Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Эколого-морфологическая и генетическая изменчивость популяции севрюги р. Урал

ВАК РФ 03.00.10, Ихтиология

Автореферат диссертации по теме "Эколого-морфологическая и генетическая изменчивость популяции севрюги р. Урал"

На правах рукописи

ШИШАНОВА Елена Ивановна

Эколого-морфологическая и генетическая изменчивость популяции севрюги р. Урал.

03.00.10 - ихтиология

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Москва- 2003

Работа выполнена во Всероссийском научно-исследовательском институте рыбного хозяйства и океанографии (ВНИРО)

Научный руководитель: доктор биологических наук

Никоноров С.И.

Официальные оппоненты: доктор биологических наук, проф.

Илясов Ю.И.

кандидат биологических наук Крылова В.Д.

Ведущая организация: Московская сельскохозяйственная академия им.

К.А. Тимирязева (МСХА)

Защита диссертации состоится « С » 2003 г. в 11 часов на

заседании диссертационного совета Д 307.003.01 при Федеральном Государственном Унитарном предприятии «Всероссийском научно-исследовательском институте пресноводного рыбного хозяйства» (ВНИИПРХ) по адресу: 141821, Московская обл., Дмитровский район, пос. Рыбное.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГУП Всероссийского научно-исследовательского института пресноводного рыбного хозяйства.

Автореферат разослан « » 2003 г.

Ученый секретарь диссертационного совета кандидат биологических наук

Подоскина Т.А.

0.ОО5-Д

UjW

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность исследований. Осетровые, в частности севрюга Acipenser stellatus (Pallas), характеризуются высоким экологическим и феноти-пическим разнообразием, которое необходимо сохранить в условиях усиления антропогенного пресса и резкого сокращения численности естественных популяций осетровых рыб (Иванов, 2000). Севрюга - один из трех наиболее многочисленных промысловых видов осетровых, заслуживает особого внимания как высокотехнологичный объект индустриальной и пастбищной аквакультуры (Мамонтов и др., 2002, Чебанов 2002).

В современных условиях значительную роль играет искусственное разведение осетровых для товарного производства рыбы и поддержания численности естественных популяций осетровых. Однако искусственное разведение и, тем более, вмешательство в природные экосистемы, оказывают отрицательное влияние на генофонд осетровых и их технологические характеристики при выращивании (Лукьяненко и др., 1988, Рябова и др. 1996, Баранникова и др., 2000, Карнаухов 2001, Чебанов, 2002). Поэтому приоритетными задачами в современном осетроводстве являются формирование коллекционных и промышленных маточных стад осетровых, сохранение жизнеспособных половых продуктов осетровых в криобанках, разработка методик доместикации, селекции и сохранения генетических ресурсов для осетроводства, а также разработка рационального режима промысла (Мамонтов, 1998, Багров и др., 2000, Малютин, 2000, Ананьев и др. 2002, Цветкова и др., 2003). Решение поставленных задач невозможно без знаний о популяционной структуре и состоянии естественных популяций осетровых.

К настоящему времени общепризнано, что для получения полноценного представления о популяциях должны бьггь использованы различные методические подходы при сборе и анализе материала, изучен комплекс признаков и дана оценка нативности изучаемой популяции (Мина, 1986, Голубцов, 1988, Калнин, 1990, Алтухов и др. 1997). Однако исследования внутрипопуляцион-ной дифференциации осетровых с использованием биохимических маркеров проводили либо на популяциях рек с изменившимися из-за гидростроительства условиями естественного размножения и высокой долей рыб искусственного происхождения (до 80%), либо при проведении исследований не изучали, и, следовательно, при анализе материала не учитывали, связь параметров белкового полиморфизма с возрастом, полом и размером особей, темпом роста, принадлежностью к определенному, фенотипу и т.д. (Камшилин, 1984, Лукьяненко и др. 1988, Чебанов, 1996, Чихачев, 1997).

Популяция севрюги, нерестящейся в р. Урал, в период наших исследований была единственной, которая размножалась на исторически сложившихся нерестилищах и не повергалась массовому искусственному воспроизводству. Такие популяции могут служить моделью для определения исходных принципов и методических особенностей формирования и эксплуатации искусственно поддерживаемых стад осетровых. Сведения о биологической и генетической разнокачественности уральской севрюги в период ее стабильной численности, полученные во время нерестовых миграций в реку, могут представлять значительный интерес для усовершенствования режима промысла, сохранения генофонда осетровых, выработки принципов создания и эксплуатации их коллекционных и промышленных маточных стад, что и определяет актуальность исследований

Дели и задачи исследования. Целью настоящей работы было изучение внутрипопуляционной разнокачественности севрюги р. Урал по комплексу биологических и генетических признаков во время нерестовых миграций.

В соответствии с поставленной целью предстояло решить следующие задачи:

- изучить экологические условия и динамику нерестового хода севрюги в р. Урал в период проведения исследований;

- охарактеризовать по биологическим признакам производителей севрюги по времени захода в реку на нерест и оценить разнокачественность внутрипо-пуляционных групп;

- изучить уровень белкового полиморфизма по времени нерестового хода у производителей севрюги и дать оценку генетической гетерогенности биологических групп;

- изучить половую, возрастную и генерационную изменчивость уральской севрюги по параметрам белкового полиморфизма;

- исследовать формы севрюги с разной пигментацией тела по комплексу морфометрических и генетических признаков.

Научная новизна. Впервые дана оценка биологической разнокачественности и генетической гетерогенности разных внутрипопуляционных групп популяции севрюги р. Урал, в период ее стабильного состояния, по комплексу морфометрических, биологических, генетических показателей. Выявлена генерационная, возрастная и половая генетическая гетерогенность нерестовых мигрантов севрюги. Охарактеризованы по морфометрическим и генетическим параметрам и динамике нерестового хода белоспинная и черноспинная формы уральской севрюги.

Практическая значимость.

Впервые проведена комплексная оценка генетической гетерогенности на-тивной популяции севрюги, предложены необходимые меры по совершенствованию режима промысла и по поддержанию биологического разнообразия севрюги в естественных условиях обитания.

Разработаны предложения по усовершенствованию принципов отбора производителей при формировании коллекционных стад рыб и проб спермы рыб для сохранения в криобанках, а также создания и эксплуатации промышленных маточных стад севрюги на осетровых рыбоводных заводах.

Создана компьютерная база данных, включающая 8 полиморфных локу-сов севрюги, которая может являться «точкой отсчета» при проведении дальнейших популяционно-генетических исследований и при организации генетического мониторинга популяций севрюги.

Апробация работы. Материалы диссертации были доложены на межлабораторных коллоквиумах ВНИРО, Всесоюзном совещании «Осетровое хозяйство водоемов СССР» ноябрь 1989г., г. Астрахань, конференции молодых ученых МСХА (июнь 1996), совещании в Ростове на Дону в августе 1996г. «Состояние и перспективы научно-практических разработок в области мари-культуры России», Ученом совете ВНИИР.

Публикации. По теме диссертации опубликовано 7 работ, одна статья находится в печати.

Структура и объем диссертации.

Диссертация состоит из введения, обзора литературы, характеристики материалов и методов исследований, результатов исследований, заключения, выводов, предложений. Работа изложена на ■fOt страницах машинописного текста, содержит // рисунков, и ^/"таблиц. Приложение на 6Z стр. состоит из ^таблиц.

КРАТКАЯ БИОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ОБЪЕКТА

Севрюга Acipenser stellatus (Pall.) - вид, которому присуща большая эв-рибионтность, эвригалинность, сложная, многовозрастная структура нерестовых популяций, многократный повторный нерест, с различными по длительности межнересговыми интервалами. В отличие от других каспийских осетровых, севрюге свойственно быстрое созревание, относительно короткий жизненный цикл, отсутствие жилых речных форм и своеобразная форма тела и рыла. Окраска спины и боков варьирует от черной до белой. Каспийская севрюга

проходная рыба, нагуливается в море, на нерест идет в реки, образуя популяции, приуроченные к разным рекам.

Н.Е. Песериди (1967) на основании состояния гонад, сроков захода в реку, длительности пребывания в реке, времени и экологических особенностей размножения выделил следующие внутрипопуляционные биологические группы:

- раннюю яровую севрюгу, мигрирующую в реку в апреле-мае. Производители характеризуется 4 стадией зрелости гонад при заходе в реку и поднимаются вверх по реке на расстояние до 650 км, нерестятся в верхней и средней зоне нерестилищ и находятся в реке до 1,5-2 месяцев;

- позднюю яровую севрюгу, которая заходит в реку в конце мая и июне, нерестится на нижних нерестилищах и задерживаются в реке не более 2-3-х недель. Производители имеют 4 завершенную и 5 стадию зрелости гонад;

- озимую севрюгу, мигрирующую в реку с лета до поздней осени, зимующую в реке и поднимающуюся до верхних нерестилищ. Производители отличаются преобладанием 3 стадией зрелости гонад, их созревание завершается в период зимовки в реке.

На нерестилищах в момент икрометания на 1 самку приходится несколько самцов, они находятся на нерестилище в течение почти всего нерестового сезона (1,5-2 месяца), и осеменяют икру самок разных биологических групп. В конце нереста соотношение полов на нерестилищах достигает 1:15 (Песериди, 1967, 1986).

Режим рыболовства на р. Урал, принятый в 1967 г., обеспечивавший полноценный пропуск производителей на нерестилища и большой естественный нерестовый фонд севрюги площадью 1600 га, позволили сохранить ее внутрипопуляционное биологическое разнообразие до времени проведения исследований (Верина, Песериди, 1981, Песериди и др.1984).

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Сбор материала проводили в составе полевого отряда лабораторий ихтиологии и воспроизводства рыб Урало-Каспийского отделения ЦНИОРХ (Атырауское отделение КазНИИРХ) на лицевой тоне р. Урал «Нижне-Дамбинской», расположенной в 19 км от моря, с апреля по октябрь 1981-1985г.г. Объектом исследования в течение всей нерестовой миграции севрюги в реку были самки и самцы, принадлежащие к разным биологическим группам. Ежедневно осуществляли количественный учет севрюги из уловов 4 притоне-ний для изучения динамики нерестового хода и учета соотношения полов. Про-

водили полный биологический анализ производителей (Правдин, 1966). Всего было исследовано 5479 экз. севрюги, из них 2925 самцов и 2554 самки.

Во время биологического исследования периодически, с интервалом в несколько дней, в течение 1-3 дней подряд брали образцы печени, сердца и мышц для биохимического анализа. В 1984 г. и 1985 г. период с апреля по сентябрь было сделано по 10 выборок производителей севрюги и проанализировано соответственно 521 и 752 биохимические пробы (табл.1).

В 1985 г. в течении июня-июля в низовье р. Урал были собраны для биохимического анализа 492 экз. покатной молоди от естественного нереста из уловов бим-трала. В 1985 г. во время количественного учета оценивали в уловах долю белоспинных рыб и провели морфометрический анализ 23 самцов и 34 самок белоспинной севрюги и 23 самцов и 36 самок черноспинной севрюги по 26 признакам в соответствии с методическими рекомендациями по морфологическим исследованиям осетровых рыб и их гибридов (Крылова, Соколов, 1981). Черноспинной считали севрюгу с почти черной окраской спины, заходящей далеко за ряд боковых жучек. Белоспинная севрюга характеризуется очень светлой окраской, только около спинных жучек проходит черная полоса шириной около 5 см.

Таблица 1

Отбор проб для генетико-биохимических исследований и компоновка их по условно выделенным группам

группы 1 (ранняя яровая севрюга) 2 (ранняя яровая севрюга) 3 (поздняя яровая севрюга) 4 озимая севрюга

№ выборки 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

Количество экземпляров 51 51 73 75 55 32 47 49 22 66

1984 г. 10-16 апреля 19 апреля 22-23 апреля 26-29 апреля 4-5 мая 10-И мая 16-17 мая 22 мая весь июнь весь сентябрь

группы 1 2 3 4

Количество экземпляров 80 80 82 75 77 45 137 62 52 62

1985 г. 23-24 апреля 28-29 апреля 4-5 мая 8-10 мая 13-14 мая 18 мая 23-25 мая 29 мая весь июнь весь сентябрь

Образцы тканей от 1273 экз. производителей рыб и 492 экз. молоди, 49 экз. белоспинной и 117 экз. черноспинной севрюги были заморожены для хранения, а затем обработаны методом электрофореза в полиакриламидном и крахмальном гелях на базе лаборатории мутагенеза Института Общей Генетики (Peacock et all, 1965; Show С., Prasad R., 1970). В качестве генетических маркеров использовали 5 полиморфных ферментных систем: лактатдегидрогеназу (ЛДГ), малатдегидрогеназу (МДГ), аспартатаминотрасферазу (ААТ), фосфог-лкжомутазу (ФГМ) и эстеразу (ЭСТ), позволивших проанализировать выборки по 8 локусам.

В журнал записывали для каждой изученной особи следующие сведения: дата анализа, порядковый номер, возраст, пол, стадия зрелости, абсолютная длина, живая масса тела, масса тела без внутренних органов, вес гонад, количество икры в 2 граммах, плодовитость, коэффициент упитанности по Кларк, генотипы исследованных локусов ЛДГ-3, ЛДГ-4, ААТ-1, ААТ-2, ФГМ-1, ЭСТ-2, МДГ-1, МДГ-2 (Правдин, 1966; Никоноров и др. 1985; Рябова, Кутергина, 1990). В 1985 г. дополнительно отмечали тип окраски тела. Такой принцип оформления материала позволил проанализировать внутрипопуляционную, возрастную, генерационную и половую изменчивость уральской севрюги, а также включает в себя возможность оценки генотипов по биологическим характеристиками. Компьютерный вариант базы данных находится в лаборатории популяционной генетики ИОГен (РАН). Достоверность различий биологических показателей мигрантов оценивалась по критерию Стьюдента (t^). Генетическая гетерогенность популяции оценивалась с помощью теста х2 на гетерогенность, Gst и показателя генетического сходства, которые обычно используются для анализа генетической внутрипопуляционной дифференциации (Ниль, Шелл, 1958, Животовский, 1979 1983, Алтухов и др. 1997, Nei, 1975). При расчете частот аллелей, гетерозиготности, оценке соответствия теоретически ожидаемых частот наблюдаемым (х2 ) по закону Харди-Вайнберга и статистической обработке биологического материала использовались компьютерные программы Ю.И. Дубровы (ИОГен) и А.Н. Горохова (МИСИС).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ БИОЛОГИЧЕСКАЯ РАЗНОКАЧЕСТВЕННОСТЬ ПОПУЛЯЦИИ СЕВРЮГИ Р.УРАЛ

Начало нерестового хода севрюги в реку зависит от климатических условий текущего года. Обычно он начинается при достижении нерестовых температур воды 3-5° С и независимо от уровня воды в реке (Песериди, Чертихина 1971, Шишанова, 1987). Динамика нерестового хода севрюги в реку в весенний период характеризуется двухвершинной кривой и представлена на рис. 1.

В начале нерестового хода в апреле в реку заходят крупные рыбы (средняя длина у самок 158 см, самцов - 141 см), доминирующих 14-17 летних старших возрастных групп, с 4 стадией зрелости гонад. Они относятся к 1 группе ранней яровой севрюги и формируют первый пик численности уловов. В этот период в уловах доминируют рыбы в темной окраской спины.

В начале мая вместе с ними в реку мигрируют рыбы 2 группы ранней яровой севрюги. Эта группа выделена в результате многолетних наблюдений (1973-1985 г.г.) за динамикой численности мигрантов на основании увеличения в этот период уловов (до 30%) относительно предшествующего периода спада добычи (Шишанова и др., 1987). От рыб 1 группы они отличаются только более высокой степенью готовности к нересту и доминированием рыб со светлой окраской тела. Еще в 1863 г. Северцов H.A. отмечал в мае подходы так называемых «егорьевского» (6 мая) и «Никольского беляка» (22 мая).

С конца мая до последних чисел июня в реку заходит поздняя яровая севрюга. В уловах доминируют более мелкие, и менее упитанные производители 13-15 летнего возраста, находящиеся в 4-5 стадиях зрелости гонад, среди которых встречаются текучие особи. В июле-августе наступает перерыв в нерестовой миграции севрюги, изредка в уловах попадаются единичные экземпляры.

С августа до середины октября в реку заходит 4 группа рыб - озимая севрюга. Она находится в реке 7-8 месяцев и размножается на верхних нерестилищах. Для этих производителей характерен низкий коэффициент зрелости гонад (до 14,2 у самок) и высокий коэффициент упитанности (до 0,31). По своим размерно-весовым и возрастным характеристикам они мало отличаются от ранней яровой севрюги.

Исследования возрастной и размерно-весовой структуры уральской севрюги подтвердили, что длина, вес, плодовитость коррелируют с возрастом рыбы, масса тела с длиной. Коэффициент упитанности производителей севрюги от возраста рыбы не зависел. Данные по доминирующим возрастным группам в 1984-1985 г.г. приведены в табл. 2. Важно отметить, что генерации рыбы, пришедшие на нерест в разные годы, могут иметь статистически достоверные различия по размеру и плодовитости.

1150

август сентмбр- -----'

200 £зо

? 2 25

^ 150

л 1.15

1 100 а 20

0 й * 1 м

:50 с. ® с с 5

¿14- £ р 0

апрель

май

июнь

°1 1 1 1 1 г,п июль август сентябрь октябрь

Рис. 1 Динамика нерестового хода севрюги в р. Урал на тоне «Нижне-Дамбинской» в 1982-1985 годах а). 1982 г., б) 1983 г., в) 1984 г., г) 1985 г. —«— самки, —■— самцы, —л—обапола -уровень воды в реке, • .......температура воды в реке

Таблица 2

Морфологическая характеристика доминирующих возрастных групп производителей севрюги

Возраст, Длина тела, Масса тела, Плодовитость, Коэффициент

лет см кг тыс. шт. упитанности

1984 г. 1985 г. 1984 г. 1985 г. 1984г. 1985 г. 1984 г. 1985 г.

САМКИ

12 152,1« 146,5** 13,1 11,0 233,4* 199,6* 0,237 0,228

13 155,0* 150,3* 11,9 12,1 244,1** 209,1** 0,233 0,235

14 155,9 155,1 12,5 12,3 266,5 227,2 0,232 0,237

15 156,6 154,2 12,9 13,1 227,4 230,1 0,240 0,234

САМЦЫ

12 136,7 135,9 7,3 6,8 - - 0,238 0,237

13 137,8 137,7 7,5 7,2 - - 0,247 0,242

14 141,8 140,1 8,0 7,7 - - 0,243 0,236

15 143,5 141,4 8,2 8,0 - - 0,246 0,242

* - р<0,05, ** - р<0,01 а,)

Таблица 3

Биологические показатели уральской севрюги из условно выделенных внутрипопуляционных биологических групп

груп Длина тела, Плодовитость, Коэффициент Возраст рыб, Коэффициент упитан-

па см тыс.шт. зрелости лет ности по Кларк

Год 1984 1985 1984 1985 1984 1985 1984 1985 1984 1985

САМКИ

1 159.53 158,82,3 270.03 263,1ЗА 23,94 24,4 4 16,12 16,3м 0.25м-4 0.243-4

2 157.13 154,93 255,33 250.84 23,24 23,9 4 14,74 15,04 0.2364 0,2403

3 151,8" 151,I4 203,7 20731 23,44 24,3 4 14,84 14.34 0Д274 0Д234

4 157,0 156,3 - 219,3 15,7 16,1 17,0 16,5 0,266 0,246

157,2 154,9 252,9 229,3 23,2 23,1 15,6 15,9 0,242 0,235

САМЦЫ

1 139,7Ы 141323Л ¿61 5,94 13,6м 14,2»' 0.2493 0,252^

2 134,44' 135,33 5,44 5,5" 12,34 12,7 0Д463 0Д423

3 132,9 4,94 5,5* 12,14 12,2 0,228" 0,228"

4 139,1 138,4 6,8 7,6 13,8 13,01 0,246 0,262

136,6 136,6 5,5 5,9 12,8 12,1 0,244 0,242

- верхний индекс указывает на группу, с которой выявлены достоверные различия

- выделены жирным шрифтом показатели со значимостью различий р <0,001, подчёркнуты - р <0,01, остальные индексированные показатели - р <0,05;

Анализ показателей длины, массы, возраста, плодовитости, коэффициентов зрелости и упитанности производителей в соответствии с описанными ранее и условно выделенными биологическими группами показывает, что между 1, 2 и 3 группами существуют достоверные различия по длине и весу самок и самцов, а также плодовитостью (табл. 3). Это во многом обусловлено преобладанием старших возрастных групп. Однако в 3 группе производители тех же доминирующих возрастных групп имеют меньшие размеры и более низкий коэффициент упитанности. Наблюдающиеся различия первых 3-х групп от 4 озимой севрюги по коэффициентам зрелости и упитанности обусловлены разным физиологическим состоянием производителей и степенью зрелости половых продуктов. При объединении показателей производителей 1 и 2 ранней яровой группы сохраняются достоверные различия между ранней и поздней яровой севрюгой по длине, коэффициенту упитанности и возрасту.

Рассмотренные данные свидетельствуют о том, что в разные периоды нерестового хода севрюги преобладают определенные возрастные группы мигрантов, меняется соотношение самок и самцов и рыб с разной окраской тела. В начале хода в апреле мигрируют рыбы старших возрастов, в мае и июне - более молодые производители, что обуславливает различия плодовитости, массы и длины тела рыб из разных внутрипопуляционных групп. Коэффициенты зрелости и упитанности рыб из рассмотренных групп связаны со степенью готовности к нересту мигрантов в разное время нерестового хода и не зависят от возраста производителей.

Таким образом, наблюдается биологическая разнокачественность производителей из условно выделенных внутрипопуляционных групп в целом соответствующая описанной ранее Песериди (1967).

ГЕНЕТИЧЕСКАЯ ИЗМЕНЧИВОСТЬ ПОПУЛЯЦИИ СЕВРЮГИ Р. УРАЛ Характеристика генетической изменчивости севрюги по времени нерестовой миграции

Оценка производителей севрюги по параметрам белкового полиморфизма показала заметные различия, хотя и неодинаково выраженные для разных полиморфных систем, между выборками, взятыми в разное время нерестового хода. Гетерозиготность стада по исследованным локусам представлена в таблице 4. Наиболее полиморфными оказались локусы ЛДГ-3, ЛДГ-4, ААТ-1, ААТ-2, ФГМ-1 и ЭСТ. По Нею (Gst) из общей популяции выделяются по гетерози-

готности следующие группы: по локусу ЛДГ-3 - 1,2,3 группы нерестующие в 1984 г., по локусу ЛДГ-4 - 2 группа (1984 г.), по локусу ААТ-1 - 4 группа 1984 г., по локусу ААТ-2 -1,2 и 3 группа (1984), и 3 группа 1985 г., по локусу ФГМ -1 и 4 группы 1984 -1985 г.г., по локусу ЭСТ - 2 и 4 группа 1984 г. (Ш, 1975). Это свидетельствует о существенной генетической гетерогенности популяции уральской севрюги в целом.

Варьирование частоты обычного аллелей исследованных локусов и гете-розиготности в выборках севрюги представлено в табл. 5. и рис. 2 Видно, что особенно выделяются апрельские и сентябрьские выборки рыб, которые отличались от большинства выборок по локусам ЛДГ-3, ЛДГ-4, ААТ -1 , ААТ-2 и ЭСТ-2.

Таблица 4

Оценка генетической изменчивости севрюги по гетерозиготности локусов

Локус Но не Относительное разнообразие между группами (Оя)

год 1 группа 2 группа 3 группа 4 группа

ЛДГ-3* 0,310 0,302 1984 1985 0,240 0,102 0,304 0,043 0.288 0,092 0,056 0,092

ЛДГ-4* 0,319 0,323 1984 1985 0,015 0,102 0.266 0,056 0,021 0,040 0,027 0,093

ААТ-1* 0,392 0,437 1984 1985 0,069 0,043 0,073 0,041 0,105 0,009 <Ш5

ААТ-2* 0,259 0,327 1984 1985 0.278 0,055 0,529 0,042 0,128 0.238 0,027

ФГМ-1* 0,263 0,284 1984 1985 0,415 0,278 0,067 0,042 0,112 0,010 0,280 0.158

ЭСТ-2* 0,379 0,402 1984 1985 0,077 0,092 0.146 0,049 0 0,022 0.171 0,097

* наличие полиморфности по 95% критерию _„ - выделяющиеся по Са группы

Полученные материалы свидетельствуют о том, что, во-первых, такие популяционно-генетические параметры, как частоты аллелей и уровень наблюдаемой гетерозиготности варьируют по времени нерестового хода севрюги в реку; во-вторых, динамика частот аллелей локусов ЛДГ-В1, ААТ-А2 и ФГМ-1 может существенно различаться у производителе^ пришедших на нерест в разные годы.

123456789 10 номер выборки ЭСТ

1 2 3 4 5

номер выборки ААТ-2

7 8 9 10

123456789 10 123456789 10

номер выборки номер выборки

ЛДГ-3 ААТ"1

—♦—Н-1984 —■—Н-1985

-л-Ч-1984 -к-Ч-1985

Рис. 2. Частота преобладающего аллеля и наблюдаемая гетерозиготность наиболее изменчивых локусов у производителей севрюги в 1984-1985 г.г.

Таблица 5.

Варьирование частоты преобладающего аллеля в выборках

Локус Частота аллеля в выборках 1984 г. Частота аллеля в выборках 1985 г.

Минимальная Максимальная Средняя Минимальная Максимальная Средняя

ЛДГ-3 0,741 0,921 0, 840 0,760 0.850 0,813

ЛДГ-4 0, 765 0. 888 0, 835 0,774 0,848 0,793

ААТ - 1 0.816 0, 974 0, 862 0,702 0,864 0,776

ААТ-2 0,607 0,810 0, 724 0,616 0,756 0.683

ЭСТ-2 0,703 0, 824 0, 779 0,686: 0,809 0,743

МДГ-1 0,993 1,000 0,998 0,988 1,000 0,996

МДГ-2 0, 984 1,000 0,993 0,993 1,000 0,997

ФГМ-1 0,700 0, 823 0,998 0.796 0,868 0,821

Оценка генетической гетерогенности внутрипопуляционных биологических групп уральской севрюги

Для оценки генетической гетерогенности внутрипопуляционных биологических групп производителей севрюги выборки были объединены в соответствии с вышеописанными четырьмя биологическими группами и протестированы на гетерогенность (Ниль, Шелл, 1958; Животовский, 1983).

Сравнение выделенных групп между собой показало существование между ними различий как минимум по одному из локусов (табл. 6). В 1984 г. гетерогенность была выявлена по локусам: ЛДГ-3 по аллелям В и В, ЛДГ-4 по аллелю В, ААТ- 1 по аллелям А, А', А", ААТ-2 по аллелям А, А, А'". В 1984 г. 1 группа ранней яровой севрюги сильно отличалась от других групп по локусам ФГМ-1 и МДГ-1,-2. В 1985г. выявлена неоднородность по локусу ЛДГ-4 по аллелю В", по локусу ААТ-1 по аллелю А, по которым в 1984г. гетерогенность не была показана. По локусам ЛДГ-3 и ФГМ-А в 1985г. выборки рыб были гомогенны. Таким образом, выделенные четыре биологические группы рыб в исследованные годы были гетерогенны, но по разным локусам и аллелям..

Для оценки аллельного разнообразия выделенные группы были проанализированы по показателю генетического сходства, который в целом подтвердил результаты теста х2! Для 2 и 3 уровня значимости (Животовский, 1983).

Полученные результаты дают основание сделать вывод о генетической неоднородности производителей уральской севрюги по использованным маркерам в разные периоды нерестовой миграции с апреля по октябрь. Однако динамика генных частот по времени миграции не обнаружила какой-либо закономерности и не имеет связи со временем захода в реку рассмотренных внутри-популяционных биологических групп. Поэтому наши данные не свидетельствуют о репродуктивной самостоятельности выделенных нами групп рыб, в том числе озимой и яровой части стада.

Таблица 6

Гетерогенность севрюги р. Урал по частоте аллелей (тест

Год, номер Наименование локуса

и название лдг-3 ЛДГ-4 ААТ-1 ААТ-2 ЭСТ-2 ФГМ-1 МДГ-1 МДГ-2

группы рыб аллель-1

1 9 8 4 г.

1 0.7732,3 0.8122 0.7243 0.8662 0.0162-3 0,7212 1,0002'3'4 0,9952

2 0,885 0,866 0,732 0.918" 0,001 0,814' 0.9911 1,000

3 0,882 0,816 0,638 0,8284 0,000 0,8031 0,993' 1,000

4 0,841 0,818 0,761 0,815 0,017 0,832 0,984' 1,000

Итого 0,841 0.835 0,724 0,862 0,011 0.798 0,993 0,998

1 9 8 5 г.

1 0,831 0,7882 0.6912-3 0,8163 0,0034 0,884 1,0002'4 0,9912' 3

3 0,807 0,803 0,670 0,7883 0.0054 0,838 0.9933 1,000"

4 0,811 0,779 0,692 0,738 0,0094 0,831 1,000 1,000"

Итого 0,806 0,823 - - 0,044 0,862 0,993й 0,971

0,813 0.793 0,683 0,776 0,020 0.848 0,997 0,996

Белостока ож 0,796 0,670 0.670 0,019 0,803 - -

Черноспинка 0.876 0,829 0,628 0.846 0,004 0,870 - -

- верхний индекс указывает на группу, с которой выявлены достоверные различия по х2

- выделены жирным шрифтом показатели со значимостью различий р <0,001, подчёркнуты - р <0,01, остальные индексированные показатели - р <0,05;

Генетическая изменчивость производителей уральской севрюги по поколениям, возрастным группам и половой принадлежности

Изучение параметров белкового полиморфизма рыб, принадлежащих к определенным возрастным группам, поколениям и полу проводили на примере самых представительных выборок рыб в возрасте 11-16 лет. Анализ гетерогенности выборок показал, что достоверные различия по частотам обычных аллелей имеются между следующими выборками рыб (табл. 7):

1. Производителями разного возраста в пределах одного поколения:

а) 13 и 14 летками поколения 1971г. по локусу ЛДГ-3 (х2 4,87; р< 0,05) и локусу ЭСТ-2 (х2 6, 98; р <0,01);

б). 14 и 15 летками поколения 1970 г., по локусам ЛДГ-4 и ФГМ (%2 соответственно 4,94 и 5,12; р<0,05;

в) 15 и 16 летками поколения 1969г. по локусу ЭСТ (х2 7,12; р < 0,05).

2. Производителями разных поколений:

а). 1971 г. и 1972 г., по локусу ЛДГ-3 (х2 5,14; р <0,05);

б) 1969 г. с 1970 г. и с 1971 г. по локусу ФГМ (х2 соответственно 4,51 и 4,5;, р<0,05);

в) 1973 г. и 1970 г. по локусу ЭСТ-2 (х29,64; р< 0,01)

Интересно отметить, что редкий аллель / локуса ЭСТ-2 не наблюдался в выборках из поколений 1973 г. и 1969 г. В выборках 1972 г. его частота незначительна (0,005), а в 1970-1971гг. - соответствует общепопуляционному значению (0,024). Поэтому между выборками из поколений 1973 г., 1969г. и 19701971 г. по нему обнаружены достоверные различия.

Сравнение частот обычных аллелей самок и самцов, пришедших на нерест в 1984 г. показало их гетерогенность по локусу ЛДГ-3 (х2 3,96; р <0,05), а в 1985г. по локусу ЛДГ-4 (х26, 78; р<0,01) Также была обнаружена неоднородность самок нерестящихся 1984 -1985 годах по ЛДГ-3 (х2 7,26; р<0,01) и самцов до ЛДГ-4 (х2 7,10; р<0,01) (табл. 8). По другим локусам изменчивости обнаружено не было.

Таким образом, исследование полиморфных локусов уральской севрюги показало рыбы разного возраста и поколений, а также самки и самцы могут бьггь гетерогенны по локусам ЛДГ-3, ЛДГ-4 и ЭСТ-2.

Таблица 7

Частота преобладающего аллеля в различных возрастных группах и поколениях севрюги

Год рожде- Возраст рыб при вылове, ЛДГ-3 ЛДГ-4 ФГМ-1 ААТ-1 ААТ-2 ЭСТ-2 аллелье ЭСТ-2 аллель 1

ния лет

11 0,825 0,841 0,87 0,8 0

1973 12 0,815 0,774 0,855 0,659 0,803 0,801 0

Всего 0,821 0,799 0,860 0,801** 0**

12 0,878 0,827 0,774 0,804 0

1972 13 0,854 0,764 0,831 0,65 0,767 0,754 0,009

Всего 0,864** 0,789 0,812 0,776 0,005

13 0,855* 0,855 0,78 0,841* 0,024

1971 14 0,759* 0,835 0,819 0,688 0,768 , 0,704* 0,014

Всего 0,799** 0,843 0,805** 0,769 0,190**

14 0,821 0,773* 0,727* 0,708 0,090

1970 15 0,86 0,860* 0,847* 0,692 0,8 0,683 0,016

Всего 0,843 0,822 0,805** 0,694** 0,013**

15 0,816 0,855 0,875 0,811* 0

1969 16 0,815 0,782 0,878 0,676 0,838 0,692* 0

Всего 0,815 0,815 0,877** 0,75 0**

* - установлены достоверные различия между возрастными группами по х2 **- установлены достоверные различия между генерациями по у?

Таблица 8

Частота преобладающего аллеля локусов ЛДГ у самок и самцов в 1984-1985 г.г

Пол севрюги 1984 1985

лдг-з ЛДГ-4 ЛДГ-3 ЛДГ-4

Самки 0, 876* 0. 833 0.810* 0, 826

Самцы 0. 826 0. 836* 0,823 0, 768*

*- выделены различия (р<0,01) между однополыми рыбами, пришедшими на нерест в разные годы, курсивом - между полами

Сравнительная характеристика производителей белоспинной и черноспинной севрюги р. Урал

Севрюга имеет разнообразную окраску кожи спины, которая варьирует от светлого, почти белого до черного цвета. В окраске имеется несколько переходных форм, поэтому можно предположить, что это расщепление признака по закону Менделя. Однако белоспинная и черноспинная севрюга доминируют в уловах в разные периоды нерестовой миграции и отличаются размерами икринок (Песериди, 1986). Аквариумные опыты, поставленные на молоди севрюги в возрасте 1,5 месяца со светлой, серой и темной окраской кожи, свидетельствуют о том, что севрюжата со светлой окраской кожи по средним показателям обладает наибольшим темпом линейного и весового роста, темные - наиболее тугорослые, серые - занимают промежуточное положение (Шилов, Хазов, 1986). Поэтому морфогенетические исследования рыб с крайними вариантами окраски спины представляли определенный интерес.

Морфометрические исследования по 26 признакам показали следующие достоверные различия:

- между самками белоспинной и черноспинной севрюги по длине рыла, наибольшей высоте головы, числу боковых жучек, числу лучей в анальном плавнике;

- между самцами - длине рыла, по ширине рта, наименьшей высоте головы, межглазничному пространству, наибольшей ширине головы, и числу лучей в анальном плавнике;

Исследование генетической изменчивости рыб этих типов окраски позволило обнаружить достоверные генетические различия между выборками белоспинной и черноспинной севрюги по локусам ЛДГ-3 и ААТ-2, х2 соответственно 4,29; р<0,05 и 11,74; р<0,001 (табл. 6).

Таким образом, обнаружена морфометрическая и генетическая изменчивость производителей с разным типом окраски спины. Несмотря на не полную ясность природы показанных различий по цвету кожи, эти сведения заслуживают внимания при разработке мероприятий по сохранению генетического разнообразия севрюги.

Генетическая изменчивость производителей, естественной и заводской молоди уральской севрюги

Генетическая изменчивость производителей уральской севрюги по поколениям, возрастным группам и полу свидетельствует о том, что в процессе роста и созревания севрюга находится под влиянием различных направлений естественного отбора в пользу тех или иных аллелей, гомозигот и гетерозигот.

Поэтому изучение генетической изменчивости производителей и их потомства представляет интерес в связи с оценкой интенсивности естественного отбора и с вопросом о природе внутрипопуляционных биологических групп.

Сравнение частоты аллелей всех объединенных выборок мигрантов 1984г. с таковыми 1985 г., позволило обнаружить высоко достоверные различия между ними по локусам ЛДГ-4 по аллелю В", ААТ-2 по А, ЭСТ по аллелю е и преобладающему аллелю ФГМ. Производителей 1984 г. и 1985 г. высоко достоверно отличались от дикой молоди 1985 г (р <0,001) по аллелю е и аллелю / локуса ЭСТ (табл. 9). Молодь, выращенная на осетровом заводе во втором туре использования прудов достоверно отличалась от производителей и дикой молоди от естественного нереста по локусу ЛДГ-3 аллелям В и В' (р <0,001) и по локусу ЛДГ-4 по всем аллелям (р <0,001). Доля гетерозигот у заводской молоди по локусу ЛДГ-3 была понижена почти в 4 раза, по локусу ЛДГ- 4, повышена в 3 раза. Существуют данные, что такое изменение частот генотипов у заводской молоди может быть связано с неблагоприятными условиями выращивания во время второго тура использования прудов (Рябова и др. 1984, 1995, 1996, Серов, 1987). В это время в опытном пруду наблюдалась высокая температура воды (до 28° С) и пониженное содержание кислорода (до 3,5 мг/л).

Генетическая изменчивость производителей, естественной и заводской молоди, свидетельствует о том, что гетерогенность исследованных выборок по исследованным ферментам может быть обусловлена разным направлением естественного отбора в раннем онтогенезе и может быть не связана с репродуктивной изоляцией исследованных выборок рыб.

Таблица 9

Частота преобладающих и редкого аллелей (ЭСТ-2 I) у производителей и молоди уральской севрюги

Год и название категории рыб Коли честно. экз. Наименование локуса

ЛДГ-3 ЛДГ-4 ААТ-1 ААТ-2 ЭСТ-2 аллель -е ЭСТ-2 аллель-1 ФГМ-1

Производители, 1984 г. 521 0,841 0,835 0,724 0,862 0,779 0,011 0,798

Производители, 1985 г. 752 0,813 0,793 0,683 0,776 0,743 0,020 0,848

Заводская молодь, 1984 г. 69 0,956 0,594 - - - - -

Дикая молодь, 1985 г. 492 0,824 0,822 - - 0,686 0,050 -

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В результате проведенных исследований впервые получены сведения о генетической гетерогенности половых и возрастных групп, поколений и фене-тических типов уральской севрюги. Поэтому, можно по новому взглянуть на генетическую неоднородность производителей севрюги из разных внутрипо-пуляционных биологических групп.

Показано, что в разные периоды нерестового хода севрюги преобладают определенные возрастные группы мигрантов, меняется соотношение самок и самцов и рыб с разной окраской тела. В начале хода в апреле - мае идут рыбы старших возрастов, в июне - более молодые. Поэтому аллозимная изменчивость рассмотренных категорий рыб может обуславливать генетическую неоднородность внутрипопуляционных групп севрюги в течение нерестовой миграции с апреля по октябрь.

Аналогичные исследования, проведенные на лососевых рыбах, черноморском анчоусе, тупорылом макрурусе, моллюсках, дрозофилах и других видах животных и насекомых, также свидетельствуют о том, что внутрипопуля-ционная гетерогенность выявленная по параметрам биохимического полиморфизма, часто бывает обусловлена возрастной, генерационной (когортной), половой и экологической генетической изменчивостью (Алтухов, Варнавская, 1983, Алтухов и др., 1974,1984, 1997; Голубцов, 1988; Калнин, 1990).

Генетические различия между генерациями, возрастными группами, самцами и самками могут быть обусловлены неодинаковой скоростью роста и созревания различных типов гомозигот и гетерозигот у самок и самцов различных генераций, которые подвергаются действию естественного отбора под влиянием факторов среды. В разных условиях приобретают преимущество различные типы гомозигот и гетерозигот, что показано как на севрюге, так и на других видах рыб (Рябова и др., 1984, 1995, 1996; Серов 1987, Калнина, 1989, Алтухов и др. 1997; Allendorf, Phelps; 1980, Dansmann et all, 1987). Поэтому генетическая дифференциация популяций, в том числе и уральской севрюги, выявленная с помощью генетических маркеров, часто отражает не структуру вида, подвида, географической или экологической расы, а является генетическим механизмом обеспечивающим устойчивость системы во времени и пространстве (Мина, 1986; Голубцов, 1988; Алтухов и др.1997).

Рассмотренные нами материалы в целом подтверждают направленность основных сформулированных принципов и подходов к разработке режима промысла и формированию маточных стад осетровых, ориентированных на

19

сохранение биологического разнообразия, поддержание возрастной и половой структуры стад, но позволяют внести ряд предложений по их усовершенствованию и корректировке (Чебанов, 2002; Ананьев и др. 2003).

На основании изложенного материала можно дать следующие практиче- ,

ские рекомендации:

1). Для обеспечения полноценного естественного воспроизводства популяции при разработке режима промысла необходимо предусмотреть пропуск ^ производителей ранней яровой севрюги в период пика численности мигрантов.

2). При искусственном воспроизводстве севрюги на осетровых рыбоводных заводах целесообразно использовать производителей ранней яровой и озимой севрюги. Во втором туре использования прудов следует иметь в виду селективное влияние неблагоприятных гидрохимических и термических условий на генофонд молоди и не выращивать молодь севрюги для выпуска в естественные водоемы.

3). При формировании коллекционных и эксплуатации промышленных маточных стад осетровых и криобанков спермы рыб необходимо:

- отбирать рыб с разной окраской тела для сохранения генетического разнообразия при создании коллекционных стад севрюги и при искусственном воспроизводстве для пастбищного выращивания в естественных водоемах; ' обеспечивать естественное соотношение полов при искусственном воспроизводстве севрюги с целью сохранения генетического разнообразия при пастбищном выращивании в естественных водоемах.

выводы

1. В период изучения популяции севрюги р. Урал, не смотря на усиливающееся антропогенное воздействие, наблюдали описанную ранее Песери-ди Н.Е. (1967), внутрипопуляционную дифференциацию производителей севрюги как по времени захода в реку на нерест, так и по биологическим показателям: возрасту, длине, массе, плодовитости, коэффициентам зрелости и упитанности. Поэтому популяция уральской севрюги может служить объектом для проведения популяционно-генетических исследований и организации мониторинга для оценки антропогенного влияния на генофонд севрюги.

2. Производители уральской севрюги в течение нерестовой миграции генетически неоднородны по всем использованным генетическим маркерам. Однако динамика частот аллелей и гетерозиготности в выборках мигрантов на протяжении нерестового хода не обнаруживает какой-либо закономерности и не связана с заходом в реку определенных биологических групп севрюги.

3. Обнаружены статистически достоверные генетические различия между исследованными внутрипопуляционными биологическими группами севрюги. Однако генетические различия между группами по исследованным локусам не повторяются из года в год, поэтому наши данные не свидетельствуют о репродуктивной обособленности выделенных на основании динамики нерестового хода и биологических показателей четырех условных внутрипопуляционных групп рыб, в том числе озимой и яровой части популяции уральской севрюги.

4. Обнаружена генетическая гетерогенность севрюги по локусам ЛДГ-3, ЛДГ-4, ФГМ-1 и ЭСТ-2 у разных возрастных групп в пределах одного поколения, между самками и самцами, между поколениями разных лет, а также мофо-метрическая и генетическая изменчивость белоспинных и черноспинных производителей по локусам ЛДГ-3 и ААТ-2.

5. Выявлена генетическая изменчивость производителей, естественной и заводской молоди по исследованным ферментам, которая может бьггь обусловлена разным направлением естественного отбора в раннем онтогенезе и неодинаковой скоростью созревания гомозигот и гетерозигот.

6. Для сохранения генетического разнообразия при разработке режима промысла севрюги и формировании коллекционных и промышленных маточных стад, а также создании криобанков спермы севрюги, необходимо учитывать полученные сведения о генетической изменчивости внутрипопуляцион-ной, генерационной, возрастной, половой структуры и фенетических типов севрюги.

По теме диссертации опубликованы следующие работы:

1. Рябова Г.Д., Никоноров С.И., Кутергина И.Г., Офицеров М.В., Шишанова Е.И. Связь между уровнем гетерозиготности по гену лактатдегидрогеназы ЛДГ-В2 и некоторыми характеристиками производителей и молоди севрюги. Тезисы науч. докл на Всесоюзном совещании «Осетровое хозяйство водоемов СССР» 11-14 декабря 1984 г. Астрахань. С.-303-304

2. Шишанова Е.И. Некоторые аспекты биологии нерестовой популяции севрюги р.Урал. Сборник тр. ВНИРО «Воспроизводство запасов осетровых рыб в Каспийском и Азово-Черноморском бассейнах», Москва, 1987, С. 162-171.

3. Шишанова Е.И., Рябова Г.Д. Никоноров С.И. Предварительный анализ генетической гетерогенности севрюги р. Урал. Сборник тр. ВНИРО «Воспроизводство запасов осетровых рыб в Каспийском и Азово-Черноморском бассейнах», Москва, 1987, С.-171-176.

4. Шишанова Е.И. Морфогенетическая характеристика белоспинной и черноспинной севрюги: Тез. докл. к Всес. совещ. «Осетровое хозяйство водоемов СССР» ноябрь 1989г. Часть 1- Астрахань, 1989,- С.347-348.

5. Шишанова Е.И. Рябова Г.Д. Популяционно-генетическая характеристика уральской севрюги: Тез. докл. к Всес. совещ. «Осетровое хозяйство водоемов СССР» ноябрь 1989г. Часть 1- Астрахань, 1989.- С.- 349-350.

6. Рябова Г.Д., Офицеров М.В., Шишанова Е.И. Исследование связи между ал-лозимной изменчивостью и некоторыми компонентами приспособленности у севрюги Acipenser stellatus (Pallas). Генетика, 1995, т 31, № 12, С. 19791692.

7. Рябова Г.Д., Офицеров М.В., Климонов В.О., Шишанова Е.И., Довгопол Г.Ф., Р.П. Ходоревская. О возможном влиянии рыбоводства на генетические и биологические характеристики севрюги: Матер, докл. совещания в Ростове на Дону в августе 1996г. «Состояние и перспективы научно-практических разработок в области марикультуры России», ВНИРО, 1996.-С.269-275.

(

Тип ВНИЭРХа Зак. 251 Тир. 100

<

I

I

>

\

2с> о5-А

"Ti 7

Р11 3 4 4

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Шишанова, Елена Ивановна

ВВЕДЕНИЕ

1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР

1.1. Краткая характеристика рыболовства на реке Урал

1.2. Биология севрюги реки Урал и ее внутривидовая дифференциация

1.3. Генетическая изменчивость популяций рыб

2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДИКА.

2.1. Материал и методика ихтиологических исследований

2.2. Материал и методика генетико-биохимических исследований 29 3. БИОЛОГИЧЕСКАЯ РАЗНОКАЧЕСТВЕННОСТЬ ПОПУЛЯЦИИ СЕВРЮГИ Р. УРАЛ

3.1 Динамика нерестового хода севрюги в р. Урал

3.2 Возрастной состав, размерно-весовые показатели и плодовитость производителей севрюги р. Урал

3.3 Упитанность и стадии зрелости производителей уральской севрюги

3.4 Оценка биологической разнокачественности производителей уральской севрюги по времени нерестового хода и внутрипопуляционным группам

4. ГЕНЕТИЧЕСКАЯ ИЗМЕНЧИВОСТЬ ПОПУЛЯЦИИ СЕВРЮГИ Р.УРАЛ.

4.1. Характеристика генетической изменчивости севрюги по времени нерестовой миграции

4.2. Оценка генетической гетерогенности внутрипопуляционных биологических групп уральской севрюги

4.3. Генетическая изменчивость производителей севрюги по поколениям, возрастным группам и половой принадлежности

5. СРАВНИТЕЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ПРОИЗВОДИТЕЛЕЙ

БЕЛОСПИННОЙ И ЧЕРНОСПИННОЙ СЕВРЮГИ Р. УРАЛ 93 6. ГЕНЕТИЧЕСКАЯ ИЗМЕНЧИВОСТЬ ПРОИЗВОДИТЕЛЕЙ, ЕСТЕСТВЕННОЙ И ЗАВОДСКОЙ МОЛОДИ УРАЛЬСКОЙ

СЕВРЮГИ

Введение Диссертация по биологии, на тему "Эколого-морфологическая и генетическая изменчивость популяции севрюги р. Урал"

Осетровые, в частности севрюга Acipenser stellatus (Pallas), характеризуются высоким экологическим и фенотипическим разнообразием, которое необходимо сохранить в условиях усиления антропогенного пресса, и резкого сокращения численности естественных популяций осетровых рыб (Иванов, 2000). За последние 20 лет численность уральской севрюги сократилась с 81,0 тыс. ц в 1980 г. до 1, 7 тыс. ц в 2000 г. Севрюга - один из трех наиболее многочисленных промысловых видов осетровых в мире, заслуживает особого внимания как высокотехнологичный объект индустриальной и пастбищной аквакультуры (Мамонтов и др., 2002; Чебанов 2002).

В современных условиях значительную роль играет искусственное разведение осетровых для товарного производства рыбы и поддержания численности естественных популяций осетровых. Однако искусственное разведение и , тем более, вмешательство в природные экосистемы, оказывает отрицательное влияние на генофонд осетровых и их технологические характеристики при выращивании (Лукьяненко и др., 1988; Никоноров, Витвицкая, 1993; Алтухов, 1994; Рябова и др. 1996; Чебанов, 1996, 2002; Баранникова и др., 2000; Карнаухов, 2001;). Поэтому, на фоне резкого снижения численности осетровых, приоритетными задачами в современном осетроводстве являются формирование коллекционных и маточных стад осетровых, создание криобанка жизнеспособных половых продуктов и разработка методик доместикации, селекции и сохранения генетических ресурсов естественных и искусственных популяций (Цветкова и др., 1996; Мамонтов, 1998; Багров и др., 2000; Малютин, 2000; Ананьев и др., 2002). Решение поставленных задач невозможно без знаний о популяционной структуре и состоянии естественных популяций осетровых в период стабильно высокой численности.

К настоящему времени общепризнано, что для получения полноценного представления о популяциях должны быть использованы различные методические подходы при сборе и анализе материала, изучен комплекс признаков и дана оценка нативности изучаемой популяции (Мина, ф 1986; Животовский, 1987; Голубцов, 1988; Калнин, 1990; Чихачев, 1997; Алтухов и др., 1997).

Однако, исследования внутривидовой дифференциации севрюги с использованием биохимических маркеров проводились либо на популяциях рек с изменившимися из-за гидростроительства условиями естественного размножения и высокой долей рыб искусственного происхождения (до 80%), либо при проведении исследований не изучалась, и, следовательно, при анализе материала не учитывалась, связь параметров белкового полиморфизма с возрастом, полом и размером особей, темпом роста, принадлежностью к определенной генерации, фенотипу и т.д. (Камшилин, ф 1984; Лукьяненко и др. 1988; Ре ков, 1996, Чебанов, 1996, Воловик и др., 1997Q.

Популяция севрюги, нерестящейся в р. Урал, в период исследований являлась единственной, которая размножалась на исторически сложившихся нерестилищах и не повергалась массовому искусственному воспроизводству. Такие популяции могут служить моделью для определения исходных принципов и особенностей формирования искусственно поддерживаемых рыбоводством стад осетровых. Сведения о биологической и генетической разнокачественности уральской севрюги в период ее стабильной численности, полученные во время нерестовых миграций в реку с одновременным проведением ихтиологических, морфометрических и О генетико-биохимических исследований, могут представлять значительный интерес для усовершенствования режима промысла, сохранения генофонда осетровых, выработки принципов создания и эксплуатации коллекционных стад и промышленных маточных стад севрюги, а также генетического криобанка половых продуктов рыб.

Цели и задачи работы. Цель исследования заключается в оценке внутрипопуляционной разнокачественности нерестовых мигрантов севрюги р. Урал по комплексу биологических и генетических признаков.

В соответствии с поставленной целью предстояло решить следующие задачи:

- изучить экологические условия и динамику нерестового хода севрюги в р. Урал в период проведения исследований;

- охарактеризовать по биологическим признакам производителей севрюги по времени захода в реку на нерест и оценить разнокачественность внутрипопуляционных групп;

- изучить уровень белкового полиморфизма по времени нерестового хода у производителей севрюги и дать оценку генетической гетерогенности биологических групп;

- изучить половую, возрастную и генерационную изменчивость уральской севрюги по параметрам белкового полиморфизма;

- исследовать формы севрюги с разной пигментацией тела по комплексу морфометрических и генетических признаков.

Научная новизна. Впервые дана оценка биологической разнокачественности и генетической гетерогенности разных внутрипопуляционных групп популяции севрюги р. Урал, в период ее стабильного состояния, по комплексу морфометрических, биологических, генетических показателей. Выявлена генерационная, возрастная и половая генетическая гетерогенность нерестовых мигрантов севрюги. Охарактеризованы по морфометрическим и генетическим параметрам и динамике нерестового хода белоспинная и черноспинная формы уральской севрюги.

Практическая значимость.

Впервые проведена комплексная оценка генетической гетерогенности нативной популяции севрюги, предложены необходимые меры по совершенствованию режима промысла и по поддержанию биологического Q разнообразия севрюги в естественных условиях обитания.

- Разработаны усовершенствованные принципы отбора производителей при формировании коллекционных стад рыб, отбора проб спермы рыб для сохранения в криобанках, а также создания и эксплуатации промышленных маточных стад севрюги на осетровых рыбоводных заводах.

Создана компьютерная база данных, включающая 8 полиморфных локусов севрюги, которая может являться «точкой отсчета» при проведении дальнейших популяционно-генетических исследований и при организации генетического мониторинга популяций севрюги.

Апробация работы. Материалы диссертации были доложены на 0 межлабораторных коллоквиумах ВНИРО, Всесоюзном совещании «Осетровое хозяйство водоемов СССР» ноябрь 1989г., г. Астрахань, конференции молодых ученых МСХА (июнь 1996), совещании в Ростове на Дону в августе 1996г. «Состояние и перспективы научно-практических разработок в области марикультуры России», Ученом совете ВНИИР

Автор приносит особую благодарность к.б.н. Иванову А.П. (ВНИРО) за поддержку во всех начинаниях и руководство на первом этапе работы и к.б.н. Рябовой Г.Д. (ИОГен) за помощь, оказанную в обработке и анализе материала, дружескую поддержку и участие на протяжении многих лет совместной работы.

Автор благодарит за помощь в сборе Аминову И.М., Камелова А.К. и Ф всех сотрудников бывшей лаборатории ихтиологии Урало-Каспийского отделения ЦНИОРХ.

Заключение Диссертация по теме "Ихтиология", Шишанова, Елена Ивановна

ВЫВОДЫ

1. В период изучения популяции севрюги р. Урал, не смотря на усиливающееся антропогенное воздействие, наблюдали описанную ранее Песериди Н.Е. (1967), внутрипопуляционную дифференциацию производителей севрюги как по времени захода в реку на нерест, так и по биологическим показателям: возрасту, длине, массе, плодовитости, коэффициентам зрелости и упитанности. Поэтому популяция уральской севрюги может служить объектом для проведения популяционно-генетических исследований и организации мониторинга для оценки антропогенного влияния на генофонд севрюги.

2. Производители уральской севрюги в течение нерестовой миграции генетически неоднородны по всем использованным генетическим маркерам. Однако динамика частот аллелей и гетерозиготности в выборках мигрантов на протяжении нерестового хода не обнаруживает какой-либо закономерности и не связана с заходом в реку определенных биологических групп севрюги.

3. Обнаружены статистически достоверные генетические различия между исследованными внутрипопуляционными биологическими группами севрюги. Однако генетические различия между группами по исследованным локусам не повторяются из года в год, поэтому наши данные не свидетельствуют о репродуктивной обособленности выделенных на основании динамики нерестового хода и биологических показателей четырех условных внутрипопуляционных групп рыб, в том числе озимой и яровой части популяции уральской севрюги.

4. Обнаружена генетическая гетерогенность севрюги по локусам ЛДГ-3, ЛДГ-4, ФГМ-1 и ЭСТ-2 у разных возрастных групп в пределах одного поколения, между самками и самцами, между поколениями разных лет, а также мофометрическая и генетическая изменчивость белоспинных и черноспинных производителей по локусам ЛДГ-3 и ААТ-2.

5. Выявлена генетическая изменчивость производителей, естественной и заводской молоди по исследованным ферментам, которая может быть обусловлена разным направлением естественного отбора в раннем онтогенезе и неодинаковой скоростью созревания гомозигот и гетерозигот.

6. Для сохранения генетического разнообразия при разработке режима промысла севрюги и формировании коллекционных и промышленных маточных стад, а также создании криобанков спермы севрюги, необходимо учитывать полученные сведения о генетической изменчивости внутрипопуляционной, генерационной, возрастной, половой структуры и фенетических типов севрюги.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1). Для обеспечения полноценного естественного воспроизводства популяции при разработке режима промысла необходимо предусмотреть пропуск к местам нереста производителей ранней яровой севрюги в период пика численности мигрантов.

2). При искусственном воспроизводстве севрюги на осетровых рыбоводных заводах целесообразно использовать производителей ранней яровой и озимой севрюги. Во втором туре использования прудов следует иметь в виду селективное влияние неблагоприятных гидрохимических и термических условий на генофонд молоди и не выращивать молодь севрюги для выпуска в естественные водоемы.

3). При формировании коллекционных и эксплуатации промышленных маточных стад осетровых и криобанков спермы рыб необходимо:

- отбирать рыб с разной окраской тела для сохранения генетического разнообразия при создании коллекционных стад севрюги и при искусственном воспроизводстве для пастбищного выращивания в естественных водоемах; " при формировании и эксплуатации промышленных маточных стад севрюги и для ведения селекционно-племенной работы следует отдавать предпочтение производителем белоспинной севрюги, имеющим лучшие экстерьерные показатели, чем производители черноспинной севрюги; " обеспечивать естественное соотношение полов при искусственном воспроизводстве севрюги с целью сохранения генетического разнообразия при пастбищном выращивании в естественных водоемах.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Шишанова, Елена Ивановна, Москва

1. Алексеев Ф.Е., Алексеева Е.И. Титова Н.В. Полиморфная система мышечных эстераз, экологическая структура поселений и исследование структуры вида у макруруса // Биохимическая и популяционная генетика рыб.- Л.: Ин-т цитологии АН СССР. 1979.- С.58-63.

2. Андропов А.Е. К вопросу о биологической дифференциации волго-каспийской севрюги// Рацион, основы ведения осетр, хоз-ва: Тез. докл,-Волгоград. 1981 .-С. 13-14.

3. Ананьев В.И., Виноградов М.Е., Манохина М.С. Приоритетные задачи научно-технической программы «Генетический криобанк гидробионтов»// Рыбное хозяйство, серия «Воспроизводство и пастбищное выращивание гидробионтов», вып. 1, М., 2002. - С. 16-26.

4. Анохина Л.Е. Закономерности изменения плодовитости рыб . -М. Наука. 1969.-С. 1-295.

5. Аллендорф Ф.У., Риман Н. Генетическое управление искусственным воспроизводством рыбных стад// Популяционная генетика и управление рыбным хорзяйством.-М.: Агропромиздат, 1991.-С.177-198.

6. Алтухов Ю.П., Салменкова Е.О., Омельченко В.Т. Популяционная генетика лососевых рыб. М.: Наука, 1997.-288с.

7. Алтухов Ю.П. Генетические последствия селективного рыболовства.// Генетика. -1994.Т30. №1. С. 5-21.

8. Алтухов Ю.П. Гетерозиготность генома, скорость полового созревания и продолжительность жизни//Докл. РАН. 1996. Т 348, №6.- С.842-845.

9. Алтухов Ю.П., Варнавская Н.В. Адаптивная генетическая структура и ее связь с внутрипопуляционной дифференциацией по полу, возрасту, скорости роста у тихоокеанского лосося нерки. //Генетика. - 1983.-Т.19, №3. - С.769-807.

10. Багров A.M., Виноградов В.К., Илясов Ю.И. Осетровое хозяйство России» проблемы и перспективы// Сб. науч. трудов. / Актуальныевопросы пресноводной аквакультуры. ВНИИПРХ . - вып. 75, 2000, -С.42-47.У

11. Н.Баранникова И.А., Бердичевский JI.C. Основные пути развития осетроводства в условиях комплексного использования водных ресурсов// Биол. основы осетроводства. -М., 1981.-С.8-21.

12. Баранникова И.А. Изучение осетровых и проблемы осетрового хоз-ва в Советском Союзе// Вопр. ихтиол.-1987.Т.27, №5.-С.735-746.

13. Баранникова И.А., Никоноров С.И., Белоусов А.Н. Проблема сохраенения осетровых России в современный период. /Междунар. Конф. : Осетровые на рубеже XXI века. -Астрахань ,2000. С. 7-8.

14. Бачевская Л.Т. Межпопуляционные различия и внутрипопуляционнаядифференциация кеты севера Охотского моря: Дисс.канд.биол. наук.1. Магадан, 1990,145 с.

15. Берг Л.С. Яровые и озимые расы у проходных рыб. // Изв. АН СССР, 1934. №5.-С. 711-732.

16. Берг Л.С. Яровые и озимые расы у проходных осетровых. // Очерки по общим вопросам ихтиологии. М.; 1953. - С. 242-260.

17. Бердичевский Л.С. Регулирование промысла осетровых и его биологические основы // Осетровое хоз-во в водоемах СССР.- М., 1983.-С.19-28.

18. Борзенко М.П. Каспийская севрюга . //Изв. Азерб. Н.-и. Рыбохоз. Станции. Баку. 1942. -114 с.

19. Васильев А.В. Сохраним осетровых рыб Каспийского моря// Мир. океанам .-1994.-Ж7-8.-С.116-118.

20. Варнавская Н.В. Адаптивная генетическая структура и ее связь с внутрипопуляционной дифференциацией по полу, возрасту, и скорости роста у тихоокеанского лосося- нерки: Автореф. Дис. . канд. биол. наук. -М, 1984.-21 с.

21. Вещев П.В. Анализ структуры производителей севрюги на нерестилищах нижнего течения Волги// Формир. запасов осетровых в условиях комплексн. использ. водн. Ресурсов: Тез. докл. к предстоящ. Всес. совещ. в окт. 1986 г.-Астрахань, 1986.-С.53-55.

22. Вещев П.В. Анализ состояния естественного воспроизводства севрюги в условиях измененного стока Волги// Первый Конгресс ихтиологов России. Астрахань, сент. 1997: Тез. докл.-М.: ВНИРО, 1997.-С.410-411.

23. Гербильский Н.Л. Пути развития внутривидовой биологической дифференциации, типы анадромных миграций и вопрос о миграционном импульсе осетровых// Ученые записки.-Л.: Изд-во ЛГУ, 1967.-Т.15.-С.5-21.

24. Гербильский Н.Л. Изучение функциональных основ внутривидовой эволюции в связи с проблемой численности и ареала в рыбном хозяйстве// Осетровые и проблемы осетрового хоз-ва.-М., 1972.-С. 10-26.

25. Голубцов А.С. Внутрипопуляционная изменчивость животных и белковый полиморфизм. -М.: Наука, 1988.-168с.

26. Державин А.Н. Севрюга: (Биол. Очерк).// Изв. Бакинск. Ихтиол. Лаб., Баку. 1922. -293 с.

27. Державин А.Н. Воспроизводство запасов осетровых рыб. -Баку ,1947, -243 с.

28. Довгопол Г.Ф., Озерянская Т.В. Влияние промысла на качественную структуру нерестового стада севрюги// Первый Конгресс ихтиологов России, Астрахань, сент. 1997: Тез. докл.-М.: ВНИРО, 1997.-С.416.

29. Душенко В.В. Популяционно-генетические исследования тупорылого макруруса Северной Атлантики //Тез.докл.Всесоюзн. конф. по теории формирования численности и рационального использования стад промысловых рыб. -М., 1982.- С.125-125.

30. Животовский Л. А. Показатель сходства популяций по полиморфным признакам // Журн. Общ. Биол. 1979. Т 40, № 4.- С. 587-602.

31. Животовский Л.А. Статистические методы анализа частот генов в природных популяциях // Итоги науки и техники. Общая генетика. -М., 1983, т. 8, -С.-78-79.

32. Животовский Л.А. Проблемы анализа комплекса признаков.// Сб. науч. трудов. «Экологическая генетика и эволюция».- Кишинев: «Штиинца», 1987.-С. 134-177.

33. Захаров С.С., Песериди Н.Е. Основные закономерности миграции осетровых р. Урал в зависимости от гидрологических условий реки. /Рациональные основы ведения осетрового хозяйства: (тез. Докл. н.-практ. Конф.).-Волгоград, 1981.- С. 85-87.

34. Зачетнова Т.И. К изучению бентоса низовьев р. Урал. /Тезисы отчетной сессии ЦНИОРХ.- Астрахань, 1972. -С. 62-64.

35. Иванов В.П. Критическое состояние каспийских осетровых и пути их сохранения. /Междунар. Конф.: Осетровые на рубеже XXI века.-Астрахань. 2000.- С. 6-7.

36. Казанский Б.Н., Подушка С.Б., Буренин O.K. О значении мигрантов озимого типа для осетрового хозяйства // Биологические основы осетроводства.- М.: Наука, 1983.- С.- 42- 54.

37. Калнин В.В. Изучение связей компонент изменчивости количественных признаков с гетерозиготностью аллозимных локусов. Автореф. дисс. . канд. биол. наук. Москва, 1989.- 22 с.

38. Калнина О.В. Аллозимный полиморфизм и репродуктивные взаимоотношения азовской и черноморской рас европейского анчоуса (Engraulus engrasicholus L.). Автореф. дисс. . канд. биол. наук. -Москва, 1989.-24 с.

39. Карнаухов Г.И. Сохранение биоразнообразия азовской севрюги в современных экологических условиях: Матер, междун. Науч.-практ. конф. «Проблемы и перспективы развития аквакультуры России». -Краснодар: «Здравствуйте», 2001 .-С.-44-45.

40. Кашенцева Л.Н. Пастбища севрюги в Каспийском море .// Биол. ресурсы и пробл. разв. аквакульт. на водоемах Урала и зап. Сибири: Тез. докл. Всерос. конф., Тюмень, 17-18 сент. 1996,-Тюмень, 1996.-С.59-61.

41. Криксунов Е.А., Малина К.М. Влияние водности р. Урал на эффективность воспроизводства севрюги// Вопр. ихтиол.-1994.-Т.34, №5.-С.662-665.

42. Крылова В.Д. Морфологические исследования осетровых рыб// Первый Конгресс ихтиологов России, Астрахань, сент. 1997: Тез. докл.-М.: ВНИРО, 1997.-С.284.

43. Крылова В.Д., Соколова Л.И. Морфологические исследования осетровых рыб и их гибридов// Мет. реком.-М.: ВНИРО, 1981.-49с.

44. Кутергина И.Г. Рябова Г.Д. Генетический анализ наследования дуплицированных локусов лактатдегидрогеназы Ldh-3 b Ldh-4 у севрюги //Генетика. -1990. Т. 26. №5. -С.952-954.

45. Лебедев Н.В. Элементарные популяции рыб / Пищ. Пром.: М., 1967. 212 с.

46. Ли Ч. Введение в популяционную генетику. М.: Мир, 1978. - 555 с.

47. Лукьяненко В.И. Внутривидовая дифференциация осетровых и ее значение для рационального ведения осетрового хозяйства /Тез. отчетной сессии ЦНИОРХ. Астрахань, 1973. С.53-56.

48. Лукьяненко В.И. Родовая структура и видовой состав отдельных родов семейства осетровых// Формир. запасов осетровых в условиях комплексн. использ. водн. Ресурсов: Тез. докл. к предстоящ. Всес. совещ в окт. 1986 г.-Астрахань, 1986.-С.198-200.

49. Лукьяненко В.И., Каратаева Б.Б., Камшилин И.Н. Сезонные расы Волго-Каспийских рыб. -Андропов. 1988.-192с.

50. Майр Э. Принципы зоологической систематики. М.: Мир. 1971,454 с.

51. Малюченко О.П., Гордон Н.Ю. Некоторые генетические характеристики сибирского осетра заводского воспроизводства, полученные методом аллозимного анализа /Междунар. Конф.: Осетровые на рубеже XXI века.-Астрахань. 2000.- С. 171-172.

52. Мамонтов Ю.П. Аквакультура России: состояние, приоритеты и перспективы развития.//-С.-Пб.:ГосНИОРХ, 1998.-77с.

53. Мамонтов Ю.П., Герецкий Н.Е., Золотова З.К. Осетровые рыбы в аквакультуре России// Рыбн. хоз-во. Сер. Пресноводная аквакультура: Аналит. и реферат, информ. ВНИЭРХ.-2002.-Вып. 4.-С.1-27.

54. Мина М.В. Микроэволюция рыб. М. Наука, 1986, - 207 с.

55. Никоноров С.И., Витвицкая Л.В. Эколого-генетические проблемы искусственного воспроизводства осетровых и лососевых рыб.-М.: Наука, 1993.-254С.

56. Никоноров С.И., Рябова Г.Д., Кутергина И.Г., Офицеров М.В. Электрофоретический анализ изменчивости севрюги// ДАН, т.234, №1, -С.209-211.

57. Нил Дж., Шелл У. Наследственность человека.- М.: Изд-во Иностр. Лит., 1958. -388 с.

58. Переварюха Ю.Н. Изменения процентного соотношения и распределение отдельных популяций севрюги в море с 1982 по 1992 гг.// Первый Конгресс ихтиологов России, Астрахань, сент. 1997: Тез. докл.-М.: ВНИРО, 1997.-С.447-448.

59. Персов Г. М. Семенники севрюги в период нерестной миграции, нереста и поката/Тр. Лабор. Основ рыбоводства. 1947, т.1. С. 177-185.

60. Песериди Н.Е. К методике изготовления и просветления спилов лучей осетровых рыб //В кн.: Рыбн. ресурсы водоемов Казахстана и их использование.- Алма- Ата, 1966, вып. 5,- С.10-31.

61. Песериди Н.Е. Ступенчатый запрет и его роль в воспроизводстве осетровых р.Урал // В кн.: Биол. Основы рыбного хоз-ва республ. Ср. Азии и Казахстана : (Тез. докл. конф.). -Балхаш, 1967, -С. 212-214.

62. Песериди Н.Е. Нерестовые популяции осетра и севрюги р. Урал и мероприятия по их воспроизводству // Автореф. дис. . канд. биол. наук. 03.00.10 -ихтиология-Гурьев, 1967.-24с.

63. Песериди Н.Е. Сезонная динамика хода осетровых в низовьях р.Урал // В кн. : Осетровых СССР и их воспроизводство: (Тр. ЦНИОРХ, т. 3).- М., 1971.- С.355-358.

64. Песериди Н.Е. Рыбы Казахстана. Алма-Ата, 1986., Т.1., -С. 112 342.

65. Песериди Н.Е. К вопросу диагностики внутрипопуляционных группировок проходных осетровых // В кн.: Тез. отчета, сессии ЦНИОРХ.-Астрахань, 1973,- С. 86-88.

66. Песериди Н.Е. О внутривидовой и внутрипопуляционной неоднородности осетровых // В кн.: Тез отчетн. сессии ЦНИОРХ по результ. работ в IX пятилетке,- Гурьев, 1976,- С.33-35.

67. Песериди Н.Е., Верина И.Л. О приемной мощности нерестилищ осетровых р.Урал // В кн.: Рацион. Основы ведения осетр, хоз-ва: (Тез. докл. конф.).- Волгоград, 1981,- С.113-115.

68. Песериди Н.Е., Захаров С.С., Исламгазиева В.Б., Шестых А.И., Жданов А.П. Характеристика режима рыболовства на р. Урал и пути его дальнейшего совершенствования // В кн.: Рацион. Основы ведения осетрового хоз-ва. -Волгоград; 1981, -С.113-115.

69. Песериди Н.Е., Исламгазиева Р.Б., Бекешев А.Б., Шестых А.И., Войнова И.А., Едаменко В.Н., Есжанов С.Е., Тарабрин А.Г. Оценка эффективности нового режима рыболовства в низовьях р.Урал // В кн.: Тез отчета, сессии ЦНИОРХ.- Астрахань, 1972,- С. 131-133.

70. Песериди Н.Е., Шубина Т.Н., Сливка А.П. Сравнительная характеристика возрастного состава волжской и уральской севрюги // В кн.: Тез. докл. отчета, сессии ЦНИОРХ.- Астрахань, 1972,- С.130-131.

71. Песериди Н.Е. Верина И.Л. О приемной мощности нерестилищ осетровых р. Урал. / Рацион, основы ведения осетрового хозяйства: (тез докл. конф.) -Волгоград, 1981. С. 113-115.

72. Плохинский Н.А. Биометрия// Изд-во МГУ. 1970.- 367 с.

73. Подушка С.Б. Проблемы сохранения генофонда осетровых в водоемах СССР// Вестник ЛГУ.-1986.-№4.-С. 15-22.

74. Петров В.В. Весенняя путина 1926 г. в низовьях р. Урала (Предварительный отчет) / Изв. Отд. Прикл. Ихтиол., 1926, т. IV, вып.2,-С.179-218

75. Поляков Г.Д. Некоторые закономерности популяционной изменчивости рыб. Автореф. дисс.доктора биол. наук. М., 1970. 40 с.

76. Правдин И.Ф. Руководство по изучению рыб.- М.: Пищепромиздат., 1966.- 376 с.

77. Реков Ю.И. Формирование запаса азовских осетровых рыб и его промысловое использование в современных условиях// Осн. пробл. рыбн. хоз-ва и охраны рыбохоз. водоемов Азов, бассейна.- Ростов-на-дону: АзНИИРХ., 1996.-С.178-180.

78. Риман Н.М., Аттер Ф.М. Популяционная генетика и управление рыбным хозяйством М.: Агропромиздат, 1991,- С. 177-198.

79. Рокицкий П.Ф. Введение в статистическую генетику.- Минск, Высшая школа. 1974.-448 с.

80. Рябова Г.Д. Кутергина И.Г. Анализ аллозимной изменчивости севрюги Северного Каспия // Генетика. -1990. Т. 26. №5. -С. 902-911.

81. Рябова Г.Д., Офицеров М.В., Шишанова Е.И. Исследования связи между аллозимной изменчивостью и некоторыми компонентами приспособленности у севрюги (Ac. Stellatus.)//Генетика.- 1995.-Т.31,№12.-С.1679-1692.

82. Северцов Н.А. Жизнь красной рыбы в уральских водах //Журн. мин. гос. имущества, 1863, т.83, вып 2. 92 с.

83. Серов Д.В. Механизмы и факторы генетического отбора по локусам лактатдегидрогеназы у севрюги : Автореф. На соискание . К.б.н.-М. ИЭМЭЖ, 24 с.

84. Седов С.И., Лукьяненко В.И. О половом диморфизме белкового состава крови русского осетра // Ж. эвол. Биохимии и физиологии,- 1969.- №1.- С.-72-73.

85. Седов С.И. Адрианова С.Б. Проблема стабильности популяционной структуры рыб в изменяющихся условиях современного Каспия //Биохимическая и популяционная генетика рыб.- Л., 1979.- С. 106-111.

86. Стыгар В.М. О начале активного питания личинок осетровых р. Урала /Рацион. Основы ведения осетрового хоз-ва. Волгоград, 1981. С. 221-222.

87. Тихий М.И. Использование и экология рыб в р. Урала в связи с проектом регулирования реки // Тр. Каз. Фил. АН СССР, «Большая Эмба». 1938, T.II, вып. 2. С. 259-366.

88. Трусов В.З. Некоторые особенности созревания и шкала зрелости половых желез осетра / Сб. №3 «Осетровые южных морей СССР» Тр. ВНИРО. 1964, т.56. С.- 18-67.

89. Ходоревская Р.П. Оценка запасов осетровых в Каспийском море// Рыбн. хоз-во.-1997. №5.-С.39.

90. Чебанов М.С. Формирование генетической коллекции осетровых рыб в южном филиале ФГУП ФСГЦР// Генетика, селекция и воспроизводство рыб. Доклады Первой Всероссийской конференции. Санкт-Петербург: ФГУП ФСГЦР, 2002.- С. 73-80.

91. Чебанов М.С., Савельева Э.А., Колос А.А. Оценка репродуктивного качества осетровых заводского происхождения// Ресурсосберегающиетехнологии в аквакульт.: Тез.докл. Межд. симпоз. (Адлер, окт., 21-24, 1996).-Краснодар, 1996.-С.105.

92. Чибилев А. А. Эколого-географические особенности нерестилищ осетровых в среднем течении р. Урал// Первый Конгресс ихтиологов России, Астрахань, сент. 1997: Тез. докл.-М.: ВНИРО, 1997.-С.94-95.

93. Чихачев А.С. Многолетний мониторинг генетической структуры азовских популяций осетровых рыб// Первый Конгресс ихтиологов России, Астрахань, сент. 1997: Тез. докл. М.: ВНИРО, 1997.- С.368-369.

94. Чугунова Н.И. Руководство по изучению возраста и роста рыб.- М.: Изд-во АН СССР, 1959, 136 с.

95. Чугунов H.JL, Чугунова Н.И. Сравнительная промысловая биологическая характеристика осетровых Азовского моря //Осетровые южных морей Советского Союза. М., 1964, С.25-56.

96. Шишанова Е.И. Некоторые аспекты биологии нерестовой популяции севрюги р. Урал : Сборник тр. ВНИРО «Воспроизводство запасов осетровых рыб в Каспийском и Азово-Черноморском бассейнах».-Москва, 1987.-С162-171.

97. Шишанова Е.И. Морфогенетическая характеристика белоспинной и черноспинной севрюги// Тезисы докладов к Всесоюзному совещанию ноябрь 1989 г. «Осетровое хозяйство водоемов СССР».-Астрахань, 1989.часть 1.-С.347-348.

98. Шишанова Е.И., Рябова Т.Д. Никоноров С.И. Предварительный анализ генетической гетерогенности севрюги р. Урал : Сборник тр. ВНИРО «Воспроизводство запасов осетровых рыб в Каспийском и Азово-Черноморском бассейнах». Москва, 1987, С.-171-176.

99. Шишанова Е.И. Рябова Г.Д. Популяционно-генетическая характеристика уральской севрюги: Тез. докл. к Всес. совещ. «Осетровое хозяйство водоемов СССР» ноябрь 1989г. Часть 1- Астрахань, 1989.- С,-349-350.

100. Шубина Т.Н. Анализ возрастной структуры нерестовой популяции волжской севрюги // Осетровые СССР и их воспроизвосдтво. М., 1967. Вып. 1., С. 121-176.

101. Allendorf F.W., Phelps S.R. Loss of genetic variation in hatchery stock of cutthroat trout// Trans. Amer. Fish. Soc., 1980, V.109.- P. 537-543.

102. Allendorf F.W., Leary R.F. Heterozygosity and fitness in natural population of animals //Conservation Biology: The Science of Scarscity and diversity / Ed Soule' M.E. Sanderland: Sinauer, M.A., 1986.- P.57-76.

103. Peacock A.C., Bunting S.L., Queen K.G. Serum protein electrophoresis in acrylamide gel // Sciens.-1965.-V. 147,- P.1451-1543.

104. Garsia-Marin J. L., Jorde P.E., Ryman N. Management implications of genetic differentiation between native and hatchery populates of drown trout (Salmo trutta) in Spain //Fquacult. 1991. V. 95.- P. 235-249.

105. Ckaala O., Dahle G., Jorstad K.E., Naevdal G. Interaction between natural and formed fish populations: information from genetic markers// J/Fish/Biol/ 1990 V. 36 №3,- P. 449-460.

106. Crandell P.A., Gall G.A.E., Body weight analysis for individually tagget rainbow trout: males, females and precocious males // Aquaculure. 1992. V. 100.- 99 p.

107. Show C., Prasad R. Starch gel electrophoresis of enzymes A compilation of recipes // Biochem/ Genet. 1970. V. 4.- P.297.

108. Danzmann R.DG., Ferguson M.M., Allendorf F.M. Heterozygosity and components of fitness in strain of rainbow trout //J.fish. biol. 1987. 35A. -P. 313-319.

109. Nei M. Molecular population genetic and evolution.- Amsterdam, 1975., -278 p.

110. Nass C.A. The % test for small expectations in contingency tables with small special reference to accidents and absentees / "Biometrika", 1959, V.46, № 3-4, P. 365-385.

111. Ryman N., Allendorf F. W., Stahl G. Reproductive isolation with little genetic divergence in sympatric populations of brown trout (Salmo trutta) // Genetics, 1979, 92.- P. 247-262.

112. Mitton J.B., Pierce B.A. The distribution of individual heterozygosity in natiral populations // Genetic. 1980. Vol. 95/№4,- P. 1043-1054.

113. Mitton J.B., Levis W.M. Jr. Relationship between genetic variability and life-history feature of bony fises // Evolution. 1989. Vol. 43. №8.- P.1712-1723.

114. Mitton J.B., Grant M.C. Associations among protein heterozygosity, grows rate, and developmental homeostasis //Ann.Rev. Ecol. Syst. 1984. Vol. 15.- P. 479-499.О