Бактериоценоз воды и судака (Stizostedion lucioperca) в дельте Волги

Обухова, Ольга Валентиновна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Бактериоценоз воды и судака (Stizostedion lucioperca) в дельте Волги
ВАК РФ 03.00.18, Гидробиология

Автореферат диссертации по теме "Бактериоценоз воды и судака (Stizostedion lucioperca) в дельте Волги"

На правах рукописи

ОБУХОВА ОЛЬГА ВАЛЕНТИНОВНА

БАКТЕРИОЦЕНОЗ ВОДЫ И СУДАКА (STIZOSTEDЮN LUCЮPERCА) В ДЕЛЬТЕ ВОЛГИ

03. 00.18 - Гидробиология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Москва, 2004

Работа выполнена в ФГУП "Каспийский научно-исследовательский институт рыбного хозяйства" и ФГУП "Всероссийский научно-исследовательский институт пресноводного рыбного хозяйства"

Научный руководитель: кандидат биологических наук

Юхименко Людмила Николаевна

Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор

Симаков Юрий Георгиевич

кандидат биологических наук, Шмакова Зинаида Ивановна

Ведущая организация - Астраханский государственный университет (АГУ)

Защита состоится

2004 г. в

часов на

заседании диссертационного совета К 212. 122. 03 при Московской государственной технологической академии по адресу: 113149, г. Москва, ул. Болотниковская, дом 15

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Московской государственной технологической академии (МГТА)

Автореферат разослан

.2004 г.

Ученый секретарь диссертационного совета, кандидат биологических наук

Николаева И.Ф.

Общая характеристика работы

Актуальность проблемы. Волго-Каспийский бассейн — уникальный рыбопромысловый регион страны и сохранение его биоразнообразия, продуктивности и рыбохозяйственного потенциала является основной задачей в области охраны окружающей среды. При этом основополагающее значение имеет проведение экологического мониторинга, включая наблюдения за происходящими в гидроэкосистеме физико-химическими и биологическими процессами, уровнем загрязнения и последствиями этого влияния на состояние здоровья рыб (Liston, 1990; Григорьев, 1992; Ganthier, 1993; Novo et.al., 1994; Ларцева, 1998; Иванов, 2000; Курапов, Ревякин, 2002).

Бактериофлора - обязательный структурный компонент водной экосистемы, формирование которой зависит от многообразных абиотических и биотических факторов, которые включают широкий спектр параметров и определяют общий фон их существования. Длительное антропогенное воздействие на водоем приводит к изменению адаптационных механизмов микрофлоры, повышению ее вирулентности, антибиотикорезистентности и появление атипизма (Abdellatif et al., 1991; Chin et al., 1992; Бойко, 1998; Журавлева, 1998; Юхименко с соавт., 1998; Бухарин, 1999). При этом в воде и рыбе условно-патогенные микроорганизмы могут персистировать длительное время, порой изменяя свой метаболизм, но не утрачивая свою патоген-ность. Следовательно, широкое распространение микрофлоры в гидроэкосистеме, доказанная патогенность многих видов как для рыб, так и для человека, свидетельствует об актуальности и информативной значимости микробиологических исследований различных гидробионтов и среды их обитания, особенно в регионах с нарушенной экологией (Vuradinovic, 1990; Tanaka et al., 1992; Ларцева, 1998; Bykowski, 1998; Бычкова, 2002, Карасева, 2003).

Цель и задачи исследования. Цель исследования - изучение бак-териоценоза воды и судака в дельте Волги, микробиологических и экологических факторов, детерминирующих распространенность и образование паразитарных систем условно-патогенных микроорганизмов. Разработка профилактических рекомендаций по снижению уровня бактериемии рыб в природных и искусственных условиях. Для выполнения работы были поставлены следующие задачи:

1. Оценить качество вод Волго-Ахтубинской поймы и дельты р. Волги по эколого-микробиологическим показателям.

2. Провести количественные санитарно-микробиологические исследования судака и воды в местах его обитания.

3. Изучить качественный состав микрофлоры рыбы и среды ее обитания; выявить доминирующие группы микроорганизмов и их распространенность в дельте Волги по сезонам и годам. •

4. Исследовать признаки, характеризующие патогенность и способность к персистированию основных групп бактерий и определить их диагностическую ценность для ихтиопатологического анализа.

5. Изучить влияние некоторых распространенных в дельте Волги тяжелых металлов на чистые культуры доминирующих групп микроорганизмов.

6. Проанализировать влияние стрессовых факторов среды на развитие бактериемии судака в естественных условиях и при использовании его в рыбоводных целях.

7. Разработать рекомендации по снижению микробной обсеменен-ности судака в естественной популяции и в условиях воспроизводства.

Научная новизна. Выполненная работа является первой по комплексу микробиологических исследований, проведенная в Волго-Каспийском регионе, основанная на теории единства организма и среды, что позволяет объективно оценивать санитарно-экологическую и эпизоотическую ситуацию на водоеме, а также выделить районы, наиболее подверженные антропогенному воздействию с учетом их трофности.

Расширен спектр методик, применяемых при изучении болезней рыб. Установлены различия микробиологических показателей при глубинном и поверхностном посевах, принятых в странах ЕС, свидетельствующие о необходимости их унифицирования. Впервые выявлены и определены различия фенотипического проявления факторов персистенции и/или патоген-ности выделенной микрофлоры и антибиотикорезистентности в зависимости от ее экотииической принадлежности. Определено влияние солей тяжелых металлов на морфологию и патогенные свойства доминирующих видов гидромикрофлоры.

На защиту выносятся результаты изучения эколого-микробио-логической характеристики воды дельты Волги, бактериоценоза судака, факторов, влияющих на его формирование и биологические свойства выделенных микроорганизмов.

Практическая значимость. Основные результаты работы имеют большое значение как в теоретическом, так и в практическом плане - при установлении причин развития септицемии судака, особенно при его заболеваниях: дерматофибросаркоме и ахтсриозс жабр, обусловленных изменениями условий окружающей среды и резистентности рыбы. Количественно-качественные показатели микрофлоры позволяют не только прогнозировать санитарно-эпизоотическую ситуацию на водоеме, но и разрабатывать лечебно-профилактические мероприятия в условиях искусственного рыборазведения.

Разработаны и отправлены на утверждение в Департамент ветеринарии Минсельхоза РФ «Рекомендации по борьбе с ахтериозом судака в пру-

довых хозяйствах» и «Рекомендация по профилактике дерматофибросарко-мы судака в естественных водоемах».

Апробация. Основные материалы диссертации были представлены на заседаниях Астраханского отделения Всероссийского общества микробиологов, эпидемиологов и паразитологов (1999, 2001, 2004), 49-ой студенческой научно-практической конференции (Астрахань, 1999); Всероссийской научно-практической конференции «Проблемы патологии, иммунологии и охраны здоровья рыб и других гидробионтов» (Москва, 2003); Международной молодежной конференции «Экологические проблемы крупных рек-3» (Тольятти, 2003); Ежегодной научно-практической конференции молодых ученых» (Астрахань, 2003).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 6 работ.

Структура и объем работы. Диссертация состоит из введения, 3 глав собственных исследований, заключения, выводов и приложения. Работа изложена на 169 страницах, содержит 8 таблиц и 23 рисунка. Список использованной литературы включает 238 источников, из них 190 отечественных.

Глава I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Литературный обзор состоит из пяти разделов, в которых рассмотрены вопросы физико-географической характеристики Астраханской области, экологической обстановки всего Волго-Каспийского бассейна, влияния антропогенного загрязнения на биопродуктивность дельты Волги и Каспийского моря, использования гидробионтов для оценки качества вод, распространения условно-патогенной микрофлоры в промысловых и культивируемых рыбах, а также среде их обитания. Описана биологическая характеристика судака с учетом экологических и природно-социальных условий региона.

Ухудшение среды обитания и различные нарушения биотехники в условиях рыбоводства снижают резистентность организма рыбы, что способствует активизации адаптационных механизмов микроорганизмов и приводит к повышению обсемененности внутренних органов и тканей гидро-бионтов.

В заключении литературного обзора делается вывод о целесообразности проведения комплексных санитарно-микробиологических исследований в области ихтиопатологии и экологии, поскольку некоторые условно-патогенные бактерии могут быть индикаторами загрязнения водоемов и физиологического состояния рыбы.

Глава II. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Работа выполнена в лабораториях водных проблем и токсикологии и научной диагностики болезней рыб КаспНИРХ в период с 1999 по 2003 гг. Дифференциальная диагностика микроорганизмов и заключительная обработка материала проводилась в лаборатории ихтиопатологии ФГУП "ВНИИПРХ".

Эколого-микробиологичсскис исследования вод Волго-Ахтубинской поймы (р. Ахтуба, р. Бузан) и р. Волги (в черте города) проводили ежемесячно (с апреля по ноябрь), а дельты (Главный и Гандуринский банки) - по-сезонно в 2001,2003 гг., всего 60 проб воды.

Для оценки степени загрязнения водной среды в качестве стандартных микробиологических методов выбраны следующие показатели: общее количество бактерий на мембранных фильтрах методом ультрафильтрации (Разумов, 1932), численность гетеротрофных бактерий и олигокарбофильной микрофлоры (Абакумов, 1992).

Оценку состояния экосистемы по показателям развития бактерио-планктона проводили согласно комплексной экологической классификации качества поверхностных вод суши и по шкале экологических модификаций (Абакумов, 1992; Оксиюк с соавт., 1993).

При выполнении санитарно-бактериологического мониторинга исследовали 175 экз. судака естественной популяции и 10 экз. рыб после зимовки в прудах АОРЗ (Александровского осетрового рыбоводного завода), параллельно анализировали воду в местах его обитания.

Сбор материала по воде и рыбе осуществляли посезонно с 1999 по 2001 гг. на Главном, Гандуринском банках и на р. Бузан.

Для изучения качественного состава микрофлоры за период исследований собрано и обработано более 2-х тысяч бактериальных культур, выделенных из воды, жабр, крови, печени, почек, кишечника и мышц здорового и больного дерматофибросаркомой судака. Наряду с этим, проводили учет количественных показателей микробного обсеменения печени, жабр и мышц рыб, а также воды в местах их обитания.

При проведении исследований использовали как общепринятые традиционные, так и усовершенствованные и модифицированные методы. При этом использовали основные принципы и этапы бактериологического исследования согласно Лабораторному практикуму по болезням рыб (1983) и Сборнику инструкций по борьбе с болезнями рыб (1999).

У всех выделенных штаммов определяли галотолерантность, т. е. способность расти в МПБ (мясо-пептонном бульоне) с 3,0; 7,0 и 10,0% хлорида натрия; анализировали факторы патогенности: протеолитическую, ле-цитиназную, гемолитическую активность, а у аэромонад - ДНКазную активность. Помимо этого, изучали резистентность выделенных микроорганизмов

к некоторым используемым в рыбоводстве антибиотикам: ампицилину, бен-зопенициллину, левомицетину, стрептомицину, тетрациклину и фурадонину.

В итоге вся микрофлора, изолированная из органов судака и воды, была проведена по 38-40 микробиологическим тестам и идентифицирована до вида (Берджи, 1997; Пивоваров, Королик, 2000).

Для изучения влияния различных концентраций тяжелых металлов на ростовую реакцию и адаптационные возможности условно-патогенной микрофлоры были проведены экспериментальные работы с использованием штаммов бактерий, выделенных из речной воды дельты р. Волги: Citrobacter freundii (авирулентный); Aeromonas hydrophila (авирулентный) и A.hydrophila (обладающий протеолитической, гемолитической, лецитиназ-ной и ДНКазной активностью).

Численность колониеобразующих микроорганизмов определяли методом десятикратных разведений и последующим высевом аликвоты в 3-х повторностях на плотную питательную контрольную среду (МПА) и с добавлением сульфидов кадмия (CdSO4), меди (CuSO4) и цинка (ZnSO4) в концентрациях 5,10 и 20 мкг/л. На третьи сутки после посева проводили повторное тестирование всех испытуемых штаммов на наличие или изменение маркеров патогенности.

При проведении сравнительного анализа количества мезофильных аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов (КМАФАнМ) при различных методах посева объектами исследования были мышца и печень судака, выловленного в районах промысла дельты Волга в летне-осенний период 1999 г. Посевы проводили двумя методами: глубинным (принятым в Российской Федерации) и поверхностным (утвержденным в странах ЕС).

Экспериментальные исследования по влиянию мяса судака, больного дерматофибросаркомой, на организм теплокровных (белые крысы), проводили на базе Астраханской областной государственной ветеринарной лаборатории. Опыт осуществляли в двух вариантах: I - простое скармливание мясом больного судака и II - скармливание после инъекции гидрокортизона в дозе 125 мг/кг веса, приводящей к иммунодефициту. Длительность наблюдения составила 3 месяца. В качестве первого контроля использовали ин-тактных животных, которым в рационе животный белок заменяли мясом судака. Второй контроль - введение гидрокортизона и включение в рацион мяса здорового судака. В процессе опыта наблюдали за поведением животных, а в конце эксперимента изучали патологические изменения и гистост-руктуру внутренних органов подопытных животных.

Математическая обработка результатов осуществляли методом вариационной статистики на компьютере по программам DISTAT и OREGAN.

Глава Ш. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1. Эколого-микробиологическая оценка воды и рыбы в дельте Волги

В результате проведенных исследований было установлено, что для экосистемы дельты р. Волги характерна устойчивая сезонная динамика общей численности бактериопланктона и гетеротрофной микрофлоры. Весенние пики количественных показателей развития микроорганизмов были, в первую очередь, связаны с увеличением количества органического вещества и вовлечением его в биологический круговорот гидроэкосистемы, а также с большим поступлением в водоем аллохтонной микрофлоры в паводковый период. В значительной степени это отразилось на численности бактерио-планктона, максимум которого приходился на май месяц и составлял в среднем 10,7 ± 0,7 - на р. Волга; 5,2 ± 0,5 - на р. Ахтуба; 7,8 ± 0,2 - на р. Бузан; 4,8 ± 0,4 и 3,3 ± 0,3 млн. кл./мл - на Главном и Гандуринском банках, соответственно. В последующие месяцы отмечено снижение общего количества микрофлоры с минимумом в июле-августе (в среднем 2,3 ± 0,6 млн.кл./мл) и незначительным увеличением в сентябре.

Динамика развития гетеротрофных бактерий в сезонном аспекте в основном зависит от содержания легкоокисляемых органических веществ, температуры воды, а также развития и физиологического состояния фито- и зоопланктона. Так, низкие количественные показатели белокразрушающей микрофлоры в июне-июле были на уровне 3,1 ± 0,7 тыс.кл./мл и обусловлены высокой активностью планктонных организмов. Пик численности сапро-фитов приходился на конец вегетационного периода (сентябрь-октябрь) и достигал в среднем 16,1 ±3,1 - на р. Волга; 37,4 ± 6,9 - на р. Ахтуба и 23,3 ± 3,4 ТЫСКЛ/МЛ - на р. Бузан. На Главном и Гандуринском банках количество гетеротрофных бактерий было максимальным в августе и составляло 2,85 ± 0,2 и 3,61 ± 1.1 тыс.кл./мл, соответственно. Значительное увеличение численности данной микрофлоры связано с обогащением водной среды метаболитами гидробионтов и продуктами их постлетальной минерализации.

Известно, что при нарушении микробных ценозов незагрязненных природных вод избыточным количеством органических веществ наступает изменение соотношения бактериального населения, регистрируемого на мя-сопептонном агаре и на средах, бедных органическим веществом (Лаптева, 1988; Марголина, 1989). Поэтому наряду с общепринятыми микробиологическими показателями для оценки качества и уровня трофики исследуемых вод мы использовали коэффициент соотношения количества олигокарбо-фильных бактерий к численности сапрофитов.

Результаты наших исследований показали небольшие значения индекса трофности на водотоках дельты Волги. Основной пик развития олиго-

карбофилыюй микрофлоры приходился на июль-август, наиболее четко выраженный в гидроэкосистемах с высокой трофностью, обусловленных массовым развитием и активностью фитопланктона. Так, на р. Ахтуба индекс трофности был равен 6,9 ± 0,6, на р. Бузан - 7,5 ± 0,6, на р. Волга - 6,6 ± 0,3, на Гандуринском банке в августе он достигал в среднем 13,4 ± 0,9, а на Главном банке - 9,8 ± 0,9 (Р<0,05). Осенью было установлено постепенное снижение численности олигокарбофильных бактерий и уже в октябре индекс трофности на водотоках верхней зоны дельты Волги не превышал 2,3±0,1, в то время как на Главном и Гандуринском банках он был 5,4±0,3 и 5,9±0,3, соответственно.

Результаты комплексного исследования в дельте р. Волги и Волго-Ахтубинской пойме позволили дифференцировать степень загрязнения данных водотоков согласно эколого-санитарной классификации качества поверхностных вод суши и индекса Романенко (Оксиюк с соавт., 1993); охарактеризовать состояние экосистемы по шкале экологических модификаций; определить трофность водоема и выделить зоны наибольшего антропогенного воздействия на гидроэкосистему (Абакумов, 1992).

Установлено, что уровень органического загрязнения исследуемых водотоков в течение всего вегетационного периода соответствовал Р -мезосапробной зоне и варьировал от достаточно чистой до слабо загрязненной (табл. 1), а состояние экосистем было на уровне фоновых значений. Увеличение биогенной нагрузки аллохтонного и внутриводоемного происхождения во время половодья, в конце вегетационного периода определило ухудшение качества вод Волго-Ахтубинской поймы и р. Волги до сильно загрязненной, а нижней зоны дельты - до умеренно загрязненной (а- мезо-сапробная зона). Гидроэкосистемы Волго-Каспийского бассейна в данные периоды испытывали значительное антропогенное напряжение, а на рр. Волга, Ахтуба и Бузан даже с элементами экологического регресса, что подтверждалось соответствующей тенденцией изменения величины индекса Романенко.

Анализируя пространственное распределение микрофлоры, мы выделили участки, испытывающие постоянную антропогенную нагрузку. Наиболее загрязненной была верхняя зона дельты, подверженная повышенному антропогенному воздействию, что привело к нарушению целостности экосистемы, а микроорганизмы здесь выступали как объективные тест-индикаторы. Учитывая повышенное содержание гетеротрофной микрофлоры, низкие значения индекса трофности в течение всего вегетационного периода, а также максимальную численность бактериопланктона во время половодья исследуемые водотоки по степени загрязнения можно представить в виде убывающей последовательности: р. Волга > р. Ахтуба > р. Бузан > Гандуринский банк > Главный банк (табл. 1).

Таблица 1

Эколого-микробиологическая характеристика водных экосистем дельты Волги _

Районы исследования Месяцы

IV V VI VII VIII IX X XI

р. Волга 4а 0,20 4а 0,05 36 0,05 За 0,10 За 0,11 46 0,48 46 0,56 36 0,19

р. Ахтуба 36 0,33 36 0,05 36 0,12 36 0,30 46 0,69 46 0,65 4а 0,20 За 0,12

р. Бузан 36 0,11 36 0,04 36 0,04 За 0,09 36 0,20 46 0,54 46 0,71 За 0,14

Главный банк 36 0,06 За 0,10 За 0,09

Гаидуринский банк За 0,05 36 0,17 36 0,29

Примечание: числитель-разряд качества воды согласно эколого-санитарной классификации (Оксиюк, 1993): За-достаточно чистая (£'- мезосапробная зона); 36 - слабо загрязненная (Р"- мезосапробная зона); 4а - умеренно загрязненная (а*- мезосапробная зона); 4б - сильно загрязненная (а" -мезосапробная зона); знаменатель - индекс Романенко: процентное отношение количества гетеротрофных бактерий к общей численности бактерио-планктона: менее 0,03 - особо чистая; 0,03-0,3 - чистая; 0,3-3,0 - грязная; более 3,0 - особо грязная.

Следует отметить, что весенний пик численности бактериопланкто-на был наиболее ярко выражен на реках Волга и Бузан, а в дельте - на Главном банке, где проходит основной сток паводковых вод. Однако, максимальные значения количества сапрофитной микрофлоры в летне-осенний период были отмечены на р.Ахтуба и Гандуринском банке, характеризующиеся низкой проточностью, высокой зарастаемостыо водной растительностью и заиленно стью дна, способствующие интенсивному накоплению органического вещества и эвтрофикации данных водотоков, что подтверждено относительно высокими значениями индекса трофности. Таким образом, устойчивая сезонная динамика структурных и функциональных показателей микробных сообществ дельты р. Волги отражает сложившийся и стабильный

комплекс биотических и абиотических факторов, характерных для данной экосистемы. По результатам наших исследований ухудшение качества вод в различные сезоны года обусловлено гидрологическим и гидрохимическим режимами, а также трофикой водоемов.

Общее количество мезофильных аэробных, анаэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов (КМАФАнМ) - один из важнейших критериев, необходимый для объективной оценки эпизоотической ситуации экосистемы дельты Волги. Он заключается в изучении окружающей среды в местах промысла, включая мониторинговые наблюдения за состоянием рыбы, необходимость которого отражена в литературе (Novo et al., 1994; Лар-цева, 1998; Бычкова, 2002, Карасева, 2003).

Установлена прямая корреляция между показателями КМАФАнМ воды и рыбы. При этом, общая микробная обсемененность зависела от сезона года, района исследования и состояния организма самой рыбы. Так, на Главном банке обсемененность воды и печени судака имела самые низкие количественные показатели в среднем - 2,8+0,8 тыс.клУмл - в воде и (1,5±0,4) ТЫСКЛ./Г - в рыбе, достигая своих максимальных значений в августе - 4,9±0,5 ТЫСКЛ/МЛ и 2,7±0,3 тыс.кл/г, соответственно. Результаты са-нитарно-микробиологических исследований судака на Гандуринском банке и р. Бузан показали близкие значения обсемененности печени изучаемого объекта - в среднем 3,0 ± 0,4 и 3,4 ± 0,7 тыс. клУг, а количественные микробиологические показатели воды достигали максимальных значений в августе и составляли 7,3 ± 0,7 и 6,6 ± 0,9 тыс.клУмл, соответственно. Следует отметить, что обсемененность воды там оставалась на достаточно высоком уровне и в осенний период: 3,5 ± 0,4 и 5,5 ± 1,1 тыс. клУмл, соответственно, что свидетельствует об экологическом неблагополучии данных районов вследствие значительного антропогенного загрязнения Астраханским газоконден-сатным комплексом и высокой эвтрофикой этих водоемов.

Симптоматично, что обсемененность печени судака была выше весной, составляя в среднем 1,9 ± 0,3 тыс. клУг, а осенью - 1,2 ± 0,5 тыс. клУг, что связано с низкой резистентностью исследуемых объектов в этот сезон года.

При проведении сравнительного анализа глубинного и поверхностного, методов посева при микробиологической оценке рыбы выявлены значительные расхождения в ее результатах. Как правило, при поверхностном посеве показатели обсемененности были выше на порядок, чем при глубинном. Это свидетельствует о необходимости унифицирования методологических подходов при микробиологическом изучении КМАФАнМ как по отечественным, так и по зарубежным стандартам.

3.2. Бактеориоценоз судака в дельте волги и влияние на него различных факторов среды

За период наших исследований из воды и рыбы было выделено 28 видов бактерий, относящихся к 15 родам: Acinetobacter, Aeromonas, Alcali-genes, Bacillus, Citrobacter, Edwardsiella, Enterobacter, Escherichia, Flavobacte-rium, Klebsiella, Moraxella, Proteus, Providencia, Pseudomonas, Salmonella, a также несколько видов и родов несовершенных грибов - Fungi.

В работе приведены характеристики всех выделенных нами видов с указанием частоты их встречаемости в воде и в рыбе, а также литературные данные об их эпизоотической, санитарно-экологической и эпидемиологической значимости

Энтеробактерии. За период исследований выделено 648 штаммов. По числу выделенных родов и видов данное семейство доминировало в микрофлоре судака и в воде дельты Волги, составляя 26,5±0,3 и 24,6+0,3% проб, соответственно. При этом, наиболее часто в рыбе встречали микроорганизмы родов Proteus - 28,9+0,6% и Citrobacter - 22,4+0,3% проб. Обращает на себя внимание довольно редкая встречаемость в воде и рыбе индикаторно-значимых E.coli - 4,6+0,8 и 5,5+0,8% и Salmonella sp. - 3,1+0,4 и 4,3+0,8% проб соответственно, что свидетельствует о продолжающемся антропогенном прессинге на водную экосистему, когда условно-патогенная микрофлора превалирует над индикаторной, что согласуется с литературными данными (Bragg, 1991; Виноградова, 1988; Виноградова, Пархомчук, 1991).

Аэромонады. За период исследования было выделено 517 штаммов бактерий этого рода. Как в воде, так и в рыбе доминировал один вид -A.hydrophila: 26,7+0,8 и 28,2+0,2% проб, соответственно. При этом, Aeromonas sp., A.hydrophila, A.caviae и A.schubertii; чаще выделяли из рыбы, чем из воды, a A.sobria, наоборот, чаще - из воды. В удельном весе всей выделенной микрофлоры аэромонады составляли в воде 20,4+0,4; в рыбе 21,1+0,4% проб. Довольно частым явлением была одновременная высевае-мость 2-х или 3-х видов аэромонад из одного органа, что согласуется с данными, ранее приведенными Л.Н. Юхименко (1998).

Псевдомонады. За период наших исследований из анализируемого материала было выделено 449 штаммов бактерий этого рода. В удельном весе всей выделенной микрофлоры в воде они составляли 17,7+0,6; в рыбе -18,3+0,6% проб. При этом в воде доминировали изоляты Ps.fluorescens - 32,6 + 0,7, а в рыбе - Ps.cepatia 35,7 + 0,7% проб; Ps.putida и Ps.syringae составляли в воде 13,1+0,9 и 23,9+0,7%, а в рыбе 14,1+0,8 и 17,9+0,9% штаммов соответственно.

Флавобактерни. За период исследования было выделено 372 штамма бактерий этого рода, составляющего в удельном весе всей выделенной микрофлоры 16,5+0,5% - в воде и 14,9+0,6% - в рыбе.

При этом, в структуре рода доминировал один вид - F.aquatile 37,2±0,7 и 35,3+0,6% проб, соответственно. Fl.capsulatum, FLferrugincum и Fl.rigense составляли в воде 25,5+0,2; 23,2+0,2 и 14.1 +0,2% проб, а в рыбе 20,7+0,2; 25,8+0,3 и 18,2+0,4% проб, соответственно.

Существенных различий встречаемости доминирующих групп бактерий по районам исследования нами не выявлено. Основными биотопами выделенной микрофлоры были желудочно-кишечный тракт, жабры и почки. Существенное инфицирование крови рыб бактериями группы протея и частая высеваемость из внутренних органов энтеробактеров, эдвардсиелл, про-виденеий, аэромонад и псевдомонад указывает на серьезную бактериемию судака.

Таким образом, близкий коэффициент корреляции между обсеме-ненностью воды и рыбы доминирующими группами бактерий свидетельствует о возможности их использования в качестве тест-индикаторов для оценки санитарно-эпизоотического и экологического состояния водоема.

3.3. Сезонная динамика микрофлоры, выделенной из воды и рыбы

Температурный фактор активизирует или подавляет рост микрофлоры, обусловливая ее сезонную динамику с периодическим доминированием сменяющих друг друга популяций бактерий. Она может характеризовать стабилизацию, рост и снижение обсемененности объектов внешней среды. Сезонная сукцессия характерна для большинства водоемов и является одним из важных показателей устойчивости микробного сообщества, а также степени его приспособленности к условиям обитания, где лимитирующим является термический режим водоема. При повышении температуры низкая концентрация растворенного кислорода в воде вызывает увеличение скорости прохождения воды с содержащимися в ней токсикантами и микробами через жабры и кишечник. Следовательно, время, в течение которого рыба подвергается воздействию вредных веществ и бактерий, увеличивается, т. е. сокращается цикл заражения рыбы микрофлорой, а темп ее обсеменения ускоряется (Ведемейер, 1980; Беляков, Яфаев, 1989; Bragg, 1991; Литвин, 1999).

Особенности сезонного распределения микрофлоры, выделенной из воды и рыбы, отражают динамику их гетерогенности и регулирования в водной экосистеме. Выявлены ярко выраженная цикличность, эпизоотические подъемы и спады, характеризующие стабилизацию, рост и снижение обсеменения объектов окружающей среды. Так, доминирующие в анализируемом материале энтеробактерии достигали максимума в своем развитии летом, составляя в воде и рыбе 35,3+0,8 и40,7+0,7% проб, соответственно. При этом цитробактеры составляли 26,5+0,3 и 20,6+0,5%, протеи 35,6+0,2 и 23,2+0,8% проб в структуре семейства. Весной отмечена несколько повышенная обсемененность энтеробактериями рыбы по сравнению с водой, в

среднем в 1,2 раза, что обусловлено ослабленным физиологическим статусом судака в пред- и посленерестовый период.

Сезонная цикличность аэромонад связана с эвтрофикой водоема и природно-климатическим фактором, комплекс которых обусловливает плавное изменение их численности. Максимум развития бактерий этого рода в воде и рыбе был отмечен летом, достигая 23.5+0,6 и 25,2+0,4% проб, соответственно. При этом в рыбе доминировали Aeromonas sp. - 24,5+0,8 и Ahydrophila - 30,6+0,9% проб. Симптоматично, что пик аэромонадных инфекций у людей, вызванных A.hydrophila, в Астраханской области приходился на лето и раннюю осень (Бойко, 1998; Журавлева, 1998). В эти сезоны года нами установлено незначительное преобладание аэромонад в рыбе, по сравнению с водой, что, по всей вероятности, произошло за счет пассирования по трофическим звеньям через рыбу, которой питался судак в это время. Следовательно, природные и физиологические факторы обеспечивали функциональное развитие аэромонад и обусловили благоприятные условия их более частой встречаемости в рыбе, чем в воде. При анализе материала обращает на себя внимание ярко выраженная сезонная цикличность развития неферментирующих псевдомонад и флавобактерий с максимумами развития весной и осенью с небольшим преобладанием в воде.

Ацинетобактеры, моракселлы, алкалигенесы в анализируемом материале выделялись примерно на одном уровне без каких-либо сезонных пиков. Бациллы и грибы несколько превалировали в весенний период за счет паводковых вод, насыщенных взвешенными веществами органического и неорганического происхождения и подтопления береговой зоны, влекущей за собой попадание почвенной флоры в водную экосистему.

Таким образом, полученные данные свидетельствуют о сезонной неоднородности и гетерогенности микробных популяций в гидроэкосистеме, цикличность которых необходима им для саморегуляции своей численности.

3.4. Изучение галотолерантности выделенной микрофлоры

В результате экспериментального анализа нами установлена значительная галотолерантность всей выделенной микрофлоры, причем жизнеспособность рыбных штаммов была несколько выше, чем у водных. Самые высокие показатели толерантности были зарегистрированы в 3,0 и 7,0 % растворе хлорида натрия - в 80,0 и 36,0% случаев соответственно.

Обращает на себя внимание значительная устойчивость к солевым растворам грампозитивных бацилл. Так, в 3,0 % концентрации жизнеспособными оставалась 76,7 % штаммов. С увеличением концентрации соли до 7,0 и 10,0 % выживаемость этих микроорганизмов снижалась в среднем в 1,6 раза. Изолированные нами грибы ингибировал только 20,0% раствор Nad, т. е. у этой группы микро- и микофлоры, нежелательной в гигиеническом

плане, достаточно много шансов оставаться жизнеспособными вплоть до готовой продукции.

Доминирующие в воде и рыбе в весенний и осенний сезоны псевдомонады и флавобактерии несколько преобладали в биопрофиле водных штаммов. Однако рыбные штаммы этих микроорганизмов были галотоле-рантнее водных в 2,0 и 2,4 раза, соответственно (Р<0,05), что, по-видимому, связано с миграциями весной и ранней осенью из Северного Каспия в реку судака, который уже был контаминирован морской флорой. В пользу этого свидетельствуют данные о близких показателях галотолерантности рыбных и водных штаммов в летний сезон. В связи с этим можно предложить, что галотолерантность микрофлоры может быть индикатором популяционной структуры рыб.

3.5. Изучение факторов патогенности выделенной микрофлоры (протеаза, лецитиназа, гемолизин, ДНКаза)

Антропогенный прессинг на окружающую среду приводит к изменению условий существования бактерий, активизируя их адаптационные механизмы, которые сопровождаются процессами изменчивости микробов. В первую очередь - это факторы патогенности, которые выполняют двойную функцию, обеспечивая выживание паразита как в организме, так и во внешней среде (Бойко, 1998; Бухарин, 1999). Следовательно, изучение патогенных свойств бактерий, играющих роль адаптивных факторов - неотъемлемая часть микробиологических исследований.

Известно, что с помощью ферментов протеиназ и лецитиназ бактерии преодолевают тканевые барьеры, расщепляют белковые молекулы и при интенсивном размножении в рыбе определяют ее автолиз, порчу и различные патологические процессы (Катор, 1982;Ы81ои, 1988, 1990).

В результате проведенных нами исследований выявлено, что гидрофлора обладала более высокими значениями протеолитической и лецитиназ-ной активности (в 1,4 и 1,2 раза соответственно), чем выделенная от рыб.

Гемолитическая активность (феномен Канагава), т. е. способность микроорганизмов разрушать человеческие эритроциты - свидетельство эпидемиологической опасности бактерий для человека. В отличие от протеазы и лецитиназы, преобладающих у водных штаммов микроорганизмов, гемолитической активностью обладали почти на одном уровне штаммы, выделенные как из воды, так и из рыбы, соответственно в 20,1 ± 0,7 и 18,8 ± 0,8% случаев. Следовательно, независимо от происхождения культуры, микрофлора, персистирующая в водной экосистеме дельты Волги, представляет определенную эпидемиологическую опасность для человека.

Особую привлекательность как маркер патогенности имеет ДНКаз-ная активность аэромонад, поскольку подтверждена ее близкая корреляция со способностью вызывать патологические процессы у рыб и человека

(Юхименко, 1988; Camahan et al., 1989; Cercenado, 1989; Бойко, 1998). Полученные нами результаты показали, что ДНКаза у штаммов, выделенных из воды обнаружена в 70,3+0,6%, а из рыбы - в 66,0+0,4% случаев. Следовательно, миграция аэромонад по схеме вода-рыба-вода осуществляется по пищевым звеньям или в результате влияния биотических и абиотических составляющих водной экосистемы. По-видимому, благодаря именно ДНКазе аэромонады способны эффективно адаптироваться к организму рыб, вступая с ними в различные симбиотические отношения.

Результаты анализа сезонной динамики маркеров патогенности показали ее динамичное нарастание у рыбных штаммов выделенных нами микроорганизмов. При этом гидромикрофлора посезонно практически не изменяла показателей своей патогенности. Это согласуется с принципом экологической детерминации факторов патогенности по О.В. Бухарину (1999) и служит не только инструментом сохранения видов, но и обеспечивает устойчивость их систем. Ее необходимость проявляется, прежде всего, при контакте с популяцией хозяина, в данном случае с рыбой. Так, протео-литическая активность всей микрофлоры, выделенной от судака, возрастала от весны к осени в 1,3; лецитиназная, гемолитическая и ДНКазная - в 1,2 раза. Здесь наглядно прослеживается связь нарастания факторов патогенно-сти с улучшением физиологического статуса рыб, связанная с их летним и осенним нагулом. В то же время, высокая патогенность бактерий в данный период обусловливает их эпидемиологическую значимость для людей в Астраханской области (Погорелова с соавт., 1995; Бойко, 1998).

Симптоматично, что A.hydrophila, доминирующая в нашем материале и в сазане, исследуемом ранее (Ларцева, 1998), в 30,0% случаев имела самую высокую ДНКазу (от 1,0 до 4,0 мм) с июня до середины октября. Доминантами патогенных свойств у энтеробактерий были лецитиназа, за исключением протеев, которые лидировали по протеазе. У псевдомонад и фла-вобактерий в основном регистрировалась протеаза. Бациллы и грибы имели более чем в 50,0% случаев протеазу и лецитиназу.

Таким образом, учет набора факторов патогенности и (или) нерси-стенции позволяет характеризовать конкретный штамм микроорганизма по способности образовывать паразитарные системы, т.е. экологическое благополучие водоемов может тестироваться микробиологическими методами.

3.6. Изучение антибиотикорезистентности выделенной из воды и рыбы микрофлоры

Изучение антибиотикорезистентности микрофлоры является логическим завершением бактериологических исследований в области биологии, ветеринарии, медицины. Антибиотикорезистентность приобретается микроорганизмами в качестве защитного фактора от изменений окружающей среды, обусловленных техногенным прессом (Мойсеенко, 1994). Наши иссле-

дования показали, что микрофлора, обсеменяющая судака и воду, обладала множественной антибиотикорезистентностью. Выделенные микроорганизмы проявляли максимальную чувствительность к левомицетину 2,7±0,2; затем -к тетрациклину -9,7±0,4, стрептомицину -15,6±0,6, фурадонину- 16,5±0,4 и ампицилину -79,5+0,6% случаев. Минимальная чувствительность у всех бактерий была зарегистрирована к бензилпенициллину — 96,0+0,6%. Следовательно, наличие маркеров патогенности и антибиотикорезистентности у выделенных микроорганизмов свидетельствуют об их высоких адаптационных возможностях, что позволяет им длительно персистировать в объектах окружающей среды, т. е. в воде и гидробионтах.

3.7. Изучение биологических свойств некоторых условно патогенных микроорганизмов в результате взаимодействия с солями тяжелых металлов

Тяжелые металлы являются главной компонентой в загрязнении Волго-Каспийского бассейна. Попадая в водоемы со сточными водами промышленных предприятий, они вызывают необратимые изменения природных экосистем. В условиях природного и антропогенного загрязнения особую значимость приобретают методы контроля состояния водной среды, которые сочетают быстроту, информативность, доступность и широкомас-штабность. Такими возможностями обладают методы биотестирования, которые позволяют оценить биологическую опасность загрязнения вод токсическими веществами (Никаноров, 1991,2000; Орлов, 2002).

В последние годы внимание исследователей привлекли микроорганизмы, которые могут быть тест - объектами, поскольку обладают рядом преимуществ: они сравнительно легко культивируются, могут быть получены в форме однородного материала, чувствительного к токсикантам, не уступая другим организмам. Эти отличительные свойства водных бактерий открывают перспективу их более широкого использования в биоиндикации, а также в комплексе исследований, связанных с охраной гидроэкосистемы от загрязнения (Дмитриева, Безвербная, 2002).

В связи с этим нами были изучены биологические свойства некоторых условно-патогенных микроорганизмов при их взаимодействии с солями тяжелых металлов.

Сульфид кадмия (CdSO)

Результаты проведенных нами экспериментов показали, что все используемые концентрации соли кадмия (5, 10 и 20 мг/л) оказывали ингиби-рующее действие на испытуемые штаммы (Citrobacter freundii, Aeromonas hydrophyte авирулентный и вирулентный штаммы). Однако, наиболее устойчивым к действию соли был цитробактер, численность которого даже при максимальной концентрации металла - 20 мг/л уменьшилась только в 1,8 раза по сравнению с контролем.

Самым чувствительным оказался авирулентный штамм Л.ЬуёгорЬу1а, количество колоний которого, выросших на селективной среде (МПА) с 20 мг/л сульфида кадмия, сократилось в 8,4 раза, по сравнению с контролем, а Л.ЬуёгорИу1а вирулентный - только в 2,1 раза. В концентрации соли кадмия 10 и 20 мг/л нами было отмечено изменение морфологических признаков - замедление роста и уменьшение примерно в 1,5 раза размеров колоний авирулентных аэромонад. У С.1теипёи и Л.ЬуёгорИу1а с патогенными свойствами данные признаки были на уровне контроля.

Сульфиды меди и цинка (CuSO, ZnSOl).

Данные соли стимулировали рост всех штаммов бактерий, используемых в опыте. Наиболее устойчивым был штамм Л.ЬуёгорИу1а, обладающий протеолитической, гемолитической, лецитиназной и ДНКазной активностью. Его численность была выше, чем в контроле при всех концентрациях сульфидов, достигая максимальных величин при 10 мг/л Си804 и 5 мг/л /п804, увеличиваясь в 1,6 и 3,5 раза, соответственно. Максимальное отклонение количества колоний цитробактера зарегистрировано при 5 мг/л солей меди и цинка и было в 2,1 и 3,2 раза больше, чем в контроле. При этом, самым восприимчивым к действию этих сульфидов был авирулентный штамм Л.ЬуёгорИу1а; соли оказывали на него стимулирующее действие, увеличивая численность колоний при 10 мг/л Си804 и /п804 в 8,8 и 9,3 раза по сравнению с контролем. Следует отметить, что содержание цинка в селективной среде (МПА) значительно повлияло на морфологию колоний авирулентной аэромонады. В контроле диаметр колоний не превышал 0,5 см, при 5 и 20 мг/л /п804 их размеры увеличились до 0,6-0,8 см, а при 10 мг/л - от 1,5 до 3,0 см. Сульфид меди не оказал значительного влияния на морфологические признаки этого штамма: даже при 20 мг/л Си804 размеры колоний были на уровне контроля - 0,5 см. У вирулентного штамма Л.ЬуёгорИу1а при всех концентрациях солей меди и цинка колонии были одинаковых размеров, соответствующие контролю. С.йшпёи при 5 мг/л Си804 и 10, 20 мг/л /п804 стал более подвижно-активным, т. е. колонии срослись, образуя одну сплошную массу по всей чашке Петри.

При изучении влияния солей тяжелых металлов на изменение их патогенных свойств установили, что штамм вирулентных аэромонад сохранял свои патогенные свойства на уровне контроля, кроме ДНКазной активности, которая снизилась при 20 мг/л сульфидов меди и кадмия с 4,0 до 3,0 мм. У авирулентного штамма Л.ЬуёгорИу1а при 10 мг/л /п804, 5 и 10 мг/л Си804 появилась слабовыраженная лецитиназная активность, на уровне 1 мм. У С.1теипёи при 10 мг/л сульфида кадмия зарегистрирована гемолитическая активность, отсутствующая в контроле.

Таким образом, полученные результаты свидетельствуют о высокой металло-устойчивости природных микроорганизмов (аэромонад и цитробак-тера), связанной, по-видимому, с постоянно повышенным фоном данных

металлов в водах Волго-Каспийского бассейна. Установлена способность условно-патогенной микрофлоры сохранять и даже приобретать некоторые патогенные свойства при высоких концентрациях сульфидов тяжелых металлов (Сё, /п).

3.8. Факторы, определяющие бактериальную контаминацию внутренних органов судака естественной популяции и в условиях искусственного выращивания

Болезни рыб, возникающие как в естественных, так и в искусственных водоемах, наносят значительный ущерб рыбному хозяйству. Особенно остро встает эта проблема в современном рыбоводстве. Так, ущерб от болезней при искусственном выращивании по отдельным возрастным группам рыб может составлять 100%. В естественных водоемах болезни рыб наблюдаются сравнительно редко, хотя их роль в регулировании численности популяций водных организмов довольно заметна. Многими авторами, как отечественными, так и зарубежными, особо подчеркивается, что при ухудшении среды обитания в естественной среде или нарушении биотехники выращивания снижается резистентность организма рыбы, тем самым, нарушая симбиотические взаимоотношения (паразит-хозяин) с окружающей микрофлорой в сторону заболевания (Тапака й а1., 1992; ОаМЫег, 1993; Ларцева, 1998; Бычкова, 2002; Головина с соавт., 2003; Карасева, 2003)..

Бактериальная контаминация внутренних органов связана с температурным фактором среды и состоянием рыбы. В процессе эксплуатации прудов в случае неблагополучного их санитарно-гигиенического состояния с ростом численности бактерий наступает момент, когда организм рыбы перестает справляться с растущей агрессивностью среды, в результате чего в паренхиматозных органах появляются бактерии, что свидетельствует не только о высоком бактериальном прессинге воды, но и о снижении резистентности организма рыбы (Юхименко, 1987; 2000). В связи с этим целесообразно проведение комплексного санитарно-микробиологического исследования, необходимого для объективной оценки эпизоотического состояния рыбной популяции, особенно представителей тех, которые используются в рыбоводной практике.

Установлено, что зараженность судака дерматофибросаркомой в различных дельтовых и авандельтовых районах р. Волги колебалась от 0,2 (2001 г.) до 11,0% (1994 г.). Рыбы, пораженные этим заболеванием, по всем санитарно-ветеринарным требованиям должны выбраковываться, что часто не соблюдается в условиях промысла и при заготовке производителей для рыбоводных целей. Усугубляется положение и неблагополучием самих прудов, которые десятилетиями не летуются и сильно заилены.

Бактериоценоз судака, больного дерматофибросаркомой, мало чем отличался от здорового. Исключение составили только эдвардсиеллы, кото-

рые редко, но встречались в здоровой рыбе, а у больной отсутствовали в микробном фоне. Мышцы больного судака в зоне поражения были инфицированы в 100 раз выше, чем у здоровой рыбы, а печень больных рыб - в 10 раз больше, чем здоровых. Симптоматично, что ДНКаза аэромонад, обсеменяющих больную рыбу была в 2 раза ниже, чем у здоровых, что по-видимому, связано с сильно ослабленным организмом пораженных особей. Как следствие, после зимовки в разные годы выживает около 40-60% заготовленных производителей.

При разгрузке зимовалов в начале апреля произошло существенное снижение (почти в 2 раза) в микробном профиле рыбы энтеробактерий, среди которых зимовку «пережили» цитробактеры, протеи и провиденсии, удельный вес которых снизился в 1,9; 1,7 и 1,6 раза по отношению к осенним показателям. Доминирующие изначально аэромонады и псевдомонады в органах судака после зимовки оставались на прежнем уровне, а количество флавобактерий увеличились в 1,2, бацилл - 2,2, грибов - в 2,4 раза против осенних значений. Следовательно, факторами, детерминирующими сохранение некоторых условно-патогенных микроорганизмов (аэромонад и псевдомонад), а также значительное увеличение грампозитивных бацилл и грибов, были абиотические факторы. Комплекс неблагоприятных факторов внешней среды естественно снизил резистентность рыб и обусловил повышение количественных показателей обсемененности печени и мышц рыб в 15 и 30 раз, соответственно, по сравнению с осенними данными.

Ахтериоз судака вызывает рачок АсЫЪегез регеагиш, обусловливающий обширные повреждения жаберного аппарата, ведущие к нарушению газообмена и снижению сопротивляемости организма к вторичным заболеваниям, в частности, сапролегниозу. При высокой инвазированности жабр этими ракообразными происходит усиленное ослизнение, разрушение респираторного эпителия лепестков и, как следствие, нарушение газообмена (Ларцева с соавт., 2002)..

С 2000г. наблюдали изменение локализации ахтериса. Так у 72,0% инвазированных рыб, кроме жабр, были поражены ротовая полость и глотка. Вероятно это связано с продолжительной неблагоприятной токсикологической обстановкой на водоеме и перемещением паразита в более «спокойную» экологическую нишу (Ларцева с соавт., 2002).

В связи с этим научный и практический интерес представляли микробиологические исследования обсемененности жабр судака в динамике от заготовки производителей на тоне до окончания зимовки в прудах. В результате осенью во время заготовки производителей было установлено увеличение на два порядка микробной обсемененности жабр рыб, сильно пораженных патогенными рачками, по сравнению со слабо зараженными -(6,4±0,3) х106 против (9,5±0,7) х 104 КОЕ/г. Следовательно, у пораженных рыб с высокой степенью инвазии мало шансов пережить зимовку.

Жабры перезимовавших рыб при одном уровне инвазированности (2-4 рачка) были обсеменены на порядок выше осенних показателей -4,7 ± 0,6 х 105, против 9,5 ± 0,7 х Ю4 КОЕ/г. Увеличение в удельном весе микрофлоры бацилл и грибов в 2,2 и 2,4 раза, соответственно, в зимний период не могло не оказать негативного воздействия на организм рыб в целом. Следовательно, весенняя заготовка производителей этого вида рыб была бы предпочтительнее и проходила бы с меньшими потерями. Полученные нами результаты свидетельствуют о необходимости в любом случае проводить жесткий отбор производителей при их заготовке и просматривать жабры рыб на наличие рачков. При выявлении характерной картины заболевания сильно пораженных особей следует выбраковывать.

Таким образом, проведение бактериологического исследования позволило не только выявить основные группы микроорганизмов, участвующих в развитии патологических процессов у рыб, но и проследить их нарастание и изменение в динамике, а также выявить факторы, способствующие их сохранению и развитию.

Анализ полученных данных показывает, что оптимизацией и отработкой технологического процесса можно существенно снизить развитие септического процесса рыб, а иногда просто его не допустить. Результаты проведенных исследования послужили основанием для написания двух рекомендаций по профилактике дерматофибросаркомы и ахтериоза судака, которые отправлены на рассмотрение и утверждение в Департамент ветеринарии Минсельхоза РФ.

3.9. Результаты биопробы на белых крысах по влиянию на их организм мяса больного дерматофибросаркомой судака

Целью проводимой работы являлось выяснение патогенного воздействия мяса судака, пораженного дерматофибросаркомой (ДФС) на организм теплокровных животных.

В результате проведенных экспериментов было показано, что при включении в рацион питания теплокровных опухолевых тканей судака, истинных бластом не образуется. Однако, при этом происходило общетоксическое воздействие на организм. Патологические изменения, в основном, обнаруживались в кишечнике. В случае индуцированного иммунодефицита, явления токсического воздействия имели наиболее яркую картину. В патологический процесс вовлекались печень, почки и легкие крыс.

Таким образом, мясо больного судака представляет опасность для теплокровных при употреблении его в пищу, особенно на фоне угнетенного иммунитета. В связи с этим, рыбу, пораженную дерматофибросаркомой не рекомендуется употреблять в пишу и скармливать животным.

ВЫВОДЫ

1. Установлена устойчивая динамика количественных показателей микробных сообществ дельты Волги, эколого-микробиологическое состояние которой зависит от сезонных изменений, гидролого-гидрохимических режимов и трофики водоемов. Выделены районы с активной антропогенной нагрузкой - р. Волга в черте города, pp. Ахтуба и Бузан, характеризующиеся повышенным содержанием гетеротрофной микрофлоры и низкими значениями индекса трофности в течение всего вегетационного периода.

2. Количественно-качественный состав микрофлоры судака обусловлен образом его жизни, типом питания, способом и районами лова. Установлена прямая корреляция между общей микробной обсемененностью воды и рыбы. Одним из ведущих факторов в развитии микроорганизмов, определяющим ее видовой и количественный состав, является температура воды и состояние резистентности самой рыбы. Как следствие, обсеменен-ность ее печени весной была выше, чем осенью.

3. Установлено, что в бактериоценозе гидроэкосистемы дельты Волги доминировали энтеробактерии (протеи и цитробактеры), аэромонады и флавобактерии. Всего из воды и рыбы выделены бактерии 15 родов, относящихся к 28 видам, а также несовершенные грибы. В исследуемой гидроэкосистеме сезонные изменения выделенной условно-патогенной микрофлоры (энтеробактерий и аэромонад) характеризовались активизацией в летне-осенние месяцы. Пики развития флавобактерии и псевдомонад приходились на весну и осень - периоды промысла в дельте Волги.

4. Наличие факторов патогенности (протеазы, лецитиназы, гемолизина и ДНКазы у аэромонад) с более высокими показателями у гидромикрофлоры по нарастающей от весны к осени, галотолерантность и множественная антибиотикорезистентность позволяют определить степень опасности для рыб и прогнозировать эпизоотическую, а также эпидемиологическую обстановку на водоеме.

5. Установлена способность условно-патогенной микрофлоры не только сохранять, но даже приобретать некоторые патогенные свойства при высоких концентрациях сульфидов тяжелых металлов кадмия, меди и цинка, а также изменять свою морфологию, в некоторых случаях значительно увеличивая размеры колоний, что обеспечивает выживание этих микроорганизмов в неблагоприятных экологических условиях.

6. В качестве индикаторных организмов экологического и санитарного состояния гидроэкосистемы дельты Волги целесообразно использовать бактерии A.hydrophila; родов Proteus и Citrobacter.

7. Факторами, определяющими распространенность условно-патогенных бактерий и обсемененность ими органов и тканей судака являются:

- обсемененность воды в районах его обитания, антропогенная трансформация и эвтрофирование водоемов;

- заболевания рыбы инфекционной и инвазионной природы (дерма-тофибросаркома и ахтериоз), снижающие резистентность ее организма;

- нарушения биотехники разведения - отсутствие выбраковки больных особей при посадке производителей в пруды, антисанитарное состояние последних в комплексе инициируют повышенную микробную обсеменен-ность рыбы и обусловливают ее высокий отход за период зимовки.

8. При включении в рацион крыс мяса, пораженного дерматофибро-саркомой судака, у них отмечали патологические изменения сначала в тканях кишечника, а затем в тканях почек и легких.

9. В результате проведенных исследований подготовлены рекомендации по профилактике дерматофибросаркомы судака в естественных водоемах и по борьбе с ахтериозом судака в прудовых хозяйствах.

Список опубликованных работ по теме диссертации:

1. Ларцева О.В., Мижуева С.А Разработка рациональных технологических приемов обработки сырья из промысловых рыб Волго-Каспия //Сб. тезисов докл. 49-ой студенческой научно-практической конференции. - Астрахань, 1999. - С. 45-46.

2. Лисицкая И.А., Болдырева ЯМ., Ларцева Л.В., Ларцева О.В. Микрофлора судака и среды его обитания //Тез. докл. Всерос. Конф. молодых ученых "Рыбохозяйственная наука на пути в 21 век". Владивосток, 2001. -С. 100-101.

3. Егоров С.Н., Курапов А.А., Болдырева Я.М., Обухова О.В. Влияние волжского стока на санитарно-экологическое состояние водной экосистемы Северного Каспия //Тез. докл. Всерос. научно-практ. конф. «Проблемы патологии, иммунологии и охраны здоровья рыб и других гидробио-нтов». - Москва, 2003. - С. 40-41.

4. Болдырева Я.М., Обухова О.В., Лисицкая И.А. Особенности маркеров патогенности аэромонад, инфицирующих судака в дельте Волги в условиях антропогенного воздействия // Тез. докл. Всерос. научно-практ. конф. «Проблемы патологии, иммунологии и охраны здоровья рыб и других гид-робионтов». - Москва, 2003. - С. 17-18.

5. Обухова О.В., Егоров С.Н. Эколого-микробиологический скри-пинг Волго-Ахтубинской поймы // Тез. докл. Межд. молодежи, конф. «Экологические проблемы крупных рек-3». - Тольятти: ИЭВБ РАН, 2003. - С. 208.

6. Обухова О.В. Эколого-микробиологические показатели водных экосистем Волго-Ахтубинской поймы // Тез. ежегод. научно-практ. конф. молодых ученых. - Астрахань, 2003. - С. 39.

Р-8088

Тип. АИСИ Зак. 260. Тир. 100 12.04.04 г.

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Обухова, Ольга Валентиновна

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Физико-географическая характеристика Астраханской области.

1.2. Экологическая обстановка Волго-Каспийского бассейна.

1.2.1. Экологическая обстановка водотоков дельты р.Волги.

1.2.2. Экологическая обстановка акватории Северного Каспия.

1.2.3. Влияние антропогенного загрязнения на биопродуктивность дельты Волги и Каспийского моря.

1.2.4. Использование гидробиологического мониторинга для оценки качества вод.

1.3. Биологическая характеристика исследуемого объекта.

1.4. Распространенность условно-патогенной микрофлоры в промысловых и культивируемых рыбах, а также в среде их обитания.

ГЛАВА 2 МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ

2.1. Методы отбора и обработки проб при эколого-микро-биологическом мониторинге.

2.2. Методы выделения и видовой идентификации условно-патогенных микроорганизмов.

2.3. Методы определения факторов патогенности, галотоле-рантности и антибиотикорезистентности у выделенной микрофлоры и влияние на нее тяжелых металлов.

2.4. Методы глубинного и сравнительного поверхностного посева, принятого в странах ЕС.

2.5. Методы проведения биологической пробы на белых крысах.

ГЛАВА 3 РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1. Эколого-токсикологическая оценка воды дельты Волги. 2 Бактериоценоз судака в дельте Волги и влияние на него различных факторов среды. Сезонная динамика выделенной из воды и рыбы микро

J«J« 1 S mJ флоры.

3.4. Изучение галотолерантности выделенной микрофлоры.

3.5. Изучение факторов патогенности выделенной микрофлоры (протеаза, лецитиназа, гемолизин, ДНКаза).

3.6. Изучение антибиотикорезистентности выделенной из воды и рыбы микрофлоры.

3.7. Изучение биологических свойств некоторых условно-патогенных микроорганизмов в результате взаимодействия с солями тяжелых металлов.

3.8. Факторы, определяющие бактериальную контаминацию внутренних органов судака естественной популяции и в условиях воспроизводства.

3.9. Результаты биопробы на белых крысах по влиянию на их организм мыса больного дерматофибрасаркомой судака.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Бактериоценоз воды и судака (Stizostedion lucioperca) в дельте Волги"

Среди внутренних морей России Каспий занимает особое место. В настоящее время он дает 40,0% рыбы, добываемой во внутренних водоемах России, и лидирует по уловам ценных видов рыб пресноводного комплекса (судака, леща, сома, щуки и др.). Уникальность его рыбных богатств определяется сосредоточением основных мировых запасов осетровых видов рыб (70,0%). В Волго-Каспийском рыбопромысловом районе добывается более 60,0% всех рыб, обитающих на Каспии. Поэтому Россия, более чем другие прикаспийские государства, заинтересована в сохранении запасов ценных промысловых видов рыб и их устойчивой эксплуатации (Карпюк с соавт., 2002).

Каспийское море - целостная природная геосистема, в которой сложно воздействуют геологические, гидроклиматические, антропогенные и космические факторы. Каспийское море - это своего рода центр наибольшей на нашей планете впадины, более того, - это реликт, донесший до настоящих дней уникальную фауну и флору. Его рыбное богатство доступно всем прикаспийским государствам. Этот водоем не раз становился важным и надежным источником белкового питания людей, спасая их от голода в периоды засухи, эпидемий, социально-политических катаклизмов. Рыбные богатства Каспия -итог своеобразного сочетания условий, определяющих высокий уровень его биологической продуктивности уникального состава ихтиофауны. Между тем, в загрязнении Каспийского моря, особенно акватории Северного Каспия, являющейся основным местом нагула всех промысловых видов рыб и их молоди, речной сток является основным носителем аллохтонных веществ, широкого ассортимента производственных, коммунально-бытовых сточных вод. Многокомпонентное загрязнение Каспийского моря стало действенным фактором в изменении санитарно-гигиенической и экологической обстановки среды обитания многих промысловых объектов (Салманов, 1999).

В связи с этим, основной задачей в области охраны этой окружающей среды является сохранение биоразнообразия, продуктивности водных и прибрежных экосиситем, а также рыбохозяйственного потенциала Каспийского бассейна как уникального рыбопромыслового региона страны (Курапов, Ревякин, 2002).

Под охраной окружающей среды в соответствии с Федеральным законом «Об охране окружающей среды», введенным в действие в январе 2002г., подразумевается деятельность, направленная на сохранение и восстановление природной среды, рациональное использование и воспроизводство природных ресурсов, предотвращение негативного воздействия хозяйственной и иной деятельности на окружающую среду, которая является основополагающей при проведении экологического мониторинга на водоеме. Основными задачами последнего являются: наблюдения за происходящими в окружающей внешней среде физическими, химическими и биологическими процессами, уровнем загрязнения и последствиями этого влияния на растительный и животный мир.

Как показали результаты мониторинговых исследований, на протяжении многих лет гидроэкосистема дельты Волги находилась в состоянии «антропогенного напряжения с элементами экологического регресса» (Катунин с соавт., 1999; 2001; Курочкина с соавт., 2002).

В связи с поднятием уровня Каспия в Астраханской области в зоне подтопления оказалось более 10 населенных пунктов с их разнообразными хозяйственно-бытовыми отходами, что обусловило ухудшение санитарно-эпидемической обстановки в дельтовых районах, поэтому возрастает и будет возрастать угроза распространения инфекционных заболеваний водного происхождения (Полунин с соавт., 1995). Между тем анализ многолетней динамики заболеваемости кишечными инфекциями по дельтовым районам Астраханской области выявил синхронность между возрастанием заболеваемости людей кишечными инфекциями и уровнем подъема Каспия; временем и сроками половодья и межени (Буркин с соавт., 1995). В то же время, как показали литературные данные, формирование микробиоценозов воды и рыбы зависит от многочисленных биотических и абиотических факторов, которые включают широкий спектр параметров и определяют общий фон их существования. Качественный состав и количественные показатели микрофлоры принимают как конечный результат взаимодействия всех ингредиентов экосистемы в совокупности и используют в качестве индикатора для оценки санитарно-эпизоотического состояния водоема (Ларцева, 1998; Бычкова, 2002; Карасева, 2003).

Способность автономного существования в водной экосистеме и возможность персистирования различных бактерий, в том числе патогенных и условно-патогенных, по трофическим звеньям: фито-зооплактон, рыба, свидетельствует об актуальности и высокой информативной значимости микробиологических исследований различных гидробионтов и среды их обитания. В воде и рыбе микроорганизмы могут персистировать (переживать) длительное время, используя эти экологические ниши как факторы своего заразного начала. При этом метаболизм их меняется, но они не утрачивают свою патоген-ность, попадая вновь в привычную для них среду теплокровных (Ganthier, 1993; Литвин, Пушкарева, 1994; Авчинников, 2000).

Следует отметить, что важным экологическим фактором, определяющим стабильность системы «паразит-хозяин», является регуляция плотности популяции паразита и хозяина, которая осуществляется по пути отрицательной обратной связи. Немаловажный аспект паразитизма (в широком смысле его значения) включает исследование особенностей паразита среди популяции хозяина и внутри популяции (место локализации), оценку динамики роста популяций паразита и хозяина, а также изучение регулирующего действия факторов внешней среды (Кеннеди, 1978; Беляков, Яфаев, 1989).

Все ценные промысловые виды рыб связаны между собой отношениями типа «хищник-жертва», конкуренцией, обменом различными паразитическими организмами, в том числе, бактериями. Таким образом, они составляют одну систему и взаимодействуют со средой как единое целое. Однако в изменяющихся условиях гидроэкосистемы важнейшие параметры ее состояния, прямые и обратные связи между ее компонентами гетерогенны и подвержены изменчивости. При этом ихтиопатологическое состояние является важным мобильным фактором, влияющим на формирование биологических ресурсов в водоеме (Иванов, 2000).

Многообразное местообитание судака в Волго-Каспийском регионе (от Северного Каспия до верховых зон Волго-Ахтубинской поймы), тип питания, обусловливают разнообразие его бактериоценоза, часто отличающегося от других рыб и других районов, что требует специфического подхода с учетом особенностей исследуемого региона. Следует отметить, что энтеробактерии, аэромонады, вибрионы в Волго-Каспии играют особую эпидемиологическую значимость. Так, аэромонадные инфекции людей зарегистрированы до 23,0% случаев от всех выявленных острых кишечных инфекций — ОКИ (Бойко, 1998). Длительное антропогенное давление на окружающую среду, в частности, на гидроэкосистему, приводит к изменению условий существования бактерий, что, в свою очередь, включает адаптационные механизмы этих микроорганизмов, приводит к активизации факторов, способствующих их циркуляции в различных объектах окружающей среды и сопровождается процессами изменчивости микробов. По-видимому, как следствие этого процесса может.быть повышение их вирулентности, антибиотикорезистентности, появление атипизма, например, капсулообразование (Бойко, 1998; Журавлева, 1998; Юхименко с соавт., 1998). Поэтому одной из задач профилактики бактериозов и бактерионосительства, обусловленных возбудителями сапронозных инфекций, является выявление районов окружающей среды, являющихся источником или резервентом возбудителей - это определяет особый интерес с ихтиопатологической и медицинской точек зрения.

Определенную практическую значимость имеет формирование микробного фона судака, используемого в рыбоводных целях, в частности, при поражении его опухолевым и инвазионными заболеваниями, т.к. этот вид рыбы имеет большую значимость в диетическом и лечебном питании населения.

Все вышесказанное определяет актуальность изучения основных аспектов формирования бактериоценозов этой ценной рыбы и среды ее обитания.

Многие вопросы, касающиеся условий и факторов, определяющих патоген-ность, условно-патогенных микроорганизмов, способность к персистенции, па-разитированию и антибиотикорезистентности остаются малоизученными, особенно в регионе с напряженной экологической обстановкой.

Цель исследования - изучение бактериоценоза воды и судака (Stizostedion lucioperca) в дельте Волги, микробиологических и экологических факторов, детерминирующих распространенность и образование паразитарных систем условно-патогенных микроорганизмов. Разработка профилактических рекомендаций по снижению уровня бактериемии рыб в природных и искусственных условиях.

Задачи исследования:

1. Оценить качество вод Волго-Ахтубинской поймы и дельты р. Волги по эколого-микробиологическим показателям.

2. Изучить количественный и качественный состав микрофлоры судака и среды его обитания; выявить доминирующие группы микроорганизмов и их распространенность в дельте Волги по сезонам и годам.

3. Исследовать признаки, характеризующие патогенность и способность к персистированию основных групп бактерий и определить их диагностическую ценность для ихтиопатологического анализа.

4. Изучить влияние некоторых распространенных в дельте Волги тяжелых металлов на чистые культуры доминирующих групп микроорганизмов.

5. Проанализировать влияние стрессовых факторов среды на развитие бактериемии судака в естественных условиях и при использовании его в рыбоводных целях.

6. Разработать рекомендации по снижению микробной обсемененно-сти судака в естественной популяции и в условиях воспроизводства.

Автор выражает огромную благодарность научному руководителю, к.б.н., старшему научному сотруднику лаборатории ихтиопатологии ВНИИПРХ Людмиле Николаевне Юхименко за руководство, практическую помощь в исследовательской работе и в подготовке диссертационной работы, зав. лабораторией научной диагностики болезней рыб КаспНИРХ д.б.н. Ларцевой Л.В. и всем сотрудникам этой лаборатории за помощь и возможность проведения бактериологических работ.

Заключение Диссертация по теме "Гидробиология", Обухова, Ольга Валентиновна

ВЫВОДЫ

1. Установлена устойчивая динамика количественных показателей микробных сообществ дельты Волги, эколого-микробиологическое состояние которой зависит от сезонных изменений, гидролого-гидрохимических режимов и трофики водоемов. Выделены районы с активной антропогенной нагрузкой — р. Волга в черте города, pp. Ахтуба и Бузан, характеризующиеся повышенным содержанием гетеротрофной микрофлоры и низкими значениями индекса троф-ности в течение всего вегетационного периода.

2. Количественно-качественный состав микрофлоры судака обусловлен образом его жизни, типом питания, способом и районами лова. Установлена прямая корреляция между общей микробной обсемененностью воды и рыбы. Одним из ведущих факторов в развитии микроорганизмов, определяющим ее видовой и количественный состав, является температура воды и состояние резистентности самой рыбы. Как следствие обсемененность ее печени весной была выше, чем осенью.

3. Установлено, что в бактериоценозе гидроэкосистемы дельты Волги доминировали энтеробактерии (протеи и цитробактеры), аэромонады и флавобактерии. Всего из воды и рыбы выделены бактерии 15 родов, относящихся к 28 видам, а также несовершенные грибы. В исследуемой гидроэкосистеме сезонные изменения выделенной условно-патогенной микрофлоры (энтеробактерий и аэромонад) характеризовались активизацией в летне-осенние месяцы. Пики развития флавобактерий и псевдомонад приходились на весну и осень - периоды промысла в дельте Волги.

4. Наличие факторов патогенности (протеазы, лецитиназы, гемолизина и ДНКазы у аэромонад) с более высокими показателями у гидромикрофлоры по нарастающей от весны к осени, галотолерантность и множественная антибио-тикорезистентность позволяют определить степень опасности для рыб и прогнозировать эпизоотическую, а также эпидемиологическую обстановку на водоеме.

- обсемененность воды в районах его обитания, антропогенная трансформация и эвтрофирование водоемов;

- заболевания рыбы инфекционной и инвазионной природы (дерматофиб-росаркома и ахтериоз), снижающие резистентность ее организма;

- нарушения биотехники разведения - отсутствие выбраковки больных особей, при посадке производителей в пруды, антисанитарное состояние последних в комплексе инициируют повышенную микробную обсемененность рыбы и обусловливают ее высокий отход за период зимовки.

8. При включении в рацион крыс мяса, пораженного дерматофибросарко-мой судака, у них отмечали патологические изменения сначала в тканях кишечника, а затем в тканях почек и легких.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

Практические рекомендации изложены в проектах рекомендаций по борьбе с ахтериозом судака в прудовых хозяйствах и рекомендациях по профилактике дерматофибросаркомы судака в естественных водоемах, которые отправлены на рассмотрение в Департамент ветеринарии Минсельхозпрода РФ.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Обухова, Ольга Валентиновна, Москва

1. Абакумов В.А. Руководство по гидробиологическому мониторингу пресноводных экосистем . СПб.: Гидрометеоиздат, 1992. - 318 с.

2. Авчинников А.В. Микробное загрязнение водной среды и его влияние на заболеваемость населения //Мед. консультация. —2000. № 2. - С. 43-47.

3. Алехина Р.П. Условия воспроизводства полупроходных и речных рыб в-дельте р. Волги // Мат-лы Межд. конф. «Современные проблемы Каспия», посвященной 105-летию КаспНИРХ. Астрахань, 2002. - С. 19-22.

4. Алтон Л.В. Жизнеспособность бактерий родов Bacillus и Pseudomonas в морской и речной воде, загрязненной нитратами // Гигиена и санитария. 1991. - № 6. - С. 26-28.

5. Алтон Л.В. Жизнеспособность Proteus vulgaris и бактерий рода Pseudomonas в воде и почве, загрязненной нитратами //Гигиена и санитария. 1993.-№5. с. 16-18.

6. Андреев В.В., Якубов Ш.А., Кирилов В.Н. Эколого-генетический мониторинг загрязнений Нижней Волги и Северного Каспия //Докл. АН СССР. -1990.-314, №2.-С. 505-508.

7. Ардабьева А.Г., Тарасова Л.И., Малиновская Л.В., Смирнова Л.В. Кормовая база Северного Каспия в 2002 году // Рез-ты НИР за 2002 г. "Рыбохозяй-ственные исследования на Каспии". Астрахань, 2003. - С. 134-144.

8. Афанасьев В.И., Наумова A.M., Лашенкова Н.Н., Наумова А.Ю. Энтерит карпа и форели и меры борьбы с ним //Итоги научно-практ. работ в ихтиологии. М.: МИК, 1977. - С. 38-39.

9. Балушкина Е.В. Критерии и методы оценки уровня антропогенной нагрузки и качества воды //Тез.докл. Межд.науч.конф. «Малые реки: Современное экологич. состояние, актуальные проблемы». Тольятти: ИЭББ РАН, 2001. -С. 19.

10. Бауэр О.Н. Определение паразитов пресноводных рыб фауны СССР. -Л.: Наука, 1987.-С.582.

11. Бахтиярова З.К. Сальмонеллезы среди прудовых рыб в Ставропольское крае /Научн.тр. Ставроп. СХИ. Ставрополь, 1982. - Вып. 43. - С. 66-70.

12. Беляева В.Н., Катунин Д.Н. Влияние колебаний уровня моря на формирование биологической и рыбной продуктивности Северного Каспия //Тез. докл. I Межд. конф. «Биолог.ресурсы Каспийского моря». Астрахань, 1992. -С. 38-42.

13. Н.Беляков В.Д., Яфаев Р.Х. Эпидемиология М.: Медицина, 1989. - 416с.

14. Берджи. Определитель бактерий М.: Из-во Мир, 1997. - 799 с.

15. Бесчетнова Э.И., Вознесенская Л.М. Климатические особенности и опасные явления погоды Астраханской области в XX столетии. Астрахань, 2001.- 101 с.

16. Бжевская Л.И. Сезонная динамика микрофлоры воды и молоди семги на Солзенском рыбозаводе Архангельской области // Рыбн. хоз-во / Сер. Аквак-ра: Инф. пакет "Болезни рыб".- М.: ВНИЭРХ, 1998. Вып.2. - С.24-26.

17. Богданова Е.А. Паразиты рыб как биоиндикаторы токсикологической ситуации в водоемах. СПб.: ГосНИОРХ, 1993. - 23 с.

18. Богданова Е.А. Паразитофауна и заболевания рыб крупных озер Северо-Запада России в период антропогенного преобразования экосистемы. -СПб.: ГосНИОРХ, 1995.-С. 108-141.

19. Бойко А.В., Погорелова Н.П. Влияние техногенных загрязнений на бактериальные сообщества водоемов //Журн. микробиол. эпид. и иммунологии. 1998.-№ 6.-С. 23-25.

20. Большова А.А., Бабин Е.В. Развитие эвтрофированных процессов в низовьях р. Урала //Тез. докл. I Межд. конф. «Биол. ресурсы Каспийского моря». Астрахань, 1992. - С. 46-48.

21. Борисенко В.Ф. Свойства аэромонад и их значение в интенсивно эксплуатируемых рыбоводных прудах //Автореф. канд. дисс. М, 1991. - 30 с.

22. Борисова М.Н., Козаченко Н.Г., Иренков И.П. Эпизоотическая ситуация рыбохозяйственных водоемов Московской области и пути ее улучшения // Тез. докл. Межд. конф., посвящ.80-летию Моск. Гос. акад. вет., мед. и биотехнологии.-М, 1999.-С. 141-142.

23. Борисова М.Н., Козаченко Н.Г. Болезни рыб, вызываемые аэромонадами: взгляд на проблему // Рыбн. хоз-во / Сер. Болезни гидробионтов в аква-культуре. Аналит. и реф. информ- М.: ВНИЭРХ, 2002 №1. - С.25-26.

24. Бутаев A.M., Гаджиев А.З., Гасанов Ш.Ш., Монахов С.К. Современное состояние и возможное направление развития экосистемы Каспийского моря //Вестн. ДНЦ РАН. 1999. - № 4. - С. 85-95.

25. Бутаев A.M., Кобыш Н.Ф. Грозит ли Каспию нефтяное загрязнение //Мат-лы Межд. конф. «Современные проблемы Каспия», посвященной 105-летию КаспНИРХ. Астрахань, 2002. - С. 33-39.

26. Бухарин О.В. Биомедицинские аспекты персистенции бактерий //Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунологии. 1994. - № 8-9. - С. 4-13.

27. Бухарин О.В. Персистенция патогенных бактерий.- М.: Медицина, 1999.-366 с.

28. Бухарицин П.И. Многолетняя характеристика загрязнения природных вод Нижней Волги //Тез. докл. науч.-практ. конф. «Рыбные запасы Волго-Каспийского региона и их охрана». Астрахань, 1988. - С. 22-23.

29. Бухарицин П.И. Прибрежные нефтепромыслы и нефтяное загрязнение Северного Каспия //Тез. докл. I Межд. конф. "Биолог, ресурсы Каспийского моря". Астрахань, 1992.-С. 51-53.

30. Бычкова Л.И. Микробиоценоз радужной форели (Oncorynchus mykiss Walbaum) и водной среды при садковом выращивании //Автореф. канд. дисс. -М, 2002. 25 с.

31. Бычкова Л.И., Юхименко Л.Н., Можарова А.И. Протейная инфекция у форели при выращивании в морских садках // Рыбн. хоз-во / Сер. Аквак-ра: Инф. пакет "Болезни рыб".- М.: ВНИЭРХ, 1995. Вып.2. - С.7-10.

32. Валедская О.М. Сравнительная оценка некоторых барьерных систем волжского судака в норме и при дерматофибросаркоме //Автореф. канд. дисс. -Астрахань, 1996.- 16 с.

33. Васильченко О.Н., Карпунина Н.В., Чакалтана Д.А., Шабанова Д.А. Воспроизводительная способность белорыбицы и методы ее увеличения //Мат-лы Межд. конф. «Современные проблемы Каспия», посвященной 105-летию КаспНИРХ. Астрахань, 2002. - С. 52-58.

34. Васильченко О.Н., Мамедов Ч.А., Шабанова Д.А., Карпунина Н.В. Совершенствование биотехники разведения полупроходного судака в дельте Волги //Рыбохозяйственные исследования на Каспии: Рез-ты НИР за 2001 г. /КаспНИРХ. Астрахань, 2002. - С. 406-409.

35. Виноградова Л.А., Пархомчук Т.К. Комплексные санитарно-микробиологические критерии оценки качества водных объектов в условиях возрастающей антропогенной нагрузки //Гигиена и санитария. 1991. - № 1. -С. 24-26.

36. Вялова Г.П., Шкурина Э.К., Стексова В.В. Инфекционные заболевания камбал на шельфе Сахалина //Тез. докл. I конгресса ихтиологов России. -Астрахань, 1997. С. 372.

37. Гавришова Н.А. О комплексе микробиологических показателей при характеристике качества вод /Сб. иаучн. тр./Самоочищеиие и биоиндикация загрязненных вод. М.: Наука, 1980. - С. 74-77.

38. Гаранина С.Н. Действие отходов бурения на фитопланктон //Тез. докл. I конгресса ихтиологов России. Астрахань, 1997. - С.412.

39. Гераскин П.П. Функциональные особенности реакции каспийских осетровых на загрязнение среды обитания //Тез. докл. I конгресса ихтиологов России. Астрахань, 1997.-С. 413.

40. Гераскин П.П., Алтуфьев Ю.В., Шевелева Н.П. Механизмы появления некоторых видов нарушений воспроизводительной системы осетровых под влиянием загрязнения среды //Тез. докл. II Всесоюзн. конф. по рыбохоз. токсикологии. СПб., 1991. - Т. 1. - С. 114-115.

41. Голова Ж.А., Дедюха В.П. Микробиология рыбы и рыбных продуктов. М.: Агропромиздат, 1986. - 148 с.

42. Головина Н.А., Стрелков Ю.А., Воронин В.Н., Головин П.П., Евдокимова Е.Б., Юхименко Л.Н. Ихтиопатология. М.: Мир, 2003. - 448 с.

43. Голубева И.В., Килессо В.А., Кисилева Б.С. Энтеробактерии. М.: Медицина, 1985.-321 с.

44. Голубков С.М. Влияние антропогенных факторов внешней среды на структурно-функциональную организацию речных систем //Тез. докл. Межд. науч. конф. «Малые реки: Современное экологич. состояние, актуальные проблемы». Тольятти: ИЭВБ РАН, 2001. - С.60.

45. Горбунов К.В. Влияние зарегулирования Волги на биологические процессы в ее дельте и биостоке. -М.: Наука, 1976. 219 с.

46. Григорьев Ю.И. Регламентирование микробиологических критериев оценки качества продуктов питания из морской рыбы и беспозвоночных приразработке новых и совершенствовании традиционных технологий их приготовления //Автореф. док. дисс. М, 1992.- 32 с.

47. Грищенко Л.И. Сравнительный анализ патологических процессов при инфекционных болезнях и токсикозах рыб //Тез. докл. Первого Рос-амер. симп. «Аквакультура и здоровье рыб». М.: ВНИИПРХ, 1998. - С. 138-139.

48. Грищенко Л.И. Эпизоотология, течение и проявление асцитно-язвенного синдрома карпов в тепловодных рыбоводных хозяйствах //Сб. тез. докл. научно-практ. конф. «Проблемы охраны здоровья рыб в аквакультуре». -М, 2000.-С. 53-54.

49. Гумилев Л.Н. История колебания уровня Каспия за 200 лет //М, 1980.- С. 37-47.

50. Гутвейб Л.Г. Динамика численности, биомассы и продукции бактери-опланктонного сообщества бухты Ласпи//Экология моря. -1990. в.36. -С. 16-20.

51. Дзюбан А.Н., Крылова И.Н. Оценка состояния бактериопланктона и бактериобентоса Рыбинского водохранилища в районе г. Череповец (Вологодская обл.) //Биол. внутр. вод. 2000. - № 4. - С.68-79.

52. Дзюбан А.Н., Косолапов Д.Б., Кузнецова И.А. Микробиологические процессы в Горьковском водохранилище //Водные ресурсы. 2001. -Т.28, № 1.- С. 47-57.

53. Дзюбан А.Н. Бактериопланктон нижнего течения р.Амур //Тез. докл. Межд. и молодежи, конф. «Экологические проблемы крупных рек-3». Тольятти: ИЭВБ РАН, 2003. - С. 77.

54. Дмитриева Г.Ю., Безвербная И.П. Микробная индикация эффективный инструмент для мониторинга загрязнения прибрежных морских вод тяжелыми металлами //Океанология. - 2002. - Т.42, № 3. - С. 408-415.

55. Домарадский И.В. Вирулентность бактерий как функция адаптации //Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунологии. 1997. - № 4. — С. 16-20.

56. Евгеньева Т.П., Басурманова O.K., Шехтер А.Б. Дегенеративные изменения в белых мышцах русского осетра (Acipenser giildenstadtti) //Докл. АН СССР.- 1989. 309, № 2. - С. 462-466.

57. Емец Г.П., Баздеркина С.А., Ассена Э. Водная бактериофлора как показатель санитарного состояния водоема //Тез. докл. Межд. научн. конф. «Проблемы рационального использования биоресурсов водохранилищ». Киев. -1995.-С. 243-244.

58. Жезмер В.Ю., Лященко Е.В., Кутищева Н.В., Галдина Е.А. Протейная инфекция в установках с оборотным водообеспечением //Рыбное хоз-во. 1991. - № 4. - С. 39-40.

59. Жукинский В.Н., Оксиюк О.П., Олейник Г.Н., Кошелева С.И. Принципы и опыт построения экологической классификации качества поверхностных вод суши //Гидробиологический журн. 1981. - 17. -№ 2. - С.38-49.

60. Журавлева JT.A. Распространенность аэромонад в регионе дельты Волги и некоторые эпидемиологические особенности заболеваний, вызываемых ими //Автореф. дис. .канд. мед. наук. -М. 1998. - 14 с.

61. Захалева В.А., Душкина JT.A. Микрофлора икры морских сельдей Белого и Балтийского морей // Тр. Зоол. ин-та АН СССР. 1990. - С. 51-53.

62. Зубкова Л.А., Валедская О.М., Маслов А.К. Электронно-микроскопические исследования лимфоидной дерматофибросаркомы судака //Сб. научн. тр. «Вопросы устойчивости функционирования рыбного хозяйства во внутренних водоемах». -М. — 1987. С.112-120.

63. Иванов В.П. Состояние и перспективы сырьевой базы и промысла рыб на Каспии//Тез. докл.1 Конгресса ихтиологов России. -Астрахань. -1997. -С. 421.

64. Иванов В.П. Биологические ресурсы Каспийского моря. Астрахань: Изд-во КаспНИРХ. - 2000. - 100 с.

65. Иванов В.П. К вопросу о возникновении очагов заболеваний рыб // Тез. докл. науч. практ. конф. «Проблемы охраны здоровья рыб в аквакульту-ре». - М.: МИК, Россельхозакадемия. - 2000. - 136 с.

66. Иванов В.А., Сокольский А.Ф. Научные основы стратегии защиты биологических ресурсов Каспийского моря от нефтяного загрязнения. Астрахань: Изд-во КаспНИРХ. - 2000. - 181 с.

67. Каламкарова Л.И. Распространение условно-патогенных микроорганизмов в продуктах питания //Гигиена и санитария. 1989. - № 6. - С. 72-73.

68. Карасева Т.А. Болезни рыб в аквакультуре севера России (на примере Кольского полуострова) // Автореф. дис. . канд.биол. наук. Петрозаводск. -2003.-22 с.

69. Карасева Т.А. Санитарно-эпизоотическая ситуация в рыбоводных хозяйствах Мурманской области в 1990-1999 гг. // Сб. тез. докл. Всерос. научно-практ. конф. «Проблемы патологии иммунологии и охраны здоровья рыб и других гидробионтов».- М. 2003. - С. 50-51.

70. Карасева Т.А., Сердюк А.В., Логинова Г.А. Некоторые болезни атлантического лосося на рыбоводных заводах Мурманской области // Тр. АН СССР УрО Коми. Сыктывкар. - 1990. - С. 91-97.

71. Карпюк М.И., Мажник А.Ю., Дегтярева Н.Г. Проблемы водных биоресурсов Каспия: сегодня и завтра //Материалы Межд. конф. «Современные проблемы Каспия», посвященной 105-летию КаспНИРХ. Астрахань. - 2002. -С. 132-136.

72. Касымов А.Г. Экология Каспийского озера. Баку. - 1994. - 237 с.

73. Катунин Д.Н., Хрипунов И.А., Беспарточный Н.П., Галушкина Н.В., Никотина Л.Н., Кравченко Е.А., Радованов Г.В., Кашин Д.В., Железцова Е.Г.,

74. Дулимов А.Б., Фесенко В.И., Азаренко А.В. Гидролого-гидрохимический режим дельты Волги и Каспийского моря в 2001 г. //Рыбохозяйственные исследования на Каспии. Рез-ты НИР за 2001 г. /КаспНИРХ. Астрахань. - 2002. - С. 14-32.

75. Каховский А.Е. Профилактика болезней рыб бактериальной этиологии в интенсивно эксплуатируемых рыбоводных прудах //Автореф. дис. . канд. биол. наук. М. - 1991. - 20 с.

76. Кеннеди К. Экологическая паразитология. М.: Мир. - 1978. - 228 с.

77. Ковалева Ю.В. Изменение чувствительности бактерий к антимикробным препаратам при их совместном культивировании //Актуальные проблемы внутр. мед.: Сб. тез. 58 научн. конф. СНО.- СПб. 1996.- С. 56-57.

78. Коваленко Л.Д. Влияние сточных вод на зоопланктонные организмы // Тез. докл. I Конгресса ихтиологов России. Астрахань. - 1997. - С. 427.

79. Козинец Г.И., Высоцкий В.В., Погорелов В.М. Кровь и инфекция. -М.: Триада-фарм.-2001.-456 с.

80. Кондратьева Л.М. Микробиологические исследования экологического состояния реки Амур // Вестн. ДВО РАН. 2001. - № 1. - С. 57-71.

81. Копылов А.И., Крылова И.Н., Косолапов Д.Б., Масленникова Т.С. Микробиологическая характеристика воды Иваньковского водохранилища //Водн. ресурсы. 2000. - 27. - № 6. - С. 728-734.

82. Костров В.П., Панарин А.П. Загрязнение металлами вод и рыбы Среднего Каспия //Тез. докл. I Конгресса ихтиологов России. Астрахань. - 1997. -С. 430-431.

83. Куликовский А.В. Оценка безопасности пищевых продуктов в США //Ветеринария. 1996. - № 1. - С. 58-59.

84. Куликовский А.В., Касьяненко А.И., Соснина В.В. Экология Salmonella enteridis во внешней среде //Ветеринария. 1996. - № 3. - С. 24-27.

85. Курапов А.А., Ревякин В.И. Задачи производственного экологического мониторинга ОАО НК «Лукойл» на Северном Каспии //Материалы Межд. конф. «Современные проблемы Каспия», посвященной 105-летию КаспНИРХ. -Астрахань. 2002. - С. 165-169.

86. Кушнаренко А.И. Динамика численности и поведение волжского судака в условиях подъема уровня Каспийского моря // Тез. докл. Всесоюз. конф. «Экосистемы морей России в условиях антропогенного пресса (включая промысел)». Астрахань. - 1994. - С. 126-127.

87. Кушнаренко А.И., Фомичев О.А., Сидорова М.А., Чернявский В.И., Манькова Н.Ю. Состояние запасов полупроходных видов рыб и перспективыих промысла //Рыбохоз. исследования на Каспии: Рез-ты НИР 2002 г. Астрахань. - 2003. - С. 223-231.

88. Лаптева Н.А. Олигокарбофильные бактерии в пресных водоемах //Сб. науч. Тр. «Структура и функционирование пресноводных экосистем». -СПб.-Наука. 1988.-С. 42-61.

89. Ларцева Л.В. Микрофлора осетровых и расслоение мышц //Рыбное хоз-во. 1990. - № 6. - С. 67.

90. Ларцева Л.В. Гигиеническая оценка по микробиологическим показателям рыбы и рыбных продуктов Волго-Каспийского региона //Автореф.дис. . докт.биол.наук М. - 1988. - 44 с.

91. Ларцева Л.В. Рыбы и гидробионты-переносчики возбудителей инфекционных болезней человека // Астрахань. — Из-во КаспНИРХ. -2003. -99 с.

92. Ларцева Л.В., Румянцев В.Д., Хачатрян Т.В. Случай протейной инфекции сазана в авандельте Волги //Экспресс-информ. М. - ЦНИИТЭИРХ. -1988. - в.5. — С. 1-4.

93. Ларцева Л.В., Катунин Д.Н. Микрофлора рыб биоиндикатор загрязнения дельты Волги //В кн.: «Водные биоресурсы, восп-во и экология». - М. -1993.-С. 7-27.

94. Ларцева Л.В., Проскурина В.В., Вьюшкова Л.А. Санитарно-эпизоотическая ситуация Волго-Каспийского региона на рубеже XXI века //Сер. Болезни рыб в аквакультуре: обзорная информация. 2002. — в. 1. - 50 с.

95. Левин А.П., Булгаков Н.Г., Абакумов В.А., Терехин А.Т. Определение экологически допустимых уровней расходов воды по гидробиологическим показателям /Вестн. МГУ. Сер. 16. - 1998. - № 3. - С. 49-52.

96. Литвин В.Ю. Природно-очаговые инфекции: ключевые вопросы и новые позиции //Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунологии. 1999. - № 5. -С. 26-33.

97. Литвин В.Ю., Пушкарева В.И. Факторы патогенности бактерий: функции в окружающей среде //Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунологии. 1994. - XIII-IX. - С. 83-87.

98. Лукьяненко В.И. Общие закономерности деградации экосистем и ухудшения качества воды в загрязненных водоемах //Тез. докл. II Всес. конф. по рыбохозяйств. токсикол. С-П,- 1991. - т.2. - С. 16-18.

99. Лукьяненко В.И. О предкатастрофическом состоянии каспийского осетрового хозяйства и его причинах //Тез. докл. I Межд. конф. «Биологические ресурсы Каспийского моря». Астрахань. - 1992. - С. 236-239.

100. Марголина Г.Л. Микробиологические процессы деструкции в пресноводных водоемах //М.: Наука. 1989. - 120 с.

101. Методические указания по санитарно-бактериологической оценке рыбохозяйственных водоемов //Сб. инструкций по борьбе с болезнями рыб. -М.- 1999.-С. 161-171.

102. Микитюк П.В. Ветеринарно-санитарная экспертиза пресноводной рыбы //Справочник. М. - 1989. - 208 с.

103. Михайленко JI.E., Хороших Л.А., Багнюк Л.И., Коднер Э.И., Тронько Н.И., Калениченко К.П. Микробиологическая характеристика верхнего участка Днепра //Водные ресурсы. 1995. - т. 22. - № 3. - С. 292-298.

104. Мойсеенко Н.Н. Условно-патогенные бактерии в морской воде реакционных зон //Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунологии. 1994. - № 1. — С. 8-11.

105. Монахов С.К., Макарова Е.Н. О рыбохозяйственных требованиях к пропуску половодья в дельту Волги в средние по водности годы //Мат-лы Межд. конф. «Современные проблемы Каспия», посвященной 105-летию КаспНИРХ. Астрахань. - 2002. - С. 212-216.

106. Мучкина Е.Я., Грабовенко И.С. Биотические взаимоотношения в планктоне глубоководного водохранилища //Реконструкция гомеостаза: Матер. 9-ого Междунар. симп Красноярск. - 1998. - т.2. - С. 132-136.

107. Мухина Л.Б. Современное состояние вопроса микробиологической оценки качества продукции из гидробионтов // тез. докл. научно-технич. конф., посвящ. 300-лет. юбилею флота России. — Санкт-Петербург. 1995. - С. 1-2.

108. Непоменко Л.Ф., Островская Е.В. Динамика загрязнения тяжелыми металлами и токсичности морской среды в районе проведения буровых работ //Мат-лы Межд. конф. «Современные проблемы Каспия», посвященной 105-летию КаспНИРХ. Астрахань. - 2002. - С. 216-220.

109. Никоноров A.M. Мониторинг качества вод: оценка токсичности //СПб: Гидрометеоиздат. 2000. - 159 с.

110. Новоскольцева Т.Н. Аэромоноз карпов: совершенствование мер борьбы и профилактики болезни //Автореф. дис. .канд.биол.наук. М. — 2002. -30 с.

111. Новоскольцева Т.Н., Иринков И.П., Борисова М.Н. Микрофлора крови карпов при язвенном синдроме //Тез. докл. I конгресса ихтиологов России. — Астрахань. 1997. - С. 383-384.

112. Оксиюк О.П., Жукинский В.Н., Брагинский Л.П., Линник П.Н., Кузьменко М.И., Кленус В.Г. Комплексная экологическая классификация качества поверхностных вод суши //Гидробиол. журн.-1993. -29. -№ 4.-С. 62-74.

113. Орлов К.Ю. Биотестирование как интегральная оценка токсичности природных и сточных вод загрязненных тяжелыми металлами //Автореф. дис. . канд.биол.наук. М. - 2002. - 18 с.

114. Остроумов С.А. Водная экосистема: крупноразмерный диверсифицированный биореактор с функцией самоочищения воды //Докл. РАН. 2000. -374. №3.- С. 427-429.

115. Остроумов С.А. Принципы анализа экологической опасности антропогенных воздействий, в том числе химического загрязнения: концепция и новые данные //Вестн. МГУ. Сер. 16. - 2000. - № 4. - С. 27-34.

116. Патин С.А. Характер, масштабы и факторы антропогенного воздействия на морские экосистемы //Тез. докл. Всесоюз. конф. «Экосистемы морей России в условиях антропогенного пресса (включая промысел)». Астрахань. -1994.-С. 29-31.

117. Патин С.А. Экологические проблемы освоения нефтегазовых ресурсов морского шельфа. М.: Изд-во ВНИРО . - 1997. - 350 с.

118. Патин В.А., Бесчетнова Э.И., Ушакова Н.М. Атлас Астраханской области //М.: Федеральная служба геодезии и картографии России. 1997. - 48 с.

119. Пивоваров Ю.П., Подъясенев С.В. Аэробная микрофлора свежевы-ловленной и мороженой промысловой рыбы //Гигиена и санитария.-1985. № 6. -С. 80-81.

120. Пивоваров Ю.П., Зиневич Л.С., Грачева М.Н. Микрофлора мясных и рыбных продуктов //Гигиена и санитария. 1988. - № 8. - С. 18-21.

121. Пивоваров Ю.П., Королик В.В. Санитарно-значимые микроорганизмы //М.: Из-во «ИКАР». - 2000. - 267 с.

122. Полунин И.П., Мухатов Т.Д., Юшков В.А. Проблема подъема уровня Каспия и охрана здоровья населения Астраханской области // Тез. докл. Межд. конф. «Каспий настоящее и будущее». - Астрахань. - 1995. - С. 76-80.

123. Потапова Н.А., Королевская Т.В. Ростовая реакция водных бактерий как биологический тест на токсичность водной среды //Гидробиол.журн. 1986. - 22. - № 2. - С. 46-49.

124. Просяная В.В. Характеристика флавобактерий, выделенных от судака //Тез. докл. VIII Всес. совещ. по паразитам и болезням рыб. JI. — Наука. -1985. - С. 114-115.

125. Пугаева В.П., Сазонов А.А., Таврюсева Т.В. Состояние здоровья тихоокеанских лососей на Камчатке //Тез. докл. I конгресса ихтиологов России. -Астрахань. 1997. - С. 386.

126. Пученкова С.Г. Выделение Edwardsiella tarda от черноморских кефалей //Тез. докл. Всес. конф. «Научно-технические проблемы марикультуры в стране». Владивосток. - 1990. - С. 183-184.

127. Пученкова С.Г. Санитарно-микробиологические исследования устриц и морской воды у побережья Северного Кавказа //Гигиена и санитария. -1991. -№3.- С. 22-23.

128. Пученкова С.Г., Шкурина З.К. Микрофлора производителей горбуши в период нереста на юге Сахалина //Информ. пакет. Сер. Аквакультура. — М. -ВНИЭРХ. - 1991. - в.2. - С. 1-5.

129. Радин И.Д. Протеометрия в санитарной ихтиопатологии //Тез. докл. V Всес. симпоз. по инфекционным болезням рыб. М. - 1986. - С. 83-85.

130. Романов А.А., Шевелева Н.Н. Нарушение морфогенеза у осетровых Каспия //Рыбное хоз-во. 1993. - № 4. - С. 27-28.

131. Романенко А.В. Сравнительная характеристика микрофлоры малых рек Рыбинского водохранилища //Тез. докл. Межд. науч.конф. «Малые реки: Современное экологич. состояние, актуальные проблемы». Тольятти: ИЭВБ РАН.-2001.-С. 173.

132. Романенко В.Д., Оксиюк О.П., Жукинский В.Н., Столберг Ф.В., Лав-рик В.И. Экологическая оценка воздействия гидротехнического строительства на водные объекты //Киев: Наук, думка. 1990. - 256 с.

133. Рыбакова И.В. Оценка качества верхневолжского водохранилища и его притоков по микробиологическим показателям // Тез. докл. Межд. науч. конф. «Малые реки: Современное экологическое состояние, актуальные проблемы». Тольятти: ИЭВБ РАН. - 2001. - С.176.

134. Сайко Д.В. Состав микрофлоры воды и корма с карпового хозяйства Калининградского порта //Тез. докл. мол. ученых «Биомониторинг и рацион, использован, морск. и пресн. гидробионтов» Владивосток. -1999. - С. 177-178.

135. Салманов М.А. Экология и биологическая продуктивность Каспийского моря. Баку. - 1999. - 400 с.

136. Сердюк А.В. Морские флаво- и флексибактерии как этиологические агенты язвенного синдрома у культивируемой радужной форели //Тез. докл.

137. Первого Рос-амер. симп. «Аквакультура и здоровье рыб» М.: ВНИИПРХ. -1998.-С. 174-175.

138. Сердюк А.В., Калинина Н.Р. Результаты предварительной оценки угрозы инфекционных заболеваний в полярной аквакультуре лососевых //Тез. докл. Всерос. конф. «Научно-техн. проблемы марикультуры в стране» Владивосток. - 1990. - С. 186-187.

139. Скурат Э.К., Сиволоцкая В.А., Говор Т.А. Аэромоноз карпа и меры борьбы с ним в условиях республики Беларусь //Тез. докл. I Конгресса ихтиологов России. М.- Из-во ВНИРО. - 1997. - С. 390.

140. Станев Ц.Т. Върху биомасата и продукцията на бактериопланктона в западната част на Черно море //Океанология. 1989. - № 18. - С. 61-64.

141. Степанова О.А. Морские бактерии и вирусы в воде и донных осадках бухты Севастополя //Экология. 2001. - № 1. - С. 61-63.

142. Сужко О.А., Алешин В.В. Экологический мониторинг и оценка бак-терионального загрязнения воды Нижнего Дона // Юж. Рос. гос. техн. ун-т. -Новочеркасск. 2000. - Рус. Деп. в ВИНИТИ. - 24.05.00., № 1507 - 300. - 8 с.

143. Суздалева А.Л., Шидловская Н.А. Численность бактериопланктона в Десногорском водохранилище водоеме- охладителе Смоленской АЭС //Мат-лы научн. конф. «Водные экосистемы и организмы-2».- М. - 2000. - т.З. - С. 82.

144. Сытник Ю.М., Арутюнова Н.В., Евтушенко Н.Ю. Тяжелые металлы в осетровых рыбах Каспия // Проблемы изучения, охраны и рационального использования природных ресурсов Волго-Ахтубинской поймы и дельты Волги. -Астрахань. 1989. - С. 97-99.

145. Умербаева Р.И., Сокольский А.Ф. Микробиологические исследования в Каспийском море // Рыбохозяйственные исследования на Каспии: Рез-ты НИР за 2002 г. /КаспНИРХ. Астрахань. - 2003. - С. 89-93.

146. Хейфец Л.Я., Кравченко М.С., Осыка В.Ф., Кочуровская Г.Г. Нормирование и контроль качества вод //Водные ресурсы. № 2. - 1988. - С. 122-129.

147. Чиров П.А., Озерова Р.А., Белонович Г.А. Санитарно-гигиеническое состояние вод малых рек Саратовской области //Тез. докл. Межд. научн. конф. «Малые реки: Современное экологич. состояние, актуальн. проблемы». Тольятти. - 2001.- С. 247.

148. Щетинина Е.В. Микробиологические критерии формирования и устойчивости чистоты Байкальских вод //Автореф. дис. .канд.биол.наук. Иркутск. - 2003. - 18 с.

149. Шульгина Л.В., Загородная Г.И., Шульгин Ю.П., Бывальцева Т.М., Галкина Л.М. Микрофлора дальневосточных морей и ее влияние на продукцию из промысловых объектов //Гигиена и санитария. — 1995. № 1. — С. 14-16.

150. Юхименко Л.Н. Проблема аэромоноза рыб в России //Тез. докл. I Конгресса ихтиологов России. М. - Из-во ВНИРО. - 1997. - С. 398-399.

151. Юхименко JI.H. Бактериальная геморрагическая септицемия рыб, вызванная подвижными аэромонадами и ее профилактика //Тез. докл. I Рос-амер. симп. «Аквакультура и здоровье рыб». -М.: ВНИИ1 IPX.-1998.-С. 179-180.

152. Юхименко JI.H., Койдан Г.С. Современное состояние проблемы аэ-ромоноза рыб // Рыбное хоз-во. Сер. Болезни гидробионтов в аквакультуре. Аналит. и реф. информ. /ВНИЭРХ. 1997. - в.2. - С. 1-9.

153. Юхименко JI.H., Койдан Г.С. Современное состояние проблемы аэ-ромоноза рыб // Сб. избран, трудов ВНИИПРХ: кн.1- Т. 1-Й. -Дмитров. 2002.- С. 467-468.

154. Юхименко JI.H., Гусева Н.В., Койдан Г.С. Иммунопрофилактика аэ-ромоноза рыб //Тез. докл. I Конгресса ихтиологов России. М. — Из-во ВНИРО.- 1997.-С. 399.

155. Юхименко JI.H., Койдан Г.С., Борисенко В.Ф., Головин П.П., Бычкова Л.И. Эпизоотическая значимость Pseudomonas fluorescens v. capsulata //Инф. пакет «Болезни рыб». Сер. Аквакультура. Рыбное хоз-во. - М. - 1998. - в.2. -С. 8-13.

156. Юхименко Л.Н., Бычкова Л.И. Бактериальные болезни лососевых рыб и методы их профилактики //Тез. докл. научно-практ. конф. «Марикультура Северо-запада России». Мурманск: ПИНРО. - 2000. - С. 44-45.

157. Юхименко Л.Н., Бычкова Л.И., Трифонова Е.С. Эпизоотическая ситуация на Можайском производственно-экспериментальном осетровом заводе //Сб. тез. докл. научно-практ. конф. «Проблемы охраны здоровья рыб в аквакультуре». М. - 2000. - С. 131-133.

158. Юхименко Л.Н., Койдан Г.С., Бычкова Л.И. Перспективы использования субалина для коррекции микрофлоры кишечника рыб и профилактики

159. БГС //Сб. тез. докл. научно-практ. конф. «Проблемы охраны здоровья рыб в ак-вакультуре». М. - 2000. - С. 133-135.

160. Юхименко Л.Н., Шелкунов И.С., Койдан Г.С., Бычкова Л.И. Специфическая и неспецифическая профилактика аэромоноза карпа в тепловодном хозяйстве //Сб. Избранных Трудов ВНИИПРХ: кн.1. - т. I-II. - Дмитров. -2002. - С. 466-467.

161. Acar J., Rostel В. Antimicrobial resistans. An okerview // Off int. epzoot. 2001. - 20. - №3. - P. 787-810.

162. Amandi A., Hiu S., Rohovee J.S., Fryer J.L. Isolation and characterization of Edwardsiella tarda from chinooc salmon (Oncorhynchus tschawytscha) // Appl. And Environ. Microbial. 1982. - 43. - №6. - P. 1380-1384.

163. Andremot A.L. Impact des antibiotiques sur les flores sommensales con-ditionne Г avenil de la resistance // Med. sci. 2002. - 18. - №3.- P.364-365.

164. Ansary A., Haneef R.M., Torres J.L., Yabav M. Plasmidsand antibiotic resistance in Aeromonas hydrophila isolated in Malaysia from healthy and diseased fish//J. Fish Diseases. 1992.- 15. - №2.-P. 191-196.

165. Baya A.M., Ronalde J.L., Novarro R.B., Hetrick F.M., Toranzo A.E. First edwardsiellosis outbreak in a wild population of striped bass from the Chesapeake bay // Inter. Conf. "Diseases of fish and challfish." Palma de Mallorca. - 1995. -P.65-188.

166. Bejerano Y., Saring S., Home M.T., Roberts R.J. Mass mortalities in silver carp Hypophtalmichthys molitrix associated with bacterial infection following handling // J. Fish. Diseases. 1979. - 2. - № 1. - P.49-56.

167. Bernoth E.M., Korting W. Indentification of a Cyprinid fish, the tench Tinea tinea L., as a carrier of the Bactterium Aeromonas salmonicida, causative agent of furunculosis in salmonids //J. Vet. Med. 1992. - 39. - №8. - P.585-594.

168. Bird D.F., Karl D.M. Microbial biomass and population diversity in the upper water column of the Black Sea // Deep Sea Res. A. - 1991. - V.38. - Suppl 2A. -P.1069-1082.

169. Bonde G.T. Salmonella and other pathogenic bacteria // Sci. Total Environ. 1981. - 18. - P. 1-11.

170. Bullock G.L. Bacterial gill disease of freshwater fishes // Fish Disease Leafl. US Dep. Inter. Fish and Wild life serv. 1990. - №84. - P. 1-3.

171. Bykowski P.J. Jakosc zbrowotna surowcow i produktow zymnsciowych pochodzenia // 9 Przem. Spoz. 1998. - 52. - №7. - P.13-16.

172. Carunasagar J., Pai R. Systemic Citrobacter freundii infection in Common carp, Cyprunus carpio L., fingerling// J. Fish Diseases. 1992. - 15. - №1. - P.95-98.

173. Esteve C., Amaro C. Sidephore production in Aeromonas spp. Isolated from Europhore production, Anguilla anguilla L. // J. Fish. Diseases. 1991. - 14. -№3. - P.423-427.

174. Faisali M., Popp W., Refal M. Hohe Mortalitat der Nil-Tilapia Oreo-chromis niloticus verusacht durch Providencia rettgeri // Berlin und munch. Ztl. -1987. 100. - №7. - P.238-240.

175. Farcas J. Filamentous Flavobacterium sp. isolated from with gill diseases in cold water//Aquaculture. 1985. -44. - №1. - P. 1-10.

176. Ganthier M.J., Munro P.M., Flatan G.N., Clement R.L., Breittmayer V.A. Nouvelles, perspectives sur Г adaption des enterobacteries dans le milien marin //

177. Mar. Lafe. 1993. - 3. - № 1 -2. - P. 1 -18.

178. Georgescu R., Casaiman G. Contributii la studial bolilor infect ioase la hi-bridul Hyp. molitrrix Aristicht. nobilis // Bull. cerc. piscic. 1981.-3. - №1-2. -P.l 17-122.

179. Hansen G.N., Roa J.K., Olafsen L. Isolation of Enterobacter agglomerans from dolphin fish, Coryphaena hippurus L. // J. Fish Diseases. 1990. - 13. - №7. -P.93-96.

180. Kent M.L. The impact of diseases of pen-reared salmonids on coastal marine environment // Fisken or havet. 1994. - 13. - P.85-95.

181. Kodama H., Murai Т., Nakanishi Y. Bacterial infection which produces high mortality in cultured Japanese flounder (Paralichthys olivaceus) in Hokkaido // Jap. J. Vet. Res. 1987. - 35. - №4. - P.227-234.

182. Kumar A., Bachhil V.N., Bhilegaonakar K.N., Agarwal R.K. Occurrence of enterotoxigenic aeromonas speciesin foods // J. Commun. Diseases. -2000. 32. -№3.- P. 169-174.

183. Kusuda R., Dohata N., Fukuda Y., Kawai K. Pseudomonas anguilliseptica infection of striped jack//Gyobyo kenkyu Fish Pathol. -1995 30.- №2. - P.121-122.

184. Lawton Robert L., Morse Erskine V. Salmonella surwival in freshwater and experimental infections in gold fish // J. Environ sei. and Health. 1980. - A15. -№4. - P.339-358.

185. Liston J. Microbial hazards of seafood consumption // Food Technol. -1990. -44 №12. - P.58-62.

186. Low K.W., Goh S.G., Lim T.M., Sin Y.M., Leung K.V. Actin rearrangements accompanying Aeromonas hydrophila entery into cultured fish cells // J. Fish Diseases. 1998. -21. - №1. - P.55-56.

187. Mekuchi Т., Kijokawa Т., Honda К. Экспериментальное заражение японской камбалы Edwardsiella tarda //Fish Pathol. 1995- 30. - №4. - P.247-250.

188. Mersch-SundermannV., Wundt W. Dik bakteriologische Beschaffenheit des Wassers Vom Rhein Neskar Raum I, Mitt: Keimzahlen und Enterobakteriaceen- eine Bestan dsaufnahme der aktuellen Belastung situation // Zbl. Bacteriol. 1987.- B.184. №6. - P.459-469.

189. Munuero E.L., Garcia B.D., Ibanes G.J.J. Analisis microbiologico de aquas de bebida envasadas comercializadas en la cindad, de Sevilla // Alimentaria. -1994. 31. - №257. - P.175-177.

190. Novo C. Valerio, Perez A. Pilas. Problemas sanitarios associados alcon-sumode pescados // Alimentaria. 1994. - 31. - №250. - P.55-67.

191. Ostland V.E., Mae Phee D.D., Lumsden J.S., Ferguson H.W. Virulence of Flavobacterium branchiophilium in experimentally infected salmonids // J. Fish Diseases. 1995. -18. - №3. - P.249-262.

192. Park D. On the ecology of heterotrophic microorganism in fresh water // Trans. Brit. Myrol. Soc. 1972. -58. - №2. - P.291-299.

193. Poole S.E., Gillmore Т., Giles J.E. Bacteriological quality of seafood retailed in Brisbane // Food. Austral. 1989. - 41. - №12. - P. 1104-1108.

194. Qingru Bo., Jerremy C., Xinmin H. Патологическое и патогенетическое изучение эдвардсиеллеза у угрей //Chin. J. Vet. Sci. 1999.-19. - №3- P.258-260.

195. Raloff J. Antibiotic resistance in coming to dinner // Sci. New. 2001. -159.-№21.-P.325.

196. Rogulska A., Antychowicz J., Zelazny J. Aktywnosc hemolityczna i pro-teolityczna jako wskazniki patogennosci bakterii Aeromonas hydrophila i A. sobria dla karpi (Cyprinus carpio L.) // Med. Wet. 1994. - 50. - №2. - P.55-58.

197. Rusin P.A., Rose J.B., Gerba C.P. Health significance of pigmented bacteria in drinking water // Water Sci. and Tehnol. 1997. - 35. - №11-12. - P.21-27.

198. Sato N. Systemic Citrobacter freundii infection amond sunflsh // Bull. Jap. Soc. Sci. Fish. 1982. - 48. -№11.- P.1551-1557.

199. Schindler P.R.G., Metz H. Coliform bacteria in drinking water from South Bavaria: identification by the AP 20 System and resistence patterns // Zentrabl. Hyg. und Umweltmed. 1990. - 190. - №5. - 6. - P.436.

200. Schubert R.H.W. Ecologi of aeromonads and isolation from environmental samples // Experientia. 1987. - 43. - №4. - P.351-354.

201. Siontas S., Hoffman R.W., Pfeil-Putzien C., Fischer- Scherl Th. Carp erythrodermatitis (CE) due to an Aeromonas hydrophila infection. Casuistic and experimental results // J. Yet. Med. B. 1991. - 38. - №3. - P. 186-194.

202. Tokako M. Изучение популяции бактерий группы кишечной палочки в реке // Vamagushi Med. J. 1990. - 39. - №1. - P. 1-16.

203. Nan E., Low K.W., Wong W.C., Leng K.V. Internalization of Aeromonas hydrophila by fish epithelial cells and be inhibited with a tyrosine Kinase inhibitor // Microbiology. 1998. - 144. - №2. - P.299-307.

204. Totis G., Kamarianos A., Karamaulis X., Siontas A., Kilikidis S. The influence of environmental and other stress factors of the appearance of carp erythrodermatitis of the common carp // Bull. Vet. Med. Soc. 1994. - 45. - №2. -P.150-154.

205. Wakabayashi H., Hun Q. J., Kimura H. Flavobacterium branchiophila sp. nov., a causative agent of bacterial gill disease of freshwater fishes // Lnt. J. Syst. Bacteriol. 1989. - 39. - №3. - P.213-216.

206. Wiklund T. Skin ulcer diseases of flounder (platichthys flesus ): Diseases pattern and characterization of an etiological agent // Acta acad. Aboen. B. 1994. -54. -№2.-P. 1-42.

207. Zheng Т., Jian X., Aubert J., Aubert M. Pagrosomus major. Studies on opportunistic pathogens and bacterial flora in the water environment // Rev. Int. Ocenog. Med. 1991. - №101-104. - P.78-82.

Информация о работе

Обухова, Ольга Валентиновна
кандидата биологических наук
Москва, 2004
ВАК 03.00.18

Диссертация

Бактериоценоз воды и судака (Stizostedion lucioperca) в дельте Волги - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы