Бесплатный автореферат и диссертация по сельскому хозяйству на тему

Эндолитные бактерии и использование их в защите хлопчатника от болезней в северных районах Таджикистана

ВАК РФ 06.01.11, Защита растений

Автореферат диссертации по теме "Эндолитные бактерии и использование их в защите хлопчатника от болезней в северных районах Таджикистана"

VT« oa

r ' i

t. .. 1

АКАДШИЯ СШК!1ФХШЯПСТилиШХ 11А.УК РШ1УПЛША УЗШКШГАН УЗБяКйСil ОРД1Ш ТРУДШОГО ICPAUiiOfO ЗЛАШШ

11аучно-нссдадо11ат1ль.:юа институт защиты растшщ

'На íipíftíax рукописи

КчРИЛОа ЮТБОЛБПИ XAKU.'lEfWBIH

аЧДО^/ГНШ EAKTiiPJHI и пСПОЛЬЗСЪАШЬ' Ил В ЗлШТИ ХЛППЧАТШ.КА ОТ EOJLüIKl В C^Pilß PA It СНАХ ТАДЖИКИСТАНА

Олепгалыюсгь tt3.OI.Ii- йащига растений or вредителей и болезней

А В Т О Р ¿ г' ii Р А Г

диссертации на соискание ученой степени кандидата еельскохозяйсгвешшх наук

Vmimir- 1УЭЗ

Диссертационная работа выполнят в Таджикском аграрном университете, в 198У-1992 гг.

НаущшП руководитель — доктор сельскохозяйственных наук, профессор ¿¡.Я.ЫКШДШшй

Официальные оппонент: . доктор биологических гшук, профессор С.и.ГЛШЭАНЩА кандвдат биологически наук,старший научный сотрудник

ГЛ'.ТоМЫйВЛ

Ведущая, организация - УзШЩШЮ Уахлшок) УзАИХН

Защита диссертации состоится " , Д(^3г.

_чассв на заседании Специализированного от ста

Л CB0.50.2J в Узбекском Ордена Трудового Красного Зламшн науч-но-всследпватольском институте зашиты растешшчю сдросу: 700140, г.Ташкент, ц/о 140 УзНШЙР УэАСХН.

С диссертационной рабогой молю ознакомиться в библиотеке института.

Автореферат разослан " /Р У93г.

Учениц секретарь ипэциалнзпроданного совета, кшщидат биологических наук

ШЛШ.

ü

ЙВД XAPAhl'^líCTllKA РАБОШ

Актуальность та-'п. 3 последние года в научши литературе впервые появились сведения: об апд»1шшцх ¿акгщшй и в кш оси остях использования их в зашлте растении от болезлоуК Цепликиев, СултановаДпонлова; I9tí7; Сг.'.лрняв .Ленлик ев.Ишшцкия.Резнпк, Султанова; 1990 ¡"Vyunitekaya , Menlikie-v , Sultanova , Lapa , Sla-bospitskaya ,1990:. l/Lisaghi ( Bormdelinger , I99Ü; LíeiUlIlKK-еврй;.мрнсва,^гйМШд.Реашж,1й91). »

Способность ш<дохл:тннх бактерий сшашагь tí растении дри значительно:; конкуренции заслуживает ъанг.апш и делает их xio— тенцпалышг.л кандидатами для биологической защити растений от болезней.

3.ü.U\:i:paaB, L. //.¿«шшодиз, С.Р.Резникйьшищсая

сформулировали теоретические л практические положат о принципах использования эндоЛитнцх бактерий в зацлте растений от болезней.

üia принципы. иткрпваюг ьоз(.:о::ц;осгн для создания новых високоэ^екпшшх препаратов, отвечащлх современным требова-шяи защита pccreuii;'. от вре.нипх организмов. -

Цель п задачи исследования, целью настоящей рабоги являлся-отбор блодоготески активных штапиов энда>шшх бактерии л ссздщле на их ошози новых препаратов для защиты хлопчатника от комплекса болезнен. •,

Ü связл с 3Tííi.¡ в зад-ачу последовашШ входили:

- изучить антагонистическую активность бактерии, изолированных с эпдотканеп здоровых растении хлопчатника;

- на основе изучения основных биологических и фшио-лого-биохш.'ичеекпх сволств отобрать штат: эндо^шшх бакте-рий.перспектишые для практического использования;

- наработать препарат на основе биологически активных шгашив эвд охотных бактерии хлопчатника;

- изучить адазкгишомь препаратов эадо.^пгцнх бактерий в защите хлопчатника от болезней; «.' "

- разработать практические рекомендации по яршенешш препаратов .на основе агдо.],шчшх бактерий.

Научная новизна работы". Впервые изучены слгагонисги-

nuciüto свойства б око o 2G0 шгашов эццо^шмшх бокгерли из рода Bacillus , лзшшрошн.тцх со здорсвш: ргютешО хлодчагипка; огоб-ранн 12 шташов для создания лрзцлоата, Псслсдшзанн кульгуюлыю-¡.¡ормодогпч^скло признаки, блачсгнчсскао особенности л дошаяого-биохшичискпе CBOíiCTua ¡i единшмищюованц до вида У шгашаа Bacillus subtilis.

арактадаская цакносгв padoi'u. и'а осисво штаммов Bacillus оиЬ-tills ,С1Д,Vtíji.jlI-оУ созщищ иошо високоэ^йстяшшс

биопрепарата, продашнач^ннае для зцматц хлоачатшша от коаплок-CQ болозпеЛ и? хек иродпосовноИ плп забдагоБро.хнцой сбрабопш ши семян.

ьлхерлалы исслидомиша ыэшодш л Риклашый 1фоопект"Хлш1-косяорга" г. Река'.оададш! по иршшшш) хашкосиорит.Рмсида» iío-f.:í'rera по ка/нжислол x'jipjj^.jiíjtj¿íсл:ра'дсшейгацня лршшишл лес— гицвдов л ригялкгораа росса расти;.; бя&цчшарах хямшоспорш (¿6д) с IV)ü2 г. вглглш в план х'ьсшшпшкЯ.-

Аирпблцня работк. кагсршлы диссертации г.олаллш па: Республиканской шупно-ароизводсгиший шфсроцщш сшциалистов но биелогэтеско;; защите растеиплОхуыапба .я-'пгпрь ÏW9I); Лишкабадска; областей одишаро по заьцисо pacïc4a!2viwi)inr«âus.Ivüí; «ajroioji KOii;V.opeiu¡iui яро^еоопрско-преподаваузльокох'о cccrasa Таджикского аграрного ушгаорскготаидаапсо,апрель ïi/аЯ).

Диссертационная работ рассмотрена и одобрена па засадшхия .¿акулы-сна плодоовоцсводстБа и с.::.ör oroaioanmi Таджикского аграрного •шизерептега.

Публлкацзд результат он пссла игдишп;;. Uo шгериалаи исследований опубликовало "i работы, в гк чг.цзе риюашнП проспект в виде брааорн л Рско;.:а;дац"д.

Сгрукгура iг ирье:: пахота, диссертация счет eut да введения, обзора литературы,й ívsu» собсгйзанш шшелашкь, ваводов, прак-хвпосюис рскшшдащдй и списка лглъратури.ышачаощего I'ck; отечественных я 64 заработных всхоадпиа. Работ гдлострирована &Í уабли-даг.а, 8 раезиодш а а ¿>охогра*йдап.

Объем диссоргацпи с гайгшцрг.ш,рисунками, vicusarejou-tn 'литературы в прщнк.сенияШ1 составляв!' Tóú страниц жашипописного текста.

1. ОЪЗСР лРТ.Д'лТ/Ри ■ Ьлолпглчоская зицкта кдсгишц от боли пней

Сбобшеш лсгошшки литература но блологтескоИ зедиго расю-ш!И ог Сс.кзноа; лор об] щи спор о образующим бакгерияп, их зшгюшш, расирострапштосги, всспйпгскмси л доуги". свойствам и лрмкгллеско-1.1.7 пршенснлы.

2.1. ¡.1иото н усичиз'ет тесярдизаши ¿ндоу-ияне бпттзрлп язаплр оттай с расгедпй хлопчамшка сортов Х0У-^,1и!ргязскг.й-3, ыган-1 л собрпшше л Ходлепгскш я оарарабадском рагцяка ЛешшабздскоЗ облает.

Евалогические слалияи .»асгсш;й,ку.татураш1«.1 ор^ологлаоскло, ттгшвегачзого'о и и;зкп1:1>го-блах;жа«еск1:о СЕоГютва шдодитшх йзкгеряй изучеиы хз лаберагор/ж ка ,>едрп задана растений Таджикского аграрного учтерелтога а отдела антпблогяков янегкгуга шкро-блологлп л.и1русолппш(Д.1газ) ЛЛ /крашн. Опцишз образцу препаратов зид&/шшх бакторй! наработан ц в аролззодстжшна-оштпая пар-

гая лралг.рпгог УЗД(хлплкоспоргн) глготовлопа в ¿нопршгегровском

Первичной ;х1штанг;> бполрипарит он видоляело в лаборатории ка)едрц ззщпш растс«1Ш5 ¡1 в гешщо Республиканской станцлл зеидпги растений. Паиовиа нспшпцля бдопрошпагов проведаны в колхозе ям. Урупход;.;асвп Ходаентсхого района: цролзводствснхие леппг.шпя - б гш ко хозяйстве и и соЕхозе"Дг.асо;;олп Толлкисгол" За^арабодского района.

Почла опыт ого участка опта дошли од для сор о-бурых ком«шс~ Г"Х почв Северного Талашпстанп: она характеризовалась илзкш содержанием гу.му са (I, а'^).

«¡.2. Объекта я г.стодц исследования Объектами псследокшля слупил: здоровые л бачшце растения ;аоляагшжа, онло:втю бачторлл п рх препарат.

для язогшрошзш'а алшооргашшго с эндоткглоц апаллзируоиУЬ' часть растешт стебель) нркгоали огоряяшой годоР; обсушили,ио-ворхпость стсрштзгчюлп спирта; п •длггбпротди над дданенеи городки п оллшлп кору, лусочя? ллугришлх гкпней размером к-З т лог.с-авлл па кпрто^тмт.Ч агар а чпагеах Негрп я кульпшзрокаш в гоче-

и no дней при температуре kö-3QüÜ. ¡Затем изучали вдрсслше колонип микроорганизмов л отсеивали их в пробирки на косол araD.

Идентификации шдМшшх бактерий проводили но определителям Бе^гд(1957,1974), работе Gordon ÍIS73) л "Ыегодлчсскям рекомендациям по водзлешао и «деига^дкацяи бактерий рода Bacillus из организма человека л хишоишх'ЧКвЗ).

'йптотоксичность эндо.ниных бактерий и грибов изучали по методу О.А.Еерестецкого и А..аЗ.Боровкова(13В£).

Лнатагонлсгячоскуя активность эндо^игннх бактеpn¡i изучал методом радиальных штрих ra (i¡ropob,ISG5).

Чувствительность ита:.и.;ов энда,дгных бактерий к антибиоп кам определяли на картоуедьнлг. агаре и среде Гаузе !?- 2 с помощью стандартных йуяашых дисков,

В лабораториях я вегетационных шагах изучили влияние предпосевной обработки се;.;ян хлопчатника суспензиями препаратов па всхожесть селян, яораленн ость проростков п всходов возб; дителяш гнилой.

lía полевых опытах иешкшш! предпосевной я заблаговременную обработку сеияя хлоичагкжаСсорт lQâ-*n) суспензиями щ> паратпв. Норма расхода суспензия- от ¿Ú0 до эЩ л/г в зависимости от срока сева а влажности нечвм. Иовторпооть опытов чей рехкратная; ялоср.дь делянок rio ¿40 n¿. Па опытах проводила V4 ты появления всходов я густота сгояши хлопчатника, роста л ра впгпя растений, яораксшности их болезнями и урогля хлопка-йыр да.

Ыасяичпосгь семян хлопчатника определяли экстракционный методом.

Статистическую обработку дапкш: уро::ая хлопка-сырца проводил!! п 0 ■ L . Л.. ¿ ocho xobj 7¿¡ ) .

Экономическую адалшшлость применения биопрепарат пв определяла путем сопоставления стоимости затрат, связаняпх с их изготовление! и пршенэнпЕМ.с стош остью защищенного урожая.

3- ЗЩШШ.<; ЬйиФООРтШШЫ ХДШШШКА Результаты бпвлогпчоокого опалю а здоршых растении хдопчатипка показали заселенность их внутренних тканей бакгс-паа'-'Я. В i пчеле раскрытия коробочек околыше ткани растзаиЦ (сорт lOH-v) были саоелеш: roröaf'it пз рода Altornadan Pénicillium

Ондогкани оплышх вергицшглезнш.! шлтом растении сорта Диргиз-уЗ содержали -V.dahliae , Th.basicola и бактерии соответственно - СО, 0; 34.4 я

О ткаиой увядших растений тонковолокнистого хлопчагни-ка(сорт УБЬЗ-И) вццэлены возбудители вертш;иллозного вилта и черной корневой гяхшя,соогвег сизшио - И,8 и 31,С тканой этих se растений изолированы бактаршн'о,?;5) и вида Alternarla (-2,ñ;¡5) и-Aspergillu3 (3,3í¿). '

Микробиологические анализы растений хлопчатника сорта 108-w виявош зараяошю их тканей возбудителем в ер г иди л лез кого вилта и бактеряяпЦрлс' i). У здоровых растений соотношение количества тканей,заселенных воз буди га лек вилта и бактериями составило: в (Т.азе бутонизации -1:18, цветения-!:19 и созревания уоа.сая - 1:13, а у о'олышх растений соответственно -4:1, 11:1 и 13:1. ¿ели соотношение количества тканей,заселенных возбудителен вилта к бактериям в уазе соэреваши -»рохая у болышх растений бнло в пользу патогена,то у здоровых оно било в пользу бактерий.

УС

10Q 90 ВО Ю 60 50 <0 30 ■20 JO

3 -ботврия 2-V. daMae

' г /г

бужшзоцея ¿0вюеше / здоробое рас/ш/ие;

i'J 1 1

у г-

¿Ьдоебате j. урахоя

2 дшно9 растение Рис. Зас&7Рп?юст тканей тслшпп хлопчатника сорта /ов-Ф %г

Для исследования отоброш более 2üü пзолятов бактерий, (V л а np е с цпр у они I о шгагмц отаесеш к роду Pseudomonas, осталыше-граппололягелыше, образуйте эндоспорц - к роду Bacillus ..

Средп изолированию: бактерии доминировали штаи.'л Bacillus; они развивали бекевне кслошш с прозрачно-голубова:гыш,гладки.М1 или слабо-извалпсгыш; краяши

4. ЫЩПГЩЛ^Щ СВОЙСТВА аЩОЛ.'ЙУХ ü'uü'^Püü

uiamimoi

4.1. Антагонистическая активность эндо.'.птшп;: бактерий

Установив налтие бактерий в шдоткштх хлопчатника, мы не шелл сведений об их разнообразии и бг.олсгпчесшп: свойствах, йачачьпш этаяш достшсенпц oroii цели являлся отбор шгш.шов для создания препаратов. Поскольку проводить отбор культур сразу HD нескольким лапалстра« практически невозг.о.'шо, то дритерл-ем первичного скршшга бил избран один из главных показателе!:' антасош1сткчоск1я активность к фпгопатогешшк шкроорганизмам. Б качестве тест-кулмчр использовали возбудителей осноишх болезней хлопчатника т V .cLahliae .F.oxyßporum.i.'vasinfectum , Th.baeicola u Xanthoaonas malvacearum .

В результате, около четверти исслсдоваших пгакков от-несанн ¡: группе антагонистов, проявляющих высокую стежшь ш-гибированяя двух-трех ('¿¡гопагогонов.Только V-,% культур пз общего числа исследовапинх не проявили антагон;.сгпчесш1х свойст ни к оддому из. исследованных тестов.

Среди исследованных штаилов бацилл один проявил высокую антагонистическую активность ко всем тест-культураи.шсо-коактшзнш:и по отношении it V.dattLiee была iV,'7;j нкшю, к j.< eporum f.vaalBiectum - л к Th.basicolo штатов.

Среди Есследонашшх штаммов бащлл 34,öy! проявили высокую aase гонистическую активность г. возбудитзю гемкоза хлопчагшн:а(рис

Поскольку основа fci задачей работ являлся отбор культур эндоуптннх бактерии для создания препаратов, сочли цег лесообразшм провести углубленное исследование шисагшшсигаос-лой адишюсти в первую очередь тех штатов, которые i&paKTCpi зоваяись более вврааояшв; дойсгв^зп на подишшю тост-культуры» С oroii ноль» 'для ,дальне, jj eü работ отобрали 9 штакыов(таб:

. Тест-культурам; для исследования били возбудит',¡ли гер.

%

50 40 30 20 10-

т.

22.6

25,8

зи

МО

523

Высокая акшиЬноапь [>/5№) ггпп -Умеренно ашиЬныв (хнзл/ф - слабая актибность (<Ю№Ь СП-ОтсутстЬив оти&ности

59,8

22В

Мб*

/4 б

УйоЫ'шв Еадорогию ИюзгсоЕа X./-.¡№сгатт £ УаьЩесЫт

Рис- Степень антагонистической ак/лиЬ-::сти шгпамкоЬ эндофитных бактерий к Ьоз6удия-?ля/1 отезнеи хлопчатника

гпцшшазного вялта,оузарлозного увядашп,черной корневой гнили л гокмоэа хлопчатника.

В числе отобранных культур од!ш штамм(2СД)оказался высокоактлв-кнм в отношении всех четырех воз будит еде ft болезней; два штачма(51Д и С1Д) были высокоактивными к возбудителям вллта л пузарлозного увядания ,три(56Д2,79Д и 11-89) к том ко и возбудителю черной корневой гшиш н одли(24д) - к возбудителю гошока.

Таблица I.

Ангаг г.: логическая активность отобранных штаммов эддоритных бактерий рода bacillus к возбудителям болезнен хлопчатника

(¡1Тамм ! Зона додавлзнш роста геог-культуры, ми__

антаг01ШСГ , y.dahliaa { F.oxyspormn j Th.basicola ! X.mal^acearu:

t ' I

( l.vasinfektam, ;

РАЛ 16 7 12 ■ 24

25Д 10 35 13 10

2СД 15 29 40 20

51Д .25 21 24 12

56Д2 22 12 31 14

егд 26 18 12 14

79Д 24 9 20 15

11-89 15 0 22 -

812Л 15 0 14 20

Для работ по созданию биопрепаратов интерес представляли игамт: 2С-Д - интенсивно подавляющий рост всех те ст-организм об; 61Д- активный к возбудителям верглщшгезяого вплта и йуэардозяо-го упядднил, 79Д - активный к вилту и чернол корневой гнили и 24Д - высокоактивный к возбудители гоммоза.

4.2. Морфологические и ^лзполого-бяохлмлческпз свойства эндггитннх бактерий

ьаследсюшло культууально-мор алогических я ■'гзполого-бпохп.ш^еаарс свойств игакмов бацилл, позволяла ошэогя га к С

ЕЛДГШ рода fc с ill us :B.iiegaterium i, B.lichenifornis,B.£5Ucl.txlis B.polynyxa .B.cereus ,B.coaquluBS , Среда ЛИХ ио чпслоинпотп знап"тил7ЛЮ преобладал B.subtiliE (pre,У).

Огобрашшо по штгиа.1сг1г*сско.'1 аптииосг;: т'.ульгууц (;Тп;-сг'Нг. н 1>г.ду B.eubtiliB . Joe очл xopouo vecvyv в аэробннх

62 У.

В. suôliàs

' UP kWV I / *

Рис. 3 ôudoô podo

Bocl fPu st L/mupoôambJX с хлопчатника

условиях, причел некоторые из 1шх(51Д,01д/Л>,ц и 11-Ь9)росли при ■ ph?." а шгша» 5Щ - при рИ Ь,7. Исследуемые культуры гцд-ролизовалп кража,! я ^¿гшу, редуцировали нитраты,усваивали глюкозу(за исклычецпсм аюша арабшозу(крале ЫД),ыап-

Ш1Т и ксилозу (крало 73,0, не образовывали газ из О^ в анаэробных условиях, утилизировали цитрат и пропионат; штаммы 24Д, 25Д,26.Ц,51Д и 5GA продуцировали лецитиназу.Некоторые штаммы характеризовались наличием лизоцимного «актора; наиболее ъыракенпой активность» обладал штамм 24Д. Указанное дает основание считать,что штанин B.subtilis играют существенную роль в жизни растений л вполне /могут бить использованы в качестве основы биопрепаратов,предназначенных для защиты хлопчатника от болезнен.

Исследуемые штаг.;.;ы ащоышчшх бактерии оказались 4VB-ствителышми к широко нршеще.мш англбногикл, за исключением полшпкеша; штамм 61д характеризовался полним отсутствием чувствительности к этому шюибпогпку.слабочувстзкгелышгми были штаммы 26Д, II-89 и Испытанные штаммы отличались умеренной чувствительностью к лишшгящнну и тетрациклину (кроме ÏI-89).

4.й.3лияиле условий щращниашм эндоритных бацилл на накопление биомассы и извинение антагонистической активности Проведены исследования по оптимизации условий культивирования отобранных ачдоТкпшх бакгердк. Для агат о их выращивали на питательных средах, которые были разработаны для культивирования -бактерий B.subtilis с применением метода ¡математического моделирования.

Аля шгаша 26Д mirôwc оптимально]; оказалась синтетическая среда с кукурузным экстрактом; другие больший прирост биомассы дали на сусло-агаре, па огих питательных средах все штаммы бактерии на 3-4 сутки образовал и споры до во-90;£.

Антагонистическую активность последу егшх штаммов-, выращенных на различных питательных средах,определяли методом агаровых бдо 'ков. Ьсе штаммы бактерий проявили ангигрибную активность на среде сусло-агар и сингт-ичиской среде с кукуруз-[fflii экстракта.!.

ü. 1 iPn'liAPATU liA OUlKbii аЩО^'/ГШХ ЬиСОТЩ, 1LC ißrOTÜjjiriüiü Экспериментальные серии препаратов ондоуитних бактерий наработаны на оси шзе итаммов B.ßubtilte^iJi.^GÄ.öLH.II-eS.HIü'JI). Опнтпо-пр оишленпая нар пи 0!1олрен8рата"хлопкоспорпн" изготовлена на основе бактерии В.nubtiiis 2ёд. В диссертации изложены этапы изготовления биопрепаратов в лабораторных условиях а в Днепропетровском хгаг^аркааводе: даш их характеристика.

Биопрепараты предсгавтлйТ собой лизобильно-высушенную, порисго-крнсгаллпзотгш.ую массу ш:впх спор и клеток бактерии, жлтовато-корютшвого цвета с разлитыми оттенками. В качестве наполнителя используется сахарозо-:::слат1ловая среда. При разведе-'пял препаратов в воде образуется гомогенная хлопьевидная взвесь мккр о организма.

дШСТШЛОСТЬ ОЕРАБОШ С&Ш МШЧА'ШКА

EIidlPalJAPATAliill й&ОйШШХ JiUiTUPiM

Ii естественных условиях заселение растений эндойитныш йормаш бактерй; происходит перавлшерно и г.одлшшо. В связи с этил лагогешшс кш>о<к>,в шссе находящиеся в почве,сохраняющиеся на растительных остатках и посевных семенах, успевают проникать в .pacrcuoi в первые зе уазы ех развития.поэтому одной лз задач лро>плакгякп нападения ¿;пюпат огенов является более раннее введение в растение полезных эпдобактерий.

Общепризнано,что обработка сепян препаратами является одним из зТшскишшх способов заищтн растений от патогенов. При эгш.яонгалт эндобактерлй с семенами и,далее, с проростками создает вознодгоегь для перехода их к всходан. и растения!.!.

испытание препаратов эндо^нгных бактерий паи было начато в IStiü г. с момента шгогозденлл ш первых ояытнкх образцов. Препараты.изготовленные на основе шгакмов эидобадстервй 24д, ОД,II-öS.öiii.bGJijjи показали превосходные дезян-

.¿Hunpvnctne свойства о аагаиишм п сногвчшк действа{ всходн хлопчатника появились на 1-Х дня ранше в сравнении с посевами, где посев бил проведен сокеиаш,ярогравяепш*ш бропокотш и уогеязликш; яовисллдсь всхожесть cei ян п эакегно снизилась по-ряпяшость всходов корпев о:;- гнилых На пидопптннх полях уро-яи'иоегь ггы1"йгя;жя. била вкше в ердоех па 1,э ц/га.

В 1990-1992 г.г. ь:ы проводила углубленное исследование действия биопрепаратов с целью установления причин увеличения ур огня, которые не ¡.:огли быть сведены лишь к защитим свойства;.! эндобактерпа.

и.1. Влияние препаратов эядоА;пищх бактерий на всхожесть се./як, густоты всходов хлопчатника и лорашшосгь ях болезнями

Ъ лабораторном опцте обработка сег.ян хлоцчаткг,ка(сорт 108-4;) суспензией препарата ¿ОМ титр I {.'.лрд/мл) по сравнения с контролем я эталоном (протравливание бропокотш) повысила их всхожесгМгабл, ' .2). Довольно внсокую статистическую значимость по всхожести эти селена л/.ели в полевых условиях.

Таблица .

Всхожесть се,.'лн хлопчатнкка(сорт 106-Ф) обработанных биопрепаратом 2^Д,1990 г.

Вариант опыта ! —:-¿Р^есть,.

! лабораторная ! полевая

Контроль йЗ.З 44,2

Бршоког 94,6. 87,5

Биопрепарат 26Д Sb,8 89,7

В теплице лря тек.пгратуре +¿¿-30°C изучали влияние обработки се:,'яи того ке сорта хлопчатника в суспензия препарата 2GÜ разных титров (100 кли/кл, 500 клнД'.л я 1 нлрдЛ'.л) на их всхо:;:есть и псра;:;енность всходов корневой гнилыо.Оеме-иа опытных партитив в течение >¡4 час.замачивали в суспензиях препарата из расчета 700 л па £ г. От ого времени было достаточно для полного поглощения суспензии и поюшшовв-нт бактериальных клеток к спор внутрь семян. Для сравнения лсподьзовали негр отравленные С2..:ена, увлажнеюше водой из того ;.tu расчета (7U0 л/т).

'• _ ;,спиташше гптры препарата ¡¿6Д не оказывали -ток-

сического действия на семена,проростка л всхода глоачатия-ка. lío мере увеличения типа рабочей суспензии препарата

всхожесть се;иш повышалась до 90,Ъ'1, -довольно заметно ешь ¡.-■ялась пораненность всходов корневой гнклью(табл.' . 3). üe.vena хлопчатника п их проростки прекрасно переносили довольно высокий i.'hkd осшни титр рабочей суспензии - I млрдДи.

Таблица 3.

Влияние предпосевной обработки сечян хлопчатника (сорт 108-4>) б и опр е; ¡ара г ш ¡¿6Д на их всхожесть и порамеинооть всходов корневой гнилью.'Геплщр.ХУШг.

Вар гаи ти опыта

i

' Титр рабочей' похожее- Шораданнос-1 суспензия I ть си,;яц,!ть всходов биопрепарата' Ъ ¡г.ошюво^

гнилыэ,'/»

Контроль -непр отрав леннце

се;.-:спа(заг.'0чки в воде) - 05,о 13,7

Семена замочены в суспензия бцоарепярвта Ни 100 штД:л 78,3 .0,5

го ае 'о00 i/.лнЛ-л 83,0 6,0

го ;;:е I плрд/ил У0,5 4,4

Ь 1991 г. в специально!.: полевом опыте для обработки се; ян использовали еще более высокий титр рабочей суспензии препарата - 3,5 илрдЛ'л клеток и спор. Результаты испытания показали.что биопрепараты эндоиппшх бактерий при случайшм завышении их дозы и титра не представляют никакой опасности для с е."ян л растении, aa обор or, аопшв егся их зрСзективность.

В иолезпх опытах блопреларагы.особенно 24Д,<;0Д л 61Д, ускорили появление всходов; они способствовали прорастанию треснувших г! незначительно лгазрецдеинше семян, а также усиливали прорастание селян со слабой всхожестью и шерглой прорастания. За счет этого и наблплалась повышенная густота всходов на опытшх вариантах(таб.-.' .,.4).

показатели опытов свидетельствуют о биологической оф~ ^скгшяюстп биопрепаратов против корневой гшип; пора;,кип ость всходов это.1! болезные снизилась по^тн в с раза по сравнению с контроле!',, и первые 2 года лепагапия, гоядоз проявился га ед;яг.''л!щх гастслщх. Положительное влияние бяолрепарагов

Таблица ' 4.

Злиянлэ биопрапаратш эндсдпищх бактергй на густоту всходов хлодчатндка (сорт 108-^v) к порат-енность пх болезняш

опыта 'i дна, " до пслных t Oï 03¿>2. б сход 03 ^леднго количеством 'всходоз кг I п.;.:. ; иОЯЦОНГ коонев л;- •■ oí; гнлль;э scyjj'ios г оз а; се^ддадь- hoü uod- ;.m,IS92r.

1990г. '• ! ; 19Э1г. ! i i 1990Г. ! ! 1991г. i ; i990r. i i t I9SÏT. \ » ISS2r.

Поаддосевная обработка сегдн

ол?" эль 16 17 33,8 50,Б 5,6 т 9 ¿i»- 9,9 4,a

IS 17 33,5 50,5 5,1 0,3 8,7 3,8

'¿■'-к 15 IS 37,2 55,1 зд 0,5 5Д 0,7

15 IG 37,8 57,0 3,2 0,5 ö,3 0,6

L 15 IG 37,1 50,0 3,0 0,5 7,3 1,3

79R - 17 - 51,2 - 0,6 S,7 ■ 1,5

Ü¿L+7S£ IS 17 34,2 54,е 5,0 0,6 5,9 2,0

ii—¿s 15 15 35,4 49,1 4,0 0,? - • -

Заблаг ce D si: энная обпаботка се •лк

- 23 - 21,2 - - - 4,¿ 5,7

со с:: окот - ?.з - 22,7 - - 3,7 1,6

^"плогдаоаг

- 22 23,5 - - 3,1 0,8

на сншшие этого заболевания возможно было выявить в 1ьУ2г., когда па контроле поражены ость семядольных листочков доходила до 6/1. 11а вариантах обработки со: ян биопрепаратами число болышх всходов составило от 0,6 до '¿.0,1: на эталоне(.протрав-Л1шание семян бр он окотом) число больных растении достигало Особенно Эффективными в борьбе с гшюзш были препараты 24Д и 2СД.

Несмотря на го, что опнти были зало.-ашы по хлопковой старопашне и на сильно зараженных возбудителем вилта участках п для посева бил использован восприимчивый сорт хлопчатника (108-й), заболевание проявилось до 20Й растениях. Тем но менее, из данных табл.о очевидно полачительное действие биопрепаратов; пораженность растении вплтш снизилась в 2-2,5 раза в сравнении с контроле!/..

Влияние препаратов эндо^итных бактерий на рост и развитие растений, уро::яй хлопка-сырца и его качество

Биопрепараты оказали положительное влияние на рост и развитие растений; они по росту бнли на 4-7 см выше растений контрольного варианта; поэтому показателю особенно выделялись варианты 24Д.26Д и С1Д.

На вариантах обработки семян биопрепаратами отмечено некоторое усиление темпов цветения растении. Так, в 1УЬ0 г. на 7 лшя в варианте II—Ь9 количество растений с цветами было 43,2%, на контроле- 37,9% и эталоне- 27,Й. Наиболее интенсивно созревание уоояая происходило по препарата},! 61Д+7ЭД, 11-вЭ и 26Д.

Среднее увеличение урожайности хлопчатника за 3 года в результате применения биопрепаратов 24Д и 26Д в сравнении с контролем составило соответственно 4,5 и 4,3 ц/га, а но сравнению с эталоном- - 3,2-3,0 ц/га(рлс.' . ..4).

ЭндоТ)ИТные бактерии,заселявщие растения в естественных .условиях и вводимые в него через семена биопрепаратами улучшают некоторые технологические свойства волокна.По совокупности всех качественных показателей лучшим оказалось волокно с растений вариантов 24Д и Я6Д.

Ц/т

Црнкшоиш ирияпрагов аддо^япих бактерии улучшило посменно качества се.чш и повисало их (.¡аслиллость 1,'асса 1000 се'Лян била больна па ¡3,9 г в сравнении с контролем, а всхожесть их поьпоилась на в,(!Г;. Виход масла с образцов семян по варианту биопрепарат 24Д превосходил контроль на '<¿,31%, а эталон - па

и.З. йшниятус» я ач •екишпоогь обработки су ;.чн хлопчатник'! прпясрагши о!Щ»"«г-)шх бактерия

В колхоза ли/рушеодааста Ходжснтского района Республики Гадапкистал биопрепаратами било обработано 44,4 г сокш хлопчатника п посеяно на. нлазди: в ¿969 г. - 40 га, 1ъ90 г. -70 га, 1991 г. - 134 га л в 1992 г. - 200 га.

Цаявклтедьиш результаты от пргасиеипа биопрепарата 26Д (хлоякоспорш) пвдупзли на всех площадях бригад & 1,13,14.34 п 43; срздтЯ Уро:'лр хлопка-овда составил: в 1990 г.-30,8 на полях, где сеяли сот..-па, иротравлошше «доколши* а броиоко-г о?,:.

Все затрат, связгиишс с пртишииси биопрепарата па '£ га, составили 1963 руб. Стоилость бр он око та и протравливания гм со.'.'ял па 1 га - ЬСЗ руб. Обработка семян биопрепаратами позволила получить чистый доход в суше 53906 руб/га. Разница прибыли в сравнении с принят'.: в хозяйстве програьаявапяш сомян брдаокотом состаг.яла '("¿00 руб/га или 17,1/1. Себестоимость I ц хлопка-сырца спчзллась на 95 руб. ши на 6,2;';' за слет повише-нгя урожая.

Окупаемость доиол:ыс.1ьиагоЧзещзщешюго) урезая по биопрепарату составила 6 руб.36 коп.', а на эталоне - 4 руб. 37 коя. (по нелал 1291-199?. г.г.).

вровень раптабеяькости прп иршшшга биопрепарата опдгьятноЛ бпг.тсочсн с.пставг;л т..?. на 16,4^ больше в

сгагпелил с к.^лтрол1":;.': >.; па 12,3/5 - с эталоном.

Таблица ,5.

¿дияняе препаратов эндсуптных бактерий на дорагзннссгь хлопчатника зертициллезнш вялтом

■¿аогрлт опыта 1 Больные

; xi.es. 1990 г. ! 25.Со. ! 1ЙЙ2 г.

¡всего !ь т.ч. ■сильно ! всего )в т.ч. ■ сильно 1 ои. и: ш • ис епзза\ 0 71 М- ;

саго ЧчьпБ'0--! всего а ^1-оуль-

Ппеддос энная обпаботка се: ян

л он г о ель 12,5 7.2 6,7 4,5 IIД 6,0 21,8 9,4

Бтонокот 6,7 5,0 5,0 1,7 0,1 5.8 18,7 8,1

В.'юппепапат 24£ а,7 5,2 3,4 1,5 £,4 2,3 П,2 5,5

¿од 7,2 4,0 3,4 1,Н 5,8 3,5 6,7 6,2

¿11 7,2 3,5 4.5 2,7 С,5 4,1 11,9 . 6,6

79Д - - 4,2 2,3 6,0 2,9 11,9 6,2

61Д+79Д 8,5 4,0 3,6 1,6 6,0 3,5 11,3 6,9

" Ц_89 7,5 4,4 4,0 2,4 - - - -

Заблаг о зозкенаая обоаботке сег.ян .

л аа г роль - - - - 3,1 о,3 21,2 11,9

Ьоон оког - - - ■ - 7,4 5,2 19,4 11,2

5;: сп г е гагат - . - - - 3,7 2,0 11,2 6,9

В ü В 0 ли

1. lia основа изучения биологических свойств штатов бактерии рода Bacillus, изолированных из глутрешшх тканей здоровых растений хлопчатника, создали вцсокох^ектхшние биопрепара тн, предназначенные для защиты растений от ко1.'.плакса болезней.

2. Клетки и спорн бактерии B.subtiliq из которых состоят биопрепараты,обеззараживают семена, яр оыысаит в растение и распространяются в ондоткалях, защищают всходы и растения от проникающих инфекций возбудителей болезней, стимулируют рост и развитие растений л обеслечгааюг повышение урожая и высокую окупаемость затрат.

. 3. Биопрепараты эндо'^итшк бактерий совершенно безопасны для человека, .нпвотшх и, в целом,для окружающей среды.

4. Рабочие суспензии биопрепаратов зндамтащх бактерий с установлышнми титрами простыми традицисшш.ш способами перзме-шпвавг с cei-.enat.iii пли для этого используют современные протравочные машин.

б. Обосновано создание и производство биопрепарата на основе шдо:;лтлой бактерии B.subtilis 2иД, который обеспечивает: широкий спектр действия на '¡пгопогсгопнуы микрофлору; отсутствие шгпбпрующего действия на рост и развитие растений; безвредность для теплокровных; кизнедеятельность культуры в различных условиях аорадоп. -,

G. Биопрепарат ¿6Д(под названием "хлопкоспорин) предназначен для предпосевной и заблаговременной обработки семян хлопчатника с целью зациты проростков и всходов от комплекса возбудителей корневых гнилей и гипноза. Э]/[)Октивиость препарата резко проявляется в годы с вла'шол весной и резкими колебаниями среднесуточной температуры.

?..Хлош:оспорин безопасен для округа щей среды и характеризуется более высокой аррекгивностью по сравнению с применяемыми m практике химическими иротравателяг.'Ш сек^г формалин ш и бр опок о том.

ПРАлТШШОЬ' РМЫЛ1ДА1#И

полевне и производственные испытания препаратов позволяет рекомендовать обработку се.ли биопрепаратам Йимхлопкоспорпн) взамен протравливания их химическими препаратами.

Биопрепарат применяют способам предпосевной или заблаговременной (за 1-й месяца) обработки семян его суспензией. Норма расхода с содержанием ЦТП млрд меток в I г.

1. Предпосевной обработке семян ¿¡,0-.ч,Ь кг на тонну семян.

2. Ирл ааблаговредкшной обработке 0,7-1,0 кг на тонну

семян.

С и И С О К 'опубликованных работ по теме-диссертации

Ьепликиев ы.И. »¿апьяпц Г.1.1. »Смирнов ii.il. .Резник С.Р.,иьп-ницкая оЛ. ,Каримов л. Дотянович А.ь. .Чаплинский. i3.il., Кадри Р. Хлояко спорил.- Душанбе: ШО Тад;:аий1й1ИТП,1^УЙт Х5с.

Ыенлшшев ,^апьяиц Г.и..Редвалулла и.ллршов к., Ььюнвцкая В.Л. Кевин биологический препарат для защиты растении ст болезнен. -Душанбе

иеплшшев М.Я. .Заньянц Г.¡... .Смирнов и.п. .Резник О.Р. ,Вы:>-ницкая В.А. .Султанова ы.л. дотшювич п.а. ,1ааршош 1Ы. .ларшов К. ,Надрл Р. Хпшкослорш - новый бяадоготосклй препарат для защиты растении от болезнен.- Душанбе:'гадкис.1:.].и'.Ш. ш^ориодоонш листок,$ 133-Ьй, сер.Йй.ЬйЛ902. - ¡¿с.

Ьешиижев ¡.¡.л. .¿апышц 1'..... .лмопав ы,х.,ошшц)ш. и.А., Султанова ы.Х.,Гримов А.л. Рекомендации по применению хлопко-спорша.- Душанбе , .

1САГС.ЮЕ 1ЭТБС1Б0П ЖашЯшшг :;тпок х,''талик фшляри ношодо илшй даражасини одни учун таПёрланган "Эццсфи бак-терияси ta уш Тсткистоиш шимолиП районларида гГзаш касалликлардан здаыоя килишда «¡о.Чдалаша" ыасзусидэгц диссертация ишининг

:; h с л ч л и л з ¡;¡ у н и.

пШ.гая 1903 Пил 19 октябрь Узбекистан гдалог; х^жглик лар акадсмияси Гсшлликларни >;ныоп ошла илмиЯ-тадчтот шилгохи-шнг махсус илмиП кеигашида булади. 700140 Тошкент - 140, Узбекистон ^сишшкларни хш.юя кнлш илмгохи.

Диссертация иши кириа, 3 та боб, т^улоса manatí чицаришга таясия па ^о^;аланмган адабпётлар р^Лхати 122 та сатан,63 та хоркжий адабиётлар руйхатидан иборат.

Кш хаями 145 бет машинкэда ёзилган булиб.щущан 24 та жацг.ал ,8 та схема, 3 та расы, и лога санов ра ишлаб чикаришда i-уллаш далолатнзм'-.свдлн игюрат.

Оя^-ги йиллорда илшН здабиётлзрпд биринчи марта энс,с£ит бактериялар Еа уларни усииликларнл глс:лликлардан химоя вдгагада ];^ллаи цуцкинлиги ^"грисида маълумстяар пг.Дцо булди.

?сишик т^даасида булок оргашзмлэр билан ра^обашда ялаш-лиги б у бакгерпяларш биологик кзрггдяп: ¡;оли га вази^асини орти-ши билан бирса улгхга г.сг-г.^пг.да мухш курсив восигасига номзод далиб та ¡иг/! ешошятиш беради. Илшнг асосиП максади эндс^ит бактерияларни янгп атгммларини Гсшлтак танасидан ажратиб олиб, булар асосида тяиоыан янги дсрилар /препарат/ пилаЯ чтщт па уларда 1Узпшиг й?ляа5 касэлликлэриго ъчрши самарадорлилигини ^рганишдан иборатдир.

Плгай излашш гари^аспга sea бактерияларш! кутпандалнк да-раяасинн "рганиш,уларни (¿ноиолошк-биожшк хусусиятларини Гр-ганиш, ;|аолл:1яигини ургашш билан бурга ,ке.«гдаж учун янги таъ-jupva.H прог.грптлгр ишлгб пит'иб,*-- г.репаратларш р?за касаляшс-ларига карай сашр-тдорлилик дарситгспда синовдан уткаготдан ва ишаб чи^аришга тавсияномалар таП'Зрлалдян иборат булодк.

, Текширия ишлзри I96Ü-I5S2 пиллар иобоНюща ояиб боридци. Бактерия Лешшбод гнлоят.иаи гузони IC8 -5,^иргазстон -3, I7S-2, Кгтнгт.н -I **» ОССЗ-И трлери эедотуадмасидан ажратиб

олицди.

Усимликни биологик аналиоп su?.c$kt ¿актерияни морфология-си ,'|аоллиги ?а фиэлолого-бкохлшк хусуоилти Тойлкистон давлат дорил 5унуни усимлшсларни :;ш-юя килиш ка$едраси, Украина. $анлар академиясnvа царашли микробиология па гкрусология институтишнг антибиотик булимида урганилди. Эцдо£кт. бактерияларш талиба наыунаси Украинаш микробиология ла вирусология илмгохларида к?пай гирялди. 25 Д /хяопкоспорин/ препаратный ишлаб чицариш таж-риба нам/i аси Днепропетровск хим^арм заводида купайтирилди.

Нрелпратларни Зафаробод районига :;аршали Уринху;;:аев номли камоа гуталнгида па "ГСоысомоли Тотишистоп" давлат зфгаяигида синовдан утказилди.

Биринчи марта cor гузадан атфатилган эдцо'ит бактерияни Bacillus турига зароили 210 та штамшни фааллнк хусусияти Урганилди.Бактерияни кулътурално - мор$ологик белгкларц,£иоло-гик.^ияиолого-бкохишк хуеусияти па S тасини тури ашгданди. Улар Bacillus subtilis турига кирили аницлаеди. Baci-

lue subtilis ни 24 Л, 26 Д, 61 Л» VC Л ia Г1-С9 штаммлариш зяли» тсмонлама ургаттоб,П'.ги ю^ори самарадорли биологик препарат ишлаб чшзшди. Бу препарат бклан чнгитни олдкндан ишлов бе-риб кУ1шя ёки зки.дан о.лдин шяое бериш йрга бит.он гузани кук-чллш: касалликларяга царши кураашл мумкин.

Эндо^ит бактериядан таКёрланган биопрепарат ишлаб чшдарш шароитида синовдан утказилди.Синовлар шуни курсатдкки.улер уруг-ликш! касолликлар югумидан на сапрофит микроорганизылардан бутун лай ыухо<{аза вдлади.уругликш униб усишини теэлаштиради,.усимлкк-ш г.смплеке юцумлпк касалликлардан ?гшоя гсилади,гузаш усиш га Topai; -пётиш ,даада пахта хосилиш оширади.

Бу биопрепаратлар техник,хужалик ва иктисодий семорпдорли-III су.яче. хезкрги уругликни дорияпйдиган кимёвий препаратлар-дан кояишайди.

Kariiuov Kurbonbai Khakimbaevitch S U M U A li Y

of Dissertation in the themes "Sndophytio bacteriums and its use in cotton protection from diseases in the north areas of Tajikistan". Disaetation in introduced as a competition for an academic degree as a candidato of agriculture, science.

Defence of Dissertation takea place on 1993 at o'clock at the sitting of specialigen session o.t

Uzbeck science - research Institute for Plant Jtoteiction.

Adreas: 700140, Tashkent-140, UziaiZR.

The Dissertation v;ork includes the items such as Introduction, lieview, results of the aspirant researches, Conclusions, practical recommendations, list of 122 native and 63 foreign literature sonrees. There are 24 tables, 8 figures and 3 photofa, some statements in experiments and practical use.

Dissertation has been printed on 145 pages.

In recent years science literature for the first time inr-formed about endophytic bacteriums and possibility to use its for plant protection from some diseases.

Capability of there bacteriums to be eui-vive in substantial compete conditions deserve some attention as a potential means for biological protection of plants from diseases.

Object of the work is to select seine endophytic bacterium strains end on their base to create some new preparations for use in cotton plant protection from the complex of diseases.

The Problem of the research v;as to specify antagonistic activity of bacteriums, isolated ont of endotissue of cotton good plants; then on the base of study of biological and physiologic-chemical properties to isolate endophytic bacterium strains, which may be perspective ones for practical use and on the base of the active strains to produce some biological preparations, to perform the study of their effectiveness in cotibn plant protection from diseases and to prepare some practical" recommendations ,

Kesearch of said bacterium were realized during 1989-1992 years.

Bacteriums isolated out of tissue of cotton plants-varieties 108 E, Kirgisia-3, 175 F] Namangan-1 and 9883 X, picked up in Leninabad area.

Biological plant analyses, cultural-morphologic antagonistic and phisiologo-biochemical xjroperties of endophytic bacteriums v/ere performed in Tajic agrarian University laboratories of plant protection and in the. department of antibiotic of microbiologic and virucologic Institute (MVI), Ukrainen Science Academy.

Experimental endophytic bacterium samples of preparations were produced in M.V.I. Production-experimental preparation 26 I) (Khlopkosporin) was produced at the Dnepropetrovsk: Chemicalpharia-zavod.

Preparations have been investigatud in the Collective farm of Hojjent region and in the State farm by name "Komsomol Tojiki-aton" in Zafaxabad region.

Tor the first time 215 strains of endophytic bacteriums Bacillus isolated out of good cotton plants have been investigated for their active of them properties; the most active of them to the pathogens of cotton diseases have bean taken out for use in practice.

According to the object of this Y/ork cultural-morphologic indicatios, biologic features, physiologic-biochemical properties have been revealed, and also 9 strains identified up to species. They are Bacillus subtilies.

On the base of study of Bacillus subtilies strains, such a8 24- D, 26 D, 61 D, 79 D and 11-89, have boon produced new high effective biopr.eparations for cotton plant protection from complex of diseases by.means of beforehand seed treatment, • • Field and production investigations of endophytic bocteri-uas have shown their good disinfection effectiveness against the diseases pathogens and saprophitic microorganisms, stimulate the seed Eermimation, protect the sprigs, shoots and plants from diseases. She.preparations intensified tha growth and development of cotton plants, raise the' seed-cotton yield.

Endophytic bacterium preparations in technical, coianexcial and economical effectiveness don't inferior to the chemical ones, used for cotton eoed disinfection and cotton plants' protection from diseases.