № 11. - P. 35963604.

214. Baker S.A., Foster A.B., Lamb S.D., Hodson N. Blum M.S., Novak A.F., Taber S. Identification of 10-hydroxi-d-2-decenoic Acid in Royal Jelly. // Nature.- 1959, №183.-P.996-997.

215. Bancs B.E.C., Hanson J.M., Sinclair N.M. The isolation and identification of noradrenaline and dopamine from the venom of the honey bee, Apis mellifera // Toxicon. 1976. - Vol. 14, № 2. - P. 117-125.

216. Blum M.S., Novak A.F., Taber S. 10-hydroxi-d-2-decenoic Acid, an Antibiotic Found in Royal Jelly. // Science.- 1959.- Vol.130.- P.452-453.

217. Burack W.R., Godd M.E., Biltonen R.L. Modulation of phospholipase A2: identification of an inactive membrane-bound state // Biochemistry. 1995. - Vol. 34, № 45. - P. 14819-14828.

218. Dawson C.R., Drake A.F. Helliwell J., Hider R.C. The interaction of bee melittin with lipid bilayer membranes // Ibid. 1978. - Vol.510, № 1. - P. 75-86.

219. Denecamp J., Rojas A. Cell kinetics and radiation pathology // Experimentia.- 1989.- V. 45, №3.- P. 33-41.

220. Dewey W.C., Ling C.C. Meyn R.E. Radiation-induced apoptosis: relevance to radiotherapy // Int. J. Radiat. Oncol. Biol. Phis. -1995.- V.33, № 3.- P. 781-796.

221. Dich E., Pulido V. In vitro growth inhibition capacity of honey, propolis extracts and domestic disinfectalis // XXXIII Congr. int. apicult., Apimondia Beijing, 1993 - P. 461-462.

222. Dustmann J.H. Bee products for human health the problem of apitherapy // XXXIVth Int. Congr. of apicult., Apimondia - Lausanne, 1995. - P. 377379.

223. Ehcido N., Takenaha T., Latsunsmi K. Comporative studies on Chemical compositions of Honey, Royal Jelly, Pollen Loades // Bull. Fuc. Agr. Tamagava Univ.- 1986.- Vol.26.- P. 1-8.

224. Eliason J.F., Vassali P. Bone marrow physiology and radiobiology // Blood cells. 1988. - №14. - P. 339-354.

225. Fletcher D.L., Dillared C.J., Tappel A.Y. Measurement of fluorescent lipid peroxidation products in biological system and tissues // Analyt. Biochem.-1973.-Vol.52.- P. 497-499

226. Fletcher J.E., Michaux R., Ming-Shi Jiang. Contribution of bee venom phospholipase A2 // Toxicon. 1990. - Vol. 28, № 6. - P. 647-656.

227. Folch J, Less M, Stanley A. A simple method for the isolation and purification of total lipids from animal tissues // Biol. Chem. 1957. Vol. 226, № 2.-P.497-509.

228. Fredholm B, Haegermark O. Studies on the histamine releasing effect of bee venom fraction and compound 48/80 on skin and lung tissue of the rat // Acta fisiol. scand, 1969. Vol. 76, № 3. - P. 288-298.

229. Frias T.I, Torre A. N, Espinar M.N. Sugars and crystalisation of the honeys // Apimondia Beijing , 1993 - P. 427-428.

230. Gonzales G.A.P, Dias B.M. A preliminary study of the action of propolis on the immunological system in mice // XXXIVth Int. Congr. of apicult, Apimondia Lausanne, 1995. - P. 380-381.

231. Goodhead D.T. Radiation effects in living cells. // Can. J. Phis. 1990. -Vol. 68. - №9. -P. 872-882.

232. Habermann E. Bee and Wasp venom // Science.- 1972. Vol. 177. - P. 314322.

233. Habermann E. Melittin stuctura and activity // Natural toxins / Ed. D. Eaker, T. Wadstrom. - S.L.: Pergamon Press. Oxford and New York, 1980. -P. 173-181.

234. Habermann E. Apamin // Pharmac. Ther. 1984. - Vol. 25. - P. 225-270.

235. Haimovitz-Fredman A. Radiation-induced signal transduction and stress response //Radiat. Res. 1998. - Vol.l50.-№5. - P.102-108.

236. Hendry J.H. The number of primary transplanted splenie colony-forming ctlls. //Cell Tissue Kinet. 1983. - Vol.4. - №3. - P.217-223.

237. Hufferman I. DNA-radicals as structirals monitors of direct radiation action. // Radiat. and Environ. Biothis. 1991. - Vol. 30. - №2. - P. 71-79.

238. Huidoboro J.F, Sanches M.P, Santana F J. Possible relationship between some enzimts in galician honeys // XXXIVth Int. Congr. of apicult, Apimondia, Lausanne, -1995. P. 304-305.

239. Imail Y., Nakao I. The radiosensevity of cells. // Exp. Haematol. 1987. -vol.15. - №7.- P.890-895.

240. Jelkmann W. Renal erythropoietin: properties and production // Rev. Phisiol. Biochem Pharmacol.- 1986,-Vol. 104 P. 136-144.

241. Kadiri L.A., Waff D.E. Common mechanism in the induction of variol biological effects by ionising radiation // Int. J. Radiat. Biol. 1990. - Vol. 57. - №6. - P.249-262.

242. Katsu T., Sanchika K., Jamanaka H., Shinoda S., Fujuta J. Mechanism of cellular membrane damage induced by melittin and mastoparan // Jap. J. Med. Sci. and Biol. 1990. - Vol. 43, № 6. - P. 259.

243. Kerr J.K.F., Willie A.H., Currie A.H. Apoptosis a basic biological phaenomenon with wider implications in tissue kinetics // Brit. J. Cancer. -1972. V.26. - №2. - P.239-245.

244. Lang H.J. Versuche uber eihen stracleschutzeffekt von Bienengift und Apamin an Raten bee Rontgenganzkorper-bestrahlung.-Wurzburg, 1970

245. Latsunamy K. Antibacterial action of honey and royal jelly// Honeybee Science.-1984.-Vol.5, №3.- P.125-130.

246. Lausada L., Anselmo R., Lescano L. Effects of different storage conditions on the preservation of bees honey qality // XXXIVth Int. Congr. of apicult., Apimondia Lausanne, 1995. - P. 310-314.

247. Lawson D. Molecular events during membrane fusion in study of exocitosis in rat peritoneal mast cells // J. Cell. Biol. 1985. - Vol. 72. - P. 242-259.

248. Le Poncin-Lafitte M., Aymond M., Billon S. et al. Catecholamines and stress: reset advances. // Developments in neuroscience, N.Y., Amsterdam, Oxford.- 1983.-Vol. 8. P. 227-230.

249. Li Y., Yu B., Thu H., Jain M.K., Tsai M et al. Phospholipase A2 engineering. Structural and functional roles of the highly conserved activesite residue aspartate-49 // Biochemistry. 1994. - Vol. 33, № 49. - P. 14714-14722.

250. Marcucci M.C. Chemical and bioligical investigation of propolis // XXXIVth Int. Congr. of apicult., Apimondia Lausanne, 1995. - P. 315319.

251. Meng Xian-zuo. Facile synthesis and bioactivity of 9-oxo-(e)-2-decenoic acid, a queen honeybee pheromone. \\ XXXIII Congr. int. apicult., Apimondia Beijing, 1993. - P. 123.

252. Mollay C., Kreit G., Berger H. Action of phospholipases on the cytoplasmic membrane of E. Coly, stimulation by melittin // Biochem. et biophys. acta. -1976. Vol. 426, № 2. - P. 317-324.

253. Pan J. Study on the protein contents of honey // XXXIVth Int. Congr. of apicult., Apimondia Lausanne, 1995. - P. 334-336.

254. Phillips S.J. The effect of snake and bee venom in cardiovascular hemodynamics and function // Toxins Anim. and Plant Origin. N.Y.-1972.-Vol. 2.-P. 683-701.

255. Potimas E.M., Nider R.C. Honey bee venom // Bee world. 1987. - Vol. 68, №2.-P. 51-70.

256. Radford I.R. Evidens for a general relationship between the induced level of DNA double-strand brakage and cell killing after X-radiation of Mammalian cells // Int. J.Radiat. Biol. -1986.- V.49,. № 5.-P.611-620.

257. Ratty J., Dass R. Effects of flavonoides on nonenzimatic lipid peroxidation: structure-activity relationship // Biochem. Med. Metab. Biol.- 1988.- Vol. 39, №l.-P.69-79.

258. Rekka E., Kourounakis L., Kourounakis P. Antioxidant activity and interleukin production effected by honey bee venom // Anzeim.-Forsch.-1990.-vol.40.-№ 8.-P.912-913.

259. Rembold H. Biologically active substance in royal jelly // Vitam. Horm.-1965.-№ 23.- P.359-382.

260. Rossi J., Delfino J., Caride A., Fernandez H. Interaction of unsaturated fattyfj iacids with the red blood cell Ca -ATPaze. Studies with a novel phatoactivatable probe // Biochemistry. 1995. - Vol. 34, № 11. - P. 38023812.

261. Shipman W.H., Cole L.J. Honey bee venom in experimental radiobiology

262. Suda T.I., Yamaguchi Y., Suda I. The radiosensivity of haemotopoetic stem cells and colonies. //Exp. Hematol. 1988.-№ 16.-P. 895-899.

263. Suzuki S. "Repair" of fast neutron and X-ray induced damage to the permeabilites of red blood cells to sodium and potassium ions and its promoution // int. J. Radiat. Biol. 1978.-vol.34.-№ 6.-P.513-522.

264. Tadic Z., Orsolic M., Lachovic V., Curie S., Basic I. The effects of propolis on haemopoesis // XXXIVth Int. Congr. of apicult., Apimondia -Lausanne, 1995. P. 405-406.

265. Takenaka T. Chemical composition of royal jelly //Honebee Science.-1982.-№ 3.-P.69-74.

266. Tseng Chin-yin, Yu Zer-ran, Li Ching-fung. Preparation and characterization of royal jelly powders. \\ XXXIII Congr. int. apicult., Beijing, 20-26 Sept., 1993 \ XXXIII Congr. int. apicult., Apimondia Beijing, 1993.-P. 371-376.

267. Umansky S.R. The genetic programm of Cell Death. Hypothesis and Some Applicatios to Transformation, Carcinogenesis, Ageing // J. Theor. Biol. -1982.-V. 97, l4- P. 591-602.

268. Valdes S.G., Giral T., Martin M. Ohe antibacterial action of the bee honey with propolis // XXXIII Congr. int. apicult., Apimondia Beijing, 1993 - p. 512-513.

269. Varis K. K., Helenius J., Rantavaera A. Ohe mineral content of honey // XXXIII Congr. int. apicult., Apimondia Beijing, 1993 - P. 446-447.

270. Verma S.P. Low levels of irradiation modify lipid domains in model membranes. //Radiat. Res.-1986.-Vol.l07.-№2.-P.183-193.

271. Vick J., James A., William H., Shipman W.H. Effects of whole bee venom and it's fractions (apamin and melittin) on plazma cortizol levels in the dog // Toxicon, 1972. Vol. 10, № 4. - P. 377-380.154

272. William's G.T., Smith C.A. Molecular regulation of apoptosis: genetic controls on cell death // Cell. 1993. - Vol.74. - № 5. - P.777-779.

273. William's J.J. Haematology.- Forth Ed., London., 1992.- 552 p.

274. Wintrobe S. Clinical haematology. Ninth Ed., Vol.1. Philadelphia -London, 1993.- 763 p.

275. Wu Cui-wen, Zhang Fu-xing, Fang Bing-bing. Glucose oxidase (GOD) in royal jelly. \\ XXXIII Congr. int. apicult., Beijing, 20-26 Sept., 1993 Apimondia Bucarest, 1993. - P. 377-381.

276. Xiao Jing-wei, Wang Rong-jiang, Li Shao-wen. The active peptide from royal jelly inhibiting bacteria. // XXXIVth Int. Congr. of apicult., / Apimondia Lausanne, 1995. - P. 407.

277. Zhang C.J., Dong W.C., Zeng J.Y. the detection of high fructose content syrups in honey by means of the high pressure liquid chromatograthy // XXXIII Congr. int. apicult., Apimondia Beijing, 1993 - P. 414-420.

278. Zhang X. Yu A., Wang S. The analysis of the nutritive content and the clinical investigation of honey for babies // XXXIII Congr. int. apicult., Apimondia Beijing, 1993 - P. 515-516.

Информация о работе

Николаева, Анна Алексеевна
кандидата биологических наук
Нижний Новгород, 2000
ВАК 03.00.13

Диссертация

Физиологический анализ действия продуктов пчеловодства на систему крови крыс при экспериментальном лучевом поражении - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы