Антипролиферативные и антиопухолевые свойства синтетических аналогов полиаминов

Голомазова, Ксения Алексеевна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Антипролиферативные и антиопухолевые свойства синтетических аналогов полиаминов
ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Автореферат диссертации по теме "Антипролиферативные и антиопухолевые свойства синтетических аналогов полиаминов"

На правах рукописи

Голомазова Ксения Алексеевна

Антипролиферативные и антиопухолевые свойства синтетических аналогов полиаминов

(03.00.04 - биохимия)

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Москва - 2006

.Г¿4

Работа выполнена на кафедре биохимии медицинского факультета Российского университета дружбы народов

Научный руководитель:

доктор биологических наук, профессор Сяткин Сергей Павлович

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор Трещалина Елена Михайловна доктор биологических наук, профессор Сыроешкин Антон Владимирович

Ведущая организация:

Российский государственный медицинский университет

Защита диссертации состоится «19» мая 2006 года в 14.00 часов на заседании диссертационного совета Д 212.203.13 при Российском Университете дружбы народов по адресу: 117198, Москва, ул. Миклухо-Маклая, д. 8, медицинский факультет.

С диссертацией можно ознакомиться в научной библиотеке Российского Университета дружбы народов по адресу: 117198, Москва, ул. Миклухо-Маклая, д. 6.

Автореферат разослан «10» апреля 2006 г.

Ученый секретарь

диссертационного совета Д 212.203.13 доктор фармацевтических наук, доцент

Т.П.Лагуткина

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность проблемы

В настоящее время стало очевидным, что методология подходов разработки новых перспективных химиотерапевтических соединений направленного действия с заранее заданными свойствами должна базироваться на фундаментальных исследованиях особенностей метаболизма опухолевой клетки. В этом отношении обмен полиаминов (ПА), являющихся эссенциальными факторами процессов клеточного роста и дифференцировки [1], может быть чрезвычайно важным фактором для прогноза влияния различных агентов на клеточную пролиферацию. При этом высокий уровень ПА может свидетельствовать о наличии канцерогенных свойств вещества, а снижение их уровня, в том числе за счет ингибирования ключевых ферментов синтеза или активации ключевых ферментов распада ПА — о возможном антипролиферативном действии [27].

В этой связи интерес представляет изучение лекарственных веществ, содержащих остаток ПА в структуре, в частности, производных фенотиазина и бензодиазепина. Существует гипотеза о том, что аналоги ПА способны замещать эндогенные ПА в клетке в участках связывания. Это приводит к нарушению функций внутриклеточных ПА [17].

Изучение влияния выбранных веществ на обмен ПА в нормальных и опухолевых клетках дает возможность оценить их возможное канцерогенное либо антипролиферативное действие и, таким образом, расширить и уточнить сведения об их фармакологических свойствах. В соответствии с этим в исследование включены 12 лекарственных психотропных препаратов из группы фенотиазина и бензодиазепина, а так же 12 новых оригинальных синтетических веществ, содержащих в своей структуре ПА фрагменты.

Цель исследования

Оценка влияния различных синтетических аналогов полиаминов на уровнь полиаминов и активность различных аминооксидаз для прогноза их канцерогенных и антипролиферативных свойств.

Задачи исследования

1. Модифицировать метод высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) для количественного определения содержания ПА в биологических пробах.

2. Оценить влияние психотропных препаратов - стрктурных аналогов ПА на уровень ПА, активность аминоксидаз и орнитиндекарбоксилазы.

3. Оценить влияние оригинальных веществ - структурных аналогов ПА на уровень ПА, активность аминоксидаз и орнитиндекарбоксилазы.

4. Прогноз канцерогенных и антипролиферативных свойств для психотропных препаратов.

5. Прогноз канцерогенных и антипролиферативных свойств для оригинальных синтетических веществ.

Научная новизна работы

Впервые показана возможность использования модифицированного метода ВЭЖХ для определения уровня ПА и активности орнитиндекарбоксилазы в более безопасных условиях благодаря использованию ацетонитрила вместо метанола в качестве элюента.

Впервые проведено исследование воздействия аналогов ПА 12-ти известных психотропных препаратов из группы бензодиазепина и фенотиазина, а также 12-ти новых оригинальных синтетических соединений на метаболизм ПА в бесклеточных тест-системах.

Результаты экспериментов позволили впервые установить, что среди тестированных агентов нет потенциальных канцерогенов. Впервые выявлены 3 препарата (аминозина гидрохлорид, ридозина гидрохлорид, трифтазин, галоперидол и амитриптилина гидрохлорид) и 2 оригинальных синтетических соединения (1-амино-4-азафлуорен и 1,4-

диазоацетонафтилено[ 1,2-1]флуорантен), обладающих

потенциальными антипролиферативными свойствами.

Практическая значимость работы

Предложенная модификация метода определения уровня ПА и активности ОДК с помощью ВЭЖХ позволяет снизить его токсичность и сократить время анализа, что упрощает практическую лабораторную работу.

Результаты исследований формируют базу данных для разработки программного обеспечения расчетов связи «структура-активность» при компьютерном моделировании химических структур с заданными биологическими свойствами, в частности с канцерогенной и антипролиферативной активностью.

Результаты изучения новых свойств известных психотропных препаратов дополняют сведения об. их фармакологическом действии, что может быть использовано в пактической фармакологии. Данные о новых синтетических соединениях, содержащих ПА остатки, могут быть использованы в для синтеза агентов с улучшенными свойствами.

Положения, выносимые на защиту

1. Модифицированный метод ВЭЖХ с ацетонитрилом в качестве элюента вместо метанола можно использовать для определения активности орнитиндекарбоксилазы и уровней ПА.

2. Аминазина гидрохлорид, ридазина гидрохлорид и трифтазин, амитриптилина гидрохлорид, галоперидол (психотропные преператы из группы бензодиазепина и фенотиазина) повышают активность аминоксидаз.

3. Хлопротиксена гидрохлорид, аминазина гидрохлорид, ридазина гидрохлорид снижают активность орнитиндекарбоксилазы на 48,6-70% в бесклеточной системе из регенерирующей ткани печени, а также из ткани гепатомы Г-27 крыс, где наиболее активным был галоперидол.

4. Синетические оригинальные вещества 1-амино-4-азафлуорен и 1,4-диазоацетонафтилено[1,2-4]флуорантен снижают активность ОДК на 50-70% в бесклеточной системе из регенерирующей ткани печени, а также из ткани гепатомы Г-27 крыс.

5. 7-аминопиридо[1,2-а] бензимидазол, 3 -дицианометилен-4-азафлуорен,

1-амино-9-фениламино-4-азафлуорен и 1,4-

диазоацетонафтилено

[ 1,2флуорантен снижают активность орнитиндекарбоксилазы на 50,5-83,2% в бесклеточной системе из регенерирующей ткани печени, а также из ткани гепатомы Г-27 крыс. Эти же вещества вызывали такое же снижение уровня ПА в обеих тест-системах.

6. Изученные психотропные препараты, а также оригинальные химические соединения не повышают уровень ПА в бесклеточной системе из регенерирующей ткани печени, что свидетельствует об отсутствии канцерогенных свойств.

7. Наиболее вероятны антипролиферативные свойства у структурных аналогов ПА из группы психотропных препаратов: хлопротиксена гидрохлорида, аминазина гидрохлорида, ридазина гидрохлорида; и у оригинальных структурных аналогов ПА: 1-амино-4-азафлуорена, 1-амино-9-фениламино-4-азафлуорена и 1,4-диазоацетонафтилено[1,2-£]флуорантена.

Апробация работы

Результаты работы были доложены на отечественных и международных конгрессах и конференциях: третьей, четвертой и пятой международных конференциях «клинические исследования лекарственных средств», на итоговой научной студенческой конференции РУДН, на четвертой международной конференции студентов и молодых ученых «Актуальные вопросы спортивной медицины, лечебной физической культуры, физиотерапии и курортологии».

Апробация диссертации состоялась 27 марта 2006

года.

' Публикации.

По теме диссертации опубликовано 10 научных работ, в том числе 3 статьи в международных журналах и 7 тезисов.

Структура и объем диссертации

Диссертация изложена на 129 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, главы с описанием материалов и методов, 3-х глав с описанием результатов собственных исследований, обсуждения результатов и выводов. Список литературы включает 223 источника, из них 187 зарубежных и 36 отечественных. Работа иллюстрирована 16 рисунками и 17 таблицами.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Материалы и методы исследования

В ходе эксперимента проводились исследования биологических свойств структурных аналогов полиаминов, условно разделенных на две группы: лекарственные вещества (Рис. 1) и соединения оригинального синтеза (Рис. 2).

Лекарственные вещества были получены из Института экспериментальной патологии, онкологии и радиобиологии им. Р. Е. Кавецкого НАН Украины в следующих лекарственных формах: таблетки (вещества I, II, IV, VII, VIII, IX, X, XII) и инъекционные растворы в ампулах (вещества III, V, VI, XI). Соединения оригинального синтеза были получены из лаборатории

органического синтеза, кафедра органической химии РУДН, в виде порошков.

Все исследуемые вещества растворяли в соответствии с их физико-химическими свойствами до конечной концентрации в пробах, равной 0,1 мМ. Приготовленные растворы хранили в плотно закрытых емкостях темного стекла в холодильнике.

Рис. 1. Структурные формулы лекарственных веществ.

№ Название Формула

I Хлорпротиксен гидрохлорид

II Тизерцин (левомепромазин) Н Н2 Н2С-С-С-Ы(СН3)2

III Аминазин <СН2)зМ<СНз)2 оог

IV Ридазин |!Нз иИ ~ сох-

V Трифтазин СН 5 'HCl Ч 1 (СН г), ОССт"

VI Флуфеназин « - s N--Í5-JJ-N )-СНгСН2ОН CF3

vir Мажептил СНЭ О N 1 (СНг)з 2N(CH 3)г

VIII Азалептин ^.ст о

IX Амитриптилин

X Мелипрамин »HCl [cH2)3N(CH2)2

XI Галоперидол / w л \=-J OH /) F

XII Эглонил Г3 N CH2NH^c^O -- H2N-OîS'^"^5555^"'^

Рис. 2 Структурные формулы веществ оригинального синтеза.

№ Название Формула

1 7- аминопиридо[1,2-а] бензимидазол

2 7-нитропиридо[1,2-а]бензимидазол

3 1 -амино-4-азафлуорен шг

4 1 -амино-4-азафлуоренол ОН NN2

5 З-дицианометилен-4-азафлуорен

6 9-[а-(Р-гидроксиэтил) аминометилен]-4- азафлуорен НС- _СН2СН2ОН N н

7 9-[а- пиридилаимнометилен]-4-азафлуорен «^Л /—ч ) СИ N-У

8 1 -амино-9-фениламино-4-азафлуорен ö

9 1 -амино-4-азафлу оренон-9 о nh2

10 1,4- диазоацетонафтилено[1,2-Цфлуорантен

11 2- метоксикарбонил-ф-бензоилэтил)анилин ^^сооснз

12 5-(2- метоксикарбонил)фенил-а-фурфурол н

Парциальная гепатэктомия проводилась по методике Higgins, Anderson (1931) под эфирной анестезией. Для получения регенерирующей ткани печени животных забивали декапитацией через 12-15 часов после операции. Извлекали малые дольки печени и перфузировали на льду физиологическим раствором с температурой 2-4°С, взвешивали и гомогенизировали. . Бесклеточные тест-системы представляли собой цитозольную

фракцию (20 ООО g х 20 мин при 4°С) 33 % - гомогената ткани печени с добавлением необходимых компонентов. Полученный супернатант 33% гомогената использовали для экспериментов по определению активности аминоксидаз (по методике в модификации С. П. Сяткина, 1981) и ОДК, уровня полиаминов

Рис. 3 Хромато-масс- спектр стандартных бензоильных производных полиаминов

Raes Spectry» 0S/19/B5 17:23:08 Sa.pl»: PR г CotHia.:

Tt.p; ЗИ Org. С 100. В

50. в

■/я 100.0

5в гях

Data: Т4446 ИЗ Call: esasB-t «3

Base i>'z: 105 R1 С: 45B24B.

80768, в.

134

162

191

.......

208

^248 250

SPEC:

33$

...365....,,

456

1.....'

4SB

С. П., Голомазовой К. А, 2006). Пробы предварительно производных полиаминов (для определения их подлинности и количественного содержания, рис. 3).

Затем проводили определение оптической плотности растворов бензоильных производных в следующих условиях. Хроматограф «Милихром 5-3», длина волны 254 нм, колонка с обращенной фазой С) 8. Определение проводили в режиме градиентного элюирования. В качестве элюента использовали систему ацетонитрил-вода. Концентрации ацетонитрила

Рис. 4 Хроматограмма стандартных производных путресцина, спермидина и спермина (метод ВЭЖХ)

*Ч<..1 ».» «I»КМмт Щ-УЛ-ХМ«*"» «Г'РЛМЧН!'!

Удлинит» »Ч^МГ'Г** X I> «-><•*• ».V V «а г-р» * (р.*«»**-*«* К|Г«<ИЛ<?Ч>»'Л

* О

« КХЛ**

а ( г-н-л» л"-'—»» гч* о*"» >

» ■ Л

3. - ЛОО — ». ,<>*>' :Ю.ОО •»»««Ч

ало-

г лоо

С* О О О'ЛОО ооочч оооо оооо

л о о

- О 5* — о?л

*<»«>

составляли 0% (0 - 1 минута), 0-20% (2-3 минута), 10-50% (4-10 минута), 50-75% (11-13 минута) и 75-100% (14 - 20 минута). На рисунке 4 представлена хроматограмма ВЭЖХ стандартных бензоильных производных полиаминов.

Расчет количеств бензоильных производных полиаминов проводился автоматически по компьютерной программе прибора «Милихром 5-3» с учетом предварительного анализа площадей пиков бензоильных производных путресцина, спермидина и спермина в растворах стандартов.

Штамм гепатомы Г-27 был получен из Онкологического научного центра РАМН им. Н. Н. Блохина. Штамм гепатомы пассировался на крысах, как было описано ранее И. Н.

Швембергер (1970). В экспериментах использовали белых беспородных крыс - самцов массой 100 - 130 г, содержащихся на стандартном рационе вивария РУДН со свободным доступом к воде. Первично гепатома Г-27 (из ампулы) перевивалась белым беспородным крысам. Ткань гепатомы, полученная в этом пассаже не может быть использована для определения активности ОДК и уровня полиаминов и перевивается в следующий раз через 2 недели. Для перевивки берется ткань с периферических участков опухоли, очищается от соединительной ткани, измельчается с физиологическим раствором и перевивается следующему животному (1 мл клеточной массы на 1 животное). Ткань второго и последующих пассажей используется для экспериментов по определению активности ОДК и уровней полиаминов.

Количество белка в пробах исследуемых тканей определяли по Ьо\\ту (1951) в модификации С.П. Сяткина (1981).

Статистический анализ полученных результатов проводили традиционными методами вариационной статистики. Различия считались достоверными при р<0.05

Результаты исследования

Было проведено исследование влияния веществ структурных аналогов полиаминов из группы лекарственных средств и веществ оригинального синтеза на обмен полиаминов. Для этого были выбраны две бесклеточные тест-системы из тканей с повышенным митотическим индексом:

1) регенерирующая печень крыс — нормально пролиферирующая ткань с усиленным синтезом полиаминов за счет повышения активности ОДК и с нормальной активностью аминоксидаз ПАО и ДАО;

2) солидная гепатома крыс Г-27 — опухолевая ткань с повышенной патологической клеточной пролиферацией, характеризующейся нормальной или незначительно повышенной активностью ОДК и практически полной потерей активности аминоксидаз ПАО и ДАО.

1. Исследование биологических свойств синтетических аналогов полиаминов из группы лекарственных веществ.

1. 1. Тест-система из регенерирующей печени крыс.

1.1.¡.Влияние на активность аминоксидаз.

Влияние психотропных препаратов на обмен полиаминов в бесклеточной тест-системе из регенерирующей печени крыс

оценивали по характеру и величине их действия на активность аминоксидаз - ПАО и ДАО. Полученные экспериментальные данные представлены в таблице 3. Они свидетельствуют о том, что среди лекарственных препаратов — структурных аналогов полиаминов (1-я группа веществ), все исследованные вещества

Таблица 3.

Влияние лекарственных веществ на скорость окислительного дезаминирования путресцина, спермидина и спермина в

Вещество ДАО ПАО ПАО

путресцин спермидин спермин

Контроль 5,47±0,004 6,84±0,005 7,52±0,004

I 16,73±0,02* 13,00±0,02* 1,35±0,05*

II 7,82±0,1* 14,94±0,1* 7,01±0,07*

III 12,52±0,06* 19,48±0,02* 9,97±0,06*

IV 14,31 ±0,05* 8,22±0,1* 10,53±0,1*

V 10,11 ±0,05* 14,37+0,02* 8±0,04*

VI 10,2±0,2* 11,98±0,02* 5,7±0,08*

VII 7,18±0,07* 14,25±0,2* 5,94±0,01*

VIII 8,83±0,08* 1,46±0,07* 8,72±0,01*

IX 12,3±0,05* 8,08±0,1* 7,47±0,06*

X 11,64±0,05* 10,77±0,4* 2,39±0,01*

XI 11,28±0,05* 7,9±0,07* ' 8,54±0,04*

XII 10,88±0,05* 11,6б±0,03* 4,41±0,04*

Примечание. В таблице приведена удельная активность ДАО и ПАО в нкат/мг белка. Результаты представлены в виде М± т для 9 проб. * Статистически достоверные отличия от контроля, Р<Р.05

увеличивают распад путресцина, спермидина (за исключением вещества VIII) и спермина, за исключением веществ I, II, VI, VII, IX, X и XII.

1.1.2. Влияние на активность ОДК и уровни полиаминов.

Влияние психотропных препаратов на обмен полиаминов в ткани регенерирующей печени оценивали по характеру и силе их действия на скорость синтеза полиаминов. Результаты этой серии опытов представлены в таблице 4. Следует отметить, что все

исследованные вещества ингибировали активность ОДК. Самыми сильными ингибиторами активности ОДК оказались вещества I, III, IV и IX.

Таблица 4.

Влияние лекарственных веществ на активность ОДК в бесклеточной тест — системе из регенерирующей печени крыс

Вещество Активность ОДК % ингибировании

Контроль 13,32±0,06 0

I 6,85±0,07* 48,6

II 11,38±0,09* 14,59

III 5,26± 0,04* 60,5

IV 6,35±0,07* 52,3

V 10,59±0,08* 20,50

VI 10,52±0,06* 21,05

VII 11,96±0,07* 10,22

VIII 11,01±0,06* 17,36

IX 9,21±0,05* 30,87

X 9,81±0,07* 26,32

XI 9,95 ±0,08* 25,28

XII 10,34±0,07* 22,33

Примечание. В таблице приведена удельная активность ОДК в нкат/мг белка. Результаты представлены в виде М± т для 9 проб *Статистически достоверные отличия от контроля, Р<0.05 увеличивают распад путресцина, спермидина (за исключением вещества VIII) и спермина, за исключением веществ I, И, VI, VII, IX, X и XII.

Таблица 5.

Влияние лекарственных веществ на уровни полиаминов в бесклеточной тест — системе из регенерирующей печени крыс

Вещества Концентрации полиаминов, нмоль/мл

Путресцин Спермидин Спермин

Контроль 23,1±0.06 18,2±0.06 3,8±0.04

I 10,2±0.04* 3,2±0.05* 1,5±0.05*

II 20,4±0.05 * 17,0±0.04* 2,5±0.04*

III 19,6±0.06* 8,5±0.06* 1,6±0.05*

IV 16,4±0.07* 7,9±0.05* 1,4±0.04*

V 10,0±0.05* 10,2±0.06* 3,1±0.04*

VI 10,0±0.06* 9,5±0.05* 2,8±0.05*

VII 19,6±0.06* 13,0±0.06* 3,2±0.05*

VIII 18,5±0.04 * 12,0±0.04* 3,2±0.04*

IX 9,5±0.05* 10,3±0.04* 2,8±0.06*

X 10,9±0.4 * 12,5±0.05* 2,9±0.05*

XI 10,0±0.05 * 13,6±0.04* 3,0±0.04*

XII 29,8±0.06* 15,8±0.05* 3,3±0.05*

Примечание. В таблице приведена концентрация полиаминов в нмоль/мл. Результаты представлены в виде М+- т для 9 проб. * Статистически достоверные отличия от контроля, Р<0.05

Уровни полиаминов рассматривали как интегральные показатели изменения баланса скорости распада и синтеза полиаминов под влиянием тестируемых веществ. Все исследованные соединения, кроме XII, вызывали снижение уровней путресцина и полиаминов. Наиболее эффективными оказались I, III и IV.

1.2. Влияние лекарственных веществ на активность ОДК и уровни полиаминов в бесклеточной тест-системе из гепатомы Г-27

крыс.

Аналогичным образом оценивали влияние психотропных препаратов на скорость синтеза полиаминов в бесклеточной тест-системе из гепатомы Г-27 крыс. Результаты представлены в таблице 5. Следует отметить, что наибольшее ингибирующее влияние на активность ОДК оказывали вещества I, III, IV.

Таблица 6.

Влияние лекарственных веществ на активность ОДК в бесклеточной тест - системе из гепатомы Г-27 крыс

Вещество Активность ОДК % ингибирования

Контроль 18,21±0,07 0

I 7,25±0,06 * 60,19

II 12,36±0,07* 32,12

III 6,3 2± 0,06* 65,29

IV 7,03±0,06* 61 »39

V 11,89±0,07* 34,71

VI 11,36±0,07* 37,62

VII 13,56±0,06* 25,54

VIII 12,98±0,07* 28,72

IX 10,52±0,05* 42,23

X 10,65±0,06* 41,52

XI 11,32±0,07* 37,84

XII 11,39±0,08* 37,45

Примечание. В таблице приведена удельная активность ОДК в нкат/мг белка. Результаты представлены в виде М± т для 9 проб. *Статистически достоверные отличия от контроля,Р<0.05

Таблица 7.

Влияние лекарственных веществ уровни полиаминов в бесклеточной тест — системе из гепатомы Г-27 крыс_

Вещества Концентрации полиаминов, нмоль/мл

Путресцин Спермидин Спермин

Контроль 56,4±0.05 42,8±0.06 35,1±0.04

I 29,1 ±0.04* 1,43±0.03* 11,7±0.03*

II 43,1±0.05* 30,2±0.04* 29,6±0.04*

III 20,1±0.06* 20,8±0.06* 12,1±0.03*

IV 19,6±0.04* 20,0±0.05'" 11,9±0.03*

V 39,1±0.05* 29,8±0.06* 20,5±0.04*

VI 38,8±0.06* 25,6±0.05* 19,6±0.05*

VII 45,2±0.06* 39,5±0.06* 30,8±0.05*

VIII 46,2±0.04* 30,8±0.04* 28,6±0.04*

IX 35,1±0.05* 24,6±0.04* 10,8±0.06*

X 32,3±0.4* 23,5±0.05* 19,1±0.05*

XI 35,1±0.05* 28,6±0.04* 19,2 ±0.04*

XII 35,8±0.06* 29,0±0.05* 21,5±0.05*

Примечание. В таблице приведена концентрация полиаминов в нмоль/мл. Результаты представлены в виде М± т для 9 проб. *Статистически достоверные отличия от контроля, Р<Р.05.

Все протестированные вещества так же, как и в серии опытов с регенерирующей печенью, вызывали понижение уровней путресцина и полиаминов. Наиболее активными были I, III и IV.

Таким образом, предварительный анализ результатов исследований по влиянию психотропных препаратов на активность ферментов синтеза и распада полиаминов показывает, что наиболее перспективными с точки зрения канцеростатических свойств можно считать вещества I, III, IV и IX, так как они в наибольшей мере подавляют синтез и активируют распад полиаминов.

2. Исследование биологических свойств синтетических аналогов полиаминов из группы веществ оригинального синтеза.

2.1. Тест-система из регенерирующей печени крыс.

2.1.1.Влияние на активность аминоксидаз. Количественную оценку влияния данной группы веществ на обмен полиаминов проводили аналогичным с предыдущей серией опытов образом. Полученные экспериментальные данные суммированы в таблице 8. Они свидетельствуют о том, что все

Таблица 8.

Влияние веществ оригинального синтеза на скорость окислительного дезаминирования путресцина, спермидина и спермина в бесклеточной тест — системе из регенерирующей

Вещество ДАО путресцин ПАО спермидин ПАО спермин

Контроль 12,77±0,07 23,15+0,009 6,06+0,003

1 9,27+0,08* 5,56+0,03* 6,06+0,2*

2 2,78+0,02* 0,36±0,01* 29,61+0,09*

3 14,81±0,01* 13,18+0,02* 31,59+0,04*

4 4,63+0,03* 29,78+0,03* 28,71+0,01*

5 3,7±0,05* 9,26+0,02* 27,61+0,04*

6 0,93+0,01* 14,82±0,01* 27,32+0,03*

7 10,19+0,01* 29,63+0,02* 22,41+0,05*

8 6,48±0,02* 21,32+0,01* 32,24+0,1*

9 10,18+0,05* 35,19+0,04* 23,3+0,02*

10 22,22+0,01* 37,97+0,2* 24,48+0,03*

И 5,56+0,01* 11,11+0,05* 19,67+0,04*

12 13,87±0,01* 25,09+0,02* 23,29+0,02*

Примечание. В таблице приведена удельная активность ДАО в нкат/мг белка. Результаты представлены в виде М± т для 9 измерений.. *Статистически достоверные отличия от контроля, Р<0.05

исследованные вещества, кроме 1, существенно увеличивают распад спермина. Окисление путресцина ускоряют соединения 3, 10 и 12, а спермидина — 4,7,9 и 10.

2.1.2. Влияние на активность орнитиндекарбоксилазы и уровень полиаминов в бесклеточной тест системе из регенерирующей печени крыс.

Влияние тестируемых веществ из группы соединений оригинального синтеза на скорость образования полиаминов проводили аналогичным первой серии опытов образом. Результаты суммированы в таблицах 9 и 10.

Таблица 9.

Влияние веществ оригинального синтеза на активность ОДК в бесклеточной тест — системе из регенерирующей печени крыс

Вещество Активность ОДК % ингибирования

Контроль 12,96±0,07 0

1 6,32± 0,05* 51,23

2 7,25±0,08* 44,06

3 4,26±0,06* 67,13

4 8,33±0,07* 35,73

5 9,23±0,05* 28,78

6 10,98±0,07* 15,28

7 8,00±0,06* 38,27

8 3,61±0,08* 72,14

9 5,02±0,06* 61,26

10 2,18±0,06* 83,18

11 10,00 ±0,08* 22,84

12 7,56±0,06* 41,67

Примечание. В таблице приведена удельная активность ОДК в нкат/мг белка.

Результаты представлены в виде М± т для 9 проб *Статистически достоверные отличия от контроля, Р<0.05

Таблица 10.

Влияние веществ оригинального синтеза на уровни полиаминов в бесклеточной тест — системе из регенерирующей печени крыс

Вещества Концентрации полиаминов, нмоль/мл

Путресцин Снермидин Спермин

Контроль 38,2±0.06 27,9±0.05 10,2±0.04

1 19,1 ±0.04* 14,0±0.06* 5,0±0.03*

2 20,6±0.05* 1,05±0.04* 6,4±0.03*

3 13,4±0.06* 9,3±0.05* 4,9±0.04*

4 23,4±0.07* 20,1±0.06* 9,2±0.03*

5 26,8±0.05* 19,8±0.06* 9,8±0.04*

6 30,0±0.06* 20,8±0.05* 10,0±0.04

7 23,1±0.06* 15,6±0.06* 6,8±0.04*

8 10,2±0.04* 7,0±0.02* 2,5±0.03*

9 19,6±0.05* 12,8±0.03* 4,4±0.05*

10 06,4±0.4* 4,7±0.01* 1,8±0.03*

11 30,6±0.05* 23,9±0.04* 10,0±0.03

12 29,4±0.06* 15,5±0.05* 6,2±0.05*

Примечание. В таблице приведена концентрация полиаминов в нмоль/мл. Результаты представлены в виде М± т для 9 проб *Статистически достоверные отличия от контроля, Р<0.05

Все исследованные вещества проявили ингибирующее действие на активность ОДК. Самыми активными были 1,3, 8 и 10. Именно это могло быть причиной снижения уровней полиаминов под действием всех тестируемых веществ. Наиболее эффективными оказались 3, 8 и 10. 2.2 Исследование биологических свойств вегцеств оригинального синтеза в бесклеточных тест-системах из гепатомы Г-27 крыс.

Количественную оценку влияния этих соединений на скорость образования полиаминов в опухолевой ткани проводили аналогичным с психотропными препаратами образом. Результаты этой серии опытов представлены в таблицах 11 и 12.

Полученные данные указывают на то, что все исследованные вещества проявили ингибирующее действия на активность ОДК. Наиболее эффективными ингибиторами оказались вещества 3, 8, 9 и 10. Эти же соединения наиболее существенным образом снижали уровни полиаминов.

Таблица 11.

Влияние веществ оригинального синтеза на активность ОДК в бесклеточной тест — системе из гепатомы Г-27 крыс_

Вещество Активность ОДК % ингибирования

Контроль 15,79±0,06 0

1 7,3 6± 0,06* 53,39

2 8,64±0,08* 45,28

3 5,32±0,07* 66,31

4 9,21±0,05* 41,67

5 10,58±0,06* 33,00

6 12,36±0,08* 21,79

7 9,18±0,06* 41,86

8 4,75±0,07* 69,92

9 6,32±0,07* 59,97

10 3,95±0,06* 74,98

11 12,07±0,09* 23,56

12 8,39±0,07* 46,93

Таблица 12.

Влияние веществ оригинального синтеза на уровни полиаминов в бесклеточной тест — системе из гепатомы Г-27 крыс_

Вещества Концентрации полиаминов, нмоль/мл

Путресцин Спермидин Спермин

Контроль 58,4±0.06 48,5±0.05 40,8±0.04

I 29,2±0.04* 24,2±0.06* 20,4±0.03*

II 30,5±0.05* 26,4±0.04* 24,5±0.03*

III 23,0±0.06* 16,2±0.05* 13,6±0.03*

IV 34,8±0.07* 29,6±0.04 29,6±0.03*

V 39,5±0.05* 30,1±0.06* 30,0±0.04*

VI 45,6±0.05* 32,9±0.05* 31,5±0.04*

VII 32,5±0.05* 26,4±0.05* 26,3±0.04*

VIII 12,8±0.03* 11,6±0.02* 10,7±0.03*

IX 28,7±0.03* 19,8±0.03* 18,5±0.04*

X 11,7±0.4* 9,7±0.01* 8,1±0.02*

XI 40,0±0.05* 30,1±0.03* 30,8±0.03*

XII 30,1±0.05* 25,1 ±0.04* 23,4±0.04*

Таким образом, во второй группе веществ наиболее перспективными в качестве потенциальных антипролиферативных и противоопухолевых средств можно выделить соединения 3, 8, 9 и 10.

ВЫВОДЫ

1. Модифицированный метод ВЭЖХ с ацетонитрилом в качестве элюента вместо метанола можно использовать для определения активности орнитиндекарбоксилазы и уровней полиаминов в биологических пробах.

2. У 12-ти изученных психотропных препаратов бензодиазепинового и фенотиазинового рядов не выявлено способности достоверно снижать активность аминоксидаз в регенерирующей печени, что свидетельствует об отсутствии среди них потенциальных канцерогенов.

3. Аминазина гидрохлорид, ридазина гидрохлорид, амитриптилина гидрохлорид, повышающие активность

аминоксидаз в 1,3 - 1,7 раза в ткани гепатомы 27, являются потенциальными антипролиферативными агентами.

4. Среди 12-ти изученных психотропных препаратов бензодиазепинового и фенотиазинового рядов не выявлено агентов, повышающих активность орнитиндекарбоксилазы в нормальной ткани печени и являющихся потенциальными канцерогенами. Хлорпротиксена гидрохлорид, аминазина гидрохлорид и ридазина гидрохлорид, снижающие активность орнитиндекарбоксилазы на 50-60% в ткани гепатомы 27 и в регенерирующей печени, являются потенциальными антипролиферативными агентами.

5. Среди 12-ти оригинальных веществ активность аминоксидаз повышают в 1,2-1,4 раза в регенерирующей печени 1-амино-азафлуорен, 1,4-диазоацетонафтилено[1,2-1]-флурантен -потенциальные антипролифератив-ные агенты. Снижающие активность аминоксидаз в регенерирующей печени 7-аминопиридо[1,2-а]бензимидазол и 7-нитропиридо[1,2-а]бензимидазол в 1,5-1,7 раза являются потенциальными канцерогенами.

6. Все изученные 12 оригинальных веществ снижают активность орнитиндекарбоксилазыкак в регенерирующей печени, так и в гепатоме 27 не являются потенциальными канцерогенами (кроме 7-аминопиридоГ1.2-а1бензимидазола и 7-нитропиридо[1.2-а]бензимидазола. которые при этом снижают активность аминоксидаз). но способны снижать пролиферативную активность опухоли; 1-амино-4-азафлуорен, 1-амино-9-фениламино-4-азафлуорен и 1,4-диазоацетонафтилено[1,2-Г]флуорантен, снижающие активность орнитиндекарбоксилазы на 30-50%, являются потенциальными антипролиферативными агентами.

7. 1-амино-9-фениламино-4-азафлуорен и 1,4-диазоацетонафтилено[1,2-Г]флуорантен снижают уровень полиаминов на 50-70%, вследствие чего способны подавлять опухолевую пролиферацию.

Список работ по теме диссертации

1 .Сяткин С.П., Федорончук Т.В., Голомазова К. А., Мирошникова Е.К., Березов Т.Т.. Методология доклинического тестирования канцерогенных и противоопухолевых свойств химических соединений // Тез. докл. Третьей междун. конф. «Клинические исследования лекарственных средств». Москва 1517 октября, 2003. - С.441-443.

2.Голомазова К.А., Сяткин С.П., Свинарев В.И., Федорончук Т.В. Канцерогенные и канцсростатические свойства психотропных препаратов // Материалы четвертой междун. конф. «Клинические исследования лекарственных средств». Москва 2022 октября, 2004. Прил. к жур. «Клинические исследования лекарственных средств в России». - 2004. — С. 61-62.

3.Шевченко A.A., Голомазова К.А. Влияние структурных аналогов полиаминов на скорость окислительного дезаминирования путресцина, спермидина и спермина в ткани регенерирующей печени крыс // Итоговая научная студенческая конференция. - РУДН, 19-22 Апреля 2005 г. (в печати).

4. Голомазова К. А., Шевченко А. А.. Пролиферативные свойства синтетических аналогов полиаминов. // Материалы четвертой международной научной конференции студентов и молодых ученых «Актуальные вопросы спортивной медицины, лечебной физической культуры, физиотерапии и курортологии» -Москва, 22 апреля 2005. - С. 35.

5.Шевченко А. А., Голомазова К. А. Канцерогенные свойства психотропных препаратов. // Материалы четвертой международной научной конференции студентов и молодых ученых «Актуальные вопросы спортивной медицины, лечебной физической культуры, физиотерапии и курортологии» - Москва, 22 апреля 2005. - С. 36

6.Сяткин С.П., Голомазова К.А., Левов А.Н., Федорончук Т.В., Свинарев В.И., Шевченко A.A., Березов Т.Т. Канцерогенные и канцеростатические свойства производных бензимидазола и азафлуорена как структурных аналогов полиаминов // Материалы межрег. научно-прак. конф., посвященной 85-летию самарского гос. мед. унив. «Новая идеология в единстве фундаментальной и клинической медицины», Самара, июнь 2005. — С. 389-393.

7.Сяткин С. П., Голомазова К. А., Свинарев В. И., Федорончук Т. В., Фролов В. А. Влияние психотропных препаратов на обмен полиаминов. - Пятая международная конференция «Клинические исследования лекарственных средств» - 13-14 октября 2005 г. - С. 147-148.

S.S.P.Syatkiiii T.V.Fedorontchouk, K.E.Golomazova, E.A.Miroshnicova, N.Ja.Greedina, M.Yu.Lidack, T.T.Berezov. Regulation of cell proliferation and tumor growth processes by chemical compounds mediated by polyamines metabolism // Springer Wien New York. - J.Amino Acids. - V.25, № 2. - 2003. - P. 178179.

9.T.V.Fedoronchuk, K.E.Golomazova, E.A.Miroshnicova, S.P.Syatkin, V.A.Frolov. Activators of polyamines oxidative desamination as potential anticancer agents // Springer Wien New York. - J.Amino Acids. - V.25, № 2. - 2003. - P.l 16. lO.Syatkin S.P., Frolov V.A., Golomazova K.A., Svinarev V.I., Shevchenko A.A, Fedoronchuk T.V. Carcinogenic and carcinostatic properties of psychotropic medications // Springer Wien New York. -J.Amino Acids. - V.29, № 1. - 2005. - P. 20-21.

Голомазова Ксения Алексеевна Антипролиферативные и антиопухолевые свойства синтетических аналогов полиаминов

Данная работа посвящена исследованию антипролиферативных и канцерогенных свойств структурных аналогов полиаминов из группы лекарственных препаратов и веществ оригинального синтеза. Исследование проводилось на бесклеточных моделях, полученных из регенерирующей печени крыс и гепатомы Г-27 крыс. В ходе эксперимента было оценено влияние указанных выше веществ на активность аминоксидаз, орнитиндекарбоксилазы и уровни полиаминов. Также была проведена модификация метода ВЭЖХ для определения уровня полиаминов, которая позволила сократить время анализа и снизить токсичность метода.

Xenia A. Golomazova

Antiprliferative and anticancer properties of synthetic polyamine's analogues

This work is dedicated to investigation of antiproliferative and

carcinogenic properties of structure analogues of Polyamines -medicines and original synthesis substances. The investigation was carried out on non-cellular models, obtained from regenerating rat liver and rat hepatoma H-27. Influence of cited above substances on polyamineoxydase, ornitinedecarboxylase activities and levels of polyamines was assessed. Also the HPLC method of determination of level of polyamines was modified, that decreased time of analysis and it's toxicity

Введение Диссертация по биологии, на тему "Антипролиферативные и антиопухолевые свойства синтетических аналогов полиаминов"

Актуальность проблемы

В настоящее время стало очевидным, что методология подходов разработки новых перспективных химиотерапевтических соединений направленного действия с заранее заданными свойствами должна базироваться на фундаментальных исследованиях особенностей метаболизма опухолевой клетки. В этом отношении обмен полиаминов (ПА), являющихся эссенциальными факторами процессов клеточного роста и дифференцировки [1], может быть чрезвычайно важным фактором для прогноза влияния различных агентов на клеточную пролиферацию. При этом высокий уровень ПА может свидетельствовать о наличии канцерогенных свойств вещества, а снижение их уровня, в том числе за счет ингибирования ключевых ферментов синтеза или активации ключевых ферментов распада ПА - о возможном антипролиферативном действии [27].

Цель исследования

Задачи исследования

4. Прогноз канцерогенных и антипролиферативных свойств для психотропных препаратов.

5. Прогноз канцерогенных и антипролиферативных свойств для оригинальных синтетических веществ.

Научная новизна работы Впервые показана возможность использования модифицированного метода ВЭЖХ для определения уровня ПА и активности орнитиндекарбоксилазы в более безопасных условиях благодаря использованию ацетонитрила вместо метанола в качестве элюента.

Практическая значимость работы

Результаты изучения новых свойств известных психотропных препаратов дополняют сведения об их фармакологическом действии, что может быть использовано в пактической фармакологии. Данные о новых синтетических соединениях, содержащих ПА остатки, могут быть использованы в для синтеза агентов с улучшенными свойствами.

Положения, выносимые на защиту

4. Синетические оригинальные вещества 1-амино-4-азафлуорен и 1,4-диазоацетонафтилено[1,2-£]флуорантен снижают активность ОДК на 5070% в бесклеточной системе из регенерирующей ткани печени, а также из ткани гепатомы Г-27 крыс.

5. 7-аминопиридо[1,2-а] бензимидазол, З-дицианометилен-4-азафлуорен, 1-амино-9-фениламино-4-азафлуорен и 1,4-диазоацетонафтилено [1,2-{]флуорантен снижают активность орнитиндекарбоксилазы на 50,583,2% в бесклеточной системе из регенерирующей ткани печени, а также из ткани гепатомы Г-27 крыс. Эти же вещества вызывали такое же снижение уровня ПА в обеих тест-системах.

6. Изученные психотропные препараты, а также оригинальные химические соелинения не повышают уровень ПА в бесклеточной системе из регенерирующей ткани печени, что свидетельствует об отсутствии канцерогенных свойств.

Апробация работы

Апробация диссертации на заседании кафедр биологической химии и микробиологии Российского университета Дружбы Народов состоялась 27 марта 2006 года.

Публикации.

По теме диссертации опубликовано 10 научных работ, в том числе 3 статьи в международных журналах и 7 тезисов:

1. Сяткин С.П., Федорончук Т.В., Голомазова К.А., Мирошникова Е.К., Березов Т.Т. Методология доклинического тестирования канцерогенных и противоопухолевых свойств химических соединений // Тез. докл. Третьей междун. конф. «Клинические исследования лекарственных средств». Москва 15-17 октября, 2003. - С.441-443.

2. Голомазова К.А., Сяткин С.П., Свинарев В.И., Федорончук Т.В. Канцерогенные и канцеростатические свойства психотропных препаратов // Материалы четвертой междунар. конф. «Клинические исследования лекарственных средств». Москва 20-22 октября, 2004. Прил. к жур. «Клинические исследования лекарственных средств в России». - 2004. - С. 61-62.

3. Шевченко А.А., Голомазова К.А. Влияние структурных аналогов полиаминов на скорость окислительного дезаминирования путресцина, спермидина и спермина в ткани регенерирующей печени крыс // Итоговая научная студенческая конференция. - РУДН, 19-22 Апреля 2005 г.

4. Голомазова К. А., Шевченко А. А. Пролиферативные свойства синтетических аналогов полиаминов. // Материалы четвертой международной научной конференции студентов и молодых ученых «Актуальные вопросы спортивной медицины, лечебной физической культуры, физиотерапии и курортологии» - Москва, 22 апреля 2005. - С. 35.

5. Шевченко А. А., Голомазова К. А. Канцерогенные свойства психотропных препаратов. // Материалы четвертой международной научной конференции студентов и молодых ученых «Актуальные вопросы спортивной медицины, лечебной физической культуры, физиотерапии и курортологии» - Москва, 22 апреля 2005. - С. 36.

6. Сяткин С.П., Голомазова К.А., Левов А.Н., Федорончук Т.В., Свинарев

B.И., Шевченко А.А., Березов Т.Т. Канцерогенные и канцеростатические свойства производных бензимидазола и азафлуорена как структурных аналогов полиаминов // Материалы межрег. научно-прак. конф., посвященной 85-летию Самарского гос. мед. унив. «Новая идеология в единстве фундаментальной и клинической медицины», Самара, июнь 2005.

C. 389-393.

7. Сяткин С. П., Голомазова К. А., Свинарев В. И., Федорончук Т. В., Фролов В. А. Влияние психотропных препаратов на обмен полиаминов. - Пятая международная конференция «Клинические исследования лекарственных средств» - 13-14 октября 2005 г. - С. 147-148.

8. S.P.Syatkin, T.V.Fedorontchouk, K.E.Golomazova, E.A.Miroshnicova, N.Ja.Greedina, M.Yu.Lidack, T.T.Berezov. Regulation of cell proliferation and tumor growth processes by chemical compounds mediated by polyamines metabolism // Springer Wien New York. - J.Amino Acids. - V.25, № 2. - 2003. -P.178-179.

10. Syatkin S.P., Frolov V.A., Golomazova K.A., Svinarev V.I., Shevchenko A.A, Fedoronchuk T.V. Carcinogenic and carcinostatic properties of psychotropic medications // Springer Wien New York. - J.Amino Acids. - V.29, № 1. - 2005. -P. 20-21.

Структура и объем диссертации

Заключение Диссертация по теме "Биохимия", Голомазова, Ксения Алексеевна

ВЫВОДЫ

3. Аминазина гидрохлорид, ридазина гидрохлорид, амитриптилина гидрохлорид, повышающие активность аминоксидаз в 1,3 - 1,7 раза в ткани гепатомы 27, являются потенциальными антипролиферативными агентами.

5. Среди 12-ти оригинальных веществ активность аминоксидаз повышают в 1,2-1,4 раза в регенерирующей печени 1-амино-азафлуорен, 1,4-диазоацетонафтилено[1,2-£]-флурантен - потенциальные антипролифератив-ные агенты. Снижающие активность аминоксидаз в регенерирующей печени 7-аминопиридо[1,2-а]бензимидазол и 7-нитропиридо[1,2-а]бензимидазол в 1,5-1,7 раза являются потенциальными канцерогенами.

6. Все изученные 12 оригинальных веществ снижают активность орнитиндекарбоксилазыкак в регенерирующей печени, так и в гепатоме 27 не являются потенциальными канцерогенами (кроме 7-аминопиридо[1,2-а!бензимидазола и 7-нитропиридоГ1,2-а1бензимидазола, которые при этом снижают активность аминоксидаз), но способны снижать пролиферативную активность опухоли; 1-амино-4-азафлуорен, 1-амино-9-фениламино-4-азафлуорен и 1,4-диазоацетонафтилено[ 1,2-Лфлуорантен, снижающие активность орнитиндекарбоксилазы на 30-50%, являются потенциальными антипролиферативными агентами.

7. 1-амино-9-фениламино-4-азафлуорен и 1,4-диазоацетонафтилено[1,2-^флуорантен снижают уровень полиаминов на 50-70%, вследствие чего способны подавлять опухолевую пролиферацию.

Заключение

Анализ литературы, посвященной роли полиаминов и ферментов их обмена в процессах клеточной пролиферации и дифференцировки показывает, что эта тема является актуальной и требует дальнейшей экспериментальной разработки.

Уникальность ПА как факторов роста заключается в том, что они одновременно могут выполнять в живом организме диаметрально противоположные функции: активировать (при оптимальной концентрации) и ингибировать (при высоких концентрициях) синтез нуклеиновых кислот и белка в нормальных и опухолевых тканях. Эти свойства лежат в основе регуляторной функции ПА и определяют их высокую метаболическую лабильность. Так, период полужизни путресцина в различных тканях животных равен двум часам и спермидина - нескольким суткам. Это возможно лишь благодаря непосредственной регуляции внутриклеточных уровней ПА основными ферментами их обмена (ОДК, ДАО и ПАО), которые, в свою очередь, также отличаются высокой метаболической подвижностью. Взаимосвязь процессов метаболизма полиаминов и биологических свойств полиаминсодержащих соединений лежит в основе прогноза их канцерогенных и антипролиферативных свойств. Изучению данной взаомисвязи и посвящено настоящее исследование.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Для экспериментов использованы две модельные бесклеточные тест-системы из тканей с сохраненной и утраченной системой контроля за скоростью клеточной пролиферации. Использованные тест-системы позволяют исследовать влияние аналогов полиаминов как на регенерирующую, так и на опухолевую ткань [34]. В качестве тканей с повышенным митотическим индексом использовали регенерирующую печень здоровых крыс и солидную гепатому крыс Г-27. Ткань печени обладает высокой скоростью регенерации и высоким уровнь полиаминов. Моделью патологической регенерации была ткань гепатомы крыс Г-27 - это солидная опухоль печени, первично индуцированная у нелинейных белых крыс диэтилнитрозамином [17, 34]. Регенерирующая печень здоровых крыс

Для получения бесклеточной тест-системы выполняли стандартную парциальную гепатэктомию:

1. Под эфирным наркозом крысам проводили лапаротомию, у основания левой боковой и центральной долей печени накладывали лигатуру, доли удаляли. Такая операция приводила к хорошо выраженной регенерации оставшейся части печени в течение последующих 18-20 часов. В эти сроки животных умерщвляли декапитацией и извлекали малые участки регенерирпующей печени для исследования.

2. Эти участки обескровливали на льду для исключения погрешностей определения активности ферментов и уровня полиаминов за счет примеси гемоблобина, затем взвешивали.

3. Обескровленные участки печени гомогенизировали на холоду с буфером.

4. Гомогенат ткани ультрацентрифугировали при 20 ООО g в течение 15 минут при 2-4°С.

5. Супернатант полученного 33% гомогената использовали для определения активности ОДК и уровня полиаминов или по определению активности полиаминоксидаз.

Регенерирующая ткань гепатомы крыс Г27 Получали штамм гепатомы Г-27 из Банка опухолевых штаммов ГУ Российский онкологический Научный Центр им. Н. Н. Блохина РАМН. Ампулы с биологическим материалом транспортировали к месту перевивки в жидком азоте. Перевивали гепатому крысам подкожно по 50 мг взвеси опухолевой ткани в 0,5 мл питательной среды 199. Пассировали опухоль 2-3 раза на белых беспородных крысах-самцах в течение 2-3 недель. Затем крыс забивали декапитацией и выделяли опухоль. В опытах использовали 2-3 пассажи in vivo. Образцы опухолевой ткани для исследования готовили следующим образом: Ткань опухоли, освобожденную от некротических масс, суспендироли со стерильным физиологическим раствором на холоду в стерильных условиях. Перевивали полученную суспензию крысам подкожно по 50 мг взвеси на крысу.

В полученных образцах определяли активности ОДК и уровень полиаминов. Остаток опухолевого материала использовали для последующих перевивок. Ткань гомогенизировали с охлажденным 50 мМ фосфатным буфером рН 6,6, содержащим дитиотриэтол 0,1 мМ и пиридоксальфосфат 0,4 мМ. Измельчение ткани проводили в металлическом охлажденном прессе. Полученную массу взвешивали. Затем проводили гомогенизацию в лабораторном стеклянном гомогенизаторе с предварительно охлажденным тефлоновым пестиком. Смесь центрифугировали в ультрацентрифуге с ускорением 20000 g при t = 4°С в течение 15 минут. Полученные таким образом бесклеточные тест-системы по составу химических компонентов были максимально приближены к внутриклеточной среде и содержали необходимые комопоненты для определния активности ОДК, ДАО, ПАО и урованя полиаминов и, кроме того, содержали минимум компонентов, способных помешать определению.

Изученные препараты

Известные психотропные препараты

Первую группу составили психотропные лекарственные препараты из числа фенотиазина (вещества тизерцина гидрохлорид - II, аминазина гидрохлорид - III, ридазина гидрохлорид - IV, трифтазин - V, флуфеназин -VI, мажептил-VII), бензодиазепина (вещества азалептин - VIII, амитриптилина гидрохлорид - IX, мелипрамина гидрохлорид - X), тиоксантена (хлорпротиксена гидрохлорид - I), пиперидина (галоперидол -XI) и сульфанилбензамида (эглонил XII) (таблицы 2, 3). Во вторую группу вошли также двенадцать веществ - структурных аналогов полиаминов оригинального синтеза. Это производные бензимидазола (вещества 1 и 2), азафлуорена (вещества 3, 4, 5, 6, 7, 8), флуорантена (вещества 9 и 10), анилина (вещество 11) и фурфурола (вещество 12) (таблица 4). Лекарственные препараты были предоставлены Институтом экспериментальной патологии, онкологии и радиобиологии им. Р. Е. Кавецкого НАН Украины (Киев, Украина), препараты III, V, VI, XI в форме растворов для инъекций в ампулах, вещества I, II, IV, VII, VIII, IX, X, XII - в виде таблеток.

Оригинальные синтетические вещества

Вещества оригинального синтеза в виде порошков были получены из лаборатории органического синтеза (Россия, Москва, кафедра органической химии РУДН). Их названия и формулы отражены в таблице 4.

Некоторые характеристики лекарственных веществ - структурных аналогов полиаминов

Аббрев. в-ва Название лекарственного средства и лекарственная форма Химическое название мг

I Хлорпротиксена гидрохлорид, таблетки 15 мг (г)-2-(2-хлор-9Н-тиоксантен-9-илиден)-М,М-диметил-1 -пропамина гидрохлорид 352

II Тизерцина гидрохлорид, таблетки 25 мг (К)-2-метокси-Ы,Ы-бета-триметил-10Н-фенотиазин-10-проопанамина гидрохлорид 328

III Аминазина гидрохлорид, раствор для инъекций 25 мг/мл 2-хлор-М,М-диметил-10Н-фенотиазин-10-пропанамина гидрохлорид 318,5

IV Ридазина гидрохлорид, таблетки 10 мг 10- [2-( 1 -метил-2-пиперидинил)этил] - 2-(метилтио)-10Н-фенотиазина гидрохлорид 406,5

V Трифтазин, таблетки 5 мг; раствор для инъекций 2% 10-[3-(4-метил-1-пиперазинил)проопил]-2-(трифторметил)-10Н-фенотиазина гидрохлорид 443,5

VI Флуфеназин, раствор для инъекций 25 мг/мл 4- [3- [2-(трифторметил)-10Н-фенотиазтн-10-ил] пропил] -1 -пиперазинилэтанола гидрохлорид 339

VII Мажептил, таблетки 10 мг М,М-диметил-10-[3-(4-метил-1 -пиперазинил)пропил] -10Н-фенотиазин-2-сульфонамид 446

VIII Азалептин,таблетки 100 мг 8-хлор-11 -(4-метил-1 -пиперазинил)-5Н-дибензо[Ь,е] [ 1,4] диазепин 326,5

IX Амитриптилина гидрохлорид, таблетки 25 мг 3-(10, 11-дигидро-5Н-дибенз [a,d] циклогептен-5-илиден)-Н,Ы-диметил-1-проопанамина гидрохлорид 277

X Мелипрамина гидрохлорид, таблетки 25 мг 10,11-дигидро->Ш-диметил-5Н-дибенз [b,f] азепин-5-пропанамина гидрохлорид 316,5

XI Галоперидол, таблетки 1,5 мг, раствор для инъекций 5% 4- [4-(4-хлорфенил)-4- гидрокси-1 -пиперидинил] -1 -(4-фторфенил)-1 -бутанон 375,5

XII Эглонил, капсулы 100 мг 5-(аминосульфонил)-Ы- [(1 -этил-2- пирролидинил)метил]-2- метоксибензамид 341

Формулы исследуемых структурных аналогов полиаминов из группы лекарственных веществ

Аббревиатура в-ва

Формула

Физико-химические свойства

CH(CH2)2N9CH3)2'HCI

Желтый кристаллический порошок со слабым запахом, растворим в воде.

Н Н2 Н2С-С-С-N(CH3)2

0CH3

Желтовато-белый, слегка гигроскопичный порошок, неустойчив к свету и воздуху

III

CH2)3N(CH3)2

Белый или со слабым кремовым оттенком микрокристаллический порошок. Слегка гигроскопичен, темнеет на свету, очень легко растворим в воде. рН водного раствора 3,5 -5,5.

Белый или желтоватый кристаллический или микронизированный порошок без запаха или слабо пахнущий.

Основание плохо растворимо в воде, легко - в этаноле, очень легко

- в хлороформе, рН 1% раствора 4,5 - 5,2.

V сн3 N 1 (СН-Аз Q^yy" Белый или слегка зеленовато-желтый кристаллический порошок. Растворим в воде и спирте, на свету растворы темнеют.*

VI я - S^ U-о—N^ у-СНгСН2ОН ч CF3 Белый кристаллический порошок, почти без запаха. Растворим в воде, умеренно - в спирте и эфире, слабо - в хлороформе и ацетоне.

VII |н> 0 N 1 Белый кристаллический порошок, почти без запаха.

VIII ^снз р Зеленовато-желтое мелкокристаллчиеское вещество.

IX Белый кристаллический порошок без запаха, хорошо растворим в воде.

X ^^^^ *HC1 |cH2)3N(CH2)2 Белый кристаллический порошок, легко растворим в воде и спирте.

XI Аморфный или мелкокристаллический он \ S F порошок от белого до светло-желтого цвета.

Практически не растворим в воде, ограниченно растворим в спирте, метиленхлорие, эфире. Насыщенный растовор имеет реакцию от нейтральной до слабокислой.

XII СН2СН3 XX H2N—OjS ^^^ Аморфный или мелкокристаллический порошок от белого до светло-желтого цвета. Практически не растворим в воде, ограниченно растворим в спирте, метиленхлорие, эфире.

Растворы готовились непосредственно в день проведения опыта и потом хранились во флаконах темного стекла.

Формулы исследуемых структурных аналогов полиаминов из группы веществ оригинального синтеза

Название Формула

1 7-аминопиридо[ 1,2-а]бензимидазол ^ХХ/О

2 7-нитропиридо[1,2-а]бензимидазол

3 1 -амино-4-азафлуорен NHJ

4 1 -амино-4-азафлуоренол ОсрСр он NH2

5 З-дицианометилен-4-азафлуорен NC CN

6 9-[а-(р-гидроксиэтил) аминометилен]-4-азафлуорен НС. -CH2CH2OH N н

7 9- [а-пиридилаимнометилен] -4-азафлуорен /=4 О

8 1-амино-9-фениламино-4-азафлуорен fi NHj f)

9 1 -амино-4-азафлуоренон-9 О NHj

10 1,4-диазоацетонафтилено[1,2-Афлуорантен

11 2- метоксикарбонил-(р-бензоилэтил) анилин ^^^coochj

12 5-(2-метоксикарбонил)фенил-а-фур-фурол н

Все лекарственные препараты растворяли в воде или в водных или в водно-спиртовых растворах с добавлением кислот или щелочей (в зависимости от растворимости и устойчивости веществ), вещества оригинального синтеза растворяли в смеси этилового спирта и дистиллированной воды.

Выбор именно этих соединений обусловлен сходством их структур со структурами соединений, противоопухолевая активность которых доказана, в частности, с противоопухолевыми антибиотиками, формулы которых в сравнении с формулами некоторых лекарственных веществ приведены в таблице 5.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Голомазова, Ксения Алексеевна, Москва

1. Берлинских Н. К., Залеток С. П. Полиамины и опухолевый рост -Киев: Наук, думка, 1987. 140 с.

2. Березов Т.Т. Обмен аминокислот нормальных тканей и злокачественных опухолей. М.: Медицина, 1969. - 224 с.

3. Борбо Л.И., Яхимович JI.B., Черный В.А., Некрасов П.Я., Дорфман В.М. Выявление биогенных аминов в опухолях с диагностической це-лью//Архив патологии. 1976. Т.38. -№ 9. С.33-38.

4. Вартанян М. Е. Клинико-биологические и наследственные закономерности течения шизофрении: Автореф. докт. дис. М., 1968. -60 с.

5. Гамалея Н.Б. Современные биохимические концепции патогенеза шизофрении. М.: Медицина, 1978. - 303 с.

6. Гелынтейн В.И. Прогрессия трансплантируемых опухолей мышей // Цитология. -1971. Т. 13. С.3-14.

7. Горбунова В.А. Новая система предклинического скрининга новых противоопухолевых препаратов в США: Обзор // Вести. Всесоюз. Он-кол. Науч. Центра АМН СССР. 1991, № 2. С.45-46.

8. Горкин В.З., Москвитина Т.А. Биохимические особенности течения шизофрении // Журн. Невропатологии и психиатрии. 1985. - Т. 87, № 7. - С. 1062-1064.

9. Дин Р. Процессы распада в клетке М.: Мир, 1981. - 120 с.

10. Ю.Закревский В.И. Определение активности орнитиндекарбоксилазы у микроорганизмов с помощью 2,4-динитро-1-фторбензола // Сборник научных работ Волгоградского медицинского института. Волгоград. 1973.-Т.26.-С.375-377.

11. П.Лидак М.Ю. Нуклеозиды и рак // Целенаправленное изыскание физиологически активных веществ: Докл. VII Всесоюз. симпоз. 26-29 янв. 1987 г. Рига: Зинатне, 1989. - С.79-94.

12. Лысенко А.В., Ускова Н.Н., Альперович Д.В. и др. // Нейрохимия. -1998. -Т. 15, № 2. С. 165-172.

13. Москвитина Т. А., Камышанская Н.С., Смирнов А.В. и др./ Определение активности орнитиндекарбоксилазы в печени млекопитающих. Бюл. эксперим.Биол. Мед. 1985. - Т. X, № 6. -С.147-165.

14. Полищук И. А. Шизофрения К.: Здоров'я, 1976. - 263 с.

15. Протопопов В. П. Избранные труды. К.: Здоров'я, 1961. - 560 с.

16. Регенерация печени у млекопитающих/ Сидорова В.Ф., Рябинина З.А., ЛейкинаЕ.М. -Л.: Медицина, 1966. 123 с.

17. П.Семенов С. Ф., Попова Н. Н. Нервно-психические заболевания в свете иммунопатологии мозга.- М.: Медицина, 1969. 265 с.

18. Сепетилев Д. М. Статистические методы в научных медицинских исследованиях. М.: Медицина, 1968 - 419с.

19. Сяткин С.П. Микрометод флуорометрического определения полиаминов и путресцина тканей животных тонкослойной хроматографией на пластинках Силуфола УВ-254 // Вопр. мед. химии. 1981. - Т. 27, № 6. -С. 848-851.

20. Сяткин С.П. Модифицированный метод определения белка в пробах с повышенным содержанием липо- и гликопротеидов // Вопр. мед. химии. 1981.-Т. 27, № 1.-С. 136-138.

21. Сяткин С.П. Полиамины и лизосомы как система опосредованной регуляции химическими веществами процессов клеточной пролиферации и опухолевого роста: Автореф. докт. дисс. М., 1998. -41 с.

22. Сяткин С.П., Березов Т.Т. Окислительное дезаминирование полиаминов в гепатомах с различной скоростью роста // Вопр. мед. химии.-1979.-Т. 25,№5.-С. 611-617.

23. Сяткин С.П., Березов Т.Т. Быстрый спектрофотометрический метод определения орнитиндекарбоксилазы с помощью 2,4-динитрофторбен-зола//Вопр. мед. химии. 1980. Т. 26, № 4. - С. 561564.

24. Сяткин С.П., Березов Т.Т. Метаболизм полиаминов в опухолевых тканях // Вестник Академии медицинских наук СССР. 1982. - Т.З. С. 10-21.

25. Сяткин С.П., Березов Т.Т. Обмен полиаминов в злокачественных опухолях // Вестник АМН СССР. 1982. - № 3. - С. 10-21.

26. Сяткин С.П., Березов Т.Т., Гридина Н.Я. и др. Полиамины как биохимические маркеры антипролиферативного действия ингибиторов ферментов биосинтеза полиаминов и путресцина в культуре L-клеток //Вопр. мед. химии. 1991.-Т.37, №6.-С. 77-81.

27. Сяткин С.П., Галаев Ф.В. Окисление путнесцина, спермидина и спермина диаминоксидазой печени мышей // Биохимия. 1977. - Т.42. -С.1010-1013.

28. Хоменко А.К. Особенности систем ферментов, участвующих в обмене полиаминов при злокачественном ростею // Опухоль и организмю -Киев, 1973.-С.300-301.

29. Хоменко А.К., Залеток С.Т., Суслик Д.Р. Повышение экскреции полиаминов при химическом канцерогенезе // Онкология. Киев. -1976. №6.-С.27-31.

30. Хомутов P.M., Денисова Г.Ф., Хомутов А.Р., Белостоцкая К.М., Шлосман Р.Б., Артамонова Е.Ю. Аминооксипропиламин эффективный ингибитор орнитиндекарбоксилазы in vitro и in vivo // Биоорганическая химия.- 1985.-Т.П.-С. 1574-1576.

31. Хомутов А.Р., Хомутов P.M. Синтез аминооксианалогов путрес-цина и спермидина//Биоорг. Химии. 1989. Т. 15. №5. - С.698-703.

32. Шапот B.C. Биохимические аспекты опухолевого роста М.: Медицина, 1975. - 304 с.

33. Швембергер И.Н. Морфология и гистогенез опухолей, индуцированных у крыс нитрозоаминами. Л.:Медицина, 1966. - 154 с.

34. Швембергер И.Н. Перевиваемый штамм гепатомы крысы Г-27 // Цитология. 1970. Т. 12.- С.1057-1059.

35. Шизофрения и полиамины / Свинарев В.И., Залеток С.П., и др. Киев, «ЕксОб», 1999. - 176 с.

36. Зб.Экспериментальные опухоли печени// Быкорез А.И., Пинчук В.Г. — Киев, Наукова думка, 1976. 280 с.

37. Abraham A.J. Studies on DNA-dependent RNA polymerase from Escherichia coli. I. The mechanism of polyamine induced stimulation of enzyme activity // Eur. J. Biochem. 1968. V. 5 - P. 143-146.

38. Agostinelli E., Riccio P., Mucigrosso J., Turini P., Mondovi B. Amine oxidases as biological regulators // Perspectives in polyamine research / Ed. A. Perin, G.Scalabrino, A.Sessa, M.E.Ferioli. Milano, Italy: Wichting Editore, 1988.-P.11-14.

39. Alhonen-Hongisto E., Eeinonen P., Eaine R., Janne J. Human myeloma cells acquire resistance to difluoromethylornithine without overproducing ornithine decarboxylase // Biochem.Biophys.Res.Commun. 1987. V.I 14.-P.132-137.

40. Anderson D. J., Crossland J., Shaw G. G. // Neuropharmacol. 1975. - Vol. 14,№2.-P. 571-577.

41. Anderson G., Heby O. Polyamine and nucleic acid concentration in Ehrlich ascites carcinoma cells and liver of tumor-bearing mice at various stages of tumor growth // J.Natl.Cancer Inst. 1972. V.48. - P.165-172.

42. Andersson G., Osterberg S., Heby O. Accumulation of spermidine in Ehrlich ascites tumor cells during plateau phase growth. A function of an increased fraction of G 2 phase cells and polyploideels // Int.J.Biochem. -1978. -V.9.-P.263-267.

43. Argento-Ceru M.P., Sartori C., Autuori F. Association of diamine oxi-dase with microsomal membranes in rabbit liver // Life Sci. 1974. V.I5. - № 11.-P.1909-1915.

44. Autelli R., Holm I., Heby O., Persson L. Feedback regulation of ornithine decarboxylase expression. Studies using a polysomal run-off system // FEBS Letters. 1990. V.260. P.39-41.

45. Aziz SM, Lipke DW, Olson JW, Gillespie MN. Role of ATP and sodium in polyamine transport in bovine pulmonary artery smooth cells.// J Cell Physiol. 1993 May. V,155(2). - P.399-407.

46. Bachrach U. Metabolism and function of spermine and related polya-mmes // Ann.Rev.Microbiol. 1970. V.24. P. 109-134.

47. Bachrach U. Antiviral Action of oxidized polyamines // Virus-cell interactions and viral antimetabolites / Ed. D.Shugar. New York: Acad.Press, 1972. P. 149-162.

48. Bachrach U. Function of naturally occurring polyamines. New York: Acad, press, 1973. 175 p.

49. Bachrach U., Abzug S., Bekierkrust A. Cytotoxic effect of oxidized spermine on Erlich ascites cells // Biochim. Biophys.Acta. 1967. V.134. -P. 174-181.

50. Bachrach U., Ben-Joseph M. Studies on ornithine decarboxylase activity in normal and T2-infected Escherichia coli // FEBS Lett. 1971. - V. 15. P.75-77.

51. Bachrach U., Don S., Wiener H. Polyamines and tumor cells: effect of transformation of chick embryofibroblasts by Rons sarcoma virus on polyamine leves // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1973. - V.55. - P. 1035-1041.

52. Bachrach U., Don S., Wiener H. Polyamine in normal and in virus-transformed chick embryo fibroblasts // Cancer Res. 1974. V.34.- P. 15771580.

53. Bachrach U., Persky S. Interaction of oxidized polyamines with DNA. V.Inhibitionof nucleic aid synthesis // Biochim. Biophys. Acta. 1969. -V.I79. -P.484-493.

54. Bardsley W.G., Childs R.E., Crabbe M. Inhibition of enzymes by em-tal ion-chelating reagents. The action of copper-chelating reagents on diamine oxidase // Biochem. J. 1974. V.I37. № 1. P.61-66.

55. Barros C., Giudice G. Effect of polyamines on ribosomal RNA synthesis during Sea Urchin development // Exp. Cell. Res. 1968. V.50. P. 671-674.

56. Basil H.S., Feuerstein B.G., Deen D.F., Lubich W.P., Bergeron R.J., Samejima K., Marton L.J. Correlation betwen the effects of polyamine analogues on DNA conformation and cell growth // Cancer Res. 1989. -V.49. -P.5591-5597.

57. Basu H.S., Pellarin M., Feuerstein B.G., Deen D.F., Marton L.J. Effect of N',N14-bis(ethyl)homospermine on the growth of U87MG and SF-126 human brain tumor cells // Cancer Res. 1990. V.50. - P.3137-3140.

58. Basu H.S., Wnght W.D., Deen D.F., Roti-Roti J., Marton L.J. Treatment with a polyamine analog alters DNA-matrix association in HeLa cell nuclei. A modified halo assay // Biochemistry. 1993. V.32. - P.4073-4076.

59. Beaven M.A., Shaff R.E. Study of the relationship of histaminase and diamine oxidase activities in various rat tissues and plasma by sensitive isotopic assay procedures // Biochem. Pharmacol. 1975. - V.24. № 9. -P.979-984.

60. Becker F.F. Acute glycogenolysis: a major stimulus of autophagocytic activity in rat hepatocytes // Proc. Soc. Exper. Biol. Med. 1972. - V.I40. -P.l 170-1172.

61. Berdinskih N.K., Homenko A.K., Zaletok S.P. Diagnostic value of determination of polyamine excretion in patients with malignant tumours //Tenth international congress of biochemistry.: Abstracts. 1976. P.599.

62. Berdinskih N.K., Homenko A.K., Zaletok S.P. Study of excretion of polyamines in mammary carcinoma // Seventh international symposium on the biological characterisation of human tumours.: Abstracts. 1977. P. 141.

63. Bergeron R.J., Hawthorine T.R., Vinson J.R.T., Beack D.E., Ingeno M.J. The role of the methylene back bone in the antiproliferative activity of po polyamine analogues // Cancer Res. 1989. - V. 49. P. 2959-2964.

64. Bolkenius F.N., Bey P., Seiler N. Specific inhibition of polyamine oxidase in vivo is a method for the elucidation of its physiological role // Bio-chim. et biophys. acta. 1985. V.838.-№ 1. P.69-71.

65. Boyle S.M., Cohen P.S. Putrescine-mediated degradation of ribonuc-leic acid in chloramphenicol-treated Escherichia coli // J. Bacteriol. 1968. V.95.-P.1266-1272.

66. Brewer E.N., Rusch H.P. Control of DNA replication: effect of sper-mine on DNA polymerase activity in nuclei isolated from Physarun Palycepha-lum // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1966 - V.25. - P.579-584.

67. Briggs M.H. Vitamin and coenzyme conyeny of hepatomas induced by butter yellow // Nature. 1960. - V.I 87. - P.249.

68. Byers T.L., Bitonti A.J., McCann P.P. Bis(benzyl)polyamine analogues are substrates for a mammalian cell-transport system which is distinct from the polyamine transport system // Biochem. J. 1990. V.269. - P.39-40.

69. Byers TL, Pegg AE. Regulation of polyamine transport in Chinese hamster ovary cells.// J Biol Chem. 2004 Jul 16. V.279(29). - P. 29921-29929.

70. Caldarera C.M., Barbiroli В., Monizzi G. Polyamine and nucleic acid drug and development of the chick embryo // Biochem. J. 1965 V.97. - P.84-98.

71. Caldarera C.M., Monizzi G. Polyamines and nucleic acid metabolism in the chick embryo //Ann. N. Y. Acad. Sci. 1970. - V.I71. - P.709-722.

72. Caldarera C.M., Monizzi G., Rossoni C., Barbiroli B. Polyamines and nucleic acid metabolism during development of chick embryo brain // J. Neuro-chem. 1969. - V.16. - P.309-316.

73. Casero R.A., Bergeron R.J., Porter C.W. Treatment with a-difluoro-methylornithine plus a spermidine analog leads to spermine depletion and growth inhibition in cultured L1210 Leukemia cells // J. Cell. Physiol. 1984. -V. 121. P. 476-482.

74. Cavia E., Webb Т.Е. The polyamines and nucleic acid in growing rat hepatomas // Biochem. J. 1972. V.I29. - P.223-224.

75. Caunders N.A., Kett K.F., Minohin R.F. Uptake, efflux and metabolism of the polyamines and putrescine in rabbit lung slices // Biochim. Biophys. Acta.: Mol. Cell. Res. 1987. V.927. № 2. P. 170-176.

76. Chen K.J., Presepe V., Parhen N., Lin A.J. Changes of ODC activity and polyamines content upon differentiation mouse NB-15 neuroblastoma cell // J. Cell. Physiol. 1982. V.I 10. - P.285-290.

77. Chen Y.Q. Mechanism of cell damage by hematoporphyrin derivative (HPD) plus light. III. Effect of HPD plus light on lysosomes of liver and hepatoma cell // Chung Hua Chung Liu Tsa Chih. 1989. - V.I 1. - P.22-24.

78. Cohen S.S. The polyamine content of bacterial t-RNA // Ann. N. Y. Acad. Sci. 1970. - V.171.-P.869-881.

79. Cohen S.S. Introduction to the polyamines // New Jersey: Prentice Hall, Inc. 1971.-179 p.

80. Cohen S.S., O'Malley B.W., Stastny M. Estrogenic induction of or-nithine decarboxylase in vivo and in vitro // Science. 1970. - V.I70. P.336-338.

81. Cohen S.S., Raina A. Some interrelations of natural polyamines and nucleic acids in growing and virus-infected bacteria // Organizational Biosynthesis. / Ed. H.J. Vogel, J.O.Eampen and V.Bryson. New York: Acad. Press. -1967.-P.157-184.

82. Claverie N., Mamont P.S. Comparative antitumor properties in rodents of irreversible inhibitors of L-Ornithinedecarboxylase, used or as prodrugs // Cancer Res. 1989. - V.49. P.4466-4471.

83. Crabbe M., Childs R.E., Bardsley W.G. Time-independent inhibition of diamine oxidase by carbonyl-group reagents and urea // Eur. J. Biochem. -1975. V.60. -№ 2. - P.325-333.

84. Cullis PM, Green RE, Merson-Davies L, Travis N. Probing the mechanism of transport and compartmentalisation of polyamines in mammalian cells. // Biochem J. 1994 Oct 1. V. 303. - P.89-96.

85. Danzm C., Casara P., Claverie N., Metcalf B.W., Fung M.J. (2R,5R)-6-heptyne-2,5-diamine and extremely potent inhibitor of mammalian ornithine decarboxylase // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1983. V.I 16. - P.237-243.

86. Darzynkiewier Z., Arnason B.G. Suppression of RNA synthesis in lymphocytes by inhibitors of proteolytic enzymes // Exp. Cell. Res. 1974. -V.85. P.95-104.

87. Davidson N.E., Anderson N.G. Chromosome coiling: abnormaleties induced by polyamines // Exp. Cell. Res. 1960. V.20. - P.610-613.

88. Davidson N.E., Mank A., Prestigiacomo L.J., Bergeron R.J., Casero R.A. -Growth inhibition of hormoneresponsive and resistant human breast can cer cells in culture by N ,N -bis(ethyl)spermine // Cancer Res. 1993. V.53. -P.2071-2075.

89. Davison A.N. Pyridoxal phosphate as coenzyme of diamine oxidase // Biochem. J. 1956. V.64. - P.546-548.

90. Dawson M., Dryden W.F. The toxicity of spermine and spermidine to cells in culture // Biochem. Pharmacol. 1960. V.18. - P.1307-1313.

91. De Duve С., de Barsy Т., Pool В. e. a. Lysosomotropic agents // Biochem. Pharmacol. 1974. V.23. - P.2495-2531.

92. Delcros J.-G., Sturkenboom M.C.M., Basu H.S., Feuerstein B.C., Stafer R.H., Marton L.J. Differential effects of spermine and its analogues on the structures of polynucleotides complexed with ethidium bromide // Biochem. J.-1993. -V.291. -.269-274.

93. Dion A.S., Herbst E.J. Polyamine changes during development of Drosophila Melanogaster// Ann. N. Y. Acad. Sci. 1970. V.171. P.713-734.

94. Don S., Bachrach U. Polyamine metabolism in normal and in virus-transformed chick embryo fibroblasts // Cancer Res. 1975. V.35. - P.3618-3622.

95. Don S., Wiener H., Bachrach U. Specific increase in polyamine levels in chick embryo cells transformed by Rous sarcoma vifus // Cancer Res. 1975. V.35. № 1 .-P. 194-198.

96. Dubin D.T., Rosenthal S.M. Polyamine-glutathione conjugates in E.coli // Fed. Proc. 1960. V. 19. - P.I.

97. Duffy P.E., Defendini R., Kremzner L.T. Regulation of meningioma cell growth in vitro by polyamines // J. Neuropathol. Exp. Neurol. 1971. V.30.-P.698-713.

98. Edwards M.L., Prakash N.J., Stemench D.M., Sunkara S.P., Bitonti A.J., Davis G.F., Dumont J.A., Bey P. Polyamine analogues with antitumor activity // J. Med. Chem. 1990. V. 33. - P. 1369-1375.

99. Eichberg J., Zetusky W., Bell M.E., Cavanagn E. Effects of polyami-nes on calcium dependent rat brain phosphatidylinositol-phosphodiesterase //J. Neurochem. 1981.-V. 36.-P. 1868-1871.

100. Eloranta Т.О., Khomutov A.R., Khomutov R.M., Hyrvonen T. Ami-nooxy analogs of spermidine as inhibitors of spermine synthase and substrates of hepatic polyamine acetylating activity // J. Biochem. 1990. -V.108 P.593-598.

101. Eloranta Т.О., Maenpaa P.H., Raina A.M. Synthesis of hepatic poly-amines. Ribonucleic acid and S-adenosylmethionine in normal and oestrogen-tncated chicks // Biochem. J. 1991.- V.I54. P.95-103.

102. Ericsson J.L.E. Studies on induced cellular autophagy. I. Electron microscopy of cells will in vivo labelled lysosomes // Exper. Cell. Res. -1969.-V.55. P.95-106.

103. Feuerstein B. G., Williams L. D., Morton L. J. Implications and concepts of polyamine-nucleic acid interactions // J. Cell. Biochem. 1991.-V.46.-P.37-47.

104. Fogel W.A. Amine oxidases in mammalian gastrointestinal tract // Ital. J. Biochem.- 1992. V.41.-№ 1. - P.61 A-62A.

105. Fogel-Petrovic M, Shappell NW, Bergeron RJ, Porter CW. Polyamine and polyamine analog regulation of spermidine/spermine N1-acetyltransferase in MALME-3M human melanoma cells// J. Biol. Chem. -October 18, 2002. Vol. 277, Issue 42. - P. 39867-39872.

106. Francis G.E., Pinsky C.M. Growth and differentiation control // Cancer Chemother. Biol. Response. Modif. Annu. -Amsterdam, 1988. P.507-544.

107. Fukuchi J, Hiipakka RA, Kokontis JM, Nishimura K, Igarashi K, Liao S. TATA-binding protein-associated factor 7 regulates polyamine transport activity and polyamine analog-induced apoptosis.//Biochem Pharmacol. 1994 Oct 18. - V.48(8). - P. 1611-8.

108. Fuller O.J., Carper S.W., Clay L, Chen J.-R., Gerner E.W. Polyamine regulation of heat-shock-induced spermidine N -acetyltransferase activity // Biochem. J. 1990. - V.267. P.601-605.

109. Gazdar A.F., Stull H.B., Kilton L.J., Bachrach U. Increased ornithine decarboxylase activity in murine sarcoma virus infected cells // Nature. 1976.-V. 262.-P. 696-698.

110. Ghoda L., Basu H.S., Porter C.W., Marton L.J., Coffino P. The role of ornithine decarboxylase suppressionand polyamine depletion in the antiproli-ferative activity of polyamine analogs // Mol. Pharmacol. 1992. -V.42. -P.302-306.

111. Giorgi P.P. Polyamine and ammo acid incorporation in vitro into microsomes of rat cerebral cortex. // Biochem. J. 1970. - P.643-651.

112. Goldstein J.The effect of spermine on the accumulation of nucleic acid and protein in mammalian cells // Exp. Cell. Res. 1965. - V.37. P.494-497.

113. Gumport R.I. Effects of spermidine on the RNA polymerase reaction //Ann. N. Y. Acad. Sci. 1970. - V.171.-P.915-938.

114. Gray W.R., Hartley B.S. A fluorescent end-group reagent for proteins and peptides // Biochem. J. 1963. V.89. - P.59.

115. Haddox M.K., Russell D.H. Nuclear transglutaminase activity and nuclear conjugation of polyamines exhibit parallel increases in regenerating rat liver // Eur. J. Cell. Biol. 1980. - V. 22. - P. 12-117.

116. Haddox M.K., Russell D.H. Increased nuclear conjugated polyamines and transglutaminase during liver regeneration // Proc. Nat. Acad. Sci. USA, Biol. Sci. 1981. V.78. - P.1712-1716.

117. Halline A.G., Dudeja P.K., Brasitus T.A. 1,2-dimethylhydrasine induced alterations in N-acetylspermidine levels in rat distal colonic mucosa: effects of a-difluoromethylornithme // Cancer Res. 1989. V.49. P.633-638.

118. Hansson R., Thysell H. Heparin-induced increase of diamine oxidase in lymph and blood plasma of rat, guinea-pig and rabbit // Acta Physiol. Scand.-1971.-V.81 .-P.208-214.

119. Harada J.J., Porter C.W., Morris O.K. Induction of polyamine limitation in Chinese hamster cells by a-methylornithine // J. Cell. Physiol.- 1981. -V.107.-P.413-426.

120. Harris J.W., Wong J.P., Kehe C.R. The role of adenosine triphosphate, chalones and specific proteins in controlling tumor growth fraction // Cancer Res. 1975. V. 35. - P. 3181 - 3186.

121. Heby О., Agrell I. Observations on the affinity between polyamine and nucleic acids I I Hoppe Seylers Z Physiol Chem. -1971. V.352. P.29-38.

122. Heby O., Lewan L. Putrescine and polyamines in relation to nucleic acids in mouse liver after partial hepatectomy // Viuchows Arch. 1971. V.8. -P.58-66.

123. Heby O., Marton L.J., Wilson C.B. Polyamine metabolism in a rat brain tumor cell line: its relationship to the growth rate // J. Cell. Physiol. -1975. V. 86. - V. 86. - P. 511-522.

124. Heby O., Persson L. Molecular genetics of polyamine synthesis in eukaryotic cells // Trends Biochem. Sci. 1990. - V.I72.- P. 153-158.

125. Heby O., Russel D.M. Depression of polyamine synthesis in L1210 leukemic mice during treatment with apotent antileukemic agent 5-azacytidine //Cancer Res.-1973.-V.53.-P.159-165.

126. Heby O., Russel D.M. Effects of methylglyoxalbis(guanylhydrazone) on polyamine metabolism in spleens of mice with disseminated L1210 lymphoid leukemia // Cancer Res. 1974. - V.34. - P.886-892.

127. Herbst E.J., Bachrach U. Metabolism and biological functions of po-lyamines//Ann. N. Y. Acad. Sci.- 1970. V.I 71. P.691-1009.

128. Hershko A., Amoz S., Mager J. Effect of polyamines and divalent metals on in vitro incorporation of amin acids into ribonucleoprotein particles // Biochem. Biophys. Res. Commun. -1961. V.5. P.46-51.

129. Higgins G.M., Anderson R.M. Experimantal pathology of liver: restoration of liver of white rat following partial surgical removal // Arch. Path. -1931.-V. 12.-P. 186-202.

130. Hirsch J.G. The essential participation of an enzyme in the inhibition of growth of tubercle bacilli by spermine // J. Ep. Med. 1953. V.97. -P.327-344.

131. Hogan B.L.M. Effect of growth conditions on the ornithine decarboxylase activity of rat hepatoma cells // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1971. -V.45. -P.301-307.

132. Holm I., Persson Lo., Pegg A.E., Hebby O. Effects of S-adenosyl-1,8-diamino-3-thio-octane and S-methyl-5'-methylthio adenosine on polyaminesynthesis in Ehrlich ascites tumor cells // Biochem. J. 1989. - V.261. -P.205-210.

133. Holtta E.Oxidation of spermidine and spermine in rat liver: purification and properties of polyamine oxidase // Biochemistry. 1977. - V.16. № 1.-P.91-100.

134. Holtta E., Pulkkinen P., eleving K., Janne J. Oxidation of polyamines by diamine oxidase from human seminal plasma // Biochem. J. 1975. P.373-378.

135. Holtta E., Sinervirta R., Janne J. Synthesis and accumulation of polyamines in rat liver regenerating after treatment With carbon tetrachloride // Biochem and Biophys. Res. Communs. 1973. V.54. - P.350-357.

136. Homewood C.A., Warhurst D.C., Peters W., Baggaley V.C. Lysoso-mes, pH and anti-malarial action of chloroquine // Nature. 1975. - V.235. -P.50-52.

137. Igarashi K., Tabeda Y. Polyamines and protein synthesis. VI. Role of spermine aminoacyl-t-RNA formation // Biochim. Biophys. Acta. 1970. -V.213.-№ 1.-P.240-243.

138. Inouye M, Pardee A.B. Reguirement of polyamines for bacterial division // J. Bacteriol. 1970. - V.101. - № 3. - P.770-776.

139. Israel M., Rosenfield J.S., Modest E.J. Analogs of spermine and spermidine. I. Synthesis of polymethylenepolyamines by reduction of cyanoc-thylated alphaomega-alkylene-diamines // J. Med. Chem. -1964. -V.7.-P.710-716.

140. Israel M., Zoll E.G., Muhammad N., Modest E.J. Synthesis and antitumor evaluation of the presumed cytotoxicmetabolites of spermine and N,N -bis(3-aminopropyl)nonane-l,9-diamine // J. Med. Chem. 1973. -V.16. - P.l-5.

141. Janne J. Studies on the biosynthetic pathway of polyamines in rat liver// Acta Physiol. Scand. 1967. - V.300. - P.70-71.

142. Janne J., Alhoneu-Hopgisto L., Kapyako K., Seppanen P. Experimental approaches to the systemic and topical use of polyamine antimetabolites as antiproliferative agents // Advances in polyamine research. New York: Raven Press, 1983. - P. 17-32.

143. Janne J., Poso H., Raina A. Polyamines in rapid growth and cancer // Biochim. Biophys. Acta. 1978. V.473. P.241-293.

144. Janne J., Raina A. On the stimulation of ornithine decarboxylase and RNA polymerase activity in rat liver after treatment with growth hormone // Biochim. Biophys. Acta. 1969. - V.I74. - P.769-772.

145. Kalistratos G., Pfau A., Timmermann A. Untersuchungen uber mali-gnolipin // Z Krabsforsch. 1970. - V.73. - P.387-396.

146. Kapeller-Adler R. Amine oxidases and methods for their study. -New York: Wiley-interscience. 1970. 319 p.

147. Kee Kristin, Vujcic Slavoljub, Merali Salim, Diegelman Paula, Kisiel Nicholas, Powell C. Thomas, Kramer Debora L., Porter Carl W. Metabolic and Antiproliferative Consequences of Activated Polyamine Catabolism in

148. CaP Prostate Carcinoma Cells // J. of The American Society for Biochemistry and Molecular Biology. 1997. - V 272. - P. 18746-18751

149. Khan NA, Sezan A, Quemener V, Moulinoux JP. Polyamine transport regulation by calcium and calmodulin: role of Ca(2+)-ATPase. // Chem Biol. 1999. - V.6(10). - P.717-29.

150. Khawhja J.A. Graduel release of spermine and RNA from rat-liver microsomes treated with EDTA // FEBS Lett. 1972. - V.21. - P.49-52.л ,

151. Khawhja J.A., Raina A. Possible role of spermine and Mg in the attachment of ribosomes to the endoplasmic reticulum membranes // 7-th Meeting FEBS: Abstracts. -1971. P. 153.

152. Kimes B.W., Morris D.R. Inhibition of nucleic acid and protein synthesis in Escherichia coli by oxidized polyamines and acrolein // Biochim. Bio-phys. Acta. 1971. - V.288. P.235-244.

153. Kramer DL, Miller JT, Bergeron RJ, Khomutov R, Khomutov A, Porter CW. Regulation of polyamine transport by polyamines and polyamine analogs.//J. Biol. Chem. 2004. - Vol. 279. - P. 27050-27058.

154. Kobayashi Y. Plasma diamino oxidase titres of normal and pregnant rate // Nature. 1964. - V.203. - P.146-147.

155. Koenig H., Goldstone A.D., Lu C.Y. p-adrenergic stimulation of Ca2+-fluxes, endocytosis, hexose transport and amino acid transport in mouse kidney cortex is mediated by polyamine synthesis // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. -1983.-V.80.-P.7210-7215.

156. Kostyo J.L. Changes in polyamine content of rat liver following hy-pophysectomy and treatment with growth hormons // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1966. - V.23. - P.150-155.

157. Kremzner L.T., Duffy P.E., Defendini R.F., Terrano M.J. Metabolism of polyamines in normal human and in tumors of the C.N.S. // Excerpta Med. 1969. V.193. - P.242.

158. Lala P.K., Patt H.M. Cytokinetic analysis to tumor growth // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1966. V.56. - P. 1735-1742.

159. Libby P.R., Bergeron R.J., Porter C.W. Potent induction of spermidine/spermine N'-acetyltransferase (SSAT) activity and its relationship to inhibition of cell growth // Cancer Res. 1989. V.30. - P.586-589.

160. Lowry O.K., Rosebrough N.J., Fair A.L., Randall R.J. Protein measurement with Folin phenol reagent // J. Biol. Chem. 1951. - V.193. -P.265-275.

161. Luk G.D., Goodwin G., Marton L.J., Baylin S.B. Polyamines are needed for the survival of human small-cell lung carcinoma in culture // Proc. Natl. Acad. Sci., USA. -1981. V.78. -P.2355-2358.

162. Mach M, White M.W., Neubawer M., Degen J.L., Morris D.R. Isolation of a cDNA clone encoding S-adenosylmethionine decarboxylase // J. Biol. Chem. 1986. -V.261. P.l 1697-11703.

163. Mamont P.S., Ducherne M.-C., Grove J., Bey P. Antiproliferative properties of DL-a-difluoromethylornithine in cultured cells. A consequence of irreversible inhibition of ornithine decarboxylase // Biochem. Biophys. Res. Co-mmun. 1978. V.81. - P.58-66.

164. Mamont P.S., Siat M., Joder-Ohlenbusch A.-M., Bernhardt A., Casa-ra P. Effect of (2R,5R)-6-heptyne-2,5-diamine, a potent inhibitor of Lornithi-ne decarboxylase, on rat hepatoma cells cultured in vitro // Eur. J. Biochem. -1984. V.142.-P.457-463.

165. Matsui J., Pegg A.E. Increase in acetylation of spermidine in rat liver extracts brought about by treatment with carbon tetrachloride // Biochem. Biophys. Res. Communs.-1980. V.92. P. 1009-1015.

166. Matsushima M., Bryan G.T. Early induction on mouse urinary bladder ornithine decarboxylase activity by rodent vesical carcinogenes // Cancer Res. 1980. V.40. - P.1897-1901.

167. Mimori K., Mori M., Shiraishi Т., Tanaka S., Haraguchi M., Ueo H., Shitasaka C., Akiyoshi T. Expression of ornithine decarboxylase mRNA and c-myc mRNA in breast tumours // Int. J. Oncol. 1998. V.I2. - P.597-601.

168. Miyamoto M., Teryama H., Ohnishi T. Effects of protease inhibitors on liver regeneration // Biochem. Biophys. Res. Comm. 1973. V.55. -P.84-90.

169. Miyski K., Hayashi M., Chiba Т., Nasu K. Effect of some polyme-thylenepolyamines on the growth of transplantable cancer // Chem. Pharm. Bull. -1960.-V.8.-P.933.

170. Morioka K., Tanada K., Kezuke Y. Etal. Early changes in ornithine decarboxylase activity and polyamines during erythroid differentiation of friend leukemia eels//Oncodevelop. Biol.Med. 1983. -JST° 4.-P.231-237.

171. Moulinoux J.-P., Quemener V., Khan N.A. Biological significance of circulating polyamines in oncology // Cell. Mol. Biol. 1985 V.37. - P.773-783.

172. Niiranen Kirsi, Pietila Marko, Pirttila Terhi J., Jarvinen Aki,t

173. Halmekyto Maria , Korhonen Veli-Pekka, Keinanen Tuomo A., Alhonen Leena, Janne Juhani Targeted Disruption of Spermidine/Spermine Nl-Acety transferase Gene in Mouse Embryonic Stem Cells I I J. Biol. Chem. -2003.- Vol. 277. P. 25432-25438.

174. Nishioka K. International Symposium on Polyamines in Cancer. Critical role of polyamines in cancer: basic mechanisms and clinical approaches // Cancer Res. 1993. - V.53. - P.2689-2692.

175. Nishioka K. Polyamines in cancer. Houston, 1996. 230 p.

176. Nishioka K., Romsdahl M.M. Elevation of putrescine and spermidine in sera of patients with solid tumors // Clin. Chem. Acta. 1974. - V.57. -№ 2. -P.155-161.

177. O'Brien R.L., Olenick J.G., Hahn F.E. Reactions of quimine, ehloro-quine and quinacrine with DNA and RNA polymerase reactions // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.-1966.-V.55.-P.1511-1517.

178. Ochoa M.J., Weinstein I.B. Spermine inhibition of polypeptide synthesis in a subcellular system derived from the L1210 mouse ascites leukemia // Biochim. Biophys. Acts. 1965. - V.95. - P. 175-179.

179. Oki Т., Kawasaki H., Ogata K., Yamada H., Tomida I., Morino Т., Fukami H. Biochemical studies on polyamine and its analogues. II. Mechanism of phage inactivation by enzymatically oxidized spermine // Afr. Biol. Chem. -1969.-V.33.-P.994-1000.

180. Pegg A.E. The effects of diamine abd polyamines on enzymic me-thylation of nucleic acid // Biochim. Biophys. Acta. 1971. - V.232. - 630642.

181. Pegg A.E. Recent advances in the biochemistry of polyamines in eukaryotes // Biochem. J. 1986. V.234. P.249-262.

182. Pegg A.E. Perspectives in cancer research. Polyamine metabolism and its importancein neoplastic growth and as a target for chemotherapy // Cancer Res. 1988. V.48. P.751-774.

183. Pegg A.E., Coward J.K. Growth of mammalian cells in the absence of the accumumletion of spermine // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1985. V.I 13. -P.82-89.

184. Pegg A.E., Mc Cann P.P. Polyamine metabolism and function I I Am. J. Physiol. 1982. - 243, № 1. - P. 212-221.

185. Pegg A.E., Williams-Ashman H.G. Biosynthesis of putrescine in the prostate gland of the rat // Biochem. J. 1968a. - V.I 08. - P.533-539.

186. Petropoulos Alexandras D., Xaplanteri Maria A., Dinos George P., Wilson Daniel N., Kalpaxis Dimitrios L. Polyamines Affect Diversely the Antibiotic Potency // J. Biol. Chem. November 7, 2003. - Vol. 278, Issue 45.-P. 44826-44831.

187. Raina A., Janne J. Biosynthesis of putrescine: characterizationof ornithine decarboxylase from regenerating rat liver // Acta. Chem. Scand. -1968. -V.22.-P.2375-2378.

188. Raina A., Teloranta T. Association of polyamines and RNA in isolated subcellular particles from rat liver // Biochem. Biophys. Acta. 1967. -V.138.-P.200-203.

189. Razin S., Rosansky R. Metabolism of antibacterial action of spermine // Arch. Biochem. And Biophys. 1959. V.81. - P.36-56.

190. Russell D.H. Elevated polyamine synthesis in a mouse L1210 leu-kemia//Proc. Am. Cancer Res. 1970. - V.I 1.-P.69.

191. Russell D.H. Drug stimulation of putrescine and spermidine synthesis. Relationships to enhancement of ribonucleic acid synthesis // Biochem. Pharmacol.-1971. V.20. P.3481-3491.

192. Russell D.H. The rolles of the polyamines: putrescine, spermidine and spermine in normal and malignant tissue // Life Sci. 1973. - V.13. -P. 1635-1647.

193. Russell D.H. Polyamines in growth-normal and neoplastic // Polyamines in normal and neoplastic growth. New York: Raven Press, 1973. -P.l-13.

194. Russell D.H. Clinical relevance of polyamines // Crit. Rev. Clin. Lab. Sci.-1983.-V.18.-P.261-311.

195. Russell D.H., Haddox M. K. Cyclic AMP-mediated induction of ornithine decarboxylase in normal and neoplastic growth // Adv. Enzyme Regul. 1979. V.17.-P.61-87.

196. Russell D.H., Levy C.C. Polyamine accumulation and biosynthesis in a mouse L1210 Leukemia// Cancer Res. 1971. V.31. - P.248-261.

197. Russell D.H., Levy C.C., Schimpft S.C. Urinary polyamines in cancer patients//Cancer Res. 1971.-V.31.-P. 1555-1558.

198. Russell D.H., McVicker T.A. Polyamine biogenesis in the rat mammary gland // Physiologist. 1971.- V.I4. P.3.

199. Russell D.H., Russell S.D. Relative usefulness of measuring polyamines in serum, plasma and urine as Biochemical Markers of cancer // Clin. Chem. 1975. - V.21. - M> 7. - P.860-863.

200. Russell D.H., Snyder S.H. Amine synthesis in rapidly growing rat liver, chick embryo and various tumors //Proc. Natl. Acad. Sci. USA. -1968. -V.60. -P.420-427.

201. Snyder S.H., Russell D.H. Polyamine synthesis in rapidly growing tissues // Fed. Proceedings. 1970. V.29. - P. 1575-1582.

202. Sonawane N. D. t, Francis C. Szoka, Jr.§, and A. S. Verkman Chloride Accumulation and Swelling in Endosomes Enhances DNA Transfer by Polyamine-DNA Polyplexes // J. Biol. Chem. 2002. - Vol. 277. -P.25323-25328.

203. Soulet D, Covassin L, Kaouass M, Charest-Gaudreault R, Audette M, Poulin R. Role of endocytosis in the internalization of spermidine-C(2)

204. BODIPY, a highly fluorescent probe of polyamine transport. // Cell Physiol. 1993. - Vol. 157(3). - P.493-501.

205. Soulet Denis, Gagnon Bruno, Rivest Serge, Audette Marie, Richard Poulin A Fluorescent Probe of Polyamine Transport Accumulates into Intracellular Acidic Vesicles via a Two-step Mechanism // Biochem J. -2002 V.367(Pt 2). - P.347-357.

206. Southren A.L., Calanog A.M., Mishr S., Weingold A.B. Effect of cycloheximide on production of diamine oxidase by the human placenta // J. Appl. Physiol., 1970. V.29. P.684-686.

207. Sturman J.A., Gaull G.E. Polyamine metabolism in the brain and liver of the developing monkey // J. Neurochem. 1975. - V.25. - P.267-272.

208. Tabor C.W. The stabilizing effect of spermine and related amines on mitochondria and protoplasts // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1960. -V.2.-P.117-120.

209. Tabor C.W., Tabor H. 1,4-diaminobutane (putrescine), spermidine and spermine // Ann. Rev. Biochem. 1976. - V.45. - P.285-306.

210. Williams-Ashman H.G., Pegg A.E., Lockwood D.H. Mechanism and regulation of polyamine and putrescine biosynthesis in male genital glands and other tissues of mammals // Adv. Enzyme Reg. 1969. - V.7. - P.291-323.

211. Zarybnicky V., Horasek P. Influence of ionic strength on the staility ofphage T2rto osmotic shock. //Folia Microbiol. 1968.- V.13. - P.391-400.

Информация о работе

Голомазова, Ксения Алексеевна
кандидата биологических наук
Москва, 2006
ВАК 03.00.04

Диссертация

Антипролиферативные и антиопухолевые свойства синтетических аналогов полиаминов - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему Антипролиферативные и антиопухолевые свойства синтетических аналогов полиаминов ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Автореферат диссертации по теме "Антипролиферативные и антиопухолевые свойства синтетических аналогов полиаминов"

Введение Диссертация по биологии, на тему "Антипролиферативные и антиопухолевые свойства синтетических аналогов полиаминов"

Заключение Диссертация по теме "Биохимия", Голомазова, Ксения Алексеевна

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Голомазова, Ксения Алексеевна, Москва

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Антипролиферативные и антиопухолевые свойства синтетических аналогов полиаминов
ВАК РФ 03.00.04, Биохимия