Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Трипаносомозы животных (биологические свойства возбудителей, эпизоотология, пато- и иммуногенез, диагностика, меры борьбы)

ВАК РФ 03.00.19, Паразитология

Автореферат диссертации по теме "Трипаносомозы животных (биологические свойства возбудителей, эпизоотология, пато- и иммуногенез, диагностика, меры борьбы)"

РОССИЙСКАЯ АКАДЕМИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ НАУК

ВСЕРОССИЙСКИЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ВЕТЕРИНАРИИ имени Я.Р.КОВАЛЕНКО

тпг~—\пг—;--

~ 1 МАП 1933 Н* пРава* рукописи

САБАНШИЕВ МАЖИТ

ТШШЮС0М03Ы ЖИВОТНЫХ ( биологические свойства возбудителей, эпизоотология, п&то- и иммуногенез, диагностика, меры борьбы)

02.00.19 - паразитология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук

Москва - 1993

Работа выполнена в Казахском научно-исследовательском ветеринарном институте Казахской Академии сельскохозяйственных

доктор-биологических наук, профессор Пак С.М. (ин-т зоод.Ан РК) дсктор медицинских наук1 Щуйкина Э.Е. (ИМПиТМ)

Ведущее учреждение - Всероссийский государственный научно-исследовательский институт контроля, стандартизации и сертификации ветеринарных препаратов.

Защита диссертации состоится » /Л "М. 1933 г. в Й^Х часов на заседании специализированного Совета Д 020..02 по защите диссертаций на соискание ученой степени доктора наук при Всероссийском научно-исследовательском институте эксперяметотальной ветеринарии имени Я.Р.Коваленко (109472, Москва, Кузьминки, ШЗВ)

наук.

Официальные оппоненты:

Заслуженный деятель науки Российской Федерации, доктор биологических наук, профессор Дьяконов Л.П. (ШЭВ)

С диссертацией можно ознскомиться в библиотеке ВИЭВ,

Автореферат разослан

Ученый секретарь специализированного Совета, кандидат биологических наук

В.В.Амелина

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ,

Актуальность проблемы. Трипаносомоза лошадей и верблодов на территории бывшего СССР имели широкое распространение в 20-30 годах. В эти годы учеными Оиля изучены вопросы эпизоотологии, диагностики, терапии и профилактики (С.к.Драчинский, А.А.Марков, А.В.Белицер, И.И .Казанский, И.В.Абрамов, И.С.Авессаломов,' П.Н. Лаврентьев и др.). В результате проведения определенных мероприятий, трипаносомозы живот, дых, особенно случная болезнь лошадей х< концу 40-х годов считались ликвидированными на территории СССР, в том числе и в Казах- . стане.

В последуюцие годы, в связи с резким сокращением поголовья лошадей л верблюдов;- трипаносомозы'регистрировались, но изучению не подвергались. К 70 годам, с увеличением поголовья лошадей и верблюдов и с большим экономическим ущербом, причиняемым трипаносом-озамя, встал-вопрос о серьезном изучении этих болезней не только в Казахстане, но л в других республиках.

По данным в (^отчетности ГУВ МСХ Республики Казахстан в насто-

' ящее время зарегистрирована неблагополучные по су-ауру верблюдов • •• ■

пункты в 8 т«* областях, а по случной болезни лошадей - почти повсеместно. \ ., •

Инструкция о.мероприятиях по борьбе со случной болезнью однокопытных а инструкция по борьбе с су-ауру верблюдов, утвержденные в. 1939 году ГУВ Н&ркомзема СССР, предусматривает лечебно-профилактическую наганвзацию животных^' неблагополучных по трипаносомозу хозяйствах. Однако наганазация (внутривенное инъекция) полудиких лошадей я верблюдов'в условиях Казахстана, где развито отгонно-табун-ное содержание животных, сопряжена с определенными трудностями. •

К тому же исследованиями В.В.Петровского, С.Х.Хамивва (1974) установлено, что в хозяйствах Атрауской (Юрьевской) облает* Казахстана цшриулируют наганинорезистентные расы трипаносом.

Многолетняя практика также показала, что полное оздоровление неблагополучных по трипаносомозам хозяйств с помощью наганина при отгонно-табунном содержании животных практически невозможно.

В специальной литературе приводится достаточнее количество райот, посвященных проблеме изучению трипаносомозов. В то же время важные аспекты диагностики, патогенеза и особенности эпизоотологии в Казахстане изучены недостаточно.

Рекомендованные ранее химиопрепараты для.лечения и профилактики трипаносомозов животных в' современных условиях оказались неэффективными.

Согласно инструкции для прихизненой диагностики трипаносомоза лошадей из серологических тестов использует на практике реакцию связывания комплемента (РСК). Однако практика показала, что эта реакция слабо-чувствительна и не выявляет всех больных животных. В связи с этим возникает необходимость совершенствования существующих и разработка новых, более эффективных методов диагностики трипансомоза<

Исходя из вышеизложенного можно констатировать, что ранее разработанные меры борьбы с трипаносомозами животных в условиях Казахстана недостаточно эффективны в нэ всегда выполнимы.

Изучение особенностей краевой эпизоотологии, патогенеза, изыскание эффективных средств борьбы с трипаносомозами животных являются актуальными для разработки систем научно-обоснованных мероприятий.

Цель и задачи исследований

Целью наших исследований явилось на основе более глубокого изучения краевой эпизоотология и паразито-хозяйндахвзаймоотношеши усовершенствовать методов Диагностики, лечения в профилактики.

Для достижения этой цели были поставлены следующие задачи:

1.'Выявить эпизоотологические особенности трипаносомозов лошадей и верблюдов в различных природно-климатических зонах Республики Казахстан.

2. Выделить полевые штаммы трипаносом и изучить их биологические свойства,

3.Изыскать пути совершенствования и изготовления новых средств и метода диагностики трипаносомозов животных.

4. Разработать методы экспериментальное воспроизведения трипаносомозов и изучить некоторые вопросы иммуногенеза и патогенеза.

5.Усовершенствовать систему мероприятий по профилактике, лечению и оздоровлению хозяйств от трипаносомозов животных.

На2чтая_шшша_работа. Установлены особенности -эпизоотического процесса и.степень распространения су-ауру верблюдов и случной болезни лошадей в некоторых зонах Казахстана.

Впервые в Казахстане выделен шташ возбудителя случной болезни лошадей, адаптированный к кроликам, и изучены его биологические свойства. i

На основании патоморфологических исследований, впервыj установлено по лики ст оз но 8 поражение яичников у кобыл и деструктишо-неКротические процессы в семенниках у жеребцов при хроническом течении случной болезни.

Выделены полевые штаммы возбудителя су-ауру верблюдов и изу-#

чона их чувствительность к различным химиотерапевтическим препа-

1 • ' .

ра?ам. Подобраны наиболее эффективные трипаноцидные препараты для лечения и профилактики трипаносомозов животных.

Разработан новый способ постановки непрямой реакции ямцуно-флуоресценции (НШФ) для диагностики трипаносомозов тавотных, В качестве антигена использгван трипан^оомшй эритроцитарный диагностикам. ( A.C. СССР № 15633Ьэ от 06.01.1030 г.)

Разработан новый способ диагностики трипаносомоза лошадей -реакция связывания лошадиного комплемента (РСЛК). РСЛК сочетает в себе чувствительность и специфичность реакции агглютинации и РСК. На указанный способ диагностики трипаносомоза лошадей получено свидетельство Всесоюзного Ассоциативною,комитета изобретений "Приведения" (С.» 003571I от 14.02.1992 г.).

Определена диагностическая ценность НШФ и РСЛК при трипаносомоза* животных и выявлена высокая эффективность этих реакций в сравнении с РСК.

Разработан способ отделения трипаносом от форменных элементов крови для приготовления антигена. (A.C. СССР * I63I43I от CI.II.1990 г.). ,

Изучен иммункмй статус, динамика Т- и B-систем лимфоцитов при трипаносомозах животных.

Разработаны более эффективные средства химиотерапии и химио-профилактики трипаносомозов животных, определены дозы и кратность введения препаратов.

Разработан? схема оздоровления хозяйств от трипаносомозов животных в зависимости от эпизоотического состояния и условий содержания. Доказана возможность более быстрого оздоровления хозяйств от случной болезни лошадей при использовании разработанных нами диагностических и лечебно-профилактически* мероприятий.

Практическая ценность. Изучение эпизоотической ситуации трипаносомозов в разных регионах Казахстана с учетом технологии содержания животных дает возможность научно обосновать лечебно-профилактические мероприятия.

Разработанная методика постановки НШФ при трипаносомозах животных вошла в состав методической рекомендации по изучению и разработке мер борьбы с протозойными болезнями животных, утверж-ценноР 30.IÜ.I9i..I г.' отделением ветеринарии ВАСХНИЛ.

Трипаносомный эритроцитарный диагностикум, используемый в качестве антигена для НРИФ, обладает высокой чувствительностью, стабильностью и может быть применент для диагностики трипаносомозов.

Использование реакции связ'-вания лошадиного комплемента (РСЛК) И непрямой реакции флуорес "лрующих антитзл для диагностики случной , болезни лошадей позволяет в 2-3 раза повысить по сравнению с РСК выявление больных лошадей, что намного улучшает эффективность оздоровительных мероприятий.

Применение нового способа отделения припаносом от форменных элементов крови на градиенте сахарозы повышает выход паразитарной массы и снижает затраты труда при изготовление трипаносомного антигена.

Результат^ патоморфологических исследований показал, что одной из причин яловости кобцл при случной болезни является патология органов половой ясферы. Поэтому целесообразно исключить из использования в воспроизводстве лошадей больных хронической формой случной болезни.

Рекомендован для лечения и профилактики трипаносомоза лошадей более эффективный препарат - азидин. Материалы данного предложения вошли в состав "Наставление по применению азидина (берени а, батризи-на) для лечения и профилактики случной болезни однокопытных", утвер-зденное ГУВ при Гос. комиссии Совета Министров СССР по продовольствию и закупкам 3.12.15Э0 г.

Применение данного препарата нак ого облегчает труд ветеринарных работников и позволяет в короткий срок оздоровить неблагополучные хо'яйства от случной болезни лошадей.

Разработанная система мероприятий по борьбе со случной болезнью лошадей была рекомендована научно-техническим советом Госагропрома КазССР 07.07.1988 г. для практического использования: Применение

этих мероприятий в хозяйствах неблагополучных по случной болезни лошадей обеспечивает оздоровление поголовья в течение 1-2 лет. Основные положения этих предложений вошли в инструкцию о мероприятиях по предупреждению и ликвидации случной болезни однокопытных, утвержденную ГУБ Госкомиссии Совета Министров СССР по про до во ль от-* вию и заяупкам 12.11.1990 г.

Апдобах|ия_2аботы

Материалы диссертации доложены на:

- республиканской научно-практической конференции по борьбе с паразитарными болезнями сельскохозяйственных животных, посвящен ной 100-летию со дня рождения К.И.Скрябина (г. Жамбыл, .1978 г.);

- Всесоюзной научной конференции "Состояние научных исследований и перспективы ликвидации протозойных болезней сельскохозяйственных животных" (г. Москва, 1980 г.);

- республиканском семинаре-совещании по борьбе с' инвазионным^ болезнями сельскохоь-дйственных животных" (г. Шымкент, 1981 г.');

- Всесоюзной научно-методической конференции "Перспектив!" ликвидации тряпансомозов лошадей и верблюдов (г.Фрунзе, 1985т.);

- Четвертом съезде Всесоюзного общества протозоологии (г.Ленинград, 1987 г.);

- Всесоюзной научной конференции "Возбудители и переносчики парзитозов и меры борьбы с ними" (г.Ташкент, 1988 г.);

- республиканской научно-производственной конференции "Борьба с паразитарными болезнями сельскохозяйственных животных

в Казахстане" (г. Павлодар, 1988 г.);

- республиканской научно-производственной конференции по борьбе с паразитарными болезнями сельскохозяйственных животных (г. Шымкент, 1990 г.);

-координационных Советах по' ветеринарии ВО ВАСХНИЛ (1986 -'- 1991 гг.);

- заседаниях Ученого Совета КазНИВИ (I975-I99I гг.).

Пубсткация. По теме диссертации опубликовано 26 печатных работ.

Объем и структура дисертации. Диссзртация изложена на 301 страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов, собственных исследований, заключения, практических предложений, списка литературы 'отечественные и зарубежные) и приложения. Иллюстрированы 15 рисунками, 27 таблицами и -7 схемами.

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛВДВАНИЯ I..Материал и методы исследований

Работа проводилась в I975-I99I гг. в лабораториях КазНИВИ и в хозяйствах Алма-Атинской, Талды-Курганской, Джамбульской, Шым-кентской, Кзыл-Ординской, Кустанайской, Джезказганской, Уральской областей Республики Казахстан.

В опытах использовано 96 лошадей, 24 осла, 586 кроликов, 215 морских свинок, 5840 белых мышей и обследовано 7500 лошадей и 3993 верблюда.

Объектом изучения и заражения подопытных животных служили: 2 "полевых штамма возбудителя случной болезни лошадей, выделенные от естественно больных' животных из неблагополучных хозяйств Алма-Атинской и Талды-Курганской областей; лабораторный тгтлТ. ¿qiùpiiduxi

полученный из Омского НИВИ; 6 полевых штаммов возбудителя су-ауру, выделенные от естественно больных верблюдов и лошадей из неблагополучных хозяйств Шымкентской, Джамбульской и Кзыл-Ординской областей.

Штаммы трипаносом поддерживали на морских свинКах, кроликах, яошадях-донорах и на белых мышах. Поле, ой штамм возбудителя случ-

а

ной болезни лошадей поддерживали в основном на кроликах-самцах, путем регулярного интратестикулярного заражения здоровых кроликов через каждые 15-30 дней в период роста паразитемии в семенниках кролика-донора.

Для заражения подопытных животных полевым штаммом Т-в^и! из семенников инвазированных кроликов брали пунктат (инъекционной иглой со шприцем) в количестве 0,1Г0,5 мл, разводили физиологическим раствором 1:5 и вводили животным подкожно, внутрибрю-шинно, интравагинально, интратестикулярно, интрауретрально и т.д.

С целью изучения эпизоотической ситуации трипаносомозов' животных анализировали данные ветеринарной отчетности. В неблагополучных хозяйствах имеющиеся поголовье верблюдов или лошадей подвергали клиническому и выборочно микроскопическому и серологическому исследованиям. Анализировали технологию содержания животных, методы организации и проведения случной компании.

Микроскопическое исследование мазков крови или раздавленной капли при су-ауру проводили путем просмотра их под световым микроскопом, а при случной болезни - соскоба, взятого из половых органов жеребцов или кобыл. При этом степень паразитарной реакции устанавливали путем подсчета паразитов в одном, ста, двустах, н пятистах полях зрения микроскопа.

Форменные элементы крови подсчитывали на приборе "Пикас-кеяь", гемоглобин определяли по Сали в гЖ.

Реакцию связывания комплемента ИСК) ставили согласно наставления по постановке РСК при случной болезни и су-ауру лошадей. •

Реакцию'непрямой гамагглгтинации (РЫТА) испытали при трипа-

носомозах животных по обще принятой мето,.;ике. Трипаносомный эри*

троцитарный диагностикум готовили в различных вариантах.

Реакцию флуоресцирующих антител (РФА) отавшш в непрямом варианте по методика .Уе11ег иСоопз (195<'. Печенную сыворотку против сывороточных глобулинов животных (кроликов, лошадей) подучили из института эпидемиологии и микробиологии имЛ.Ф .Гамалея АШ РФ.

Красящий титр антивидовой меченной сыворотки определяли методом двойной диффузии в агаровой геле по Оухтерлони (1948). Агар готовили методом, описанным, в руководствах Л.Д.Зильбер, Г.И.Абелев (1962).

Реакцию связывания конглютин*друщих комплексов (РСКК) ставили по методу Т.Сайдулдина (1981).

Для иммунологических исследований лимфоциты выделяли в градиенте плотности фекол-верографина. Т-лиыфоциты определяли методом спонтанного розвткообразования по общепринятой методике. Ранние или активные Е-РОК (А-РОК) подсчитывали сразу, без инкубации на холода. Содержание В-лимфоцитов оценивали методом розеткооб-разовааия о вричррадиша бака,"нагруженными антисывороткой к ниц и комплементом (ВАС-РОК). Полученные данные обработали статистически по методу Н.В .Садовского (1975).

При патолог анатомическом вскрытии иосдедоваля паренхиыотоа-ныа органы, лимфоузлы, пол.овые органы, головной и спинной мозг. Из воех органов готовили мазки-отпечатки.доя микроскопического исследования.

Патматериал фиксировали в Ю$-ноы растворе нейтрального формалгаа, жидкости Карнуа, 96° спирте. Парафиновые срезы окрашивали по общепринятой методике.

Гистолг' Шоскую обработку материалов, полученных от лошадей проводили совместно с ведущим научным сотрудником лаборатории патоморфологш и электронной микроскопии КазШШИ К.А.Кашкинбао-выы.

Лечебно-профилактическая эффективность хишютерапевтичаских прзпаратов определялась по общепринятой методике на подопытных аивотных. При этоы били не шатаны различные дозы препарата Сот минимальной до лечебной). Эффективность препаратов'устанавливали по результатам клинического, микроскопического и серологического иооледовалий зиьотшх.

2. Эпизоотическая ситуация трипаносоыозов животных в некоторых областях Казахстана

-Результата наших исследований, проведенных в течение 1976-I9S.Í гг. и анализ ветеринарной отчетности по заболеванию лошадей и верблюдов трипанооомозами за период I98I-I99I гг. показали, что эта б<мшзни распространены широко на территории Республики Казахстан. Причем доминирующим является случная болезнь лошадей. В зависимости от количества поголовья в табуна и технологии содержания процент заракенности аивотных варьирует в различных зонах от 0,6 до 46,7$. В шго-в ост очных и сбвзрных зонах республики ■с поголовьем 100-600 лоиадей трипаносомоз выявлен у 1,6-

21,1% яишотны.:, В южных а центральных зонах, гдо поголовье в табунах превышает 500 и более ., болезни зарегистрирована у • 0,6-46,7$ живслшх. Более широко распространено паразитог эситель-ство. Средний показатель заракенаости лошадей случной болезнью

в 7-ми областях республики, относящихся к 4 природно-географиче^-ким зонам составил - 13,0"?. В результате многолетнего изучения случной болезни лошадей в неблагополучных зонах Казахстана установлено, что Ьсновной причиной широкого паспространенип Селезни в хозяйствах является несвоевременное ил I неполное проведение диагностических и противоэпизоотических мероприятий. Случная болезнь лошадей получила особенно большое распространение в. хозяйствах с поголовьем 1000 и более лошадей, ^де табуны не сформированы по половозрастным группам и нат достаточного контроля в проведении случной компании.

На юге Казахстана су-ауру вербявдс-з имеет широкое распространение в ряде хозяйств Шымкентской, Кзыл-Ординской областей и наносит значительный ущерб верблюдоводству. В неблагополучных по су-ауру хозяйствах Шымкентской области нами выявлено 0,4-48,9% больных верблюдов, в Кзыл-Ординской - 28,3-32,7% и в Джамбулъской (единственном неблагополучном хозяйстве) - 53,5%. То петь заболеваемость верблюдов су-ауру в разных хозяйствах не одинакова и варьирует от 0,4 до 53,5^. Средний показатель заболеваемости верблюдов в южных зонах республики составил - 15,655.

Исследования показали, что основными причинами распространения болезни являются неполноценное проведение общепрофияактических мероприятий, а также наличие в неблагополучных по су-ауру хозяйствах (местностях) наганиноустойчивьгс рас возбудителя.

3. Возбудители трипаносомозов животных

3.1. Выделение и адаптация полевых штаммов случной болезни лошадей

Для выделения полевого штамма возбудителя случной болезни,, различны® виды животных были заражены соскобом из половых органов

спонтанно больных лошадей разными методами.

При многочисленных попытках выделить полевой штамм Тгур. еди1регаш!1 , только в двух случаях заражение лиэотных увенчалось успехом. В 1-ом случае удалось заразить интравагинально осленка двухмесячного возраста. В последующих опытах от нвго-интратестикулярно кроликов-самцов и в результате был выделен "Алма-Атинский штаны" трппаносом. Во Я-оы случае удолооь заразить интратастикулярно кролика, интравагинально жеребенка и был выделен "Талды-Курганский штамм" возбудителя. В дальнейшем тра-паносош перепрививалиоь через тестис кроликов путем регулярного перезаражения их.

При выделении полевого штамма возбудителя случной болезни лошадей от естественно больных животных было установлено, что наилучшими рвцепкэнтаыи являются жеребята, ослята и в меньшей степени - кролики-самцы.

Тачание болезаи у* кроликов характеризовалось отеками семенников, геморрагический воспалительным процессом и некрозом кожи мошонки. При пункции отечных семенников вы с ту дала серозная кид-кость, содержащая трипаносомы в различной степени интенсивности паразитеыии. У одних кроликов наблюдалось более острое течение болезни с сильным поражением половых органов и нервной система, у других - незначительные отеки семенника, которые заканчивались полным в оздоровленной. У отдельных кроликов установлена невосприимчивость к трипаносомозу.

Дальнейшие, исследования показали, что выделенные штаыш хрипаноооы от спонтанно больных лошадей из неблагополучных по •случной болезни хозяйств Алма-Атинской и Талда-Курганской областей оказались чувствительными к ниганину.

3.2. Выдалсшиз полевых штаммов возбудителя су-ауру и изучение их: резистентности к наганину

Полевыа штаммы грипаносоы (оу-ауру) били выдалагш путем подаояного зарагания морских свинок, щеплт или кроликов кровью спонтанно больных оу-ауру животных. В наиболее неблагополучных до оу-ауру верблюдов хозяйствах Шымкентской, Кзыл-Ординской и Ддацбулской областей Казахстана были выделены е штаммов трипано-ооу от больных 2ИВОТ1ШХ.

Наши исследования показали, что вса выделенные полевые штаы-131 возбудителя су-ч*уру из паблагополучячх хозяйств указанных областей оказалшь устойчивыми к наганину. Кроме того, лвчешш больных су-ауру верблюдов в южных золах республики на давало ожи-дазмого терапевтического эффекта в тачание рада лет. Это очань ванное обстоятельство доказывает о циркуляция па юга Казахстана нагатшно-устойчнвах рас возбудителя су-ауру.

А. Клиника ж патоыорфологичеокиа изменения • при экспериментальной случной болезни лошадей '

При случной болезни наиболее актуальным является изучение патвлогоанатоыических и патоыорфологическнх изменений половых органов, иыещих большое значение как для диагностики, так и дяя определения воспроизводительной функции организма.

Для опыта заразшш 10 лошадей полевым штаммом возбудителя с^учноЗ боДезни. У этих кобьш. через 7-10 дней доела заражения появилась припухлость половых губ, вальвы и незначительные истечения из влагалища. Пря микроскопическом исследовании оосяобсэ из слизистой оболочки половых органов в те аз срока йбнарукаиы »ряадноооыы.

В последующие периоды болезни отмечали появление узелков я красн::х пятен на кока половых губ и слизистой оболочка влагалища. Коаа половых губ была депигыентирована.

С целью паталсгоанатомическаго и лагсморфояагического исследования внутренних и половых органов бил проведен убой (по 3 головы) больных случной болезнью лошадей на 20, 95 и 173 сутки поело заражения.

При этоа у лошадей, убитых через 20 дней поело заражения1 отмечали полнокровие и слабил оток субэпителиального слоя дарудных половых органов. Паразиты была обнаружены в слизистых оболочках уратры, влагалища, околовлагтлищшх и падвшашшх лимфоузлах.

У лошадей, убитых через 95 суток после заражения, наблэдадш увеличение регионарных лимфатических узлов половых органов и яичников о иноивственныыи или ячеистыми фолликулярными кистами. Три-панооомы была найдзпы в повархностно-шейнЬы лимфоузле, молочной »едеза, в тимусе и в яичнике. '

У животных, убитых чероз 173 суток посла янвазировапия, ispo-ые вытеописашшх изменений, установили выраженные гоаоррагшескш воспаления яичников с обширными кровоизлияниями. Паразиты били обнаружены в глубоко-паховых, поверхностно-шейных, бронхиальных и заглоточных лимфатических узлах, в печени, почках, яичниках, а у омога животного - в аадкооти желудочков головного ыозга.

изучения паталогоанатоыичвоких изменений при случной болезни ;шхрауратралшо заразили 9 жорабцов полевым шишом возбудителя. У всех хшвотных на 6-15 сутки посла заражения а соскобах из уретра обнаружены трипаносомы. На 15-40 суши у 7 животных появились отеки препуция. Дерабцов забивали ио 3 головы.на 3, С и II кесяпы посла заражения в дшпыике болезни.

Репульгаты исследований показали, что наиболее глубокие па-

тологическиа изменения отмечали в семенниках и его придатках, которые характеризовалисьчразвитам двустороннего абцесса у всех 3-х яеребцов. При гисгологачосюга исследованиях, семенниках и их придатках обнаружены обширные некротические очаги паренхимы. Нот сомнений в том, что указанные патолс ягееские изменения обуславливают склеротические процессы и атрофию семенника н тем са-мш нарушают процессы сперматогенеза.

Таким образом, при случной болезни жер~1цов, такяе как у кобыл, основные патологические) изменения происходят в репродуктивных органах, особенно при длительном течении инвазии.

Полученные нами результаты позволил считать, что больные случной болезнью лошади, особенно в более поздние стадии инвазии, меяео пригодны к-воспроизводству. Поэтому считаем, что при проведении лечебных мероприятий необходимо дифференцированный подход в каадом конкретном случае. Лошадей с хроническим течением случной болезни, на наш взгляд, целесообразно сдать на мясо. И наоборот, больных'лошадей в начале инвазии в зависимости от племенной ценности можно подвергать лечению.

,.5, Некоторые-вопросы иммунитета при трипаносомозах животных

Из литературных источников известно, что при трипаносомозе угнетен не только гуморальный, но п клеточный иммунитет. Для впяс-Я8КШ1 иммунного состояния животных каш проведено исследование клеточного иммунитета в динамике заболевания при су-ауру морских свинок и случной болезни лошадей.

Анализ данных, полученных до заражения показал, что исходный уровень Т-клоток, включающий А-РОК и Е-РОК, составил в процентном содержании 69, а уровень В-клеток, включающий две субпо-пуляцки (ЕА и ЁАС) - 65 и 51, ^ соответственно. Трипаносомоз у морс-

них свинок вызвал существенные сдвиги в Т- и В-сиотемах иммунитета. Уже через 10 суток после заражения наблюдали снижение уровня Т- и В-клеток ио сравнении с исходным. Так, у Т-клеток он оос-тавия 56$, у В-клеток - 45$. Уровень этих меток понизился на 19,2 и 26% соответственно.

Через 20 суток наблюдалось дальнейшее снижение обоих популяций Т-клеток до 46 и 49$, что на 26$ ниже исходило уровня. Уровень ЕА-РОК оставался прежним, а содержание Е/С-РОК незначительно повысилось по сравнению с донными, полученными через 10 суток после заракения.

Через месяц после зара&ениг прослеживалось незначительное повышение уровня Т-клетоа и резкое сшшшие уровня ЕДЗ-клаток (до 23$), что на 39$ ниже исходного уровня.

Известно, что В-лимфоциты являются предшественниками плазматических клеток - продуцентов антител. Процессу активного антп-телообразования характерю повышение уровня В-ликфоцитов. В .данном случае снижение содервдния уровня В-клеток, видимо, можно объяснить острим течением патологического процесса при трипаносомозе лабораторных животных.

В дальнейшем были изучены в динамике количественные показатели клеточного иммунитета при случной болезни лошадей. Для этого 8 голов лошадей заразили полевым шташоы возбудителя случной болезни, а 3 лошади служили контролем. Анализ полученных результатов показал, что содержание Т- и В-клеток остается на уровне О 'значений, полученных от животных контрольной группы до А месяцев от начала исследований. Через 5 месяцев после заракения резко возрастает количество всех шшунокошетентных клеток. Количество Е-РОК увеличивается на 118$ но сравнению с данными шшотных" контрольно? группы, количество аЗ-РОК увеличивается на 108$, ЕЛС-РОК

гозрастает незначительно. Такое повышенное содержание иммуноком-петентнюс клеток сохранялось до конца срока исследований (до б месяцев).

Полученные данные свидетельствуют о том, что повышенное содержание иммунокомпетентных клеток при сручной болезни лошадей характеризует хроническое точение инвазии.

6. Диагностика случной болезни лошадей

Как известно, в практических условиях случная болезнь лошадей диагностируется на основании клинического осмотра животных, микроскопического и серологического методов исследования.

В результате многолетнего изучения случной болезни лошадей в неблагополучных хозяйствах республики нами установлено, что наиболее часто встречается у кобыл такие клинические симптомы, как отеки половых губ и вульвы, слизистое истечете из влагалища, депигментация в виде мелких пятен на коке половой щели. Возможен таю*е односторонний паралич лицевого нерва с отвисанием уха и нижней губы или поражение спинного мозга в виде паралича задних конечностей. У жеребцов-производителей в большинстве случаев болезнь протекает бессимптомно, лишь иногда возможны отеки препуция. Кроме того, проявлением случной болезни являются аборты и мвртворовдения у жеребых кобыл и сравнительно низкий выход жеребят в общих табунах. Заметной разницы в течении болезни в север-геых, южных и др. зонах ми не наблюдали. Степень тяжести инвазии также не зависела от породности животных.

Таким образом, при клинической диагностике случной болезни лошадей необходимо обязательное исследование состояния мочеполовых органов и нервной системы.

Для оценки эффективности микроскопического метода диагноста-

ки, наш исследованы вагинальные соскобы у 488 кобыл в неблагополучных по случной болезни хозяйствах, а также 25 лошадей, зараженных экспериментально. При этом, у спонтанно больных лошадей трипаносом удалось обнаружить всего в 3-х случаях. Необходимо . отметить, что паразиты в половых органах животных были обнаружены в конце или после завершения случного сезона (в конце мая и в ише). В эти же сроки года нам двадды удавалось вгчелить полевые штаммы трмвдйвсом от спонтанно больных "подседалом" лошадей.

'При экспериментальной случной болезни лошадей паразиты в соскобах чаще обнаруживались в течение 1,5-2 месяцев после заражения. В последующие'периоды возбудителей находили редко, периодически, а у некоторых животных они совсем не обнаруживались.

Эти данные свидетельствуют о том, что.паразиты обнаруживаются в мочеполовых органах чаще всего в начале болезни. А в отдаленные сроки обнаружить их практически не удается. Поэтому микроскопическое исследование на случную болезнь следует проводить в конце случного сезона или сразу после его завершения.

6.1. Способ отделения трипаносом от форменных элементов крови

Для приготовления трипаносомного антигена нами разработан способ отделения трипаносом от форменных элементов крови, путем центрифугирования крови с паразитами в градиенте плотности сахарозы.

Отделение трипаносом от форменных элементов крови белых мышей проводили в градиенте плотности сахарозы следующим образом. Гепари-низированную кровь е паразитарной массой смешивали с равным объемом оабуференного Физиологического раствора при рН 7,0-7,4.

В центрифужные пробирки объемом Ю мл вносили растворы сахарозы в различной молярное™. В первую пробирку вносили 2 мл 2,33 М

Гас хвора сахарозы и сверху наслаивали такое же количество 2,19 !,. раствора сахарозы. Во втору» пробирсу вносили 2,04 М и 1,90 Ы раствор сахарозы^в третью - 1,75 Ы и 1,46 И. раствора и в четвертую пробирку - 1,31 М и 1,16 Ы расгэоры сахарозы. Затем во ваз пробирки сверх градиента внос! ш пастеровский пипеткой 4 мл разбавленной крови. Пробирки помещали в центрифугу и центрифугировали при 1000-1200 об/мин в течении 5-10 мш.

Выход паразитов в 1-ой пробирке был очень низким и на превышал 10$, во 2-ой и 4-ой пробирках - трипаносомн и форившша элемент крови распределялись в равных соотношениях. В 3-? пробирка тряданосош концентрировались между слоями эритроците® и плазмы, образуя белоз кольцо.-

Содзржаниз тркпаиосом в нем составило 60-90$, присутствие форменных элементов крови незначительное (до 10$).

Таким образоа, наиболее оптимальной концентрацией сахарозы дая отделения паразитов являются раствор) с полярностью 1,46 и 1,75.

Посла центрифугирования белое кольцо паразитов отсасывал,; пастеровской пипеткой. Паразитарную массу отмывали от распора сахарозы забуферешшц физиологический растворен СеН 7,0-7,4) путам однократного центрифугирования при 2500-3000 об/мин в течение 10-15 минут.

Таким образом, прн иснояьзованиь. предлагаемого пак л способа внхлй паразитарной. иасси составил 80-90$ в отлетав от кяваотзнх раяав оаоообоз (50-60$). Прадаагавшй сносов отделения зрпаакесс« о^ формешшх элементов крови являязся ароотаи, менее грудоедоин цитодои а аоавогяв5 получить высоке® адход паразита рией масса (А.С. » 1631431).

Полученные таким образом трипаносомныо массы использовались в дальнейшем для изготовления антигена, эритроцита рных дкагностикуиов и т.д.'

6.2. Серологические метода диагностики

6.2.1. Непрямая реакция шаунофлуорасцепции (НРйФ) при случной болезни лошадей

Для изучения чувствительности, специфичности НРШ и использования ее для диагностики случной болозни лошадей били отработаны режимы постановки реакции.

Вначале диагностическая значимость НРЙ5 била.определена в эксперименте па кроликах. Опытные кролики были заражены интра-тестикулярно полевым штаммом возбудителя случной болезни лошадей.

Следует отызгить, что по НРИФ антитела обнаруживались па 1416 сутки после заражения и регулярно выявлялись в течение 55 суток (срок наблюдер^я). По К21С из & у 2-х кроликов отмечены сомнительные результаты и только у 1-го был полиаиоль-заый результат.

Далее определяли диагностическую ценность НРЙФ при экспери-ыенгильн ой с л у чп ах $ схл. 6 зн я лошадей. Сыворотки кровиЧяштных лошадей положительно ¿¿гагарсзалк на случную болезнь по НРЩ> через 10-14 суток поело .¿.¿ссания с последующим нарастанием титра антител до 1:64 и 1:128. Положительная реакция сохранялась в течение всего периода инвазии, тогда как сыворотки контрольных животных постоянно показывали отрицательные результата. В то время

по ЮК только а трех случаях 'получены сомнительные показания. Дальнейшие исследования показали, что антитела из сыворотки крови бсльлых лезадей исчезают на 5 и 6 месяцы после лечения тр:ша-к ог;.1дн;;м врвзаратой.

Произволе твешше кспнтанкя НРИФ пр-л. слугой болезни локадэй так.« доказали ее. высокую чувствительность. При исследовании 448 проб сывороток крови лопадей из неблагополучных по случной болезни хозяйств республики, по ИР® полохптельпо реагировали сыворотки крови 142 лошдой, а по ВЗК только - ¿2 проб.

Таким образом, ЫРНФ является более чувствктолышм а эрЗчк-тившш тестом при диагностике трипаносомоза лошадей по сразнешп с РСК.

Однако НРгёЬ не наша практического применения из-за отсутсг-бгя стабильного тркпаносомпого антигена.

Усовершенствование реакции непрямой иг-муно^луорасценции для диагностики трипаносомоза-

Для обеспечения стандартности, чувствительности я спецка:п-ности НРИ5 и яспользсзлпия ее для массовых исследований япвотных на тряшгсгйсцоз бала изучены способа получения стабильного тр'.ша-нооомпого антигена.

Учитывая прегмуцества зритроцатариых диагностикуыов в реакции непрямой гемоагглитинации, вами были проведены работы по выяснении возможности использования в НРй$ в качестве антигена граданооомаый эрктрофитарный диагностику». Антигенный эритропи-таршй диагностируй готозили такао, как для ИГЛ по общепр^ня^й методике.

Для постановки реакции готовили .тенкиа мазки на обезаиренпо!'. предметном стекле из эригроаатоэ сенсибилизированных трппавосоы-

антигеном. Мазки (актива) выо/нЕзали на воздуха и фиксировала охлажденным ацетона.; в течаат 10 сек. ?вадсфш стэвкяа по

общепринятой методика.

13 дпльнейхец была .иртт активность и чувствительность

эрггроцатарйого трипаносошюго диагностикуыа в сравнении с кор-пу скуля риш антигеном в реакции ¡-.»прямой ишунофлуорасцвнции при случной болезни лошадей. Эритроцитарный диагностику»! при этом иодользовали в свежем состоянии в посла хранения в течение 4-х ызояцав.

Результата реакции показали, что с цоиощью трщщносомного эритроцетараого диггностакуыа и сдаю выявить 94 больных

трипаносомоз си аивотнцх. Вркмерно такт so результаты показам в реакция корцу окулярные антигены С трипаиосомы в мазках крови). Сыворотки здоровых лошадей, кроликов и овец (гетерогенные) реагировали отрицательно в HP MS со воаци антигенами. Эритроцитаркы! тршаносомннй даагноотшсум хранившийся при 0-4^ в течения 4-х месяцев, в НРШ доказал такую za активность, как и свежеприготовленный.

Такш обрааок, было установлено, что эритроцитарный гркгшно-ошшый диагноотнкуы ысйшт пршенятьоа в качества антигена дга поозгановки рзакции непрямой иммунофпуорвоценции (A.C. Л I5633S9).

6.2.3. Реакция авязыэаякя кшядатЕнкрутщнх •

кошлексоз при случной болезни лоиадай.

Наряд? ß непрямой рзакцаей фдуоросцирущкх апииел шши было асгштйео ари случной болезни доаздей реакция связывания конглиги-кврущвн. к сволок с оз (НЗКК). РЗКК ставила по методу Т.С .Сайдадк-не (1981). В начала pessaä постановки PGKK при случяо! бодезпи ясдадей бил отработан с позитивной стандартной трипазосоаной сы-эороксой и сыворотками здароаах аивовшх. Затаи ЮКК испытывала б сраваениа о РОК пра экспериментальной случной болазни лошадзй.

Исследования поучзеля,. ето^даух^^адвй антигсла по ШКК вышшшюь иачшад о 2& суток, у - о 76 о/ток и j одного -95 еутск :& гятрах 1:5 в. обнаруживались до конца ошзта. По ВС К

антитела в титра 1:5 били обнаружены у двух лошадай начиная с ВЗ суток, у двух - с 1'*А суток поело заражения, а у двух животных комплемвнтосвязываицие антитела ни в одном случпе не били выявлены.

Всего было исследовано III проб енвороток крови подогштннх д.гаот1Шх. Из них.положительно реагировали по PC К а по

РС1Щ - 48,6$.

В дальнейшей било проведено производственное испытание КЗКК при случной болезни лошадей. Объектом исследования слузили '¿'¿О проб енвороток крови лошадэй^получзиных из неблагополучных по случной болезни хозяйств Джезказганской области. ¡1з указанного количества проб сывороток крови лошадей по РСК положительно ротировали на случную болезнь только 17, по HP® - 44, а по РСКК -38 енвороток.

Результата проведенных работ показывают, что РСКК является более чувствительным тестом по сравнению с РСК.

6.2.4. Усовершенствование некоторых серологических тестов дтя диагностики тршано-сс&оза лошадей

Хотя РСКК гораздо чацэ выявляет полозительнереагируицих животных при случной болезни лошадей, чем PCX, чувствительность се не превышала 48,6$.

С целью повышения чувствительности реакции и стабильности ее результатов памп совместно с профессором Т.С .Сайдулдшши и аспирантом Г.Ильгег-баевой разработал серологический тест для диагностики трипаносомоза лошадей на базе FCK и ГСКК, названный реакцией связывания лошатршого комплемента 11СЛК), основанный на взаимодействии комплекса антиген-антитело с комплементам лоиада.

• Сущность реакции заключается в том, что при образовании в реак-

циояной смеси каиллокса антиген-антитело, кошламепт соединяется о ниц и индикаторная систана, состоящая из конглютииииа и эритро-цктсм барана, сенсибилизированных гемолизином, остается без изменений. При отсутствии антител в исследуемой сыворотке, комплемент лошади остается свободным и реагирует с коакшгишшоы, в результате чего происходит склеивание или агглютинация эритроцитов в индикаторной сисмкг. При постановке КПК в испытуемых сыворотках крови лоааде2 осботвегшый коиплаызат должен быть полностью кнак-тивироаак.

Опит показала, что при сравнительном носледовааии Г71 сывороток экспериментально больных случной болезнью лошадей по КЖ, РСКК я РОЛК, положительный результат по ГОК бил отмечен в 62 случаях (средой! титр 1:10), по РСКК - в 23 случаях (сраддий титр 1:20), а по РСЛК - в 144 случаях Ссрэдаий тигр 1:40).

Чувствительность КЖ составила 36,2$, РСКК - 57,3$, а РСДК -64,2$.

Таким образом, рззультаты .этого ошта показали, что реакция связывания лошадиного коишгаыепта от. аз ала Ьь наиболее чувствительной ж специфичной при случной болезни лсшадзй по сравнению с ГСК и РОКЕ. По своей чуЕотаитедьнос?Е РСЛК на уояупает реакции флуоресцирующих антител и манат быть ж}польаована дщ диагностики трипаноооыоза лошадей.

7. Терапия трипаносоыозоз гнзотшзх

7.1. Испытанна аздцда при случкой болазак лошадзй

Для изыскания менее токоичннх и эффективных оредотв лечения грипаноосиозсш зшвотш*" нами были испытааа разлшше акгипа'рааа-гаршю прааараты» Среда них наиболее доотуввш в аффективный

оказался азидин. Для определения оптимальной разовой дозы прзпа-рата, опыта проводили па послах, экспериментально заражении! возбудителями су-ауру верблюдов и случной бола а пи ло-адзй. Исследования показали, что при трипаносомозе ослов ^зовой эйоятив-пой терапевтической дозой азидана является 5 да/кг иассн.

Затем азидин испытчвали па экспериментально зараязнных случной болезнью лошадях. 4-х больных случной болезни) кобал па 44 день поело заражения лечили азидинда в дозе 5 мг/кг массы однократно, 3-х бальных кобыл' - азидином в дозе 3,5 иг/кг массы тола двухкратно и 3-х кобыл - паганиноа согласно инструкции. Через 10-17 суток теле'лечения отеки половых органов всех лошадей рассасывались. При микроскопическом исследовании соскобсэ из 'влагалища всех локадей ни у одаого животного трияанооомы па обнаружены. После лечепия гшвотних постепенно снижался титр антитзл в сыворотке крови. Через 5-6 месяцев (после лечения) сыворотки крови всах опытных животных отрицательно реагировали по НИЭ на случпув болезнь. ' '

В результата проведенных работ установили, что азидин в доза 5 мг/кг массы при однократной применении ила в доза 3,5 ыг/кг массы при двухкратно:* введении обладает лечебной эффективностью.

В течение ряда лет в неблагополучных по случной болезни лошадей хозяйствах рэспублкки было подвергнуто лечении азидшоц з» доза 5 мг/кг массы 583 больные и подозреваемые в заболевании лошади. Было установлено, что однократное внутримышечное введение препарата в указанной доза обеспечивает выздоровланиз ашотннзе вт трипаносомоза.

7.2. Азидин при су-ауру верблюдов Терапевтическая эффективность азидана изучена в опытах на

3? естественно больных оу-ауру верблюдах в неблагополучной по этому заболеванию хозяйстве Шшк .втской области." Больных су-ауру верблшдоэ при вараненных клинических признаках лечили ази-дашсш в дозв о ш?/кг масюа телд одаонратно. Через 3040 шшут после введения препарата наблюдали потливость, тремор шшц и лаяаназ гивотных, которые проходили чероз 3-4 часа. При повтор- • кет осмотра этих животных чврв*з^~йосяцев, они били в удовлетворительном состоянии, без клинических признаков су-ауру. Групповая . бнопроба на сикхах показала отрицательные результаты. В другой неблагополучнее по су-ауру хозяйства Шамкенгской области было установлен у верблюдоа смешанное течение су-ауру с дефалопино-зоа. 17 больных су-ауру а цефалопинозои верблюдов обрабатывали, оддовраыенно азидинсм и хлорофосом. Азидан. вводили внутршшшеч- . по в дозе 3,5 иг/кг двухкратно в 1% водном раствора. Носоглотку ороишли 3/2-водаыц раствором хлорофоса. Посла введения-азидина у варблвдеш появлялись аналогичные признаки воздействия препарата. Через месяц г.ослз лечения общее состояние аивотных стало удовлетворительным. Групповая биоароба на щенках показали отрицательные результата. . . . ■

Дале а из табуна били выделены 237 верблюдов, подозреваемые в заболевании- су-ауру. Их тоаз лечили азидиноа в указанной дозе. Вослз введения препарата варбяюдомаиш в количеотао 24 голов сразу ез абортировали.

Таким образом, азидкв при су-ауру варблэдов оказался иенве • природам, хотя обладает лечебной эффективностью. Азида оказы-

Еаэт на организм верблюдов токсическое воздействия, вызывая, абор-■ и, дрожание мускулатуры и другие не&елаталыша явления.

7.-3. Испытание пагагшио-азидиноз Л смеси при трипанос юдсзах животных

Постоянное удовлетворение иузд практической ветеринарии в новых трипанопвдшх препаратах реально но осуществимо, поэгоиу проблему ¡кшю частично реиать путем их коибкнированного.применения. К такпл конбжаппям относится, в частности, пагапино-азпдпновая смесь (НАС).

Крпсталло-олтичзскн! анализ и изучение УФ, 1СГ - спектров азидипа, нагашша по отдельности и их смесей проведенных на ка-фддро органической химии КазГ/ показал, что по своей структура нагашшо-азид-щовая смесь является не просто смесью исходах соединений, а представляет собой комплексное соединенно иекду молекулами азидана и паганина. На основании полученных гюзультатса они установили, что образование комплекса идет по - С - 0 группа« азидаша, к одаой молекуле азидана присоединяется дво молекула пагапша. Высушенная сиесь - кристаллическое вещество кзлтого ирета, в воде не растворяется.

Безвредность сшси определяли па белых шшах такта как нага-пип, по методу ГШИ Шосхва). Било установлено, что смесь в дозе 0,75 г/кг оказался совершенно безвредным для бэлйс мышей, тогда как от указанной дозы паганина допускается 100$ гибель.

■ Лечебауа здфзктгшпость НДС (сыеси) определяли на больных трипаносомозом белых мюпх и кроликах з различных дозах. Результат« опыта позазали, что НЛО,в дозе 20 яг/кг маесн излечивает больных белых шией, а в доза 10 мг/кг - кроликов.

Необходимо отпетпгь, что КЛС состоит из глодекузш паганина и азидипа. Поэтому, "начала нами была определена чувствительность нагашшоустойчивого шта:«.:а трипаносон к смеси. Опыты проводились в дпух вариантах на 60 белых тзах, зараженных пагашшоустоЗчл-

вими и наганяяочувствителышьш штаыыами тршшносоы. Результата ~ огшта показали, что нагадино-азид: ловая скесь оказывает одинаковое урмщисцядаоо действие на наганшо-разистениша и чувствительные штам1Ш тршаносок. Это позволило считать, что ВДС ыояат бить использована для лечения и профилактики су-ауру животных.

7.3.1. Испытание наганнно-азидинойвой сыеои

при случной болезни лошадей

Сыеоь азидиш о напшшоы в соотношении 1:1 исяыталн на б кобшш, зараженных возбудителем случной болезни. На 8-J2 дай посла заражения у кобыл отмечала отечность половых губ и слизис-тоо истечение из влагалища, содернацдее трипакосомы. По истечении 54 оутоа со дня заражения 5 больших случной болезнью кобыл лечила НАС в доза 15 иг/кг иаооы. Препарат вводили иодаоздо. Побочные действия препарата на наблюдалось. Через 15-20 суток клинические признаки болезни исчезли. Сыворотки крови леченных кобыл на 5 и 6 месяцы посла введения препарата по РСК-и НРйЬ показали отрицательные результаты. У контрольной кобылы отеки половых органов сохранились и во влагалища паразитов находилц периодически.

Подученные данные свидетельствует о терапевтической эффектаи-иооти снеси (Hiß) при случной болезни лошадей.

7.3.2. Испытание нагавипо-азидинозой снеси

при су-ауру верблюдов

В одаоы из неблагополучных по оу-ауру хозяйств Кзыл-Ордин-окой области нами было выявлено 89 верблюдов, иыедцях клкничео-кца болезни и 382 верблюда, подозреваемые в заболевании. Перед вачадоы лета наоекомых всех больных, подозрительных г заболевании, а также условно здоров''X верблюда» в количестве 850 голов с де-чебно-срофдлактичйской целью обработали ндганино-азидиновой смаоью

в соотношении 1:3,5. Препарат вводили животным внутримышечно в 1С# концентрации из расчета 3,5 ыд на 100 кг массы штатного. После введения препарата у животных побочных действий не наблюдали. При повторном исследовании всех животных черев 3 месяца клинически больных верблюдов не выявили. Групповая биопроба кровью ранее больных су-ауру верблюдов показала отрицательные результата.

Таким образом, было установлено, что паганино-азидлнозая омеоь оказалась эффективным препаратом и при су-ауру верблюдов.

7.3.3. Профилактическая эффективность наганино-азидиновой сызси

'Предварительные опыты на кроликах показали, что наганино-азидиновая спесь (НАС) в дозе 20 иг/кг массы предохраняет кроликов от заражения триианосомс,ш в течение 25 о уток (-.рок наблюдения) . • • .

Профилактическая эффективность сызои препаратов была изучена на в головах лошадей в дозах 10, 20, 30 цг/кг массы. При этом установили, что смесь в дозе 10 мг/кг предохраняет лошадей от за.а-аенил тршаносомаыи в течение 2,5 месяца Сорок наблюдения).

В опытах на 12 кобылах также были получены аналогичные результаты. Опытных кобыл по истечении 75 оутоя со времени введения наганино-азидиновой смеси в дозе 10 мг/яг не удавалось заразить возбудителем случной болезни.

В производственных условиях профилактическую эффективность НЖ2 изучали на жеребцах-производителях неблагополучных по случной болезни хозяйств. За 5-7 сутки до случки, условно здоровых и подозреваемых в заболевания 307 жеребцов 6 хозяйств о профилактической целью обработали смесью азидина и наганина в дозе 10 мг/дг массы, а затем их пустили в случку. Контролем служили 18 жеребцов

одного табуна, которые без профилактической обработки участвсша- ~ ли в случке. Опытных и контрольны); жеребцов-производителей повторю исследовали на случную болезнь по истечении 6 месяцев. При этом, среди опытных животных клинически больных жеребцов не выявили. Только у двух жеребцов отмечалась положительная реакций но. НР1Й и то в низких титрах.

А в контрольной группе лошадей выявлено 3 клинически больных жеребцов, которые одновременно реагировали положительно на случную бадезнь и по КЖ и по НР®.

Результаты праизводственього опыта показали, что наганино-. азидиновая ;месь в указанной дозе предохраняет жеребцов-производителей от случной болезни в течение случного сезона продолжительностью 2-3 месяца.

8. Оздоровление хозяйств от случной болезни лошадаЕ

Оздоровительные мероприятия проводились в стационарно неблагополучных по случной болезни лошадей 5-ти хозяйствах центрального Казахстана с учетом эпизоотической ситуации тршаносоаоза, . технологии содержания и с учетом дриродао-клшатических. особенностей региояа.

Перед началом случной компании проводили диагностическое обследование лошадей и разделили их условно на три группы: больные, подозрительные по заболеванию и здоровые. К больным отнеоли лошадей, именцих клинические признаки случной болезни при отрицательных результатах серологического исследования или же дающих положительные результаты по серологии при отсутствии клинических симптомов болезни. Подозрительными по заболеванию считали иивотных, имеющих неясные клинические признаки болезни при отрицательных ре-

зультатах серологических исследований, а так кв животных бивших в случке о больными. Животные, не имевшие отношения к неблагополучной груше и на бывшие в случке с больными или подозрительными по заболеванию лошадьми, считались здоровими.

Больных случной болезнью лошадей отдаляли от обдого табуна и подвергали лечению придином в доза 5 мг/кг массы, однократно. Излеченных животных после откорма сдали на мясокомбинат. Особо ценных племенных лошадей после излечения переводили в общий табун посла исчезновения антител в сыворотке крови.

Здоровых и подозреваемых в заболевании яарвбцов-производн-телей, п8ред началом случной компании за 3-5 дней обрабатывали с лечебно-профилактической целью наганино-азидиновой смесью. Подозреваемых в заболевании кобыл (за исключением яаребнх) тагов обрабатывали азидансм в лечебной дозе и пускали их в случку.

Животные, прошедщиа лечебпо-профилактичеокую обработку, оставались под гшстояш.ым ветеринарным наблюдением в течение года. При поголовном клиническом осмотре их после проведения лечебно-профилактических мероприятий на 5 и 6 месяцы клинически больных случной болезнью лошадей не обнаружили.

На второй год оздоровления, перзд начален ойучной компании, всех зхерабцов производителей всех 5-ти хозяйств исследовали на случную б-олезнь по ЮК, К2КК и НИЦ, При этом были выявлены в табуна двух хозяйств единичные положительно реагирующие по КШК и НРШ аерабцы, по без клинических симптомов болезни. Этих ке-ребцов (всего 2 головы) изолировали и после откорма они были сданы на мясо. Всех здоровых жеребцов перед случкой обрабатывали наганино-азидиновой "кесью в дозе 10 мг/кг массы. Яловые кобылы всех 5-ти хозяйств такие били отделаны и сданы на мясо. После ви-яеребяи кобыл, весь косяк, п слабительно реагирущих яаребцов-

производителей, обрабатывался азидиноы о лечебно-профилактической целью в той хе дозе.

По истечении 1,5 и ¡¿,5 месяцев после заве равняя случной компании конепоголовья хозяйств вновь исследовали на случную, болезнь лошадей. Ери этом клинически больных или положительно реагирующих ядвотных не обнаружили.

Результаты приведенных мероприятий показали, что в условиях Центрального Казахсвана, где развито табунно-отгоннов коневодство, проведенные каин схемы оздоровления оказались эффективными но борьбе со олучной болезнь^ лошадей.

Не об- одшо отметить, что поголовная обработка небольшого табуна лошадей азндиаои в дозе 5 иг/кг масок также позволила оздоровить 5 хозяйств от случной болезнн лошадей.

ВЫВОДЫ

1. На территории Казахстана случная болезнь лошадей и су-ауру верблюдов имеют значительное распространение. Средний показатель зараженности лошадей случной болезнью составляет 13,о£,

а верблюдов су-ауру - 15,67«.

2. Во всех неблагополучных по су-ауру верблюдов зонах рао-пубдшси распространены иаганиноуотойчивые расы триланосои.

Су-ауру верблюдов при смешанной инвазии о цефалопянозом протекает более остро и часто приводит к их гибели.

4. Наиболее восприимчивыми к возбудителю случной болезнн лошадей являются ослята, жеребята и в меньшей степени к ролики-оамцы. Эти животные могут быть использованы в производственных условиях дня о^опробы и при выделении полевого итамма возбудителя.

5. Тр.ц<7!носош ( т.еди1рег<1ищ) развиваясь в органах половой сферы у кроликов-самцов, вызывает такой же патологический про-

цесс, как при случной болезни лошадей (жьребцов).

6. Использование реакции связывания конглютинирупцих комплексов (РСКК) при диагностике случной болезни лошадей способствует выявлению положительно реагирующих животных в 2-3 раза чаще, чем РСК.

7. Непрямая реакция флуоресцирующих антител (НРИФ) для диагностики трипаносомоза лошадей является более чувствительной и специфичной, чем РСК и РСКК. Выявляет больных случной болезнью лошадей во всех стадиях инвазии.

8. Для постановки НРИФ при трипаносомозе в качестве антигена целесообразно использовать эритроцитарный трипаносомный диаг-ностикум. Это способствует снижению в сотни раз материальных-затрат при массовом исследовании животных, что позволит более широко использовать НРИФ в иммунодиагностике. •

9. Разработанная нами реакция связывания лошадиного комплемента (РСЛК), основанная на взаимодействии комплекса антиген-антитело с нелитическим комплементом лошади, в диагностике случной болезни лошадей не уступает НРИФ по своей чувствительности.

10. Патологоанатомические и патоморфологические изменения у больных случной болезнью лошадей характеризуются' дистрофическими изменениями в печени и почках, деструктивно-некротическими процессами в яичниках, семенниках, с воспалением наружных половых органов. Последние приводят их к временному или постоянному стерияитету.

11. Аэидин в дозе 5 мг/кг массы при однократном применении и в дозе 3,5 мг/кг массы животного при двухкратном введении эффективен для лечения больных случной болезнью лошадей.

12. Наганино-аэидиновая смесь в соотношении 1:1 в дозе Ю мг/кг массы тела животного предохраняет лошадей от заражения возбудителем случной болезни в течение 2,5-3 месяцев.

13. Наганкно-азидкдсшая сыась, оказывая одинаковое трипано-цидаое действ на на наганинорезистонтные и на наганиночувствитель-ЕН9 мтамиы трипаносоы, излечивает (Зольных су-ауру верблюдов в доге 3,5 ил на 100 кг массы в соотношении аренаратов 1:3,5.

14. Располагая набором трипаноцидных препаратов, асподьзуя предложенные наш схемы лечения и профилактики, можно добиться выоокой лечебно-арсх'илактичаской аффективнооти как при су-ауру, так и при случной болезни лошадей.

ПРАКТИЧЕСКИЙ ПЕЕДЕОШШ И ШСШЭДАЦИИ '

При появлении в хозяйстве случной болезни лошадей больных изолируют,и лечат азидиноы в дозе Б ыг/кг кассы одаократно или в дозе 3,5 ыг/кг - двухкратно. При этом необходимо учитывать, что больных о глубоким поражением половых органов или нервней системы, особенно в более поздаиа стадии инвазии целесообразно сдать ва дасо. Наибольший эффект в лечении больных трипаносомозом животных достигается на ракш.: стадиях заболевания. Здоровых и подозреваемых жеребцов-производителей перед случкой обрабатывают

азидином или нагашшо-азидиновой смесью в дозе 10 ыг/кг массы. '

в

Подозреваешх в заболевании кобыл, а такие весь косяк больных случной болезнью жеребцов-производителей также обрабатывают азидином в лечебной дозе. Животных, обработанных азидинои или наганино-азидиновой смесью о лечебно-профилактической целью повторно исследуют на трипаноошоз через 5-6 месяцев. При выявлении больных аивотных после повторных исследований изолируют и сдают их на иясо.

Больных оу-ауру верблюдов лечат наганино-азидиновой смесью в дозе 3,5 мл на 100 кг веса (в соотношении препаратов 1:3,5). Наиболее лучшие резулг -аты дает лечебно-профилактическая обработка всего варблюдо-логоловья перёд началом валета кровососущих на-

обкомах. Затем их перегоняют на летние пастбища, свободные от насекомых. Животных повторю исследуют на оу-ауру осепью. 'Выделенных больных оу-ауру верблюдов сдают на мяоо.

Для предупреждения развития лекарственной устойчивости у тршаносам необходимо периодически заменять один трипаноцидаый препарат другим или притенять сочетания из двух и более препаратов о различными механизмами действия на клетку паразита.

Результаты наша исследований позволяют рекомендовать для широких производственных испытаний:

I. Непрямую реакцию ишунофлуоресцеицли с эритроцита рта трипаноссшыы диагйоотшсуыои для диагностики тршшносшозов ¿тавотных.

'¿. Реакцию связывания лошадиного комплемента (РСЛК) в качестве чувствительного и специфического серологического теста для диагностики случной болезни лошадей.

На основании проведенных исследований разработаны п внедрены в практику:

1. Рекомендации по химиотерапии случной болезни лошадей.

2. Наставления по применению азидина (беренила, батризина) для лечения и профилактики случной болезни однокопытных С в соавторстве) ...

3. Инструкция о -мероприятиях по предупреждению и лшсвидац^ч случпой болезни однокопытных (в соавторстве).

СИЖОК ОПУБЛЖОВАЯШХ РАБОТ ПО ТЖВ

ДШСЕРТЛЦИИ

I. Сабаншшв U.C., Ескалиев Т.Е. Выделение ï. equiperdum от лошадей. // Ветермария. - 1978. - И 10. -С.66-67.

?.. Сабаншиев Ы.С., Ескалиев T.1Î. Диагпоотика случной болезни лошадей методом флуоресцирующих антител. // Паразитарные болез-

ни с.х. животных и мери борьбы о ними: Материалы республиканской научно-пряктич.конф. 24-¿6 октяс^я 1978 г. в г.Джамбуле. - Алма-Ата, 1979. - С. 139-140.

3. Ескалиев Т., Сабаныиев Ы. Вопросы терапии и профилактики су-ауру верблюдов // Паразит, болезни с.х. животных и меры борьбы о ними: Материалы рвспуб.аауч.-нрактич.конф. 24-26 октября 1978 г. в г.Джамбуле. - Aj" 1а-Ата, 1979. -C.II9-I2I.

4. Сабаншпев U.C., Ескалиев Т.Е. Восприимчивость лабораторных жив о "них к возбудителю случной болезни лоаадай // Инф.и на-зараз. богазни с.х,кив-х в Казахстане: Сб.науч.тр.ин-та. - Алма-Ата, 1971. - С.93-95.

5. Сабаншиев U.C. Биологические особенности т. equiperdum выделенных от лошадей //Современные проблемы протвзоологии: Таз. докл.Всесоюз.общ-ва протозоологов. - Вильнюс, 1982. -С.ЗХ4.

6. Сабаншиев U.C. Терапевтическая эффективность азидина при олучной болезни лошадей // Зпизоот., иммунитет, диагност, и хи-миадроф.ш. азитозов с.х.жив-х в Казахстане: Сб.научн.тр.ин-та. -Алма-Ата. 1984. - C.I3I-I34.

7. Тулепбаев O.K., Сабаншиев U.C. Диагностическая ценность реакции флуоресцирующих антител при случной болезни лошадей // Вестн.с.х, ийуки Казахстана. - 1985. - № IX. - С.69-70.

• 8, СаЗаншиев М.С. Некоторые вопросы эпизоотологии и терапии оу-ауру верблюдов на юге Казахстана // Проф.и мери борьбы о па. д-аит.болезн.с.х.жив-х в Казахстане: Сб.научн.тр.ин-та. - Алма-Ата,

1986. - С.73-75.

- 9. Сабаншиев U.C. Экспериментальный трипаносомоз кроликов // Зопр.ват.паразит. в Казахстана: Сб.научн.тр.ин-та. - Алма-Ата,

1987. Ç.123-127.

10. Косиченко Л.Г., Сабаншиев М.С. Реакция непрямой гемаг-глгтинации при случной болезни лошадей // Вопр.вет.паразит, в Казахстане: Сб.научн.тр.ин-та. - Алма-Ата, 1987. - С.106-109.

11. Сабаншиев М.С. Некоторые вопросы иммунитета при су-ауру ослов // Совр.пробл.протозоологии: Тез.докл.4-го съезда Всесоюз. общ -ва протозоологов. - Ленинград, февраль 1987. С.180.

12. Ергалиев К.К., Сабаншиев U.C., Арынов К. Вопросы пара-зитоценоза при су-ауру верблюдов // Вести.с.х. науки Казахстана.

- 1987. - » 9. - С.64-65.

13. Сабаншиев U.C. Пути ликвидации случной болезни лошадей в Казахстане // Веста.е.*.науки Казахстана. - 1987. - » II. -С.68-70, '

14. Сабаншиев U.C. Эффективность наганино-азидиновой смеси при трипаносомозе лошадей // Вестн.с.х.науии Казахстана. - 1987.

- » 12. - С.73-75.

15. Сабаншиев M С., Сагиев М.С. Трипаноцидная эффективность наганина и наганино-азидиновой смеси при экспериментальном трипаносомозе // Воэбуд. и переносчики параэитозов и меры борьбы с ними: тез.докя.Всесоюзн.коиф.по паразитологии 11-13 октября 198Сг.

- Ташкент, 1988. - C.I70.

16. Сабаншиев U.C., Косиченко Л.Г., Жумагулов А.К. Некоторые вопросы иммунитета при экспериментальном трипаносомозе морских свинок // Проблемы профия.параэитозов жив-х в Казахстане: Сб. научн.тр.ин-та. Алма-Ата, 1988. - С.128-133.

17. Сабаншиев М.С., Болдырева Р.Г. Сравнительное изучение различных серологических тестов при диагностике случной болезни лошацей // Вестн.с.х.науки Казахстана. - 1989. » 6. - С.62-64.

"18. Сабаншиев М.С. Эпизоотическая ситуация случной болезни и меры борьбы с ней // Диагност., лечение и пробил.паразит, и

ассо'-иатив.болезн.жив-х в Казахстане: Межвузовский сб.АЗШ. -Алма-Ата, 1989. - С.124-127.

15. Спобоб диагностики трипаносоыоэов животных: A.C.I563399 СССР, ЫКИ3 С 01 » 33/53, 33/50 / U.C.Сабаншиев (СССР). - 4с: ил..

20. Способ отделения трипаносои от форменных элементов крови: A.C.I63I43I СССР, МКИ3 С 01 » 33/53 / Ы.С.Сабаншиев, Л.Г.Ко-сиченко и А.К.Жумагуяов (СССР). - 4 е.: их.

21. Косиченко Я.Г., Сабаншиев U.C., %запбврова Н.Ш. Динамика клеточного иммунитета при случной болезни лошадей // Вести, о.х.науки Казахстана. - 1990. - M II. - С.87-89.

22. Сабь.гаиев U.C., Кашкинбаев H.A., Косиченко Л.Г. Клиника и патояогоанатомические изменения при экспериментальной скучной болезни лошадей // Вопросы совр.вет.паразитологии в Казахстане:-Сб.научн.гр.ин-га. - Алма-Ата, 1990. - C.I88-I9I.

23. Сабаншиев U.C., Жупарбеков М. Эпизоотическая ситауция ^лучной болезни лошадей в некоторых хозяйствах центрального Ка- > эахстана и меры борьбы с ней // Вопросы совр.вет.паразитологии

в Казахстане: Сб.научн.тр.ин-та. - Алма-Ата,- 1990. - С; 192-197.

24. Способ диагностики трипаносомоза лошадей: C.00357II на "Ноу-хау" от.14 февраля 1992 г. / Ы.С.Сабаншиев, Т.С.Сайдулдин и Г.Д.Ильгекбаева: - I е.: ил.

25. Ильгекбаева Г.Д., Сабаншиев М.С., Сайдуядин Т.С. Эффективность серологических методов диагностики при трипаносомозе лошадей // Цитология. - 1992. - $ 4. -Т.34. -С.66-67.

26. Кашкинбаев К.А., Сабаншиев U.C., Аыанбаев А. Локализация трипано.сом в органах и патоморфологические изменения у больных • случной болезнью кобыл // Терапия и проф.паразитозов с.х. к-х: Сб.научных тр.ин-та. - А^.ла-Ата, 1992. - C.I9I-I95.