Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

БЕЛКОВО-УГЛЕВОДНЫЙ ОБМЕН В ОНТОГЕНЕЗЕ РАЗЛИЧНЫХ ПО СКОРОСПЕЛОСТИ СОРТОВ ГОРОХА

ВАК РФ 03.00.12, Физиология и биохимия растений

Автореферат диссертации по теме "БЕЛКОВО-УГЛЕВОДНЫЙ ОБМЕН В ОНТОГЕНЕЗЕ РАЗЛИЧНЫХ ПО СКОРОСПЕЛОСТИ СОРТОВ ГОРОХА"



На правах рукописи

ЯРОВАТАЯ МАРИНА АНАТОЛЬЕВНА

М-Щи*/'

БЕЛКОВО-УГЛЕВОДНЫЙ ОБМЕН В ОНТОГЕНЕЗЕ РАЗЛИЧНЫХ ПО СКОРОСПЕЛОСТИ СОРТОВ ГОРОХА

03.00.12.— физиология и биохимия растений

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Воронеж-2004

Работа выполнена в С^шовском государствешюм университете

Научный руководитель: доктор бнолотческих наук, профессор

Павловская Нншль Ефимовна

Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор

Е принце в Александр Трофимович; кандидат биологических наук Соколенко Галина Григорьевна

Ведущая оргаштцня; Институт биохимической физики

им. H.M Эмануэля РАН

' Защита диссертации состоится 2004 г.

в «iV^m часов на заседании диссертационного совета Д212.038.02. Воронежского государственного университета по адресу: 394006 Воронеж, Университетская площадь, 1.

С диссертацией можно ознакомиться в научной библиотеке Воронежскою ГО сударственнош университета.

Автореферат разослан « 40 » г.

Ученый секретарь диссертационного совета

Брехова JI.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальности ттрг^и^т. Технологические достоинства семян и зерна закладываются при era созревании, поэтому стадии целости позволяют выделить компонеггш, формирующие качественный состав м физиологическую ценность сельскохозяйственной продукции. Основными классами запасных оещеетв зернобобовых культур и, в частности, гороха, являются белки и полисахариды.

Протеин зернобобовых является хорошим источником незаменимых аминокислот. Так, по содержанию лизина в протеинах (5,5...'7,5%) зернобобовые ирирэвшшаюгея к кормам животного происхождения.

Бобовые культуры особенно богаты углеводами, до 60%. в основном, крахмалом. Углеводы представляют источник энергии, эквивалентный по калорийности углеводам зерновых культур.

Однако специалистам в области питания, пищевой промышленности и селекции растений нужно быть готовыми к тому, что продукты, получаемые из бобовых, могут содержать те или иные токсичные компоненты: лектины, инги-бигоры пиролаз, входящие в состав запасных белков, и трисахариды — рафи-ноэу, вербаскозу и стахиозу, с нижа кщне толевую ценность продуктов.

Наличие и соотношение запасных компонентов семян зависят от генотипа it формируются в конкретных условиях среды. Основным фактором при этом является гснотип, который определяет длину' вегетационного периода (или скороспелость), урожайность it устойчивость к биотическим и абиотическим факторам.

Проблема скороспелости связала, во-первых, с формированием качества к, во-вторых, с получением ранннх урожаев. Однако проблеме скороспелости несправедливо уделяется мало внимания, что в какой-то степени нам удалось восполнить.

Северные районы, Сибирь и регионы с частыми летними засухами остро нуждаются в раннеспелых сортах. Трудность создания раннеспелых сортов заключается в требовании производства формировать за короткий срок урожай семян на уровне среднеспелых и не уступающих им по качеству.

Щдыи настоящею исследования явилось исследование белково->глсводного комплекса гороха группы сортов, различающиеся длиной вегета-тшонного периода в онтогенезе и формирующихся семенах.*

В Т17Д<>И НССПППНЯИЩ! ИХППИЯПГ

1. Изучить юменчивость содержания сырого протеина и фракционного состава запасных белков в процессе созревания семян гороха.

'¿СХА

2. Исследовать ншратредукгаэную активность в листьях и корнях /ороха в онтогенезе и установить ее связь с накоплением запасных Сел кое в семенах.

3. Изучить активность иншбнторок протеиназ и лсктинов в процессе развития семян гороха,

4. Ifcследовать углеводный обмен в различных органах гороха в онтогенезе.

* 5. Выявить динамику накоапення крахмала и амилозы в семенах гороха.

6. Установить соотношение за нас них форм углеводов и белков в семенах различных по скороспелости сортов гороха.

Ичучняч ипшпнп. Впервые щучена взаимосвязь белкового и углеводного обмена в семенах гороха различных но скороспелости сортов в онтогенезе. Работа QHoctrr вклад в развитие представлений о зависимости формирования качества семян от длины ве1етаннонного периода растений и условий выращивания,

Пряктччрпгпя TifHHfx-Ti. рдГ^ттм Выявленные закономерности формирования белкоао-утеподного комплекса в семенах различных по скороспелости сортов i ороха могут Сыть положены в основу днффе pernota шм сырья в зависимости от по тре Снос "г ей производства.

Atipffhmm ря<У>тм Результаты исследований 1Ю теме диссертационной работы докладывались и обсуждались на Ш-ей Межцународной научной конференции «Регуляши роста, развития и продуктивности растений» (Минск, ■ 2003); V съеие ОФР «Фганологня растений — основа фитобиш ехнолопш» (Пенза, 2003); на XII Межлуна род! юч симпозиуме «Нетрадиционное растениеводство. Экнолопм. Экология и здоровье» (Лтушта, 2003); научной конференции, посвященной памяти Д.А. Земля нухнна (Воронеж, 2003, 2004); 68-Й Межвузовской научной конференции (Курс к, 2003); на научной конференции «Икдад земляков-орловцев в развитие и становление российской шуки, культуры и образования: «Хируртческие науки в России: история, современность и перспективы, к 120-летию научной деятельности ПИ. Дьяконова» (Орел, 2003), научной конференции ас пиратов и студентов «Биохимические основы современной агрономии» (Орел, 2004), научной конференции «Фшнолошче-

ские аспекты продуктивности растений» (Орел, март 2004). *

rivfhmfniTMH рдульт.тгпп »опепоягший. По материалам диссертации опубликовано: 8 статей, 3 тезиса, 1 статья находится в печати.

Структура и ofltJtM тигггрттпш Дне се ртациокная работа состоит го введения, обзора л»ггературы, экснер1Еменгальных глав, заключения, выводов,

библиографического списка и приложения. Рабата изложена на 140 страницах машинописного текста, вклкнает 24 таблицы и 9 рисунков. Список литературы состоит m 180 наименований работ, из которых 60 - зарубежные акторы.

Нп tiriiHTV яынгч^ятгя п le лук» н не поюжения;

1. Качество запасных веществ семян гороха формируется в процессе их рази im 1я и зависит от генотипа, длины вегетационного периода и погодных условий гола выращивания.

2. Содержание сырого протеина, фракционный состав и активность анти-п Л1 [мс i парных компонентов (ингибиторов протеиназ и лектинов) зависят от степени зрелости и скороспелости генотипа гороха.

3. Различие в накоплении запасных форм углеводов в зрелых семенах гороха ззклкпастся о скорости использования отдельных Сахаров в период созревания семян в зависимости or длины вегетационного периода.

4. Раннеспелые сорта гороха накапливают в семенах больше крахмала, а iiovme спелые - белка. Белок раннеспелых сортов гороха но фракционному составу и низкому содержанию токсичных компонентов имеет большую био-лотческую ценность, чем средне- и позднеспелые сорта.

OítwwT и цртптн iiffwififiiHm

Исследованы три группы сортов гороха, различающиеся длиной вегета-1Ш01Ш0ГО периода, подготовленные и переданные к,с.-х.н. старшим научным сотрудником лаборатории селекции гороха, фасоли и чечевицы ГНУ ГНЦ ВИИШЕК китенок T.C.I Раннеспелые сорта с длиной вегетационного периода 60-70 дней (Шустрик, Сипела, Д-8, Л-1069); среднеспелые сорта с длиной веге-ташюшюго периода 70-80 дней (0>лус, Орловчанин, Kalle, Алла); позднеспелые copra, согревающие за S0 и более дней (JI-1658, Немчиновский 817, Электрон, Тройка). Кроме этих сортов исследовали овощной горох из коллекции ВИР; NZ-301, Paramaccnt и кормовой горох: ОмскнЙ-8, Орловчанин-2, Штамбовый Мальцева, Штамбовый 603, Filby, Wavoi, Partt-5, Atiroy.

Экспериментальная работа проводилась ita базе кафедры фармакологии и биохимии ОГУ и лаборатории биохимии ГНУ ГНЦ ВНИИЗБК, материал пира не it на опытном поле того же института (учетная площадь делянки 10 м1). Средняя проба листьев, стеблей и генеративных органов составлялась из 10 случайно выбранных растений гороха, которые отбирали на протяжении всего периода развития. Повторность трехкратная.

Содержание сырого протеина определялось по Кьельдалю, содержание белка по Лоури, определение i с маптпопшнрукщей активности (по Апексидэе и др., 1933), активность ингибиторов протеиназ — (по Мельниковой, 1982 и Ьснхен, 1983), идентификацию сортов гороха гфоводили на пластинах га иоли-акриламндного геля в ЭФ-камере фирмы «Хеликон» методом Кона рева и др.

(2000). Нитратредуктазную активность - по Плешкову (1985). Общее количество моно и диса.харидов определяли по (Ермакову, 1987), выделение к определение крахмала и амилозы - но Рихтеру и др. (1975).

Стптнстнческую olrpnfjfTTKy ,'п^цх проводили по Доспехову (1979).Наименьшую существенную раз;ищу (HCPo.os) рассчитывали дтя 5% уровня аичшости на основании дисперсионного анализа:

HCPb,«H(i.oixSti,

пе t для 5% уровня значимости брали ш соответствующей стандартной таблицы Критериев Стыодекга, а среднюю ошибку разницы S<1 с предварительным расчетом обобщенной ошибки среднею Sx - посредством вычисления комио-ненгы дисперсионного анализа - остаточной дисперсии (о1™).

Математические расчеты производили посредством ПЭВМ и ЭВМ МК-52 с использованием соответствующих стандартных программ {статистические параметры, критерий Стыодеша - достоверность различий, элементы дисперсионного анализа для НСР и т.д.) (Соколов, 1987).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

ИЗМЕНЧИВОСТЬ СОДЕРЖАНИЯ СЫРОГО ПРОТЕИНА И ЗАПАСНЫХ БЕЛКОВ В ПРОЦЕССЕ СОЗРЕВАНИЯ СЕМЯН ГОРОХА

Химический состав зрелого семени определяется, прежде всего, запасными веществами, которые в зависимости от вида семян содержатся главным образом в эндосперме или семядолях зародыша. Содержание белка в семенах бобовых, по сравнению со всеми друшми источниками растительного происхождения, очень велико и составляет от 20 до 40%.

Наши данные показывают (табл. 1), что в процессе созревания семян гороха содержание сырого протеина снижается от фазы молочной спелости к фази полной спелости у всех исследованных сортов. Содержание сырою протеши у раннеспелых сортов составляет 24,24...25,64%, у среднеспелых -22,26..,26,86% и у позднеспелых - 24,50...28,79%. Такая закономерность наблюдается и во все последующие фазы развития. В семенах полной спелости раннеспелых сортов гороха содержание «сырою белка» составляет 21,70...22,92%, у среднеспелых - 21,00...26,34%, у ноашеслелых -21,00...27,91%. Самым высоким содержанием просешщ отмечен сорт Тройка, у которого эта величина равна приблизительно 28,00%, а содержание протеина 21,00% отмечено у всех трех групп гороха. Таким образом, низкое содержание сырого протеина может наблюдаться в семенах гороха с различной .длиной вегетационного периода, но его высокое содержание свойственно, в основном, иогтнсспелым сортам и среднеспелому сорту гороха - Kalle.

Исследование полиморфизма запасных белков методом электрофореза в пол!икр!намидном геле показало, что количество субьедюшцна электрофо-реграммах не зависит ни от скороспелости, ни от морфотша гороха. Так, у раннеспелых сортов гороха число субъединнц — от 21 до 25, среднеспелых и гкганеспслых — от 17 до 27. Однако имеются генотипы с ограниченным числом субьеднниц. Так, у формы \Vavai — 9 субьеднниц, а у Штамбового 603 -всего 6. Различия между различными сортами гороха заключаются только в скорости синтеза белков и связаны с генотнпическнми особенностями.

Таблица I

Содержание сырого протеина в семенах различных но скороспелости сортов гороха в процессе созревания, (%)

Л п/п Сорт Длина вегетационного периода, дни Молочная спелость Восковая спелость Полная спелость

t Шустрик 60-70 24,24 23,71 22,92

2 Д-8 25,38 22,14 22,84

3 Орпсла 25,64 23,54 21,70

4 Л-1069 24,94 24,24 22,05

НСРы, 1,2 V 1,1

5 Орлов чанин 70-80 23,19 21,88 21,00

6 Орлус 24,06 23,01 21,26

7 Kalle 26,86 26,69 26,34

8 Алла 22,26 22,03 21,61

НСРы» 1J и А/

9 Л-1658 более 80 24,50 22,05 21,00

10 Электрон 26^4 26,03 2538

11 Нем ч и новски Й 817 26,78 26,69 26,51

12 Тройка 28,79 28,64 27,91

НСРШ 1,3 и

фракционный состав бе л ко» семян в 01гг01биезе

Питательную ценность семян определяет не стать ко содержат« белков, сколько соотношение фрак!шй к незаменимых аминокислот. Белки семян зернобобовых культур многокомпонентны и лрн экстрагироаатш распределяется по следующим фракциям: соло-, сапе- и щелочерзстворимые. Следова-те л ы ю, выявление i с нет нч ее к их источников, способных тчекнть соотношение белковых фракций в сторону увеличения наиболее ценных по аминокислотному составу, является одной га основных задач селекции но сопанию вы* с ококачест венных сор too.

Белки семян гороха сосюяг ш водо-солерэстворимой (76...83%), ще-лоч ера с творим ой (8...10%) и остальных фракций. Наибольшее количество незаменим ijx аминокислот сосредоточено и водо-солерастворимой фракюш, включающей альбумины и глобулины. Как покатано нашими не следованиями, отложе1ше запасных белков и семенах троха, различающихся по скороспелости, происходит о разное время и с различной скоростью (табл. 2).

Установлено, «по раннеспелые сорта гороха уже к фазе восковой спелости формируюг альбуминовую фракцию, которая по сравнению с более по мним и сортами, имеет меньше белков. У средне- и позднеспелых сортов гороха содержание белков в водорастворимой фракщш практически одинаково. Одна ко, глобулиновая фракция у раннеспелых сортов гороха по сравнению с друпеми самая значительная и меньше всего таких белков - у по юнее пел их сортов. Птютелкиовая фракция у различных сортов различна, в среднем - наивысшая у позднеспелых форм.

Огдсльиые сорта по питательной ценности, связанной с водо-солераетворимой фракцией, можно выделить m всех трех jpyiui. Так, раннеспелая форма юроха Орнела содержит 88,5% хорошо перс варимого белка высокой биологической ценности м только 11,5% - пклелииовой фракции. Среди среднеспелых сортов у гороха copra Орловчанин - 82,4% - водо-солерастворимых белков к 17,6% - пног единое, а у позднеспелых сортов практически все семена содержат 80% - водо-солераетворкчых белков и 19,3% -пиоге.ишов, Нсклклешкм является сорт гороха Немчинове кий 817 с большим проце1гтом труднолерсваркмого белка.

Огскш, можно прсдноложтъ, что зрелые семена раннеспелых форм гороха имеют более высокую биологическую ценность запасных белков, чем более логгнне, н предпочтительнее для пищевых и кормовых целей. Сорт гороха Орнела может служить исходным материалом для создания новых форм с высоким качеством белка.

Таблица 2

Фракционный состав Сел коп семян различит по скороспелости сортов гороха, (%)

№ Сорт Мм очная спелость Восковая спелость Полная спелость

пЛг Альб- Глобу- Глют- Альб- Глобу- Гл»т- Альб- Пюбу- Глкле-

умины лин и елиаи умвны лин и елины умины лшш липы

I Ороела ад 653 V 70,6 20,7 92 793 114

2 Шупрак 7,9 68,3 гм 71,2 20,3 9А 73,6 17,0

3 Л-8 6,9 663 26*9 6,9 69,3 23,8 7(4 7М 21,9

4 Л-1069 «3 68,1 23,6 93 703 204 9,7 70,8 19^

5 Ор.1)« 8,0 61,1 30,9 10,6 703 19,3 104 71,0 184

6 Ормшя 10,2 69,7 20,1 11,0 70,1 18,9 11,0 71,4 17,6

7 К*11е ил 64,4 23,5 10,4 66,7 223 9$ 683 21^

8 Ал.1» 9,6 64,0 26,4 10,8 683 21,0 11,0 69,6 19(4

9 Л-1653 9,6 (4,0 26,4 1М 683 21,0 11,0 69,6 19А

10 Ненч внове-кай81Т 10,9 613 ИЗ 62,7 26,0 ИЗ 64,0 24,7

11 Электрой 9,6 68,0 22(4 10,1 693 20,7 104 703 193

12 Тройка 9$ 653" 243 11,0 67,4 21,6 11,6 693 19,2

шггратрпдуктазная активность в листьях и корнях гороха в

ОНТОГЕНЕЗЕ

Ключевым ферментом в ассимиляции азота растениями является нитрат ре дуктаи, подверженная сложным регуля горным воздействиям со стороны других метаболических путей. Изучение характера изменений, происходящих с растениями гороха в онтогенезе, показало, что нкгратредуктазиая активность в надземных органах и корнях менялась » процессе вегетации, при этом наибольший уровень ее активности отмечался в корнях.

Установлено (табл. 3), что иитратредуктазная активность (НР) в корнях растений гороха увеличивается постепенно от фазы 2-го листа до 4-го ог 9,0...11,0 до 22,0 нмольЫ017г, В период 2-3-х листьев нитратредуктазизя активность несколько выше у раннеспелых сортов: у растений с 2-мя листьями от 10,3 до 15,5 нмольМОа Л; в стадии 3-ю листа — от 12,3 до 16,1 нмольКО;* /г.

У среднеспелых сортов соответственно: в стадии 2-го листа 5,5...10,5 нмольКОг'/г, в стадии 3-го листа — от 10,9 до 12,6 нмольКО;"/г, У иопне спелых - в стадии 2-го листа 7,9...9.6 нчольКО:" (г, в стадии 3-го листа 10,3-12,2 нмольКОГ/г,

Таблица 3

Активность ннтратредуктазы в корнях различных геношшш __гороха, (HMiMbNOg'/r)_

ХЬп/п Сорта гороха Фа и развития

2 ЛИСТ 3 лис г А Л HCl i ЛИСТ uwce мне VlO,lil4-НЛП tnt- ,ЮС1Ъ

1 Орпела ЮЗ 12.5 20,9 147,4 10,8 7,1

2 Шустрик 15.5 16.1 2 2,4 1563 123 8.1

3 л-л 113 123 21.7 130,0 10,0 6,4

4 Л-1069 юл 12Л 22,7 145,2 V 7,9

НСРi* г 0,60 0,6S t.to 7,20 0,53 0J7

5 Орлус 83 10,9 20,7 144,3 103 73

6 Алла 8(5 12,1 12,9 152,0 11.7 6,7

7 Орлов чан и ti »,4 11,8 22,7 149,4 9.9 8,9

8 К* II« 104 12,6 21,9 150,S 10,0 6,4

НСРta 0,47 0,60 1,10 7.45 0,52 0,36

9 Л-1658 83 10,3 22.3 1513 17,6 8,7

10 Электрон ЧЛ 12.2 22,5 148,9 14p 63

И Тройка 9,6 11,0 21,6 156,2 16,9 53

12 Неччиновскнй Я17 7,9 10,5 20,9 154,5 14,1 6,9

НСРвОХ 0,42 0,55 1,0 9 7,65 0,78 0,34

В стадии 4-п> листа активность НР выравнивается но всем сортам гороха. Фаза 5-га листа (закладка репродуктивных органов) характеризуется ре> кой активизацией нитрат ре дуктазной активности и составляет у раннеспелых сортов а среднем 143,6 нмольКО;'/г, у среднеспелых - 149,0 нмольКО:"/г, у

попнеспелых - 152,7 нмольКОГ/г, Этот период связан С качественной IKреет роГшо Л, гаме не rate м фнтогорм овальною статуса на переход от к» спильной фаты к репродуктивной. Вместе с тем именно в этот период тблкгастся максимальное завязывание клубеньков и повышение усвоения молекулярного азота бактериями Rhizobium. С момента цветения и до начала развития бобов гороха нитрат ре дуктаэшя активность падает до первоначальных величии и ниже.

I Ьпратреду ктазная активность в листьях гороха значительно ниже, чем в корнях, ио закономерность ее изменения по фазам развития соответствует данным, полученным в корнях.

Прослеживается некоторая тенденция положоггельной связи между более высокой нитратредуктазной активностью!! содержанием белка у потднеспелых сортов гороха в фазу 5-го листа (г=0,58),

трипсинингибирующая и химогрипсинингибирующая активность в семенах гороха Среди белков-иишбшоров наиболее распространенными и в наибольшей степе mi изученными являются ингибиторы протеолктическнх ферментов. Колыиое количество белковых интбиторов нротеиназ обнаружено в семенах и других запасающих органах растений, тле их уровень может достигать 5-10% от общего содержания водорастворимых белков. По нашим дашолм, уровень активности белков-mmtGifropoH в семенах гороха зависит от фазы созревания.

Активность интбиторов трипсинз (ТИА) и химотрипсина (ХИА) увеличивается от фазы молочной спелости до полной спелости. Различия активности TI1A по фазам связаны лишь с временными особенностями различных по длине вегетационного периода сортов гороха.

Активность ннтобнторов хлмогрипоша в семенах гороха выше в 1,5 раза и также увеличивается по мере созревания семян: в фазу молочной спело* сти у раннеспелых сортов ее активность составляет 0,45. ..0,80 mi/г, у среднеспелых — 0,30...0,96 мг/г, у позднеспелых - 0,50. ..0,91 мг/г. В фазу восковой спелости ХИЛ составляет у раннеспелых сортов гороха 1,32... 1,65 mi/г, у среднеспелых - 1,06. ..1,51 мг/г; у позднее целых — 1,20.. Л, 30 mi/г. В фазу полной спелости ХНА у раннеспелых сортов составила 1,57...3,27 мг/г, у среднеспелых — 1,76...2,23 мг/г, у позднеспелых — 1,92...2,72 мг/г.

Таким образом, активность ингибиторов протеиназ может характеризовать только степень созревания семян различных сортов гороха, но lté их скороспелость. Вместе с тем, семена гороха сорта Шустрик отличаются самой высокой активностью ТИА и ХИА, а среднеспелый сорт Алла самой низкой ТИА и XIIA, что характеризует нх различную биологическую ценность.

геМАГГЛЮТИНИРУЮЩАЯ АКТИВНОСТЬ ЛЕКТИНОВ СЕМЯН ГОРОХА Известно, что токсичность ссмян некоторых растений для животных и человека связана с наличием фитогемашногининов, или лектинов, вызываю-щнх аплюгинацию эритроцитов. И>за наличия этой группы веществ семена бобовых обладают очень низкой питательной ценностью.

Наши исследования показали, что активность лектинов в семенах юро-ха зависит от труппы крови и колеблется от 3,2 до 28,6 ГАЕ мгУг Селка,

По всем фуллам крови (кроме четвертой) прослеживается тенденция большей жмагглюгинирующей активности лектинов в семенах позднеспелых сортов гороха, по сравнению с рзнне- и среднеспелыми формами.

№ данных таблицы 4 следует, что молочная и восковая стадии согревания семян гороха характеризуются значительно более высокими показателями ГЛЕ, чем полная спелость. При этом у раннеспелых сортов в фазу молочной спелости ГДЕ составляет 36,5...47,3 мг/гбелка; у среднеспелых сортов соогвет-ственно 44,5...54,б мгУп а у позднеспелых - 30,7...54,0 мг/гбелка. В фазу восковой спелости у раннеспелых сортов активность лектинов сшскается до 23,1...28,б мг/г, у среднеспелых возрастает до 44, ] ...57,3 мгУгн у ткшнеснслых -48,1...54,б мг/г. В фазу полной спелости семян у раннеспелых сортов гороха ГАЕ составляет 13,8...28,5 мг/г, у среднеспелых-7,8... 16,8 мг/г и у ¡юта 1ссцелых - 16,1...38,2 мг/гбелка. Самой высокой гем агглютинирующей активностью в раниие сроки созревания характеризуются среднеспелый сорт Орлопчанил и позднеспелый сорт Тройка, у которого высокая активность ГЛЕ сохраняется до полной спелости семян.

Исходя га полученных данных, прослеживается следующая закономерность: мешочная спелость раннеспелых семян гороха, молочная и восковая спелость среднеспелых форм и восковая спелость позднеспелых сортов гороха характеризуются наиболее высокой активностью лектинов. При максимальных значениях ГЛЕ, а также в семенах полной спелости позднеспелые сорта гороха имеют самую высокую активность лектинов по сравнению с другими сортами. Исключение составляет позднеспелый сорт гороха Электрон, у которого ГЛЕ в зрелых семенах составляет веет 16,1 мг/г, то есть на уровне среднеспелых форм. У раннеспелых сортов, кроме Орпелы, активность лектинов зрелых семян выше, чем у среднеспелых.

Таблица 4

Гемагглютниируюшая активность (ГАЕ мг/г белка) (по второй группе крови) в процессе созревания семян гороха

№ п/п Название сорта Фаза спелости семян

молочная восковая полнам

1 Шустрик- 47.3 28.6 28,5

2 Орлела 38,2 23.1 13.8

3 Д-8 36.5 30,2 24,3

4 Орловчаннк 54,6 573 16.8

5 Орлтс 45,1 44,1 7,8

6 Алла 44,5 50,0 12,5

7 Тройка 54,0 54,6 38,2

8 Электрон 45,1 16,1

9 Л-1058 31,6 48,4 37,1

НСР,„ 2,01 2,12 ш

Таким образом, qwnue семена позднеспелых сортов гороха имеют наибольшую гем агглютинирующую активность лектинов по сравнению с другими формами, но значительно тисе, чем эти же сорта, а также среднее пел ыс — и фазу восковой спелости.

углеводный обмен различных по скороспелости сортов

гороха

У большинства однолетних растений известны формы, которые плетут намного раньше, чем другие. Как правило, позднеспелые формы характеризуются более длительной фазой нленильностн, чем раннеспелые. Проблемы скороспелости и юненнльности связаны между собой жразаелимо (Бериьс и др., 1985).

Установлено (табл. 5), что в процессе созревания семян гороха от молочной до полной восковой спелости происходит снижение содержания суммы всех Сахаров; у раннеспелого сорта Шустрик от 218,1 мг/г до 75,7 mí/п У среднеспелого сорта Орловчанин от 206,3 мг/г до 74,4 мг/г и у ногте с целого сорта Тройка от 230,8 мг/гдо 81,6 мп'г. В эти периоды сахара представлены глкжоэой. Фруктозой и сахарозой. Наибольшее количество Сахаров представлено в виде сахарозы, содержание которой в семенах раннеспелого сорта ш фазам составляет: 105,8 мп'г, 72,3 MtYr; 43,5 мг/г. У среднеспелого сорта соответственно: 100,3 мг/г; 62,3 мг/i; 39,8 mi/г и у novu ¡ее целого сорта: 124,3 мг/г, 86,2 mi/i; 52,6 мг/г. Ib моносахаридов: пгкжозй н фруктоза находятся в семенах молочной спелости в соотношении по скороспелому сорту 65,7/46,6 мг/г; по среднеспелому - 62,7/ 43,3 мг/п по полнее пело м у - 58,3/48,2 мг/г В фазу носковой спелости соотношение меняется и составляет но раннеспелому сорту 25,0/49,8 mi/i; по среднеспелому - 31,2/48,3 мг/п но поинеспелому - 15,2/ 31,5 мг/г.

Полная восковая спелость семян гороха характеризуется знзчигслыюй убылью моносахаров. У раннеспелого сорта исчезает фруктоза, у средне- и позднеспелых сортов фруктоза находится в количестве около 15,3,..16,8 мг/г. Между тем, в фазу полной восковой спелости у раннеспелых и среднеспелых сортов появляется трпсахарид рафнноза, который у позднеспелого сорта идентифицирован только в семенах технической целости. В этот период в семенах сортов, различающихся по скороспелости, исчезает фруктоза, но за счет рзфи-HOJU общее количество Сахаров увеличивается: у скороспелого сорта до 106,8 мг/г, у среднеспелого - 87,5 мг/п У иопнсснелого - 114,0 mi/г. líe выявлено какой-либо закономерности в накоплении Сахаров в зрелых семенах различных сортов гороха. Различие заключается лишь » скорости использования отдельных Сахаров в период созревания семян в зависимости от длины вегетационного периода н темпов накопления запасных форм углеводов.

Таблица 5

Содержание углеводов в семенах гороха в процессе созревания, (мг/г абсолютно сухого вещества)

Сахара Молочная спелость Восковая спелость Полках спелость Зрелые семена

Раннеспелый сорт Шустрик

глюкоза 1 65,7 25,0 10,2 6,8

фруктоза 1 44,6 49.8 0,0 0.0

сахароза 1 105,8 - 723 43,5 42,4

рафнноза { 0,0 0.0 22,0 58.4

сумма 1 218,1 Сахаров | 147,1 75,7 106,8

Среднеспел ы й сорт Орлаячанни

глюкоза 61,7 31.2 »,0 ял

фрукмом «3 483 153 ОД

сахароза 1003 623 393 343

рафнкоза 0,0 0,0 >03 443

сумма сахарок 2063 141,8 74,4 87,5

ПашсаклыК сортТ ройка

глюкоза 583 15,2 123 10,0

фруктоза 48,2 31.9 16.8 0,0

ширма 1243 86,2 52,6 463

рафнноза 0,0 0,0 0,0 57,8

сумма Сахаров 230,8 132,9 81,6 114,0

СИНТЕЗ КРАХМАЛА В СЕМЕНАХ ПОРОХА

- Запасной формой углеводов в семенах гороха является крахмал, который в зависимости от генотипа составляет 13,..65%, Синтез крахмала начитается в хлороапастах листьев, и расходуется растением по мере необходимости. Его содержание в листьях не превышает 5...7% по весу сухого вещества.

Установлено, что по мере развития растений гороха содержание крахмала в листьях разных сортов гороха медленно снижается, по различия между ними не существенны.

Скорость 1шкоплсния крахмала в семенах у различных сортов гороха зависит от их скороспелости. У раннеспелых сортов уже в фазу молочной и восковой спелости содержание крахмала около 40,0%, а у пстнеспелых сортов эти фазы характеризуются содержанием крахмала вдвое меньшим (20,0. ..25,7%), чем у первой труппы. Среднеспелые сорта имеют промежуточные величины содержания крахмала (27,5...40,0%). Зрелые семена гороха поинсспепых сор-

той накашивают меньше крахмала (42,0%), чем раннеспелые и сред неспелые (47,5%) (рис. 1).

Большое внимание, уделяемое в последнее время крахмалу ю гороха и Европе, связано с высоким содержанием амилозы в некоторых сортах, особенно овощных. Однако в России горох в недостаточной степени используют как источник получения крахмала и>за его слабой изученности.

Наши исследования показывзюг (табл. б), что содержание амилозы в крахмале семян овощных генотипов гороха (№-301, Рагатасет, Ошзпа) на 10, ..20% выше, чем в крахмале зерновых генотипов, Накопление амилозы происходит на протяжении всех фаз созревания. В фазу молочной спелости содержать амилозы у зерновых сортов гороха составляет 14,0... 16,2*! в, в фазу и основой спелости - 20,0...26,2% и в семенах технической спелости —27,2.,,35,6%. У овощных сортов гороха накопление амилозы начинается ог 21,2...32,4% в фазу молочной спелости, 38,4..,47,5%- в фату восковой спелости и 47,0...50,4% - в фазу полной спелости.

У скороспелых и среднеспелых сорю» зерновых генотипов гороха в семенах технической спелости содержание амилозы находтся в пределах 27,2.,.31,4%, а у позднеспелых сортов - 34,8...35,6%.

□ раннеспелый

Шустрик Исреднеспелый

Орловчанин □позднеспелый Тройка

молочная спелость

полная спелость

Саза развития

Рис. I. Динамика накоплении крахмала и семенах различных по скороспелости сортов гороха, (%)

Таблица 6

Содержание амилозы в крахмале гороха, (%)

Л Название сорта Фаза созревания семян

1|/о молочная восковая полная

Зерновые

1 Шустрик 14,0 гга 27,2

2 Орлела 15,5 20,7 30,5

3 Орлов чан и н 16Л 20,0 31,4

4 Орлуе на 26¿ 30,5

5 Н«мчиновскнЯ 817 ил 16,5 35,6

6 Тройка 15,5 19,5 34,8

НСРм! 0,7 1,1 í.í

Овощные

7 NZr30l 21,2 47,5 50,4

8 Pararoaceot 28,0 38,4 47,0

9 Durana 32,4 40,0 48,3

ИСР ' г'4 2,1 2,4

соотношение запасных форм углеводов и жлков в семенах

ГОРОХА

Фотосинтез влияет не только на кодичественную сторону метаболизма азота, усиливая скорость образования аминокислот и белков, но также существенно изменяет направленность этого процесса и может 1гриводнть к соааанию веществ, имеющих большое физиологическое значение.

Изменяя состав продуктов фотосинтеза под влиянием различных факторов внешней среды, можно управлять сшггетическими процессами растения и направлять их в нужную для практики и сельского хозяйства сторону.

Таким образом, соотношение белковых веществ и углеводов может меняться как в процессе онтогенеза, так и под влиянием внешней среды, что, скорее всего, отраэшея в накоплении запасных веществ при формирована семени. Известен факт (Конареэ и др., 1993), что содержание белка «крахмала в семенах находится в обратной корреляционной зависимости. Нередко процент белка в зерне повышается при неблагоприятных условиях формирования урожая (например, при недостатке света) за счет недостаточного накопления крахмала.

В ссмспах растении, в зависимости от принадлежности к определенным семействам, накашивается различное соотношение азот- и упперодсодержащих

запасных веществ. Так, в семенах агакопых, прошит углеводов, а иметю крахмала, составляет 70...78%, а бедка всего- 20., .25%. В семенах бобооых растений, содержание крахмала составляет 40...60?é, а белка — 25...35%.

lio нашим данным, и фазе молочной спелости заметно увеличивается содержание крахмала у среднеспелых сортов, в то время как у раннеспелых и позднеспелых сортов этот показатель меняется незначительно.

Соотношение содержания крахмала к белкам у гороха раннеспелого сорта Шустрик составляет 1,62; у сорта Орнела -1,98. У среднеспелых сортов 0р-повчанин и Орлуе эти тказателн составляют соответственно — 1,2*4 и 1,14. У позднеспелых сортов гороха Тройка и Немчинове кий 817 дашсые — 0,69 и 0,84 соответственю. В фазу восковой спелости заметно увеличивается содержание крахмала у среднеспелых сортов, в то время как у раннеспелых и позднеспелых сортов этог показатель меняется незначительно (табл. 7).

В фазу восковой спелости у раннеспелых сортов гороха Шустрик и Орпе-ла соотношение крахмала к протеину составляет 1,71 и 1,72 соответственно. У. среднеспелых сортов Орловчанин и Орлус -1,51 и 1,74. У пощаде с целых сортов Тройка и Немчнновский 817 соответственно - 0,70 и 0,96.

К моменту софевзння семян у всех трех ípyitn сортов гороха крахмал преобладает над протеином. Содержание протеина постепенно снижается (рис. 2),

Рис. 2, Содержание крахмала и сирого протеина в семенах различных сортов горожа в фазу полной спелости, (%) (г=>-0,79)

ПКрахмал □Сырой протеин

Зрелые семена гороха характеризуются следующими показателями соотношения крахмала и протеина: у раннеспелых сортов Шустрик и Орнела -2,16 и 2,07; у среднеспелых сортов - Орловчаиин и Орлус - 2,27 и 2,23; у пом-неспелых сортов Тройка и Немчиновскнй 817 - 1,43 и 1,65.

Таким образом, выявлена интересная закономерность (табл. 7). Раннеспелые сорта гороха накапливают больше крахмала, чем прогеинов и эта теп-денция сохраняется на протяжении всего периода созревания, у позднеспелых сортов гороха накопление запасных веществ формируется значительно штоке по времени, но накопление белка происходит.интенсивнее, чем крахмала. Эта тенденция сохраняется до фазы полной спелости. Среднеспелые сорта занимают промежуточное положение, но крахмала в них накапливается больше, чем у позднеспелых форм.

Огскиа, если требуется получить больше крахмала, то следует использовать скороспелые формы гороха, если требуется повысить выход сырого протеина, желательно повысить производство позднеспелых сортов гороха.

Высокое содержание крахмала в раннеспелых сортах растений объясняет их более высокую энергию прорастания, чем у более поздних сортов, так как гидролиз крахмала обеспечивает растение основными субстратами дыхания — углеводами, которые в виде фосфатных эфиров вступают в синтетические процессы.

Таблица 7

Соотношение крахмала и протеина в семенах гороха в процессе

созревания

-V« Сорта Молочная Восковая спе- Полная спе-

' п/п спелость лость лость

1 Шустрик 1,62 1,71 2,16

2 Орпела 138 1,72 2,07

3 Орловчанин 1,24 " 131 2,27

4 Орлус 1.14 1,74 2ДЗ

5 Тройка 0,69 0,70 i,43

6 Немчиноаский 817 0,84 0,96 * 1,65

Данные колебания содержания в семенах запасных белков н углеводов в зависимости <ут генотипа представлены на рисунке 3.

Сырой протеин

21,0... 28,8*! о

Фракционный состав бедное % от суммарных белков

Ингибиторы протеиназ

ТИА

0,52...2,15м1/г ^-

Альбумины Пюбулины Пногеликы

7,2.. .12,1% 59,1...68,3% 11,5...30.9%

ХИА

0,30...3,27м1/г

Нитратредуктазная активность, км аль ЫО}/г_

Белки (в процессе созрева* цця

Лектины, ГАЕ, мг/г

Генотип

(зерновые, овощные, лнсточкоаые, усатые, рашюспелые. среднеспелые, позднеспелые

Корни Листья

5,5... 156,8 3,4... 15,5

Углеводы (в процесс созревания семени)

Группа Отчие нез

крови II тр. крови

4,8..54.6 12.2...57.3

Крахмал

20,0...49,5%

X

Сумма Сахаров 74,4...230,8м|/г

Рафии оза

0,0...5 8,4м г/г

Сахароза 34,3.,.124,Змг?г

Рис. 3. Колебание содержания запасных белков и углеводов в семенах гороха в зависимости от генотипа

ВЫВОДЫ

1. Накопление белков в семенах и углеводов в различных органах гороха носиг динамичный хардвер и зависит от генотипа, длины вегетационного периода и года выращивания.

2. В процессе созревания семян гороха содержание «сырого» протеина снижается от фазы молочной спелости к фазе поп ной спелости у всех исследованных сортов. В семенах полной спелости раннеспелых сортов эта величина составляет 21,70.,. 22,92%, среднеспелых - 21,00...26,34%, поганее пел ых -21,00...27,91%. Низкое содержание «сырого белка» не зависит от длины вегетационного периода, но высокое — свойственно, в основном, позднеспелым и среднеспелым сортам.

3. Установлен полиморфизм белков семян гороха в процессе нх согревания. Количество субьединицможет составлять от 9 до 27. Проигсс созревания семян связан с усложнением электрофоретнчсских спектров белка, но не зависит от дишы вегетационного периода. Различия заключаются только в скорости синтеза белков и связаны с генотипичесними особенностями сорта.

4. В процессе созревания семян гороха соотношение фракций белка меняется незначительно. В зрелых семенах содержание альбуминов у раннеспелых сортов составляет 7,4...9,7%, у среднеспелых - 10,5... 11,0% ну позднеспелых -10,5...11,6%. Содержание глобулинов у раннеспелых сортов составляет -70,6...79,3%, среднеспелых -68,2...71,4% и позднеспелых - 64,0...70,2%. Глю-телиновая фракция у раннеспелых сортов гороха составляет 11,5...21,9%, среднеспелых - 17,6...21,9%, у позднеспелых - 19,2...24,7%. Белки раннеспелых с ортов'гороха имеют батьшую биологическую ценность. Выявлены наиболее ценные по штгательным достоинствам с орта гороха. Так, раннеспелая форма Орпсла содержит 88,5% хорошо переваримого белка высокой биолотческой ценности н только 11,5% - га юге липовой фракции.

5. У гороха выявлена невысокая шггратредуктаэея активность в листьях, увелнчдаакшаяся к фазе 5-го листа (период закладки ре продукт >шных органов) (12,4...14,4 ичшьШг'/г) и резко снижающаяся к фаэг цветения (1,6...2,2 нмшьКОГ/г). В корнях юлратредуктозная активность значительно выше и максимальные величины (143,3...152,7 ачольЪЮз'/г) отмечены также в стадии 5-го листа. Прослеживается положительная тенденция между накоазением белков в зрелых семенах гороха и нитратредуктазной аетивностью в корнях позднеспелых сортов в фазу 5-го листа (г=0,58).

6. К запасным белкам относятся токсичные протеины - иншбнторы гидролаз и лсктины. Установлено, что ТИА и ХИЛ увеличиваются в семенах гороха от фазы молочной до полной спелости - от нулевых значеюгй до "1,57...3,27 мгУг. Активность ииибигороа протешШ может характеризован.

только степень согревания семян различных сортов гороха, но не их скороспелость. Выявлены раннеспелый сорт гороха Шустрик с самой высокой ТИЛ и ХИЛ и среднеспелый сорт Алла с самой низкой активностью ингибиторов, что характершуег их различную биологическую ценность.

7. Гемаппюгинируюшая активность и зрелых семенах гороха максимальна по второй фуппе крови и составляет ог 12,2 до 28,6 ГЛЕ мг/г белка, независимо ог длины вегетационного периода. Исключением является сорт гороха Орлус, у которого значительно более низкая активность лектинов (6,8 мг/г). Наивысшая активность ГЛЕ отмечена у позднеспелого сорта Тройка (15,4. ..28,б мг/г белка) в зависимости от группы крови. В процессе налива семян гороха гемагтлюгинирукхиая активность значительно снижается к моменту полной седости, но остается самой высокой у позднеспелых сортов.

8. В различных органах гороха выявлены моно-, днеахарнды и крахмал. В листьях, стеблях и корнях в квенильный период обнаружены глккозз, фруктоза, мальтоза и сахароза, сумма которых в листьях (прилистниках) составляет 6,43...10,60 мг/г; в стеблях - 5,80...7,05 мг/г; в корнях-6,60...15,10 мг/г. В фазу бутошшшш содержание растворимых утл сводов снижается. Наибольшее содержание углеводов отмече1Ю в листьях (прилистниках), а наименьшее в генеративных органах. Обнаружена четкая положительная связь между скороспелостью растений гороха и содержанием углеводов в листьях (или прилистниках).

З.Отмечена средняя и сильная полож>тгельная корреляционная связь между снижением содержания простых Сахаров в процессе созревания ссмян гороха н тема [платинирующей активностью (т=0,45...0,99).

10. В процессе созревания ссмян гороха ог фазы молочной до полной восковой спелости происходит снижение содержания суммы простых Сахаров, но появляется трлсахарид рафнноза, который у гкадне спелого сорта илздггифн-цирован таи.ко в семенах технической ■зрелости. Различие в накоплении их в зрелых семенах гороха заключается в скорости использования отдельных Сахаров в период созревания семян в зависимости от длины вегетационного периода.

11. Интенсивность накопления крахмала в семенах различных сортов гороха зависит ог их скороспелости. Зрелые семена гороха позднеспелых сортов накапливают меньше крахмала (42,0%), чем раннеспелые и среднеспелые (47,5%). Установлено, что содержание амилозы в крахмале семян овощных генотипов гороха на 10...20% выше, чем в крахмале зерновых генотипов и составляет в зависимости от условий года 47,0...55,0%. В крахмале зерновых сортов гороха содержание амилозы находится б пределах 27,2...35,0% н мало зависит ог скороспелости.

12. Установлено определенное соотношение между накоплением крах* мала к белкам. Раннеспелые сорта гороха накапливают больше крахмала, чем белков, н эта тенденция сохраняется на протяжении всего периода софсвання. У попне спелых сортов гороха накопление белка происходит интенсивнее, чем крахмала. У раннеспелых сортов гороха соотношение крахмала и протеина в фазу полной спелости составляет 2,07...2,16; у среднеспелых — 2,23,..2,27; у позднеспелых - 1,43...1,65..

13. Белок раннеспелых сортов гороха по фракционному составу и низкому содержанию токсичных компонентов имеет большую биологическую ценность, чем средне- и позднеспелые сорта. Выявлены сорта Алла и Орлус, имеющие наиболее высокую биологическую ценность.

14. Накопление крахмала и белка в семенах гороха зависит от погодных условий года. В условиях засушливого лета накапливается больше крахмала, а в условиях влажного — белка. .

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Дтя промышленного получеши растительного белка предпочтительны средне- и погоне спелые сорта гороха, а для получения крахмала - раннеспелые сорта.

2. Среднеспелые сорта гороха (Алла, Орлус) отличаются высокой бно-л отчее кон ценностью и являются предпочтительными для промышленного производства продуктов питания и корма ятя животных.

Список- работ, опубликованных по теме листешмии:

1. Яроватая М.А. Фракционный состав белков и активность протеолитнче-ских ферментов в процессе созревания семян гороха. / Павловская НЕ., Корниенко Н.Н. // Сборник материалов 111-Международной научной конференции «Регуляция роста, развития и продуктивности растений». Рост и морфогенез у растений, природные и синтетические ретуляторы роста, биотехнология. - Беларусь, Минск, 8-10 октября 2003. - с. 144.

2. Яроватая М.А. Токсичные вещества белкового комплекса зернобобовых культур. / Павловская Н.Е., Монахова Н.А., Гагарина Ш1 // Материалы V съезда общества физиологов России. - Пенза, 15-20 сентября 2003. - с.220-221

3. Яроватая МЛ. Активность ипратредуктазы растений и накоплен!к белка . в процессе созревания семян гороха. / Павловская Н.Е., китенок тТс1 И Материалы V съезда общества физиологов России. — Пенза, 15-20 сентября 2003. — с. 420

4. Яроватая М А. Синтез углеводов в созревающих семенах гороха. / Павловская НЕ. // Материалы XII Международного симпозиума «Нетрад)Щиошюс

растениеводства Эниолошя. Экология иааоровье». Генетика. Селекция. Семеноводство и тем. дело. Поев. 140-летию осн. учеты о биосфере В. И. Вернадского, 105-летию бот.-сел. Н.В. Цинина. — Крым, Алушта, 7-14 сентября 2003. - с. 27-30

5. Яроватая М. А Нитратредуктазная активность в листьях и корнях гороха в онтогенезе. / Павловская Н.Е. // Межрегиональный сборник научных работ ((Оргшшзацня и регуляция физиолого-биохимических процессов», посвященный памяти АА Землянухина. ВГУ, - 2004. - №6. - с. 92-95

6. Павловская НЕ. Взаимосвязь накопления белка в семенах гороха с тгг-ратредуктазной активностью / Яроватая М.А // Межрегиональный сборник научных работ «Организация и рефляция фнзиолого-биохимических процессов», посвященный памяти А А. Зсмлянухииа. ВГУ. - 2004, - №6. - с. 39-41.

7. Павловская НЕ Онтогенетические изменения содержания белка и крахмала в семенах различных по скороспелости сортов гороха. / Яроватая М.А // Аграрная наука. - Москва. -2004. -№б. - с. 13-14.

8. Яроватая М.А Фракционный состав белков семян различных по скороспелости сортов гороха // Материалы научной конференции аспирантов и студентов «Биохимические основы современной агрономии». - Орел ОГАУ, апрель 2004. - с. 120-124.

9. Яроватая МА Лектины зернобобовых культур в биотехнологии. / Гагарина И.Н., МирошгежоваМП., Павловская НЕ. И Материалы 68-й межвузовской конференции студентов и молодых ученых. - Курск, 22-23 апреля 2003. -с.68.

10. Яроватая М.А. Роль компонентов белкового комплекса зернобобовых культур в лечении злокачественных заболеваний. / Гагарина НИ, Мирош ник о-ва М.П., Павловская НЕ. // Сборник работ Всероссийской научно-практической конференции «Вклад земляков-орловцев в развитие и становление российской науки, культуры и образования». Хирургические науки о России: история, современность и перспективы, к 120-летию науч. деят. ПН Дьяконова. - Т.5., часть 2. - Орел, 18-19 декабря 2003. - с.62-63.

11. Яроватая М. А Формирование бел ково-угле водного комплекса в процессе развития семян различных по скороспелости сортов гороха. У Павловская НЕ., Конпыков И.В., ЬГит^тоК Т.С.1// Материалы научно-методической конференции в 2-х ч., ч,1. «Физиологические аспекты продуктивности растений». -Орел, март 2004. - с. 233-238.

й!-77

Издатель Александр Воробьев Лицензия ИД №00283 от 1 октября 1999 г., выдана Министерством РФ по делам печати, телерадиовещания я средств массовых коммуникаций.

Отпечатано с готового оригинал-макета. Подписано в печать 09.04.2004 г. Формат 60x84 1/16. Бумага офсетная. Усл. печ. л. 1,5. Тираж 100 экз. Заказ № 026.