Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Биологически активные вещества-антиоксиданты растений Якутии

ВАК РФ 03.00.16, Экология

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Кузьмина, Саргылана Семеновна

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР

1.1. Система «ПОЛ - антиоксиданты».

1.1.1. Перекисное окисление ненасыщенных жирных кислот липидов мембран как регуляторный процесс.

1.1.2. Антиоксидантная защита липидов биологических мембран.

1.1.2.1. Ферменты-антиоксиданты.

1.1.2.2. Низкомолекулярные антиоксиданты.

1.2. Роль процессов процессов избыточного перекисного окисления липидов при различных патологиях органов и тканей.

1.3. Антиоксидантная система защиты растений.

1.3.1. Эволюция антиоксидантных механизмов.

1.3.2. Антиоксиданты растительной клетки.

1.3.3. Флавоноиды и их биосинтез в растениях.

1.3.3.1. Классификация флавоноидов.

1.3.3.2. Физико-химические и химические свойства флавоноидов.

1.3.3.3. Биосинтез флавоноидов.

1.3.4. Аскорбиновая кислота в растениях и ее участие в метаболизме.

1.3.4.1. Биогенез в растениях.

1.3.4.2. Участие АК в метаболических процессах.

ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ РАБОТЫ, ВЫТЕКАЮЩИЕ ИЗ ЛИТЕРАТУРНОГО ОБЗОРА.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛ ИССЛЕДОВАНИЯ И МЕТОДИКИ

2.1. Объект и методика проведения физиологических исследований.

2.1.1. Краткая характеристика растения.

2.1.2. Методы подготовки растительного материала.

2.1.3. Влияние способов подготовки проб на сохранность рутина.

2.1.4. Изучение влияния недостаточного водообеспечения и низких положительных температур на биосинтез БАВ в проростках.

2.1.5. Характеристика препаратов «Эпсорин» и «Родиола розовая».

2.1.6. Объект и методика эксперимента по изучению влияния экзогенного рутина при иммобилизационном стрессе.

2.1.7. Объект и методика эксперимента для изучения влияния экзогенного комплекса антиоксидантов при сахарном диабете.

2.2. Методики проведения биохимических исследований.

2.2.1. Методика определения суммы флавоноидов.

2.2.2. Методика определения содержания рутина.

2.2.3. Методика определения содержания АК в растениях.

2.2.4. Методика определения содержания антиоксидантов.

2.2.5. Методика определения интенсивности ПОЛ с помощьюТБК.

2.2.6. Методика подготовки ткани печени для анализа.

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

3.1.Рутин в растениях Якутии.

3.1.1. Содержание рутина в различных органах некоторых дикоросов Якутии и его биологическая роль.

3.1.2. Накопление рутина в зависимости от погодных условия.

3.2. Флавоноиды и аскорбиновая кислота в растениях Якутии.

3.2.1. Флавоноиды в некоторых видах дикорастущих растений Якутии

3.2.2. Аскорбиновая кислота в некоторых видах дикорастущих растений Якутии.

3.2.3. Влияние почвенно-влажностных условий на накопление флавоноидов и аскорбиновой кислоты в растениях.

3.2.4. Изучение влияния низких положительных температур и недостаточного водообеспечения на биосинтез БАВ в проростках в камеральных условиях.

3.3. Протекторное действие рутина при иммобилизационном стрессе белых мышей.

3.4. Снижение интенсивности ПОЛ в крови больных сахарным диабетом природными комплексами антиоксидантов.

3.4.1. Изменение уровня ПОЛ и антиоксидантной активности при сахарном диабете по сравнению с патологиями печени.

3.4.2. Результаты комплексной терапии препаратами «Эпсорин» и «Родиола розовая» больных сахарным диабетом.

ВЫВОДЫ.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Биологически активные вещества-антиоксиданты растений Якутии"

За последнее время область медико-биологических знаний расширила свои пределы и достигла глубин понимания фундаментальных процессов, происходящих в живом и, в частности, в человеческом организме. Одним из таких универсальных процессов является перекисное окисление липидов (ПОЛ), цепное окисление ненасыщенных жирных кислот с участием молекулярного кислорода, обеспечивающее расширенное воспроизводство свободных радикалов [1]. Известно, что умеренная активация ПОЛ в ответ на действие поражающего фактора является одним из адаптационных механизмов и направлена на увеличение проницаемости клеточной мембраны, облегчение работы мембранных белков. Однако, выходя за определенные пределы, эти сдвиги приобретают самостоятельное патогенетическое значение, которое проявляется денатурацией и инактивацией белка, делипидизацией мембраны, нарушением деления и роста клетки [2]. Т.е. в нормальной физиологии клетки процессы ПОЛ играют важную роль как элемент регуляторной системы.

Уровень протекания процессов ПОЛ контролируется антиоксидантной системой (АОС). Антиоксиданты - это вещества, которые относятся к различным классам химических соединений, но объединены способностью переводить свободные радикалы в неактивное состояние. Механизмы их действия могут быть весьма различны - от непосредственного связывания свободнорадикальных групп, до повышения устойчивости клеточных структур и макромолекул к их повреждающему воздействию [3].

АОС и ПОЛ образуют единую систему, которая в норме находится в динамическом равновесии [2].

Антиоксиданты могут быть синтезированы самим организмом или поступают извне. К ним относятся биологические активные вещества (БАВ) ан-тиоксидантного действия растительного и животного происхождения. БАВ осуществляют гармоническую взаимосвязь и взаимозависимость всех физиологических и биохимических процессов в организме. Нормализуя, регулируя все жизненные функции, они играют существенную роль в формировании стрессоустойчивости и адаптации организмов. Основными источниками БАВ являются растения.

Флавоноиды - полифенолы, синтезируемые только растениями, давно привлекли внимание исследователей как широко распространенные антиок-сиданты с высокой активностью. Антиоксидантная активность этих соединений сравнима с активностью самых сильных антиоксидантов, например, а-токоферола [4,5]. Механизм защитного действия флавоноидов от свободнорадикальных процессов, в частности от ПОЛ, заключается в

2+ 2+ способности этих соединений хелатировать ионы металлов (Fe , Си ) [6,7], перехватывать липидные радикалы ("ловушки" CP) [3,5,6,8,9], ингибировать действие оксигеназ (липооксигеназы) [6], миелопероксидазы [10]. Таким образом, флавоноиды способны прерывать как неферментативное так и ферментативное ПОЛ. Основываясь на этих свойствах, флавоноиды обладают различным терапевтическим действием: антиатеросклеретическим [11], противоопухолевым [12,13,14], антимутагенным [4], противорадиационным [15,16], противовирусным [17], иммунорегулирующим и противовоспалительным [18,19]. При таком разнообразном фармакологическом эффекте преимущество флавоноидов перед другими физиологически активными веществами заключается в их низкой токсичности, т.к. флавоноиды не являются для человека ксеногенными веществами [16]. Таким образом, флавоноиды являются доступными антиоксидантами, обладающими сильной антирадикальной активностью и многообразием терапевтического действия, низкой или отсутствием токсичности.

Биохимические и физиологические особенности растений формируются под воздействием условий произрастания. Как известно, экстремальные экологические условия Якутии способствуют повышенному синтезу БАВ в растениях этого региона [20]. Рекогносцировочные работы по содержанию алкалоидов [21,22], сапонинов [23,24], эфирных масел [25,26], флавоноидов [27], танидов [28], кумаринов [29] в дикорастущих растениях Якутии показали, что в целом природные условия Якутии благоприятствуют биосинтезу в растениях БАВ. Наиболее подробные исследования химического состава растений были предприняты А.Д.Егоровым и его учениками. Были выявлены закономерности накопления витамина С и каротина в растениях в зависимости от конкретных экологических условий произрастания [30]. Многолетние исследования А.Д.Егорова и других показали, что химический состав растений является интегральным отражением действия на них экстремальных условий Севера. В настоящее время проводятся исследования по изучению влияния условий произрастания на биосинтез антиоксидантных ферментов и низкомолекулярных антиоксидантов в растениях Якутии в области радиобиологии [31,32], а также на культурных растениях [33]. Однако влияние экстремальных условий Севера на биосинтез БАВ, в частности, флавоноидов в дикорастущих видах якутских экоформ по-прежнему остается наименее изученным.

Актуальность и значимость изучения неспецифической антиоксидант-ной системы организмов к экстремальным условиям Севера позволили нам сформулировать цель данной диссертации.

Цель работы - изучить накопление некоторых низкомолекулярных антиоксидантов в растениях Якутии в зависимости от климатических, погодных условий произрастания, в межвидовом и межорганном отношении, а также их влияние на стрессоустойчивость растительных и животных организмов, включая человека.

Научная новизна. Впервые приводятся количественные данные о содержании флавоноидов в цветках и листьях некоторых дикорастущих растений в условиях Якутии. Показано влияние почвенно-влажностных и температурных условий, солнечной инсоляции на биосинтез комплекса флавоноидов и флавонолового гликозида рутина, а также аскорбиновой кислоты.

Показано, что рутин снижает интенсивность ПОЛ при иммобилизаци-онном стрессе белых мышей. При этом антиоксидантное действие рутина реализуется при стрессе не столько за счет непосредственного взаимодействия с липидными радикалами, сколько, по-видимому, за счет опосредованного действия в протективном эффекте по отношению к ферментам-антиокси-дантам печени.

Показано достоверное снижение уровня ПОЛ у больных сахарным диабетом при коррекции препаратами местного производства «Эпсорин» и «Родиола розовая» на фоне традиционного лечения.

Практическая значимость. Выведены зависимости накопления рутина, суммы флавоноидов, аскорбиновой кислоты в 5 видах дикорастущих растений Якутии от конкретных условий произрастания - инсоляции, температуры воздуха, влагообеспечения. Эти зависимости дают основу для практического использования и прогнозирования накопления данных БАВ в изученных лекарственных растениях при интродукции.

На основе проведенных исследований по коррекции ПОЛ у больных сахарным диабетом препаратами «Эпсорин» и «Родиола розовая» данные препараты рекомендуются для комплексной терапии сахарного диабета.

Апробация работы. Основные положения работы были доложены и обсуждены на научно-практических конференциях молодых ученых и аспирантов (г.Якутск, 1996, 1997, 2000), VII Молодежной конференции ботаников (Санкт-Петербург, 2000), Международной конференции «Флора, растительность и растительные ресурсы Забайкалья» (Чита, 2000), на научных конференциях Института биологических проблем криолитозоны СО РАН и БГФ ЯГУ.

Личный вклад соискателя. Основные результаты диссертационной работы были получены лично соискателем. Ею же проведена аналитическая

10 обработка, основная интерпретация полученных результатов и подготовка публикаций.

Основные положения, выносимые на защиту.

1. Климатические и погодные (почвенно-влажностные, температурные, солнечная инсоляция) условия произрастания растений формируют их неспецифический физиолого-биохимический адаптивный потенциал, включающий уровень антиоксидантной защиты с участием НМАО.

2. Эффективная стабилизация процессов ПОЛ при формировании антистрессовой реакции или при лечении патологий, связанных с нарушением системы «ПОЛ - антиоксиданты», происходит при действии комплекса низкомолекулярных антиоксидантов.

Заключение Диссертация по теме "Экология", Кузьмина, Саргылана Семеновна

ВЫВОДЫ

1. Установлена прямая зависимость между накоплением рутина и интенсивностью инсоляции в цветках и листьях исследованных трех видов растений (кровохлебка лекарственная, тысячелистник обыкновенный, герань луговая) в двух климато-географических регионах Якутии, а также обратная зависимость от средней температуры воздуха в июле.

2. Содержание флавоноидов в листьях и цветках 5 видов исследованных дикорастущих растений (кровохлебка лекарственная, тысячелистник обыкновенный, герань луговая, полынь монгольская, очиток пурпурный) в трех климато-географических регионах Якутии прямо пропорционально влагообеспеченности растений и обратно пропорционально средней температуре воздуха в июле.

3. Содержание аскорбиновой кислоты в листьях и цветках 5 видов исследованных дикорастущих растений в трех климато-географических регионах Якутии обратно пропорционально вла-гообеспеченнос-ти растений и прямо пропорционально средней температуре воздуха в июле. Аскорбиновая кислота и флавоноиды являются взаимодополняемыми антиоксидантами в исследованный период жизнедеятельности данных растений.

4. Введение экзогенного рутина при иммобилизационном стрессе мышей тормозит процессы ПОЛ в крови и печени в 1,6 и 2,1 раза, соответственно, и снижает уровень низкомолекулярных антиоксидантов в крови в 1,7 раза, а в печени, наоборот, повышает в 1,2

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Кузьмина, Саргылана Семеновна, Москва

1. Владимиров Ю.А., Арчаков А.И. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах. - М.: Наука, 1972.

2. Барабой В.А., Брехман И.И., Голотин, Кудряшов Ю.П. Перекисное окисление и стресс.- СПБ.: Наука, 1992 148с.

3. Halliwell В., Aeschbach R. The characterization of antioxi-dants.//Food.Chem.Toxicol., 1995, Jul, №33.- P.601-617.

4. Rice-Evans C.A., Viller B.J. Antioxidant activities of flavonoids as bioactive components of food.//Biochem.Soc.Trans, 1996, Aug., 24.- P.790-795.

5. Теселкин Ю.О., Жамбалова Б.А. и др. Антиоксидантные свойства дигид-рокверцетина.//Биофизика, 1996, Т.41, №3. С.620-625.

6. Groot Н., Rauen U. Tissue injury by reactive oxygen species and protective effects of flavonoids.//Fundam.Clin.Pharmacol., 1998, №12. P.249-255.

7. Kostyuk V.A., Potapovich A.I. Antiradical and chelating effects in flavonoid protection against silica-induced cell injury. //Arch. Biochem. Biophys., 1998, Jul., 1, -P.43-48.

8. Aherne S.A., O'Brien N.M. Protection by the flavonoids myricetin, quercetin, and rutin against hydrogen peroxide-induced DNA damage in Caco-2 and Hep G2 cells. //Nutr. Cancer, 1999, 34. P. 160-166.

9. Ratty A.K., Das N.P. Effect of flavonoids on nonenzymatic lipid peroxidation: structure-activity relationship.// Biochem. Med. Metab. Biol., 1988, Feb., 39. -P.69-79.

10. Chu S.C., Hsieh Y.S., Lin J.Y. Inhibitory effects of flavonoids on Moloney murine leukemia vims reverse transcriptase activity. // J. Nat. Prod., 1992, Feb;55(2) P.179-183.

11. Devi M.A., Das N.P. In vitro effects of natural plant polyphenols on the proliferation of normal and abnormal human lymphocytes and their secretions of interleukin-2.//Cancer. Lett., 1993 ,May 14, 69(3)- P.-191-196.

12. Ильюченок Т.Ю., Хоменко А.И. и др. Фармакологические и радиозащитные свойсива некоторых производных гамма-пирона. //Фармакология и токсикология, 1975, Т.38, №5. С.607-611.

13. Тюкавкина И.А., Руленко Ю.А. и др. Природные флавоноиды как пищевые антиоксиданты и биологически активные добавки. //Вопросы питания, 1996, №2. С.33-36.

14. Biziagos Е., Crance J.M., Passagot J., Deloince R. Effect of antiviral substances on hepatitis A virus replication in vitro.// J. Med. Virol. 1987, May, 22 №1 P.57-66.

15. Bronner C., Landry Y. Kinetics of the inhibitory effect of flavonoids on histamine secretion from mast cells.// Agents Actions, 1985, Apr. 16(3-4). P.-147-151.

16. Schwartz A., Middleton E.Jr. Comparison of the effects of quercetin with those of other flavonoids on the generation and effector function of cytotoxic T lymphocytes.//Immunopharmacology, 1984, Apr., 7(2).-P.115-126.

17. Макаров A.A. Биологически активные вещества лекарственных растений Якутии. Якутск, 1989. - 159с.

18. Самарин В.П. Предварительные итоги обследования флоры Центральной Якутии на содержание алкалоидов. //Учен. зап. Якут. Ун.-та, 1962, Вып. 12. С.66-85.

19. Самарин В.П. О суммарном содержании алкалоидов в некоторых растениях Якутии.// Проблемы современной ботаники. Т.2. М.: Наука, 1965. -С.200-205.

20. Самарин В.П. Итоги обследования флоры сосудистых Якутии на содержание сапонинов. //Учен. зап. Якут. Ун.-та, 1965, Вып. 15. С. 15-38.

21. Слепцова JI.B. Обследование флоры Якутской АССР и некоторых районов Иркутской области на содержание сапонинов. //Учен. зап. Якут. Ун.-та, 1971, Вып. 18. Сер. Биология. География. Химия. С.5-16.

22. Самарин В.П. Выход и физические свойства эфирных масел некоторых растений Якутии. /Сб. науч. Работ ЯО Вбиох.О. Якутск, 1963. - С.74-76.

23. Слепцова J1.B., Сымытова А.С. Динамика накопления и некоторые физико-химические константы эфирных масел. /Материалы к изучению лекарственной флоры Якутии. Якутск: изд.ЯГУ, 1977. - С.63-71.

24. Макаров А.А., Дубовик JI.A. Материалы по флавоноидоносности растений Центральной Якутии. /Материалы к изучению лекарственной флоры Якутии. Якутск: изд.ЯГУ, 1977. - С.53-62.

25. Макаров А.А., Прямкова Н.А. К изучению танидоносности растений Центральной Якутии. /Материалы к изучению лекарственной флоры Якутии. -Якутск: изд.ЯГУ, 1977. -С.8-39.

26. Макаров А.А., Габышев М.И. Рекогносцировочное обследование растений Центральной Якутии на кумариноносность. /Материалы юбилейной научной сессии, посвященной 50-летию образования СССР и ЯАССР. -Якутск, 1972. С.43-44.

27. Егоров А.Д. Витамин С и каротин в растительности Якутии. М.: Изд.-во АН СССР, 1954.-248с.

28. Журавская А.Н., Стогний В.В., Кершенгольц Б.М. Зависимость радиочувствительности семян растений от экологических условий места произрастания. //Радиационная биология. Радиоэкология, 1998, Т.38, вып.5. -С.706-711.

29. Стогний В.В., Журавская А.Н., Кершенгольц Б.М. Влияние условий произрастания на активность антиоксидантной системы семян различных видов дикорастущих растений. //Растительные ресурсы, 2000, Т.36, вып.1. -С.31-39.

30. Алексеев В.Г., Курилюк Т.Т., Мярикянов М.И. и др. Белки в растениях Якутии. Новосибирск: Наука. Сиб.отд., 1981. - 108с.

31. Арчаков А.И. Микросомальное окисление. М.: Наука, 1975.- 235с.

32. Sevanian A., Hochstein P. Mechanisms and consequences of lipid peroxidation in biological systems. //Annu.Rev.Nutr., 1985, 5. P.365.

33. Бурлакова Е.Б., Храпова Н.Г. Перекисное окисление липидов мембран и природные антиоксиданты. //Успехи химии, 1985, Т.54, №9. С. 15401558.

34. Кершенгольц Б.М. Этанол и ацетальдегид в организмах растений и животных. Дисс. на соиск. уч. степ, докт.биол.наук. Якутск, 1991.

35. Введение в биомембранологию/ Под ред. А.А.Болдырева. М.: Изд.-во МГУ, 1990. -208с

36. Рогожин В.В. Физиолого-биохимические механизмы формирования ги-побиотических состояний высших растений. Автореф. дисс. на соиск. уч. степ, д.б.н. Иркутск, 2000.

37. Бурлакова Е.Б. Биоантиоксиданты: новые идеи и повторение пройденно-го./Сб. тезисов докл. межд.симпозиума в рамках междун.выставки "Медицина и и охрана здоровья". Тюмень: Изд.-во Тюм.гос.ун.-та, 1997. - С.З-4.

38. Арчаков А.И. Оксигеназы биологических мембран. М.: Наука, 1983. -235с.

39. Гродзинский Д.М. Радиобиология растений. Киев: Наук.думка, 1989. -379с.

40. Sebrell W.H., Harris R.S. The vitamins. //Chemistry, physiology, pathology, methods, Second edit., vol.1. New York-London, 1967.

41. Душейко А.А. Витамин А: обмен и функции. M.: Наука, 1989. - 90c.

42. Биофизические и физико-химические исследования в витаминологии. /Материалы симпозиума по витаминам антиоксидантного действия. М.: Наука, 1981.-200с.

43. Роль процессов свободнорадикального окисления липидов в патогенезе хронических дерматозов и методы их коррекции. /Под ред. В.С.Полкановой. Свердловск: МИ, 1987. - 136с.

44. Бардыштев И.А. и др. Различия реакций ПОЛ. //Физиология человека, 1993, №5. С.127-133.

45. Запрометов М.И. Фенольные соединения. Распространение, метаболизм и функции в растениях. М.:Наука,1993.- 310с.

46. Рогинский А.А. Фенольные антиоксиданты: реакционная способность и эффективность. М.: Наука, 1988. - 247с.

47. Надиров Н.К. Токоферолы (витамины группы Е) биологически активные вещества. - М.: Знание, 1991. - 64с.

48. Владимиров Ю.А. Биологические мембраны и патологии клетки. М: Общество "Знание", 1979.

49. Ланкин В.З. Ферментативное перекисное окисление липидов. //Укр. Био-хим. Жури., 1984, Т.56, №3. С.317-331.

50. Плацер 3., Видлакова М., Кужела Л. Процессы перекисного окисления липидов при повреждении и ожирении печени // Чехословацкое мед. обозрение, 1970, №1.

51. Блюгер А.Р., Майоре А.Я. Исследование основных патогенетических линий поражения клеток печени в условиях клинической и экспериментальной патологии и подходы к регуляции и купированию этих процессов // Успехи гепатологии. -Рига, 1982,-вып.-10.

52. Козлов Ю.П. Свободные радикалы и их роль в нормальных и патологических процессах. М: Изд.-во МГУ, 1973

53. Козлов Ю.П. Свободнорадикальное окисление липидов в норме и при патологии./Биоантиокислители. М., 1975.

54. Гичев Ю.П., Хаснулин В.И., Неустроева Т.С. Исследование показателей перекисного окисления и антиокислительной активности при поражениях печени алкогольной и вирусной этиологии. / Физиология и патология механизмов адаптации человека-Новосибирск, 1977.

55. Потапов А.Ф. Профилактика и коррекция процессов перекисного окисления липидов у больных с абдоминальными операциями. Автореф. дисс. На соиск. уч. степ. канд. мед. наук. Москва, 1994, 23с.

56. Букин Ю.В., Драудин-Крыленко В.А. Молекулярно-биологические механизмы гастроканцерогенеза и подходы к профилактике рака желудка. //Успехи биологической химии, т.40, 2000. С.329-356.

57. Неустроева Т.С. Особенности перекисного окисления липидов эритроцитов у больных коронарным атеросклерозом Крайнего Севера и Сибири: Автореф. канд. мед. наук. Новосибирск, 1990.

58. Атаманов В.М. Функциональные свойства эритроцитов и перекисное окисление липидов при ишемической болезни сердца.// Перекисное окисление липидов и антиоксидантная терапия при ишемической болезни сердца. Межвузовский сб. науч. тр. Горький, 1988.

59. Хорст А. Молекулярные основы патогенеза болезней. М.: Медицина, 1982.-454 с.

60. Скрыпин В.Н. и др. Альфа-токоферол модификатор фазового состояния липидного бислоя //Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 1984, №12. - С.673-675.

61. Гродзинский Д.М., Войтенко В.П., Кутлахмедов Ю.А. Надежность и старение биологических систем Киев: Наук.думка, 1987. - 176с.

62. Гродзинский Д.М. Антропогенная радионуклидная аномалия и растения. -Киев: Лыбидъ, 1991. 156с.

63. Биоантиокислители. -М.: Наука, 1975. 160с.

64. Барабой В.А. Растительные фенолы и здоровье человека. М.: Наука, 1984. - 172с.

65. Запрометов М.И. Биохимия катехинов (биосинтез, превращение и практическое применение). М.:Наука,1984.- 436с.

66. Георгиевский В.П., Комиссаренко Н.Ф., Дмитрук С.Е. Биологически активные вещества лекарственных растений. Новосибирск:Наука, Сиб.отд., 1990.- 211с.

67. Ермаков А.И., Арасимович В.В. Методы биохимических исследований растений. Ленинград:Агропромиздат, 1987.- 456с.

68. Харборн Дж. Биохимия фенольных соединений /пер.с англ. М.:Мир, 1968,-436с.

69. Клышев Л.К., Бандюкова В.А., Алюкина Л.С. Флавоноиды растений (распространение, физико-химические свойства, методы исследования). А-А.: Наука Каз. ССР, 1978. - 220с.

70. Минаева В.Г. Флавоноиды в онтогенезе растений и их практическое использование. Новосибирск: Наука,Сиб.отд., 1978.- 244с.

71. Иванова С.Д. Дубильные вещества, сапонины, антраценпроизвод-ные и флавоноиды в лекарственных растениях. М.:Издат.-во МГУ, 1967. - 82с.

72. Киселева А.В., Волхонская Т.А. Биологически активные вещества растений Южной Сибири. Новосибирск:Наука,Сиб.отд., 1991.106с.

73. Запрометов М.Н., Загоскина Н.Е. Еще об одном доказательстве участия хлоропластов в биосинтезе фенольных соединений. //Физиология растений, 1987, Т.34, Вып. 1. С.165-172.

74. Девятнин В.А. Содержание витаминов в различных пищевых продуктах и готовой пище.// В кн.: Витамины в питании и профилактика витаминной недостаточности. Под ред. В.В. Ефремова.-М.:Наука, 1969.-С. 114.

75. Макаров А.А./Методы поисков и изучение дикорастущих лекарственных растений.-Якутск:Якутский гос.ун-т.-1981 .-С.68.

76. Матусис И.И. Связанная форма аскорбиновой кислоты. Аскорбиген в животных тканях.//Бюлл. экспер. биол. и мед.-1945.-Т.20.-Ы1.-С.66-72.

77. Prochasko Z. L-Ascorbinsaure, Chemmie.ln: Vitamine. Chemie und Bio-chemie. Herausgeg. J. Fragner. Jena, 1964, 1. Respiratory catabo-lism of ascorbic acid. Nutr. Rev,, 1964.-vol.22.-Nl.-P.7-12.

78. Гольдштейн Б.И., Волькензон Д.В., Качерова С.А. Определение аскорбиновой кислоты в тканях животного организма//Биохимия.-195O.T.I 5.-N4.-C.414-417.

79. Шамрай Е.Ф.,Платош И.Г.Горчакова Г.Д. О связанной форме витамина С в лимонном соке// Вопр. питания.-1953.-N4.-C.41-45.

80. Овчаров К.Е. Роль витаминов в жизни растений. М.:Наука, 1956.

81. Sanda V. In: Vitamine. Chemie und Diochemie. Herausgeg. J. Fragner. Jena.-1964 ,-N 1 .-P.423-431.

82. Mapson L.V,. L-Ascorbinsaure. Biochemical System. In: The Vitamins. Chemistry, physiology, methods. Ed. W.H. Sebrell, Jr, R.S. Harris. New York-London, 1967, P.386.

83. Четвериков А.Г.Далмансон А.Э.,Харитоненко И.Г.,Блюменфельд JI.A. //Биофизика.-1964, №9.-С.18-23.

84. Семихатова О.А. Дыхание поддержания и адаптация растений. //Физиология растений, 1995, Т.42, №2. С.312-319.

85. Ругге Э.К., Блюменфельд JI.A. Свободные радикалы аскорбиновой кислоты, возникающие при взаимодействии с белками//Биофизика.-1965,-N10.-С.689-695.

86. Биленко М.В. Ишемические и реперфузионные повреждения органов. М.Медицина, 1989, 368 с.

87. Меньшикова Е.Б., Зенков Н.К. Антиоксиданты и ингибиторы радикальных окислительных процессов//Успехи соврем, биологии.-1993.-Т.113.-N4.-C.442-455.

88. Buettner G.R.,Moseley P.L. Ascorbate both activates and inac-tivates bleomycin by free radical generation//Biochemistry.-1992.-vol.31.-N40.-P.9784-9788.

89. Полная энциклопедия практической фитотерапии. /Под ред. Т.А.Виноградова и др. М.: Олма-Пресс, 1998. - 638с.

90. Липницкий С.С. Зеленая аптека в ветеринарии. Минск: Ураджай, 1995. -280с.

91. Меерсон Ф.З. Адаптация, стресс, профилактика. М.: Наука, 1981. -280с.

92. Епанчиков А.В. Лекарственные растения Урала и Зауралья. М.: Прометей, 1990. - 165с.

93. Жанаева Т.А., Лобанова И.Е. Экстракция флавонолов из свежих и высушенных листьев Bupleurum multinerve D.CV/Растительные ресурсы, 1992, вып.4 С.28-38.

94. The flavonoids: Advances in reseach since 1980 /Ed. HarbornJ.B. London, New York: Chaman and Hall, 1988,- 432 p.

95. Бузун Г.А. Выделение ферментов из растений в присутствии эндогенных фенолов //Успехи биологической химии, 1972, т. 13 .С.98-114.

96. Николаева М.Г., Разумова М.В., Гладкова В.Н. Справочник по проращиванию покоящихся семян. Л.: Наука, 1985. - 348с.

97. Фармакологическая статья лекарственного препарата «Эпсорин»

98. Мельцер И.М., Алексеева М.Н., Кершенгольц Б.М. Способ лечения вирусных гепатитов с помощью индивидуализируемых доз «Эпсорина». -Якутск: Изд.-во ЯГУ, 1997. 12с.

99. Заключение по апробации препарата Эпсорин кафедрой неврологии и нейрохирургии №2 лечебного факультет. Российский гос. Медицинский университет, 16 декабря 1993 г. №009093

100. Протокол клинического испытания нового отечественного тонизирующего средства Эпсорина. Гл. военный клинический госпиталь им.Н.Н.Бурденко, 6 апреля 1994 г. №007186

101. Заключение по клиническим испытаниям ВНИИ Физической Культуры и спорта.

102. Monach Claudine, Morand Christine, Demigne Christian, Texier Odile. Bioavailability of rutin and quercetin in rats// FEBS Lett., 1997. Vol.409. Nol,-P.12-16.

103. Стальная И.Д., Гаришвили Т.Г. Метод определения малонового диаль-дегида с помощью ТБК. /Современные методы в биохимии. М: Медицина, 1977.

104. Santos Antonioc, Uyemura Sergio A. Effect of naturally occurring flavo-noids on lipid peroxidation and membrane permeability transition in mitochondria. //Free Radic. Biol. And Med., 1998, 24, №9. P. 1455-1461.

105. Williamson G., Plumb G.W. Dietary quercetin glycosides: Antioxidant activity and induction of the anticarcinogenic phase ii marcer enzyme quione reductase in eels. // Carcinogenesis, 1996, 17, №11. P.2385-2387.

106. Cao Guohua, Sific Emin, Prior Ronald L. Antioxidant and prooxidant behavior of flavonoids structure activity relationships. //Free Radic. Biol, and Med., 1997, 22, №5. p.749-760.

107. Жанаева Т.А. Рутин и расщепляющие его ферменты в различных тканях листьев гречихи. //Физиология растений, 1998, Т.45, №1. С.74-78.

108. Запрометов М.Н. Светорегуляция вторичного метаболизма растений. //Физиология растений, 1987, Т.34, №4. С.698-710.

109. Валуцкая А.Г. Кизучению динамики агликоно-гликозидного равновесия флавоноидов володушки в онтогенезе /Научно-техническая конференция молодых ученых и специалистов. Новосибирск, 1966.-С.65-78.

110. Пименов М.Г., Волхонская Т.А. Содержание флавонолов в некоторых видах рода Bupleurum L. //Растительные ресурсы, 1992, т.28, вып.1 -С.58-66

111. Кузьмина С.С. Результаты исследований по содержанию рутина в растениях Якутии. //Молодежь и наука PC (Я). Тез. докл. Республ. Научн.-практ. конф. молодых уч. и спец. (г.Якутск, 5-6 декабря 1996 г.) 4.2.-Якутск, 1996.- С.66

112. Кузьмина С.С., Попова А.С. Содержание рутина в растениях Центральной Якутии. //Теоретич. и приклад, проблемы охраны генофонда и обогащения биоразнообразия. Тез. докл. регион, науч. конф,- Якутск, 1997.-С.106-107.

113. Ряховская Т.В., Алюкина J1.C. Флавоноидные компоненты полыни метельчатой /Матер. 2-го Всесоюз. симпозиума по фенольным соединениям,- Алма-Ата: Наука Каз.ССР, 1973.- С.82-94.

114. Метеорологические ежемесячники. Выпуск 24 ,Часть2. Якутск, 1998.

115. Метеорологические ежемесячники. Выпуск 35. Часть2. Якутск, 1998.

116. Маргна У.В. Взаимосвязь флавоноидов с первичным метаболизмом растений//ВИНИТИ, сер.Биологическая химия, т.ЗЗ. М., 1990.175с.

117. Жибоедов П.М., Костюк В.И., Кашулин П.А. Динамика синтеза флавоноидных соединений в зависимости от гидротермических условий. //Проблемы адаптации растений в Субарктике. /Поляр.-альп. Ботан. Сад-ин-т. Апатиты, 1997. - С.7-18.

118. Сидорович Е.А., Рупасова Ж.А. и др. Особенности сезонного накопления фенольных соединений в растениях бадана толстолистого при интродукции в Беларуси. //Бюллетень Гл.ботан.сада, 1998. Вып.176. - С.141-146.

119. Азовцев Г.Р. Синтез и накопление фенольных веществ в кровохлебке аптечной в связи с ее экологией. //Биологически активные соединения растений Сиб. Флоры. Новосибирск: Наука, 1974. - С.33-45.

120. Агроклиматические ресурсы Якутской АССР. Ленинград: Гидроме-теоиздат, 1973. - 111 с.

121. Средние многолетние вероятностные характеристики продуктивной влаги под озимыми и ранними яровыми зерновыми культурами. Ленинград: Гидрометеоиздат, 1980. - 96с.

122. Саввинов Д.Д. Температурный и водный режимы лесных почв Якутии. /Исследования растительности и почв в лесах Северо-Восточной СССР. Отв.ред. д.б.н. И.П.Щербаков. Якутск: Як.книж.изд.-во, 1971. - С.118-175.

123. Саввинов Д.Д. Почвы Якутии Якутск: Як. Книж. Изд.-во, 1989. -152с.

124. Шашко Д.И. Климатические условия земледелия Центральной Якутии. М.: Изд.-во АН СССР, 1961. - 264с.

125. Дохунаев В.Н. Исследования корневых систем некоторых растений Центральной Якутии в разных экологических условиях. Автореф. на со-иск. уч. степ.канд.биол.наук. Ленинград, 1963. - 23с.

126. Метеорологические ежемесячники. Выпуск 22, Часть 2. Якутск, 1997.

127. Метеорологический ежемесячники. Выпуск 22, Часть 2. Якутск, 1998.

128. Метеорологический ежемесячники. Выпуск 22, Часть 2. Якутск, 1999.

129. Попова А.С., Иванова З.С., Кузьмина С.С., Крылова М. О количественном содержании флавоноидов в некоторых лекарственных растениях Якутии. //Наука невостребованный потенциал. Тез. докл. Межвуз. Науч.-практ. конф.- Якутск, 1996. - С.20-21.

130. Лакин Г.Ф. Биометрия: Учеб. Пособие для биол. Спец. Вузов. М.:1. B.Ш., 1990.-352с.

131. Растительность СССР /Отв.ред. Б.К.Шишкин. М.-Л.: Изд.-во АН СССР, 1940.-315с.

132. Серебряков И.Г. Экологическая морфология растений. Жизненные формы покрытосеменных и хвойных: Учебное пособие.- М.: В.Ш., 1962. -186с.

133. Полякова Л.В., Пленник Р.Я. Флавоноиды в интродукционных популяциях некоторых бобовых растений.//Сиб.вестн.с.-х.науки. 1996, №1-2.1. C.48-55.

134. Мординова М.Н. Влияние интродукции на рост и развитие некоторых лекарственных растений. /Интродукционные исследования растений в Якутии. Сб.науч.трудов. Якутск: ЯФ СО РАН СССР. - 1987. С.93-102.

135. Данилова Н.С. Природная флора Якутии как источник полезных растений. /Проблемы ботаники на рубеже XX-XXI веков: Тез.докл. П(Х) съезда Русс.бот.общ. Т.2. СПб: Ботанический институт РАН, 1998. - С.288.

136. Экология растений. М.: Мир, 1978. - 384с.

137. Кузьмина С.С. Особенности накопления флавоноидов в лекарственных растениях в условиях Якутии. //VII Молод. Конф. Ботаников в Санкт-петербурге (С.-Пбг, 15-19 мая, 2000). Тез. докл. С.-Пбг, 2000. - С.

138. Кузьмина С.С. Влияние погодно-климатических условий на накопление флавоноидов в растениях Якутии. //Междун. Конф. ботаников. Чита, 2000.

139. Чупахина Г.Н., Головина Е.Ю., Дедков В.П. Система аскорбиновой кислоты песколюба песчаного Куршской косы. /Проблемы ботаники на рубеже XX-XXI веков: Тезисы докл. Т.1, СПб: Бот.инст. РАН, 1998. -398с.

140. Землянухин А.А. Влияние аскорбиновой кислоты на водообмен у растений. //Физиология растений, 1964, Т.11, Вып.6. С. 1047-1054.

141. Чупахина Г.Н. Система аскорбиновой кислоты растений: Монография. -Калиниград: Калинингр. Ун.-т, 1997.- 120с.

142. Domae Yoshinori,. Higuchi Hirikazi. Initial changes in lettuce (L.S.Linn) leaves under water stress as detected by monodehydroascorbate radical. //Plant and cell Physiol. 1998.- 39, suppl. - P.35.

143. Сельскохозяйственная карта Якутской АССР. -Якутск, 1989.

144. Усанова В.М. К вопросу о классификации аласов Центрально-Якутской равнины. /Материалы по растительности Якутии. Сб.статей. Ленинград: АН Всесоюзное ботаническое общество, 1961. - С.7-21.

145. Караваев М.Н., Скрябин С.З. растительный мир Якутии. Якутск: Кн. Изд.-во, 1971.- 125с.

146. Шоринг Б.Ю., Полещук С.В. и др. Действие антиоксидантов на рост и развитие растений. //Известия АН. Серия Биологическая, 1999, №1. -С.30-38.

147. Кения М.В., Лукаш А.И., Гуськов Е.Н. Роль низкомолекулярных антиоксидантов при окислительном стрессе. //Успехи соврем. Биологии, 1993, Т.113, Вып.4.- С.456-470.

148. Холодостойкость растений. Пер. с англ. Г.Н.Зверевой. М.: Колос, 1983.-318с.

149. Курганова Л.Н., Веселов А.П. и др. Перекисное окисление липидов и антиоксидантная система защиты в хлоропластах гороха при тепловом шоке. //Физиология растений, 1997, Т.44, №5. С.725-730.

150. Бондаренко В.А. Влияние замораживания-оттаивания на развитие ПОЛ в мембранах митохондрий печени крыс// Современные вопросы криобологии.- Киев: Наукова думка, 1976. С.31 - 36.

151. Варфоломеев С.Д. Простагландины новый тип биологических регуляторов // Соросовский образовательный журнал.- 1996, №1,С.40-48.

152. Введение в биомембранологию //Под ред. А.А. Бондарева.- М.: МГУ, 1990.-208 с.

153. Неустроева Т. С. Особенности перекисного окисления липидов эритроцитов у больных коронарным атеросклерозом Крайнего севера и Сибири: Автореф. дисс. . канд. мед. наук. Новосибирск, 1990.

154. Kawabata Temynki. Iron coordination by catechol antioxidants // Biochem. Pharmacol- 1996. Vol. 51, No. 11. P. 1569-1577.

155. Варганян Л.С., Гуревич С.М. Влияние ионола на метаболизм супероксидных радикалов в печени мышей // Вопросы медицинской химии. 1999, №4

156. Слепухина Л.В. Изменение радиочувствительности целостного организма под действием ингибиторов свободнорадикальных реакций: Автореф. дисс. . канд. биол. наук. М., 1970.

157. Аристархова С.А. Роль токоферола в общей системе природных антиоксидантов и возможность подмены его в организме. М., 1978.- 24с.

158. Бурлакова Е.Б. Биохимические действия антиоксидантов // 5-й Всесоюзный биохимический съезд: Тезисы симпозиальных докладов. М.: Наука, 1985.- T.I.- С.85

159. Савченко О.С, Руда Н.В. Влияние флавоноида кверцетина на детокци-кационную функцию печени //Укр. биохим. ж.- 1997, Т.69, №1.-С.65-68

160. Свободные радикалы в биологии. /Под ред. У. Прайор (пер. с англ.). -М.:Мир, 1979.-Т.2.- 328 с.

161. Балаболкин М.И. Эндокринология. М.: Медицина, 1989. - 498с.

162. Кузьменко А.Н., Клименко Е.Н. Свободнорадикальное окисление липидов сыворотки крови людей в зависимости от содержания в ней витамина Е //Бюллетень экспериментальной биологии и медицины, №9, 1997.-С.298-307.

163. Новиков В.Н., Молотков О.В. и др. Влияние раздельного и сочетанного применения Т-активина и а-токоферола на лечение экспериментального сахарного диабета. //Проблемы эндокринологии, №2, 1999.-С.45-48.

164. Афанасьев С.А., Лишманов Ю.Б. и др. Влияние родиолы розовой на устойчивость изолированного сердца стрессированных крыс к ишемиче-ским и реперфузионным повреждениями //Бюллетень экспериментальной биологии и медицины, №5, 1997. С.512-519.

165. Хазанов В.А., Сайфутдинов P.P. Митохондриальные эффекты в механизме антигипоксического действия экстракта шлемника байкальского. -Бюллетень экспериментальной биологии и медицины, №9, 1999.- С. 327329.

166. Нелаева А.А., Бышевский А.Ш. и др. Перекисное окисление липидов и гомеостаз у больных инсулин-зависимым сахарным диабетом. //Проблемы эндокринологии, №5, 1998. С.10-15.146

167. Ланкин В.В., Тиксус А.К. и др. Концентрационная инверсия антиокси-дантното и прооксидантного действия Р-каротина в тканях in vivo //Бюллетень экспериментальной биологии и медицины, №9, 1999.

168. Тиказе А.К., Коновалова Г.П., Ланкин А.С. В-каротиносодержащие препараты увеличивают антиоксидантный потенциал печени и миокарда. //Бюллетень экспериментальной биологии и медицины, №9, 1999. С. 324326.

169. Калибровочный график по рутину для определения содержания суммы флавоноидов.

170. Калибровочный график для определения содержания аскорбиновой кислоты