Бесплатный автореферат и диссертация по сельскому хозяйству на тему

Фармако-токсикологические свойства гепакардина и его применение в гериатрии

ВАК РФ 06.02.03, Звероводство и охотоведение

Автореферат диссертации по теме "Фармако-токсикологические свойства гепакардина и его применение в гериатрии"

На правах рукописи

ГЛОТОВА СВЕТЛАНА ВЯЧЕСЛАВОВНА

ФАРМАКО-ТОКСИКОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ГЕПАКАРДИНА И ЕГО ПРИМЕНЕНИЕ В ГЕРИАТРИИ

06.02.03 - ветеринарная фармакология с токсикологией

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

И04600392

Санкт-Петербург - 2010

004600392

Работа выполнена на кафедре фармакологии и токсикологии ФГОУ ВПО «Санкт-Петербургская государственная академия ветеринарной медицины».

Научный руководитель:

доктор ветеринарных наук, профессор Соколов Владимир Дмитриевич

Официальные оппоненты:

доктор ветеринарных наук Соколова Лидия Николаевна

доктор ветеринарных наук, профессор Рахматуллин Эмиль Касымович

Ведущая организация:

ФГОУ ВПО «Воронежский государственный аграрный университет»

Защита диссертации состоится </15гЛ0ре*Ю&\§ года в/Спасов на заседании диссертационного совета Д 220.059.03 при ФГОУ ВПО «Санкт-Петербургская государственная академия ветеринарной медицины» по адресу: 196084, Санкт-Петербург, ул. Черниговская, 5,тел./факс (812) 388-36-31.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГОУ ВПО «Санкт-Петербургская государственная академия ветеринарной медицины».

Автореферат разослан «. _» «¿^/Г"2010 года и размещён на сайте http://spbgavm.ru 2010 года.

Ученый секретарь диссертационного совета — Белова

(УУ^ /Лариса Михайловна

1. Общая характеристика работы

Актуальность темы.

Продолжительное использование животных на фермах служит одним из главных показателей высокой культуры ведения хозяйства. При широко проводимой в настоящее время интенсификации животноводства продление срока использования животных - необходимое условие для дальнейшего экономически эффективного развития данной отрасли (Бычков А.И., 1995; Сивольский A.B., 2002).

Аналогичная тенденция прослеживается и среди домашних плотоядных животных.

Отмечено (Laflamme DP.,2005; Kraft W., 1997), что в последние годы за ветеринарной помощью стали чаще обращаться владельцы с животными средней и старшей возрастных групп. Это связано с увеличением средней продолжительности жизни и повышением абсолютной численности животных старшей возрастной группы.

Соответственно, практикующим ветеринарным специалистам все чаще и чаще приходится сталкиваться с заболеваниями, характерными для стареющих животных (Соколов В.Д., 2008; Чуваев И.В., 2007).

Как показывает анализ работы клинических подразделений, инфекционные заболевания отступили на второй план и большей частью встречаются болезни неинфекционной этиологии (Дейвис М., 2002).

В настоящее время (Чуваев И.В., 2009; Witte Р., Scott Н., 2009) наиболее часто встречаются болезни, связанные с нарушениями обмена веществ (мочекаменная болезнь, артриты, артрозы, остеохондрозы и пр.), иммунной системы (онкология, аутоиммунные заболевания, аллергические проявления и т.д.), а также связанные с поражением печени (гепатит, цирроз и пр.).

Доказано, что у животных с возрастом наблюдается усиление интенсивности процессов перекисного окисления липидов, снижается антиоксидантная защита организма (Вахта A.A., 2008; Мельниченко В.И. 2006). Это является важным этиологическим фактором возникновения ряда хронических болезней, а также

приводит к появлению новообразований у старых животных и в целом к появлению большинства признаков старения (Анисимов В.Н., 2003;Holzenberger М„ Dupond J„ Ducos В., 2003; Orr W.C., Sohal R.S., 1994).

На сегодняшний день для лечения заболеваний, возникающих с возрастом, используется широкий спектр монопрепаратов ( кардио-, гепато хондропро-текторы, антиоксиданты и др.). Это в значительной степени отражается на стоимости и трудоемкости применения препаратов животным, т.к., как правило, используется не один, а несколько лекарственных средств одновременно.

Данные факты свидетельствуют об актуальности и необходимости поиска комплексных лекарственных средств для увеличения продолжительности и улучшения качества жизни животных средней и старшей возрастных групп.

Все это и послужило обоснованием к разработке гериатрического направления в ветеринарной фармакологии.

Цель и задачи исследований. Основная цель исследований заключалась в разработке эффективного политропного гериатрического средства, обладающего кардио-, гепато -, хондропротекторными, антиоксидантными свойствами и способного улучшать качество жизни старых животных. В связи с этим были поставлены следующие задачи:

- разработать рецептуру препарата;

- определить лечебно-профилактическую дозу препарата для собак;

- определить в лабораторных условиях безвредность (токсичность) препарата;

- изучить гепатопротекторное, противотоксичное и кардиопротекторное свойства препарата на лабораторных животных;

- испытать препарат на животных старшей возрастной группы.

Научная новизна. Разработан новый политропный гериатрический препарат для животных и впервые изучены его фармако-токсикологические свойства. Установлено, что препарат Гепакардин (ЧИН 3607) обладает выраженным гепато -, кардио- , хондропротекторными и антиоксидантными свойствами. Показана его лечебная эффективность и безвредность для организма лаборатор-

ных и плотоядных животных, что дает основание для применения данного средства в ветеринарной гериатрии.

Практическая значимость. Установлен высокий терапевтический эффект Гепакардина при лечении старых животных с различными возрастными заболеваниями: сердца, печени, суставов, нарушениями антиоксидантного статуса организма. Разработаны рекомендации по применению препарата Гепакардин в ветеринарии.

Апробация материалов диссертации. Основные материалы диссертации доложены и обсуждены на I международном конгрессе ветеринарных фармакологов "Эффективные и безопасные лекарственные средства" (Санкт- Петербург, 2008), а также на XIX международной научно-практической конференции «Новые фармакологические средства в ветеринарии» СПбГАВМ (2007).

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Разработка рецептуры Гепакардина и определение его средней терапевтической дозы.

2. Определение на лабораторных животных безвредности препарата Гепакардин (острая токсичность, хроническая токсичность, эмбриотоксич-ность, тератогенность)

3. Изучение противотоксических и гепатопротекторных свойств препарата.

4. Изучение кардиопротекторных свойств препарата Гепакардин.

5. Эффективность применения препарата Гепакардин в качестве гериатрического средства для животных старшей возрастной группы.

Публикация материалов исследований. По теме диссертации опубликовано восемь научных работ, две из них - в рецензируемых журналах ВАК Минобразования и науки РФ.

Объем и структура работы. Диссертация включает введение, обзор литературы, материалы и методы исследований, результаты собственных исследований, обсуждение полученных результатов, выводы, практические предложения, список литературы, приложения. Диссертационная работа изложена на 140

страницах компьютерного текста, содержит 22 таблицы и 30 рисунков. Список литературы включает 183 источника, из них 57 иностранных авторов.

2. Собственные исследования Материалы и методы исследований

Работа выполнена в период с 2006 по 2010 год на кафедре фармакологии и токсикологии ФГОУ ВПО «Санкт-Петербургская государственная академия ветеринарной медицины».

В экспериментальных условиях предметом исследований служили 372 белые крысы линии <^151аг» и 60 белых беспородных мышей. Препарат испытан на 131 собаке и 42 кошках с различными возрастными заболеваниями в условиях производства на базе ветеринарной клиники Института Ветеринарной Биологии и приюта для собак г.Санкт-Петербурга, а также в РВС Московского и Фрунзенского районов г. СПб и в питомнике для собак г. Якутска.

В работе были использованы фармакологические, гематологические, биохимические, токсикологические и другие методы исследования.

Определение терапевтической дозы препарата устанавливали при проявлении его кардио- и гепатопротекторных свойств.

Из фармакологических свойств Гепакардина были исследованы кардиопро-текторное, противотоксическое, гепатопротекторное, хондропротекторное и ан-тиоксидантное действия.

Кардиопротекторное действие Гепакардина определяли с использованием модели острой кардиомиопатии, вызванной введением адреналина. Для этого нами была модифицирована модель на крысах острой сердечной недостаточности с повреждением миокарда.

Опытным путем была установлена доза 0,1% р-ра адреналина гидрохлорида, вызывавшая при однократном подкожном введении гибель 50% испытуемых животных (1Л)5о) и характеризующаяся четкими проявлениями кардиомиопатии на электрокардиограмме (ЭКГ). Она составила 4 мг/ кг. (Чуваев И.В., 2009).

б

Исследование по изучению кардиопротекторных свойств Гепакардина проводили на 4 группах крыс по 10 голов в каждой: Гепакардин (1 группа) и препарат сравнения - рибоксин (2 группа) задавали внутрь в дозе 50 мг/кг и 40 мг/кг соответственно, 1 раз в сутки, в течение 14 дней до интоксикации; 3 группа - контроль; 4 группа - интактные.

Эффективность препарата оценивали по общему состоянию животных после интоксикации, изменениям на ЭКГ, наличию тропонина I в крови и гистологической картине в миокарде крыс в сравнении с контрольными группами.

ЭКГ снимали через 24 ч после инъекции адреналина на кардиографе CardiMax FX -7102.

Тропонин I в сыворотке крови лабораторных животных определяли имму-нохроматографическим методом (HiSense Tnl Card) через 48 ч после интоксикации.

Изучение гепатопротекторных свойств Гепакардина выполняли с использованием модели острого гепатита. Для этого внутрибрюшинно вводили четыреххлористый углерод (ССЦ), в форме 50% раствора на вазелиновом масле, 1 раз в сутки, 3 дня подряд в дозе 0,4 мл/кг (Брытов A.B., 2007).

Опыт проводили на 5 группах крыс по 10 голов: Гепакардин давали внутрь в дозе 50 мг/кг 1 раз в сутки в течение 14 дней до интоксикации (1 группа) и после интоксикации до окончания опыта (2 группа); препарат сравнения - Кар-сил (3 группа) задавали внутрь в дозе 5 мг/кг 1раз в сутки в течение 14 дней до интоксикации; 4 группа - контроль; 5 группа - интактные.

О гепатопротекторном действии препарата судили по общему состоянию животных, клиническому и биохимическому анализам крови, взятым на 5-й день после окончания интоксикации.

Противотоксическое действие Гепакардина определяли на модели острого гепатита, вызванного этиловым спиртом. Этанол вводили крысам внутрибрюшинно в дозе 4г/кг в концентрации 24%. Интоксикацию проводили 3-х кратно с интервалом в 24 часа

Испытание провели на 4 группах крыс по 10 голов: Гепакардин (1 группа) и препарат сравнения - Карсил (2 группа) давали внутрь в дозе 50 мг/кг и 5 мг/кг соответственно, 1 раз в сутки, 14 дней до, а также после интоксикаций; Згруппа - контроль; 4 группа - интактные.

При проведении каждой интоксикации учитывали время засыпания (принятие бокового положения) и длительность алкогольного сна; по окончании испытания у крыс брали кровь для проведения биохимических исследований.

Изучение острой токсичности препарата Гепакардин проводили методом постановки биологической пробы на белых беспородных мышах. ЛД50 определяли по методу Кербера.

Изучение хронической токсичности препарата Гепакардин было выполнено на белых крысах в течение трех месяцев.

Изучение эмбриотоксического и тератогенного действия препарата Гепакардин проводили на белых беспородных крысах.

Подробно методы определения токсичности препарата Гепакардин приведены в соответствующих разделах.

Клинические испытания препарата Гепакардин провели в несколько этапов.

На первом этапе испытаний действие препарата было изучено на 10 беспородных собаках старше 10 лет с различными возрастными заболеваниями, на базе приюта для собак г. СПб. Эффективность лечения оценивали по изменению общего состояния, биохимическому и клиническому анализам крови на момент начала и окончания опыта.

Второй этап испытаний провели на 40 собаках и 42 кошках старшей возрастной группы на базе ветеринарной клиники ООО «Институт Ветеринарной Биологии» г. СПб. Эффективность лечения оценивали по общему состоянию, биохимическому и клиническому анализам крови на момент начала и окончания опыта.

Испытание препарата проводилось также на 20 собаках средней возрастной группы породы якутская лайка, в питомнике «Арктик-Трэвел» г. Якутска, а

8

также на 61 собаке старшей возрастной группы на базе РВС г. СПб. Эффективность лечения оценивали по общему состоянию животных и биохимическим показателям сыворотки крови в сравнении с контрольной группой.

Гематологические показатели определяли на автоматическом гематологическом анализаторе Picoscale PS - 4, где подсчет форменных элементов основан на счете электрических импульсов, вызванных исследуемыми частицами.

Биохимические показатели сыворотки крови (уровень АЛТ, ACT, щелочной фосфатазы, креатинина, мочевины, общего белка, общего билирубина, кальция, фосфора) определяли фотометрическим методом на биохимическом анализаторе Stat Fax 1904 Plus (США).

Уровень перекисного окисления липидов оценивали следующим образом: концентрацию малонового диальдегида устанавливали методом с тиобарбиту-ратовой кислотой, концентрацию диенкетонов - модифицированным методом Плацера на кафедре биохимии СПбГАВМ.

Статистическую обработку проводили с использованием критерия Стьюден-та, рассчитанного по формулам для относительных величин.

3. Результаты исследований 3.1. Разработка нового политропного гериатрического средства

У старых животных встречается целый ряд возрастных заболеваний опорно-двигательного аппарата, почечная, сердечная и печеночная недостаточности, а также онкологические болезни (Данилевская Н.В., Николаев A.A., 2002; National Research Council, 2006). По мере взросления в организме увеличивается количество продуктов перекисного окисления липидов в связи с ослаблением антиоксидантной защиты, что уменьшает жизненный потенциал и увеличивает риск развития новых болезней, ассоциированных со старческим возрастом (Крутько В.Н., 2002).

Учитывая данный спектр наиболее часто встречаемых возрастных изменений у домашних животных, нами был разработан политропный гериатриче-

ский препарат Гепакардин. Фармакологический эффект препарата обусловлен входящими в его состав компонентами:

- витамин Е (а- токоферол) - является антиоксидантом, тормозит перекисное окисление липидов биологических мембран благодаря взаимодействию со свободными радикалами и образованием быстро разлагающегося семихинона.

- селен - метионин является наиболее усвояемой формой органически связанного селена, который входит в состав многих жизненно важных ферментов, в том числе глутатионпероксидазы - фермента, являющегося составной частью антиоксидантной системы организма.

Таким образом, оба компонента (витамин Е и селен) являются синергистами и действуют на разных стадиях перекисного окисления, обеспечивая мощную защиту организма от оксидантного стресса.

- глюкозамина гидрохлорид и хондроитина сульфат - обладают протективным действием в отношении хондроцитов, способствуют их восстановлению при повреждениях, нормализуют продукцию внутрисуставной жидкости, стимулируют синтез глюкозаминогликанов, тем самым ускоряют процессы репарации костной ткани, тормозят прогрессирование остеоартроза.

- кальция глюконат - восполняет дефицит кальция, часто встречающийся у старых животных (Scarlett J.M., 1998).

- экстракт корня женьшеня (Panax ginseng) содержит сапониновые гликозиды, эфирные и жирные масла, обладающие адаптогенными свойствами.

- экстракт расторопши пятнистой (Silybum marianum) содержит флавонои-ды (силибин, силикристин, силидианин), проявляющие гепатопротекторное и мембраностабилизирующее действие (Campos R., 1989; Давчев П., 1981).

- экстракт чаги 6epe3oeoü(Inonotus obliquus) - содержит широкий спектр биологически активных веществ, в т.ч. хромогенный полифенолкарбоновый комплекс, проявляющий противоопухолевое, гастро- и гепатопротективное свойства (Cui Y„ Kim D.S., 2005; Саакян K.P., 2004).

На моделях острой кардиомиопатии, с использованием 0,1% раствора адреналина гидрохлорида и острого гепатита, вызванного парентеральным введению

ем четыреххлористого углерода, была установлена средняя терапевтическая суточная доза препарата Гепакардин. Она составила 50 мг/ кг.

3.2. Фармакологические свойства Гепакардина Кардиопротекторное действие препарата Гепакардин было изучено на модели острой кардиомиопатии, вызванной введением адреналина. Известно, что большие дозы адреналина способны вызывать у животных повреждение миокарда, и оно бывает настолько выраженным, что в сердце возникают некротические очаги, схожие с инфарктными (Меерсон Ф.З., 1984; Гоффман Б., 2006).

Было установлено, что смертность животных в контрольной группе после интоксикации составила 50%. У выживших крыс из этой группы были выявлены на ЭКГ четкие изменения, характерные для некроза клеток сердечной мышцы (рис.1): подъем сегмента БТ выше изолинии дугой, выпуклостью кверху, в виде монофазной кривой, при этом сегмент БТ сливался с положительным зубцом Т; вольтаж зубцов был слишком занижен; наблюдалось замедление сердечного ритма (Орлов В.Н., 1983).

Таблица 1

Влияние профилактического применения препарата Гепакардин на сердце в условиях острой интоксикации 0,1 % раствором адреналина гидрохлорида_

—Группа Показатель — 1 (Гепакардин) 2 (Рибоксин) 3 (контроль) 4 (интактные)

% выживших животных после интоксикации 100 100 50 100

% «+» реакций на ТропонинI 40 50 100 0

В крови всех крыс из группы контроля было установлено наличие Тропо-нина I, являющегося наиболее значимым и специфичным маркером повреждения миокарда (Целуйко В.И., 2003).

В группах крыс, получавших Гепакардин и Рибоксин, гибели не наблюдалось; выраженные патологические изменения на ЭКГ регистрировали лишь у 50% подопытных животных (рис.2); наличие в крови Тропонина I было выявлено у 40% крыс, получавших Гепакардин и у 50% - получавших Рибоксин (табл. 1).

и

Повреждение кардиомиоцитов в результате токсического действия больших доз адреналина подтверждалось при гистологическом исследовании миокарда крыс из контрольной группы наличием изменений, ведущих к некрозу кардиомиоцитов: отсутствие сарколеммы, глыбчатость цитоплазмы; лизис ядер, а в некоторых клетках - полное их отсутствие; в некоторых образцах миокарда обнаружили участки с более светлой окраской мышечной ткани, что дало возможность предположить ишемию миокарда.

При гистологическом исследовании миокарда крыс, получавших Гепакардин и Рибоксин, были выявлены признаки зернистой дистрофии: набухание цитоплазмы, нечеткие границы клеток и ядра; ядра кардиомиоцитов были слабо окрашены, с нечеткими границами; сарколемма сохранялась; окраска мышечных волокон была неоднородна.

, 1 ;! ; ; : Ш ' 1 ;

• -..'•....х-л—,1—СД—

! <У ...... .1 О 0 ' ШП г:! ^

Рис. 1. ЭКГ крысы, получавшей Гепакардин, через 24 ч. после интоксикации

Рис. 2. ЭКГ крысы из группы контроля, через 24 ч. после интоксикации

Таким образом, результаты опыта подтвердили наличие у препарата Гепакардин кардиопротекторных свойств, т.е. способности оптимизировать работу и функцию сердца и предупреждать повреждающее действие экзогенных факторов на миокард.

Гепатопротекторное действие препарата Гепакардин было изучено с использованием модели острого гепатита, вызванного четыреххлористым углеро-

дом (ЧХУ). ЧХУ, один из самых агрессивных ксенобиотиков, также является специфическим гепатотропным ядом, вызывающим в сублетальных дозах развитие острого и хронического гепатита, цирроза печени (Holland J.J., 1980; Suja V., Shyamaladevi C.S., 1997).

Введение ЧХУ вызывало гибель 30% животных в группе контроля (4 группа). В группе крыс, получавших Гепакардин до и во время затравки (2 группа), а также в группе, получавших Карсил (3 группа), гибели не наблюдалась; в группе, получавших Гепакардин только в течение 14 дней до интоксикации (1 группа), гибель составила только 10% (табл. 2).

Следует отметить, что у животных, получавших Гепакардин, живая масса в течение опыта увеличивалась (на 1,5 и 5,9 % начальной), в то время как у крыс из группы контроля она снизилась на 3,6% (табл. 2). У животных, получавших препарат Карсил, масса увеличилась на 2,7%.

Таблица 2

Изменение живой массы лабораторных животных при интоксикации ЧХУ

^-ДТоказатели Смертность, Масса, до Масса, после Разница в ве-

группа % опыта, г опыта, г се, %

1 (Гепакардин) 10 400 406 +1,5%

2 (Гепакардин) 0 408 432 + 5,9%

3 (Карсил) 0 405 416 + 2,7 %

4 (контроль) 30 415 400 -3,6%

5 (интактные) 0 406,7 413,3 +1,8%

Таблица 3

Влияние применения препарата Гепакардин на изменение некоторых биохимических показателей сыворотки крови крыс на фоне трехкратной затравки ЧХУ (среднее по группам) в сравнении с препаратом Карсил__

"Показатель Группа^^ АЛТ, мкмоль/л ACT, мкмоль/л Креатинин ммоль/л Щелочная фосфатаза Ед/л Общий белок, г/л

1 1,45±0,08** 2,4±0,05** 56,65±2,66** 96,15+16,74** 68,4+2,63

2 1,2+0,09** 2,4+0,09** 59,8+ 0,75 99,4±0,71** 62,5±1,20

3 1,3*0,07** 2,3±0,08** 64,7± 3,44 100,34± 2,3 ** 64,0+2,15

4 4,15+2,04* 4,75±1,86* 68,5+6,56 64,7±8,51 * 54,4+6,52

5 1,23+0,12** 2,4±0,25** 63,3+6,40 128,1+24,85** 63,1±3,13

Примечания

*- значения достоверные в сравнении с пассивным контролем р<0.05 **- значения достоверные в сравнении с активным контролем р<0.05

У крыс из группы контроля в сыворотке крови (табл.3) было повышено содержание таких ферментов, как аланин- и аспартатаминотрасферазы (AJ1T и ACT) на 70,3% и 49,5% соответственно (по сравнению с контролем) увеличивающихся при разрушении клеток печени. Использование с профилактической и лечебной целью Гепакардина не вызывало достоверных изменений показателей AJIT и ACT по сравнению с интактными животными и группой крыс, получавших Карсил.

Снижение количества общего белка в сыворотке крови крыс группы контроля по сравнению с интактными (на 13,7%) характерно также для токсического поражения печени (Уиллард М., 2004). В сыворотке крови животных, получавших Гепакардин и Карсил, наблюдалось незначительное снижение (на 0,9%) и повышение количества общего белка (на 8,3%).

Результаты проведенного исследования могут свидетельствовать о высоких гепатопротекторных свойствах Гепакардина, которое обусловлено его мембра-ностабилизирующим и защитным действием на микросомальную ферментативную систему гепатоцитов, метаболизирующую ксенобиотики, а также антиок-сидантной активностью.

Изучение противотоксических свойств Гепакардина проводили на модели острого гепатита, вызванного интоксикацией этиловым спиртом.

Этанол в определенных дозах способен угнетать ЦНС, при этом его биотрансформация происходит в основном в гепатоцитах. Введение алкоголя усиливает свободно-радикальное окисление в печени, что также усугубляет ее алкогольное поражение (Флеминг М., 2006).

При проведении исследования было установлено, что крысы из контрольной группы и крысы, получавшие Карсил, входили в алкогольный сон (принимали боковое положение) быстрее, нежели получавшие Гепакардин.

Анализируя данные по длительности алкогольного сна (табл.4), следует отметить, что крысы подопытных групп находились в состоянии алкогольного сна достоверно меньше, чем животные контрольной группы во всех трех случаях интоксикации. Однако крысы, получавшие Гепакардин, были более активны

14

после выхода из бокового положения (лучше реагировали на внешние раздражители, более активно двигались), чем крысы, получавшие Карсил.

Таблица 4

Время нахождения крыс в состоянии алкогольного сна, среднее по гр. (сек)

группы № интоксшс^-^^ Контрольная группа Подопытная группа (Гепакардин) Подопытная группа (Карсил)

1-я интоксикация 3470 ± 193 2681±183** 2701 ±98**

2-я интоксикация 3065 ±132 2466 ±214** 2503 ±112**

3-я интоксикация 2765 ±215* 1757±158* ** 1896 + 278*

Примечания:

* Изменения, достоверные по отношению к первой интоксикации (Р< 0,05); ** Изменения, достоверные по отношению к соответствующим интоксикациям в контрольной группе (Р< 0,05).

Учитывая, что длительность алкогольного сна напрямую зависит от

функционального состояния печени (в отличие, например, от времени принятия бокового положения после введения этанола в острой дозе), можно говорить о выраженном детоксикационном эффекте препарата Гепакардин в связи с тем, что именно в печени метаболизируется 75- 95% всего поступившего в организм этанола (Шабанов П.Д., Калишевич С.Ю., 1998).

Биохимический анализ сыворотки крови через 24 ч после последней интоксикации показал, что у животных из контрольной группы показатели, характеризующие функцию печени, были выше, чем у крыс из подопытных групп (получавших Гепакардин и Карсил): АЛТ на 15,5 и 16,8 Ед/л, АСТ на 144,3 и 121,9 Ед/л, щелочная фосфатаза на 3,91 и 3,47 Ед/л соответственно. Биохимические показатели крыс из групп, подвергшихся интоксикации, достоверно отличались от интактных, что показательно для алкогольного поражения печени.

Полученные результаты свидетельствуют об эффективности применения препарата Гепакардин при остром гепатите, вызванном интоксикацией этанолом. Увеличение времени вхождения в алкогольный сон в группе крыс, получавших Гепакардин, по сравнению с контрольной, возможно, связано с нейропротек-торным и адаптогенным свойствами данного препарата (Бородкин Ю.С., 1986).

3.3. Токсикологическая характеристика препарата

Исследование по изучению острой токсичности препарата было выполнено на самцах 60 белых беспородных мышей: 6 групп по 10 голов. Препарат, предварительно растворенный в 1 % р-ре крахмала, вводили внутрь через желудочный зонд в объеме 0,5 мл в дозах: 100,500, 1000, 1500 и 2000 мг/ кг. Животным контрольной группы вводили 1% р-р крахмала (без препарата) в объеме 0,5 мл. Крысы находились под наблюдением 48 часов. В этот период оценивали общее состояние животных (внешний вид, состояние кожных покровов, наличие гиперсаливации, падеж), изменения в поведении, потребление корма и воды.

В указанный период все подопытные и контрольные животные имели нормальные поведенческие реакции, хороший аппетит, здоровый внешний вид. Гибели животных во всех группах в течение испытуемого периода отмечено не было. Вскрытие и визуальный осмотр внутренних органов (легкие, сердце, печень, почки, желудок) каких-либо патологических изменений не выявили. Осмотр слизистых оболочек пищевода, желудка и кишечника у всех крыс не выявил признаков раздражения.

Таким образом, по принятой классификации токсичности препаратов (Медведев Л.И., 1964г.), Гепакардин можно отнести к IV классу - малотоксичные препараты (1ЛЭ5о свыше 1000 мг/кг).

Изучение хронической токсичности препарата Гепакардин было выполнено на самцах 32 белых крыс (4 группы по 8 голов), которые получали Гепакардин в дозах: 500, 300 и 100 мг/кг; 4 группа - контрольная. Препарат скармливали в течение трех месяцев (90 дней) в смеси с кормом.

В течение всего опыта животные находились под наблюдением, при этом учитывали потребление ими корма и воды, поведение, состояние шерсти и слизистых оболочек. Взвешивание животных проводилось 1 раз в 15 дней.

По истечении периода исследования было произведено взятие крови для биохимических исследований, вскрытие, визуальный осмотр и морфологическая оценка состояния внутренних органов.

Согласно полученным данным, после 90 дней применения препарата Гепа-кардин в пределах физиологических норм находились все показатели: общее состояние, масса тела, показатели клинического и биохимического анализов крови (AJIT, ACT, щелочная фосфатаза, креатинин, общий белок, кальций, фосфор) и достоверно не отличались по отношению к контрольной группе. По результатам вскрытия и морфологического исследования органов, ежедневное пероральное применение Гепакардина крысам в дозах 500, 300 и 100 мг/кг в течение 90 дней не оказывает раздражающего действия на слизистую оболочку желудочно-кишечного тракта, а также не сопровождается развитием дистрофических изменений в паренхиматозных органах и системах организма.

Таким образом, пероральное применение препарата Гепакардин во всех изученных дозах в течение 90 дней не оказывает токсического влияния на сердце, печень, почки, углеводный и белковый виды обмена веществ организма белых крыс.

Изучение эмбриотоксического и тератогенного действия Гепакардина проводили на белых крысах. Самок после оплодотворения разделили на группы по 10 голов: 1 и 2 группы - контрольные; 3 и 4 группы - подопытные, с 1-го дня беременности и до окончания опыта получали препарат 1 раз в сутки в дозе 100 мг/кг.

Крысы 1 и 3 групп были вскрыты на 15 день беременности; крысы 2 и 4 групп родили естественным путем.

У животных 1 и 3 группы определяли количество живых и мертвых плодов, желтых тел в яичниках, мест имплантации в матке; у живых плодов, извлеченных из матки, оценивали общее состояние, наличие отечности, кровоизлияний и уродств. У животных 2 и 4 группы определяли количество живых и мертворожденных крысят, среднюю массу плода и длину туловища, наличие аномалий.

Проведенные исследования показали, что применение Гепакардина в течение первой половины беременности достоверно не влияло ни на количество желтых тел, ни на количество мест имплантации у крыс подопытной группы по

17

сравнению с контрольной. Сохранность потомства на 15 сутки беременности в контрольной и подопытной группах также достоверно не отличалась. Из самок контрольной и подопытной групп (1 и 3 группы) было извлечено и обследовано соответственно 91 и 96 живых плодов. Из них плоды с нормальным развитием составляли 92,3% и 95,8% в контрольной и подопытной группах соответственно. Анализ числа плодов с отклонениями в развитии не выявил достоверных отличий между контрольной и подопытной группами.

Применение Гепакардина достоверно не влияло на численность потомства у крыс. Количество живых и мертвых плодов у крыс из 2 и 4 групп достоверно не отличалось. Не выявлено достоверной разницы и в изучаемых биометрических показателях: средняя масса одного плода в контрольной и подопытной группах составляла 5,3 г и 5,1 г соответственно; средняя длина туловища новорожденных плодов так же не отличалась.

Таким образом, наши исследования, проведенные на разных сроках беременности крыс, показали, что препарат Гепакардин не обладает ни эмбриотоксиче-ским, ни тератогенным действием.

3.4. Клинические испытания препарата

После подтверждения высокой эффективности и безопасности препарата Гепакардин в ходе лабораторных исследований мы провели клинические испытаниям препарата в условиях производства.

Первая часть исследования была проведена на базе приюта для собак г. Санкт-Петербурга. Под наблюдением находилось 10 беспородных собак старше 10 лет. Собаки в течение всего периода исследования содержались в одинаковых условиях, получали сбалансированный сухой корм.

Перед началом исследования был проведен мониторинг общего состояния животных, а также клинический и биохимический анализы крови. При клиническом осмотре отмечалось удовлетворительное общее состояние животных, у некоторых - истеричность слизистых оболочек, жирная себорея и тусклость шерсти, признаки кардио- и гепатопатии (глухие сердечные тоны, шумы, арит-

мия, увеличение границ сердца при аускультации грудной полости; болезненность при пальпации и увеличение границ печени), а также нарушения работы опорно-двигательного аппарата (хромота, шаткость походки, болезненность при движении и пальпации суставов).

Первый анализ сыворотки крови, взятый у собак перед началом приема препарата, выявил у семи из десяти животных значительное повышение таких показателей, как AJIT, ACT, щелочная фосфатаза и общий билирубин (на 64,3%, 65,7%, 107,5% и 42,4% соответственно выше нормы). Это подтверждало наличие в организме интенсивных процессов цитолиза, в первую очередь в гепатоцитах, а также, возможно, нарушение функции кардиомиоцитов, о чем свидетельствовало увеличение активности ACT. Значительное увеличение уровня малонового диальдегида явилось показателем активно идущих процессов перекисного окисления липидов (ПОЛ) в организме и наличием метаболических нарушений в различных органах и тканях (Бурмистров С.О., 1997) . Соотношение Са:Р в сыворотке крови в среднем составляло 1: 1,25 ( при норме 1,5: 1), что говорило о нарушении минерального обмена.

Таким образом, у всех животных были зафиксированы наличие возрастных изменений, характерных для стареющего организма (кардио- и гепатопатии, заболевания опорно-двигательного аппарата), в т.ч. усиление процессов ПОЛ.

Гепакардин задавали внутрь 1 раз в сутки, в дозе 50 мг/кг в течение 30 дней.

После месячного курса применения препарата у собак было отмечено повышение активности, улучшение динамических функций (уменьшение или отсутствие хромоты), изменение цвета слизистых оболочек (до нормального, розового), отсутствие себореи, улучшение качества шерсти, нормализация сердечного ритма, отсутствие болезненности в области печени и уменьшение границ органа до нормальных размеров при пальпации, а также отсутствие болезненности в области суставов. Для повторного проведения комплекса биохимических исследований были взяты пробы крови у каждого животного.

В сыворотке крови собак, получавших Гепакардин, наблюдали восстановление до нормальных значений практически всех исследовавшихся биохими-

19

ческих показателей (AJIT, ACT, общий билирубин, щелочная фосфатаза, малоновый диальдегид), что говорило о снижении в организме интенсивности процессов перекисного окисления липидов, улучшении функционального состояния печени и сердечной мышцы. Соотношение Са:Р в крови составило 1,25 : 1, что может говорить о нормализации кальци-фосфорного обмена у животных.

В клиническом анализе крови животных отклонений не наблюдалось, что может говорить об отсутствии токсического действия препарата Гепакардин при длительном применении.

Таким образом, после 30 дней применения препарата Гепакардин был отмечен ряд положительных изменений в состоянии собак старше 10 лет: улучшения клинического состояния животных, восстановление до нормальных значений биохимических показателей крови, характеризующих функцию печени и сердца, уровень ПОЛ и минеральный обмен.

Следующий этап клинических испытаний препарата Гепакардин проводили на базе клиники Института Ветеринарной Биологии. При этом исследовали собак и кошек в основном старшей возрастной группы, с различными возрастными заболеваниями. Препарат Гепакардин назначали во время кормления в дозе 50 мг/кг, 2 раза в сутки, в течение 3-4 недель.

Таблица 7

Влияние препарата Гепакардин на общее состояние животных

Наиболее характерные клинические признаки на момент начала лечения Изменения клинических признаков через месяц применения препарата Гепакардин

Снижение активности, переносимости физических нагрузок; отсутствие желания гулять Повышение тонуса; уменьшение одышки и вялости после нагрузок; выход на прогулки с удовольствием

Периодическая рвота желчью Отсутствие рвоты

Себорея Отсутствие или значительное уменьшение себореи

Воспалительные процессы (отиты, дерматиты) Снижение местной воспалительной реакции

Хромота Значительное уменьшение либо отсутствие хромоты

Болезненность при движении суставов конечностей, пальпации вдоль позвоночного столба Отсутствие или значительное уменьшение боли

Учитывая данные анамнеза, клинического осмотра и рентгенологического исследовании на момент поступления в клинику, можно было сделать вывод, что у всех животных данной группы присутствовали признаки возрастных изменений опорно-двигательного аппарата (артроз, остеоартрит, остеохондроз, дегенеративные изменения позвоночного столба, деминерализация костной ткани). По биохимическому анализу крови, взятому на момент начала исследования, у большинства животных было выявлено повышение таких биохимических показателей, как АЛТ, ACT, общий билирубин, щелочная фосфатаза. Как видно из табл. 7, применение препарата Гепакардин в течение месяца в терапевтической дозе (50 мг/кг), способствовало улучшению общего состояния всех испытуемых животных. Также было отмечено восстановление до нормальных значений некоторых биохимических показателей крови (АЛТ, ACT, щелочная фосфатаза, общий билирубин).

Дополнительные клинические испытания Гепакардина на 81 собаке средней и старшей возрастных групп на базе питомника для собак «Арктик-Трэвел» г. Якутска, Московской и Фрунзенской РВС г. СПб. также показали положительное влияние препарата на организм животных. Было отмечено повышение активности и улучшение рабочих качеств животных, быстрое и полное восстановление до нормальных значений некоторых биохимических показателей (АЛТ, ACT, общий билирубин, креатинин, щелочная фосфатаза) по сравнению с собаками из контрольных групп.

Таким образом, при анализе полученных данных о применении препарата Гепакардин животным старшей возрастной группы можно говорить о его выраженном антиоксидантном, адаптогенном, а также хондро-, гепато - и карди-опротекторных свойствах, что позволяет его рекомендовать в качестве гериатрического средства.

Выводы

1. Разработана рецептура политропного препарата Гепакардин, сочетающего в себе компоненты растительного и животного происхождения.

2. Определена оптимальная лечебно-профилактическая доза препарата, которая составила 50 мг/ кг.

3. Установлено кардио- и гепатопротекторное действие Гепакардина.

4. Гепакардин не вызывает гибели и не оказывает токсического действия на организм лабораторных животных при однократном введении в дозе в 40 раз выше терапевтической, что позволяет отнести его к IV классу токсичности препаратов (малотоксичные).

5. Скармливание Гепакардина в течение 30 дней в рекомендованной терапевтической дозе (50 мг /кг), а также десятикратно превышенных дозах, не выявило токсического действия на основные жизненно важные системы организма (сердечно-сосудистую, дыхательную, выделительную), функции печени и показатели гомеостаза.

6. Гепакардин не оказывает эмбриотоксического и тератогенного действия на лабораторных животных.

7. Применение Гепакардина в дозе 50 мг/кг в течение месяца дает положительный эффект у животных старшей возрастной группы: повышает активность и работоспособность, улучшает состояние печени, сердца и опорно-двигательного аппарата, а также антиоксидантную защиту организма.

8. Установлена возможность использования комплексного препарата Гепакардин в качестве эффективного гериатрического средства в ветеринарии

Практические предложения

1. Комплексный препарат Гепакардин может быть рекомендован для применения в повседневной практике ветеринарного врача в качестве гериатрического средства при различных возрастных заболеваниях сердца (хроническая сердечная недостаточность на фоне инфаркта, фиброза миокарда, жировой инфильтрации и др.), печени (острый и хронический гепатиты различной этиологии, гепатоз, цирроз), опорно-двигательного аппарата (артроз, остеоартрит, остеохондроз, дегенеративные изменения позвоночного столба, деминерализация костной ткани), а также в качестве антиоксидантного и адаптогенного средства.

2. Разработаны методические рекомендации по применению «Гепакардина» в ветеринарии. Подготовлена и подана техническая документация для регистрации препарата в Департамент ветеринарии РФ.

3. Полученные результаты используются в учебном процессе на кафедре фармакологии и токсикологии Санкт-Петербургской государственной академии ветеринарной медицины.

Список опубликованных работ по теме диссертации

Статьи в зиурнале, рекомендованном ВАКМин.обр. и науки РФ:

1. Чуваев И.В. Изучение гепатопротекторных свойств препарата ЧИН 3607 на модели острого гепатита/ И.В.Чуваев, C.B. Глотова, Н.Л. Андреева// Ветеринарная практика - 2008.- № 3 (42) - С. 116 -121

2. Чуваев И.В. Изучение противотоксических свойств препарата ЧИН 3607 на модели острой алкогольной интоксикации / И.В. Чуваев, C.B. Глотова// Ветеринарная практика - 2009.- № 1 (44) - С. 57- 61

Статьи, опубликованные в сборниках материалов различных конференций:

3. Чуваев И.В. Необходимость изыскания гериатрических средств для плотоядных / И.В. Чуваев, В.Д. Соколов, C.B. Глотова// Материалы XIX Международной научно-практической конференции по фармакологии и токсикологии,- 2007.- С. 47

4. Чуваев И.В. Изучение противотоксических свойств препарата ЧИН3607 на модели острого гепатита/ И.В. Чуваев, C.B. Глотова, В.Д. Соколов // Материалы Первого международного конгресса ветеринарных фармакологов «Эффективные и безопасные лекарственные средства»,С-Пб. -2008,- С.105-106

5. Чуваев И.В.Оптимизация адреналиновой модели инфаркта миокарда на крысах / И.В. Чуваев, C.B. Глотова // Материалы Всероссийского съезда ветеринарных фармакологов и токсикологов «Эффективные и безопасные лекарственные средства в ветеринарии», С.-Пб - 2009 - С. 28 -31

6. Соколов В.Д. Сравнительный анализ обращений владельцев собак в клинику ООО «Институт Ветеринарной Биологии» за 1998 - 2008 гг./ В.Д. Соколов, И.В. Чуваев, С.В.Глотова // Материалы всероссийского съезда ветеринарных фармакологов и токсикологов «Эффективные и безопасные средства в ветеринарии» - 2009. - С. 88- 90

7. Глотова C.B. Изучение острой и хронической токсичности препарата ЧИН 3607 (Гепакардин)/ C.B. Глотова// Актуальные вопросы ветеринарной биологии - 2009. - № 2(2)- С. 15 -18

8. Чуваев И.В. Клинические испытания препарата Гепакардин на собаках старшей возрастной группы/ И.В. Чуваев, C.B. Глотова, H.JI. Андреева // Актуальные вопросы ветеринарной биологии - 2009,- № 4 (4) - С. 24 - 30

\ч

Подписано в печать 11.03.2010 г. Формат 60x84 1/16. Бумага офсетная. Печать офсетная. Усл. печ. л. 1,4. Тираж 100 экз. Заказ № 1544.

Отпечатано в ООО «Издательство "ЛЕМА"»

199004, Россия, Санкт-Петербург, В.О., Средний пр., д.24, тел./факс: 323-67-74 e-mail: izd_lema@mail.ru http://www.lemaprint.ru

Содержание диссертации, кандидата ветеринарных наук, Глотова, Светлана Вячеславовна

1. Введение.3 стр.

2. Обзор литературы

2.1. Проблема возраста у животных.7 стр.

2.2. Механизмы старения.9 стр.

2.3 Современные гериатрические препараты.17 стр.

3. Собственные исследования

3.1. Материалы и методы исследования.37 стр.

3.2 Разработка препарата Гепакардин. Определение ЕД50.43 стр.

3.3 Изучение безвредности Гепакардина

3.3.1. Определение острой токсичности.45 стр.

3.3.2. Определение хронической токсичности.47 стр.

33.3. Определение эмбриотоксичности и тератогенности55 стр.

3.4. Изучение гепатопротекторных свойств Гепакардина.58 стр.

3.5.Изучение противотоксических свойств Гепакардина.66 стр.

3.6.Моделирование острой кардиомиопатии на крысах.72 стр.

3.7. Изучение кардиопротекторных свойств Гепакардина.78 стр.

3.8. Клинические испытания.89 стр.

Введение Диссертация по сельскому хозяйству, на тему "Фармако-токсикологические свойства гепакардина и его применение в гериатрии"

t

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

АКТУАЛЬНОСТЬ ТЕМЫ

Сегодня на ранней стадии развития находится новая ветеринарная дисциплина — гериатрия.

Продолжительное использование животных на фермах служит одним из главные показателей высокой, культуры, ведения^ хозяйства. При широко проводимой в настоящее время интенсификации животноводства продление срока использования животных - необходимое условие для дальнейшего экономически эффективного развития данной отрасли [21, 92].

Аналогичная, тенденция прослеживается и среди домашних плотоядных животных.

Отмечено [151, 153], что в последние годы за ветеринарной помощью стали чаще обращаться владельцы с пациентами средней и старшей возрастных групп^ Это связано с увеличением, средней продолжительности жизни и повышением абсолютной численности животных старшей возрастной группы.

Соответственно, практикующим ветеринарным специалистам все чаще и чаще приходится сталкиваться с заболеваниями, характерными для стареющих животных [96^ 119].

Как показывает анализ работы клинических подразделений, инфекционные заболевания отступили на второй план и большей частью приходится сталкиваться с заболеваниями неинфекционной этиологии [49].

В- настоящее время- [120, L83] наиболее-, часто встречаются!, болезни, связанные с нарушениями обмена веществ (мочекаменная болезнь, артриты, артрозы, остеохондрозы и пр.), иммунной системы (онкология, аутоиммунные заболевания, аллергические проявления и т.д.), и поражением печени (гепатит, цирроз и пр.).

Доказано, что у животных с возрастом наблюдается усиление интенсивности процессов перекисного окисления липидов, снижается антиоксидантная защита организма^ [11, 80]. Это является важным этиологическим фактором возникновения ряда хронических болезней, а также приводит к появлению новообразований у старых животных и в целом к появлению большинства признаков старения [8, 145, 163].

На сегодняшний день для лечения заболеваний, возникающих с возрастом используется широкий спектр монопрепаратов (кардио-, гепато хондропротекторы, антиоксиданты и др.). Это в значительной степени отражается на стоимости И- трудоемкости применения препаратов животным, т.к., как правило, используется не один, а несколько препаратов одновременно.

Данные факты свидетельствуют об актуальности и необходимости поиска комплексных лекарственных средств для увеличения продолжительности и улучшения качества жизни животных средней и старшей возрастных групп.

Все это и послужило обоснованием к разработке гериатрического направления-в ветеринарной фармакологии.

ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЙ.

Основная цель исследований заключалась в разработке эффективного политропного гериатрического средства, обладающего кардио-, гепато-, хондропротекторными, антиоксидантными свойствами и способного улучшать качество жизни старых животных. В овязи с этим были поставлены следующие задачи:

- разработать рецептуру препарата;

- определить, оптимальную лечебно-профилактическую дозу препарата для собак;

- определить в лабораторных условиях безвредность (токсичность) препарата;

- изучить гепатопротекторное, противотоксичное и кардиопротекторное свойства препарата на лабораторных животных;

- испытать препарат на животных старшей возрастной группы.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА

Изучены фармако-токсикологические свойства нового гериатрического препарата Гепакардин для плотоядных, установлена его лечебная эффективность и безвредность для организма лабораторных и плотоядных животных, что дает основание для применения данного средства в ветеринарии.

ПРАКТИЧЕСКАЯ ЦЕННОСТЬ РАБОТЫ

Установлена лечебная эффективность Гепакардина и отработана схема применения препарата старым собакам, страдающим возрастными заболеваниями.

Разработаны методические рекомендации по применению Гепакардина в качестве гериатрического средства в ветеринарии.

Данные о гериатрических свойствах Гепакардина могут быть использованы в учебном процессе.

АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ.

Основные материалы диссертации доложены и обсуждены на XIX Международной научно-практической конференции фармакологов и токсикологии (Санкт-Петербург, 2007), I международном конгрессе ветеринарных фармакологов "Эффективные и безопасные лекарственные средства" (Санкт-Петербург, 2008), Всероссийском съезде ветеринарных фармакологов и токсикологов «Эффективные и безопасные лекарственные средства в ветеринарии» (Санкт-Петербург, 2009).

ПУБЛИКАЦИЯ НАУЧНЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

По теме диссертации опубликовано 8 научных работ. Две из работ опубликованы в журнале, рекомендованном ВАК Министерства образования и науки РФ - «Ветеринарная практика», № 3 (42), 2008 г, с.116 и № 1 (44), 2009 г., с^57.

СТРУКТУРА И ОБЪЕМ ДИССЕРТАЦИИ

Диссертация изложена на 140 страницах компьютерного текста, иллюстрирована 30 рисунками и 22 таблицами. Список использованной литературы включает 183 наименования, втом числе 57 -иностранных авторов. I

ОСНОВНЫЕ ПОЛОЖЕНИЯ, ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ:

1. Разработка рецептуры Гепакардина и определение его средней терапевтической дозы.

2. Определение токсичности препарата Гепакардин на лабораторных животных".

3. Изучение противотоксических и гепатопротекторных свойств препарата.

4. Изучение кардиопротекторных свойств препарата Гепакардин.

5. Эффективность применения препарата Гепакардин в качестве гериатрического средства для собак старше 10 лет.

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение Диссертация по теме "Звероводство и охотоведение", Глотова, Светлана Вячеславовна

5. ВЫВОДЫ

1. Разработана рецептура политропного препарата Гепакардин, сочетающего в себе компоненты растительного и животного происхождения.

2. Определена оптимальная лечебно-профилактическая доза препарата, которая составила 50 мг/ кг.

3. Установлено кардио- и гепатопротекторное действие Гепакардина.

4. Гепакардин не вызывает гибели и не оказывает токсического действия на организм лабораторных животных при однократном введении в дозе в 40 раз выше терапевтической, что позволяет отнести его к IV классу токсичности препаратов (малотоксичные).

5. Скармливание Гепакардина в течение 30 дней в рекомендованной терапевтической дозе (50 мг /кг), а также десятикратно превышенных дозах, не выявило токсического действия на основные жизненно важные системы организма (сердечно - сосудистую, дыхательную, выделительную), функции печени и показатели гомеостаза.

6. Гепакардин не оказывает эмбриотоксического и тератогенного действия на лабораторных животных.

7. Применение Гепакардина в дозе 50 мг/кг в течение месяца дает положительный эффект у животных старшей возрастной группы: повышает активность и работоспособность, улучшает состояние печени, сердца и опорно-двигательного аппарата, а также антиоксидантную защиту организма.

8. Установлена возможность использования комплексного препарата Гепакардин в качестве эффективного гериатрического средства в ветеринарии

6. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. Комплексный препарат Гепакардин может быть рекомендован для применения в повседневной практике ветеринарного врача в качестве гериатрического средства при различных возрастных изменениях: болезнях сердца (хроническая сердечная недостаточность на фоне инфаркта, фиброза миокарда, жировой инфильтрации и др.), печени (острый и хронический гепатиты различной этиологии, гепатоз, цирроз), опорно-двигательного аппарата (артроз, остеоартрит, остеохондроз, дегенеративные изменения позвоночного столба, деменирализация костной ткани), а также в качестве эффективного антиоксидантного и адаптогенного средства.

2. Разработаны методические рекомендации по применению «Гепакардина» в ветеринарии. Подготовлена и подана необходимая документация для регистрации препарата в Департамент ветеринарии РФ.

3. Полученные результаты используются в учебном процессе на кафедре фармакологии и токсикологии Санкт-Петербургской Государственной академии ветеринарной медицины.

Библиография Диссертация по сельскому хозяйству, кандидата ветеринарных наук, Глотова, Светлана Вячеславовна, Санкт-Петербург

1. Абрамова Ж.И. Человек и противоокислительные вещества / Ж.И. Абрамова, Г.И. Оксенгендлер JL: «Наука», 1985 - С. 196.

2. Авакаянц Б. М. Лекарственные растения в ветеринарии / Б.М. Авакаянц -М.: «Аквариум», 2001. С. 220.

3. Аксенов В.М. Руководство по геронтологии и гериатрии. Т. 4. Клиническая гериатрия / В.М. Аксенов, В.Н. Ярыгин, А.С. Мелентьев

4. М.: ГЭОТАР-МЕД, 2003 С. 342

5. Алексеев B.C. БАДы. Полный справочник / B.C. Алексеев, Ю.М. Гаврисяк,

6. A.С. Глазыкина, Е.В. Головчанская и др. М.: «Эксмо», 2007 - С.720.

7. Алексеева Л.И. Структум (хондроитинсульфат) новое средство для лечения остеоартроза / Л.И. Алексеева, Л.И. Беневоленская, Е.Л. Насонов //Терапевтический архив. - 1995.- №5-С.19-20.

8. Альперович В.Д. Старость / В.Д. Альперович М., 1998. - С. 26.

9. Амвросьев А.П. Нейрогуморальная регуляция и двигательная активность при старении / А.П. Амвросьев, А.П. Кирилюк, Л.М. Лобанок, А.А. Милютин, В.А. Сюсюкин Минск: «Наука и техника» - 1984. - С. 156

10. Анисимов В.Н. Молекулярные и физиологические механизмы старения/

11. B.Н. Анисимов С.-Пб.: «Наука», 2003. - С. 224

12. Астрханцева Л.З. Гериатрическая фармакология/ Л.З. Астраханцева Л.: «Медицина», 1971 - С. 260.

13. Батрак Г.Е. Дозирование лекарственных средств экспериментальным животным / Г.Е. Батрак, А.Н. Кудрин М.: «Медицина», 1979 - С. 140

14. Бахта А.А. Биохимические характеристики антиоксидантной защиты организма собак: Автореф. дис. канд. вет.наук. С.-Пб, 2008 - С. 19

15. Бахта А.А. Возрастные особенности антиоксидантного статуса организма собак / А.А. Бахта // Ученые записки Казанской государственной академииветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана, Т. 185. Казань, 2006 - С. 1317.

16. Беленький M.JI. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта /МЛ. Беленький Д.: « Медицина», 1963. - С. 183.

17. Белобородова Э.И. Эффективность растительных гепатопротекторов при хронических гепатитах / Э.И. Белобородова, А.А. Шаловай, P.O. Гайсаев -Томск, 2003. С. 280.

18. Белявский В.Н. Адаптогенные эффекты антиоксидантов и их применение в свиноводстве и птицеводстве: Автореф. дис. канд. вет. наук Одесса, 1991- С.15

19. Бородкин Ю.С. Этимизол оригинальное средство повышения адаптивных возможностей организма / Ю.С. Бородкин, Ю.В. Зайцев, С.С. Лосев, С.И. Богословская// Фармакологическая регуляция состояний дезадаптации - М.: «Медицина», 1986 - С. 44-53

20. Бочков В.Н. Клиническая биохимия / В.Н. Бочков, А.Б. Добровольский, Н.Е. Кушлинский, В.А. Логинов, Е.П. Панченко, Е.И. Ратнер, М.Г. Творогова, В.Н. Титов, В.А. Ткачук М., 2004. - С. 363- 368.

21. Брытов А.В. Изучение фармако-токсикологических свойств хофитола / А.В. Брытов, автореф. дис. на соиск. канд. вет.н. С.-Пб, 2007 .

22. Бурлакова Е.Б. Роль природных антиоксидантов в регуляторных процессах / Е.Б. Бурлакова // Биоантиоксиданты в лучевом поражении и злокачественном росте М., 1975 - С. 172- 198

23. Бурмистров С.О. Перикисное окисление липидов, белков и активность антиоксидантной системы сыворотки крови новорожденных и взрослых / С.О. Бурмистров и соавт.// Акушерство и гинекология 1997 - N 6. - С. 36-39

24. Бычков А.И. Характеристика возрастных изменений содержания общих липидов и холестерина в плазме крови у интактных животных до и после введение витамина Е/ А.И. Бычков// Успехи современного естествознания 2004 - № 10-С. 36-37

25. Вайс Р.Ф. Фитотерапия: Рук. / Р.Ф. Вайс, Ф. Финтельманн: Пер. с нем. -М.: «Медицина», 2004. С. 356 - 358

26. Визир В.А. Клинические аспекты применения милдроната в кардиологии / В.А. Визир // ВКИ. Материалы III Международного симпозиума «Церебро-кардиальная патология: новое в диагностике и лечении» Судак, 2001 - С. 21-28.

27. Виленчик М.М. Биологические основы старения и долголетия / М.М. Виленчик М.: «Знание», 1987 - С. 147 - 150.

28. Виленчик М.М. Молекулярные механизмы старения / М.М. Виленчик -М., 1970-С. 67.

29. Владимиров Ю.А. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах / Ю.А. Владимиров, А.И. Арчаков М.: Наука, 1972 - С. 212 -217.

30. Войтенко В.П. Молекулярные механизмы старения и эволюция продолжительности жизни: проблема системного анализа / В.П. Войтенко // Всесоюз. симп. Молекулярные и клеточные механизмы старения: тез. докл. Киев, 1987 - С. 37-38.

31. Войтенко В.П. Надежность биосистем и балансовая теория старения/ В.П. Войтенко//Надежность биологических систем, Киев, 1985 - С. 139-148.

32. Войтенко В.П. Системные механизмы развития и старения/ В.П. Войтенко, A.M. Полюхов Л.: «Наука», 1986 - С.98 - 101.

33. Воскресенский О.Н. Биоантиоксиданты и свободнорадикальная патология / О.Н. Воскресенский Полтава, 1987 - С. 5-11

34. Воскресенский О.Н. Методы диагностики метаболических нарушений при атеросклерозе и дифференцирование примененияпротивоатеросклеротических средств / О.Н. Воскресенский Полтава, 1982 - С. 28.

35. Воскресенский О.Н. О связях адаптогенного и антиоксидантного действия /О.Н. Воскресенский // Адаптация и адаптогены Владивосток, 1977 - С. 91-96.

36. Воскресенский О.Н. Эмоциональный стресс и физиологическая антиоксидантная система/ Воскресенский О.Н., Бобырев В.Н., Катрушов

37. A.В. и др. // Адаптация человека к экстремальным условиям окружающей среды Одесса, 1980 - С. 70-71.

38. Гаммерман А.Ф. Дикорастущие лекарственные растения СССР / А.Ф. Гаммерман, И.И. Гром М.: «Медицина», 1976 - С. 272.

39. Гацура В.В. Кардиопротективное действие препаратов биотехнологического цитохрома С при острой ишемии миокарда/ Гацура

40. B.В., Серов А.Н., Давыдов Е.П.// Бюлл. эксперим. биологии и медицины -1998 № 61 (12) - С.22-29.

41. Георгиевский В.П. Биологически активные вещества лекарственных растений / Георгиевский В.П., Комиссаренко Н.Ф., Дмитрук С.Е. -Новосибирск, 1990 С. 243.

42. Гогин Е.Е. Острый коронарный синдром: этапы диагностики, определяющие тактику оказания помощи / Е.Е. Гогин // Терапевтическийархив 2001.- №4- С.5-11 .

43. Голотин В.Г. Влияние экстрактов женьшеня и элеутерококка на продолжительность жизни белых крыс / Голотин В.Г., Брехман И.И., Добрякова А.И., Ли С.Е. // Лекарственные средства Дальнего Востока, 1972 г. №11 - С.37- 41.

44. Гоффман Б. Катехоламины и средства, влияющие на адренэргическую передачу/ Гоффман Б. Клиническая фармакология по Гудману и Гилману. Книга 1. М., 2006. - С. 185.

45. Грибель Н.В. Особенности противоопухолевого действия ряда комплексных препаратов природного происхождения: Автореф. дис. на соис. степени кан. биол. наук. Томск, 1987.

46. Гриффит В. Витамины, травы, минералы и пищевые.добавки / Гриффит В. Справочник - М.: «ФАИР - ПРЕСС», 2000. - С. 88.

47. Давчев П. Терапевтическая эффективность и переносимость препарата легалон/ П. Давчев, Б. Вановски, Д. Стоянова // Клиническое значение препарата Легалон: материалы симп. М., 1981. - С. 76 - 82.

48. Данилевская Н.В. Хондропротекторы и использование их в ветеринарии / Данилевская Н.В., Николаев А.А. // Ветеринар.- 2002 №3 - С. 20 .

49. Дардымов И. В. Женьшень, элеутерококк ( к механизму биологического действия)/И.В. Дардымов М.: Наука, 1976 - С. 114.

50. Дардымов И.В. Женьшень / Дардымов И.В., Гутникова З.П. -Владивосток, 1970 С. 256.

51. Дейвис Майк. Гериатрия собак и кошек / Дейвис Майк М., 2002 - С.26

52. Денисова Т.П. Клиническая геронтология: Избранные лекции/ Денисова Т.П., Малинова Л.И. М., 2008. - С.8-9.

53. Доркина Е.Г. Изучение гепатозащитного действия природных флавоноидных соединений /Доркина Е.Г. // Экспериментальная и клиническая фармакология Москва, 2004. - № 6 - С. 41.

54. Дупленко Ю.К. Старение: очерки развития проблемы / Дупленко Ю.К. -Д.: «Наука», 1985 С. 187

55. Дюмаев К.М. Антиоксиданты в профилактике и терапии патологий ЦНС / Дюмаев К.М., Воронина Т.А., Смирнов Л.Д. М.: «Изд-во Ин-та биомед. Химии РАМН», 1995 - С. 272

56. Ершов Ю.А. Механизмы токсического действия неорганических соединений / Ершов Ю.А., Плетнева Т.В. М.: Медицина, 1989. - 272 с.

57. Журавлев А.И: Биоантиокислители / Журавлев А.И.// Сб. научных трудов Моск. вет. академии 1975. - Т.80 - С. 3-13.

58. Журавлева Т.П. Основы гериатрии: учебное пособие / Журавлева Т.П. -М., 2007. С. 288.

59. Жутаев И.А. Антиоксидантная система, онтогенез и старение / И.А. Жутаев, Воскресенский О.Н., В.Н. Бобырев и др. // Вопросы медицинскойхимии-1982 Т.28- №1.- С. 14-27.

60. Зорикова П.С. Антистрессорная активность растительных экстрактов /i

61. Зорикова, П.С., Мартынова Н.И.// Акт. проблемы фармакологии и поиска новых лекарственных препаратов 1986.- Т.2. - С. 40-41.1. С/ W

62. Йорданов Д. Фитотерапия. Лечение лекарственными травами / Йорданов Д., Николов П., Бойчанов А. София, 1976 - С. 263.

63. Калинин А.В. Пути совершенствования системы обеспечения лечебных учреждений травматолого-ортопедического профиля консервированными биоимплантатами: Автореф. дис. на соиск. докт. мед. наук С. - Пб, 2003 -С. 24

64. Камышников B.C. Справочник по клиник -биохимическим исследованиям и лабораторной диагностике. Часть II. Методы клинической химии и интерпретация получаемых с их использованием результатов / Камышников В:С. М., 2004 - С. 337.

65. Камышников B.C., Клинико-биохимическая лабораторная диагностика,Т. 1 / Камышников B.C. Минск, 2003. - С.230.

66. Канунго М. Биохимия старения/ Канунго М. М.: «Мир»,1982 - С. 296

67. Кигель Г.Б. Показатели биологической нормы для лабораторных животных/ Кигель Г.Б., Харабаджхъян А.В.- Ростов -на-Дону: Медицина, 1978- С.95.

68. Киреев И.В. Фармако-токсикологические свойства экстраселена и его применение в ветеринарии / И.В. Киреев .Автореферат дисс. на соиск. уч.ст. к.б.н. Краснодар, 2009.

69. Кириллов О.И. Опыт фармакологической регуляции стресса/ Кириллов О.И. Владивосток, 1965 - С. 126.

70. Козловская М.М. Экспериментальное изучение стресс протективных свойств лекарственного растения / Козловская М.М., Авдулов Н.А., Пак Е.М., Журавлев Б.В. // Новые лекарств, препараты из растений Сибири и Дальнего Востока - Томск, 1986 - С. 80.

71. Конопля Е.Ф. Гормоны и старение: Стероидные гормоны и геном клетки/ Конопля Е.Ф., Лукша Г.Л. Мн., 1987 - С.58.

72. Корякина Я. Роль микроэлементов в организме сельскохозяйственных животных / Корякина Я., Данилова П.// «Ветеринария сельскохозяйственных животных» № 2 - 2009 - С.57.

73. Крутько В.Н. Математические основания геронтологии / Крутько В.Н., Славин М.Б., Смирнова Т.М. М., «УРСС», 2002. - С. 274.

74. Куценко С А. Основы токсикологии / Куценко С. А. С.-Пб., 2004. - 715с.

75. Линдербратен В.Д. Влияние препаратов женьшеня и элеутерококка на термоустойчивость белых мышей/ Линдербратен В.Д.// Симпозиум по элеутерококку и женьшеню и др. лекарственных растений Дальнего Востока Владивосток, 1962 - С.22-23.

76. Лужников Е.А. Детоксикационная терапия : Рук. для врачей / Лужников Е.А., Гольдфарб Ю.С., Мусселиус С.Г. СПб.: Лань, 2000. - С.191.

77. Лукьянова Л.Д. Кислородзависимые процессы в клетке и ее функциональное состояние / Лукьянова Л.Д. и соавт. М., 1982 - С.301.

78. Лэмб М. Биология старения / Лэмб М. М.: «Мир», 1980 - С.208.

79. Машковский М.Д. Лекарственные средства. 15- издание / Машковский М.Д. М., 2005. - С. 567.

80. Меерсон Ф.З. Адаптация, стресс и профилактика /Меерсон Ф.З. М.: Наука, 1981-С. 278.

81. Меерсон Ф.З. Патогенез и предупреждение стрессорных и ишемических повреждений сердца / Меерсон Ф.З. М.: Медицина, 1984 - С.72.

82. Меерсон Ф.З. Патогенез и предупреждение стрессорных и ишемических повреждений сердца / Меерсон Ф.З. М.: Медицина, 1984. - С.69.

83. Мельниченко В.И. Антиоксиданты в ветеринарии: новые возможности/ Мельниченко В.И. // Ветеринарная клиника 2006 - № 7 - С.2.

84. Минушкин О.Н. Некоторые гепатопротекторы в лечении заболеваний печени / Минушкин О.Н. М., 2004 - С. 131.

85. Михайлов К.В. Причина и механизм старения организмов/ К.В. Михайлов// Клиническая геронтология 2004 - Т. 10 - № 9 - С. 98

86. Мищенко В.П. Использование антиоксидантов в профилактике и терапии возрастной патологии / О.Н. Воскресенский, В.П. Мищенко, Н.П. Скакун и др. Методич. Рекомендации Полтава, 1987 - С. 15.

87. Москалев А.А. Старение и гены / Москалев А.А. С- Пб.: Наука, 2008 -С. 213.

88. Никитченко И.Н. Адаптация, стресс и продуктивность сельскохозяйственных животных / Никитченко И.Н., Плященко С.И., Зеньков А.С. Минск: Ураджай, 1988 - С. 135.

89. Орлов В.Н. Руководство по электрокардиографии / Орлов В.Н М., 1983 -С. 167.

90. Племяшов К.В. Применение препарата «Страйд плюс» при лечении остоартрита у собак./ Племяшов К.В., Нечаев А.Ю. // Ветеринарная клиника № 12 - 2005 - С. 25.

91. Плецитый К.Д. Экспериментальное изучение иммунокорректирующих свойств а- токоферола при стрессе / Плецитый К.Д., Давыдова Т.В., Фомина В.Г. // Патологическая физиология и экспериментальная терапия 1988 - №1 - С. 38-41.

92. Пшенникова М.Г. Адаптация к стрессорным и физическим нагрузкам / Пшенникова М.Г., Ф.З. Меерсон М.: Медицина, 1988 - С. 56.

93. Ратькин А.В. Коррекция гепатотоксичности циклофосфана оригинальными гепатопротекторами: Автореф. дис. канд. фарм. наук.- Пятигорск, 2003 -С.15

94. Саакян К.Р. Чага (черный березовый гриб). Аналитический обзор / К.Р. Саакян, К.Ф. Ващенко, Р.Э. Дармограй// Провизор- 2004. № 16 - С.56

95. Сапрыгин Д.Б. Современная диагностика и оценка острого коронарного синдрома: значение определения тропонинов /Д.Б. Сапрыгин // Лечащий врач. — 2005. — № 4. С. 54—56.

96. Сивольский А.В.Продолжительность хозяйственного использования коров и эффективность селекции по этому признаку: Автореф. дис. канд. вет. наук. Рязанская ГСХА, 2002. - С. 5

97. Смоляров В.И.Рациональное питание/ В.И.Смоляров Киев,1991.-С. 156

98. Созинов В.А. Современные лекарственные средства для лечения собак и кошек/ В.А. Созинов, С.А. Ермолина М.: «Аквариум», 2004. - С. 231

99. Соколов В.Д. Фармакологическая коррекция стресса / В.Д. Соколов, Н.Л. Андреева//Ветеринария 1989. - №5- С. 61-64

100. Соколов В.Д. Гериатрическое направление в ветеринарной фармакологии/ В.Д. Соколов, И.В. Чуваев // Материалы первого международного конгресса ветеринарных фармакологов и токсикологов «Эффективные и безопасные лекарственные средства» 2008.- С. 58

101. Соколов С .Я. Фитотерапия и фитофармакология: руководство для врачей /С.Я. Соколов М., 2000. - С. 543

102. Тарусов Б.Н. Основы биологического действия радиоактивных излучений /Б.Н. Тарусов М.: Медгиз, 1954. - С. 100

103. Ткалич JI.B. Фармакологические данные о новом препарате Силибане: Автореф. дис. канд.вет.наук. - Л., 1980. - С. 13

104. Трифонов И.Р. Биохимические маркеры некроза миокарда. Часть 1: Общая характеристика биомаркеров. Их применение для диагностики инфаркта миокарда: обзор современных рекомендаций / И.Р. Трифонов // Кардиология 2001. - №11- С. 93-95

105. Туманов В.А. Ангиопротекторы/ В.А. Туманов, О.Н. Воскресенский -Киев: «Здоровье», 1982 С.54 - 59.

106. Тутельян В.А. Селен в организме человека: метаболизм, антиоксидантные свойтсва, роль в канцерогенезе/ В.А. Тутельян, В.А. Княжев, С.А. Хотимченко, Н.А. Голубкина, Н.Е. Кушлинский, Я.А. Соколов М.: Издательство РАМН, 2002.- С.92

107. Уиллард М. Лабораторная диагностика в клинике мелких домашних животных / М. Уиллард, Г. Тведтен, Г. Торнвальд М.- 2004 - С. 254

108. Устинов Д.А. Стресс- факторы в промышленном животноводстве / Д.А. Устинов М.: Россельхозиздат, 1976. - С. 95

109. Устинова Е.Е. Предупреждение стрессорного повреждения сердца и его гипоксической контрактуры с помощью естественного антиоксиданта а-токоферола /Устинова Е.Е., Меерсон Ф.З. // Кардиология. 1982 - Т.22 №7 - С. 89 -94.

110. Флеминг М. Этанол /М. Флеминг, Дж. Михич, Э. Харрис Клиническая фармакология по Гудману и Гилману. Книга 1. - М., 2006. - С. 342

111. Фролькис В.В. Клиническая геронтология /В.В. Фролькис М., 2003. - Т.9 - №3 - С.69

112. Фролькис В.В. Природа старения / В.В. Фролькис М.: «Наука», 1969 - С. 11-180

113. Фролькис В.В. Старение и биологические возможности организма / В.В. Фролькис М.: «Наука», 1975 - С. 58i

114. Харкевич Д.А. Фармакология: учебник для вузов: для студентов, медицинских вузов / Д.А. Харкевич. Изд. 10-е - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2009. - С. 343

115. Хлопицкий В.П. Применение би<элогически активных препаратов для нормализации воспроизводительной функции у высокопродуктивных молочных коров /В.П. Хлопицкий // Практик 2009. - № 1 - С.43

116. Хрисанфова Е.Н. Основы геронтологии: (Антропол. аспекты): Учеб. для студентов вузов / Е.Н. Хрисанфова. М.: ВЛАДОС, 1999. - С. 84 - 90

117. ПЗ.Целуйко В.И. Уровень тропонина I и клиническое течение инфаркта миокарда / В.И. Целуйко, Е.Г. Почепцова, С.М. Карлов // Экспериментальная и клиническая медицина 2003 - № 3-4 - С. 67 - 71

118. Чеботарев Д.Ф. Геронтология и гериатрия / Д.Ф. Чеботарев М., 1984. - С. 32

119. Чеботарев Д.Ф.Физиологические механизмы старения /Д.Ф. Чеботарев, В.В. Фролькис Л.: «Наука», 1982. - С.

120. Чекман И.С. Кардиопротекторы клинико - фармакологические аспекты/ И.С. Чекман, И.А. Горчакова, С.Б. Французова, В.О. Минцер// Укра1нский медичний часопис - 2003. - №6 (38) - С. 18 -22

121. Черноярова Н.Н. О влиянии женьшеня^ на уровень сахара в крови у здоровых и больных сахарным диабетом /Н.Н. Черноярова, О.М. налетова // Матер, к изучению женьшеня и лимонника Л., 1958. -Вып. 2 - С.166

122. Чечеткин А.В. Биохимия животных /А.В. Чечеткин, И.Д. Головацкий, П.А. Калиман, В.И. Воронянский М.: «Высшая школа», 1982. - С. 232

123. Чуваев И.В. Возможность использования Артрогликана какгеронтологического препарата /И.В. Чуваев, С.В. Ипатьева //Новыеветеринарные препараты и кормовые добавки (экспресс-информация) С.-Пб. - 2006. - С.32

124. Шабалин В.Н. Руководство по геронтологии / Шабалин В.Н. М., 2005 -С. 359-415.

125. Шабанов П.Д. Биология алкоголизма / П.Д. Шабанов, С.Ю. Калишевич -С.-Пб. 1998. - С. 95-123

126. Шарый Н.И. Иммунитет и старение: сборник / Н.И. Шарый М., 1986 - С. 20-23

127. Шишкин А.Н. Гериатрия: учебное пособие для студ./ А.Н. Шишкин, Н.Н. Петрова, JI.A. Слепых М.: «Академия», 2008. - С. 13

128. Яременко-К.В. Адаптогены как средства профилактической медицины/ К.В. Яременко Томск, 1990. - С. 43

129. Ярыгин В.Н. Руководство по геронтологии и гериатрии. Том 3. Клиническая гериатрия / В.Н. Ярыгин, А.С. Мелентьев М.: «ГЭОТАР -Медиа», 2007 - С. 534

130. Arthur J.R. Roles of selenium in type I iodithyronine 5'-deiodinase and in thyroid hormone and iodine metabolism / J.R. Arthur , G.J. Beckett // Selenium in biology and human health Ed. R.F. Burk. N.Y.: Springer - Verlag, 1994. P.93-115

131. Biourge V. Аспекты рационального кормления стареющих кошек / V. Biourge, D. Elliot// Veterinaty focus 2009 - № 19 (3) - P. 32 -37

132. Boyington J.C. Crystal structure of formate dehydrogenase H: Catalysis involving Mo, molybdopterin, selenocysteine and an Fe4S4 cluster /J.C. Boyington, V.N. Gladychev, S.V. Khandulov et al. // Science 1997- Vol.275 -P.1305 - 1308

133. Cantor A. Effects of selenium and vitamin E on nutritional muscular dystrophy in turkey poults/A. Cantor, P. Moorhead // Ohyo Agr. Res. And Development. Center- 1977- Vol. 229-P. 25-27.

134. Center S.A. Balanced therapy for chronic liver disease / S.A. Center// Waltham Focus 2000. - №10 - P.20-31

135. Comfort AvThe biology of Senscense /A. Comfort-N-Y- 1956-P. 36

136. Cui Y, Antioxidant effects of Inonotus obliquus/ Y. Cui, D.S. Kim; K.C. Park // J. Ethnopharmacol 2005 - № 96(1-2) - P.79-85

137. Cupp C.J.The role of nutritional:interventions in the longitive and maintenance of long-term health inaging cats/C.J: Ciipp,^^ W.W. Kerr, C. Jean Philippe, et al. // Intern J. Appl. Res. Vet. Med. - 2008 - № 6 - P. 69 -81

138. Desplaces A. The effects of Silymarin on experimental phalloidine poisoing / A. Desplaces, J. Choppin, G. Vogel, W. Trost// Arznei, mittel Forsch, 1975 -Jg.25'-№ 1 - P. 89-96

139. Duke J.A. CRC handbook of medical herbs. Boca Raton (Fla.) / Duke J.A.: CRC Press,1986 -P.670 , V .

140. Flemming K. Die therapetishe Wirking von Silymarin bei rontgenbestrahlten Mausen/- Hemming KM Arznei mittel Forsch, 1971- Jg. 21- № 8 - P: 1206

141. Franchini A.The influence of high doses of vitamin E on immune response of chicks to inactivated oil adjuvant vaccine / Franchini A., Bertuzzi S., Meluzzi A. // Clin. Veter. 1986. - Vol. 109, № 1 - P. 117-127

142. Free radicals, lipid peroxidation and cancer7 Eds. D.C.H. McBrien et al; L.: Acad. Press, 1982-P. 56

143. Gladyshev V.N. Selenocysteine containing proteins in mammals / Gladyshev V.N., Hatfield D:L: // J. Biomed. Sci. 1999 - Vol. 6, N.3- P. 151

144. Hoekstra W.Gi Biochemical function of selenium and its relation to vitamin Е / Hoekstra W.G. //Fed.Proc. 1975 Vol.34 - P. 2083 - 2089

145. Holland J.J. Defective interfering RNA viruses and the host cell response / Holland J.J., Kennedy S.I.T., Semler B.L. et al. // Comprehensive Virology, N.-Y.-1980 -Vol. 1-P. 137-192

146. Holzenberger M., Dupond J., Ducos B. et al. // Nature. 2003 V.421- P.182i187.

147. Hong Yen Hsu. The chemical constituents of oriental herbs / Hong - Yen Hsu, Yuh - Pan Chen, Mina Hong// Oriental Healing Arts Inst. Los Angeles: OUP, 1982 - P. 1546

148. Jewell D.E. Veterinary Therapeutics/ Jewell D.E. et al. 2000 - 1 - 264 - 272

149. King M.M., McCay P.B. Anticancerogene effect of selenium and vitamin E in rats / King M.M., McCay P.B. // Cancer Res. 1983- Vol.43, Suppl.- P. 2485a

150. Kitchell B.E. Proceeding of geriatric medicine I Symposium. Veterinary Post -Graduate Institute, Santa Cruz, California, 1988

151. Korff S., Katus H.A., Giannitsis E. // Heart. — 2006. V. 92. - P. 987 — 993.

152. Kraft W, Danckert D. Development of the age structure of a cat population compared with the dog / Kraft W, Danckert D. // Tierarztl Prax Ausg К Klientiere Heimtiere, 1997 25 - P. 678 - 683

153. Krahenbuhl S. Reduced antioxidative capacity in liver mitochondria from bile duct ligated rats / Krahenbuhl S. // Hepatology. -1995. Vol. 22, № 2. - P.607-612

154. Laflamme D.P. Nutrition for aging cats and dogs and the importance of body condition/ D.P. Laflamme // Vet. Clin. North America Small Animal Practice, 2005-№35-P. 713-742

155. Leber H.W. Influence of Silymarin on drug metabolizing enzymes in rat and man / Leber H.W., Knauff S. // Arznei mittel Forsch, 1976 - Jg. 26, №8 -P. 1603-1605

156. Lewis W.H. Medical botany/ Lewis W.H., Elwin Lewis M.P.F., N.Y.- Wiley, 1977-P. 515

157. Masoro E.J. Handbook of the Biology of Aging. Sixth Edition // E.J.Masoro, S.N.Austad Amsterdam - 2006. - P.56

158. Maynard Smith I. Review lectures on senescese. The causes of ageing / Proc. R. Soc. Lond, Ser. B, 157, 1962 - P. 56-58

159. McCukey R.C. Morphological mechanisms for regulating blood flow through hepatic sinusoids / McCukey R.C. / / Liver. 2000, - Vol. 20 - P. 3-7

160. McMurray C.H. A possible prophypaxix and model for degenerative myopathy in young cattle / McMurray C.H., McEldowney P.K. //Br. Vet. J. 1977 Vol. 133- P. 535

161. Medawar P.B. An ansolved problem of biology / Medawar P.B. reprinted// The Uniquenses of the Individual. Methen, London, 1957 P. 71

162. National Research Council. Nutrient requirements of dogs and cats. The national Academies Press, Washington, DC.2006 P. 1 -373

163. Nordmann R. Alcohol and antioxidant systems /Nordmann R. // Alcohol, 1994 № 29 - P. 513 - 522

164. Orr W.C., Sohal R.S. // Science. 1994. V.263. P.1128-1130.

165. Palmieri L. Metabolic rate of Exogenous Chondroitin Sulfate in the experimental animals./ Palmieri L., Conte A. at all. // Arzeim. Forsch. Drug Res. 40 (1) № 3 (1990) - P. 69

166. Proctor J.F. Selenium, vitamin E and liseed oil meal as preventatives of muscular dystrophy in lambs / Proctor J.F., Hogue D.E., Warn R.G. // Journal Anim. Science, 1958- Vol. 17 P. 1883

167. Raunen H.M. Enzymaktivitatskorrelationen im serum nach experimentellen Leberschadigunden der ratte / Raunen H.M., Schriewer H.// Arznei mittel -Forsch, 1971 Jg. 21, № 8 - P. 1201 - 1205

168. Reiter R.Selenium and drug metabolism. I. Multiple modulations of mouse liver enzymes / Reiter R., Wendel A. // Biochem. Pharmacol., 1983 Vol.32 - P. 3063 -3067

169. Scarlett J.M. Associations between body condition and desease in cats/ Scarlett J.M., Donoghue S. //J. Am. Vet. Med. Assoc. 1998 - 212- P. 1725 - 1731

170. Setnicar. Pharmacokinetiks of Glucosamine in dog and man/ Setnicar, Giacchetti C. at all. //Arzeim.Forsch./Drug Res. 41(1), № 2 (1991) P. 21

171. Setnicar, Pacini M. at all. Antireactive properties of Glucosaminoglicane Sulfate / Setnicar, Pacini M. at all. // Arzeim. Forsch./ Drug Res.41 (1) № 2 (1991) -P.62

172. Shubert M. Insertion of the human immunodeficiency vims CD4 receptor into the envelope of vesicular stomatitis virus particles / Shubert M., Joshi В., Blondel D., Harmison G.G. // Journal of Virology -1992 Vol. 66 - №3 - P. 1579 - 1589

173. Strehler B. L. Time, Cells and'Agins, Academic press / Strehler B. L. N-Y and London, 1962-P.45

174. Suja V. Liv.100 pretreatment inhibits the CC1 4 induced lipid peroxidation in rat liver. An in vitro study / Suja V., Shyamaladevi C.S. // Current Science 1997 -№ 1 - P. 72- 74

175. Tatar M., Bartke A., Antebi A. // Science. 2003- V.299 P.1346-1351

176. Timothy E. Glucosamine and Chondroitin for treatment of osteoarthritis /Timothy E., Michael P. at all.// JAMA, 2000 Vol. 283, № 11 - P.78

177. Vogel G. Pharmacological properties of Silymarin, the antihepatotoxic agent from the seeds of the milk thistle, Silybum marianum (L.) Gaertn. / Vogel G. // Symposium on the pharmacodynamics of Silymarin, Miinchen Berlin- Wien-1976 - P. 1-6

178. Wallel A.F. Chondroitin Sulfate and Glucosamine: a review of the Safety Profile / Wallel A.F., Tarek H. // JANA. 2001 -Vol. 3,№ 4 - P. 37

179. Watson P.J. Chronic hepatitis in dogs: a review of current understanding of the aetiology, progression, and treatment / Watson PJ. // The veterinary Journal 167 2004 - P. 237-238

180. Whitney J.C. Observations on the effect of age on the severity of heart valve lesions in the dog / Whitney J.C. // Journal of Small Animal Practice 2003 - № 15-P. 511-522

181. Williams R. Liver failure/ Williams R., London, 1986 230 P.

182. Witte P. Ортопедические болезни стареющих кошек / P. Witte, H. Scott // Veterinaty focus, № 19 (3), 2009. C.46-49i