Экологическая пластичность структуры ренальной ткани пресноводных и морских костистых рыб

Назарова, Екатерина Александровна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Экологическая пластичность структуры ренальной ткани пресноводных и морских костистых рыб
ВАК РФ 03.00.16, Экология

Автореферат диссертации по теме "Экологическая пластичность структуры ренальной ткани пресноводных и морских костистых рыб"

□03484474

На правах рукописи

Назарова Екатерина Александровна

ЭКОЛОГИЧЕСКАЯ ПЛАСТИЧНОСТЬ СТРУКТУРЫ РЕНАЛЫЮЙ ТКАНИ ПРЕСНОВОДНЫХ И МОРСКИХ КОСТИСТЫХ РЫБ

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Специальность 03.00.16 - экология

2 6 НОЯ 2009

Борок-2009

003484474

Работа выполнена в Учреждении Российской академии наук Институте биологии внутренних вод им. И. Д. Паланина РАН

Научный руководитель: кандидат биологических наук, ведущий научный сотрудник

Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор, член-корреспондент РАН

доктор биологических наук, главный научный сотрудник

Заботкина Елена Анатольевна

Моисеенко Татьяна Ивановна

Кориева Жанетта Вячеславовна

Ведущая организация: Учреждение Российской академии наук Институт проблем промышленной экологии Севера Кольского научного центра РАН, г. Апатиты

Защита состоится 17 декабря 2009 г в Ю^а заседании диссертационного совета ДМ 002.036.01 при Учреждении Российской академии наук Институте биологии внутренних вод им. И. Д. Папанина РАН по адресу: 152742 Ярославская обл., Некоузский район, п. Борок, ИБВВ РАН; тел./факс: (48547) 24-0-42. С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Учреждения Российской академии наук Института биологии внутренних вод им. И. Д. Папанина РАН.

Автореферат разослан « £2009

Ученый секретарь диссертационного совета, кандидат биологических наук л Л. Г. Корнева

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы

Выяснение механизмов адаптаций рыб к различным биотическим и абиотическим факторам, определение нормы и патологии в условиях антропогенного загрязнения является важным аспектом решения одной из проблем экологии -взаимодействия организма и среды. Согласно концепции биомаркеров, признанной в 1990-е гг. прошлого века, наиболее удачными являются биохимические, физиологические и гистологические показатели (Лукин, Шарова, 2005). Почки рыб, наряду с печенью и жабрами являются важнейшими маркерами загрязнения, так как они незаменимы в процессе поддержания стабильной внутренней среды организма, включающей водно-солевой баланс, выведение продуктов обмена веществ и ксенобиотиков, формирование неспецифического и специфического иммунитета, синтез ряда гормонов (Наточин, 1976; Баранникова и др., 2000; Кондратьева и др., 2001; Микряков и др., 2001). Наиболее полно изучена структура почек у рыб разных экологических групп, как в норме, так и при воздействии антропогенных факторов на уровне световой микроскопии (Brown, 1957; Smith et al., 1970; Наточин, 1976; Турдаков, 1977; Boomker, 1979; Аминева, Яржомбек, 1984; Галактионов, 1995). Однако многие вопросы, касающиеся тонких внутриклеточных перестроек в паренхиме про- и мезонефроса у рыб в зависимости от различных факторов среды обитания, отрывочны и не систематизированы. Результаты таких исследований могут иметь теоретическое значение для выяснения адаптивных изменений как к естественным факторам среды, так и к действию токсикантов различной природы, в том числе тяжелых металлов, одним из которых является кадмий. Решением Европейского сообщества он внесен в «черный список» загрязняющих веществ, представляющих наибольшую опасность для гидробионтов (Колпакова и др., 1996). Показано, что уровень аккумуляции кадмия в почках рыб по сравнению с другими органами наибольший (Szebedinszky et al., 2001; Chowdhury et al., 2004; Кашулин, Гладышева, 2005; Franklin et al., 2005; Борисов, 2006; Моисеенко и др., 2006; Чернова и др., 2006), но большинство работ направлено на изучение его действия у важных в рыбоводстве лососевых и карповых рыб (Hasser ei al., 1986; De Smet, Biust, 2001; Hansen et al., 2002; Drastichova et al., 2003; Chowdhury et al., 2004), а сведения по исследованию свободноживущих видов представлены скудно. При этом имеющиеся в литературе данные по влиянию ионов кадмия на морфофункциональные характеристики почек достаточно противоречивы, а изменения тонкой структуры клеток почек практически не изучены (Dallinger et al., 1997; De Conto Cinier et al., 1997; Drastichova et al., 2003; Franklin et al., 2005; Panchanathan, Vattapparumbil, 2006). Исследование поставленных вопросов во многом поможет расширить знания об устойчивости различных видов костистых рыб как необходимого компонента водных экосистем к изменению физико-химических свойств природных вод (в том числе при антропогенном загрязнении их тяжелыми металлами).

Цель работы - выявить экологическую пластичность структуры почек костистых рыб на тканевом, клеточном и субклеточном уровнях в зависимости от факторов среды и физиологических особенностей видов.

Задачи исследования: 1. Исследовать структуру ренальной ткани про- и мезонефроса и выявить ее особенности у пресноводных и морских видов, принадлежащих к отрядам Cypriniformes и Perciformes.

2. Установить зависимость соотношения различных форм лейкоцитов в почках рыб от эколого - физиологических особенностей видов.

3. Исследовать ультраструктуру клеток паренхимы почек рыб и определить степень ее зависимости от условий обитания видов в воде с различной соленостью.

4. Изучить действие ионов кадмия в сублетальных концентрациях на структуру почечной ткани и ультраструктуру ее клеток у карпа, гольца и окуня.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Исследованные пресноводные и морские рыбы имеют одинаковую структурную организацию ренальной ткани, но различаются по морфологии и соотношению некоторых клеточных элементов, что отражает адаптацию организма к различной солености и кислородному режиму среды обитания.

2. При действии кадмия прослеживается не зависящая от его концентрации, срока экспозиции, вида и возраста рыб единая последовательность проявления патоморфологических изменений в тканях почек рыб на клеточном и субклеточном уровнях, что отражает неспецифическую реакцию организма на воздействие токсиканта.

Научная новизна

Для 12 видов рыб отр. Cypriniformes и Perciformes, обитающих в пресных и соленых водах, получены новые данные о количественном соотношении различных форм лейкоцитов в почках. Обнаружена корреляционная связь этого показателя с чувствительностью рыб к дефициту кислорода в воде. Впервые изучена ультраструктура лейкоцитов у Barbatulo barbatulo (L.), Cobitis taenia L., Stizostedion volgense (Gmelin), Trachurus mediterraneus (Staindachner) и Diplodus annularis (L.). Выявлены клетки с радиально расположенными везикулами в почках Carassius auratus (L.), Abramis ballerus (L.), Barbatulo barbatulo (L.), Cobitis taenia L., Diplodus annularis (L.). Палочковые клетки - в почках Cobitis taenia L., Stizostedion lucioperca (L.), Stizostedion volgense (Gmelin) и Diplodus annularis (L.), Бокаловидные клетки - проксимальном отделе канальцев Stizostedion volgense (Gmelin). В паренхиме про- и мезонефроса исследованных видов впервые описаны клетки, структура которых подобна ионтранспортирующим клеткам жаберного эпителия рыб.

Впервые установлены отличия в количестве и размерах ряда клеточных органелл у эпителиоцитов морских и пресноводных рыб. Выявлено 2 типа эпителиоцитов проксимального отдела канальцев у всех исследуемых видов, различающихся по линейным размерам и качественным характеристикам. Описана ультраструктура клеток промежуточного отдела канальцев нефрона в мезонефросе синца и судака. Обнаружено наличие микроресничек в щеточной каемке эпителиоцитов проксимального отдела канальцев.

Установлена степень развития некробиоза в интерстициальной ткани мезонефроса карпа, гольца и окуня под действием ионов кадмия, проявившаяся в уменьшении площади, занимаемой интерстициальной тканью. У гольца выявлены изменения в количественном соотношении различных форм лейкоцитов в пронефросе, а также в ультраструктуре клеток лимфомиелоидной и нефрогенной тканей мезонефроса.

Теоретическая и практическая значимость

У костистых рыб выявлена взаимосвязь ультраструктурной организации почек с выполняемыми ими функциями, которая отражает адаптационные возможности рыб к дефициту кислорода и к обитанию в пресных и соленых водах. Полученные данные являются существенным вкладом в общие сведения об экологии этой группы рыб.

Результаты исследований, посвященные действию ионов кадмия на рыб, расширяют знания о неспецифическом ответе клеток и тканей почек и могут использоваться при оценке экологического состояния водных объектов к действию хронического комплексного загрязнения водоемов. Материалы диссертационной работы могут быть использованы при чтении курсов лекций «Сравнительная цитология и гистология» и «Водная токсикология».

Апробация работы

Основные результаты работы были представлены на Всероссийской и международной научно-практических конференциях «Проблемы иммунологии, патологии и охраны здоровья рыб 1,2» (Борок, 2004,2007); XII-XIII Международной конференции студентов, аспирантов и молодых ученых «Ломоносов 2005, 2006» (Москва, 2005, 2006); XXI Российской конференции по электронной микроскопии (Черноголовка, 2006); IX съезде гидробиологического общества РАН (Тольятти, 2006); Всероссийской научно-практической конференции «Экологические проблемы уникальных природных и антропогенных ландшафтов» (Ярославль, 2006, 2007); Международной конференции «Биоиндикация в мониторинге пресноводных экосистем» (Санкт-Петербург, 2006); XII Европейском ихтиологическом конгрессе (Хорватия, Дубровник, 2007); XIII Международной молодежной школе -конференции «Биология внутренних вод» (Борок, 2007).

Публикации

По материалам диссертации опубликовано 15 статей, 3 из них в журналах, входящих в перечень ВАК РФ, и 6 тезисов конференций.

Структура и объем работы

Диссертация изложена на 191 странице машинописного текста, состоит из введения, 4 глав, заключения, выводов, списка литературы, включающего 303 наименования, в том числе 126 на иностранном языке, и содержит 37 таблиц и 27 рисунков, 21 из которых - в приложении (124 микрофотографии).

Благодарность

Автор выражает глубокую благодарность к.б.н. Е.А. Заботкиной за помощь в выборе направления исследований, руководство работой на основных этапах ее выполнения; д.б.н. Г.М. Чуйко, д.б.н., проф. H.H. Тятенковой, к.б.н. Д.Ф. Павлову, к.б.н. Т.Б. Лапировой, к.б.н. В.И. Мартемьянову, к.б.н. H.H. Ружинской за ценные советы и замечания при обсуждении результатов работы; лично к.б.н. Ю.В. Герасимову, д.б.н. A.B. Крылову, д.б.н. И.И. Рудневой и сотрудникам их лабораторий за помощь в отборе материала для исследований; В.В. Павловой и сотрудникам ЦКП электронной микроскопии за помощь в обработке материала,

ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ Глава 1. Обзор литературы

В главе представлены сведения об особенностях анатомии, морфологии и функционирования про- и мезонефроса круглоротых и рыб, а также даны структурно-функциональные характеристики клеток ренальной ткани данных органов у некоторых видов костистых рыб. Обсуждается проблема классификации лейкоцитов и особенности лейкоцитарной формулы рыб. Представлены данные по антропогенной эмиссии кадмия, накоплению и действию этого металла на организм рыб.

Глава 2. Материалы и методы исследований

Объектом исследования из природных водоемов послужили особи 7 видов карпообразных: серебряный карась Carassius auratus (L.), лещ Abramis brama (L.), линь Tinca tinca (L.), плотва Rutilas rutilas (L.), синец Abramis ballerus (L.), усатый

голец Barbatulo barbatulo (L.), обыкновенная щиповка Cobitis taenia L. и 5 видов окунеобразных рыб: берш Stizostedion volgense (Gmelin), обыкновенный судак Stizostedion lucioperca (L.), речной окунь Perca fluviatilis L., средиземноморская ставрида Trachurus mediterraneus (Staindachner) и морской карась Diplodus annularis (L.). Рыб отлавливали ловушками, тралом, неводом и сачком в летне-осенний период 2005-2006 гг. в Рыбинском водохранилище, реках Ильд и Сутка и бухте Карантинная Черного моря. Размерно-весовые характеристики изученных рыб приведены в таблице 1.

Таблица 1

Объем обработанного материала методом световой и электронной

микроскопии в полевых исследованиях __

Вид (возраст рыбы) Длина, см Масса, г N Вид (возраст рыбы) Длина, см Вес, г N

Отр. Карпообразные (Cypriniformes) Отр Окунеобразные (Perciformes)

Лещ (7+-8+) 31.3±0.5 695,7±28,1 10 Окунь (4+) 13.1±0.3 33,7±1,6 6

Синец (6+-8+) 27.1±0.6 322,7± 14,2 16 Судак (5+-7+) 43,3±1,4 1222±166 24

Плотва (7+) 16.8±1.0 101,6±19,5 14 Берш (4-К5+) 32,6±1,9 470,5±44,7 16

Серебряный карась (5+) 20.5±1.9 348,8±44,0 10 Ставрида (3+) 10.1±0.2 14,6±0,8 7

Линь (4+) 15.5±0.7 90,5±9,6 8 Морской карась (3+) 5,6±0.2 5,9±Ю,5 6

Голец (3+) 8,5±0,2 5,8±0,3 10 Примечание: здесь и далее данные представлены в виде средних значений и их ошибок (х±8Е); для анализа у всех особей были взяты пробы головной и туловищной почек.

Щиповка 8,1 ±0.2 3,7±0,4 16

Экспериментальную часть работы проводили на обыкновенном карпе (Cyprinus carpió L.), усатом гольце (Barbatulo barbatulo) и речном окуне (Perca fluviatilis). Карпы и окуни были получены на базе «Сунога» ИБВВ им. И. Д. Папанина РАН в 1996 и 2006 гг. соответственно. Гольцы выловлены летом 2006 г. в р. Ильд. В качестве токсического агента использовали CdCl2. Токсичность кадмия для каждого вида рыб устанавливали в предварительных лабораторных экспериментах. Концентрацию токсиканта поддерживали на постоянном уровне сменой воды раз в 2 дня. Рыб ежедневно кормили искусственным кормом. Условия постановки экспериментов, размерно-весовые характеристики изученных рыб и виды анализа приведены в таблице 2.

Анализ соотношения лейкоцитов проводили на мазках - отпечатках головной и туловищной почек, которые приготавливали по стандартной методике, окрашивали по Романовскому-Гимза (Волкова, Елецкий, 1971). Под световым микроскопом БИОЛАМ-И подсчитывали 200 лейкоцитов, при идентификации которых придерживались классификации Н.Т. Ивановой (1983). Для выяснения количественного отклонения в гематологических параметрах использовали индекс сдвига лейкоцитов (ИСЛ): ИСЛ=(£ гранулоцитов)/ф агранулоцитов) (Житенева и др., 2004).

Полутонкие срезы готовили на микротоме УМТП-3, окрашивали метиленовым синим по стандартной методике (Миронов и др., 1994). На микроскопе Olympus СХ31 (видеоадаптер JVC) с препаратов получали цифровые фотографии, которые обрабатывали в программе Image Tool 3.0. Измеряли наружный диаметр и площадь боуменовых капсул, канальцев и кровеносных капилляров. Площадь интерстициальной ткани рассчитывали как разность между общей площадью среза и суммой площадей боуменовых капсул, канальцев и кровеносных капилляров.

Таблица 2

Условия постановки экспериментов, размерно-массовые характеристики

изученных рыб и виды анализа

Вид рыбы Условия экспериментов Обыкновенный карп (1+) Усатый голец (3+) Речной окунь (0+)

1) Длина (х±8Е), см 2) Масса (х^БЕ), г 1) 17,2±0,9 2) 108,3±15,6 1) 8,6±1,2 2) 4,2±0,2 1) 9,0±0,6 2) б,8±1,3

Количество особей опыт 20 20 10

контр. 20 20 10

ЬС 50 при 96 часовой экспозиции опыт 25 мг/л 25 мг/л 0,1 мг/л

контр. водопроводная вода

Концентрация Cd в опыте (расчет по иону металла) опыт 5 мг/л; (0,2 от LC 50) 50 мкг/л; (0,002 от LC jo) 20 мкг/л; (0,2 от LC so)

контр. водопроводная вода

Сроки отбора проб, сут 7,14,21,28 7,14,21,28 7,14

Объем аквариумов, л 150 50 50

Изучаемые органы пронефрос и мезонефрос

Материал для электронной микроскопии фиксировали и обрабатывали по стандартной методике (Миронов и др., 1994). Ультратонкие срезы готовили на микротоме LKB 8800 и просматривали под электронными микроскопами JEM 100С и JEM 1011. Измерение клеток и клеточных органелл проводили на негативах и цифровых микрофотографиях, обработанных в программе Adobe Photoshop CS. Измеряли: продольный (dj) и поперечный диаметр (cfc) лейкоцитов, клеток с радиально расположенными везикулами (КРВ), и палочковых клеток и их субклеточных структур (ядра всех типов выше перечисленных клеток, фагосомы макрофагов, гранулы гранулоцитов и палочковых клеток, везикулы КРВ); длину (L) и ширину (Н) мелано-макрофагальных центров и подоцитов боуменовых капсул; степень вытянутости (v) и поперечный диаметр (d2) хлоридных и бокаловидных клеток, а также продольный (d[) и поперечный диаметр (d2) ядер у этих типов клеток, митохондрий хлоридных клеток и секреторных гранул бокаловидных клеток; длину (L) и максимальную ширину (В) эпителиоцитов канальцев, а также средний диаметр (d) микроворсинок и микроресничек, длину (L) зоны эндоцитоза, щеточной каемки, продольный (dO я поперечный диаметр (d2) ядер и митохондрий у этих типов клеток, а также продольный (di) и поперечный диаметр (d2) секреторных гранул эпителиоцитов I типа проксимального отдела канальцев нефрона. Подсчитывали количество гранул в гранулоцитах и палочковых клетках, везикул в КРВ, митохондрий в хлоридных клетках, секреторных гранул в бокаловидных клетках и эпителиоцитах I типа проксимального отдела канальцев нефрона. Вычисляли форм-

фактор (FF) гранул гранулоцнтов и палочковых клеток как отношение ширины к длине гранулы. Интенсивность дегрануляции гранулоцнтов (ИДГ) рассчитывали как отношение количества опустошенных гранул и гранул с измененной структурой (ИГ) к количеству нормальных гранул (НГ) для данного типа клеток: ИДР=(ИГ)/(НГ). Для оценки интенсивности разрушения митохондрий (ИРМ) в эпителиоцитах вычисляли отношение количества нормальных (НМ) к разрушенным митохондриям (РМ): ИРМ=(РМ)/(НМ).

Статистическая обработка материала. Результаты обработаны статистически в программах MS Excel 2003 и Statistica 6.0, они представлены в виде средних значений и их ошибок (x±SE). Для оценки достоверности результатов использовали t-критерий Стьюдента и дисперсионный анализ (ANOVA, LSD-тест) при р-0,05. Для оценки сходства в соотношении лейкоцитов пронефроса между видами рыб применяли кластерный анализ методом У орда в программе PAST (Hammer et al, 2001).

Глава 3. Особенности структурной организации почек пресноводных и морских костистых рыб

3.1. Структура почек рыб на тканевом уровне

Пронефрос исследованных ввдов состоит из ретикуло-лимфомиелоидной ткани и кровеносных сосудов. Большая часть клеток крови представлена эритроцитами и лимфоцитами, встречаются крупные клетки с незернистой цитоплазмой, а также плохо идентифицируемые зернистые лейкоциты. В пронефросе серебряного карася обнаружен относительно толстый слой тяжей ткани (72,6±9,2 мкм), состоящий из нескольких рядов клеток, имеющих светлую или темную цитоплазму и плотно прилегающих друг к другу. Светлые клетки идентифицированы как стероидогенные, темные - как хромаффинновые. Тяжи клеток окружают крупный сосуд и образуют интерренальную ткань.

Мезоиефрос, как и пронефрос, состоит из ретикуло-лимфомиелоидной (интерстициальной) ткани, идентификация клеток которой также затруднена. Эта ткань тесно связана со стенками сосудов и петлями нефронов. Следует отметить, что мезонефрос исследованных видов имеет: 1) межвидовые различия в степени развития интерстициальной ткани; 2) у морских видов окунеобразных рыб доля интерстициальной ткани меньше, чем у пресноводных; 3) доля интерстициальной ткани достоверно выше у всех видов карпообразных, по сравнению с таковой у окунеобразных (рис. 1).

Рис. 1. Степень развития

интерстициальной ткани в мезонефросе у исследованных отрядов рыб. РЛМТ-доля интерстициальной ткани от общей площади ренальной ткани мезонефроса, %.

Результаты исследования показали, что головная и туловищная почки всех исследованных видов построены сходным образом, в их состав входят обязательные компоненты: ретикулярная строма, кроветворная ткань и кровеносные сосуды, кроме того, в состав мезонефроса - нефрогенная ткань. Перечисленные компоненты

Карпообразные

Пресноводные окунеобразные

Морские окунеобразные

свойственны почкам всех ныне живущих видов круглоротых и рыб, а основные отделы нефрона и высшим позвоночным (Гинецинский, 1964; Наточин, 1976; Ланге и др., 1990; Говадинова и др., 2000; Микряков и др., 2001). Различную степень развития интерстициальной ткани мезонефроса у карпообразных и окунеобразных видов, вероятно, можно объяснить тем, что по палеонтологическим данным предковая группа карпообразных была генеративно (первично) пресноводной, и ее филогенетическое развитие, включая появление исследованных нами видов, происходило исключительно в пресных водах (Кэрролл, 1992; Справочник для палеонтологов..,1994). Предковая группа современных окунеобразных возникла и развивалась в морской воде. Лишь значительно позднее относительно малое количество древних видов, включая предковую группу, от которой произошли современные пресноводные окуневые, освоило пресные воды (Кэрролл, 1992; Справочник для палеонтологов.., 1994; Мамилов и др., 1998). Вероятно, этим можно объяснить различное соотношение интерстициальной и нефрогенной тканей в мезонефросе у исследованных видов карпообразных и окунеобразных рыб. Возможно, у окунеобразных в почечно-селезеночном типе кроветворения основную роль играет пронефрос, а мезонефрос в процессе филогенетического развития стал более специализированным. В результате значение одной из функций мезонефроса (лимфо- и миелопоэз) ослабело. Об этом свидетельствует болев слабая степень развития интерстициальной ткани у морских окунеобразных, по сравнению с пресноводными. Данное предположение согласуется с тем, что в морской воде почки рыб испытывают гораздо большую нагрузку, чем в пресной воде, т.к. не только реабсорбируют, но и секретируют ионы (Наточин, 1976).

Интерренальная ткань ранее была описана в различных участках головной и туловищной почек осетровых. Среди костистых этот тип ткани наиболее полно изучен в пронефросе лососевых (Баранникова, 1975; 1978а, б; Макеева, 1992). Развитие данной ткани в мезонефросе исследованных видов нами обнаружено не было. Некоторые авторы называют тельца Станниуса задней интерренальной тканью (Аминева, Яржомбек, 1984). Тем не менее, показано, что эти тельца не развиваются из вольфовых каналов и не секретируют кортикосгероиды, тогда как интерренальная ткань пронефроса и надпочечники млекопитающих происходят из эпителия целомической выстилки (Межнин, 1978). Поэтому тельца Станниуса вряд ли можно отождествлять с корой надпочечников млекопитающих и интерренальной тканью.

Таким образом, отсутствие интерренальной ткани в мезонефросе костистых рыб (в отличие от осетровых) и уменьшение площади интерстициальной ткани в ряду пресноводные карпообразные - пресноводные окунеобразные - морские окунеобразные возможно связано с увеличением количества нефронов на единицу площади ренальной ткани и последующей специализацией нефрогенной ткани в процессе эволюции, что позволило окунеобразным освоить водоемы с широким диапазоном солености.

3.2. Состав и соотношение лейкоцитов

Так как состав и соотношение различных типов лейкоцитов в лимфомиелоидной ткани почек трудно описать на стандартных гистологических срезах, нами был проведен анализ мазков-отпечатков органов.

Установлено, что лимфомиелоидная ткань почек исследованных видов содержит гемоцитобласты, лимфоциты, макрофаги, плазматические клетки, нейтрофилы и эозинофилы, находящиеся на различных стадиях зрелости. В обоих органах соотношение лейкоцитов носит лимфоидный характер: лимфоциты

составляют 37-68% в пронефросе, 38-79% в мезонефросе. Доля гемоцитобластов в головной почке почти в 1,5-2 раза выше, чем в туловищной, что свидетельствует о более высокой лейкопоэтической активности этого органа. Соотношение остальных типов лейкоцитов в про- и мезонефросе у каждого вида рыб существенно отличается.

Известно, что лейкоцитарная формула периферической крови зависит от миграционной активности рыб, питания, пола, возраста, температуры воды и т.д. (Житенева и др., 2004). Так как пронефрос костистых рыб является основным органом лейкопоэза, можно предположить, что подобные показатели должны отражаться на соотношении лейкоцитов и в этом органе. В качестве возможного фактора мы рассмотрели чувствительность рыб к дефициту кислорода в воде, а также тип питания и миграционную активность видов.

Придерживаясь классификации Г. В. Никольского (1974) и привлекая данные по чувствительности рыб к пороговому содержанию растворенного в воде кислорода (Черфас, 1956; Карпанин, Иванов, 1967; Карпевич, 1975, Яржомбек и др., 1986), исследованные виды условно могут быть разделены следующим образом: карась, лещ и линь относятся к группе рыб, выдерживающих слабое насыщение воды 02 (0,5 мл/л). Синец, плотва, окунь, ставрида, голец, судак и щиповка (4 мл/л) - к группе, более требовательной к количеству Ог в воде.

Данное деление не противоречит распределению лейкограмм пронефроса в кластерном анализе, который позволил выделить группы рыб, обладающие наибольшим сходством в соотношении различных типов лейкоцитов. Более того, виды с близкими значениями порогового содержания кислорода в воде попадают в одну группу при распределении лейкограмм в кластерном анализе (рис. 2).

О)

о см (О ю т- со т-

М 1У

Рис. 2. Распределение по сходству лейкограмм головиой почки.

1 группа: 1-серебряный карась, 2-линь, 3-лещ.

2 группа: 9-окунь, 11-ставрида.

3 группа: 7-синец, 4—голец, 6-плотва.

4 группа: 5-щиповка, 10-судак, 8-берш, 12-морской карась.

Выдвинутое предположение подтверждают и данные о содержании основных электролитов в эритроцитах у этих видов рыб, которые, в зависимости от концентрации натрия и калия в клетках, попадают в аналогичные группы. Показано, что концентрация калия в эритроцитах связана со способностью видов адаптироваться к экстремальным изменениям условий среды обитания. Самая высокая концентрация калия в эритроцитах получена у линя и карася, которые живут в условиях периодического дефицита кислорода, населяя стоячие, часто заболоченные водоемы, в которых другие виды обычно не могут обитать (Мартемьянов, 1992). Концентрация натрия в эритроцитах связана с их кислороднесущей емкостью. Показано, что чем ниже концентрация натрия в эритроцитах, тем рыбы более адаптированы к дефициту кислорода. Самая высокая концентрация натрия обнаружена у окуня и судака (Мартемьянов, 1992), что также согласуется с полученными результатами.

По характеру питания и миграционной активности сходства между распределением рыб на основании лейкограмм не наблюдается.

Таким образом, соотношение различных форм лейкоцитов в головной почке коррелирует с чувствительностью рыб к дефициту кислорода в воде и не зависит от типа питания и миграционной активности.

3.3. Ультраструктура клеток ренальной ткани

3.3.1. Лейкоциты

Тонкая структура лимфоцитов, макрофагов и мелано-макрофагальных центров, плазматических клеток у исследованных нами видов сходна с другими костистыми (Zapata, 1979; Temmink, Bayne, 1987; Agius, Roberts, 2003; Балабанова, 19976, 2005). Размеры этих клеток и субклеточных структур одного типа незначительно варьируют у разных видов и в разных органах, исключение составляют макрофаги и мелано-макрофагальные центры, размеры которых у разных видов рыб различаются более чем в 2 раза. Основные отличия наблюдаются в структуре и количественных характеристиках гранулоцитов.

Не&трофилы (от 5,7x3,7 мкм у серебряного карася до 11,5x9,4 мкм у морского карася). Характерным признаком этих клеток являются заполняющие цитоплазму специфичные гранулы, количество которых в нейтрофилах карпообразных превышает таковое у окунеобразных. По структуре гранул все исследованные виды можно разделить на 5 групп. 1 группа: серебряный карась, лещ, линь, синец, плотва и щиповка - имеют темные гранулы с электронно-плотной палочковидной сердцевиной (FF от 0,65 у карася до 0,17 у линя). 2 группа - голец, специфичные гранулы которого темные, зернистые, с электронно-плотной округлой сердцевиной, занимающей большую часть органелл (FF 0,83). 3 группа: окунь, судак, берш -гранулы с равномерно распределенными электронно-плотными фибриллами, расположенными вдоль органелл (FF от 0,66 у судака до 0,28 у берша). 4 группа -ставрида, она имеет фибриллярной структуры гранулы с электронно-прозрачной палочковидной сердцевиной (FF 0,69). 5 группа - морской карась, гранулы нейтрофилов которого электронно-плотные без фибриллярной структуры (FF 0,85).

Эозинофплы (от 4,9x4,7 мкм у судака до 8,4x6,5 мкм у линя). Цитоплазма этих клеток также содержит специфичные гранулы, которые, как правило, крупнее, а количество их меньше, чем в нейтрофилах. По структуре гранул виды разделили на 3 группы. 1 группа: серебряный карась, лещ, линь, синец, голец, щиповка, окунь, судак, берш и ставрвда - имеют электронно-плотные, иногда более светлые гранулы гомогенной структуры. 2 группа - плотва, она имеет электронно-плотные гранулы и гранулы с эксцентрично расположенным более прозрачным участком. Возможно, ультраструктурные различия гранул эозинофилов у плотвы являются следствием особенностей функциональной активности клеток. 3 группа - морской карась, специфичные гранулы которого округлые, электронно-прозрачные с электронно-плотной каймой и звездчатой центральной частью. FF гранул большинства видов составляет от 0,67до 0,85.

Гранулоциты I-II типа обнаружены только у морского карася (7,Ох 5,6 мкм). Они меньше по сравнению с нейтрофилами и эозинофиламн. Особенностью этих клеток является наличие нейгрофильных и эозинофильных специфичных гранул. Количество гранул I типа превышает таковое гранул II типа в клетках про- и мезонефроса.

Гранулоциты III типа обнаружены только у берша (6,9х 5,3 мкм). Цитоплазма содержит светлые, зернистой структуры специфичные гранулы (FF 0,92), некоторые

из которых имеют электронно-плотное скопление в срединной части. Количество гранул в этих клетках меньше, чем у гранулоцитов берша, описанных выше.

Ранее было показано, что в кроветворной ткани пластинчатожаберных встречаются 3 типа гранулоцитов (нейтрофилы, эозинофилы и базофилы), у круглоротых, большинства осетровых и костистых рыб - 2 типа (нейтрофилы и эозинофилы) (Parish at al., 1986; Ланге и др., 1990; Говядинова и др., 2000; Балабанова, 19976, 2005). У некоторых видов из отрядов окунеобразных и камбалообразных отмечают только нейтрофилы (Roubal, 1986). Среди костистых лишь у лаврака Dicentrarchus labrax L. и карпа Cyprinus carpió описаны нейтрофилы, эозинофилы и базофилы. Более того, у карпа выделены гранулоциты II—П1 типа, содержащие эозинофильные и базофильные гранулы (Cenini 1984; Балабанова, Заботкина, 1988; Mesegueret al., 1990).

Специфичные гранулы обнаруженного нами III типа гранулоцитов берша имеют сходные черты строения с гранулами базофилов других видов, что позволяет нам назвать данный тип клеток базофилами.

Таким образом, на основании полученных результатов и литературных данных можно сделать вывод о том, что у разных видов круглоротых и рыб ультраструктура агранулоцитов подобна и не зависит от условий среды обитания. Несмотря на разнообразие типов и морфологических форм гранулоцитов у пресноводных и морских рыб, нам также не удалось обнаружить зависимости их ультраструктуры от среды обитания видов. Тем не менее, привлекая морфометрические данные, можно сделать вывод о том, что вторичные гранулы клеток миелоидного ряда видоспецифичны. Структура гранул может быть связана с различным набором ферментов и других антибактериальных факторов, а также характером их накопления в гранулах (Шубникова,1974; Алмазов и др., 1979; Бут и др., 2002).

3.3.2. Палочковые клетки

При описании данного типа клеток использовалась классификация В.Е. Матей, разработанная для жаберного эпителия костистых рыб (Матей, 1996). В почках исследованных видов обнаружены клетки на 3, 4 и 5 стадиях развития. Размеры этих клеток подобны таковым гранулоцитов (от 5,3x3,3 мкм у судака до 9,3x6,6 мкм у окуня). Гранулы в клетках (4-5 стадии зрелости) крупнее клеток зернистого рада (FF гранулы от 0,75 у линя и морского карася до 0,24 у судака). Клетки 3 стадии описаны в мезонефросе линя, судака, берша и морского карася; 4 стадии - в пронефросе щиповки, мезонефросе линя, плотвы и всех окунеобразных. На 5 стадии палочковые клетки, располагавшиеся между эпителиоцитами, многочисленны в проксимальных участках нефрона линя, окуня, судака и берша. На этой стадии зрелости клетки секретируют свое содержимое в просвет канальца.

Ультраструктура палочковых клеток, изученных в нашей работе, подобна таковой этих клеток в различных органах у других видов пресноводных и морских рыб (Матей, 1996; Kramer, Potter, 2002; Manera, Dezfuli, 2004). Ранее сведения о нахождении палочковых клеток в почках обыкновенной щиповки Cobitis taenia, обыкновенного судака Stizostedion lucioperca, берша Stizostedion volgense и морского карася Diplodus annularis отсутствовали.

Дискуссия о происхождении и функциях палочковых клеток, длящаяся более 90 лет, завершилась созданием гипотезы об эпителиальной природе этих клеток и участии их в неспецифическом иммунном ответе (Балабанова, Матей, 1987; Iger, Abraham, 1990; Manera, Dezfuli, 2004). Полученные результаты не противоречат этой гипотезе, хотя нами и не были обнаружены все стадии дифференцировки этих клеток.

Возможно, пролиферация палочковых клеток происходит в покровном эпителии, а далее они разносятся с током крови во все органы и ткани, где и происходит их дальнейшее развитие. В пользу нашего предположения говорит факт обнаружения незрелых палочковых клеток в слое недифференцированных элементов эпителия филаментов жабр и в нижних слоях эпидермиса рыб (Матей, 1996, Manera, Dezfuli, 2004).

3.3.3. Клетка с радиально расположенными везикулами (КРВ)

Ранее эти клетки отмечены в кроветворных органах, периферической крови, перинатальной жидкости и кишечнике рыб. Они очень редки, обнаруживаются не у всех видов рыб и не у всех представителей одного и того же вида (Ferguson, 1976; Lopez et al., 2001; Балабанова, 2006a). Полученные данные показали, что эти клетки встречаются в про- и мезонефросе всех исследованных видов карпообразных. Среди окунеобразных нам удалось обнаружить КРВ лишь в мезонефросе окуня и морского карася. Структура КРВ в почках всех исследованных видов подобна таковой других видов пресноводных и морских рыб (Ferguson, 1976; Lopez et al., 2001; Балабанова, 2006a). Размеры КРВ подобны размерам лимфоцитов (от 4,2x3,0 мкм у гольца до 6,0x4,8 мкм у окуня). Возможно, что эти клетки участвуют в защитных реакциях организма, о чем свидетельствует гранулярная структура КРВ, а также их наличие в кроветворных органах и периферической крови рыб.

3.3.4. Хлоридные (ионтранспортирушщие) клетки

В почках всех исследованных видов рыб обнаружены клетки (от 7,17x4,82 мкм в пронефросе линя до 18,4x5,3 мкм в мезонефросе плотвы), имеющие сходную структуру с ¡¡«¡транспортирующими клетками жаберного эпителия костистых рыб (Матей, 1996; Carmona et al., 2004; Kaneko, Katoh, 2004). Для тех и других клеток характерно развитие гладкого эндоплазматического ретикулума (ГЭР) и обилие митохондрий. Основная особенность обнаруженных клеток заключается в присутствии секреторных гранул. Нами показано, что цитоплазма хлоридных клеток ставриды и морского карася содержит большее количество митохондрий по сравнению с пресноводными, что полностью соответствует сведениям о более высоком уровне энергозатрат на поддержание гомеостаза у морских рыб (Наточин, 1976; Матей, 1996; Виноградов, 2000) и свидетельствует о функциональной активности этих клеток. В про- и мезонефросе хлоридные клетки могут располагаться как диффузно в паренхиме органов, так и вокруг кровеносных сосудов и капилляров, а в мезонефросе - вокруг эпителиоцитов канальцев. Такое их расположение в туловищной почке свидетельствует о возможности транспорта ионов из канальцев в клетку и из клетки в кровь через межклеточную жидкость. В совокупности полученные результаты позволяют предположить, что пронефрос помимо основной функции (лимфо- и миелопоэз) в какой-то мере участвует и в ионрегуляторных процессах.

Таким образом, ультраструктура хлоридных клеток у морских окунеобразных отличается от таковой у пресноводных окунеобразных и карпообразных видов. Это отражает различие в способах ионной регуляции и является адаптивными признаками к жизни в воде с различной соленостью.

3.3.5. Бокаловидные (слизистые) клетки

Обнаружены в мезонефросе берша (клетка 20x8 мкм, гранула 1,7x1,3 мкм; FF 77). Они имеют сходную структуру с клетками, описанными для верхних слоев эпидермиса, мочеточников и жаберного и обонятельного зпителиев пресноводных костистых рыб, слизистых оболочек кишечника, трахеи и бронхов млекопитающих (Хэм, Кормак, 1982; Матей, 1996; Гдовский и др., 2007). Известно, что слизь,

выделяемая гранулами этих клеток, предотвращает слущивание эпителия, содержит лизоцим, протеолитические ферменты и антитела против бактериальных антигенов (Хэм, Кормак, 1982; Матей, 1996). Показано, что слизистые клетки в мезонефросе берша располагаются между разрушающимися эпителиоцитами канальца вместе с большим количеством палочковых клеток. Секрет бокаловидных и палочковых клеток близок по своему физико-химическому составу и предохраняет организм от инфекций (Матей, 1996). Скорее всего, эти клетки включены в механизм физиологической регенерации эпителия канальцев.

3.4. Ультраструктура основных отделов нефрона мезоиефроса

Почечное тельце является началом нефрона у всех исследованных видов и имеет единый план строения с таковым у высших позвоночных (Гинецинский, 1964; Хэм, Кормак, 1982; Улумбеков, Челышев, 2002). Основное отличие в структуре почечного тельца морского карася и ставриды заключается в утолщении базальной мембраны, развитии в ней фибриллярного слоя и более узкой полостью боуменовой капсулы по сравнению с пресноводными видами. Данные факты говорят о том, что у морских рыб барьер, отделяющий кровь от полости почечного тельца, трудно проницаем для воды, поступающей в результате ультрафильтрации.

Проксимальный отдел канальцев оказался наиболее дифференцированный. Ранее у некоторых видов костистых рыб было обнаружено до 3 типов эпителиоцитов (Винниченко, 1980). У исследованных нами видов описано лишь 2 типа клеток, отличающихся своей морфологией. В качестве критериев выделения различных типов эпителиоцитов выбраны следующие признаки (табл. 3): 1. Длина эпителиоцитов (клетки I типа выше таковых II типа); 2. Длина щеточной каемки (клетки II типа образуют более короткую щеточную каемку, чем клетки I типа); 3. Развитие зоны эндоцитоза (протяженность зоны у клеток I типа больше, чем у клеток II типа); 4. Наличие секреторных гранул (клетки II типа данные гранулы не образуют).

Эпителиоциты I типа образуют начало проксимального канальца. Это вытянутые, пирамидальной формы клетки (от 11,7x9,3 мкм у морского карася до 18,8x14,3 мкм у судака), плотно прилегающие друг к другу, ядра округлой формы располагаются в базальной части клеток. Зернистая цитоплазма содержит большое количество митохондрий, которые в базальной части клетки располагаются строго вдоль ее продольной оси. Менее упорядочение эти органеллы лежат в апикальной части эпителиоцитов. У морских видов в эпителиальных клетках I и II типов количество митохондрий больше, чем у пресноводных. В некоторых случаях данный показатель различается в 2-6 раз. От базальной части клеток тянутся складки клеточной мембраны, которые переходят в каналы ГЭР, образующие у морских видов сложные переплетения. Возможно, образование таких переплетений и большое количество митохондрий, находящихся в непосредственной близости с ними, обусловлено, согласно гипотезе Ю.В. Наточина (1976), формированием в эпителиоцитах системы секреции фосфатов, сульфатов и двухвалентных ионов, для которой необходимо большее количество энергии по сравнению с реабсорбцией ионов. Развитие мембраны, переходящей в ГЭР, напрямую связано с этим механизмом, так как ГЭР представляет собой молекулярную основу для работы насосов. Для этого участка нефрона также характерны лизосомы и крупные секреторные гранулы. Функцию гранул связывают с реабсорбцией белка и транспортом Na+ и С1" (Хэм, Кормак 1982; Аминева, Яржомбек, 1984; Смит, 1986). Функцию лизосом - с экскрецией креатина, органических кислот и чужеродных веществ (Смит, 1986). В околоядерной цитоплазме хорошо различим аппарат

Гольджи, В апикальной части клеток на границе со щеточной каемкой располагается хорошо развитая зона эндоцитоза (от 7,6 мкм у судака до 1,8 мкм у плотвы). Эта зона характеризуется наличием тубуло-везикулярной системы, образованной микропузырьками и короткими сегментами изогнутых тубул, между которыми локализуются микрофиламенты. Показано, что через эту систему транспортируются полисахариды, а также различные ионы (Смит, 1986; Матей, 1996). Щеточная каемка наиболее высокая для этого типа эпителиоцитов и состоит из большого числа микроресничек и микроворсинок, обращенных в просвет канальца (табл. 3). В эпителиоцитах I типа у пресноводных видов диаметр микроресничек больше такового микроворсинок. У ставриды и морского карася микроворсинки толще микроресничек. Ультраструюура микроресничек подобна таковой, описанной для шейного отдела канальца речной миноги Lampetra fluviatilis L., лягушки Rana temporaria L. и трахеи высших позвоночных (Винниченко, 1980; Улумбеков, Челышев, 2002).

Эпителиоцнты II типа по структуре сходны с клетками I типа, но меньше таковых по высоте (от 8,9x3,6 мкм у плотвы до 13,1x9,6 мкм у синца). Большое количество митохондрий характерно и для этого типа эпителиоцитов, что, скорее всего, обусловлено наличием противоградиентных сорбционных и секреторных процессов. Лизосомы, по сравнению с клетками I типа, встречаются реже. Признаком эпителиоцитов II типа является отсутствие специфичных гранул, меньшая протяженность зоны эндоцитоза, высота щеточной каемки, больший диаметр микроворсинок по сравнению с таковым у клеток I типа (табл. 3). '

Эпителиоцнты промежуточного отдела канальцев обнаружены в нефроне синца и судака. Это самые низкие клетки (8,9x6,3 мкм у судака, 10,4x9,9 у синца). Ядра в них располагаются в базальной части, сформированная зона эндоцитоза отсутствует, изредка в цитоплазме встречаются везикулы и микрофиламенты. Особенностью клеток является почти ровная апикальная поверхность с очень редкими и короткими микроворсинками (табл. 3). По сравнению с рассмотренными выше группами эпителиоцитов щеточная каемка этих клеток у синца короче более чем в 3 раза, а у судака - более чем в 8 раз. Диаметр микроворсинок этого участка больше по сравнению с эпителиоцитами I, II типов (табл. 3). Опираясь на литературные данные (Гинецинский, 1964; Винниченко, 1980; Аминева, Яржомбек, 1984) и собственные результаты, можно предположить, что промежуточный отдел канальцев присутствует у всех видов пресноводных костистых рыб, но так как эти клетки ограничивают небольшой отрезок нефрона, то обнаружить и описать их крайне сложно. Структура этих типов эпителиоцитов свидетельствует об аналогии их с клетками тонкого сегмента петли Генле нефронов млекопитающих, основная функция которых - реабсорбция воды (Улумбеков, Челышев, 2002).

Эпителиоциты дистального отдела канальцев - это высокие и очень широкие у основания клетки (от 17,6x7,1 мкм у линя до 10,3x10,1 мкм у гольца), ядро занимает центральное положение, иногда смещено к базальной части. Для цитоплазмы характерно наличие свободных рибосом, хорошо развитого ГЭР, а также большего числа более крупных по сравнению с другими типами эпителиоцитов митохондрий, что, скорее всего, связано с факультативной реабсорбцией воды, осуществляющейся против большего, по сравнению с другими участками канальца, градиента концентрации (Гинецинский, 1964; Смит, 1986). В цитоплазме встречаются лизосомы и аппарат Гольджи, отдельные каналы шероховатого эндоплазматического ретикулума. Кроме того, в клетках морских видов выявлено большое количество везикул, наличие которых, возможно, обусловлено секрецией К1" в этом участке

канальца, а также более выраженной факультативной реабсорбцией воды по сравнению с пресноводными (Гинецинский, 1964; Смит, 1986). Апикальная часть клеток образует лопастевидные цитоплазматические выросты.

Таблица 3

Средние морфометрические параметры эпителиоцитов и субклеточных

структур всех исследованных видов (мкм)

Отдел канальца Клетка (Ь*В) Зона эндоцитоза (Ь) Щеточная каемка (Ь) Микро ворсинки ((1) Микро реснички (<1)

Проксимальный (эпителиоциты 1типа) (14,8±0,48)х (7,53±0,43) 3,53±0,22 3,27±0,16 0,14±0,01 0,24±0,003

Проксимальный (эпителиоциты II типа) (10,1±0,33)х (7,64±0,48) 1,47±0,09 1,54±0,06 0,20±0,01 0,24±0,003

Промежуточный (9,68±0,34)х (8Д1±0,83) — 0,40±0,05 0,28±0,05 —

Дистальный (14,4±0,49)х (10,3±0,42) — — — —

Примечание: Ь - длина, В - максимальная ширина, (1 - диаметр.

Таким образом, выявленные особенности ультраструктуры эпителиоцитов в основных отделах нефрона у пресноводных и морских рыб отражают различия в способах ионной регуляции у данных видов рыб и являются адаптивными признаками к жизни в воде с различной соленостью. Отличия в размерных характеристиках каждого типа эпителиоцитов у разных видов имеют, по-видимому, видовую специфику, тогда как другие признаки (количество и плотность секреторных гранул и лизосом, положение митохондрий, плотность цитоплазмы, различные включения и т.д.) связаны, скорее всего, не с особенностями морфологии различных типов эпителиоцитов, а со степенью функциональной активности клеток. Вне зависимости от среды обитания для всех видов показано сходное изменение длины эпителиоцитов, зоны эндоцитоза, щеточной каемки, диаметра микроворсинок от проксимального к дистальному отделу нефрона (табл. 3).

Анализ структуры про- и мезонефроса морских и пресноводных костистых рыб, принадлежащих к отрядам Карпообразные и Окунеобразные, позволил выявить как общие черты, характерные для всех видов, так и специфичные признаки, сохранившиеся на тканевом, клеточном и субклеточном уровнях организации и отражающие связь со средой обитания исследованных видов.

Глава. 4. Влияние сублетальных концентраций кадмия па структуру головной и туловищной почек карпа, гольца и окуня 4.1. Изменения в соотношении лейкоцитов пронефроса Результаты исследований показали, что под действием токсиканта в головной почке карпа, гольца и окуня изменилось соотношение всех рассматриваемых типов клеток, в первую очередь это выразилось в лимфопении, нейтрофилии и эозинофилии.

Колебания соотношения лейкоцитов в пронефросе, по-видимому, могут быть связаны с перераспределением этих клеток между почками и периферической кровью. Увеличение индекса сдвига лейкоцитов (ИСЛ) относительно контроля во время эксперимента свидетельствует об усилении гранулопоэза в головной почке

рыб, скорее всего, связано с развитием воспалительной реакции в органе под действием ионов кадмия (табл. 4). Уменьшение ИСЛ у карпа на 7 сут опыта может быть вызвано не только уменьшением доли незрелых форм гранулоцитов, но и увеличением долей плазматических клеток и лимфоцитов в органе. Ранее было отмечено, что кадмий модифицирует белки организма, в результате чего иммунная система организма рыб воспринимает их как чужеродные, реагируя синтезом антител (Крючков, Бойко, 2002). Как известно, именно плазматические клетки продуцируют на своей поверхности антитела, а лимфоциты «помогают» им реагировать при гуморальном иммунном ответе (Галактионов, 1995).

Следует отметить, что изменения в соотношении лейкоцитов при действии различных концентраций кадмия носят неспецифический характер, выражающийся в снижении числа лимфоцитов и увеличении клеток миелоидного ряда, свидетельствующий об изменении темпов кроветворения и направленности процессов клеточной дифференцировки в сторону усиления миелопоэза. Подобные изменения в соотношении лейкоцитов ранее были показаны при воздействии различных по химической природе токсикантов (Heath, 1995; Лапирова, 2000, Балабанова и др., 2003; Заботкина, Лапирова, 2003,20046; Степанова, 2003; Заботкина и да, 2007).

Таблица 4

Индекс сдвига лейкоцитов (ИСЛ)_

Срок экспозиции Вид рыбы Карп Голец Окунь

Контроль 0,962 0,65' 0,99"

ё 7 сут 0,60' 0,933 2,173

0) 2 я - 14 сут 0,881Д 0,8 б2,3 1,612

4> S 21 сут 1,072 0.892-3 —

о 28 сут 1,453 0,812 —

Примечание: здесь и далее значения с различными цифровыми индексами для каждого вида достоверно отличаются между контролем и сроками экспозиции (р<0,05; ANOVA, LSD тест). Расчет индекса сдвига лейкоцитов, представленного в таблице, указан в главе «Материалы и методы».

4.2. Изменения структуры мезоиефроса

Результаты исследований показали, что в норме структура интерстициальной и нефрогенНой тканей и ультраструкгура клеток почек карпа, гольца и окуня подобна таковой, описываемой в главе 3, а также в работах других авторов (Bielek, 1980а, Ь; Cenini, 1984; Балабанова, 2002). В ходе эксперимента у исследованных видов обнаружено развитие воспалительной реакции, включающей 2 взаимосвязанных процесса: альтерация и экссудация ткани (табл. 5). Показано, что эти процессы имеют строго определенную последовательность.

Таблица 5

Основные этапы структурных изменений ренальной ткани мезонефроса и ее клеток при действии сублетальных концентраций ионов кадмия

1этап 1. Повреждение митохондрий 2. Образование ядерной петли в лейкоцитах, опустошение гранул в гранулоцитах (табл. 6) 3. Увеличение количества секреторных гранул, размыкание межклеточных контактов в проксимальных канальцах. 4. Лизис содержимого палочковых клеток 5. Увеличение размеров и количества фагосом в макрофагах 6. Некробиоз клеток лимфомиелоидной ткани (табл. 7) а. Гиперемия кровеносных сосудов клубочка, утолщение базальной мембраны боуменовой капсулы б. Инфильтрация нефрогенной ткани эритроцитами, лимфоцитами, нейтрофилами и клетками с радиально расположенными везикулами

II этап 1. Расширение цистерн шероховатого эндоплазматического ретикулума в лимфоцитах и клетках с радиально расположенными везикулами 2. Разрушение эпителиоцитов проксимального отдела канальцев 3. Размыкание межклеточных контактов и последующее разрушение эпителиоцитов дистальных участков канальцев а. Появление лейкоцитов и включений в просвете дистальных канальцев

III этап 1 .Разрастание соединительной ткани вокруг разрушенных канальцев 2. Белковая дистрофия лимфомиелоидной ткани

Примечание: цифрами обозначены морфопатологии, входящие в процесс альтерации ткани, буквами - в процесс экссудации.

Таблица 6

Влияние сублетальных концентраций ионов кадмия на интенсивность дегрануляцни гранулоцнтов в туловищной почке исследованных видов рыб

Вид рыбы экспозиции-4--^ Карп Голец Окунь

эозинофил базофил нейтрофил эозинофил эозинофил

Контроль 0,21' 0,081 0,03' 0,04' 0.071

ё 7сут 0,792 0,45? 0.202 0,04' 1,233

и 5 а 14сут 1,252 3,634 0,463 о,зз3 0,312

о, ю С Я 21сут 2,903 З,043 "о оо 0,28у —

л 28сут 4,373 3,554 0,5 83 0,12 ■ —

Примечание: расчет индекса дегрануляцни гранулоцнтов, представленного в таблице, указан в главе «Материалы и методы».

Таблица 7

Степень развития некробиоза в шггерстицналыюй ткани мезонефроса под _действием ионов кадмия (%)__

Вид рыбы Карп Голец Окунь

Срок экспозиции — (N=10) (N=10) (N=10)

Контроль 67,7±2,04 79,1±0,95 44,4±0,62

ЕЗ 7сут 66,Ш:1,74 65,5±1,64 35,7±0,7'

g 14 сут 48,3±2,53 56,7±1,83 35,3±0,7'

о и Ü 21 сут 35,7±3,92 60,5± 1,12 —

Р) 28 сут 37,9±4,32 50,7±3,3' —

Примечание: в таблице указана доля интерстициальной ткани без некробиотических признаков от общей площади ренальной ткани.

Некоторые из наблюдаемых нами морфопатологий зафиксированы у других видов рыб при различных схемах экспериментов по влиянию токсикантов на почки рыб (Shrivastava, Pandey, 1986; Гамбарян, Лаврова, 1989; Ooi, Law, 1989; Singhal, Jain, 1997; Моисеенко, 1998; Степанова и др., 1998; Madden, Fowlerr 2000; Заботкина, Лапирова, 2003, 2004; Drastichova et al., 2003) и указывают на тяжелые функциональные изменения органа и возможной интоксикации рыб вследствие нарушения выведения продуктов обмена Наше предположение подтверждается ранее обнаруженными нарушениями ионрегулирующей и экскреторной функций почек у некоторых карповых и скорпеновых рыб из районов, загрязненных кадмием (Brown et, al., 1984; Griffin, 2001; Julian et al., 2001; Фомин, 2002; Feng et al., 2004).

По мнению C.M. Короткова и И.А. Скульского (1996), основное действие кадмия связано с атакой на сульфгидрильные группы белков мембран и с блокированием дыхательных процессов в митохондриях. Эти данные подтверждаются ультраструктурными исследованиями, проведенными в нашей работе, а также результатами других авторов, где показано, что среди прочих мембранных органоидов митохондрии оказались наиболее чувствительны к действию токсиканта. Обнаружены деградация митохондрий и образование постмитохондриальных вакуолей в хлоридных клетках жаберного эпителия и иммунокомпетентных клетках пронефроса и селезенки различных видов рыб (Матей, 1996; Балабанова, 1997а, 1998). Повреждение мембран митохондрий возможно связано не только с действием кадмия на белки, но и с гипокальциемией в органе, которая приводит к «вымыванию» кальция из матрикса митохондрий (Матей, 1996; Сарис, Карафоли, 2005; Моисеенко и др., 2006; Hollis et al., 1999).

Увеличение размеров макрофагов за счет увеличения количества и размеров фагосом в этих клетках, наличие разрушенных остатков клеток практически во всех фагосомах указывает на гибель большого числа эритроцитов, а также лейкоцитов лимфоидного и зернистого радов дифференцировки. Проявление фагоцитирующих способностей гранулоцитов, увеличение количества опустошенных гранул в этих клетках показывает участие гранулоцитов в утилизации поврежденных элементов тканей и подтверждает развитие и некробиотических явлений в лимфомиелоидной ткани мезонефроса у всех исследованных особей уже на ранних сроках воздействия

токсикантом. Гибель клеток лимфомиелоидной ткани позволяет предположить снижение устойчивости рыб к различным заболеваниям. Расширение цистерн шероховатого эндоплазматического ретикулума в цитоплазме лимфоцитов и клеток с радиально расположенными везикулами возможно связано с усилением синтетической функции в клетках, возникшей в результате воздействия токсиканта и не являющейся специфической реакцией на кадмий. Подобные ультраструктурные изменения иммунокомпетентных клеток в почках и селезенке карпа (Cyprinus carpió L.) наблюдали ранее при иммунизации рыб без токсического воздействия поллютантов (Балабанова, Заботаина, 1988; Заботкина, Балабанова, 1989).

Утолщение базальной мембраны боуменовой капсулы, гиперемия сосудов клубочка и как следствие появление в них, а также в просвете капсулы большого количества эритроцитов, нейтрофилов и клеток с радиально расположенными везикулами, эмиграция лимфоцитов из просвета сосудов в проксимальные и дистальные участки канальцев, являются следствием изменения физико-химических свойств пораженных тканей и влекут за собой образование экссудата (Ярыгин, Серов, 1977). Наличие большого количества лейкоцитов и включений, предположительно белковой природы, в просвете канальцев к 14 сут экспозиции в токсиканте согласуется с вышеприведенными данными и подтверждает развитие воспалительного процесса в органе.

Следует отметить, что наши исследования согласуются с ранее опубликованными работами, в которых авторы указывают наибольшую чувствительность проксимальных участков канальцев к действию ионов металла (Bhattacharya et. al., 1978; Fôrlin et al., 1986; Shrivastava, Pandey, 1986; Гамбарян, Лаврова, 1989; Hamilfon et al., 1989; Ooi, Law, 1989; Singhal, Jain, 1997; Madden, Fowler, 2000). Некоторые авторы это явление связывают с тем, что металлотионеины парадоксальным образом усиливают действие кадмия на почки, так как показано, что из-за их низкой молекулярной массы белки проникают сквозь гломерулы и поступают в клетки проксимального канальца, где деградируют в лизосомах, высвобождая связанные ионы, в результате чего происходят тяжелые дегенеративные изменения в проксимальных участках канальцев (РаЙс, Гуляева, 2003).

Увеличение числа секреторных гранул в цитоплазме эпителиоцитов I типа проксимального отдела канальцев, скорее всего, связано с участием этих органелл в деградации металлотионеинов и удалении кадмия из организма (Olsson, Hogstrand, 1987; Malins, Ostrander, 1994; De Smet et al., 2001; Райе, Гуляева, 2003; Немова, 2005).

Наблюдаемое размыкание межклеточных контактов канальцев нефрона связывают с «вымыванием» кальция из кальциевых сайтов этих контактов (Матей, 1996; Улумбеков, Челышев, 2001).

Таким образом, выявленную нами последовательность изменений в ренальной ткани под действием ионов кадмия можно рассматривать как систему неспецифических реакций на действие большинства токсикантов. Данные изменения могут служить дополнительным гистологическим критерием при проведении мониторинговых исследований по оценке влияния на рыб антропогенных факторов среды.

В главе «Заключение» приводятся основные результаты и выводы, полученные в диссертационной работе.

ВЫВОДЫ

1. В мезонефросе костистых рыб доля интерстициальной ткани от общей площади ренальной ткани убывает в ряду: пресноводные карпообразные - пресноводные окунеобразные - морские окунеобразные. Различие в соотношении нефрогенной и интерстициальной тканей является адаптацией, позволившей окунеобразным освоить водоемы с широким диапазоном солености.

2. Соотношение различных форм лейкоцитов в головной почке коррелирует с чувствительностью рыб к дефициту кислорода в воде и не зависит от типа питания и миграционной активности.

3. У пресноводных и морских костистых рыб ультраструктура агранулоцитов, бокаловидных, палочковых клеток и клеток с радиально-расположенными везикулами сходна Среди клеток миелоидного ряда выявлено 5 типов нейтрофилов и 3 типа эозинофилов по структурным признакам вторичных гранул. Зависимость ультраструктуры гранул от обитания видов в морской или пресной воде не обнаружена

4. Ультраструктура основных отделов нефрона и хлоридных клеток у морских окунеобразных отличаются от таковой у пресноводных окунеобразных и карпообразных толщиной базальной мембраны боуменовой капсулы, большим количеством митохондрий в эпителиоцитах и хлоридных клетках, большим количеством везикул, а также более развитой системой клеточных мембран и гладкого эндоплазматического ретикулума в эпителиоцитах канальцев. Это отражает различие в способах ионной регуляции и является адаптациями к жизни в воде с различной соленостью.

5. У пресноводных и морских видов рыб длина эпителиоцитов, зоны эндоцитоза и щеточной каемки, диаметр микроворсинок меняются сходным образом от проксимального к дистальному отделу нефрона и являются критерием для выделения двух типов эпителиоцитов проксимального отдела канальцев. Различия же в количестве и плотности секреторных гранул, лизосом, положение митохондрий в цитоплазме эпителиоцитов отражают только их функциональную активность.

6. Негативное влияние кадмия выражается в развитии воспалительной реакции почек, выявленой на клеточном и субклеточном уровнях уже на начальном этапе воздействия. Опустошение специфичных гранул гранулоцитов, расширение цистерн шероховатого эндоплазматического ретикулума в лимфоцитах и клетках с радиально расположенными везикулами, увеличение количества и размеров фагосом в макрофагах свидетельствуют об усилении секреторной, синтетической и фагоцитарной активности лейкоцитов и способствуют снижению повреждающего эффекта токсиканта. Последовательность проявления выявленных изменений не зависит от концентрации кадмия, вида и возраста рыб.

Список работ, опубликованных по теме диссертации: Статьи в изданиях, рекомендованных ВАК РФ

1. Назарова Е.А. Влияние сублетальной концентраций кадмия на ультраструктуру лейкоцитов головной и туловищной почек годовиков карпа (Cyprinus carpió L.) // Токсикол. вестник. 2007. №1. С. 7-10.

2. Заботкина Е.А., Лапирова Т.Б., Назарова Е.А. Влияние ионов кадмия на некоторые морфофункционачьные и иммунофизиологические показатели сеголеток речного окуня Perca fluviatilis (PERCIFORMES, PERCIDAE) // Вопросы ихтиологии. 2009. Т. 49. №1. с. 117-124.

3. Лапирова Т.Б. Сравнительный анализ иммунофизиологических механизмов реагирования молоди осетра сибирского и карпа обыкновенного на действие кадмия / Т.Б. Лапирова, Е.А. Заботкина, Л.В. Балабанова, Е.А. Назарова // Вопр. рыболовства. 2009. Т. 10. № 1 (37). С. 81-91.

Статьи и тезисы конференций в других изданиях

4. Бубенкова Е.В., Назарова Е.А. Действие фенола и нафталина на структуру селезенки и туловищной почки карася серебряного // В сб. Биотехнология - охране окружающей среды. М.: МГУ, 2005. С.68-71.

5. Назарова Е.А. Влияние ионов кадмия на структуру туловищной почки карпа // Мат. докл. XV мол. науч. конф. Сыктывкар, 2004. С. 120-121.

6. Заботкина Е.А., Бубенкова Е.В., Назарова Е.А. Влияние сублетальных концентраций ионов кадмия на структуру иммунокомпетентных органов карпа // Мат. Веер, кауч-практ. конф. «Пробл. иммун., патол. и охраны здоровья рыб». Москва, 2004. С. 92-100.

7. Лапирова Т.Б. Реакция иммунной системы карпа на действие сублетальной концентрации кадмия / Т.Б. Лапирова, Е.А. Заботкина, Л.В. Балабанова, В.Р. Микряков, Е.В. Бубенкова, Е.А Назарова // Мат. Веер, науч-практ. конф. «Экол. пробл. уникальных природных и антропогенных ландшафтов». Ярославль, 2004. С. 229-234. -

8. Назарова Е.А. Влияние сублетальной концентрации кадмия на состояние выделительной системы карпа // Тез. XII междун. конф. студ., аспир. и молодых ученых «Ломоносов 2005». М., 2005. С. 155-156.

9. Назарова Е.А. Влияние токсикантов различной природы на иммунокомпетентные клетки туловищной почки представителей семейства карповых (Cypriniformes) // Мат. II Веер. науч. конф. «Принципы и способы сохранения биоразнообразия». Йошкар-Ола, 2006. С. 205-206.

10. Назарова Е.А. Изменения тонкой структуры клеток головной и туловищной почек карпа в результате воздействия сублетальной концентрации кадмия // Тез. XIII междун. конф. студентов, аспирантов и молодых ученых. «Ломоносов 2006». М., 2006. С. 164-165.

11. Назарова Е.А., Заботкина Е.А. Возрастные, видовые и экологические особенности состава лейкоцитов головной почки трех видов пресноводных костистых рыб Рыбинского водохранилища // Тез. докл. IX съезда гидробиологического общества РАН. Тольятти, 2006. С. 53.

12. Заботкина Е.А., Назарова ЕА. Сравнительная характеристика лейкоцитарного состава периферической крови и иммунокомпетентных органов пресноводных и морских костистых рыб // Мат. Всеросс. науч.-практич. конф. «Экол. пробл. уникальных природных и антроп. ландшафтов». Ярославль, 2006. С. 57-60.

13. Заботкина Е.А., Назарова Е.А. Изменение соотношения лейкоцитов в периферической крови и иммунокомпетентных органах сеголеток окуня как показатель загрязнения среды // Тез. докл. конф. «Биоинд. в мониторинге пресноводных экосистем». С-Пб., 2006. С. 57-58.

14. Назарова Е.А., Заботкина Е.А. Влияние сублетальной концентраций кадмия на соотношение и структуру лейкоцитов головной и туловищной почек речного окуня (Perca fluviatilis L.) // Мат. межд. науч-практич. конф. «Пробл. иммун., патологии и охраны здоровья рыб-2». Борок-Москвгц 2007. С. 68-72.

15. Назарова Е.А., Заботкина Е.А. Изменение соотношения лейкоцитов в головной и туловищной почках усатого гольца при острой и хронической интоксикациях солями

кадмия // Мат. 2 науч. конф. с уч. стран СНГ «Совр. проблемы физиол. и биохим. водных организмов». Петрозаводск, 2007. С. 104

16. Nazarova Е.А., Zabotkina Е.А. Comparative characteristic of kidney cells of freshwater and sea bony fishes (order Perciformes) // XII European Congress of Ichthyology. Croatia. Dubrovnik, 2007. P. 78-79.

17. Назарова E.A. Влияние сублетальной концентраций кадмия на ультраструктуру клеток туловищной почки речного окуня (Perca Jluviatilis L.) // Тез. докл XIII Межд. мол. школы-конф. «Биол. внутр. вод». Борок. 2007. С. 47.

18. Заботкина Е.А. Некоторые особенности гуморального и клеточного иммунитета лещей оз. Чашницкое и Рыбинского водохранилища / Е.А. Заботкина, Т.Б. Лапирова, Г.М. Чуйко, Е.А. Назарова // Мат. Веер, науч.-практ. конф. «Экол. пробл. уникальных природных и антроп. ландшафтов». Ярославль, 2007. С. 63-68.

19. Назарова Е.А., Заботкина Е.А., Балабанова Л.В. Оценка степени токсичности сублетальных концентраций кадмия для головной и туловищной почек пресноводных костистых рыб // Мат. веер, науч-практ. конф. «Экол. пробл. уник, природ, и антроп. ландшафтов». Ярославль, 2007. С. 188-193.

20. Назарова Е.А., Балабанова Л.В., Заботкина Е.А. Изменение соотношения лейкоцитов в головной почке карпа, гольца и окуня при хронической интоксикации солями кадмия // Мат. III Веер. конф. по водной токсик., посвящ. пам. Б. А. Флерова. «Антроп. влиян. на водные организмы и экосис.». Ч. 2. Борок, 2008. С. 105-109.

21. Nazarova Е.А., Zabotkina Е.А. Specific and nonspecific reactions of miesonephros cells of whiskered loach (Barbatula barbatula (L.)) at influence of cadmium ions sublethal concentration// ХШ European Congress of Ichthyology. Klaipeda. Lithuania, 2009. P. 36-37.

22. Назарова Е.А. Особенности структуры эпителиоцитов канальцев туловищной почки костистых рыб и их взаимосвязь с выполняемыми функциями // Мат. XXVII междун. конф. «Биол. ресурсы Белого моря и внутренних водоемов Европ. Севера». Петрозаводск, 2009. С.380-385.

Подписано в печать 2.11.09. Объем 1 п.л. Заказ 1171. Тираж 100 экз. Отпечатано в типографии Ярославского государственного технического университета 150000 г. Ярославль, ул. Советская, 14а. Тел. 30-56-63

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Назарова, Екатерина Александровна

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Анатомия почек круглоротых и рыб.

1.2. Морфологические и функциональные особенности почек круглоротых и рыб.

1.3. Выделение и осморегуляция.

1.4. Проблема классификации форменных элементов кроветворной ткани.

1.5. Морфология и ультраструктура форменных элементов кроветворной ткани почек костистых рыб.

1.6. Лейкоцитарная формула.

1.7. Клеточные элементы почек костистых рыб не установленного генеза.

1.8. Токсичность и биоаккумуляция кадмия.

1.9. Влияние кадмия на морфо-фупкциональный статус рыб.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Экологическая пластичность структуры ренальной ткани пресноводных и морских костистых рыб"

Выяснение механизмов адаптаций рыб к различным биотическим и абиотическим факторам, систем биотестов для оценки здоровья рыб и определение нормы и патологии в условиях возрастающего антропогенного загрязнения является важным аспектом решения одной из проблем экологии - взаимодействие организма и среды. Согласно концепции биомаркеров, признанной в 1990-е гг., наиболее удачными являются биохимические, физиологические и гистологические показатели (Лукин, Шарова, 2005). Почки рыб, наряду с печенью и жабрами, являются важнейшими маркерами загрязнения, так как они незаменимы в процессе поддержания стабильной внутренней среды организма, включающего водно-солевой баланс, выведение продуктов обмена веществ и ксенобиотиков, формирование неспецифического и специфического иммунитета, синтез ряда гормонов и т.д. (Наточин, 1976; Межнин, 1978; Купер, 1980; Кауфман, 1990; Кондратьева и др.,2001; Микряков и др., 2001; Ellis, 1977; Zapata, 1979). Структура почек у рыб разных экологических групп как в норме, так и при воздействии токсикантов наиболее полно изучена на уровне световой микроскопии (Наточин, 1976; Турдаков, 1977; Аминева, Яржомбек, 1984; Кауфман, 1990; Галактионов, 1995; Микряков и др., 2001; Brown, 1957; Smith et al., 1970; Boomker, 1979). Однако многие вопросы, касающиеся топких внутриклеточных перестроек в паренхиме про- и мезонефроса у видов в зависимости от различных факторов среды обитания с привлечением электроино-микроскопических приемов отрывочны и не систематизированы. Вместе с тем, результаты таких исследований могут иметь несомненное значение для выяснения адаптивных изменений как к естественным факторам среды, так и к действию токсикантов различной природы, в том числе и тяжелых металлов, одним из которых является кадмий. Решением Европейского сообщества он внесен в «черный список» загрязняющих веществ, представляющих наибольшую опасность для гидробиопгов (Колпакова и др., 1996). С одной стороны, результаты исследований показали, что уровень аккумуляции кадмия в почках рыб по сравнению с другими органами наибольший (Кашулин, Гладышева, 2005; Борисов, 2006; Моисеенко и др., 2006; Чернова и др., 2006; Kraal, 1995; Berntssen, 2000; De Smet, Blust, 2001; Szebedinszky et al., 2001; Chowdhury et al., 2004; Franklin et al., 2005), с другой, — большинство работ направлено на изучение его действия в основном лишь у важных в рыбоводстве лососевых и карповых рыб, скудно представлены сведения по изучению свободноживущих видов (Elasser et al., 1986; Beena, Viswaranjan, 1988; De Smet, Biust, 2001; Hansen et al., 2002; Drastichova et al., 2003; Chowdhury et al., 2004). К тому же, имеющиеся в литературе данные по влиянию ионов кадмия на функционирование почек и патологические изменения и них достаточно противоречивы, практически не изучены изменения тонкой структуры клеток почек, особенно интерстициальной ткани, на ранних сроках действия сублетальных концентрации данного токсиканта (Dallinger et al., 1997; De Conto Cinier C. et al., 1997; Drastichova et al., 2003; Franklin et al, 2005; Panchanathan, Vattapparumbil, 2006). Исследование поставленных вопросов во многом поможет расширить знания об устойчивости различных видов костистых рыб, как важного компонента водных экосистем, к изменению физико-химических свойств природных вод (в том числе при антропогенном загрязнении их тяжелыми металлами).

1. Исследовать структуру ренальной ткани про- и мезонефроса и выявить ее особенности у пресноводных и морских видов рыб, принадлежащих к отрядам Cypriniformes и Perciformes.

2. Установить зависимость соотношения различных форм лейкоцитов в почках рыб от эколого-физиологических особенностей видов.

Научная новизна

Для 12 видов рыб отр. Cypriniformes и Perciformes, обитающих в пресных и соленых водах получены новые данные о количественном соотношении различных форм лейкоцитов в почках. Обнаружена корреляционная связь этого показателя с чувствительностью рыб к дефициту кислорода в воде. Впервые изучена ультраструктура лейкоцитов у Barbatula barbatula (L.), Cobitis taenia L., Stizostedion volgense (Gmelin), Trachurus mediterraneus (Staindachner) и Diplodus annularis (L.). Выявлены клетки с радиально расположенными везикулами в почках Carassius auratus (L.), Abramis ballerus (L.). Barbatula barbatula (L.), Cobitis taenia L., Diplodus annularis (L.). Палочковые клетки — в почках Cobitis taenia L., Stizostedion lucioperca (L.), Stizostedion volgense (Gmelin) и Diplodus annularis (L.). Бокаловидные клетки - проксимальном отделе канальцев Stizostedion volgense (Gmelin). В паренхиме про- и мезонефроса исследованных видов впервые описаны клетки, структура которых подобна ионтрапепор гирующим клеткам жаберного эпителия рыб.

Впервые установлены отличия в количестве и размерах ряда клеточных органелл у эпителиоцитов морских и пресноводных видов. Выявлено 2 типа эпителиоцитов проксимального отдела канальцев у всех исследуемых видов, различающихся по линейным размерам и качественным характеристикам. Описан промежуточный отдел канальцев в нефроне синца и судака. Обнаружено наличие микроресничек в щеточной каемке эпителиоцитов проксимального отдела канальцев.

Установлено некробиотическое действие ионов кадмия на мезонефрос карпа, гольца и окуня, проявившееся в изменении площади, занимаемой интерстициальной тканью. У гольца выявлены изменения в количественном соотношении различных форм лейкоцитов в пронефросе, а также в ультраструктуре клеток лимфомиелоидной и нефрогенной тканей мезонефроса.

Теоретическая и практическая значимость

У костистых рыб выявлена взаимосвязь структурной организации почек с выполняемыми ими функциями, которая отражает адаптационные возможности рыб к дефициту кислорода и к обитанию в пресных и соленых водах. Полученные данные являются существенным вкладом в общие сведения об экологии этой группы рыб. Результаты исследований, посвященных действию ионов кадмия на рыб, расширяют знания о неспецифическом ответе клеток и тканей почек и могут использоваться при оценке экологического состояния водных объектов к действию хронического комплексного загрязнения водоемов. Материалы диссертационной работы могут быть использованы при чтении курса лекций: «Сравнительная цитология и гистология» и «Водная токсикология».

Заключение Диссертация по теме "Экология", Назарова, Екатерина Александровна

ВЫВОДЫ

1. В мезонефросе костистых рыб доля лимфомиелоидной ткани от общей площади ренальной ткани убывает в ряду: пресноводные карпообразные - пресноводные окунеобразные - морские окунеобразные. Различие в соотношении нефрогенной и лимфомиелоидной тканей является адаптацией, позволившей окунеобразным освоить водоемы с широким диапазоном солености.

3. У пресноводных и морских костистых рыб ультраструктура агранулоцитов, бокаловидных, палочковых клеток и клеток с радиально-расположенными везикулами сходна. Среди клеток миелоидного ряда выявлено 5 типов нейтрофилов и 3 типа эозинофилов по структурным признакам вторичных гранул. Зависимость ультраструктуры гранул от обитания видов в морской или пресной воде не обнаружена.

4. Ультаструктура основных отделов нефрона и хлоридных клеток у морских окунеобразных отличаются от таковой у пресноводных окунеобразных и карпообразных толщиной базальной мембраны боуменовой капсулы, большим количеством митохондрий в эпителиоцитах и хлоридных клетках, большим количеством везикул, а также более развитой системой клеточных мембран и гладкого эндоплазматического ретикулума в эпителиоцитах канальцев. Это отражает различие в способах ионной регуляции и является адаптациями к жизни в воде с различной соленостью.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Изучение структуры про - и мезонефроса показало, что изучаемые органы всех исследованных видов костистых имеют единый план строения с круглоротыми и другими группами рыб. В состав пронефроса входят обязательные компоненты: ретикулярная строма, кроветворная ткань, интерренальная ткань и эндотелий сосудов, создающий сосудистое русло. В состав мезонефроса - ретикулярная строма, кроветворная ткань, нефрогенная ткань и кровеносные синусы. Кроветворная ткань обоих органов содержит эритроциты, лимфоциты, плазматические клетки, макрофаги, мелано-макрофагальные центры и различные типы гранулоцитов.

Почки костистых рыб - это типичные полифункциональные органы. Они входят в состав наиболее древней почечно-селезеночной системы, осуществляющей кроветворную функцию, при этом пронефрос является основным органом кроветворения круглоротых и рыб. Кроме того, пронефрос входит в состав эндокринной системы, мезонефрос выполняет выделительную, осмо - и ионрегулирующую функции.

Вместе с тем, анализ полученных результатов однозначно свидетельствует о видовой специфике структуры тканей и клеток про- и мезонефроса как у пресноводных, так и морских костистых рыб.

Обнаружено, что в мезонефросе костистых рыб доля лимфомислоидной ткани от общей площади ренальной ткани убывает в ряду: пресноводные карпообразные -пресноводные окунеобразные — морские окунеобразные. Различное соотношение лимфомиелоидной и нефрогенной тканей возможно связано с увеличением количества нефронов на единицу площади ренальной ткани и последующей специализацией нефрогенной ткани в процессе эволюции, что позволило окунеобразным освоить водоемы с широким диапазоном солености.

Показано, что видовые особенности в количественном соотношении различных форм лейкоцитов сохраняются и в головной, и в туловищной почках исследованных видов, обитающих в пресных и соленых водах. Тем не менее, метод кластерного анализа позволил выделить 4 группы рыб, обладающие наибольшим сходством в соотношении различных типов лейкоцитов. Несмотря на то, что в литературе неоднократно упоминалось о зависимости соотношения лейкоцитов в периферической крови от факторов среды, типа питания, образа жизни, нам не удалось выявить связь лейкограмм почек у исследованных видов рыб с миграционной активностью или типом питания. Вместе с тем, наблюдается определенная зависимость количественного соотношения различных форм лейкоцитов в пронефросе от чувствительности рыб к дефициту кислорода в воде. По-видимому, адаптация рыб к кислородному режиму водоемов оказывается более важным и глубоким фактором, определяющим, в конечном итоге, параметры неспецифической защиты организма.

Анализ тонкой ультраструктуры лимфоцитов, плазматических клеток, макрофагов, мелано-макрофагальиых центров у костистых видов показал структурное подобие этих типов клеток с круглоротыми и другими группами рыб.

Различия выявлены в структуре вторичных специфичных гранул нейтрофилов и эозинофилов у исследованных видов рыб. На ультраструктурпом уровне выделено 5 типов гранул у нейтрофилов и 3 типа - у эозинофилов. Основываясь на собственных результатах и литературных данных выявлено, что как правило, гранулы нейтрофилов у всех карпообразных имеют сходную структуру (исключение составляют гранулы гольца обыкновенного), а гранулы окунеобразных отличаются большим разнообразием у морских и пресноводных видов. Анализ структуры гранул эозинофилов не выявил подобной тенденции. Помимо выше описанных гранулоцитов, у берша обнаружены клетки с III типом гранул, которые мы отнесли к базофилам, а у морского карася гранулоциты с гранулами, характерными как для нейтрофилов, так и эозинофилов.

Следует отметить, что впервые изучена ультраструктура лейкоцитов у Barbatula barbatula (L.), Cobitis taenia L., Slizostedion volgense (Gmelin), Trachurus mediterraneus (Staindachner) и Diplodus annularis (L.).

Таким образом, на основании полученных результатов и литературных данных, можно сделать вывод о том, что у разных видов круглоротых и рыб ультраструктура агранулоцитов подобна и не зависит от условий среды обитания. Несмотря на разнообразие типов и морфологических форм гранулоцитов у пресноводных и морских рыб, нам также не удалось обнаружить зависимости их ультраструктуры от среды обитания видов, но, привлекая морфометрические данные, можно говорить о том, что вторичные гранулы клеток являются признаками видовой специфики мислоидного ряда, которые у разных видов рыб могут быть связаны с различным набором ферментов и других антибактериальных факторов, а также характера их накопления в гранулах.

Несмотря на морфологическое разнообразие лейкоцитов, функция данных клеток заключается в осуществлении иммунных реакций, в результате которых уничтожаются чужеродные антигены, а так же собственные измененные клетки. Данные функции характерны и для лейкоцитов круглоротых и других групп рыб, а также высших позвоночных, однако имеется ряд морфологических и физиологических особенностей, присущих только костистым рыбам.

Обнаруженные нами в про - и мезонефросе клетки с радиально расположенными везикулами и палочковые клетки у всех исследованных видов, а также данные типы клеток у ранее исследованных видов рыб имеют сходную ультраструктуру, независящую от среды обитания видов.

Клетки с радиально расположенными везикулами нами впервые описаны в почках Carassius auratus (L.), Abramis ballerus (L.), Barbatula barbatula (L.), Cobitis taenia L., Diplodus annularis (L.).

Палочковые клетки - в почках Cobitis taenia L., Stizostedion lucioperca (L.), Stizostedion volgense (Gmelin) и Diplodus annularis (L.).

При рассмотрении функций этих клеток мы придерживаемся версии об их участии в осуществлении неспецифических защитных реакций.

Таким образом, разнообразие типов клеток в пределах одной систематической группы, наличие смешанных типов лейкоцитов свидетельствует о незаконченном процессе дифференцировки этих типов клеток, а дискуссии о функциях палочковых клеток и клеток с радиально расположенными везикулами, обнаруженные нами в мезонефросе берша, бокаловидные клетки свидетельствуют о незаконченном процессе формирования в филогенезе защитных реакций организма у костистых рыб и о возможных будущих изменениях во взглядах на функционирование механизмов неспецифической защиты организма.

В паренхиме головной и туловищной почек пресноводных и морских костистых рыб нами обнаружены клетки, ультраструктура которых подобна хлоридным (ион гранспортирующим) клеткам жаберного эпителия рыб. Особенности ультраструктуры этих клеток у исследованных нами пресноводных и морских видов рыб напрямую связаны с их функциями, которые, по-видимому аналогичны таковым в жабрах рыб и заключаются в поддержании ионного баланса в организме. Что является адаптацией к жизни костистых рыб в воде с различной соленостью.

Анализ ультраструктуры основных отделов нефрона всех видов исследуемых рыб показал единый план строения. Следует отметить, что размеры подоцитов и всех типов эпителиоцитов варьируют, но нами не выявлено зависимости этих показателей от видов, обитающих в пресной или морской воде. Тем не менее, вне зависимости от среды обитания для всех исследованных видов показано, что длина эпителиоцитов, зоны эндоцитоза и щеточной каемки, диаметр микроворсинок меняются сходным образом от проксимального к дистальному отделу нефрона и являются критерием для выделения двух типов эпителиоцитов проксимального отдела канальцев.

Выявлено 2 типа эпителиоцитов в проксимальном участке канальца и наличие в составе щеточной каемки не только микроворсинок, но и микроресничек.

Эпителиоциты промежуточного отдела канальцев нефрона нами описаны только для синца и судака, что скорее всего, связано с трудностями обнаружения данного отдела канальцев у других костистых. Структурное подобие этих клеток тонкому сегменту петли Генле позволяет предположить и их сходство функций.

Следует отметить, что такие признаки, как количество и плотность секреторных гранул и лизосом, положение митохондрий, плотность цитоплазмы, различные включения и.т.д., скорее всего, связаны пе с видовыми особенностями в морфологии различных типов эпителиоцитов, а с функциональной активностью клеток в определенный период времени.

Выявленные нами особенности в строении почечного тельца у морских и пресноводных видов, свидетельствуют о присутствии у морских видов барьера, трудно проницаемого для воды, поступающей в боуменову капсулу в результате ультрафильтрации. Показаны различия в количестве митохондрий и размерах микроворсинок в щеточной каемке эпителиоцитов I и II типов проксимального участка канальца у пресноводных и морских видов. В дистальном отделе канальцев наблюдаются отличия в количестве везикул и митохондрий в клетках пресноводных и морских костистых рыб. Исключение составляет обыкновенная щиповка, количество митохондрий у которой превышает этот показатель по сравнению с морскими видами. И если различия в количестве митохондрий между морскими и пресноводными видами связывают с разницей в осмотическом давлении крови, то выявленная особеннось у щиповки, по-видимому, компенсирует маленькие размеры этих орагнелл.

Таким образом, анализ структуры про- и мезонефроса у морских и пресноводных костистых рыб, принадлежащих к отрядам карпообразные и окунеобразные, позволил выявить как общие черты, характерные для всех видов, так и видоспецифичные признаки, позволяющие связать их со средой обитания и особенностями обмена веществ исследованных видов.

Анализ количественного соотношения различных форм лейкоцитов в пронефросе карпа, гольца и окуня под действием ионов кадмия подтвердил неспецифический характер сдвига соотношения клеток в сторону лейкопении и нейтрофилии, характерный при действии большинства токсикантов. Впервые исследован этот показатель у усатого гольца ВагЬаШ1а ЬагЬаЫа (Ь.). О причине различий в индексе сдвига лейкоцитов между карпом, гольцом и окунем однозначно сказать нельзя, так как они могут быть связаны как с различными концентрациями и сроками воздействия кадмием, так и зависеть от возраста и разной интенсивности обменных процессов у рыб.

В работе впервые показано развитие некробиотических процессов под влиянием кадмия, указывающих на течение воспалительной реакции в организме. Различие в протекании некробиоза в интерстициальной ткани почек, выразившееся в уменьшении доли этой ткани без некробиотических признаков от общей площади ренальной ткани у всех исследованных видов, возможно связано не только с различными факторами, перечисленными выше, но и со степенью развития ткани в мезонефросе у этих видов рыб.

Под действием ионов кадмия произошло опустошение специфичных гранул гранулоцитов (у эозинофилов всех исследемых видов, у базофилов карпа и нейтрофилов гольца) расширение цистерн шероховатого эндоплазматического ретикулума в лимфоцитах и КРВ, увеличение количества и размеров фагосом в макрофагах свидетельствуют об усилении секреторной, синтетической и фагоцитарной активности лейкоцитов и способствуют снижению повреждающего эффекта токсиканта.

Изменение структуры мезонефроса исследуемых видов также характеризуется повреждением митохондрий во всех клетках нефрогенной и лимфомиелоидной тканей, образованием ядерной петли в лейкоцитах, увеличением количества секреторных гранул, размыканием межклеточных контактов в проксимальных и дистальных отделах канальцев и последующим разрушением эпителиоцитов, образующих эти отделы, лизисом содержимого палочковых клеток, гиперемией кровеносных сосудов клубочка, утолщением базальной мембраны боуменовой капсулы и инфильтрацией нефрогенной ткани эритроцитами, лимфоцитами, нейтрофилами и КРВ

Таким образом негативное влияние кадмия выражается в развитии воспалительной реакции ночек, выявленой на клеточном и субклеточном уровнях уже на начальном этапе воздействия. Данные изменения имеют строго определенную последовательность и свидетельствуют о тяжелых функциональных нарушениях органа, в том числе концентрационной способности почек и, как следствие, возможной интоксикации рыб в результате нарушения выведения продуктов обмена.

Выявленную нами последовательность изменений в ренальной ткани под действием ионов кадмия можно рассматривать как систему неспецифических реакций на действие большинства токсикантов. Данные изменения могут служить дополнительным гистологическим критерием при проведении мониторинговых исследований по оценке влияния на рыб антропогенных факторов среды.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Назарова, Екатерина Александровна, Борок

1. Алмазов В. А., Афанасьев Б. В., Зарицкий А. Ю., Мамаев Н. Н., Рудакова Т. Л., Фрейдлин И. С., Цвейбах А. С., Шишков А. Л. Физиология лейкоцитов человека. Л.: Наука, 1979. 232 с.

2. Аминева В. А., Яржомбек А. А. Физиология рыб. М.: Легкая и пищевая промышленность, 1984. 200 с.

3. Антипова П. С. Сезонные и возрастные изменения морфологического состава крови карпа// Вопросы ихтиологии. 1954. №3. С. 120-121.

4. Аревшанян С. Г. Некоторые аспекты биоиндикации загрязнения тяжелыми металлами системы «вода-илы» р. Раздан // Тез. докл. всероссийской конференции: «Биоиндикация в мониторинге пресноводных экосистем». Санкт-Петербург. 2006. С. 8-9.

5. Балабанова Л. В. Влияние кадмия на ультраструктуру иммунокомпетентных клеток мозамбикской тилапии Oreochromis mossambicus II Цитология. 1997. Т. 39. N 8. С. 677680.

6. Балабанова JI. В. Ультраструктура иммунокомпетентных клеток почек рыб сем. Cyprinidae // Биология внутренних вод. 1997. № 2. С. 65-69.

7. Балабанова Л. В. Влияние кадмия на ультраструктуру иммунокомпетентных клеток селезенки и почек осетра Acipenser baeri Brandt // Биология внутренних вод 1998. N 2. С. 80-85.

8. Балабанова Л. В. Ультраструктура гранулоцитов некоторых видов окунеобразных рыб // Биология внутренних вод. 2002. № 1. С. 79-84.

9. Балабанова Л. В. Палочковые клетки рыб разных видов // Биология внутренних вод. 2006. № 2. С. 83-88.

10. Балабанова Л. В., Заботкина Е. А. Ультраструктура клеток иммунной системы карпа Cyprinus carpió в норме и при иммунизации // Цитология. 1988. Т. 30. № 6. С. 657-661.

11. Балабанова Л. В., Заботкина Е. А., Лапирова Т. Б., Микряков В. Р. Влияние карбофоса и иммунизации бактериальным антигеном на некоторые показатели иммунной системы карпа Cyprinus carpió L. (Cyprinidae) // Вопросы ихтиологии. 2003. Т. 43. № 2. С. 262-271.

12. Баранникова И. А., Баюнова Л. В., Дюбин В. П., Саснко И. И., Семенкова Т. Б. Содержание кортизола в сыворотке крови и функция интерреналовой железы в жизненном цикле осетра Acipenser gueldenstaedtii II Вопросы ихтиологии. 2000. Т 40. №3. С. 379-388.

13. Баранникова И. А., Васильева Е. В., Тренклер И. В., Цепелован П.Г. Интерренальная железа в жизненном цикле проходных осетровых сем. Acipcnseridae // Вопросы ихтиологии. 1978. Т 18. Вып. 4(111). С. 719-735.

14. Белоцкий С. М., Авгалион Р. Р. Воспаление. Мобилизация клеток и клинические эффекты. М.: Изд-во БИНОМ, 2008. 240 с.

15. Бикбулатова Е.М, Бикбулатов Э.С., Степанова И.Э. Изменчивость показателей органического вещества в Рыбинском водохранилище // Мат. докл. конференции «Актуальные проблемы экологии Ярославской области». Ярославль. 2008. С. 121-124.

16. Борисов М. Я. Накопление тяжелых металлов в тканях и органах леща как показатель токсического загрязнения оз. Воже // Тез. докл. всероссийской конференции: «Биоиндикация в мониторинге пресноводных экосистем». Санкт-Петербург. 2006. С. 23-24.

17. Бочаров Ю. С. Эволюционная эмбриология позвоночных. М.: Издательство московского университета, 1988. 232 с.

18. Бубенкова Е. В. Назарова Е. А. Действие фенола и нафталина на структуру селезенки и туловищной ночки карася серебряного // В сб. Биотехнология охране окружающей среды. М.: МГУ, 2005. С. 68-71.

19. Бут П. Г., Муравьев Р. А., Фомина В. А., Роговин В. В. Антимикробная активность миелопероксидазы пероксидазосом нейтрофила // Известия АН. Серия биологическая. 2002. №3. С. 266-270.

20. Буторин Н. В. Гидрологические процессы и динамика водных масс в водохранилищах Волжского каскада. JL: Наука, 1969. 322 с.

21. Буторин Н.В., Зиминова H.A., Курдин В.П. Донные отложения всрхневолжских водохранилищ. JL: Наука, 1975. 160 с.

22. Валедская О. М., Сайед М. А., Зайцев В. Ф. Влияние тяжелых металлов на некоторые показатели иммунитета карпа // Исследования по рыбоводству в регионе Северного Прикаспия. 2001. С. 189-194.

23. Випниченко JI. И. Сравнительная ультраструктура нефрона. Атлас. JL: Наука, 1980. 136 с.

24. Виноградов Г. А. Процессы ионной регуляции у пресноводных рыб и беспозвоночных. М.: Наука, 2000.216 с.

25. Волкова О. В., Елецкий Ю. К. Основы гистологии с гистологической техникой. М.: Медицина, 1971.272 с.

26. Волынкип Ю. Л. Лейкоциты и тромбоциты периферической крови некоторых рыб отряда окунеобразных (Perciformes) // Вопросы ихтиологии. 1983. Т. 23. Вып. 5. С. 865869.

27. Гдовский П. А., Ружинская H.H., Мензиков С.А. Структурно-функциональная организация периферического отдела обонятельной системы рыб // Физиология и токсикология пресноводных животных. Сборник статей. Рыбинск: Рыбинский дом печати, 2007. С. 46-99.

28. Гинецинский А. Г. Физиологические механизмы водно-солевого равновесия. М-Л.: Наука, 1964. 426 с.

29. Говядинова А. А. Исследование локализации и особенностей строения кроветворной ткани у осетровых рыб // Автореф. . дис. канд. биол. наук. М.: Издательство московского университета, 1998. 24 с.

30. Говядинова А. А., Ланге М. А., Хрущев Н. Г. Гемопоэтические органы уникальной локализации у осетровых рыб // Онтогенез. 2000. Т. 31. С. 440-445. Головина Н. А., Тромбицкий И. Д. Гематология прудовых рыб. Кишинев: Штиинца, 1989. 160 с.

31. Голодец Г. Г. Состав крови выращиваемой молоди осетра, леща и судака // Вопросы ихтиологии. 1954. Вып. 2. № 2. С. 114-119.

32. Глушко М. П. Головная почка рыб как кроветворный орган осетровых // В Сб. «Эколого-биологические проблемы Волжского региона и Северного Прикаспия». Астрахань. 2002. С. 118-119.

33. Гуртовский Н. Н., Матвеев Б. С., Дзержинский Ф. Я. Практическая зоотомия позвоночных. М.: Высшая школа, 1976. 351 с.

34. Житенева Т. С. О питании леща в Рыбинском водохранилище // Труды биологической станции «Борок» АН СССР. 1958. Вып. 3. С. 259-272.

35. Житенева Л. Д., Макаров Э. В., Рудницкая О. А. Основы ихтиогематологии (в сравнительном аспекте). Ростов-на-Допу: Эверест, 2004. 312 с.

36. Заботкина Е. А., Балабанова Л. В. Изменение ультраструктуры иммунокомпетентных клеток селезенки при иммунизации карпа Cyprinus carpió L. // Биология внутренних вод: информационная бюллетень. 1989. N 82. С. 64-71.

37. Заботкина Е. А., Лапирова Т. Б. Влияние тяжелых металлов на иммуно-физиологический статус рыб // Успехи современной биологии. 2003. Т. 123. № 4. С. 411-418.

38. Заботкина Е. А., Лапирова Т. Б. Влияние кадмия на структурно-функциональное состояние иммунокомпетентных органов карпа // Мат. докл. конференции: «Современные проблемы физиологии и биохимии водных организмов». Петрозаводск. 2004. С.46-47.

39. Заварзин А. А. Основы сравнительной гистологии. Л.: Издательство ленинградского университета, 1985. 400 с.

40. Зубаренко А. В., Кравченко Л. Г., Касьяненко Г.В. Нефропатп у д1тей з шдвищеним вмютом свинцю та кадм1ю в сироватщ кров1 // Пед1атр1я, акушерство та гшекол. 2000. N 6. С.85.

41. Иванова М. Н. Соотношение кормовых объектов в пище щуки и судака и интенсивность их нагула // Биология внутренних вод: информационная бюллетень. 1977. №34. С. 47-51.

42. Иванова Н. Т. Материалы к морфологии клеток крови рыб. Ростов-на-Дону: РГПИ, 1970. 136с.

43. Иванова Н. Т. Атлас клеток крови рыб. М.: Легкая и пищевая промышленность, 1983. 184 с.

44. Иванова Н. Т. Система крови (материалы к сравнительной морфологии системы крови человека и животных). Ростов-на-Дону: РГПИ, 1995. 156 с.

45. Калашникова 3. М. О классификациях морфологических элементов крови рыб // Вопросы ихтиологии. 1976. Т. 16. № 3 (98). С. 510-524.

46. Карпанин Д. П., Иванов А.П. Рыбоводство. М.: Пищевая промышленность, 1967. 372 с. Карпевич А. Ф. Теория и практика акклиматизации водных организмов. М.: Пищевая промышленность, 1975. 432 с. Kapp Я. Макрофаги. М.: Медицина, 1978. 187 с.

47. Касьяненко Г. В., Зубаренко О. В., Кравченко Л. Г. Вплив солей важких метал1в на стаи серцево-судинно1 системи у дггей // Пед1атр1я, акушерство та гшекол. N 2. 2000. С.47

48. Кауфман 3. С. Эмбриология рыб. М: ВО Агропромиздат, 1990. 272 с.

49. Козлов В. А., Громыхина Н. Н. Влияние макрофагов на гемопоэз и иммунопоэз //

50. Итоги науки и техники. Сер. Иммунология. 1984. Т. 13. с. 195-216.

51. Козловская В. И., Герман А. В. Полихлорированные бифенилы и полиароматическиеуглеводороды в экосистеме Рыбинского водохранилища // Водные ресурсы. 1997. Т.24. № 5. С. 563-569.

52. Колпакова Е., Лулоф И., Руттемаан Й. Проект «Волга в Череповце». Отчет об исследованиях, проведенных в г.Череповце в августе 1995 г. — Н.Повгород: Экоцентр «Дронт», 1996. 23 с.

53. Кондратьева И. А., Киташова А. А., Ланге М. А. Современные представления об иммунной системе. Вестник московского университета. Сер. 16. Биология. 2001. № 4. С. 11-20.

54. Коновалов Ю. Д. Связывание кадмия и ртути белками и низкомолекулярными тиоловыми соединениями рыб (обзор) // Гидробиологический журнал. 1993. Т.29. № 1. С. 42-51.2 ^

55. Короткое С. М., Скульский И. А. Изменение влияния Сс1 на дыхание изолированных митохондрий печени крысы после их преинкубации с Са 2+, Бг2+, Ва2+, Мп2+ и рутениевым красным // Цитология. 1996. Т. 38. № 4/5. С. 500-510.

56. Котов А. М. Сезонная динамика морфологического состава и углеводного обмена крови у ряда черноморских рыб // Тез. докл. всесоюзной конференции «Экологическая физиология рыб». 1973. С. 169-170.

57. Кэрролл Р. Палеонтология и эволюция позвоночных в 3-х томах М.: Мир, 1992. Т. 1. 280 с.

58. Лапирова Т. Б. Влияние сублетальных концентраций ртути, меди и кадмия на иммунофизиологическое состояние молоди ленского осетра // Биология Внутренних вод. 2001. №3. С. 80-84.

59. Линник П. Н., Искра И. В. Кадмий в поверхностных водах; содержание, формы нахождения, токсическое действие // Гидробиологический журнал. 1997. Т. 33. № 6. С. 72-87.

60. Манько В. М., Хаитов Р. М. Макрофаги: гетерогенность и роль в иммунных реакциях // Успехи современной биологии 1985. Т. 99. С. 110-122.

61. Мартемьянов В. И. Содержание катионов в плазме, эритроцитах и мышечной ткани рыб Волжского плеса Рыбинского водохранилища // Журнал эволюционной биохимии и физиологии. 1992. Т. 28. № 5. С. 576-581.

62. Мартемьянов В. И. Закономерности изменений уровня натрия в эритроцитах рыб при адаптации к температуре // Известия РАН. 2009. №4. С.491-495.

63. Матей В. Е. Жабры пресноводных костистых рыб: Морфофункциопальная организация, адаптация, эволюция. СПб.: Наука, 1996. 204 с.

64. Микряков В. Р., Лапирова Т. Б. Влияние солей некоторых тяжелых металлов на картину белой крови молоди ленского осетра Acipenser bueri Brandt // Вопросы ихтиологии. 1997. Т. 37. № 4. С. 538 542.

65. Миронов А. А., Комиссарчик Я. Ю., Миронов В. А. Методы электронной микроскопии в биологии и медицине. СПб.: Наука, 1994. 400 с.

66. Мурадова Г. Р., Габибов М. М., Мусаев Б. С., Рабаданова А. И. Влияние хлорида кадмия на показатели липидного обмена рыб // Вестник ДГУ. 2006. № 1. С. 94—98.

67. Наточин Ю. В. Ионрегулирующая функция почки. JT.: Наука, 1976. 268 с.

68. Наумов Н. П., Карташев Н. Н. Зоология позвоночных в 2 частях. М.: Высшая школа,1979. 4.2. 333 с.

69. Немова Н. Н. Биохимические эффекты накопления ртути у рыб. М.: Наука, 2005. 164 с. Никольский Г. В. Экология рыб. М.: Высшая школа, 1974. 357 с.

70. Отюкова Н. Г. Некоторые аспекты гидрохимического режима малой реки в условиях зоогенного нарушения // Водные ресурсы. 2009. Т. 36. №5. С. 1-6.

71. Отюкова Н. Г., Цельмович О. J1., Крылов А. В. Влияние количества атмосферных осадков и зарегулирования стока на химический состав воды и зоопланктон малой реки // Биология внутренних вод. 2007. № 3. С. 48-55.

72. Ошмарин П.Г., Ошмарин А.П. Мультиорганность функций как одна из основ филогенетических изменений органов // Эволюционные исследования. Вавиловские чтения. 1988. С. 123-125

73. Панфилов Н. Д. Фомин А. А. Краткий справочник фотолюбителя. М.: Искусство, 1985. 367 с.

74. Поддубный А. Г. Экологическая топография популяций рыб в водохранилищах. Л.: Наука, 1971.312 с.

75. Покровский В. М., Коротько Г. Ф. Физиология человека. В 2-х томах. М.: Медицина, 1998. Т. 2. 368 с.

76. Половкова С. Н. Питание синца и снетка на различных биотопах Рыбинского водохранилища // Труды ИБВВ АН СССР «Биологические и гидрологические факторы местных перемещений». 1968. Вып. 16 (19). С. 147-165.

77. Попов В. С. Картина крови в онтогенезе рыб в условиях нормы и патологии. Люберцы: ПИК. ВИНИТИ, 1986. 30 с.

78. Пронина С. В., Пронин H. М. Тканевые базофилы сиговых рыб в норме и при заражении цистодами // Тез. докл. 10-й конф. украинского общества паразитологов. Одесса-Киев, 1986. Ч. 2. С. 139.

79. Пронина С. В., Пронин H. М. Взаимоотношения в системе гельминт- рыбы. М.: Наука, 1988. 139 с.

80. Проссер Л. Сравнительная физиология животных. Пер. с англ. под ред. Смирнова, В 3-х томах. М: Мир, 1977. Том. 1. 608 с.

81. Проценко В. А., Шпак С. И. Функциональная и метаболическая характеристика тканевых базофилов и базофильных грапулоцитов крови // Успехи современной биологии. 1983. Т. 95. Вып. 3. С. 408-420.

82. Пустовит Н. С., Пустовит О. П. Некоторые гематологические показатели молоди камчатской микижи Parasalmo mykiss // Вопросы ихтиологии. 2005. Т. 45. № 5. С. 680688.

83. Румянцев H. Н. О ретикуло — эндотелии и строении кроветворных органов некоторых видов костистых рыб // Архивы анатомии, гистологии и эмбриологии 1939. Т. 21. № 2. С. 162-180.

84. Сарис Н. Е. Л., Карафоли Э. Роль митохондрий в перераспределении внутриклеточного кальция: исторический обзор // Биохимия. 2005. Т. 70. Вып. 2. С. 231-239.

85. Световидов А. Н. Рыбы Черного моря. М.: Наука, 1964. 550с.

86. Серпунин Г. Г., Коробейникова Е. Г. Реакция системы крови карпа на воздействие тяжелых металлов П Мат. докл. I Конгресса ихтиологов России. Астрахань. 1997. С. 237-238.

87. Смирнова Л. И. О физиологии зернистых лейкоцитов рыб // Вопросы ихтиологии. 1968. Т. 8. Вып. 5 (52). С. 939-948.

88. Смит Л. С. Введение в физиологию рыб. М.: Агропромиздат, 1986. 168 с. Солдатов А. А. Особенности организации и функционирования системы красной крови рыб // Журнал эволюционной биохимии и физиологии. 2005. Т. 41. № 3. С. 217223.

89. Строганов П. С. Экологическая физиология рыб. М.: МГУ, 1962. 144 с.

90. Токин Б. П. Общая эмбриология. М: Высшая школа, 1977. 512 с.

91. Точилина Л. В. Лейкоцитарная формула морских рыб // Гидробиологический журнал. 1994. Т. 30. № 3. С. 50-57.

92. Точилина Л. В. Картина крови у пелагических и придонных морских рыб при различной скорости плавания // Гидробиологический журнал. 1997. Т. 33. № 1. С. 9096.

93. Фортунатов М. А. Цветность и прозрачность воды Рыбинского водохранилища как показатели его режима // Труды Института биологии водохранилищ АН СССР. Москва-Ленинград. 1959. Вып.2 (5). С. 246-357. Фрейдсльф Е. И. Гематология. М.: Медгиз., 1947. 442 с.

94. Флеров Б. А., Томилина И. И., Кливленд Л., Баканов А. И., Гапеева М. В. Комплексная оценка состояния донных отложений Рыбинского водохранилища // Биология внутренних вод. 2000. №2. С. 148-155.

95. Хэм Ф., Кормак Д. Гистология. В 5 томах. Пер. с анг., под ред. Афанасьева, Ченцова. М. Мир, 1982. Т. 2. 120 с.

96. Черфас Б. И. Рыбоводство в естественных водоемах. М.: Пищспромиздат, 1956. 468 с. Шубникова Е. А. Лекции по гистологии. М.: МГУ, 1974. 272 с.

97. Яржомбек А. А., Лиманский В. В., Щербина Т. В., Бекина Е. Н., Лысенко П. В. Справочник по физиологии рыб. М.: Агропромздат, 1986. 192 с.

98. Ярыгин Н. Е., Серов В. В. Атлас патологической гистологии. М.: Медицина, 1977.200 с. Ястребов М .В. Об основах и способах филогенетического преобразования органов и функций // Журнал общей биологии. 1995. Т.56. №6. 662-676.

99. Яхненко В. М. Сезонная и возрастная динамика морфологического состава периферической крови некоторых рыб озера Байкал // Автореф. . канд. биол. наук. Москва. 1980. 24с.

100. Agius C., Roberts R. J. Melano-macrophage ccnters and their role in fish pathology // Journal of Fish Diseases. 2003. N 9. V. 26. P.499-509.

101. Barber D. L., Westermann J. E. M. Occurrence of the periodic acid-Schiff positive granular leukocyte (Pas-GL) in some fishes and its significance // Journal of Fish Biology. 1978. V. 12. P. 35-43.

102. Barber D. L., Westermann J. E. M., Jensen D. N. New observations on the rodlet cell (Rhabdospora thelohani) in the white sucker Catostomus commersoni (Lacepede): Lm and Em studies // Journal of Fish Biology. 1979. V.14. № 3. P. 277-284.

103. Barber D. L., Westermann, J. E. M. Comparison of the DNA of nuclei of rodlet cells and other in the chub Semotilus atromaculatus: hybridization in situ // Canadian Journal of Zoology. 1986. V. 64. P. 801-804.

104. Barber D. L., Westermann J. E. M, Whete M. G. The blood cells of the Antarctic icefish Chaenocephalus aceralys Lonnberg: light and electron microscopic observation // Journal of Fish Biology. 1981. V. I9.№ l.P. 11-28.

105. Benzer S. S., GUI A., Yilmaz M. The finding biology of Tinea tinea L., 1758 living in Hirfanli Dam Lake // Fen Bilimleri Dergisi. 2007. C. 28. S. 1. P.40-50.

106. Berntssen M. H. G., Lundebye A-K, Hamre K. Tissue lipid peroxidative responses in Atlantic salmon (Salmo salar L.) per fed high levels of dietary copper and cadmium // Fish Physiology and Biochemistry. 2000. N 1. V. 23. P. 35-48.

107. Bielek E. Elektronenmikroscopische Untersuchungen der Blutzellen der Teleostieren. II. Thrombocyten//Zoologische Jahrbücher. 1979. B.IOI. H. 1. S. 19-26.

108. Bielek E. Elektronenmikroscopische Untersuchungen der Blutzellen der Teleostier. III.Granulocyten//Zoologische Jahrbücher fur Anatomie. 1980. B. 103. H. 35. S. 105-121.

109. Bielek E. Elektronmikroscopische Untersuchungen der Blutzellen der Teleostier. IV. Monocyten und makrophagen // Zoologische Jahrbücher fur Anatomie. 1980. B. 103. H. 36. S. 498-509.

110. Bielek E. Developmental stages and localization of peroxidatic activity in the leucocytes of three teleost species (Cyprinas carpio L.; Tinea tinea L.; Salmo gairdneri Richardson) // Cell Tissue Response. 1981. V. 220. P. 163-180.

111. Bielek E. Rodlet cells in teleosts: new ultrastructural observations on the distribution of the cores in trout (Oncorhynchus mykiss, Salmo trutta L.). Journal of submicroscopic cytology and pathology. 2002. V. 34. P. 271-278.

112. Bielek E. Strauss B. Ultrastructure of the granulocytes of the South American lungfish, Lepidosiren paradoxal Morphogenesis and comparison to other leucocytes // Journal of Morphology. 1993. № 1. P. 29-41.

113. Bigaj J., Dulak J., Plytycz B. Lymphoid organs of Gasterosteus aculeatus II Journal of Fish Biology. 1987. V. 31. P. 233-234.

114. Brzoska M. M., Moniuszko-Jakoniuk J. Interactions between cadmium and zinc in the organism // Food and Chemical Toxicology. 2001. V. 39. P. 967-980.

115. Calzada A., Medina A., Gonzales De Canales M. L. Fine structure of the intestine development in cultured sea bream larvae // Journal of Fish Biology. 1998. V. 53. P. 340365.

116. Cannon M. S., Mollenhauer H. II., Cannon A. M., Eurell T. E., Lewis D. H. Ultrastructural localization of peroxidase activity in neutrophil leucocytes of Ictalurus punctata II Canadian Journal of Zoology. 1980. V. 58. P. 1139-1143.

117. Cannon M. S., Mollenhauer H. II., Eurell T .E., Lewis D. H., Cannon A. M., Tompkins C. An ultrastructural study of the leucocytes of the channel catfish (Ictalurus punctatus) II Journal of Morphology. 1980. V. 164. N 1. P. 1 -23.

118. Chowdhury M. J., McDonald D. G., Wood C. M. Gastrointestinal uptake and fate of cadmium in rainbow trout acclimated to sublethal dietary cadmium // Aquatic Toxicology. 2004. V. 69. №2. P. 149-163.

119. Clawson C. C., Finstad J., Good R. A. Evolution of the immune response. V. Electron microscopy plasma cells and lymphoid tissue of the paddlefish // Laboratory Investigation. 1966. V. 15. P. 1830-1847.

120. Dallinger R., Egg M., Kock G., Hofcr R. The role metallothionein in cadmium accumulation of Arctic char (Salvelinus alpinus) from high alpine lakes // Aquatic Toxicology. 1997. V. 38. P. 47-66.

121. De Smet H., Biust R. Stress Responses and changes in Protein Metabolism in carp (Cyprinus carpio) during cadmium exposure // Ecotoxicology and Environmental Safety. 2001. V. 48. №3. P. 17-22.

122. De Smet H., De Wachter B., Lobinski R., Blust R. Dynamics of (Cd, Zn)-metallothioneins in gills, liver and kidney of common carp Cyprinus carpio during cadmium exposure // Aquatic Toxicology. 2001. V. 52. N 3-4. P. 269-281.

123. Drastichova J., Svestkova E., Luskova V., Svobodova Z. Cytochemical study of carp neutrophil granulocytes after acute eposure to cadmium // Journal of Applied Ichthyology. 2005. V. 21.N3. P.215-219.

124. Drastichova J., Syobodova Z., Luskova V., Machova J., Celechovska O., Svestkova E. The effect of cadmium on haematological and biochemical indices of carp (Cyprinus carpió L.) // Toxicology Letters. 2003. V.144. P. 174.

125. Ellis A. E. Leucocytes and related cells in the plaice (Pleuronectes platessa L.) // Journal of Fish Biology. 1976. V. 8. N 2. P. 143-156.

126. Ellis A. E. Ontogeny of the immune response in Salmo salar. Histogenesis of the lymphoid organs and appearance of membrane immunoglobuline and mixed leucocyte reactivity // Deviation of Immunobiology. 1977. P. 225-232.

127. Ellis A. E. The leucocytes of fish: a review // Journal of Fish Biology. 1977. V. 11. P. 435491.

128. Elasser M. S., Roberson B. S., Hetrick F. M. Effect of Metals on the Chemiluminescent Response of Rainbow Trout {Salmo gairdneri) phagocytes // Veterinary Immunology and lmmunopathology. 1986. V. 12. P. 243-250.

129. Feng J., Liu Y., Tian L., Wang Y., Gao L. // Shuichan xuebao. Journal of Fish China. 2004. V. 28. №2. P. 195-200.

130. Ferguson H. W. The ultrastructure of plaice {Pleuronectes platessa) leucocytes // Journal of Fish Biology. 1976. V. 8. N 2. P. 139-142.

131. Fey F. Fergleichende Hamozytologie niederer Vertebraten. Ill Granulozyten // Folia of Haematology. 1966. B.86. S. 133-147.

132. Filipovic V., Raspor B. Metallothionein and metal levels in cytosol of liver, kidney and brain in relation to growth parameters of Mullus surmuletus and Liza aurata from the Eastern Adriatic Sea// Water Research. 2003 V. 37. N 13. P.3253-3262.

133. Fishelson L., Becker. K. Rodlet cells in the head and trunk kidney of the domestic carp (Cyprinus carpió): enigmatic gland cells or coccidian parasites? // Naturwissenschaften. 1999. V. 86. P. 400-403.

134. Forlin L., Haux C., Karlsson-Norrgren L., Runn P., Larsson A. Biotransformation enzyme activities and histopathology in rainbow trout, Salmo gairdneri, treated with cadmium// Aquatic Toxicology. 1986. V. 8. P. 51-64.

135. Gambaryan S. P. Kidney morphology in sturgeons a microdissectional and structural study // Journal of Fish Biology. 1988. V. 33. № 3. P.383-398.

136. Ghosal T. K., Kaviraj A. Combined effects of cadmium and composted manure to aquatic organisms // Chemosphere. 2002. V. 46. № 5. P. 1099-1105.

137. Gill T. S., Pant J. C. Erythrocytic and leucocytic responses to cadmium poisoning in a freshwater fish, Puntius conchonius Ham // Environmental Research. 1985. V. 36. N 2. P. 327-337.

138. Griffin J. L., Walker L. A., Shore R. F., Nicholson J. K. Metabolic profiling of chronic cadmium exposure in the rat // Chemistry Research and Toxicology. 2001. V. 14. N 10. P.1428-1434.

139. Haaparanta A., Valtonen E. T., Hoffmann R., Holmes J. Do macrophage canters in freshwater fishes reflect the differences in water duality // Aquatic Toxicology 00. 1995. P. 1-20.

140. Hammer O., Harper D. A. T., Ryan P. D. PAST: Palaeontological Statistics software package for education and data analysis // Palaeontologica electrónica. 2001. V. 4. Iss. 1. Art. 4. 9 pp. (http://palaeo-electronica.org/2001-l/past/issuel~01 .htm).

141. Hartwig A. Recent advances in metal carcinogenicity // Pure and Applied Chemistry. 2000. N 6. V.72. P.1007-1014.

142. Hattink J., De Boeck G., Blust R. The toxicokinetics of cadmium in carp under normoxic and hypoxic conditions // Aquatic Toxicology 2005. V. 75. № 1. P. 1-15. Heath A. G. Water pollution and fish physiology. CRC Press, 1995. 359 p.

143. Hine P. M., Wain J. M. Observations on eosinophilic granule cells in peritoneal exudates ofeels, Anguilla australis //Journal of Fish Biology. 1989. V. 34. N 6. P. 841-853.

144. Hodgson E. A Text book of modern toxicology. Wiley-interscience, 2004. 543 c.

145. Julian L., Walker L. A., Shore R. F., Nicholson J. K. Metabolic profiling of chronic cadmium exposure in the rat// Chemistry Research and Toxicology. N 10. 2001. V. 14. P. 1428-1434.

146. Kaneko T., Katoh F. Functional morphology of chloride cells in killifish Fundulus heteroclitus, a euryhaline teleost with seawater preference // Fisheries Science. 2004. V.70. 723-733.

147. Kraal M. H., Kraak M. HS., Groot C. J. De Davids C. Uptake and tissue distribution of dietary and aquaeus cadmium by carp (Cyprinus carpio) II Ecotoxicology and Environ Safety. 1995. V. 31. № 2. P. 179-183.

148. Kramer C. R., Potter H. Ultrastructural observations on rodlet-cell development in the head kidney of the southern platyfish, Xiphophorus maculatus (Teleosteoi: Poeciliidae) // Canadian Journal of Zoology. 2002. N 8. V. 80. P. 1422-1436.

149. Madden E. F., Fowler B. A. Mechanisms of nephrotoxicity from metal combinations: A review // Drug and Chemical Toxicology. 2000. V. 23. N 1. P. 1-12.

150. Mahajan C. L., Jagmohan S. D. Cell types in the peripheral blood of an air breathing fish Channa punctatus // Journal of Fish Biology. 1979 V.14. P. 481-487.

151. Malins D. C., Ostrander G. K., Aquatic toxicology: molecular, biochemical and cellular perspectives. CRC Press, Inc., 1994. 547 p.

152. Manera M., Dezfiili B.S. Rodlet cells in teleosts: a new insight their nature and functions // Journal of Fish Biology. 2004. V. 65. P. 597-619.

153. Mayberry. L. F., Marchiondo, A. A., Ubelaker, J. E., Kazic, D. Rhabdospora ihelohani Laguesse, 1895 (Apicomplexa): new host and geographic records with taxonomic consideration. // Journal of Protozoology. 1979. V. 26. 168-178.

154. Meseguer J., Esteban M. A., Munoz J., Lopez-Ruiz A. Ultrastructure of the peritoneal exudate cells of seawater teleosts, sea bream (Sparus aurata) and sea bass (Dicentrarchus lab rax) // Cell and Tissue Research. 1993. V. 273. N 2. P. 301-303.

155. Muiswinkel W. B. Fish immunology today // Immunology and immunization of fish. 1982. P. 1-2.

156. Olsson P-E, Hogstrand C. Subcellular distribution and binding of cadmium to metallothionein in tissues of rainbow trout after exposure to 109Cd in water // Environmental Toxicology and Chemistry. 1987. V. 6. P. 867-874.

157. Ooi V. E. C., Law F. K. Changes induced by cadmium in the kidney of black sea bream, Mylio makrocephalus (Teleostei) // Bulletin of Environmental Contamination and Toxicology. 1989. V. 43. № 5. P. 769-775.

158. Panchanathan J. P., Vattapparumbil P. I. Patterns of cadmium accumulation in selected tissues of the catfish Ciarias balrachus (Linn.) exposed to sublethal concentration of cadmium chloride // Veterinary archive. N 2. 2006. V. 76. P. 167-177.

159. Parish N., Wrathmell A., Hart S., Harris J. The leucocytes of the clasmobranch Scyliorhinus canícula L. a morphological study // Journal of Fish Biology. 1986. V. 28. P. 545-561.

160. Rani K U., Rao K S. Cellular Composition of Blood of Marine Tcleost, Gerres filamentosus (Cuvier), from Visakhapatnam Harbour // Indian Journal of Marine Sciences. 1979. V. 8. № 1. P. 55-57.

161. Ray P. K. Immune responses to Aeromonas hydrorophila in Cat Fish (Heteropmustus fossilis) exposed to cadmium and hexacheorocyclonexane // Bulletin of Environmental Contamination and Toxicology. 1992. V. 48. № 2. P. 194-201.

162. Rijkers G. T. Kinetics of humoral and cellular immune reactions in fish // Developmental and comparative immunology. 1982. S. 2.

163. Robohm R. A., Nitkowski M. F. Phisiological responses of the cunner, Tautogalabrus adspersus, to cadmium. IV. Effects on the immune system. U.S. Dept. Commer., NOAA Tech. Rep. NFMS SSRF-681. 1974. P. 15-20.

164. Roubal F. R. Blood and other possible inflammatory cells in the sparid Acanthopagrusaustralis (Genther) // Journal of Fish Biology. 1986. V. 28. № 5. P. 573-593.

165. Rough K. M., Nowak B. F., Reuter R. E. Haematology and leucocytes morphology of wildcaught Thunnus maccoyii II Journal of Fish Biology. 2005. V. 66. N 6. P. 1649-1659.

166. Ruparellia S. G., Verma J., Sayed S. R., Rawae U. M. Effect of cadmium on blood of

167. Tilapia, Jreochromis mossambicus (Peters), during prolonged exposure // Bulletin of

168. Environmental Contamination and Toxicology. 1990. V. 45. N 2. P. 305-312.

169. Satarug S., Baker J. R., Reilly P. E. B., Moore M. R., Williams D. J. Changes in zinc andcopper homeostasis in human livers and kidneys associated with exposure to environmentalcadmium // Human and Experimental Toxicology. 2001. V. 20. N 4. P.205-213.

170. Satarug S., Baker J. R., Urbenjapol S. Haswell-Elkins M., Reilly P .E. B., Williams D. J,

171. Moore M. R. A global perspective on cadmium pollution and toxicity in non-occupationallyexposed population // Toxicology Letters. 2003. V. 137. P. 65-83.

172. Secombes C. J., Van Groningen J. J. M., Egberts E. Separation of lymphocytes, subpopylation in carp Cyprinus carpio L. by monoclonal antibodies: immunohistochemical studies // Immunology. 1983. V. 48. P. 165.

173. Shrivastava A., Pandey A. K. Effect of CdCh of kidney in Puntius Sophore a fresh water fish

174. Comparative Physiology and Ecology. 1986. V. 11. N 4. P. 203-207.

175. Smith A. M., Nelson A. W., Potter M. Plasmacytopoiesis in the pronephros of the carp

176. Cyprinus carpio L.) // The Anatomical Records. 1970. V. 167. P. 351-370.

177. Shamoo A. E. Biological target sites of Mercurial // In: The Toxicity of Methyl Mercury. The

178. Jons Hopkins University press. Baltimore and London. 1987. 259 p.

179. Singhal R. N., Jain M. Cadmium induced changes in the histology of kidneys in common carp, Cyprinus carpio (Cyprinidae) // Bulletin of Environmental Contamination and Toxicology. 1997. V. 58. N 3. P. 456-462.

180. Sloman A. K., Skott R. G., Diao Z., Rouleau C., Wood M. C., McDonald D.G. Cadmium affects the social behavior of a trout of rainbow (Oncorhynchus mykiss) II Aquatic Toxicology. 2003. V. 65.P. 171-185.

181. Suchada T., Prayad P., Kashane C., Suchart U, Somphong S. // Ultrastructural alterations in the liver and kidney of white sea bass, Latcs calcarifer, in acute and subchronic cadmium exposure// Environmental Toxicology. 2004. 19 (1). P. 11-19 :

182. Tao S., Liu C., Dawson R., Long A., Xu F. Uptake of Cadmium Adsorbed on Particulates by Gills of the Goldfish (Carassius auratus) II Ecotoxicology and Environmental Safety. 2000. V.47. P.306-313.

183. Tejendra S. G. E. August Stress Related Changes in the Hematological profile of the American Eel (Anguilla rostratd) II Ecotoxicology and Environmental Safety. 1993. V. 25. P. 227-235.

184. Temmink J. H. M., Bayne C. J. Ultrastructural characterization of leucocytes in the pronephros of carp (Cyprinus carpio L.) // Developmental and Comparative Immunology. 1987. V. U.N1.P. 125-137.

185. Thelohan P. Sur des sporozoaires indetermines parasites des poissons. Journal d Anatomie et Phisiologie Paris. 1892. V 28. P. 163-171.

186. Toshiyuki A., Etsuko K., Yasushi O., Yasushi S., Teruhiko K., Shaikh Z. A., Nogawa K.

187. Application of path analysis to urinary findings of cadmium-induced renal dysfunction //

188. Velcheva I. Content and transfer of cadmium (Cd) in the organism of fresh-water fishes // Acta zoologica Bulgarica. 2002. V.54. N 3. P.109-114.

189. Viola A., Pregnolato G., Albergoni V. Effects of in vivi cadmium exposure on natural killer (NK) cells of catfish, Ictalurus melas // Fish and Shellfish Immunology. 1996. V. 6. P. 167172.

190. Witeska M. Changes in selected blood indiced of common carp after acute exposure to cadmium// Acta Veterinaria Brno. 1998. V 67. P. 289-293.

191. Zapata A. Ultrastructural study of the teleost fish kidney // Developmental and Comparative Immunology. 1979. № 3. P. 55-65.

192. Zapata A. Lymphoid organs or teleost fish. II Ultrastructure of renal lymphoid tissue of Rutilus rutilus and Gobio gobio // Developmental and Comparative Immunology. 1981. V. 5. P. 685-690.

193. Zapata A. Phylogeny of the fish immune system // Bulletin de L Institute Pasteur. 1983. V. 81. P. 165-186.

Информация о работе

Назарова, Екатерина Александровна
кандидата биологических наук
Борок, 2009
ВАК 03.00.16

Диссертация

Экологическая пластичность структуры ренальной ткани пресноводных и морских костистых рыб - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы