Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Биохимические аспекты эндогенной интоксикации организма человека при грыжах передней брюшной стенки

ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Автореферат диссертации по теме "Биохимические аспекты эндогенной интоксикации организма человека при грыжах передней брюшной стенки"

МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ УКРАИНЫ СИМФЕРОПОЛЬСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ

На правах рукописи

КАЗАКОВА ВЕРА ВАЛЕНТИНОВНА

БИОХИМИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ЭНД01 ЕННОН ИНТОКСИКАЦИИ ОРГАНИША ЧЕЛОВЕКА ПРИ ГРЫЖАХ ПЕРЕДНЕЙ БРЮШНОЙ

СТЕНКИ

(Ш)О.(М бшетшия

. Авторсфера г диссертации на снискание учёдан сшпгки кандидата биолопгюек»пс наук

МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ УКРАИНЫ СИМФЕРОПОЛЬСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ

На правах рукописи

КАЗАКОВА ВЕРА ВАЛЕНТИНОВНА

БИОХИМИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ЭНДОГЕННОЙ ИНТОКСИКАЦИИ ОРГ АНИЗМА ЧЕЛОВЕКА ПРИ ГРЫЖАХ ПЕРЕДНЕЙ БРЮШНОЙ

СТЕНКИ

03.00.04 биохимия

Латорефера г диссертации на соискание ученой ctciküü кашшата биологических гаук

Диссертация яшшекя рукописью.

Диссертационная работа выполнена на кафедре- бпо^ямнн Оимферонольсясч о шеу.чареттжо/о ужшерс.чтегц I 'ауч.чме рукоао/уислн: нокч ор биоло! ичссих наук,

(н-д) ш;!,ч <мяашшп1ш: Киевский национальный медицинский университет им. акая. А.А, Ьогомолыш, кафедра бнохнмнн

ш-сштин спсш!али.;ированнош совета К 20.02..02 при Симферопольском

! осударепшшом мшверситс-ю.

Адресуниверситета: Ш03&. Крым

г. Симфер'ополь, ул Ялтинская. 4 С дтссршцией можно шнакомтьсн в бнолиотекс уннвсрситста

профессор Кожчпспко Свешана Владимировна

доктор иеашшнеких нате.

Профессор ЖсбрОвСКИН ВиЮОр ВтЛОриАМЧ

пфициа'П.ш.н- (>Г1и(м11.;н1ы: доктор оио;кн ичаких наук.

профессор Сорнсепко Светлана Николаевна кандидат медицинских паук, /тценг Ширяев Валерий Викторович

Защита состой гея ___________1990г. и часов на

у чельш секретарь специализированного сонета кандидат биолутическнх наук, доцент.

ЯНЦЕВ А.В.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Вопросы связанные с изучением молекулярных процессов при различных состояниях организма, в том числе при патологии, относятся к числу общебиологических проблем.

Развитие фундаментальных биохимических концепций и их применение в клинических исследованиях является важным для более глубокого понимания химических прекращений в организме, которые имеют отношение к процессам жизнедеятельности.

В последнее время широкое распространение получили исследования, направленные на раскрытие молекулярных механизмов при различных заболеваниях как с целью разработки биохимических маркёров, ноз-нопяющич выявить изменения уже на ранних тглнах разиития болезни, так и с целью оценки тяжести патологии и состояния организма в процессе лечения. т акже для создания научных основ химиотерапии /Меерсон Ф.З. и соавг. ¡976. Тоскнн К.Д. 1978., Ellis МЛ977/. В свяли - тугим, всё большее значение приобретают биохимические исследования при заболеваниях, лечение которых связано с щгергическим вмешательством, в частности, при хирургической патологии брюшной стенки, в том числе при грыжах живот ! Бех Н.Д. и coaßi. 1992, Губка A.B. и сиав1.19й9, Чаденко В.В. и соаиг. 1990. Гудим В.И. и соавт.1983, Давиденков Е.Ф. п соавт. 1992 /. Патогенез хрыж живота сложен и многообразен, однако одним id важнейших звеньев является интоксикация организма больного веледствни всегда имющихся у больного нарушений в периодической деятельности пищеварительной системы в связи с выраженностью спаечного процесса в брюшной полости /Жебровский В.В., Тоскнн К.Д. 1973/.

Анализ литературных данных показал, что вопрос биохимической диагностики интоксикации при грыжах живота не изучен. Степень хронической лндогенной интоксикации не учитывается хирургами в процессе определения показаний к операции, ири определении onqiauiromioro риска, в медицинской коррекции интоксикации в процессе предопераци-

oHHOft подготовки. Поэтому несмотря на эффективность лечения ряда хирургических заболеваний брюшной стенки имеют место осложнения в состоянии больных как до операции, гак и в послеоперационном периоде в результате эндогенной интоксикации организма / Береснев О.В. и соавт. 1994, Крнгер Л.1. и соавт. 1985. Лашаш В.З. и соавт. 1981, 1984. Сыро-ватская Л.П. и соавт. 1993. Streuli R. 1У89Л

Рядом исследователей показано, что при различных патологических состояниях, в том числе и при хирургическом вмешательстве, нарушается целостность биологических мембран /Кригер А..Г". и соавт. 198S. Толкачёва 11.15. 1991, lienesch R. 1976/. Одним из наиболее мощных модифицирующих мембраны факторов является интенсификация перекнсиого окисления лини/'.ов (ПОЛ) Бурлакова E.fi. 1981,1985, Владимиров Ю.А. н соавт. iУ; ?.. Козлов Ю.П. и соавт. 1972/, С ПОЛ могут быть связаны такие функционально значимые нарушения, как изменения проницаемости мембран, функции мембраносвязанных ферментов, метаболических процессов в j.-41-ггкях /Кагян B.R и соавт. 197". ТируглйК.Н. 197 V. ' Vtnavo имеющиеся в на«тоящее время в литературе данные на наш взгляд, не в полной мере отражают состояние перекисного окисления липидов и связь этого метаболического процесса с эндогенной интоксикацией организма при хирургической патологии, в частноеш, при грыжах передней брюшной пенки. Не изученным является вопрос о функциональном состоянии эритроцитов и внутри?р1!трош1тарнои метаболизме при данной патологии. Вместе с чем, наличие на мембране 'ритроциюв человека и животных одренорецситоров / Морозов В.П. и соавт. 1992/, их чувствительность к недостаточности токоферола / Бурдакова Е.Б. и соавт. 1985, Хранова II,Г. !975 возможность сорбции на поверхности токсических веществ >'Фри-дович Н.К.. 19~9/. свидетельствует о целесообразности исследования эритроцитов при различных патологических состояниях.

Данная работа выполнена на базе кафедры биохимии Симферопольского государственного университета и является логическим продолжением исследовании, которые проводятся на кафедре факультетской

хирургии №2 Крымского медицинского института по изучению биохимических показателе!! при грыжах передней брюшной стенки.

Целью настоящей работы явилось изучение состояния перскисного окисления липндов и внутриэритроцитарного метаболизма при эндогенной интоксикации больных с грылсамн передней брюшной стенки до операции и в послеоперационном периоде.

В соответствии с этим решались такие задачи:

1. Изучить количественное содержание в сыворотке крови больных среднемолекуляриых олигопептидов как маркёров уровня интоксикации организма.

2. Изучить особенности изменения количественного содержания общих липндоя и продукт* перекнсного окисления липидов в плазме крови и эритрошпарпых мембранах у больных с данной патологией,

3,Определить взаимосвязь между уровнем эндогенной интоксикации организма и интенсивностью перекненого окисления липндов до операции я в послеоперационом периоде.

•V Охарактеризовать особености количественного содержания в эритроцитах больных глюкозы, гликозилированного гемоглобина, фосфо-еноли.чрувата, АТФ и уровня 1 ексокиназной активности.

5. Определить зависимость внутрнэрнтроцитарного метаболизма от интенсивности перекисного окисления липидов в мемЬранах и уровня эндогенной интоксикации.

Основные положения диссертации, выносимые на защиту:

1. Высокое содержание среднемолскулярных олитиептнлов в сыворотке крови больных с грыжами передней брюшной стенки свидетельствует о значительной интоксикации организма при данной хирургической патологии до операции и в послеоперцнонном периоде.

2. Снижение уровня общих липидов и высокое содержание диеновых к стонов, диеновых конъюгатов и малонового диальдегида (МДА) в плазме крови и в мембранах эритроцитов больных до операции и в послеоперационном периоде может свидетельствовать о глубоких изменениях в

гшпнпиом обмене и о нарушениях в системе антноксидантной защиты организма.

3. Интенсификация процессов перекисного окисления липидов в эригроцитарных мембранах, сопровождается увеличением уровня содержания глюкозы и пиисозилнрованного гемоглобина в эритроцитах, что позволяет предположить возможность происходящих при данной патологии измене-ний в транспорте глюкозы в эритроциты и в утилизации

8 НИХ ГЛЮКОЗЫ.

4. Высокий уровень активности гексокиназы, а также содержания фосфоенолпирувата и ЛТФ в эритроцитах больных свидетельствует об интенсификации внугриэрихроцитарных тиколшичееких реакции, чю можс! быгь связано с: увеличением содержания глюкозы в эритроцитах и эритроцитарпых энергозатрат при данной хирургической патологии,

5. Изменения г, урояие эндрогениой интоксикации и процессов перелагают о окисления липидов в организме больных с грыжами передней брюшной стенки имеют более устойчивый характер по 'сравнению с изменениями некоторых показателей внут1чпритрошггарного метаболизма и могу т создавать предпосылки для послеоперационных осложнений. '

Научили иовтнз

Установлено, что при 1рьтжах передней брюшной стенки осуществляются изменения в липидном обмене, в частности, интенсифицируются процессы псрекисного окисления липидов (ПОЛ), о чём свидетельствует увеличение содержания первичных н вторичных продуктов ПОЛ в плазме крови и в мембранах эритроцитов.

Дана оценка степени эндогенной интоксикации больных до операции п в послеоперационном пдэиоде. Показана взаимосвязь степени эндогенной интоксикации и уровня процессов перекисного окисления лигшдов.

Установлено, что у больных с грыжами пqJeднeй брюшной стенки осуществляются изменения во внугриэртроцнтарном метаболизме, в частности, интенсифицируются гликолнтические реакции и спонтанное гликозилированне гемоглобина.

Показано, что изменения в уровне эндогенной интоксикации и процессов перекисного окисления лишков при данной хирургической патолог ии имеют более устойчивый характер, по сравнению с изменениями некоторых показателей внутриэрнтроцит-арного метаболизма и могут создавать предпосылки для послеоперационных осложнений.

Практическое и теоретическое значение работы

Результаты исследований свидетельствуют о том, что у больных с грыжами передней брюшной стенки эндогенная интоксикация организма сопровождается усилением перекисиого окисления липпцов. В патологический процесс вовлекаются эритроциты. осуществляются изменения в мембранах и во внуфичритропитарном метаболпзме.

Различия в динамике изменений щученных биохимических показателей до операции и в послеоперационном периоде позволяют использовать их для оценки обшего состояния организма и для контроля возможных послеоперационных осложнений.

Результаты исследований иснолмуются на кафедре биохимии Симферопольского государственного университета при чтении лекций по специальным курсам; "Биохимия углеводов и липидов","Биохимия крови", "Структурная организация и функции бномембран". Полученные данные внедрены в работу хирургического отделения Железнодорожной больницы и 6-ой городской больницы г. Симферополя, где они учитываются в процессе предоперационной подготовки, при определении степени операиииннея о риска у больных различною возраста, а также при послеоперационном лечении больного.

Личный вклад автора в разработку научных результатов, которые выносятся на защиту заключается в исполнении всего объёма экспериментальной части диссертационной работы, подборе и обработке литературных данных, а также вклад с научными руководителями н анализ и интерпритацшо полученных результатов.

Апробация работы. Материалы диссертации докладывались на областной научно-прапической конференции, посвященной 10-летию кафедры хирургических болезнен педиатрического и стоматологического факультетов (Харьков, 1993г.), иа научно-практической конференции хирургов Украины Стариков, 1995г.), на научной конференции хирургов России (Санкт-Петербург, 1995г.), на V научно-практической конференции (Ялта. 1993г.), на >81 заседании научного общества хирургов Крыма (Симферополь. 1995г.), на расширенном заседании кафедры факультетской хирургии №2 Крымского медицинского института (Симферополь. 1994г.), на. расширенном заседании кафедры биохимии Симферопольского государственного университета (Симферополь, 1995г.).

Объём и структура рабты. Работа изложена на 139 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов, результатов собственных исследований с их обсуждением, заключения, выводов и списка л-першуры (305 источников: из них 8с> иностранных авторов). Текст диссертации проиллюстрирован 14 таблицами и 20 рисунками.

Материалы и мет.чм исследовании

Материалом исследования служили сыворотка и плазма крови, а также эритроциты больных с грыжами передней брюшной стенки.

Были обследованы больные (51 человек) в возрасте от 42 до 60 лгт, а также здоровые люди-доноры (47 человек). Кровь Доноров получали в отделении проливания крови при Отделенческой клинической больнице на ст. Симферополь, кровь больных - в хирургической отделении (ой же больницы.

Содержание общих липидов (ОЛ) в плазме крови и в оригроцитарных мембранах определяли сульфофосфованилиновым методом но К /'oller и N.Hirsch р. модификации Ю.А.Барышкова с соавт. (1966)..

Уровень среднемолекулярных пептидов в сыворотке крови определяли по методике H.H. Габрюлян с соавт. (1934).

Первичные продукты перекисного окисления лнпвдов (ГЮЛ) -диеновые кеггоны и диеновые коныогаты - в плазме крови и в эритроци-ырных мембранах определяли по методике З.Плацер и соавт., в модификации В.Б. Гаврнлован М.И. Мншкоруднои (1983).

Определение содержания МДА проводили с помощью тиобарби-туровой кислоты /СНакауа Н.. С!н=Ь! N. 1989/. Мембраны эритроцитов получали по методике Т.А, Серебриноиой (1980).

Гсмолизагы эритроцитов получали по методике Драбкина (1949). Концентрацию гемоглобина в гемолизате определяли унифицированным гемиглобинцианидным методом, который используется в практике клинической биохимии.

Для определения пшкозилнрованного гемоглобина использовали колориметрический тиобарбитуровый метод/Л.И.Данилова. Н.П. Лопатина. 1986/.

Определнне концентрации глюкозы в гемолизате эритроцитов проводили глюкозооксидалным методом /Балаховский И.С., 1У87/.

Количественное содержание фосфоенолпировиноградной кислоты и АТФ в гемолизатах эритроцитов определяли при помощи методов, основанных на отщеплении неорганического фосфата и его колориметрическом определении .Алейников Т.Л., Рубцова Г.В., 1983/.

Определние активности внутрюр1Ггроц1ггарнои гексокиназы проводили спектрофотометрическн, используя кислотно-основный индикатор крезоловын красный ;Кочетов Г.А.. 1930/.

Цифровые данные, полученные в результате исследовании, статистически обрабатывали /Бэйли,1964/. Объём совокупности составлял, в среднем, от 4(1 до 50. Сравнение двух перменных величин осуществляли на основании [-критерия Отьюдента. В диссертационной работе говорится об изменниях только в тек случаях, когда Р<0,05, Для установлении тесноты взаимосвязи между двумя показателями, определяли коэффициент корреляции (г).

Результаты исследований и их обсуждение

I. Количественное содержание среднемолекулярных олигопептидов в сыворотке крови больных с грыжами передней брюшной стенки до операции и в послеоперационном периоде Среднемолекулярные олигопептиды (СМО) являются продуктами катаболизма эндо- и экзогенных белков, которые оказывают прямое токсическое действие на метаболизм клетки. По уровню содержания С МО в крови можно судить о степени эндогенной интоксикации организма.

Полученные результаты свидетельствуют о том, что до операции больные с, грьгжамц передней брюшной стенки имеют повышенный уровень интоксикации по сравнению с донором. Количественное содержание CMQ в сыворохке крови больных составляли (¡,299^0,1)12 усл. од., прошв 0.2лI±0.012 усл.ед. в контрольной грчипе. Ещё более высокий уровень содержания СМО в сыворотке крови больных наблюдается на 3 сутки после операции: 0.*Ю5±0,01о усл.ед., что на 60% выше, чем у доноров. При нормальном течении послеоперационного периода наблюдается постепенное снижение количественного содержания СМО в сыворотке крови больных: к 10-ым суткам уровень СМО составлял 0,29"±0.Ш5 усл.ед., что однако, оставалось достоверно выше, чем у доноров (рис.1, А).

Таким образом, полученные результаты свидетельствуют о том, что у больных с грыжами передней брюшной стенки имеет место повышенная интоксикация организма, сохраняющаяся и в послеоперационном периоде, что может быть следствием изменения деятельности пищеварительных органов, а также значительных н устойчивых метаболических нзменннй в организме.

2. Содержание общих липидов и продуктов их перекисного окисления в плазме крови больных с \ рыжа ми передней брюшной стенки

С целью выявления возможных изменений в липидном обмене при грыжах передней брюшной стенки, было изучено содержание общих липидов нх перекисного окисления в плазме крови больных. У больных до операции наблюдается достоверно меньшее (Р<0,05) содержание общих лппидов в плазме крови (5,51±0,01мг/мл против 6,41 ±0,014мг/мл у доноров). В послеоперационном периоде прослеживался достоверное снижение данного показателя но сравнению с больными до операции (4,48±0,019мг/мл и 4,52±0,02мг/мл на 3 и 10 сутки, соответственно) (Рис.1. Б).

Снижение общих липидов в плазме крови сопровождается увеличением содержания первичных продуктов их перекисного окиеления: диеновых кгшнов и диеновых коньюгатов. У больных до операции содержание диеновых кегонов в плазме крови возрасло на 2Ъ.8% (0.052± 0.006 усл.ед./мг липидов, против 0,041 ±0,004 усл.ед./мг липидов у доноров). В ранний послеоперационный период (3-й сутки) наблюдается ещё более выраженное увеличение уровня содержания в плазме первичных продуктов ПОЛ. Содержание диеновых кегонов возрастало на 40% (0,068+0,006 усл.ед/мг липидов), диеновых коньюгатов- на 66% (0,269x0,010 усл.ед/мг липидив) по сравнению с донорами. На 10-е сутки после операции содержание первичных продуктов ПОЛ оставалось по-прежнему высоким (Рис.1. В).

Несколько иной оказалась динамика количественного содержания в плазме крови малонотюго диальдегида (МДА). У больных до операции уровень МДА в плазме крови оставался в предел;« нормы и достоверно повышался только па 3-й сутки после операции (0,293+0,015 усл,ед,/мг липидов, против 0,259±0,009 усл.ед./мг липидов у доноров). На 10-е сутки после операции содержание МДА в плазме крови снижалось и не имело достоверных различии но сравнению с контрольной труппой (Рис. I, Г).

Из литературы известно, что процессы перекисного окисления липидов и системы, регулирующие образование их продуктов в органах и тканях, играют важную роль в развитии различных патологических

СМ0лсл.ед.

0.400

ОБЩИЕ ЛИЛИДЫ «г/мл

7.0 6.0

50 «

10 2.0 10

12 3 4

МДА.УМЕД МГ/липидов

5

одоо

0.250 0.200 0.150 О.ЮО [1050

|

В

Рис. 1 Содержание среднемолехулярных олшопептидо» (СМ' )) в сыворотке крови (А); общих лшшдов (Б);

г -1 щ

диеновых кегонов I_1, диеновых коньюгатов р=з (В);

и малонового днальдегида (Г) в плазме крови у больных с грыжами передней брюшной стенки: 1-доноры; 2-бо.хьные до операции; 3- больные на 3-й сутки после операции; 4- больные на 10 сутки после операции.

-интервал ошибки средней величины

реакций 'Башкатова В.Г. и соавт.,198<>. Бех Н.Д. 1989, Волков и соавт. 1983, Троицкий Г.В. и соавт. 197б/.Полученные данные указывают на то, что при хирургической пато-логии передней брюшной стенки, связанной с образованием 1рыж, уеили-вается интоксикация организма не только в резу льтате образования среднемолекулярных олигопептидов, но также в результате шггенсифика-ции процессов ПОЛ и накопления больших количеств, прежде всего, первичных продуктов нерекисного окисления лшншов. Сравнительно менее выраженные изменения в образовании МДЛ свидетельствуют о возможности "'обрыва" цени окисления липидов в результате действия защитных механизмов,

3. Содержание общих липидов и продутой нерекисного окисления липидов в мембранах эритроцитов больных с грыжами передней брюшной стенки Биохимические процессы в клетках узко специализированы и функции клеток весьма ограничены. Таким примером может служить эритроцит. Наличие на мембранах эритроцитов адпенорецепторов, которые связывают на своей поверхности токсические агенты, отсутствие внутриклеточных мембранных образований и органелп. всё это делает целесообразным изучение .эритроцитарных клеток при различных состояниях организма

Как показали результаты наших исследований, содержание общих липидов в мембране эритроцитов больных достоверно ниже по сравнению с контрольной труппой: до оперании-на 14% (1,4б±0,02 мг.'чп, против 2,33± 0,03 мг/мл у доноров), па 3-н сутки после операции - на 16% (1,26± 0.02мг, мл), на 10-е сутки на 9% <1.3310,013 мг/мл) (Рис.2, А).

Сшгжение содержания общих липидов в эритроцнтарных мембранах сопровождается увеличением содержания продуктов ПОЛ. До операции содержание диеновых «.тонов в эритроцнтарных мембранах больных увеличивается на 21% (0,068±0,005 усл.ед./мг липидов. против 0.056±0,005 усл.ед./мг/липидов у доноров),. а диеновых копьюгатов на - 13% по сравнению с контрольной группой (0,299±0,014 усл.ед./мг .липидов, против

ОБЩИЕ ЛИПИДЫ МГ/МЛ

А Б

0.400

0.550

§

§ 0.300

1

§ 0.250

0200

§ 0.150

0100

1 0050

12 3 4

В

Г"1

Рис.2 Содержание общих лииидов (А), диеновых кетоновЫ ,

диеновых коньюгагов § (Б") и малонового днальдегида

(В) в эритронитарных мембранах при грыжах передней брюшной стенки:

1-лоноры; 2- больные до операции: 3-больные на 3 сутки послеоперацни; 4- больные из 10-е супси после операции интервал ошибки средней величины

0.263±0.009 усл.ед/мг липидов у доноров). В раннем послеоперационном периоде наблюдается ешё более выраженное увеличение уровня первичных продуктов ПОЛ: содержание диеновых кетонов возрастает на 41% (0,079± 0,007 усл.ед./мг лппидое), а диеновых коньюгатов - на 30% (0,324±0,012 усл.ед./мг липидов) по сравнению с донорами.

На 10-е сутки после операции наблюдается достоверное снижение содержания первичных продуктов ПОЛ в мембранах эритроцитов, однако их уровень ио-прежнему остаётся выше, чем у доноров (Рис.2, Б).Прослеживается однонаправленность изменений в содержании общих липидов и первичных продуктов ПОЛ как в плазме крови, так и в мембранах эритроцитов. Вместе с тем, обращают на себя внимание более значительные изменения в содержании МДА в мембранах эритроцитов но сравнению с плазмой крови.

В мембранах эритроцитов уровень содержания МДА до операции возрастал на 10% (0,325±0,012 уел.ед'мг лишшов. против 0,294±0.003 усл.ед./мг липидов), на Vir сутки после операции- на (0,379+0,012 з'сл.еа.,''нг липидов). на Ш-е сутки - на 16% (.0,331 ±0.015 усл.еа.. мг липидов) по сравнению с контрольной группой (Рис.2. В), В связи с этим можно предположить, что интенсификация процессов ПОЛ при данной патологии в значительной степени затрагивает мембраны эритроцитов и происходящие в них метаболические изменения труднее поддаются коррекции защитными системами организма.

Большой фактический материал, накопленный к настоящему времени, позволяет считать общепризнанным значение нарушений в системе аитиоксиззитиой зашиты для интенсификации процессов ПОЛ и развитая патологических состояний /Ушакова В.Н. и соавг. 1934, Бех Н.Д. и еоавт. 1939, Кулагин Ю.И. 1991/.

В наших исследованиях отмечается тесная взаимосвязь в изменениях уровня содержания СМО и продуктов перекисного окисления липидов до операции и в послеоперашюпом периоде ( в среднем i-+0,93) (Рнс.З). что свидетельствует о закономерных и взаимосвязанных

изменениях в метаболических ситуациях, происходящих в организме при данной патологии.

4. Изменение показателей внутриэритроцигарного метаболизма у больных с грыжами передней брюшной стенки 4.1 Содержание глюкозы и гликозшшрованного гемоглобина в ?ритроцитх. больных с грыжами передней брюшной стенки

Как известно из литературы /Галенок В.Л. и еоавт. 1983. Castro О. и соавт. 19~6.\ глюкоза проникает в эритроцит из окружающей плазмы при помощи системы шертозависимого переноса, на которую не влияет инсунш. Вчеп е г тем. ipaiicnopi пиокозы в эритроцит зависит от структурного состояния клеточной мембраны и может измениться при интенсификации процессов перс-кисного окисления липидов.

12 3 4

Рис.3 Взаимосвязь в изменениях содержания СМО (ЕНЭ) диеновых кетонов(Д-Д). диеновых конъюгагов(*-А) и малинового диальдегнда <р-о) « плазме крови больных с грыжами передней брюшной стенки; 1-доноры; 2-больные до операции; 3-больные на 3 суп;н после операции; 4-больные на 10 сутки после операции.

ГЛЮКОМ, ммоль1»

12 3 4

А

ФЕП, МГ'/.

Н Х>

12 3 4

Б

АТФ, мг */.

0.8

08 а<г

1 2 3 К

В

§ 5.0

4П

л

$

311

2.0

£

*

1'ис.4 Содержание г люкозы (Л). ФВ11 (Ь), ЛТФ (11), гдикозилированного гсмоптобипа (Г) в эритроцитах больных о г рыжами передней брюшной стенки:

I - допоры; 2-больные до операции; 3- больные на 3-й сутки после операции; 4- больные на 10-е сутки после операции.

[ интервал ошибки средней величины.

Результаты проведенных.исследований свидетельствуют о значительном увеличении содержании глюкозы в эритроцитах больных до операции (10,24+0.35 ммоль/л, против 4,31±0,19 чмоль/л у доноров). На 3 сутки после операции содержание, глюкозы в эритроцитах практически не меняется (9.?1±0.70 ммоль/л), а на 10-е сутки после операции достигает уровня контрольной I рупиы (4,1210.20 ммоль/л) (Рис.4, А,).

Представляло интерес выяснить влияет ли изменение содержания глюкозы в эритроцитах на интенсивность гликолитическнх реакций и на спонтанное гликозшшрование гемоглобина - метаболических процессов, в значительной степени определяющих функциональное состояние »рнтронитарныу клеток.

Полученные данные свидетельствуют о более высоком содержании пшко'.илнрованного гемоглобина в эритроцитах больных до операции (4,46±0.018. что на 29выше чем у доноров). На 3-й сутки после операции уровень содержания тликозилированного гемоглобина практически не менялся (4.20£0Л'<"••. против 4,4<>г0.1Н -? у больных до операции). На Ш-е с\ткн после операции содержание гликозилированного гемоглобина в .фнтроцитах достоверно снижалось ди уровня контрольной группы и составляло 3.42±0.05:;, (Рнс.4.Б).

Как видно из этих данных, характер изменения количественного содержания гликозилированного гемоглобина в целом соответствует изменению уровня содержания I люкизы. что свичетельству« о зависимости сиошанною пшкозилирования гемоглобина огконцентрации ппокозы в эритроцитах (г--'-0,9 25.

В связи с увеличением содержания в эр!процнтах больных глюкозы представ ляло интерес выяснить состояние виутриэритроцитарных птиколи-тическик реакции, поставляющих эричроцигам энергию и 2,3 дифосфогли-нерат (2,3 ДФП, регулирующий сродство гемоглобина к кислороду.

4.2. Содержание А'ГФ, фоофоенолшфувата и уровень гексокипазной активности в эр)процитах больных с грыжами передней брюшной стенки

Одним из показателей интенсивности гликолптических реакций в клетках являются уровни содержания в них макроэргических интермешгатов, в частности фосфоенолпирувата (ФЕ1Т), а также АТФ .'Мак-Мюрей У. 1930/.

В эритроцитах больных с грыжами передней брюшной стенки до операции отмечается в 2 раза больше содержание ФЕП по сравнению с контрольной группой (3,05±0,15 иг'', против 1,35±0.10 мг%у доноров). На 3-й сутки после операции содержание ФЕП в эритроцитах больных достоверно снижалось, но незначительно (2,52г0,15 мг%) и только на 10-е сутки послеоперационного периода достигало уровня контрольной группы (1.30+0,11 мг:;.)(Рис.4. В).

Изменения в количественном содержании ФЕП в эритроцитах сочетались с изменениями в содержании АТФ. Уровень содержания АТФ .я''эритроцитах больных до операции в 1,8 раз выше, чем в контрольной группе ¡0Д)±0.02 мг4« против 0.45±0,04м1"-'* у доноров). На 3-й сутки после операции содержание АТФ снижается в среднем на 18'.^ (0,66+0,03 мхл«'; против 0.80+0,02мг''о у больных до .операции) и достигает уровня контрольной группы на 10-е сутки послеоперационного периода (0,Мг 0,03мг^) (Рис.4.Г).

Увеличение количественного содержания ФЕП и АТФ в эритроцитах больных с арыжами передней брюшной стенки свидетельствует об интенсификации онутриэригронгггарных гликолптических реакций до операции и в раннем послеоперационном периоде.

Для подтверждения данного вывода также была изучена активность внутриэрнтроцитарнои тексокиназы г фермента, катализирующего первую "пусковую" реакцию гликолиза и определяющего ход дальнейших гликолптических реакций.

Как показали результаты исследований, активность тексокиназы в эритроцитах грыженосителей в пооперационном периоде почти в 1,5 раза

выше, чем в контрольной группе (4,91±0,10 нмоль/мг-мин против 3,22±0,03 нмоль/мг-мнн у доноров). На 3-й сутки после операции активность гексокииазы снижается, но остаётся выше, чем у доноров (4,120,09 нмоль/мг-мин). На 10-е сутан после операции активность гексокиназы достигает уровня контрольной группы (3.19±0.04 нмоль/мг-мин) (Рис. 5, А).

Прослеживается хорошо выраженная корреляция в измениях уровня содержания в эритроцитах больных АТФ, ФБП и активносш гексокиназы до операции и в послеоперационный период ( в среднем г~- 0.86) (Рис. 5, Б). • •

Рис. 5 Активность эритроцитарнои хексокшмзы (А)

п взаимосвязь в изменениях содержания АТФ (о-о) ФНП а-гЛ) и активности гексокиназы (Ш—О) в эритроцитах больных с |рыжамн передней брюшной стенки: 1-доноры: 2- больные до операции; 3- больные на 3-й сутки после операции; 4- больные на 10-е сутки после операции.

Молено предположи», что интенсификация гликолитаческих реакций в эритроцитах больных с грыжами передней брюшной етсяки обусловлена увеличением уровня глюкозы в эритроцитах и направлена на устранение её избытка. Не исключено, что интенсификация реакций глдколиза в эритроцитах ведёт к увеличению содержания в них побочного продукта гаиколитнческих реакций - 2,3 ДФГ. являющегося аляостерическим эффектом гемоглобина ( связываясь с гемоглобином 2,ЗДФГсшгжает его сродство к кислороду). Возможно это имеет определённое адаптивное значение в условиях роста в эритроцитах больных количества тлико.шлированного гемоглобина, характеризующегося высоким сродством к кислороду /Галенок В.А. 1989/.

Сопоставление данных по изучению процессов перекисного окисления липидов и внутриэритроштгарного метаболизма показало, что более устойчивым и являются изменения в состоянии ПОЛ, так как даже на Н)-е с)тки после операции содержание общих липидов и проектов их перекисного окисления в плазме крови и в мембране эритроцитов не достигает уровня контрольной группы.

Таким образом, результаты проведенных исследований свидетельствуют о том, что в организме больных с грыжами передней брюшной стенки усиливается эндогенная интоксикация и осуществляются метаболические изменения, сопровождающиеся интенсификацией процессов перекисного окисления липидов, а также биохимическими изменениями в эритроцитарных клетках. Установленные различия в динамике изменений биохимических показателей до операции и в после операционном периоде представляют определённый интерес в перспективе дальнейших исследований молекулярных пронессов, связаных е эндогенной интоксикацией организма и могут быть использованы в клинической практике.

ВЫВОДЫ

). Покачано, что у больных с (рыжами передней брюшной стенки усиливается интоксикация организма, о чём свидетельствует значительное повышение содержания среднем олекулярных олигопептидов в сыворотке крови как до операции, так и в послеоперационном периоде ( на 3-й и на 10-е сутки посте операции).

2. Установлено, что снижение содержания общих липидов в плазме крови и в мембранах эритроцитов сопровождается увеличением уровня диеновых кетонов. диеновых коньмгшов и малонового диальдепща в указанных местах локализации до операции и в послеоперационном периоде,

3. Показана взаимосвязь в изменениях уровня интоксикации организма больных и содержания первичных (диеновые кегоны и диеновые коньюгаты) и вторичных (МДА) продуктов перекисиою окисления липидов в плазме крови и в мембранах эритрошпоп.

4. Показано увеличение содержания пнокозы и пшкозилированнохо гемоглобина в эритроцитах больных до операции и в раннем послеоперационном периоде (на 3-й сутки после операции;.

5. Установлено, что у больных с грыжами передней брюшной стенки интенсифицируются онутрюритрецитарные гликолитические реакции, о чём свидетельствует повышение содержания в эритроцитам ФЕП, АТФ и уровня активности гексокиназы до операции и в раннем послеоперационном периоде.

6. Показано, что изменения в уровне интоксикации организма и процессов исрекисного окисления липидов при данной патологии имевл более устойчивый характер по сравнению с изменениями некоторых показателей внутриэригроцитарного метаболизма и могут создавать предпосылки зля послеоперационный осложнений.

СПИСОК РАБОТ,ОПУБЛИКОВАННЫХ 1ТО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Профнлак1ика послеоперационных сердечно-сосудистых осожнений у больных с обширными вентральными трыжами и спаечной нсироходи-мостыо кишечника. В кн.: Тез. докл. "Актуальные вопросы неотложной хирургии органов брюшной полости". - Харьков.-1993.-С.83-85 (Соавт. Ильченко Ф.Н., Каминский И.В., Нескоромный В.В.).

2. Состояние н коррекция нарушений сурфактанта лёпсих и иммунитета у хирургических больных пожилого возраста. В кн.: Тез.докл. "Система сурфактанта лёгких в норме и патологии". - Ялта.-1993.-С.70-71. (Соавт. Ильченко Ф.Н., ВоробцоваТ.С.).

3. Использование аитиоксидянтов в коррекции эндогенной интоксикации у больных со сложными грыжами живота. Клин, хирург. 1994 (В печати) ¡Соавг. Ильченко Ф.Н.. Жебровский В.В.. Каминский Н.В.).

4. Осложнения со стороны раны после операции по поводу 1рыж живота и их профилактика. Вест, хирург. 1994. (В печати). (Соавт. Жебровский В.В.. Ильченко Ф.Ш.

У Особенности коррекции синдрома эндогенной интоксикации с применением антиоксидантов у бозьных со сложными формами грыж живота. В кн.: Тез. докл. " Гнойносептическне осложнения и неотложной хирургии".-Харьков.-1995,-С.2!9-221. (Соавт. Каминский И.В.. Жебров-ская А.13Л.

о. Диагностика ранних послеоперационных осложнений в хирургии гепатопачкреатотсуоденальной зоны. В кн.: 'Новые технологии в хирургической гепзтологии".-!995.-С,370-371, (Соавт. Жебровский ВВ.. Каминский И.В.. Хайдар Вехой).

AHOTAUlfl

KassKosa Bipa BaneHTiniBHa

"BiaxiMiqni aciiem11 ¡¿iiaoreiinoi inioKCHKanii onnniijwy 'uouhhh apn rpiutrax ntpcaHbo'i 'jcpeshui chhkh" ^noepTanis na .-vnoöjTra navKOBoro ciynena KanonaaTa 6ioJiori<iUHX uavK 3i cneuiaiibuocri 03.00 .04 - öioxiMia, CiM^epononi,, 1096

Moio.'Kimii ftioxiMi'itioio aiiaiirjv ficraiiowieHo. mo np»i ipn:+;;iK itepeu-Hf-oi 'lepfnuo'i irriiiKH nooujioeiLCJi enaoreHHa iinoKCüKauitf opraubay i 3HiucnioiuTL-cii .ViOiaoosiMHt jmmh, äjJ cynpojios-Kvioitcf! urreHcii^iKauiao ncpckhcho! o oKitencinia niniiÜB. a iuko;k GiorjMi'-iinniu -Kuimin b cpinpo-UirrapHirj: j.iitiiii.l-:.

t ir>T.:a3aua mxeiiOü^iKauiH ep!npou!rrapHH.v. r^iiconiTiriHip". peaKiiiii ra miKOJiiJQOBaiiim rea oi .ioöi iiv.

h ii founJ qui br means of ibi> biochemical tnraihods that venire! hernias form the rising of endogenic intoxication and metabolic changes uith inaeasing of lipids petoxcidaiion mui biochemical changes in erythrocytes cells.

The iiv.'ii'iftcnvcn of Glycolytic reactions and haemoglobin's dycosihitkm in erythrocytes ceils is observed

KjiwiHcBbic ejiooa: -?H;!oi e»)iia}t mnoKCKKanHH. nepeKiteHoe oxncrieHne :iii!i!i;voB, rjii!k03njihp0bahhwri iCMorno6nti, T'CKCOKiiHasa. 4>oci})oohojI-ntipyBax. AT<i>, opiirpomrru,

ANNOTATION

KAZAKOVA VERA VALENTiNIVNA

i'Sic biochemical nspccls of endogenic intoxication of human organism with ventral hernias"