Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

ЭПИЗООТОЛОГИЯ, ДИАГНОСТИКА И ЛЕЧЕНИЕ СУ-АУРУ ВЕРБЛЮДОВ В ГУРЬЕВСКОЙ ОБЛАСТИ

ВАК РФ 03.00.19, Паразитология

Автореферат диссертации по теме "ЭПИЗООТОЛОГИЯ, ДИАГНОСТИКА И ЛЕЧЕНИЕ СУ-АУРУ ВЕРБЛЮДОВ В ГУРЬЕВСКОЙ ОБЛАСТИ"

сЯ - Я?

ВСЕСОЮЗНАЯ ОРДЕНА ЛЕНИНА АКАДЕМИЯ -СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ НАУК ИМЕНИ В. И. ЛЕНИНА Всесоюзный ордена Ленина институт экспериментальной _ветеринарии_.

На правах ру кошки ХАМИ ЕВ Самигулла

ЭПИЗООТОЛОГИЯ, ДИАГНОСТИКА И ЛЕЧЕНИЕ СУ-АУРУ ВЕРБЛЮДОВ В ГУРЬЕВСКОЙ ОБЛАСТИ

(03.00.19 — Паразитология)

Автореферат диссертации на соискание ученой степени' кандидата ветеринарных наук

Москва — 1075

—¿^^ет^да

/г

4

ВСЕСОЮЗНАЯ ОРДЕНА ЛЕНИНА АКАДЕМИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ НАУК ИМЕНИ В. И. ЛЕНИНА Всесоюзный ордена Ленина институт экспериментальной _ ветеринарии __

На правах рукописи ХАМИЕВ Самнгулла

, ЭПИЗООТОЛОГИЯ, ДИАГНОСТИКА И ЛЕЧЕНИЕ СУ-АУРУ ВЕРБЛЮДОВ В ГУРЬЕВСКОП ОБЛАСТИ

(03.00.19 — Паразитология)

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

{Зсатркад. .. Г*: :5л ¡юте к; 1 I .. п-г^пмя!

/ "' сА-ЯВЩ,

Москва — 1975

Работа выполнена ® лаборатории протозоологии н арахнологии Всесоюзного ордена Ленина института экспериментальной ветеринарии (директор — действительный член ВАСХНИЛ, профессор Я. Р. 'Коваленко).

Диссертация изложена на 148 страницах машинописного текста, в том числе: введение — 3, обзор литературы — 27, собственные исследования — 87, обсуждение полученных данных — 11. выводы — 3, список литературы ■— 14 стр.

Работа иллюстрирована 11 фотографиями, 3 графиками и 24 таблицами.

Научный руководитель — кандидат ^ветеринарпых ¡наук В. В. ПЕТРОВСКИЙ.

Научный консультант — заслуженный деятель науки РСФСР, доктор ветеринарных наук, профессор И. В.

АБРАМОВ.

Официальные оппоненты:

Доктор ветеринарных наук, профессор В. Е. Щуревский и кандидат ветеринарных наук, доцент Н, В. Павлова.

Ведущее учреждение — Узбекский научно-исследовательский ветеринарный институт.

Автореферат разослан

Защита диссертации состоится «¿к^» 97 ^ г.

в 14 часов па заседании Ученого Совета Всесоюзного ордена Ленина института экспериментальной ветеринарии (Москва, 109472, ВИЭВ)*

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ВИЭВ. Ученый секретарь ВИЭВ,

кандидат биологических наук В. В. Калугин

Одной из важнейших задач, поста'вленных XXIV съездом КПСС 'перед сельскохозяйственной наукой и практикой, является всемерное развитие социалистического животноводства. Наряду с увеличением поголовья окота необходимо значительное повышение его продуктивности.

. В связи с этим внимание ветеркнарных шецн ал истов должно 'быть направлено на снижение потерь в животноводстве от ¡незаразных, инфекционных и инвазлонных, в том чис-' ле кровеларааитарных (болезней. Разработка и ©недрелие эффективных методов лечения животных да-ет возможность шоднять качество -ветеринарных мероприятий в борьбе со многими ¡болезнями и тем самым обеспечить снижение экономического ущерба в животноводстве,

В -развитии общественного животноводства в степ-ных, полупустынных .и пустынных зонах Казахстана большое значение нм-еет взр'блюаоводство. Однако развитие этой важной от.расли животноводства сдерживается .рядом фа.кторов, среди которых одно из первых .мест занимает трипаносомоз (су-ауру) —«самое опасное заболевание верблюдов, настоящий бич верблюдоводческих хозяйств» .(С. М. Терентьев, 1950).

Благодаря исследованиям, проведенным советскими ттро-тозоологами, были научены: 'биология возбудителя су-ауру (Тгурапоэоша птаекошуаЫтоуае, В. Л. Якимов, 1918). клиническое проявление болезни, особенности эпизоотологии, географическое распространение, диагностика, лечение и профилактика (В. Л, Якимов, 1918—1937; С. А. Иловайский и

B. Д. Шт.нбен, 1922—.1926; К. Миротворскнй, 1922; А. А. Марков, А. Л. Цейсс. 1926—1928; И. И. Казанский. 19215—1953; С- А. Ама-нжулов, 1926—1936; С. И. Драчинский, 1926—>1928; А. .И, Журавлев, 1926; Г. А. Радзивиловский, 1932—1935;

C. Л. Алексеев и Л. И. Мелетьев, 1935; И. В. Абрамов. (1932— 1935); С. А. Абрамов, 1936; В, А. Саляев, 1935—1938; П. Н. Арбузов, А. А. Самарцев, П. И, Островидов, 1936—1940; Е. М. Рафаловнч, 1935; Д. А. Мирэабеков, 1939—1941; Г. С. Дзасохов, 1932—1935; Е. А. Муратов, 1935—1939; В. Ф. Новинская, 1951 — 1953; Л. А. Лаврентьев, 1955; В. В. Петровский, 1973— 1975; В. Г. Меньшиков, 1973 и др,) и приобретение резис-2 Зек, 1590 3

тентнссти трнпаиосом к длительно применяемым препаратам (С. И. Драчшгский и А. А. Марков, .1926; И. И. Казанский, 1926, 1927; А. В, Белицер и А. В! Богородицкий, 1932; В. А. Саляев, 1938; М. Сабаншиев, 1972, S, Nil-son, 1953; В. Nalsa, №67; A. Grav, С. Roberts, 1971; В. Gill, Т. Toure, 1973 и др.).

. Изучение этих вопросов дало возможность разработать научно обоснован-)[ую систему мероприятий, (применение которой..позволило свести до минимума заболеваемость животных су-ауру iß зонах ее широкого распространения. Однако в период Великой'Отечественной чюнны (1941—1945) в связи со значительным .перемещением животных, а шосле ее окончания с уменьшением поголовья лошадей и верблюдов ¡было ослаблено внимание к проведению мероприятий "по борьбе с этой болезнью в неблагополучных местностях, что. привело' к ее -р.а сцр остр а н ен и ю >в отдель-ных областях Узбекской, Туркменской к особенно в Казахской ССР.

На территории Казахской ССР су-ауру верблюдов за последние годы регистрируется в хозяйствах Гурьевской, Уральской, Кзыл-Ордянской. Чимкентской, Джамбулской и Талды-Курганской областей, в связи с чем -возникла 'Необходимость в проведении исследований по изучению >гого заболевания IB зоне -интенсивного .верблюдоводства республики '— Гурьевской области. ■

Для выполнения этой работы были поставлены следующие задачи:

1. Проанализировать эпизоотическое состояние по су-ауру ■верблюдов в хозяйствах области за .период с 1962 по 1974 гг.

2. Определить наличие и степень резистентности к ■наганм-ну выделенных штаммов возбудителей су-ауру.

3. Усовершенствовать серологически« методы диагностики.

4. Испытать новые трипаношидные препараты для лечения больных су-ауру 'верблюдов, '

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Работа проводи'лась в 1973—1975 годах в лаборатории протозоологии и арахнологии, общей эпизоотологии, болезни; . пчел и в хозяйствах Гурьевской области Казахской ССР.

В опытах использовано 114 верблюдов, 8 собак, 2576 белых мышей и 39 .морских овинок, Кроме этого, в производственных условиях обследовали 1112 шерблюдов в семи хозяйствах пяти районов Гурьевской области.

Материалом для изучения биологических ососбенностей тр.ипаносом й заражения подопытных животных служили восемь штаммов; три туркменских (Т*Г, Т-ü, Т-Ш), сауранскнй (С),' балыкшпискнй* (Б), ?рн махамбетских (M-I, M-1I, M-II1).

Штаммы трипа.носом .поддерживали . путем перепрививки на морских свинках, -белых мышах, а также сохраняли в жидком азоте.

Подопытных животных обследовали клшшко-гематологи-чески н серологически до заражения, во время болезни, после 'Переболела¡шя м лечения.

В производственных условиях верблюдов обследовали клинически, микроскопией .препаратов из периферической ¡крови. От всех обследованных больных и .подозрительных по заболеванию верблюдов сыворотку крови исследовали в реакциях связывания комплемента (РОК) длительного связывания комплемента (РДСК), формалиновой (реакцией (ФР) и выборочно проводили биопробу на . белых .мышах.

РОК [проводили согласно инструкции по ее постановке грн случной болезни н су-ауру лошадей, а РДСК в новой модификации. В реакциях(использовали трнпаносомные антигены Сибирского научно-исследовательского института, а для постановки .реакции агглютинации {РА)—как антигены Сибирского НИВИ, так и три готовленные нами, .которые доводили по общему оптическому стандарту мутности до концентрации 10 млрд. микробных тел ,в 1 мл.

Из элвзото логических .показателей изучали территориаль- . ную приуроченность, сезонность ¡болезни, заболеваемость I : 10 ООО то годам, коррелядию показателей заболеваемости с уровнем профилактических обработок.

Степень устойчивости .полевых штаммов тршпаносом к :на-ганину оп.редел ял и путем сравнения доз препарата, вызывающих 100%-ный терапевтический эффект у изучаемых штаммов, к дозе препарата, вызывающей тот же эффект у чувствительного штамма.

Изучение терапевтической эффективности .х.и.ч мол ре л аратов 'Проверяли п.а белых мышах, морских свинках, собаках и верблюдах.

Препараты испытывали в различных дозах .и концентрациях и вводили из расчета на 1 кг живой массы.

Результаты лечения контролировали биопробой через 20— 30 дней после введения .препарата .на белых мышах.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИИ

Анализ эпизоотического состояния по су-ауру верблюдов Гурьевской области за 1962—1974 гг.

Су-ауру верблюдов -в Казахстане в довоенные годы регистрировали очень часто. После.¡внедрения системы оздоровительных мероприятий случаи болезни были сведены до ми-2* - 5

шмума. Однако в последние гады су-ауру получила распространение в ряд« областей Казахской, Узбекской и Туркменской ССР. Также установлены случая заболевания верблюдов в ранее благополучных хозяйствах некоторых районов .и и Гурьевекой области,

, Впервые су-ауру .верблюдов в Гурьевской области было зарегистрировано И. И. Казанским, Л. Н- Арбузовым, В, А.-Саляевым в 1936 :году в Жилокссин-ском (З-мбиноком) районе, хозяйства которого к 1940 г. -были оздоровлены.

При обследовании верблюдоводческих хозяйств четырех районов (Махам1бетский, Балыкшинский, Макатский, Эмбин-ский) нами были выделены 'больные су-ауру (микроскопией, биопробой) ще.рблюды в двух'.районах (Балыкшшккий, uWa-хам'бетский), ib одном .из которых в последние годы ¡случаев острого и хронического ■заболевания не отмечали (Махам-бетский район).

Изучение эпизоотической обстановки .по су-ау.ру верблюдов1 в области нами проводилось путем анализа эпизоотологии ее к их ¡показателей за последние 11 лет (1962—1972) по ■материалам ветеринарной отчетности и за сравшгвыемый с ними период (1973—1974 гг.) по результатам наших исследований.

а) Территориальная приуроченность 'болезни

■ Заболеваемость су-,ау-ру верблюдов за ,период с 1962 по 1972 irr. наблюдалась на территории юсех восьми районов области. Однако степень распространения 'болезни была .различной. Северные районы ^Индерский, Кзылкупинский) поражались реже- н заболеваемость су-ауру характеризовалась в виде спорадических случаев.

В 1973—'1974 тч\ в четырех 'неблагополучных по су-ауру районах области (Балыкшинский, Махамбетский, Макатский и Эмбннский) нами обследовано 1112 верблюдов, из которых по клиническим признакам (.исхудание, увеличение поверхностных лимфатических узлов, конъюнктивиты, отеки в области живота) было выделено 160 животных, подозрительных в заболевании су-ауру. Ори комплексном исследовании этих верблюдов (микроскопия раздавленной капли и окрашенных мазков крози, формалиновая реакция и <биапроба на белых мыюах) диагноз на су-ауру .подтвердили у SO животных, принадлежащих хозяйствам Балыкши.иского и Махамбетского районов. 6 .....

б) Сезонность су-ауру

Сезонность болезни также является одним из эпнзоото-■■■ логических "показателей, знание которого определяет подходы к проведению профилактических мероприятий. Она может быть выражена .индексом сезонности. Поскольку су-ауру является трансмиссивной болезйью, ее преимущественное 'проявление связано с массовым появлением переносчиков—те-матофатов. Однако динамика сезонности су-ауру для разных •природно-географических зон бывает различной (Р. Ф. Со-сов н А. А. Глушков, 1974).

Сезонная динамика су-ауру на территории Гурьевской области .нами изучалась на основании данных ежемесячной зз1болевземосщ верблюдов за период >с 1962 ,по 1972 гг. и характеризовалась .индексом сезонности.

Изучение динамики заболеваемости верблюдов су-ауру в Гурьевской области показало, что .выделение 'больных животных отмечалось ежемесячно, .но больше в июле, августе и сентябре, чем в другие месяцы. 'При этом ишаке сезонности за II лет равен 2,43, т. е. в сезон подъема заболеваемость су-ауру верблюдов по обл-асти а 2,43 .раза больше, «чем © .периоды' спада.

Одним из важных показателей эпизоотического .процесса, характеризующего уровень ¡болезни является интенсивность заболеваемости, которая выражается индексам 1:10 000 или в процентах.

Заболеваемость су-ауру по области за 11 лет на каждые 10 000 верблюдов составила: в 1962 г.—310, в 1963 г. — 245, в 1964 г.— 254, в 1965 г— 339, в 1966 г.— 82, в 1967 г.— 118, в 1968 г.—106, в 1969 г.—85, в 1970 г.—80, в 1971 г.—30, в >1972 г.— 10.

При выяснении причли уменьшения заболеваемости ® последние тоды оказалось, что хозяйства с целью профилактики су-ауру используют метод раниевесеннего отгона верблюдов на территории, свободные от кровососущих насекомых— переносчиков 'возбудителя болезни.

В неблагополучных районах часть -поголовья верблюдов (общественные и индивидуальные) выпасается в тех местах, где с середины мая начинается массовый лет слепней и дри наличии в табунах .больных животных происходит перезаражение здоровых.

Из йсех корвосссущнх насекомых, обитающих на территории Гурьевской области, наибольший ущерб сельскохозяйственным жмвотны-м наносят слепни (ТаЬапиз). Видовой состав слепней определяли, пользуясь руководством

Н. Г.,Олсуфьева (1958) и В. В. Шевченко (1961). При этом установили, что 215 .определенных имаго слепней принадлежат к трем видам: ТаЬагшБ Ту1о51ур1а, егЬеп, Т, ОсЬгорэ ПауойиНаШз и Т. ОсИгорб ''аегевШ-

в) Корреляция гюказатёлей заболеваемости су-ауру верблюдов с уровнем профилактических обработок нагаппиом

Одной из задач общей эпизоотологии является установление связей между .изучаемыми. явлениями. Поэтому нами выяснялось наличие корреляционной связи между показателями заболеваемости су-ауру верблюдов и уровнем профилактических обработок натанином за период с 1962 .по 1972 гг.

Влияние нагатинпзашгн.на изменение показателей заболеваемости определяли методом корреляции рантов Спирмеца. Коэффициент ранговой корреляции заболеваемости с ежегодным уровнем наганнппзацнн только п 1966 году оказался 'положительным (+0,74), что указывает на эффективность профилактики су-ауру иа.ганином за этот год.

В другие годы заболеваемость была более высокой в тех районах, где в большей степени проводили обработку (верблюдов. Характерно, что коэффициент корреляции колебался от —0,12 до 0,91, а за сравниваемый .период 1973 .и 1974 гг.— 0,24—0,54 соответственно.

Приведенные данные указывают на то, что между уровнем нагапиншапип и заболеваемостью су-ауру вербллюдов имеется обратная зависимость. Несоответствие между этими показателями в последующем было 'подтверждено наличием в нет ■благополучных по су-ауру .верблюдов хозяйствах высокой степени устойчивости трипаносом к наганину.

Выделение полевых штаммов трипаносом

Выделение штаммов осуществлялось биопробой на 2— 3-х белых мышах, которым вводили кровь от каждого из 51 верблюдов как при наличии трипа.носом в ■периферической крови (6), так и при отсутствии видимой параз.итемии <45>-

За .перод 1973—1974 гг. от обследуемых в Гурьевокоп области гверблюдов было выделено 13 штаммов трипаносом, 5 из которых использовали для определения стелени их устойчивости к наганину.

Кроме того, -на Центральной зообазе (Москва) биопробой от 8 одногорбых верблюдов (драмедар), поступивших из райо-

на Мары Туркменской ССР, был выделен штамм трипаносом (туркменский 111) от одного верблюда, который при предварительном исследовании ськворотки давал .положительную формалиновую пробу .¡I л мел клиштчеокне признаки су-ауру.

Определение степени устойчивости выделенных штаммов трипаносом к нагакину

Для лечения, н профилактики су-ауру животных используют в настоящее (время кагаини, который рекомендован более 40 лет тому назад в сочетании с другими препаратами.

Стетень устойчивости трнпан-осом к 'паганнну нами определялась па* ¡восьми штаммах, выделенных в разное время от естественно больных .верблюдов нз хозяйств Казахской н Туркменской ССР (три— туркменские, сауранскин, -балык-шннск-и-й и тр,и — махамбетские).

В качестве контроля, с которыми сравни-вали изучаемые штаммы, служил штамм «туркменский», выделенный с 1967 г. от верблюда в Туркменской ССР и с того времени пассируемый ,на белых .мышах в лаборатории- Этот штамм три-tna.it ссом является чувствительным к паганипу.

Резистентность штаммов гК лаганину изучали на белых мышах весом 18—20 граммов путем определения минимальной-терапевтической дозы наганнна, вызывающей 100%-ный лечебный эффект. Мышей-заражали подкожно тепаршмзн-решай ной, разведенной физиологическим .раствором, кровью в аоэе 0,2 мл при концентрации трипаносом -от 10 до 15 в поле зрения микроскопа (Х 670).

После появления трипаносом ¡в периферической крови у зараженных белых мышей проводили их лечение нагашшом (серия 16.07.70) в дозах от 5 до 80 мг на -1 кг живой массы, подкожно. Для чувствительного штамма интервалы между дозами составлял,» 5. мг, для проверяемых—'10 мг.

В каждом-'опыте (в качестве контроля служили .по 5— 10 мышей, лечение которых не -проводили и второй копт-рать — лечение папаннном, но зараженные чувствительным штаммом трипаносом.

Наблюдение за леченными -мышами продолжали -в течение 30—40 дней. За этот .период от них ежедневно исследовали кровь на наличие трипаносом, а через 20—30 дней от оставшихся в живых мышей ставили биол-робу -путем подкожного заражения здоровых .белых мышей.'

Результаты опытов .показали, что если для чувствительного штамма трипаносом минимальной терапевтической дозой няганнна ярвляется- 10 .мг/кг, то для изучаемых штаммов она

равна 30, 50, 60 н более 80 мг/кг, что в 3, 5, б и более восьми раз 'лревышзет дозу наганипа, эффективную для белых ■ мышей.

.■Полученные данные говорят о том, что в хозяйствах Гурьеве кой области за период длительного (около 40 лет) применения масанина у паразитирующих л верблюдах тЬи-тшюсом -выработалось привыкаете к .препарату, чем и объясняется отсутствие эффекта при лечении и профилактике этим 'прейа.ратом.

Такое .положение обязывало нас провести испытание хи-миогерапйвтнческих препаратов, принадлежащих к другим группам дммических соединений, с целью преодоления наган неустойчивости у трипа носом.

Биологические особенности наганиноустойчивых трипаносом

Характерной особенностью устойч-ивых к н.аганипу штаммов трипажхгом является длительность течения вызываемой ими 'болезни.

■При "Заражении ¡белых мышей, 'Морских свинок и собак устойчивыми, штамм.ам.и возбудителя шшубацжшный период болезни длится 8—15 дней, а чувствительными —4—5 дней. У 'белых мышей, зараж&нных' трипаносомамн устойчивых . штаммов, болезнь протекает циклически, рецидивы чередуются с периодами резкого уменьшения количества трипаносом в -крови, а у чувствительного штамма количество трипаносом зарастает и .приводит животных к гибели.

У естественно больных верблюдов наблюдается стертая клиническая картина, а у некоторых животных совсем отсутствуют признаки су-^ауру, однако в .периферической крови трипаногомы обнаруживаются в количестве 2-М0 в одном поле зрения.

■После лечения нага-нином 'В течение 15—25 дней т-рила-носомы не обнаруживаются микроскопическим исследованием, но животные остаются скрытыми носителями возбудителя, что устанавливали бистрробой, а 1в дальнейшем у них наблюдали рецидивы ¡болезни-

Выделенные нами штаммы, оказавшиеся высокорезистентными к ,наг.знину, сохраняли свои .инвазионные свойства для лабораторных животных, однако по .вирулентности отличались от чувствительного штамма трипаносом. Болезнь • протекала более 'Продолжительно у белых -мышей и морских оаинок, зараженных трнпа'нооом'ами на г а н и а о усто й ч ив ы к штаммов. Например, трилапосомы устойчивых штаммов убивают -белых мышей ¡на 1-3—«1® дии, мо»рских свинок та

93 день, ® то время как трипаносомы чувствительного штам-. ш ■ убивают. эти вилы животных соответственно на 7 и 58 сутки после заражения.

Установленное 'нами снижение вирулентности устойчивых к нагашшу штаммов трипаносом, очевидно. является адаптационным -фактором, возникшим в результате длительного: 'воздействия на возбудителя малых доз .препарата, что обусловило изменение их биологических свойств, направленное на выживание -популяции нх в организме теплокровного хозяина.

Серологическая диагностика су-ауру верблюдов

Из серологических реакций для диагностики су-ауру верблюдов рекомендована и используется из практике формалиновая реакция (ФР), механизм которой объясняется изменением.-физико-химических свойств сыворотки крови -в период -болезни животных.

Что гкасается других серологических тестов {РСК, РДСК), то попытки многих исследователей не увенчались успехом, так как -при хроническом течении су-аур у сыворотки дают задержку .гемолиза в безантигенном ряду. Более обнадеживающие результаты получены рядом авторов при использовании реакции агглютинации, однако и этот тест до настоящего времени не нашел практического применения.

Учитывая трудности в .постановке достоверного диагноза на су-ауру п ар ази тол отческими методами (микроскопия .раздавленной капли и мазков крови, биопроба на лабораторных животных), -мы сочли целесообразным сделать попытку отработать метод ретроспективной диагностики этого заболевания ,по обнаружению специфических антител серологическими реакциями.

а) Отработка режима постановки РСК

В наставлении по постановке РСК для диагностики случной болезни и су-ауру лошадей, утвержденном ГУВ МСХ СССР от 17/ХП—39 г., предусматривмается использование всех ингредиентов по 0,5 мл (общий объем 2,5 мл).

Учитывая имеющиеся данные о -большей чувствительности реакции длительного связывания комплемента ма холоду, а также данные о юозможности постановки РДСК в объеме 0,5 мл, нами проведена серия опытов по выяснению возможности использования этой реакции для диагностики су-ауру животных. .При условии .получения положительных результатов ™ РДСК в' объеме 0,5 мл можно в 5 :раз снизить ее

стоимость за счет уменьшения количества дорогостоящих компонентов.

РСК II РДСК были попытаны А. П. Зотовым и Н. И. Сте-нааювой (1955) нрн Ку-рик кете позе, а в дальнейшем Н. И- Степановой (-1959—1975) при .различных кровепарази-1 арных болезнях (тейлерпоз, анаплазмоз, бабезиоз, нуттал-лиоз) как для ,нх диагностики, так и для изучения иммунобиологического состояния больных и переболевших животных. .....-

При отработке методики .нами были использованы в главном опыте позитивные Снб.НИВИ и отрицательные сыворотки лошадей.

В результате установлено, что .реакция длительного связывания комплемента 'более чувствительна, чем РСК, и ее «спйлненне в объеме 0,5 мл дает четкие результаты, сокращает 'нормы расхода антигена, комплемента и гемолизина в 5 раз, что ¡позволяет нам рекомендовать ее для практического применения в ветеринарных лабораториях для диагностики су-ауру лошадей.

б) Испытание РДСК на позитивных и отрицательных сыворотках верблюдов

Отработав режим постановки РДСК на сыворотках лошадей, мы приступили <к отработке режима с сыворотками верблюдов. Всего было проведено четыре серии опытов с сыворотками заведомо больных и здоровых тто су-ау,ру верблюдов. ' ■ .

Основным препятствием к практическому использованию РСК. (РДСК) для диагностики су-ауру у верблюдов, как уже отмечалось, является задержка гемолиза в безантнгенном Р«лу. .

Применяя РДСК 'по вышеизложенному режиму, мы снова отмечали- феномен антикомплементарпости верблюжьих положительных по су-ауру сывороток, при прохождении всех контролей (отрицательная верблюжья, положительная лошадиная, -контроль антигена).

К. -И, Матвеев, Т. И, Булатова, Б, Д. Быченко, Т. И. Сергеева '(1973) .рекомендуют различные способы снятия антн-комилементарных свойств сывороток: путем их обработки углекислым газом, методом хроматографии, центрифушровз-инем или .подогреванием при (высоких температурах.

'■'■' В своей работе, по снятию анатикомплементзриости верблюжьих сывороток, мы .применяли центрифугирование при разлпчных'режнмах, прогревание от 56 до 73° С-и разведение проб безантигенного ряда, соответствующее разведениям-с антигеном. 12 '

Центрифугирование позитивных сывороток верблюдов проводили в течение 10 мин. при 1000, 2000, 2500. 3000 и 5000 сб/мип. Использование этих режимов не дало положительных результатов по снятию антнкомплементарности.

Не дали положительных результатов как -метод серийных .разведений безантигенного ряда, тг.к и прогревание при высоких температурах.

Таким образом, 'применим 3 простых, доступных для лабораторий метода снятия ,а,птикомплемент,арности, мы не получили положительного результата, что еще раз подтвердило непригодность РДСК (РСК) для серологической диагностики су-ауру у .верблюдов,

в) Отработка режима постановки реакции агглютинации (РА)

Реакция агглютинации является широко распростра,^ценным серологическим тестом лабораторной диагностики при многих .инфекционных заболеваниях.

Достоверность показаний серологических реакции во многом завивеит от качества, активности и специфичности используемого а-нтгена.

В качестве антигенов были попользованы 2 серии (№ 3 и № 4), приготовленные нзми, и серия № 16, изготовленная СибНИВИ, которые доводили 'по общему оптическому стандарту, мутности до концентрации 10 млрд, микробных тел !В I .мл. ,

Реакция ставилась в объеме 0,5, 1 и 2 мл с разведениями сыворотос-к от I : 5 до 1 :80.

■При объеме реакции 1 и 2 мл'количество вводимого антигена составляло 0,5'мл; при объеме 0,5 мл — антигена 0,2 мл. В качестве контролен ис пользою а л.и отрицательные сыворотки на. изотоническом (0,85%) или гипертонических (3 и 5%) растворах хлористого натрия, а также эти растворы с антигеном без сывороток. .После внесения антигена в исследуемые сьнв'оротк.п и контроли пробирки встряхивали и помещал!! в термостат при 37° на 18—20 часов.

Отработку 'реакции агглютинации ¡проводили вначале ип положительных ¡ трипаносомных и отрицательных сыворотках лошадей, которые в последующем служили контролям.н при исследовании сывороток от больных су-ауру й здоровых верблюдов. При этом оказалось,_ что наиболее четкие и повто-■ ряющиеся результаты 'были получены с: .антигеном серии Кс 16 (Сиб.НИВИ) в.объеме ¡реакции 0,5 мл (0,3 сы,воротки + +0,2 антигена) и 'выдерживании » термостате при 37° С в течение 18—20 часов,

При 'проверке положительных л отрицательных сывороток от верблюдов, по описанному выше режиму, было получено совпадение результатов с лошадиными -положительными и отрицательными сыворотками, что 'позволило приступить к исследованию сывороток от верблюдов из неблагополучных по сучауру хозяйств. Всего »было исследовано в РА 122 сьиво-ротки, из которых 17 сывороток давали .положительную формалиновую реакцию, а от 7 животных трипаносом находили в окрашенных мазках и была положительная биопроба. При проверке «то РА из 122 сывороток положительно реагировало 23, гЭ число которых входят все 17 реагирующих по ФР. При этом' титры антител достигали 1 :40.

Таким образом, результаты лровеаенных исследований указывают на возможность использования РА для диагностики су-ауру верблюдов, как дополнительного метода выявления больных животных.

Определение терапевтической эффективности различных химиопрепаратов при су-ауру лабораторных животных и верблюдов

Для лечения и .профилактики трип а носом озов животных, вызываемых различными -видами трппаносом, в основном используются препараты четырёх химических. соединений; ди-амидина, б^аминохинальдина, фенаптридина, и сульфаниро-ванного нафтнламнна. В последние годы проводятся испытания препаратов нитрофура.нового ряда.

Проведенные в 1973"—1974 тг- исследования по определению эффективности наганнна на трипаносом 4-х штаммов, выдел-енных в различных районах Гурьевской области Казахской ССР от больных су-ауру верблюдов, показали, что все 4 штамма имеют к нему высокую степень устойчивости, для преодоления которой требуются дозы, .превышающие в 5— 8 раз рекомендуемую. Такие дозы не могут быть использованы в практике, так как являются токсичными. Поэтому преодоление наганиноустойчивости трипаносом .возможно только путем замены наганина трипаноцидиым препаратом из другой группы химических соединений.

С этой целью нами были испытаны ряд препаратов, рекомендованных для лечения других протозойных болезней животных. В опытах ,но определению терапевтической эффективности препаратов животных заражали чувствительными устойчивыми к наганнну штаммами трипаносом н после появления нарааитов в периферической мрови проводили лечение соответствующими дозами препаратов, 14

О терапевтической эффективности испытуемых препара-/ тов судили по lOOVc. эффекту, который определяли по отсутствию три па н осам в шерифер и ческой крови в течение 20—35-дней после инъекции ..препарата и последующей груп-птаой биологической пробой.

Критерий lÜÖVd-ного эффекта был выбран с той целью, что-при трипанюсомозах, в отличие от пироплазмидозов,; . необходимо получение «стерилизующего»'эффекта, так как но-ситель'ство обусловливает последующие рецидивы, приводящие животных к гибели.

Нами были испытаны семь препаратов: ■пироди.а, диме-тон, фурацилин, -фурзолидон, пиральдин, беренил, и трипа-мидий.

Некоторые из испытанных нами препаратов не оказали лечебного эффекта, другие эффективны ори высоких дозах. Что касается пиральдина, беренила и тришшидня, то эти препараты при лечении 'больных су-ауру животных, зараженных устойчивым iK натанину -штаммом, оказывали высокий лечебный эффект.

■а) Пиральдин ¡налш использован для лечения белых мышей, зараженных устойчивым к л-агаатну штаммом тр im а носом, «М— I» в дозе 2,5, 5 и 10 мг/кг. При наблюдении за(мы-шами в течение 30 дней и дальнейшей 'биологической 'проверкой установлена !00°/<гная лечебная эффективность от всех доз .п.и,ральдина.

б) Беренил—Ди- (4 амидинофенил)—тиразен (N—1:3) — дна-цетурат, широко применяемый для лечения- пироплазм и-, дозов всех ендов животных и трипа нос ом озов, вызываемых Т. vivax и Т. congolense в дозе 3,!5 мг/кг.

Лабораторное испытание береннла проводили на боль-лых суауру белых мышах, зараженных штаммом «М—1». При -этом оказалось, что наименьшей дозой, обеспечивающей 100%-ный лечебный эффект, является 50 мг/кг, в то время как от меньших доз через 4—28 дней .после лечения наступали рецидивы, которые приводили к ¡гибели части животных, а от оставшихся живых мышей -групповая биопроба давала *по-ложительный .результат. ;

В 'производственных условиях на 'больных су-ауру верблюдах'лечебная эффективность беренила определялась- в совхозе «Чапаевский».

Лечению беренилом в дозе 5 мг/к-г (были подвергнуты' 10 верблюдов, из которых у девяти трип а носом ы обнаружены в крови, 5 верблюдов служили контролем и лечились нагани-пом в дозе 0,03 г/кг.

Кроме того; 10 верблюдам, имевшим, клинические призвали су-ауру, беренил вводили :в дозе 7 мг/кг, однако последующим проверкам эти животные не подвергались, так как находились на дальних пастбищах в барханах.

. Беренил вводили щ 7,5:>Л-ной концентрации внутримышечно, а наганин в 10%-ном разведении внутривенно.

При введении беренила 1в дозе 5 мт/кг глобочных явлений не наблюдалось, в то время как от дозы 7 мг/кг у всех 10 верблюдов ^ через 10—15 минут отмечались признаки интоксикации, выразившиеся .в сильном беспокойстве, частом мочеиспускании, выделении жидкого кала, потении, после чего наступала депрессия, длившаяся в течение 1,5—2 часов.

Контроль эффективности .препарата осуществился черезЗ (в октябре) и 6 (¡в январе) месяцев после лечения в дозе 5 М1Г/ЛГ. -

Все леченые верблюды не имели клинических признаков су-ауру, дали отрицательную микроскопию крови-на трнпано-сомы и биопробу на белых мышах, '

Контрольные верблюды, леченные натанином, отличались от опытных низкой упитанностью, микроскопия крови на трнпанссомы была отрншательной, .а формалиновая ^реакция у трех и .биопроба у двух оказались положительными.

Таким образом, результат опыта по изучению лечебной эффективности беренила свидетельствует о том, что этот препарат может'быть использован для лечения су-ауру верблюдов в дозе не выше 5 мг/кг три внутримышечном введении.

в) Трипамндий (изометамидий, сомарин) — хлоргидр'ат хлористого ам.ино—2 (амидино—3 -фенил диазоамипо) — 7 фенил—9 этил—10 фенантридин. Синтезирован французской фирмой «Спесиа», Бергом (1957). Представляет собой 'порошок пу.рпурсво-красного цвета, хорошо растворимый в воде до 107с. Рекомендуется попользовать слабоконцентрированные растворы не более 1—4%, в 'зависн.М'ссти от выбранной дозы. Трнпамидий вводится внутримышечно. Подкожные инъекции крупным животным не разрешаются. Можно вводить внутривешю или внутрибрюшинно.

Учитывая данные зарубежных исследователей об эффективности трипамидня при африканских трипаносомозах, а также острую необходимость замены наганина, к которому эа шериод длительного его применения в различных зонах Казахстана возбудитель су-ауру приобрел значительную устойчивость, нами' была проведена работа ло определению

терапевтической эффективности трип а мидия как з лабора:, : торных, так и в производственных условиях- ■ :

Терапевтическую эффективность трипа мидия при су-ауру-,. . определяли .на белых мышах, морских свинках . собаках, ; зараженных как -чувствительным, так и устойчивыми к на- „ Гайану штаммами трнлаиосом. (При этом были использованы дозы препарата от 0,25 до 10 мг/кг.

На чувствительный к иаганину штамм («Т—1») .все дозы трипа мидия не оказывали лечебного эффекта, и животные... погибали ъ различные сроки после введения лрепарата/:

Наганинсустойчивый штамм (М—11) оказался чувстви- : . тельным к трипа.мидию и при использовании дозы 1 мг/кг ■ вызывал по л.кое излечение собак, морских свинок, а из 25. белых мышей было вылечено 19. '

Положительные результаты лечения трипамидием .боль- .-ных су-ауру лабораторных животных, зараженных на,гапино-Ч устойчивым штаммом трипаносом, послужили основанием -для испытания этого препарата (с разрешения ГУ В МСХ СССР) на естественно больных су-ауру верблюдах в хозяйстве, в котором установлена .резистентность возбудителя к иаганину. ....;.

- Проверка лечебной эффективности трипамидия проводи- : лась ¡в совхозе «Чапаевский» вначале на 10 больных су-ауру верблюдах ори двух контрольных, которых лечили нагани-ном, Все 12 верблюдов имели клинические признаки су-ау- ' ру (исхудание, отеки в области нижней стенки живота или мошонки, увеличение нижнешейных лимфатических узлов,-тусклость. шерсти) и давали положительную формалиновую -реакцию, У девяти животных трипаносомы были обнаружены в окрашенных мазках крови; -биопроба от них также была положительной. , - ■ \

Через 10 дней после лечения-у всех опытных н контрольных животных трипаносом в окрашенных мазках крови не обнаружили, биопроба была отрицательной. Однако как , у леченных трипамидием, так и у леченных иаганином сохранилась положительная формалиновая реакция. При проверке через 66 дней у леченных трипамидием . отсутствовали / клинические признаки су-ауру, исследование мазков крови, .; биопроба «а белых мышах и формалиновая реакция были отрицательными.

Контрольные верблюды, леченные наганином, дали положительную формалиновую реакцию, -а у одного из них бно-проба на белых мышах была положительной.

Таким образом, трипамидий, примененный .для лечения . больных су-ауру верблюдов, наблюдение за которыми про-

дол жалось в течение. 2-х месяцев, оказался эффективным, в то время как один из двух .контрольных, леченных -н-агани-' ном, через этот орок дал рецидив.

Положительные . результаты лечения трипамидием 10 Сольных су-ауру верблюдов, позволили расширить опыт по изучению его лечебно-профилактического действия на большем поголовье. Трипамидием в дозе 1 мг/кг (были обработаны 75 .верблюдов, из которых 36 давали положительную формалиновую реакцию, а у ,10 животных из этого числа трнпаносомы были обнаружены ¡в мазках крови. В .качестве контроля 'были взяты 9 верблюдов, имевших клинические признаки су-ауру и положительную формалиновую реакцию, лечение которых проводили наганином в дозе 0,03 г/кг.

Учет результатов лечебно-профилактического действия трнпамидия проводили че,рез 3 и 6 месяцев.

Результаты обследования .показали, что леченные трипамидием животные имели хорошую упитанность, клинические признаки су-ауру у них отсутствовали. Трипаносом в окра-■ шенных мазках крови не обнаружено. В то же время формалиновая проба через 6 месяцев была положительной в 3-х случаях.

Все 9 контрольных животных имели клинику су-ауру н по* ложительно реагировали по формалиновой пробе, хотя в этот период микроскопия от всех девяти была отрицательная.

Таким образом, полученные данные указывают на высокую лечебно-профилактическую эффективность трипамидия ■целесообразность его использования в зонах длительного применения наг-анина, пде трнпаносомы 'приобрели устойчивость к последнему.

ВЫВОДЫ

1. Трипаносомоз верблюдов (су-ауру), вызываемый Т. шпаекоЫуак1тоуае является одной из причин, тормозящих развитие верблюдоводства в хозяйствах Гурьевской области Казахской ССР.

2. Ареал су-ауру приурочен к территории .Прикаспийской низменности и поймам рек Урала и Эм-бы, где имеются опти-

, мальные условия для .развития слепней — потенциальных переносчиков возбудителя.

3. В неблагополучных по су-ауру хозяйствах (пойма реки Урал) .обнаружено три вида слепней рода Т. Ту1о51ур1а егЬеп, Т. ОсЬгорз ПауоёииаЫз, Т. (О) ^гевМБ,

В наших сборах (215 экземпляров) преобладающим является вид Т. (О) аёгезПэ.

4. Сезонная динамика су-ауру верблюдов характеризуется

круглогодичным выделением больных животных, с пиком заболеваемости в июле—сентябре и индексом ¡сезонности1 2,43 (с 1962 .по 1072 гг.). /

5* При изучении биологических свойств возбудителя, вы--деленного от 'больных су-ауру верблюдов, выявлено наличие >и определена степень устойчивости трипаносом к наганииу. Индекс резистентности составил 5—8, т. е. для ^получения лечебного эффекта доза препарата превышала эффективную в б—8 раз.

6. На примере изучения су-ауру .в хозяйствах Гурьевской области Казахской ССР определена средняя обратная корреляционная связь между уровнем наганннизации и заболеваемостью верблюдов су-ауру, что свидетельствует об отсутст- ■ вни эффективности плановых профилактических обработок животных .наганином.

7. Для диагностики су-ауру верблюдов Р.СК и РДСК непригодны из-за антиком'племемтарности сывороток ¡больных животных. Для диагностики су-ауру верблюдов нами отработана реакция агглютинации (РА), а для диагностики су-ауру лошадей реакция длительного связывания комплемента (РДСК) в объеме 0,5 мл, что позволяет по сравнению с РСК, используемой в практике 1 (в объеме 2,5 -мл), снизить стоимость реакции в пять раз, за счет уменьшения расходования ее (Компонентов.

8. Для лечения больных су-ауру животных эффективными 1 оказались пиральдин, беренил и трип амидий:

а) пира льдин при экспериментальном су-ауру белых мышей обладает ратной эффектнвостью как против чувствительных, так и устойчивых к наглнину штаммов трипаносом.

б) беренил в дозе 5 мг/кг при внутримышечном введении верблюдам не /вызывает у них побочных явлений и оказывает лечебное действие, освобождая организм .больных животных от трипаносом, устойчивых к .иагаиину.

в) трнпамидий в дозе 1 мг/кг при внутримышечном вве-

. ден,ии верблюдам не вызывает у них побочных явлений и оказывает лечебный и длительный профилактический эффект (не менее трех месяцев), Этот ¡препарат ¡может быть рекомендован в зонах длительного применения наганина, где имеются наган и неустойчивые расы трипаносом.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

'1. Б зонах длительного применения нагаиила необходимо заменить лечебный препарат, для чего может 'быть использовал береннл (азидин) н тржпамлднй.

2> Для диагностики су-ауру лошадей вместо РСК в объеме 2,5 мл рекомендовать РДСК в объеме 0,5 мл, что позволит повысить эффективность диагностики, а затраты на ее проведение сократить в пять (раз.

3. Для серологической диагностики су-ауру ¡верблюдов щ зоне, неблагополучной по этому заболеванию, рекомендовать (производственное испытание реакции агглютинации (РА).

СПИСОК РАБОТ, опубликованных по материалам диссертации

1, Об устойчивости штаммов трипаносом к наганнну (в соавторства) . Ж. Ветеринария, № 4, 1974.

2. Современное состояние но су-ауру верблюдов в Гурь-евской области. Бюллетень ВИЭВ, 1974, вып. 18, стр. 30—32.

3. Определение терапевтической эффективности различных химиоцрепаратов при су-ауру белых мышей и верблюдов (в соавторстве). Бюллетень ВИЭВ, 1974, вып. (8, стр. 35—38.

4, Биологические свойства нагаииноустойчивых штаммов трипаносом, В печати.

5. Терапевтическая эффективность беренила и трнпами-дия/при су-ауру верблюдов (в соавторстве). В печати.

Материалы диссертации доложены:

1. На симпозиуме по инвазионным заболеваниям. Москва, сентябрь, 1974 г.

2. На Ученом совете ВИЭВ, Москва, июнь, 1975 г.

Оиветственнын за выпуск автореферата кандидат ветеринарных наук В. В, Петровский.

Подп. к печ, 6.Х,75 г, Зак. 1550—150

Типография Московской ордена Трудового Красного Знамен« I:; ветеринарной академии им, К. И, Скрябина