Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

БИОХИМИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА КОРМОВЫХ БЕЛКОВ, СТАБИЛИЗИРОВАННЫХ УКСУСНОЙ КИСЛОТОЙ

ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Автореферат диссертации по теме "БИОХИМИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА КОРМОВЫХ БЕЛКОВ, СТАБИЛИЗИРОВАННЫХ УКСУСНОЙ КИСЛОТОЙ"

ВСЕСОЮЗНЫЙ ОРДЕНА ТРУДОВОГО КРАСНОГО ЗНАМЕНИ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ ЖИВОТНОВОДСТВА *

(ВИЖ)

Не правах рукспвс*

УДК 636.2:612.015.3

Лав ли некая Нина Митрофанов на

БИОХИМИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА КОРМОВЫХ БЕЛКОВ, СТАБИЛИЗИРОВАННЫХ УКСУСНОЙ КИСЛОТОЙ

03.0G.04 - Биохимия

АВТОРЕФЕРАТ

. диссертация на соискание ученой степени . кандидата биологических наук:

п. Дубровины Московской области 1990

Ракета выполнена з лаборатории биохкши сельскохозяЛстазн-вых. животных Всесоюзного научно-исследовательского института ш-:-вотаоводотва.

Научный руководитель— доктор биологических наук,

профессор ТЛРЛНОВ М.Т.

Официальные оппонеитн: доктор биологических наук, заслуженный

деятель науки РСФСР, профессор " АЛИЕВ A.A. ■

доктор биологических наук, профессор ЧЕЧЕТЮШ Л.13.

Ведущая организация - Украинский НИИ физиологии к 6і:охі;їді:и сельскохозяйственных животных. „

. Зшита состоится * № » ОА&ртд 199 /гДв , /О часов на заседании спецаалиэированного Совете Д. 020Л6,02 Всесоюзного научно-исследовательского -инстг^тл юівоткотадстза. : ■ ■..■■■■ ■' ■ ■■ } '

Адрес института I42012, ЫосковскаяГойл., Подольский район,

Дубровины^ ЕК2.

С диссертацией псі"..) знакомиться в ^библиотеке Всесоюзного научно-иссл едоватвлг астату та жиеоЪго еодетва,

Автореферат разомни ■ сУ " 1Э9Уг.

Ч. "7 ■ і

Учены! секретарь ■ Л ". ,

соециаднэкрованфого Совета И л

кандидат биаяогОчесхмк наук И.^даНШі

I. ОБЩАЯ,ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОМ

Актуальность „темы. Улучшение использования азота корма с ель скохоэ яіістеєкнцми етютнши' - важная проблема. Однті из ее решений' является снимете деструкция протеина в рубце жвачных ■ без ухудшения его общей переваримости.

Актуальность данной работы, заключается в том» что она изучает закономерности превращения азотистых веществ корма в связи о измененным качествам протеина, а именно - со сниженной степенью его распада в. рубце крупного рогатого скота-; . ■

Одак.1 из наиболее эффективных способов уменьшения деструкцій протеина-корча в рубце признана обработка кормо вьсс средств формальдегидом (Хенкиг А. и др., 1986). Но на первый плав сейчас вздшггегся задача использования экологически чистих веществ» желательно коьібикирОЕаншго действия. С этой цеиша в работе бала испнтана уксуснач кислота - естественный изтаболзгг. Она является предЕествеяником гарных. кислот ыолока и в практике животноводства сироко др-^енявт подкорыку ее солями с цедъюпрофилактн-ки сшшенгя содерйшнзя жгра в шлоке (Алиев А. А Л974-1239 идр»). Следовательно, работа актуальна и тем, что направлена па взыска- . ш стабилизатора, столь яе эффективного ' как узе применяемые . формальдегид, протюковая кислота,ик тому же экологически частого и' комбинированного^действия.

Цель и задачи исследований. В литературе достаточно полно ,' отражена- физиология пищеварения жвачных, потребляющих кори со . сниженной деструкцией

протеина1 В : рубде, но мало - биохиыичесшсс исследований. ■ ,

Поэтому цель» настоящей работа било дат^ бто^мчесиую оценкукортовым белкам, "задазеннші" уксусной кишготоаГ от

Цїіітр. ксучкел бв^отги, | Кма. с*д. с агад, и«. іл. ї»ияркс:а к* I

да - В рубце крупного рогатого скота. Под бвохкшческоЗ оценкой . кормовт. белков од понимаем исследование некоторш,. фізико-хшичвс-кшь свойств протеинов под влиянием обработки добавок уксусной кислотой, а такав биохг-ьшчоскуп оценку скардогваецого крупному рогатому скоту рациона» содероавдго балковую добавку, обработанную уксусной кислотой» ■ .:

Еа основании излозенного были составлены следующие задачи; X) Определить (выбрать) тіш и лозу карбонилсодерда^его стабя-.лхэатора б едва корма от распада в добца.

V 2) Исследовать влияние уксусной кислоты на $ер:гектатквнне свойства белковой Добавка.

3) По уровня. бЕоишическлх показателей оценить азотккіі » угдеводко-диааднтга обыец у крупного рогатого скота, потреблявшего в.состава рациона б&дазвув добавку, обработанную уксусной х;: слотов. . ,

Ноекзнз .работа. Уксусную кислоту сироко їспользузот как кой-сервант корков (Тараяоз ы.Т., 1372). Впервые это вєієстео испытано в качестве,стабилизатора затрудвявдего, уаеныЕаш.его сротеодкз 'кормового баїка в рубцз крупного рогатого скота.

Впарене дав акадаэ. данаглакп" ^ерхеЕтатсшиз. сбоіістз о едко во Я "добавка, рубгового'ж\Дгодеаадьного сэдеряякого, крозі: крупкого рогатого скота врг.скармгаьании еку. ргцгоков, содерлаиік белки со сказанной деструюзаай пратешга в рубца.

- Предложен ыатод : расчета - оптглал-янх доз карбонм сэде цяадіїх -протекторов для уцёньаенвя даградгіта кормового протеина в рубце по содерзашз) свободных аминогрупп б коргле к количеству Карбонз-іа а протекторе. |

. ' Псактсческая значашсть. Проведеннна кссяедовагагя позволяет утверждать, что прегенеике уксусной югелоты в качэство стабилиза-

тора белка ■ карма от распада в рубце "оправданно. Она.сіі.^аех степень. деградація протеина на "закрывая" нрг.. этом І?;! свободных алмкогрупп в образцах ко^і-а. Потрєбленке^крупішіл рогатка; скотом і состава раіс:окз. белково;. добгьк;:, обработанной, уксусной кислотой, безвредно, улуч^аот обмен азотистых еєзєсть, увеличивает отлог.енге азота-у кивотнах., пэвшает удоіі молока у коров на 6% > без снижения к;: рлэстг. птока.. ,'

Анализ. кэменегп-я £ерментат;:Ено;1 акткваостн -к £ерментккгхбг— руюпг/л сэо-ств добавки под воздействием о5саботки ее уксусной кяс-'отой, а ?ак=-.е про т е эл ч ескк. протеазингіїбиругсїйх свойств: рубиосогэ дуоденального, содержимого, кроен бычков,. потребила-ыл в состава радлона бе-гкогуа добавку, обработанную кисдотої, показал, что существует достоверная^корреляционная.связь кеаду £ер-їлєнтаї;*.ЕКоЦ активность» крок;: к дуоденального содержимого.. 2то позволяет по ?ер.\:еятатпв.;^ п ^е^ентзкглбзруззщм показателям кров;:.судить о ¿ер^ентаташпа процессов в дуоденальном.

крупного рогатого скота, то есть обходиться- без слое-одгр"лровахякзотигх. ^

АтісаЗа^'-я сабо ти. 1£тер;:алы диссертация ідолозенії на к 43-еа каучно-ме?одлчі:чг_х конїареіа^-лх, ь:охсдых ученкс.к аспирантов Ь'.Па- (^"бр^й-ій, 1063, 1550);. на Всесоюзной.научно-арактгче-ско^ кэн^греЖ'-*.: модгдісі ученкх т. спзіс'-аластоа "цребле&ы прохз-водства з пар ¿раб от к;: молока"1(2лгаьа, на І"Рвсцувліжак-

ско^ научно:; кок^ерві^і^ "віотехкодогічії: дослідження і сгр--спєктїбі: розвитку".(Львов, на іїездукародноа.конферен-

цій "Еколотческпе основу ,ві:соко;і .продуктивности сельскохозяйственных ^воткьа" (Боровск, ІЬ£0). .

■ Публ:ікаі^:я. По дессертеїкїі опубликовано 5'работ.-.

ОЗъаг работы^. Іксаертяття кзлозена на 15Э страницах. :«а=аэ-сисвого текста е еддострвровгша ЗО таблгцгмс, в том "чгсле Не. срглагеюа г 3 pacyaxáa!. Работа сэсгоет кз: введг&гя. обзэрг . таратуры» осисаыЕЯ катерімлоо г катодов' Есследсваг-кС» огшсакпя г. * 00сужденЕЯ"асхучеиакх. данных», шзодрв, практических'г ..ГбЕахюгра^ва,'; вюшчаве.ей 2ûQ 'нагкеновайЕіі. ¿з'кеі 152 ка їзост^ан- -шос язис2х. 1 ■ ■ ■ : ' v ' ■ ' v

"З^І&ЗЕИШ И.іщозїка ік^ "

Ддя; гзучеквя ' pjt/янгя обработка белковых добавоккарбоіпасз- ■ : дерзйшцйе виьбствамї с делью ckssehzs ст&свне, хбст^укгх^ cpotsühs

::в;руСі:а,-Еа:осаозв.'Еоіска кэ-ряда .теаис bsílsctb . Сїзрі.іа^гег^д,. ■ ; ауравытдая . уксусная, срошіоновая кіслогк) бшга выбрана уксус

каслота.. -"¡у ■■;[_;■[." ■ ' • ■„ -,■ '

•. . г Есйіедзвангя сдвоились .согласно оЗхе2 • >

: СШІІ Hcscaráásír! у.;; ■>■

Объекты-Есслг^оганЕК

üOpOBtr.

Бнчяг^

■ : -Впахат.^чвсЕдэ ■ Азотного ! - Уіхевздно-

'г- обмена -.:".■. ликишого

■ .обмена--:--1

Г" Содергаов 2убЕЗ £ " * ■ дзгяаппзтсдерстзоЬ ■

-'. учт-ТГУ

I г____

-—і ■-'■■Бааавая дэбазжа ¡ .

- ' Пгаск -'.■ протектора кормового < балка.

I.

- .Зї'ор - ОЕТЯГ.іаЛЬНЇЙ '.

: дозы уксус.чой

-по кзлгчестзу. ■ - а".хног?у-л -. ■ ' . г карбоната

' • — ря сзлєїкх. " .

'• . ' вытязек добавок ' f — белковаэ ^ракспг:

ЦрогеалЕТК--.чєсн£8 ■. ■ - сваіїстза

Рецепти бєляока добавок біакі разработаны в лаборатории fa— зхологглі пг.1,ебарек:я ElZa. В состав белковой добавки И І вшсочпли: пол со.- н ЄЧ!Г/К "JBKli Е-рот (502), зерио ролса (30#), соевкЯ шрог (8Î), дроггг. CGÎÎ); белковой добарки 5 2 - подсодквчкккобыД шрот (442), зерно ралса (ЗОЙ), куку кз корї.*.оЕі:х бобов {20%), лглргн (63). Белковая добавка '3 состояла кз подсолиечкнкокого арота (49^). ■ со обо і*о орота (17?), кзрі.'.овш. дрогдаеіі (11$), ркбной кугл (9Î).

Б лабораторій: ^лзкологки пжеЕ£рек;:я ЕІ£а методом "ut jiitt." определена степень ргс^єплєкгл протькка добагок до и после обра- ■ боткл їх р&глхчшллх ка^бонг-лсадєрзаїХ'лії. еє^єствеке,

Дія с:;эккг; э^Аект;:вности стаС г-г/э аторов ксполь- ■

зозадз ;.:о ш;рованннЙ кг:&: кгетод с предел енгл содертглкяя свобод-«кк а'.2:когрусп в корг.їз по Меііеру. По содєрглмг^і протеина , в раіс:о-ке белковая добагка зані^.'.ала.в среднее 12%. Для изучена елхен7Л - •'ïxzzzzi-i7Я рад:эЕэв, соде-р:ла^их Селковуи добавку, обработанную у:;сгс:-:о2 кіїслотоК, ка oi~es esilscte у крупного рогатого скота в марте-г.ае ISSS ' г. крОЕегзкк кссвеасЕезяя на йлхнгчесяд здоровых го:::откю; чгрко-дестрсЗ породы в условиях фмЕодсгического двора ^ ЩИ.a. Ontп І сроьеаєн на коровах ка ї-З ^ес.лактацг.Е» по второю отелу, с удое;.! 2с-2І л/гут. иєтодом лгтлкского квадрата. Опстег 2 і: 3 - на бнчках I4-:.*.ss. возраста, гг.воіі .тассоїі сколо.ЗСО кг методом грулп.а периодов {тез. І).: Содераачяе ZZIIQZHUX стоі-товое,. хор-глокг.е двухразовое, cocr-ze из автопоилок. Itu б шиї нало-.екы Цкстула рубца по Басову, - у бк"Є-:ов - дояолнлт аіі но анастомозы з области іг-парсткой kkîikz по С-несекову. '

В состав основного рациона для коров включллх: травякуа рез-- ку, с^лоо кукгрузнк::, патоку;, для- бычков - силос, коі;б::кор:4.

Обработку дсбавкп укеускоді кислотой провэжлг» за сутки до скарь^пваняя,. гранулг-роепаке добавь осуществляли после обработка еэ кислотой. , •

.Таблица I

Схема опыта на яивотшсс:

г ¿олича- : ■ -Я' : ство : группы : голов в ; : группе :

Характеристика кормления

Расшепляе-

ыость протеина добавок, %

КОрОВЫ:

1

2

Бычки.

3

4 .

Бвгосн 6

7.

4 4

2 2

2 2

Опыт I

ОР + белковая добавка № I.

ОР + белковая добавка # I, обработанная уксусной кислотой

Опыт 2

ОР балковая добавка # I

0Р + белковая добавка Л I, обработанная уксусной кислотой

+ белковая добавка Л I, гралулз-

ОР

рованная с уксусной кислотой Опыт 3

ОР + белковая добавка В 2

ОР*-* белковая добавка ¡6 2, обработанная уксусной кислотой

63,6 45,0

63,6 45,0 58,0

60,5 43,4

ОР — основной рагргон.

г Продолаительзостъ каждого опыта 33-35 диеииз нкх21 день предварительыый период,. 7 дней - учетный, 5-7 дней физиологический» В конце каждого опытного периода у животных брали пробы рубцовдго ж дуоденального содержикого Ж кровь из яремной вены на ' четвертом часу поела начала кормления в■ немедленно раздавали по одному кшчшлитру, храяила в морозильной камере... . . •

В белковых добаздах ыы определяла: рН солевых ьытялек - со-твшщоыдтрически; белковые фракции по Ермакову, содержание ез^лно-групо * 1юдаф£Цгроваяным"и9тодом1Гейера, сухоа вэкество, золу, *яр, кдвтчаткзг. БЭЗ —- по общепринятым методикам

ойіьеіі У- нгйа:кл£к.'і' азот по Кьеяьдала.

В кидксіі часта руйцсгого х дуоденального содсргкмого после: ?;уіьтроЕгі;::я через четное слоя-ілардх определяла: рН - потенцко-ьіетрвческ;;, прэтеол::тичзскхе' к протеази кгкбирутаие своЙстеа согласно -"Методическим рекомендациям по определении протеолятгчес-ккх к проте аз ^кгпбзруюіїкх свойств кор;ла к биологических ¡еидкос-теіі" (Дубрэв::щ:, 1Э7?). Б дуоденальном содекгимсм определяли активность полезна методом Аксона 5 иода^акаціїх Черткова (1965), актіїЕность тр-пс::на - по Гглочк:ау і; Газдерову (IS70),' активность 'зсі:г/лтрі:пс;:на - методом Галочкіїка (1970). '

' В цельной крос;; определял?. содержание кєтокоеезс тел, ацетона J3-охс;;касл-ч;ю« кислотк по Е&хкзру,' концентрацію сахара - по Дэви су, кохяч є от бо о5щ;х л:;п;:дов - по кетолу Хуэрго, £ос£олішздов -по £сро*ору, ксііцеі-:трщі*.їо холєстеряка - по Ильку, со-

держанке шровкноградной -«слота (ПВК) - ї;ода£хц:'.роЕаннш кетодоа Срадаааа-я Хєугека, концентрація гемоглоЄ;;ка - Ьпектрофш«етрк-чгскіг, содержите общего азота'по Кьельдалз, аі^инкого - нянгадри-КОБЫГ4 і;етодо;л, протеазныв и протекназкниібхрукше свойства согласно ранее указанна: рекомендациям. ' .

В. сыворотке кроЕ^- определяли концентреггцо кэчеалнн с.ецетзи-моноокси&оы, активность аспартат- п алакккзлзкотранс^ераз (ЛСТ и AJ1T) - по кетодкке Уыбрайта в года^кацда ПасхикоЙ Т.е.,, ойпгЛ белок - спектро5отометр;:ческя а рефрактометрически, ^ракцзи белка - методом электрофореза.на букаге.

УчятквалЕ удой, ыодока-и ео время контрольных доек определяли міркость.-содер^анхе бєл;<а і: лактоза в молоке. .

Похучекнке данное с?£т::стическ: обработаны ш методу, oaz-сашкщу Асат:кшя B.C. (ICG5).

3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИИ

Исследования " ¿п у&ьоп во вабору така и ^оян кзрбоштл-содержащего соединения для уменьшения степад; |распадаемост» белка корма'' а рубпэ, крупного рогатого скота. Установлено, что об' работка корма различными карбонилоодержаапши веществами приводит г уггеньсецЕю количества свободных яшногрупл в балке (табл. 2).

Таблица 2

." Вшадне различныг карбоналсодергаашх соединений б дозе 5% . к шассе обрабатываемой добавки ва содержание свободных аминогрупп в I г протеина добавки (мг ^В^ групп), М '

Л ; Добавка :

в/п ; Обработка -г

• I Необработанная 15,9+3,4 23.4+1,3 17,3+0,5 2Фориальдегидаг 9,5+1,8х * 10,4+0,9х 10,9+0,5*

Евсхотами:

,3 ■ «уравьиноа ' 12,5+3,1 20,3+2,2 15,4+0,5х

- , 4; уксусной' .. 13,5+2,4 19.9+1,7 13,6+0,5*

5 црашововой ; 14,44р»6 21»2+0,9 14,4+0,5*

• 6 Граяузшоовавнак с ■

укйусноЛ кисеттоЛ 11,3+1,2

X — Р < 0,05 (по сравненгао с необработанной добавкой) .

Бее карбонидсодаржэдиэ соединения применяли в дозе Ь% к : г масса добакга. Наабоаав аффективное "закрытие" свободных аыано-

---- групп балка фэдиальдвтрм {<5%)» слабее всего - пропконовой

- хаслотоО. (11$}» КпсЕсгга близка по своей эффективности "закрытия" аминогрушх: иуравьашй ^взаимодействовала с 15^, уксусная с

■ ; ,17^,-чрошадш)вая с сюбодвнг аминогрупп.

■ ■".-: с По содержангю карбонада э кисдота в количеству свободных

' ^■.-; -аздшогруш! в добавках бала выбрана доза"уксусной кислоты. Она .. ' составила 2,25 г карбонила на 100 г корма или 7,40 г карбонила/

* 2 " ^ й 3

100 г сырого протеина добавки, что соответствует 5* уксусной кислоты к кассе обрабатываемой добавки;. •

' Под воздействием обработки добавок уксусной квслотойпроис-їодит увеличение содержания в hex небелкового азота, щелочераст-воримой, растворимой в спирте без экстракции,щелочью фракций V. (табл. 3). ■ '-'л.::*;, ./";■■'■■..'■■.

Л ; Таблица 3 ■

Содержание протеиновых:фракций белковых добавок до м после обработки к: уксусной, кислотой . ( С, ■ 4), М ¿/п.» %

" -Добавки ' l" , - ■ ■

Сраюш . : fi I :гиан7ли- •: Jí 2

: до : : обра- : • ботки г после : обра--■ ботки :рованная.: : с кис- : : :.лотой- : сотой : . 1 . после . обра- богхн

Содерастворалая I6,3¿3,8 I2,4+p,6 18,'б+р,1 25,3+;!,7 20,5+1,6х'

Целочерастворк- . • І-'" * V

мая 38,4+5,8 41,2±6,3х 39,7.±I,0^I6,5tI,0 23,1+1,0*

Спиртораство- -■" ■ ' Ч- '■■'.■. '-..■■'■ г .".::;:■■*■ ^ '■ .

ршше: ■" , "■"■'■■ .V/>.'/■.'.'■"

ей келочв»: - I3,Q+9,I II.ЗіІ.О* 8,4+0,1х I5,I¿0 4,3+0,9*

без зкетрак- - ' . . _v - ' ' ■■ ¿v - " - ■

".. нии ьелочыо ; 5,2+1,0 , 7,6±ї,Сг'8,9±І,СгІ0,8±І 19,7+3,0і

Альбуминов S,3xl,0 7,0+2,5 7,6+1,2 I0,8±I 5,I¿0,IX

Глобулинов 5,4+1,9: 5,4iI,0;5.I±I,2 : 7,9¿p,5 9,4±J.D

Неб&аковая ; 6,0+0,1 15,1+0,8X П.б^О,;2 13,6*0,4 I7,9¿3,6

-r x - P'< 0,05. 4; ■.;

Снягается количество; адъбуыявов. Ойкая суи.:а легкораадешгяе-мше и дегкорастворкша фракций: протеина в белковых добавках после обработки кх'уксусной:кислото2.уиень2ается. Сукш,хорос;о раст-Бориккх а дегкораоцепдяемых. фракций црртеияа добавок коррелирует со степенью расцепления протеина в рубца * - 0,503 (Р 0,05).

• -12 - ,

Аналогичное перераспределение содержания белковое, фракций наб~ ладшли для белковой добавки # I, гранулированной с уксусной кислотой, аа ясклвчакаем количества солераствориыоЯ фракции, содержание которой увеличивалось1 по сравнению о нативной добавкой.

Такт образом, обработка белковнх добавок уксусной кислотой намекала ш фгаикснхиыпческие свойства; уменьшилась растворимость протеина в сояевкхрастворах» cimrte, увеличилась в щелочи. Верс-яхво, «щйаяЕж ухсусноЛ. кислота es только "закрывает"сюбодные аминогруппы белков, ко взаимодействует с другими свободными £укк-вдоаакьнкид группами»-в тон числа аэотсодэраадих вехеств.

; Учитывая то, что уксусная кислота является денатурирующем' агентоивахвошеаап базков,мы предаолозилз» что взаимодействуя с балками, osa сказывает влияние ва ферментативную активность корга. Посге обработки белковых добавок кислотой наблэдала тенденцию х увеличение пепсияолнтичэской

к химотряпсанодигачеегюй активности и ж савяандо тртоезноаой активности добавок. Dpi: атом сниталосв азтавлрэваяпе пешиша, трипсина в ингкбированке хкио-трддедва сод авали вмтяшаш из белковых добавок,' обработанные уксусной каслатой Срис. I и 2). 5 случае гранулирования белковой : добавки: с кислотой изменения ферментативных свойств были более глубокий« Так, активирование тризехна нативной добавкой ie,3¿ +8Дкгфврваата сменилось его BmTi6Bpo£¿Ki5euI5,2¿4,4Mr, ингв-бдровани» ■запютуапсина увеличилось е 45,2+2,5 иг до 80,0+2,0 кг фермента Еа ХООг добавка. Дзэа иргмвкяеыой кислоты тагсае оказа-■лавлпянл« ва величину ферментативной активности добавок. С уве-дичешем дозвуксусной кислота .наблюдали тенденция к сниаекню трипеввовой активности добавки», достоверное уменьшение актавиро-гания трзшаша, нарастаете химотрипсиновой активности добавки и : тендэвшпо к дтт^аиуУ внгибнрованил кристаллического трипсина со-

кг фермента +

дентг

Ш ■ ' белковая добавка

Ш Я- Ш

1

I 2

I

I

• 3. \ 4. 5

1

6 7

рубодвое содержание

дуоденальное содержимое .-- .

кровь

группы1

. Обозначения: ■ V ,'.. : ;

СЭ - необработанная белковая добавка

'ЕЭ - белковая добавка, обработанная кислотой СЭ белковая добавка, травулзрованная с кислотой V" актвэарогги'.е ¿ерхента. , V1-.

*-" - кнтибированке фермента '.'. . >::-у'г

Ряс. I. Влияние солевой втатгцши'Ли белковой добавки а биологически кидкостеУ организма нз ахтлвносхк кристаллического тргяснна. •

ыг^ерыента

Г77

| щ ЇІН і тш

1 » 1 .

ш

12 • . 3 4 5

6: 7,

г. .■.;. ■

і

белковая ■

"—| ///і---дуоденальное

содержимое

кровь

• группы

Обозначения: 'V . . \

□ - ....

■:■■.."-, ^ Ї добавка» : обработанная кислотой ■'"■/'оВ^-^оОаияа^.грамулироваяяая с кислотой,

¿«с ■ 2~ Двнааика хяжлркпеинингаб^уицй. свойств белковой добавка содерідааого рубоа и дуоденуш, крови круп. ного рогатого скота»

левой витягхай і;з добавок, обработанных уксусной кислотой. Больше всего обїуя протеодитическуо активность добавок изменял формальдегид. Под его влиянием активность гвдролаз добавок уменьшалась ка 4ù%, под делствпегд уксусной кислоты - на 23?, пропиоао-еой.- на 21%.

Таюш образом, пріилекекке"уксусной кислоты и других карбо-нилсодердадах соединений лркводат к изменении ферментативных ' свойств белковоіі добавяк. В целом, ферментативная активность добавок снижается. ^ " " ,

Д;ша;л:ку измен о кия. g ар^ектатив:ш;{ свойств добавил, обработанной уксускоії кислотой, в пвдеварательно« тракта крупного рогатого скота изучал:: в опыте на коровах (опыт 1)и бычках (опыта 2 к зУ. Ксследовадая показала, что скармливание кпвотнші 'в ' составе радаояа белковой добавки, обработанной уксусной, клелотой приводит к CE^séïHiM тринслкЪлптической активности и увеличенио'-* хжютриясанолкткческой ахтіївности рубцового содеражмого крупного рогатого скота. Параллельно активирование кристаллического трзш— сана, рубцово^ кідкостьа етвотнкк контрольной группы сменяется'; его Енглб кровак і eu, причем налбояьой їікгабїіруюндай : э££екг окаэы-вает рубцозоэ' содергл^ое бычков опытных групп (рис.1). Кншбг-рованне кристаллического хіі^отр;:пс:іна рубцовш содера^ісл ¡азотних опытной группы ыеьзсб,' чем контрольной; в третьей-опыте разница достоверная (рпс,- 2). , 1 ■ •• ■ . " '

1!ы пришли к виводу,' что.тєїїдєнцкя ИзменеНЯЯ-^врї.'.еНТаТЗЕНЮ. свойств белковых добавок »'.'обработанных уксусной кесзотоЙ, углубляется при попаданні таких добазох в рубец в составе рациона. Это подтверждается еьхоклмл .значения:^ коэффициентов корре-ляірж активирования, тропика солєеой bhtjïskoR из балковой добавки к Рубцовым седераюаг,! ( г = -0,622 для контроля в t = 0,734

■ . . • - їв - .. . ■ ■ .* . ■■:. ДЛЯ ОПЫТНЫХ. ГруПП (Р < 0,05).

, - : Основная педь стабдлизают белков от распада в рубце долана осуществляться при условии сохранения ферментативной переварпыо-ста ворадвого балка в нижележащих отделах желудочно-кишечного тракта. .:;■■-■ "7:'.;-' V'

Оценка, активностя протеиааз в дуоденальном содержимой йнчков контрольной ж опытной групп показала» что все три віща активности (палева» трипсин» химотрипсин) на 77% выае в дуоденальном содер-дгаюи бычков, патребляшшс в составе рацгона белкбвуо добавку» обработанную уксусной кяслотоЗ. вероятно* это следствие сти^гули-рувдего действия ацетил-ионов (CH^COO-) на. секреции поджелудочного cosa к активность этих ферментов, а также. влияние поступления пидйрой чассн из вапераспододенных отделов желудочно-кишечного тракта. Так, между трипсиповоД активностьв рубдрвого в дуоденального садвржимогоживотныхустаяовдена отрицательная корреляционная связь т> -0.77^ <ковтрольная группа). Ііеклу хиьютрипснновой активностью рубдзвого содержимого и активностью хиыотрипсяна в дуодвнальшясодервпшы корреляционная связь невысока.

Таким образом, потребление рационов, . вклпчашшх- бедки, стабилизированные от распада в рубце уксусной кислотой,приводят к. укеяыпешт расаепяяеиостн протеина а изменению фериенгативша свойств рубдавого н дуоденального содержимого. Это изменение про-исходит,вероятио,как ка уровна действия уксусной кислоты ка активаторы в ингибиторы ферментов,, так и ва уровне субстрата - а иыенвоумгньвшния доступности для действия протеяназ кз-за "зал-рнтия" свободных^ашішїгріупп беякЬвіа добавок. ^ * ; . . ^

Перемвшениапреимуиественноро распада протеина кз рубца" в : веасвлеяашив отделы желудочно-кишечного тракта при потреблении в -состава радаона балковой добавка, обработанной уксусной кислотой.

ведет к уЕ^ичск;-^ п^отоолктачёскоя.пктивносгя дуоденального со-д£рга::.»го їі vLuiiiCüK^o его иігг::б::руклі:его влияния на кристаллические проте «из н. Это создает предпосылку для к «телексного раедеа-лєілія йулков доЗакм в этом отдудо пльесаритейьного тракта, а ' следовательно, к бслс-о полного, э^сктленого ксполі-зованвя белка корма ивачкмг.й.

Измэздпхо i3p:~üktfttkbhex сеоястб пжевоЯ кассы по мере про-дв;пс!ШЯ ее по :/.<иіудочко-іс:і£ечно:/у тракту лааїло отражение в показателях ^еригіїтатквноі: акті: eh ост к крони. Шіаз!.-л крови фэрару- ■ ется под непосредствен';^-! лакянке:.! пк^геарктельноЛ схсгеш С'лкег A.A., I3ü7). її рот з о л ;:т;:ч ь сіу; о £ер;-.:екты из. поджелудочной гелезы когут непос редет?с!l'io попадать в кровяное русло в нормальных ?113ко-лэгкчеехгл услор::ял {.-¿уійткєькч Г.С. , 1961), абоoptapoшться пз к:і^є«:;?.ка» г.р:; этом £ер:лант ко теряет своей акт::ькостл {¿¿cUtA*

і ксэь;; каeotuhx, потреЗлякиах добавку, обработанную, кхс- . лотоіі, каОл.^далі: у;,:«кь£Єлхе тр::пс«нод::ткческоіі активности, (разница достозйрная в перге:.: озьгте) :: узеллченде химотр;:псднолхглчбской (разница достокеркс-ч ь третьей опіггє), сі&хается кодлчзство кнгк-батороз трипсина ;: х;г/.отрї:псина. ІІедсу тр;:пс>шалиткчоскоа актив. кость» дуоденаського с:?дбргдмсго ц ксовл установлена керседяцдон-: нг=я сеязь 0,£43 i? <0,с5), ноядт:ічє ской - е» 0,ьш

(? < 0,01). Де.істБге дуод^на^ькатэ ссдеоьаного к кровя ка кргстал-лическхл їргпсля спяаанч корреляцконіїсії сгязьа г =0,500 (р<0,01).

Б дело:.;, катлчеетЕЭ якгпйулоров тріїлегна а хяхотрввг&а в. ерганлзке блвэтккх ог.иткой группы ніжв, чом а контрольной, что слуяит хорослд доводом ь пользу пр:імецеяшї в рационе крупного ро- ' гатого скота белковых доЗазок, обра<3от£лншс*уксускоЗ кислотой. То есть в оргйм::з?/.0 животных опытной ґрущш цротеолдз в рубце- йал уменьшен, а $ерментатз;а;юе рас^еяленке белка корг/д протеаназама в целом протекало более благоприятно.

' ' ' . ' - 18

'Это.назло отраженна в показателях, обмена азотистих веществ б ■крова крупного рогатого скота (табл. 4).

.' " ■ • ' '■'' '■Таблица 4 1 Показатели азотистого обмена крова крупного рогатого скота

■ ' ' ' . ~ . ." ■ ■ Готшш

• Показатели : абсолит- : 2 : 3 : : % к :абсоопт~: ■ 24к к ; ? к >

: нне : конт- ные . : конт- ■:■конт-

: единицы : рольной: еданида : рольной : рольной

• : группе ї : группе :.группе

Азот, мг %і

обтай , -".белковый , акинный, ¡¿Л/л ■ ючаваны Гетоглобш, г/л ' Общий белок ' Активность ■

■■ЛІТ' . АСТ

2399+175 2364+165 1,97+0,35 3,60+0,13 . 70,8+1,8 .95,3+3,2

0,133+0,021 0,132+0,012

114,1і II4.4і 130,5 88,4х 120,0? 104,3

105,3 125,8х

2463+135

24ІЄ+І35

1,65+0,08

4,Е6+0,15

93,0+4,0

64,1+3,3

0,110+0,02 0,150+0,02

101,1 102,0 112,1 67,5х 126,0? 105,0"

109 Д 106,7

ЮІ.5, 102,0 117,0 64,8х 124,7х 112,3х

154,5х

ез,з

X - Р < 0,05. 1

СкарйОїяваляе белковой добавке, обработанной уксусной касло- . то2 в составе рагаонов зяютншд визвало увеличение концентрация обіего и белкового азота, сниеєішє концентрации ыочекгнн, увеличение тазтзаностг§ер«енгов переатанироваиия.

Активность. £єрМЄНТ03 перетшнировакЕЯ ПО отношєшз) Б обсе- . киичестЕу ; віанонислот в сыворотке крови (аманный азот) -■■ ■'— х 10, так нязнвяемай екзняый калеке' вше укнзот- *

¿уаиїтА азот

вых. штрейяявпжх:обработанную добавку (табл. 5). Поступление в органгзм гивотного. более полноценного набора алишки слот 'ведет г увеличена) индекса,"при этом на дола афінного азота приходится меньшая активность ферментов переаюкировангя.'

-19- ■

■ 1 • " * ■ Таблвда 5*

-і Биохииьчсскке индексы показателей крови ,

■ • крупного рогатого скота ■ - . . . *

Индекс«- ■ _ ' Группа жявотнід, _____

: I : 2 : . 3 : 4 : 5

Азотный / І.И 1,20 1,26 1,23 1,32

Еелковый 1,03 О,Св 0,95 0,87 0.91

Глобулкковай 1,04 : 1,29 1,13 1,05 1,28

Лминннй 1,34 1,41 1,58 1,84 1,60

Липіідша 0,56 0,47 0,85 0,90 0,97

Суїдаа индексов 5,03 5,43 5,77 . 5,94 ■ . 6,08

Средний индекс 1,02 1,09 1,15 1,19 1,22

Содержание общего белка сыворотка крови и концентрация гемоглобина крова у всех подопытных гиЕотнцх виге, чем у животных конт- . роль но ¡1 группы (табл.1 4); Достоверного кзчекеыкя альбумаеовкгло-ОулкнэБой фракций балка у яивотньа, потреблявших кормовые белки, стабна;зкрозаюше уксусной кислотой, мы не наблюдали. Отношение ельсЗугл'.ни/глобулины, так называет^ белковні индекс был несколько нг--=;е у подопытных иівотккх. йо . сравнена» с контрольными Стаблч ■ 5). Но наряду с. его уменьшением каблддалп угелглеяие содержания белкового азота, общего белка,.ємнішого азота (табл. 4), аькнно-го шдекса (табл. 5). Такім образом, у зевотных опытных групп не ' прокзолло сдвига белкового ойкева в худшул сторону, азотистый обг<:ен у шіхпротекал полноценное, эффективнее использовалась азо-ткстке Божества в коз-уточном превра^енаи в тканях зевотных, о чем .свздетельствуют более /высокие значения азотного кадекса.у. крупного рогатого скота, потреблявшего обработанную добавку (габд. 5).

■ Следовательно, і;з\;енвнге питательных свойств К0р:-юе0г0 белка - некоторое кзмзнгкае перераспределения протеиновых фраккгЗ, ферментаті:веой активности под влиянием обработка добавок уксусной

■ - 20 -

кислотой, отразилось на показателях азотного обмена крупного рогатого, скота, .потреблявшего обработаннув добавку и привело к . . сдвигу азотного обмена в лучшую■сторону. Это нашло отражение в ■показателях использования азота корма крупным рогатым скотом (табл. 6). • /

■-;/.*У, Таблица 6

. Коэффициент использования^ азота корма животными ' ■. ■ с учетои потребленной энергии (использованы данные лаборатории физиологии пищеварения

•- . шш&у

Показатели'' * ' Группы ,

І.'Ї 2 і 3 г. 4 : 5:6 : 7

Использование.

азота, г 97.5 112,7 14,3 - 13,3 14,2 14,0

Обменная энер- ■

гая, Щк 152,4 154,4 57,3 57,3 . 63,0 61,7 : 53,9

Коэффициент . 0,64 0,73 0,25 - 0,29 • 0,23 0,26

. Коэффициент использования азота корма на 14$ выше у подопытных.коров, на- І&% у бычков, получавших гранулированную с кислотой добавку н на 13% выше в третьем опыте у бычков опытной группы по сравнении с контрольной. С шлоком у коров выделилось примерно одинаковое количество азота: 110,2 г в контроле против П2,5 г .в ошпе*. Однако, на опытном рационе весь белок шдока был обеспечен протейной рациона в баланс азота у животных был нулевым. В контроле-ке для синтеза значительной части молочного белка животные бшш вннувдена расходовать резервы тела и баланс азота у них был отрицательным.

:;Т,живзтныг'опытной і*рушін был вше глобулиновыН коэффициент, тесно связанный с углеводно-липидным обменом.. Потребление в составе рациона белков; стабилизированных уксусной кислотой, право-" дат ж интенафікацип углеводно-липздного обмена (табл. 7).

, , Таблица 7

... Показатели углеводно-липидного обмена "крова -

крупного рогатого скота"(М +

Показатели --—----——!---:—-

: I : 2 : 3 ; 4 : 5 : 6:7

55+1 35+3

Б кропи кивотинх опытной группы стжается концентрация сахара, увеличивается содержание ПВК, нарастает сумма кетоновых тел, в том Числа ацетона и ю'.слоты, снижается содер-

эанпе обакх л^пвдоз г. фэсфолкалдов крови. То есть организм этсх животных усиленно расходует энергоемкие1 вещества.''Липздный индекс у бычков, потреблявших белкэвуз добавку, гранул1!рова1Шуи с"уксусной кислотой Б^е, чои у бычков контрольно!: группы и бычков, потреблявших россыпную добавку, обработанную кислотой. Ляпндны& индекс у коров'опытной группы нкко, че;д в контрольной, КИрСЕОЙ обман у нах протекал кексе полноценно, что вероятно, сеяззно с уси-* леннкм расходом л к пидов прз дополнительном синтезе молока. Удой у., коров опытной группы был на 6% выге, чем в контрольной, а ашрностъ молока осталась на одном уровне:.3^6$+р,05.и 3,66+0,02. *

Ькохж-лчзекая оценка'кордового белка - слонихи, комплексная -показатель. Он включает в себя характеристику биохимических' свойств протеина н бнологическу» ценность протеина. Особенно ваз-

Кетоновце тела, .■■■... г/л х Ю~3

сулиа 47+2 52+1 - 36+6 59+1 59+3 55+1

ацетон 20+2 20+2 20+4 23*2* 31+2* - 23±2

й-окс№аслякая „

кяслота 27+1 32+Iх 20+8 30+9. 29+8 - 32+4

- С проБинограл чая

кислота, Ш/л Л20,4 Л45.4 ,2 Л22,7, 133,5„

. -± 4,6 ¿31,В ±3,7 ¿-3,4*4 2,0х

, х - Г < 0,05.

нн парше, когда оценивают белки, подвергшиеся воздействии, например, карбонилсодержащих веществ с целью снижения деструкции протеина в рубце. Так, белки.добавки, обработанной уксусной кислотой, имеют меньшее количество легкорастворишк в легкораслепляемых фракций протеина, изменяется их растворимость в спирте и щелоча, происходит увеличение трипсинолитической и хішотрипспно— литичесжой активности добавок. Биологическую ценность протеина, входящего в рацион, часто определяют как фракцию усвоенного организмом азота, при этом учитывают доступность и набор поступаэхях.'' ашшокислотидр. {¿д^ит1976). Анализируя данные нашего опыта, ми пржли в выводу, что. биологическая ценность белков, стабилизированных уксусной кислотой выше, чем у натквных. Скаріглиза-яіе крупному рогатому скоту белков,."защищенных" от распада в рубце, , привело к сдвигу обмена азотистых веществ в лучшу» сторону, 7 аз-вотенх полноценнее, эффективнее использовались метаболиты в «е^у- ' точном обмена веществ, о чем свидетельствует более высокое значение среднего биохиаачвского, индекса у подопытных глЕотнш., у них вша коэффициент использования азота со сравнении с тавотнця: контрольной группы.

. Таким образом, биохимическая оценка кормовых белков, стабилизированных уксусной кислотой отлхчалась от биохимической характеристики нативкых белков. Введение в состав рациона белковых добавок, обработанных уксусной кислотой, вызвало увеличение удоя у коров в отложение азота у бычков. Изменение ферментативных свойств "защищенного ** ■с помощью уксусной кислоты кормового арэтейпа привадо к наиболее полному, использованию его оргаихзшм животных, аффективному усвоению азота.

; -■■ ~ ' і. В ІЇ 1> 0 д и - , . • .

1. Обработке оелкоыл доышок' уксусное юіслотоіі вызывает • ■ ууенькекке количества в ні'л свободню. а^кногруші в сгашенае со-^

' дерлаї^ія дегкэ;йсисЕляе>Аю. і: легкорастъор/шх <;ракш;іі лроіеака.

2. Ср»^еіієш-е :юрйошасздс'рлакіо; веществ вкачества стабилизаторов- белка"коріла от распада ь рубце велет к сніжекию обшей' ■сротєолу.ткческзн активності: обрабатываешь, белковых,добавок. Наиболее з^;екті:вно Сна 4<£) сн^-ает активность гедролаэ корма формальдегид. '■ , . ;; ^ ' * .-■. 3. Сувел::чен;:еі,*. дози уксусной кислоты, пракеняшон для.об-: работкя Ослковіа. дооаьок, вро;;сходкт у^еій»-снпе актілмровакия тркпскна к'сні^-ькііє ііилстр^кс^да'солевыкк витЯЕка-мк.кз добавок. ■ ■- • '■ .■

Ч. Скарі.-л;і£ан;:е ху.уотюлі ь составе рас:она' б вікової: добавки, ■ обработало* уксусное к;: слотом, приводит к сіісгекіїа.тркпси-кодктдческо*; і: г.глютрлпслнолр.тическо;: активности руб-

цового: возрастание депскно-, т;;каскі.о- и іхкотріх-

скнолїткчєско- активно с 17. дуоденального содержимого крупного рогатого-скота..' '

Ь».А:і&л::з ¿ер^сыгПтвнъЬ: свойств кроьг. иіеотніл, потребляя-' ехх е составе рад,, о на осліх, стабилизированные уксусное кислото*, показал, что в к*. уменьшается об-ее количество кнгхй;:-

торов протекназ. ¡..ег,ду грипсанолиткческо^ активності^: дуоденального содєіі-.ді.ого г к,, о в:: установлена корреляционная связь Хш 0,^43 (Р < 0,05), ¿.^.отр.;пс.-:іо.тл;ті:ческой - О.ЬиЬ (Р< 0,35). Іе^стсГ.е дуоденального содержимого к пера^ерическо- крони • на кристаллически трипсин связаны корреляционно- связью і = 0.МЭ 1Р < 0.05). ■ ■ '

б.-Потребденхе хрушш* рогатый скотом в составе рациона ..

; - 24 - .

бедкооой добавки» обработанной уксусной.кислотой,, приводит к улучшению у ншс" обмена.азотясткх- ве&еста;этом уселич/вается коэффициент использования азота корма крупным-рогата скотом,

7. У бычков*,потреблявших:в составе рациона белки,, "эагрхек— ше" ОТ распада в рубце;уксусной:кд<уготоЙ, лий:їднії£ гндакс на . 4 ,5? и на 20Ї вше,.. чем у:живот шсс - контрольной гру шш во 2-м к 3-й опыта соответственно.-У подопытных:коров ллшщнай пнде-ж на І5Їнахе, что видаю связано с усаленным расходом лшшіоз на до-поишительнкЗ синтез молока. Увеличение удоя у, подоештнкх . коров' составило.6£' при стабальной'гсрностйіііолака..

8» Гранулированае белковой^добавки с^ уксусной кйслсто^.ведет■ к уменьшению деградируемости протеина добавка в;рубце, а ехзрзда-вание-ее дзачкым в.составе равдона улучшает, азотный г.- л^гхный обмен. ' ^ ;.■

I. ¿яя расчета опт»іальнах,доз-варбоніиісодерга^7х.'с7аЗ:^иза-торов' предлагаем недольэовать кэтод опредздекгл содержания свободных. аг^ногрупп.в белках. корьа и количество карбокг-ла в зтіх с0єдийєн2ях. • '

Зі.С'цальа снхяеная стедэкп дсструмск-протелка-корХ'з'в руб- . це жвачніа, :8:Тахге сохранности коряа предлагйем исаользтвать ук- . сускув,киатогу в дозе' 2,3 г/100 г протз^ка корлта.

Зі. Проведенные исследования свидетельствунт о тесной сьяэ;; фе;1:ентатдгноЛ акгдвзостг.дуоденального:содерхіз.іого пг^гп^ер^че-ской кровг-бычков. Патученные результата ^огут быть Есгсльзэвэкы. в каучно-пссдедоЕат альской ^ работе.

. 4. СкарьиввЫ!-а:2лвотшсл-г;акудированкэ2 с уксусной- :с:слэ- -той добаак:.полезно зхя органгзї.'^'жівоткого.Хредлагазм-пспгль-

зо геть грану, іирсжкяе белкопоЯ добавка с уксусной кислотой, что . поыааег э?.£екткькость использования азота корма крушіш рогатій скотом.

Список работ,.опуйлу-хованлых по те«е диссертант..

1. Таранов JJ.T., Хаалкнская Н.У., Кзрхгн Р.В. Азотный обхбН у крупкого рогатого скота upii потреблении, балков разной расиеп^я-ехостл // Докл. ЗЛСЗШГЛ. - 1920. -5 7. - С. 42-46.

2. Хавлянская Н.М., Ларкгя С.Б. Показателя углеводного я ля-■ шідного обмена крупного рогатого скота прй потребления белков с

н::зкоії расэд ш: як.юсть» в рубце ff) іїєстеііх с.-х. науки. - I9S0. -JJ 10. - С. I44-I4G.

3. 1авл;шс:-:ея Н.;.;.-Протгаэные і: протвазянггби^увдів свойства белковю. добаглк, обработгикш. уксусной кгслотоЙ // Тез. дек-ладов Всесоюзної кэк£. ученых к сдецкалкстов "Проблемы производства к пзрзрабэткк-колона", Егігава, 1590, - С. 20-23.

4. Таранов "М.. .£авл1кська íiJj. Протеї казні І протеїііазін-ГІбу^чІ іласт".іностІ 'крові великої рогатої худоба ерд спозшва^нХ > ргціснів, По кістять білкя, оброблені оцтовоа кислото» // Тез. -дохл. 1 ?сспуб.-;;;х2Нс::ол кеучаой "Ноїєхнологічні дослідгг-

. кия І перспектив:-, їх розетку", Дьйов, I9S0. - С. 102-103.

5. Xав-і:;нская К,.';. Брзтехназные к протеазангкблруасие свойства рубцового е дуоденального содержащего крупного рогатого " скота прі потреблен;;;: бглкоїшх дебавок, обработанных уксусной к2суі0т0й // Тез. докл. кон^." "Ь^огячесішз основы здсокэз продуктивности сельскохозяйственных йлеотйми", Боровск, ііїо. -

' С. 33-34.

Подаиеано к. печати 25.12.199О г. Заказ 632.

Тцраж 100 из. Объем 1,1 уч.-иэц. л.

ПМП ВИЖа