Биохимический состав мембран эритроцитов и функциональная активность рибосомных генов в этиопатогенезе хронической обструктивной болезни легких и профессионального бронхита

Храмцов, Александр Валентинович

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Биохимический состав мембран эритроцитов и функциональная активность рибосомных генов в этиопатогенезе хронической обструктивной болезни легких и профессионального бронхита
ВАК РФ 03.02.07, Генетика

Автореферат диссертации по теме "Биохимический состав мембран эритроцитов и функциональная активность рибосомных генов в этиопатогенезе хронической обструктивной болезни легких и профессионального бронхита"

На правах рукописи

ХРАМЦОВ АЛЕКСАНДР ВАЛЕНТИНОВИЧ

БИОХИМИЧЕСКИЙ СОСТАВ МЕМБРАН ЭРИТРОЦИТОВ И ФУНКЦИОНАЛЬНАЯ АКТИВНОСТЬ РИБОСОМНЫХ ГЕНОВ В ЭТИОПАТОГЕНЕЗЕ ХРОНИЧЕСКОЙ ОБСТРУКТИВНОЇ! БОЛЕЗНИ ЛЕГКИХ И ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО БРОНХИТА

03.02.07 - генетика

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

1 з ДЕН ¿012

Москва 2012

005057331

Работа выполнена на базах научно-исследовательской лаборатории «Генетика» Федерального государственного бюджетного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Курский государственный университет» и лаборатории медицинской генетики кафедры биологии, медицинской генетики и экологии Государственного бюджетного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Курский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации

Научный руководитель:

Иванов Владимир Петрович доктор медицинский наук, профессор,

академик РАЕН, заслуженный деятель науки РФ, заведующий кафедрой биологии, медицинской генетики и экологии ГБОУ ВПО КГМУ Минздрава России

Официальные оппоненты:

Петрин Александр Николаевич доктор медицинских наук, профессор

кафедры медицинской генетики Московского государственного медико-стоматологического университета

Азова Мадина Мухамедовна кандидат биологических наук, доцент

кафедры биологии и общей генетики ФГБОУ ВПО Российского университета дружбы народов

Ведущая организация:

Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Белгородский государственный университет»

Защита состоится 26 декабря в «15» часов на заседании диссертационного совета Д 212.203.05 в ФГБОУ ВПО Российском университете дружбы народов по адресу: 117198 г. Москва, ул. Миклухо-Маклая, дом 8.

С диссертацией можно ознакомиться в Научной библиотеке ФГБОУ ВПО «Российский университет дружбы народов» по адресу: 117198, г. Москва, ул. Миклухо-Маклая, дом 6.

31 к

Автореферат разослан <Сгъ_'_2012 г.

Ученый секретарь диссертационного совета кандидат биологических наук, доцент

О.Б. Гигани

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы

Хроническая обструктивная болезнь легких (ХОБЛ) относится к наиболее распространенным заболеваниям человека, что обусловлено загрязнением окружающей среды, табакокурением и повторяющимися респираторными инфекционными заболеваниями (Васильева О.С., 2007; Илькович М.М., 2010).

В развитых и развивающихся странах отмечается устойчивая тенденция к увеличению распространенности ХОБЛ (Овчаренко С.И., 2009). В ближайшие годы прогнозируется дальнейший рост числа больных ХОБЛ в России (Васильева О.С., 2007; Чучалин А.Г., 2008; Шмелев Е.И., 2007). Распространенность симптомов ХОБЛ в большей степени зависит от табакокурения, возраста, профессии и состояния окружающей среды, и в меньшей степени - от пола и расовой принадлежности. Но фактически все популяционные исследования в разных странах показывают большую распространенность и смертность от ХОБЛ среди мужчин в сравнении с женщинами (Илькович М.М., 2010; Назифулин В.Л., 2010; Овчаренко С.И., 2009; Порахонько H.A., 2010).

К большому сожалению, больные ХОБЛ, большей частью обращаются за медицинской помощью уже на поздних стадиях заболевания, когда у них уже диагностируется дыхательная недостаточность и легочное сердце (Величковский Б.Т., 1995). По данным Европейского респираторного общества только 25% случаев заболевания выявляется на ранних стадиях (Назифулин В.Л., 2010; BuchP., 2003). В России диагностика ХОБЛ находится на низком уровне. По официальным данным Министерства здравоохранения в стране насчитывается около 1 миллиона больных ХОБЛ в то время как по данным эпидемиологических исследований, число этих больных в нашей стране может превышать 11 миллионов человек (Васильева О.С., 2007; Порахонько H.A., 2010; Шмелев В.И., 2007).

В основе целого ряда патологических состояний, в том числе и ХОБЛ различной этиологии, лежат изменения свойств клеточных мембран, вызываемые как факторами внешней среды, так и внутренними функциональными расстройствами (Иванов В.П., 2004). Механизмы развития патологических процессов связаны с нарушением структурных свойств мембранных белков и липидов (Конопля А.И., 2008; Лизенко М.В., 2004; Новицкий В.В., 2006).

Мультигенное семейство рДНК является одним из наиболее многочисленных генных семейств в геноме, и продукты экспрессии этих генов играют важную роль в жизнедеятельности клетки, обеспечивая в конечном итоге один из основных процессов - нормальный белковый синтез. Наиболее удобной моделью для изучения количественной представительности белков и липидов в клетках являются мембраны эритроцитов (Иванов В.П., 2006; Ляпунова H.A., 2000).

Выбор мембраны эритроцитов в качестве объекта исследования был продиктован тем, что ей присущи общие принципы молекулярной организации

плазматических мембран. Поэтому закономерности изменений структуры и функции мембраны эритроцитов с определенной долей коррекции, обусловленной, прежде всего, видовой специфичностью клеток, могут быть экстраполированы на иные мембранные системы (Иванов В.П., 2004; Конопля А.И., 2008; Новицкий В.В., 2002; Сторожок С.А., 1996). Помимо этого, видимая простота организации эритроцита дает возможность изучать функциональные свойства плазматической мембраны без помех, накладываемых внутриклеточными мембранными образованиями и органеллами (Сторожок С.А., 1997; Эллиот В., 1999).

Изучение этих весьма важных аспектов, а также необходимость дальнейшего расширения представлений о химическом составе клеточных мембран и функционировании белоксинтезируюшего аппарата представляются важными как для понимания ключевой роли в структурной организации и функционировании клеток организма, так и является необходимым условием для разработки принципов коррекции мембранной патологии. Изложенное определило актуальность проведения настоящего исследования. Цель исследования

Выявить взаимосвязи состояния функциональной активности рибосо иных генов и биохимического состава клеточных мембран эритроцитов при хронической обструктивной болезни легких и профессиональном бронхите у жителей г. Курска и Курской области. Задачи исследования

Для достижения поставленной цели решались следующие задачи:

1. В ыявить особенности белкового и липидного спектра клеточных мембран эритроцитов у больных ХОБЛ, ПБ и контрольной группы;

2. Изучить состояние функциональной активности рибосомных генов в норме и при выше перечисленных заболеваниях органов дыхания;

3. Установить степень влияния показателей функциональной активности рибосомных генов на биохимический спектр клеточных мембран эритроцитов в норме и при патологии органов дыхания;

4. Рассмотреть возможности использования молекулярно-биохимического состава клеточных мембран и состояния функциональной активности рибосомных генов в качестве прогностических маркеров в формировании ХОБЛ и ПБ.

Научная новизна работы

Впервые проведена оценка влияния вредных промышленных производств Курской области на структуру клеточных мембран и функционирование клеток. Впервые изучен биохимический состав клеточных мембран эритроцитов и состояние функциональной активности рибосомных генов у больных ХОБЛ, обусловленный воздействием профессионально вредных факторов на организм человека. Выявлены закономерности изменчивости белкового и липидного состава клеточных мембран, а также функциональной активности рибосомных генов у больных ХОБЛ и ПБ, в сравнении со здоровыми. Установлены взаимосвязи количественного состава клеточных

мембран эритроцитов и состояния белоксинтезирующего аппарата клеток с клиническими проявлениями патологии, что открывает возможности для прогнозирования развития и исхода заболевания.

Практическая значимость работы

Полученные в ходе исследования данные о взаимосвязи показателей функциональной активности рибосомных генов и биохимического состава клеточных мембран эритроцитов при патологиях органов дыхания рекомендуются к применению врачами-пульмонологами и врачами медико-генетических консультаций для ранней оценки прогноза течения и исхода заболевания. Помимо этого полученные результаты рекомендуются к использованию при изучении курсов цитологии, мембранологии, молекулярной биологии, физиологии и биохимии в высших медицинских и биологических школах.

Основные положения, выносимые на защиту

1. При хронической обструктивной болезни легких выявлены изменения в количественной представительности как структурных белков цитоскелета эритроцита, так и транспортных белков. По сравнению с нормой установлены дефицит и избыток отдельных фракций мембранных фосфолипидов.

2. При профессиональном бронхите дезинтеграция количественной представительности смещена в сторону белков цитоскелета эритроцита и обнаружен только дефицит основных фосфолипидных фракций мембран эритроцитов.

3. У больных профессиональным бронхитом установлено снижение функциональной активности рибосомных генов по сравнению с контрольной группой. При ХОБЛ различий в активности рибосомных генов не установлено.

4. Сравнительный корреляционный анализ взаимосвязей цитогенетических и биохимических показателей разных нозологических форм и в контрольной группе свидетельствует о частичной вовлеченности рибосомных генов в детерминацию количественной представительности белков мембран эритроцитов и характеризуются определенными особенностями рассматриваемых выборок.

5. Молекулярно-биохимические показатели испытывают на себе влияние патогенетических механизмов течения заболеваний органов дыхания, что проявляется в их взаимосвязи различной степени выраженности.

Внедрение в практику

Результаты исследования внедрены в работу областной медико-генетической консультации, кафедры биологии, медицинской генетики и экологии Курского государственного медицинского университета, научно-исследовательской лаборатории «Генетика» Курского государственного университета.

Апробация и публикации

Всероссийской научной конференции студентов и молодых ученых с международным участием: Молодежная наука и современность (Курск, 2010, 2011, 2012), XX национальном конгрессе по болезням органов дыхания (Москва, 2010), II Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Медико-биологические аспекты мультифакгориальной патологии» (Курск, 2011), IV научно-практической конференции молодых ученых с международным участием «Завадские чтения» (Ростов-на-Дону, 2011), II Всероссийской школе-конференции молодых ученых Уфимского научного центра РАН и Волго-Уральского региона по физико-химической биологии и биотехнологии «Биомика - наука XXI века» (Уфа, 2011), IV Международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы биологии, нанотехнологий и медицины» (Ростов-на-Дону, 2011), Международной научно-практической конференции «Современные проблемы и пути и:с решения в науке, транспорте, производстве и образовании» (Одесса, 2011). По материалам диссертации опубликовано 19 печатных работ.

Структура и объем диссертации

Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, четырех глав результатов собственных исследований,, заключения, выводов, практических рекомендаций, библиографического списка и приложений. Работа изложена на 110 страницах машинописного текста, содержит 47 таблиц и 4 рисунка. Библиографический список используемой литературы включает 185 источников, 93 из которых -зарубежные.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Материалы исследования. Материалом для исследования активности рибосомных генов лимфоцитов периферической крови человека, количественного состава белков и липидов клеточных мембран эритроцитов послужила выборка больных постоянно проживающих на территории Курской области. Всего было рассмотрено 185 случаев заболеваний органов дыхания. Из них 8!) лиц страдали профессиональным бронхитом, 96 - хронической обструкгивной болезнью легких.

Исследования проводились на выборке людей в возрасте от 30 до 86 лет. Средний возраст лиц, страдающих профессиональным бронхитом составил 62,05±0,57, лиц, страдающих хронической обструктивной болезнью легких -58,41±0,80. Распределение выборки больных по полу составило: женщин -45,99%, мужчин - 54,01%.

Контрольная группа насчитывала 75 относительно здоровых лиц, постоянно проживающих на территории Курской области.

Методы исследования.

Нитогенетические методы .Получение препаратов метафазных хромосом проводили по стандартным методикам с помощью полумикрометода (Захаров А.Ф., 1982). Фиксацию клеточных культур проводили на 72 часу после

стимуляции ФГА по стандартным методикам (Назаренко С.А., 2003). Полученную взвесь раскапывали на химически чистые охлажденные стекла, высушивали и хранили при комнатной температуре (Рубцов Н.Б., 2006).

Для выявления ядрышковых организаторов использовался метод дифференциального окрашивания хромосом, предложенный Howell и Black с некоторыми модификациями. Анализ показателей функциональной активности рибосомных проводился на 20 метафазных пластинках для каждого индивида без кариотипирования. Показатели функциональной активности рибосомных генов оценивались визуально с помощью микроскопа «ZEISS» (увеличение окуляра 10, увеличение объектива 90) по пятибалльной шкале (Ляпунова H.A., 2001).

Биохимические методы. Эритроциты получали из 10 мл гепаринизированной крови по методу Beutlera (1976). Гемолиз эритроцитов осмотическим «шоком» и отмывку мембран проводили методом DodgeG.T. (1963). Липидный профиль определяли методом одномерной тонкослойной хроматографии по методу Крылова В.И. Для идентификации липидных пятен мембран эритроцитов и сыворотки крови применяли стандартные образцы фосфолипидов производства фирмы «Sigma» (США) и показатели относительной подвижности фракций. Уровень содержания определяли денситометрическим методом на ПВМ IBMPA/AT с использованием программы «OneDscan» в отраженном свете. При анализе определяли относительную оптическую плотность данного вещества. Для точного количественного выражения (в мг/дл) строили калибровочные графики, отражающие зависимость относительной оптической плотности от количественного содержания вещества. Белковые компоненты мембран эритроцитов определяли модифицированным одномерным электрофорезом в ПААГ по методу LaemliU.K. (1970). Идентификацию и обсчет белковых фракций, согласно классификации FairbanksG., SteckT.L. (1971), проводили денситометрическим методом.

Статистические методы. Статистический анализ полученных данных проводился на ПК с использованием пакета прикладных программ Statistica 6.0 фирмы StatSofflnc. (США) и MSExcel (Реброва О.Ю., 2006)

Обработка данных осуществлялась пс стандартным методикам вариационной статистики.

При описании количественных признаков использовались параметры нормального распределения: среднее значение, ошибка среднее значения, несмещенная дисперсия (Урбах В.Ю., 1975, Лакин Г.Ф., 1990). При обработке качественных показателей вычислялись: размер выборочной доли в процентах и ошибка выборочной доли. Для проверки достоверности различий между совокупностями использовались параметрические критерии Стьюдента (для сравнения средних величин) и Фишера(для сравнения дисперсий) (Лакин Г.Ф., 1990). Уровень значимости принимали равным 0,05.

Для выявления связей между признаками использовался корреляционный анализ. Приведенные коэффициенты корреляций значимо отличаются от нуля.

Для прогнозирования исхода заболевания использовался линейно-дискриминантный и регрессионный анализы (Урбах В.Ю., 1975, Реброва О.Ю., 2006).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

1. Молекулярно-биохимические показатели и их вовлеченность в патогенез ХОБЛ

В ходе исследования по специальной анкете было опрошено 192 человека больны): ХОБЛ, из них 123 мужчины и 69 женщин.

На момент исследования средний возраст мужчин больных ХОБЛ составил 58,72 года, средний возраст женщин составил 57,87 года. Различия с контрольной группой были статистически достоверны. Критерий Стьюдента составил 8,85 и 2,91 соответственно.

Полученные результаты сравнительного анализа количественных показателей БСМЭ у больных ХОБЛ и контрольной группы представлены в таблице 1.

Как видно из таблицы 1, различия между выборками имели место не только по количественному составу белковых фракций, но и по дисперсиям. Так, у больных ХОБЛ в сравнении с контрольной группой наибольшая фенотиническая вариабельность была характерна для анионтранспортного белка, паллидина, белка полосы 4.5.

Фракции белка полосы 2.2 и глютатион-8-трансферазы были значительно ниже, чем в контрольной группе. Полученные данные показывают, что в структуре клеточных мембран эритроцитов больных ХОБЛ имеет место выраженный количественный дисбаланс транспортных белков (белка полосы 3 и белка Я), а также цитоскелетных белков.

С целью установления характера взаимного варьирования количественного содержания белков мембран эритроцитов проведен корреляционный анализ БСМЭ в выборке больных ХОБЛ.

Структура взаимосвязей между количественными характеристиками мембранных белков у больных ХОБЛ существенно отличалась от контрольной группы. При этом сила взаимосвязей между количественным содержанием белков была более выражена у больных ХОБЛ, чем в контроле.

В группе больных установлена выраженная корреляционная связь количественного содержания белка 2.2 с белком 2.3 (г=0,53), которая была снижена в контрольной группе (г=0,38). Однако, в контрольной группе связь белка 2.2 с анионтранспортным белком (г=-0,47) была более выражена, чем у больных ХОБЛ (г=-0,23). Высокий уровень АТБ в мембранах больных ХОБЛ обрагас коррелировал с количественным содержанием белка 4.5 (г=-0,35), однако, данные взаимосвязи отсутствовали в контрольной группе. Низкий уровень содержания ГБТ у больных ХОБЛ обратно коррелировал с количественным содержанием а-спектрина (г=-0,33) и с р-спектрином (г=-0,30),

хотя те же взаимодействия были выше в контролі,ной группе (г=-0,46 и г=-0,40 соответственно).

Таблица 1

Сравнительный анализ количественных характеристик белков мембран _эритроцитов у больных ХОБЛ и контрольной группы _

№ Белки ХОБЛ п=95 Контроль п=75 t F

x±s, о» X±S, «і2

1 Спектрин (а) 102,45±3,59 1224,62 96,95±3,21 774,49 1,11 1,58'

2 Спектрин (ß) 99,79±3,61 1236,48 98,10±3,26 798,87 0,34 1,55

3 Белок 2.1 (анкирин) 44,66±2,14 434,07 50,91±2,71 551,62 1,84 1,27

4 Белок 2.2 16,73±1,Ю 114,25 28,72±2,06 318,30 5,43* 2,79"

5 Белок 2.3 17,72±1,51 215,96 15,70±1,18 104,10 1,01 2,07"

6 Белок 3 (АТБ) 215,45±5,28 2645,03 177,19±6,34 3013,58 4,68" 1,14

7 Белок 4.1 53,25±1,78 302,30 53,40±2,41 434,29 0,05 1,44

8 Белок 4.2 (паллидин) 45,99±1,63 250,45 38,82±2,04 311,00 2,79" 1,24

9 Белок 4.5 49,75±2,27 488,26 41,50±1,63 198,23 2,81' 2,46'

10 Белок 4.9 39,84±1,19 134,88 41,46±1,59 188,71 0,83 1,40

11 Белок 5 (актин) 54,38±1,76 293,88 56,15±2,00 299,09 0,66 1,01

12 Белок 6 (ГАФД) 69,32±1,40 186,50 73,21±1,53 176,07 1,87 1,06

13 Белок 7.1 52,95±2,42 554,88 55,01±2,32 402,12 0,60 1,38

14 Белок 7.2 19,15±0,85 67,98 19,66±1,11 91,90 0,37 1,35

15 Белок 8 (fST) 56,46±1,87 335,07 66,88±1,67 209,24 4,04" 1,60'

* - различия статистически достоверны при р<0,05

В ходе исследования проведено изучение количественного содержания основных фосфолипидов клеточных мембран эритроцитов и фосфолипидов сыворотки крови больных ХОБЛ. Полученные данные количественных показателей мембранных фосфолипидов у больных ХОБЛ представлены в таблице 2.

Среднее значение количественного содержания фосфатидилхолина в составе клеточных мембран эритроцитов у больных ХОБЛ составило 3,11±0,17 мг/дл (95% С1 2,77-3,45 мг/дл). Значение медианы (Ме=3,11 мг/дл) полностью совпадало со средним содержанием и находилось посередине межквартильного интервала ((325=2,52 мг/дл, (275=3,60 мг/дл). При сравнении с медианным значением контрольной группы (Ме=3,63 мг/дл) критерий Манна-Уитни составил г=2,08 (р=0,04).

Усредненное значение количественного содержания кардиолипина составило 1,85±0,15 мг/дл (95% С1 1,56-2,14 мг/дл) и практически совпадало с медианным значением (Ме=1,83 мг/дл). Значение медианы количественного содержания кардиолипина находилось посередине межквартильного интервала (<325=0,85 мг/дл, 075=2,02 мг/дл). Критерий Манна-Уитни, в сравнении с контрольной группой (Ме=2,31 мг/дл), составил г~3,53, при р=0,01.

Таблица 2

Количественные характеристики фосфолипидов мембран эритроцитов

Мембранные фосфолипиды Х±вх СІ -95%-95% 025 Ме 075

ЛФХ 1,94±0,22 1,50-2,39 0,60 1,15 2,45

СМ 1,74±0,15 1,44-2,04 0,58 1,38 2,03

ФИ/ФС 5,92±0,39 5,15-6,70 2,59 5,92 6,98

ФХ 3,11±0,17 2,77-3,45 2,52 3,11" 3,60

КЛ 1,85±0,15 1,56-2,14 0,85 1,83" 2,02

ФЭ 4,96±0,29 4,39-5,54 2,90 4,96" 5,92

* - различия сташстически достоверны (р<0,05); ЛФХ — лизофосфатидилхолин; СМ -сфингомиелин; ФИ/ФС - фосфатидилинозитол/серин; ФХ — фосфатидидхолин; КЛ — кардиотшин; ФЭ - фосфатидилэтаноламин.

Среднее значение количественного содержания фосфатидилэтаноламина составило 4,9б±0,29 мг/дл (95% С1 4,39-5,54 мг/дл), совпадало с медианным значением и отличалось от количественного содержания в контрольной группе (2=2,67, р=0,01).

Полученные данные количественного содержания фосфолипидов сыворотки крови у больных ХОБЛ представлены в таблице 3.

Таблица 3

Количественные характеристики фосфолипидов сыворотки крови у больных

ХОБЛ (п=40)

Сывороточные фосфолипиды СІ -95%- 95% 025 Ме 075

ЛФХ 1,29±0,17 0,95-1,63 0,65 0,85 1,65

СМ 1,13±0,15 0,84-1,43 0,41 1,13 1,13

ФИ/ФС 4,51±0,47 3,56-5,47 3,03 4,51 4,52

ФХ 3,32±0,32 2,67-3,97 1,93 3,32" 3,32

КЛ 2,25±0,28 1,67-2,82 0,77 2,25 2,71

ФЭ 4,79±0,33 4,13-5,45 3,67 4,79 5,98

* - ргвлетия статистически достоверны (р<0,05); ЛФХ -- лизофосфатидилхолин; СМ -сфинхом иелин; ФИ/ФС - фосфатидилинозитол/серин; ФХ- фосфатидилхолин; КЛ -кардиолипин; ФЭ - фосфатидилэтаноламин.

Статистически достоверные различия в количественном содержании сывороточных фосфолипидов у больных ХОБЛ, в сравнении с контрольной группой: отмечались лишь по одной липидной фракции - фосфатидилхолину, критер ий Манна-Уитни составил 2=2,04 при р= 0,04.

Среднее количественное содержание фосфатидилхолина составило 3,32+032 мг/дл (95% С1 2,67-3,97 мг/дл). Значение медианы (Ме=3,32 мг/дл) полностью совпадало со средним значением и было смещено к С>75=3,32 мг/дл.

Проведенное цитогенетическое исследование показало, что средний показатель ФАРГ при ХОБЛ составляет 19,99 усл.ед. Отмечено увеличение числа ассоциаций хромосом и числа хромосом, входящих в ассоциации у больных ХОБЛ, в сравнении с контрольной группой (различия достоверны, 1=3,71 и 1=3,20 соответственно). Следует заметить, что у больных ХОБЛ было

выявлено снижение числа рибосомных цистронов, в сравнении с контрольной группой, хотя различия лишь стремились к статистически значимым (1=1,96). По остальным показателям ФАРГ различий между группой с ХОБЛ и контрольной группой не выявлено. Описанные данные представлены в таблице 4.

Таблица 4

Сравнительная характеристика показателей ФАРГ при ХОБЛ и в норме

№ Показатель ХОБЛ п=67 Контроль п=53 1 Г

Х±8, с2 Х±вх а2

1 ФАРГ по 10 хромосомам 19,99±0,22 3,53 19,88±0,34 6,20 0,28 1,76

2 ФАРГ по О-хромосомам 11,97±0,21 3,08 12,21±0,30 3,44 0,65 1,12

3 ФАРГ по О-хромосомам 8,05±2,49 2,49 8,3040,24 2,10 0,78 1,19

4 Число активных рибосомных цистроиов 8,88±0,08 0,45 9,15±0,10 0,39 1,96 1,15

5 Число ассоциаций акроцентрических хромосом 0,98±0,04 0,10 0,70±0,19 0,19 3,71" 1,80'

6 Число акроцентрических хромосом, выступивших в ассоциации 2,08±0,09 0,55 1,55±0,88 0,88 3,20' 1,59

* - различия статистически достоверны (при р<0.05)

Для оценки возможных проявлений активности РГ на уровне количественного содержания белков в мембранах эритроцитов был проведен корреляционный анализ показателей ФАРГ и БСМЭ у больных хронической обструктивной болезнью легких.

Полученные коэффициенты корреляций носили как положительную, так и отрицательную направленность средней степени выраженности. У больных ХОБЛ положительные взаимосвязи наблюдались между количественным содержанием белка 6 и повышенным числом ассоциаций акроцентрических хромосом (г=0,41), количеством хромосом, вступивших в ассоциации (г=0,46), которые вовсе отсутствовали в контрольной группе. Аналогичная картина наблюдалась между суммарным показателем ФАРГ и количественным содержанием а-спектрина (г=0,40), р-спектрина (г=0,40). Пониженный показатель ФАРГ по в-хромосомам у больных ХОБЛ коррелировал с количественным содержанием а-спектрина (г=0,38). Отмеченная взаимосвязь отсутствовала в контрольной группе.

Связь обратной направленности наблюдалась между количественным содержанием белка полосы 6 и суммарной ФАРГ (г=-0,39), которая отсутствовала в контроле.

2. Молекулярно-биохимические показатели и их вовлеченность в патогенез профессионального бронхита

В ходе исследования по специальной анкете было опрошено 170 человек, больных ПБ, из них 88 мужчин и 82 женшины. На момент исследования средний возраст мужчин больных ПБ составил 61,11 года, средний возраст женщин составил 63,02 года. Различия с контрольной группой были статистически достоверны. Критерий Стьюдента составил 6,76 и 5,88 соответственно.

Ргзультаты сравнительного анализа количественного содержания белков мембран эритроцитов больных ПБ и контрольной группы представлены в таблице 5. Обнаружены достоверные различия между группами в количественном содержании по целому ряду белковых фракций. В структуре мембран эритроцитов у больных ПБ по сравнению с контролем наблюдалось низкое содержание белков: полосы 2.1, полосы 2.2.

Таблица 5

Сравнительный анализ количественных характеристик белков мембран __1___эритроцитов у больных ПБ и контрольной группы _

№ Белки ПБ п=78 Контроль п=75 t F

X±S, <*• X±S, п2

1 Спектрин (а) 107,10±3,42 913,83 96,95±3,21 774,49 2,16" 1,18

2 Спектрин (Р) 104,08±3,80 1127,77 98,10±3,26 798,87 1,19 1,41

3 Белок 2.1 (¡шкирин) 39,71±2,19 375,42 :50,91±2,71 551,62 3,22' 1,47

4 : Белок 2.2 15,16±1,12 97,97 28,72±2,06 318,30 5,84' 3,25'

5 Белок 2.3 12,98±0,91 63,24 15,70±1,18 104,10 1,84 1,65'

6 Белок 3 (АТБ) 230,73±4,61 1660,05 ]77,19±6,34 3013,58 6,87' 1,82'

7 1!елок4.1 54,58±2,44 463,23 53,40±2,41 434,29 0,35 1,07

8 Белок 4.2 (паллидин) 49,92±2,07 335,12 38,82±2,04 311,00 3,82* 1,07

9 Белок 4.5 42,94±1,71 227,89 41,50±1,63 198,23 0,61 1,15

10 1>елок 4.9 47,64±1,20 111,48 41,46±1,59 188,71 3,13' 1,69'

11 Белок 5 (актин) 55,81±1,93 290,06 56,15±2,00 299,09 0,12 1,03

12 Eei ciK 6 (ГАФД) 70,64±1,79 248,93 73,21±1,53 176,07 1,09 1,41

13 Белок 7.1 48,97±2,14 356,54 55,01±2,32 402,12 1,92 1,13

14 Белок 7.2 19,45±0,97 73,65 19,66±1,11 91,90 0,14 1,25

15 Белок 8 (r'ST) 63,72±2,86 638,53 66,88±1,67 209,24 0,95 3,05'

* - различия статистически достоверны (при р<0.05)

Наряду с пониженным содержанием указанных белков в эритроцитарных мембранах больных ПБ установлено повышенное количественное содержание а-субъединицы спекгрина, белка полосы 3, иаллидина и белка полосы 4.9. Наиболее выраженные различия между группами имели место по содержанию анионтраспортного белка (1=6,87) и подфракции 2.2 анкирина (1=5,84).

В ходе исследования проведено изучение количественного содержания основных фосфолипидов клеточных мембран эритроцитов и фосфолипидов сыворотки крови больных профессиональным бронхитом. Полученные данные

количественных показателей мембранных фосфолипидов у больных ХОБЛ представлены в таблице 6.

Среднее значение количественного содержания лизофосфатидилхолина в составе клеточных мембран эритроцитов у больных ПБ составило 1,23±0,14 мг/дл (95% СІ 0,96-1,50 мг/дл). Значение медианы (Ме=0,80 мг/дл) находилось посередине межквартильного интервала (<325=0,50 мг/дл, 075=1,10 мг/дл). При сравнении с медианным значением контрольной группы (Ме=1,15 мг/дл) критерий Манна-Уитни составил 2=3,14 (р=0,002).

Таблица 6

Количественные характеристики фосфолипидов мембран эритроцитов

больных ПБ (п=89)

Мембранные фосфолипиды СІ -95%-95% 025 Ме <375

ЛФХ 1,23±0,14 0,96-1,50 0,50 0,80' 1,10

СМ 1,28±0,13 1,02-1,55 0,48 0,95' 1,45

ФИ/ФС 5,57±0,27 5,05-6,10 4,28 5,57' 6,19

ФХ 3,84±0,25 3,35-4,33 2,74 3,50 4,22

КЛ 2,18±0,18 1,83-2,53 0,87 2,18' 2,18

ФЭ 4,53±0,30 3,94-5,13 2,06 4,53 6,29

* - различия статистически достоверны (р<0,05); ЛФХ - лнзофосфатидилхолин; СМ -сфингомиелин; ФИ/ФС - фосфатидшшнозитол/серин; ФХ - фосфатидилхолин; КЛ -кардиолигаш; ФЭ — фосфатидилэтаноламнн.

Усредненное значение количественного содержания сфингомиелина составило 1,28±0,13 мг/дл (95% С1 1,02-1,55 мг/дл). Значение медианы количественного содержания сфингомиелина (Ме=0,95 мг/дл) находилось посередине межквартильного интервала ((325=0,48 мг/дл, <375=1,45 мг/дл). Критерий Манна-Уитни, в сравнении с контрольной группой (Ме=1,25 мг/дл), составил 2=2,38, при р=0,02.

Среднее количественное содержание фосфатидилинозитола/серина составило 5,57±0,27 мг/дл (95% С1 5,05-6,10 мг/дл), совпадало с медианным значением и отличалось от количественного содержания в контрольной группе (2=2,60, р=0,01).

Среднее значение количественного содержания кардиолипина мембран эритроцитов у больных ПБ составило 2,18±0,18 мг/дл (95% С1 1,83-2,53 мг/дл), совпадало с медианным значением и отличалось от количественного содержания в контрольной группе (2=2,67, р=0,01).

Полученные данные количественного содержания фосфолипидов сыворотки крови у больных ХОБЛ представлены в таблице 7.Статистически достоверные различия в количественном содержании сывороточных фосфолипидов у больных ПБ, в сравнении с группой контроля, наблюдались лишь по фракции лизофосфатидилхолина. Среднее значение количественного содержания лизофосфатидилхолина составило 1,15±0,14 мг/дл (95% С1 0,87 -1,44 мг/дл). Значение медианы (Ме=0,80 мг/дл) находилось посередине межквартильного интервала (<325=0,55 мг/дл, (375=1,20 мг/дл). Критерий Манна-Уитни составил 2=2,50, при р=0,01.

Таблица 7

Количественные характеристики фосфолипидов сыворотки крови у больных ___ПБ(п=55)

Сывороточные фосфолипиды ХіБ, СІ -95%-95% <325 Діє <275

ЛФХ 1,15±0,14 0,87-1,44 0,55 0,80' 1,20

СМ 1,09±0,10 0,88-1,30 0,42 1,09 1,44

ФИ/ФС 5,33±0,44 4,46-6,21 2,48 5,51 5,52

ФХ 2,85±0,23 2,39-3,30 1,64 3,04 3,04

КЛ 1,45±0,15 1,15-1,74 0,57 1,45 1,45

ФЭ 5,28±0,43 4,43-6,14 2,11 4,79 7,76

* - различия статистически достоверны (р<0,05); ЛФХ — лизофосфатидилхолин; СМ — сфингомиелин; ФИ/ФС — фосфатидшшнозитол/серин; ФХ — фосфатидилхолин; КЛ — кардиолилин; ФЭ - фосфатидилэтаноламин.

В результате проведенного цитогенетического анализа были выявлены статистически достоверные различия в экспрессии рибосомных генов ряду

показателей.

Таблица 8

Сравнительная характеристика показателей ФАРГ при ПБ и в норме

.V; Показатель ПБ п=69 Контроль п=53 1 Р

Х±8, а1 Х±8„ а2

1 ФАРГ по 10 хромосомам 19,15±0,19 4,09 19,88±0,34 6,20 1,99" 1,52

2 ФАРГ по Р-хромссомам 11,28±0,18 2,25 12,21±0,30 3,44 2,80' 1,53

3 ФАРГ по С-хромссомам 7,63±0,18 2,27 8,30*0,24 2,10 2,21' 1,08

4 Число активных рибосомных цистронов 8,63±0,07 0,35 9,15±0,10 0,39 4,13' 1,12

5 Число ассоциаций акроцеюрических хромосом 0,82±0,04 0,11 0,70±0,19 0,19 1,53 1,71

6 Число акроцешрических хромосом, выступивших в ассоциации 1,69±0,09 0,51 1,55±0,88 0,88 0,90 1,72

* - различия стаггистически достоверны (при р<0.05)

ФАРГ при профессиональном бронхите составляет 19,15 у.е., что несколько ниже такового показателя в контрольной группе (1=1,99). Снижения уровня ФАРГ у больных ПБ наблюдалось как по хромосомам группы Б, так и по хромосомам группы в, в сравнении с контрольной группой. Критерий Стыодента составил 1=2,80 и 1=2,21 соответственно. Число активных рибосомных цистронов у больных ПБ было также ниже, чем в контрольной группе (1=4,13). Полученные результаты представлены в таблице 8.

Для оценки возможных проявлений активности РГ на уровне количественного содержания белков в мембранах эритроцитов был проведен корреляционный анализ показателей ФАРГ и БСМЭ у больных профессиональным бронхитом.

Полученные коэффициенты корреляций имели как положительную, так и отрицательную направленность средней степени выраженности. При этом положительные взаимосвязи средней степени наблюдались между количественным содержанием белка полосы 8 и ФАРГ по хромосомам группы D (г=0,45), числом рибосомных цистронов и белком полосы 3 (г=0,42), белком полосы 4.9 (г=0,42) и белком полосы 6 (г=0,34). Описанные взаимосвязи отсутствовали в контрольной группе.

Связи обратной направленности средней степени выраженности наблюдались между пониженной ФАРГ по хромосомам группы D и количественным содержанием белка полосы 2.1 (г=-0,57), белком полосы 2.3 (г=-0,40). Пониженное содержание белка полосы 2.1 у больных ПБ коррелировало с повышенным количеством ассоциаций акроцентирических хромосом (г=-0,41) и с повышенным количеством хромосом, вступивших в ассоциации (г=-0,34). Наблюдаемы связи были ниже, чем в контрольной группе. Пониженная ФАРГ по G-хромосомам у больных ПБ коррелировала с количественным содержанием белка полосы 8 (г=-0,35). Данная взаимосвязь отсутствовала в контрольной группе.

З.Влияние патологических особенностей течения ХОБЛ и профессионального бронхита на молекулярно-биохимические показатели.

Проведенный корреляционный анализ клинических особенностей проявления хронической обструктивной болезни легких и количественной представительности белкового состава клеточных мембран эритроцитов, выявил ряд закономерностей между рассматриваемыми показателями.

Установлена прямая взаимосвязь высокой силы между количественным содержанием белка полосы 2.2 и видом рабочих поллютантов (г=0,88). Взаимосвязи средней силы были отмечены между количественным содержанием белка 4.5 и кашлем (г=0,36). Взаимосвязь низкой силы наблюдалась между количественным содержанием АТБ и одышкой (г=0,28).

Взаимосвязь обратной направленности высокой силы наблюдалась между количественным содержанием актина и видом пыли на рабочем месте (г=-0,88). Ряд взаимосвязей наблюдался между таким клиническим симптомом как кашель и количественным содержанием а-спектрина (г=-0,40), ß-спектрина (i=-0,39), анкирина полосы 2.1 (г=-0,25). Клинический симптом удушья при ХОБЛ обратно коррелировал с количественным содержанием белка полосы 5 (г=-0,28), а содержание белка 6 обратно коррелировало с ЖЕЛ (г=-0,33).

Ряд обратных корреляционных взаимосвязей был отмечен между МОС50% и количественным содержанием белка полосы 3 (г=-0,32), белка полосы 4.1 (г=-0,27), белка полосы 4.2 (г=-0,28). Также количественное

содержание белка полосы 4.2 обратно коррелировало с ПСВ при ХОБЛ (г=-0,31), а количественное содержание ГАФД с МОС75% (г=-0,29).

В ходе работы также были проанализированы результаты корреляционного анализа между клиническими проявлениями ХОБЛ и липидным составом клеточных мембран эритроцитов.

Ряд взаимосвязей прямой направленности наблюдался между количественным содержанием сывороточного ЛФХ и такими клиническими проявлениями течения ХОБЛ как ОФВ1 (г=0,40), МОС50% (г=0,44), МОС75% (г=0,49) и ПСВ (г=0,56). Количественное содержание ФИ/ФС прямо коррелировало с МОС50% (г=0,30) и с МОС75% (г=0,33).

Взаимосвязь высокой силы, но обратной направленности отмечена между пониженным количественным содержанием мембранного ЛФХ у больных ХОБЛ и видом рабочих поллютантов (г=-0,78). Количественное содержание сывороточного ЛФХ обратно коррелировало с фактом наличия пылевых контактов на рабочем месте (г=-0,44) и со степенью бронхообструкции (г=-0,43). Количественное содержание сывороточного ФЭ у больных ХОБЛ обратно коррелировало с признаками удушья (г=-0,45).

Выделен ряд корреляционных взаимосвязей особенностей течения ХОБЛ с функциональной активностью рибосомных генов.

Полученные коэффициенты корреляций прямой направленности были отмечены между суммарной функциональной активностью рибосомных генов по 10 хромосомам и фактом наличия пылевых контактов (г=0,27). Коэффициенты корреляций обратной направленности наблюдались между признаками удушья и такими показателями ФАРГ как число ассоциаций акроцентических хромосом (г=-0,25) и количеством хромосом, вступивших в ассоциации (г=-0,29).

Полученные в ходе исследования данные о клинико-лабораторных показателях позволили провести линейно-дискриминантный анализ для выделения наиболее приоритетных в прогностическом отношении характеристик, которые могут позволить оценивать прогноз развития заболевания.

В' результате было выделено 8 признаков, обладающих наиболее высокой прогностической ценностью. Эти результаты представлены в таблице 9.

Полученное итоговое уравнение линейно-дискриминантной функции открывает возможность выполнения предварительной оценки прогноза течения заболевания с диагностической ошибкой 13,03% только по вышеуказанным критериям.

Для больных ХОБЛ, был также проведен логистический регрессионный анализ, в результате которого были получены коэффициенты регрессии, позволяющие определить вероятность течения и исхода рассматриваемого заболевания.

Таблица 9

Диагностически ценные характеристики больных ХОБЛ для прогнозирования течения заболевания 3,409)=54,15, р<0,01_

JV° Признак Ценность признака Р Коэффициент регрессии (Ь)

1 Одышка: 1 - одышки нет; 2 - возникает во время спешки; 3 - из-за одышки приходится идти медленнее, чем сверстникам; 4 - из-за одышки приходится останавливаться после прохождения примерно 100 м 44,66 0,001 -0,198

2 Кашель: 1 - не беспокоит; 2 - редкий, в основном по уграм; 3 - периодический в течение дня; 4 - постоянный 19,79 0,001 -0,132

3 Контакт с пылью на рабочем месте: 1 - нет; 2 -да 10,36 0,001 0,123

4 ЖЕЛ, % 7,26 0,007 0,007

5 ФЖЕЛ, % 6,47 0,011 -0,007

6 Белок полосы 8, мкг 4,41 0,036 0,003

7 Фасфатидилэтаполамин (мембранный), мг/дл 14,87 0,001 -0,040

8 Кардиолипин (мембранный), мг/дл 14,84 0,001 0,072

Constanta (bo) 2,513

Ошибка классификации 13,03%

Пример 1.

У больного А. нет одышки, кашель не беспокоит, на рабочем месте не контактирует с пылью, ЖЕЛ составляет 90%, ФЖЕЛ составляет 95%, содержание белка полосы 8 в составе клеточных мембран эритроцитов составляет 67 мкг, количественное содержание ФЭ и КЛ в составе клеточных мембран эритроцитов составляет 1,56 мг/дл и 4,11 мг/дл соответственно. Подставив эти значение в уравнение регрессии, получим: у=2,513+(-0,198* 1)+(-0,132* 1)+(0,123* 1)+(0.007*90)+(-0,007*95)+ +(0,003 *67)+(-0,040* 1,56)+(0,072*4,11)=2,712 Р=2,722'712/(1+2,722'712)=0,94

У больного Б. из-за одышки приходиться останавливаться примерно каждый 100 м, постоянный кашель, на рабочем месте контактирует с пылью, ЖЕЛ составляет 45%, ФЖЕЛ составляет 50%, содержание белка полосы 8 в составе клеточных мембран эритроцитов составляет 48 мкг, количественное содержание ФЭ и КЛ в составе клеточных мембран эритроцитов составляет 1,38 мг/дл и 3,57 мг/дл соответственно.

Подставив эти значения в уравнение регрессии, получим: у=2,513+(-0,198*4)+(-0,132*4)+(0,123*2)+(0.1007*45)+(-0,007*50)+ +(0,003*48)+(-0,040*1,38)+(0,072*3,57)=1,745 Р=2,72|'745/(1+2,721'745)=0,85

Таким образом, у больного А. вероятность благоприятного исхода составляет 94%, а у больного Б. - 85%.

Проведенный корреляционный анализ клинических особенностей проявления профессионального бронхита и количественной

представительности белкового состава клеточных мембран эритроцитов, выявил ряд взаимосвязей между рассматриваемыми показателями.

Полученные коэффициенты корреляций имели как положительную, так и отрицательную направленность средней и низкой степени выраженности. Так, в группе больных ПБ количественное содержание а-спектрина обратно коррелировало с видом пыли на рабочем месте (г=-0,26) и признаками удушья (г=-0,32), а напрямую коррелировало с таким показателем как факт курения (г=0,25). Количественное содержания анкирина фракции 2.2 положительно коррелировало с проявлением кашля (г=0,24). Количественное содержание анкирина фракции 2.3 отрицательно взаимодействовало с таким показателем как вид пыли на рабочем месте (г=-0,23).

Рид положительных взаимосвязей у больных ПБ был отмечен между количественным содержанием белка полосы 4.1 и видом пыли на рабочем месте, средней степени выраженности (г=0,41), возрастом при заболевании (г=0,37) и признаками удушья (г=0,2б). Было установлено шесть статистически значимых связей различной направленности количественного содержания белка полосы 4.2 и видом пыли на рабочем месте (г=0,43), возрастом при заболевании (г=0,24), таким клиническим показателем как кашель (г=0,33), признаками удушья (г=0,26), ОФВ1 (г=0,29) и обратная взаимосвязь со степенью бронхообструкции (г=-0,25).

Количественное содержание тропомиозина фракции 7.2 в составе клеточных мембран эритроцитов больных ПБ обнаружило две обратные взаимосвязи — с видом пыли на рабочем месте (г=-0,46) и с возрастом при заболевании (г=-0,42), а также положительную связь с МОС75% (г=0,31). Количественное содержание белка полосы 8 обратно коррелировало с таким показателем как ЖЕЛ (г=-0,23) и положительно со степенью бронхообструкции (1=0,23).

В ходе работы также были проанализированы результаты корреляционного анализа между клиническими проявлениями ПБ и липидным составом клеточных мембран эритроцитов.

В группе больных профессиональным брюнхитом было установлено две статистически значимые связи обратной направленности между количественным содержание ЛФХ в составе клеточных мембран эритроцитов и видом пыли на рабочем месте (г=-0,30), а также с МОС25% (г=-0,26).

Количественное содержание мембранного сфингомиелина обратно коррелировало с МС)С50% (г=-0,29). Количественного содержание ЛФХ сыворотки крови больных ПБ обратно коррелировало с таким клиническим проявлением как кашель (г=-0,39), а количественное содержание ФХ в сыворотке крови больных положительно коррелировало с одышкой при профессиональном бронхите (г=0,33).

Выделен ряд корреляционных взаимосвязей особенностей течения ПБ с фушециональкой активностью рибосомных генов.

В группе больных ПБ было установлено лишь две статистически значимые связи - отрицательная между суммарным показателем ФАРГ по 10

акроцентрическим хромосомам и одышкой (г=-0,22), положительная взаимосвязь между количеством рибосомных цистронов и ФЖЕЛ (г=0,29). Можно полагать, что показатели ФАРГ не так явно вовлечены в патогенез профессионального бронхита, как, например, белковый спектр мембран эритроцитов.

В результате было выделено 6 признаков, обладающих наиболее высокой прогностической ценностью. Полученные данные представлены в таблице 10.

Полученное итоговое уравнение линейно-дискриминантной функции открывает возможность выполнения предварительной оценки прогноза течения заболевания с диагностической ошибкой 4,37% только по вышеуказанным критериям.

Для больных ПБ, также был проведен логистический регрессионный анализ, в результате которого были получены коэффициенты регрессии, позволяющие определить вероятность течения и исхода рассматриваемого заболевания.

Таблица 10

Диагностически ценные характеристики больных ПБ для прогнозирования течения заболевания Р(14,351)=73,42, р<0,01_

№ Признак- Ценность признака Р Коэффициент регрессии (Ь)

2 Кашель; 1 - не беспокоит; 2 — редкий, в основном по утрам; 3 - периодический в течение дня; 4 - постоянный 42,72 0,001 -0,312

3 Контакт с пылью на рабочем месте: 1 — нет; 2 -да 31,36 0,001 -0,563

4 пев, % 26,38 0,001 -0,015

5 Степень бронхообструкции: 1 - 0<t>B>80%; 2 — ОФВ 80-70%; 3-ОФВ 70-50%; 4 - (ЭФВ<50% 5,57 0,019 -0,199

6 ЖЕЛ, % 4,30 0,039 0,007

Const anta (bo) 4,825

Ошибка классификации 4,37 %

Пример 2.

У больного В. нет одышки, кашель не беспокоит, на рабочем месте нет контакта с пылью, пиковая скорость выдоха составляет 95%, легкая степень бронхообструкции, жизненная емкость легких составляет 86%. Подставив эти значения в уравнение регрессии, получим:

у==4,825+(-0,280*1)+(-0,312* 1)+(-0,563*1)+(-0,015*95)+(-0,199*2)+

+(0,007*86)=2,449

Р:=2,722,449/(1+2,722'449)=0,92

У больного Г. из-за одышки приходится останавливаться после прохождения примерно 100 м, беспокоит постоянный кашель, на рабочем месте имеет место контакт с пылью, пиковая скорость выдоха составляет 38%, тяжелая: степень бронхообструкции, жизненная емкость легких составляет 31%. Подставив эти значения в уравнение регрессии, получим:

у=4,825+(-0,280*4)+(-0,312*4)+(-0,563 *2)+(-0,015 *3 8)+{-0,199*4)+

+10,007*31)=0,182

Р==2,72о'ш/(1+2,72о'182)=0,55

Таким образом, у больного В. вероятность благоприятного исхода составляет 92%, а у больного Г. - 55%.

ВЫВОДЫ

1. Изучение количественной представительности белков и фосфолипидов клеточных мембран эритроцитов у больных ХОБЛ, в сравнении с контролем, позволило выявить изменения, характеризующиеся увеличением содержания анионтранспортного белка, паллидина, белка полосы 4.5 и мембранного фосфатидилэтаноламина, а также снижением содержания фракции анкирина 2.2, ГвТ. мембранных фосфатидилхолина и кардиолипина.

2. У больных профессиональным бронхитом, в сравнении с контролем, выявлены изменения, характеризующиеся увеличением количественного содержания а-спектрина, АТБ, паллидина и дематина, а также снижением содержания фракций анкирина 2.1, 2.2, мембранных лизофосфатидилхолина, сфингомиелина, фосфатидилинозитола/серина, кардиолипина и сывсроточнолизофосфатидилхолина.

3. Изучение функциональной активности рибосомных генов выявило снижение активности рибосомных генов у больных профессиональным бронхитом (19,15 усл.ед.), в сравнении с контрольной группой (19,88 усл.ед., 1=1,99). При ХОБЛ различия в уровне функциональной активности рибосомных генов (19,99 усл.ед.) не достигали статистически значимого уровня по сравнению с контролем (1=0,28).

4. Многомерный анализ в пределах рассмотренных нозологических форм выявил статистически значимые различия в характере варьирования молекулярно-биохимических показателей между собой. Полученные результаты служат доказательством того, что ХОБЛ и профессиональный бронхит представляют собой разные статистические совокупности по характеру количественного варьирования белково-липидного спектра мембран эритроцитов и функционирования активных рибосомных генов.

5. Установлены корреляционные взаимосвязи молекулярно-генетических показателей с клиническими и социально-биологическими характеристиками больных ХОБЛ и профессиональным бронхитом. Полученные достоверные

взаимосвязи проявляли среднюю и низкую степень выраженности и были различной направленности.

6. При хронической обструктивной болезни легких выделены наиболее ценные признаки для прогнозирования течения и исхода заболевания: одышка, кашель, факт контакта с пылью, ЖЕЛ, ФЖЕЛ, количественное содержание ГБТ, ФЭ и КЛ. При этом ошибка классификации составила 13,03%.

7. При профессиональном бронхите выделено шесть прогностически ценных признака: одышка, кашель, факт контакта с пылью, ПСВ, степень бронхообструкции и ЖЕЛ. Осуществление прогнозирования течения и исхода заболевания возможно с вероятностью 95,63%.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Храмцов A.B., Климова Е.А., Трубникова Е.В., Бобынцева О.В .Прогнозирование распространенности хронических обструктивных болезней легких (ХОБЛ) в г. Курске и Курской области // Материалы 75-й Всероссийской научной конференции студентов и молодых ученых с международным участием: Молодежная наука и современность. - Курск, 2010. -Часть 1.-С. 72.

2. Храмцов A.B., Иванов В.П., Лукьянчикова Н.Н.Половой диморфизм и состав неточных мембран эритроцитов человека // Материалы Всероссийской конференции с элементами научной школы для молодежи «Репродуктология: новые технологии, проблемы перспективы». — Белгород, 2010. — С. 175-182.

3. Храмцов A.B., Иванов В.П., Бачинский О.Н., Трубникова Е.ВЛипидный спектр клеточных мембран эритроцитов человека при ХОБЛ // Сборник научных трудов XX Национального конгресса по болезням органов дыхания. - Москва, 2010. - С. 444.

4. Климова Е.А., Трубникова Е.В., Стабровская Н.В., Храмцов A.B., Бачинский О.Н., Белоус A.C., Кононыхина Н.В.Анализ взаимосвязи ассоциативной активности хромосом и экспрессии рибосомных генов у больные ХОБЛ // Сборник материалов II Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Медико-биологические аспекты мультифакториальной патологии». — Курск, 2011 - С. 62-63.

5. Храмцов A.B., Трубникова Е.В., Иванов В.П., Стабровская Н.В .Структура корреляционных взаимосвязей белкового спектра мембран эритроцитов и функциональной активности рибосомных генов у больных профессиональным бронхитом // Сборник материалов II Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Медико-биологические аспекты мультифакториальной патологии». - Курск, 2011 - С. 112-113.

6. Храмцов A.B., Иванов В.П., Бачинский О.Н. Молекулярно-биохимический состав клеточных мембран эритроцитов при непрофессиональном бронхите у человека // Материалы VI научно-практической конференции молодых ученых с международным участием, посвященной 95-летию кафедры внутренних болезней №1 «Завадские чтения». - Ростов-на-Дону, 2011 - С. 159-160.

7. Храмцов A.B., Иванов В.П. Количественный состав мембран эритроцитов при бронхолегочных патологиях // Сборник научных, учебных и учебно-методических трудов «Современные технологии в медицине и педагогике». - Курск, 2010. - С. 129-130.

8. Бачинский О.Н., Бабкина В.И., Корнеи A.B., Полякова Н.В., Храмцов A.B. Проблема профессиональных заболеваний дыхательной системы на территории Курской области // Здоровье населения и среда обитания. - 2011. -№2. - С. 40-43.

9. Смотрова A.B., Храмцов A.B. Структура корреляционных взаимосвязей липидного спектра мембран эритроцитов у больных непрофессиональным бронхитом // Материалы 76-ой Всероссийской научной конференции студентов и молодых ученых с международным участием: Молодежная наука и современность. - Курск, 2011. - С. 78-79.

10. Климова Е.А., Храмцов A.B., Барт И.И., Трубникова Е.В., Стабровская Н.В.Изучение показателей функциональной активности рибосомных генов у больных с хронической обструктивной болезнью легких // Материалы 76-ой Всероссийской научной конференции студентов и молодых ученых с международным участием: Молодежная наука и современность. -Курск, 2011.-С. 69-70.

11. Храмцов A.B., Иванов В.П., Трубникова Е.В., Стабровская Н.В .Вовлеченность молекулярно-генетический факторов в формирование хронического бронхита непрофессионального генеза // Материалы II Всероссийской школы-конференции «Биомика - наука XXI века». - Уфа, 2011. -С. 140-141.

12. Трубникова Е.В., Стабровская Н.В., Храмцов A.B. Особенности ассоциативной активности акроцентрических хромосом у больных с ХОБЛ // Материалы IV Международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы биологии, нанотехнологий и медицины». - Ростов-на-Дону, 2011.-С. 74-75.

13. Храмцов A.B. Функциональная активность рибосомных генов при хроническом бронхите непрофессионального генеза // Материалы IV Международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы биологии, нанотехнологий и медицины». - Ростов-на-Дону, 2011. - С. 76.

14. Храмцов A.B., Иванов В.П., Бачинский О.Н., Трубникова Е.В., Стабровская Н.В. Белковый спектр клеточных мембран эритроцитов при бронхите непрофессионального генеза // Курский научно-практический вестник «Человек и его здоровье».-2011, №3.-С. 154-158.

15. Храмцов A.B., Иванов В.П., Бачинский О.Н., Трубникова Е.В., Стабровская Н.В. Молекулярно-генетические факторы и их вовлеченность в формирование профессионального бронхита // Фундаментальные исследования. -2011,№11 (2).-С. 377-381.

16. Трубникова Е.В., Стабровская Н.В., Храмцов A.B., Климова Е.А., Барышев А.С.Изменение функциональной активности рибосомных генов при адаптации к внешним условиям // Материалы международной научно-практической конференции «Современные проблемы и пути их решения в науке, транспорте, производстве и образовании». - Одесса, 2011. - Том 34. - С. 90-94.

17. Храмцов A.B., Иванов В.П., Бачинский О.Н.Белковый и липидный спектр клеточных мембран эритроцитов у пациентов с профессиональным бронхитом // Пульмонология. - 2012, №1. - С. 75-77.

18. Храмцов A.B., Иванов В.П., Трубникова Е.В., Стабровская Н.В., Бачинский О.Н., Кононыхина Н.В.Хронический бронхит непрофессионального

генеза и вовлеченность молекулярно-генетических факторов в его патогенез // Архивъ внутренней медицины. - 2012, №1 (3). - С. 72-75.

19. Храмцов A.B., Иванов В.П., Трубникова Е.В., Стабровская Н.В., Бачинсмш О.Н., Кохтенко Е.В.Многомерный анализ функциональной активности рибосомных генов при хронической обструктивной болезни легких // Фундаментальные исследования. - 2012, №5 (2). - С. 369-373.

СПИСОК УСЛОВНЫХ СОКРАЩЕНИЙ

АТБ - анионтранспортный белок

БСМЭ - белковый спектр мембран эритроцитов

ЖЕЛ - жизненная емкость легких

иРНК - информационная рибонуклеиновая кислота

КЛ - кардиолипин

ЛФХ - лизофосфатидилхолин

МОС - мгновенная объемная скорость выдоха

ОФВ1 - объем форсированного воздуха за первую секунду

ПБ - профессиональный бронхит

ПСВ - пиковая скорость выдоха

РГ — рибосомные гены

СМ - сфингомиелин

Усл.ед. — условные единицы

ФЖЕЛ - функциональная жизненная емкость легких ФИ/ФС — фосфатидилинозитол/серин ФХ— фосфатидилхолин ФЭ — фосфатидилэтаноламин

ХОБЛ - хроническая обструктивная болезнь легких

Храмцоп Александр Валентинович (Россия)

Биохимический состав мембран эритроцитов и функциональная активность рибосомных генов в эгиопатогенезе хронической обструктивной болезни легких и профессиона льного бронхита

Исследование посвящено изучению состояния функциональной активности рибосомных генов и биохимического состава мембран эритроцитов при хронической обструктивной болезни легких различной этиологии. Изучение активности рибосомных генов проводится на метафазных хромосомах лимфоцитов периферической крови человека, исследование количественного состава белков и липидов — на основе мембран эритроцитов. В работе впервые показан количественный состав мембран эритроцитов и работа белоксинтезирующего аппарата клетки у больных ХОБЛ различной этиологии. Проведена оценка влияния патогенеза заболеваний на молекулярно-биохимические факторы. Работа решает проблему прогнозирования, течения и исхода заболевания.

Kbramtsov Alecsandr Valentinovich (Russia)

Biochemical composition of erythrocytic membranes and functional activity cif ribosomal genes in the pathogenesis of chronic obstructive pulmonary disease and bronchitis

The study is devoted to the state of ribosomal genes functional activity and biological composition of erythrocytic membranes, chronic obstructive pulmonary disease of different etiology. Study of ribosomal genes activity is made on the metafase cromosomes of human peripheral blood lymphocytes, and qvantative composition of the proteins and lipids are done on the erythrocytic membranes. In the research at first time was shown the quantative composition of the erythrocytic membranes, actyvity of the proteinsynthetising cell apparatus in patients with COPD of different etiology. The analysis of the disease pathogenesis influence on the mole cular-biochemical factors was done. Work solves the problem of prognosis, flow and result of the disease.

ХРЛМЦОВ АЛЕКСАНДР ВАЛЕНТИНОВИЧ

Биохимический состав мембран эритроцитов и функциональная активность рибосомных генов в этиопатогенезе хронической обструктивной болезни легких и профессионального бронхита

Автореферат

Лицензия ИД №6248 от 12.11.2001

Подписано в печать 12.11.2012 г. Формат 60x84/16 Объем 1,7 п.л. Печать офсетная. Бумага офсетная. Тираж 100 экз. заказ 2536

Изд-во Курского государственного университета 305000, г. Курск, ул. Радищева, д. 33

Отпечатано в лаборатории информационно-методического обеспечения КГУ

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Храмцов, Александр Валентинович

СПИСОК УСЛОВНЫХ СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Распространенность, этиология и патогенез ХОБЛ и профессионального бронхита.

1.2. Структурно-функциональные особенности организации клеточных мембран.

1.3. Структурно-функциональные особенности работы белоксинтезирующего аппарата клетки.

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Материалы исследования.

2.2. Методы исследования.

2.2.1. Цитогенетические методы.

2.2.2. Биохимические методы.

2.2.3. Статистические методы.

РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ.

Глава 3. Молекулярно-биохимические показатели в норме у человека.

3.1. Количественное содержание основных белков мембран эритроцитов у человека в норме.

3.2. Количественное содержание мембранных и сывороточных фосфолипидов в норме у человека.

3.3. Функциональная активность рибосомных генов в норме у человека.

3.4. Обсуждение.

Глава 4. МОЛЕКУЛЯРНО-БИОХИМИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ И PIX ВОВЛЕЧЕННОСТЬ В ПАТОГЕНЕЗ ХРОНИЧЕСКОЙ ОБСТРУКТИВНОЙ БОЛЕЗНИ ЛЕГКИХ.

4.1. Характеристика больных ХОБЛ.

4.2. Количественное содержание основных белков мембран эритроцитов больных ХОБЛ.

4.3. Количественное содержание мембранных и сывороточных фосфолипидов у больных ХОБЛ.

4.4. Функциональная активность рибосомных генов у больных ХОБЛ.

4.5. Обсуждение.

Глава 5. МОЛЕКУЛЯРНО-БИОХИМИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ И ИХ ВОВЛЕЧЕННОСТЬ В ПАТОГЕНЕЗ ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО БРОНХИТА.

5.1. Характеристика больных профессиональным бронхитом.

5.2. Количественное содержание основных белков мембран эритроцитов у больных профессиональным бронхитом.

5.3. Количественное содержание мембранных и сывороточных фосфолипидов у больных ПБ.

5.4. Функциональная активность рибосомных генов у больных ПБ.

5.5. Обсуждение.

Глава 6. ВЛИЯНИЕ МОЛЕКУЛЯРНО-БИОХИМИЧЕСКИХ ФАКТОРОВ НА ОСОБЕННОСТИ ТЕЧЕНИЯ ХРОНИЧЕСКОЙ ОБСТРУКТИВНОЙ БОЛЕЗНИ ЛЕГКИХ И ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО БРОНХИТА.

6.1. Особенности течения ХОБЛ в зависимости от уровня ФАРГ и количественного состава клеточных мембран эритроцитов.

6.2. Особенности течения профессионального бронхита в зависимости от уровня ФАРГ и количественного состава клеточных мембран эритроцитов.

6.3. Обсуждение.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Биохимический состав мембран эритроцитов и функциональная активность рибосомных генов в этиопатогенезе хронической обструктивной болезни легких и профессионального бронхита"

В развитых и развивающихся странах отмечается устойчивая тенденция к увеличению распространенности ХОБЛ [70]. В ближайшие годы прогнозируется дальнейший рост числа больных ХОБЛ в России [17, 88, 89]. Распространенность симптомов ХОБЛ в большей степени зависит от табакокурения, возраста, профессии и состояния окружающей среды, и в меньшей степени - от пола и расовой принадлежности. Но фактически все популяционные исследования в разных странах показали большую распространенность и смертность от ХОБЛ среди мужчин в сравнении с женщинами [37, 67, 70, 72].

К большому сожалению, больные ХОБЛ обращаются за медицинской помощью уже на поздних стадиях заболевания, когда у них диагностируется дыхательная недостаточность и легочное сердце [19, 86]. По данным Европейского респираторного общества только 25% случаев заболевания выявляется на ранних стадиях [67, 101]. В России диагностика ХОБЛ находится на низком уровне. По официальным данным Министерства здравоохранения, в стране насчитывается около 1 миллиона больных ХОБЛ, в то время как по данным эпидемиологических исследований, число этих больных в нашей стране может превышать 11 миллионов человек [17, 72, 86, 89].

В основе целого ряда патологических состояний, в том числе и ХОБЛ различной этиологии, лежат изменения свойств клеточных мембран, вызываемые как факторами внешней среды, так и внутренними функциональными расстройствами [35]. Механизмы развития патологических процессов связаны с нарушением структурных свойств мембранных белков и липидов [49, 54, 68].

Мультигенное семейство рДНК является одним из наиболее многочисленных генных семейств в геноме, и продукты экспрессии этих генов играют важную роль в жизнедеятельности клетки, обеспечивая в конечном итоге один из основных процессов - нормальный белковый синтез. Наиболее удобной моделью для изучения количественной представительности белков и липидов в клетке является мембрана эритроцитов [33, 36, 58].

Выбор мембраны эритроцитов в качестве объекта исследования был продиктован тем, что ей присущи общие принципы молекулярной организации плазматических мембран. Поэтому закономерности изменений структуры и функции мембраны эритроцитов с определенной долей коррекции, обусловленной, прежде всего, видовой специфичностью клеток, могут быть экстраполированы на иные мембранные системы [35, 49, 69, 80]. Помимо этого, видимая простота организации эритроцита дает возможность изучать функциональные свойства плазматической мембраны без помех, накладываемых внутриклеточными мембранными образованиями и органеллами [81, 91].

Изложенное выше, а также необходимость дальнейшего расширения представлений о химическом составе клеточных мембран и функционировании белоксинтезирующего аппарата представляется важным как для понимания ключевой роли в структурной организации и функционировании клеток организма, так и является необходимым условием для разработки принципов коррекции мембранной патологии, определили актуальность проведения настоящего исследования.

Цель исследования

Изучить взаимосвязи состояния функциональной активности рибосомных генов и биохимического состава клеточных мембран эритроцитов при хронической обструктивной болезни легких и профессиональном бронхите у жителей г. Курска и Курской области.

Задачи исследования

Для достижения поставленной цели решались следующие задачи:

1. Выявить особенности белкового и липидного спектра клеточных мембран эритроцитов у больных ХОБЛ, ПБ и контрольной группы;

Научная новизна работы

Впервые проведена количественная и качественная оценка влияния вредных промышленных производств Курской области на структуру клеточных мембран и функционирование клеток. Изучен биохимический состав клеточных мембран эритроцитов и состояние функциональной активности рибосомных генов у больных ХОБЛ, обусловленный воздействием профессиональных вредных факторов на организм человека. Выявлены закономерности изменчивости белкового и липидного состава клеточных мембран, а также функциональной активности рибосомных генов у больных ХОБЛ и ПБ, в сравнении со здоровыми. Установлены взаимосвязи количественного состава клеточных мембран эритроцитов и состояния белоксинтезирующего аппарата клеток с клиническими проявлениями патологии, что открывает возможности для прогнозирования развития и исхода заболевания.

Практическая значимость работы Полученные в ходе исследования данные о взаимосвязи показателей функциональной активности рибосомных генов и биохимического состава клеточных мембран эритроцитов при патологиях органов дыхания рекомендуются к применению врачами-пульмонологами и врачами медико-генетических консультаций для ранней оценки прогноза течения и исхода заболевания. Также полученные результаты рекомендуются к использованию при изучении курсов цитологии, мембранологии, молекулярной биологии, физиологии и биохимии в высших медицинских и биологических школах.

Основные положения, выносимые на защиту

1. При хронической обструктивной болезни легких установлено нарушение в количественной представительности как структурных белков цитоскелета эритроцита, так и транспортных белков. Выявлен дефицит и избыток отдельных фракций мембранных фосфолипидов.

2. При профессиональном бронхите дезинтеграция количественной представительности была смещена в сторону белков цитоскелета эритроцита и обнаружен только дефицит основных фосфолипидных фракций мембран эритроцитов.

4. Сравнительный корреляционный анализ взаимосвязей цитогенетических и биохимических показателей разных нозологических форм и в контрольной группе свидетельствует о частичной вовлеченности рибосомных генов в детерминацию количественной представительности белков мембран эритроцитов, характеризующейся определенными особенности рассматриваемых выборок.

5. Молекулярно-генетические показатели испытывают на себе влияние патогенетических механизмов течения заболеваний органов дыхания, что проявляется в их взаимосвязи различной степени выраженности.

Внедрение в практику

Результаты исследования внедрены в работу областной медико-генетической консультации, кафедры биологии, медицинской генетики и экологии Курского государственного медицинского университета, научноисследовательской лаборатории «Генетика» Курского государственного университета.

Апробация и публикации

Результаты работы докладывались и обсуждались на Всероссийской конференции с элементами научной школы для молодежи «Репродуктология: новые технологии, проблемы перспективы» (Белгород, 2010), 75-й, 76-й и 77-й Всероссийской научной конференции студентов и молодых ученых с международным участием: Молодежная наука и современность (Курск, 2010, 2011, 2012), XX национальном конгрессе по болезням органов дыхания (Москва, 2010), II Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Медико-биологические аспекты мультифакториальной патологии» (Курск, 2011), IV научно-практической конференции молодых ученых с международным участием «Завадские чтения» (Ростов-на-Дону, 2011), II Всероссийской школе-конференции молодых ученых Уфимского научного центра РАН и Волго-Уральского региона по физико-химической биологии и биотехнологии «Биомика - наука XXI века» (Уфа, 2011), IV Международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы биологии, нанотехнологий и медицины» (Ростов-на-Дону, 2011), Международной научно-практической конференции «Современные проблемы и пути их решения в науке, транспорте, производстве и образовании» (Одесса, 2011). По материалам диссертации опубликовано 19 печатных работ.

Структура и объем диссертации Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, четырех глав результатов собственных исследований, заключения, выводов, практических рекомендаций, библиографического списка. Работа изложена на 110 страницах машинописного текста, содержит 47 таблиц и 4 рисунка. Библиографический список используемой литературы включает 185 источников, 93 из которых — зарубежные.

Заключение Диссертация по теме "Генетика", Храмцов, Александр Валентинович

116 выводы

1. Изучение количественной представительности белков и фосфолипидов клеточных мембран эритроцитов у больных ХОБЛ, в сравнении с контролем, позволило выявить изменения, характеризующиеся увеличением содержания анионтранспортного белка, паллидина, белка полосы 4.5 и мембранного фосфатидилэтаноламина, а также снижением содержания фракции анкирина 2.2, Г8Т, мембранных фосфатидилхолина и кардиолипина.

2. У больных профессиональным бронхитом, в сравнении с контролем, выявлены изменения, характеризующиеся увеличением содержания а-спектрина, АТБ, паллидина и дематина, а также снижением содержания фракций анкирина 2.1, 2.2, мембранных лизофосфатидилхолина, сфингомиелина, фосфатидилинозитола/серина, кардиолипина и сывороточно лизофосфатидилхолина.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. С целью доклинической диагностики ХОБЛ в комплекс обследования необходимо включать исследование белкового и липидного спектра мембран эритроцитов для последующей оценки риска развития ХОБЛ с использованием интегральных показателей ЛДФ.

2. При выявлении характерных для ХОБЛ изменений количественных показателей белково-липидного состава мембран эритроцитов пациента, его следует рассматривать как имеющего повышенный риск развития хронической обструктивной болезни легких и в дальнейшем необходимо проводить с ним комплекс профилактических мероприятий, направленных на предупреждение манифеста заболевания.

3. В рамках курсов цитологии, молекулярной биологии и биохимии высших учебных заведений биологической и медицинской направленности необходимо глубже освещать проблемы функционирования белоксинтезирующего аппарата клеток, а, следовательно, и дезинтеграции количественной представительности белковых молекул мембран эритроцитов при таких наиболее распространенных заболеваниях органов дыхания как хроническая обструктивная болезнь легких.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Храмцов, Александр Валентинович, Курск

1. Альберте Б., Брей Д., Льюис Д., Рэфф М., Роберте К., Уотсон Д. Молекулярная биология клетки. - М., 1994. - В 3-х т., Т. 1. - 516 с.

2. Антонов В.Ф. Липидные мембраны при фазовых превращениях/В.Ф. Антонов, Е.Ю. Смирнова Е.В. Шевченко. М.: Наука, 1992.

3. Арифов С.С., Саатов Т.С., Саатов Б.Т., Умеров О.И. Изучение липидов в сыворотке крови у больных витилиго // Клиническая дерматология и венерология. 2010. - №2. - С. 16-18.

4. Артамонова А.Г., Мухин H.A. Профессиональные болезни: Учебник . -4-е изд., перераб. и доп. М.: Медицина, 2004. - 480 с.

5. Барановская Л.И., Гарькавцев И.В., Кравец И.А. Характеристика функционального состояния ядрышкообразующих районов хромосом человека // Цитология. 1991. - Т. 29, № 9. - С. 51 -52.

6. Барков А.Н., Трубникова Е.В., Стабровская Н.В. Молекулярные особенности организации и транскрипции рибосомных генов // Ученые записки. Электронный научный журнал Курского государственного университета. 2007. -№1 (З).-С. 30-52.

7. Биологические мембраны. Методы: Пер. с англ./Под ред. Дж.Б. Финдлея, У.Г. Эванза. М.: Мир, 1990. - 424 с.

8. Бойтлер Э. Нарушения метаболизма эритроцитов и гемолитическая анемия. М.: Медицина, 1981. -256 с.

9. Болгова Л.С., Лобода В.И., Туганова Т.Н. Дцрышковые организаторы в процессе малигнизации бронхиального эпителия // Цитология и генетика. -1998.-Т. 32, №1.-С. 79-82.

10. Болдырев A.A., Котелевцев C.B., Ланио M., Альварес К., Перес П. Введение в биомембранологию. М.: Изд-во МГУ, 1990. - 208 с.

11. Бондарь Т.П., Козина Г.И. Морфофункциональное состояние эритроцитов периферической крови при поздних сосудистых осложнениях СДII // Клиническая лабораторная диагностика. 2002. - №12. - С. 22-33.

12. Брагина H.A., Миронов А.Ф. Мембранология. Учебно-методическое пособие. -М.: ИПЦМИТХТ, 2002. - 98 с.

13. Бучинская Л.Г. Изучение структурно-функциональных особенностей ядрышка при гиперпластических процессах и раке эндометрия: автореф. дис. . канд. биол. наук, Ин-т проблем онкологии и радиологии. Киев, 1989. — 17 с.

14. Бушуева О.Ю. Функциональная активность рибосомных генов и ее связь с особенностями клинического проявления и течения миомы матки: автореф. дис. . канд. мед. наук. -М., 2005. 32 с.

15. Васильева Е.М., Гордеева Г.Ф., Баканов М.И. Изменение содержания общих липидов и фосфолипидов в эритроцитах при неврологических нарушениях у детей // Педиатрия. 2003. - №2. - С. 116-117.

16. Васильева О.С. Хроническая обструктивная болезнь легких и профессиональные факторы // Пульмонология. 2007. - №6. - С. 5-11.

17. Вейко H.H. Особенности организации метилированных копий рибосомных генов в ядрах лимфоцитов человека / H.H. Вейко, H.A. Ляпунова, Д.М. Спитковский // Цитология. 2000. - Т. 42, №3. - С. 271.

18. Величковский Б.Т. Патогенетическая терапия и профилактика хронического пылевого бронхита с обструктивным синдромом // Пульмонология. 1995. -№3. - С. 6-19.

19. Владимиров Ю.А. Роль нарушений свойств липидного слоя мембран в развитии патологических процессов // Патолог, физиология и эксперим. терапия. 1989. - № 4. - С. 7-19.

20. Гвоздев В.А. Регуляция активности генов при созревании клеточных РНК // Соросовский образовательный журнал. 1996. -№12. - С. 11-18.

21. Гвоздев В.А. Регуляция активности генов, обусловленная химической модификацией (метилированием) ДНК // Соросовский образовательный журнал. 1999.-№10.-С. 11-17.

22. Геннис Р. Биомембраны: молекулярная структура и функции. М.: Мир, 1997.-624 с.

23. Горбунов Н.В., Баранов B.C. Введение в молекулярную диагностику и генотерапию наследственных заболеваний. Санкт-Петербург. - 1997, Спец. литература. - 286 с.

24. Горбунов Н.В. Влияние структурных модификаций мембранных белков на липид-белковое взаимодействие в мембране эритроцитов человека // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1993. - т. CXVI, №11.-С. 488-491.

25. Гринштейн C.B., Кост O.A. Структурно-функциональные особенности ' * мембранных белков // Успехи биологической химии. 2001. - Т. 41. - С. 77 -104.г

26. Давыдов С.А., Бахирев A.M., Лизенко М.В., Петровский В.И., Регеранд Т.И. Нарушение структурных липидов в патогенезе бронхиальной астмы // , Пульмонология. 2004. - №4. - С. 47-52.

27. Дворецкий Л.И. Ведение пожилого больного ХОБЛ/Л.И. Дворецкий. -М.: Литтерра, 2005.-216 с.

28. Заводник И.Б., Лапшина Е.А., БрышевскаяМ. Эффект свободных жирных кислот на состояние липидного и белкового компонентов мембран // Биолог, мембраны. 1995. -№ 5. - С. 516-523.

29. Зайцева Г.Н. Транскрипция генов рибосомных РНК эукариот/Г.Н. Зайцева, Е.В. Клещенко // Молекулярная биология. 1994. - Т.28, №5. - С. 965977.

30. Захаров С.Ф. Изучение мембранных белков эритроцитов человека в норме, на разных стадиях созревания и при наследственных сфероцитарных анемиях. Дисс. канд. мед. наук. -М., 1992. 356 с.

31. Иванов В.П., Барков А.Н., Трубникова Е.В., Стабровская Н.В. Цитогенетические изменения в лимфоцитах периферической крови кроликов при полихимиотерапии // Курский научно-практический вестник «Человек и его здоровье». 2009. -№3.- С. 18-25.

32. Иванов В.П., Полоников A.B., Солодилова М.А. Белки клеточных мембран и сосудистые дистонии у человека. Курск: КГМУ, КМИ, 2004. - 280 с.

33. Илькович М.М., Кузубова H.A., Киселева Е.А. Борьба с табакокурением как основа профилактики хронической обструктивной болезни легких // Пульмонология. 2010. - №2. - С. 37-39.

34. Использование полиморфизма в пределах кластера генов рРНК человека/Б.В. Скрябин, В.М. Гиндилис, Н.С. Куприянова, М.Я. Тимофеева // Генетика. 1989. - №7. - С. 1302-1309.

35. Исследование количества ядрышек в ядрах лимфоцитов периферической крови у ликвидаторов последствий аварии на ЧАЭС / Н.В.

36. Ибрагимова, JI.B. Туголукова, В.Ю. Кравцов, A.M. Никифоров // Цитология. -2001.-Т. 43, №Ю.-С. 941 -943.

37. Ишутина H.A., Дорофиенко H.H. Лизофосфатидилхолин и арахидоновая кислота маркеры мембранодеструкции и их метаболизм в условиях герпес-вирусной инфекции // Бюллетень физиологии и патологии дыхания.-2012.-№43.-С. 93-95.

38. Казеннов A.M., Маслова М.Н. Влияние мембранного скелета безъядерных эритроцитов на свойства транспортных АТФаз // Цитология. -1991. -Т.ЗЗ, №11. С. 32-41.

39. Казеннов A.M., Маслова М.Н., Шагабодов А.Д. Роль белков мембранного скелета безъядерных эритроцитов в функционировании мембранных ферментов // Докл. АН СССР. 1990. - Т. 312, №1. - С. 223-226.

40. Камкин А.Г. Физиология и молекулярная биология мембран клеток: учеб. пособие для студ. высш. мед. учеб. заведений/А.Г. Камкин, И.С. Киселева. М.: Издательский центр «Академия», 2008.-592 с.

41. Карпишенко А.И. Медицинская лабораторная диагностика: программы и алгоритмы: справочник / под ред. А.И. Карпишенко. СПб.: Интермедика, 1997. - 304 е.: ил.

42. Количественный анализ хроматографическими методами КбО/Под ред. Э. Кэц: Пер. с англ. -М.: Мир, 1990.-320 с.

43. Колчанова И.О. Функциональная активность рибосомных генов и ее модифицирующее влияние на особенности клинического проявления, течения и эффекты лечения язвенной болезни: дис. . канд. мед. наук. М., 2005. - 167 с.

44. Конев C.B. Структурная лабильность биологических мембран и регуляторные процессы. Минск: Наука и техника, 1987. - 238 с.

45. Конопля А.И. Взаимосвязь структуры и функции эритроцитов с иммунным гомеостазом. Курск: КГМУ, 2008. - 40 с.

46. Кравец Е.Б., Стенова Е.А., Кощевец Т.Ю. и др. Мембраны эритроцитов при метаболическом синдроме // Проблемы эндокринологии. 2010. - №5. - С. 23-26.

47. Крылов В.И., Виноградов А.Ф., Ефремова С.И. Метод тонкослойной хроматографии липидов мембран эритроцитов // Лаб. дело. 1984. - №4. - С. 205-206.

48. Кузьмина Л.П. Полиморфизм белковых систем и индивидуальная предрасположенность к бронхолегочным заболеваниям профессиональной этиологии // Мед. труды и пром. экол. 1999. - №5. - С. 28-31.

49. Лакин Г.Ф. Биометрия: учеб. пособие для биолог, специальностей вузов / Г.Ф. Лакин. 4-е изд., перераб. и доп. - М.: Высш. Школа, 1990. - 352 с.

50. Лизенко М.В., Петровский В.И., Регеранд Т.П., Бахирев A.M., Давыдов С.А. Нарушение структурных липидов в патогенезе бронхиальной астмы // Пульмонология. 2004. - №4. - С. 47-52.

51. Лисица A.B., Соодаева С.К., Климанов И.А., Чучалин А.Г. Роль фосфолипидов патогенезе и терапии бронхиальной астмы // Пульмонология. — 2006.-№4.-С. 112-115.

52. Локтионов А.Л., Конопля А.И., Долгарева С.А., Микаелян П.К., Коклин И.В. Белково-липидный спектр мембраны эритроцитов у больных острым панкреатитом различной этиологии до и после лечения // Фундаментальные исследования. 2011. - № 11. — С. 316-319.

53. Ляпунова H.A. Рибосомные гены в геноме человека: вклад в генетическую индивидуальность и фенотипическое проявление дозы гена / H.A. Ляпунова, H.A. Еголина, Т.Г. Цветкова // Вестн. Рос. АМН. 2000. - №5. - С. 19-23.

54. Ляпунова H.A. Рибосомные гены в геноме человека: вклад в генетическую индивидуальность и фенотипическое проявление дозы гена / H.A.

55. Ляпунова, H.A. Еголина, Т.Г. Цветкова // Вестн. Рос. АМН. 2000. - №5. - С. 1923.

56. Ляпунова H.A. Ядрышкообразующие районы хромосом человека: опыт количественного цитологического и молекулярного анализа / H.A. Ляпунова, H.H. Вейко // Биологич. мембраны. 2001. - Т. 18, №3. - С. 189-199.

57. Мамаев H.H. Структурная организация и экспрессия рибосомных генов в физиологических и патологических условиях / H.H. Мамаев // Цитология. -1997. №1. - С.80.

58. Мамаев H.H., Мамаева С.Е. Активность ядрышкообразующих районов нормальных и лейкозных клеток костного мозга человека//Цитология. — 1984. -Т.26, №1. С. 46-51.

59. Мамаев H.H., Мамаева С.Е. Структура и функции ядрышкообразующих районов хромосом: молекулярные, цитологические и клинические аспекты // Цитология. 1992. - Т. 34, №10. - С. 3-25.

60. Мамаев H.H., Мартинес У., Морозов Е.О., Иванова H.A. Характеристика окрашенных серебром ядрышек в бластных элементах разного диаметра больных острым лейкозом // Цитология. 1988. -Т. 30, №12. - С. 14781482.

61. Молекулярная биология и биосинтез нуклеиновых кислот/под ред. A.C. Спирина. М.: Высш. школа, 1990. - 352 с.

62. Молекулярная химическая диагностика. Методы: пер. с англ./ под ред. С. Херрингтона, Дж. Макги. М.: Мир, 1999. - С. 264-265.

63. Мушкамбаров H.H., Кузнецов С.Л. Молекулярная биология: Учебное пособие для студентов медицинских вузов. М.: ООО «Медицинское информационное агентство», 2007. - 536 с.

64. Новицкий В.В., Рязанцева Н.В., Степовая Е.А. и др. Молекулярные нарушения мембран эритроцитов при патологии разного генеза являются типовой реакций организма: контуры проблемы // Бюллетень сибирской медицины. 2006. - №2. - С. 62-69.

65. Новицкий В.В., Рязанцева Н.В. Структурная дезорганизация мембраны эритроцитов как универсальная типовая реакция целостного организма при болезнях дизрегуляции // Дизрегуляционная патология/Под ред. Г.Н. Крыжанов-ского. М.: Медицина, 2002. С. 395—405.

66. Овчаренко С.И., Капустина В.А. Хроническая обструктивная болезнь легких: особенности у женщин // Пульмонология. 2009. - №2. - С. 102-111.

67. Пендина A.A. Полиморфизм ядрышкообразующих районов хромосом у эмбрионов человека / A.A. Пендина, Т.В. Кузнецова, B.C. Баранов // Цитология. 2000. - Т. 42, №6 . - С. 587 - 592.

68. Порахонько H.A., Лаптева И.М. Патогенетические особенности хронической обструктивной болезни легких и бронхиальной астмы // Пульмонология. 2010. -№3. - С. 120-123.

69. Проказова Н.В., Звездина Н.Д., Коротаева A.A. Влияние лизофосфатидилхолина на передачу трансмембранного сигнала внутрь клетки // Биохимия, 1995.-Т.63.-С. 38-46.

70. Реброва О.Ю. Статистический анализ. медицинских данных. Применение пакета прикладных программ STATISTIC А / О.Ю. Реброва. М.: МедиаСфера, 2006. - 312с.

71. Сабанаева Е.В. Специфичность окрашивания ядрышковых организаторов азотнокислым серебром / Е.В. Сабанаева // Цитология. 1989. -Т.31, №1. - С. 5-14.

72. Сингер М. Гены и геномы: В 2-х т. Пер. с англ./М. Сингер, П. Берг. -М.: Мир, 1998.-373 с.

73. Смирнова О.Ю. Особенности организации функционирования ядрышка в условиях полного пространственного разобщения его основныхструктур in situ/O.IO. Смирнова, O.A. Дудник, O.B. Зацепина // Цитология. -2002. -Т.44, №1. С. 5.

74. Современные методы хромосомного анализа в клинико-цитогенетических исследованиях/ Т.А. Залетаева, Н.П. Кулешов, Д.В. Залетаев, О.Б. Барцева; Рос. мед. акад. последил, образования. М.: Медицина, 1994. -68с.

75. Степовая Е.А., Новицкий В.В., Гольдберг В.Е. и др. Особенности состояния мембран и метаболизма эритроцитов у больных раком легкого // Вопр. онкологии. 2004. - Т. 50, № 1. - С. 63-67.

76. Сторожок С.А., Санников А.Г. Молекулярные дефекты белков мембраны эритроцита // Вопр. мед. хим. 1996. - Т.42. - В.2. - С. 103-110.

77. Сторожок С.А., Санников А.Г., Захаров Ю.М. Молекулярная структура мембран эритроцитов и их механические свойства/Рос. акад. естеств. наук. -Тюмень: Изд-во Тюмен. гос. ун-та, 1997. 139 с.

78. Урбах В.Ю. Статистический анализ в биохимических и медицинских исследованиях /В.Ю. Урбах. М.: Медицина, 1975. - 296 с.

79. Фаллер Д.М. Молекулярная биология клетки: рук-во для врачей: пер. с англ. / Д.М. Фаллер, Д. Шилдс. М.: Бином-Пресс. - 2003. - С. 61.

80. Хромосомы человека: атлас / А.Ф. Захаров, В.А. Бенюш, Н.П. Кулешов, Л.И. Барановская; АМН СССР. -М.: Медицина, 1982. 264 е.: ил.

81. Хроническая обструктивная болезнь легких. Федеральная программа. М.; 2004.

82. Ченцов Ю.С. Введению в клеточную биологию: Учебник для вузов. -4-е изд., перераб. и доп./Ю.С. Ченцов. М.: ИКЦ «Академкнига», 2004. - 495 с.

83. Чучалин А.Г. Хроническая обструктивная болезнь легких и сопутствующие заболевания // Пульмонология. 2008. - №2. - С. 5 - 14.

84. Шмелев Е.И. Хроническая обструктивная болезнь легких и сопутствующие заболевания // Пульмонология. 2007. - №2. - С. 5 - 9.

85. Элементы структурной организации транскрибируемой области рибосомного повтора (рДНК) в лимфоцитах периферической крови человека / Н.Н. Вейко, Н.А. Ляпунова, Н.В. Косякова, Д.М. Спитковский // Молекуляр. биология. 2001. - Т.35, №1. - С. 52-64.

86. Эллиот В., Эллиот Д. Биохимия и молекулярная биология клетки. М.: НИИБМХ, 1999.-372 с.

87. Ядрышкообразующие районы (ЯОР) хромосом человека: опыт количественного цитологического и молекулярного анализа / Н.А. Ляпунова, Н.А. Еголина, Н.Н. Вейко и др. // Биологич. мембраны. 2001. - Т. 18, №3. -С.189-199.

88. An X.L., Takakuwa Y., Nunomura W. et al. Modulation of band 3-ankyrin interection by protein 4.1. Functional implications in regulation of erythrocyte membrane mechanical properties // Biol. Chem. 1996. - V. 271, №52. - P. 3318733191.

89. Banerjee Т., Kuypers F.A. Reactive oxygen species and phosphatidylserine externalization in murine sickle red cells // Br. J. Haematol. 2004. - V. 124, № 3. -P. 391-402.

90. Becker P.S., Schwartz M.A., Morrow J.S. et al. Radiolabel-transfer cross-demonstrates that protein 4.1 bind to the N-terminal region of beta spectrin and to actin in binary interections // Eur. J. Biochem. 1990. -V. 193, №3. - P. 827-836.

91. Beutler E., West C., Blume R.G. Removal of leokocytes and platelets from whole blood // J. Lab. Clin. Med. 1976. - V. 88. - P. 328-333.

92. Birch J.L. Structure and function of ribosomal RNA gene chromatin / J.L. Birch, J.C. Zomerdijk // Biochem. Soc. Trans. 2008. - V. 36. - P. 619-624.

93. Blank M., Soo L., Abbott R.E. The permeability of absorbed- and spread-membrane protein (spectrin-actin) films to ions // Adv. Chem. 1980. - V. 188. - P. 299-311.

94. Boschetto P., Quintavalle S., Miotto D. et al. Chronic obstructive pulmonary disease (COPD) and occupational exposures // J. Occup. Med. Toxicol. 2006. - V. 1. -P. 1-6.

95. Branton D., Cohen C., Tyler J. Interection of cytoskeletal proteins on the human erythrocyte membrane // Cell. 1981. -V. 24. - P. 24-32.

96. Buch P., Friberg J., Scharling H. et al. Reduced lung function and risk of atrial fibrillation in the Copenhagen City Heart Study // Eur. Respir. J. 2003. - V. 21 (6).-P. 1012-1016.

97. Caballero Oliver A., Stiefel Garcia-Junco P. Transmembrane Na+ transport kinetics in arterial hypertension: relation with vascular risk parameters. Med Clin (Bare) 1995 Dec 8. V. 105 (20). - P. 768-773.

98. Carter R., Nicotra B., Hurber G. Differing effects of airway obstruction on physical work capacity and ventilation in men and women with COPD // Chest. -1994. -V. 106 (6). P. 1730-1739.

99. Changes in the organization of ribosomal genes and nucleolar domains during activation process in sugarcane roots / R. Acevedo, A. Cuadrado, C. de la Torre, de la S.M.D. Espina // Acta Microscopica. 2007 - V. 16, №1-2. - Supp. 2. -P. 307-308.

100. Chapman K.R., Tashin D.P., Pye D.J. Gender bias in the diagnosis of COPD//Chest.-2001.-V. 119 (6).-P. 1691-1695.

101. Che A., Morrison I.E., Pan R. et al. Restriction by ankyrin of band 3 rotational mobility in human erythrocyte membranes and reconstituted lipid vesicles // Biochemistry. 1997. - V. 36, №31.- P. 9588-9595.

102. Croall D.E., Morrow J.S., De Martino G.N. Limited proteolysis of the erythrocyte membrane skeleton by calcium-dependent proteinases // Biochim. Biophys. Acta. 1986. -V. 882. - P. 287-296.

103. Dahl M., Vestbo J., Lange P. et al. Creactive protein as a predictor of prognosis in COPD // Am. J. Respir. Crit. Care Med. 2007. - V. 175. - P. 250-255.

104. Descatha A., Le Guillou F., CohenJonathan A.M. et al. Is the severity of occupational asthma related to the molecular weight of the allergen // Rev. Mai. Respir. 2006. - V. 23 (2). - P. 135-140.

105. Devereux G. (2006) ABC of chronic obstructive pulmonary disease. Definition, epidemiology and risk factors // BMJ. V. 332. - P. 1142-1144.

106. Di Stefano D. A comparative study of histology, hormone receptors, peanut lectin binding, Ki-67 immunostaining, and nucleolar organizer region-associated proteins in human breast cancer // Cancer. 1991. - V.67. - P. 463-471.

107. Dockery D.W., Pope C.A., Xu X. et al. An association between air pollution and mortality in six US cities //N. Engl. J. Med. 1993. -V. 329. - P. 17531759.

108. Dodge G.T., Mitchell C., Hanahan D.J. The preparation and chemical characteristics of hemoglobin free ghosts of human erythrocytes // Arch. Biochem. Biophys.- 1963.-V. 100.-P. 119-130.

109. Dutca L.M., Culver G.M. Regulation of rRNA processing: a role of unique GTPase Dutca L.M., Culver G.M. // Mol. Cell. 2005. - V. 20, № 4. - P. 497-499.

110. Fairbanks G., Steck T.L., Wallach D.F.H. Electrophoretic analysis of the major polypeptides of the human erythrocyte membrane // Biochemistry. 1971. - V. 10.-P. 2607-2617.

111. Fowler V.M., Bennett V. Erythrocyte membrane tropomyosin. Purification and properties // J. Biol.Chem. 1984. -V. 259 (9). - P. 5978-5989.

112. Fuso L., Incalzi R.A., Pistelli R. et al. Predicting mortality of patients for acutely exacerbated chronic obstructive pulmonary disease // Am. J. Med. 1995. - V. 98 (3).-P. 272-277.

113. Gan W.Q., Man S.F., Senthilselvan A., Sin D.D. The association between chronic obstructive pulmonary disease and systemic inflammation: a systematic review and a metaanalysis // Thorax. 2004. - V. 59. - P. 574-580.

114. Global Initiative for Chronic Obstructive Lung Disease (GOLD): Global strategy for the diagnosis, management, and prevention of chronic obstructive pulmonary disease NHLBI/WHO Workshop Report updated 2006. http://www.goldcopd.com.

115. Golan D.E., Corbett J.D., Korsgren C. et al. Control of band 3 lateral and rotational mobility by band 4.2 in intact erythrocyte: release of band 3 oligomers from low-affinity binding sites // Biophys. J. 1996. -V. 70, №3. - P. 1534-1542.

116. Golan D.E., Corbett J.D., Korsgren C. et al. Control of band 3 lateral and rotational mobility by band 4.2 in intact erythrocyte: release of band 3 oligomers from low-affinity binding sites//Biophys. J. 1996. -V. 70, №3.-P. 1534-1542.

117. Halpin D.M., Miravitlles M. (2006) Chronic obstructive pulmonary disease. The disease and its burden to society // Proc Am Thoracic Soc. V. 3. - P. 619-623.

118. Hansen A.B. Nucleolar organizer regions in hyperplastic and neoplastic prostatic tissue/A.B. Hansen, B Ostergard // Hirchows Arch'A. Pathol. Anat. 1990. -V.417.-P. 9-13.

119. Harada S., Abei M., Tanaka N. Biochemical and genetic studies of glutathione-S-trasferase // Japan J. Human Genet. 1987. - V. 32, №2. - P. 142-143.

120. Harris S.J., Lux S. Structural characterization of the phosphorylation sites of human erythrocyte spectrin// J. Biol. Chem. 1980. - V.255. - P. 11512-11520.

121. Heard K.S., Diguette M., Heard A.C. et al. Membrane-bound glyceraldehydes-3-phosphate dehydrogenase and multiphasic erythrocyte sugar transport // Exp. Physiol. 1998. - V. 83, №2. - P. 195-202.

122. Intergenic transcripts regulate the epigenetic state of rRNA genes / C. Mayer, K. M. Schmitz, J. Li et al. // Mol. Cell. 2006. - V. 22, issue 3. - P. 329-338.

123. Jacob S.T. Regulation of ribosomal gene transcription / S.T. Jacob // Biochem. J. 1995. -V. 306. - P. 617-626.

124. Jinbu Y., Sato S., Nakao T. et al. The role of ankyrin in shape and deformability change of human erythrocyte ghosts // Biochim. Biophys. Acta. 1984. -V. 773, №2.-P. 237-245.

125. Kanner R.E., Connett J.E., Altose M.D. et al. Gender difference in airway hyperresponsiveness in smokers with mild COPD: The Lung Health Study // Am. J. Respir. Crit. Care Med. 1994. -V. 150. - P. 956-961.

126. Kanzaki A., Inoue T., Wada H. et al. The complete band 4.2 deficiency in human red cells // Nippon. Rinsho. 1996. - V. 54, №9. - P. 2492-2501.

127. Kelley G.E., Winzor D.J. Quantitative characterization of the interections of aldolase and glyceraldehyde-3phosphate dehydrogenase with erythrocyte membranes // Biochim.Biophys.Acta. 1984. - V. 778, №1. - P. 67-73.

128. Korsgren C., Cohen C. M. Purification and properties erythrocyte band 4.2. Association with the cytoplasmic domain of band 3 // J. Biol. Chem 1986. - V. 261, №12.-P. 5536-5543.

129. Kos M. Yeast pre-rRNA processing and modification occur cotranscriptionally / M. Kos, D. Tollervey // Mol. Cell. 2010. - V. 37, № 6. - P. 809-820.

130. Kraft S. New developments in FcsRI regulation, function and inhibition / S. Kraft, J-P. Kinet // Nature Reviews Immunol. 2007. - V. 7. - P. 365-378.

131. Kuhn A. The nucleolar transcription activator UBF relieves Ku antigen mediated repression of mous ribosomal gene transcription / A. Kuhn, V. Stefanovsky, I. Grummt // Nucl. Acids Res. 1993. - V. 21. - P. 2057.

132. Laemmli U.K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacterophage T4 // Nature. 1970. - V. 227. - P. 680.

133. Laitinen J., Lopponen R., Merenmies J., Rauvala H. Binding of laminin to brain gangliosides and inhibition of laminin-neuron interaction by the gangliosides // FEBS Lett. 1987. -V. 217. - P. 94-100.

134. Lawrence R.J. Chromatin turn ons and turn offs of ribosomal RNA genes / R.J. Lawrence, C.S. Pikaard // Cell Cycle. 2004. - V. 13, №4. - P. 599-609.

135. Learned R.M., Learned T.K., Haltiner M.M., Tjian R.T. Human rDNA Trascription is Modulated by the Coordinate Binding of Two Factors to an Upstream Control Element// Cell. 1986. -V. 45. - P. 847-857.

136. Lombardo C.R., Willardson B.M., Low P.S. et al. Localization of the protein 4.1-binding site on the cytoplasmic domain of erythrocyte membrane band 3 // J. Biol. Chem. 1992. -V. 267, №14. - P. 9540-9546.

137. MacNee W. Oxidative stress and lung inflammation in air-ways disease. // Eur. J. Phan-nacol.-2001.-V. 429.-P. 195-207.

138. Malik S., Sami M., Watts A. A role for band 4.2 in human erythrocyte band 3 mediated anion transport // Biochemistry. 1993. - V. 32, №38. - P. 1007810084.

139. Mamaev N.N. Nucleolar organizer region activity in human chromosomes and interphase nuclei of normal, leukemic, and tumor cells as evaluated by silver staining / N.N. Mamaev, S.E. Mamaeva // Int. Rev. Cytol. 1990. - V. 121. - P. 233266.

140. Mayer A.S., Stoller J.K., Bartelson B. et al. Occupational exposure risks in individuals with PI-Z alpha 1-antitrypsin deficiency // Am. J. Respir. Crit. Care Med. 2000. - V. 162. - P. 553-558.

141. Mazur E.M. Evaluation of bone marrow megakaryocyte ploidy distributions in persons with normal abnormal platelet counts/J. Lab. Clin. Med. -1988.-V. 111.-P. 194-202.

142. Mizukami I-I., Bartnicki D.E., Chaplin L. Band 8 protein of human erythrocyte membrane: another Ca2+ binding protein // Prog.Clin.Biol.Res. 1984. -V. 159.-P. 47-55.

143. Murray H.D. Control of rRNA expression by small molecules is dynamic and nonredundant / H.D. Murray, D.A. Schneider, R.L. Gourse // Mol. Cell. 2003. -V. 12, № i.p. 125-134.

144. Neison W.J., Veshnock P.J. Ankyrin binding to Na/K-ATPase and implications in polarized cells // Nature (London). 1987. - V. 328. - P. 533-536.

145. Nucleoli and AgNORs in Hodgkins disease/N.N. Mamaev, N.V. Medvedeva. V.F. Shast // Mol. Pathol. 1997. -V. 50. - P. 149-152.

146. Ohmori K. Ribosomal RNA: transcription and cellular energy control / K. Ohmori, A. Murayama, J. Yanagisawa // Tanpakushitsu Kakusan Koso. 2009. - V. 54, №3.-P. 230-236.

147. Pasternack G.R., Anderson R.A., Leto T.L. et al. Interection between protein 4.1 and band 3 //J. Biol. Chem. 1985. -V. 260, №6. - P. 3676-3683.

148. Pauwels R.A. (2000) COPD. The scope of the problem in Europe // Chest. -V. 117.-P. 332-335.

149. Pauwels R.A. and Rabe K.F. (2004) Burden and clinical features of chronic obstructive pulmonary disease (COPD) // Lancet. V. 364. - P. 613-620.

150. Piitulainen E., Tornling G., Eriksson S. Environmental correlates of impaired lung function in nonsmokers with severe alpha 1-antitrypsin deficiency (PiZZ) // Thorax. 1998. - V. 53. - P. 939-943.

151. Postma D.S., Siafakas N.M., eds. Management of chronic obstuctive pulmonary disease. (The European Respiratory Society Monograph. № 7). 1998.

152. Prescott E., Bjerg A.M., Andersen P.K. et al. Gender difference in smoking effects on lung function and risk of hospitalization for COPD: results from a Danish longitudinal population study // Eur. Respir. J. 1997. - V. 10. - P. 822-827.

153. Preuss S. rRNA gene silencing and nucleolar dominance: insights into a chromosome-scale epigenetic on/off switch / S. Preuss, C.S. Picaard // Biochim. Biophys. Acta. 2007. - V. 1769, №5-6. - P. 383-392.

154. Rachiotis G., Savani R., Brant A. et al. Outcome of occupational asthma after cessation of exposure: a systematic review // Thorax. 2007. - V. 62 (2). - P. 147-152.

155. Red Blood Cell Membranes. Structure, function, clinical implications.-ed. By Peter Agre, John C. Parker. New York. - 1989, 733 p.

156. Sandermann H., Mclntyne J.O., Fleischer S. Site-Site interaction in the phospholipid activation of D-p-hydroxybutirate dehydrogenase // Bool. Chem. 1986. -V.261.-P. 6201-6208.

157. Schols A.M., Slangen J., Volovics L., Wouters E.F. Weight loss is a reversible factor in the prognosis of chronic obstructive pulmonary disease // Am. J. Respir. Crit. Care Med.- 1998.- V. 157 (6, pt. 1).-P. 1791-1797.

158. Shapiro S.D. Animal models for COPD // Chest. 2000. - V. " 117. - P. 223-227.

159. Sheetz M.P. Membrane skeletal dynamics: role modulation of red cell deformability, mobility of transmembrane proteins, and shape // Semin. Hematol. -1983.-V. 20.-P. 175-188.

160. Siafakas N.M. et al. Optimal assessment and management of chronic obstructive pulmonary disease // Eur. Respir. J. 1995. -V. 8. - P. 1398-1420.

161. Soriano J.R., Maier W.C., Egger P. et al. Recent trends in physician diagnosed COPD in women and men in the UK // Thorax. 2000. - V. 55. - P. 789794.

162. Spiegel S., Fishman P.H. (1987). Gangliosides as bimodal regulators of cell growth//Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1987. - V. 84.-P. 141-145.

163. Sung L.A., Lin J.J. Erythrocyte tropomodulin binds to the N-terminus of hTM5, a tropomyosin isoform encoded by the gamma-tropomyosin gene // Biochem.Biophys.Res.Commun. 1994. -V. 201, №2. - P. 627-634.

164. Sussman M.A., Fowler V.M. Tropomodulin binding to tropomyosins // Eur.J.Biochem. 1992. - V. 205, №1. - P. 355-362.

165. Sylvester I.E. The human ribosomal RNA genes: structure and organization of the complete repeating unit / I.E. Sylvester, D.A. Whiteman, R. Podolsky//Hum. Genet. 1986. - V. 73, N3.-P. 193-198.

166. Takakuwa Y., Manno S. Structure of erythrocyte membrane skeleton // Nippon. Rinsh. 1996. - V. 54, №9. - P. 2341-2347.

167. Thompson R.L., Devi-Rao G.W., Stevens J.G., Wanger E.K. Rescue of a herpes simplex virus type 1 neurovirulence function with a cloned DNA fragment // J. Virol. 1985. - V. 55. - P. 504-508.

168. Triboulloy C., Rosinaru D., Mahjoub H. et al. Prognosis of heart failure with preserved ejection fraction: a 5 year prospective population based study//Eur. Heart. J. - 2008. - V.29 (3). - P. 339-347.

169. Vincent T. The relevance of researcon red cell membranes to the understanding of complex human disease: a personal perspective // Annu. Rev. Pathol. Mech. Dis. 2008. - V. 3. - P. 1-9.

170. Wedzicha J.A., Seemungal T.A., MacCallum P.K. et al. Acute exacerbations of chronic obstructive pulmonary disease are accompanied by elevations of plasma fibrinogen and serum IL-6 levels // Thromb. Haemost. 2000. - V. 84. - P. 210-215.

171. Wegner A. Kinetic analysis of actin assembly suggests that tropomyosin inhibits spontaneous fragmentation of actin filaments // J. Mol. Biol. 1982. -V. 161. -P. 217-227.

172. White P.H., Plishker G.A. Calcium-dependent association of glutathione-S-transferase with human erythrocyte membrane // Biochem.Biophys.Res.Commun. -1983. V. 144, №2. - P. 488-492.

173. WHO (2004a) Health Statistics and Health Information Systems. Revised Global Burden of Disease (GBD) 2002 Estimates. Geneva: World Health

174. Organization. http://www.who.int/liealthinfo/bodgbd2002revised/en/index.htrnlaccessed 9 January 2007).

175. Zahradka P. Regulation of ribosome biogenesis in differentiated rat myotubes / P. Zahradka, D.E. Larson, B.H. Sells // Mol. Cell. Biochem. 1991. - V. 104.-P. 189-194.

Информация о работе

Храмцов, Александр Валентинович
кандидата биологических наук
Курск, 2012
ВАК 03.02.07

Диссертация

Биохимический состав мембран эритроцитов и функциональная активность рибосомных генов в этиопатогенезе хронической обструктивной болезни легких и профессионального бронхита - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы