Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Аутоантитела к ДНК в сыворотке крови здоровых лиц

ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Коликова, Юлия Олеговна

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. УЧАСТИЕ ИММУННОЙ СИСТЕМЫ В РЕГУЛЯЦИИ

ФИЗИОЛОГИЧЕСКИХ ПРОЦЕССОВ Б ОРГАНИЗМЕ.

1.1. Естественные аутоантитела в сыворотке крови.

1.2. Происхождение аутоантител.

1.3. Аутоантитела к ДНК: характеристика и биологическое значение.

1.3.1. Выявление аутоантител к ДНК в сыворотке крови здоровых лиц.

1.3.2. Взаимодействие анти-ДНК аутоантител с ДНК.

1.3.3. Свойства аутоантител к ДНК.

1.3.4. Биологическая активность аутоантител к ДНК.

1.4. Интеграция функциональных систем организма в поддержании гомеостаза.

1.4.1. Взаимосвязь иммунной и эндокринной систем.

1.4.2. Возраст и содержание половых гормонов.

1.4.3. Возрастные изменения иммунной системы.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Аутоантитела к ДНК в сыворотке крови здоровых лиц"

Актуальность проблемы

Значительную часть иммуноглобулинов, циркулирующих в сыворотке крови у здоровых людей составляют аутоантитела к собственным антигенам организма, которые играют важную роль в регуляции иммунного ответа [Lacroix-Desmazes et al., 1998]. Особое место среди них занимают аутоантитела к ДНК, присутствие которых в сыворотке крови давно используется как клинический признак аутоиммунных заболеваний. Аутоантитела к ДНК в небольших количествах выявляли и в сыворотке крови здоровых людей, но долгое время этим данным не придавали значения.

Интерес к аутоантителам к ДНК и к их биологической роли в норме появился в середине 80-х годов. Было показано, что содержание аутоантител к ДНК у здоровых людей изменяется при стрессе и физических нагрузках [Шубик и Левин, 1985], с переменой климатических условий и сезонов года [Добродеева и Суслонова, 1990]. Рядом авторов отмечалось повышение уровня содержания аутоантител к ДНК при старении организма [Shuller et al., 1981; Kasjanov et al., 1984; Xavier et al., 1995].

Однако до сих пор не ясно, являются ли аутоантитела к ДНК обязательным компонентом сыворотки крови в норме. С одной стороны, в литературе приводятся сведения о присутствии аутоантител к ДНК у всех обследованных лиц в группах здоровых людей [Несвижский и Воробьев, 1996]. С другой стороны, имеются сообщения о том, что аутоантитела к ДНК обнаруживаются только у 15-28% здоровых лиц [Добродеева и Суслонова, 1990; Буковская, 1993]. До настоящего времени ряд исследователей придерживаются мнения о том, что аутоантитела к ДНК являются однозначным атрибутом патологического аутоиммунитета и отсутствуют в сыворотке крови здоровых людей [Azizah et al., 1996; Candore et al., 1997; Маркина и др., 2001].

Значительно возрос интерес к аутоантителам к ДНК в норме в связи с обнаружением способности этих аутоантител проникать через мембраны клеток [Yanase et al., 1997]. Было показано, что аутоантитела к ДНК могут соединяться с компонентами ядра и изменять активность экспрессии генов [Madaio et al., 1997]. Приведенные факты свидетельствуют о том, что биологическая роль аутоантител к ДНК в норме может быть связана с регуляцией активности генов и участием в фундаментальных биохимических процессах, не связанных с иммунологической защитой организма.

Одним из основных препятствий на пути к выяснению биологической роли аутоантител к ДНК в норме является отсутствие систематических исследований этих аутоантител в сыворотке крови здоровых людей. По этой же причине до сих пор остается неясной и роль аутоантител к ДНК в возникновении и развитии аутоиммунных патологий.

Цель и задачи исследования

Целью настоящей работы явилось исследование аутоантител к ДНК в сыворотке крови здоровых лиц. Были поставлены следующие задачи:

• определить пороговый уровень содержания аутоантител к ДНК в сыворотке крови здоровых лиц;

• исследовать содержание аутоантител к нативной и денатурированной ДНК в сыворотке крови мужчин и женщин разных возрастных групп;

• разработать схему выделения и очистки аутоантител к ДНК из сыворотки крови здоровых людей;

• охарактеризовать фракционный состав аутоантител, взаимодействующих с нативной и денатурированной ДНК у здоровых лиц разного возраста и пола.

Научная новизна

Установлен пороговый уровень содержания аутоантител к нативной и денатурированной ДНК в сыворотке крови здоровых лиц. Показано, что у здоровых людей уровень содержания аутоантител к нативной ДНК колеблется в пределах 0,07-0,45 относительных единиц, к денатурированной ДНК - в пределах 0,12-0,59 относительных единиц. Впервые выявлен половой диморфизм содержания аутоантител к ДНК. Средний уровень содержания аутоантител к обоим типам ДНК в сыворотке крови у женщин достоверно превышает аналогичные показатели у мужчин. Установлена неидентичность возрастной динамики изменений уровня содержания аутоантител к ДНК в сыворотке крови у мужчин и женщин. Впервые показано возрастное изменение соотношения субпопуляций аутоантител, специфичных к определенному типу ДНК и аутоантител, способных взаимодействовать как с нативной, так и с денатурированной ДНК. Высказано предположение о взаимосвязи субпопуляционного состава аутоантител к ДНК с возрастными изменениями гормонального профиля у здоровых людей.

Практическая значимость

Установление порогового уровня содержания аутоантител к ДНК позволяет судить о вероятном диапазоне их колебания в сыворотке крови здоровых людей. Данные об уровне содержания аутоантител к ДНК в сыворотке крови здоровых лиц разных возрастных групп и пола могут быть использованы в качестве дифференциального контроля при разработке диагностических тестов на основании определения аутоантител к ДНК. Полученные результаты указывают на необходимость использования в качестве точки отсчета - при оценке уровня содержания аутоантител к ДНК в сыворотке крови больных аутоиммунными заболеваниями - уровень аутоантител к ДНК в сыворотке крови здоровых людей соответствующего возраста и пола. Выявленный нами половой диморфизм возрастных изменений соотношения субпопуляций аутоантител, способных взаимодействовать с нативной и денатурированной ДНК, может быть использован для ранней диагностики аутоиммунных заболеваний и выявления групп риска с учетом половой принадлежности здоровых лиц.

Апробация работы

Основные результаты исследований докладывались на III Республиканской научно-технической конференции молодых ученых и специалистов (Казань, 1997); научно-практической конференции молодых ученых Казанской государственной медицинской академии (Казань, 1998); XII юбилейной конференции «Ферменты микроорганизмов» (Казань, 2001); VIII Всероссийском съезде неврологов (Казань, 2001); II Российской конференции молодых ученых России с международным участием (Москва, 2001); IV научно-практической конференции молодых ученых и специалистов Республики Татарстан (Казань, 2001); III Съезде Биохимического общества (Санкт-Петербург, 2002), а также на ежегодных итоговых научных конференциях Казанского государственного университета в 1997-2003 г.

По материалам диссертации опубликовано 12 работ.

Заключение Диссертация по теме "Биохимия", Коликова, Юлия Олеговна

ВЫВОДЫ

1. В сыворотке крови у всех здоровых людей постоянно присутствуют аутоантитела к ДНК. Установлен пороговый уровень их содержания у здоровых лиц. Средний уровень содержания аутоантител к нативной и денатурированной ДНК составляет 0,17 и 0,29 отн.ед., соответственно.

2. Выявлено наличие полового диморфизма уровня содержания аутоантител к ДНК: средний уровень содержания аутоантител к ДНК в сыворотке крови у женщин достоверно превышает аналогичный показатель у мужчин.

3. Уровень содержания аутоантител к ДНК в сыворотке крови у здоровых лиц изменяется с возрастом. Содержание аутоантител к ДНК достигает максимальных значений у женщин в поздний репродуктивный период, у мужчин - в период полового созревания.

4. Обнаруженные нами возрастные и половые различия в соотношениях субпопуляций аутоантител, взаимодействующих с обоими типами ДНК и аутоантител, специфичных к нативной или денатурированной ДНК, свидетельствуют о возможном участии аутоантител к ДНК в физиологических перестройках организма у здоровых лиц.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Коликова, Юлия Олеговна, Казань

1. Аршавский И.А. Физиологические механизмы и закономерности индивидуального развития.-М.:Наука, 1982.-270с.

2. Буковская С.Н. Влияние вакцинации на синтез аутоантител к ДНК/ С.Н. Буковская, Л.В. Невская, Н.В. Медуницын и др.// Иммунология-1993-№5.-С.46-47.

3. Бутенко Г.М. Проблема оценки иммунного статуса человека и возрастные изменеия иммунитета/Г.М. Бутенко// Иммунология.-1993.-№4.-С.4-6.

4. Генералов И.И. Поликлональные каталитические антитела и их возможное биологическое значение/ И.И. Генералов, Д.К. Новиков // Усп. совр. биол.-1998.-Т.118.-№2.-С. 178-193.

5. Гланц С. Медико-биологическая статистика. М.:Практика, 1999. - 459с.

6. Дарбре А. Практическая химия белка-М.:Мир, 1989.-528с.

7. Дильман В.М. Большие биологические часы. Введение в интегральную медицину.-М.: Знание, 1986.-256с.

8. Добродеева Л.К. Аутоантитела у практически здоровых людей/ Л.К. Добродеева, Г.А. Суслонова// Иммунология.-1990.-№2.-С.52-55.

9. Земсков A.M. Иммунная реактивность как фактор регуляции гомеостаза организма/ A.M. Земсков, В.М. Земсков, В.И. Золоедов, Е. Бжозовский// Усп. совр. биол.-1999.-Т.119.-№2.-С.99-114.

10. Иммунологические методы/ Отв. ред. Фримель Х.-М.'Медицина, 1987-472с.

11. П.Киселева В.И. Скрытые натуральные аутоантитела, реагирующие с ДНК и кардиолипином, перекрестно взаимодействуют с антигенами ВИЧ/ В.И. Киселева, И.В. Леках, Г.П. Безяева и др.// Иммунология.-2001.-№2.-С.12-15.

12. Клиническая эндокринология: Руководство/ Отв. ред. Старкова Н.Т-М. :Медицина, 1991.-512с.

13. Лакин Г.Ф. Биометрия-М.:Высшая школа, 1990.-352с.

14. Лапин С.В. Антинуклеарные антитела: лабораторные тесты и диагностическое значение/ С.В. Лапин, А.А. Тотолян// Мед. иммунол-2001.-Т.З.-№1.-С.З 5-50.

15. Лебедев К.А. Понятие нормы в оценке иммунного статуса человека/ К.А. Лебедев, И.Д. Понякина, Н.В. Козаченко// Физиол. чел.-1989.-Т.15.-№6-С.34-45.

16. Леках И.В. Гетерогенность и авидность аутоантител, реагирующих с ДНК/ И.В. Леках, Г.М. Ротт, A.M. Поверенный// Мол. биол.-1991.-Т.25.-№5.-С.1391-1399.

17. Леках И.В. Свойства свободных и скрытых природных антител, реагирующих с ДНК и кардиолипином/ И.В. Леках, В.И. Киселева, A.M. Поверенный// Мол. биол.-1997.-Т.31 .-№ 1 .-С. 176-179.

18. Маниатис Т. Молекулярное клонирование/ Т. Маниатис, Э. Фрич, Дж. Сэмбрук-М. :Мир, 1984.-456С.

19. Маркина О.А. Аутоантитела у детей с хроническими воспалительными заболеваниями легких/ О.А. Маркина, Н.Е. Ястребова, Н.П. Ванеева и др.// Журн. микробиол.-2001.-№6.-С.52-55.

20. Масяго А.В. Некоторые ошибки при постановке ИФА.-Кольцово, 2001 -32с.

21. Нго Н.Н. Иммуноферментный анализ/ Н.Н. Нго, Г.М. Ленхофф-М.:Мир, 1988.-360с.

22. Несвижский Ю.В. Особенности фенотипической изменчивости уровней аутоантител к ДНК у здоровых людей/ Ю.В. Несвижский, Л.Г. Сибирякова, Д.В. Корогодин и др.// Бюлл. эксп. биол. и мед.-1988.-№11.-С.585-587.

23. Несвижский Ю.В. Факторы изменчивости уровней аутоантител в человеческой популяции/ Ю.В. Несвижский. А.А. Воробьев// Вестн. Росс. Акад. мед. наук.-1996.-№8.-С.З-8.24.0стерман Л.А. Хроматография белков и нуклеиновых кислот-М.:Наука, 1985.-531с.

24. Панков Ю.А. Гормоны регуляторы жизни в современной молекулярной эндокринологии/ Ю.А. Панков// Биохимия.-1998.-Т.63.-С.1600-1615.

25. Паутова JI.B. Исследование взаимодействия полиреактивных антител с нуклеиновыми кислотами с помощью алкилирующих производных олигонуклеотидов/ JI.B. Паутова. Е.Ю. Рыкова, П.П. Лактионов и др.// Мол. биол.-1996.-Т.30.-Вып.4.-С.941-950.

26. Саттарова Л.И. Оптимизация иммуноферментной тест-системы для определения антител к ДНК/ Л.И. Саттарова, Л.А. Гафиятуллина, Д.Г. Аглиуллина и др.// Биотехнология.-1994.-№11-12.-С.38-41.

27. Семенов Б.Ф. Концепция аутоиммунитета в редакции конца 80-х и начала 90-х годов/ Б.Ф. Семенов// Журн. микробиол.-1995.-№3.-С.42-47.

28. Сидорова Е.В. Антигензависимые неспецифические иммуноглобулины. Природа и возможные механизмы образования/ Е.В. Сидорова// Усп. совр. биол .-1993 .-Т. 113 .-С.675-701.

29. Сметник В.П. Неоперативная гинекология: Руководство для врачей/ В.П. Сметник, Л.Г. Тумилович-С-Пб. :СОТИС, 1995-224с.

30. Фрейдлин И.С. Загадки тимуса. Возраст и иммунитет/ И.С. Фрейдлин// Соросовский образоват. журн.-1997.-№5-С.26-29.

31. Шубик В.М. Иммунитет и здоровье спортсменов/ В.М. Шубик, М.Я. Левин-М.:Физкультура и спорт, 1985-175с.

32. Ярилин А.А. Введение в современную иммунологию/ А.А. Ярилин, Н.А. Добротина-Нижний Новгород: Изд-во Нижегородского ун-та, 1997.-238с.

33. Ястребова Н.Е. Аутоантитела к ДНК и иммуноферментный метод их определения/ Н.Е. Ястребова, Н.П. Ванеева// Иммуноферментный анализ в диагностике заболеваний.-М., 1989-С.110-124.

34. Abakushin D.N. Histones interact with immunoglobulins and give them polispesificity/ D.N. Abakushin, A.M. Poverenny// Immunology Letters-1996.-V.53.-P.95-99.

35. Aggarwal S. Increased apoptosis of T cell subsets in aging humans: altered expression of Fas (CD95), Fas ligand, Bcl-2 and Bax/ S. Aggarwal, S. Gupta// J. Immunol.-l 998 .-V. 160.-P. 1627-1637.

36. Ahmed S.A. Gender and risk of autoimmune diseases: possible role of estrogenic compounds/ S.A. Ahmed, B.D. Hissong, D. Verthelyi et al.// Environ. Health Perspect.-l 999.-V. 107.-Suppl.5.-P.681 -686.

37. Araga S. The CD5+ В cell and myasthenia gravis/ S. Araga, M. Kishimoto, A.A.H. Nakayasu et al.// Autoimmunity.-1995.-V.20.-P.121-129.

38. Arbuckle M.R. Development of anti-dsDNA autoantibodies prior to clinical diagnosis of systemic lupus erythematosus/ M.R. Arbuckle, J.A. James, K.F. Kohlhase et al.// Scand. J. Immunol.-2001.-V.54.-P.211-219.

39. Avrameas S. Natural autoantibodies: from 'horror autotoxicus' to 'gnothi seauton'/ S. Avrameas// Immunol. Today.-1991.-V.12.-P. 154-159.

40. Azizah M.R. The prevalence of antinuclear, anti-dsDNA, anti-Sm and anti-RNP antibodies in a group of healthy blood donors/ M.R. Azizah, M.N Azila, M.N. Zulkifili et al.// Asian Рас. J. Allergy Immunol.-1996.-V.14.-№2.-P.125-128.

41. Baccala R. Two murine natural polyreactive autoantibodies are encoded by nonmutated germ-line genes/ R. Baccala, T. Vo Quang, M. Gilbert et al.// Proc. Natl. Acad. Sci. USA.-1989.-V.86.-P.4624-4628.

42. Barbas S.M. Human autoantibody recognition of DNA/ S.M. Barbas, H.J. Ditzel, E.M. Salonen et al.// Proc. Natl. Acad. Sci. USA.-1995.-V.92.-P.2529-2533.

43. Bynoe M.S. Estrogen up-regulates Bcl-2 and blocks tolerance induction of nai've В cells/ M.S. Bynoe, C.M. Grimaldi, B. Diamond// Proc. Natl. Acad. Sci-2000.-V.97.-№6.-P.2703-2708.

44. Candore G. Prevalence of organ-specific and non organ-specific autoantibodies in healthy centenarians/ G. Candore, G. Di Lorenzo, P.Mansueto et al.// Mech. Ageing Dev.-l 997.-V.94.-P. 183-190.

45. Candore G. Biological basis of the HLA-B8, DR3 associated progression of acquired immune deficiency virus syndrome/ G. Candore, G. Colonna Romano, C. D'Anna et al.// Pathobiology.-1998.-V.66.-P.33-37.

46. Casson P.R. Oral dehydroepiandrosterone in physiologic doses modulates immune function in postmenopausal women/ P.R. Casson, R.N. Andersen, H.D. Herrod et al.// Am. J. Obstet. Gynecol.-1993.-V.169.-P.1536-1539.

47. Chen С. Natural auto- and polyreactive antibodies differing from antigen-induced antibodies in the H chain CDR3/ C. Chen, M.P. Stenzel-Poore, M.B. Rittenberg// J. Immunol-1991 .-V.147-P.2346-2359.

48. Chen Z.J. Antigen-binding В cells and polyreactive antibodies/ Z.J. Chen, J. Wheeler, A.L. Notkins//Eur. J. Immunol.-1995.-V.25.-P.572-579.

49. Cook J.E. Analysis of lymphocyte diversity in the elderly: heteroduplex analysis and alternative techniques/ J.E. Cook, P.C.L. Beverley// Exp. Gerontol.-2001 -V.36.-P.583-589.

50. Coutinho A. Natural autoantibodies/ A. Coutinho, M.D. Kazatchkine, S. Avrameas// Curr. Opin. Immunol-1995.-V.7.-P.812-818.

51. Danel L. Specific estrogen binding sites in human lymphoid cells and thymic cells/ L. Danel, G. Souweine, J.C. Monier et al.// J. Steroid Biochem-1983-V.18.-P.559-563.

52. Eilat D. Anti-DNA antibodies: problems in their study and interpretation/ D. Eilat// Clin. Exp. Immunol.-1986.-V.65.-P.215-222.

53. Eilat D. Anti-DNA autoantibodies: a puzzle of autoimmune phenomena/ D. Eilat, Y. Naparstek// Immunol. Today.-1999.-V.10.-№8.-P.339-342.

54. Elson C.J. Autoreactive T cells repertoire/ C.J. Elson, N.A. Williams//Immunol. Today-1995.-V.16.-P.62-71.

55. Emlen W. A new ELISA for detection of ds-DNA antibodies/ W. Emlen, P. Jarusiripipat, G. Burdick// J. Immunol. Meth.-1990.-V.132.-P.91-101.

56. Filion M.C. Autoreactive T cells in healthy individuals show tolerance in vitro with characteristics similar to but distinct from clonal anergy/ M.C. Filion, A.J. Bradley, D.V. Devine et al.// Eur. J. Immunol.-1995.-V.25.-P.3114-3123.

57. Flatau E. Autoantibodies against double-strended and single-strended DNA in the aged/ E. Flatau, H. Bshara, Z. Shimoni et al.// Harefuah.-1992.-V.122.-№l.-P.l-4.

58. Foster M.H. Biology of disease. Nephritogenic autoantibodies in systemic lupus erythematosus: immunochemical properties, mechanisms of immune deposition, and genetic origins/ M.H. Foster. R. Cizman, M.P. Madaio// Lab. Invest-1993-V.69.-№5.-P.494-507.

59. Foster M.H. Molecular and structural analysis of nuclear localizing anti-DNA lupus antibodies/ M.H. Foster, T. Kieber-Emmons, M. Ohliger et al.// Immunol. Res.-l 994.-V. 13.-P. 186-206.

60. Francoeur A.M. Antibody fingerprinting: a novel method for identifying individual people and animals/ A.M. Francoeur// Biotechnology-1988.-V.6-P.815-822.

61. Gaynor B. Peptide inhibition of glomerular deposition of an anti-DNA antibody/ B. Gaynor, C. Putterman, P. Valadon et al.// Proc. Natl. Acad. Sci. USA.-1997.-V.94.-P. 1955-1960.

62. Globerson A. Ageing of lymphocytes and lymphocytes in the aged/ A. Globerson, R.B. Effross// Immunol. Today.-2000.-V.21.-№10.-P.515-521.

63. Grubeck-Loebenstein B. Changes in the aging immune system/ B. Grubeck-Loebenstein// Biologicals.-1997.-V.25.-P.205-208.

64. Guialis A. Anti 5S RNA/protein (RNP) antibody levels correlate with disease activity in a patients with SLE nephritis/ A. Guialis, M. Patrinou-Georgoula, N. Tsisefaki et al.// Clin. Exp. Immunol.-1994.-V.95.-№3.-P.385-389.

65. Guibert B. Naturally occurring antibodies against nine common antigens in human sera. Detection, isolation and characterization/ B. Guibert, G. Dighiero, S. Avrameas// J. Immunol.-1982.-V.128.-P.2779-2787.

66. Hahn B.H. Antibodies to DNA/ B.H. Hahn// N. Engl. J. Med.-1998.-V.338.-P.1359-1368.

67. Herrmann M. Preferential recognition of specific DNA motifs by anti-double-stranded DNA autoantibodies/ M. Herrmann, Т.Н. Winkler, H. Fehr et al// Eur. J. Immunol.-l995 -V.25.-№7.-P. 1897-1904.

68. Huber S.A. Hormonal regulation of CD4 T-cells responses in coxsackievirus B3-induced myocarditis in mice/ S.A. Huber, J. Kupperman, M.K. Newell// J. Virol.-1999.-V.73.-P.4689-4695.

69. James K. IL-6, DHEA and the ageing process/ K. James, N. Premchand, A. Skibinska et al.// Mech. Ageing Dev.-1997.-V.93 .-P. 15-24.

70. Jang Y.J. Modulation of fine specificity of by anti-DNA antibody by CDR3L residues/Y.J. Jang, D. Sanford//Mol. Immunol-2001 -V.38.-P.383-387.

71. Jerne N.K. Towards a network theory of the immune system/ N.K. Jerne// Ann. Inst. Pasteur Immunol.-1974.-V.125C.-№l-P.368-373.

72. Kalsi J.K. Functional and modeling studies of the binding of human monoclonal anti-DNA antibodies to DNA/ J.K. Kalsi, A.C. Martin, Y. Hirabayashi et al.// Mol. Immunol.-1996.-V.33.-P.471-483.

73. Kanda N. Testosterone inhibits immunoglobulin production by human peripheral blood mononuclear cells/ N. Kanda, T. Tsuchida, K. Tamaki// Clin. Exp. Immunol-1996.-V. 106.-№2.-P.410-415.

74. Kanda N. Testosterone suppresses anti-DNA antibody production in peripheral blood mononuclear cells from patients with systemic lupus erythematosus/ N. Kanda, T. Tsuchida, K. Tamaki// Arthritis Rheum.-1997.-V.40.-№9.-P.1703-1711.

75. Kanda N. Estrogen enhances immunoglobulin production by human PBMCs/ N. Kanda, K. Tamaki// J. Allergy Clin. Immunol.-1999.-V.103.-P.282-288.

76. Kasaian M.T. Identification and analysis of a novel human surface CD5" В lymphocyte subset producing natural antibodies/ M.T. Kasaian, H. Ikematsu, P. Casali// J. Immunol.-1992.-V.148.-P.2685-2690.

77. Kasjanov A. Antibodies against ss-DNA in persons of various age/A. Kasjanov, L. Cebecauer, V. Balaz//Mech. Ageing Dev.-l984.-V.28.-P.289-295.

78. Kearney J. Idiotype-directed interactions during ontogeny play a major role in the establishment of the adult В cell repertoire/ J. Kearney, M. Vakil// Immunol. Rev.-1986.-V.94.-P.27-39.

79. Kellerman S.A. TSN receptor sequences recognized by CD4+ T cells in Graves disease patients and healthy controls/ S.A. Kellerman, D.J. McCormick, S.L. Freeman et al.// J. Autoimmun.-1995.-V.8.-P.673-685.

80. Kindas-Mugge I. Similar frequency of AAB against 70kD class heat-shock proteins in healthy subjects and SLE-patients/1. Kindas-Mugge, G. Steiner, Y. Smolen// Clin. Exp. Immunol.-1993.-V.92.-№1.-P.46-50.

81. Kirman I. Increased apoptosis of bone marrow pre-B cells in old mice associated with their low number/ I. Kirman, K. Zhao, Y. Wang et al.// Int. Immunol.-1998.-V.10.-№9.-P. 1385-1392.

82. Kiyoi H. Comparable profiles of the immunoglobulin heavy chain complementarity determining region (CDR)-3 in CD5+ and CD5" human cord blood В lymphocytes/ H. Kiyoi, K. Naito, R. Ohno et al.// Immunology-1995 -V.85.-P.224-236.

83. Koren E. Murine and human antibodies to native DNA that cross-react with the A and D SnRnp polypeptides cause direct injury of cultured kidney cells/ E. Koren, M. Koscec, M. Wolfson-Reichlin et al.// J. Immunol.-1995.-V.154-P.4857-4864.

84. Kozyr A.V. Anti-DNA antibodies reveal toxicity to tumor cell lines/ A.V. Kozyr, L.P. Sashchenko, A.V. Kolesnikov et al.// Immunol. Lett.-2002.-V.80-P.41-47.

85. Krishna P. Interactions of anti-DNA antibodies with Z-DNA/ P. Krishna, M.J. Fritzler, J.H. Vande Sande// Clin. Exp. Immunol.-1993.-V.92-№l.-P.51-57.

86. Lacroix-Desmazes S. Self-reactive antibodies (natural autoantibodies) in healthy individuals/ S. Lacroix-Desmazes, S.V. Kaveri, L. Mouthon et al.// J. Immunol. Meth-1998.-V.216.-P. 117-137.

87. Lacroix-Desmazes S. Stability of natural self-reactive antibody repertoires during aging/ S. Lacroix-Desmazes. L. Mouthon, S.V. Kaveri et al.// J. Clin. Immunol.-1999.-V.19.-P. 14-26.

88. Laemmli U.K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage Т4/ U.K. Laemmli//Nature.-1970.-V.227.-P.680-685.

89. Lio D. Interleukin-5 production by mononuclear cells from aged individuals: implication for autoimmunity/ D. Lio, C. D'Anna, L. Scola et al.// Mech. Ageing Dev.-l 999.-V. 106.-P.297-304.

90. Litman R.M. Deoxyribonucleic acid polymerase from Micrococcus luteus {Micrococcus lysodeikticus) isolated on deoxyribonucleic acid-cellulose/ R.M. Litman//J. Biol. Chem.-1968.-V.243.-№23.-P.6222-6233.

91. Madaio M.P. Nuclear localization of autoantibodies. Novel insigts into protein translocation and cellular function/ M.P. Madaio, K. Yanase, M.H. Foster et al.// Ann. N. Y. Acad. Sci.-1997.-V.815.-P.263-266.

92. Maloum K. Analysis of Vh gene expression in CD5+ and CD5" B-cell chronic limphocytic leukemia/ K. Maloum, F. Davi, C. Magnac et al.// Blood-1995-V.86.-P.3875-3883.

93. Manoussakis M.N. High prevalence of anti-cardiolipin and other autoantibodies in a healthy elderly population/ M.N. Manoussakis, A.G. Tzioufas, M.P. Silis et al.// Clin. Exp. Immunol.-1987.-V.63.-№3-P.557-565.

94. Mariotti S. Thyroid and other organ-specific autoantibodies in healthy centenarians/ S. Mariotti, P. Sansoni, G. Barbesino et al.// Lancet-1992-V.239.-P. 1506-1508.

95. Martin J.T. Sexual dimorphism in immune function: the role of prenatal exposure to androgens and estrogens/ J.T. Martin// Eur. J. Pharmacol-2000-V.405.-P.251-261.

96. Martin R. Fine specificity and restriction of myelin basic protein specific cytotoxic T cell lines from multiple sclerosis patients and healthy controls/ R. Martin, D. Jaraquemada, M. Flerlage et al-// J. Immunol.-1990.-V.145.-P.536-540.

97. Mirilas P. Natural antibodies in childhood: development, individual stability, and injury effect indicate a contribution to immune memory/ P. Mirilas, C. Fesel, B. Guilbert et al.// J. Clin. Immunol.-1999.-V.19.-№2.-P. 109-115.

98. Miyawaki S. What are IgG antibodies to single-stranded DNA measured by enzyme immunoassay re-evaluation of their clinical significance/ S. Miyawaki, J. Genko, M. Kawamura// Ryumachi.-1995.-V.35.-№6-P.889-898.

99. Moiola L. Epitopes of the b subunit of human muscle acetylcholine receptor by CD4+ T cells of miastenia gravis patients and healthy subjects/ L. Moiola, P. Karachunski, M. Protti et al.// J. Clin. Invest.-1994.-V.93.-P. 1012-1020.

100. Mouthon L. The self-reactive antibody repertoire of normal human serum IgM is acquired in early childhood and remains stable throughout life/ L. Mouthon, S. Lacroix-Desmazes, A. Nobrega et al.// Scand. J. Immunol.-1996.-V.44.-P.231-243.

101. Mouthon L. Analysis of self-reactive antibody repertoires in normal pregnancy/ L. Mouthon, S. Lacroix-Desmazes, M. Kazatchkine// J. Autoimmun.-l 998.-V. 11 .-P.279-286.

102. Pisetsky D. Specificity of antibodies to bacterial DNA in the sera of healthy human subjects and patients with sistemic lupus erythematosus/ D. Pisetsky, D. Drauton, Z.Q. Wu//J. Rheumatol.-1999.-V.26.-№9.-P.1934-1938.

103. Potestio M. Apoptosis and ageing/ M. Potestio, C. Caruso, F. Gervasi et al.// Mech. Ageing Dev.-1998.-V.102.-P.221-237.

104. H.Pulsatelli L. Chemokine production by peripheral blood mononuclear cells in elderly subjects/ L. Pulsatelli, R. Meliconi, I. Mazzetti et al.// Mech. Ageing Dev.-2000.-V. 121 .-P.89-100.

105. Ray S.K. Pathogenic autoantibodies are routinely generated during the response to foreign antigen: a paradigm for autoimmune disease/ S.K. Ray, C. Putterman, B. Diamond// Proc. Natl. Acad. Sci. USA.-1996.-V.93.-P.2019-2024.

106. Reichlin M. Characterization of anti-dsDNA antibodies: cross-reaction with SnRNP polypeptides and cell-binding abilities/ M. Reichlin, B. Hahn, E. Koren// The Immunologist.-1995.-V.3.-№3.-P.84-88.

107. Sano H. Binding properties of human anti-DNA antibodies to cloned human DNA fragments/H. Sano, O. Takai,N. Harata et al.// Scand. J. Immunol-1989-V.30.-№l.-P.51-63.

108. Sharma A. Crossreactivity of human anti-dsDNA antibodies to phosphorilcholine: clues to their origin/ A. Sharma, D.A. Isenberg, B. Diamond// J. Autoimmun.-2001 .-V. 16.-P.479-481.

109. Shearer G.M. Thl/Th2 changes in aging/ G.M. Shearer//Mech. Ageing Dev-1997.-V.94.-P.1-5.

110. Shi W. Prevalence of lupus anticoagulant and anticardiolipin antibodies in a healthy population/ W. Shi, S.A. Krilis, B.M. Chong et al.// Austral, and N. Z. J. Med.-1990.-V.20.-№3.-P.231-236.

111. Shuller E. Immunological studies in human ageing: associated increase in anti-RNA and anti-DNA antibodies/ E. Shuller, A. Allinquant// J. Clin. Lab. Immunol.-l 981 .-V.6.-P. 101 -107.

112. Smeenk RJ.T. Dissociation studies of DNA/anti-DNA complexes in relation to anti-DNA avidity/ RJ.T. Smeenk, A. Van Rooijen, T.J.D. Swaak// J. Immunol. Meth.-1988.-V.109.-P.27-35.

113. Smeenk R.J.T. Anti-dsDNA: choice of assay in relation to clinical value/ RJ.T. Smeenk, H.G. van den Brink, K. Brinkman et al.// Rheumatol. Int.-1991-V.l l.-№3.-P.101-107.

114. Smeenk RJ.T. Antinuclear antibodies: cause of disease or caused by disease?/ RJ.T. Smeenk// Rheumatology .-2000.-V39.-P.581-584.

115. Spatz L. Studies of the structure, regulation, and pathogenic potential of anti-dsDNA antibodies/ L. Spatz, A. Iliev, V. Saenko et al.// Methods: A companion to methods in enzymology.-1997.-V.l 1.-P.70-78.

116. Spatz L. Light chain usage in anti-double-stranded DNA В cell subsets: role in cell fate determination/ L. Spatz, V. Saenko, A. Iliev et al.// J. Exp. Med-1997-V.185.-№7.-P. 1317-1326.

117. Sun K.H. Anti-dsDNA antibodies cross-react with ribosomal P proteins expressed on the surface of glomerular mesangial cells to a cytostatic effect/ K.H. Sun, W.T. Liu, C.Y. Tsai et al.// Immunology.-1995.-V.85.-№2.-P.262-269.

118. Swaak T. Detection of anti-ds-DNA as a diagnostic tool: a prospective study in 441 normal non-systemic lupus erythematosus patients with anti-dsDNA antibody (anti-dsDNA)/ T. Swaak, R. Smeenk//Ann. Rheum. Dis.-1985.-V.44-P.245-251.

119. Swanson P.C. Ligand recognition by anti-DNA autoantibodies. Affinity, specificity, and mode of binding/ P.C. Swanson, C. Ackroyd, G.D. Glick// Biochemistry .-1996.-V.3 5 .-№5 .-P. 1624-1633.

120. Tan E.M. Range of antinuclear antibodies in "healthy" individuals/ E.M. Tan, Т.Е. Feltkamp, J.S. Smolen et al.// Arthritis Rheum.-l997 -V.40.-№9.-P. 16011611.

121. Tanner J.J. Crystal structure of an antigen-binding fragment bound to single-stranded DNA/ J.J. Tanner, A.A. Komissarov, S.L. Deutscher// J. Mol. Biol-2001 -V.314.-P.807-822.

122. Tsokos G.C. Molecular aberrations in-human systemic lupus erythematosus/ G.C. Tsokos, G.M. Kammer// Mol. Med. Today-2000.-V.6.-P.418-424.

123. Van Helden P.D. Autoantibodies from patients with systemic lupus erythematosus can affect DNA and RNA synthesis in cultured cells/ P.D. Van Helden, L. Van Lill, A.J. Bester et al.// Biochimica et Biophysica Acta-1989-V.1009.-№2.-P. 137-142.

124. Verthelyi D. 17beta-estradiol, but not 5alpha-dihydrotestosterone, augments antibodies to double-stranded deoxyribonucleic acid in nonautoimmune C57BL/6J mice/ D. Verthelyi, S.A. Ahmed// Endocrinology.-1994.-V.135.-№6.-P.2615-2622.

125. Vlahakos D. Murine monoclonal anti-DNA antibodies penetrate cells, bind to nuclei, and induce glomerular proliferation and proteinuria in vivo/ D. Vlahakos, M.H. Foster, A.A. Ucci et al.// J. Am. Soc. Nephrol-1992-V.2.-P.1345-1354.

126. Wang Y. Anti-DNA antibodies exhibit different binding motif preferences for single stranded or double stranded DNA/ Y. Wang, J. Mi, X. Cao// Immunol. Lett.-2000.-V.73.-P.29-34.

127. Weksler M.E. Changes in the B-cell repertoire with age/ M.E. Weksler// Vaccine.-2000.-V. 18.-№ 16.-P. 1624-1628.

128. Weksler M.E. The effect of age on the B-cell repertoire/ M.E. Weksler, P. Szabo// J. Clin. Immunol.-2000.-V.20.-№4.-P.240-249.

129. Williams W.M. A cross-sectional study of anti-DNA antibodes in the serum and IgG and IgM fraction of healthy individuals, patients with systemic lupus erythematosus and their relatives/ W.M. Williams, D.A. Isenberg// Lupus 1996.-V.5.-P.576-586.

130. Xavier R.M. Antinuclear antibodies in healthy aging people: a prospective study/ R.M. Xavier, Y. Yamauchi, M. Nakamura et al.// Mech. Ageing Dev-1995-V.78.-P. 145-154.

131. Yadin O. Natural autoantibodies in the serum of healthy women-a five-year follow-up/ O. Yadin, B. Sarov, L. Naggan et al.// Clin. Exp. Immunol-1989-V.75.-P.402-406.

132. Yamada E. Structural changes of immunoglobulin G oligosaccharides with age in healthy human serum/ E. Yamada, Y. Tsukamoto, R. Sasaki et al.// Glycoconjugate J.-1997.-V.14.-P.401-405.

133. Yanase K. A subgroup of murine monoclonal anti-deoxyribonucleic acid antibodies traverse the cytoplasm and enter the nucleus in a time- and temperature-dependent manner/ K. Yanase, R.M. Smith, B. Cizman et al.// Lab. Invest.-! 994.-V.71 .-№1 -P.52-60.

134. Yanase К. Receptor-mediated cellular entry of nuclear localizing anti-DNA antibodies via myosin 1/ K. Yanase, R.M. Smith, A. Puccetti et al.// J. Clin. Invest.-1997.-V. 100.-№ 1 .-P.25-31.

135. Ye Y.L. In vitro and in vivo functional analysis of CD5+ and CD5" B-cells of NZBxNZW F1 mice/ Y.L. Ye, Y.H. Chuang, B.L. Chiang// Clin. Exp. Immunol -1996 -V. 106.-P.246-253.

136. Yu C.L. Anti-dsDNA antibody up-regulates interleukin 6, but not cyclooxygenase, gene expression in glomerular mesangial cells: a marker of immune-mediated renal damage?/ C.L. Yu, K.H. Sun, C.Y. Tsai et al.// Inflamm. Res.-2001.-V.50.-P.12-18.

137. Zamulaeva I.A. Natural hidden antibodies reacting with DNA or cardiolipin bind to thymocytes and evoke their death/ I.A. Zamulaeva, I.V. Lekakh, V.I. Kiseleva et al.// FEBS Letters.-1997.-V.413.-P.231-235.

138. Zouali M. IgG subclass distribution of autoantibodies to DNA and nuclear ribonucleoproteins in autoimmune diseases/ M. Zouali, R. Jeffries, A. Eyquem// Immunology .-1984.-V.51.-P.595-600.