Биохимические механизмы гепатопротекторного действия тритерпеноидов группы лупана и их фармакологическая активность

Карачурина, Лилия Талгатовна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Биохимические механизмы гепатопротекторного действия тритерпеноидов группы лупана и их фармакологическая активность
ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Автореферат диссертации по теме "Биохимические механизмы гепатопротекторного действия тритерпеноидов группы лупана и их фармакологическая активность"

На правах рукописи

КАРАЧУРИНА ЛИЛИЯ ТАЛГАТОВНА

БИОХИМИЧЕСКИЕ МЕХАНИЗМЫ ГЕПАТОПРОТЕКТОРНОГО ДЕЙСТВИЯ ТРИТЕРПЕНОИДОВ ГРУППЫ ЛУПАНА И ИХ ФАРМАКОЛОГИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ

03.00.04 - биохимия 14.00.25 - фармакология, клиническая фармакология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

УФА-2004

Работа выполнена в Институте органической химии Уфимского научного центра Российской академии наук

Научный руководитель:

доктор медицинских наук, профессор Зарудий Феликс Срульевич Научный консультант:

кандидат химических наук, доцент Флехтер Оксана Борисовна Официальные оппоненты:

доктор биологических наук, профессор Башкатов Сергей Александрович доктор медицинских наук, профессор Сибиряк Сергей Владимирович

Ведущая организация: Волгоградская медицинская академия

Защита состоится " июня 2004 г.

в % часов на заседании Регионального диссертационного совета

КМ 002.133.01 при Институте биохимии и генетики УНЦ РАН

по адресу: 450054, Уфа, проспект Октября, 69. тел. (3472) 35-54-79, факс (3472) 35-60-88, e-mail: dissovibg@anrb.ru

С диссертацией можно ознакомиться в Научной библиотеке Уфимского научного центра РАН по адресу: 450054, Уфа, проспект Октября, 71.

Автореферат разослан мая 2004 г.

Ученый секретарь

Регионального диссертационного совета: Гималов Ф.Р.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Высокий уровень заболеваемости населения вирусными гепатитами, многообразие токсических, лекарственных и аллергических поражений, органов гепатобилиарной системы требует эффективной медикаментозной терапии. В терапии заболеваний печени для фармакологической коррекции используют значительное количество лекарственных средств, влияющих на процессы тканевого обмена, повышающих дезинтоксикационную функцию печени, а также желчегонные средства, противовирусные и антимикробные препараты, иммуномодуляторы, ингибиторы и индукторы микросомальных систем, гепатопротекторы и антиоксиданты (Подымова С.Д., 1984; Машковский М.Д., 1987; Машковский М.Д., 2000).

Поступление в организм ксенобиотиков различной природы усиливает свободнорадикальные процессы и обусловленное ими перекисное окисление липидов. Усиление перекисного окисления липидов сопровождается нарушением структуры мембран гепатоцитов и угнетением функционального состояния печени (Венгеровский А.И., 1996). Развитие повреждений гепатобилиарной системы приводит к расстройствам микроциркуляции, иммунных механизмов и аллергических состояний (Николаев СМ., 1992; Сибиряк СВ., 2003), поэтому необходимость изучения фармакологических средств, эффективно корригирующих биохимические функции печени и иммунологическую реактивность организма, нарушенные экотоксикантами, остается актуальной проблемой (Алексеева И.Н. и др., 1991). В настоящее время известно достаточно много препаратов, которые, обладая определенным положительным воздействием, тем не менее, проявляют серьезные побочные эффекты. К тому же, большинство применяемых в России лекарственных средств дорогостоящие. Достаточно новой областью исследований является поиск высокоэффективных гепатопротекторов среди тритерпеновых соединений, в частности, группы лупана, основным источником которых служит кора белоствольных берез. Препараты из березы издавна применяли в народной медицине при лечении воспалений, дерматитов, желудочно-кишечных заболеваний, как мочегонные и желчегонные средства (Пастушенков Л.В., 1990; Соколов СЯ., 1991). В последние годы у лупановых

рос национальная! I библиотека 3

I С.Петерб»рг /-/У» ' ОЭ ЮП П

тритерпеноидов обнаружены ранозаживляющая, противовоспалительная, антибактериальная, гиполипидемическая и другие виды активности. Бетулиновая кислота обладает способностью селективно ингибировать рост опухолевых клеток путем индукции апоптоза и проходит предклинические испытания в США для лечения и профилактики меланомы. 3-0-(3',3'-Диметилсукцинил)-бетулиновая кислота, запатентованная фирмой Panacos Pharmaceuticals, находится на стадии предклинических исследований в качестве противовирусного средства. Однако практически неизученными аспектами оставались биохимические механизмы гепатопротекторной активности, иммуностимулирующие и антиоксидантные свойства тритерпеновых соединений группы лупана.

Работа выполнена в соответствии с планом научно-исследовательских работ Института органической химии УНЦ РАН по темам: "Синтез биологически активных веществ на основе растительных терпеноидов" (№ гос. регистрации 01.99.00 11836) и "Изучение биологической активности природных соединений" (№ гос. регистрации 01.20.00 13591).

Целью работы является изучение биохимических механизмов гепатопротекторного действия тритерпеноидов лупановой группы и исследование ряда их фармакологических свойств. Задачи исследования

1. Изучить биохимические механизмы гепатопротекторного действия производных тритерпеновых соединений лупановой группы при поражениях печени крыс различной этиологии в сравнении с официнальными препаратами.

2. Оценить состояние системы адениловых нуклеотидов в печени крыс при тетрахлорметановой интоксикации на фоне введения исследуемых соединений.

3. Изучить влияние тритерпеновых соединений лупановой группы на содержание окисленных и восстановленных форм никотинамидадениндинуклеотидов.

4. Исследовать фармакологические свойства производных бетулина: антиоксидантные, противоязвенные, противовоспалительные, ранозаживляющие и радиопротекторные. Изучить иммуномодулирующее действие тритерпеноидов лупановой группы и влияние на фагоцитарную активность лимфоцитов у крыс.

5. Определить острую и субхроническую токсичности тритерпеновых соединений лупановой группы на крысах.

Научная новизна и практическая значимость. Впервые исследованы

биохимические механизмы гепатопротекторной активности при экспериментальных поражениях печени крыс у 3,28-ди-О-никотината бетулина и 3,28-ди-0-гемифталата бетулина, наиболее перспективных. соединений, отобранных в результате биоскрининга 20 новых производных лупановых тритерпеноидов. Изучено влияние данных соединений на состояние, систем адениловых нуклеотидов и никотинамидных коферментов. Обнаружены антиоксидантные, противовоспалительные,. гастрозащитные, ранозаживляющие, радиопротекторные свойства. Впервые показано иммуностимулирующее действие тритерпеноидов группы лупана, а также, их влияние на фагоцитирующую способность лимфоцитов. Установлена низкая токсичность эфиров бетулина.

Апробация работы. Материалы диссертации представлены на V Международной конференции «Биоантиоксидант» (Москва, 1998); Международной научной конференции «Органический синтез и комбинаторная химия» (Москва-Звенигород, 1999); Всероссийской Научной конференции «Актуальные проблемы экспериментальной и клинической фармакологии» (СПб., 1999); Международной конференции «Поиск, разработка и внедрение новых лекарственнх средств и организационных форм фармацевтической деятельности» (Томск, 2000); Информационном бюллетене «Экспериментальная и клиническая фармакология» (Пермь, 2000); VI Международной конференции «Биоантиоксидант» (Москва, 2002); II Всероссийской конференции «Химия и технология растительных веществ» (Казань, 2002).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 11 статей в центральной печати, 7 тезисов, получен 1 патент.

Структура и объем работы. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, экспериментальной части, в которой приводятся методы, результаты собственных исследований, обсуждение результатов, заключение, выводы, а также списка литературы, включающего 212 источников, из них 115 отечественных и 97 зарубежных авторов. Диссертация изложена на 152 страницах с использованием

персонального компьютера типа IBM PC/AT и иллюстрирована 26 таблицами и 2J. рисунком.

Опыты проводили на 820 белых беспородных крысах массой 180-200 г и 580 мышах массой 16-18 г. В качестве объектов исследования использовали 20 новых тритерпеновых соединений лупановой группы, синтезированных в лаборатории тонкого органического синтеза Института органической химии УНЦ РАН. В результате биоскрининга холеретической активности были выявлены наиболее эффективные соединения 3,28-ди-Оникотинат бетулина I и 3,28-ди-О-гемифталат бетулина II. Эффективные экспериментальные дозы, вычисленные при ССЦ-гепатите на крысах, составили для соединения 1-12 мг/кг и для соединения II - 20 мг/кг. В качестве препаратов сравнения использовали карсил (Sophaгma, Болгария) и силибор.

Параметры острой токсичности определяли на мышах по Литчфилду-Уилкоксону (Беленький М.Л., 1963). Желчегонную активность оценивали по общепринятой методике Скакуна НЛ., Олейник А.Н. (1987). Токсический гепатит вызывали введением 0.4 мл/100 г массы 50% масляного раствора тетрахлорметана (Николаев СМ., 1992). Повреждения печени парацетамолом (500 мг/кг, 2 дня), тетрациклином (500 мг/кг, 5 дней), этанолом (1.2 мл/100 г, 40% раствора, 4 дня) получали согласно методическим рекомендациям по изучению гепатозащитных средств (1999). Определяли в сыворотке крови крыс активность аланин- и аспартатаминотрансфераз по Reitman S. и Frankel S. (1957), щелочной фосфатазы, общего белка биуретовым методом, холестерина, билирубина с помощью наборов "Lachema" (Чехословакия). Морфологическое исследование срезов печени проводили на окрашенных гематоксилин-эозином препаратах. Содержание

1. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

3,28-ди-£?-никотинат бетулина соединение I

3,28-ди-О-гемифталат бетулина ■ соединение П

адениловых нуклеотидов, никотинамидных коферментов и активность лактатдегидрогеназы оценивали по Прохоровой М.И. (1982). Содержание малонового диальдегида в гомогенате печени определяли по Стальной И.Д., Гаришвили Т.Г. (1977). Экспериментальные повреждения, желудка вызывали введением индометацина в дозе 20 мг/кг (Derelanko M.J., 1980), ацетилсалициловой кислоты 300 мг/кг, 60% раствора этанола в 150 мМ соляной кислоты (Кузьмицкий Б.Б., 1992), 70% этанола в подсерозную оболочку желудка (Аничков СВ., 1965). Криогенную язву получали по методу Вертелкина В А. (1987). Противовоспалительную активность изучали по Тринус Ф.П., Мохорт НА. (1975). Гуморальный иммунный ответ оценивали у мышей по количеству антителообразующих клеток по Jeme N.K., Nordin A.A. в модификации Cunningham A.J. (1968). Оценку Т-клеточного иммунитета проводили путем воспроизведения гиперчувствительности замедленного типа к эритроцитам барана и динитрохлорбензолу по методу Кпор I. (1982). Фагоцитирующую активность лимфоцитов изучали по способности поглощать частицы латекса (Имельбаева Э.А., 1996). Ожоги и раны вызывали у крыс по методу Билич Г.Л., Колла В.Э. (1978). Острую лучевую болезнь животных вызывали аппаратом "Рокус" в дозе 6 Гр. Изучение субхронической токсичности 3,28-ди-О-никотината бетулина и 3,28-ди-0-гемифталата бетулина проводили на следующих тестах: влияние на центральную нервную систему; влияние на функциональное состояние печени и почек у крыс; местно-раздражающее действие; аллергизирующее свойство соединений; изменение биохимических показателей крови крыс.

Воспроизведение экспериментальных патологий (гепатитов, язв, ожогов, ран, воспалений) проводили у наркотизированных этаминалом натрия животных. Декапитацию осуществляли под эфирным наркозом. Статистическую обработку полученных результатов проводили с применением программного обеспечения Microsoft Excel с подсчетом средних значений, средних квадратичных отклонений. Достоверность различий результатов экспериментов оценивали с использованием t-критерия Стьюдента. Различия между группами считали существенными при уровне значимости Р<0.05.

2. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

2.1. Желчегонная активность тритерпеноидов лупановой группы у крыс Печень вовлечена во многие патологические процессы и ее поражения вызывают серьезные нарушения метаболизма, детоксикации и антимикробной защиты. Известно, что соединения бетулина обладают гепатозащитными свойствами при интоксикации хлоридом кадмия и D-галактозоамином (Miura N., 1999; Banskota A.H., 2000; Adnyana I.K., 2001; Hirova К., 2002).

Результаты изучения холеретической активности 20 новых производных тритерпеноидов лупановой группы свидетельствуют, что исследуемые соединения в дозе 50 мг/кг (1/10 от ЛДзо) оказывают эффективное желчегонное действие, превосходящее показатели интактных животных.

Рис. 1. Влияние 3,28-Ди-О-гемифталата бетулина II на желчевыделительную активность при различных поражениях печени у крыс (п=6)

1 - ССЦ-гепатит; 2 - тетрациклиновый гепатит, 3 - алкогольный гепатит, 4 - ССЦ+этанол

Фармакологический эффект 3,28-ди-0-гемифталата бетулина II обусловлен

желчегонной активностью при повреждениях гепатобилиарной системы различной этиологии, и выявленной нашими исследованиями способностью тормозить процессы перекисного окисления липидов в биологических мембранах гепатоцитов (Рис. 1).

2.2. Гепатопротекторная активность соединений ЫII Установлено, 3,28-ди-О-никотинат бетулина и 3,28-ди-О-гемифталат бетулина действительно проявляют гепатозащитные свойства на экспериментальных моделях поражения печени тетрахлорметаном, парацетамолом, этанолом. Об этом свидетельствует достоверное снижение уровней сывороточных аланин- и аспартатгрансаминаз, уменьшение активности щелочной фосфатазы, что подтверждает способность соединений предотвращать

Таблица 1

Влияние соединений I иП на показатели, характеризующие синдромы поражения гепатоцитов при тетрахпорметановой

интоксикации печени крыс

Показатели Интактные ССЦ - гепатит 1 + ССЦ- н+ссц- Карсил+

животные (контроль) гепатит гепатит ССЦ-гепатит

АЛТ, мкмоль/ч л 0.92Ю.09 4.7±0.20 2.8±0.33* 3.!±0.40» 2.3Ю.51*

ACT, мкмоль/ч л 1.94±0.25 6.2±0.10 3.1±0.20* 5.5±0.20* 3.510.46*

ЩФ, ммоль/ч л 0.81 ±0.42 2.310.60 1.6±0.47 0.53Ю.50* 1.1±0.58

Интенсивность секреции желчи, мг/мин/100 г 3.56Ю.23 1.77±0.17 5.22Ю.51*# 4.61Ю.22*# 3.20±0.16»

• - достоверные результаты по сравнению с контролем, (Р<0 05)

# - достоверные результаты по сравнению с карсилом, (Р<0 05) Количество животных в группах - 6.

Таблица 2

Влияние соединений I иП на содержание общего белка, холестерина и билирубина в сыворотке крови при

тетрахлорметановой интоксикации печени крыс

Показатели Интактные животные CCLt- гепатит (контроль) I + CCU-гепатит II + ССЦ-гепатит Карсил + ССЦ-гепатит

Общий белок, г% 7.410.19 6.510.40* 8.110.30* 7.510.17 7.310.25

Холестерин, ммоль/л 3.2±0.50 6.910.77 5.1Ю.50* 5.610.42* 4.9Ю.85

Билирубин общий, мкмоль/л 12.311.11 44.213.9 26.111.2*# 31.111.57*# 25.411.4*#

* - достоверные результаты по сравнению с интактными животными, Р<0 05

# - достоверные результаты по сравнению с контролем (гепатит), Р<0 05 Количество животных в группах - 6.

нарушение целостности клеточных мембран гепатоцитов при тетрахлорметановом поражении печени у крыс (Табл. 1).

Некоторое повышение уровня общего белка в сыворотке крови крыс доказывает сохранение белоксинтезирующей функции печени на фоне введения исследуемых веществ. Лечение экспериментальных животных соединениями I и II приводит к достоверному снижению билирубина, а также восстановлению количества холестерина в крови крыс (Табл. 2). Данные биохимических исследований сыворотки крови животных, получавших 3,28-ди-О-никотинат бетулина и 3,28-ди-О-гемифталат бетулина, не уступают показателям препарата сравнения карсилу.

По результатам гистоморфологического исследования печени крыс можно заключить о незначительных некротических изменениях и сохранении морфологической структуры органа при введении соединений.

2.3. Антиоксидантные свойства соединений I и II при патологии печени крысразличной этиологии

В основе благоприятного влияния исследуемых соединений лежит свойство ингибировать перекисное окисление липидов в биологических мембранах и связанные с этим противовоспалительные, ранозаживляющие, противоязвенные, радиозащитные и другие виды их фармакологической активности.

Таблица 3

Влияние соединений I и II на содержание малонового диальдегида в печени крыс при интоксикацииразличными ксенобиотиками

Соединение Доза, мг/кг МДА, ммоль/г в печени

ССЦ-гепатит парацетамоловый гепатит этаноловый гепатит

I 12 0.197±0.03» 0.118±0.03» 0.126±0.04

II 20 0.217Ю.01» 0.113±0.01» 0.141±0.03

Карсил 12 0.18410.03» 0.119±0.03* 0.159+0.07

Контроль (гепатит) - 0.352±0.03 0.238±0.03 0.179±0.03

Интактные (биоконтроль ) 0.098±0.03» 0.086±0.02* 0.094±0.02»

Количество животных в группах - 6.

* - достоверные результаты по сравнению с контролем (гепатит), Р<0.05

Обнаружено, что наиболее эффективной антиоксидантной активностью обладает 3,28-ди-О-никотинат бетулина I, который способствует дезактивации процессов перекисного окисления лилидов при интоксикации тетрахлорметаном, уменьшая уровень малонового диальдегида (МДА) в печени в 1.1 раза по сравнению с 3,28-ди-О-гемифталатом бетулина (Табл. 3).

2.4. Влияние соединений I и II на уровень адениловых нуклеотидов в печени крыс при тетрахлорметановом гепатите

Известно, что продукты пероксидации липидов обладают свойством тормозить тканевое дыхание и разобщать сопряженное с ним окислительное фосфорилирование, то есть те процессы, которые обеспечивают энергией желчеобразовательный процесс (Саратиков А.С., Скакун Н.П., 1977). Повреждения ' механизмов окислительного фосфорилирования в митохондриальной мембране ведут к уменьшению АТФ, и затем к гибели клеток. Истощение резервов АТФ является причиной некроза клеток при окислительном стрессе и действии токсических ксенобиотиков таких как тетрахлор метан.

Таблица 4

Влияние соединений I и II на содержание адениловых нуклеотидов в печени крыс при экспериментальной интоксикации тетрахлорметаном

Параметры Биоконтроль (интакт.) Контроль (сси- гепатит) I + СС1„-гепатит (12.0мг/кг) II + ССЦ-гепатит (20.0 мг/кг)

АТФ, мкмоль/г ткани 237.0+11.2 141.8±10.3* 197.2±11.б*# 185.8+11.5*#

%от биоконтроля — 59.8 83.2 78.4

АДФ, мкмоль/г ткани 8 7.8 ±6.1 149.0±8.7* 103.0+7.20 101.0±6.6#

% от биоконтроля — 169.7 117.0 114.8

АМФ, мкмоль/г ткани 17.3±2.9 34.5±3.6» 23.6±1.8# 22.8+2.9Я

% от биоконтроля — 199.4 136.4 131.9

Количество животных в группах -10.

• - достоверно по отношению к биоконтролю, Р<0.05

# • достоверно по отношению к контролю (ССЦ -гепатит), Р<0.05

Результаты исследований продемонстрировали, что лечение соединениями I и II увеличивает синтез АТФ по сравнению с контрольной (гепатит) группой в 1.4 и 1.3 раза соответственно, нормализует содержание аденозиндифосфата (АДФ) и. аденозинмонофосфата (АМФ). Это говорит о благоприятном влиянии 3,28-ди-O-

никотината бетулина и 3,28-ди-О-гемифталата бетулина на синтез макроэргов в клетке, обеспечение энергетического баланса, восстановление митохондриальных мембран. Следовательно, исследуемые соединения активируют работу систем энергетического метаболизма в клетке (Табл. 4).

Регуляция синтеза НАД осуществляется при участии АТФ. При применении никотинамида наблюдается тенденция к увеличению содержания АТФ (Астраускас В.И., 1972). 3,28-Ди-0-никотинат бетулина и 3,28-ди-О-гемифталат бетулина регулируют уровень окисленной формы НАД*, достоверно значимо препятствуют падению количества НАД по отношению к интактным животным. Преобладание восстановленных форм пиридиновых нуклеотидов при интоксикации ксенобиотиками связано частичной блокадой цепи тканевого дыхания, соответствующее снижению метаболических процессов цикла трикарбоновых кислот и пируватдегидрогеназного комплекса (Табл. 5).

Таблица 5

Влияние соединений I и II на содержание никотинамидных коферментов в гомогенатепечени крыс при экспериментальной интоксикации тетрахлорметаном

Параметры Биоконтроль (интакт.) Контроль (ССЦ-гепатит) 1 +ССЦ-гепатит (12.0 мг/кг) П + ССЦ- ^ гепатит (20.0 мг/кг) *

НАД*, нмоль/г печени 465.2±17.0 309.1±20.б* 398.2±11.6*# 392.6±14.2*#

%от контроля — 66.5 85.6 84.4

НАДН, нмоль/г печени 208.5±11.9 252.5±8.5* 225.6±12.8 218.6±11.6#

% от контроля — 121.1 108.2 104.8

Сумма НАД* и НАДН, нмоль/г печени 673.7±28.9 561.6±28.9* 623.8±24.4 6П.2±25.8

% от контроля — 83.4 92.6 90.7

Количество животных в группах -10.

» - достоверно по отношению к биоконтролю, Р<0.05

#- - достоверно по отношению к контролю (ССЦ-гепатит), Р«0.05

По мнению многих авторов, регуляция синтеза никотинамидных коферментов осуществляется посредством АТФ и, наоборот, уровень макроэргов зависит от скорости окислительно-восстановительных реакций при участии

пирцдиннуклеотвдов (Астраускас В.И., 1972; Чекман И.С., 1977). Непрерывное течение гликолиза возможно лишь при условии постоянного потребления генерируемого НАДН, окисление которого может осуществляться при участии лактатдегидрогеназы.

2.5. Фармакологические свойства соединений I и II

2.5.1. Противоязвенная активностьтритерпеноидовлупановой группы

Результаты исследований ряда фармакологических свойств тритерпеноидов лупановой группы свидетельствуют, что на моделях экспериментальных язв изучаемые соединения оказывают выраженный противоязвенный эффект, уменьшают частоту образования язв и заживляют язвенные поражения слизистой оболочки у крыс. По-видимому, защитное действие соединений обусловлено активизирующим влиянием на синтез простагландинов, нарушенный введением ульцерогенных средств (Табл. 6).

Таблица 6

Противоязвенное действие соединенийIи Ппри профилактическом введении

крысам

Соедине ние Доза, мг/кг Среднее число деструкций СОЖ, вызванных

индометацином ацетилсалициловой кислотой этанолом (60 % в 150 мМ НС1)

I 12 15.8±1.10* Рм<0.01 Рм<0.002 10.3±0.85 0.4±0^1* Р1-5<0.002 Р)-2<0.05

П 20 • 25.0±1.42 9.6±0.85* Р<0.25 2.8±1.05* Р<0.02

Вентер 20 17.8±0.86* Р<0.02 — 0.7±0.17* Р<0.002

Омез 10 19.5±0.50 7.3±0.64* Р<0.001 —

Контроль (язва) - 26.6±2.89 ■ 112 ±0.48 8.8±1.87

»-достоверные результаты по сравнению с контролем Количество животных в группах - 6.

2.5.2. Противовоспалительная активность тритерпеноидовлупановой группы

Установлена важная особенность тритерпеновых соединений лупановой группы как антифлогистиков по сравнению с другими нестероидными

Исследуемые соединения обладают свойствами уменьшать выраженность экссудативной реакции, стимулировать пролиферативную фазу, оказывать стабилизирующее влияние на проницаемость капилляров и, тем самым, ликвидировать прогрессирующее течение воспалительных процессов (Рис. 2).

2.5.3. Действие соединений I и II нарепаративнуюрегенерацию кожиу

крыс

Нами установлена стимуляция репаративной регенерации ткани под воздействием производных бетулина, что, по-видимому, связано с активацией синтеза коллагеновых белков и увеличением содержания РНК и ДНК в регенерирующей ткани (Рис. 3).

Рис. 3. Влияние соединений I и II на заживление кожных ран у крыс на 15 сутки (п=7).

2.5.4. Иммуномодулирующее действие соединений ^ II При поражении печени наблюдается подавление иммунной системы, главным образом, Т-клеточного звена (Алексеева И.Н. и др., 1991). На примере 3,28-ди-0-никотината бетулина I и 3,28-ди-О-гемифталата бетулина П впервые показано, что тритерпеноиды лупановой группы обладают способностью стимулировать первичный иммунный ответ организма, повышают число антителообразующих клеток в селезенке при иммунизации мышей эритроцитами барана (Рис. 4).

12 3 4

Рис. 4. Влияние 3,28-ди-О-никотината бетулина I, 3,28-ди-О-гемифталата бетулина II и оксиметялурацши (ОМУ) на число антителообразующих клеток на 1 млн спленоцитов в селезенке мышей (п=10):

1 - 3,28-ди-О-никотинэт бетулина (12 мг/кг); 2 - 3,28-ди-О-гемифталата бетулина (20 мг/кг); 3 - оксиметилурацил (50 мг/кг); 4 - контроль

Развитие иммуностимулирующего эффекта под влиянием лупановых тритерпеноидов связано с активизирующим действием преимущественно на иммунокомпетентные клетки, в том числе, на клоны антителопродуцентов и их предшественников.

Данные соединения ослабляют гиперчувствительность замедленного типа к эритроцитам барана и динитрохлорбензолу, не стимулируют образование Т-зависимых антигенов, тем самым, не оказывают влияния на клеточный иммунитет животных (Табл. 8).

2.5.5. Влияние соединений I и Пна фагоцитирующую способность лимфоцитов у крыс

Наряду с активацией ряда иммунных реакций при различных поражениях печени наблюдается угнетение некоторых иммунологических показателей:

Таблица 8

Влияние соединений I и II на на гиперчувствителъностъ замедленного типа у

мышей

Соединение Доза, мг/кг Гиперчувствительность замедленного типа, %

к эритроцитам барана к дишпрохлорбензолу

I 12 30.2±3.82 26.3±1.52*

II 20 31.5±5.08 24.4±1.96*

ОМУ 50 313±3.72 24.1±1.25*

Контроль 47.1 ±7.37 49.3 ±2.89

* - достоверные результаты по сравнению с контролем (Р<0.001) Количество животных в группах - 10.

снижение функциональной активности фагоцитов, уменьшение содержания Т-лимфоцитов (Алексеева И.Н. и др., 1991). Наиболее информативным при оценке фагоцитарной активности является абсолютный фагоцитарный показатель.

Показано, что под влиянием 3,28-ди-0-никотината бетулина I и 3,28-ди-О-гемифталата бетулина П действительно возрастает число фагоцитирующих клеток и повышается фагоцитарный показатель, что свидетельствует о способности лейкоцитов поглощать чужеродные частицы (Табл. 7).

Таблица 7

Влияние соединений I и II на фагоцитарную активностьлейкоцитов

Соединение Доза, Время, Фагоцитарное Фагоцитарный Абсолютный

мг/кг сутки число, % индекс, фагоцитарный

ФЧ ФИ показатель

ФЧхФИ/в

1лх109

I 12 8 4.0±0.43 1.9±0.29 8.13±0.43

16 8.2±0.85* 1.8±0.34 2.14±0.27*

II 20 8 1.8±0.25 2.2±0.42 5.14±0.96

16 5.5±0.85» 2.1±0.45 1.97±0.17*

ОМУ 50 8 3.2±0.51 * 2.2±0.20 7.00±1.04»

16 4.0±0.63* 2.7±0.55 3.28±1.36

Контроль - 8 1.1Ю.38 3.9±0.68 3.60±0.90

(интакт.) 16 2.9±0.42 3.6±0.92 1.3210.23

* - достоверные результаты по сравнению с контролем (Р<0 05) Количество животных в группах - 7.

2.5.6. Влияние соединения Нна продолжительность жизнимышей при облучении

Повышение выживаемости при острой лучевой болезни под влиянием 3,28-ди-0-гемифталата бетулина II связано, видимо, не только со стимуляцией резистентности к инфекции, но является результатом его антиоксидантного эффекта. Результаты экспериментов позволяют заключить, что 3,28-ди-О-гемифталат бетулина и оксиметилурацил (ОМУ) более эффективны при длительном лечебном применении. При сочетанном введении данного соединения с оксиметилурацилом намечается некоторая тенденция к повышению радиозащитного эффекта (Рис. 5,6).

В Профилактика ■ Лечение

1 2 3

Рис. 5. Влияние 3,28-ди-О-гемифталата бетулина II в комбинации с оксиметилурацилом (ОМУ) на выживаемость животных при общем облучении (п=20):

1 - соединение II (20 мг/кг); 2 - соединение Н+ОМУ (20+50 мг/кг); 3 - контроль (облучение).

□ Биоконтроль (без облуч) о Соединение II (20 мг/кг) ■ Контроль (облуч)

Рис. б. Влияние 3,28-ди-О-гемифталата бетулина II на уровень малонового диальдегида в? сыворотке крови и печени крыс при облучении' I - уровень МДА в сыворотке крови; 2 - уровень МДА в печени

2.5.7. Субхроническая токсичность соединений Ти II

Исследования субхронической токсичности 3,28-ди-О-никотината и 3,28-ди-0-гемифталата бетулина продемонстрировали, что указанные соединения не обладают раздражающими, аллергизирующими, кумулирующими свойствами, не опасны при длительном применении, не изменяют морфологические и биохимические показатели крови экспериментальных животных.

Резюмируя результаты проведенных исследований, можно заключить, что тритерпеноиды лупановой группы обладают гепатопротекторной и холеретической активностью, регулируют состояние никотинамидных коферментов, процессы белкового синтеза, специфические и неспецифические механизмы клеточной защиты, способствуют сохранению энергетического баланса клетки. Исследованные 20 производных тритерпеноидов лупановой группы обладают выраженной желчегонной активностью, проявляющейся в увеличении скорости секреции желчи гепатоцитами по сравнению с препаратами сравнения и интактными животными.

Таким образом, изучение фармакологических свойств 3,28-ди-О-никотината бетулина и 3,28-ди-О-гемифталата бетулина показывает, что данные тритерпеноиды лупановой группы, в отличие от многих классических гепатопротекторов, обладают низкой токсичностью, не имеют выявленных побочных эффектов и могут служить основой для создания новых эффективных отечественных гепатопротекторов. Сочетание гепатопротекторной активности с антиоксидантными и иммуномодулирующими свойствами позволяет рекомендовать данные соединения для лечения различных заболеваний гепатобилиарной системы, включая токсические, лекарственные и аллергические поражения печени.

По результатам исследований создается возможность представления пакета документов в Фармакологический Комитет МЗ РФ для получения разрешения на I фазу клинической апробации.

выводы

1. Впервые исследованы биохимические механизмы гепатопротекторной активности тритерпеноидов лупановой группы. 3,28-Ди-О-никотинат бетулина и 3,28-ди-О-гемифталат бетулина. оказывают выраженное гепатопротекторное действие при различных повреждениях печени благодаря свойству стимулировать дезинтоксикационную функцию печени. Под влиянием исследованных соединений снижается активность маркерных ферментов синдрома цитолиза и холестаза, восстанавливается белоксинтезирующая функция и уменьшается содержание холестерина и билирубина в сыворотке крови крыс, сохраняется, морфологическая структура печени.

2. Воздействие 3,28-ди-0-никотината бетулина и 3,28-ди-0-гемифталата бетулина в условиях токсического поражения печени тетрахлорметаном сопровождается восстановлением уровня адениловых нуклеотидов. Исследуемые соединения способствуют увеличению АТФ, уменьшению содержания АДФ и АМФ, повышению АТФ/АДФ; предотвращают уменьшение энергетического заряда, что доказывает преобладание процессов ресинтеза макроэргов в гепатоцитах.

3. Повышение суммарного содержания пиридиновых нуклеотидов, предотвращение падения количества НАД и увеличение уровня НАДН, уменьшение НАДН/НАД под влиянием 3,28-ди-О-никотината бетулина и 3,28-ди-0-гемифталата бетулина свидетельствуют об утилизации восстановленных эквивалентов энергетического обмена. Исследуемые соединения активируют работу систем энергетического метаболизма в клетке.

4. Выраженные гепатопротекторные, холеретические, антиульцерогенные, противовоспалительные, ранозаживляющие, иммуностимулирующие, радиозащитные свойства З,28-ди-0-никотината бетулина и 3,28-ди-О-гемифталата бетулина во многом связаны с выявленной у них антиоксидантной активностью. Впервые установлена-иммуномодулирующая активность тритерпеноидов лупановой группы. 3,28-

Ди-0-никотинат бетулина и 3,28-ди-О-гемифталат бетулина увеличивают число антителообразующих клеток и не влияют на клеточный иммунитет. Показано, что под действием исследованных соединений возрастает число фагоцитирующих клеток и повышается фагоцитарный показатель.

5. 3,28-Ди-О-никотинат бетулина и 3,28-ди-0-гемифталат бетулина нетоксичны, относятся к IV классу малоопасных соединений, не обладают раздражающими, аллергизирующими, кумулирующими свойствами, не опасны при длительном применении, не изменяют морфологические и биохимические показатели крови экспериментальных животных.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Результаты исследований гепатозащитной активности новых синтетических производных бетулина внедрены в учебный процесс Кафедры фармакологии № 1 и № 2 Башкирского Государственного Медицинского университета по разделу «Гепатопротекторы».

2. На основе сопоставления биологической активности 14 производных тритерпеновых соединений лупановой группы выявлена определенная зависимость между структурой и гепатопротекторной активностью, что представляет существенный интерес для синтеза новых производных бетулина с целью изыскания эффективных нетоксичных гепатопротекторов. Обозначенные закономерности биологической активности и химического строения используются в лаборатории тонкого органического синтеза ИОХ УНЦ РАН для создания высокоактивных соединений.

3. Научно-исследовательским учреждением, занимающимся поиском биологически активных веществ, рекомендован комплексный подход к поиску гепатопротекторов, обладающих также антиоксидантной, иммуностимулирующей, антиульцерогенной, противовоспалительной и регенеративной активностью.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Зарудий Ф.С., Карачурина Л.Т., Сапожникова ТА., Флехтер О.Б., Исмагилова А.Ф., Давьщов М.В. Гепатозащитная и антиоксидантная активность тритерпеноидов // Материалы тезисов V Международной конференции "Биоантиоксидант". - Москва. -1998. - С. 133-134.

2. Флехтер О.Б., ПоройковВ.В., Карачурина Л.Т., Балтина Л.А., Толстиков Г.А. Синтез, прогноз и изучение гепатопротекторной активности производных тритерпеноидов // Тезисы докладов Международной научной конференции "Органический синтез и комбинаторная химия". - Москва-Звенигород. - 1999. - С. 21.

3. Зарудий Ф.С., Карачурина Л.Т., Флехтер О.Б., Давыдова В.А., Сапожникова ТА. Гепатозащитная активность тритерпеноидов лупановой группы // Материалы Всероссийской научной конференции "Актуальные проблемы экспериментальной и клинической фармакологии". - С- Пб. - 1999. - С. 77.

4. Флехтер О.Б., Карачурина Л.Т., Нигматуллина Л.Р., Балтина 1ЬЛ., Зарудий Ф.С., Давыдова В.А., Спирихин Л.В., Байкова И.П., Галин Ф.З., Толстиков ГА. Синтез и гепатопротекторная активность 2-арилиденовых производных метилбетулоната // Хим.- фарм. журнал. - 2000. - Т. 34. - № 2. - С. 3-5.

5. Флехтер О.Б., Карачурина Л.Т., Поройков В.В, Нигматуллина Л.Р., Балтина Л.А., Зарудий Ф.С., Давыдова ВА, Спирихин Л.В., Байкова ИЛ., Галин Ф.З., Толстиков ГА. Синтез эфиров тритерпеноидов группы лупана и их гепатопротекторная активность // Биоорганическая химия. - 2000. - Т. 26. -№3.-С. 215-223.

6. Зарудий Ф.С., Карачурина Л.Т., Сапожникова ТА., Давыдова ВА, Флехтер О.Б., Зарудий А.Ф. Противоязвенное действие тритерпеновых соединений лупановой группы // Материалы тезисов Международной конференции "Поиск, разработка и внедрение новых лекарственных средств и организационных форм фармацевтической деятельности". - Томск. - 2000. -С. 152-153.

7. Зарудий Ф.С., Карачурина Л.Т., Сапожникова ТА., Давыдова ВА, Хисамутдинова Р.Ю., Макара Н.С. Фармакологические свойства новых

синтетических биологически активных соединений // Информационный бюллетень "Экспериментальная и клиническая фармакология". - Пермь. -2000.-№4.-С. 48-52.

8. Флехтер О.Б., Нигматуллина Л.Р., Карачурина Л.Т., Балтина Л.А., Зарудий Ф.С., Давыдова ВА, Галин Ф.З., Толстиков Г.А. Противовоспалительная и противоязвенная активность некоторых производных бетулоновой кислоты, метилбетулоната и лупенона // Хим.- фарм. журнал. - 2000. - Т. 34. - № 11. -С. 17-20.

9. Флехтер О.Б., Карачурина Л.Т., Плясунова О А., Нигматуллина Л.Р., Балтина ЛА., Покровский А.Г., Давыдова В.А., Зарудий Ф.С., Галин Ф.З., Шульц Э.Э., Толстиков ГА. 3.28-Ди-Оникотинат бетулина, проявляющий гепатопротекторную и анти-ВИЧ активность // Патент РФ № 2174982.

Ю.Флехтер О.Б., Ашавина О.Ю., Бореко Е.И., Карачурина Л.Т., Павлова Н.И., Кабальнова Н.Н., Савинова О.В., Галин Ф.З., Николаева С.Н., Зарудий Ф.С., Балтина ЛА., Толстихов ГА. Синтез 3-0-ацетил-бетулинового и бетулонового альдегидов по Сверну и фармакологическая активность их оксимов // Хим.- фарм. журнал. - 2002. - Т. 36. - № 6. - С. 21-24.

И.Карачурина Л.Т., Флехтер О.Б., Сапожникова ТА., Нигматуллина Л.Р., Зарудий Ф.С., Галин Ф.З., Толстиков ГА. Влияние тритерпеновых соединений лупановой группы на иммунитет и выживаемость животных при облучении // Материалы VI Международной конференции "Биоантиоксидант". - Москва. - 2002. - С. 248-249.

12.Карачурина Л.Т., Флехтер О.Б., Сапожникова ТА., Хисамутдинова Р.Ю., Макара Н.С., Третьякова Е.В., Медведева Н.И., Зарудий Ф.С., Галин Ф.З., Толстиков ГА. Противовоспалительные свойства да- и тритерпеноидов // Материалы VI Международной конференции "Биоантиоксидант". - Москва. -2002.-С. 249-250.

13.Флехтер О.Б., Бореко Е.И., Нигматуллина Л.Р., Медведева Н.И., Балтина ЛА., Толстиков ГА., Карачурина Л.Т., Галин Ф.З. Химические трансформации и биологическая активность лупановых тритерпеноидов //

Материалы П Всероссийской конференции "Химия и технология растительных веществ". - Казань. - 2002. — С. 26.

14.Карачурина Л.Т., Сапожникова ТА, Зарудий Ф.С., Флехтер О.Б., Галин Ф.З. Противовоспалительные и противоязвенные свойства бисгемифталата бетулина // Хим.- фарм. журнал. - 2002. - Т. 36. - № 8. - С. 32-33.

15.Флехтер O.Б., Нигматуллина Л.Р., Балтина ЛЛ., Карачурина Л.Т., Галин Ф.З., Зарудий Ф.С., Толстиков ГА, Бореко Е.И., Павлова Н.И., Николаева С Л., Савинова О.В. Получение бетулиновой кислоты из экстракта бетулина. Противовирусная и противоязвенная активность некоторых родственных терпеноидов // Хим.- фарм. журнал. - 2002. - Т. 36. - № 9. - С. 26-28.

16. Флехтер О.Б., Медведева Н.И., Карачурина Л.Т., Балтина ЛЛ., Зарудий Ф.С., Галин Ф.З., Толстиков ГЛ. Синтез и противовоспалительная активность новых ацилпроизводных бетулина // Хим.- фарм. журнал. - 2002. -Т. 36.-№9.-С. 29-32.

17. Флехтер О.Б., Карачурина Л.Т., Нигматуллина Л.Р., Сапожникова ТЛ., Балтина ЛЛ., Зарудий Ф.С., Галин Ф.З., Спирихин Л.В., Толстиков ГЛ., Плясунова ОА., Покровский А.Г. Синтез и фармакологическая активность диникотината бетулина // Биоорганическая химия. - 2002. - Т. 28. - № 6. - С. 543-550.

18.Карачурина Л.Т., Сапожникова ТЛ., Зарудий Ф.С., Флехтер О.Б., Нигматуллина Л.Р., Галин Ф.З., Толстиков Г.А. Исследование некоторых фармакологических свойств бисгемифталата бетулина // Эксп. и клин, фармакол. - 2003. - Т. 66. - № 4. - С.56-59.

19. Флехтер OJ>., Бореко Е.И., Нигматуллина Л.Р., Павлова Н.И., Медведева Н.И., Николаева С.Н., Третьякова Е.В., Савинова О.В., Балтина ЛЛ., Карачурина Л.Т., Галин Ф.З., Зарудий Ф.С., Толстиков ГЛ. Синтез ацилированных оксимов бетулоновой кислоты и 28-оксо-аллобетулона // Хим.- фарм. журнал. - 2004. - Т. 38. - № 3.- С. 31-34.

Автор выражает огромную благодарность и признательность с.н.с, к.б.н.

Давыдовой В.А. за неоценимую помощь при выполнении данной работы и зав:

лаб. новых лекарственных средств к.б.н. Басченко НЖ. за постоянное

внимание и поддержку.

Р12 9 21

КАРАЧУРИНА ЛИЛИЯ ТАЛГАТОВНА

Биохимические механизмы гепатопротекторного действия тритерпеноидов группы лупана и их фармакологическая активность

03.00.04-биохимия 14.00.25. - фармакология, клиническая фармакология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Лицензия № 0177 от 10.06.96 г. Подписано в печать 19.05.2004 г. Отпечатано на ризографе. Формат 60x84 Vie- Усл.-печ. л. 1,5. Уч.-изд. л. 1,7 Тираж 100 экз. Заказ № 286.

450000, г. Уфа, ул. Ленина, 3, Башкирский государственный медицинский университет

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Карачурина, Лилия Талгатовна

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Гепатопротекторы и их характеристика

1.2. Биологически активные вещества березы белоствольной

1.3. Фармакологическая характеристика 31 тритерпеноидов луПановой группы

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

2.1. Описание исследуемых соединений

2.2. Методы исследований

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

3.1. Острая токсичность производных тритерпеноидов лупановой 51 группы и их связь с химическим строением

3.2. Желчегонная активность тритерпеноидов лупановой группы у 52 крыс

3.3. Гепатопротекторная активность 3,28-ди-О-никотината и 3,28-ди-О-гемифталата бетулина при поражении печени различной этиологии у крыс

3.3.1. Влияние 3,28-ди-О-никотината и 3,28-ди-О-гемифталата 57 бетулина на функциональное состояние печени крыс при токсическом гепатите, вызванном тетрахлометаном

3.3.2. Влияние 3,28-ди-О-никотината и 3,28-ди-О-гемифталата 62 бетулина на функциональное состояние печени крыс при поражении печени парацетамолом

3.3.3. Влияние 3,28-ди-О-никотината и 3,28-ди-О-гемифталата бетулина на функциональное состояние печени крыс при остром поражении печени этанолом

3.4. Антиоксидантные свойства 3,28-ди-О-никотината и 3,28-ди- 72 О-гемифталата бетулина при патологии печени крыс различной этиологии

3.5. Влияние 3,28-ди-О-никотината и 3,28 -ди- О-гемифталата 75 бетулина на уровень адениловых нуклеотидов в печени крыс при тетрахлорметановом гепатите

3.6. Фармакологические свойства 3,28-ди-О-никотината и 3,28-ди-О-гемифталата бетулина

3.6.1. Противоязвенная активность тритерпеноидов лупановой 83 группы у крыс при профилактическом и лечебном введении

3.6.2. Противовоспалительная активность тритерпеноидов 88 лупановой группы

3.6.3. Действие 3,28-ди-О-никотината и 3,28-ди-О-гемифталата 92 бетулина на репаративную регенерацию кожи у крыс

3.6.4. Иммуномодулирующее действие 3,28-ди-О-никотината и 95 3,28-ди-О-гемифталата бетулина

3.6.5. Влияние 3,28-ди-О-никотината и 3,28-ди-О-гемифталата 98 бетулина на фагоцитирующую способность лимфоцитов у крыс

3.6.6. Влияние 3,28-ди-О-гемифталата бетулина на 100 продолжительность жизни животных при облучении

3.6.7. Субхроническая токсичность 3,28-ди-О-никотината и 3,28-ди- 103 О-гемифталата бетулина на крысах

Введение Диссертация по биологии, на тему "Биохимические механизмы гепатопротекторного действия тритерпеноидов группы лупана и их фармакологическая активность"

Актуальность темы

Высокий уровень заболеваемости населения вирусными гепатитами, многообразие токсических, лекарственных и аллергических поражений органов гепатобилиарной системы требует эффективной медикаментозной терапии. С помощью биологически активных веществ можно интенсивно стимулировать пролиферацию гепатоцитов и их ультраструктур. В терапии заболеваний печени для фармакологической коррекции используют значительное количество лекарственных средств, которые условно можно разделить на следующие группы: средства, влияющие на процессы тканевого обмена (витамины, аминокислоты, гидролизаты белков, пептиды, стероидные и нестероидные анаболики, адаптогены); средства, повышающие дезинтоксикационную функцию печени (адсорбенты, антидоты); желчегонные средства; противовирусные и антимикробные препараты; иммуномодуляторы; ингибиторы и индукторы микросомальных систем; гепатопротекторы; антиоксиданты [61, 62, 82].

В связи с этим проблема изыскания новых эффективных средств, сочетающих иммуностимулирующие, антиоксидантные, противовоспалительные и противоязвенные свойства остается весьма актуальной, несмотря на то, что в арсенале мировой медицины числится достаточно много препаратов. Каждый из этих препаратов, обладая определенным положительным воздействием, базирующимся на механизмах различного типа, тем не менее, проявляет серьезные побочные эффекты. К тс>му же, большинство применяемых в клинической медицине препаратов дорогостоящие, и это обстоятельство побуждает химиков-синтетиков, фармакологов и клиницистов к поиску высокоактивных отечественных гепатопротекторов.

Поиск таких веществ может быть осуществлен среди природных соединений, в частности, тритерпеноидов группы лупана - бетулина, лупеола, бетулиновой кислоты. Препараты березы издавна применялись в народной медицине при лечении воспалений, дерматитов, желудочно-кишечных заболеваний, как мочегонные и желчегонные средства [78, 99].

У лупановых тритерпеноидов и их синтетических производных обнаружены гиполипидемическая, ранозаживляющая, противоопухолевая, антивирусная, противовоспалительная, антибактериальная, желчегонная активности [9, 19, 108, 172, 180, 186, 211].

Бетулиновая кислота обладает уникальной способностью избирательно воздействовать на рост опухолевых клеток путем индукции апоптоза как in vitro, так и in vivo [142, 111, 188]. Ряд производных бетулиновой кислоты, полученных компанией Рон-Пулек-Рорер, проявили выраженную анти-ВИЧ активность в области наномолярных концентраций и рекомендованы для клинических исследований [125, 126].

Привлекает также доступность лупановых тритерпеноидов. Так, содержание бетулина в коре белоствольных берез вида Betula pendula достигает 35%, именно из-за нахождения в ней бетулина кора березы имеет белый цвет.

Проведенный нами биоскрининг 20 соединений позволил выявить и предложить для изучения фармакологических свойств несколько новых эффективных средств, которые могут быть рекомендованы для лечения заболеваний гепатобилиарной системы и желчевыводящих путей. Практически неизученным аспектом новых производных бетулина оставались иммуностимулирующие и антиоксидантные свойства, обнаружение которых представлялось весьма вероятным.

Цель работы: изучение биохимических механизмов гепатопротекторного действия тритерпеноидов лупановой группы и исследование ряда их фармакологических свойств. Задачи исследования

4. Исследовать фармакологические свойства производных бетулина: антиоксидантные, противоязвенные, противовоспалительные, ранозаживляющие, радиопротекторные. Изучить иммуномодулирующее действие тритерпеноидов лупановой группы и влияние на фагоцитарную активность лимфоцитов у крыс.

5. Определить острую и субхроническую токсичности тритерпеновых соединений лупановой группы на крысах. Научная новизна

Впервые исследованы биохимические механизмы гепатопротекторной активности при экспериментальных поражениях печени крыс у 3,28-ди-О-никотината бетулина и 3,28-ди-О-гемифталата бетулина, наиболее перспективных соединений, отобранных в результате биоскрининга 20 новых производных лупановых тритерпеноидов. Изучено влияние 3,28-ди-О-никотината бетулина и 3,28-ди-О-гемифталата бетулина на функциональное состояние печени крыс, заключающееся в уменьшении проявлений синдромов цитолиза и холестаза.

Показано влияние ряда производных бетулина на состояние систем адениловых нуклеотидов и никотинамидных коферментов, сопровождающееся увеличением уровня макроэргов, повышением суммарного содержания коферментов, восстановлением метаболических процессов, нарушенных токсическим поражением печени.

Обнаружены антиоксидантные, противовоспалительные, гастрозащитные, ранозаживляющие и радиопротекторные свойства у 3,28-ди-О-никотината бетулина и 3,28-ди-О-гемифталата бетулина.

Впервые показана иммуностимулирующая активность производных бетулина, а также увеличение фагоцитирующей способности лимфоцитов под воздействием изучаемых соединений.

Установлена низкая токсичность тритерпеновых соединений лупановой группы.

Основные положения, выносимые на защиту

1. Новые синтетические производные бетулина обладают выраженной гепатозащитной активностью благодаря стимулирующему дезинтоксикационную функцию печени свойству наряду с эффективным противовоспалительным, антиульцерогенным и ранозаживляющим действием.

2. Тритерпеновые соединения лупановой группы регулируют метаболические процессы нарушений энергетического обмена, что проявляется в увеличении суммарного содержания пиридиновых нуклеотидов и предотвращении гипервосстановленности системы никотинамидных коферментов.

3. Исследуемые соединения оказывают ингибирующее действие на перекисное окисление липидов в биологических мембранах, обеспечивая стабилизацию мембранных структур клеток.

4. Впервые обнаружена иммуностимулирующая активность тритерпеноидов лупановой группы, что является показателем перспективного метода лечения заболеваний гепатобилиарной системы, сопряженных с иммунологическими нарушениями.

5. Тритерпеноиды лупановой группы малотоксичны, не обладают раздражающим и аллергизирующим действием, безопасны при длительном введении экспериментальным животным.

Внедрение результатов исследования в практику

Материалы исследований используются в учебных и методических пособиях кафедры фармакологии №1 и №2 с Курсом клинической фармакологии Башкирского Государственного Медицинского университета, г. Уфа.

На основе результатов исследования получен патент РФ 2174982 на изобретение «3,28-Ди-О-никотинат бетулина, проявляющий гепатопротекторную и анти-ВИЧ активность», № государственной регистрации 10640198.

Наличие комплекса ценных для медицины фармакологических свойств обосновывают необходимость дальнейших клинических испытаний данных соединений.

Апробация работы. Материалы диссертации представлены на V Международной конференции «Биоантиоксидант» (Москва, 1998); Международной научной конференции «Органический синтез и комбинаторная химия» (Москва-Звенигород, 1999); Всероссийской Научной конференции «Актуальные проблемы экспериментальной и клинической фармакологии» (С.-Пб., 1999); Международной конференции «Поиск, разработка и внедрение новых лекарственнх средств и организационных форм фармацевтической деятельности» (Томск, 2000); Информационном бюллетене «Экспериментальная и клиническая фармакология» (Пермь, 2000); VI Международной конференции «Биоантиоксидант» (Москва, 2002); II Всероссийской конференции «Химия и технология растительных веществ» (Казань, 2002).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 11 статей в центральной печати, 7 тезисов, получен 1 патент РФ.

Структура и объем работы. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, экспериментальной части, в которой приводятся методы, результаты собственных исследований, обсуждения результатов, выводов, списка литературы, включающего 212 источников, из них 115 отечественных и 97 зарубежных авторов. Диссертация изложена на 152 страницах с использованием персонального компьютера типа IBM PC/AT и иллюстрирована 36 таблицами и 2Л рисунком.

Заключение Диссертация по теме "Биохимия", Карачурина, Лилия Талгатовна

выводы

1. Исследованы биохимические механизмы гепатопротекторной активности тритерпеноидов лупановой группы. 3,28-Ди-О-никотинат бетулина и 3,28-ди-О-гемифтал ат бетулина оказывают выраженное гепатопротекторное действие при различных повреждениях печени благодаря свойству стимулировать дезинтоксикационную функцию печени. Под влиянием исследуемых соединений снижается активность маркерных ферментов синдрома цитолиза и холестаза, восстанавливается белоксинтезирующая функция и уменьшается содержание холестерина и билирубина в сыворотке крови крыс, сохраняется морфологическая структура печени.

2. Воздействие 3,28-ди-О-никотината бетулина и 3,28-ди-О-гемифталата бетулина в условиях токсического поражения печени тетрахлорметаном сопровождается восстановлением уровня адениловых нуклеотвдов. Исследуемые соединения способствуют увеличению АТФ, уменьшению содержания АДФ и АМФ, повышению АТФ/АДФ, предотвращают уменьшение энергетического заряда, что доказывает преобладание процессов ресинтеза макроэргов в гепатоцитах.

3. Повышение суммарного содержания пиридиновых нуклеотидов, предотвращение падения количества НАД* и увеличение уровня НАДН, уменьшение НАДН/НАД1" под влиянием 3,28-ди-О-никотината бетулина и 3,28-ди-О-гемифталата бетулина свидетельствуют об утилизации восстановленных эквивалентов энергетического обмена. Исследуемые соединения активируют работу систем энергетического метаболизма в клетке.

4. Выраженные гепатопротекторные, холеретические, антиульцерогенные, противовоспалительные, ранозаживляющие, иммуностимулирующие, радиозащитные свойства 3,28-ди-О-никотината бетулина и 3,28-ди-О-гемифталата бетулина во многом связаны с выявленной у них антиоксидантной активностью. Впервые установлена иммуномодулирующая активность тритерпеноидов лупановой группы. 3,28-Ди-О-никотинат бетулина и 3,28-ди-О-гемифталат бетулина увеличивают число антителообразующих клеток и не влияют на клеточный иммунитет. Под действием исследуемых соединений возрастает число фагоцитирующих клеток и повышается фагоцитарный показатель.

5. 3,28-Ди-О-никотинат бетулина и 3,28-ди-О-гемифталат бетулина нетоксичны, относятся к IV классу малоопасных соединений, не обладают раздражающими, аллергизирующими, кумулирующими свойствами, не опасны при длительном применении, не изменяют морфологические и биохимические показатели крови экспериментальных животных.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

Результаты исследований гепатозащитной активности новых синтетических производных бетулина внедрены в учебный процесс Кафедры фармакологии № 1 и № 2 Башкирского государственного медицинского университета по разделу «Гепатопротекторы». На основе сопоставления биологической активности 14 производных тритерпеновых соединений лупановой группы выявлена зависимость между структурой и гепатопротекторной активностью, что представляет существенный интерес для химического синтеза новых производных бетулина с целью изыскания эффективных нетоксичных гепатопротекторов. Обозначенные закономерности биологической активности и химического строения используются в лаборатории тонкого органического синтеза ИОХ УНЦ РАН для создания высокоактивных соединений.

Научно-исследовательским учреждением, занимающимся поиском биологически активных веществ, рекомендован комплексный подход к поиску гепатопротекторов, обладающих также антиоксидантной, иммуностимулирующей, антиульцерогенной, противовоспалительной и регенеративной активностью новых тритерпеноидов лупановой группы.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Карачурина, Лилия Талгатовна, Уфа

1. Абдурахманов М., Тухтаев Н.К., Тухтаев К.Р. Влияние иммуномодулина на структурно-функциональное состояние органов иммунной и кроветворной систем в условиях хронического токсического гепатита. // Эксп. и клин, фармакол. 1999. - Т. 62. - № 6. - С. 66-68.

2. Алексеева И.Н., Брызгина Т.М., Павлович С.И., Ильчевич Н.В. Печень и иммунологическая реактивность. Киев: Наукова Думка. - 1991. - С. 168.

3. Аничков С.В., Заводская И.С. Фармакотерапия язвенной болезни. Л.:

4. Медицина. 1965. - С. 27-30.

5. Антошин Ю.В. Применение витаминов Е и В6 для профилактики и лечения экспериментальной дистрофии печени, вызванной гидразином. // Гигиена труда. 1980. - № 9. - С. 43-44.

6. Арчаков А.И. Микросомальное окисление. М.: Наука. - 1975. - 327 С.

7. Арчаков А.И., Карузина И.И. Молекулярные механизмы взаимодействия четыреххлористого углерода с мембранами эндоплазматического ретикулума печени. // Успехи гепатологии. — Рига. 1973. - Вып. 4. - С. 39-59.

8. Балтина Л.А., Толстиков Г.А., Сердюк Н.Г, Покровский А.Г., Плясунова О.А. Ниглизин новый ингибитор вируса иммунодефицитачеловека. // Тезисы докл. IV Российского, нац. конгресса «Человек и лекарство». М. - 8-12 апреля. - 1997. - С. 207.

9. Барнаулов О.Д. Сравнительная оценка влияния некоторых тритерпеновых соединений на резистентность организма к повреждающим воздействиям. // Экстрактивные вещества древесных растений. Новосибирск. - 1986. - С. 160-161.

10. Беленький M.JI. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта. JI. - Медгиз. - 1963. - С. 152.

11. Белоусов Ю.Б., Моисеев B.C., Лепахин В.К. Клиническая фармакология и фармакотерапия. М.: Универсум Паблишинг. - 2000. - 540 С.

12. Билич Г.Л., Колла В.Э. Регуляция регенерации клетка, ткань, организм. // Фармакологическая регуляция регенераторных процессов в эксперименте и клинике. - Горький. - 1978. - С. 10-17.

13. Блинков И.Л., Чехмакина О.В. Опыт клинического применения гепатопротекторного средства — легалона. // Клиническое значение препарата легалон. Материалы симпозиума. -М. -1981.-С. 113-123.

14. Блюгер А.Ф., Майоре А.Я. Исследование основных патологических линий поражения печени в условиях клинической и экспериментальной патологии и подходы к регуляции и купированию этих процессов. // Успехи гепатологии. Рига. - 1982. - Вып. 10. - С. 12-34.

15. Ботолова Е.Н., Соловьев В.В., Озерова И.Н. и др. Влияние эссенциальных фосфолипидов на липидный спектр плазмы крови и агрегационную способность тромбоцитов у больных ИБС -ишемической болезнью сердца. // Кардиология. 1988. - № 9. - С. 57-61

16. Бромштейн А. Л., Лобанова Л.В., Векслер Т.Б. Разработка отечественных противоопухолевых препаратов на основе биологическиактивных веществ сульфатного мыла. // Тезисы докл. «Лесохимия и ^ органический синтез». Сыктывкар. - 1994.

17. Бушма М.И., Лукиенко П.И. Роль витаминов в функции монооксигеназ. // Фармакол. и токсикол. 1994. - Т. 57. - № 5. - С. 53-57.

18. Василенко Ю.К., Лисевицкая Л.И., Фролова Л.М., Парфентьева Е.П., Скульте И.В., Василенко А.Ю., Кожарский В.В., Восканян В.Л. Гиполипидемические свойства тритерпеноидов. // Хим.- фарм. журнал.- 1982.-Т. 45.-№5.-С. 66-70.

19. Василенко Ю.К., Семенченко В.Ф., Фролова Л.М., Коноплева Г.Е., Парфентьева Е.П., Скульте И.В. Фармакологические свойстватритерпеноидов коры березы. // Эксп. и клин, фармакол. 1993. - Т. 56.- № 4. С. 53-55.

20. Васин М.В., Рясина Т.В., Чернов Ю.Н. Антиоксидантные свойства и антиоксидантный эффект «эссенциале». // Цитология. 1999. - Т. 41. -№9.-С. 812-813.

21. Ведомости фармакологического комитета. Доклиническое изучение гепатозащитных средств. Методические рекомендации. // Под. ред. В.М. Булаева. М.: НЦМИ «Тимотек». - 1999. - № 2. - С.9-13.

22. Великий Н.Н. Исследование регуляторной роли окислительно-восстановительного состояния никотинамидных коферментов во внутриклеточном метаболизме в тканях животных. // Автореф. дисс. .докт. биол. наук. Киев. - 1988. - 46 С.

23. Венгеровский А.И., Батурина Н.О., Чучалин B.C., Саратиков А.С. Влияние гепатопротекторов, содержащие полифенолы, на течение экспериментального хронического гепатита. // Хим.- фарм. журнал. -1996.-№2.-С. 3-4.

24. Венгеровский А.И., Головина Е.Л., Чучалин B.C., Саратиков Л.С. Влияние энтеросорбентов на терапевтические эффектыгепатопротектора максара при экспериментальном токсическом гепатите. // Хим. фарм. журнал. - 2000. - Т. 34. - № 5. - С. 9-11.

25. Венгеровский А.И., Суходоло И.В., Чучалин B.C., Арбузов А.Г., Червякова М.Б., Мельник Ю.Ю., Гришина Е.И., Саратиков А.С. Эффективность легалона и лохеина при экспериментальном синдроме Рейе. // Хим.-фарм. журнал. 2000. - Т. 34. - № 4. - С. 6-8.

26. Вертелкин В.А., Голофеевский В.Ю., Стефанюк Н.Ф., Салтыков А.А. Криогенный способ формирования экспериментальной язвы желудка. // Пат. физиология и эксп. терапия. 1987. - № 2. — С. 77-78.

27. Визир А.Д., Башкина Р.Ф., Беленичев И.Ф., Тараненко Д.А. Состояние свободнорадикального окисления у больных гипертонической болезнью II стадии. // Терапев. архив. 1995. - Т. 67. - № 12. - С. 18-19.

28. Владимиров Ю.А. Свободнорадикальное окисление липидов и физические свойства липидного слоя биологических мембран. // Биофизика. 1987. - № 5. - С. 830-844.

29. Владимиров Ю.А., Арчаков А.И. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах. М.: Наука. - 1972. - 252 С.

30. Гильмиярова Ф.Н., Тенишева З.Х. Содержание никотинамидных коферментов, метаболизм и активность НАД-зависимых дегидрогеназ в крови при атеросклерозе. // Кардиология. 1980. - Т. 20. - № 4. - С. 90-92.

31. Глориозова Т.А., Филимонов Д.А., Лагунин А.А., Поройков В.В. Тестирование компьютерной системы предсказания спектра биологической активности PASS на выборке новых химических соединений. // Хим.-фарм. журнал. 1998. - Т. 32. - № 12. - С. 32-39.

32. Дроговоз С.М., Деримедведь Л.В., Журавель Е.В. Оптимизация антиоксидантной терапии гепатита. // Тезисы докл. V Российского нац. конгресса «Человек и лекарство». М. - 21-25 апреля. - 1998. - С. 65.

33. Дружинина Н.А. Особенности болезней верхнего отдела пищеварительного тракта у школьников из регионов атмосферного загрязнения и подход к фармакотерапии. // Автореф. дисс.канд. мед. наук. Челябинск. - 1996. - 31 С.

34. Дядык В.Н., Бычкова В.И. Перекисное окисление липидов и их обмен при вирусном гепатите В и циррозе печени. // Врачебное дело. 1986. -№ 11.-С. 114-117.

35. Заяц Т.Л., Бурлакова Е.Б., Музыкант Л.И., Евсеенко Л.С. Влияние водорастворимых антиоксидантов на проницаемость лизосомальных мембран и структуру печени крыс при термическом ожоге. // Бюлл. эксп. биологии и медицины. 1983. - № 10. - С. 29-32.

36. Иванов А.С., Захарова Т.С., Одинокова Л.Э., Уварова Н.И. Гиполипидемические свойства гликозидов бетулина. // Хим.-фарм. журнал. 1987.-Т. 21.-№9.-С. 1091-1094.

37. Иванов В.В, Климацкая Л.Г. Антиоксиданты в профилактике токсического действия акрилонитрила. // Гигиена и санитария. — 1987. -№8.-С. 20-22.

38. Иммунологические, цитохимические и биохимические методы исследования фагоцитирующих клеток. Методические рекомендации. // Под. ред. Э.А. Имельбаевой. Уфа: БГМИ. - 1996. - С. 14-15.

39. Иноятова Ф.Х., Хакимов 3.3. Сравнительное изучение эффективности некоторых фармакологических средств в регуляции уровня НАДФН в гепатоцитах при их остром поражении. // Эксп. и клин, фармакол.1999. Т. 62. - № 3. - С. 50-52.

40. Исмагилова А.Ф., Зарудий Ф.С., Давыдова В.А., Лазарева Д.Н. Влияние 2-метил-4-амино-6-оксипиримидина на гиперчувствительность замедленного типа. // Эксп. и клин, фармакол. 1997. - Т. 60. - № 1.1. С. 45-46.

41. Каталог продукции фонда «Клубная система «Счастье Жизни». С.-Пб. - 2000.

42. Катикова О.Ю. Влияние мексидола на состояние гомеостаза и ПОЛ при интоксикации парацетамолом. // Эксп. и клин, фармакол. 2002. - Т. 65.-№6.-С. 53-56.

43. Клиническая фармакология и фармакотерапия. // Под ред. Г. Фюльграффа, Д. Пальма. Минск. - 1996. - 520 С.

44. Клиническая фармакология. // Под ред. В.Г. Кукеса. М.: Медицина. —2000.-517 С.

45. Ковальчук С.Ф. Эффективность антиоксидантов при комбинированном поражении печени этиловым алкоголем и ксенобиотиками. // Тезисы докл. конф. «Биоантиоксидант». М.: Изд-во АН СССР. - 1986. - Т. 1. - С. 95-96.

46. Колб В.Г., Камышников B.C. Справочник по клинической химии. -Минск.-1982.-366 С.

47. Конопля Е.Н., Конопля Н.А., Прокопенко Л.Г. Иммуномодулирующее и гепатопротекторное действие ретиноидов при токсическомпоражении печени, вызванном D-галактозоамином. // Антибиотики и химиотерапия. 1996. - Т. 41. - № 7/8. - С. 22-25.

48. Кузьмицкий Б.Б., Мизуло М.А., Романова В.Н., Малаева Л.П. Некоторые аспекты гастропротекторной и антиагрегационной активности 13-азапростаноидов. // Эксп. и клин, фармакол. 1992. - Т.55.-№6.-С. 27-28.

49. Курганов Б.И. Аллостерические. ферменты. М.: Наука. - 1978. - 246 С.

50. Ламтюгин Ю.В., Петров В .И., Недогода С.В. Сравнительная эффективность гептрала, легалона, таукарда и эссенциале у больных с хроническими диффузными заболеваниями печени. // Материалы Межд. конф. «Клиническая фармакология. 25 лет». М. - 1997. - С. 43.

51. Левшин Б.И. Экспериментальная фармакотерапия препаратами селенаи тиазолидина токсического повреждения печени. // Дисс. . докт. мед. наук. Харьков. - 1973. - 325 С.

52. Ленинджер А.Л. Митохондрии. Молекулярные основы структуры и функции. -М.: Мир. 1966. - С. 253.

53. Липовецкий Б.М. Клиническая липидология. С.-Пб.: Наука. 2000. -119 С.

54. Лифшиц Р.И. Пиримидиновые производные стимуляторы кроветворения. // X съезд Всесоюз. физиол. общества им. И.П. Павлова, АМН СССР. - 1964. - Т. 2. - Вып. 2. - С. 30.

55. Матюхина Л.Г., Шмуклер B.C., Рябинин А.А. Тритерпеноиды коры Alnus subcordata С.А.М. // Журнал орган, химии. 1965. - Т. 35. - Вып. 3. - С. 579-580.

56. Матюшин Б.Н. Нарушение механизмов антиоксидантной защиты печени при ее патологии и их фармакологическая защита. // Тезисы докл. II Российского, нац. конгресса «Человек и лекарство» М. - 10-15 апреля. - 1995. - С. 127-128.

57. Матюшин Б.Н., Логинов А.С., Ткачев В.Д. Антиоксидантная защита печени и эффективность фармакотерапии больных с гепатобилиарной патологией. // Материалы Межд. конф. «Клиническая фармакология. 25 лет».-М.-1997.-С. 48.

58. Машковский М.Д. Лекарственные средства. М,: Новая Волна. - Изд. 14-е. - 2000. - Т. 1. - 539 С. - Т. 2. - 608 С.

59. Машковский М.Д. Пособие по фармакотерапии для врачей. М. - 1987. -Ч. 2.-С. 415.

60. Методы биохимических исследований. // Под ред. М.И. Прохоровой. — Л.: Изд-во Ленингр. унив. 1982. - 272 С.

61. Методические указания по экспериментальному и клиническому изучению радиопротекторов. М. - 1978. — 31 С.

62. Миронов М.И. Методические аспекты оценки гепатотоксичности лекарственных препаратов на стадии доклинического изучения. // Побочное действие туберкулостатических препаратов: Сборник науч. трудов. -М. 1983. - С. 34-38.

63. Мышкин В.А. Коррекция перекисного окисления липидов при экспериментальных интоксикациях различными химическими веществами. // Автореф. дисс. докт. мед. наук. Челябинск. - 1998. -46 С.

64. Мышкин В. А. Применение оксиметилурацила для повышения неспецифической резистентности организма к токсическим агентам. // Автореф. дисс. . .канд. мед. наук. Уфа. - 1982. - 23 С.

65. Мышкин В.А., Лазарева Д.Н., Алехин Е.К. Мембранопротекторное действие и фармакологические свойства производного пиримидина. // Тезисы докл. "Перспективы биоорганической химии в создании новых лекарственных препаратов". Рига. -1982.-С.214.

66. Никитина Т.Н., Насыров Х.М. Фитология. Лекарственные растения в научной медицине. Уфа: Изд. «Башкортостан». - 1993. - 248 С.

67. Николаев С.М. Растительные и лекарственные препараты при повреждениях гепатобилиарной системы. Новосибирск: Наука. -1992.-С. 155.

68. Нисевич Н.И., Молева Т.П., У чайников В.Ф. Значение процессов перекисного окисления липидов в синдроме цитолиза при вирусном гепатите у детей. // Педиатрия. 1978. - № 6. - С. 44-48.

69. Ногаллер A.M., Барханова А.Г., Захарова Г.Ю. Применение желчегонных средств в терапии больных с нарушениями функций желчевыделительной системы. // Клин, медицина. 1989. - № 9. - С. 129-135.

70. Оболенцева Т.В., Ходжай Я.И., Ларьяновская Ю.Б. Влияние некоторых природных веществ на язвенное поражение желудка крыс, вызванные ацетилсалициловой кислотой. // Бюлл. эксп. биологии и медицины. — 1974. Т. 77. - № 3. - С. 39-41.

71. Олейник А.Н. Влияние антиоксидантов на перекисное окисление липидов при комбинированном поражении печени. // Фармакол. и токсикол. 1983. - № 3. - с. 39-41.

72. Олейник А.Н. Функционально-биохимическая характеристика острого поражения печени циклофосфаном и его коррекция антиоксидантами. // Автореф. дисс. . канд. мед. наук. Киев. - 1988. - 21 С.

73. Островский Ю.М., Сатановская В.И., Островский С.Ю. Метаболические предпосылки и последствия потребления алкоголя. — Минск.-1988.-263 С.

74. Пасиешвили Л.М., Хименко П.Л., Дьяконова И.Г. Опыт применения новой лекарственной формы препарата карсил при хронических заболеваниях печени. // Актуальные проблемы гепатологии. Харьков. - 1989.-С. 35-38.

75. Пастушенков Л.В., Пастушенков А.Л., Пастушенков В.Л. Лекарственные растения: Использование в народной медицине и быту. -Л.: Лениздат. 1990. - С. 32-34.

76. Перцов С.С., Балашова Т.С., Кубатиев А.А. Перекисное окисление липидов и антиоксидантные ферменты мозга крыс при остром эмоциональном стрессе: влияние интерлейкина 1р. // Бюлл. эксп. биологии и медицины. 1995. - № 9. - С. 244-247.

77. Пидэмский Е.Л., Тульбович Г.А., Голенева А.Ф., Кошмякова Н.В. Перекисное окисление липидов при асептическом воспалении и воздействии флоголитиков и антиоксидантов. // Пат. физиология и эксп. терапия. 1990. - № 1. - С. 19-21.

78. Плечев В.В. Стимуляция некоторыми производными пиримидина поглотительной способности РЭС при ее различных функциональных состояниях. // Автореф. дисс. . канд. мед. наук. Уфа. - 1974. - 22 С.

79. Подымова С.Д. Болезни печени. М.: Медицина. - 1984. - С. 480.

80. Рудько И.А., Балашова Т.С., Кубатиев А.А., Ермоленко В.М. Состояние прооксидантной и антиоксидантной систем эритроцита у больных хронической почечной недостаточностью. // Терапев. архив. -1995.-№8.-С. 7-10.

81. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. // Под. ред. В.П. Фисенко. — М. -2000.-398 С.

82. Рыжикова М.А., Фархутдинов P.P., Загидуллин Ш.З. Влияние лекарственных растений на процессы свободнорадикального окисления в модельных системах. // Здравоохранение Башкортостана. 1998. - № 5-6.-С. 38-41.

83. Рысс Е.С., Звартау Э.Э. Фармакотерапия язвенной болезни. С.-Пб.: «Невский Диаяект»; - М.: «Изд-во Бином». - 1998. - 253 С.

84. Саратиков А.С., Венгеровский А.И., Паульс О.В., Седых И.М. Влияние эплира на токсическое поражение печени в эксперименте. // Фармакол. и токсикол. 1990. - Т. 53. - № 5. - С. 42-45.

85. Саратиков А.С., Скакун Н.П. Желчеобразование и желчегонные средства. Томск. - 1977. - 274 С.

86. Семенов А. А. Природные противоопухолевые соединения. — Новосибирск. 1979. - 129 С.

87. Сибиряк С.В., Вахитов В.А., Курчатова Н.Н. Цитохром Р450 и иммунная система: факты, гипотезы, перспективы. — Уфа: Гилем. — 2003.-211 С.

88. Скакун Н.П., Писыео Г.Т., Мосейчук И.П. Поражение печени четыреххлористым углеродом. М.: НИИТЭХИМ. - 1989. - 106 С.

89. Скакун Н.П., Кметь С.Е. Острое поражение печени парацетамолом // Врачебное дело. 1982. - № 8. - С. 19-22.

90. Скакун Н.П., Мосейчук И.П., Гиль Л.Л. Эффективность антиоксидантов при комбинированном поражении печени четыреххлористым углеродом и этанолом. // Фармакол. и токсикол. — 1987. № 3. - С. 97-99.

91. Скакун Н.П., Олейник А.Н., Блихар Е.И. Комбинированная фармакотерапия заболеваний печени с использованием антиоксидантов. Методические рекомендации. Тернополь. - 1987. — С. 16.

92. Скакун Н.П., Олейник А.Н., Пилюрин И.Т. Эффективность антиоксидантов при повреждении печени четыреххлористым углеродом. // Тезисы Всесоюз. совещания «Биоантиоксидант». -Черноголовка. 1983. - С. 131-132.

93. Скулачев В.П. Аккумуляция энергии в клетке. М.: Наука. - 1969.

94. Скулачев В.П. Трансформация энергии в биомембранах. М.: Наука. — 1972.-204 С.

95. Соколов С .Я., Замотаев И.П. Справочник по лекарственным растениям. (Фитотерапия). Челябинск: «Металлургия». - Изд. 3-е. - 1991. - С. 128131.

96. Стальная И.Д., Гаришвили Т.Г. Метод определения малонового диальдегида с помощью тиобарбитуровой кислоты. // Современные методы в биохимии. М. - 1977. - С. 66-68.

97. Таран Ю.П., Шишкина Л.Н., Евсеенко Л.С. Влияние 6-метилурацила на параметры системы регуляции пероксидного окисления липидов при термическом ожоге. // Пат. физиология и эксп. терапия. 1995. - № 1. — С. 40-43.

98. Тиунов Л.А. Механизмы естественной детоксикации и антиоксидантной защиты. // Вестник РАМН. 1995. - № 3. - с. 9-13.

99. Толстиков Г.А., Балтина Л.А., Сердюк Н.Г. Глицерретовая кислота. // Хим.-фарм. журн. 1998. - Т. 32. - № 8. - С. 5-14.

100. Толстиков Г.А., Балтина Л.А., Шульц Э.Э., Покровский А.Г. Глицирризиновая кислота. // Биоорганическая химия. 1997. - Т. 23. -№9.-С. 691-709.

101. Тонский Я.И., Корда М.М., Клищ И.М. Роль антиоксидантной системы в патогенезе токсического гепатита. // Пат. физиология и эксп. терапия. 1996. -№2.-С. 43-45.

102. Тринус Ф.П., Мохорт Н.А., Клебанов Б.М. Нестероидные противовоспалительные средства. Киев. - 1975. - 240 С.

103. Фархутдинов P.P., Загидуллин Ш.З., Абдрашитова Н.Ф., Мирхайдаров А.Р., Тихонов А.В. Биооксиданты и проблемы их применения в клинической практике Здравоохранения Башкортостана. // Здравоохранение Башкортостана. 1996. - № 1. - С.41-48.

104. Филина Л.И., Семенченко В.Ф. Технология фитопрепаратов из коры березы. // Материалы 49 региональной конф. по фармации, фармакологии и подготовки кадров. Пятигорск. — 1994. - С. 78.

105. Фрейдлин И.С. Методы изучения фагоцитирующих клеток при оценке иммунного статуса человека. // Учебное пособие. Л. - 1986. - 37 С.

106. Чекман И.С., Потемкина Н.Н., Туманов В.А. Никотинамидные коферменты как объект воздействия лекарств и ядов. // Фармакол. и токсикол. 1977. - Т. 40. - №1. - С. 113-122.

107. Четверикова Л.К., Иноземцев Л.И. Роль липопероксидации в патогенезе гриппозной инфекции и поиск средств противовирусной защиты. // Вестник РАМН. 1996. - № 3. - С. 37-40.

108. Шабанов П.Д., Калишевич С.Ю. Биология алкоголизма. С.-Пб.: Изд. «Лань».-1998.-272 С.

109. Шварц Г.Я., Сюбаев Р.Д. Соотношение антиэкссудативного, анальгетического и жаропонижающего компонентов в действиинестероидных противовоспалительных препаратов. // Фармакол. и токсикол. 1982. - Т. 45. - № 1. - С. 46-49.

110. Энциклопедия народной медицины. Лесные лекарственные растения. -М.: Изд. дом АНС. 2002.- Т. 8. - раздел 18. - С. 12-32.

111. Adnyana I.K., Tezuka Y., Banskota A.H., Tran K.Q., Kadota S. Three new triterpenes from the seeds of Combretum quadrangulare and their hepatoprotective activity. // J. Nat. Prod. 2001. - V. 64. - № 3. - P. 360363.

112. Araya H., Horie Т., Hayashi M., Awazu S. Alteration in rat liver microsomal membranes induced by acetaminophen. // J. Pharmacobiodyn. 1987. - V. 10. -№7.-P. 296-301.

113. Banskota A.H., Tezuka Y., Adnyana I.K., Xiong Q., Hase K., Tran K.Q., Tanaka K., Kadota S. Hepatoprotective effect of Combretum quadrangulare and its constituents. // Biol. Pharm. Bull. 2000. - V. 23. - № 4. - P. 456460.

114. Benson G.D. Acetaminophen in chronic liver diseases. // Clin. Pharmacol. Ther. 1983. - V. 33. - P. 95-101.

115. Boreko E.I., Pavlova N.I., Savinova O.V., Nikolaeva S.N., Flekhter O.B., Phyzhova N.S., Nikandrov V.N. Inhibition of virus reproduction and proteinase activity by lupane and some other terpenes. // News Biomed. Sci. -2002.-№3.-P. 86-91.

116. Braca A., Morelli I., Mendez J., Battinelli L., Braghiroli L., Mazzanti G. Antimicrobial triterpenoids from Licania heteromorpha. И Planta Med. — 2000.-V. 66.-P. 768-769.

117. Bradbury B.J., Soper S.J., Kaczvinsky Jr.J.R., Bailey D.L., Gale C.D. US Patent 6,124,362, September 26, 2000 (Class A61K 031/19; A61K 031/05),t1. Appl. 353408.

118. Budavari S. Novel lupane derivatives, their preparation and pharmaceutical compositions containing same. Patent WO 94/26695.

119. Budavari S. Novel lupane derivatives, their preparation and pharmaceutical compositions containing same. Patent WO 94/26725.

120. Canini F., Bartolucci L., Cristallini E., Gradoli C., Rossi A., Ribacchi R., Valori C. Use of silymarin in the treatment of alcoholic hepatic steatosis. // Clin. Ter. 1985. -V. 114. - № 4. - P. 307-314.

121. Carlson R.M., Krasutsky P.A., Karim M.R.U. Use of betulin and analogs there of to theat herpesvirus infection. US Patent 5,750,578. May 12, 1998. A01N027/00; A01N031/00; A61K039/245.

122. Chatterjee P., Kouzi S.A., Pezzuto J.M., Hamann M.T. Biotransformation ofmthe antimelanoma agent betulinic acid by Bacillus megaterium ATCC 13368. // Appl. and Envir. Microbiology. 2000. - V. 66. - № 9. - P. 38503855.

123. Cho S.H., Gottlieb K., Santhanam U. Cosmetic compositions containing betulinic acid. // Eur. Pat. Appl. EP717, 983 (Class A61K7/48), 26 June 1996, US Appl. 359,976, 20 Dec. 1994; 14 pp.

124. Cunningham A.J., Gzenberg A. Futher improvement in the plague, technique for detecting single antibody forming cell. // Immunology. 1968. -V. 2.-P. 599-600.

125. Dashman Т., Kamm J. Effect of high doses of vitamin E on dimethylnitrosoamine hepatotoxicity and drug metabolism in the rat. // Biochem. Pharmacol. 1979. -V. 28. - P. 1485-1490.

126. De Clerq E. The emerging role of fusion inhibitors in HIV infection. // Drugs R.D. 1999. - V. 2. - № 5. - P. 321-331.

127. Demizu S., Kajiyama K., Takahashi K. et al. Antioxidant and antimicrobial constituents of licorice: Isolation and structure elucidation of a new benzofuran derivative. // Chem. Pharm. Bull. 1988. - V. 36. - № 9. - P. 3474-3479.

128. Derelanko M.J., Long J.F. Effect of corticosteroids on indomethacin-induced intestinal ulceration in the rat. // Dig. Diseases Sci. 1980. - V. 25. -№11. -P. 823-829.

129. Dereu N., Evers M., Poujade C., Soler F. PCT Int. Appl. WO 9426,725. Appl. 93/5,620. 11 May. 1993.

130. Dybing E., Holme J.A., Gordon W.P. Genotoxicity studies with paracetamol. // Mutat. Res. 1984. - V. 138. - № 1. - P. 21-32.

131. Euler H.V. New observations of fat-soluble growth factors. // Arkiv kemi mineral geol. 1925. - V. 9. -№ 25. - P. 6.

132. Fernandes M.A., Heras В., Garcia M.D., Saenz M.T., Villar A. New insights into the mechanism of action of the anti-inflammatory triterpene lupeol. // J. Pharm. Pharmacol. -2001. -V. 53. P. 1533-1539.

133. Fulda S., Jeremias I., Steiner H.H., Pietsch Т., Debatin K.M. Betulinic acid: a new cytotoxic agents against malignant brain-tumor cells. // Int. J. Cancer. 1999.-V. 82.-P. 435-441.

134. Fulda S., Scaffidi C., Susin S.A., Krammer P.H., Kroemer G., Peter M.E., Debatin K.M. Activation of mitochondria and release of mitochondrial apoptogenic factors by betulinic acid. // J. Biol. Chem. 1998. - V. 273. - № 51.-P. 33942-33948.

135. Green M.D., Fischer L.J. Hepatotoxicity of acetaminophen in neonatal and young rats. II. Metabolic aspects. // Toxicol. Appl. Pharmacol. 1984. - V. 74.-№ l.-P. 125-133.

136. Hayek E.W.H., Jordis U., Moche W., Sauter F. A bicentennial of betulin. // Phytochemistry. 1989. - V. 28. - № 9. - P. 2229-2242.

137. Hirova K., Takahashi Т., Miura N., Naganuma A., Sakamoto T. Synthesis of betulin derivatives and their protective effect against the cytotoxicity of cadmium. // Bioorg. Med. Chem. 2002. - V. 10. - P. 3229-3236.

138. Holme J.A., Dahlin D.C., Nelson S.D., Dybing E. Cytotoxic effects of N-acetyl-p-benzoquinone amine, a common arylating intermediate of paracetamol and N-hydroxyparacetamol. // Biochem. Pharmacol. 1984. -V. 33. - № 3. - P. 401-406.

139. Howard A., Patelski J. Effect of interavenous polyunsaturated phosphatidylcholine in experimental atherosclerosis. // Verh. Dtsch. Ges. Inn. Med. 1972. -V. 78. - P. 1245-1248.

140. Jaaskelainnen P. Betulinol and its utilisation. // Paperi ja Puu.-Pap. och Tra. 1981. - № 10. - P. 599-603.

141. Jeong H.-J., Chai H.B., Park S.-Y., Kim D.S.H.L. Preparation of amino acid conjugates of betulinic acid with activity againts human melanoma. // Bioorg. Med. Chem. Lett. 1999. - V. 9. - P. 1201-1204.

142. Just M.J., Recio M.C., Giner R.M., Cuellar M.J., Manez S., Bilia A.R., Rios J.-L. Anti-Inflammatory Activity of Unusual Lupane saponins from Bupleurum fruticescens. П Planta Med. 1998. - V. 64. - P. 404-407.

143. Kaplan N.O. The role of pyridine nucleotides in regulating celluar metabolism // Curr. Top. Cell. Regul. 1985. - V. 26. - P. 371-381.

144. Kashiwada Y., Chiyo J., Ikeshiro Y., Nagao Т., Okabe H., Cosentino L.M., Fowke K., Lee K.H. 3,28-Di-0-(dimethylsuccinyl)-betulin isomers as anti-ШУ agents. //Bioorg. Med. Chem. Lett.-2001.-V. 11.-P. 183-185.

145. Kashiwada Y., Hashimoto F., Cosentino L.M., Chen C.-H., Garrett P.E., Lee K.-H. Betulinic acid and dihidrobetulinic acid derivatives as potent Anti-HIV agents. // J. Med. Chem. 1996. -V. 39. - № 5. - P. 1016-1017.

146. Katunuma N., Kominami E. A new enzyme that specifically inactivates apoprotein of NAD-dependent dehydrogenases // Biochem. Biophys. Res. Comm.-1971.-V. 45.-№ l.-P. 76-81.

147. Kim D.S.H.L., Pezzuto J.M., Pisha E. Synthesis of betulinic acid derivatives with activity against human melanoma. // Bioorg. Med. Chem. Lett. 1998. -V. 8. - № 13.-P. 1707-1712.

148. Kouzi S.A., Chatterjee P., Pezzuto J.M., Hamann M.T. Microbial transformations of the antimelanoma agent betulinic acid. // J. Nat. Prod. -2000.-V. 63.-P. 1653-1657.

149. Kozurkova M., Misurova E., Kropacova K., Hakova H. The effect of essentiale on histones and nucleic acids in liver and blood-forming tissues of rats irradiated with gamma-rays. // Radiats Biol. Radioecol. — 1999. V. 39. -№ 4. -P. 388-393.

150. Kundu А. В., Barik B. R., Mondal D. N., Dey A. K., Baneryi A. Ziziberanic acid a pentacyclic triterpenoid of Ziziphus jujuba. II Phytochemistry. 1989. -V. 28.-№11.-P. 3155-3158.

151. Kweifio-Okai G., Field В., Rumble B.A., Macrides T.A., De Munk F. Esterification Improves antiarthritic effectiveness of lupeol. // Drug Dev. Res. 1995.-V. 35.-P. 137-141.

152. Lee C.Y., Man-Fan W.J. Vitamin E supplementation improves cell-mediated immunity and oxidative stress of Asian men and women. // J. Nutrition.о2000. V. 130. - № 12. - P. 2932-2937.

153. Lorenz D., Mennioke W.H., Behrendt W. Untersuchungen zur Elimination von Silymarin bei cholezystektomierten: 2. Mitt Biliare Elimination nach merfacher oralen Gabe. // Planta Med. 1982. - V. 45. - P. 216-229.

154. Ma J., Starck S.R., Hecht S.M. DNA polymerase inhibitors from Tetracera boiviniana. II J. Nat. Prod. 1999. - V. 62. - P. 1660-1663.

155. Malini M.M., Lenin M., Varalakshmi P. Protective effect of triterpenes on calcium oxalate crystal-induced peroxidative changes in experimental urolithiasis. // Pharmacol. Res. 2000. - V. 41. - № 4. - P. 413-418.

156. Manez S., Recio M.C., Giner R.M., Rios J.-L. Effect of selected triterpenoids on chronic dermal inflammation. // Eur. J. Pharm. 1997. - V. 334.-P. 103-105.

157. Maurya S. K., Devi S., Pandey V.B., Khosa R. I. Content of betulin and betulinic acid, antitumor agents of Ziziphus species. II Fitoterapia. 1989. -V. 60. - № 5. - P. 468-469.

158. Melek F. R., Ranwan A. S., Ahmed A. A., Hamman A. A., Abualabi E. A. Triterpenes from Atractylis carduus L. II Farmazie. 1989. - V. 44. - № 10. -P. 735.

159. Mennioke W.H., Lorenz D., Behrendt W. Studies on the biliary of silybin in cholecystectomized patients following multiple oral administration ofsilymarin. // Naunyn-Schmeideberg's Arch. Pharmacol. 1979. - V, 308. -P. 114-120.

160. Mitchell J.R., Jollow D.J., Potter W.Z. Acetaminophen-induced hepatic necrosis. I. Role of drug metabolism. // J. Pharmacol. Exp. Ther. 1973. -V. 187. -№ l.-P. 185-194.

161. Miura N., Matsumoto Y., Miyairi S., Nishiyama S., Naganuma A. Protective effects of triterpene compounds against the cytotoxicity of cadmium in HepG2 cells.// Mol. Pharmacol. 1999. - V. 56. - № 6. - P. 1324-1328.

162. Mukherjee P.K., Saha K., Das J., Pal M., Saha B.P. Studies on the antiinflammatory activity on rhizomes of Nelumbo nucifera. // Planta Med. -1997.-V. 63.-P. 367-369.

163. Nishida M., Naeshiro H., Hashimoto O. Skin aging — preventing cosmetics containing lupeol and or its organic acid esters. // Jpn. Appl. 10. 01. 1992.

164. O'Grady J.G. Paracetamol-induced acute liver failure: prevention and management. // J. Hepatology. 1997. - V. 26. - P. 41-46.

165. Oalces D., Pollak J., Webster W. Effects of a herbicide formulation, Tordon 75D and its individual components on the oxidative functions of mitochondria. // Organohal. Сотр. 1999. - V. 42. - P. 357-361.

166. Pezzuto J.M., Das Gupta Т.О., Kim D.S.H. Patent 5869535 USA.

167. Rachej a K.L., Linscheer W.G., Cho C. Hepatotoxicity and metabolism of acetaminophen in male and female rats. // J. Toxicol. Environ. Health. —1983. -V. 12. № l. p. 143-158.

168. Recio M.C., Giner R.M., Manez S., Gueho J., Julien H.R., Hostettmann K., Rios J.L. Investigations on the steroidal anti-inflammatory activity of triterpenoids from Diospyros leusomelas. II Planta Med. 1995. -V. 61. - P. 9-12.

169. Recknagel R.O., Glende Jr. E.A., Dolak J.A. Mechanism of carbon tetrachloride toxicity. // Pharmacol. Ther. 1989. - V. 43. - № 1. - P. 139154.

170. Reitman S., Frankel S. A colorimetric method for the determination of serum glutamic oxalacetic and glytamic pyrulic transaminases. // Am. J. Clin. Pathol. 1957. - V. 28. - № 1. - P. 56-63.

171. Reynolds E.S., Treinen R.J., Farrish H.H., Moslen M.T. Metabolism of 14C.carbon tetrachloride to exhaled, excreted and bound metabolites. Dose-response, time-course and pharmacokinetics. // Biochem. Pharmacol, —1984.-V. 33.-№21.-P. 3363-3374.

172. Rieber M., Strasberg-Rieber M. Induction of p53 without increase in p21 WAFl in betulinic acid-mediated cell death is preferential for human mitastatic melanoma. // DNA Cell Biol. 1998. - V. 17. - № 5. - P. 399-406.

173. Rugutt J.K., Rugutt K.J. Relationships between molecular properties and antimycobacterial activities of steroids. // Nat. Prod. Lett. 2002. - V. 16. -№2.-P. 107-113.

174. Ryu S.Y., Choi S.U., Lee C.O., No Z., Ahn J.W. Antitumor triterpenes from medicinal plants. // Arch. Pharm. Res. 1994. - V. 17. - P. 375-377.

175. Schmidt M.L., Kuzmanoff K.L., Liang-Indeck M.L., Pezzuto J.M. Betulinic acid induced apoptosis in human neuroblastoma cell lines. // Eur. J. Cancer. 1997. - V 33. -№ 12. - P. 2007-2010.

176. Schriewer H., Kastrup W., Wiemann. Ein Beitrag zur Frage der antihepatoxischen Wirkung von Silymarin auf den durch Phaloidin intoxication gestorten Lipidstoffwechsel der Ratte. // Arzneimittel-Forsch. -1975.-Bd. 25.-P. 188-194.

177. Selzer E., Pimentel E., Wacheck V., Schlegel W., Pehamberger H., Jansen В., Kodym R. Effects of betulinic acid alone and in combination with irradiation in human melanoma cells. // J. Invest Dermatol. 2000. - V. 114. -P. 935-940.

178. Sheth K., Bianchi E., Wiedhope R., Gole J.R. Antitumor Agents from Alnus oregona (Betulaceae), II J. Pharm. Sci. 1973. - V. 62. - P. 139.

179. Siegers C.P., Fruhling A., Younes M. Influence of dithiocarb, (+)-catechin and silybine on halothane hepatotoxicity in the hypoxic rat model. // Acta Pharmacol, toxicol. 1983. -V. 53. - P. 125-129.

180. Sies H. Nicotinamide nucleotide compartmentation // Acad. Press. 1982. -P. 205-233.

181. Simonsen J.L., Ross W.C.J. The Terpenes vol. IV. // Univercity Press Cambridge. 1957. - P. 289.

182. Steele J.C., Warhurst D.C., Kirby G.C., Simmonds M.S. In vitro and in vivo evalution of betulinic acid as an antimalarial. // Phytother Res. 1999. - V. 13. - № 2. - P. 115-119.

183. Sunitha S., Nagaraj M., Varalakshmi P. Hepatoprotective effect of lupeol and lupeol linoleate on tissue antioxidant defence system in cadmiuminduced hepatotoxicity in rats. // Fitoterapia. — 2001. V. 72. - № 5. - P. 516-523.

184. Thompson C.B. Apoptosis in the pathogenesis and treatment of disease. // Science. 1995. -V. 267. - P. 1456-1462.

185. Tran A., Treluyer J.M., Rey E. Protective effect of stiripentol on acetaminophen-induced hepatotoxicity in rat. // Toxicol. Appl. Pharmacol. -2001.-V. 170.-№3.-P. 145-152.

186. Valenzuela A., Lagos C., Schmidt K., Videla L. Silymarin protection against hepatic lipid peroxidation by acute ethanol intoxication in the rat. // Biochem. Pharmacol. -1985. -V. 34. P. 2209-2212.

187. Valterova I., Klinot J., Vystrcil A. Preparation and antibacterial activity of di-, tri- and tetraoid acids derived from 3,4-sekolupane. // Collect. Czech. Chem. Commun. 1983. - V. 48. - № 2. - P. 649-661.

188. Vidya L., Varalakshmi P. Control of urinary risk factors of stones by betulin and lupeol in experimental hyperoxaluria. // Fitoterapia. 2000. - V. 71. -P. 535-543.

189. Vina J.R., Romero F J., Estrela J.M. Effect of acetaminophen (paracetamol) and its antagonists on glutathione (GSH) content in rat liver. // Biochem. Pharmacol. 1980. -V. 29. - № 3. - P. 1968-70.

190. Vogel G., Trost W., Braatz R. Untersuchungen zu Pharmacodynamic, Angriffspunkt und Wirkungsmechanismus von Silymarin, dem antihepatotoxischen Prinzip aus Silybum mar. (L.) Gaertn. // Arzneimittel-Forsch.-1975.-Bd. 25.-P. 179-188.

191. Wada S., Iida A., Tanaka R. Screening of triterpenoids isolated from Phyllanthus flexuosus for DNA topoisomerase inhibitory activity. // J. Nat. Prod.-2001.-V. 64. — P. 1545-1547.

192. Wang B.H., Polya G.M. Selective inhibition of cyclic AMP-dependent protein kinase by amphiphilic triterpenoids and related compounds. // Phytochemistry. 1996. -V. 41. - № 1. -P. 55-63.

193. Walker R.M., McElligott T.F., Power E.M. Increased acetaminophen-induced hepatotoxicity after chronic ethanol consumption in mice. // Toxicology. 1983. -V. 28. - № 3. - P. 193-206.

194. Wheeler J. Die Darstellung des betulin durch Sublimation. // Pharai. J. -1899.-P. 494.

195. Yoshikawa Т., Furukawa Y., Wakamatsu Y., Kondo M. Immunopotentiators and the protection they give against carbon tetrachloride hepatotoxicity. // Experientia. 1982. - V. 38. - № 4. - P. 501-502.

196. Башкирскбго/государ ственного' * медицинского университета / доктор медицинских наук,профессор В.М. Тимербулатов/5» 2004 г.71. АКТо внедрении результатов научных исследований соискателя ИОХ УНЦ РАН Карачуриной JI.T. на кафедре фармакологии № 1

197. Зав. кафедрой фармакологии № 1с курсом клинической фармакологии д.м.н., профессорщкирского государственного медицинского университета доктор медицинских наук,профессор В.М. Тимербулатов/6"у> 2004 г.1. АКТ

198. Наименование предложения для внедрения: включен раздел «Гепатопротекторы» в учебный процесс для студентов на кафедре фармакологии № 2 с курсом клинической фармакологии в цикл лекций по лечению заболеваний печени и гепатобилиарной системы.

199. Кем предложен, исполнитель: соискатель лаборатории новых лекарственных средств ИОХ УНЦ РАН Карачурина JI.T.

200. Эффективность внедрения: новые синтетические биологически активные соединения на основе бетулина обладают эффективной гепатопротекторной активностью, проявляющейся в уменьшении симптомов холестаза и цитолиза, сопряженной с антиоксидантным действием.

201. Зав. кафедрой фармакологии № 2с курсом клинической фармакологиид.м.н., профессор JI.A. Валеева

Информация о работе

Карачурина, Лилия Талгатовна
кандидата биологических наук
Уфа, 2004
ВАК 03.00.04

Диссертация

Биохимические механизмы гепатопротекторного действия тритерпеноидов группы лупана и их фармакологическая активность - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы