Антимикотическая активность препарата-пробиотика "Бактиспорин" in vitro и его использование в комплексном лечении зооантропонозной трихофитии

Мухамадеева, Ольга Ринатовна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Антимикотическая активность препарата-пробиотика "Бактиспорин" in vitro и его использование в комплексном лечении зооантропонозной трихофитии
ВАК РФ 03.00.07, Микробиология

Автореферат диссертации по теме "Антимикотическая активность препарата-пробиотика "Бактиспорин" in vitro и его использование в комплексном лечении зооантропонозной трихофитии"

На правах рукописи

МУХАМАДЕЕВА ОЛЬГА РИНАТОВНА

АНТИМИКОТИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ ПРЕПАРАТА-ПРОБИОТИКА

«БАКТИСПОРИН» IN VITRO И ЕГО ИСПОЛЬЗОВАНИЕ В КОМПЛЕКСНОМ ЛЕЧЕНИИ ЗООАНТРОПОНОЗНОЙ ТРИХОФИТИИ

03.00.07 - микробиология 14.00.11 - кожные и венерические болезни

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Уфа-2005

Работа выполнена на базе Филиала ФГУП «НПО «Микроген» МЗ и СР РФ «Иммунопрепарат», Республиканского кожно-венерологического диспансера, Уфимского городского кожно-венерологического диспансера.

Научный руководитель: кандидат биологических наук,

с.н.с. Кузнецова Татьяна Николаевна

кандидат медицинских наук,

доцент Хисматуллина Зарема Римовна

Официальные оппоненты: доктор медицинских наук,

Туйгунов Марсель Маратович

доктор медицинских наук,

профессор Кунгуров Николай Васильевич

Ведущее учреждение: ГОУ ВПО Московская медицинская академия им. И.М. Сеченова

Защита диссертации состоится « о?3» _2005 г.

в /У" часов на заседании Регионального диссертационного совета КМ 002.124.01 при Президиуме Академии наук Республики Башкортостан по адресу: 450014, Уфа, ул. Новороссийская, 105.

С диссертацией можно ознакомиться в научной библиотеке Филиала ФГУП «НПО «Микроген» МЗ и СР РФ «Иммунопрепарат» по адресу: 450014, Уфа, ул. Новороссийская, 105.

Автореферат разослан «7^» /С^Я^О^^- 2005 г.

Ученый секретарь диссертационного совета, доктор медицинских наук (1 К.А. Лукманова

JffrfJ

ц4юп

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы

Микотическая инфекция является одной из актуальных проблем дерматологии. По различным данным микозами страдает от 10 до 40 % населения планеты всех возрастов [Сергеев А.Ю., Сергеев Ю.В., 2003].

Заболеваемость дерматофитиями в Республике Башкортостан за 2003 год составила: микроспорией - 29,0 на 100 тыс. населения, трихофитией - 11,7 на 100 тыс. населения [Информационное письмо для врачей, 2004]. В Республике Башкортостан показатели по трихофитии превышают общероссийские в 6-7 раз [Потекаев H.H., 2002].

Изучению проблем дерматофитий посвящены исследования Е.А. Медведевой (1968), П.Н. Кашкина (1978), П.Н. Пестерова (1988), З.Р. Хисматуллиной (1995), Х.С. Фахретдиновой (2004). В них освещены особенности морфологии грибов-возбудителей, эпидемиологии и клиники заболеваний, предложены новые подходы к лечению. Однако часто встречающийся полиморфизм грибов-возбудителей в материале от больного при диагностических исследованиях, большое количество нагноительных форм (до 51,7 % случаев при зооантропонозной трихофитии), длительный срок лечения (от 30 до 70 дней) и побочные явления традиционной терапии (развитие дисбиоза кишечника, снижение функциональной активности нейтрофилов, присоединение респираторных заболеваний) указывают на необходимость дальнейшего изучения этих вопросов.

Несмотря на достаточно широкий спектр современных антимикоти-ков основным препаратом для лечения больных зооантропонозными дерматофитиями является гризеофульфин. Однако при его применении наблюдается ряд побочных эффектов (диспепсия, головная боль, аллергические реакции и др.) [Машковский М.Д., 2000], а длительное применение

может привести к нарушению

микрофлоры

[Гафаров М.М., 2001; Болотовский Г.В., 2002]. Ввиду наличия интеркур-рентных заболеваний [Давыдова И.Р., Норманнская Т.Н., 2002], присоединения вторичной инфекции [Новиков А.И., Логинова Э.А., 2001], несостоятельности иммунного ответа [Медведев Ю.А., 1986; Хамзина О.Ш., 1996] при лечении зооантропонозных дерматофитий часто приходится использовать комплексную терапию.

Сложность лечения зооантропонозных дерматофитий делает актуальным поиск новых препаратов, обладающих, помимо антимикотиче-ской, дополнительно антибактериальной активностью, иммуномодули-рующими и ферментативными свойствами, не вызывающих побочных эффектов, удобных в применении, а также ценодоступных.

Такими препаратами являются пробиотики из бактерий рода Bacillus, например «Бактиспорин». Препарат «Бактиспорин» применяется для профилактики дисбиоза кишечника, при гнойно-воспалительных заболеваниях, бактериальном вагинозе [Михайлова H.A. и др., 1999]. Однако антагонистическая активность Бактиспорина в отношении грибов-дерматофитов не изучена.

Исходя из вышеизложенного, изучение антимикотического действия пробиотика «Бактиспорин» в отношении тест-штаммов грибов-дерматофитов в тестах in vitro и клинической эффективности его использования в комплексном лечении зооантропонозной трихофитии является актуальным.

Цель исследования

Изучение антимикотической активности препарата-пробиотика «Бактиспорин» в отношении грибов-дерматофитов в тестах in vitro, а также возможности его использования в комплексном лечении зооантропонозной трихофитии для повышения эффективности лечения.

Задачи исследования

1. Изучить особенности морфологии возбудителей зооантропонозной трихофитии, а также клиники, эпидемиологии и методы ее диагностики,

2. Изучить антимикотическую активность препарата «Бактиспорин» в отношении грибов-дерматофитов (Tr. mentagrophytes var. gypseum и М. canis) в тестах in vitro.

3. Исследовать состояние кишечной микрофлоры у больных зооантропонозной трихофитией до лечения и в динамике лечения при традиционной и комплексной терапии с использованием препарата «Бактиспорин».

4. Изучить состояние функциональной активности нейтрофилов у больных зооантропонозной трихофитией в очаге воспаления и периферической венозной крови до лечения и в динамике лечения при традиционной и комплексной терапии с использованием препарата «Бактиспорин»,

5. Провести сравнительную оценку эффективности традиционной терапии зооантропонозной трихофитии и комплексного лечения с использованием препарата «Бактиспорин».

Научная новизна

- разработана новая среда для культуральной диагностики грибов-дерматофитов на основе среды Сабуро с добавлением гидролизата кератина, позволяющая сократить срок диагностики на 2-3 дня;

- установлено, что при зооантропонозной трихофитии в очаге воспаления (капиллярная кровь) нейтрофилы обладают более высокой функциональной активностью, чем в центральном кровотоке (венозная кровь);

- установлена способность Бактиспорина повышать функциональную активность нейтрофилов как в центральном кровотоке (венозная кровь), так и в очаге воспаления (капиллярная кровь) при зооантропоноз-ной трихофитии;

- предложен новый метод ранней оценки эффективности проводимой терапии зооантропонозной трихофитии (на 10-й день лечения) на основе показателей фагоцитарной активности нейтрофилов в очаге воспаления.

Научно-практическая значимость работы

Разработаны критерии оценки антагонистической активности пре-парата-пробиотика «Бактиспорин» в отношении грибов-дерматофитов в тесте отсроченного антагонизма in vitro.

Предложен новый метод ранней оценки эффективности проводимой терапии зооантропонозной трихофитии на основе показателей фагоцитарной активности нейтрофилов из очага воспаления на 10-й день лечения.

Предложен новый способ комплексного лечения зооантропонозной трихофитии, сочетающий использование препарата-пробиотика «Бактиспорин» с гризеофульвином, позволяющий сократить сроки излечения больных и повысить качество проводимой терапии.

Внедрение результатов исследования в практику

Результаты исследования вошли в методические рекомендации «Зооантропонозная трихофития» для врачей дерматовенерологов, ординаторов, интернов, слушателей ИПО (Уфа, 2004); изложены в монографии «Зооантропонозная трихофития у детей: аспекты иммуномодулирующей терапии» (Уфа, 2005).

Получены патент на изобретение («Способ оценки эффективности лечения трихофитии» № 2246113 С1 РФ, G 01 N 33/52 Заявл. 30.03.2004; Опубл. 10.02,2005 // Бюл. - 2005. - № 4), положительное решение о выдаче

патента на изобретение от 14.11.2005 (по заявке № 2004129925 от 14.10.2004 «Способ диагностики дерматомикозов и питательная среда для дерматофитов»).

Способ лечения внедрен в практику и применяется в Республиканском кожно-венерологическом диспансере, Уфимском городском кожно-венерологическом диспансере, Бирском кожно-венерологическом диспансере.

Материалы диссертации используются в учебном процессе кафедры инфекционных болезней с курсом дерматовенерологии ИПО БГМУ.

Основные положения, выносимые на защиту

1. Препарат Бактиспорин обладает антимикотической активностью в отношении грибов-дерматофитов (Tr. mentagrophytes var. gypseum и М. canis) в тестах in vitro.

2. У больных зооантропонозной трихофитией еще до начала лечения существуют дисбиотические нарушения кишечной микрофлоры. Проведение традиционной терапии с использованием гризеофульвина усугубляет дисбиоз кишечника. Включение Бактиспорина в комплексную терапию улучшает состояние микробиоценоза кишечника.

3. При традиционной терапии зооантропонозной трихофитии в процессе лечения гризеофульвином повышается функциональная активность нейтрофилов в очаге воспаления и снижается в венозной крови, что свидетельствует об истощении резервных возможностей клеточного звена иммунитета. Применение Бактиспорина повышает функциональную активность нейтрофилов в очаге воспаления и в центральном кровотоке.

сутствием присоединения сопутствующих респираторных заболеваний, и приводит к сокращению сроков лечения в среднем на 3-4 дня.

Апробация работы

Материалы диссертационной работы доложены и обсуждены на Республиканской итоговой научно-практической конференции студентов и молодых ученых Республики Башкортостан с международным участием «Вопросы теоретической и практической медицины» (Уфа, 2003); XI Российском конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 2004); World Conference on Magic Bullets Celebrating Paul Ehrlich's 150th Birthday (Нюрнберг, 2004); Всероссийской научной конференции молодых ученых «Актуальные вопросы инфекционной патологии человека, клинической и прикладной иммунологии» (Уфа, 2004); Заседании Уфимского филиала Всероссийского научного общества дерматовенерологов (Уфа, 2004).

Публикации

По материалам диссертации опубликовано 25 научных работ, в том числе одна монография и пять статей в центральной печати.

Объем и структура диссертации

Диссертация изложена на 134 страницах, содержит 20 таблиц и 34 рисунка. Она состоит из введения, обзора литературы (2 главы), собственных исследований (6 глав), заключения, выводов и практических рекомендаций. Список литературы включает 299 источников (159 отечественных и 40 зарубежных).

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Материалы и методы исследований

Материалом для изучения заболеваемости зооантропонозными дерматофитиями и грибковой флоры их обуславливающей в Республике Башкортостан являлись данные годовых отчетов Республиканского кож-но-венерологического диспансера за пять лет (1999 - 2003 гг.).

В ходе выполнения исследований нами проведено клинико-лабораторное обследование, лечение и динамическое наблюдение 98 детей больных зооантропонозной трихофитией в возрасте от 9 до 16 лет (24 девочек и 74 мальчиков). Детей разделили на две группы. I группа (контрольная) состояла из 46 больных зооантропонозной трихофитией детей, получавших традиционный курс лечения (гризеофульвин, витаминотерапия, местное лечение). II группа (опытная) состояла из 52 больных зооантропонозной трихофитией детей, получавших одновременно с традиционной терапией препарат «Бактиспорин». Гризеофульвин назначали в дозе 18 мг/кг массы тела в течение 20-30 дней в зависимости от формы заболевания. Препарат «Бактиспорин» применяли перорально за 30 минут до еды одновременно с традиционным лечением по схеме: 3 дня по 3 дозы 3 раза в день, 3 дня по 2 дозы 3 раза в день и 14 дней по 2 дозы 2 раза в день. Общий курс лечения составил 20 дней.

В работе использовали препарат-пробиотик «Бактиспорин», основой которого являются лиофилизированные живые бактерии штамма Bacillus subtilis ЗН. Препарат произведен на базе ГУП «Иммунопрепарат» (г. Уфа), серия №81. Одна ампула препарата содержит одну дозу равную (1-5)х109 КОЕ.

В качестве культур тест-штаммов грибов использовали клинические штаммы грибов-дерматофитов Tr. mentagrophytes var. gypseum (n=20) и M. canis (п=45), выделенные от больных трихофитией и микроспорией

за период 2002-2003 гг. Чистые культуры тест-штаммов грибов сохраняли на среде Сабуро при температуре 4-6 °С в течение 24-36 месяцев с ежемесячным пересевом.

Изучение антагонистической активности препарата «Бактиспорин» в отношении грибов-дерматофитов Tr. mentagrophytes var. gypseum и М. canis проводили методом отсроченного антагонизма путем штрихового посева тест-штаммов грибов на твердые питательные среды [Егоров Н.С., 1965] и уколом в агар [Билай В.И., 1982]. Контролем служило параллельное выращивание культур грибов без исследуемого препарата.

Чувствительность препарата «Бактиспорин» к антибиотикам и ан-тимикотикам определяли методом бумажных дисков [Егоров Н.С., 1965]. Диски с антибиотиками использовали стандартные (ТУ 9398-00103948447-96). Диски с антимикотиками (гризеофульвин, тербинафин, флуконазол) изготовливали самостоятельно. Для этого из фильтровальной бумаги вырезали диски диаметром 5 мм, пропитывали раствором антими-котика и высушивали на воздухе.

Клинические исследования эффективности препарата «Бактиспорин» при лечении детей, страдающих зооантропонозной трихофитией, проводили на базе Республиканского кожно-венерологического диспансера.

Обследование детей, больных зооантропонозной трихофитией, включало в себя: общий анализ крови и мочи, копрограмму, а также бактериологические и иммунологические методы исследования.

Состояние микрофлоры кишечника определяли по качественным и количественным показателями [Эпштейн-Литвак Р.В., Вильшанская Ф.Л., 1979]. Исследования проводили до начала и после курса лечения.

Фагоцитарную активность нейтрофилов оценивали по способности клеток к фагоцитозу (фагоцитарный индекс - процент активных фагоцитов из числа потенциальных), фагоцитарному числу (количество поглощенных частиц в одном нейтрофиле) [Шишкин В.Л. и др., 1987]. Способность

к активации кислородзависимого метаболизма оценивали в тесте восстановления нитросинего тетразолия - НСТ-тесте (спонтанный и индуцированный частицами латекса), индекс НСТ (отношение показателей НСТ индуцированного к показателям НСТ спонтанного) [Шишкин B.JI. и др., 1987]. Одновременно определяли миелопероксидазную активность (МПО) фагоцитов (МПО спонтанная и после индукции фагоцитов частицами латекса) и индекс МПО (отношение МПО индуцированной к МПО спонтанной) [Хаитов P.M. и др., 1995].

Для оценки функциональной активности нейтрофилов в процессе лечения у больных зооантропонозной трихофитией трижды проводили забор капиллярной крови из очага поражения и венозной крови (до начала лечения, на 10-й день и после лечения).

Статистическую обработку цифровых данных проводили на ПЭВМ (MS Excel 9.0, MS Word 9.0, Statistica 6.0) с использованием стандартных методик вариационной статистики, включая вычисление t-критерия Стью-дента для оценки значимости различия при парных измерениях показателей. Статистически значимыми считали различия при Р<0,05.

Результаты исследований и их обсуждение

Анализ заболеваемости зооантропонозными дерматофитиями в Республике Башкортостан за период с 1999 по 2003 годы показал, что показатели по трихофитии превышают общероссийские в 6 раз. Основной контингент больных трихофитией составляют сельские жители (до 89,5 %).

Клинически трихофития может протекать в трех формах: поверхностной, инфильтративной и нагноительной. Возможно сочетание нескольких форм у одного больного.

У обследованных нами больных поверхностная форма трихофитии наблюдалась у 12,2 % больных, инфильтративная - у 37,8 %, нагноитель-ная - у 51,5 %. Атипичные варианты течения встречались в 16 % случаев.

Клинический полиморфизм затруднял диагностику, поэтому при любом подозрении на микоз было необходимо исследование патологического материала от больного.

Первым этапом исследования является микроскопия материала (волос и чешуек кожи), вторым - культуральная диагностика. При изучении клинических штаммов грибов (Tr. verrucosum, Tr. mentagrophytes var. gyp-seum, M. canis) был обнаружен значительный полиморфизм как при микроскопическом, так и при культуральном исследованиях, что затрудняло этиологическую диагностику.

Помимо полиморфизма культур затрудняют этиологическую диагностику дерматофитий длительные сроки бактериологического исследования, особенно при выделении Tr. verrucosum, из-за их медленного роста на обычно применяемых средах. Нами разработана новая питательная среда, основой которой является стандартная среда Сабуро. Для ускоренного роста грибов в неб добавлен гидролизат кератина - естественный субстрат для роста грибов-дерматофитов. Использование новой питательной среды сократило сроки идентификации на 2-3 дня, что позволило ускорить назначение этиотропной терапии.

Длительность лечения антимикотическими препаратами и наличие большого количества нагноительных форм зооантропонозной трихофитии требуют назначения комплексного лечения, включающего наряду с анти-микотиком препараты, обладающие антибактериальным и иммуномодули-рующим действием. В этой связи представлялось целесообразным наряду с традиционным лечением дополнительно применить пробиотик «Бактиспо-рин».

Учитывая, что его антибактериальное, иммуномодулирующее, ферментативное и противовоспалительное действия хорошо изучены, а антагонизм в отношении грибов-дерматофитов неизвестен, на первом этапе исследований проведено изучение антимикотической активности Бактис-

порина в тестах in vitro.

Для определения антифунгальных свойств Бактиспорина в отношении клинических штаммов Tr. mentagrophytes var. gypseum (п-20) и M. canis (п=45) использовали метод посева перпендикулярными штрихами согласно руководству Егорова Н.С. (1965). В проведенном тесте получена зона задержки роста тест-штаммов грибов более 10 мм (для Tr. mentagrophytes var. gypseum -17-25 мм, М. canis -18-29 мм), что свидетельствовало о высокой чувствительности исследуемых штаммов к Бактиспорину.

Для наблюдения за развитием отдельных колоний грибов в зависимости от градиента концентрации биологически активных веществ, выделяемых препаратом «Бактиспорин», использовали метод посева гриба уколом в агар. Для количественной оценки антимикотической активности препарата «Бактиспорин» вычисляли коэффициент ингибирования роста тест-штаммов грибов в зависимости от места посева и дней роста гриба (таблица 1).

Таблица 1- Ингибирование роста тест-штаммов грибов Tr. mentagrophytes var. gypseum и M. canis препаратом «Бактиспорин»_

Расстояние колоний от края препарата, мм Коэффициент ингибирования, %

2 дня 3 дня 4 дня 5 дней 6 дней 7 дней 8 дней 9 дней 10 дней

Tr mentagrophytes var gypseum (n=20)

10 100 100 100 100 100 100 100 100 100

20 100 100 100 90,2 82,1 73,7 68,9 66,8 63,7

30 44,4 37,2 40,6 38,2 34,3 33,1 30,1 29,9 28,6

40 10,3 2,3 4,7 3,9 3,6 4 5,5 7,7 6,7

50 9,3 2.5 1,6 1,6 1,4 1,1 0,5 0,8 0.5

60 10,2 3,2 1,4 1,4 1,4 1J 0.3 0,6 0.2

M. canis (n"45)

10 100 100 100 100 100 100 100 100 100

20 65,5 64,3 75,9 76,3 72,3 72,2 70,8 66,6 65,4

30 57,5 42,2 55,9 52,1 46,6 42,7 44,6 42,2 40,0

40 20,0 18,6 21,7 18,9 18,2 17,6 20,0 15,9 13,4

50 15,0 12,5 1,7 4,2 3,6 3,1 6,2 0,9 3,0

60 20,0 11,3 1,4 1,3 1,3 1,2 0,6 0,6 0,9

Из представленных данных следует, что коэффициент ингибирова-ния тест-штаммов грибов возрастал по мере приближения к краю посева препарата и достигал 100 % на расстоянии 10 мм.

Согласно проведенным исследованиям были разработаны критерии оценки антагонистической активности препарата «Бактиспорин» в отношении грибов-дерматофитов в тесте отсроченного антагонизма при посеве тест-штаммов грибов методом укола в агар. Отсутствие роста колоний грибов на расстоянии 10 мм от края посева препарата, коэффициент инги-бирования роста грибов более 50 % в зоне до 30 мм могут являться основанием для того, чтобы считать препарат антагонистически активным в отношении данного вида гриба. Оценку результатов оптимально проводить на пятые сутки посева тест-штаммов грибов-дерматофитов.

Исследование морфологии мицелия гриба под воздействием Бак-тиспорина показало, что в непосредственной близости от посевов препарата (10 мм) отмечено разрушение спор, что проявлялось в изменении их структуры, формы, отсутствии каких-либо признаков прорастания. На более отдаленных участках (20 мм и более) происходило изменение структуры мицелия грибов (появление сферопластов на кончиках ростковых трубок и растущих гифов с их последующим разрушением).

Таким образом, известные свойства Бактиспорина как пробиотика и выявленная нами антимикотическая активность позволили применить его в клинике для комплексного лечения зооантропонозной трихофитии.

Для изучения эффективности использования Бактиспорина в комплексном лечении трихофитии было подобрано две группы больных: 52 человека (опытная группа), получавших комплексное лечение с Бактиспо-рином, и 46 человек (контрольная группа), получавших традиционное лечение гризеофульвином.

Поскольку длительность лечения любого заболевания определяется состоянием иммунной системы, а оно, в свою очередь, зависит от состоя-

ния кишечной микрофлоры, был изучен микробиоценоз кишечника детей обеих групп (98 человек). Выявлено, что у 25,5 % детей еще до начала лечения наблюдались явления дисбиоза кишечника. Из них дисбиоз I степени выявлен у 36 % больных, И степени - у 54 %, III степени - у 10 %.

При традиционном лечении (46 человек) с использованием гризео-фульвина выявлено, что доля больных, страдающих дисбиозом кишечника, увеличилась до 46,5 %, причем возросла доля дисбиоза кишечника II и III степени. Таким образом, применение гризеофульвина привело к нарушению кишечной микрофлоры к концу лечения, усугубило уже имеющийся дисбиоз кишечника.

Наряду с изучением кишечного микробиоценоза нами были проведены исследования по изучению состояния иммунного ответа у больных зооантропонозной трихофитией. Изучена функциональная активность ней-трофилов до лечения и в процессе традиционной терапии в очаге воспаления и центральном кровотоке у больных зооантропонозной трихофитией.

Полученные данные функциональной активности нейтрофилов капиллярной крови из очага воспаления и венозной крови были сопоставлены между собой и с аналогичными данными у практически здоровых детей (п=31). Выявлено, что у детей обеих групп полиморфно-ядерные фагоциты капиллярной крови обладали более высокой функциональной активностью по сравнению с таковой у фагоцитов, циркулирующих в венозной крови, что проявлялось более выраженной активацией метаболических процессов (более высокая способность к активации кислородзависи-мого метаболизма и МПО). Показатели функциональной активности нейтрофилов у больных зооантропонозной трихофитией вне зависимости от места их расположения (очаг воспаления или центральный кровоток) находились на более низком уровне, чем показатели практически здоровых детей (таблица 2).

Таблица 2 - Показатели функциональной активности нейтрофи-лов (М±ш) капиллярной крови в очаге воспаления и венозной крови у больных зооантропонозной трихофитией до лечения и практически здоровых детей__

Показатели функциональной активности нейтрофилов Венозная кровь Капиллярная кровь

Больные трихофитией (п=98) Практически здоровые дети (п=31) Больные трихофитией (п=98) Практически здоровые дети (п=31)

Фагоцитарный индекс,% 23,85±1,79* 38,63±3,32 29,46±1,07"" 35,75±1,03

Фагоцитарное число 3,71 ±0,42 3,30±0,33 3,94±0,39 3,20±0,25

нет СП., % 12,06±0,87* 15,00±1,18 15,15±0,79*'" 19,00±1,21"

НСТ инд., % 13,43±2,40 16,00±0,90 22,71±3,52" 23,60±1,86"

Индекс НСТ 1,23±0,25 1,14±0,15 2,05±0,17*'" 1,36±0,27

МПО сл., у.е. 0,22±0,0б' 0,56±0,05 1,28±0,40 1,33±0,11"

МПО инд.,у.е. 0,23±0,03* 0,53±0,05 1,38±0,39" 1,25±0,22"

Индекс МПО 1,00±0,13 0,93±0,03 0,36±0,2Г" 0,94±0,04

различие с показателями практически здоровых лиц статистически значимо (Р<0,05) " различие с показателями венозной крови статистически значимо (Р<0,05)

Исследование показало, что в процессе традиционного лечения отмечалась нормализация функциональной активности нейтрофильных полиморфно-ядерных фагоцитов в очаге воспаления (таблица 3) и снижение практически всех показателей у клеток, находящихся в венозной крови (таблица 4), до уровня значительно меньшего таковых у здоровых детей.

Таблица 3 - Показатели функциональной активности нейтрофи-лов (М±т) капиллярной крови из очага воспаления в процессе лечения больных зооантропонозной трихофитией детей, получавших тра-

Показатели функциональной активности нейтрофилов Исследуемые группы

Больные зооантропонозной трихофитией дети (п=4б) Практически здоровые дети (п=31)

до лечения 10 дней лечения после лечения

Фагоцитарный индекс, % 29,20±1,70" 27,80±1,80" 33,00±0,04*" 35,75±1,03

Фагоцитарное число 3,67±0,48 3,16±0,20 4,17±0,34' 3,20±0,25

НСТ сп., % 15,40±3,39 26,00±6,85"'" 14,33±0,33* 19,00±1,21

НСТ инд., % 31,00±2,40" 24,80±1,32" 21,00±3,00" 23,60±1,86

Индекс НСТ 2,23±0,42" 1,06±0,22" 1,47±0,23" 1,36±0,27

МПО сп., у.е. 1,32±0,53 0,90±0,19 2,01±0,25" 1,33±0,П

МПО инд., у.е. 1,43±0,16 0,87±0,15" 1,86±0,63 1,25±0,22

Индекс МПО 1,69±0,2б' 0,99±0,08" 0,93±0,04" 0,94±0,04

различие с показателями практически здоровых лиц статистически значимо (Р<0,05) " различие с показателями до лечения статистически значимо (Р<0,05)

Таблица 4 - Показатели функциональной активности нейтрофи-лов (М±ш) венозной крови в процессе лечения больных зооантропонозной трихофитией детей, получавших традиционную терапию, и

Показатели функциональной активности нейтрофилов Исследуемые группы

Больные зооантропс трихофитией дети нозной (п=46) Практически здоровые дети (п=31)

до лечения 10 дней лечения после лечения

Фагоцитарный индекс, % 23,8±1,22" 27,80±0,64''" 18,67±1,53*'" 38,63±3,32

Фагоцитарное число 3,5±0,45 3,59±0,19 2,87±0,28 3,30±0,33

НСТ сп., % 13,40±0,71 14,40±2,75 11,00±0,65''" 15,00±1,18

НСТ инд., % 17,40±1,18 23,60±1,6Г" 19,00±3,79 16,00±0,90

Индекс НСТ 1,40±0,35 1,61±0,27 1,76±0,13' 1,14±0,15

МПО сп., у.е. 0,18±0,03' 0,15±0,05' 0,Ю±0,0Г" 0,5б±0,05

МПО инд., у.е. 0,20±0,02* 0,23±0,07" 0,11±0,0Г" 0,53±0,05

Индекс МПО 1,00±0,22 1,63±0,15*'" 1,16±0,12 0,93±0,03

различие с показателями пракгачески здоровых лиц статистически значимо (Р<0,05) " различие с показателями до лечения статистически значимо (Р<0,05)

Полученные результаты можно расценить как усугубление недостаточности функционально-метаболической активности клеток фагоцитарного звена иммунной системы, что может проявляться в ухудшении клинического состояния больных детей.

Таким образом, большое число нагноительных форм зооантропо-нозной трихофитии (51,5 %), длительные сроки лечения (от 30 до 70 дней), негативное влияние гризеофульвина на состояние кишечного микробиоценоза, снижение функциональной активности нейтрофилов требовали поиска новых подходов к терапии данной инфекции.

В связи с этим в комплексном лечении зооантропонозной трихофитии нами был применен препарат «Бактиспорин» с целью профилактики дисбиотических нарушений в кишечнике и повышения функциональной активности нейтрофилов. Выявленная нами в тестах in vitro антагонистическая активность Бактиспорина в отношении грибов-дерматофитов позволила использовать его в качестве дополнительного антимикотического препарата.

Основными критериями эффективности лечения у каждого из больных являлись: характер клинических изменений в очаге воспаления, скорость ликвидации воспалительных явлений, нормализация кишечной микрофлоры и уровень функциональной активности нейтрофилов.

Изучение состояния микробиоценоза кишечника у больных зооантропонозной трихофитией, получавших комплексное лечение с использованием Бактиспорина, показало, что к концу лечения доля больных, страдающих дисбиозом кишечника, уменьшилась с 25,5 % до 3,5 %, дисбиоз III степени отсутствовал. Ни у одного больного с нормальным состоянием кишечной микрофлоры до лечения дисбиотических нарушений после проводимой терапии отмечено не было.

Таким образом, введение в схему лечения пробиотика «Бактиспорин» позволило избежать негативного влияния гризеофульвина на кишеч-

ную микрофлору и улучшить ее состояние у детей, изначально имеющих дисбиоз кишечника.

Результаты оценки показателей функциональной активности ней-трофилов в процессе комплексного лечения с использованием препарата «Бактиспорин» приведены в таблице 5 (данные функциональной активности нейтрофилов в центральном кровотоке) и в таблице б (данные функциональной активности нейтрофилов в очаге воспаления).

Таблица 5- Показатели функциональной активности нейтрофилов (М±ш) венозной крови в процессе лечения больных зооантропо-нозной трихофитией детей, получавших комплексную терапию с использованием пробиотика «Бактиспорин», и практически здоровых детей______

Показатели функциональной активности нейтрофилов Исследуемые группы

Больные зооантропс трихофитией дети нозной (п=46) Практически здоровые дети (п=31)

до лечения 10 дней лечения после лечения

Фагоцитарный индекс, % 23,90±0,37" 16,80±0,75''" 26,42±0,47" " 38,63^3,32

Фагоцитарное число 3,93±0,39 3,22±0,27 3,71±0,22 3,30±0,33

нет СП, % 10,73±1,04* 12,90±1,30 1б,50±1,05" 15,00±1,18

НСТ инд, % 14,18±0,13' 19,50±1,04" 22,50±2,45"'" 16,00±0,90

Индекс НСТ 1,40±0,16 1,53±0,17 1,73±0,24" 1,14±0,15

МПО сп, у.е. 0,27±0,10' 0,26±0,08" 0,20±0,03" 0,56±0,05

МПО инд, у.е. 0,27±0,10" 0,30±0,09* 0,28±0,07* 0,53±0,05

Индекс МПО 1,00±0,05 1,32±0,27 1,18±0,10 0,93±0,03

При сопоставлении показателей фагоцитарной активности нейтрофилов детей, получавших комплексную терапию с Бактиспорином, с соответствующими показателями детей, получавших традиционное лечение, отмечено, что включение в схему традиционной терапии Бактиспорина, способствовало активации фагоцитарных свойств нейтрофилов центрального кровотока (таблица 5).

В отношении фагоцитов, мигрировавших в очаг воспаления, имму-номодулирующий эффект Бактиспорина был значительно более выражен (таблица 6).

Таблица 6 - Показатели функциональной активности нейтрофи-лов (М±т) капиллярной крови из очага воспаления в процессе лечения больных зооантропонозной трихофитией детей, получавших комплексную терапию с использованием пробиотика «Бактиспорин», и

Показатели функциональной активности нейтрофилов Исследуемые группы

Больные зооантропонозной трихофитией дети (п=46) Практически здоровые дети (п=31)

до лечения 10 дней лечения после лечения

Фагоцитарный индекс, % 29,73±0,43" 42,5Ш,63" 44,50±0,68*'" 35,75±1,03

Фагоцитарное число 4,22±0,31 * 4,53±0,34'" 4,62±0,15* 3,20±0,25

НСТ сп., % 14,91±1,29' 20,30±1,41" 22,81±0,64'" 19,00±1,21

НСТ инд., % 24,09±1,64 28,80±1,14'" 32,70±3,42*'" 23,60±1,86

Индекс НСТ 2,43±0,72 1,63±0,14 1,47±0,21 1,36±0,27

МПО сп., у.е, 1,25±0,19 1,43±0,15 1,84±0,19''" 1,33±0,11

МПО инд., у.е. 1,33±0,12 1,63±0,27 1,95±0,2Г'" 1,25±0,22

Индекс МПО 1,03±0,06 1,15±0,06 1,04±0,03 | 0,94±0,04

Как видно из таблицы 6, непосредственно в очаге воспаления отмечалась четко выраженная активация как фагоцитарных, так и метаболических свойств нейтрофилов. Показатели функционально-метаболической активности нейтрофилов в очагах зооантропонозной трихофитии уже к 10 дню лечения находились на одном уровне с соответствующими показателями у практически здоровых детей, а в ряде случаев превышали их (фагоцитарное число, Р<0,05, НСТ индуцированный, Р<0,05). Сопоставляя показатели активности нейтрофилов у детей, получавших комплексное лечение с Бактиспорином, с аналогичными данными группы детей, получавших только традиционную терапию, была установлена более выражен-

ная активация функциональных и метаболических свойств фагоцитов (поглотительная способность - фагоцитарный индекс 42,50±1,бЗ и 27,80±1,80%, Р<0,05, и фагоцитарное число - 4,53±0,34 и 3,1б±0,20, Р<0,02; миелопероксидазная активность: соответственно МПО спонтанная 1,43±0,15 и 0,90±0,19 условных единиц, Р<0,05, и МПО индуцированная 1,63±0,27 и 0,87±0,15 условных единиц, Р<0,05). Также при этом были отмечены более высокие показатели резервных возможностей активации кислородзависимого метаболизма - в НСТ-тесте (индекс НСТ соответственно 1,63±0,14 и 1,06±0,22, Р<0,05), и активности миелопероксидазной системы (индекс МПО соответственно 1,15±0,06 и 0,99±0,08, Р<0,05). В конце лечения функциональная активность фагоцитов была на достоверно более высоком уровне, чем у практически здоровых детей и детей, получавших традиционную терапию (Р<0,05).

В целом, функциональная и метаболическая активность нейтрофи-лов была выше у детей, получавших в процессе комплексного лечения зооантропонозной трихофитии Бактиспорин, чем у детей, прошедших традиционный курс лечения. Наиболее выраженная активация фагоцитов при этом отмечалась у клеток, мигрировавших в очаг воспаления, вызванный микотической инфекцией.

При сопоставлении клинической картины трихофитии с показателями фагоцитарной активности нейтрофилов крови из очага воспаления была замечена зависимость, которая заключалась в том, что чем выше показатели фагоцитарной активности нейтрофилов в очаге воспаления, тем быстрее наступало клиническое разрешение кожного процесса, Это позволило разработать метод ранней оценки проводимого лечения трихофитии на основании фагоцитарного числа и фагоцитарного индекса на 10-й день лечения: при значениях фагоцитарного индекса 20 % и менее и фагоцитарного числа 3,0 эффективность проводимой терапии можно оценить как низкую, более 40 % и 4,0 (соответственно) - как высокую.

Согласно разработанным критериям выявлено, что при проведении комплексного лечения с использованием пробиотика «Бактиспорин», эффективность проводимой терапии можно оценить как высокую (на 10-й день лечения фагоцитарный индекс - 42,5 %, фагоцитарное число - 4,53), а в группе больных, получавших традиционный курс лечения, - как среднюю (на 10-й день лечения фагоцитарный индекс - 27,8 %, фагоцитарное число - 3,16).

Включение Бактиспорина в комплексную терапию зооантропоноз-ной трихофитии повлияло на сроки элиминации грибов из очага воспаления. Так, при всех формах трихофитии первый отрицательный анализ на наличие грибов в очаге воспаления был получен на 3-4 дня раньше, чем при проведении традиционной терапии.

Исчезновение клинических проявлений при поверхностной и ин-фильтративной формах зооантропонозной трихофитии происходило достоверно раньше у больных, получавших комплексную терапию с Бактис-порином, чем у больных контрольной группы (Р<0,05). При нагноитель-ной форме заболевания достоверного различия в сроках прекращения гнойного отделяемого между группами не было. Однако в дальнейшем, у детей, получавших Бактиспорин, по сравнению с больными контрольной группы, разрешение гиперемии и инфильтрации, а также формирование рубцовой атрофии наблюдалось на 2-3 дня раньше.

Полученные данные могут являться результатом прямого антагонистического действия метаболитов, выделяемых препаратом «Бактиспорин», на гриб-патоген. Бактиспорин повышает функциональную активность нейтрофилов в очаге воспаления, что может ускорить элиминацию патогена из очага, а также устраняет напряжение фагоцитарного звена иммунитета в центральном кровотоке - венозной крови, что повышает защитные силы организма больного. Нормализация кишечной микрофлоры приводит к улучшению работы желудочно-кишечного тракта, нормализации обмена веществ, что, в свою очередь, повышает эффективность

лечения гризеофульвином.

Таким образом, исходя из полученных нами результатов, можно заключить, что включение Бактиспорина в комплексную терапию зооантро-понозной трихофитии повышает эффективность традиционной терапии и способствует ускорению процесса выздоровления.

Выводы

1.Впервые установлено, что Бактиспорин обладает антимикотиче-ской активностью в отношении грибов-дерматофитов Tr. mentagrophytes var. gypseum (п=20) и M, canis (п=45) в тестах in vitro.

2.Разработана новая питательная среда для выделения грибов-дерматофитов. В состав среды входит стандартная среда Сабуро и гидро-лизат кератина. Применение новой среды позволяет сократить сроки выделения грибов-дерматофитов на 2-3 дня.

3.Установлено, что традиционная терапия (гризеофульвин) зооан-тропонозной трихофитии может приводить к ухудшению состояния кишечной микрофлоры. Включение в комплексную терапию Бактиспорина приводит к нормализации микробиоценоза кишечника и отменяет негативное влияние гризеофульвина.

4.У больных зооантропонозной трихофитией нейтрофилы капиллярной крови в очаге воспаления обладают более высокой функциональной активностью по сравнению с нейтрофилами венозной крови. Включение в комплексную схему лечения зооантропонозной трихофитии Бактиспорина приводит к достоверно более высокому повышению функциональной активности нейтрофилов в очаге воспаления и центральном кровотоке по сравнению с традиционной терапией.

5.Использование препарата-пробиотика «Бактиспорин» в комплексном лечении зооантропонозной трихофитии сокращает сроки лечения (на 3-4 дня) по сравнению с традиционной терапией.

Практические рекомендации

У больных зооантропонозной трихофитией рекомендуется проводить комплексное лечение с использованием препарата-пробиотика «Бак-тиспорин». Препарат назначается с первого дня лечения одновременно с гризеофульвином перорально: 3 дня по 3 дозы 3 раза в день, затем 3 дня по 2 дозы 3 раза в день и 14 дней по 2 дозы 2 раза в день. Общий курс лечения 20 дней. Бактиспорин принимают натощак за 30 минут до еды.

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. Мухамадеева О.Р. Возможность применения препаратов-пробиотиков в дерматологии // Материалы 68-й Республиканской итоговой научно-практической конференции студентов и молодых ученых Республики Башкортостан с международным участием «Вопросы теоретической и практической медицины». - Уфа. - 2003. - С. 160-161.

2. Мухамадеева О.Р. Изучение антимикотической активности препарата-пробиотика Бактиспорин in vitro // Материалы 67-й международной итоговой студенческой научно-практической конференции, посвященной 110-летию проф. Озерецкого Н.И. - Красноярск. - 2003. -С. 61-62.

3. Мухамадеева О.Р., Хисматуллина З.Р. Антимикотические свойства препарата-пробиотика Бактиспорин // IV международна конференшя студенпв i молодих вчених «Медицина - Здоров'я XXI стор1ччя». - Днепропетровск. - 2003. - С. 151.

4. Мухамадеева О.Р., Хисматуллина З.Р., Кузнецова Т.Н., Ураз-лин Н.У., Шаймарданова В.Н., Шахмаметова С.Р. Возможность использования препарата-пробиотика Бактиспорин в комплексном лечении дерма-тофитий // Первый Российский конгресс дерматовенерологов. Тезисы научных работ. - Санкт-Петербург. - 2003. - Т.1. - С. 286-289.

5. Хисматуллина З.Р., Гафаров М.М., Латыпов Б.Г., Мухамадеева О.Р., Курамшина Е.Р. Эпидемиологические особенности дерматофитий в Республике Башкортостан // Первый Российский конгресс дерматовенерологов. Тезисы научных работ. - Санкт-Петербург. - 2003. - Т.1. - С. 299.

6. Мухамадеева О.Р., Хисматуллина З.Р., Кузнецова Т.Н., Шаймарданова В.Н., Султанова 3.3., Уразлин Н.У. Возможность применения препарата-пробиотика Бактиспорин в микологии // Материалы VI Российского съезда врачей-инфекционистов. - Санкт-Петербург. - 2003. - С. 264.

7. Хисматуллина З.Р., Медведева Е.А., Мухамадеева О.Р., Латыпов Б.Г., Левченко Т.С. Клинические особенности трихофитии, обусловленной Trichophyton mentagrophytes var. gypseum // Материалы VI Российского съезда врачей-инфекционистов. - Санкт-Петербург. - 2003. - С. 415416.

8. Хисматуллина З.Р., Мухамадеева О.Р. Особенности клиники зоонозной трихофитии // Дерматовенерология. Косметология. Сексопатология. -2003. -№ 1-4 (6).-С. 21-23.

9. Азнабаева Л.Ф., Мухамадеева О.Р., Хисматуллина З.Р., Кузнецова Т.Н., Булгакова А.И. Функциональная активность нейтрофилов у больных зооантропонозной трихофитией детей при комплексном лечении с использованием пробиотика Бактиспорин // Иммунопатология, аллергология, инфектология. - 2004. - №4. - С. 53-64.

10. Мелентьев А.И., Галимзянова Н.Ф., Мухамадеева О.Р., Кузнецова Т.Н., Хисматуллина З.Р. Подавление развития некоторых грибов-

дерматофитов штаммами Bacillus subtilis in vitro // Материалы второго всероссийского конгресса по медицинской микологии «Успехи медицинской микологии». - Москва. - 2004. - T. IV. - С. 69-70.

11. Мелентьев А.И., Мухамадеева O.P., Галимзянова Н.Ф., Кузьмина Л.Ю., Яковлева О.В. Угнетение роста дерматофитов под влиянием Bacillus subtilis // World Conference on Magic Bullets Celebrating Paul Ehr-lich's 150th Birthday. - Nürnberg, Germany. - 2004. - P. 83.

12. Мухамадеева O.P., Кузнецова Т.Н., Мелентьев А.И., Хисматул-лина З.Р., Галимзянова Н.Ф. Влияние препарата-пробиотика Бактиспорин на рост микроскопических грибов in vitro // Всероссийская научная конференция «Актуальные вопросы разработки, производства и применения иммунобиологических и фармацевтических препаратов». - Томск. - 2004.--С. 126-129.

13. Мухамадеева O.P., Кузнецова Т.Н., Хисматуллина З.Р. Действие препарата Бактиспорин на культуры грибов дерматофитов in vitro // II EADV Spring Symposium. - Budapest, Hungary. - 2004. - P. 76.

14. Мухамадеева O.P., Хисматуллина 3.P., Левченко T.C., Демина Н.В., Кузнецова Т.Н. Комплексное лечение зооантропонозной трихофитии с использованием препарата-пробиотика Бактиспорин // Всероссийская конференция дерматовенерологов «Современные направления диагностики, лечения и профилактики ИППП и дерматозов». - Нижний Новгород. -2004.-С. 30-31.

15. Мухамадеева O.P., Хисматуллина З.Р., Кузнецова Т.Н. Применение препарата-пробиотика «Бактиспорин» в комплексном лечении зооантропонозной трихофитии // Проблемы медицинской микологии. - 2004,-Т.6, №2. - С. 31-33.

16. Хисматуллина З.Р., Мухамадеева O.P. Клиническое многообразие зооантропонозной трихофитии // Проблемы медицинской микологии,-2004. - Т.6, № 2. - С. 28-30.

17. Мухамадеева O.P., Кузнецова Т.Н., Хисматуллина З.Р. Подавление роста микроскопических грибов-дерматофитов препаратом «Бактиспорин» in vitro // Материалы Всероссийской научной конференции молодых ученых «Актуальные вопросы инфекционной патологии человека, клинической и прикладной иммунологии». - Уфа. -2004. - С. 118-119.

18. Мухамадеева O.P., Кузнецова Т.Н., Хисматуллина З.Р. Особенности течения зооантропонозной трихофитии // Материалы Всероссийской научной конференции молодых ученых «Актуальные вопросы инфекционной патологии человека, клинической и прикладной иммунологии». - Уфа. - 2004. - С. 262-264.

19. Хисматуллина З.Р., Фахретдинова Х.С., Мухамадеева O.P. Зоо-антропонозная трихофития: Методические рекомендации для врачей-дерматовенерологов, ординаторов, интернов, слушателей ИПО. - Уфа, изд-во «Башкириздат». - 2004. - 24 с.

20. Мухамадеева O.P., Кузнецова Т.Н., Хисматуллина З.Р. Состояние кишечной микрофлоры у детей с зооантропонозной трихофитией и возможность ее коррекции пробиотиком Бактиспорином // Материалы Всероссийской научной конференции с международным участием «Медицинские иммунобиологические препараты в XXI веке: разработка, производство и применение». - Уфа. - 2005. - С. 114-115.

21. Мухамадеева O.P., Кузнецова Т.Н., Хисматуллина З.Р. Влияние препарата-пробиотика «Бактиспорин» на функциональную активность нейтрофилов в очаге воспаления у детей с зооантропонозной трихофитией // Материалы Всероссийской научной конференции с международным участием «Медицинские иммунобиологические препараты в XXI веке: разработка, производство и применение».-Уфа.-2005. - С. 116-118.

22. Хисматуллина З.Р, Мухамадеева O.P. Изменение функциональной активности нейтрофилов крови у детей, больных зооантропонозной трихофитией при комплексном лечении с использованием пробиотика Бактиспорин // Хисматуллина З.Р, Медведев Ю.А. Зооантропонозная трихофития у детей: аспекты иммуномодулирующей терапии. - Уфа: Издательство «Здравоохранение Башкортостана». - 2005. - С. 61-85.

23. Хисматуллина З.Р, Мухамадеева O.P. Состояние кишечной флоры у детей больных зооантропонозной трихофитией // Сибирский журнал дерматологии и венерологии. - 2005. - № 6. - С. 37-38.

24. Пат. 2246113 Cl РФ, G 01 N 33/52. Способ оценки эффективности лечения трихофитии / Мухамадеева O.P., Азнабаева Л.Ф, Хисматуллина З.Р, Кузнецова Т.Н., Кильсенбаева Ф.А. Заявл. 30.03.2004; Опубл. 10.02.2005 // Бюл. - 2005. - № 4.

25. Положительное решение о выдаче патента от 14.11.2005 по заявке № 2004129925 от 14.10.2004. Способ диагностики дерматомикозов и питательная среда для дерматофитов / Мелентьев А.И, Мухамадеева O.P., Басченко И.А, Галимзянова Н.Ф, Сидорова Л.В, Хисматуллина З.Р.

№235 44

РНБ Русский фонд

2006-4 26758

Мухамадеева Ольга Ринатовна

Антимикотическая активность препарата-пробиотика

«Бактиспорин» in vitro и его использование в комплексном лечении зооантропонозной трихофитии

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Подписано в печать 1611 2005. Бумага офсетная Отпечатано на ризографе. Формат 60*84 1/16. Усл.-печ. л.1,63 Уч.-изд л 1,55 Тираж 100 экз. Заказ № 173 Отпечатано в ООО «Ксерокс СТМ», г Уфа, ул Достоевского, 49 Тел.(3472) 73-03-78

Содержание диссертации, кандидата медицинских наук, Мухамадеева, Ольга Ринатовна

ОГЛАВЛЕНИЕ.

ВВЕДЕНИЕ.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Глава 1. Зооантропонозные дерматофитии: эпидемиология, клинические и иммунологические особенности, лечение.

1.1. Клинико-эпидемиологические особенности трихофитии, обусловленной зоофильными дерматофитами.

1.2. Иммунологические аспекты дерматофитий, обусловленных зоофильными дерматофитами.

1.3. Лечение дерматофитий, обусловленных зоофильными дерматофитами.

Глава 2. Применение пробиотиков на основе Bacillus subtilis в медицине

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

Глава 3. Материалы и методы исследований.

Глава 4. Клинико-эпидемиологические особенности зооантропонозной трихофитии.

Глава 5. Изучение морфологических и культуральных особенностей возбудителей зооантропонозных дерматофитий.

5.1. Изучение полиморфизма грибов в материале от больного.

5.2. Изучение многообразия культур Tr. verrucosum.

5.3. Изучение многообразия культур Tr. mentagrophytes var. gypseum

5.4. Изучение многообразия культур М. canis.

Глава 6. Разработка новой среды с гидролизатом кератина для ускоренного определения вида гриба-возбудителя культуральным методом.

Глава 7. Изучение антимикотической активности препарата-пробиотика «Бактиспорин» in vitro.

7.1. Изучение антимикотической активности Бактиспорина в отношении грибов-дерматофитов.

7.2. Изучение возможности использования препарата-пробиотика «Бактиспорин» в комплексе с системными антимикотическими препаратами.

Глава 8. Комплексное лечение больных зооантропонозной трихофитией с использованием препарата-пробиотика «Бактиспорин».

8.1. Состояние микробиоценоза кишечника у детей, больных зооантропонозной трихофитией, и возможность его коррекции.

8.2. Влияние препарата-пробиотика «Бактиспорин» на функциональную активность нейтрофилов детей, больных зооантропонозной трихофитией.

8.3. Влияние препарата-пробиотика «Бактиспорин» на клиническую эффективность лечения зооантропонозной трихофитии.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Антимикотическая активность препарата-пробиотика "Бактиспорин" in vitro и его использование в комплексном лечении зооантропонозной трихофитии"

Актуальность проблемы

Заболеваемость дерматофитиями в Республике Башкортостан (РБ) за 2003 год составила: микроспорией - 29,0 на 100 тыс. населения, трихофитией -11,7 на 100 тыс. населения [Информационное письмо для врачей, 2004]. В Республике Башкортостан показатели по трихофитии превышают общероссийские в 6-7 раз [Потекаев Н.Н., 2002].

Изучению проблем дерматофитий посвящены исследования Е.А. Медведевой (1968), П.Н. Кашкина (1978), П.Н. Пестерова (1988), З.Р. Хисматулли-ной (1995), Х.С. Фахретдиновой (2004). В них освещены особенности морфологии грибов-возбудителей, эпидемиологии и клиники заболеваний, предложены новые подходы к лечению. Однако часто встречающийся полиморфизм грибов-возбудителей в материале от больного при диагностических исследованиях, большое количество нагноительных форм (до 51,7 % случаев при зооантропо-нозной трихофитии), длительный срок лечения (от 30 до 70 дней) и побочные явления традиционной терапии (развитие дисбиоза кишечника, снижение функциональной активности нейтрофилов, присоединение респираторных заболеваний) указывают на необходимость дальнейшего изучения этих вопросов.

Несмотря на достаточно широкий спектр современных антимикотиков основным препаратом для лечения больных зооантропонозными дерматофитиями является гризеофульфин. Однако при его применении наблюдается ряд побочных эффектов (диспепсия, головная боль, аллергические реакции и др.) [Машковский М.Д., 2000], а длительное применение может привести к нарушению состояния кишечной микрофлоры [Гафаров М.М., 2001; Болотовский Г.В., 2002]. Ввиду наличия интеркуррентных заболеваний [Давыдова И.Р., Норманнская Т.Н., 2002], присоединения вторичной инфекции [Новиков А.И., Логинова

Э.А., 2001], несостоятельности иммунного ответа [Медведев Ю.А., 1986; Хам-зина О.Ш., 1996] при лечении зооантропонозных дерматофитий часто приходится использовать комплексную терапию.

Сложность лечения зооантропонозных дерматофитий делает актуальным поиск новых препаратов, обладающих, помимо антимикотической, дополнительно антибактериальной активностью, иммуномодулирующими и ферментативными свойствами, не вызывающих побочных эффектов, удобных в применении, а также ценодоступных.

Такими препаратами являются пробиотики из бактерий рода Bacillus, например «Бактиспорин». Препарат «Бактиспорин» применяется для профилактики дисбиоза кишечника, при гнойно-воспалительных заболеваниях, бактериальном вагинозе [Михайлова Н.А. и др., 1999]. Однако антагонистическая активность Бактиспорина в отношении грибов-дерматофитов не изучена.

Цель исследования

Задачи исследования

1. Изучить особенности морфологии возбудителей зооантропонозной трихофитии, а также клиники, эпидемиологии и методы ее диагностики.

3. Исследовать состояние кишечной микрофлоры у больных зооантро-понозной трихофитией до лечения и в динамике лечения при традиционной и комплексной терапии с использованием препарата «Бактиспорин».

Научная новизна

Впервые: - выявлена антимикотическая активность препарата «Бактиспорин» в тестах in vitro в отношении грибов-дерматофитов Tr. mentagrophytes var. gypseum и М. canis и разработаны критерии ее оценки в тесте отстроченного антагонизма; разработана новая среда для культуральной диагностики грибов-дерматофитов на основе среды Сабуро с добавлением гидролизата кератина, позволяющая сократить срок диагностики на 2-3 дня; установлено, что при зооантропонозной трихофитии в очаге воспаления (капиллярная кровь) нейтрофилы обладают более высокой функциональной активностью, чем в центральном кровотоке (венозная кровь); установлена способность Бактиспорина повышать функциональную активность нейтрофилов как в центральном кровотоке (венозная кровь), так и в очаге воспаления (капиллярная кровь) при зооантропонозной трихофитии;

Научно-практическая значимость работы

Разработаны критерии оценки антагонистической активности препарата-пробиотика «Бактиспорин» в отношении грибов-дерматофитов в тесте отсроченного антагонизма in vitro.

Внедрение результатов исследования в практику

Результаты исследования вошли в методические рекомендации «Зооан-тропонозная трихофития» для врачей дерматовенерологов, ординаторов, интернов, слушателей ИПО (Уфа, 2004); изложены в монографии «Зооантропо-нозная трихофития у детей: аспекты иммуномодулирующей терапии» (Уфа, 2005).

Получены патент на изобретение («Способ оценки эффективности лечения трихофитии» № 2246113 С1 РФ, G 01 N 33/52 Заявл. 30.03.2004; Опубл. 10.02.2005 // Бюл. - 2005. - № 4), положительное решение о выдаче патента на изобретение от 14.11.2005 (по заявке № 2004129925 от 14.10.2004 «Способ диагностики дерматомикозов и питательная среда для дерматофитов»).

Способ лечения внедрен в практику и применяется в Республиканском кожно-венерологическом диспансере, Уфимском городском кожно-венерологи-ческом диспансере, Бирском кожно-венерологическом диспансере.

Основные положения, выносимые на защиту

1. Препарат «Бактиспорин» обладает антимикотической активностью в отношении грибов-дерматофитов (Tr. mentagrophytes var. gypseum и М. canis) в тестах in vitro.

3. При традиционной терапии зооантропонозной трихофитии в процессе лечения гризеофульвином повышается функциональная активность нейтро-филов в очаге воспаления и снижается в венозной крови, что свидетельствует об истощении резервных возможностей клеточного звена иммунитета. Применение Бактиспорина повышает функциональную активность нейтрофилов в очаге воспаления и в центральном кровотоке.

4. Использование препарата «Бактиспорин» в комплексном лечении зооантропонозной трихофитии повышает эффективность лечения, что проявляется: сокращением сроков элиминации возбудителя из очага воспаления, ускоренным регрессом клинических проявлений инфекции, отсутствием присоединения сопутствующих респираторных заболеваний, и приводит к сокращению сроков лечения в среднем на 3-4 дня.

Апробация работы

Публикации

Объем и структура диссертации

Диссертация изложена на 134 страницах, содержит 20 таблиц и 34 рисунка. Она состоит из введения, обзора литературы (2 главы), собственных исследований (6 глав), заключения, выводов и практических рекомендаций. Список литературы включает 199 источников (159 отечественных и 40 зарубежных).

Заключение Диссертация по теме "Микробиология", Мухамадеева, Ольга Ринатовна

Практические рекомендации

У больных зооантропонозной трихофитией рекомендуется проводить комплексное лечение с использованием препарата-пробиотика «Бактиспорин». Препарат назначается с первого дня лечения одновременно с гризеофульвином перорально: 3 дня по 3 дозы 3 раза в день, затем 3 дня по 2 дозы 3 раза в день и 14 дней по 2 дозы 2 раза в день. Общий курс лечения 20 дней. Бактиспорин принимают натощак за 30 минут до еды.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата медицинских наук, Мухамадеева, Ольга Ринатовна, Уфа

1. Айзенман Б.Е. Антибиотические свойства бактерий. Киев: Наукова думка, 1973.-С. 49-74.

2. Ануфриева Р.Г., Заславская П.Л., Шендеров Б.А. Изучение микробной экологии и морфологии биопленки толстой кишки крыс под влиянием рифам-пицина// Антибиот. химиотер. 1989. - Т. 34, №6. - С. 457-461.

3. Ахапкина И.Г., Бутова Л.Г., Фомкина И.П., Блинкова Л.П. Штамм Bacillus subtilis — продуцент фунгицидного вещества // Журн. микробиол. эпидеми-ол. иммунол. 1995. - №17. - С. 91-92.

4. Бабенко Ю.С., Соколова И.Е., Гниломедова Л.Е. Химиотерапевтическая активность литических ферментов при стафилококковой инфекции // Антибиот. химиотер. 1990. - Т.35, №11.- С. 9-11.

5. Барсукова А.А., Филатов А.В., Васин Ю.А. Хемилюминесцентный анализ фагоцитоза макрофагов // Иммунология. 1983. - №2. - С. 63-66.

6. Белявская В.А., Чердынцева Н.В., Бондаренко В.М., Литвяков Н.В. Биологические эффекты интерферона, продуцируемого рекомбинантными бактериями препарата-пробиотика субалин // Журн. микробиол. 2003. — №2. — С. 102-109.

7. Белоусова Т.А. Дерматофитии актуальная проблема современной дерматологии // Русский медицинский журнал. - 2003. - Т. 11, №17. - С. 980-984.

8. Биккузина Г.М. Микроэкология кишечника у детей раннего возраста с бронхо-легочной инфекцией и его коррекция пробиотиком бактиспорином: Автореф. дис. . канд. мед. наук. Уфа, 2003. - 22 с.

9. Билай В.И., Пидопличко Н.М. Токсинобразующие микроскопические грибы и вызываемые ими заболевания человека и животных. Киев: Наукова думка, 1970.-291 с.

10. Болотовский Г.В. Дисбактериоз: симптомы, лечение, профилактика. — СПб.: ИК «Невский проспект», 2002. 160 с.

11. Бондарев И.М., Каспаров JI.H., Лещенко В.М. Анализ современных особенностей эпидемиологии микроспории в Москве // Вестн. дерматол. вене-рол. 1995. - №5. - С. 25-27.

12. Бондарев И.М., Каспаров Л.Н., Кулагин В.И. и др. Факторы эффективности: системы организации борьбы с дерматофитиями в Москве // Вестн. дерматол. венерол. 1997. - №1. - С. 24-27.

13. Бондаренко В.М., Рубакова Э.И., Лаврова В.А. Иммуномодулируюггцее действие лактобактерий, используемых в качестве основы препаратов пробиотиков // Журн. микробиол. эпидемиол. иммунол. 1998. - №5. - С. 107112.

14. Будумян Т.М., Панова Е.О. Этиология и терапия зооантропонозной микроспории // Российский журнал кожных и венерических болезней. 2003 . — №6.-С. 33-35.

15. Бурова С.А. Проблема грибковых заболеваний человека // Российский журнал кожных и венерических болезней. 1998. - №1. - С. 39-44.

16. Воробьев А.А., Абрамов Н.А., Бондаренко В.М., Шендеров Б.А. Дисбакте-риозы актуальная проблема медицины // Вестник РАМН. - 1997. — — С. 4-6.

17. Воробьев А.А., Бондаренко В.М., Лыков Е.А. и др. Микроэкологические нарушения при клинической патологии и их коррекция бифидосодер^ка-щими пробиотиками // Вестник РАМН. 2004. - №2. - С. 13-17.

18. Воронина Л.Г. Эффективность лечения микроспории у детей тербинафииа гидрохлоридом (экзифином) // Проблемы медицинской микологии. — 2000. Т.2, №2. - С. 67.

19. Воспаление. Руководство для врачей / Под ред. В.В. Серова, B.C. Паукова. М.: Медицина, 1995. - 640 с.

20. Гатауллина Р.Х. Профилактика и лечение дисбактериоза кишечника у женщин репродуктивного возраста препаратом-пробиотиком Бактиспорином: Автореф. дис. . канд. мед. наук. -М., 2003. -24 с.

21. Гафаров М.М. Этиология, патогенез, клиника и лечение больных микозами стоп в регионе с развитой нефтехимической промышленностью (Республика Башкортостан): Дис. . докт. мед. наук. М., 2001. - 283 с.

22. Герасимчук Е.В., Серегина Е.Д., Хренников Е.М. Жидкие пробиотики Эуфлорин-В и Эуфлорин-L в лечении больных дерматозами // Бизнес медицина. 2002. - №3. - С. 40.

23. Гисматов Р.Х. Этиотропная и иммуномодулирующая терапия больных туберкулезом легких, находящихся в местах лишения свободы: Автореф. дис. . канд. мед. наук. М., 2004. - 26 с.

24. Голубничная В.Н. Оценка воспроизводимости результатов при определении чувствительности к антимикотикам методом дисков // Проблемы медицинской микологии. -2004. Т. 6, №2. - С. 70-71.

25. Гончарова Г.И., Дорофейчук В.Г., Смолянская А.З. и др. Микробная экология кишечника в норме и при патологии // Антибиотики и химиотерапия. — 1989. Т. 34, №6. - С. 462-466.

26. Давыдова И.Р., Норманнская Т.М. Комплексный подход к лечению больных микроспорией в стационаре областного КВД // Современные проблемы детской дерматовенерологии и микологии: Мат. Всерос. конф. М., 2002.-С. 34-35.

27. Дик Д. Иммунологические аспекты инфекционных заболеваний. — М.: Медицина, 1982. 573 с.

28. Егоров Н.С. Микробы антагонисты и биологические методы определения антибиотической активности. М.: Высшая школа, 1965. - 212 с.

29. Егоров Н.С., Лория Ж.К., Выборных С.Н., Хамрук Р. Влияние состава среды на синтез бацитрацина и спорообразование Bacillus licheniformis-28 КА // Прикл. биохим. микробиол.- 1986.-Т.22, №1.-С. 107-111.

30. Заболеваемость инфекциями, передающимися половым путем (ИППП), и заразными кожными болезнями в Республике Башкортостан в 2003 году // Информационное письмо для врачей. Уфа, 2004 - 24 с.

31. Захарова И.Я., Павлова Е.Н. Секреторные гидролазы термофильных бацилл, проявляющих литические свойства // Биосинтез ферментов микроорганизмов: Тез. докл. 4 Всесоюз. конф. Ташкент, 1988. - С. 11-12.

32. Зельцер И.З. О прогнозировании дисбиотического эффекта при токсико-гигиенической оценке антибиотиков // Антибиот. химиотер. 1989. - Т. 34, №6.-С. 440-442.

33. Златкина А.Р. Современные подходы к коррекции дисбиоза кишечника // Рос. журн. гастроэнтерол. гепатол. колопроктол. 1999. - №3. - С. 64-67.

34. Калюжная Л.Д., Сницаренко О.В., Дяченко Е.И. и др. Фавиформный вариант трихофитии, устойчивый к лечению гризеофульвином // Вестн. дерма-тол. венерол. 1991. - №4. - С. 61-62.

35. Кашкин П.Н. Медицинская микология. Л.: Медгиз, 1962. - 344 с.

36. Кашкин П.Н., Лисин В.В. Практическое руководство по медицинской микологии Л.: Медицина, 1983. - 192 с.

37. Кашкин К.П., Караев З.Р. Иммунная реактивность организма и антибиотическая терапия. JL: Медицина, 1984. - 200 с.

38. Королева Л.П. Лечение орунгалом детей, больных микроспорией // Вестн. дерматол. венерол. 1997. -№4. - С. 69-71.

39. Королева Л.П., Лещенко В.М., Самсонова В.А. и др. Опыт лечения больных микроспорией в Московском городском микологическом центре (МГМЦ) департамента здравоохранения // Вестн. дерматол. венерол. -1996. -№5. -С. 24-27.

40. Корсунская И.М. Микроспория: учебное пособие М.: РМАПО, 2001. -32 с.

41. Коршунов В.М., Володин Н.Н., Ефимцев Б.А. и др. Микроэкология влагалища. Коррекция микрофлоры при вагинальных дисбактериозах. — М., 1999.-52 с.

42. Коршунов В.М., Володин Н.Н., Ефимов Б.А. Дисбактериозы кишечника // Детская больница. 2000. - № 1. - С. 66-74.

43. Кудрявцев В.А., Сафронова Л.А., Осадчая А.И. и др. Влияние живых культур Bacillus subtilis на неспецифическую резистентность организма // Мик-робиол. журн. 1996. - Т. 58, №2. - С. 46-54.

44. Кузнецова Н.П., Чащин А.Ю., Патина В.П. Динамика заболеваемости дер-матофитиями в Иркутской области // Успехи медицинской микологии: Мат. первого Всерос. конгресса по медицинской микологии. М.: Национальная академия микологии, 2003. - Т.2. - С. 85.

45. Кулагин В.И., Хейдар С.А., Шекрота А.Г. и др. Современный способ лечения детей, больных микроспорией // Успехи медицинской микологии: Мат.первого Всерос. конгресса по медицинской микологии. М.: Национальная академия микологии, 2003. - Т.2. - С. 77-79.

46. Кульберг А .Я. Регуляция иммунного ответа. М.: Медицина, 1986. - 210 с.

47. Лазарева Д.Н., Плечев В.В., Муртазин З.Я. Актуальные проблемы антибио-тикотерапии. Уфа, БГМУ, НПО «Башбиомед». - 1997. - 192 с.

48. Лечебно-профилактический препарат Бактиспорин: Пат. 2130316 РФ / Михайлова Н.А., Кузнецова Т.Н., Кунягина О.В. Заявл. 97101057/13; Опубл. 1999.05.20 // БИПМ. - 1999. - №14.

49. Лещенко В.М. Лабораторная диагностика грибковых заболеваний. — М.: Медицина, 1982. 144 с.

50. Лещенко В.М., Хамзина О.Ш., Куршакова Т.С. Иммунный статус у больных антропонозной трихофитией // Вестн. дерматол. 1992. - № 2. -С. 48-50.

51. Мазанкова Л.И., Курохтина И.С. Перспективы применения споровых про-биотиков при заболеваниях желудочно-кишечного тракта у детей // Педиатрия. 2002. - №4. - С. 56-61.

52. Маноян М.Г., Летягин К.П., Панин А.Н. Терапия и профилактика дермато-микозов животных вакциной «Микродерм» // Проблемы медицинской микологии. 2000. - Т. 2, №2. - С. 55-56.

53. Маноян М.Г., Летягин К.П., Панин А.Н. Роль грибов-сапробионтов в патогенезе кожных поражений у мелких домашних животных // Проблемы медицинской микологии. 2000. - Т. 2, №2. - С. 56.

54. Маракулин В.П., Соловьева С.А., Зенкин Н.Г. Динамика заболеваемости микроспорией и трихофитией в г. Томске // Проблемы медицинской микологии. 2004. - Т. 6, №2. - С. 98.

55. Машкиллейсон А.Л., Кулешова Л.М., Соловьев A.M. Инфильтративно-нагноительная и поверхностная трихофития (описание случаев) // Вестн. дерматол. венерол. 1998. - №2. - С. 65-67.

56. Машковский М.Д. Лекарственные средства: В 2 т. 14-е изд., перераб., испр. и доп. М.: ООО «Издательство Новая Волна», 2000. - Т. 2. - 608 с.

57. Маянский А.Н., Маянский Д.Н. Очерки о нейтрофиле и макрофаге. Новосибирск: Наука, 1983. 360 с.

58. Медведев Ю.А. Молекулярно-клеточиые механизмы иммуногенеза при зоонозной трихофитии: Автореф. дис. . докт. мед. наук. М., 1988. — 36 с.

59. Медведев Ю.А., Алехин Е.К., Лещенко В.М. Применение иммуностимуляторов в терапии зооантропонозной трихофитии // Вестн. дерматол. вене-рол. 1987. - №11. - С. 70-73.

60. Медведев Ю.А., Алсынбаев М.М. Основы иммунных и иммунонаправлен-ных методов терапии и профилактики. Уфа.: РИО ГУП «Иммунопрепа-рат», 2000.-81 с.

61. Медведев Ю.А., Терегулова Г.А. Анализ изменений функциональной активности нейтрофилов у больных с различными клиническими формами зооантропонозной трихофитии // Вестн. дерматол. венерол. 1986. - №2. -С. 69-72.

62. Медведева Е.А. Грибковые заболевания человека, вызванные зоофильными дерматофитами: Дисс. . докт. мед. наук. Л., 1968. - 467 с.

63. Медведева Е.А. К современным проблемам медицинской микологии // Всероссийский съезд дерматологов и венерологов: Тезисы докладов. - Челябинск, 1989. - С. 326-327.

64. Медведева Е.А. Роль клинического полиморфизма в эпидемиологии зоо-нозных дерматофитий // Научно-практическая конференция дерматовенерологов Урала, Сибири и Дальнего Востока: Тез. докл. Екатеринбург, 1994.-С. 113.

65. Медведева Е.А., Тимофеева Е.Д., Белявцева И.С. и др. Динамика дерматофитий в Башкирской АССР за 32 года (1947-1978) // Вестн. дерматол. венерол. 1980. - №12. - С. 53-56.

66. Меерзон Т.И. Необычная локализация микроспории гладкой кожи, вызванной Microsporum canis // Вестн. дерматол. венерол. 1985. - №5. - С. 70-71.

67. Мелентьев А.И., Актуганов Г.Э. // Прикладная биохимия и микробиология. 1999. - Т. 35, №6. - С. 624-628.

68. Митрохин С.Д., Шендеров Б.А. Микробиологические и биохимические показатели изменения микробной экологии толстой кишки крыс под влиянием рифампицина // Антибиот. химиотер. 1989. - Т. 34, №6. - С. 448-452.

69. Молекулярно-генетические аспекты инфекционной патологии / Под ред. К.П. Кашкина. Л., 1978. - 106 с.

70. Несвижский Ю.Н. Изучение изменчивости кишечного микробиоценоза человека в норме и при патологии // Вестник РАМН. 2003. - №1. - С. 49-53.

71. Никитенко В.И. Вместо лекарств бактерии // Наука в СССР. - 1991. — №4.-С. 116-121.

72. Никитенко В.И. Медицинский институт Оренбурга представляет препарат споробактерин // JAMA. 1991. - Т.64, №1. - С. 31.

73. Никитенко В.И., Горбунова Н.Н., Жигайлов А.В. Споробактерин новый препарат для лечения дисбактериозов и гнойно-воспалительных процессов // Дисбактериозы и эубиотики: Тез. докл. Всерос. науч.-практ. конф. -М., 1996.-С. 26.

74. Новиков А.И., Логинова Э.А. Болезни кожи инфекционного и паразитарного происхождения: Руководство для врачей. М.: Медицинская книга, Н.Новгород: Издательство НГМА, 2001. - 283 с.

75. Окороков А.Н. Диагностика болезней внутренних органов: Т.1. Диагностика болезней органов пищеварения. М.: Мед. лит., 2000. - 560 с.

76. Олейникова Г.К., Кузнецова Т.А., Хут Ф.И. и др. Циклические липопепти-ды с фунгицидной активностью из морского изолята бактерии Bacillus subtilis // Химия природных соединений, биоорганическая и биомолекулярная химия. 2001. - №11. - С. 27-30.

77. Осипова И.Г., Михайлова Н.А., Сорокулова И.Б. и др. Споровые пробиоти-ки // Журн. микробиол. 2002. - №3. - С. 113-119.

78. Осипова И.Г., Сорокулова И.Б., Сазаева Л.Г. Некоторые аспекты механизма защитного действия споровых пробиотиков // Тез. докл. II Международной конф., посвящ. 100-летию Пермского НПО «Биомед» «Современная вакцинология». Пермь, 1998.-С. 144-145.

79. Осипова И.Г., Сорокулова И.Б., Терешкина Н.В., Григорьева Л.В. Изучение безопасности бактерий рода Bacillus, составляющих основу некоторых пробиотиков // Журн. микробиол. эпидемиол. иммунол. 1998. — №6. -С. 68-70.

80. Основы строения, деятельности иммунной системы и оценки ее состояния / Под ред. Ю.А. Медведева. Уфа: БГМУ, 1998. - 40 с.

81. Пестеров П.В. Трихофития зооантропонозная. Томск: Изд-во Томского Ун-та, 1988.-124 с.

82. Петров Р.В. Иммунология. М.: Медицина, 1982. - 268 с.

83. Платонов А.В., Туфанов К.А. Клинико-эпидемиологические особенности микроспории у детей в Амурской области // Проблемы медицинской микологии. 2000. - Т.2, №2. - С. 62-63.

84. Покровский В.И., Авербах М.М., Литвинов В.И. и др. Приобретенный иммунитет и инфекционный процесс. М.: Медицина, 1979. - 280 с.

85. Полятыкина О.В., Сучкова Г.Д., Кормилина Н.И. Течение и лечение микроспории у детей с аскаридозом // Проблемы медицинской микологии. -2004. Т.6, №2. - С. 109.

86. Потекаев Н.Н. К клинике и терапии микроспории // Вестн. дерматол. венерол. 2000. - №5. - С. 69-72.

87. Потекаев Н.Н. Микроспория // Русский медицинский журнал. 2003. - Т.8, №4.-С. 7-12.

88. Потекаев Н.Н., Брагина Е.Е., Дмитриев Г.А. Влияние тербинафина на Mi-crosporum canis. Исследования in vitro и in vivo // Вестн. дерматол. венерол.-2002. №6. - С. 4-7.

89. Принципы и методы выявления иммунопатологических состояний при инфекционных, аутоиммунных и аллергических заболеваниях: информационно-методическое письмо / В.Л. Шишкин, В.В. Сперанский, Ш.З. Заги-дуллин и др. Уфа, 1987. - 47 с.

90. Разнатовский К.И., Родионов А.Н., Котрехова Л.П. Дерматомикозы: Руководство для врачей. СПб.: Издательский дом СПбМАПО, 2003. - 158 с.

91. Райимкулиев Б.Р., Эрешов М.Э., Намноева Т.Н. и др. Организационные формы борьбы с зоофильной трихофитией в Туркменистане // Вестн. дерматол. венерол. 1997. -№1. - С. 28-30.

92. Рудницкий Е.А., Соболев А.В., Киселева Л.Ф. Заболеваемость людей микроспорией в зоне радионуклидного загрязнения // Проблемы медицинской микологии. 2000. - Т.2, №2. - С. 68.

93. Рукавишникова В.М., Гребенюк В.Н., Мохаммад Юсуф. Атипичная форма микроспории // Вестн. дерматол. венерол. 1997. - №4. - С. 65-68.

94. Рукавишникова В.М. Современные особенности клиники и лечения микроспории // Лечащий врач. 2001. - №4. - С. 16-24.

95. Сайтов М.М., Никитенко В.И., Осипов В.К. и др. О роли дисбактериоза в развитии хирургической инфекции // Дисбактериозы и эубиотики: Тез. докл. Всерос. науч.-практ. конф. М., 1996. - С. 32.

96. Саттон Д., Фотергилл А., Ринальди М. Определитель патогенных и условно патогенных грибов: Пер. с англ. — М.: Мир, 2001. — 486 с.

97. Ю5.Сафронова Л.А., Осадчая А.И., Кудрявцев В.А. Литическая активность Bacillus subtilis, условия ее выявления и поддержания // Биотехнология. — 2000.-№5.-С. 16-21.

98. Сергеев А.Ю., Сергеев Ю.В. Грибковые инфекции. Руководство для врачей. М.: ООО «Бином-пресс», 2003.-440 с.

99. Серебрянский Ю.Е., Афанасьев С.С., Денисов Л.А. и др. Цитокины в иммунореабилитации инфекционных больных // Военно-медицинский журн. 1999. - №3. - С. 41-50.

100. Скрипкин Ю.К.,-Яцуха М.В. Микроспория // Рос. мед. журн. 1997. -№2. - С. 37-40.

101. Скрипкин Ю.К., Яцуха М.В. Трихофития, фавус // Рос. мед. журн. 1997. -№1. - С. 42-46.

102. Ш.Смирнов В.В., Резник С.Р., Василевская И.А. Спорообразующие аэробные бактерии продуценты биологически активных веществ. - Киев: Наукова думка, 1982.-280 с.

103. Смирнов В.В. Антибиотики и/или пробиотики: размышления и факты // Лнсування та д1агностика. 1998. - №2 - С. 24-30.

104. Смирнов В.В. Эколого-таксономические и биотехнологические аспекты исследования бактерий и высших растений продуцентов биологически активных веществ // Мпсробюлопчний журнал. - 1998. - Т.60, №5. — С. 3-18.

105. Смирнов В.В., Коваленко Н.К., Подгорский B.C. и др. Пробиотики на основе живых культур микроорганизмов // Мжробюлопчний журнал. -2002. Т.64 - №4. - С. 62-79.

106. Современная наружная терапия дерматозов (с элементами физиотерапии) / Под ред. Н.Г. Короткого. Тверь: «Губернская медицина», 2001. - 528 с.

107. Сорокулова И.Б. Влияние пробиотиков из бацилл на функциональную активность макрофагов // Антибиот. химиотер. 1998. - №2. - С. 20-23.

108. Способ выделения дерматофитов из клинического материала: Пат. 2181144 РФ / Подхомутникова О.В., Воробьева О.Н., Коняхина И.Г. и др. Заявл. 2000131769/13; Опубл. 10.04.2002//БИПМ. - 2002.

109. Степанова Ж.В., Гребенюк В.Н., Воробьева И.А. и др. Диагностические ошибки при зооантропонозной трихофитии // Вестн. дерматол. венерол. -2001.-№6.-С. 36-38.

110. Степанова Ж.В. Современные методы терапии микозов у детей // Успехи медицинской микологии: Мат. первого Всерос. конгресса по медицинской микологии. М.: Национальная академия микологии, 2003. - Т.2. -С. 178-179.

111. Степанова Ж.В., Смольякова JI.JI. Опыт лечения больных микроспорией гладкой кожи с поражением пушковых волос // Вестн. дерматол. венерол. -1990.-№2.-С. 61-62.

112. Сухова Л.П., Щербаков В.М. Случай групповой заболеваемости микроспорией сотрудников городской станции скорой медицинской помощи // Российский журнал кожных и венерических болезней. 1998. - №5. -С. 27-28.

113. Тарануха Н.Н. Комплексное лечение больных зооантропонозной микроспорией волосистой части головы гризеофульвином и гепатопротекторами (клинико-экспериментальное исследование): Автореф. дис. . канд. мед. наук. М., 1990.-24 с.

114. Терегулова Г.А., Фахретдинова Х.С., Левченко Т.С. и др. Редкий случай многоочаговой «семейной» микроспории // Дерматовенерологической службе Республики Башкортостан 80 лет: Сб. науч. тр. Уфа, 2000. -С. 55-56.

115. Терещенко В.Н., Шайковская Е.В., Будаев Д.Д. К вопросу о дерматомико-зах в Забайкалье // Проблемы медицинской микологии. 2004. - Т.6, №2. -С. 122-123.

116. Фазылова А.А., Эткина Э.И. Современная тактика лечения при нарушениях микробиоценоза кишечника у детей раннего возраста: Методические рекомендации. Уфа, 2000. - 30 с.

117. Фаткуллина З.Г., Рокицкая В.Н. Опыт лечения больных микроспорией // Казанский медицинский журнал. 1987. - №2. - С. 136-137.

118. Фахретдинова Х.С. Особенности эпидемологии, клиники и профилактики микроспории, обусловленной Microsporum canis.: Автореф. дис. . канд. мед. наук М., 1986. - 24 с.

119. Фахретдинова Х.С., Медведева Е.А. Особенности распространения и медико-географическая характеристика зооантропонозной микроспории в Республике Башкортостан // Здравоохранение Башкортостана. 1997. - №2. — С. 11-13.

120. Фахретдинова Х.С., Медведева Е.А., Медведев Ю.А. и др. Современные методы лечения зооантропонозных дерматомикозов // Проблемы медицинской микологии. 2004. - Т. 6, №2. - С. 125-126.

121. Фахретдинова Х.С., Терегулова Г.А., Демина Н.В. К вопросу о клинических особенностях зооантропонозной микроспории // Дерматовенерологической службе Республики Башкортостан 80 лет: Сб. науч. тр. Уфа, 2000.-С. 54-55.

122. Федотов В.П., Коряковский В.А., Козленко В.В. и др. Клинико-лаборатор-ная оценка эффективности наружного лечения микроспории 5 % мебетизо-ловой мазью // Вестн. дерматол. венерол. 1990. — №4. - С. 59-62.

123. Фелькер А .Я., Межова Е.А. Стафилококковый анатоксин в комплексном лечении больных инфильтративно-нагноительной трихофитией // Вестн. дерматол. венерол. 1980. - №6. - С. 65-67.

124. Хазиев А.Ф., Михайлова Н.А., Алсынбаев М.М. Изучение свойств высоко-очищенной металлопротеазы, продуцируемой Bacillus subtilis // Журн. микробиол. -2003.-№3.-С. 91-93.

125. Хаитов P.M., Пинегин Б.В., Исматов Ч.И. Экологическая иммунология. — М.: Изд-во ВНИРО, 1995.-219 с.

126. Хамзина О.Ш. Антропонозная трихофития, особенности клиники, течения и терапии в условиях Западного Казахстана: Автореф. дис. . канд. мед. наук. М., 1991.-22 с.

127. Хамзина О.Ш. Ферментативная активность нейтрофилов у больных дерма-то фитиями//Вестн. дерматол. 1996.-№1.-С. 36-37.

128. Харвуд К. Бациллы. Генетика и биотехнология. М., 1992. - 52 с.

129. Хасанова Т.В. Использование Бактиспорина и СПСА вакцины для профилактики и лечения гнойно-септических осложнений в гнойной хирургии: Автореф. дис. . канд. мед. наук. -М., 2003. 24 с.

130. Хейдар С.А. Лечение микроспории у детей // Российский медицинский журнал. 2001. - №4. - С. 37-38.

131. Хисматудлина З.Р. Клинико-иммунологическое своеобразие трихофитии, обусловленной Trichophyton verrucosum, Trichophyton mentagrophytes var. gypseum, Trichophyton quinckeanum: Дис. . канд. мед. наук. Екатеринбург, 1995.-94 с.

132. Хисматуллина З.Р. К вопросу об атипичных формах трихофитии // Здравоохранение Башкортостана. 1995. -№2-3. - С. 75.

133. Хорошилова Н.В. Иммуномодулирующее и лечебное действие пробиоти-ков // Иммунология. 2003. - №6. - С. 352-355.

134. Хорошилова Н.В. Иммунотерапевтические аспекты применения пробиоти-ков в клинической практике // Лечащий врач. 2003. - №2. - С. 71-73.

135. Циммерман Я.С. О сущности понятия «дисбактериоз (дисбиоз) кишечника» и правомерность использования этого термина // Рос. жур. гастроэнте-рол., гепатол., колопроктол. 2000. - №1. - С. 81-84.

136. Чистякова Э.В. Методические указания по лечению инфильтративной трихофитии аминохинолом и гризеофульвином. Уфа, 1977. - 25 с.

137. Чистякова Э.В. Современная эпидемиология зооантропонозной трихофитии: Дис. . докт. мед. наук. -М., 1992. 185 с.

138. Шарп Р., Скавен М., Аткинсон Т. Бациллы: Генетика и биотехнология. -М., 1992.-398 с.

139. Шевелева С.А. Пробиотики, пребиотики и пробиотические продукты. Современное состояние вопроса // Вопросы питания. 1999. - №2. - С. 32-40.

140. Шеклакова Н.Д., Бормотов В.Ю, Зисерман В.Е. и др. Редко наблюдающиеся формы трихофитии // Вестн. дерматол. венерол. 1986. - №9. - С. 65-66.

141. Шекрота А.Г. Лечение детей, больных зооантропонозной микроспорией, иммунокорригирующими средствами (клинико-экспериментальные исследования): Автореф. дис. . канд. мед. наук. М., 1989. - 22 с.

142. Шендеров Б.А. Нормальная микрофлора и ее роль в поддержании здоровья человека // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопрок-тологии.- 1998.-№1.-С. 61-65.

143. Шецирули Л.Т., Апридонидзе К.Г., Вахуташвили В.И. Ультраструктурная цитопатология микотического процесса, обусловленного красным трихо-фитоном, в динамике // Вестн. дерматол. 1975. - № 6. - С. 13-17.

144. Широков А.В., Мелентьев А.И., Актуганов Г.Э. Белковые и пептидные факторы Bacillus sp. 739 ингибиторы роста фитопатогенных грибов // Прикладная биохимия и микробиология. - 2002. - Т.38, № 2. - С. 161-165.

145. Эпштейн-Литвак Р.В., Вилыпанская Ф.Л. Бактериологическая диагностика дисбактериоза кишечника: Методические рекомендации. -М., 1979. 18 с.

146. Юшков П.Д. О трихофитиях животного происхождения // Сов. вестн. вен. и дерматол. 1933. - №8. - С. 595.

147. Яцуха М.В. Трихофития, микроспория и фавус. Особенности эпидемиологии // Вестн. дерматол. венерол. 1992. - №3. - С. 43-46.

148. Aly R. J. // Am. Acad. Derm. 1994. - Vol. 31, №3. - P. 21-25.

149. Arika Т., Hase Т., Yokoo M. Anti-Trichophyton mentagrophytes activity and percutaneous permeation of butenafine in guinea pigs // Antimicrob. Agents Chemother. 1993. - Vol. 37, № 2. - P. 363-365.

150. Calderon R., Hay R. Fungicidal activity of human neutrophyls and monocytes on dermatophyte fungi Trichophyton quinckeanum and Trichophyton rubrum // Immunology. 1987. - Vol. 61, №3. - P. 289-295.

151. Cohen D.E., Foa H., Sangueza O.P. Trichophytosis gladiatorum // J. Am. Acad. Dermatol. 1993. - Vol. 28, №6. - P. 1022.

152. Cox A., Moore J.A. Experimental Trichophyton mentagrophytes infection in laboratory animals // Journal Compartment Pathology. 1968. - Vol. 78, №1. -P. 35-41.

153. Czaika V., Tietz H.J., Schulze P. et al. Dermatomycosis caused by Trichophyton verrucosum in mother and child // Hautarzt. 1998. -Vol. 49, №7. - P. 576-580.

154. D'Souza A.L., Rajkumar C., Cooke J. et al. Probiotics in prevention of antibiotic associated diarrhoea: meta-analysis // BMJ. 2002. - Vol. 324, №7350. -P. 1361.

155. Escalante M.T., Sanchez-Borges M., Capriles-Hulett A. et al. Trichophyton-specific IgE in patients with dermatophytosis is not associated with aeroallergen sensitivity // J. Allergy Clin. Immunol. 2000. - Vol. 105, №3. - P. 547-51.

156. Grappel S.F., Blank F. Role of Keratinases in Dermatiphytosis Immune Responses of Guinea-Pigs infected with Trichophyton mentagrophytes and Guinea-Pigs Immunized with Keratinases // Dermathologia. 1972. - Vol. 145, №4. -P. 233-296.

157. Grappel S.F., Blank F., Bishop C.T. Circulating Antibodies in Dermatophyto-ses // Dermathologia. 1972. - Vol. 144, №1. - P. 1-14.

158. Gregurek-Novak Т., Rabati S., Silobrci V. Defective phagocytosis in chronic trichophytosis // J. Med. Vet. Mycol. 1993. - Vol. 31, №2. - P. 115-120.

159. Grenn F. (Ill), Balish E. Supression of in vitro lymphocyte transformation during an experimental dermatophyte infection // Infections and Immunity. -1979. Vol.26, №2. - P. 554-561.

160. Haab C., Bertschinger H.U., von Rotz A. Epidemiology of trichophytosis in fattening calves in regard to the prevention of leather defects // Schweiz. Arch. Tierheilkd. 1994. - Vol. 136, №6-7. - P. 217-226.

161. Helisto P., Aktuganov G., Galimzianova N. et al. Lytic enzyme complex of an antagonistic Bacillus sp. X-b: isolation and purification of components // Journal of Chromatography В.- 2001.- №758 -С. 197-205.

162. Khardori N. Host-Parasite interaction in fungal infection // Eur. J. Clin, micro-biol. and Infect. Diseases. 1989. - №8. - P. 331-351.

163. King R.D. Nutritional Immunity in cutaneous fungous infection // Int. J. Dermatol. 1986. - Vol. 15, №5. - P. 358-359.

164. Kugler M., Loeffler W., Rapp C. et al. Rhizocticin A, an antifungal phosphono-oligopeptide of bacillus subtilis ATCC 6633: biological properties // Arch. Microbiol. 1990.-Vol. 153, №3,-P. 276-281.

165. Lapper A.W.D. Immunological aspects of Dermatomycoses in animals and men // Review Medical Veterinarian Mycology. 1989. - №6. - P. 435-436.

166. Lee Т.Н., Arai M., Murao S. Some properties of lytic enzyme for red yeasts prepared from Bacillus pumilis // J. Ferment. Technol. 1979. - Vol. 57, №1. -P. 32-38.

167. Lim H.-S, Kim Y.-S., Kim S.-D. // Appl. Environ. Microbiol. 1997. - Vol. 57, №2.-P. 510-516.

168. Loeffler W., Katzer W., Kremer S. et al. Gegen Pilze wirksame antibiotika der Bacillus subtilis Gruppe // Forum Microbiol. 1990. - Vol. 13, №13. -P. 160-163.

169. Lorito M., Harman G., Hayes C. et al. // Phytopathology. 1993. - Vol. 83, №3. - P. 302-307.

170. Meinicke K., Michel G. Croconazole: a new broad spectrum agent in the treatment of fungal skin infections // Int. J. Clin. Pharmacol. Res. 1994. - Vol. 14, №4.-P. 139-148.

171. Murao S., Takahara Y. Enzymes lytic against Pseudomonas aeruginosa produced by Bacillus subtilis YT-25 // Agr. and Biol. Chem. 1974. - Vol. 38, №12. -P. 305-316.

172. Nahmias J., Greenberg Z., Berger S.A. et al. Health profile of Ethiopian immigrants in Israel: an overview // Isr. J. Med. Sci. 1993. - Vol. 29, №6-7. -P. 338-343.

173. Process for producing chitin and chitisan from dermatophyte: WO 9314216, C12P19/26 /NakamuraK., Yamada C. -22.07.1993.

174. Pereiro Miguens M., Pereiro M., Pereiro M. Jr. Review of dermatophytoses in Galicia from 1951 to 1987, and comparison with other areas of Spain // Mycopa-thologia.- 1991.-Vol. 113, №2.-P. 65-78.

175. Pinto V., Marinaccio M., Seratti A. et al. Kerion of the vulva. Report of case and review of the literature // Minerva Gynecol. 1993. - Vol. 45, №10. - P. 501505.

176. Quesada-Chanto A., Utzinger D., Jimenez-Ulate F. Antimicrobial activity of Bacillus UCR-236 and its potential use as biological control // Arg. biol. e tecnol. -1996. Vol. 39, №3. - P. 613-621.

177. Rombouts F.M., Phaff HJ. Lysis of yeast cell walls. Lytic (l-6)-glucanase from bacillus circulans WL-12,2 // Eur. J. Biochem. 1976. - Vol.63, №1. - P. 47-56.

178. Sharga Boris M. Production of suppressive volatile by Bacillus bustilis BS 2924/ Pap. of the International Conference "Diversity of Microbiol Species and Regulation of the Their Activity" // Bot. Lithuan. 1999. - Suppl. 3. - P. 41-46.

179. Simaljakova M., Polak I. Zoonotic dermatomycoses in urban populations // Epidemiol. Mikrobiol. Immunol. 1995. - Vol. 44, №4. - P. 175-176.

180. Simaljakova M., Skutilova E. Mycotic infections in childhood // Bratisl. Lek. Listy. 1995. - Vol. 96, №3. - P. 122-126.

181. Tominaga Y., Tsujisaka Y. Degradation of cell wall of Mucor mucedo by chito-sanase from Bacillus R-4 // Agr. and Biol. Chem. 1979. - Vol. 43, №12. -P. 2607-2609.

182. Towalski Z., Rothman H. Enzyme technology // The Biotechnological Challenge. Cambridge University Press. Cambridge, 1986 - P. 37-76.

183. Tsujisaka Y., Tominaga Y., Iwai M. Purification and some properties of the lytic enzyme from Bacillus R-4 which acts on Rhizopus cell wall // Agr. and Biol. Chem. 1975. - Vol. 39, №1. - P. 145-152.

184. Vollekova A., Danilla T. An epidemic of Trichophyton tonsurans trichophytosis in wrestlers (1994-1996) // Epidemiol. Microbiol. Immunol. 1999. - Vol. 48, №1. - P. 16-20.

185. Vollekova A., Kolibasova K., Baronakova A. An unusual 'black-dot' trichophytosis corporis in a man // Bratisl. Lek. Listy. 1997. - Vol. 98, №1. - P. 43-45.

186. Watanabe Т., Oyanagi W., Suzuki К., Tanaka H. Chitinase system of Bacillus circulans WL-12 and importance of chitinase Al in chitin degradation // J. Bacterid. 1990. - Vol. 172, №7. - P. 4017-4022.

187. Weksberg M.D., Fischer B.D. Unusual Tinea corporis caused by Trichophyton verrucosum // Int. J. Dermat. 1986. - Vol. 29, №10. - P. 653-655.fJ

Информация о работе

Мухамадеева, Ольга Ринатовна
кандидата медицинских наук
Уфа, 2005
ВАК 03.00.07

Диссертация

Антимикотическая активность препарата-пробиотика "Бактиспорин" in vitro и его использование в комплексном лечении зооантропонозной трихофитии - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы