Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Экспрессия генома на ранних стадиях регенерации печени, вызванной частичной гепатэктомией

ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Содержание диссертации, доктора биологических наук, Платонов, Олег Максимович

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА I. РЕАЛИЗАЦИЯ ГЕНЕТИЧЕСКОЙ ИНФОРМАЦИИ У ВЫСШИХ ЖИВОТНЫХ

1.1. Состав и строение хроматина

1.1.1. ДНК-гистоновый комплекс.

1.1.2. Негистоновые белки

1.1.3. Хромосомальная РНК г

1.1.4. Ядерная ДНК-зависимая РНК-полимераза.

1.2. Структурная организация генома эукариот и модели регуляции транскрипции.

1.2.1. Принципы организации последовательностей ДНК у эукариот.

1.2.2. Гетерогенная ядерная РНК.

1.2.3. Информационная РНК.

1.2.4. Ядерные и цитоплазматические рибонуклеопротеиды, содержащие информационную РНК.

1.2.5. Модели структурной организации единицы транскрипции и дифференциальной активности генов у эукариот

ГЛАВА 2. РЕАЛИЗАЦИЯ ГЕНЕТИЧЕСКОЙ ИНФОРМАЦИИ В

РЕ1ЕНЕРШУЩЕЙ ПЕЧЕНИ.

2.1. Общебиологическая и морфологическая характеристика печени, регенерирующей после частичной гепатэктомии

2.I.I. Митохондрии регенерирующей печени

2.2. Транскрипция генетической информации в регенерирующей печени

2.2.1. Объем транскрибируемой информации

2.2.2. Динамика активности ядерной ДНК-зависимой РНК-полимера зы.

2.2.3. Изменение структуры и некоторых свойств хроматина

2.3. Трансляция генетической информации в регенерирующей печени.

2.3.1. Аминокислоты.

2.3.2. Полисомальный аппарат.

2.3.3. Синтез специфических белков

2.4. Регенерация печени, вызванная ингибитором трансляции циклогексимидом ("квазирегенерация") по Тодорову

ГЛАВА 3. ОБЪЕКТ ИССЛЕДОВАНИЯ, МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

ГЛАВА 4. БИОСИНТЕЗ ЯДЕРНОЙ РНК in vivoH in vitro

4.1. Биосинтез ядерной РНК in vivo.

4.1.1. Методы исследования.

4.1.2. Динамика ранних изменений удельной радиоактивности ядерной РНК после импульсной метки 2-*4С-оротовой кислотой.

4.1.3. Влияние ингибитора митохондриальной трансляции хлор-амфеникола на ранний подъем биосинтеза ядерной РНК

4.2. Биосинтез РНК в системе изолированных ядер.

4.2.1. Методы исследования.

4.2.2. Динамика эндогенной активности хроматина изолированных ядер.

4.2.3. Изменение активности РНК-полимеразы I и II в первые часы после частичной гепатэктомии

4.2.4. Влияние ингибиторов цитоплазматической и митохондри-альной трансляции на эндогенную активность хроматина изолированных ядер.

4.2.5. Влияние цитозола на эндогенную активность хроматина изолированных ядер

4.2.6. Биосинтез РНК в перекрестных системах, состоящих из ядер и цитозола покоящейся и регенерирующей печени

4.2.7. Частичная очистка цитоплазматического фактора из регенерирующей печени крыс

4.2,8. Механизм действия цитоплазматического "фактора регенерации"

ГЛАВА 5. ТРАНСКРИПЦИЯ ЯДЕРНЫХ РНК, КОМПЛЕМЕНТАРНЫХ

ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЯМ ДНК, С РАЗЛИЧНОЙ ЧАСТОТОЙ ПОВТОРЯЕМОСТИ.

5.1. Метода исследования.

5.2. Определение содержания транскриптов с различных по частоте повторяемости последовательностей ДНК

5.3. Изучение сложности ядерной РНК, транскрибируемой с различных последовательностей ДНК.

ГЛАВА 6. АВТОРАДИОГРАФИЧЕСКАЯ И ЭЛЕКГРОШО-МИКРОЖОПИЧЕСКАЯ

ХАРАКТЕРИСТИКА РАННИХ ЭТАПОВ РЕГЕНЕРАЦИИ

6.1. Метода исследования.

6.2. Авторадиографическое изучение биосинтеза РНК

6.3. Ультраструктурные изменения гепатоцитов

6.4. Топографическая характеристика митохондрий

ГЛАВА 7. ЦИТОПЛАЗМАТИЧЕСКИЕ иРНК и ИРНП.

7.1. Метода исследования.

7.2. Выявление в цитоплазме последовательностей РНК, аналогичных таковым в различных фракциях ядерной РНК

7.3. Информационные РНК цитоплазмы

7.4. Свободные цитоплазматические иРНП регенерирующей печени.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Экспрессия генома на ранних стадиях регенерации печени, вызванной частичной гепатэктомией"

Организм, орган, ткань, клетка, субклеточные и надмолекулярные структуры, молекулы - уровни организации живой материи, познание которых является большим достижением биологии последних нескольких десятилетий XX века. Успехи морфологии, физиологии, биохимии, молекулярной биологии и других дисциплин привели к тому, что мы теперь знаем основные принципы хранения и реализации генетической информации, понимаем, что в основе жизнедеятельности организма ведущую роль играют механизмы, осуществляющие и контролирующие экспрессию генома. Эти механизмы всё более усложняются по мере эволюционного роста; сложность их достигает максимума у высших эукариот.

Одним из аспектов сложной и многогранной проблемы регуляции экспрессии генетической информации у высших организмов является вопрос, как осуществляется переход высокодифференцированных клеток из одного функционального состояния в другое. Этот процесс имеет место при действии гормональных факторов на ткань-мишень, при резком изменений гуморальной среды, вызванном, например, изменением пищевого рациона. Большой интерес как с общебиологических, так и с медикобиологических позиций представляют собой системы, обладающие высокой пролиферативной активностью. К их числу относятся, прежде всего, ткани, интенсивно пролиферирующие в течение всей жизни организма (кроветворная система, слизистый эпителий кишечного тракта). Другие органы и ткани (печень, почки), отличающиеся низким митотическим индексом, обладают высокой потенциальной способностью к регенерации после действия различных повреждающих эти органы факторов. Ими могут быть либо паренхиматозные яды, либо экспериментально вызванное резкое снижение функции, обусловленное хирургическим удалением части органа (частичная гепатэктомия или односторонняя нефректомия).

В связи с анатомическими особенностями строения печени грызунов регенерация печени, вызванная частичной гепатэктомией, является одной из наиболее удобных экспериментальных моделей для изучения регенераторных процессов. Достоинства этой модели заключаются в следующем:

1. Высокая степень синхронизации клеточного цикла гепатоци-тов;

2. Разобщение во времени начала пролиферации гепатоцитов и соединительно-тканных элементов печени;

3. Простота и доступность модели, короткие сроки эксперимента®

Регенерация печени, вызванная частичной гепатэктомией, широко используется в различных биохимических и морфологических исследованиях, как модель для изучения интенсивно проходящих биосинтетических процессов. Этой стороне регенерации печени посвящено значительное число публикаций, тем более, что строго контролируемый рост клеток печени является идеальным контролем для изучения процессов гепатоканцерогенеза.

Как и для других пролиферирупцих тканей, для регенерирующей после частичной гепатэктомии печени можно выделить предмитоти-ческую и пролиферативные фазы регенерации. Первая, предмитотиче-ская стадия регенерации печени, представляет особый интерес с точки зрения регуляции экспрессии генома, так как именно в этой фазе закладываются основы "перепрограммирования" генетического аппарата клеток печени в ответ на пролиферативный стимул. Термин "перепрограммирование" был впервые предложен Цаневым (Tsa-nev, 1975) и подразумевает временное изменение спектра синтезируемых клеткой белков в ответ на адаптогенный стимул.

В свою очередь, предмитотическую стадию клеточного цикла регенерации) можно разделить на раннюю (переход клеток из gq в Gj фазу клеточного цикла) и позднюю, непосредственно связанную с началом репликации ДНК (Gj - s). Применительно к регенерирующей печени ранняя предмитотическая фаза соответствует первым 10 - 12 ч после частичной гепатэктомии, вторая - 12 - 24 ч после операции. Поздняя предмитотическая стадия регенерации печени характеризуется максимальной интенсивностью биосинтетических процессов и наиболее полно охарактеризована в литературе.

Наибольший интерес с точки зрения выяснения механизмов перепрограммирования генома клеток, стимулированных к пролиферации, имеет ранняя предмитотическая фаза. Из общих соображений ясно, что именно в первые часы после действия стимулирующего фактора должны начать проявляться молекулярные механизмы, подготавливающие клетку к делению. Тем не менее, тленно этим срокам регенерации в литературе, посвященной регенерирующей печени, не уделялось должного внимания. Следует особо отметить отсутствие данных по динамике процессов реализации генетической информации в первые часы после частичной гепатэктомии.

В соответствии с представлениями, существующими в настоящее время, регуляция экспрессии генетическом информации у высших эукариот может осуществляться на следующих уровнях:

I) транскрипция; 2) процессинг (сплайсинг); 3) транспорт информации из ядра в цитоплазму; 4) трансляция.

Задачей введения не является детальный анализ всех этих возможностей применительно к регенерирующей печени, однако, необходимо определить основные направления настоящей работы, вытекающие из обозначенных выше этапов экспрессии генетической информации. Эти направления включают в себя решение следующих основных задач:

I. Изучение роли ядерной ДНК-зависимой РНК-полимеразы в раннем ответе клеток на пролиферативный стимул;

2. Выяснение значения цитоплазматических, в том числе мито-хондриальных факторов, в перепрограммировании гепатоцитов, стимулированных к делению;

3. Изучение транскрибируемости последовательностей ДНК, различающихся по частоте повторяемости;

4. Выявление особенностей транспорта ядерной РНК в цитоплазму и её характеристика в составе цитоплазматических РНП.

Обоснование постановки этих задач вытекает из следующих предпосылок .

I. Ядерная ДНК-зависимая РНК-полимераза является ключевым ферментом транскрипции. Она отличается сложным субъединичным строением, которое, как считается, связано с процессами регуляции транскрипции. У эукариот описано три формы ядерной РНК-по-лимеразы, различающиеся по синтезируемому ими продукту (РНК-по-лимераза I, синтезирующая 18 и 28S рибосомальные РНК; РНК-поли-мераза П, ответственная за синтез гетерогенной ядерной РНК и РНК-полимераза Ш, катализирующая синтез низкомолекулярных рибо-сомальшх и транспортных РНК).

Известно также, что при изменении функционального состояния клетки меняется активность отдельных форм фермента. В случае регенерирующей печени описано существенное возрастание активности РНК-полимеразы I через 10 - 12 ч после частичной гепатэкто-мии. Однако динамика изменения активности различных форм РНК-полимера зы в первые часы после операции плохо изучена, тогда как выяснение этого вопроса представляется весьма актуальной задачей.

В настоящей работе представлены как результаты изучения РНК-синтезирующей способности изолированных ядер, так и активности отдельных форм частично очищенной РНК-полимеразы в динамике предмитотической фазы регенерации печени.

2. Роль цитоплазмы в регуляции активности ядерного генома общеизвестна. Немаловажное значение во взаимосвязи цитоплазмы и ядра имеет тот факт, что все без исключения компоненты аппарата транскрипции синтезируются на цитоплазматических рибосомах, что и обусловливает роль аппарата трансляции в транскрипции ядерного генома. В литературе описаны различные цитоплазма-тические факторы, активирующие или ингибирующие биосинтез ядерной РНК, однако, механизм действия этих факторов на процесс транскрипции ядерного генома остаётся не ясным. Имеются единичные публикаций, посвященные роли цитоплазмы в биосинтезе ядерной РНК и её транспорте из ядра, относящиеся к поздней предмитотической фазе регенерации печени. Что касается ранней предмитотической стадии регенерации печени, то сведения о взаимосвязи цитоплазмы и ядра отсутствуют. В связи с этим представляло несомненный интерес выяснение роли цитоплазмы в активности ядерной РНК-синтезирущей системы в первые часы после частичной гепатэктомии.

В эукариотических клетках наряду с информацией, закодированной в дцерном геноме, имеет место генотип, обусловленный наличием ДНК в субклеточных структурах. Применительно к животным клеткам, последний связан с наличием в них митохондрий, содержащих митохондриальную ДНК. Информационная ёмкость митохоядри-ального генома невелика и не может обеспечить кодирования всех компонентов митохондриального матрекса; многие митохондриальные белки кодируются ядерным геномом, транслируются на рибосомах цитоплазмы и затем включаются в состав митохондрий. Несмотря на значительную зависимость от ядерного генома, должна тлеть место и обратная взаимосвязь митохондриального генотипа с ядром. Что касается низших эукариот (нейроспоры), то на этом объекте убедительными экспериментами показана роль трансляции митохондри-альных рибосом в активности ядерных генов, ответственных за синтез митохондриальной РНК-ПОЛИМера ЗЫ (Barath, Kuntzel, 1972).

Предварительные электронно-микроскопические исследования ранних этапов регенерации печени в первый час после частичной гепатэктомии, в условиях блокирования митохондриальной трансляции, стимулировали предположение, что в раннем пролиферативном ответе генома ядра гепатоцитов немаловажную роль имеет трансляция рибосом митохондрий. Выяснению этой возможности, имеющей очень важное общебиологическое значение, посвящен один из разделов работы.

3. Вопрос о том, сопровождается ли пролиферативный ответ клеток изменением объёма транскрибируемой информации, до настоящего времени остаётся открытым. Не известно,также, меняет-ли при этом спектр транскрибируемых последовательностей ДНК, различающихся по частоте повторяемости. Последний вопрос имеет немаловажное значение для выяснения роли различных последовательностей ДНК в регуляции экспрессии генома вообще и в перепрограммировании генома клеток, стимулированных к пролиферации, в частности.

Сведения об объёме реализуемой в процессе регенерации печени генетической информации крайне противоречивы. Наряду с данными об увеличении транскрибируемой информации, имеются также литературные сведения о значительном её сужении в регенерирующей печени. Однако эти сведения носят хаотический характер в смысле их отношения к определённым фазам регенерации (клеточного цикла) и с трудом поддаются систематизации.

Одной из задач работы было выяснение возможности изменения транскрибируемости различных последовательностей генома регенерирующей печени и их представительства в составе различных фракций гетерогенной ядерной РНК, а также изучение возможного изменения объёма транскрибируемой информации в первые часы после стимулирования гепатоцитов к пролиферации.

4. В современных представлениях о регуляции экспрессии генома у эукариот важная роль отводится посттранскрипционному контролю потока генетической информации. Считается, что важную ре-гуляторную роль в процессах регуляции биосинтеза белка тлеют этапы транспорта ядерной РНК в цитоплазму и её накопление в составе цитоплазматических рибонуклеопротеидов. Последнее связано с обнаружением специфических РВП-частиц, названных информосомами, которые могут депонировать информационную РНК с последующим её освобождением для трансляции под действием соответствующего регуляторного сигнала. Запасание в цитоплазме информационной РНК с последующей её реализацией описано в раннем эмбриогенезе амфибий и рыб.

Для регенерирующей печени нет данных о возможной регуляции потока генетической информации, связанной с цитоплазматически-ми рибонуклеопротеидами, как нет данных и о наличии информосом Е регенерирующей печени. Одной из задач работы было выяснение возможности накопления в регенерирующей печени цитоплазматических РНП, содержащих определённые классы информационных РНК (иРНК для рибосомальных белков и гистонов).

Итак, на основании изложенных выше основных задач диссертационной работы можно сформулировать её основную цель - выяснение последовательности биохимических и молекулярных механизмов, сопровождающих процесс перепрограммирования генома клеток, стимулированных к пролиферации.

По материалам исследований опубликовано 38 научных работ, основные положения диссертации обсувдены на республиканских и всесоюзных конференциях и съездах, а также на международных симпозиумах, посвященных структуре и функциям генома.

В выполнении настоящей работы на разных её этапах принимали участие сотрудники отдела молекулярных механизмов биосинтеза белка и лаборатории инструментальных методов исследования Института молекулярной биологии и генетики All УССР, а также сотрудники Института проблем онкологии АН УССР и Института биохимии им. А.В. Палладина АН УССР.

От Института молекулярной биологии и генетики АН УССР - ст. н. сотр., к.б.н. С.М. Желябовская, мл. научн. сотр., к.б.н. П.Я. Смалько, Т.В. Корнюшина, М.Ю. Оболенская, Т.Е. Герасимова, ст. инженеры В.И. Прима, I.M. Лебедева, Э.Г. Лисица, К.М. Билич.

От Института проблем онкологии АН УССР - ст.н.с., к.б.н. В.М. Андрианов.

От Института биохимии им. А.В. Палладина АН УССР - ст.н.с., к.б.н. А.С. Полицук, д.б.н. В.П. Короткоручко.

Автор выражает искреннюю признательность член-корр. АН СССР Г.П. Георгиеву за научную и методическую помощь в выполнении некоторых разделов настоящей работы.

Заключение Диссертация по теме "Биохимия", Платонов, Олег Максимович

ВЫВОДЫ

I. Ранние этапы перепрограммирования генома гепатоцитов, стимулированных к пролиферации частичной гепатэктомией, тесно связаны и координированы с цитоплазматической и митохондриальной трансляциями: предварительное введение ингибитора цитоплазматической трансляции циклогексимида полностью блокирует ранний подъём РНК-полиме-разной активности изолированных ядер гепатоцитов; получен и частично очищен белковый фактор, названный "фактором регенерации", механизм действия которого связан с переводом "свободной" формы РНК-полимеразы I в матрично активное состояние; радиоавтографические данные свидетельствуют о важной роли ядрышка в процессе переноса в цитоплазму ядерной РНК; ранние этапы регенерации (30 и 60 мин) характеризуются тропизмом митохондрий к ядру; хлорамфеникол не только блокирует тропизм митохондрий к ядру, но и подъём биосинтеза рибосомальной РНК в первые 1,5 ч после частичной гепатэктомии; высказывается предположение о возможной общности митохондриальной РНК-полимеразы с одной из субъединиц ядрышковой РНК-полимеразы I. Эта общность может обусловливать координированный ответ ядерного и митохондриального геномов на пролиферативный стимул.

II. Перепрограммирование генома гепатоцитов в первые 3 ч после частичной гепатэктомии сопровождается качественным и количественным изменением спектра транскрибируемых последовательностей да; снижается сложность ядерной РНК за счёт существенного снижения сложности транскриптов с уникальных последовательностей ДНК; существенно увеличивается транскрибируемость среднеповторяющихся последовательностей ДНК, в то время как сложность транскриптов с частоповторяющейся фракции ДНК (3x10^) остаётся неизменной; изменяется число копий транскриптов с различных последовательностей ДНК.

III. Перепрограммирование генома гепатоцитов сопровождается изменением транспорта РНК из ядра в цитоплазму как на самых ранних стадиях регенерации, так и в предмитотическом периоде: ускоряется переход ядерной РНК в цитоплазму; в цитоплазме появляются РНК, не характерные для покоящейся печени; на определённых стадиях регенерации в цитоплазме накапливаются рибонуклеопротеиды, содержащие индивидуальные информационные РНК (информосомы).

201 ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Полученные нами экспериментальные данные, касающиеся различных аспектов экспрессии генетической информации в раннем предми-тотическом периоде регенерации печени, свидетельствуют о том, что перепрограммирование покоящихся гепатоцитов к делению является сложным, многокомпонентным процессом, начинающимся сразу после частичной гепатэктомии.

Изменения биосинтетической программы проявляются не только на биохимическом уровне (транскрипция ядерной РНК, её транспорт в цитоплазму, появление цитоплазматического "фактора регенерации"), но и сопровождаются перестройкой ультраструктурных компонентов клетки, участвующих в реализации генетической информации. Получены также данные о влиянии митохондриального генома на ранние изменения транскрипции ядерного генома.

Анализу этих результатов, а также объяснению взаимосвязи обнаруженных нами изменений экспрессии генетической информации по-свящён заключительный раздел работы.

I. Одним из наиболее ранних проявлений изменения экспрессии генетической информации (из описанных в литературе и характерных для регенерирующей печени) является появление в цитоплазме обнаруженного нами "фактора регенерации". Белковая природа этого фактора подтверждается как его термолабильностью, так и экспериментами с ингибитором цитоплазматической трансляции циклогекси-мидом, вводимым до частичной гепатэктомии.

Естественно, возникает вопрос о природе иРНК для этого фактора. Существует две возможности: I) иРНК для фактора регенерации синтезируется de novo и тогда транскрипция этой РНК должна быть первой реакцией генома на действие неизвестного пока триг-герщго ; механизма, запускающего процесс регенерации печени, или 2) иРНК для фактора регенерации предсуществует в покоящейся печени и активируется сразу после операции. Прямые экспериментальные данные в пользу одного из этих вариантов отсутствуют, однако, вероятный выбор в пользу одного из них будет сделан позднее. Не вызывает сомнения тот факт, что появление в цитоплазме фактора регенерации, является трансляционно зависимым процессом.

Второй немаловажный вопрос связан с возможной гетерогенностью фактора регенерации. Как показано в работе И.Н. Тодорова с сотр. (Гутникова и др., 1980), изучающего ингибирующий процесс транскрипции цитоплазматические белковые факторы, последние представляют собой достаточно гетерогенный материал, состоящий как из специфических, так и неспецифических белков. В разделе 4.2.6 представлены данные, свидетельствующие о том, что роль неспецифических компонентов цитозола (РНКазы, сериновые протеазы) вряд ли существенна в активирующем действии фактора регенерации. Однако предположение о гетерогенности фактора регенерации может быть подтверждено или отвергнуто только после дальнейшей очистки этой фракции цитозола.

Эксперименты по изучению действия цитозола из регенерирующей печени на ядра из регенерирующей печени в разные сроки после частичной гепатэктомии и сравнение этих данных с результатами, полученными в перекрестных системах с использованием ядер из покоящейся печени (рис. 20) позволяет предположить, что "фактор регенераций" либо присутствует в цитоплазме очень непродолжительное время, либо ядра чувствительны к его действию в очень короткий период регенерации (не позднее 1,5 ч после операции) . Учитывая данныеMatsui et ai. (1976) о наличии в ядрышке гепатоцитов покоящейся печени свободной (не связанной с хроматином) формы РНК-полимеразы I, нами было высказано предположение, что ранняя активация РНК-полимеразной активности изолированных ядер и биосинтеза ядерной РНК in vivo обусловлено переводом свободной формы РНК-полимеразы I в связанное с матрицей состояние. Иными словами, механизм ранней активации биосинтеза РНК сразу после частичной гепатэктомии связан с увеличением числа сайтов инициации ядрышковой РНК-полимеразы.

Косвенным подтверждением этому предположению являются данные, полученные по радиоавтографическому изучению биосинтеза РНК в разные сроки после операции (рис. 35 а, б). В этих экспериментах было обнаружено, что через 3 ч после ЧГ в части ядрышек синтез РНК угнетен, тогда как в другой части он существенно активирован. Наиболее вероятным объяснением неадекватного ответа ядрышек на пролиферативный стимул является предположение, что не все ядрышки содержат матрично не связанный фермент. Включение метки над нуклеоплазмой мало изменяется в этот срок регенерации, свидетельствуя о том, что ранний подъём биосинтеза РНК связан в основном с активацией ядрышковой РНК-полимеразы.

Предположение о переходе "свободного" фермента в транскрип-ционно активную матрично связанную форму получило окончательное подтверждение в экспериментах по блокированию эндогенной активности хроматина актиномицином Д и изучению активности "свободного" фермента на матрице поли (дА) - поли (дТ). В бесклеточной системе, состоящей из ядер и цитозола из покоящейся печени, обнаружена значительная активность "свободной" формы фермента (рис. 25). Короткая прединкубация ядер покоящейся печени с ци-тозолом через I ч после частичной гепатэктомии приводит к тому, что вся РНК-синтезирующая способность ядер выявляется в матрично связанной форме. Замена цитозола на отдельные его фракции, элюируемые с КМ-целлюлозы, свидетельствуют о том, что способностью перевода "свободного" фермента в активное состояние обладают только фракции, соответствующие "фактору регенерации".

Таким образом, активирующее действие "фактора регенерации" на РНК-синтезирующую способность изолированных ядер связано с переводом неактивной свободной формы РНК-полимеразы I в матрич-но активное состояние. Изучение субъединичного состава "свободной" и матрично связанной формы РНК-полимеразы I, проведенное Матцуи и др., показало, что в "свободной" форме отсутствует одна из субъединиц (65000 Д), присутствующая в связанном с хроматином ферменте. Возникает естественное предположение, что "фактор регенерации" либо представляет собой эту недостающую субъединицу, либо способствует её присоединению к неактивному ферменту. Выбор между этими возможностями тесно связан с выяснением митохондриально-ядерных взаимоотношений.

Проведенные нами впервые электронно-микроскопические исследования гепатоцитов печени через 0,5: I и 3 ч после частичной гепатэктомии выявило необычное расположение митохондрий в клетке, ранее не описанное в литературе. В отличие от покоящейся печени, митохондрии печени через 30 и 60 мин после операции концентрируются возле ядерной мембраны. Для исключения субъективной оценки электронограмм была проведена морфометрия гепатоцитов с оценкой частоты встречаемости этого явления в динамике процесса регенерации. Достоверность приближения митохондрий к ядерной мембране не вызывает сомнения.

Необходимо обратить внимание на тот факт, что митохондрии концентрируются возле тех участков ядерной мембраны, где обнаруживается либо смещённое к периферии активно работающее ядрышко, либо где в зоне внутренней ядерной мембране отмечается скопление электронно-плотного участка эухроматина. Эта особенность приближения митохондрий к активно транскрибируемым зонам хроматина исключает возможные артефакты, связанные с фиксацией материала для электронограмм.

Функциональная природа этого явления не ясна и, как уже отмечалось, не описана для объектов, стимулированных к пролиферации. Обсуждению могут быть подвергнуты три предположения: I) приближение митохондрий к ядерной мембране связано с возрастающими энергетическими потребностями ядра, связанными с усилением биосинтетических процессов; 2) контакт ядер и митохондрий необходим для передачи последним генетической информации, необходимой митохондриям в последующих процессах, связанных с перепрограммированием генетической информации гепатоцитов, подготавливающихся к пролиферации; 3) митохондриально-ядерный контакт обусловлен необходимостью передачи информации в направлении митохондрии—*-ядро. Рассмотрим более подробно эти возможности.

1. Через 0,5 и I ч после частичной гепатэктомии синтез РНК как в опытах in vivo , так и in vitro угнетен. Увеличение биосинтеза ядерной РНК в опытах in vivo носит кратковременный характер и, вряд ли, требует существенных энергетических затрат. Кроме того, никем не описано, что усиление транскрипции ядерного генома требует контакта ядра с митохондриями. В то же время в момент максимально напряжённой биосинтетической активности ядра через 6 - 12 ч после ластичной гепатэктомии ядерно-мито-хондриальный контакт, хотя и имеет место, но он значительно менее выражен, чем в первый час после операции.

2. Кодирующая ёмкость мтДНК обеспечивает синтез только 10 -15 % структурных элементов митохондрий. К числу их относится большая и малая РНК, около 20 тРНК, три субъединицы цитохромо-ксидазы, одна субъединица цитохрома В, четыре субъединицы АТФ-синтетазного комплекса и ещё неидентифицированные продукты, составляющие до 35 % кодирующей ёмкости мтДНК. Все остальные белковые компоненты митохондрий кодируются ядерным геномом, соответствующие им информационные РНК транслируются на цитоплазматических рибосомах, продукты трансляции переносятся в митохондрии (Гаузе, 1977). Вероятно, какая-то часть информационных РНК, транскрибируемых в ядре, может транслироваться и на митохондри-альных рибосомах, но экспериментальные данные по этому вопросу отсутствуют.

Таким образом, ядерно-митохондриальный контакт для обеспечения органелл белками, кодируемыми ядерным геномом, не является необходимым, поскольку эти белки транслируются на рибосомах цитоплазмы.

3. Возможность контроля активности ядерного генома со стороны белковых факторов, транслируемых на митохондриальных рибосомах, изучена крайне недостаточно, несмотря на то, что а priori существование в клетке двух геномов, даже существенно различающихся по информационной ёмкости, требует координации их активности. Наиболее весомые данные в пользу предположения о роли митохондриальной трансляции в транскрипции ядерного генома получены в экспериментах Бараца и Кюнтцеля яан.сгаава (Barath, Kiint-zel, 1972, 1972а).

Этими авторами было показано, что синтез митохондриальной РНК-полимеразы, кодируемой ядерным геномом, контролируется мито-хондриальным репрессором, блокирование которого ингибитором митохондриальной трансляции хлорамфениколом приводит к существенному накоплению в клетке мит.РНК-полимеразы.

Собственные наблюдения, а также результаты экспериментов Бараца и Кюнтцеля, стимулировали наши эксперименты по проверке возможной роли митохондриальной трансляции в активации транскрипции ядерного генома на начальных стадиях регенерации печени.

Эксперименты проводились in vitro и in vivo с использованием ингибитора трансляции митохондриальных рибосом хлорамфени-кола. В системе изолированных ядер, содержащих митохондрии из покоящейся и регенерирующей печени, нами не была обнаружена разница в РНК-синтезирующей способности хроматина ядра (рис.14), Хлорамфеникол также не влиял на способность цитозола из регенерирующей печени активировать синтез РНК изолированными ядрами покоящейся печени. Отрицательные результаты, полученные в опытах in vitro, могут быть интерпретированы двояко. Либо мито-хондриальная трансляция не влияет на изменение РНК-полимеразной активности ядер, либо использованные нами бесклеточные системы не являются достаточно полными для решения этого вопроса.

Эксперименты с введением антибиотика in vivo позволяют сделать выбор в пользу второго предположения.

П. В литературе, посвящённой ранним стадиям регенерации печени, систематическое изучение динамики биосинтетических процессов начинается, как правило, с 2 - 3-х часов после частичной гепатэктомии. В значительной степени осторожность изучения первых часов после операции связана с представлением о повреждающем действии последней, в результате которой могут развиваться побочные явления, связанные с послеоперационным токсикозом, отёчностью ткани и др. Однако экспериментальные данные, полученные в последние годы, свидетельствуют в пользу того, что ранние изменения биосинтетического аппарата гепатоцитов генетически детерминированы и не связаны с механическими повреждениями, вызванными частичной гепатэктомией.

Из наиболее ранних работ, свидетельствующих в пользу этого предположения, следует отметить эксперименты по кратковременному прерыванию кровообращения в системе v. porta, обеспечивающей снабжение кровью двух третей печени, подвергаемых частичной гепатэктомии. Кратковременное накладывание лигатуры

2-3 мин) на эти сосуды приводит к изменению биосинтеза РНК, напоминающее аналогичное при истинной операции (Tsukada, Lie-berman, 1965). Однако, в отличив от частичной гепатэктомии, накладывание временной лигатуры не приводит к подготовке гепатоцитов к митотическому циклу, то есть отсутствует инициация репликации ДНК.

Представление о дистрофических изменения гепатоцитов, полученные в ранних электронно-микроскопических исследованиях регенерации печени, опровергаются данными (Fahimi,i967) с использованием более щадящих методов фиксации ткани.

Приведенные выше данные литературы достаточно убедительно опровергают предположение о том, что ранние изменения метаболизма гепатоцитов обусловлены токсическим эффектом, вызванным частичной гепатэктомией.

Изменение уровня биосинтеза РНК на ранних стадиях регенерации печени изучалось нами как в РНК-полимеразной системе изолированных ядер, так и в опытах in vivo при короткой экспозиции с 2-^С-оротатом натрия. Динамика изменения биосинтеза РНК в этих двух группах экспериментов оказалась достаточно сходной. Сразу после частичной гепатэктомии отмечается резкое снижение биосинтеза РНК, достигающее максимума через 0,5 - I ч после операции. Вслед за этим отмечается как увеличение РНК-полиме-разной активности изолированных ядер, так и увеличение удельной радиоактивности ядерной РНК после импульсной метки in vivo. В последнем случае первый максимум включения меченого оротата отмечается через 1,5 ч после частичной гепатэктомии с последующим небольшим снижением, за которым следует дальнейшая активация биосинтеза ядерной РНК. Для РНК-полимеразной активности изолированных ядер характерно прогрессивное увеличение активности, начиная с первого часа после частичной гепатэктомии, и достигающее максимума через 6 - 12 ч после операции. Отсутствие дискретности возрастания РНК-полимеразной активности, возможно, связано с большими интервалами её изучения по сравнению с экспериментами in vivo. Тем не менее сходный характер динамики изменения биосинтеза РНК в опытах in vivo и in vitro не вызывает сомнений.

Описанная выше кинетика изменения эндогенной РНК-синтезиру-ющей активности хроматина изолированных яцер печени на ранних этапах регенерации полностью снимается предварительным введением ингибитора цитоплазматической трансляции циклогексимида. Этот ингибирующий эффект действия циклогексимида прежде всего свидетельствует о том, что ранние изменения в активности транскрипционного аппарата ядра клеток, стимулированных к пролиферации, обусловлены, трансляцией иРНК, необходимых для активации ядерного генома. Эксперименты с циклогексимидом исключают также возможность объяснения раннего снижения биосинтеза РНК как следствие послеоперационной травмы.

Обнаруженное нами снижение биосинтеза ядерной РНК и РНК-полимеразной активности изолированных ядер через I ч после частичной гепатэктомии хорошо координирует с изменением свойств хроматина ядер, описанным в литературе (Kushch et al., 1974, 1978; Alvarez, 1974; Кущ и др., 1975, 1976). Именно в этот срок после операции гистохимическими методами было показано, существенное изменение термочувствительности хроматина, его способности к связыванию с актиномицином Д и акридиновым оранжевым. Интересно отметить, что подобные изменения свойств хроматина носят кратковременный характер и уже через 2 - 3 ч после частичной гепатэктомии хроматин по этим показателям не отличается от контроля. Механизм подобного изменения свойств хроматина наиболее вероятно связан с обнаруженным в лаборатории Зе

Ленина изменением свойств гистона HI (Батова и др., 1979). Авторы показали, что через I ч после операции гистон HI вступает в комплекс с каким-то высокополимерным соединением, что приводит к существенному снижению его окрашивания красителем после электрофореза в полиакриламидном геле. Этот комплекс, вероятно, существует очень короткое время, так как через 2 ч после операции поведение гистона HI не отличается от контроля. Гистон HI, как считается, принимает участие в процессах конденсации-деконденсации хроматина и изменение его электрофоретических свойств через I ч после операции наиболее вероятно связано с кратковременным изменением состояния конденсации хроматина.

Таким образом, в основе обнаруженного нами снижения биосинтеза ядерной РНК и РНК-полимеразной активности в первый час после частичной гепатэктомии лежит изменение свойств и структуры хроматина. Как следует из наших данных и данных литературы, эти изменения начинаются сразу после операции и заканчиваются не позднее чем через I ч после неё. Этот период и является, по-видимому, ключевым в процессе перепрограммирования генома гепатоцитов, стимулированных к пролиферации частичной гепатэктомией. Тот факт, что предварительное введение циклогексимида ингибиру-ет этот процесс, свидетельствует о важной роли в нем процесса трансляции на рибосомах цитоплазмы.

III. Хлорамфеникол является специфическим ингибитором трансляции митохондриальных (и прокариотических) рибосом. Сложность использования этого антибиотика на высших животных связана с его быстрой детоксикацией в печени и быстрым снижением концентрации в крови. Однако, как следует из фундаментальных исследований, проведенных в лаборатории Крона (De Vries, Kroon, 1970), использованные нами концентрации антибиотика (30 мг/100 г веса животного) достаточны для поддержания в крови концентрации антибиотика, при которой митохондриальная трансляция эффективно ингибируется в течение 1,5 - 2-х часов после его введения.

Предварительное введение хлорамфеникола в указанной дозе полностью снимало характерную для первых 3-х часов после операции динамику изменения удельной радиоактивности ядерной РНК после 30 мин экспозиции с меченым оротатом. С целью выяснения природы РНК, синтезируемой в первые 1,5 часа после частичной гепатэктомии, последняя была подвергнута фракционированию в градиенте концентрации сахарозы. Экстракция тотальной ядерной РНК проводилась в условиях, способствующих максимальному сохранению натив-ности препарата.

При 30-ти минутной экспозиции с меченым предшественником профиль радиоактивности РНК, выделенной через 1,5 ч после частичной гепатэктомии, характеризуется существенным возрастанием удельной радиоактивности в зоне 18 и 28s . Низкие дозы актино-мицина Д полностью снимают возрастание удельной радиоактивности в этой зоне с сохранением радиоактивности в пределах 4 - 12 S, что свидетельствует в пользу ядрышковой природы активации биосинтеза РНК в первые часы после частичной гепатэктомии.

Предварительное введение хлорамфеникола до частичной гепатэктомии приводит к полному восстановлению профиля ядерной РНК, характерному для покоящейся печени (рис. 2). Таким образом, хлорамфеникол ингибирует подъём биосинтеза ядерной РНК, характерный для первых 1,5 ч после операции, практически не влияя на седиментационный профиль РНК, синтезируемой покоящейся печенью. Обращает на себя внимание тот факт, что блокируется не только активация биосинтеза ядерной РНК, но и его снижение, отмечаемое в первый час после операции. Иными словами, перепрограммирование ядерного генома гепатоцитов, стимулированных к пролиферации зависит не только от цитоплазматической трансляции, но и каким-то образом связано с трансляцией митохондри-альных рибосом.

Собственные экспериментальные данные, а также анализ сведений литературы, позволяют нам сделать некоторые обобщения относительно возможной взаимосвязи митохондриальной трансляции и транскрипции ядерного генома. Предлагаемая нами концепция вытекает из следующих данных.

1) Согласно гипотезе Бараца и Кюнтцеля (Barath, Kuntzel, 1972) транскрипция генов, кодируемых ядерным геномом, контролируется на уровне митохондриальной трансляций. Ими получены убедительные данные, в пользу этого предположения на низших эука-риотах.

2) Активация раннего подъёма биосинтеза ядерной РНК, связанного со стимуляцией гепатоцитов к пролиферации, ингибируется хлорамфениколом.

3) Цитоплазматический "фактор регенерации" способствует переходу "свободной" формы РНК-полимеразы в матрично-связанное состояние .

4) Отсутствие в одной из изоформ РНК-полимеразы I субъединицы с молекулярной массой 65000 д, характерной для "матрично-связанной" РНК-полимеразы.

5) Молекулярная масса митохондриальной РНК-полимеразы печени крыс, определяемая разными авторами, колеблется в пределах

•э

64 - 66 • 10° дальтон (Reid, Parsous, 1971; Muker;jee, Goldfeder, 1973). Приведенные данные позволяют предположить, что митохондриальная РНК-полимераза идентична одной из субъединиц ядрышковой РНК-полимеразы.

Естественно, возникает вопрос, почему ранее не возникало подобное предположение? I) Ранее не проводились исследования биосинтеза ядерной РНК в первые часы после частичной гепатэктомии; 2) не исследовалась взаимосвязь митонхондриальной трансляции с транскрипцией ядерного генома. Предположение о частичной общности РНК-полимеразных систем ядра и митохондрий облегчает объяснение координированного их ответа на пролиферативный стимул.

Предлагаем схематическое изображение модели взаимодействия митохондриального и ядерного генома в первые часы после частичной гепатэктомии (рис. 54).

В свете предлагаемой гипотезы становятся понятными неудачи, связанные с попытками установить влияние митохондриальной трансляции на ядерную транскрипцию в опытах in vitro ; подобная система должна состоять из РНК-полимеразной системы изолированных ядер, системы биосинтеза белка на цитоплазматических рибосомах и полную митохондриальную систему, включающую транскрипцию митохондриальной ДНК и трансляцию мит. рибосом.

Какова возможная функциональная роль координации процессов транскрипции ядерного и митохондриального геномов на ранних стадиях регенерации печени? Как уже неоднократно упоминалось, процесс перепрограммирования генома гепатоцитов, стимулированных к пролиферации частичной гепатэктомией, протекает очень быстро и практически заканчивается через I - 1,5 ч после операции. Подобная быстрая реакция генетического аппарата связана, вероятно, с тем, что в покоящейся печени предшествуют некоторые компоненты аппарата транскрипции, активируемые частичной гепатэктомией. К их числу могут относиться "свободная" форма ядерной РНК-полимеразы и информационная РНК для "фактора регенерации", участвующего, как нами было показано, в активации "свободной" формы фермента. Недостающим компонентом для начала интенсификации синтеза ядерной РНК является одна из субъединиц ядерной РНК-по-лимеразы, ген для которой дерепрессируется митохондриальным

Рис. 54. Схема взаимодействия ядерного и митохондриального геномов в первые часы после частичной гепатэктомии фактором. Плата, которую митохондрии получают за участие в активации ядерного синтеза - митохондриальная РНК-полимераза, необходимая им для подготовки к делению.

Конечно, предлагаемая нами схема взаимодействия митохонд-риального и ядерного генома на ранних этапах регенерации печени далека от совершенства. Один из основных её компонентов -идентичность митохондриальной РНК-полимеразы и одной из субъединиц ядерного фермента - постулируется, но остаётся не доказанным. Прямое его доказательство возможно путём выделения чистых полипептидов из ядра и митохондрий и их сравнения методом пептидного картирования или иммунологически. Решение этой сложной, но реально выполнимой задачи представляет большой общебиологический интерес.

1У. Одним из подходов к изучению экспрессии генома у эукариот, широко используемым в настоящее время, является изучение сложности и состава первичного продукта транскрипции - гетерогенной ядерной РЖ. За последние годы появился ряд публикаций, посвяшённых изменению состава и сложности гетерогенной ядерной РЖ, а также полисомальной поли(А+)-РНК в регенерирующей печени. В настоящей работе изучалась транскрипция различный семейств последовательностей ДНК двумя различными методами; гибридизацией в избытке ДЖ и гибридизацией в избытке РЖ. В процессе работы для обоих методов была апробирована и успешно использована гибридизация в растворах формамида в условиях,практически исключающих реассоциацию ДНК.

Первоначальной задачей было выяснение возможного изменения транскрипции различных последовательностей ДНК в первые три часа после частичной гепатэктомии. С этой целью использовались как тотальные препараты гетерогенной ядерной РЖ, так и её отдельные фракции, меченые in vivo в течение часовой экспозиции с 2-*4С-оротатом натрия. В связи с тем, что животных забивали через I ч после введения меченого предшественника, необходимо иметь в виду, что препарат, выделенный, например, через 3 ч после операции, включал метку в интервале 2 - 3 ч после операции.

Кинетика гибридизации меченой ядерной РНК, выделенной через I и 2 ч после частичной гепатэктомии, с избытком тотальной ядерной ДНК не отличалась от контроля. Через 3 ч после операции обнаружено существенное снижение скорости гибридизации одной из фракций гетерогенной ядерной дРНК (flPHKggo). Это снижение наэ блюдается для величин Сот выше 10 , характерных для гибридизации уникальных последовательностей ДНК.

Детальное обсуждение возможных интерпретаций полученных данных представлено в разделе 5.2. Предварительно выдвинутое предположение об изменении транскрипции уникальных последовательностей ДНК через 3 ч после частичной гепатэктомии, получило подтверждение в экспериментах с гибридизацией отдельных фракций ДНК в формамидной системе. При гибридизации в водных растворах образование гибридов РНК/ДНК происходит в условиях конкуренции со стороны реассоциации ДНК. Для сложной гетерогенной системы, каковой является РНК и ДНК высших животных, оценить реальный избыток ДНК для различных последовательностей полинуклеотидов практически невозможно. Уже в первых работах по гибридизации в растворах формамида было показано, что при соответствующих концентрациях последнего и определенной температуре инкубации образование РНК/ДНК гибридов протекает в отсутствии реассоциации ДНК. Имеющиеся в литературе сведения по использованию формамида в этих целях разработаны применительно к сравнительно простым системам, состоящим из нуклеиновых кислот прокариотических организмов. Нами впервые были отработаны условия, исключающие не только реассоциацию тотальной ядерной

ДНК крысы, но и отдельно выделенных повторяющихся фракций, с включая фракцию с частотой повторения 3-10 .

Важным достоинством проведения гибридизации в формамидных условиях является значительное упрощение её математического описания. В отсутствии реассоциации, при большом избытке одного из компонентов,гибридизация является реакцией псевдо-первого по-рядка(В1зЬор, 1972):

Н - 1 - е-КСо* где н - степень гибридизации следового компонента, к - константа скорости гибридизации, со - концентрация избыточного компонента, t- время. Подобное упрощение математического описания позволяет получить ценную информацию путём анализа кинетических данных численными методами на ЭВМ.

Высказанное нами ранее предположение о том, что изменение кинетики гибридизации через 3 ч после частичной гепатэктомии связано со значительным увеличением числа отдельных копий РНК, транскрибированных с уникальных последовательностей ДНК, подтвердилось гибридизнцией в формамидных условиях. Существенных качественных различий в транскрибируемости отдельных фракций ДНК через 3 ч после частичной гепатэктомии нами не обнаружено. В норме и через 3 ч после операции из приблизительно 50 %-нож гибридизуемой дРНК^дО доля транскриптов в составе РНК из покоящейся и регенерирующей печени составляет соответственно: с УП-30 % И 30 %, с РП - 4,5 И 5 %, с СП - 12,5 и 12 %, с ЧП - 0,8 и 1,5 %.

Данные о проценте транскрибируемости отдельных последовательностей генома и сложности соответствующих транскриптов и их изменении через 3 ч после частичной гепатэктомии получены методом гибридизации в формамиде в присутствии большого избытка тотальной ядерной РНК. На фоне снижения сложности тотального препарата яРНК и соответственно уникальных транскриптов через 3 ч после операции отмечается повышение сложности транскриптов с частоповторящейся фракции генома. Необходимо отметить, что данные о транскрибируемости частоповторящейся фракции получены нами впервые, как, естественно, и её изменения при регенерации печени. Это стало возможным благодаря использованию форм-амидной методики, надёжно исключающей реассоциацию даже ГЦ-бо-гатых часто повторяющихся последовательностей ДНК. Предпринимаемые ранее попытки определить возможность гибридизации са-теллитных ДНК мыши и человека давали настолько низкий уровень связывания, что он был отнесен к возможным примеоям других (не сателлитных) последовательностей ДНК (Harel et al., 1968; Me Hi et al., 1975).

Поскольку структурно-функциональная роль часто повторяющихся последовательностей генома крысы неизвестна, то, естественно, изменение их транскрибируемости на ранних этапах ; регерации печени не может быть однозначно интерпретировано. Может быть только высказано предположение, что увеличение сложности РНК, транскрибированной с этихбпоследовательностей, связано с увеличением числа копий транскриптов с уникальных последовательностей ДНК, имеющим место в этот же период регенерации.

Что касается транскрибируемости различных последовательностей ДНК, то через 3 ч после операции она существенно снижена для уникальных последовательностей, что определяет общее снижение сложности ядерной РНК. Транскрибируемость средне повторяющихся последовательностей возрастает с 1,9 до 2,5 %. Эти данные хорошо согласуются с результатами, полученными в лаборатории Р.И. Салганика с использованием хроматина, обогащённого транскрипционно активной фракцией (Дашкевич, Аршинова, 1977; Дашкевич и др., 1979). Увеличение транскрибируемости средне повторяющейся фракции ДНК может быть связана как с увеличением биосинтеза рибосомальных РНК, так и с синтезом других транс-криптов, которым в литературе отводится регуляторная роль.

Имеющиеся в литературе сведения об изменении сложности ядерной и полисомальной РНК в ходе регенерации достаточно противоречивы. Так, через 12 ч после операции группой Фаусто и сотр. не было обнаружено существенных изменений в объёме транскрибируемой информации (Colbert et al., 1977; Tedschi et al., 1978). Некоторое снижение сложности РНК, транскрибируемой через 2,5 и 48 ч после частичной гепатэктомии,было обнаружено методом повторной гибридизации транскрипционно активной ДНК с тотальной клеточной РНК (Grady et al., 1979). Снижение сложности избыточного класса через 3 ч после частичной гепатэктомии было показано в работе (Krieg et al., 1979).Они же показали снижение или даже исчезновение некоторых последовательностей, представленных небольшим числом копий, в этот срок после операции.

Обнаруженное нами существенное снижение сложности ядерной РНК через 3 ч после операции, не наблюдаемое ранее, может быть связано не только с использованием системы, препятствующей ре-ассоциации ДНК, но и применением тотального препарата ядерной РНК, в отличие от поли(А+), использованной в большинстве работ, которая, как известно, составляет только часть ядерных транскрипт ов .

Изменение спектра транскрибируемых последовательностей, как отмечалось выше, имеет место не ранее чем через 2 ч после операции (с учётом длительности экспозиции метки). Именно к этому сроку заканчивается ранний биосинтез ядерной РНК, идентифицированной нами как рибосомальная 18 и 28S РНК. Случайна ли эта временная последовательность активации биосинтеза рибо-сомальной и гетерогенной ядерной РНК? Имеющиеся данные литературы позволяют предположить важную роль ядрышковой РНК в транспорте информационной РНК из ядра в цитоплазму. Сведения об участии ядрышек в переносе РНК из ядра в цитоплазму были впервые получены Харрисом и соавторами в опытах по гибридизации клеток (Harris, 1972; 1973; Deak et al., 1972; Deak, 1973; Sidebottom, Deak, 1976). Вскоре после слияния эритроцита курицы с клеткой человека или мыши в ядре эритроцита начинает синтезироваться значительное количество РНК. Судя по месту синтеза (нуклеоплаз-ма), эта РНК, скорее всего является информационной РНК. Это предположение подкрепляется её седиментационными свойствами и чувствительностью к специфическому ингибитору РНК-полимеразы II <х - аманитину. Радиоавтографически было показано, что в первые 2 дня после слияния в реактивированном ядре эритроцита ещё нет ядрышек и иРНК, несмотря на её активный синтез, за пределы ядра не перемещается. Аналогично, если при слиянии клеток с двумя различными ядрами (мыши и человека) гетерокарион облучали ультрафиолетом, то метка концентрировалась в ядре и над цитоплазмой не появлялась. Через 4-5 дней после слияния, когда в эритроците появлялось ядрышко, метка из ядра быстро перемещалась в цитоплазму. Эти данные свидетельствуют об участии йдрыш-ка в переносе не только той РНК, которая синтезировалсь в нем самом, но и РНК, которая образовалась вне ядрышкового аппарата. Основываясь на результатах этих экспериментов, Харрис предполагает, что ядрышко по отношению к иРНК выполняет не только функцию "транспортного средства", но и является регулятором, определяющим количество иРНК, переходящей в цитоплазму.

Подобная транспортная функция ядрышек вполне коррелирует с неодновременным синтезом в них РНК и перемещением их к ядерной мембране, по мере накопления в ядре вновь синтезированной РНК(stocker et al., 1961; Саркисов итдр., 1975). Радиоавтографические данные, полученные при различной экспозиции с меченым оротатом, через 3 ч после частичной гепатэктомии, также позволили нам высказать аналогичное предположение. Оно основывалось на анализе данных по изучению среднего числа зерен серебра над цитоплазмой гепатоцитов интактных и оперированных животных и относительного содержания метки над этими структурами. Это наблюдение было нами впоследствии подтверждено электронно-радио-авт©графическими данными при импульсной метке (*%)-оротатом натрия. Интенсивное включение меченого предшественника наиболее заметно над смещенным к периферии ядра ядрышком. При этом, как правило, отмечаются тяжи зерен серебра, свидетельствующие о транспорте в цитоплазму, синтезированной в ядрышке РНК. Ядрышки, расположенные в центре ядра, как правило, не содержат над собой зерен серебра, что вполне согласуется с высказанными ранее предположениями о транспортной роли ядрышек.

Таким образом, поставленный нами ранее вопрос о возможной взаимосвязи биосинтеза ядрышковой РНК с биогенезом гетерогенной ядерной РНК на ранних этапах регенерации печени вполне обоснован не только данными литературы, но и собственными экспериментами. Поэтому можно предположить, что активация биосинтеза ядрышковой РНК через I - 1,5 ч после частичной гепатэктомии и изменение спектра транскрибируемых последовательностей ДНК через 2 - 3 ч после операции связаны между собой не только временными, но и причинно-следственными взаимоотношениями. Что касается транспорта ядерной РНК в цитоплазму, то полученные нами радиоавтографические данные свидетельствуют об ускорении перехода вновь синтезированной РНК в цитоплазму через 3 и особенно через 6 ч после операции. Характерно, что если в покоящейся печени содержание зерен серебра над цитоплазмой возрастает скачкообразно по мере увеличения времени с момента введения метки до забоя животных (максимум I - 2 ч после введения меченого предшественника), то через 3 и 6 ч после операции промежуток времени между образованием РНК и ее появлением в цитоплазме существенно сокращается. Полученные нами данные хорошо коррелируют с результатами кинетического определения времени полужизни и скорости процессинга иРНК, свидетельствующими о существенном сокращении этих параметров в регенерирующей печени (Чернов-ская и др., 1976).

Одним из интересных и мало изученных аспектов транспорта РНК в цитоплазму регенерирующей печени является возможность переноса в цитоплазму видов РНК, которые в покоящейся печени не покидают ядра. Подобный вопрос является частью актуальной проблемы регуляции экспрессии генетической информации на уровне транспорта ядерной РНК в цитоплазму. Впервые поставленный в 1968 г. Древзом и др. (Drews et al., 1968), он и в настоящее время далек от решения.

Однако полученные в настоящей работе данные по конкурентной гибридизации цитоплазматической РНК с фракциями ядерной дРНК, свидетельствуют об изменении представительства в цитоплазме регенерирующей печени отдельных фракций ядерных РЖ. Взаимоотношения дРНК^о и дРНК^дО не установлены, но опираясь на ранее высказанные предположения о возможной их связи по типу предшественник-продукт, можно предполагать ускорение превращения ядерных предшественников иРНК и их перехода в цитоплазму. Иными. словами, полученные данные косвенно подтверждают высказанное ранее предположение об ускорении в регенерирующей печени процессинга иРНК.

Описанные нами собственные данные и данные литературы по перепрограммированию генетической информации клеток печени, стимулированных к пролиферации, не были связаны с экспрессией отдельных генов. Изучение полисомальных информационных РНК, а также РНК, полученных из пострибосомного экстракта, позволило нам высказать некоторые предположения относительно динамики изменения содержания в цитоплазме индивидуальных иРНК. Анализ нуклеотидного состава, электрофоретической подвижности, содержания полиаденилированных последовательностей этих РНК позволил высказать предположение о накоплении в цитоплазме регенерирующей печени иРНК для рибосомальных белков и иРНК для гистонов соответственно через 6 и 21 ч после частичной гепатэктомии.

Максимумы накопления иРНК в цитоплазме совпадают с максимумами содержания свободных информационных рибонуклеопротеидов (иРНП), идентифицированных нами по плотностным характеристикам как информосомы. Характерно, что содержание информосом в пост-рибосомном экстракте гепатоцитов возрастает в периоды активации биосинтеза белка и является минимальным в покоящейся печени. Накопление в цитоплазме свободных иРНП связано, вероятно, с несоответствием объёма информации, поступающей в цитоплазму, и возможностью её трансляции. Однако, если подобное несоответствие и имеет место, то оно имеет кратковременный характер, поскольку максимумы накопления иРНК и иРНП соответствуют описанным в литературе периодам интенсификации белкового синтеза, а также теоретически возможным максимумам биосинтеза рибосомальных белков и гистонов.

Библиография Диссертация по биологии, доктора биологических наук, Платонов, Олег Максимович, Киев

1. Ананьев Е.В., Ильин Ю.В., Чуриков Н.А. Множественные рассеянные ПО хромосомам гены Drosophila melanogaster с вариирующей локализацией. 3. Определение сайтов локализации фрагментов Дм118А и Дм118В. Генетика, 1979, т.15, № 8, с.1360-1372

2. Арбузов В.А. Регуляция синтеза белка. Стабильность мРНК как один из факторов регуляции синтеза белка в клетках эукариотов. Успехи соврем, биол., 1977, т.83, № I, с. I63-I8I

3. Арион В.Я., Георгиев Г.П. О функциональной гетерогенности хромосомальной информационной РНК. Докл. АН СССР, 1967, т. 17$, № 3, с. 716-721

4. Арион В.Я., Мантьева В.Л., Георгиев Г.П. Разделение метаболи-чевки стабильной и лабильной информационных РНК ядер животных клеток. Мол. биол., 1967, тЛ, № 5, с.689-698

5. Баранов Ю.Н., Забойкина Т.Н., Дубовая В.И., Тарантул В.З., Газарян К.Г. Полиуридиловая последовательность в мРНК глобина голубя. Докл. АН СССР, 1977, т.234, № 5, с. 955-957

6. Батова И.Н., Содоре О.Ю., Федосеева Г.Е., Зеленин А.В. Необычное электрофоретическое поведение гистона HI при активации хроматина печени крыс. Докл. АН СССР, 1979, т.249, № 4, с.998-1002

7. Белоусова А.К., Алёхина Р.П. Действие пептидного антибиотика глобимицина на процесс транскрипции в клетках регенерирующей печени крыс. В кн.: Метаболизм клеточного ядра и ядерно-ци-топлазматические отношения. - Киев : Наук, думка, 1970, с.167-169

8. Борисова О.Ф., Афанасенко Г.А., Рысков А.П., Царегородцев В.И. Изучение вторичной структуры ядерных предшественников информационной РНК (про-мРНК). — Мол. биол., 1976, т. 10, № 5,с. I094-1102

9. Быкорез А.И., Пинчук В.Г. Экспериментальные опухоли печени: Моделирование, морфогенез, ультраструктура. Киев : Науков. думка, 1976. - 278 с.

10. Василенко С.К., Камзолова С.Г., Кнорре А.Г. Прямой спектрофо-тометрический метод количественного определения нуклеотидного состава рибонуклеиновых кислот. Биохимия, 1962, т.27, № I, с. 142-148

11. Веденов А.А., Дыхне A.M., Франк-Каменецкий М.Д. Переход спираль-клубок в ДНК. Успехи физ. наук, 1971, т.Ю5, № 3,с. 479-519

12. Вольпе П. Биохимия клеточного цикла. М. : Мир, 1979,

13. Воронина А.С., Степанов А.С. Белковый РНК-связывающий фактор экстрактов животных клеток. Характеристика взаимодействия двух фракций РНК-связывающего белка с РНК. Биохимия, 1972, т.37, № 2, с.437-445

14. Воронина А.С., Степанов А.С., Овчинников Л.П. Белковый РНК-связывающий фактор экстрактов животных клеток. Образованиеинформособных частиц РНК-связываюгцим белком клеток печеникрысы. Биохимия, 1972, т.37, № I, с. 10-15

15. Воронина А.С., Степанов А.С., Преображенский А.А., Овчинников Л.П. Биохимия, 1972, т.37, №2, с. 430-436

16. Газарян К.Г., Тарантул В.З., Баранов Ю.Н., Липасова В.А., Гибридизация гигантских молекуул РНК эритробластов с повторяющимися и уникальными последовательностями ДНК. Мол. биол.,1974, т.8, № 2, с.372-379

17. Газарян К.Г., Тарантул В.З. Молекулярная организация и экспрессия генома эукариотов. Онтогенез, 1978, т.9, № I, с. 2038

18. Газарян К.Г., Тарантул В.З. Успехи в изучнии генов у эукариот. Онтогенез, 1980, т. II, № 2, с.115-129

19. Газиев А.И., Закржевская Д.Т., Уманский С.Р. и др. Полинуклео-тидлигазная активность негистоновых белков хроматина клеток костного мозга. Докл. АН СССР, 1971, т.199, № 2, с.470-473

20. Галактионов В.Г., Алексеева Н.Ю., Бэкман Э.М., Гребцова Л.Б., Арион В.Я., Горбачева Л.Д. Отмена аллогенной ингибиции коло-ниеобразования с помощью различных классов РНК. Журн. микро-биол., 1978, т.1, с.75-79

21. Галкин А.П., Корнюшина Т.В., Верхацкая А.А. и др. Особенности синтеза РНК в срезах ткани печени крыс и клетках эмбрионов кур в условиях угнетения синтеза белка. Укр. биохим. журн.,1975, т.47, № 3, с.295-298

22. Галкин А.П., Митрохин Ю.И., Тодоров И.Н. Исследование биосинтеза РНК в митохондриях в условиях продолжительного угнетения биосинтеза белка в цитоплазме клеток печени крыс. Мол. биол.,1976, т.10, № 6, с. 1238-1247

23. Гаузе Г.Г. Митохондриальная ДНК. М., Наука, 1977, 287с.

24. Гвоздев В.А. Организация генома у эукариотов. Мол. биол., 1978, т.12, № I, с. 5-35

25. Георгиев Г.П., Мантьева B.JI. Информационная и рибосомальная РНК хромосомального-ядрышкового аппарата, методы разделения и нуклеотидный состав. Биохимия, 1962, т.27, № 5, с.949-957

26. Георгиев Г.П., О структуре единиц транскрипции в клетках эу-кариотов. Успехи биол. химии, т.14, 1973, с.3-46

27. Георгиев Г.П. Организация генетическлго материала в животных клетках. Журн. Всес. хим. общ. им. Менделеева, 1975, т.20, № 3, с.242-246

28. Георгиев Г.П. Организация генома у эукариот.- В кн. : Молекулярные механизмы генетических процессов. Структура и функция хромосом. Генетическая инженерия. -М., Наука, 1979, с. 17-42

29. Георгиев Г.П., Бакаев В.В. Три уровня структурной организации хромосом эукариотов. Мол. биол., 1978, т.12, № 6, с.1205-1230

30. Георгиев Г.П., Ильин Ю.В., Рысков А.П., Крамеров Д.А. Мобильные диспергированные генетичесеие элементы эукариот и их возможное отношение к канцерогенезу. Генетика, 1981, т.17,2, с. 222-231

31. Гутникова М.Н., Митрохин Ю.И., Бойков П.Я., Тодоров И.Н.0 сложной природе ингибирующего действия цитозола на транскрипцию в изолированных ядрах печеник крыс. Биохимия, 1980, т.45, № 10, с.1863-1869

32. Дашкевич B.C., Аршинова Т.В. Транскрипция и репликация ДНК в активном и реприссированном хроматине регенерирующей печени крыс. В кн. : Из-во Сиб. отд. АН СССР, 1977, № 5, в.1, с.83-86

33. Дашкевич B.C., Дударева Н.А., Салганик Р.И. и др. Изменения в составе транскрипционно активной ДНК печени крыс при гормональной индукции и регенерации. 1У.В кн. : 1У Всесоюхный симп.

34. Мол. мех. мол. ген. процессов, Тезисы докладов, М.,1979,с. II

35. Дворкин Г.А., Ефимова В.Ф., Коганицкая Л.И. Влияние цитоплазмы на синтез РНК в изолированных ядрах клеток печени крыс. -Докл. АН СССР, 1973, 210, № 2, с.461-463

36. Збарский И.Б. Связь ядерной оболочки со структурами цитоплазмы и механизмы ядерно-цитоплазматических отношений. Успехи совр.биологии, 1972, 73, № I, с.3-25

37. Збарский И.Б. Состав и свойства ядерной оболочки. В кн.: Клеточное ядро. Морфология, физиология, биохимия. - М.: Наука, 1972, с.229-245

38. Ильин Ю.В., Хмеляускайте В.Г., Кульгускин В.В. Множественные рассеянные ПО хромосомам гены Drosophila melanogasterс вариирующей локализацией. 7. Транскрипция мобильных диспергированных генов I и 3. Генетика, 1981, т. 17, № 2, с.211-221

39. Комар В.Е., Седова В.М. Характеристика ядерных РНК регенерирующей печени крыс. Мол.биол., 1973, т.7, № 3, с.353-359

40. Кричевская А.А., Георгиев Г.П. Ядерные рибонуклеопротеиды, содержащие информационную РНК. 7. Информатин. Мол.биол., 1973, т.7, № 2, с.168-173

41. Кущ А.А., Колесников В.А., Зеленин А.В. Изменения свойств хроматина клеток печени в ранние сроки после частичной гепатэктомии. -Мол. биол., 1975, т.9, № I, с.138-144

42. Кущ А.А., Колесников И.А., Ниязматов А.А. и др. Количественные цитохимические исследования хроматина гепатоцитов мыши в ранние сроки после частичной гепатэктомии. Цитология, 1976, т.18,1. Ш 4, с.490-493

43. Лихтенштейн Е.Б., Забойкин М.М., Алехина Р.П., Шалот B.C. Выявление фракции стабильной ядерной ДНК-подобной РНК в клетках печени крысы.- Докл. АН СССР, 1976, т.227, № I, с.240-243

44. Лишневская Е.Б. Мембранносвязанные рибосомы. Успехи соврем, биологии, 1977, т.83, № I, с.182-197

45. Луканидин Е.М., Георгиев Г.П., Виллиамсон Р. Ядерные рибонуклеопротеиды, содержащие информационную РНК. 9. Изучение белков информоферов и полисомных РНП, содержащих мРНК. Мол. биол., 1973, т.7, № 2, с.264-268

46. Мантейфель В.М., Ершов Ю.В., Бандрина И.Н., Зеленин А.В. Электронно-микроскопическое исследование хроматина в ядрах гепатоцитов im situ в первые часы после частичной гепатэктомии. -Мол. биол., 1977, т.II, №3, с.677-684

47. Мантьева В.Л., Арион В.Я. Влияние ультрафиолетового облучения на транскрипцию. Мол.биол., 1969, т.З, № 2, с.294-302

48. Мацука Г.Х., Ельская А.В., Коваленко М.И., Корнелюк А.И. Транспортные рибонуклеиновые кислоты. Киев : Наукова думка, 1976. - 219 с.

49. Молнар Я., Самарина О.П., Георгиев Г.П. Ядерные рибонуклеопро-теиды, содержащие информационную РНК. 5.Белковый состав частиц. Мол. Биол., 1968, т.2, № 6, с.795-806

50. Монахова М.А., Костенко А.И. К вопросу о контактировании хромосом с ядерной оболочкой. В кн.: Материалы II Всесоюзн. Симп. "Структура и функции клеточного ядра" : Тез. докл., М., 1970,с.185-191

51. Мотлох Н.Н. Цитология и биохимия митохондрий регенерирующей печени. Успехи совр. биологии, 1978, т.86, № 1(4), с.114-128

52. Овчинников Л.П., Воронина А.С., Степанов А.С. и др. Информосо-моподобные комплексы, образуемые при добавлении РНК к гомогена-там животных клеток. -Мол. биол., 1968, т.2, № 5, с.752-763

53. Овчинников Л.П., Белицина Н.В., Аванесов А.Ц., Спирин А.С. Пострибосомные РНК-содержащие частицы цитоплазиы животных клеток по данным анализа в градиенте плотности. Докл.АН СССР, 1969, т.186, № 5, с.1202-1205

54. Овчинников Л.П., Спирин А.С. Рибонуклеопротеидные частицы ци-топлазматических экстрактов животных клеток. Успехи совр. биологии, 1971, т.71, № I, с.3-17

55. Ойвин И.А. Статистическая обработка результатов экспериментальных исследований. Патол. физиол. эксперимент, терапия, I960, № 4, с.76-85

56. Плохинский Н.А. Биометрия. М. : Изд-во МГУ, 1970, 366с

57. Подобед О.В., Брыкина Е.В., Абакумова О.Ю. и др. Метаболическая характеристика содержащей поли(А) мРНК клеток печени. Мол. биол., 1974, т.8, № 6, с.936-943

58. Попов А.К., Федотов А.Р. Информационная РНК ретикулоцитов кролика, не связанная с рибосомами. Докл. АН СССР, 1975, т.$ 5, с.1199-1201

59. Прима В.И., Платонов О.М., Газарян К.Г. Анализ реассоциации фракций ДНК крысы. Биохимия, 1980, т.45, № 3, с.498-506

60. Самарина О.П., Асриян И.С., Георгиев Г.П. Выделение ядерных нуклеопротеидов, содержащих информационную РНК. Докл.

61. АН СССР, 1965, т.163, № 6, с.1510-1513

62. Самарина О.П., Кричевская А.А., Брусков В.И. и др. Ядерные рибонуклеопротеиды, содержащие информационную РНК (выделение и свойства). Мол.биол., 1967, т.1, № I, с.129-141

63. Саркисов Д.С., Пальцын А.А., Втюрин Б.В. Приспособительная перестройка биоритмов. М. : Медицина, 1975, 182с

64. Смирнова Н.В., Родионов В.М. Соотношение во времени между синтезом ДНК и гистонов в регенерирующей печени крыс. Биохимия, 1974, т.39, № 6, с.1264-1269

65. Спирин А.С., Белицина Н.В., Айтхожин М.А. Информационные РНК в раннем эмбриогенезе. I. О "периодичности" морфогенетической активности ядер в раннем эмбриогенезе. Журн. общ. биологии, 1964, т.25, № 5, с.321-338

66. Степанов А.С., Воронина А.С., Овчинников Л.П., Спирин А.С. -Белковый РНК-связывающий фактор экстрактов животных клеток. Обнаружение и характеристика белкового РНК-связывающего фактора экстрактов животных клеток. Биохимия, 1972, т.37, № I,с.3-9

67. Тарантул В.З., Липасова В.А., Баранов Ю.Н., Газарян К.Г. Исследование долгоживущих ядерных РНК эритроидных клеток птиц.- Мол. биол., 1974, т.8, № 6, с.864-870

68. Тодоров И.Н., Галкин А.П., Корнюшина Т.В. и др. Синтез РНК в печени крыс в условиях угнетения синтеза белка циклогексимидом.- Укр. биохими. журн., 1974, т.46, № 4, с.431-437

69. Тодоров И.Н., Шен Р.А., Галкин А.П. Цитоплазматический ингибитор процессов транскрипции в печени крыс. Докл. АН СССР, 1975, т.224, № 3, с.717-720

70. Тодоров И.Н., Шен Р.А., Желябовская С.М., Галкин А.П. Исследование контроля биосинтеза РНК в печени крыс. Особенности биосинтеза РНК в условиях длительного подавления биосинтеза белка. Биохимия, 1976, т.41, № 10, с.1859-1870

71. Хансон К.П., Животовский Б.Д. Транскрипция повторяющихся и уникальных последовательностей ДНК тимуса крысы, стимулированных фитогемагглютинином. Биохимия, 1976, т.41, № II, с.2031-2036

72. Харрис Г. Ядро и цитоплазма. М. : Мир, 1973. - 190с

73. Цанев П.Г., Марков Г.Г. К вопросу о количественном спектрофо-тометрическом определении нуклеиновых кислот. Биохимия, I960, т.25, № I, с.151-155

74. Черновская Т.В., Любимова Е.В., Лерман М.И. Метаболизм мРНКв клетках регенерирующей печени: ускорение процессинга и распада мРНК. Мол. биол., 1976, т.10, № 6, с.1361-1368

75. Чуриков Н.А., Ильин Ю.В., Георгиев Г.П. Новый принцип организации генетического материала у эукариот. Докл. АН СССР, 1978, т.239, № 2, с.218-222

76. Adesnik M., Darnell J.E. Biogenesis and. characterization of histone mRNA in HeLa cells. J. Mol. Biol., 1972, v.-67, N 3, p. 397-406

77. Allfrey V.G. Role of chromosomal proteins in gene activation. In : Biochemistry of cell division. / Ed. Baserga R. - Spri-engfield, 1969, p. 179-205

78. Alvarez M.R. Early nuclear cytochemical changes in regenerating mammalian liver. Expl. Cell Res., 1974, v. 83, N 2, p. 225-230

79. Ananiev E.V., Gvozdev V.A., Ilyin Y.V. et al. Reiterated genes with varying location in intercalary heterochromatin regions of Drosophila melanogaster polytene chromosomes. Chromosoma, 1978, v. 70, p. 1-12

80. Arnold E.A., Young K.E. Low molecular weight chromatin-associ-ated RNA from rat liver. Biochem. Biophys. Acta, 1972, v.269, N 2, p.252-261

81. Arnstein H.R.V., Bonanou-Tzedaki S.A., Pragnell J.B. Haemoglobin messenger in the postribosomal supernatant of reticulocytes. Biochem. Soc. Transactions, 1973, v. 1, N 3, p.561-565

82. Aronsen K.F., Ericson В., Nosslin B. et al. Evaluation of he-pati с regeneration by scintillation scanning, cholangiography and angiography in man. Ann. Surg., 1970, v.171, N 3, p.567-574

83. Artman M., Roth J.S. Chromosomal RNA : an artifact of preparation. J. Mol. Biol., 1971, v.60, N 2, p. 291-301

84. Attardi G., Parnas H., Hwang M.L.H., Attardi B. Giant-size rapidly labeled nuclear RNA and cytoplasmic messenger RNA in immature duck erytrocytes. J. Mol. Biol., 1966, v.20, N 1, p. 14-5-183

85. Axel R., Cedar H., Felsenfeld G. Synthesis of globin RNA from duck-reticulocyte chromatin in vitro. Proc. Nat. Acad. Sci. USA, 1973, v.70, N 6, p. 2029-2032

86. Axel R., Fiegelson P., Schutz G. Analysis of the complexity and diversity of mRNA from chicken liver and oviduct. Cell, 1976, v. 1, p. 247-254

87. Bade E.G. Biological and ultrastructural aspects of early stages of liver regenerating. In : Control of cellular Growth in Adult organisms. / Eds. Teir H., Rytomaa T. N.Y. : Acad. Press, 1967, p. 260-269

88. Bag J., Sarkar S. Studies on a nonpolysomal RNP coding for myossin heavy chains from chick embryonic muscles. J. Biol. Chem., 1976, v.251, p. 7600-7609

89. Bantl e J.A., Hahn W.E. Complexity and characterization of polyadenylated RNA in the mouse brain. Cell, 1976, v.8, N 1, p. 139-150

90. Barath Z., Kuntzel H. Cooperation of mitochondrial and nuclear genes specifying the mitochondrial genetic apparatis in the Neurospora crassa. Proc. Nat. Acad. Sci. USA, 1972,v.69, N 6, p. 1371-1374

91. Barath Z., Kiintzel H. Induction of mitochondrial RNA polymerase in Neurospora crassa. Nature New Biol., 1972a, v.240, N 102, p. 195-197

92. Bastian Ch. Comparative studies on transcription in isolated nuclei. Effect of homologous and heterologous cytosol. Biochem. Biochem. Res. Communs., 1977, v.74, N 5, p.1109-1115

93. Bastos R.N., Volloch Z., Avin H. Messenger RNA population analysis during erythroid differentiation : a kinetical approach. J. Mol. Biol., 1977, v,110, N 1, p. 191-203

94. Becker P.P., Broome J.D. L-asparaginase : ingibition of endogenous RNA polymerase activity regenerating liver. -Arch. Biochem., 1969, v. 130, N 1, p. 332-336

95. Becker P.P., Baserga R., Broome J.D. Effect of L-asparagina-ses on DNA synthesis in regenerating liver and in other dividing tissues. Cancer Res., 1970, v. 30, N 1, p.133-137

96. Bekhor I., Hung G.M., Bonner J. Sequence-specific interaction of DNA and chromosomal protein. J. Mol. Biol., 1969, v. 39, N 2, p. 351-364

97. Benecke B.-J., Penman S. A new class of small nuclear RNA molecules synthesized dy a type 1 RNA-polymerase in HeLa cells. Cell, 1977, v. 12, N 12, p. 939-946

98. Berger S.L., Cooper H.L. Very short lived and stable in RNA-s from resting human lymphocytes. Proc. Nat. Acad. Sci. USA, 1975, v. 72, N 10, p.3873-3877

99. Berger s.l., Cooper h.l. The relationship between hnRNA poly(A and poly (A~) RNA in non-dividing human lymphocytes. Biochem. Biophys. Acta, 1978, v. 517, N 1, p. 84-98

100. Bernard O.D., Jackson J., Cory S., Adams J.M. Noncoding nuc-leotide sequences in the 3- terminal region of a mouse immunoglobulin k-chain mRNA determined by analysis of cDNA. -Biochemistry, 1977, v.16, N 18, p.4117-4125

101. Bishop J.O. Molecular hybridization of RNA with a large excess of DNA. Biochem. J., 1972, v.126, N 1, p.171-185

102. Bishop J.O. DNA-RNA hybridization. Acta endocrinol., 1972, v. 71, N 168, p.247-276

103. Bishop J.O., Morton J. G., Rosbash M., Richardson M. Three abundance classes in HeLa cell messenger RNA. -,Nature, 1974, v. 250, N 5^63, p.199-204

104. Biswas B.B., Ganguly A., Das A. Eukariotic RNA polymerases and the factors that control them. In. : Progress in Nucleic Acid Research & Mol. Biol., 1975, v. 15, p. 145-184

105. Blobel G. A protein of molecular weight 78 000 bound to the pmlyadenylated region of eucariotic messenger RNAs. Proc;. Nat. Acad. Sci. USA, 1973, v. 70, N 3, p. 924-928

106. Bonner J., Huang R.C. Histones as specific repressors of chromosomal RNA synthesis in histones, their role.- transfer of genetic information. London, 1966, p.18-28

107. Bont W.S., Reselman G., Miesner I., Bloemendal H. Studies on cytoplasmic RNA from rat liver.8. Stability of polyribosomes from normal and regenerating rat liver. Arch. Biochem., 1967, v.119, N 1, p.36-40

108. Brandhorst B.P., Humphreys T. Synthesis and decay rates of major classes of deoxyribonucleic acid like RNA in sea urchin embryos. Biochemistry, 1971, v. 10, N 5, p. 877-881

109. Brandhorst B.P., McConkey E.H. Stability of nuclear RNA in mammalian cells. J. Mol. Biol., 1974, v.85, N 2, p.451-464

110. Breathnach R., Mandel J. L., Ghambon P. Ovalbumin gene is splitin chicken DNA. Nature, 1977, v.270, N 5601, p.314-319

111. Breathnach R., Benoist С., О'Наге K. et al. Ovalbumin gene : Evidence for a leader sequence in mRNA and DNA sequences at the exon-intron boundaries. Proc. Nat. Acad. Sci. USA, 1978, v.75, N 10, p.4853-4857

112. Bresnick E., Thompson U.B., Morris H.P., Liebelt A.G. Inhibition of thymidine kinase activity in liver and hepatomas by TTP and dCTP. Biochim. Biophys. Res.Commun., 1964, v.16, N 2, p.278-284

113. Bresnick E., Williams S.S., Moss& H. Rate of turnover of deo-xythymidine kinase and of its template RNA in regenerating and control liver. Cancer Res., 1967, v.27, N 2, p.467-475

114. Briane D., Jalouzot R., Gontcharoff M. Variation du taux d'eu1 1 1 1chromatine au cours de la regeneration du foie de rat. Biol, cell, 1978, v.31, N 1, p.1-6

115. Britten R.J., Davidson E.H. Gene regulation for higher cells ; a theory. Science, 1969, v.165, N 3890, p.349-357

116. Britten R.J., Graham D.E., Neufeld B.R. Analysis of repeating DNA sequences by reassociation. In: Methods Enzymol., 1974, V.29E, p.363-418

117. Britten R.J., Kohne D.E. Repeated sequences in DNA. Science, 1968, v.161,N 3841, p.520-540

118. Brown D.D., Littna E. Rna synthesis during the development of Xenopus laevis the South African clawed toad. J. Mol. Biol., 1964, v.8, N 4, p.669-673

119. Brown D.D., Weber C.S. Gene linkage by RNA-DNA hybridization. 1. Unique DNA sequences homologous to 4 S RNA, 5 S RNA and ribosomal RNA. J. Mol. Biol., 1968, v.34, N 3, p.661-680

120. Brues A.M., Drury D.R., Brues M.C. Quantitive study of cell growth in regenerating liver. Arch. Pathol., 1936, v.22,1. N 5, p.658-673

121. Bucher N.L.E. Regeneration of mammalian liver. Intern. Rev. Cytology, 1963, v.15, P.245-268

122. Bucher N.L.R., Malt R.A. Regeneration of liver and kidney. -Buston : Little, Brown, and Company, 1971

123. Bucher N.L.E., Swaffield M.N. Rate og incorporation of labeled thymidine into DNA of regenerating rat liver in relation to amount of liver excised. Cancer Res., 1964, v.24, N 9, p. 1611-162514

124. Bucher N.L.R., Swaffield M.N. Nucleotide pools and (6- ) orotic acid incorporation in early regenerating rat liver. Bio-chem. Biophys. Acta, 1966, v.129, N 3, p.445-459

125. Buckingham M.E., Caput D., Cohen A. et al. Ihe synthesis and stability of cytoplasmic mRNA during myoblast differentiation in culture. Proc. Nat. Acad. Sci. USA, 1974, v.71, N 4, p. 66-70

126. Busch S.,Chambon P., Mandel P., Weill J.D. The effect of partial hepatectomy on the RNA-polymerase of rat liver. Bio-chem. Biophys. Res. Comm., 1962, v.7, N 4, p.255-258

127. Caizergues-Ferrer M., Rouch C., Zalta J.-P. Purification of DNA-dependent RNA polymerase С from Zaidela hepatoma cells. -Eur. J. Biochem., 1976,v.69, N 2, p.527-534

128. Cameron J.R., Loh E.Y., Davis E.W. Evidence for transposition of dispersed repetitive DNA families in yeast. Cell, 1979, v. 16, p.739-750

129. Cammarano P., Melli M., Novell! G.D. Poly-U stimulated incorporation of phenylalanine by subfraction of liver microsomes. Biochem. J., 1963, v.89, N 3, 94P

130. Campbell P.N., Lowe E., Serck-Hanssen G. Protein synthesis by microsomal particles from regenerating rat liver. Biochem.

131. J., 1967, v.103, N 1, p.280-288

132. Campo M.S., Bichop J.O. Two classes of messenger RNA in cultured rat cells: repetitive sequences transcripts and unique sequence transcripts. J. Mol. Biol., 1974, v. 90, N 4, p. 649-663

133. Casey J., Davidson N. Rates of formation and thermal stabilities of RNA:DNA and DNA:DNA duplexes at high concentration of formamide. Nucl. Acids. Res., 1977, v.4, N 5, p.1539-1552

134. Catino J.J., Yeoman L.C., Mandel M., Busch H. Characterization of a DNA binding protein from rat liver chromatin which decreases during growth. Biochemistry, 1978, v.17, N 6, p.983-987

135. Chakravorty A.K., Bush H. Alkaline ribonuclease and ribonucle-ase inhibitor in nuclear and nucleolar preparations from normal and neoplasmic tissues. Cancer Res., 1967, v.27, N 3,p.789-792

136. Chaudhuri S., Doi 0., Lieberman I. The rate of ribosomal syn-thes in rat liver after partial hepatectomy. Biochem. Bioph-ys. Acta, 1967, v.134, N 3, p.479-486

137. Chen J.П., Spector A. The bicistronic nature of lens alfacrys-tallin 14 s RNA. Proc. Nat. Acad. Sci. USA, 1977, v.74, N 12, p.5448-5452

138. Church R.B., McCarthy B.J. Ribonucleic acid synthesis in regenerating and embryonic liver. J. Mol. Biol., 1967, v.23, N 3, p. 459-475

139. Church R.B., McCarthy B.J. Changes in nuclear and cytoplasmic RNA in regenerating mouse liver. Proc. Nat. Acad. Sci. USA, 1967a, v.58, N 4, p.1548-1555

140. Church R.B., McCarthy B.J. Changes in nuclear and cytoplasmic

141. RNA in regenerating mouse liver. Proc. Nat. Acad. Sci.USA, 1969, v.58, N 4, 1543-1555

142. CIarkson S.G., Kurer V., Smith H.O. Sequence organization of a cloned. tDNAmet fragment from Xenopus laevis. Cell, 1978,v. N 3, p.713-724

143. Colbert D.A., Tedeschi M.V., Atryzek V., Fausto N. Diversity of polyadenylated mRNA sequences in normal and 12-hr regenerating liver. Develop. Biol., 1977, v.59, N 1, 111-123

144. Comb D.G., Sarkar N., Rinziro C.J. The methylation of lysine residues in protein. J. Biol. Chem., 1966, v.241, N 8, p. 1857-1862

145. Cox R.E. Estrogen withdrawal in cluck oviduct. Selective loss of high abundance classes of polyadenylated messenger RNA. -Biochemistry, 1977, v.16, N 15, p.3433-3443155. 6rick F. Split genes and RNA splicing. Science, 1979, v.204, N 4390, p.264-271

146. Crothers D.M., Zimm B.H. Viscosity and sedimentation of the DNA from bacteriophages T2 and T7 and the relation to molecular weight. J. Mol. Biol., 1965, v.12, N 2, p.525-536

147. Curtis P.J., Weissman C. Purification of globin messenger RNA from dimethyl-sulfoxide-induced Friend cells and detection ofa putative globin mRNA precursor. J. Mol. Biol., 1976, v.106 , N 4, p.1061-1075

148. Dahmus M.E., Bonner J. Nucleoproteins in regulation of gene function. Fed. Proc.,1970, v.29, N 3, p.1255-1261

149. Daimel В., Louis Ch., Seceris C.E. The presence of small molecular weight RNAs in nuclear ribonucleoprotein particles carrying HnRNA. FEBS Lett., 1977, v.73, N 1, p.80-84

150. Darnell J.E., Implications of RNA-RNA splicing in evolution of eukaryotic cell. Science, 1978, v.202, N 437^, p.1257-1260

151. Darnell J.E., Jelinek W.R., Molloy G.R. Biogenesis of mRNA: genetic regulation in mammalian cell. Science, 1973, v.181, N 4106, p.1215-1221

152. Darnell J.E., Philipson L.,Walt R., Adesnik H. Polyadenylic acid sequences: role in conversion of nuclear RNA into messenger RNA. Science, 1971, v.174, N 4008, р.507-£Ю

153. Darnell J.E., Wall R., Tushinski R.J. An adenylic acid-rich sequence in messenger RNA of HeLa cells and its possible relationship to reiterated sites in DNA. Proc. Nat. Acad.Sci. USA, 1971, v.68, N 5, p.1321-1325

154. Davidson E.H., Britten R.J. Organization, transcription, and regulation in the animals genome. Quart. Rev. Biol., 1973, v.48, N 4, p.565-613

155. Davidson E.H., Britten R.J. Regulation of gene expression: Possible role of repetitive sequences. Science, 1979, v.204, N 4397, p.Ю52-1059

156. Davidson E.H., Klein W.H., Britten R.J. Sequence organization in animal DNA and a speculation on hnRNA as a coordinate regulatory transcript. Develop. Biol., 1977, v.55, N 1, p. 6984

157. Deak I. Further experiments on the role of the nucleolus in the transfer of RNA from nucleus to cytoplasm. J. Cell Sci., 1973, v.13, p.395-401

158. Deak I., Sidebottom E., Harris H. Further experiments on therole of the nucleolus in the expression of structural genes.- J Cell Sci., 1972, v.11, p.579-391

159. Dona C.M., Deeb S.S., Sueoka N. Sequence complexity of nuclear RNAs in adult rat tissues. Cell, 1978, v.13, N 1, p. 111-120

160. Drews J.,Brawerman G., Morris H.P. Nucleotide sequence homologies in nuclear and cytoplasmic RNA from rat liver and he-patomes. Eur. J. Biochem., 1968, v. 3,N 1, p.284-292

161. Edmonds M., Caramela M.G. The isolation and characterization of adenosine monophosphate-rich polynucleotides synthesized in Ehrlich ascites cells. J. Biol. Chem., 1969, v.244, N 5,p. 1314.-1324

162. Efstratiadis A., Kafatos E.C., Maniatis T. The primary structure of rabbit -globin mRNA as determined from cloned DNA.- Cell, 1977, v.10, N 3, p.571-585

163. Ehresmann B.,Imbault P., Well J.H. Spectrophotometry determination of protein concentration in cell extracts containing tRNA's and rRNA's. Anal. Biochem., 1973, v.54, N 2, p.454-463

164. Elska A., Matsuka G.Kh., Matyach Y.M. tRNA and aminoacyl tRNA synthetase during differentiation and under different functional stages on the mammary glands. Biochem. Biophys. Acta, 1971, v.247, N 2, p.430-^40

165. Enger M.D., Campbell E.W., Hanners J.L. Appearance of cytoplasmic informosomes in cultured Chinese hamster cells in the absence of protein synthesis. FEBS Lett., 1975, v.55, N 1, p.214-219

166. Eahimi H.D. Perfusion and immersion fixation of rat liver with glutaraldehyde. Lab. Invest., 1967, v.16, N 5, p.736-750

167. Б1 атасе M.-G.,Aellen M.-F., Briand P.-A. et al. No detectib-le reitBration of genes coding for mouse MOPC 41 immunoglobulin light-chain mRNA. Proc. Nat. Acad. Sci. USA, 1976,v.73, N 3, p.727-731

168. Fausto N., Colbert D.A., Greene R.F. , Tedeschi M.V. Transcriptional activity and gene expression during liver regeneration. In: Onco-Developmental Gene expression. - New York: Academic Press, 1976, p.35-^5

169. Fausto N.,Van Lancker J.L. Molecular mechanisms of liver regeneration. 4. Thymidylic kinase and DNA polymerase activities in normal and regenerating liver. J. Biol. Chem., 1965, v.240, N 3, p.1247-1255

170. Floyd L., Okamura N., Busch H. Base composition of rapidly sedimenting nuclear RNA of the regenerating liver. Biochem. Biophys. Acta, 1966, v.129, N 1, p.68-73

171. Flytzanis C.N., Alonso A., Louis Ch. et al. Association of small nuclear RNA with HnRNA isolated from nuclear RNP complexes carrying HnRNA. FEBS Lett., 1978, v.96, N 1, p.201-206

172. Foster J.H., Lawler M.R., Welborn M.B. et al. Recent experience with major hepatic resections. Ann. Surg., 1968, v.167, N 5, p.651-668

173. Frayssenet C.C., La Farge C.M., Molimard R.H. 14C-orotate incorporation into nuclear RNA of liver and kidney after partial hepatectomy in rats. In: Liver regeneration after experimental injury. / Eds. R.Lesch, W.Reuter. - New York, 1975, p.273-276

174. Fucamachi S., Bartoov В., Freeman K.B. Synthesis of RNA by isolated rat liver mitochondria. Biochem. J., 1972, v.128, N 2, p.299-309

175. Fujioka M.,Koga M., Lieberman I. Metabolism of ribonucleicacid after partial hepatectomy. J. Biol. Chem., 1963, v.238, N 10, p.3401-3406

176. Galau G.A., Britten R.J., Davidson E.H. A measurement of the sequences complexity of polysomal mRNA in sea urchin embryos. Cell, 1974, v.2, N 1, p.9-21

177. Galau G.A., Klein V/.H., Britten R.J., Davidson E.H. Significance of rare mRNA sequences in liver. Arch. Biochem. Biophys., 1977, v.179, N 2, p.584-599

178. Garapin A.C., Le Pennec J.P., Roskan W. et al. Isolation by molecular cloning of a fragment of the split ovalbumin gene. Nature, 1978, v.273, N 5661, p.349-354

179. Gelderman A.H., Rake A.V., Britten R.J. Transcription of nonrepeated DNA in neonatal and fetal mice. Proc. Nat. Acad. Sci. USA, 1971, v.68, N 1, p.172-176

180. Georgiev G.P. The nature and biosynthesis of nuclear ribonucleic acids. Progr. Nuclei Acid Res., 1967, v.6, p.259-351

181. Georgiev G.P. On the structural organization of operon and the regulation of RNA synthesis in animal cells. J. Theo-ret. Biol., 1969, v.25, N 2, p.473-490

182. Georgiev G.P., Ilyin Y.U., Ryskov A.P. et al. Isolation of eukariotic DNA fragments containing structural genes and the adjacent sequences. Science, 1977, v.195, N 4276, p. 394-397

183. Georgiev G.P., Ryskov A.P., Coutelle C. et al. On the structure of transcriptional unit in mammalian cells. Biochem. Bophys. Acta, 1972, v.259, N 2, p. 259-283

184. Getz M.J., Birnie G.D., Young B.D. et al. A Kinetic estimation of base sequence complexity of nuclear poly(A)- containing RNA in mouse Friend cells. Cell, 1975, v.4, N 1, p.121129

185. Getz M.J., Saunders G.F. Origin of human leukocyte chromatin associated RNA. Biochem. Biophys. Acta, 1873, v.312, N 3, p.555-573

186. Gilmour R.S., Harrison P.R., Windass J.D. et al. Globin mRNA synthesis and processing during haemoglobin induction in Friend cells. Cell Different., 1974, v.3, N 1, p.3-22

187. Gindice G., Novelli G.D. Effect of actinomycin D on synthesis of DNA polymerase in hepatectomized rats. Biochem. Biophys. Res. Comm., 1963, v.12, N 2, p.383-387

188. Grady L.J., Campbell W.P., North A.B. Nonrepetitive DNA transcription in normal and regenerating rat liver. Nucl. Acid Res., 1979, v.7, N 1, p.259-269

189. Grady L.J., Campbell W.P., North A.B. Sequence diversity of nuclear and polysomal polyadenylated and non-polyadenylated RNA in normal and regenerating rat liver. Eur. J. Biochem., 1981, v.115, N 2, p.241-245

190. Green R.F., Fausto N. Analysis of gene expression in regenerating liver by hybridization of nuclear and cytoplasmic RNA with DNA. Cancer Res., 1977, v.37, N 1, p.118-127

191. Greenberg J.R. Isolation of L-cell messenger RNA which lacks poly(adenylate) sequences. Biochemistry, 1976, v.15, N 11, p.3516-3522

192. Greenberg J.R. Isolation of messenger ribonucleoproteins in cesium sulfate density gradients: evidence that polyadenylated and non-polyadenylated mRNAs are associated with protein.

193. J. Mol. Biol., 1976a, v.108, N 2, p.403-416

194. Gross K.W., Jacobs-Lorena M.,Baglioni C., Gross P.R. Cell-free translation of maternal messenger RNA from sea urchin eggs. Proc. Nat. Acad. Sci. Usa, 1973, v.70, H 9, p.2614-2618

195. Hahn W.E., Van Ness J., Maxwell I.H. Complex population of mRNA sequences in large polyadenylated nuclear RNA molecules. Proc.Nat. Acad. Sci. USA, 1978,v75, N 11, p.5544-55^7

196. Hamburger-Heyd J.,Halbreich A., Mager J. Reduced rate of

197. ATP catabolism and enchanced amino acid incorporating activity of regenerating rat liver microsomes. Biochem. Biophys. Res. Qommun., 1967, v.26, N 3, p.471-476

198. Harel I., Hanania N., Tapiero M., Harel L. RNA replication by nuclear satellite DNA in different mouse cells. Biochem. Biophys. Res. Commun., 1968, v.33, N 5, p.696-701

199. Harris H. Turnover of nuclear and cytoplasmic RNA in two types of animal cells, with some further observations on the nucleolus. Biochem. J., 1959, v.73, N 2, p.362-369

200. Harris S.E., Rosen J.M., Means A.R., O'Malley B.W. Use of a specific probe for ovalbumin messenger RNA to quantitate estrogen-induced gene transcript. Biochemistry, 1975, v.14, N 10, p.2072-2081

201. Hawtrey A.O., Schirren V. Preparation of an active nucleopro-tein complex from rat-liver microsomes by isooctane extraction. Biochem. Biophys. Acta, 1962, v.61, N 3, p.467-469

202. Henshaw E.C. Messenger RNA in rat liver polyribosomes^ Evidence that in exist as ribonucleoprotein particles. J. Mol. Biol., 1968, v.36, N 2, p.401-411

203. Henshaw E.C., Loebenstein J. Rapidly labeled, polydisperse RNA in rat liver cytoplasm: Evidence that it is containing inribonucleoprotein particles of heterogeneous size. Biochem. Biophys. Acta, 1970, v.199, N 2, p.405-420

204. Herman R.Q., Penman S. Multiple decay rates of heterogeneous nuclear RNA in HeLa cells. Biochemistry, 1977, v.16, N 15, p.3^60-3465

205. Hewish D.R., Burgoyne L.A. Chromatin sub-structure. The digestion of chromatin DNA at regularly spaced sites by a nuclear deoxyribonuclease. Biochem. Biophys. Res. Commun., 1973, v.52, N 2, p.504-510

206. Heyden H.W., Zachau H.G. Characterization of RNA fractions of calf thymus chromatin. Biochem. Biophys. Acta, 1971, v.232, N 4, p.651-660

207. Higashino K., Lieberman I. Lysine catabolism by liver after partial hepatectomy. Biochem. Biophys. Acta, 1965, v.111, N 1, p.3^6-348

208. Higgins G.M., Anderson R.M. Experimental pathology of liver. "I. Restoration of liver of white rat following partial surgical removal. Arch. Path., 1931, v.12, N 2, p.186-202

209. Hill M., Miller-Paures A., Errera M. Studies on rapidly labelled ribonucleic acid in HeLa cells. Biochem. Biophys. Acta, 1964, v.80, N 1, p.39-51

210. Hiremath S.T., Wang T.Y. Effect of testosterone on RNA sequence complexity in rat prostate. Biochem. Biophys. Res. Commun., 1979, v.89, N 4, p.1200-1205

211. Hirschman S.L., Felsenfeld G. Determination of DNA composition and concentration by spectral analysis. J. Mol. Biol., 1966, v.16, N 2, p.347-358

212. Holmes D.S., Bonner J. Preparation and properties of giant nuclear RNA. Biochemistry, 1973, v.12, N 12, p.2330-2338

213. Holmes D.S., Bonner J. Sequence composition of rat nuclear DNA and high molecular weight nuclear RNA. Biochemistry,1974, v.13, N 3, p.841-848

214. Holmes D.S., Bonner J. Interspersion of repetitive and single-copy sequences in nuclear RNA of high molecular weight. -Proc. Nat. Acad. Sci. USA, 1974b, v.71, N 3, p.1108-1112

215. Holmes D.S., Mayfield J.E., Sander G., Bonner J. Chromosomal RNA: Its properties. Science, 1972, v.177, N 4043, p.72-7^

216. Hnilica L.S. Proteins of cell nucleus. In: Progress in nucleic acid Research and molecular biology. New York: Acad, press, 1967, v.7, p.25-106

217. Howard E.F. Small nuclear RNA molecules in nuclear ribonucleo protein complexes from mouse erythroleukemia cells. Biochemistry, 1978, v.17, N 16, p.3228-3236

218. Hozumi N., Tonegawa S. Evidence for somatic rearrangement of immunоglobulin genes coding for variable and constant regions Proc. Nat. Acad. Sci. USA, 1976, v.73, N 10, p.3628-3633

219. Huang R.C.C., Smith M.M. Nucleic acid hybridization and the nature of chromosomal protein bound RNA. Results Probl.Cell Differ., 1972, v.3, N 1, p.65-74

220. Humphries S., Windass J., Williamson R. Mouse globin gene expression in erythroid and non-erythroid tissues. Cell, 1976, v.7, N 1, p.267-277

221. Hunt J.A. Rate of synthesis and half-life of globin messenger RNA. Biochemical J., 1974, v.138, N 3, p.499-510

222. Hutton J.R. Renaturation kinetics and thermal stability of DNA in aqueous solutious of formamide and urea. Nucl. Acids Res., 1977, v.4, N 10, p.3537-3555

223. Hwang K.M., Murphree S.A., Shausky C.W., Sartorelli A.C. Sequential biochemical events related to DNA replication in the regenerating rat liver. Biochem. Biophys. Acta, 1974, v.366 N 2, p.143-148

224. Hynes N.E., Groner В., Sippel A.E. et al. mRNA complexity and. egg white protein mRNA content in mature and hormone-withdrawn oviduct. Cell, 1977, v.11, N 4, p.923-932

225. Ilyin Y.V., Tchurikov N.A., Ananiev E.V. et al. Studies on the DNA fragments of mammals and Drosophila containings structural genes and adjacent sequences. Cold Spring Harbor Symp. Quant. Biol., 1978, v.42, p.959-982

226. Imaizumi Т., Diggelman H., Scherrer K. Demonstration of globin messenger sequences in giant nuclear precursors of messenger RNA of avian erythroblasts. Proc. Nat. Acad. Sci. USA, 1973, v.70, N 4, p.1122-1129

227. Ishikawa K., Sato I., Sato S., Ogata K. Ribonucleoprotein complexes containing nascent DNA-like RNA in the crude chromatin fraction of rat liver. Biochem. Biophys. Acta, 1974, v.353, N 4, p.420-437

228. Ishikawa K., Ueki M., Nagai K. Transportation of mRNA from nuclei to polysomes in rat liver cells. Biochem. Biophys. Acta, 1972, v.259, N 1, p.138-154

229. Ivanov I.G., Zlateva B.S., Markov G.G. Transcription of mouse DNA. Dokl. Bulg. AN, 1975, v.28, N 6, p.813-816

230. Jacobs-Lorena M., Baglioni C. Messenger RNA for globin inthe postribosomal supernatant of rabbit reticulocytes. Proc. Nat. Acad. Sci. USA, 1972, v.69, N 3, p.1425-1428

231. Kedes L.H., Birnstiel M.L. Reiteration and clustering of DNA sequences. Nature, 1971, v.230, N 5291, p.165-169

232. Kedinger C., Gniazdawski M., Mandell J.L. te't al. -amanitin:a specific inhibitor of one of two DNA-dependent RNA polymerase activities from calf thymus. Biochem. Biophys. Res. Comm.- 1970, v.39, N 1, p.165-171

233. Kish V.M., Pederson T. Heterogeneous nuclear RNA secondary structure. Olygo(U) sequences base paired with poly(A) and their possible role as binding sites for Hn-nuclear RNA-speci-fic proteins. Proc. Nat. Acad. Sci. USA, 1977, v.74, N 5,p.1426-1430

234. Klein W.A., Murphy W., Attardi G. et al. Distribution of repetitive and non-repetitive sequences transcripts in HeLa mRNA- Proc. Nat. Acad. Sci. USA, 1974, v.71, N 5, p.1785-1789

235. Kornberg R.D. Chromatin structure: A repeating unit of histo-nes and DNA. Science, 1974, v.184, N 4139, p.868-871

236. Kornberg R.D., Thomas J.O. Chromatin structure: Oligomers of the histones. Science, 1974, v.184, N 4139, p.865-868

237. Kramerov D.A., Ryskov A.P., Georgiev G.P. The structural or-gamizaion of nuclear pre-mRNA. 2. Very long double-stranded structures in nuclear pre-mRNA. Biochem. Biophys. Acta,m1977 v.475, N 2, p.461 -475

238. Krawezyk L., Chorary M. Changes in cellular concentration of DNA-dependent RNA polymerases A and В during regeneration of rat liver. Acta Biochimica Polonica, 1978, vl25, N 3, p.257m271

239. Krieg L., Alonso A., Volm. M. Kinetic complexity of nuclear poly (A)-containing RNA in normal and regenerating rat liver.- Eur. J. Biochem., 1979, v.96, N 1, p.77-85

240. Kushch A.A., Kolesnikov V.A., Zelenin A.V. The influence of 0,35 M sodium chloride treatment on physico-chemical properties of liver chromatin in partially hepatectomized guinea pigs- Exp. Cell. Res., 1974, v.86, N 2, p.419-422

241. Kwan S.-P., Wood T.G., Lingrel J.B. Purification of a putative precursor of globin in RNA from mouse nucleated erythroid cells. Proc. Nat. Acad. Sci. USA, 1977, v.74, N 1, p.178-182

242. Lane B.P., Becker P.P. Regulation of mammalian liver. 2. Surface alteration during differentiation of the liver cell in preparation for division. Amer. J. Pathol., 1966, v.48, N 1, p.183-196

243. Leder A., Miller H.I., Hamer D.H. et al. Comparison of cloned mouse and -globin genes: Conservation of intervening sequence location and extragenic homology. - Proc. Nat. Acad. Sci. USA, 1978, v.75, N 12, p.6187-6191

244. Leening H.E. The determination of molecular weight of RNA by polyacrylamid gel electrophoresis; the effect of changes in conformation. Biochem. J., 1960, v.113, N 1, p.131-138

245. Legler M.K., Cohen E.P. Estimation of the number of nucleotide sequences in mouse DNA complementary to mRNA specifying a complete mouse immunoglobulin. Biochemistry, 1976, v.15, N 18, p.4390-4399

246. Lerner M.R., Boyle I.A., Mount S.M. et al. Are SnRNAs involved in splicing? Nature, 1980, v.283, N 5743, p.220-224

247. Lerner M.R., Steitz I.A. Antibodies to small nuclear RNAs com-plexed with proteins are produced by patients with systemic lupus erythematosis. Proc. Nat. Acad. Sci. USA, 1979, v.76,1. N 11, p.5495-5499

248. Lewin B. Units of transcription and translation: The relationship between heterogeneous nuclear RNA and messenger RNA. -Cell, 1975, v.4, N 1, p.11-20

249. Lewin B. Units of transcription and translation: Sequence components of geterogeneous nuclear RNA and messenger RNA. Cell 1975, v.4, N 1, p.77-93

250. Levy B.W., Dixon G.H. Renaturation kinetics of cDNA complementary to cytoplasmic polyadenylated RNA from rainbow trout testis. Nucl. Acid. Res., 1977, v.4, N 4, p.883-898

251. Lieberman I. Studies on control of mammalian DNA synthesis. -In: Biochemistry of Cell Division. / Ed. R.Baserga. Sprieng-field, 1969, p.119-137

252. Lieve G., Penman S. Small RNA species of the HeLa cell: Metabolism and subcellular localization. Cell, 1976, v.8, N 1, p.19-31

253. Loening U.S. The fractionation of high-molecular-weight RNA from plants by polyacrylamide gel electrophoresis. Biochem. J., 1969, V.113, N 1, p.131-138

254. Loening U.E., Ingle J. Diversity of RNA components in green plants tissues. Nature, 1967, v.215, N 2315, p.363-367

255. Lowry 0., Rosehrough N., Parr A., Raudall R. Protein measurement with the folin phenol reagent. J. Biol. Chem., 1951,v.193, N'2, p.265-275

256. Lubimova E.V., Chernovskaja T.V., Lerman M.I. Three mRNA populations differing in turnover and processing in mouse liver. -Mol. Biol. Rep., 1975, v.2, N 4, p.269-275

257. Lukanidin E.M., Aitkhozina N.A., Kulguslcin V.V., Georgiev G.P. The isolation of formoferes free of dRNA. FEBS Lett., 1971, v.19, N 1, p.101-105

258. Man N.T., Cole R.J. Quantitative changes in chromosomal activity during chicken myogenesis in vitro, a DNA-RNA hybridization study. Exptl. Cell Res.,g97^, v.83, N 2, p.328-33^

259. Maor D., Alexander P. Changes in ribonuclease activity in rat liver following hepatectomy. Biochem. Biophys. Acta, 1968,v.157, N 3, p.627-629

260. Majumdar C., Tsukada K., Lieberman I. Liver protein synthesis after partial hepatectomy and acute stress. J. Biol. Chem., 1967, v.242, N 4, p.700-704

261. Maley G.P., Lorenson M.G., Maley P. Inhibitors of protein synthesis: Effect on levels of deoxyaytidylate deaminase, thy-midylate synthetase, and thymidine kinase in regenerating rat liver. Biochem. Biophys- Acta, 1965, v.18, N 2, p.364-370

262. Markov G.G., Arion V.J. Characterization of nuclear-ribоsomal and DNA-like RNA differentially extracted by hot phenol fractionation. Eur. J. Biochem., 1973, v.35, N 1, p.186-200

263. Marmur I. A procedure for the isolation of deoxyribonucleic acid from microorganisms. J. Mol. Biol., 1961, v.3, N 2, p. 208-218

264. Matsui Т., Onishi Т., Muramatsu M. Nucleolar DNA-dependent RNA polymerase from rat liver. Eur. J. Biochem., 1976, v.71, N 2, p.351-368

265. Mayfield J.E., Bonner J. Tissue differences in rat chromosomal RNA. Proc. Nat. Acad. Sci. USA, 1971, v.68, N 11, p.2652-2655

266. Mayfield J.E., Bonner J. A partial sequence of molecular events in regenerating rat liver. Proc. Nat. Acad. Sci. USA, 1972, v.69, N 1, p.7-Ю

267. McKnight G.S., Schimke R.T. Ovalbumin mRNA: Evidence that theinitial product of transcription is the same size ascpolysomal ovalbumin messenger. Proc. Nat. Acad. Sci. USA, 1974» v.71, N 11, p.4327-4331

268. McNamara D.J., Racevskis J., Shumm D. D.E., Webb Т.Е. RNA synthesis in isolated rat liver nuclei under conditions of RNA processing and transport. Biochem. J., 1975, v.147, N 2, p. 193-197

269. Melli M., Bishop J.O. Molecular hybridization between rat liver DNA and complementary RNA. Biochem. J., 1970, v.120, N 2,p.225-235

270. Melli M., Whitfield C., Rao K.V. et al. DNA-RNA hybridization in vast DNA excess. Nat. New. Biol., 1971, v.231, N , p.8-12

271. Melli M., Ginelli E., Corneo G., Di Lernia R. Clustering of the DNA sequences complementary to repetitive nuclear RNA of HeLa cells. J. Mol. Biol., 1975, v.93, N 1, p.2$-38

272. Moen R.C., Palmiter R.D. Changes in hormone responsivenes of chick oviduct during primary stimulation with estrogen. De-vel. Bio;., 1980, v.78, N 2, p.450-463

273. Molloy G.R., Jelinek W., Salditt M.S., Darnell J.E. Arrangementof specific oligonucleoprotein within poly (A) terminatedhn RNA molecules. Cell, 1974, v.1, N 1, p.43-52

274. Molloy G.R., Thomas W. L. S., Darnell J.E. Occurence of uridy-late-rich oligonucleotide regions in hn nuclear RNA of HeLa cells. Proc. Nat. Acad. Sci. USA, 1972, v.69, N 8, p.3684-3688

275. Monachan J.J., Hall R.H. Chromatin and gene regulation in eukachem., 1974, p.67-112

276. Monachan J.J., Hall R.H. Chromatin and gene regulation in eu-kariotic cells at the transcriptional level. Critical Rev. in Biochem., 1974, p.67-112

277. Monachan J., Harris S., OfMalley H. Effect of estrogen on gene expression in the chick oviduct. J. Biol. Chem., 1976, v.251 N 12, p.3738-3748

278. Moore R.E., Cardelli J.A., Pitot H.E. Decay of cytoplasmic po lyadenylated RNA labeled with ^H-orotate in rat liver and effect of re-utilization of labeled precusor on such decay. -Biochemistry, 1977, v.16, N 13, p.3037-3044

279. Morgan W.S., Leon H.A. Adenosine triphosphate activity of normal and regenerating rat liver. Exp. Molec. Path., 1963, v.2 N 2, p.297-302

280. Mukerjee H., Goldfeder A. Purification and properties of ribonucleic acid polymerase from rat liver mitochondria. Biochemistry, 1973, v.12, N 25, p.5096-5101

281. Muramatsu M., Shimada N., Higashi K., Hakagawa T. Effect of cycloheximide on the nucleolar RNA synthesis in rat liver. J .

282. Molec. Biol., 1973, v.51, N 1, p.91-99

283. Murphy W.I., Attardi G. Size distribution of poly(A)-containing mRNA from free polysomes of HeLa cells. Biochem. Biophys.

284. Res. Commun., 1977, v.74, N 1, p.291-299

285. Murray V., Holliday R. Mechanism for RNA splicing of gene tran script. FEBS Lett., 1979, v.106, N 1, p.5-7

286. Mutschler L.E., Gordon A.H. Plasma protein synthesis by isolated perfused regenerating rat liver. Biochem. Biophys. Acta, 1966, V.130, N 2, p.486-492

287. Moryama Y., Hoduett J.L., Prestayko A.W., Busch H. Studies on the nuclear. 4. To 7 S RNA of the Novikoff hepatoma. J. Mol. Biol., 1969, v.39, N 1, p.335-349

288. O'Connor P.J. An alkaline deoxyribonuclease from rat liver non-histone chromatin proteins. Biochem. Biophys. Res. Commun., 1969, v.35, N 6, p.805-810

289. Nguyen-Hun M.C., Stratman M., Groner B. et al. Chicken lyso-zyme gene contains several intervening sequences. Proc. Nat. Acad. Sci. USA, 1979, v.76, N 1, p.76-80

290. Niessing J., Sekeris C.E. The protein moiety of nuclear ribonucleoprotein particles containing DNA-like RNA: Presence of heterogeneous and high-molecular-weight polypeptides chains.- FEBS Lett., 1971, v.18, N 1, p.39-45

291. Olins A.L., Olins D.E. Spheroid chromatin units ( Bodies). -Science, 1973, v.183, N 4122, p.330-332

292. Olsen G.D., Gaskill P., Kabat D. Presence of haemoglobin messenger ribonucleoprotein in reticulocyte supernatant fraction.- Biochem. Biophys. Acta, 1972, 2.272, N 2, p.297-304

293. O'Malley B.W., Woo S.L.C., Harris S.E., Rosen J.M., Means A.R., Steroid hormone regulation of specific messenger RNA and protein synthesis in eucariotic cells. J. Cell Physiol., 1975, v.85, N 2, p.343-356

294. Ord M.G., Stocken L.A. Variations in phosphate content and thiol/disulphide ratio of histones during cell cycle. Biochem. J., 1968, v.107, N 2, p.403-410

295. Palmiter R.D. Quantitation of parameters that determine the rate of ovalbumin synthesis. Cell, 1975, v.4, N 3, p.189-197

296. Pardue M.L. Repeated DNA sequences in the chromosomes of hog-her organism. Birth Defects, Amsterdam-New York, 1974, p.32

297. Patterson M.K.Jr., Orr G.R. Regeneration, tumor, dietary, and L-asparaginase effects on asparagine biosynthesis in rat liver. Cancer Res., 1969, v.29, N 7, p.1179-1183

298. Pawse A.R., Ord M.G., Stocken L.A. Enzymatic phosphorylation of histone H1 in regeneration rat liver. Biochem. J., 1969» v.114, N 4, 54p

299. Pearson VI.R., Wu G.-R., Bonner J. Analysis of rat repetitive DNA sequences. Biochemistry, 1978, v.17, N 1, p.51-59

300. Peltz R. The integrity of "giant" nuclear RNA. Biochem. Biophys. Acta, 1973, v.308, N 1, p.148-153

301. Perry R.P., Kelley D.E. Messenger RNA turnover in mouse L cells. Proc.Nat. Acad. Sci. USA, 1973, v.70, N 1, p.350-353

302. Pogo A.O., Littau V.C., Allfrey V.G., Mirsky A.E. Modification of RNA synthesis in nuclei isolated from normal and regenerating liver: Some effects of salt and specific divalent cations. Proc. Nat. Acad. Sci. USA, 1967, v.57, N 4, p.743-750

303. Pogo G.T., Pogo A.O., Allfrey V.G., Mirsky A.E. Changing patterns of histones acetytation and RNA synthesis in regeneration of liver. Proc. Nat. Acad. Sci. USA, 1968, v.59, N 8, P-1337-1344

304. Price R., Penman S. A distinct RNA polymerase activity, synthesizing 5,5 S, 5 S and 4 S in nuclei from adenovirus 2- infected HeLa cells. J. Mol. Biol., 1972, v.70, N 3, p.435-450

305. Proudfoot N.J. Complete 3-non-coding region sequences of rabbit and human -globin mRNA. Cell, 1977, v. 10, N 2, p. 559-570

306. Proudfoot N.J., Brownell G.G. 3'- non-coding region sequences in eukariotic mRNA. Nature, 1976, v.263, N 5411, p.211-214

307. Quelette A.J., Kumar A., Malt R.A. Physical aspects and cytoplasmic distribution of mRNA in mouse kidney. Biochem. Bio-phys. Acta, 1976, v.425, N 2, p.384-395

308. Quelette A.J., Malt R.A. Accumulation and decay of mRNA in mouse kidney. Biochemistry, 1976, v.15, N 10, p.3358-3361

309. Rabbits Т.Н., Forster A. Evidence for noncontinuous variable and constant region genes in both germ line and myeloma DNA. Cell, 1978, v.13, N 2, p.319-327

310. Rahman Y.E., Cerny E.A., Peraino C. Studies on rat liver ribo-nucleases. 4. Liver ribonucleases in developing, 2-acetyl-ami-no fluorence fed and partially hepatectomized rat. Biochem. Biophys. Acta, 1969, v.178, N 1, p.68-73

311. Reid B.D., Parsons P. Partial purification of mitochondrial RNA polymerase from rat liver. Proc. Nat. Acad. Sci.USA,1971, v.68, N 11, p.2830-2834

312. Reynolds E.S. The use of lead citrate at high pH as an electron-opaque stain in electron microscopy. J. Cell Biol., 1963, v.17, N 2, p.208-212

313. Rieder H.P. Eine new Modifikation der Cu-Eolin-Methode im Liq-or cerebrospinalis. Klinisce V/ochenschrift, 1966, Bd.44, N 17 S.1036-1040

314. Rigby P.W.J., Dieckman M., Rhodes C., Berg P. Labeling DNA to high specific activity in vitro by nick translation with DNA-polymerase. Д. Mol. Biol., 1977, v.113, N 1, p.237-251

315. Rigler R. Microphluorometric haracterization of intracellular nucleic acids and nucleoproteins by acridine orange. Acta physiol. Scand., 1966, v.67, suppl., 267, p.122

316. Ritzen M., Carlsson S.-A., Darzynkiewich Z. Cytochemical evidence of nucleoprotein changes in rat adrenal cortex following hypophysectomy or dexamethasone supression. Exp. cell, res.,1972, v.70, N 2, p.462-465

317. Roberts R. Small RNAs and splicing. Nature, 1980, v.283,1. N 57^-3, p.132-133

318. Roeder R.G., Rutter W.J. Multiple forms of DNA-dependent RNA polymerase in eukariotic organisms. Nature, 1969, v.224,1. N 5216, p.234-239

319. Roeder R.G., Rutter M.J. Specific nucleolar and nucleoplasmic RNA polymerases. Proc. Nat. Acad. Sci. USA, 1970, v.65, N 3, p.6P5-682

320. Roth J.S. Increased stability of trrnplates for some enzymes of DNA synthesis in tumors: Deoxycytidylate deaminase, thymidine, and thymidilate kinase. Life Sci., 1964, v.3, N 12, 1145-1149

321. Roth J.S. Some observations on assay and properties of ribo-nuclease in normal and tumor tissues. In: Methods in Cancer Research. / Ed. H.Busoh. - New York: Acad, press, 1967, v.3, p.153-242

322. Ryffel G.U., McCarthy B.J. Complexity of cytoplasmic RNA in different mouse tissues measured by hybridization of polyadenylated RNA to complementary DNA. Biochemistry, 1975, V.14, N 6, p.1379-1385

323. Ryffel G.U., McCarthy B.J. Bolyadenylated RNA complementary to repeated DNA in mouse L-cells. Biochemistry, 1975a, v.14, N 6,p3385-1389

324. Ryskov A.P., Farashyan V.R., Georgiev G.P. Ribonuclease-stab-le base sequences specific exclusively for giant dRNA. Biochem. Biophys. Acta, 1972, v.262, N 3, p.568-572

325. Ryskov A.P., Mantieva V.L., Avakian E.R., Georgiev G.P. The hybridization properties of 5 end sequences of giant nuclear RNA. FEBS Lett., 1971, v.12, N 1, p.141-146

326. Ryskov A.P., Tokarskaya O.V., Georgiev G.P. Direct demonstration of a complementarity between mRNA and double-stranded sequences of pre-mRNA. Mol. Biol. Repts., 1976, v.2, N 5, p.353-361 '

327. Ryskov A.P., Tokarskaya O.V., Georgiev G.P., Coutelle Ch., Thiele B. Globin mRNA contains a sequence complementary to double-stranded region of nuclear pre-mRNA. Nucl. Acids Res., 1976a, v.3, N 6, p.1487-1498

328. Sahasrabuddhe C.G., Van Holde K.E. The effect of trypsin on nuclease-resistant chromatin fragments. J. Biol. Chem., 1974, v.249, N 1, p.152-156

329. Samarina O.P., Lukanidin E.M., Georgiev G.P. On the structural organization of the nuclear complexes containing messenger RNA. Biochem. Biophys. Acta, 1967, v.142, N 2, p.561-564

330. Sarasin A. Particules ribonucleoproteiques 40 S des noyauxde foie de rat. Properties des proteines de ces particules. -FEBS Lett., 1969, v.4, N 4, p.327-330

331. Schmidt Y., Tannhauser S. A method for the determination of the desoxyribonucleic acid, ribonucleic acid and phosphopro-tein in animal tissues. J. Biol. Chem., 1945, v.161, N 1, p.83-89

332. Scholia C.A., Tadeshi M.V., FauSto N. Gene expression and the diversity of polysomal messenger RNA sequences in regenerating liver. J. Biol. Chem., 1980, v.255, N 7, p.2855-2860

333. Schumm D.E., Morris H.P., Webb Т.Е. Cytosol-modulated transport of messenger RNA from isolated nuclei. Cancer Res., 1973, v.33, N 8, p.1821-1828

334. Schumm D.E., Webb Т.Е. Transport of informosomes from isolated nuclei of regenerating rat liver. Biochem. Biophys. Res. Communs., 1972, v.48, N 5, p.1259-1265

335. Schiitz G., Nguyen-Huu M.C., Giesecke It. et al, Hormonal control off egg white protein messenger RNA synthesis in chicken oviduct. Cold Spring Harbor Symp. Quant. Biol., 1978, v.42, part 2, p. 617-62 4

336. Schiitz G., Sippel A.E., Nguyen-Huu M.C. et al. Control of gene function by steroid hormones in the chick oviduct. Acta endocrinol., 1979, v.91,Suppl., N 225, p.480

337. Scornik 0.A. Protein synthesis in the regenerating liver. J. Biol. Chem., 1974, v.249, N 8, p.3876-3883

338. Seifart K.H., Seceris C.E. Extraction and purification of

339. DNA-dependent RNA polymerase from rat liver nuclei. Eur. J. Biochem., 1969, v.7, N 3, p.408-412

340. Sensky T.S., Haines M.E., Rees K.R. The half-life of polyade-nylated polysomal RNA from normal and transformed cells mono-layes culture. Biochem. Biophys. Acta, 1975, v.407, N 2, p.430-438

341. Scherrer K., Lathman H., Darnell J.E. Demonstration of an unstable RNA and of a precursor to ribosomal RNA in HeLa cells. Proc. Nat. Acad. Sci. USA, 1963, v.49, N 2, p.240-248

342. Scherrer K., Marcaud L. Messenger RNA in avian erythroblastis at the transcriptional and translational levels and the problem of regulation in animal cells. J. Cell Physiol., 1968, v.72, Suppl.,1, p.181-212

343. Shearer R.W., McCarthy B.J. Evidence for ribonucleic acid molecules restricted to the cell nucleus. Biochemistry, 1967, v.6, N 1, p.283-295

344. Shih T.Y., Bonner J. Chromosomal RNA of calf thymus chromatin. Biochem. Biophys. Acta, 1969, v.182, N 1, p.30-35

345. Shortman K. Studies on cellular inhibitors of ribonuclease. 3. Levels of ribonuclease and ribonuclease inhibitor during regeneration of rat liver. Biochem. Biophys. Acta, 1962, v.61, N 1, p.50-55

346. Sidebottom E., Dealt I. The function of the nucleolus in the expression of genetic information: Studies with hybrid animal cells. Int. Rev. Cytol., 1976, v.N 1, p.29-53

347. Simpson G.E.C., Einckh E.S. Pattern of regenerating of rat liver after repeated partial hepatectomies. J. Path, and Bact., 1963, v.86, N 2, p.361-370

348. Singer R.H., Penman S. Messenger RNA in HeLa cells: Kinetics of formation and decay. J. Mol. Biol., 1973, v.78, N 1,p.321-334

349. Sippel A.E., Hynes N., Groner В., Schiitz G. Size distribution of rat liver nuclear RNA containing mRNA sequences. Eur. J. Biochem., 1977, v.77, N 1, p.141-151

350. Sivolap Y.M., Bonner J. Association of chromosomal RNA with repetitive DNA. Proc. Nat. Acad. Sci. USA, 1971, v.68, N 2, p.387-392

351. Smith M.J., Hough B.R., Chamberlin M.E., Davidson Е.Ы. Repetitive and non-repetitive sequence in sea urchin heterogeneous nuclear RNA. J. Mol. Biol., 1974, v.85, N 1, p.103-126

352. Spirin A.S. Informosomes. Eur. J. Biochem.,1969, v.10, N 1, p.20-35

353. Spirin A.S. Eukariotic messenger RNA informosomes. Omnia mea mecum porto. EEBS bett., 1978, v.88, N 1, p.15-17

354. Spirin A.S., Nemer M. Messenger RNA in early sea-urchin embryos: Cytoplasmic particles. Science, 1965, v.150, N 1257, p. 214-219

355. Spohr G., Imaizumi Т., Stewart A., Scherrer K. Identification of free cytoplasm globin mRNA of duck er.ythroblasts by hybridization to anti-nessenger DNA and by cell-free protB-in synthesis. FEBS Lett., 1972, v.28, N 2, p.165-168

356. Staib W., Miller L.L. Uber den Stoffwechsel von L-Phenylala1. Л U- 14nin-u- С and L-Threonin-u- С bei subtotal hepatektomxerten

357. Ratten. Biochem. Ztschr., 1964, Bd.399, N 2, S.266-273

358. Stevely W.S., White M. Low-molecular weight nuclear ribonucleic acid synthesis after partial hepatectomy. Biochem. J., v.119, N 5, 59p, 1970

359. Stirpe P., Piume L. Studies on the pathogenesis of liver necrosis by -amanitin. Biochem. J.,1967, v.105, N 2, p.779-782

360. Stocker E., Maurer W., Altmann H. Autoradiographische Unter7)suchungen mit ^H-Cytidin uber die RNS-Synthese in Nucleolus und Kern und die Migration der RNS zum Cytoplasma. Die Naturwissensch., 1961, Bd. 4, S.582-583

361. Sugano H., Suda S., Kawada Т., Sugano I. Characterization of rapidly labeled 40 S RNP particles in rat liver cytoplasm.- Biochem. Biophys. Acta, 1971, v.238, N 1, p.139-149

362. Takai S., Borun T.W., Muchmore J., Lieberman I. Concurrent synthesis of histone and DNA in liver after partial hepatectomy. Nature, 1968, v.219, N 5156, p.860-861

363. Takeda M., Yamamura H., Ohga f. Phosphoprotein kinases associated with rat liver chromatin. Biochem. Biophys. Res. Comm., 1971, v.42, N 1, p.103-110

364. Tartof K.D. Increasing the multiplicity of ribosomal RNA genes in Drosophila melanogaster. Science, 1971, v.171,1. N 3968, p.294-297

365. Tedeschi M.V., Colbert D.A., Fausto N. Transcription of the non-repetitive genome in liver hypertrophy and the homology between nuclear RNA of normal and 12 h-regenerating liver. -Biochem. Biophys. Acta, 1978, v.521, N 2, p.641-649

366. Tidwell Т., Allfrey V.G., Mirsky A.E. The methylation of histones during regeneration of the liver. J. Biol. Chem., 1968, v.243, N 4, p.707-715

367. Tilghman S.M., Tiemeier D.C., Polsky F. et al. Cloning specific segments of the mammalian genome: Bacteriophage containing mouse globin and surrounding gene sequences. Proc. Nat. Acad. Sci. USA, 1977, v.74, N 10, p.4406-4410

368. Tilghman S.M., Tiemeier D.C., Seidman J.G. et al. An intervening sequence of DNA identified in the structural portion of a mouse -globin gene. Proc. Nat. Acad. Sci. USA, 1978, v.75, N 2, p.725-727

369. Timberlake W.E., Shumard D.D., Golberg R.B. Relationship between nuclear and polysomal RNA population of Achlya: A simple eukaryotic system. Cell, 1977, v.10, N 3, p.623-632

370. Tonegawa S., Maxam A.M., Tizard R. et al. Sequence of a mouse germ-line gene for a variable region of an immunoglobulin light chain. Proc. Nat. Acad. Sci. USA, 1978, v.75, N 3, p.1485-1489

371. Troyano P.M., Fatima B.M., Lara F.J.S. Histone synthesis in Rhinchosciara salivery glands. 1. Site and timing of synthesis. Cell Differ., 1975, v.4, N 4, p.257-263

372. Tsanev R. Cell cycle and liver function. In: Cell Cycle and Cell Differentiation. / Eds. by Reinert J. & Holtzer H. : Springer, New York, 1975, p.197-248

373. Tsujimoto Y., Suzuki Y. Structural analysis of the fibroin gene at the 5 'end. and its surrounding regions. Cell, 1979,v.16, N 2, p.425-^36

374. Tsukada K., Majumdar C., Lieberman I. Liver polyribosomes and phospolipase A. Biochem. Biophys. Res. Comm., 1966, v.25, N 1, p.181-186

375. Tsukada K., Morijama Т., Doi 0., Lieberman I. Ribosomal change in liver after partial hepatectomy and acute stress. J. Biol. Chem., 1968, v.243, N 6, p.1152-1159

376. Tsukada K., Moriyama Т., Umeda Z., Lieberman I. Relationship between ribosomal alteration after partial hepatectomy and increase in liver protein synthesis in vivo. J. Biol. Chem., 1968, v.243, N 6, p.1160-1165

377. Tsukada K., Lieberman I. Liver nuclear ribonucleic acid polymerase formed after partial hepatectomy. J. Biol. Chem., 1965a, v.240, N 4, p.1731-1736

378. Tsukada K., Lieberman I. Protein synthesis by liver polyribosomes after partial hepatectomy. Biochem. Biophys. Res. Commun., 1965b, v.19, N 6, p.702-707

379. Tchurikov N.A., Ilyin Y.V., Ananiev E.V., Georgiev G.P. The properties of gene Dm225, a representative of dispersed repetitive genes in Drosophila melanogaster. Nucl. Acid. Res., 1978, v.5, N 12, p.2169-2178

380. Tchurikov N.A., Ilyin Y.V., Skryabin K.G. et al. General pro-pertie s of mobile despersed genetic elements of Drosophila melanogaster. Cold Spring Harbor Symp. Quant. Biol., 1981,v.45, p.294-315

381. Valerian von Meister. In der: Beitrage zur Pathologischen Anatomie und zur Allgemeinen Pathologie, 1894. Cit. by "Liver regeneration after Experimental Injury", New York, 1975, p. ix

382. Van Lancker J.L. Control of macromolecular synthesis in regenerating liver and its alteration by X-radiation. In: Biochemistry of Cell Division. / Ed. R.Baserga. - Spriengfield, 1969, p.155-177

383. Varshavsky A.J., Bakayev V.V. Studies on chromatin. §>. -Bodies and free DNA in chromatin lacking histone H1. Mol. Biol. Repts., 1975, v.2, N 2, p.209-217

384. Varshavsky A.J., Ilyin Y.V., Georgiev G.P. Very long stretches of free DNA in chromatin. Nature, 1974, v.250,N 5372, p.602-606

385. Vidali G., Boffa L.C., Allfrey V.G. Properties of an acidic histone binding protein fractions from cell nuclei. J. Biol. Chem., 1972, v.247, N 22, p.7365-7373

386. Vogelstein В., Gillespie D. RNA-DNA hybridization in solution without DNA reannealing. Biochem. Biophys. Res. Commun., 1977, v.75, N 4, p.1127-1132

387. Vorob'ev V.I., Konstantinova I.M., Kulitchkova V.A. Effect of cortisone on transcription of rat liver DNA of various degrees of repetition. FEBS Lett., 1974, v.47, N 1, p.39-42

388. De Vries H., Kroon A.M. On the effect of chloramphenicol and oxytetracycl ine on the biogenesis of mammalian mitochondria. Biochem. Biophys. Acta, 1970, v.204, N 2, p.531-551

389. Warburg 0., Christian N. Isoliezung und Kristallization des Garungs Ferments Enolase. Biochem. J., 1941, Bd.310, N 2, S.384-421

390. Warner J.R., Soeiro R., Bernhoim II.C. et al. Rapidly labeled

391. HeLa cell nuclear RNA. J. Mol. Biol., 1966, v.19, N 2, p. 349-361

392. Week P.K., Jonson Т.О. Nuclear-cytosol interaction that modulate RNA synthesis and transcript size of mouse brain nuclei. J. Neurochem., 1976, v.27, N 6, p.1367-1374

393. Weinberg R.A., Penman S. Metabolism of small molecular weight monodisperse nuclear RNA. Biochem. Biophys. Acta, 1969, v.190, N 1, p.10-29

394. Weiss S.B. Enzymatic incorporation of ribonucleic triphosphates into the interpolynucleotide linkages of ribonucleic acid. Proc. Nat. Acad. Sci. USA, 1960, v.46, N 8, p.1020-1030

395. Wettstein P.O., Staehelin Т., Noll H. Ribosomal aggregate engaged in protein synthesis: Characterization of the ergo-somes. Nature, 1963, v.197, N 4866, p.430-437

396. Widnell C.C., Tata J.R. Studies on the stimulation by ammonium sulphate of the DNA-dependent RNA polymerase of isolated rat liver nuclei. Biochem. Biophys. Acta, 1966, v.123, N 3, p.478-492

397. Wilkes M.M., Pearson W.R., Wu G»R., Bonner J. Sequence organization of the rat genome by electron microscopy. Biochemistry, 1978, v.17, N 1, p.60-69

398. Wilson M.C., Melli M., Birnstiel M.L. Reiteration frequency of hist one coding sequence in man. — Biochem. Biophys. Res. Communs., 1974, v.61, N 2, p.404-409

399. Woodcock C.L. Ultrastructure of inactive chromatin. J. Cell. Biol., 1973, v.59, N 2, part 2, p.368a

400. Wu G., Zubay G. Prolonged transcription in a cell-free system involving nuclei and cytoplasm. Proc. Nat. Acad. Sci. USA, 1974, v.71, N 5, p.1803-1807

401. Yen P.H., Sodja A., Cohen M. et al. Sequence arrangement ofof tRNA genes on a fragment of drosophila melanogaster DNA cloned in E.coli. Cell, 1977, v.11, N 4, p.763-777

402. Young B.D., Birnie G.D., Paul J. Complexity and specificity of polysomal poly(A)+ RNA in mouse tissues. Biochemistry, 1976, v.15, N 12, p.2824-2829

403. Yu F.-L. Two functional sates of the RNA-polymerases in the rat hepatic nuclear and nucleolar fractions. Nature, 1974, v.251, N 5473, p.344-346

404. Zahringer J., Baliga B.S., Munro H.N. Subcellular distribution of total poly(A)—containing RNA and ferritin-mRNA in the cytoplasm of rat liver. Biochem. Biophys. Res. Commuh., 1976, v.68, N 5, p.1086-1093

405. Zauderer M., Liberti P., Baglioni C. Distribution of histone mRNA among free and membrano-associated polyribosomes of a mouse myeloma cell line. J. Mol. Biol., 1973, v.79, N 3, p.577-586

406. Zimm B.H., Crothers D.M. Simplified rotating cylinder viscometer for DNA. Proc. Nat. Acad. Sci. USA, 1962, v.48, N 6, p.905-911