Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Ферменты и изоферменты углеводного обмена сыворотки крови при гинекологических заболеваниях коров черно-пестрой породы

ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Автореферат диссертации по теме "Ферменты и изоферменты углеводного обмена сыворотки крови при гинекологических заболеваниях коров черно-пестрой породы"

' : : ■ 014

I ' о 4 \

МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

МОСКОВСКАЯ ВЕТЕРИНАРНАЯ АКАДЕМИЯ имени К.И.СШБЖ

На правах рукописи

' БЕЛШ0ВСКА2 Ольга Степановна

ФЕКСТШ Й ИЗОШШПН УГЛЕВОДНОГО СЕМЕНА СЫВОРОТКИ КРОВИ ПРИ ГИНЕКОЛОГИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЯХ • КОРОВ ЧЕРНО-ЯЕС1РОЙ ПОРОДЫ

03.00,04 - Биохимия

Автореферат диссертации на соискание ученой отепенд кандидата Люяогачеоких наук

Москва > 1993

Работа выполнена в Московской ветеринарное академии вмени К.И.Скрябина. .

Научный руководитель: заслуженный деятель наука РСФСР,

доктор биологических наук. .. профессор Малахов А.Г.

Официальные оппоненты: доктор биологичеоких неук *.# Клопов М.И.

■ кандидат биологичеоких наук Яременко И.И. < , ■,

Ведущая организация!' Всероссийский научно-исследовательский институт эксперименталь-* ' ной ■ветеринара? имещ Я.Р.Коваленко

Защита состоится 1993 г. В часов

на заседании спецашшзярованного совета Д 120.36.05 по защите, диссертаций на соискание ученой степени доктора наук в Московской ветеринарной академия имена К.И. Скрябина, (109472, Москва, ул.Академика Скрябина, 23. Тел. 377-93-83).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке академии.

Автореферат разослан. " /V " 1993 г.

Ученый секретарь ; специалиаярованного совета

Сафонов Н.А.

*1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность работы. Лечение гинекологических заболеваний фуяного рогатого скота остается актуальной проблемой клинической ветеринарии. Несмотря на определенные успехи, достигнутые 'в _ Евчаннн заболеваний половой сфера, процент симптоматического ¡еспяодия продолжает оставаться высоким. Бесплодие возникает ¡следствие различных болезней половнх органов, которые появля-ноя чаща всего во время родов и в послеродовой период (Григорьев Т.Е. , 1988). Поэтому предупреждение я своевременное эффек-■явное леченаз послеродовых, акушерско-гинекологнческах болезней [еобходшло рассматривать как важнейшее звено в система ыероприя-•яй по ликвкдацаа беспяодая я яловости у коров.

К болезням половшс орггпоз, готорнв наиболее часто ссшро-юадаются бесплодием относятся эндометриты, субинволюцая и атолл матка. Такие заболевания сопровождаются нарушением обмена еществ.и ояирвниём кивотинх, изменением гормональной актявнос-п аелез внутренней секреции (Нежданов А.Г., 1982-1985,; Пар-адзе З.О., 1991; Ильина В.А., 1992; Kolb Е., 1984)'.

Следует отметить, что в денной области метаболизм углево-ов'нзугея еде далеко не полно, но представляется очень важным, ад как углевода участвз'ат в энергетических, пластических и ре-уляторннх процессах как в клетка, так а в целом организме Стамбровская A.A., 1971, 1978; Бадаяьянц П.П., 1932; Гри-орьева Т.Е., Леонтьев Л.Б., 1987 ; йяока Е.И., 1990).

Многочисленные стрессн (Жаров A.B., 1985, 1988; Голиков .Н., 1988; Proeiaan В.М., 1987), истощенные запаси витаминов-поантиокислателей, недоброкачественность кормов создают благо-рдятныв условия для активации свободнорадикального окисле!Шя ипидов (СР01,, которое происходят яа фоне местной гипоксии, стощения резервов антиоксидантной сястот защиты организма АОЗ) '(Еуравлев А.И., Пантюшенко В.Т., 1989 ; Мяльдзин А.Р., 389; Шерстенников И.Л., 1990; Ильина Е.А., 19Э2).

Учитывая вышеизложенное, в качестве лечебного средства, на-э внимание привлек озон, обладающий выраженной метаболической ативностью в отношении различных органических соединений (Maro B.K. и др., 1992 ; Перетяган С.П., 1991; Колесова O.E. и р., 1992 ; iuhmy 3., 1989 ; Зшшэп G., 1989 ; Waohuttl J. et U, 1989). 3 настоящее время в медицинской практике показана ?S9

■:■■.». ; 2 _ пгсркая эффективность озрноуорашш в условиях патологий, связанных о недостатком кислорода н истощенней запасов ЛОЗ (Перетя • гин С.П.; 1991, 1992; Цархисенко Ю.А. и др., 1992,; Яковлева

Е.И. я др. , 1992 ;. Н1111пв . 1985).. Однако существуют ухе пер ' вне я успешные попытки лечения гинекологических заболеваний {Эуев.В.М,, ¡Зайцев В.Я*, 1992; Качалина Т.С. и др,, 1992), в том числе у крупного рогатого екота (Душкин В.А. я др., 1992) озонотерапией. Это определяет необходимость изучения противо^-гипохсяческих я бактерицидных механизмов действия озона, обосно вания его эффективных я безопасных, концентраций и доз, оценки их влияния на приспособительные реакции при изучаемых патоло-■ гаях. ■

Педь и задачи исследований. * Основной целы» настоящей работ! явилось углубленное изучение моде^лярных основ патогенеза вед» метрита, субинволюции матка, возникших в результате задержания последа, а также биохимичеокое обоснование оптимальных схем озонотерапид при остром катарально-гнойном эндометрите.

Дня достижения поставленной целя решались следующие задачи. I) исследовать динамику изменений активноотни изоферментного .■спектралактатдеридрогвназы (ДДГ), активности фруктозобисфосфат-аяьдсдазы (АЛД), катал азы я пе£оксидазы, а также концентрации " метаболитов углеводного обмена (глюкозы, лактата, пярувата) после отела в норме, при остром катарально-гнойном эндометрите я субинвояюцяи матки; 2) ясследовать вышеперечисленные показатели у коров с хроническими катарально-гнойным я овфытым зндо-метритами ;3) изучить основные биохимические эффекты взанмодейо! ввя озона о вышеперечисленными* ферментами я углеводами крови. . Обосновать аффективные я безопасные концентрация я дозы озона . для внутриматочной обработки озонированным физраствором (ОФ).

Научная новизна работа. Впервые получены данные об изменении активности и изоферментного спектра ЛДГ, активности АЛД, каталазы а пероксидазы, концентрации глюкозы, лактата я парува-' та в динамике развития острого эндометрита я субинволпции матки я при хроническом -эндометрите.

Ейервые в ветеринарной практике с использованием биохимических тестов обоснована озонотерапия острых эндометритов крупного рогатого скота цутем внутриматочного промывания ОФ. Биохимически обоснован диапазон эффективных доз озона пря лечения эндометрита. ' ■ ■

Теоретическое и практическое значение -работы. Предстааяен-) материалы могут быть использованы для комплексной диагнос-ш л разработка эффективных методов лечения эндометритов а суб-волвцаа матка.

Результаты исследования в известной мере отражают состояние smoc звеньев продукции энергии организма на различных этапах юаня асслодуешх патологий.

В работе показана принципиальная возможность применения >на для коррекции растройств гомеостаза организма при остром юаотратв, а биохимические данные позволяют судить об озоноте-ш как факторе 'функциональной интеграции метаболических про-сов а данных условиях. 3 результате проведенных доследований" ширены научные представления о механизме формирования под янием озона компенсаторно-приспособитальных реакций уже на шах этапах лечения острого эндометрита.

Полученные результаты открывают перспективу целенаправлен- ;. з экспериментально-клинического поис^р возможностей использо- ' ш фармакологических средств и озона при различного рода па-' ' >глях, связанных с инфекционными заражениями и гипоксическими

:-;рО>"с'ГВ&\5Н.

йдтчнно результаты внедрены на кафедре органичесхссй я баоло-юкоЯ хжоп ?ЯВА лра чтении лекций по темам: "Углеводный обмен юлоленяо азс^орментинх спектров в клинике", "Патология об-воществ". Результата работа использованы в методических алиях "Пряменондо современных энзимологических методов в p£taapim"-M. :Моск. вот. акад., 1992. Айвойаддя_т>вбртн. Основные паюяешш диссертационной работы жены на II (1988) научной конференции молодых ученых ММ, ■ ой Всероссийской научно-практической вонферонцйп "Озон в эгид з медицине", Нижний Новгород, июнь 1992 г., на заседа-Лосковского отделения биохимического общества РАН, Москва, январь, 1993 г., вё. кафедральном и межкафедральном совеща-сотрудников МВА. ' ,

Структура и объем диссертации. Диссертационная работа состо-I введения, обзора литературы, собственных исследований, обитая, выводов, сведений о практическом использовании резуль-i исследований, рекомендаций по использованию научных внво-списка литературы, включаодего 281 источник, в ток числе,

102 иностранных авторов, приложения. Работа изложена на 178 страницах машинописного текста, содержит 24 таблицы а 32 рисунка.

Публикация -работы. По материалам диссертационной работы опубликовано 3 научных статьи, в которых отракены ее основные положения.

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССВДОВАНИН 2.1. Материалы и метода исследований

Исследования проводили на коровах черно-пестрой породы ордена Знак Почета совхоза им. Моссовета Перовского района г.Москвы. Животные были подобраны по принципу аналогов. Форш- . рование групп проводили комиссионно с участием местного ветеринарного персонала, после тщательного клинического и гинекологического обследования под руководством доцента кафедры акушерства, гинекологии и искусственного осеменения МВА, канд. вет. наук Козлова Г.Г. ,

Экспериментальная часть работы состояла из трах серий опытов.

1. Изучение биохимических показателей крови, характеризующих углевод. Л обмен и ферментативное звено антиокислительной системы защити организма коров с острым катарально-гнойным эндометритом и субинволюцаей матки: I груша - тавотные с физиологическим течением родов и послеродового периода (10 голов); П груша - животные с острым катарально-гнойным эндометритом (9 голов); Ш группа - животные с субинволюцией матки (9 голов). Кровь брала после отела с интервалом 5-15 дней.

2. Изучение биохимических показателей крови, характеризую^ щих углеводный обмен и ферментативное звено антиоксидантной системы организма коров с хроническими катарально-гнойным и скрытым эндометритами: I группа - животные с физиологическим течением родов и послеродового периода (10 голов); П группа - коровы с хроническим катарально-гнойным эндометритом (10 гслов); Ш группа - животные с хроническим скрытым эндометритом (15 голов

3. Изучение биохимических показателей 1фови,.характеризующих углеводный обмен я ферментативное звено АОЗ коров при физиологическом течении послеродового периода (I группа, 10 голов),

в ходе антибиотике- (П группа, 7 голов) и озонотёрашш (Ш группа 10 голов) острого катарально-гноЁного! эндометрита.

Зтонополицил& применяли однократно, озонотераоию - четц-охкратно, с интервалом 4 дня. Лечебные средства использовали

внутраматочного промывания. Кивотные. Ш группы были разде-ош! на 2 Еодгругши. I подгруппе озонированный физраствор вво-зма а дозе 1,5 иг, 2 подгруппа - в дозе 3 мг.

ПерЕОо взятаэ крова проводили до начала лечения. Последующа - через 4, И, 18, 25, 30, 60 суток после начала лечения. Катераадом исследования слуяшш цельная кровь и сыворотка коров, -з которой определяла глюкозу о-толунддновым мето-с-м; дактат а каруват знзаматическц; активность ДДГ оптачэс-ьы гестом; - активность АИД а лороксядазы колориметрически ; ктивносТь каталазч титриметрачески; изоферментный спектр ДДГ второй »яектройорааа » ДААГа; озонаровашш физраствора (0,3 % аШ.) проводил канд.тахн.каук Сщшгуй Г.А. на озонатора "ОЗОН-К", азрзйотанксм а лвбозай предоставленной вш Ш пАксон" ; концент-ацпю озона о аифузяруегмм раствора определяли йодометрическам гтодом.' Статастйчоска результаты ббрабатнвалп по Стыаденту.

2.2. Результата собствешшс исследований Данашка содержания показателей катаболизма углеводов , • п актнвностя ферзгонтов крова пра остром катарально-

гкайкем эндометрато л субикватащш катки • '

' Получению дешшо пок&знваэт, что коздэнтрадш глюкозы на оуты поело стсл-, у здороил: гивотяых в средней на 26 % шв ''-0,0015 токовой у яивотных с заболеваниями послооталыюго ргсда» У тавотных с откаченная патсдогяяма концентрация ленда а парувата в этот период достоверно в среднем в 1,5 раза зз (Р^0,05). Пав шщентрацш лактата, наступавший на 10 ткл поело отала э дальнейшем правая к уваляченав активности с (г »40,799, Р-С0,01 - а группа; г «+0,903, Р-О.ОО? - Ш ?таа) (рм. I п 2). & дальнейшем у животных;П. и Ш групп наблю-зось уволйчокао концвктрацки глюкози в парувата а достигало т на 30 сутка посла отала а сшвгенав. концентрации лактата. Ю-?5 суткам достоверных различий между группами установлено было. -

В первые сутка после стала у коров с глтараяько-гяойным ?ометрптом выявлрна более- низкая по сравнению с фйзподогичэс-г течением послеродового' периода активность катал азы и пер-адазы (на 30, Р^0,01 а 29 Р-^0,05, соответственно).. На >9

шсяь/

3,0

2,С

1,С

5 Ю- 20 30. 40 50- 60

Ч—-I"

75

90

нкат/м

13,0 11,0

9,0 '

7,0^1 сут ДО

Рис.1, ^реляционная эавжушость между содержанием лакт'ата (шоль/л)(—) и активностью ЛдГ (- -днкат/ш) у

... .....(нкат/мл) у

коров с острым катарально-гнойным эндометритом (П группа) после отела .

сутТКГ"

и" активностью Дф ?нкат/мл7 (- -) У коров о субинвОлюциеЙ матки (Ш группа) пооле отела

4,0

3,0 2,0

1.0

нкат/мя

01

1т

--ЛДГд

I группа П группа :' Ш группа А 0

Рис.3. Изоферментные спектры ЛДГ у коров при физиологическом течении послеотельного периода (I группа), при остром катаралыю-гнойном зндометште (П группа) и субинволюции матки (Ш группа) на 15 сутки после отела

5 сутки наступает период, сопровождающийся у животных П груп-ы усилением функции АОЗ, выражающееся увеличением активности аталазн а, как ужа отмечалось, началом усиления синтеза глю-озн (г =+0,640, Р-^0,05), которая играет немаловажную роль в вдтноЗ функции организм. Превращаясь в пентозофосфатном пу-а, глюкоза участвует в образовании НАДО!^, идгаего в глютатион-вдуктазну» систему. ■

7 коров Ш грушш, суда по активности каталазы и пероксида-з, интенсивность перекаскцх вроцэссов била несколько меньше, го подтверждает подострнЙ характер точения субинводюции.

В результате исследования изоферментного спектра ЛДГ при ¡зиологаческом течении послеродового периода было установлено, го общая' активность фермента за 3 месяца исследований колеба-юь от 8,531^0,369 до 5,244^р,315' нкат/ш, в том числе ЛДГ^ -г 3,276^0,142 до 1,84(^0,091 нкат/мя, ДДГ2 - от 2,423^,104 до -384*0,083 нкат/мл, ДДГд - от 1,478^0,111 до 0,824^0,049 нкат/мл, [Г4 - от 1,32^0,052 до 0,393^0,024 нк^г/мл, ДДГ5 - от 0,862± 037 до 0,27ЗД),016 нкат/ми. •

Отмеченное выше увеличение, активности лактатдегадрогеназы I п а Ш группах было наиболее выражено на 15 сутки после отела происходило в основном за счет фракций ЛДГз»- ДДГ^ и ДДГ5. НС. 3).

Содержание глюкозы, лактата, пирувата

и активность ферментов крова при хронических катарально-гнойном

и скрытом эндометритах

■ ^

У животных с хроническим катараяьно-гнойным эндометритом Злюдалось значительное по сравнению с нормой увеличение кон-нтрации лактата (в 2,4 раза, Р<0,001) л пирувата (на 7 %, ■0,05.) и снижение концентрации глюкозы (на 30 %, Р-^0,05), э как ужо отмечалось можно объяснить активизацией окислитель--восстаяовитаяышх процессов в сторону восстановления за счет пользования катионов водорода донора - НАДН, а'такяе активами пентозофосфатного щунта, пополняющего внутриклеточные за-зы НАДОН^, необходимые для процессов регенерации с участием рментатавного звена АОЗ. ....... \

Изучение ферментативного звена АОЗ показало угнетение анти-юлительной активности катая азы и пероксидазы у животных с

8 '

1

хроническим катарально-гнойным эндометритом. Активность* катала- . зы снижена на 23 % (Р-^0,05), пероксидазы на 12 % (Р>0,05). Это по-видимоцу связано,с истощением запасов АОЗ, что косвенно подтверждается и низким уровнем активности лактатдегидрогеназы (на 27,4 % со сравнению с физиологическим течением послеродового периода, Р-^0,05). !

Активность АЛД у животных с хроническим катарально-гнойным -эндометритом выше контрольного значения на 30 % (Р<0,05), что многими авторами связывается с развитием прогрессивной мышечной > ' дистрофии.

При скрытом эндометрите содержание глюкозы в крови несколь-. ко выше (на 16 Р>0,05) таковой у животных .с хроническим кв*-тарально-гнойным эндометритом, а лактата я пярувата ниже (на 14 %, Р^0,001 и 4 %, Р>0,05). •

Активность' ЛДГ и АЛД при хроническом окотом эндометрите значительных отличий от физиологического течения послеродового периода не имеет, хотя в сравнении с хроническим катарально-гнойным эндометритом активность ДДГ выше (на 21 %, Р<0,05), а АЛД ниже (на 27 %, Р^О,05). Такая картина, по нашему мнению, является благоприятной в прогностическом смысле^-' что подтверждается данными ро исследованию активности каталазы а пероксидазы. При скрытом эндометрите активность указанных ферментов выше по сравнению с активностью у животных с хроническом катарально-гнойным эвдометритом, что без сомнения првщаает "буферную емкость" "буферной антиоксидантной системы".

' При хроническом эндометрите происходит снижение интенсивности обменных процессов, причем при катарально-гнойном оно более выражено. Наряду с этим у коров с хроническим скрытым эндометритом превалируют биохимические процессы антиокислительной защиты с увеличением активности ферментных систем - пероксидазы и каталазы.

Динамика изменения содержания метаболитов углеводного обмена и активности ферментов крови при антибиотяко-и озонотерашш острого катарально-гнойного эндометрита

Как известно,, эндометриты сопровождаются многочисленными стрессами, обусловленными нарушениями <|бмена веществ с активацией неферментативного СРО на фоне местной гипоксии.,' Нашими исследованиями показано, что озон, как средство, обладающее

ирайенной метаболической активностью, оказывает благоприятное эйетвае на течение воспалительного процесса.

Озонотерапия, в ряде случаев, может быть методом выбора ря лечении гинекологических заболеваний вследствие малой эффек-явности иля неэффективности антибактериальной терапии, выражений сенсибилизации больных животных к лекарственным препаратам, ■ шшонной цм>4унореактивностн,

доследование биохимической активности озона в отношении ргаияческих субстратов крови н действия на ферментативную ак-шность позволило установить, что это взаимодействие носит >эозависимый характер. , . В результате прямого озонолиза, а также усиления процессов илязеции метаболитов в крови при применении озонотерапии проис-дало снижение концентрация лактата уже на 18 сутки после нала лечения в 2 раза (Р<0,01) при дозе 1<5 мг и на 13 % >0,05) при дозе 3 мг. Незначительное увеличение концентрации рувата при дозе 1,6 мг о 241,05±1Э,40¿»моль/л до 248,24±9,40 эль/л на 18 сутки сменилось резким снижением ' этой величины 220,12^,68/моль/л и ко 2 месяцу это значение'было даже, ¡только ниже физиологического значения (138,11^16,26 и 148,26^ г5 риояъ/л, соответственно).

В результате дойствия озонйдов на 4 сутки произовло уме-и?— ле '/.онцентрацяи глюкозы, причем при дозе 3 мг оно более вм-8но (1,5 от - на 7 %, Р>0,05 ; 3 мг - на 27 %, Р<0,05). В ьнейшем происходило заметное увеличение концентрации в обеих группах, причем в I подгруппе это значение приближалось к ¡«логическому (2,365^0,306 и 3,389±0,376 ммоль/л, соответст-зо)....... ...

При использовании этонополицилина наблюдалось резкое увс-■нне концентрации глюкозы уже 'на 4 сутки после начала лече-(с 2,562+0,429 до 3,385*0,463 ммоль/л). По такому изменению Фвстпой долей уверенности можно судить о влиянии определен-| стресс-фактора, чего не было отмечено при применении озоно-

ПЯй.

В этой группе наш также было отмечено несколько пикообраз-(по сравнению со значением до начала лечения - 246,83+10,39 ь/л) всплесков концентрации пирувата на 4, 18 и 30 сутки з начала лечения (269,17^9,58, 272,85±8,89 и 257,69£7,-14 ь/л, соответственно), что объясняется активизацией процессов

ю

глюконеогенеза, за счет которого, как известно, происходит образование глюкозы, идущей на восполнение недостатка энергии.

Наиболее полно коррегиругацее действие озона на гомеостаэ организма животных проявилось при исследовании активности ферментов углеводного обмена и ферментативного звена АОЗ.

Озонотерашя создавала благоприятные увловия для ликвидации последствий гипоксии, так или иначе, возникающей при послеродовых заболеваниях.

При озовотерапии после начала лечения происходит увеличе- 1 ние активности всех исследуемых ферментов на II сутки, за исключением катал азы, пик активности которой зарегестрирован уже на 4 сутки (АЛД - в 1,36-1,5 раз, Р-=0,01; ЛДГ - в 1,2-1,49 раз, . Р-^0,05 ; пероксидазы в 4,1-6,4 раз,. Р^0,001; каталазы в 2,95 раз, Рс0,001). - •'- ••'■•;'..

Всплеск активности АДД и ЛДГ, по нашему мнению, произошел в результате активизации гликолитического пути окисленияглюко-зы, что в свою" очередь повышает энергетический потенциал клеток эндометрия. Прячем возрастание активности ЛДГ происходило в основном за счет анодных фракций/, и только применение дозы 3 мг привело к увеличению активнооти ДДГ за счет ДДГ5.

Нами выявлена прямая корреляционная зависимость между активностью ДДГ и каталазы в I подгруппе(*: »+0,682, Р-<0,05) • (рис. 4) после начала лечения. Подобная корреляция обнаружена и для активностей изофермента ЛДГ^ и каталазы (г »+0,684, Р-^0,05). По мере нормализации процессов СРО происходит и нормализация гликолитических процессов. Подобной корреляционной зависимости между активностю - гликолитических ферментов и ферментов АОЗ во 2 подгруппе выявлено не было. Г

На 4-11 сутки после начала лечения в I подгруппе произошло увеличение активности каталазы в 3,4 раза (Р^О,001), а во второй подгруппе в 5,6 раз (Р-^0,001). Резкий подъем активности фермента во второй подгруппе, по нашему мнению, неблагоприятен, так как приводит к быстрому истощению запасов АОЗ;

Таким образом, окислительное и прооксидантное действие : озона включало адекватные изменёния ферментативного звена анти-■ окислительных механизмов. В такой ситуации умеренная активация ' (свободнор&цикальных реакций оказывает терапевтическое влияние биохимические эффекты перекисно^о.окисления липидов (ПОЛ).

исследования характера взаимодействия озона

кровьэ ксгдо констатировать^ что озон з диапазоне доз ¿1,5-3 мг яздает зачетным биологическим влиянием в отношения углеводных бстратов кровк и его действие сопровождается усилением кисло- • дзависииых шродессов, связанных о выработкой я утилизацией арготических субстратов.

В итоге такого двойного воздействия {озок+активация ПОЛ) оЕсходала перестройка метаболизма на тканевом уровне,в резуль-га увеличения-йхтивноетя ннош ферментных систем возрастали эроста реакций кпслбродзаварошх процессов, что повышало арготический потенциал клеток авдометрйя.

Вследствие активации многих метаболических КЕСлородзависи-: процессов'в организм.? под влпянпем озона и инициируемых им щессов ПОЯ о последующей активацией ДОЗ оптимизировалась шция половой сферы, быстрее проходили процессы репарации и становления репродуктивной, функции.

При антибиотакотерапии активность ферментов снижается; Г. на 4 сутки с 11,833^.0,195 до 9,38-3^0,417 нкгт/нл; катала-на II сутки с' 58,24*6¿70 до 32„31±9,72 якат/шиг £ альдояазы 18 сутки, с 0,545^0,026 до 0,455+0¡052 нкат/мл. Но последующее

увеличение их активности приводит к тому, что ко второцу месяцу поело начата лечения по сравнению с-1 группой эти значения несколько завышены (АЛД- - 0,406*0,042 и 0,523*0,061 нкат/мл, ЛДГ - 5,213±0,223 и 8,974*0,342 нкат/шг, катал аза - 76,31*3,76 и 84,61*8,41. нкат/мкл, пероксидаза - 0,220*0,019 и 0,118*0,011 нкат/мл), что можно объяснить "неполным биохимическим выздоровлением" . Причем, увеличение" активности ЛДГ в этой группе происходит за счет-фракции ЛДГ4, что, по нашецу ,мнению, является неблагоприятным фактором, так как известно, что данный изофермент синтезируется преимущественно в печени и увеличение его'в крова говорит о"неблагополучии" в обмене веществ Н этом органе.

Полученные каш 'результаты дополняют имеющиеся сведения об обменных процессах в организме здоровых животных о нормальным пэловым никлом, при остром, хроническом эндометритах а цра суб-Е.1В0ЛЮЦИИ. матка'. • ' .

•; • ВЫВОД! '

1. Результаты проведенных исследований показали, что у ни-еотных с физиологическим течением родов и послеродового периода

• -уровень глюкозы,'.в.среднем равен 2,876*0,140 шоль/л, лактата -1,344*0,125 лмоль/л,- лирувата - 158,04±6,12 ^мсль/л.

Активность ферментов в среднем составила: фкгктозобисфосфа?-альдслазы - 0,608*0,045 нкат/ш, катадазы - 72,33*3,05 нкат/мк£8 пероксидазы - 0,256*0,043 нкат/щ, лактатдегидрогеназы - 7,0331; 0,351 нкат/ш ; изоферментный спектр ДЦГ имеет следующий состав: ЛДГ1 - 2,402*0,128 нкат/мл, ЛДГ2 - 1,962*0,090 .нкат/мл, ЛДГд -1,219*0,063 Нкат/ш, ЛДГ4 - 0,852*0,093 нкат/мл, ДДГ5 - 0,598* 0,066 нкат/мл.

2. Биохимический состав крови больных животных при остром катарально-гнойном эндометрите характеризовался следующими показателями:

а) отмечались более низкий уровень (на 29 %) глюкозы и в динамике, пикообразное увеличение показателя на 30 сутки (на 43 %) по сравнению с физиологическим течением послеродового периода;

б), концентрация лактата была достоверно выше в среднем на 50 %, пирувата - на 40-50 % ;

в) активность фруктозобисфосфатальдолазы достоверно снижалась к 20 суткам и разница с физиологическим течением послеро- " дового периода в этот момент составила 22 %. В дальнейшем

дальность фермента повышалась а к 90 суткам разница составила 3 ■'

г) пак активности лактатдегадрогеназы наступал на 10 сутки осле отела, в основном за счет фракций ЛДГ4 а ЛДГд, а в это река зиачсляэ показателя врешпвао контрольное в 1,9 раза. В .альнейлшл происходил спад активности и к 90 суткам разница оставила 32 %;

д) пссле недостоверного подъема активность катаяазы снижаюсь к достигала манацума на 50 сутки после отела, что на 43 % изс8 контрольных значений. ■ Восполнение недостатка активности атолазн происходило за счет увеличения активности пероксидазы» ик активности фермента наступал на 30 сутки, что на 33 % выше онкольного значения.

3. При субанвсишцяи матка динамика изменения содержания етабояатов и активности ферментов характеризовался следующими оказатедями:

а) уровень глюкозы был на 23 % ниже, а на 30 сутки - на 35% юте по сравнению с физиологическим течением послеродового пе-аода; ..

б) концентрации лактата и пирувата были достоверно шие 'в,-реднем на 30 %; -

в) на 20 сутки после отела разница активностей фруктозодас-эсфатальдолазы составила 14 %, на 90 сутки - 45 %; .

г) пак активности лактатдегадрогеназы наступал на 20 сути эсле отела, в основном за счет фракций ЛДГд и ЛДГд, когда резеда с контролем составила 23 %, к 90 суткам достоверных разли-ай меаду группами обнаружено не было ;

д) активность каталазы снижалась на 40, 50 сутки после гела соответственно на 29, 31, 14 % ;

е) активность пероксидазы повышал&сь на 10, 50, 60 сутки . а. 19, 16, 36 %, соответственно, и снижалась на 5, 30 сутки на . 3 а 33 %, соответственно.

4. При хроническом катарально-гнойном эндометрите отмечены ;. деньшение по сравнению с контролем содержание Глюкозы (на 30 %) активность лактатдегадрогеназы (на 27,4 %), а также увеличена 1в концентрация лактата (в 2,4 раза) а актавность фруктозобас-зсфатальдолазы (на 30 %). Достоверных различий в исследуемых 5казателей у контрольных животных и животных со скрытым эндо-

5 три том установлено не бьшо, за исключением содержания Лактата,

где разница составила'50 %. , » ■

5. У коров с хроническим скрытым эндометритом превалируют биохимические процессы антиокислитальной защиты с увеличением активности каталазы на 13 % и пероксидазы на 43 %. При хроническом катарально-гноГшом эндометрите произошло снижение активности каталазы и пероксидазы на 23 %.

6. В результате замедления гликалитических процессов при * • применении этонополицилина на 4 сутки произошло увеличение на

29 % концентрации глюкозы, о чем также говорит снижение актив- ■ ности фруктозобисфосфатальдолазы и лактатдегидрогеназы за счет фракций ЛДГ^ и ЛДГ2» что сопровождалось повышенным содержанием , пирувата и угнетением каталазной активности на 47

7. Внутриматочное введение озонированного физраствора в дозе 1,5 мг оказывает без выраженных токсических последствий стимулирующее действие на развитие компенсаторно-приспособительных механизмов, повышает энергетический потенциал клеток эндометрия: увеличивая активность фруктозобисфосфатальдолазы, лактатдегидрогеназы (за чет фракций ЛДГ^ и ДЩ^), активизирует гликолитичес-кий путь окисления глюкозы; усиливая утилизацию лактата и пирувата, интенсифицирует цикл Кребса; способствует умеренной активации свободнорадикальных реакций перекисного окисления липидов, которая сопровождается возрастанием активности каталазы и пороксидазы.

8. Указанные изменения свидетельствуют об активации реак- ' цлй функционального напряжения организма, приводящих к ликвидации патологического процесса, а действие озонотерагош направлено на уменьшение пролиферативннх процессов в пораженных клетках эндометрия.

9. Реабилитация организма коров после перенесенного острого катарально-гнойного эндометрита при озонотерашш заканчивается

в основном к 18 суткам, что на 7 суток раньше, чем при традиционной антибиотикотерапии, что также подтвеш,.рается 'оззультатам? диспансерного обследования и последующего осеменй^я

10. Полученные новые данные о значена ко^сэственных из-, менений показателей биохимического сорта »а кооти котки , пои эндометритах значительно расширяют сущесч'эгашше «ренета»ления о патогенезе этого заболевания, дают теооетичэйшэ осслование к применению озонотерапии и позволяют судить оо оолезни и эф-Фшаивйэсм лечения. !

« РЕКОМЕНДАЦИИ ' ПО ИСПОЛЬЗОВАНИЮ НАУЧНЫХ ВЫВОДОВ

1, Результаты по активности исследуемых ферментов могут быть использованы как критерий нормы в клинической биохимии и ' научно-исследовательской работе при изучении эндометритов коров различной этиологии.

2. Отмеченные изменения биохимических показателей крови рекомендуется использовать в широкой ветеринарной практике, а также клинической биохимии для комплексной диагностики и проведения контроля за лечением эндометритов и разработки й оценки эффективности новых "методов лечения. Применение рассматриваемых методов

в комплексе с обычными клиническими исследованиями позволяет уточнить характер и локализацию патологического процесса в эндометрии, осуществить наблюдения за. его изменениями под влиянием антибиотиКо- и озонотерапии, уточнить дозировку вводимых препаратов и продолжительность курса леченая, а также своевременно решить вопрос о необходимости более радикального речения.

Список рабе?, опубликованных по теме диссертации

' I. Белоновская О.С. Активность ферментов углеводного обме- : :а при остром эндометрите и субинволюции матки у крупного рога-■ого скота//Бопроси ветеринарной биологии: СЗ.науч. тр../Моск. ют.акад. им. К.И.Скрябина, 1992. С,35-37.

2. Балоновская О.С., СинегубГ.А. Биохимические аспекты лри-енения озонотерапии при эндометритах крупного рогатого скота /Озон в биологии и мёдицине: Тез.докл, 1-ой Всероо.кауч.-практ. онф. 25-26 июня 1992 г., Ниаший Новгород, 1992. С.69. _

3. Малахов А.Г. , Белоновская О.С. Метаболиты углеводного Змена при гинекологических патопогиях//Вопросы ветеринарной аологии: Сб.науч.тр.ДЬск.вет.акад. им. К.И.Скрябина, 1993. .17-18.