Бесплатный автореферат и диссертация по сельскому хозяйству на тему

Активность, выживаемость спермиев и оплодотворенность яиц в зависимости от технологических приемов криоконсервации спермы петухов

ВАК РФ 06.02.01, Разведение, селекция, генетика и воспроизводство сельскохозяйственных животных

Автореферат диссертации по теме "Активность, выживаемость спермиев и оплодотворенность яиц в зависимости от технологических приемов криоконсервации спермы петухов"

ГБ он

^^все)>оссийский научно-исследовательский

И ТЕХНОЛОГИЧЕСКИЙ ИНСТИТУТ ПТИЦЕВОДСТВА

На правах рукописи

У

ИВАНОВ АЛЕКСАНДР ВАСИЛЬЕВИЧ гЛу'"/

(//

АКТИВНОСТЬ, ВЫЖИВАЕМОСТЬ СПЕРМИЕВ И ОПЛОДОТВОРЕННОСТЬ ЯИЦ В ЗАВИСИМОСТИ ОТ ТЕХНОЛОГИЧЕСКИХ ПРИЕМОВ КРИОКОНСЕРВАЦИИ СПЕРМЫ ПЕТУХОВ

Специальность 06.02.01 — разведение, селекция, генетика и воспроизводство сельскохозяйственных животных

Автореферат

диссертации иа соискание ученой степени кандидата сельскохозяйственных наук

Сергиев Посад 1996

Диссертационная работа выполнена во Всероссийском научно-исследовательском и технологическом институте птицеводства.

Научный руководитель — доктор сельскохозяйственных наук, профессор А. Д. Давтян.

Официальные оппоненты: доктор биологических наук,

профессор В. И. Бесулин; кандидат сельскохозяйственных наук И. И. Попов.

Ведущая организация — Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К. И. Скрябина.

Защита диссертации состоится <-с^Р » ¿3$ 1996 г. часов на заседании диссертационного совета (шифр Д 020.91.01) Всероссийского научно-исследовательского и технологического института птицеводства.

Адрес института: 141300, г. Сергиев Посад Московской области, ул. Птицсградская, 10, ВНИТИП.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ВНИТИП.

Автореферат разослан « 3О » ______1996 г.

Ученый секретарь диссертационного совета, кандидат сельскохозяйственных наук

Т. Н. Ленкова

Актуальность темы. Развитие промышленного птицеводства тесно связано с решением задач по дальнейшему совершенствованию пород птиц, улучшение!* использования плененных ресурсов. Технология криоконсервации спермы птиц, в сочетании с научно оСоснованнши приемами искусственного осеменения, способствует их выполнен™.

В настоящее время выделены следующие области применения замороженной спермы: для сохранения генофонда редких пород и инбредных линий, а также резервного генофонда промышленных кроссов и микролиний; .для сохранения генофонда элитных самцов, с цельп использования в селекционных программах; при разработке селекционных программ, вклшанцих анализирующие и обратные скрещивания; оцепа потомства или интенсивные повторные осеменения с определенными самцами в течение трех-четкрех лет в селекции для создания обменного генофонда.

Успешному осеменению птицы замороженно-оттаянной спермой способствует надежная технология криоконсервирования, тесно связана с биологическими особенностями птиц.

Исследования, проведенные различными авторами, свидетельствуют о нестабильности получаемь"'- результатов и низкой сохранности спермиев после оттаивания.

Поэтому определение оптимальных условий криоконсервации, позволяющих сохранять биологическую полноценно гь спермиев после замораживания-оттаивания является актуальной проблемой.

Цель и задачи исследований. Основной гталы> работы является совериенствование технологии криоконсервации спермы петухов и искусственного осеменения кур криоконсервированной спермой.

Задачи исследований:

I. 1Ь’Лщть влияние различных способов обработки криопротектора N-Ы - диметилаиетамида (ДМА) на спермии петухов.

2. Изучить влияние концентрации водородные ионов (pH) |фио-протектора ДМА на биологическую полноценность спермиев петухов.

3. Определить оптимальные размеры гранул замороженной спермы и эффективность послойного оттаивания на спермии петухов.

4. Определить оптимальный срок хранения оттаянной спермы.

5. Определить оптимальные дозы и интервалы осеменения кур заморскенно-оттаянной спермой. ■

Неу-.ная новизна работы, выявлено, что предварительная обработка криопротектора ДМА методом перегонки с добавлением бензола или этилового спирта при криоконсерваши спермы петухов обеспечивает наилучшую активность, выживаемость и оплодотворяющую способность сперкиев петухов.

Впервые изучено влияние качественных показателей криопротектора ДЫА на биологическую полноценность слермиев петухов после криокон сервации.

. па основании ксллекса исследований установлены оптимальнее размеры гранул замороженной спермы, влияние.послойного оттаивания .замороженной спермы ка полноценность спермиев петухов, определены оптимальные сроки хранения оттаянной спермы, установлены оптимальные дозы и интервалы осеменения кур замороженно-оттаянной спермой при данной технологии ::риоконсервации.

Новизна полученных результатов подтверждена полученнш положительным решением о выдаче патента от 28.11.94 г. (заявка № 94011604).

Практическая значимость работы. Разработанный режим криоконсервации позволяет значительно увеличить жизнеспособность спермиев петухов, что способствует получению высокой оплодотворяющей способности (до 86,6 5С), позволяет накапливать и длительно хранить сперму петухов-улучшателей, создавать банк

спермы, а также использовать в программах сохранения генофонда кур и в целом для повышения эффективности селекционно-племенной работы.

По материалам работы разработаны методические рекомендации по криоконсервации спбгмы петухов, которые вошли в "Методические рекомендации по искусственному осеменению сельскохозяйственной птицы" (одобрены ученым Советом ВНИТШ 6.03.96 г., протокол № 2).

Апробация работы. Материалы диссертационной работы доложены на ХХУ и ХХУ1 конференциях молодых ученых и аспирантов ВНИТИП (1993, 1994 гг).

Публикация результатов исследований. Основные положения диссертации олуб. иковакы в 4 работах.

Структура и объем работы. Диссертационная работа включает сяедуюп’ие разделы: введение, обзор литературы, материал, методика «• условия проведения исследований, результаты исследований и их обсуждение, производственная проверка, выводы, предложения производству, список литературы и приложения.

Материалы диссертации изложены на НО страницах машинописного текста, содержат 22 тас.шцы, 8 рисунков. Список литературы вклгчает 161 источник, в тон числе 76 иностранных.

Материал, методика и условия проведек.я исследований

В соответствии с поставленными задачами в 1990-1995 гг. было проведено пять опытов и производственная проверка в экспериментальном хозяйстве ВНИТИП и ПШЗ "Смена’’ Московской обл. по схеме, приведенной в табл. I.

В опытах использовали петухов и кур линии П-4 кросса П-46, отобранных в 22-недельном возрасте по принципу аналогов по живой массе и экстерьеру. Сперму от петухов получали методом массажа, при режиме их использования 3 раза в нелелю.

Схема опытов

.ЛІ

Изучаемые факторы

} Кол-во Юсемекено Шспользова-? Число Шроинкубировано

! опытных \ кур, !но петухов^образцов !яиц в каждой

! групп I гол. ! гол. 1 спермы I группе, шт.

1. Способы обработки криопротектора КЧГ-Дикзтилацетаиила (ДМА) . • * ’ - 5 125 25 191 150-200

2. Концентрация водородных ионов (pH) криопротектора ДЦА 4 80 25 232 150-200

3. Размеры гранул эамороженк й спермы и их послойное оттаивание 3 60 25 198 100-150

4. Сроки хранения спермы после оттаивания ; 5 100 25 .96 100-150'

5. Оптимальные дозы спермы и янтер-• валы осеменения кур заыорохенно-оттаянной спермой 4 . ео 25 82 400-450

Для замораживания использовали смешанную сперму, которую разбавляли непосредственно после взятия в соотношении 1:1 (начальное разбавление).

Сперму охлаждали при температуре 2-4 °С в течение 30 мин., после чего к содержимому флаконов добавляли криопротектор ДМА.

Замораживание спермы проводили в виде гранул методом прямого внесения а жидкий азот.

Оттаивали сперму в водяной бане при температуро 50 °С.

Осеменение кур проводили во второй половине дня с 15 до 17 часов.

Устойчивость сйермы к процессам замораживания и оттаивания определяли по активности, выживаемости и оплодотворяющей способности. .

Активность спермиев определяли по 10-балльной шкале. Выживаемость спермиев оценивали в процессе хранения спермы при температуре 2-4_5с до полного прекращения подвижности и выражали 9 абсолютных едининаэс. •

. Оплодотворяющую способность спермы определяли по результатам осеменения кур и инкубации яиц, сомнительные по сплодотво-ренности яйцд вскрывали.

Результаты исследований обработаны биометрически по методикам, изложенным в руководствах Плсхиксксго У А. (1969) и Меркурьевой Е.А. (1970).

. Результаты исследований

I. Влияние различных способов обработки криопротектора ДМА на полноценность спермиев петухов после оттаивания.

Перг'г использованием криопротектор Д'£А был обработан следующими способами: фосфорным ангидридом с последующей перегонкой

Ш груша), гидрохсидом калия с последующей перегонкой (Ш группа), азеотропной перегонкой с добавлением бензола (ІУ грудпа), азео-тропноЯ перегонкой с добавлением этилового спирта (У группа). Первая группа служила контролем, где использовали необработанный }Щ.

Качественные показатели криопротектора при различных вариантах его обработки Гфедставлены в табл. 2.

Таблица 2

Качественные показатели криопротектора ДОА при различных способах его обработки

Показатели 1 Варианты обработки криопротектора

! Кк) I 2 1 3 1 4 1 5

Температура кипения при 7Б0 ш Ну , С 162 165 1РП 163 170

Плотность при 20 °С, г/см 0,9772 0,9560 0,9554 0,9481 0,9392

Коэффициент рефракции 1,4253 1,4348 1,4345 1,4362 1,4368

Время обесцвечивания р-ра КМ л 0^, час 0,3 I 1,5 I 1.5

Концентрация водородных ионов ПО % водного раствора)

6,57 6,68 7,52 7,32 6,95

Как видно из представленной табл. 2, показатели качества ДМА в значительней степзни зависят от способа его обработки. -

Результаты опыта по изучение криоустойчивости сперш при внесении различных вариантов ДКА приведены э табл. 3. :

Анализируя полученные данные, можно отметить,.что активность, выживаемость н оплодотворяющая способность спермиев существенно изменяются в зависимости от способа обработки ДЫА.

Лучшие результаты получены в 4 и 5 группах, где применялась азеотропн&я перегонка }Щ с добавлением бензола и. столового ' спирта. ' , '

Таблица З

Активность; выживаемость спермиев и оплоцотворенность яиц при различных способах обработки ДІЛА

Варианты ¡Активность ’Выживаемость Шроинкубиро- Юплодотво-обработки!спермиев 1 спермиев, Івано яиц, шт. Іренность ДИА 'после оттай-, абс.ед. ! I яиц, Ъ

Кк) 3,76 100,0 210 60,9

2 • 1,20 18,8 - -

3 4,51 179,4 І9& 62,0

4 4,93 237,3 194 68,5

5 4,67 213,4 197 70,0

Активность спермиев в 4 и 5 группах была лучше по сравнению с контролем на 1,17 и 0,91 балла соответственно. Выживаемость спермиев в этих группах превышала контрольную группу на 127,3 и

113,4 абс.ед. соответственно. Оплоцотворенность яиц в 4 группе *ыла в даю контрольной Группы на 7,6 %, в 5 группе-на 9,1 %

(Р> 0,95).

При использовании второго варианта ДМА после криоконсервации наблюдалась низкая активность спермиев (1,20 балла), и они быстро теряли своп подвижность, что о'._.влилось на их выживаемости, в связи с чем в этой группе осеменение не проводили.

2. Влияние концентрации водородных ионов pH) криопротектора длА на полноценность спермиеЕ петухов после оттаивания.

Для определения оптимального значения -Н был проведен опыт, в котором ДМА предварительно обрабатывали до 7,0; 8,0; 9,0; 10,0 pH, после чего вносили криопротектор в разбавленную сперму в 6 % концентрации. После замораживания-оттаивания оценивали сперму по активности, выживаемости и оплодотворяющей способности. Итоговые результаты опыта представлены в табл. 4.

• Таблица 4

Влияние pH ДОА на активность, выживаемость епермиев и оплсцотБоренноеть яиц при использовании завороженно-оттаянной спермы

pH ДМА Г pH !спер-1иы с ¡Активность спермиев (баллов) при ■¡различных сроках хранения спермы. ! (дней) !Еыяи-!Прои-!Спло-!вае- !нкуби!цот-!ыость!рова-!воре-

|ДМА ! 1 ! I I 1 2 ! 1 ! ! 4 ! | 4 1 !СПер- •! НО жность

1 I 1 0 I з 5 !миев, ¡абс. ¡ЯИЦ, ¡шт. !ЯГ

! I I I ! 1 ! еп. I !

7,0 7,х1 4,27 3,18 1,74 0,65 0,10 0 152,4 225 68,0

8,0 7,43 4,59 5,19 1,82 0,72 0,26 0 165,5 194 74,2

9,0 7,67 4,40 2,07 1,75 0,41 0,18 0 146,6 211 70,1

Ю,0(к) 7,62 5,21 ?,63 1,24 0,27 в,Об 0 150,7 179 72,6

Как следует из данных табл. 4,увеличение целочности ДНА с 7,0 до 10,0 pH ведет к увеличений актиьностк спермиев после оттаивания, однако они быстро теряют свою способность к поступательному движению, что отразилось на их выживаемости и оплодотворят- л способности.

Наиболее оптимальной концентрацией водородных ионов Д^А является pH 8,0. При этом значении отмечена наилучшая выживаемость слермиев (165,5 ьбс.ед.) и оплодотворенность яиц 74,2 %.

При испытании различных доз ДНА в зависимости от его pH получены данные, представленные в тайл. 5. •

Полученные результаты дают основание полагать, что количество вводимого криопротектора ДМА в некоторой степени зависит от его pH так, при pH 7,0 лучсая активность сперкиев (5,19 балла), выживаемость (80,4 абс.ец.) и оплсдотворгакая способность (£6,0 %) получена при введении в сперму 12 % ДМА. При pH 8,0 и 9,0 лучшая активность (5,50 и 5,25 балл), выживаемость (95,Я й 127,6 абс.ед.) спермиев и'оплодотворенность яиц (70,5 и'64,8 55) соответственно получена при концентрации криепрот’ектора 8 %.

Таблица 5

Активность, выживаемость сперниев и оплодотворенномь яиц в зависимости от концентрации и pH ДМА

pH

ДМА

! pH

!спермы

| т »

1 №

!группы

!

»

!

Кг пентрация!Актив- 'Вкжива-Шронн- !0плодо-?ность !емость !кубиро-!творен-!спершев!спермк-!вано !ность !после !ев, абс! яиц, 1яиц, %

ДМА,

%

! оттай ва-! !нип,балл!

ед.

шт.

7,19 I 4 2,66 35,3 - -

7,19 2 б 4,05 55,0 103 46,3

7,0 7,15 3 8 . 4,65 53,3 90 53,4

7,10 4 10 4,81 63,3 100 48,0

7,08 5 12 5,19 80,4 107 56,0

7,21 I 4 2,44 68,0 _ _

7,27 2 . б 3,97 91,6 • 96 62,5

8,0 7,30 3 8 5,50 95,3 102 70,5

7,38 4 10 4,84 81,3 III 66,5

7,54 5 12 4,88 61,3 105 68,5

7,53 I 4 2,50 114,7 — _

7,55 2 6 3,90 114,0 90 50,0

9,0 7,62 3 8 5,25 127,5 108 64,8

7,64 4 10 4,70 73,0 93 60,2

7,64 5 12 4,90 59,1 95 50,5

7,6Б I 4 2,01 54,6 _ _

7,73 2 6 4,37 66,3 ПО 66,3

10,0 7,78 3 (к1 8 3,82 63,9 106 64,1

7,83 4 10 3,60 50,8 94 55,3

7,88 5 12 3,83 46,0 90 48,8

При использовании /Щ, имеющего pH 10,0, 6 %-ная концентрация показала лучшие результаты по активности (4,2Г7балла), выживаемости спермиев (66,3 ебс.ед.) и оплодотворекности яиц (66,3 %).

При всех вариантах pH 4 %-ная концентрация ДЫА показана худшие результаты, активность спермиев выла ниже 3 баллов, в связи с чей осеменение не проводили.

В дальнейших исследованиях использовали криопротектор ДМ А, имеющего-pH 8,0, который вносили в сперму » 8,0 % концентрации.

3. Влияние размеров гранул замороженной спермы и их послойного оттаивания на биологическую полноценность спермиев.

При определении оптимального размера гранул замороженной спермы были изучены активность, выживаемость спермиев и сплодот-воренность яиц после криоконсервации. Сперыа была заморожена в виде гранул размером 1-2; 4-5; 7-8 мм. Результаты исследования представлены в табл. 6. .

. Таблица б

Влияние различных размеров замороженные гранул спермы на активность, выживаемость спермиев и опдодотворенность

яиц . . • - . , .

Размеры I Активность!ВыживаемостьЯ1роинхубировано!Сплодотворен-гранул, ! спермиев, ? спермиев, -1 яиц, шт. !ность яиц, т I балл 1 абс.ед. !__________________________■______! %_________

1-2 3,42 66,0 124 58,0

4-5 3,19 133,3 119 69,7

7-8 3,97 178,6 129 70,5

Как видно из представленные данных, увеличение размеров гранул в изучаемые пределах ведет к увеличению активности, выживаемости и оплодотворяющей способности спермиев.

Активность спермиев при использовании гранул спермы размером 7-8 км превышала ахтинноеть, полученную при использовании более мелких гранул (1-2, 4-5 мм) на 0,67 и 0,78 балла соответственно. Выживаемость спермиев тах^же была выше на 112,6 и 45,3 абс.ед.

по сравнению . с 1 и 2 группами. Причем при использовании гранул размером 1-2 мм наблюдалось быстрое снижение подвижности спермиев,, что отразилось на-их выживаемости (66,0 абс.ед.).

Оплодотворенность яиц после осеменения с использованием гранул замороженной спермы диометром 7-8 мм и 4-5 им была екшє по сравнению с использованием мелких гранул (1-2 мі;) на 12,5 и

II,7 % соответственно <Р?0,95). •

Для более точной оценки различных слоев гранул было возможно использовать только крупные гранулы, в связи с чем при послойном оттаивании использовали гранулы диаметром 7-8 ил.

В табл. 7 показано влияние послойного оттаивания заме _.ожен-ных гранул спермы на активность, выживаемость спермиев и оплодог-воренность яиц. .

Таблица' 7

' Влияние послойного оттаивания рямороженнкх гранул спермы на активность, выживаемость спермиев и оплодотворенность яиц

* Слой !Активность!ЕыживаемостьШроинхубиро- I .ллодотворен-

гранул !спермиев, ! спевку.ев, !вано яиц, шт. Іность яиц, %

1 балл. і абс.еп. і_______________ I__________________

Наружный 3,32 60,7 125 66,4

Средний 5, 77 118,2 138 . 70;2

БнуренниЯ 4,60 104,3 143 56,6

Как показали результаты исследования,средний слой гранул обеспечивает л} -плую активность спермиев (5,0 балла), выживаемость (118,2 абс.ед.) и оплодотворенность шц (70,2 %).

■ ' 4. Влияние срока хранения оттаянной спермы на

оплодотворенность. яиц ’

При определении оптимального срока хранения спермы после оттаивания изучали оплодотворенность яиц при -семенении кур с

интервал а:лі 3.4 и 5 дней. Результати исследования представлены в табл. 8.

Таблица 8

Влияние срока хранения оттг :нноЯ спермы на оплодотвсренность яиц

Срок хрсле-'____________Интервал осеменения_____________________________

ния оттаян-! о , , ц

ной еперпь:,!-------------------•-------іЛІЬ--------•-------------------

шк. 1проинуу-!о)1лоцот!пгоинку-!ог оцот-'прошшуИоплоцог-!бировыно!ворен- !бировано!вооен- !бировано!ворен-!яиц, И!т.!носто !яиц, шт.іность^ !яиц, шт.!ность _____________!__________!яиц, Ч ! !яип. % !_________!пиц. <

Без хранения (контроль) 8?. 67.0 109 68,8 ЛЗ 62,8

15-20 79 6Я.0 105 69,5 т30 63,0

20-5.5 85 47,0 ■ 112 44,6 х34 33,8

45-50 76 48,6 97 45.3 121 37,1

60-55 82 41,4 103 29,8 131 38,1

Получэннке результаты свидетельствуют о снижении оплодотворяющей способности спершев при увеличении срока хранения сперма. Это отчетливо прослеживается при З-цш.-Еноа интервале осеменения,, .де контрольная группа показала макг-мально высо.сие результаты.

При 4-дневнсм интервале осеыенег -я полученные данные показали, что хранении оттаянной спермы в течение 15-20 мин не с .сазывает существенного рлияния на оплодотворенность яиц. Хранение с. зрмы свыше 20 шн. значите..ьно «“чикает гтот показатель.

Дачная тенденция сохраняется и при 5-дневном интервале осеменения. ‘

5. Оптимально дозы и интервалы при осеменении кур .. дморожешю-оттальной спермой.

С целью выбора оптимальней дозы осеменения кур криоконсер-е .юваньоП спзрмой проводили опыт, результаты которого представлены в табл. 3."

. Таблица 8'

Число сперлиев в дозе осеменения кур заморсяенно-оттаянной спермой

Показатели *• і Число сперютев в дозе осомопенил U'JiH.)

200 ! 250 ; 300 ! 350

Проинкубировало яиц, шт. 451 447 44? 434

Сплодотворенность яиц, % 70,2 72,5 86,6 . 85,0

Вкэод цыплят» % 61,4 63,7 74,2 73,4

Выводимость яиц, % 67,4 37,9 85,7 06,4

Число сперыкев в дозе осеменения, как свидетельствуют полученный данные, в значительной степени влияет на выход цып; ;т. В целом отмечается тенденция на увеличение вывода цыплят при увеличении дозы вводимой спермы. Наибольший вывод цыплят (74,2 %) получен при использовании 300 млн. спермиев в дозе осеменения, наименьший - при 200 млн. ег.ерниев.

Длительность вьяивания спермиев в половых путях кур сильно варьирует после однократного осеменения и зависит от цлогих фактороз, а часло которых входит и концентрация спермиев в дозэ осеменения.

В табл. 9 представлены данные по оплодотворэнности яиц в точение 10 дней после однократного осеменения оттаянной спермой.

Таблица 9

Сглодотв орен; 1 ость >иц в течение Ю дней после однократного осеменения

Дни | сбора! яиц ! Число спесмиев я позе осеменения илн.

200 ! 250 ! 300 ! 350

I ! 2 1 3 ! 4 ! 5

I 41,6 (36)х 70,9 (31) 81,1 (37) 86,6 (30)

2 65,6 (30) Р6,б (30) 100,0 (33) 100,0 (33)

3 100,0 (39) 78,9 (38) 100,0 (39) 85,0 (40)

4 35,2 (40) 51,3 (37 71,3 (39) . 79,5 (39)

5 36,1 (36) 33,3 (36) 34,3 (35) 65,8 (£3)

Продолжение таблицы 9

І 1 Г\ Л. ! О о 1 4 1 5

е 16,2 (37) 17,9 (39) 22,2 (36) . 67,5 (27)

7 0 (34) 8,6 (35) 14,1 (34) 9.3 (32)

8 0 (40) 0 (39) 8,1 (37) 5,1 (39)

9 0 (26) 0 (36) 0 (35) 0 (31)

10 0 (32) 0 (39) 0 (30) 0 (35)

Примечание: х - в скобках указано число проинкубированных яиц. .

Кмс правило, многими исследователями отмеча* ся, что опло-дотворенность яиц после однократного осеменения с~°жей спермой возрастает со вторых суток, достигает определенного максимума, и затем постепенно снижается. Б нашем опыте также отмечается данная тенденция.

В первой группе (доза 200 млн. спермиев) высокая оплодотво-ренность наблюдалась на второй и третий день. Затем в последующе дни снизилась и на седьмые сутки была равна нулю.

Во второй группе (доза 250 млн.) высокая оп: эдотворенность сохранялась а течение 3 днеП. На четвертый день она резко поща на спад и на восьмой день не было отмечено ни одного опдсдстворенного я^а. • .. ' .

Увеличение дозы до 300 млн. 'третья группа) показало’ высокую оплодотворенность яиц в первые четыре дня, затем резко снизилась, и на девятый день оплодотворенное^ была равна нулю.

Максимальная доза (350 млн.) показала лучшие результаты.

Так, сравнительно : ісокие результаты по оплодотворенности яиц были в течение 5 дней. Отсутствие оплодотворенности яиц отмечали на девятый день.

При определении оптимальных интервалов осеменения хур оттаянной спермой нами были изучены интервалу осеменения I раз в 3, 4, 5 и 6 дней. Полученные данные представлены в табл. 10.

Таблица 10

Влияние интервалов между осеменениями кур оттеянкой спермой на иикубационнте качества яиц

Показатели ! Интессалы осеменений, гни

! о ! 4 ! 5 ! 6

Проинкубировано яиц, шт. 415 431 450 426

Сплэдотворенность яиц, % 73,0 79, ё 72,0 70,8

Вывод цыплят, % 63,1 69,3 61,7 61,6

Выводимость КИП, % 36,5 £6,9 85 ,С Ь.,0

Как видно из представленной табл. 10, максимальная одухотворенность яиц (79,8 %) и,как следствие, вывод цьтаят (69,3 %) были получены при интервалах повтор ¿х осеменений I раз в 4 дня.

Снижение сплодотворенности яиц при одновременном уменьшении интервалов осеменений до 3 дня» объясняется, вероятно, тем, что

■ слишком частые осеменения сопровождают«; более частым етрессиро-Вйнием птицы и большой микробной обсеиеиенныстьв яйцевода, вследствие чего * нем создаются неблагоприятные условия для выживания сперыиев. ,

Снижение оплодотворенности яиц при увеличении кнтзпвалоз . осеменений обусловлено недостаточны« числом биологически аолно-''Пвнкьлс спермиеа,. ::ли недостаточной их оплодотворяющей способностью. . .

... Производственная проверка

. Проверку полученных 'результатов в производственных условиях проводили ьа птице лунки "С^" кросса •'Смена*’. Сперь-у замораживали от 1С г.етухов-улгплсбте::?!» по двум режимам: в качестве базового

варианта использовали ранее разработанный во ВЩГШ способ криоконсервации (без обработки ДМ А, без учета pH и размеров гранул слермы и срока хранения оттаянной спермы). Осеменрние кур в базовом варианте проводили дозой спермы 250 млн. с интервалом I раз в 3 чня. В ноьом варианте использовали ДНА, который предварительно обрабатывали методом перегонки с добавлением стилового спирта, после чего pH был доведен до 8,0, для осе^нения использовали гранулы диаметром 7-8 мм, оттаянную сперму использовали в течение 1520 мин. Осеменение кур в новсм варианте проводили дозой спермы 200 млн. сгерниев с штервапом I раз в 4 дня. . . .

Использование нового ьарианта позволило получись 82,7 % оплодотворенных яиц и 66,1 % выйоц цыплят, что на 7,4 и 5,0 % вшэ, чем в базовом варианте, соответственно.

Таким образом, материалы, предст-вленные в табл. II, сви; i- •

Тельствуют о преимуществе.нового варианта. '

’Пслучен ахономический эффект в сумме 488 тысяч рублей (в не-'

нах 1995 г.). , , а

Таблк ,а II ■

Ррзульта"ч производственно,, проверки

!

Вариант

¿¿икааателм !измер.1 базовый ! новый

Поголовье кур ’ гол. 200 ' 200-.

Проинкуоировано агг шт. 1982 2213 *

Количество оплодотворенных яиц шт. . 1492 1830

Оплодстворекность яиц ' % 75,2 82,7

Выведено 1:..ПЛЯТ . гол. 1252 1507

Вывод цыплят . % 63,1 68,1

Выводимость яиц % 82,9 82,3

выводы

I. При кргэконсерваши спермы петухов выявлена тесная связь между качественными . показателями криспротеяторал'- /V - димгтил— ацетамида (ДУА) и полноценностью спермивв после оттаиванчя.

• 2. Применение предварительно обработанного криопротектора

ДНА методом перегонки с добавлением бензола или этилобого спирта при хриохонсервации спермы петухоь обеспечивает лучшую ее бю~ логическую полноценность. При этом значительно повысилась активность спер имев (на 23,7 % и 19,5 %), выпиваемо сть спермивв (на 27,3 % и

13,4 %), оплодотворенность яиц (на 7,6 % и 9,1 %) соответственно по сравнению с контролем.

3. Использование криопротектора ДНА с pH 8,0, при внесении его в количестве 8 % от объема разбавленной спермы, обеспечивав' лучшую оплодотворенность яиц (на 6,4 % больше, чем в контроле).

4. В гранулах замороженной спермы диаметром 7-3 мм обеспечивается лучшее сохранение активности* ветив&змости спервдеа к оплодствореннссти киц.

5. При послойном оттаивали гранул спермы наиболее высокие показатели активности (5,С7баллов), выживаемости (118,2 обс.еа.) и опяодстворяпцг1 способности (70,2 %\ спердеев наблпдаатся в обр зцах среднего слоя гранул,

.6, Хранение оттаянной спермы более 20 мин. зкапите'ъно снижает показатель оплодотворенности яиц. •

7. Рациональным числом спермиев в дозе осеменения является введение в половые пути кур 500 млн. слермиев йри 4-х дневном интервале осеменения. Оплодотворенность яиц при таком реж! ж осеменений составила 79,8 вывод ш ллят-69,3 %.

ПРЕДЛОЖЕНИЯ ПРОИЗВОДСТВУ

Прь замораживании спермы петухов рекомендуется проводить предварительную обработку криспротетгора ДНА кеюдом перегонки с добавление!.; бензола к гм зтилоэого спирта. Перед использованием ДМА необходимо доводить его pH до 8,0 и вводить его в количестве 8 % от объема разбавленной спермы. При замораживании спермы по данноЧ технологии рекомендуется поддерки.ать размер гранул в пределах 7-8 км. После оттаивания спермы петухов необходимо испо/ -зовать ее в течение 20 мин. При осеменении кур оттаянной спелой рекомендуется вводить в п^левьте пути кур 300 млн. сперыиев с интервалом I раз Ь 4 цчя. ■

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. Давтян А.Д., Иванов Л.В., Упырева С.А., Айтуганова С.В.

Использование крисконсерзированной спермы //Передовой научно-производст^нний опыт в пгицевгтетве. Экспресс-информация ВКИТШ.-1991. - № 6. - С. 28-31. .

2. Иванов A.B. Влияние pH криопр лектора ДМА и способа оттаивания сперкь’ петухос на ее качестзо //Тез.дс'л.Всерое.конф. молодых ученые и аспирантов по птицеводству. - Сергиев Посад,

1ГЭЗ. - С. 35-37. .

3 Иванов A.B. Влияние срока храж шя оттаянной спермы и некоторых качественных показателей криопротехтора ДМА на жизнеспособность спермиев петухов //Передовой научно-производственный опыт в ппг эводстве: Экспресс-информация БШТИП. - 1994. -94,-С, 18-21. . ' '

4. Давтян А.Д., Иванов А.Б, Испытание буферных систем в разбавителе спермы петухов при криокс .сервации /Др. ВНИТИП -I9i^. - Т. 71. - С. 26-29. V ■'