Бесплатный автореферат и диссертация по сельскому хозяйству на тему

Антагонистическая активность пробиотического препарата "Бацинил" в отношении патогенных и условно-патогенных микроорганизмов и его профилактическая и лечебная эффективность при эндометритах у коров

ВАК РФ 06.02.02, Кормление сельскохозяйственных животных и технология кормов

Автореферат диссертации по теме "Антагонистическая активность пробиотического препарата "Бацинил" в отношении патогенных и условно-патогенных микроорганизмов и его профилактическая и лечебная эффективность при эндометритах у коров"

4849264

На правах рукописи

МЯСНИКОВА Натальи Григорьевна

АНТАГОНИСТИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ ПРОБИОТИЧЕСКОГО ПРЕПАРАТА «БАЦИНИЛ» В ОТНОШЕНИИ ПАТОГЕННЫХ И УСЛОВНО-ПАТОГЕННЫХ МИКРООРГАНИЗМОВ И ЕГО ПРОФИ-ЛАКТИКТИЧЕСКАЯ И ЛЕЧЕБНАЯ ЭФФЕКТИВНОСТЬ ПРИ ЭНДОМЕТРИТАХ У КОРОВ

06.02.02 — ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискаиие ученой степени кандидата ветеринарных наук

Воронеж - 2011

9 ИЮИ 2011

4849264

Работа выполнена на кафедре биотехнологии и ветеринарной медицины ФГОУ ВПО «Смоленская государственная сельскохозяйственная академия»

Научный руководитель:

доктор ветеринарных наук, доцент Красочко Ирина Александровна

Официальные онионентм: доктор ветеринарных наук

Бригадиров Юрий Николаевич

доктор ветеринарных наук Шумский Николай Иванович

Ведущая организация:

ФГОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии им. К. И. Скрябина»

Защита состоится "28" июня 2011 г. а 13-00 часов на заседании диссертационного совета ДМ 006.004.02 при ГНУ «Всероссийский научно-исследовательский ветеринарный институт патологии, фармакологии и терапии» РЛСХН (394087, г. Воронеж, ул. Ломоносова, 114-6)

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГПУ Всероссийский научно-исследовательский ветеринарный институт патологии, фармакологии и терапии РАСХН

Автореферат разослан ' мая 2011 г.

Ученый секретарь диссертационного совета

Близнецова Г.Н.

1.ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. На сельскохозяйственных предприятиях Российской Федерации послеродовые эндометриты наблюдается в среднем у 14,8 % коров, Белоруссии - у 6,6-16,0 %, Канаде - у 11,2 %, Голландии - у 13 % животных от общего числа отелившихся (Валюшкип К.Д., 2001). Одной из основных причин возникновения послеродовых эндометритов является активация условно-патогенной и патогенной микрофлоры на фоне угнетения иммунной системы, нарушений обменных процессов (О.Г.Новиков, 2003; В.С.Бегунов, 2009; О.П.Ивашкевич, 2009 и др.). Ухудшение условий содержания, недостаточное или неполноценное кормление коров и нетелей по витаминам, микро- и макроэлементам (особенно но йоду и селену) в стойловый период увеличивает частоту этого заболевания. Предрасполагающими факторами возникновения послеродовых эндометритов бактериальной этиологии являются различные технологические и экологические факторы - температурный стресс, нарушения в кормлении и содержании, повышенная бактериальная обсемененность помещений и т.д. (B.C. Авдеенко с соавт., 1996; К.Д.Валюшкип, 2001; О.П.Ивашкевич, 2009 и др.).

В последние годы в связи с более глубоким изучением гомсостаза животных знания об этиологии и патогенезе заболевания расширились. Однако многие вопросы остаются мало исследованными или спорными. В настоящее время при большом спектре лекарственных средств и их высокой стоимости особое внимание необходимо обращать на оценку различных способов терапии и профилактики, использовать лишь те препараты и приемы, эффективность которых является бесспорной и подтверждается статистической обработкой результатов исследований. Это необходимо и для совершенствования методов лечения и профилактики заболевания.

В связи с этим во многих странах изыскиваются такие способы лечения послеродовых эндометритов, которые бы в меньшей степени сопровождались осложнениями и в меньшей мере сказывались отрицательно на последующей воспроизводительной функции животных. При разработке новых способов лечения ведется и разработка новых лекарственных препаратов.

В настоящее время одним из основных методов лечения послеродовых эндометритов является использование химиотерапевтических препаратов (В.С.Бегунов, 2009; Г.Ф. Медведев и др. 1998; О.П.Ивашкевич, 2009; О.Г. Новиков, 2002 и др.). Однако их использование часто приводит к ухудшению качества животноводческой продукции - в молоке и мясе до 28 дней находятся остаточные количества применяемых препаратов, что ведет к ограничению использования продукции. В практике ветеринарной службы имеется опыт применения пробиотиков для профилактики и терапии послеродовых эндометритов (И.Я.Шматко, 2001 и др.). Но их применение в настоящее ог-

раничено. Это обусловлено тем, что для решения этой проблемы в настоящее время пробиотиков не выпускается. Их использование не ухудшает качеств продукции и не вызывает осложнений.

В этой связи разработка способов применения пробиотических препаратов для лечения послеродовых эндометритов является актуальной.

Цель и задачи исследования. Целью настоящих исследований явилась разработка пробиотического препарата «Бацинил» для профилактики и терапии послеродовых эндометритов у коров.

Для достижения цели были поставлены следующие задачи:

1. Изучить ситуацию по послеродовым эндометритам в хозяйствах Смоленской области и установить роль возбудителей инфекционных заболеваний в их этиологии.

2. Изучить состояние иммунитета и обменных процессов у коров, больных послеродовыми эндометритами.

3. Изучить чувствительность микрофлоры, выделенной от коров, больных послеродовыми эндометритами к бесклеточному пробиотическому препарату «Бацинил».

4. Изучить влияние бесклеточного пробиотического препарата «Бацинил» на обменные процессы и иммунитет животных при профилактике и терапии послеродовых эндометритов.

5. Изучить терапевтическую, профилактическую и экономическую эффективность бесклеточного пробиотического препарата «Бацинил» при профилактике и терапии послеродовых эндометритов.

6. Подготовить методические рекомендации и временную инструкцию по применению бесклеточного пробиотического препарата «Бацинил» при профилактике и терапии послеродовых эндометритов.

Научная новизна. Изучена эпизоотическая ситуация, определена этиологическая структура послеродовых эндометритов у коров в Смоленской области, состояние иммунитета и обменных процессов у больных послеродовыми эндомегритами коров в хозяйствах Смоленской области.

Научно обоснована возможность применения бесклеточного пробиотического препарата «Бацинил» для профилактики и терапии послеродовых эндометритов бактериальной этиологии у коров.

Установлена высокая профилактическая, терапевтическая и экономическая эффективность применения бесклеточного пробиотического препарата «Бацинил» при послеродовых эндометритах у коров.

Практическая значимость полученных результатов. Результаты экспериментальных исследований дополняют современные знания в области патогенеза и лечения послеродовых эндометритов коров, что позволяет повысить эффективность борьбы с ними. Разработанный способ терапии и про-

филактики послеродовых эндометритов позволяет значительно сократить длительность заболевания и повысить продуктивность коров.

Применение указанной разработки в условиях производств позволяет в 2-2,5 раза сократить длительность течения послеродовых эндометритов у коров и на 25-35% увеличить продуктивность животных.

На основании проведенных исследований разработаны и утверждены:

- временная инструкция по применению бесклеточного пробиотическо-го препарата «Бацинил» (утверждено Главным управлением ветеринарии Смоленской области 29 сентября 2010 г.);

- инструкция по применению препарата «Бацинил» в ветеринарии (Рассмотрена и одобрена на заседании Ветбиофармсовета Минсельхозпрода Республики Беларусь, протокол № 54 от 15 июля 2010 г.);

- методические указания по применению пробиотическнх препаратов в животноводстве и ветеринарной медицине (утверждено Главным управлением ветеринарии Смоленской области 18 октября 2010 г.);

- методические указания по применению пробиотическнх препаратов на основе метаболитов бацилл для сельскохозяйственных животных и птиц (Утверждены ГУВ МСХП РБ 23.07.2010 г. № 10-1-5/86).

Способ терапии и профилактики послеродовых эндометритов с использованием иробиотиков конкурентоспособен в сравнении с аналогами. Окупаемость ветеринарных мероприятий при его использовании для терапии послеродовых эндометритов составляет в среднем 25,7 рубля на I рубль затрат.

Апробация результатов диссертации. Основные положения диссертации доложены и одобрены на: Международной научной конференции «Проблемы и перспективы развития аграрного производства» (Смоленск, 2007); Volumul 18 include materialele Simpozionului jtiintific intemational "Agricultura modernü-realizüri $i perspective" dedicat aniversárii a 75 ani ai Universitajii Agrare de Stat din Moldova (Кишинев, 2008); международной научно-практической конференции, посвященной 35-летию ФГОУ ВПО Смоленская ГСХА «Научное обеспечение аграрного производства в современных условиях» (Смоленск, 2010).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 7 научных работ, в том числе 1 статья в издании, рекомендованном ВАК РФ.

Структура а объем диссертации. Диссертация изложена на 125 страницах текста в компьютерном исполнении, включает: введение, обзор литературы, материалы и методы, изложение собственных исследований, анализ и обобщение результатов исследований, выводы и практические предложения. Список использованной литературы включает 185 наименований работ отечественных и зарубежных авторов. Материалы диссертации иллюстрированы 24 таблицами и 28 рисунками. В приложении приводятся документы,

подтверждающис-научную и практическую значимость диссертационной работы.

Основные положении диссертации, выносимые на защиту:

- распространение послеродовых эндометритов у коров в хозяйствах Смоленской области и роль возбудителей инфекционных заболеваний в их этиологии;

- состояние иммунитета и обменных процессов у коров при послеродовых эндометритах;

- разработка и апробация способа профилактики и терапии послеродовых эндометритов бактериальной этиологии с использованием пробиотиче-ского препарата на основе метаболитов бацилл «Бацинил»;

- профилактическая, терапевтическая и экономическая эффективность использования пробиотического препарата на основе метаболитов бацилл «Бацинил» при послеродовых эндометритах.

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Экспериментальная часть работы выполнена па кафедре биотехнологии и ветеринарной медицины ФГОУ В ПО «Смоленская государственная сельскохозяйственная академия» по заданию 08.04.01. «Разработать методы ранней диагностики, эффективные средства и способы профилактики и лечения массовых незаразных и вызываемых условно-патогенными микроорганизмами заболеваний у молодняка высопродуктивных животных» (№ гос. Регистрации 15070 3666026906.06.8.001.2).

Исследования проведены в шесть этапов.

На первом этапе была изучена эпизоотическая ситуация и определена этиологическая структура возбудителей послеродовых эндометритов в животноводческих хозяйствах Смоленской области.

На втором этапе было проведено исследование состояния иммунитета и обменных процессов у коров при послеродовых эндометритах.

На третьем этапе исследования были направлены на проверку антагонистической активности пробиотического препарата на основе продуктов метаболизма бацилл в отношении патогенной и условно-патогенной микрофлоры, выделенной от коров, больных послеродовыми эндометритами.

На четвертом этапе были отработаны оптимальные схемы применения пробиотического препарата на основе продуктов метаболизма бацилл для профилактики и терапии коров, больных послеродовыми эндометритами. Критерием оценки эффективности препарата служили такие показатели, как исчезновение клинических эндометритов, улучшение клинического состояния животных, повышение молочной продуктивности, оплодотворяемость коров.

На пятом этапе были изучены гематологические, биохимические и иммунологические показатели кропи телят при использовании пробиотического препарата на основе продуктов метаболизма бацилл при терапии больных послеродовыми эндометритами корон.

На шестом этапе была изучена лечебная, профилактическая и экономическая эффективность пробиотического препарата на основе продуктов метаболизма бацилл для терапии больных послеродовыми эндометритами коров.

В ходе экспериментов использованы серологические, вирусологические, бактериологические, иммунологические, гематологические, биохимические, клинико-эпизоотологические и статистические методы.

Для оценки степени распространения послеродовых эндометритов коров проведен анализ материалов ветеринарной отчетности Главного управления ветеринарии Смоленской области за 2000 - 2009 годы согласно методическим указаниям по эпизоотологическому исследованию И.А. Бакулова (1987).

Серологическими методами (РИГА) исследовались сыворотки крови коров с различным клиническим состоянием репродуктивных органов.

Бактериологическую экспертизу патологического материала, полученного от больных эндометритами коров проводили по общепринятым методикам.

Оценку антагонистической активности проводили методом диффузии в мясо-пептонный агар в отношении выделенных при эндометритах коров микроорганизмов (Staph, epidermidis, Proteus vulgaris, E.coli, Staph, pyogenes, Staph, aureus, Ps. aeruginosa). Продукты метаболизма бацилл получали после культивирования их на мясо-пептонном бульоне в течение 4-х дней, после чего бактериальные клетки удаляли центрифугированием и стерилизующей фильтрацией.

На поверхность застывшего 4%-го агара наносили культуру тест-культур микроорганизмов в концентрации 500,0 - 1000,0 млн. микробных клеток, помещенных в 1,4-1,6% (мягкий) мясо-пептонный агар. После застывания агара и нем готовили лунки диаметром 9 мм и вносили продукты метаболизма.

Для оценки антагонистической активности метаболитов бацилл измеряли диаметр зоны задержки роста тест-культур.

Для оценки состояния общей неспецифической резистентности организма животных определяли бактерицидную активность сыворотки крови по О.В. Смирновой и Т.А. Кузьминой (1968); концентрацию лизоцима в сыворотках крови - по В.Г. Дорофейчуку (1972) и содержание общего белка в сыворотке крови - с помощью биуретового метода.

Разделение белков на фракции проводили методом электрофореза в агарозном геле с использованием аналитического оборудования и наборов производства фирмы «Sebia» (Франция).

Г ематологические исследования проводили на гематологическом анализаторе «Medonic СЛ 620» (Швеция) с использованием реактивов производства фирмы «Cormey» (Польша), биохимические исследования крови - на биохимическом анализаторе «Фотофермент-1» (Россия) с использованием наборов производства фирмы «Cormey» (Польша).

Биометрическую обработку полученного цифрового материала проводили с помощью персонального компьютера и программы Microsoft Excel. В качестве доверительного интервала был выбран уровень вероятности Р<0,95 (уровень значимости >0,05).

Экономическую эффективность применения разработанного препарата рассчитывали согласно «Методике определения экономический эффективности ветеринарных мероприятий» (Москва, 1982 г.).

3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1. Причины возникновения и патогенез послеродовых эндометритов коров

3.1.1. Изучение ситуации но заболеваниям органов размножения у коров в хозяйствах Смоленской области

Анализ ветеринарной отчетности Главного управления ветеринарии администрации Смоленской области за 2000-2009 гг. свидетельствует о значительном неблагополучии крупного рогатого скота по заболеваниям органон размножения. В таблице 1 и на рис. 1 представлены данные о заболеваемости коров эндометритами.

Установлено, что в период с 2000 по 2009 гг., несмотря на снижение количества коров в области, заболеваемость их эндометритами остается стабильно высокой. Приведенные данные свидетельствуют о необходимости разработки высокоэффективных средств и методов профилактики и терапии данного заболевания.

3.1.2. Изучение этиологии эндометритов у коров в Смоленской области

Наиболее часто послеродовой эндометрит у коров возникает после аборта (82,4%), при задержании последа (80,7%), и после патологических родов (75,4%). Указанные патологии ведут к нарушению целостности слизистой оболочки матки и к последующему инфицированию условно-патогенной и патогенной микрофлорой. При проведении бактериологического исследования содержимого матки 147 больных эндометритом коров в 95100% случаев выделяется микрофлора. В таблице 2 представлены частота выделения и состав микрофлоры при послеродовых эндометритах.

Таблица 1

Заболеваемость крупного рогатого скота эндометритами

в хозяйствах Смоленской области в 2000-2009 годы

Годы Поголовье крупного рогатого скота Из них коров Получено телят (гол.) Выход телят (%) Заболеваемость

Всего заболело коров (тыс.гол.) %

2000 220,1 101,8 72,4 67 15,9 15,6

2001 205,6 95,1 72,5 72 16,3 17,1

2002 196,5 89,1 66,2 72 15,9 17,8

2003 180,2 81,0 59,7 70 15,0 18,5

2004 155,3 72,6 58,5 74 13,4 18,4

2005 140,6 68,7 54,9 77 12,7 18,4

2006 132,9 65,0 53,1 78 10,8 16.6

2007 125,2 60,6 48,6 77 10,5 17,3

2008 110,9 53,8 43,1 76 9,5 17,6

2009 104,1 52,8 42,1 78 9,0 17,0

19

2000 2001 2002 2003 2004 2005 2006 2007 2008 2009

Рис. 1. Заболеваемость коров эндометритами (% от общего количества коров)

Таблица 2

Частота выделения и состав микрофлоры от коров, больных послеро-__ довыми эндометритами__

Вид микроорганизма % выделения Ассоциации % выделения

Staph, epidermidis 12 Proteus vulgaris 8

Proteus vulgaris 12 Staph, epidermidis. Strep, pyogenes, E.coli 12

E.coli 16 Staph, aureus, Str. faecalis, Mucor, Aspergillus flavus, Pénicillium, Staph, epidermidis, Proteus vulgaris 16

Strep, pyogenes 8 Proteus vulgaris, Mucor, Ps. aeruginosa, Aspergillus flavus 12

Staph, aureus 12 E.coli, Mucor Aspergillus flaus 4

Ps. aeruginosa 4 Proteus vulgaris, Mucor, Strap, pyogenes, Aspergillus flavus 4

Aspergilla flaus 8 Staph, aureus, Mucor, Str. pyogenes, Ps. aeruginosa 8

Mucor 20 Staph, epidermidis, Str. faecalis, Mucor, E.coli, Staph. Aureus, Penicillium 20

Penicillium 4 Str. faecalis, Mucor, E.coli 4

При эндометритах наиболее часто выделяются: E.coli (16%), Staph. epidermidis (12%), Proteus vulgaris (12%), Staph. aureus (12%), Str. pyogenes (8%), Ps. aeruginosa (4%), a также Mucor (20%), Aspergillus flavus (8%), Pénicillium (8%).

Кроме таких факторов, как задержание последа, патологические роды, аборт, в возникновении послеродовых эндометритов большую роль играют нарушения зоогигиенических и санитарных нормативов. Так, в хозяйствах, где имелись нарушения зоогигиенических норм кормления (недостаток в рационе белка, сахара, микро- и макроэлементов, витаминов), санитарного состояния животноводческих помещений, отсутствие моциона, отмечали 3-4-кратное увеличение животных с послеродовыми эндометритами. При этом у животных регистрировали угнетение клеточного и гуморального звеньев иммунитета, что являлось одним из важных условий возникновения послеродовых эндометритов. Па этом фоне происходит активация патогенной и услов-

но-патогенной микрофлоры, которая существенно осложняет течение послеродовых эндометритов.

Таким образом, в возникновении и развитии эндометритов у коров на фоне задержания последа, нарушения сократительной функции матки, инволюции матки, патологических родов, абортов, нарушений технологии содержания коров существенную роль играют возбудители бактериальных инфекций - эшерихии, стафилококки, протеи, псевдомоны и грибы родов аспер-гиллус, мукор, пенициллус.

3.2. Разработка способа профилактики и терапии послеродовых эндометритов у коров с помощью бесклеточного пробиотического препарата «Бацшшл»

3.2.1.Изучение антагонистической активности препарата «Бацинил» в отношении микроорганизмов, выделенных от коров, больных послеродовыми эндометритами

Для разработки способа профилактики и терапии послеродовых эндометритов у коров в качестве основы использован бесклеточный пробиотиче-ский препарат «Бацинил». Основой бесклеточного пробиотического препарата «Бацинил» являются продукты метаболизма спорообразующих бактерий -бацилл (Bacillus subtilis) с высокой антагонистической активностью против возбудителей желудочно-кишечных, респираторных и генитальных инфекций сельскохозяйственных животных.

Антибактериальными активнодействующими веществами в пробиоти-ческом препарате «Бацинил» являются пептиды молекулярной массой 220 и 270 нм, что подтверждено УФ-спектроскопией. Антибактериальные вещества высоко устойчивы к действию протеазы. В их состав входят а- и [1-аминокислоты, основные, дигидро- и серу содержащие аминокислоты. Кроме того, в состав препарата входят термостабильные протеазы.

Механизм действия препарата «Бацинил» основан на подавлении роста патогенной и условно-патогенной микрофлоры, а также входящих в состав препарата протеаз, разжижающих омертвевшие ткани и способствующих быстрейшему воздействию антибактериальных веществ препарата на бактерии, осложняющие течение послеродовых эндометритов.

Результаты исследования антагонистической активности разработанного препарата «Бацинил» по отношению к бактериям, выделяемым при послеродовых эндометритах коров, представлены в таблице 3.

Полученные результаты свидетельствуют о том, что беклеточный пробиотический препарат «Бацинил» обладает широким спектром антагонистической активности в отношении бактериальных возбудителей эндометритов коров.

Таблица 3

Антагонистическая активность «Бацинила» в отношении микроорганизмов,

выделенных от больных послеродовыми эндометритами коров.

Серия «Бацинила» Диаметр зоны задержки роста микроорганизмов, (мм)

Staph, epidermidis Proteus vulgaris E.coli Staph, pyogenes Staph, aureus Ps. aeruginosa

№ 1 25 18 16 11 28 17

№2 21 22 15 19 21 22

№3 19 20 20 17 25 28

№4 22 26 22 22 20 11

№5 23 29 18 21 28 19

№6 19 31 19 . 18 30 29

№7 29 25 26 28 32 31

М+гп 21,8 24,4 17,7 19,5 26,3 22,5

3.2.2. Отработка оптимального способа терапии послеродовых эндометритов коров с помощью бссклеточиого пробио-тика «Бацинил»

Для отработки терапии послеродовых эндометритов с использованием бссклеточиого пробиотика «Бацинил» исследования проводили на клинически здоровых коровах СПК "Селезнёвский", СПК «1-ое Мая», СПК «Крутое» Велижского района Смоленской области. В опыт были взяты коровы в начальной стадии эндометритов. При этом отрабатывались оптимальная доза, способ и кратность введения. Для отработки оптимального способа терапии было сформировано 10 групп больных эндометритами коров по 10-15 голов в группе.

Коровам опытной группы № I вводили Бацинил по 15 мл однократно внутриматочно; опытной группы № 2 - по 15 мл однократно внутримышечно; опытной группы № 3 - по 15 мл однократно внутриматочно и внутримышечно; опытной группы № 4 - по 10 мл 1 раз в сугки 5 дней подряд внутриматочно; опытной ¡руппы № 5 - по 15 мл 1 раз в сутки 5 дней подряд внутриматочно; опытной группы № 6 - по 10 мл 1 раз в сутки 5 дней подряд внутримышечно; опытной 1руппы № 7 - по 15 мл, 1 раз в сутки 5 дней подряд внутримышечно; опытной группы № 8 - по 10 мл 1 раз в сутки 5 дней подряд внутриматочно и внутримышечно; опытной |руппы № 9 - по 10 мл 1 раз в сутки 5 дней подряд внутриматочно и внутримышечно; коровам контрольной группы внутриматочно вводили гинекологические палочки с фуразолидоном. Данные, полученные в результате исследований, представлены в таблице 4.

Таблица 4

Терапевтическая эффективность бесклеточного пробиотика «Бацинил» при послеродовых эндометритов у коров

Показатели Опытная группа № 1 Опытная группа № 2 Опытная группа №3 Опытная группа №4 О пыт-ная группа №5 Опытная группа №6 Опытная группа №7 Опытная группа № 8 Опытная группа №9 Контрольная группа

Количество животных в группе, гол 10 10 10 15 15 15 15 15 15 10

Выздоровело животных, голов/% 8/80 6/60 8/80 15/100 15/100 11/73,3 13/86,6 14/93,3 15/100 4/40

Продолжительность лечения, дней 6,00 ±0,30 8,30 +0,37 6,80 ±0,33 5,00 ±0,30 4,80 ±0,20 6,50 ±0,31 6,00 ±0,29 5,50 ±0,27 5,30 ±0,26 15,70 ±0,39

Оплодотворилось после 1 осеменения, голов/% 7/70 5/50 4/70 15/100 15/100 7/46,6 9/60 14/93,3 15/100 4/40

Из представленных в таблице данных видно, что оптимальной терапевтической дозой является 15 мл препарата «Бацинил» при его внутриматоч-ном введении 1 раз в сутки 5 дней подряд. При этом терапевтическая эффективность достигает 100%. Однократное внутриматочное введение препарата менее эффективно (80%). Внутримышечное введение препарата имело низкую эффективность как при однократном (60%), так и при 5-кратном введении (73,3-86,6%). Комбинированное применение «Бацинила» -93,3-100%.

При изучении состояния микрофлоры, выделяемой из половых органов коров после лечения пробиотическим препаратом «Бацинил», установлено, что через 2 дня лечения в содержимом матки в основном содержались эше-рихии, прогеусы, стафилококки и стрептококки в концентрациях 103 - 104 КОН на 1 г содержимого. Через 5 дней после начала лечения количество вышеуказанных бактерий снизилось 100-500 раз, но в содержимом обнаружено наличие бацилл, входящих в «Бацинил», а также лакто- и бифидобактерии. В конце лечения, после исчезновения истечений из матки количество патогенной микрофлоры было минимальным - отмечены единичные колонии эше-рихий, протеусов, стафилококков и стрептококков. Концентрация и лакто-, и бифидобактерий была 101- 10' КОЕ на 1 г содержимого.

Таким образом, отработка методов терапии послеродовых эндометритов показала, что наиболее эффективным является внутриматочное или внут-риматочно-внутримышечное применение бесклеточного пробиотического препарата «Бацинил». Такая схема позволяет на 40-50% повысить эффективность осеменения животных, снизить до 10-15% количество животных с послеродовыми эндометритами. При их возникновении выздоровление составляло 93,3 - 100% больных животных.

3.2.3. Отработка способа профилактики послеродовых эндометритов коров с иомошыо бесклеточного пробиогика «Бацинил»

Для отработки способа профилактики послеродовых эндометритов с использованием бесклеточного пробиотика «Бацинил» исследования проводили на клинически здоровых коровах СПК "Селезнёвский". При этом отрабатывались оптимальная доза и кратность введения. Для этого было сформировано 5 групп по 8-9 коров. Коров опытной группы № 1 обрабатывали препаратом «Бацинил» внутриматочно по 10 мл I раз в сутки 3 дня подряд; опытной группы № 2 - по 10 мл 1 раз в сутки с интервалом в 2 дня 3-кратно, опытной группы № 3 - по 15 мл 1 раз в сутки 3 дня подряд, опытной группы №4-но 15 мл 1 раз в сутки с интервалом в 2 дня 3-кратно. Коровы группы N» 5 - контроль. Результаты исследований представлены в таблице 5.

Приведенные в таблице данные свидетельствуют, что для профилактики послеродовых эндометритов внутриматочное введение бесклеточного

пробиотика «Бацинил» по 10 мл 1 раз в сутки 3 дня подряд, по 15 мл 1 раз в сутки 3 дня подряд и по 15 мл 1 раз в сутки с интервалом в 2 дня 3-кратно имели одинаково высокую эффективность - 87,5 - 88,9%.

Таблица 5

Эффективность бесклеточного пробиотика «Бацинил» при профилак-

тике послеродовых эндометритов у коров

Показатели Группы животных

Опытная группа № 1 Опытная группа №2 Опытная группа Л» 3 Опытная группа №4 Контрольная группа

Кол-во животных в группе, гол 8 9 9 8 8

Заболело, голов/% 1/12,5% 2/22% 1/11,1% 1/12,5% 4/50

Профилактическая эффективность, % 87,5% 77,8% 88,9% 87,5% -

Таким образом, для профилактики послеродовых эндометритов возбудителями бактериальных инфекций с использованием бесклеточного пробиотика на основе бацилл «Бацинил» оптимальная доза - 10 мл при 3-х кратном использовании 1 раз в день 3 дня подряд.

3.2.4. Влияние нробиотического препарат «Бацинил» на гематологические и биохимические показатели у корой при терапии послеродовых эндометритов

При лечении коров пробиотическим препаратом на основе продуктов метаболизма бацилл «Бацинил» отмечено незначительное его влияние на биохимические и гематологические показатели. У коров, внутриматочно обработанных «Бацинилом», отмечается незначительное повышение уровня общего белка к 12 дню наблюдения с 7,9 до 8,01 г/%, после чего - уменьшение к 20-му дню до исходного уровня - 7,9 г/%. Из белков сыворотки крови, отвечающих за иммунную систему, не отмечено существенных изменений в ходе исследований. Обработка больных послеродовыми эндометритами коров «Бацинилом» оказывает влияние на различные показатели обменных процессов. При этом отмечается увеличение концентрации холестерина, глюкозы, креатинина, но уменьшение уровня мочевины, мочевой кислоты. Также установлено, что активность АЛТ у коров, которые лечились «Бацинилом», достоверно снижается по сравнению с больными коровами, не получавшими препарат. Аналогичная ситуация отмечена и в отношении активности ACT. Показатели активности щелочной фосфатазы были практически без изменений на протяжении всего опыта. Полученные данные свидетельствуют о нормализации функции печени под действием нробиотического препарата «Бацинил». Также у больных послеродовыми эндометритами коров, лечен-

ными «Бацинилом», отмечается достоверное уменьшение количества эритроцитов, но, в то же время, увеличение количества лейкоцитов и гемоглобина. Это свидетельствует об активации гемопоэза и переключения его с эри-троиоэза на лейкопоэз. У коров в результате лечения «Бацинилом» отмечается снижение эозинофилов на 3,2 - 3,3%, также уменьшается количество моноцитов, палочкоядерных и сегментноядерных нейтрофилов, что свидетельствует о снижении гнойной воспалительной реакции организма и активности фагоцитоза. По при этом увеличивается количество лимфоцитов, что говорит об активации клеточного иммунитета коров.

Изучение влияния препарата «Бацинил» при профилактике послеродовых эндометритов на обменные процессы и иммунитет показало, что разница показателей в опытной и контрольной группах была незначительна и статистически недостоверна.

3.3. Экономическая эффективность проводимых мероприятий

Производственные испытания пробиотичсского препарата «Бацинил» проводили в СПК «Селезневский» Велижского района Смоленской области.

Таблица б

Производственные испытания пробиотического препарата на основе продуктов метаболизма бацилл в СПК «Селезневский» Велижского района Смолен-

ской области

Показатели Опытная группа Контрольная группы

Количество животных в группе, гол. 50 45

Продолжительность лечения, дни 5,5+0,6 15,2+2,6

Завершение инволюции половых органов, дни 15,3+2,4 25+2,9

Оплодотворилось после 1-ого осеменения:

всего 50 12

процент 99,8% 26,7%

Затраты на лечение, руб/гол. 30,0 81,0

Продуктивность (литров молока в сутки) 16 14

Для изучения экономической эффективности препарата из заболевших корон с учетом принципа условных аналогов были сформированы 2 группы больных эндометритами коров в возрасте до 3 - 7 лет. Коровам опытной группы (п=50) вводили «Бацинил» внутриматочно в дозе 15 мл 1 раз в сутки

в течение 5 дней, контрольной группы (п=45) - антибиотики пролонгированного действия Бицилин-5 внутримышечно 1 раз в 5 дней (3 раза), фуразоли-доновые палочки 1 раз в сутки внутриматочпо в течение 15 дней подряд; ихтиол 7% внутриматочпо 1 раз в сутки с интервалом 3 дня (3 раза). Всех животных перед лечением обрабатывали окситоцином. Результаты испытаний представлены в таблице 6.

Экономический эффект от использования пробиотического препарата «Бацинил» для терапии послеродовых эндометритов у коров составил 771 рублей на 1 животное, а окупаемость ветеринарных мероприятий - 25,7 рубля на 1 рубль затрат.

ВЫВОДЫ

1. Заболеваемость коров послеродовыми эндометритами в сельхозпредприятиях Смоленской области в период с 2000 по 2009 годы была стабильно высокой -15,6% - 17,0%. Наиболее часто послеродовой эндометрит у животных регистрируется после аборта (82,4%), при задержании последа (80,7%) и патологических родах (75,4%), при которых происходит нарушение целостности слизист ой оболочки матки и инфицирование се микроорганизмами.

2. При бактериологическом исследовании содержимого матки больных эндометритом коров вьшеляются E.coli (16%), Staph. epidermidis (12%), Proteus vulgaris (12%), Staph. aureus (12%), Strep. pyogenes (8%), Ps. aeruginosa (4%), а также грибы -Mucor (20%), Aspergillus flavus (8%), Penicillium (8%), участвующие в этиологии и патогенезе послеродовых эндометритов у животных.

3. При серологических исследованиях у коров с послеродовыми эндометритами выявлены антитела в диагностических титрах к вирусу инфекционного ринотрахеита у 96,5% и к возбудителю вирусной диареи (болезни слизистых) - в 98,2% случаях, свидетельствующие о циркуляции указанных вирусных патогенов среди животных и возможном их участии в этиолог ии и патогенезе послеродовой патологии.

4. У больных послеродовыми эндометритами коров отмечено снижение в крови концентрации фосфора на 37,1%, сахара - на 69,7%, мочевины - на 30,1%, холестерина - на 69,9%, ß-липопротеидов - на 71%, общих липидов -на 66,4%, по сравнению со здоровыми животными, что свидетельствует о нарушении липидного, углеводного обменов и функции печени, которые играют существенную роль в процессах воспроизводства животных.

5. Содержание Г-лимфоцитов у больных послеродовыми эндометритами коров было достоверно ниже, по сравнению со здоровыми, в 1-й день после заболевания на 7,0%, на 4-й день - на 6,0%, на 7-й день - на 10%, на 15-й день - на 9%, на 25-й день - на 11,2%, но с недостоверной разницей содержания В-лимфоцитов (0,7-4%).Количество «нулевых» лимфоцитов было дос-

товерно выше у больных животных - самый высокий показатель (26,0±1,4%) наблюдался через 7 дней после родов, что было выше на 41,9%, чем у здоровых коров (р<0,05). Наблюдалась повышенная фагоцитарная активность лейкоцитов у здоровых животных в послеродовый период - на 12,7 - 30,7%, по сравнению с больными животными (р<0,05), но фагоцитарное число было выше у больных животных. На достоверно высоком уровне находилось количество лизоцима и бактерицидная активность сыворотки крови (р<0,05) у здоровых коров во все сроки исследования. Концентрация лизоцима в маточном секрете у больных и здоровых коров на 1-й, 7-й и 15-й дни послеродового периода была на одном уровне, и только на 25-й день после отела количество лизоцима было достоверно выше (р<0,05) у здоровых животных -8,3±1,2 мкмоль/л у здоровых и 5,9±0,4 мкмоль/л у больных животных.

6. Установлена высокая антагонистическая активность нробиотическо-го препарата «Бацинил», приготовленного на основе продуктов метаболизма Bacillus subtilis, в отношении микрофлоры, выделяемой при эндометритах корон - Staph, epidermidis, Proteus vulgaris, E.coli, Staph, aureus, Strep, pyogenes, Ps. aeruginosa.

7. Терапевтическая эффективность послеродовых эндометритов коров с ис-полиованием пробиотического препарата «Бацинил» при внутриматочном его введении в дозе 15 мл I раз в день в течение 5 дней достигает 99,8%, при этом отмечается активизация белкового обмена и нормализация функции печени.

8. Профилактическая эффективность послеродовых эндометритов коров с использованием пробиотического препарата «Бацинил» при внутриматочном его введении в дозе 10 мл 1 раз в день в течение 3 дней составляет 87,5-88,9% и не оказывает отрицательного влияния на гематологические и биохимические показатели организма коров.

9. Экономический эффект от применения коровам при эндометритах бактериальной этиологии пробиотического препарата «Бацинил» составляет 771 рублей на животное, а окупаемость ветеринарных мероприятий - 25,7 рубля на 1 рубль затрат.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Для терапии больных эндометритом коров рекомендуется применять препарат «Бацинил» впутриматочно в дозе 15мл 1раз и день в течение 5 дней.

Для профилактики эндометритов у коров рекомендуется применять препарат «Бацинил» в дозе 10мл при 3-х кратном использовании 1 раз вдень 3 дня подряд.

СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1 *. Камошснков А.Р., Мисннкова Н.Г., Красочко П.А., Красочно И.А. Использование фильтрата культуры В. subtilis для терапии эндометритов коров// Российский ветеринарный журнал. Сельскохозяйственные животные. -

2009.-№4.-С. 9-12.

2. Красочко И.А., Мисннкова Н.Г., Грибко С.М. Этиологическая структура микроорганизмов при заболеваниях органов воспроизводства у коров// Материалы международной научной конференции «Проблемы и перспективы развития аграрного производства» - Смоленск, 2007. - С.468-469,

3. Красочко И., Мисннкова И. Изучение чувствительности микроорганизмов, выделенных при заболеваниях репродуктивных органов бесклеточным пробиотикам на основе бацилл// Volumul 18 include materialcle Simpozionului $tiintific intemajional „Agricultura moderná-reaüzüri perspective" dedicat aniversárii a 75 ani ai Universitütii Agrare de Stat din Moldova Col red.: N. Eremia, B.Püsürin, §t. Turcanu [et al.], Chijináu, 23-25 seplembrie 2008// Chi?inüu, 2008. - P. 155-156.

4. Красочко И.А., Мисникова Н.Г. Показатели иммунитета у коров при эндометритах и заболеваниях репродуктивных органов// Научное обеспечение аграрного производства в современных условиях. Сборник материалов международной научно-практической конференции, посвященной 35-летию ФГОУ ВПО «Смоленская ГСХА». - Смоленск, 2010. - С. 339-344.

5. Камошснков А.Р., Красочко И.А., Мисникова Н.Г., Кашко Л.С. Изучение чувствительности микроорганизмов, выделенных при заболеваниях репродуктивных органов к бесклеточным пробиотикам на основе бацилл// Актуальные проблемы животноводства и пути их решения: сборник материалов международной научно-практической конференции. Под общ. ред. проф. А.Р. Камошенкова, доц. В.М. Новикова. - Смоленск,

2010.-С. 47-49.

6. Методические указания по применению пробиотических препаратов на основе метаболитов бацилл для сельскохозяйственных животных и птиц/ П.А. Красочко, Э.И. Коломиец, Ю.В. Ломако, И.Г. Мисннкова и др. Утв. ГУВ МСХП РБ 23.07.2010 г. № 10-1-5/86 - Горки: Изд. УО «Белорусская государственная сельскохозяйственная академия», 2010. - 34 с,

7. Методические указания по применению пробиогических препаратов в животноводстве и ветеринарной медицине/ П.А.Красочко, А.Р.Камошенков, И.А Красочко, Н.Г. Мисникова и др. Утв. Главным управлением ветеринарии Смоленской области 18 октября 2010 г. - Смоленск, 2010 г. - 52 с.

*- издание из перечня ведущих рецензируемых научных журналов и изданий ВАК РФ.

Подписано в печать 23.05.2011 г. Формат 60x84 1/16 Бумага офсетная № 1. Печать офсетная Объем 1 п. л. Тираж 100 экз. Заказ № 5089.

Отпечатано ОАО «Смоленская городская типография», 214000, г. Смоленск, ул. Маршала Жукова, 16, тел.: 59-99-07, 38-28-65, 38-14-53.

Содержание диссертации, кандидата ветеринарных наук, Мясникова, Наталья Григорьевна

ПЕРЕЧЕНЬ УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ

Актуальность темы диссертации

Глава 1. Обзор литературы

1.1. Распространение и этиология послеродовых эндометритов у коров

1.2. Способы лечения коров с задержанием последа

1.3. Пробиотики в профилактике и терапии заболеваний животных

1.3.1. Роль нормальной микрофлоры в жизнедеятельности организма животного

1.3.2. Условия формирования нормальной микрофлоры

1.3.3. Традиционные и новые взгляды на качественный состав пробиотиков

1.4. Краткая характеристика спорообразующих бактерий

1.5. Аспекты влияния спорообразующих бактерий на макроорганизмы

1.5.1. Физиологические аспекты

1.5.2. Определение эффективности бациллярных пробиотических препаратов на животных

1.5.3. Механизмы пробиотического действия спорообразующих аэробных бактерий

1.6. Анализ данных литературы

Глава 2. Собственные исследования

2.1. Материал и методы исследований

Глава 3. Результаты собственных исследований

3.1. Причины возникновения и патогенез послеродовых эндометритов коров

3.1.1. Изучение ситуации по заболеваниям органов размножения у коров в хозяйствах Смоленской области

3.1.2. Изучение этиологии эндометритов у коров в Смоленской области

3.1.3. Роль вирусов в этиологии эндометритов коров

3.1.3.1. Изучение сероконверсии у клинически здоровых коров к антигенам возбудителей ИРТ и ВД

3.1.3.2. Состояние обменных процессов и иммунитета у коров при послеродовых эндометритах

3.2. Разработка способа профилактики и терапии послеродовых эндометритов у коров с помощью бесклеточного пробиотического препарата « Бацинил»

3.2.1. Изучение антагонистической активности препарата «Бацинил» в 60 отношении микроорганизмов, выделенных от коров, больных послеродовыми эндометритами

3.2.2. Отработка оптимального способа профилактики и терапии послеродовых эндометритов коров с помощью бесклеточного пробиотика «Бацинил»

3.2.3.Отработка способа профилактики послеродовых эндометритов с помощью бесклеточного пробиотика « Бацинил»

3.2.4. Влияние пробиотического препарат Бацинил на гематологические 71 и биохимические показатели у коров при профилактике и терапии послеродовых эндометритов

3.3.Экономическая эффективность проводимых мероприятий

4. Обсуждение результатов собственных исследований

Выводы

Практические предложения

Введение Диссертация по сельскому хозяйству, на тему "Антагонистическая активность пробиотического препарата "Бацинил" в отношении патогенных и условно-патогенных микроорганизмов и его профилактическая и лечебная эффективность при эндометритах у коров"

Актуальность темы диссертации

Послеродовые эндометриты - достаточно распространенная акушерская патология. Она представляет собой осложнение третьей стадии родов. У крупного рогатого скота частота этой патологии в различных странах колеблется от 4 до 16 %, но в отдельные годы достигает 10-25 %. В Великобритании частота патологии не превышает 4 %. Ущерб при заболевании молочной коровы в этой стране оценивается в 286,82 фунтов стерлингов [183].

В сельскохозяйственных предприятиях Российской Федерации послеродовые эндометриты наблюдается в среднем у 14,8 % коров, Белоруссии — у 6,6-16,0 %, Канаде - у 11,2 %, Голландии - у 13 % животных от общего числа отелившихся [78,150].

Эта патология очень часто приводит к понижению продуктивности, воспроизводительной функции и преждевременной выбраковке многих животных. Даже при условии своевременного лечения последствия болезни устраняются не полностью, и животные оплодотворяются позднее, чем после нормальных родов. Интервал от отела до оплодотворения у них продолжительнее в среднем на 17-30 дней, чем у здоровых животных; нередко у переболевших коров отмечается длительное бесплодие [5, 6, 31, 37, 38, 59, 73, 79, 107]. Многие животные утрачивают способность к размножению вследствие необратимых изменений в половых органах и их выбраковывают [36, 97, 181].

Ухудшение условий содержания, недостаточное или неполноценное кормление коров и нетелей по витаминам, микро- и макроэлементам (особенно по йоду и селену) в стойловый период увеличивает частоту этого заболевания [1,2, 16, 33, 72, 91].

При пастбищном содержании послеродовые эндометриты встречаются реже. Однако в жаркое время при отсутствии осадков понижается в пастбищном корме содержание каротина, что приводит к повышению частоты заболевания в это время или после постановки животных на стойловое содержание.

Большое значение в возникновении патологии придают различным экологическим факторам. Температурный стресс вызывает укорочение беременности, а это может быть одним из существенных этиологических факторов задержания последа и в последующем — возникновению послеродовых эндометритов. Сокращение беременности отмечается и при многоплодии, при этом частота задержания последа достигает 37—56 % или более [183].

В последние годы в связи с более глубоким изучением гомеостаза животных до и после отела, знания об этиологии и патогенезе заболевания расширились. Однако многие вопросы остаются мало исследованными или спорными. Достаточно сказать, что даже в отношении важности сокращений матки для отделения последа имеются противоречивые сведения [183]. И главное, что до сих пор мы не знаем, как предотвратить или предвидеть патологию конкретно у того или иного животного.

В настоящее время при большом спектре лекарственных средств и их высокой стоимости особое внимание необходимо обращать на оценку различных способов терапии и профилактики, использовать лишь те препараты и приемы, эффективность которых является бесспорной и подтверждается статистической обработкой результатов исследований. Это необходимо и для совершенствования методов лечения и профилактики заболевания.

В связи с этим во многих странах изыскиваются такие способы лечения послеродовых эндометритов, которые бы в меньшей степени сопровождались осложнениями и в меньшей мере сказывались отрицательно на последующей воспроизводительной функции животных. При разработке способов лечения ведется и разработка новых лекарственных препаратов.

В зарубежной практике наиболее часто используют способы консервативного (медикаментозного) лечения коров с задержанием последа и послеродовыми эндометритами. По сущности их можно выделить два основных момента: 1) использование медикаментозных средств и физиотерапевтических процедур, направленных на повышение тонуса и сократительной функции матки; 2) однократное или регулярное внутриматочное применение антибактериальных препаратов широкого спектра действия с целью предупреждения микробного разложения последа и развития тяжелых воспалительных процессов [25].

В настоящее время одним из основных методов лечения послеродовых эндометритов является использование химиотерапевтических препаратов. Однако их использование часто приводит к ухудшению качества животноводческой продукции - в молоке и мясе до 28 дней находятся остаточные количества применяемых препаратов, что ведет к ограничению использования продукции.

В практике ветеринарной службы имеется опыт применения пробиотиков для профилактики и терапии послеродовых эндометритов, но их применение в настоящее ограничено. Это обусловлено тем, что для решения этой проблемы в настоящее время пробиотиков не выпускается, хотя использование не ухудшает качества продукции и не вызывает осложнений. В этой связи разработка способов применения пробиотических препаратов для лечения послеродовых эндометритов является актуальной.

Цель и задачи исследования.

Целью настоящих исследований явилась разработка пробиотического препарата «Бацинил» для профилактики и терапии послеродовых эндометритов у коров.

Для достижения цели были поставлены следующие задачи:

1. Изучить ситуацию по послеродовым эндометритам в хозяйствах

Смоленской области и установить роль возбудителей инфекционных заболеваний в их этиологии.

2. Изучить состояние иммунитета и обменных процессов у коров, больных послеродовыми эндометритами.

3. Изучить чувствительность микрофлоры, выделенной от коров, больных послеродовыми эндометритами к бесклеточному пробиотическому препарату «Бацинил».

4. Изучить влияние бесклеточного пробиотического препарата «Бацинил» на обменные процессы и иммунитет животных при профилактике и терапии послеродовых эндометритов.

5. Изучить терапевтическую, профилактическую и экономическую эффективность бесклеточного пробиотического препарата «Бацинил» при профилактике и терапии послеродовых эндометритов.

6. Подготовить методические рекомендации и временную инструкцию по применению бесклеточного пробиотического препарата «Бацинил» при профилактике и терапии послеродовых эндометритов

Научная новизна и значимость полученных результатов

Изучена эпизоотическая ситуация, определена этиологическая структура послеродовых эндометритов у коров в Смоленской области, состояние иммунитета и обменных процессов у больных послеродовыми эндометритами коров в хозяйствах Смоленской области.

Научно обоснована возможность применения бесклеточного пробиотического препарата «Бацинил» для профилактики и терапии послеродовых эндометритов бактериальной этиологии у коров.

Установлена высокая профилактическая, терапевтическая и экономическая эффективность применения бесклеточного пробиотического препарата «Бацинил» при послеродовых эндометритах у коров.

Практическая значимость полученных результатов

Результаты экспериментальных исследований дополняют современные знания в области патогенеза и лечения послеродовых эндометритов коров, что позволяет повысить эффективность борьбы с ними. Разработанный способ терапии и профилактики послеродовых эндометритов позволяет значительно сократить длительность заболевания и повысить продуктивность коров.

Применение указанной разработки в условиях производства позволяет в 2-2,5 раза сократить длительность течения послеродовых эндометритов у коров и на 25-35% увеличить продуктивность животных.

На основании проведенных исследований разработаны и утверждены:

Временная инструкция по применению бесклеточного пробиотического препарата «Бацинил» (утверждено Главным управлением ветеринарии Смоленской области 29 сентября 2010 г.).

Инструкция по применению препарата «Бацинил» в ветеринарии (Рассмотрена и одобрена на заседании Ветбиофармсовета Минсельхозпрода Республики Беларусь, протокол № 54 от 15 июля 2010 г.)

Методические указания по применению пробиотических препаратов в животноводстве и ветеринарной медицине (утверждено Главным управлением ветеринарии Смоленской области 18 октября 2010 г.).

Методические указания по применению пробиотических препаратов на основе метаболитов бацилл для сельскохозяйственных животных и птиц (Утверждены ГУВМСХПРБ 23.07.2010 г. № 10-1-5/86)

Способ терапии и профилактики послеродовых эндометритов с использованием пробиотиков конкурентоспособен в сравнении с аналогами. Окупаемость ветеринарных мероприятий при его использовании для терапии послеродовых эндометритов составляет в среднем 25,7 рубля на 1 рубль затрат.

Основные положения диссертации, выносимые на защиту:

1. Распространение послеродовых эндометритов у коров в хозяйствах Смоленской области и роль возбудителей инфекционных заболеваний в их этиологии.

2. Состояние иммунитета и обменных процессов у коров при послеродовых эндометритах

3. Разработка и апробация способа профилактики и терапии послеродовых эндометритов бактериальной этиологии с использованием пробиотического препарата на основе метаболитов бацилл «Бацинил».

4. Профилактическая, терапевтическая и экономическая эффективность использования пробиотического препарата на основе метаболитов бацилл «Бацинил» при послеродовых эндометритах.

Апробация результатов диссертации

Основные положения диссертации доложены и одобрены: на

Международной научной конференции «Проблемы и перспективы развития аграрного производства» (Смоленск, 2007); Volumul 18 include materialele Simpozionului §tiintific international ’’Agricultura modema-realizari §i perspective” dedicat aniversarii a 75 ani ai Universitatii Agrare de Stat din Moldova (Кишинев, 2008); международной научно-практической конференции, посвященной 35-летию ФГОУ ВПО «Смоленская ГСХА «Научное обеспечение аграрного производства в современных условиях» (Смоленск, 2010).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 7 научных работ, в том числе 1 статья в издании, рекомендованном ВАК РФ.

Структура и объем диссертации

Диссертация изложена на 125 страницах машинописного текста и состоит из: введения, обзора литературы, материалов и методов изложения, собственных исследований, анализа и обобщения результатов исследований, выводов и практических предложений. Список использованной литературы включает 185 наименований работ отечественных и зарубежных авторов. Материалы диссертации иллюстрированы 24 таблицами и 28 рисунками. В приложении, приводятся документы, подтверждающие научную и практическую значимость диссертационной работы.

Заключение Диссертация по теме "Кормление сельскохозяйственных животных и технология кормов", Мясникова, Наталья Григорьевна

ВЫВОДЫ

1. Заболеваемость коров послеродовыми эндометритами в сельхозпредприятиях Смоленской области в период с 2000 по 2009 годы была стабильно высокой 15,6% - 17,0%. Наиболее часто послеродовой эндометрит у животных регистрируется после аборта (82,4%), при задержании последа (80,7%) и патологических родов (75,4%) , при которых происходит нарушение целостности слизистой оболочки матки и инфицирование ее микроорганизмами.

2. При бактериологическом исследовании содержимого матки больных эндометритом коров выделяются E.coli (16%), Staph, epidermidis (12%), Proteus vulgaris (12%), Staph, aureus (12%), Strep, pyogenes (8%), Ps. aeruginosa (4%). а также грибы - Mucor (20%), Aspergillus flavus (8%), Penicillium (8%), участвующие в этиологии и патогенезе послеродовых эндометритов у животных.

3. .При серологических исследованиях у коров с послеродовыми эндометритами выявлены антитела в диагностических титрах к, вирусу инфекционного ринотрахеита у

96,5% и возбудителю вирусной диареи — болезни слизистых в

98,2% случаях, свидетельствующие о циркуляции указанных вирусных патогенов среди животных и возможном их участии этиологии и патогенезе послеродовой патологии.

4. У больных послеродовыми эндометритами коров отмечено снижение в крови концентрации фосфора на 37,1%, сахара на

69,7%, мочевины на 30,1%, холестерина на 69,9%, Р-липопротеидов на 71%, общих липидов на 66,4% по сравнению со здоровыми животными, что свидетельствует о нарушении липидного, углеводного обменов и функции печени, которые играют существенную роль в процессах воспроизводства животных.

5. Содержание Т-лимфоцитов у больных послеродовыми эндометритами коров было достоверно ниже по сравнению со здоровыми в 1-й день после заболевания на 7,0%, на 4-й день — 6,0%, на 7-й день на 10%,на 15-й день — 9%, на 25 -й день - на 11,2%, но с недостоверной разницей содержания В-лимфоцитов (0,7-4%), а количество «нулевых» лимфоцитов было достоверно выше у больных животных - самый высокий показатель (26,0±1,4%) наблюдался через 7 дней после родов, что было выше на 41,9%, чем у здоровых коров (Р<0,05); повышенная фагоцитарная активность лейкоцитов у здоровых животных в послеродовой период по сравнению с больными животными' (Р<0,05) была на 12,7 — 30,7%, но фагоцитарное число было> выше у больных животных; на достоверно высоком уровне находилось количество лизоцима и бактерицидная активность сыворотки крови (Р<0,05) у здоровых коров во все сроки исследования. Концентрация лизоцима в маточном секрете у больных и здоровых коров на 1-й, 7-й и 15-й дни послеродового периода была на одном уровне, и только на 25-й день после отела количество лизоцима было достоверно выше (Р<0,05) у здоровых животных - 8,3±1,2 мкмоль/л и у больных 5,9±0,4 мкмоль/л .

6. Установлена высокая антагонистическая активность пробиотического препарата «Бацинил», приготовленного на основе продуктов метаболизма Bacillus subtilis в отношении микрофлоры, выделяемой при эндометритах коров Staph, epidermidis, Proteus vulgaris, E.coli, Staph, aureus, Strep, pyogenes, Ps. aeruginosa.

7. Терапевтическая эффективность послеродовых эндометритов коров с использованием пробиотического препарата «Бацинил» при внутриматочном его введении в дозе 15 мл 1 раз в день в течение 5 дней достигает 99,8%, при этом отмечается активизация белкового обмена и нормализация функции печени.

8. Профилактическая эффективность послеродовых эндометритов коров с использованием пробиотического препарата «Бацинил» при внутриматочном его введении в дозе 10 мл 1 раз в день в течение 3 дней составляет- 87,5-88,9% и не оказывает отрицательного влияния на гематологические и биохимические показатели организма коров.

9. Экономический эффект от применения коровам при эндометритах бактериальной этиологии пробиотического препарата «Бацинил» составляет 771 рублей на животное, а окупаемость ветеринарных мероприятий - 25,7 рубля на 1 рубль затрат.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Для терапии больных эндометритом коров рекомендуется применять препарат «Бацинил» внутриматочно в дозе 15мл 1раз в день в течение 5 дней.

Для профилактики эндометритов у коров рекомендуется применять препарат «Бацинил» в дозе 10мл при 3-х кратном использовании 1 раз в день 3 дня подряд.

Библиография Диссертация по сельскому хозяйству, кандидата ветеринарных наук, Мясникова, Наталья Григорьевна, Смоленск

1. Акушерство, гинекология и искусственное осеменениесельскохозяйственных животных / Н.Н. Михайлов и др.; под ред. Н.Н. Михайлова.-М.: Агропромиздат, 1990.-527 с. 19

2. Акушерство, гинекология и искусственное осеменениесельскохозяйственных животных / Н.Н. Михайлов и др.; под ред.

3. Н.Н. Михайлова-М.: Агропромиздат, 1990.-527 с. 100

4. Андреев, Е.В. Средства и способы пассивной иммунизациителят в хозяйствах по производству говядины //Проблемыветеринарной иммунологии / Е.В.Андреев —Агропромиздат, М.: 1985.— С. 135-138. 206 .

5. Асонов, Н.Р. Микробиология / Н.Р. Асонов- М.: Агропромиздат, 1989.-349 с. 65

6. Баженова, Н.Б. Лечение коров при остром эндометрите / Н.Б.

7. Баженова, В.У. Давыдов, Г.С. Степанов // Ветеринария-1989 № 2С. 42-43. 5 '

8. Безбородкин, В.В. Бактериальная загрязненность половых путей укоров в послеродовой период / В.В. Безбородкин, Э.Л. Горев //

9. Сельское хозяйство Таджикистана 1978-№ 4.-С. 37-39. 50

10. Белкин, Б.Л: Характеристика условно патогенной микрофлорыродовых путей у здоровых и больных коров / Б.Л. Белкин, М.А. Батманов, Х.А. Юсупов // Совершенствование мер борьбы с болезнями сельскохозяйственных животных в Таджикистане-1988 С. 24—33. 68

11. Богач, П.Г. Алгоритмические и автоматные модели деятельности гладких мышц / П.Г. Богач, JI.B. Решедько. — Киев: Навукова думка, 1979.-348 с. 97

12. Бондаренко, В.М. Молекулярно-генетические исследования лактофлоры человека и животных / В.М. Бондаренко // Ветеринарная патология. 2005. — № 3. - С. 41 - 49. 108

13. Болезни крупного рогатого скота и свиней / П.А. Красочко и др.; под ред. П.А. КрасочкоМинск: Технопринт, 2003— 464 с. 6

14. Валюшкин, К.Д. Акушерство, гинекология и биотехника размножения животных: учебник / К.Д. Валюшкин, Г.Ф. Медведев Мн.: Ураджай, 2001.-869 с. 20, 76

15. Ветеринарное акушерство и гинекология / Г.А. Кононов и др.; под ред. Г.А. Кононова — JL: „Колос”, 1977 656 с. 21

16. Ветеринарное акушерство и гинекология / B.C. Шипилов и др.; под ред. B.C. Шипилова. — М.: Агропромиздат, 1986.- 480 с. 25, 86

17. Ветеринарные препараты: справочник / Л.П. Маланин и др.; под ред.

18. A.Д.Третьякова-М.: Агропромиздат. 1988.-319 с. 87

19. Ветеринарное акушерство, гинекология и биотехника размножения /

20. B.Я. Никитин и др.; под ред. В.Я. Никитина и М.Г. Миролюбова М.: Колос, 1999.-495 с. 95

21. Волосков, П.А. Основы борьбы с бесплодием крупного рогатого скота /П.А. Волосков-М.: Сельхозиздат, 1960.-208 с. 35, 63, 104

22. Воскресенский, С.Л. Роль сократительной деятельности матки в родовом процессе: автореф.дис. .д-ра мед. наук: 14.00.01/ С.Л. Воскресенский-Минск, 1995.-35 с. 77

23. Гавриш, В.Г. Препараты для лечения коров, больных эндометритом /

24. В.Г. Гавриш // Ветеринария.-l986.-№1- С.50. 42, 69

25. Гавриченко, Н.И. Физиологические особенности двойневой беременности и послеродового периода у коров: автореф.дис. .канд. биол. наук / Н.И. Гавриченко Витебск, 1997. — С. 19. 89

26. Глаз, А.В. Стимуляция функции яичников у коров пролонгированымигормональными препаратами: монография / А.В. Глаз.- Гродно: Издательский отдел ГГМУ, 2000 С. 68. 78 .

27. Горев, Э.Л. Репродуктивная функция у коров после отела и абортов в условиях Таджикистана / Э.Л. Горев // Сельское хозяйство Таджикистана — 1973—№ 2 — С. 27—29. 40

28. Горев, Э.Л. Восстановление репродуктивной функции и аспекты ее регуляции у коров после родов / Э.Л. Горев— Душанбе: „Дониш”, 1981.-339 с. 41

29. Грачева, М., Гаврилов, Эффективность нового бактерийного препарата биоспорина при лечении острых кишечных инфекций // Ж. микробиол.- 1996. № 1. — С. 75 - 77. 177

30. Грига, Н.Н. Индикатор инволюции матки у коров / Н.Н. Грига // Вестник ветеринарии-1977-№ 3.-С. 14—15. 70

31. Грязнева, Т.Н. Изучение антогонизма между лактобактериями, протеем и кишечной палочкой на морских свинках-гнотобиотах / Т.Н. Грязнева.- М., 1989.- 6 с.- Деп. ВНИИТЭМ агропром. 115.11.1989, MBA, №523, ВС-89. 57

32. Грязин В.Н. Этиология респираторных заболеваний телят имеры специфической профилактики в условиях спецхоза //Научно-технический бюллетень Всесоюзной академиисельскохозяйственных наук им. В.И.Ленина, Сибирское отделение.— 1982.— № 11.— С.19-22. 210

33. Гудимова, Т.Е. Болезни гениталий и мастит / Т.Е. Гудимова //

34. Ветеринария 1986.-№ 8. - С. 62. 7 •

35. Дуда, И.В. Нарушение сократительной деятельности матки / И.В. Дуда Мн.: Беларусь, 1989 - С. 95-120. 79

36. Енджей, М.Я. Исследования влияния дефицита микроэлементов на плодовитость коров / М.Я. Енджей // Новости ветеринарной фармации и медицины—1990—Т. 6, № 2 -С. 72. 22

37. Емельянов, М.В. Скрытые эндометриты и воспроизводительная способность у коров / М.В. Емельянов, А.Я. Дзените // Профилактика и лечение болезней молодняка в промышленном животноводстве Рига, 1989.-С. 58-64. 36

38. Зверева, Г.В. Современные проблемы бесплодия крупного рогатого скота /Г.В. Зверева // Вести сельскохозяйственной науки.— М.:

39. Колос, 1982.-№4.-С. 116-125. 15

40. Ивашкевич, О.П. О ранней послеродовой патологии у коров / О.П. Ивашкевич // Ветеринарная наука-производству: сб. науч. тр. / БелНИИЭВ. Мн.: „Ураджай”, 1985.- Вып. 23 - С.189. 8

41. Ивашкевич, О.П. О ранней послеродовой патологии у коров / О.П. Ивашкевич // Ветеринарная наука-производству: сб. науч. тр. / БелНИИЭВ. Мн.: „Ураджай”, 1985.-Вып. 23.- С.189. 37

42. Казеев, Г.В. Ветеринарная акупунктура: научно-практическое руководство / Г.В. Казеев // РИО РГАЗУ М., 2000 — 398 с. 92

43. Кисляк Н.С., Ленская Р.В. Клетки крови у детей в норме и патологии.— М.: Медицина, 1978.— 252 с. 200

44. Ковалев, М.И. Экпериментально-клинические данные о действии ацеклидина и гинофорта на матку коров: автореф. дис. .канд. вет. наук / М.И. Ковалев. Витебск, 1968. -14 с. 102

45. Коваль, М.П. Витамины в рационах коров/М.П. Коваль-Мн.: „Ураджай”, 1977.-64 с. 28

46. Коваль, М.П. Доврачебная помощь животным в личном хозяйстве / М.П. Коваль, Н.И. Баламут. Мн.: „Ураджай”, 1985.-160 с. 30

47. Козловский, Е.В. Ветеринарная микробиология / Е.В. Козловский, П.А. Емельяненко.-М., 1982-С. 53-58. 52

48. Копытин, В.К. Профилактика родовых и послеродовых осложнений укоров / В.К. Копытин, Ю.В. Машаров // Ветеринарные и зооинженерные проблемы животноводства: материалы Международной науч.-практ. конф., г. Витебск, 28-29 ноября 1996-Минск, 1996.-С. 43.98 .

49. Коршунов, В.М., Поташник, вуг, К. Микрофлора кишечника у детей Монголии, России и Швейцарии // Ж. микробиол. 2001. - № 2. - С. 61- 64. 138

50. Коршунов, В.М., Поташник, Л. В., вуг, К. Качественный состав нормальной микрофлоры кишечника у лиц разных возрастных групп // Ж. микробиол. 2001. - № 2. - С. 57 - 62. 139

51. Кот, Н.И. Вирусная патология респираторных и генитальных органов крупного рогатого скота: автореф.дисс. кандидата ветеринарных наук /Н.И.Кот Минск, 2002. - 20 с. 212

52. Краткий определитель бактерий Берги. М.: Мир, 1980. - 495 с 125

53. Лабораторные исследования в ветеринарии. Бактериальные инфекции: Справочник: Под. ред. Б.И.Антонова — М. Агропромиздат, 1986. -352 с. 196

54. Логвинов, Д.Д. Ветеринарное акушерство и гинекология: учебник / Д.Д. Логвинов. Киев: „Урожай”, 1964 - 436 с. 94

55. Малик, Н.И., Панин, А.Н. Ветеринарные пробиотические препараты // Ветеринария. 2001. -№ 1. — С. 46-51. 110

56. Мадисон, В. Задержание последа предложений много, загадка остается / В. Мадисон // Молочное и мясное скотоводство—2004 — № 1— С.13-15. 90

57. Мазанкова, Л.Н., Лыкова, Е.А. Пробиотики: характеристикапрепаратов и выбор в педиатрической практике // Дет. инфекции. -2004. № 1. — С. 18 - 23. 123

58. Медведев, Г.Ф. О возникновении эндометритов у коров / Г.Ф. Медведев //Ветеринария 1973- № 4- С.85-87. 10

59. Медведев, Г.Ф. Воспроизводительная функция коров и телок в зависимости от состояния половых органов и метаболического профиля крови: автореф. дис. .доктора ветеринарных наук / Г.Ф. Медведев.-Львов, 1988.-50 с. 11, 75

60. Медицинская картотека. Электронный ресурс. 2007 — 2008. - Режим доступа: http://www.medka.ru.ru. 192

61. Методика определения экономической эффективности ветеринарных мероприятий //Ветеринария, 1984, № 1.— С.73-79.205

62. Михайлов, Н.Н. Меры борьбы с бесплодием и яловостью коров / Н.Н. Михайлов.-Улан-Удэ: Бурятское кн. изд.-во, 1976.-75 с. 93

63. Моцкялюнас, Р.Ч. Профилактика незаразных болезней у коров / Р.Ч. Моцкялюнас-Таллин,1988.—С. 116-118. 59

64. Нежданов, А.Г. Лечение коров при эндометрите и субинволюции матки / А.Г. Нежданов, М.Т. Коняев // Ветеринария—1972 — № 1 — С. 45-46. 43,31,66

65. Нежданов А.Г. Стероидные гормоны в крови и послеродовые болезни у коров// Ветеринария, 1983. №5. - С. 49-51. 32

66. Никитин В.М. Справочник методов иммунологии.— Кишинев: Штинца, 1982.— 304 с. 201

67. Новиков Д.К., Новикова В.Н. Клеточные методы иммунодиагностики.— Минск: Беларусь, 1979.— 224 с. 197

68. Новиков О.Г. Этиология пневмоэнтеритов телят, мастита и эндометритов у коров, разработка средств и методов их профилактики и терапии: Автореф. дисс. доктора веет.наук: 16.00.03 Санкт-Петербург, 2002. - 40 с. 74

69. Нормирование минерального питания высокопродуктивных коров / И.И. Горячев и др.. // Зоотехническая наука Белоруссии. Мн.: Ураджай, 1989. - Т.30.- С. 69-73. 23

70. Опыт по воспроизводству „проблемных” коров / В.М. Шириев идр.. //Ветеринария-1999 -№ 11— С.35-37. 12

71. Осипова, И.Г., Сорокулова, И.Б. Доклинические испытания новых споровых пробиотиков // Вестн. РАМН. 2005. - №12. - С. 36 — 40. 154, 175

72. Осипова, И.Г., Михайлова, Н.А. Споровые пробиотики // Ж. микробиол. 2003. - № 3. - С. 113 — 119. 155, 176

73. Подберезный, В.В., Полянцев, Н.И. Влияние эндобактерина на иммунный статус организма и паренхиматозные органы коров при мастите // С.-х. биол. 1994. - №6. - С. 106 — 111. 169

74. Полянцев, Н.И. Акушерско-гинекологическая диспансеризация на молочных фермах / Н.И. Полянцев, А.Н. Синявин- М.: Росагропромиздат, 1989.—176 с. 83

75. Полянцев, Н.И. Ветеринарное акушерство и биотехника репродукции животных: учебное пособие / Н.И. Полянцев, В.В. Подберезный — Ростов н/Д: Феникс, 2001 480 с. 84, 3

76. Преображенский, О.Н. Оценка некоторых приемов лечения и профилактики при задержании последа у коров / О.Н. Преображенский // Ветеринария-2000 №3.- С. 3 8^40. 13

77. Применение антибиотиков при эндометрите коров / С.А. Аминов и др.. // Ветеринария-1991.-№ 4.-С.44. 31, 44

78. Применение новокаиновых блокад в акушерстве и гинекологии / К.Д. Валюшкин и др..-Мн., 1997 55 с. 30

79. Применение новокаиновых блокад в акушерстве и гинекологии / К.Д. Валюшкин и др..—Мн., 1997 55 с. 99, 30

80. Профилактика гинекологических болезней у коров / Е.И. Клунская и др.. //Ветеринария—1980 -№1.-С.43-46. 58

81. Райд, Л.В. Микрофлора матки при послеродовом метрите коров / Л.В. Райд // Профилактика нарушений обмена веществ и воспроизводительной функции коров.-Таллин, 1985 С. 98-99. 55, 67

82. Резник, С.Р., Вьюницкая, В.А. Серологический ответ макроорганизма на патогенные бактерии под влиянием пробиотика из бацилл // Микробиол. ж. 1993. - Т. 55, №5. - С. 81 - 83. 183, 170

83. Рекомендации по изучению микрофлоры желудочно-кишечного трактаживотных: рекомендации / П.А.Красочко, А. А.Гласкович,

84. Е.А.Капитонова, Ю.В.Ломако. Витебск: УО ВГАВМ, 2008. - 20 с. 105

85. Рокицкий П.Ф. Биологическая статистика. М.: Высшая школа, 1967.— 327 с. 203

86. Родионова, Т.Н. Влияние ДАФС-25 на воспроизводительную функцию коров / Т.Н. Родионова, М.Н. Панфилова // Ветеринария-2004 -№ 3-С.31-33. 103

87. Руководство к практическим занятиям по ветеринарной микробиологии /Смирнова Н.И., Кольцова Т.Г., Тимофеев Ф.Е. и др. Под ред. Н.И.Смирновой.— Минск: Вышэйшая школа, 1977.— 208 с. 198

88. Рубцов, В.И. К вопросу задержания последа у высокопродуктивных коров: автореф. дис. . кандидата ветеринарных наук / В.И. Рубцов — М.- 1963.-14 с. 24

89. Сабась, М. Применение Утеротоника-Польфа при отделении последа у коров в условиях практики / М. Сабась // Новости ветеринарной фармации и медицины.-l 990.-Т. 6, № 2 — С. 53—55. 28

90. Сазонов М. Г. Организация и проведение ветеринарных мероприятий при воспроизводстве стада// Совершенствование ' методов воспроизводства сельскохозяйственных животных. Кишинев, 1979. -С. 64-72.33

91. Семиволос, А.М. Новый способ стимуляции моторики матки у коров при задержании последа / А.М. Семиволос // Ветеринарные и зооинженерные проблемы животноводства: материалы Междунар. науч.-практ. конф., г. Витебск, 28-29 ноября 1996 Минск, 1996-С.66. 91

92. Сегмень, А.Н. Микрофлора матки коров в послеродовый период / А.Н. Сегмень//Ветеринария-1971-№ 9 С. 107-109. 51

93. Середин, В.А. Биотехнология воспроизводства в скотоводстве: учебное пособие / В.А. Середин. Нальчик: КБГСХА, 2003. - 472 с. 82, 39, 96

94. Сиротенко, З.П. Активно бороться с гинекологическими болезнями коров / З.П. Сиротенко, Э.Л. Горев // Сельское хозяйство Таджикистана 1977-№ 4.-С.35-37. 16

95. Смирнова О.В., Кузьмина Т.А. Определение бактерицидной активности сыворотки крови методом фотонефелометрии //Журнал микробиологии.— 1966.— № 6.— С.8-11. 199

96. Смирнов, В.В., Резник, С.Р. Влияние комплексного пробиотикаспоролакта на микробиоценоз кишечника теплокровных // Микробиол.ж. 1995. - Т. 57, № 4. - С. 42 - 49. 128

97. Смирнов, В.В. Антибиотики и/или пробиотики: размышления и факты

98. Мед. картотека. — 1998. — №8. 193

99. Сорокулова, И.Б. Влияние пробиотиков из бацилл на функциональнуюактивность макрофагов // Антибиотики и химиотерапия. 1998. - № 2. -1 С. 20-23. 171

100. Сорокулова, И.Б. Перспективы применения бактерий рода Bacillus для конструирования* новых биопрепаратов // Антибиотики и химиотерапия — 1996. Т. 41, №10. - С. 13 — 15. 172

101. Сорокулова, И.Б. Сравнительное изучение биологических свойствбиоспорина и других коммерческих препаратов на основе бацилл //

102. Микробиол. ж. 1997. - Т. 59, № 6. - С. 43 - 49. 173

103. Сорокулова, И.Б. Влияние пробиотиков из бацилл на функциональнуюактивность макрофагов // Антибиотики и химиотерапия. 1998. - № 2. 1. С. 20-23. 184

104. Сорокулова, И.Б. Перспективы применения бактерий рода Bacillus дляконструирования новых биопрепаратов // Антибиотики ихимиотерапия — 1996. Т. 41, №10. - С. 13 - 15. 185

105. Сорокулова, И.Б. Перспективы применения бактерий рода ВасШш дляконструирования новых биопрепаратов // Антибиотики- ихимиотерапия — 1996. Т. 41, №10. - С. 13 - 15. 1951107. Способ медикаментозного лечения задержания последа у коров / Г.Ф.

106. Агропромиздат, 1991.— 528 с.208

107. Тараканов, Б.В. Использование пробиотиков в животноводстве. -Калуга: ВНИИ ФБ и П с/х животных, 1998. С. 5 - 6. 117 ^ 111. Терешенков, А.С. Профилактика и лечение акушерскоi гинекологических заболеваний коров / А.С. Терешенков- Мн.: