Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Активность протеиназ и их ингибиторов при воспалительных заболеваниях кожи

ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Автореферат диссертации по теме "Активность протеиназ и их ингибиторов при воспалительных заболеваниях кожи"

На правах рукописи

ДЮКОВА ЕЛЕНА ВЛАДИМИРОВНА

АКТИВНОСТЬ ПРОТЕИНАЗ И ИХ ИНГИБИТОРОВ ПРИ ВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЯХ КОЖИ

03.00.04 - биохимия 14.00.16 - патологическая физиология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Новосибирск-2004

Работа выполнена в Сибирском государственном медицинском университете

Научные руководители:

доктор биологических наук, профессор Суханова Галина Алексеевна

доктор медицинских наук, профессор Климов Владимир Васильевич

Офицальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор доктор медицинских наук, профессор

Колпаков Аркадий Ростиславович Цырендоржиев Дондок Дамдинович

Ведущая организация: Омская государственная медицинская академия (г.Омск)

Защита состоится^^О¿р££рсы.с5{ 2004 г. в_часов на заседании

диссертационного совета Д 001.34.01. в НИИ биохимии СО РАМН по адресу: 630117, Новосибирск, ул.Академика Тимакова, 2.

С диссертацией можно ознакомится в научно-медицинской библиотеке НИИ биохимии СО РАМН.

Автореферат разослан /Я

Ученый секретарь диссертационного совета: Русских Г.С.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. К числу фундаментальных достижений биохимии относится понимание протеолиза как особой формы биологического контроля. Протеолитические ферменты участвуют в развитии необратимых реакций, образовании биологически активных веществ, обеспечивают быстрый

ответ клетки на действие раздражителей эндогенной и экзогенной природы (Веремеенко К.Н.,1988; Локшина Л.А.,1994; Bonnefoy A., 2000). В плазме крови в основном представлены сериновые протеиназы, среди которых особое значение имеет калликреин (Adam К., 2000; Яровая Г.А., 2002). В результате действия калликреина (КК), образуется брадикинин, который относится к вазоактивным пептидам, является медиатором воспаления. Брадикинин влияет на тонус гладких мышц кровеносных сосудов, на состояние эндотелия, проницаемость сосудистой стенки, миграцию и хемотаксис лейкоцитов, стимулирует пролиферацию лимфоцитов (Суханова Г.А, 1993; Веремеенко К.Н, 1994; Margulis H.,1998; Яровая Г.А., 2001). Среди внутриклеточных протеиназ большое значение имеют эластаза и коллагеназа, которые разрушают биологические структуры в очаге воспаления, воздействуют на компоненты межклеточного матрикса (Доценко В.Л., 2000; Климова О.А., 2000; Duffi M., 2000). В регуляции протеолиза участвуют специфические белки - ингибиторы протеиназ крови и тканей. Наиболее хорошо изучена роль ссрпротеиназного ингибитора (а1ПИ), ограничивающего активность сериновых протеиназ, и а2-макроглобулина (а2МГ), являющегося ингибитором практически всех протеиназ сыворотки крови (Веремеенко К.Н., 1985; Kaslik С, 1997; Дубровин СМ., 2000; Huntington J., 2000). Менее изучены кислотостабильные ингибиторы (КСИ), которые локализованы в секретах слизистых оболочек органов, биологических жидкостях, в плазматических мембранах клеток (Оглоблина О.Г., 1982; Cuvelier A.,2000; Fries Е.,2000).

Кожа является естественным защитным барьером организма от внешней среды, подвержена действию физических и химических факторов, первой вступает в контакт с патогенными микроорганизмами. В настоящее время наиболее полно изучена морфология кожи, ее микроструктура. Исследованию протеолитических процессов в коже уделяется значительно меньше внимания.

Для исследования биохимических процессов кожи используют биопсийный материал (Varani J.,1998; Курдина М.И., 2002), культуру клеток кожи (Alkemada J.,1994; Константинова Н.В.,1996; Дилакян Э.А., 2002), кожную

тканевую жидкость (Rössing N.,1981; Oikarinen A., 1983). _

Toa НАЦИОНАЛЬНАЯ

БИБЛИОТЕКА СПетср^ 09 5М ,

W41

Повреждение кожных покровов под влиянием физических, химических, инфекционных факторов приводит к воспалению и деструкции кожи, к которым реакции протеолиза имеют непосредственное отношение (Brigeaman К., 1984; Liu Z.,2000). Увеличение активности протеиназ и ингибиторов в коже и сыворотке крови обнаружено при ихтиозах (Chang A., 1990), аллергическом дерматите (Глухенький Б.Т.,1982), пузырчатке (Грандо С.А.,1990; Liu Z.,2000), хронической крапивнице (Гребенникова В А, 1988), роже (Амбалов МА1991), розацеа (Глухенький Б.Т.,1985), микозах кожи (Гребенникова В.А, 1993).

Воспаление в коже складывается из последовательно развивающихся фаз: повреждение клеток и тканей, нарушение микроциркуляции и реологических свойств, с восстановлением. ткани в результате пролиферации. клеток и образованием рубца (Чернух А.М., 1979). Известно, что воспалительная реакция при псориазе развивается с преобладанием пролиферативных процессов (Чернух A.M., 1979; Мордовцев В.Н., 1993), при экземе наиболее выражены экссудативные реакции (Шарапова Г.Я.,1989; Мордовцев В.Н.,1993), ангииты характеризуются как острые деструктивные состояния, связанные с повреждением сосудов кожи (Иванов О.Л., 1998). Исследования системы протеолиза при данных дерматозах позволит оценить роль протеолитических ферментов и ингибиторов в различные стадии воспаления в коже. Цель работы: изучить активность внутриклеточных и внеклеточных протеиназ и их ингибиторов при воспалительных заболеваниях кожи. Задачи исследования:

1.Изучить активность калликреина, калликреиногена, эластазы, коллагеназы, ягпротеиназного ингибитора, я2-макроглобулина и кислотостабильного ингибитора в здоровой коже, кожном экссудате, сыворотке крови здоровых людей и в культуре фибробластов кожи эмбриона человека.

2.Изучить активность внеклеточных и внутриклеточных протеиназ и их ингибиторов при псориазе, экземе и ангиитах кожи.

3. Установить взаимосвязь показателей протеолиза в патогенезе воспалительных заболеваниях кожи.

Научная новизна. Впервые изучены показатели протеолиза кожи и кожного экссудата практически здоровых людей. Установлено, что в коже и кожном экссудате активность протеиназ и их ингибиторов ниже, чем в сыворотке крови, однако изменения процессов протеолиза в кожном экссудате при дерматозах более выражены, чем в сыворотке крови. Получены новые данные о состоянии протеолиза сыворотки крови и кожного экссудата при псориазе, экземе и ангиитах кожи. Установлено, что существенное значение для оценки степени тяжести и. прогноза , воспалительных заболеваний кожи имеет дефицит

а1 -протеиназного ингибитора. Показано, что активность коллагеназы является наиболее информативным показателем глубины поражения кожи, активность эластазы в большей степени связана с обострением воспалительного процесса, а от активности a1- протеиназного ингибитора зависит степень тяжести заболевания.

Теоретическая и практическая значимость. В работе представлены результаты исследования активности протеолитических ферментов и их ингибиторов в коже, кожном экссудате и сыворотке крови практически здоровых лиц. Обнаружена зависимость между показателями протеолиза сыворотки крови и кожного экссудата. Выявлены изменения в системе протеолиза при развитии дерматозов. Полученные результаты позволяют использовать показатели протеолиза для характеристики дерматозов в качестве критериев глубины поражения кожи, обострения воспалительного процесса и степени тяжести заболевания. Сведения о внедрении. Материалы диссертации используются при чтении лекций и проведении практических занятий для студентов медико-биологического факультета Сибирского государственного медицинского университета и внедрены в практику отделения кожных и венерических болезней клиник Сибирского государственного медицинского университета. Основные положения, выносимые на защиту

1. Активность коллагеназы, эластазы и кислотостабильного ингибитора в коже значительно выше, чем в кожном экссудате. В сыворотке крови выявлена более высокая активность калликреина, калликериногена, арпротеиназного ингибитора, а2-макроглобулина по сравнению с кожей и кожным экссудатом. Существует положительная корреляционная связь между протеолическими ферментами сыворотки крови и кожного экссудата здоровых лиц.

2. Развитие воспалительного процесса в коже приводит к дисбалансу систехмы протеолиза, что выражается активацией протеиназ, увеличением протеиназно-ингибиторного индекса, снижением активности ингибиторов протеолиза при тяжелых формах дерматозов. Изменения в кожном экссудате более существенны, чем в сыворотке крови.

3. К индикаторам воспалительной реакции кожи относятся калликреин и эластаза. Коллагеназа является показателям глубины поражения кожи, дефицит а1-протеиназного ингибитора связан со степенью тяжести заболевания. Реализация и апробация работы

Основные результаты представлены на заседаниях кафедры биохимии и молекулярной биологии СГМУ, региональных и российских конференциях: III съезде физиологов Сибири и Дальнего Востока (Новосибирск, 1997); конференции молодых ученых России с международным участием

«Фундаментальные науки и прогресс клинической медицины» (Москва, 1998); рабочем совещании с международным участием «Лизосомы и лизосомальные болезни» (Новосибирск, 2000); II Российской конференции молодых ученых (Москва, 2001); конференции «Физиология организма в нормальном и экстремальном состояниях» (Томск, 2001); IV съезде физиологов Сибири и Дальнего Востока (Новосибирск, 2002); III научно-практической конференции молодых ученых и студентов «Санкт-Петербургский научный форум» (Санкт-Петербург, 2003).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 13 работ. Структура диссертации. Диссертация состоит их введения, четырех глав, выводов и списка цитируемой литературы. Работа изложена на 120 страницах, содержит 16 таблиц и 13 рисунков. Библиография включает 264 литературных источников, из них 159 отечественных и 105 иностранных авторов.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Показатели протеолиза изучали у 123 человек, из них 30 практически здоровых лиц и 93 больных дерматозами: псориаз (без поражения внутренних органов) - 20 человек; экзема - 39 (19 человек - микробная экзема, 20 -истинная экзема), ангииты кожи - 34 человека (острая форма-14 человек, хроническая форма - 20 человек). Среди больных с хронической формой были выделены 11 человек с I степенью тяжестью и 9 человек со II степенью тяжестью заболевания.

Во всех группах определяли активность протеиназ и их ингибиторов в сыворотке крови. Кожный экссудат получали у 15 человек из контрольной группы и у 24 больных экземой. Предполагалось, что показатели сыворотки крови отражают общее состояние организма, а исследование кожного экссудата позволяет оценить состояние протеолиза кожи вблизи очага воспаления. Для получения кожного экссудата применяли метод «кожного окна» (Климов В.В.,1990). Для изучения протеолиза в здоровой коже использованы фрагменты кожи, полученные при аппендектомии и грыжесечении у 12 больных в возрасте 28-45 лет, в анамнезе которых не было кожных болезней. Гомогенат кожи готовили из фрагментов ткани (Чалимова Р.А.,1976). Исследование in vitro проведено на культуре фибробластов кожи эмбриона человека, в которых определяли активность кислотостабильного ингибитора и эластазы.

Для изучения системы протеолиза определяли активность калликреина, калликреиногена по методу Т.С. Пасхиной, А.В. Кринской (1977), активность эластазы по методу О.Г. Оглоблиной, Л.В. Платоновой (1984), коллагеназы по методу Шараева П.Н. (1987), а1-протеиназного ингибитора, а2-макроглобулина

по методу В.Ф. Нартиковой, Т.С. Пасхиной (1979) и кислотостабильного ингибитора по методу Л.А. Беловой (1997) в сыворотке крови, кожном экссудате и кожном экстракте из фрагментов ткани.

Статистический анализ результатов проводился с помощью пакета программ «8ТАТ18Т1КА 5.0.». Проверку на нормальность распределения проводили с использованием критерия Колмогорова-Смирнова. Проверка гипотез о равенстве двух средних производилась с помощью непараметрического критерия Манна-Уитни, использовали методы корреляционного и дисперсионного анализа, с применением показателя Снедекора (Лакин Г.Ф.,1980; Гельман В.Я.,2002).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ОБСУЖДЕНИЕ

Изучение протеолитических процессов кожи имеет большое значение в оценке процессов воспаления, деструкции, регенерации, старения ткани. Однако данные о процессах протеолиза в коже отсутствуют. В связи с этим одна из задач заключалась в исследовании активности протеиназ и их ингибиторов в коже, кожном экссудате по сравнению с сывороткой крови человека.

В результате проведенных исследований обнаружены низкие значения активности протеиназ и их ингибиторов в кожном экссудате по сравнению с сывороткой крови здоровых лиц (табл.1).

Таблица 1

Активность протеиназ и ингибиторов в сыворотке крови и кожном экссудате

практически здоровых лиц

Показатель Сыворотка крови Кожный экссудат

(30) (15)

Калликреин (мЕ/мл) 87,27±4,76 36,36±2,51

р<0,05

Калликреиноген (мЕ/мл) 273,94±11,15 130,91±5,94

р<0,05

Эластаза (нмоль/мин-мл) 92,81±8,48 7,69±0,41

р<0,05

Коллагеназа (мкмоль/ч-л) 0,18±0,01 Не определяется

арпротеиназный 29,12±2,44 1,98±0,18

ингибитор (ИЕ/мл) р<0,05

а2-макроглобулин (ИЕ/мл) 4,00±0,28 0,219±0,020

р<0,05

Кислотостабильный 273,00±8,48 210,39±28,16

ингибитор (мИЕ/мл) р<0,05

Примечание: р- показатель достоверности различий при сравнении со значениями в сыворотке крови

Среди показателей протеолиза в здоровой коже выявлена низкая активность КК, однако активность ККГ, эластазы, коллагеназы, а1-ПИ, (а^МГ и КСИ в коже 1,3 -2,0 раза выше, чем в кожном экссудате (табл.2).

Таблица 2

Активность протеолитических ферментов и их ингибиторов кожи и

Показатель Кожный экссудат Кожа

(15) (12)

Калликреин 5,08±0,32 4,16±0,25

(мЕ/мг белка) р<0,05

Калликреиноген 18,86±0,94 37,13±1,09

(мЕ/мг белка) р<0,05

Эластаза 1,13±0,03 1,84±0,12

(нмоль/мин-мг белка) р<0,05

Коллагеназа Не определяется 0,026±0,00 2

(мкмоль/ч-мг белка)

сц-протеиназный 0,28+0,04 0,45±0,04

ингибитор (ИЕ/мг белка) р<0,05

аг-макроглобулин 0,032+0,001 0,065±0,005

(ИЕ/ мг белка) р<0,05

Кислотостабильный 308,03±23,16 398,12+26,01

ингибитор р<0,05

(мИЕ/мг белка)

Примечание: р- показатель достоверности различий при сравнении со значениями в кожном экссудате

Низкая активность КК и ККГ в кожном экссудате, вероятно, обусловлена тем, что эти ферменты являются белками плазмы, но в результате обменных процессов интерстициальной жидкости с кровью (Rössing N.,1981), попадают в кожный экссудат. В последние годы появились сведения о калликреин-кининовой системы тканей, которая по физиологическим функциям и значению в развитии заболеваний отличается от плазменной (Яровая Г.А.,2001). Физиологические функции тканевого КК многообразны и до конца не выяснены. Известно, что этот фермент участвует в поддержании абсорбции воды и солей в эпителии, утилизации глюкозы, регуляции пролиферативных процессов (Chen V., 2000, Яровая Г.А.,2001), контролирует различные стадии воспаления, развитие шоковых состояний, тромбозов, геморрагий, злокачественных новообразований (Кузнецова Т.П. 1994; Lopes-Cortes F.,1995;Schemraer-Danninger Е.,1999). На основании полученных данных можно предположить, что часть КК и ККГ кожи и кожного экссудата имеет тканевое происхождение. Возможно, КК кожи и кожного экссудата, участвующий в образовании брадикинина, обусловливает высокую реактивность сосудистой сети ткани (Чернух А.М.,1978; Мордовцев В.Н.,1993).

Сравнительный анализ показал, что в здоровой коже выявлена высокая активность коллагеназы по сравнению с кожным экссудатом (табл.2). Исследуемый фермент является интерстициальной коллагеназой (Хасигов П.З., 2003). К этому же типу относятся коллагеназы нейтрофилов, фибробластов (Соловьева Н.И., 1994; Nagase Н.,1999). В сыворотке крови представлена в основном коллагеназа полиморфноядерных нейтрофилов, которая локализована в лизосомах клеток и не накапливается, а синтезируется по мере необходимости, что связано с выраженным разрушительным действием по отношению к компонентам экстрацеллюлярного матрикса (Рывняк В.В.,1996). Высокая коллагенолитическая активность в коже (табл.2) обусловлена участием фермента в метаболизме коллагена, выполняющего опорную, формообразующую функцию и обеспечивающего прочность кожи. Коже необходимо большое количество активной коллагеназы для поддержания баланса вновь синтезируемого коллагена, от которого зависят свойства ткани (Парфенова Е.В.,2000).

Эластаза принимает участие в метаболизме эластина, одного из структурных белков кожи. При старении эластин становится менее устойчивым к действию этой протеиназы, что приводит к нарушению биомеханических свойств кожи (Чернух A.M., 1982). Активность эластазы в коже на 60% выше, чем в кожном экссудате (табл.2). Источником эластазы в кожном экссудате, вероятно, являются нейтрофилы. При получении кожного экссудата развивается асептическое воспаление кожи, при котором происходит миграция нейтрофилов из сосудов и дальнейшая их дегрануляция с высвобождением лизосомальных ферментов (Бенделик Е.К.,1999; Доценко В.Л.,2000). Нейтрофильная эластаза относится к сериновым протеиназам, обладает широкой субстратной специфичностью, способна расщеплять многие биологические субстраты, в том числе эластиновые волокна кожи и сосудистой стенки (Доценко В.Л.,1994; Оглоблина О.Г.,1996). Кроме нейтрофилов, источником эластазы в коже могут быть макрофаги. Макрофагальная эластаза относится к семейству металлопротеиназ, расщепляет эластин сосудистой стенки, что способствует перемещению макрофагов в наружный слой кожи при развитии воспалительных реакций (Nagase H,1999; Vaalomo M, 1999).

Одним из главных механизмов регуляции активности протеолитических ферментов является их взаимодействие с эндогенны белковыми ингибиторами протеиназ, такими как а1-ПИ, а2-МГ и КСИ (Оглоблина О.Г., 1982; Казанская Н.Ф., 1994; Cuvelier А.,2000). aj-ПИ, являясь белком острой фазы воспаления, может поступать в кожу и интерстициальную жидкость при нарушении проницаемости сосудов (Чесноков Н.Б., 1981; Котова Т.С.,1986). Обнаруженная активность а2-МГ в коже и кожном экссудате, возможно,

обеспечивается фибробластами и другими клетками макрофагально-моноцитарного ряда (Condacci I.,1988; Дубровин СМ., 2000).

CCi-ПИ и аг -МГ в коже и кожном экссудате ограничивают активность КК, эластазы, коллагеназы и других протеиназ, контролируют процессы синтеза и расщепления коллагена, эластина, протеогликанов и структурных гликопротеинов (Кочегура Т.Л.,1990; Казанская Н.Ф.,1994). Кроме того, эти ингибиторы, возможно, принимают участие в функционировании кожи как органа иммунной системы. Ингибиторы протеиназ вызывают торможение иммунологических реакций (Прокопенко Л.Г., 1987; Проценко ВЛ., 1988; Сергеев Ю .В .,1990). В коже а2 -МГ может выполнять функцию защитного барьера против протеолитических ферментов патогенных микробов и паразитов (Веремеенко К.Н.,1977).

Активность КСИ в кожном экссудате была на 30% выше, чем в коже (табл.2). КСИ представляют собой кислые гликопротеины, легко преодолевающие гистогематические барьеры, проникающие в ткани и межклеточную жидкость. Кроме того, выделяют группу местносинтезируемых КСИ (Оглоблина О.Г., 1982; Fries E., 2000). Это объясняет сравнительно высокую активность КСИ, обнаруженную в коже и кожном экссудате по сравнению с сывороткой крови.

Для характеристики внутриклеточного протеолиза определяли активность эластазы и КСИ в фибробластах кожи эмбрионов человека. Активность эластазы и КСИ в фибробластах была значительно выше, чем в кожном экссудате и коже (рис. 1). Фибробласты представляют основные метаболически активные клетки дермы, обладают высокой чувствительностью к внешним воздействиям (Константинова Н.В.,1996; Маркушева Л.И.,1998). Известно, что эти клетки могут синтезировать коллагеназу, ингибиторы цистеиновых протеиназ и -МГ (Condacci I.1988; Соловьева Н.И.,1994; Дилакян Э.А.,2000).

120

■ Фибробласты

100

В Кожа

□ Кожный экссудат

*

Рис 1. Соотношение активности эластазы и кислотостабильного ингибитора в фибробластах, коже и кожном экссудате (в % к значениям фибробластов) *-показатель достоверности различий при сравнении с фибробластами

и

Эластаза фибробластов относится к металлопротеиназам. Главная функция металлоэластазы, в отличие от сериновой, заключается в деструкции экстрацеллюлярного матрикса (Уаа1ошо М.,1999), что придает фибробластам важное значение в повреждении кожи. Высокая активность КСИ, действующих в кислой среде, в фибробластах, вероятно, обусловлена их участием в защите кожи от действияпротеиназ экзо-и эндогенного происхождения.

Участие внеклеточных и внутриклеточных протеиназ и ингибиторов в процессах воспаления кожи изучено при псориазе, экземе и ангиитах кожи. В результате проведенных исследований установлено, что при псориазе (рис.2) активность КК и коллагеназы сыворотки крови повышалась в 2,7 и 1,5 раз, по сравнению с контрольной группой, соответственно. Активность эластазы в сыворотке крови при псориазе находилась в пределах нормы. Активация протеиназ сопровождалась угнетением активности и КСИ, активность

а1-ПИ не изменялась. Повышение активности КК и коллагеназы в сыворотке крови при данном дерматозе, вероятно, отражает сосудистые

нарушения и патологические изменения соединительной ткани

(Мордовцев В.Н., 1991; Загретдинова Р.М.,2001).

□ Контроль

□ Калликреин

В Калликреиноген 3 Эластаза ■ Коллагеназа

□ ПИ НМГ а КСИ

Рис.2. Активность протеолитических ферментов и ингибиторов в сыворотке крови больных псориазом (в процентах к контролю)

"-показатель достоверности различий при сравнении со значениями в контрольной группе (р<0,05)

При экземе наблюдалось увеличение всех исследуемых показателей протеолиза в сыворотке крови и кожном экссудате (рис.3). Активность калликреина и эластазы в сыворотке крови повышалась в 2,8 и 2,0 раза, активность калликреиногена снижалась на 47%, соответственно, по сравнению с контрольными значениями. При экземе, в отличие от псориаза, активность

300 -1 250 -200 -

Псориаз

коллагеназы не изменялась. Активность с^ПИ, ОЕгМГ и КСИ повышалась на 60%, 40% и 160%, соответственно. При исследовании кожного экссудата были установлены более существенные изменения, чем в сыворотке крови.

400 -350 -300 -250 -г? 200 -150 -100 -50 -0 -

КК ККГ Эластаза ПИ МГ КСИ

■ Сыворотка В Кожный экссудат

Рис.3. Активность протеиназ в сыворотке крови и кожном экссудате больных экземой (контроль принят за 100%)

*- показатель достоверности различий при сравнении с контрольными значениями (р<0,05)

Активация протеиназ в сыворотке крови и кожном экссудате при экземе связана с воспалением в эпидермисе и усилением экссудативных процессов, преобладающих при этом дерматите (Хазизов И.Е., 1992). Повышение активности свидетельствует о значительном ингибиторном

потенциале, ограничивающем активацию протеиназ. Обращает внимание тот факт, что при экземе в большей степени возрастает активность КСИ, связанная с повреждением кожи.

При ангиитах кожи также наблюдалась активация протеолиза в сыворотке крови больных (рис. 4). Более выраженные изменения кининогенеза в сыворотке крови выявлены при острой форме ангиитов кожи (увеличение КК в 4,7 раза, снижение активности ККГ на 82%), чем при хронической. При острой форме этого дерматита отмечены самые высокие значения активности эластазы и коллагеназы, что поддерживает массивные деструктивные и воспалительные процессы в сосудах и окружающих тканях. Высокая активность

внутриклеточных протеиназ в сыворотке крови при ангиитах кожи может быть причиной аутоиммунных нарушений, с последующей хронизацией процесса и частыми рецидивами.

Калпикреин Калликреиноген Эластаза Коллагеназа

□ Контроль ■ Ангииты кожи,острая форма ЕАнгииты кожи, хроническая форма

Рис.4. Активность протеиназ в сыворотке крови больных ангиитами кожи (в процентах к контролю)

*- показатель достоверности различий при сравнении с контрольными значениями (р<0,05)

При ангиитах кожи выявлено 4 типа реакций ингибиторов на повышение активности протеолитических ферментов. 1 тип характеризуется снижением активности сц-ПИ, а^-МГ и КСИ сыворотке крови больных с хроническими ангиитами кожи II степени тяжести и неблагоприятным прогнозом развития заболевания. 2 тип обнаружен при хронических ангиитах I степени тяжести и является признаком более благоприятного прогноза. В этой группе наблюдалось увеличение активности снижение активности и КСИ. При

острых ангиитах кожи 3 тип обусловлен снижением активности и

увеличением активности КСИ в сыворотке крови. При низкой активности а1 ПИ возрастает риск хронизации заболевания, так как увеличивается угроза чрезмерной деструкции внеклеточного матрикса в зоне воспаления (Маянский Д.Н.,1997). 4 тип, связанный с увеличением активности в сыворотке крови всех исследуемых ингибиторов, так же наблюдался при острой форме ангиитов. Повышение активности ингибиторов при этом типе следует рассматривать как компенсаторную реакцию организма на повышение активности протеиназ.

Известно, что активность протеолитических ферментов и их ингибиторов находится в определенном равновесии, которое может нарушаться при деструктивных и воспалительных процессах. Для оценки степени

сбалансированности протеолитической и антипротеолитической систем были рассчитаны протеиназно-ингибиторные индексы (ПИИ), числено равные отношению активности протеолитических ферментов к ингибиторам (табл. 3).

Таблица 3.

Протеиназно-ингибиторные индексы сыворотки крови при дерматозах

Контроль Псориаз Экзема Ангииты кожи, острая форма

Высокая Низкая

ингибиторная ингибиторная

активность активность

КК/а2МГ 23,39±2,13 86,07±7,56 43,89±5,67 64,60±6,38 197,75±13,74

р<0,05 р<0,05 р<0,05 р<0,05

3,64±0,29 7,91±0,06 5,24±0,02 8,58±0,05 19,29±0,16

КК/а,ПИ р<0,05 р<0,05 р<0,05" р<0,05

КК/КСИ 0,32±0,01 1,09±0,04 0,34±0,01 0,95±0,05 0,95±0,05

р<0,05 р>0,05 р<0,05 р<0,05

Кол/агМГ 0,05±0,004 0,09±0,007 р<0,05 0,03±0,001 р<0,05 0,11±0,003 р<0,05 0,20±0,006 р<0,05

Кол/а | ПИ 6,21 ±0,41 8,21 ±0,39 3,83±0,22 14,44±0,23 32,17±0,31

р<0,05 р<0,05 р<0,05 р<0,05

Кол/КСИ 0,66±0,05 0,82±0,03 0,25±0,01 1,61 ±0,08 1,61±0,08

р<0,05 р<0,05 р<0,05 р<0,05

Э/а2МГ 24,63±0,11 32,61±0,15 33,06±0,15 32,2 7±1,23 63,09±5,07

р<0,05 р<0,05 р<0,05 р<0,05

Э/а,ГШ 3,46±0,33 3,05±0,21 4,41 ± 0,42 4,25±0,35 10,83±1,71

р>0,05 р<0,05 р<0,05 р<0,05

Э/КСИ 0,36±0,03 0,43±0,02 0,25±0,01 0,49±0,03 0,49±0,03

р<0,05 р<0,05 р<0,05 р<0,05

Примечание: р - показатель достоверности различий при сравнении со значениями в контрольной группе

Наиболее высокие значения выявлены при определении отношения активности КК к ингибиторам: КК/агМГ, КК/с^ГЩ и КК/КСИ. Анализ ПИИ свидетельствует о важной роли КК в развитии дерматозов. Дисбаланс в системе протеолиза при ангиитах кожи более выражен, чем при экземе и псориазе.

Дисперсионный анализ, основанный на определении критерия Фишера и показателя Снедекора, позволяет установить достоверность влияния одного или нескольких определенных факторов и степень влияния этих факторов на результативный признак. Мы исследовали степень влияния трех факторов -глубины поражения кожи, обострения и тяжести воспалительного процесса на активность протеиназ и их ингибиторов. В результате дисперсионного анализа (рис.5) установлено, что степень влияния глубины поражения кожи по

Снедекору на коллагеназу была максимальна и составляла 96%, на эластазу -84%, на КК и ККГ-77% и 74%, соответственно. При обострении воспаления в коже имеет значение активность эластазы. Степень влияния данного фактора по Снедекору на активность эластазы составляла 98%, на коллагеназу - 96%. Для КК и ККГ она менее выражена (82% и 84%, соответственно). Определение показателя Снедекора при оценке тяжести воспалительного процесса, свидетельствует о связи этого фактора с

Рис.5. Степень влияния глубины, формы и тяжести воспалительного процесса кожи на показатели протеолиза (в %-показатель Снедекора)

Корреляционный анализ выявил умеренную положительную связь между всеми показателями протеолиза кожного экссудата и сыворотки крови практически здоровых людей, о чем свидетельствуют коэффициенты корреляции, находящиеся в пределах 0,50-0,67. При экземе коэффициенты корреляции значительно выше, чем у здоровых лиц. Самый высокий коэффициент корреляции (0,88) выявлен для активности КК кожного экссудата и сыворотки крови.

Таким образом, протеолитические ферменты и их ингибиторы принимают участие в функционировании нормальной и патологически измененной кожи. Значение внеклеточных и внутриклеточных протеиназ в патогенезе дерматозов обусловлено нарушением проницаемости сосудов и целостности ткани, инициацией воспалительных процессов. При экссудативных процессах,

наблюдаемых при экземе, происходит повышение активности КК эластазы. Усиление пролиферативной компоненты воспалительной реакции при псориазе сопровождается увеличением активности КК и коллагеназы. Изменения со стороны КК, эластазы и коллагеназы приводят к выраженным деструктивным реакциям при ангиитах. Активация КК, наблюдаемая при всех этих процессах, приводит к нарушениям микроциркуляции, которые наиболее выражены при ангиитах кожи. Обязательной частью воспаления является дегрануляция нейтрофилов и переход эластазы и коллагеназы в сыворотку крови и окружающие ткани. Эластаза и колагеназа участвуют в развитии деструктивных процессов, усугубляя течение воспаления. Высокие значения активности этих протеиназ обеспечивают широкий диапозон воспалительных очагов при ангиитах - от покраснения на коже до крупных изъязвлений.

Реакция ингибиторов на активацию протеиназ так же влияет на развитие активного воспаления в коже. Острое воспаление при экземе и ангитах кожи сопровождается увеличением ингибиторной активности. У больных ангиитами кожи острой формы с низким уровнем а1-ПИ возрастает риск хронизации заболевания. При хронических ангиитах кожи, в основном, наблюдается снижение активности ингибиторов, степень которого зависит от тяжести заболевания. При псориазе отсутствует выраженный ответ со стороны ингибиторов, что возможно связано со снижением реактивности организма.

Наличие связи между показателями протеолиза сыворотки крови и кожного экссудата позволяет использовать их для установления роли протеолитических процессов в патогенезе дерматозов и подборе эффективных способов лечения кожных заболеваний. Анализ протеиназно-ингибиторных индексов позволил выделить основную роль калликреина в развитии воспаления при кожной патологии. Дисбаланс системы протеолиза в сыворотке крови усиливается от экземы к псориазу и ангиитам кожи. Индикатором деструктивных процессов по результатам математического анализа является коллагеназа. Эластаза, в отличие от других протеиназ, определяет остроту воспаления, а дефицит - тяжесть заболевания. В перспективе возможна

разработка новых средств с использованием протеиназ и их ингибиторов в лечении дерматозов. Полученные результаты имеют теоретическое и практическое значение для биохимии, патологической физиологии и дерматологии.

ВЫВОДЫ

1. Активность калликреина, калликреиногена, а1-протеиназного ингибитора, а2-макроглобулина в сыворотке крови выше, чем в коже и кожном экссудате практически здоровых людей. В коже и фибробластах кожи эмбриона человека обнаружена высокая активность коллагеназы, эластазы и кислотостабильного ингибитора.

2. При воспалительных заболеваниях кожи происходит активация системы протеолиза. Активность калликреина, эластазы, коллагеназы в сыворотке крови и кожном экссудате при дерматозах увеличивается. Повышение активности протеолитических ферментов в кожном экссудате выражено в большей степени, чем в сыворотке крови.

3. У больных экземой активность а1протеиназного ингибитора, аг-макроглобулина и кислотостабильного ингибитора в сыворотке крови и кожном экссудате возрастает. При псориазе активность а2-макроглобулина и кислотостабильного ингибитора в сыворотке крови снижается.

4. При ангиитах кожи выявлено 4 типа реакций ингибиторов. При хронических ангиитах кожи I степени тяжести в сыворотке крови увеличивается активность а1протеиназного ингибитора, снижается активность а2-макроглобулина и кислотостабильного ингибитора. При II степени тяжести хронических ангиитов кожи в сыворотке крови снижается активность всех ингибиторов. Острая форма заболевания при 3 типе характеризуется снижением активности а1протеиназного ингибитора и а2-макроглобулина на фоне увеличения активности кислотостабильного ингибитора, при 4 типе активность всех ингибиторов увеличивается.

5. Увеличение протеиназно-ингибиторных индексов при дерматозах отражает степень дисбаланса системы протеолиза, который наиболее выражен при ангиитах кожи. Между протеолитическими ферментами и их ингибиторами сыворотки крови и * кожного экссудата существует положительная корреляционная связь. Активность коллагеназы является показателем глубины поражения кожи, активность эластазы - обострения воспаления, а активность протеиназного ингибитора - тяжести воспалительного процесса в коже.

6. Протеиназы и их ингибиторы играют важную роль в патогенезе воспалительных заболеваниях кожи. Увеличение активности калликреина, эластазы и коллагеназы способствует развитию микроциркуляторных и деструктивных процессов при дерматозах. Повышение активности а1-протеиназного ингибитора, макроглобулина и кислотостабильного ингибитора является компенсаторной реакцией на активацию протеиназ при

дерматозах. При низкой активности а1-протеиназного ингибитора возрастает риск хронизации воспалительного процесса в коже.

СПИСОК ПУБЛИКАЦИЙ

1. Суханова Г.А., Акбашева О.Е., Дюкова Е.В., Пехтерева Е.В. Оценка состояния системы протеолиза в диагностике заболеваний // Клиническая лабораторная диагностика - 1997. - №6. - с.21-22.

2. Суханова Г.А., Акбашева О.Е., Дюкова. Е.В. Ингибиторы протеолиза как показатели обратимости патологических реакций// Сб. тезисов III съезда физиологов Сибири и Дальнего Востока.- Новосибирск.-1997.-С.224-225.

3. Акбашева О.Е., Дюкова Е.В. Диагностическое значение исследований протеиназ и их ингибиторов // Сб. ст. по материалам конгресса молодых ученных России с международным участием «Фундаментальные науки и прогресс клинической медицины». Москва.- 1998.-С.40-41.

4. Дюкова Е.В. Протеиназы и ингибиторы протеолиза при ангиитах кожи//Сб.статей молодых ученых и студентов «Современные проблемы фундаментальной и клинической медицины».-Томск.-1999.-е. 166-167.

5. Суханова ГА, Дюкова Е.В., Гидалевич В.Я., Галушкин К.Г. Активность протеолитических ферментов и их ингибиторов в кожном экссудате//Вестник СГМУ.-№1 .-2000.-С.27-30.

6. Суханова Г.А., Акбашева О.Е., Дюкова Е.В. Взаимодейсвтие внутриклеточных и внеклеточных систем протеолиза//Тезисы рабочего совещания и с международным участием «Лизосомы и лизосомальные болезни» -Новосибирск, 2000.- С.85.

7. Дюкова Е.В. Характеристика протеолитических процессов кожи и сыворотки при дерматозах - Вестник Российского Государственного медицинского университета-№2 (17).-2001 .-с. 133-134.

8. Дюкова Е.В., Спирина Л.В. Протеиназы и их ингибиторы в здоровой коже//Материалы II Российской конференции хмолодых ученых.-Москва-2001.-с.82-83.

9. Суханова Г.А., Акбашева О.Е., Дюкова Е.В., Кондратьев А.П. Роль ингибиторов биохимических реакций в оценке адаптации и состояния здоровья человека// Сб. материалов конференции «Физиология функций организма в норме и экстремальных состояниях» - Томск.-2001.с.31

Ю.Суханова Г.А., Акбашева О.Е., Дюкова Е.В., Кондратьев А.П. Антиоксиданты и ингибиторы протеолиза в оценке состояния здоровья человека// Клиническая лабораторная диагностика-2001. -№ 11. -С. 8.

11. Дюкова Е.В. Активность протеолитических ферментов и их ингибиторов при дерматозах// Сб. тезисов IV съезда физиологов Сибири .-2002.-С.84-85.

12.Суханова Г.А., Пестерев П.Н., ЛевицкийЕ.Ф., Дюкова Е.В., Найданова И.П. Активность протеиназ и их ингибиторов сыворотки крови и кожного экссудата при экземе//Сибирский журнал дерматологии и венерологии-2002.-№3.-с.11-13.

13.Дюкова Е.В., Злобина Е.В. Значение эластазы и ее ингибиторов в развитии патологии кожи//Сб.материалов III Международной научно-практической конференции молодых ученых и студентов «Санкт-Петербургский научный форум-2003».-Т. 1.- с.76-78.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

КК - калликреин ККГ- калликреиноген КСИ - кислотостабильный ингибитор - макроглобулин -протеиназный ингибитор ПИИ - протеиназно-ингибиторный индекс

р.1966

РНБ Русский фонд

2004-4 27345

Размножено 100 экз. Копировальный центр «Южный», г. Томск, ул. 19-й Гвараейской дивизии, 75 тел. 41-34-47

Содержание диссертации, кандидата медицинских наук, Дюкова, Елена Владимировна

Список принятых сокращений

Введение

Глава 1. Обзор литературы

1.1 .Роль протеолиза в организме

1.2. Протеолитические ферменты

1.3. Ингибиторы протеолитических ферментов 18 1 АЗначение процессов протеолиза в коже

Глава 2. Материал и методы исследования

Глава 3. Результаты исследования 43 ЗЛ.Активностость протеолитических ферментов и ингибиторов в 43 сыворотке крови и кожном экссудате практически здоровых лиц

3.2.Показатели протеолиза кожи

3.3. Состояние протеолиза при дерматопатологии 49 3.3.1 .Активность протеолитических ферментов и ингибиторов в 49 сыворотке крови при псориазе

3.3.2. Активность протеолитических ферментов и ингибиторов в 51 сыворотке крови и кожном экссудате при экземе

3.3.3. Активность протеолитических ферментов и ингибиторов в 60 сыворотке крови при ангиитах кожи

3.4.Соотношение активности протеиназ и ингибиторов сыворотки 68 крови при дерматозах

3.5. Математический анализ полученных результатов

Глава 4.0бсуждение результатов 78 Выводы 97 Список литературы

Список принятых сокращений

БАНЕ - р-нитрофениловый эфир-М-бутилоксикарбонилаланин

БАЭЭ - N -бензоил-Ь-аргинин этиловый эфир

ДМБА-диметилпарабензоальдегид

КК - калликреин

ККГ - калликреиноген

ККС-калликреин-кининовая система

КСИ - кислотостабильный ингибитор

КЭ - кожный экссудат а2 - МГ - а -макроглобулин

ПИИ - протеиназно-ингибиторный индекс ct| - ПИ - cti-протеиназный ингибитор

СК - сыворотка крови

ТИМП - тканевые ингибиторы металлопротеиназ •

Введение Диссертация по биологии, на тему "Активность протеиназ и их ингибиторов при воспалительных заболеваниях кожи"

Актуальность исследования. К числу фундаментальных достижений биохимии относится осознание протеолиза как особой формы биологического контроля. Изменение метаболизма, структуры и функции клеток во многом определяется активацией внеклеточных и внутриклеточных процессов ограниченного протеолиза. Протеолитические ферменты участвуют в развитии необратимых реакций, образовании биологически активных веществ, обеспечивают быстрый ответ клетки на действие раздражителей эндогенной и экзогенной природы (8, 16, 22, 74, 77, 99, 118, 129, 131, 163). Система протеолиза крови и тканей включает в себя протеолитические ферменты, их неактивные формы, активаторы и ингибиторы протеиназ, продукты протеолиза (36).

В плазме крови в основном представлены сериновые протеиназы. Особое значение имеет калликреин, который является важным компонентом калликрен-кииновой систмемы. Брадикинин, образующийся в результате действия калликреина, принимает участие в регуляции тонуса и проницаемости сосудов, по каскадному принципу регулирует процессы свертывания, фибринолиза и систему комплемента (19, 21, 158, 159, 163, 178). Среди внутриклеточных протеиназ большое значение имеют эластаза и коллагеназа. Эластаза и коллагеназа полиморфноядерных нейтрофилов разрушают биологические структуры в очаге воспаления, воздействуют на компоненты межклеточного матрикса(10, 53, 76, 94, 126, 142, 190, 194, 196). В регуляции протеолиза участвуют специфические белки-ингибиторы протеиназ крови и тканей. Наиболее хорошо изучена роль ар протеиназного ингибитора, ограничивающего активность сериновых протеиназ, и аг-макроглобулина, являющегося ингибитором практически всех протеиназ сыворотки крови: цистеиновых, сериновых, аспартильных и металлопротеиназ (21, 39, 49, 127, 192). Менее изучены кислотостабильные ингибиторы, которые локализованы в секретах слизистых оболочек органов, в плазматических мембранах, в тканях и биологических жидкостях (96, 188, 232, 252).

Кожа является естественным защитным барьером организма от внешней среды, подвержена действию физических и химических факторов, первой вступает в контакт с патогенными микроорганизмами (108, 125, 152). В настоящее время наиболее полно изучена морфология ткани, ее микроструктура (152). Изучению протеолитических процессов в коже уделяется значительно меньше внимания. Протеиназы принимают участие в процессах обновления (51), заживления (230, 231), пигментации кожи (72). Со снижением активности коллагеназ связана одна из теорий старения кожи (51, 103). Коллагеназосодержащие препараты используют для лечения ран, обширных ожогов, устранения рубцов, коллоидов. В косметологии протеиназы применяют при стимулировании регенеративных процессов кожи, для профилактики образования морщин (53). Ингибиторы протеолитических ферментов обеспечивают защиту кожи от протеиназ бактериального происхождения (21, 243, 252).

Как правило, материалом для исследования биохимических процессов кожи является биопсийный материал (67, 148, 193, 206, 261). Одним из наиболее доступных методов получения кожной тканевой жидкости является метод «кожного окна» (17, 150). В развитии воспалительных процессов кожи, физиологической регенерации и пролиферации клеток принимают участие фибробласты (14, 57).

Одной из актуальных проблем биохимии является изучение роли внутриклеточных и внеклеточных протеиназ в оценке состояния кожи при патологии. Процессы протеолиза имеют непосредственное отношение к реакциям воспаления и деструкции ткани (176, 220) Развитие воспалительных реакций в коже приводит к изменению баланса между протеиназами и ингибиторами в плазме крови. Увеличение активности протеиназ и ингибиторов в коже и сыворотке крови обнаружены при ихтиозах (193), аллергическом дерматите (31), пузырчатке (27, 160), хронической крапивнице (28), роже (9), розацеа (30), грибковых поражениях кожи (29).

К наиболее распространенным дерматозам относятся экзема и псориаз. Практически не изучены ангииты кожи. Известно, что воспалительная реакция при псориазе развивается с преобладанием пролиферативной компоненты (80, 108, 157). При экземе наиболее выражено экссудативное воспаление (108, 146, 157). При ангиитах развиваются острые деструктивные состояния (47, 78, 108). Исследование системы протеолиза при данных дерматозах позволит оценить роль протеолитических ферментов и их ингибиторов в различных стадиях воспаления в коже.

Цель работы изучить активность внутриклеточных и внеклеточных протеиназ и их ингибиторов при воспалительных заболеваниях кожи. Задачи исследования:

1.Изучить активность калликреина, калликреиногена, эластазы, коллагеназы, а.|-протеиназного ингибитора, аг-макроглобулина и кислотостабильного ингибитора в коже, кожном экссудате, сыворотке крови здоровых людей и в культуре фибробластов кожи эмбриона человека.

2.Изучить активность внеклеточных и внутриклеточных протеиназ и их ингибиторов при псориазе, экземе и ангиитах кожи.

3.Установить взаимосвязь показателей протеолиза в патогенезе воспалительных заболеваниях кожи.

Научная новизна. Впервые изучены показатели протеолиза кожи и кожного экссудата практически здоровых людей. Установлено, что в коже и кожном экссудате активность плазменных и внутриклеточных протеиназ и их ингибиторов ниже, чем в сыворотке крови, однако изменения процессов протеолиза в кожном экссудате при дерматозах более выражены, чем в сыворотке крови. Получены новые данные о состоянии протеолиза сыворотки крови и кожного экссудата при псориазе, экземе и ангиитах кожи. Установлено, что существенное значение для оценки степени тяжести и прогноза воспалительных заболеваний кожи имеет дефицит ai-протеиназного ингибитора. С помощью дисперсионного анализа показано, что активность коллагеназы является наиболее информативным показателем глубины поражения кожи, активность эластазы в большей степени связана с развитием острого воспалительного процесса, а от активности (Х|- протеиназного ингибитора зависит степень тяжести заболевания. Теоретическая и практическая значимость. В работе представлены результаты исследования активности протеолитических ферментов и их ингибиторов в коже, кожном экссудате и сыворотке крови практически здоровых лиц. Обнаружена зависимость между показателями протеолиза сыворотки крови и кожного экссудата. Выявлены изменения в системе протеолиза при развитии дерматозов. Полученные результаты позволяют использовать показатели протеолиза для уточнения диагноза, являются критериями глубины поражения кожи, обострения и степени тяжести заболевания. Особое внимание рекомендуется уделять больным с дефицитом а|-протеиназного ингибитора. Основные положения, выносимые на защиту.

1. Активность коллагеназы, эластазы и кислотостабильного ингибитора в коже значительно выше, чем в кожном экссудате. В сыворотке крови выявлена более высокая активность калликреина, калликреиногена, с*]-протеиназного ингибитора, а2-макроглобулина по сравнению с кожей и кожным экссудатом. Существует положительная корреляционная связь между протеолитическими ферментами сыворотки крови и кожного экссудата здоровых лиц.

2.Развитие воспалительного процесса в коже приводит к дисбалансу системы протеолиза, что выражается активацией протеиназ, увеличением протеиназно-ингибиторных индексов, снижением активности ингибиторов протеолиза при тяжелых формах дерматозов. Изменения в кожном экссудате более существенны, чем в сыворотке крови.

З.К индикаторам воспалительной реакции кожи относятся калликреин и эластаза. Коллагеназа является показателем глубины поражения кожи, дефицит а,|-протеиназного ингибитора связан с тяжестью заболевания. Реализация и апробация диссертации.

Основные результаты представлены на заседаниях кафедры биохимии и молекулярной биологии СибГМУ, региональных и российских конференциях: III съезде физиологов Сибири и Дальнего Востока (Новосибирск, 1997); конференции молодых ученых России с международным участием «Фундаментальные науки и прогресс клинической медицины» (Москва, 1998); рабочем совещании с международным участием «Лизосомы и лизосомальные болезни» (Новосибирск, 2000); II Российской конференции молодых ученых (Москва, 2001); конференции «Физиология организма в нормальном и экстремальном состояниях» (Томск, 2001); IV съезде физиологов Сибири и Дальнего Востока (Новосибирск, 2002); III научно-практической конференции молодых ученых и студентов «Санкт-Петербургский научный форум» (Санкт-Петербург, 2003). Материалы диссертации используются при чтении лекций и проведении практических занятий для студентов медико-биологического факультета Сибирского государственного медицинского университета и внедрены в практику отделения кожных и венерических болезней клиник Сибирского государственного медицинского университета.

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 13 работ, из них 3 в центральных рецензируемых журналах.

Структура диссертации. Диссертация состоит их введения, четырех глав, выводов и списка цитируемой литературы. Работа изложена на 126 страницах, содержит 17 таблиц и 13 рисунков. Библиография включает 264 литературных источников, из них 159 отечественных и 105 иностранных авторов.

Заключение Диссертация по теме "Биохимия", Дюкова, Елена Владимировна

ВЫВОДЫ

1. Активность калликреина, калликреиногена, агпротеиназного ингибитора, (Х2-макроглобулина в сыворотке крови выше, чем в коже и кожном экссудате практически здоровых людей. В коже и фибробластах кожи эмбриона человека обнаружена высокая активность коллагеназы, эластазы и кислотостабильного ингибитора.

2. При воспалительных заболеваниях кожи происходит активация системы протеолиза. Активность калликреина, эластазы, коллагеназы в сыворотке крови и кожном экссудате при дерматозах увеличивается. Повышение активности протеолитических ферментов в кожном экссудате выражено в большей степени, чем в сыворотке крови.

3. У больных экземой активность ai-протеиназного ингибитора, ссг-макроглобулина и кислотостабильного ингибитора в сыворотке крови и кожном экссудате возрастает. При псориазе активность а,2-макроглобулина и кислотостабильного ингибитора в сыворотке крови снижается.

4. При ангиитах кожи выявлено 4 типа реакций ингибиторов. При хронических ангиитах кожи I степени тяжести в сыворотке крови увеличивается активность (Хрпротеиназного ингибитора, снижается активность а2-макроглобулина и кислотостабильного ингибитора. При II степени тяжести хронических ангиитов кожи в сыворотке крови снижается активность всех ингибиторов. Острая форма заболевания при 3 типе характеризуется снижением активности a i-протеи назного ингибитора и осг-макроглобулина на фоне увеличения активности кислотостабильного ингибитора, при 4 типе активность всех ингибиторов увеличивается.

5. Увеличение протеиназно-ингибиторных индексов при дерматозах отражает степень дисбаланса системы протеолиза, который наиболее выражен при ангиитах кожи. Между протеолитическими ферментами и их ингибиторами сыворотки крови и кожного экссудата существует положительная корреляционная связь. Активность коллагеназы является показателем глубины поражения кожи, активность эластазы обострения воспаления, а активность арпротеиназного ингибитора тяжести воспалительного процесса в коже.

6. Протеиназы и их ингибиторы играют важную роль в патогенезе воспалительных заболеваниях кожи. Увеличение активности калликреина, эластазы и коллагеназы способствует развитию микроциркуляторных и деструктивных процессов при дерматозах. Повышение активности арпротеиназного ингибитора, аг-макроглобулина и кислотостабильного ингибитора является компенсаторной реакцией на активацию протеиназ при дерматозах. При низкой активности арпротеиназного ингибитора возрастает риск хронизации воспалительного процесса в коже.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата медицинских наук, Дюкова, Елена Владимировна, Новосибирск

1. Адаме Р. Методы получения культуры клеток для биохимиков / Р. Адаме.-М., 1983.

2. Акбашева О.Е. Показатели протеолиза в оценке резорбции при опухоли кости / О.Е. Акбашева, Г.А. Суханова, И.А. Щепеткин // Клиническая лабораторная диагностика. 2002. - №11. - С. 23 - 33.

3. Активность системы прекалликреин-калликреин и особенности ее регуляции при некоторых аллергических заболеваниях / И.И. Ненашева, В.Л. Доценко, Л.А. Горячкина, Г.А. Яровая // Вопросы медицинской химии. 1986. - Т.32, Вып.5. - С. 106 - 110.

4. Активность эластазы и ее ингибиторов при разной этиологии у больных хроническими обструктивным бронхитом / Е.Б. Букреева, О.Е. Акбашева, Г.А. Суханова и др. // Бюллетень экспериментальной биологии медицины. 2002 (Приложение 1). - С. 55 - 57.

5. Александров С.Л. Теоретические аспекты механизма действия сериновых протеиназ / С.Л. Александров. // Биоорганическая химия.-1994.-Т. 20,№1.-С. 5-9.

6. Александров С.Л. Эффективность действия протеолитических ферментов / С.Л. Александров // Биоорганическая химия. 1994. - Т. 20,№2.-С. 126- 133.

7. Амбалов М.А. Изменения калликреи-кининовой системы у больных с эритематозной и геморрагической формой рожи/М.А.Амбалов, Л.Д.Левина// Врачебное дело.-1991.-№ 11.-С.92-95.

8. Ю.Антитромбиновая недостаточность следствие инактивирующего действия лейкоцитарной эластазы / В. Л. Доценко, А .Я. Спирина, А.И. Макинский и др. // Вопросы медицинской химии. - 2000. - №2. - С. 176 - 183.

9. И.Барабаш Р.Д. Влияние калликреина слюны на минеральный обмен в тканях зубочелюстной системы крыс / Р.Д. Барабаш, В.Ф. Постольский, С.В. Вовчук // Физиологический журнал. 1982. - Т. 28, №1. - С. 72 -75.

10. Белова Л.А. Выбор метода депротеинизации сыворотки крови / Л.А. Белова, И.В. Пинчук, А.А. Белов // Клиническая лабораторная диагностика. 1997. - №8. - С. 34 - 36.

11. Бенделик Е.К. Общая трипсиноподобная, эластазоподобная и антитрипсиновая активность у пациентов с контузией глаза/ Е.К.Бенделик, В.Л.Доценко// Вопросы медицинской химии.- 1999.-№ 4.- С. 12-17.

12. Бобро Л.И. Фибробласты и их значение в тканевых реакциях / Л.И. Бобро // Вестник дерматологии и венерологии. 1990. - №5. - С. 65 -67.

13. Вагапова Л.Б. Прогностическое значение определения в сыворотке крови активности эластазы и ее ингибиторов при гнойно-воспалительных заболеваниях новорожденных / Л.Б. Вагапова // Материалы VI съезда детских врачей Грузии. 1987. - Т.1. - С. 250 -252.

14. Варанина Н.И. Некоторые показатели системы протеиназы-ингибиторы при развитии адаптационных реакций организама после интенсивной физической нагрузки / Н.И. Баранина, Л.В. Михайлин,

15. С.С. Чабаненко // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1999. - Т.127, №5. . с. 529 - 532.

16. Вельтищев Д.Ю. Диагностическое значение «кожного окна» в клинике аффективной патологии / Д.Ю. Вельтищев, О.В. Серавина. // http://www.psychology.ru/affective/Veltichev-98.

17. Веремеенко К.Н. cti-ингибитор протеиназ и его исследование в клинике / К.Н Веремеенко // Клиническая медицина. 1985. - Т.63., № 12.-С. 21-27.

18. Веремеенко К.Н. Кининовая система / К.Н. Веремеенко. К.: Здоровья, 1977.- 182с.

19. Веремеенко К.Н. Определение активности эластазы и ее ингибиторов в сыворотке крови с помощью хромогенных субстратов / К.Н. Веремеенко, А.И. Кизим, А.Г. Терентьев // Клиническая лабораторная диагностика. 1992. - № 5-6. - С. 58 - 61.

20. Веремеенко К.Н. Протеолиз в норме и при патологии / К.Н. Веремеенко, О.П. Голобородбко, А.И. Кизим. К.: Здоровья, 1988. -256с.

21. Веремеенко К.Н. Протеолитические ферменты и их ингибиторы. Новые области применения в клинике / К.Н Веремеенко // Врачебное дело.-1994. №1. - С. 8 - 13.

22. Владимиров В.В. Современные методы терапии псориаза / В.В. Владимиров. // http://www.consilium-medicum.com.

23. Гельман В.Я. Медицинская информатика/В.Я.Гельман.-Санкт-Петербург,2002.- 480с.

24. Гомазков О.А. Функциональная биохимия регуляторных пептидов. / О.А. Гомазков. М.: Медицина, 1993. - 265с.

25. Горбовицкий С.Е. К вопросу о происхождении, биохимическом составе и физиологии кожной тканевой жидкости / С.Е. Горбовицкий, Э.Д. Голованов // Вестник дерматологии и венерологии. 1972. - №1. -С. 3 - 8.

26. Грандо С.А. Значение компонентов калликреин-кининовой системы в патогенезе пузырных поражений кожи при пузырчатке и пемфигоиде / С.А. Грандо, Б.Т. Глухенький // Вопросы медицинской химии. 1990. -Т.36, №1. - С. 23 - 27.

27. Гребенникова В.А. Калликреин-кининовая система при хронической крапивнице и отеках Квинке/В.А.Гребенникова, Г.Л.Абрамян//Вестник дерматологии и венерологии.-1988.-№ 6.-С. 12-15.

28. Гребенникова В.А. Состояние калликреин-кининовой системы при микозе стоп с сочетанием патологией нижних конечностей/ В.А.Гребенникова, Г.Э. Гурский, И.В.Андреева// Вестник дерматологии и венерологии.-1993.-№ 1.-С.54-58.

29. Григорян А.В. О показаниях и методике применения протеолитических ферментов в комплексном лечении больных хроническим остеомиелитом / А.В. Григорян, И.Д. Канорский, Е.Ф. Зебзеев // Советская медицина. 1974. - №7. - С. 53 - 55.

30. Гурдус В.О. Комплексная патогенетическая терапия больных ангиитами кожи с учетом показателей гемостаза: Автореф. дисс. .докт. мед. наук. Москва, 1992. - 139с.

31. Даниленко Л.П. Роль кининов при аллергических заболеваниях / Л.П. Даниленко, С.И. Матвеев // Врачебное дело. 1983. - № 5. - С. 49 - 52.

32. Дилакян Э.А. Характеристика эндогенных ингибиторов цистеиновых протеиназ из трансформированных фибробластов. / Э.А. Дилакян, Т.А. Гуреева // Вопросы медицинской химии. 2002, - Т.48, №6. - С. 611 -617.

33. Дин Р. Процессы распада белка в клетке. / Р. Дин. М.: Медицина, 1981. - 120с.

34. Доценко B.JI Действие лейкоцитарной эластазы на высокомолекулярный кининоген плазмы крови человека в присутствии (Xi протеиназного ингибитора// B.JI. Доценко, Е.А. Нешкова, Г.А.-Вопросы медицинской химии-2001г.-№ 1.-С.14-19.

35. Дубровин С.М. аг-макроглобулин: современное состояние вопроса / С.М. Дубровин, А.В. Муромцев, Л.И. Новикова // Клиническая лабораторная диагностика. 2000. - №6. - С.З - 7.

36. Дудченко Н.А. Функциональное состояние органов гепатобилиарной системы поджелудочной железы и почек у больных микробной экземой / Н.А. Дудченко, О.И. Даниленко // Вестник дерматологии и венерологии. 1998. - №2. - С. 42 - 44.

37. Езикян Т.И. Коллагенолитическая активность десневой жидкости и тканях десны у больных с воспалением пародонта / Т.И. Езикян, В.К. Леонтьев, М.М. Персиц // Стоматология. 1991. - №6. - С. 15 - 17.

38. Иванов О.Л. Микроциркуляторные нарушения при васкулитах кожи / О.Л. Иванов, Э.С. Мачин, А.Н. Ясаманова // Вестник дерматологии и венерологии. 1984. №9. - С. 23 - 26.

39. Иванов О.Л. Современная классификация и клиническое течение ангиитов кожи / О.Л. Иванов // Российский медицинский журнал. — 1997. Т.5, №11. - С. 2 - 7.

40. Иванов О.Л. Диагностика ангиитов кожи / О.Л. Иванов // Российский журнал кожных и венерических болезней //1998.-№1.- С.66-70.

41. Кайнова А.С. Лизосомы и коллагеновые болезни / А.С. Кайнова// Вопросы ревматизма.-1972.-№ 2.-С.83-85.

42. Казанская Н.Ф. Ингибиторы факторы регуляции протеолиза / Н.Ф. Казанская // Биоорганическая химия . - 1994. - Т.20, №5. - С. 485 - 490.

43. Казанцева И.А. Апоптоз и его роль в патологии кожи / Казанцева И.А. // Российский журнал кожных и венерических болезней. 2000. - № 4. -С. 17-22.

44. Канунго М. Биохимия старения. / М. Канунго. М.,1982. - 294с.

45. Киселев В.Н. Методические аспекты оценки состояния каликрени-кининовой системы крови/ В.Н.Киселев, В.П.Куликов // Лабораторное дело.-1988.-№7.-С.27-32.

46. Климова О.А. Препараты коллагенолитических протеаз беспозвоночных: биохимические аспекты медицинского и косметологического применения / О.А. Климова, В.Ю. Чеботарев // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2000. - Т. 130, №7.-С. 70-75.

47. Козырева Е.К. Протеолитические ферменты лизосом при раке яичника / Е.К. Козырева, К.И. Жордания, Л.С. Бассалык // Вопросы медицинской химии. 1991. - №4. - С. 20 - 29.

48. Коленда Ю.В. Влияние калликреина на развитие общего адаптационного синдрома / Ю.В. Коленда, С.В. Вовчук // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. 1985. -№4. -С. 11-14.

49. Коллагеназы I и IV типов и их эндогенные регуляторы в иммортализованных и трансформированных фибробластах / Н.И. Соловьева, С.В. Винокурова, Э.А. Дилакян и др. // Вопросы медицинской химии. 2001. - Т.47, № 1. - С. 72 - 79.

50. Константинова Н.В. Изучение роли фибробластов как основного фактора дифференцировки эпидермиса/ Н.В.Константинова, Р.Д. Урсо, Н.Г.Короткий//Бюллетень экспериментальной биологии и медицины.-1996.-№ 1.-С.80-85.

51. Котова Т.С. di-ингибитор протеиназ: характеристика биохимических и биологических свойств и определение уровня при различных заболеваниях. / Т.С. Котова, В.Ю. Басис, О.И. Атовмян. //Вопросы медицинской химии. 1986. - № 4. - С. 77 - 80.

52. Короленко Т.А. Катаболизм белка в лизосомах/Т.А.Короленко.-Новосибирск., 1990.-189с.

53. Кочегура Т.Л. Исследование компонентов, отражающих состояние соединительной ткани и системы протеолиза при патологии легких. / Т.Л. Кочегура // Терапевтический архив. 1990. - Т.62, №3. -С. 143 -146.

54. Краева Г.А. Некоторые свойства катепсина D и эластазы из нейтрофилов периферической крови свиньи / Г.А. Краева, В.И. Кокренков // Биохимия. 1988. - Т.53, № 4. - С. 655 - 662.

55. Кубанова А.А. Кожные болезни. / А.А. Кубанова. М.: Медицина, 1999.-283с.

56. Кузнецов В.А. Показатели кининогенеза у больных красной волчанкой. / В.А. Кузнецов, И.В. Беменов // Советская медицина. 1981. - №7. - С. 36-39.

57. Кузнецова Т.П. Активность тканевого и плазменного калликреина в слезной жидкости кролика после щелочного ожога роговицы / Т.П. Кузнецова, Н.Б. Чеснокова, Т.С. Пасхина // Вопросы медицинской химии. 1994. - № 3. - С. 37 - 40.

58. Кулага В.В. Кининова система у больных псориазом / В.В. Кулага, В.В. Латышева // Вестник дерматологии и венерологии. 1978. - №5. - С. 11 - 15.

59. Кулага В.В. Содержание брадикининогена у больных аллергическими васкулитами кожи/ В.В. Кулага, Б.В. Полушкин// Вестник дерматологии и венерологии.-1972.-№ 5.-С.35-38.

60. Курдина М.И. Экспрессия урокиназы и ее рецепторов в коже больных псориазом/ М.И.Курдина, Антропова Ю.Г., Ильинская О.П./ Вестник дерматологии и венерологии .-2002.-№ 1.-С.9-12.

61. Кутманова А.З. Прогностическое значение определения функциональных форм аг-макроглобулина при вирусном гепатите В / А.З. Кутманова, Г.М. Боголюбова, Т.В. Антонова // Клиническая лабораторная диагностика. 1992. - №7-8. - С. 40 - 42.

62. Лайнен Г.Р. Матриксные металлопротеиназы и фибринолитическая активность/ Г.Р.Лайнен// Биохимия.-2002.-Т67,№1.-С.-107-115.

63. Лакин Г.Ф. Биометрия / Г.Ф. Лакин. М.: Высшая школа, 1980. - 293с.

64. Левин М.М. Характеристика аутоиммунных процессов при псориазе / М.М. Левин, И.С. Чернышов, В.М. Шубин // Вестник дерматологии и венерологии . 1995. - №3. - С. 29 - 32.

65. Лизосомы нормальной и патологически измененной кожи / Т.В. Ухина, А.А. Кубанова, М.М. Шегай, П.В. Сергеев // Вестник дерматологии и венерологии. 1994. - №6. - С. 28 - 30.

66. Локшина Л.А. Протеолитические ферменты в процессе онкогенеза / Л.А. Локшина // Вопросы медицинской химии. 1991. - № 6. - С. 1520.

67. Локшина Л.А. Протеолитические ферменты в регуляции биологических процессов / Л.А. Локшина // Биоорганическая химия. -1994. Т.20, №2. - С. 134-141.

68. Локшина Л.А. Регуляторная роль протеолитических ферментов / Л.А. Локшина//Молекулярная биология. 1979. - Т.13, №6. - С. 1205 - 1229.

69. Локшина Л.А. Роль лизосомальных ферментов в деструкции ткани / Л.А. Локшина // Вопросы медицинской химии. 1987. - Т.33,№5. - С. 23 - 26.

70. Лузиков В.Н. Контроль качества: белки и органеллы/

71. B.Н.Лузиков//Биохимия.-2002.-Т67,№ 2.-С.205-219.

72. Мавров И.И. Микроциркуляция при дерматозах / И.И. Мавров, Б.И. Каруга. К.: Здоров'я, 1985. - 134с.

73. Магомедова М.П. Калликреин-кининовая система при патологических состояниях у детей// М.П.Магомедова, Н.А.Коровина// Педиатрия.-1995 .-№ 3 .С. 102-106.

74. Маркушева Л.И. Антитела к фиброболастам кожи человека у больных различными дерматозами / Л.И. Маркушева, В.А. Самсонов, Е.Е. Фомина // Вестник дерматологии и венерологии. 1998. - №2. - С. 31 -33.

75. Маянский Д.Л. Лекции по клинической патологии/ Д.Н.Маянский, И.Г.Урсов// Новосибирск., 1997.-249с

76. Маянский Д.Н. Лизосомальные ферменты фагоцитирующих клеток в патогенезе воспаления/Д.Н.Маянский, Д.Д.Цырендоржиев,

77. C.А.Руланова//Вопросы медицинской химии.-1987.-Е.ЗЗ,№ 5.-С.7-8.

78. Милевская С.Г. К клинике и лечению узловатого васкулита / С.Г. Милевская, Н.В. Беляев // Сб. трудов науч.-практ. конф. «Диагностика и лечение ревматоидного полиартрита и болезней нижних конечностей». Томск, 1982. - С. 192.

79. Милевская С.Г. Псориатический артрит/ С.Г.Милевская, П.Н. Пестерев,- Томск.-1997.

80. Михаилов П.А. Семейство макроглобулинов / П.А. Михаилов, Л.И. Симонова, В.Д. Садчиков // Экспериментальная и клиническая радиология. 1978. - № 10. - С.17 - 20.

81. Мордовцев В.Н. Псориаз/ В.Н. Мордовцев, Г.В. Мушет, Албанова В.И.-Кишенев: ШТИИНЦА.-1991 186с.

82. Мощич П.С. Определение аг-макроглобулина при заболеваниях печени / П.С. Мощич, К.Н. Веремеенко, С.А. Крамарев // Педиатрия. -1980.-№9. -С. 11-13.

83. Нартикова В.Ф. Унифицированный метод определения активности cti -антитрипсина и а2 -макроглобулина в сыворотке (плазме) крови человека / В.Ф. Нартикова, Г.С. Пасхина // Вопросы медицинской химии. 1979. - Т.25, Вып.4. - С. 494 - 499.

84. Нартикова В.Ф. Очистка и свойства кислотостабильного ингибитора трипсина из сыворотки крови кролика/ В.Ф. Нартикова, Т.С. Пасхина // Биохимия.- 1969.-Т.34, № 2.-С.282-292.

85. Никулин Н.К. Экзема: патогенетическая терапия / Н.К. Никулин, Г.А. Пантелеева, К.В. Дмитриенко // Вестник дерматологии и венерологии. -2000. №4. - С. 48 - 50.

86. Оценка состояния системы протеолиза в диагностике заболеваний / О.Е. Акбашева, Г.А. Суханова, Е.В. Дюкова, Е.В. Пехтерева // Клиническая лабораторная диагностика. 1997. - №6. - С. 21 - 22.

87. Парфенова Е.В. Направление использования коллагена в технологии косметических средств / Е.В. Парфенова, Т.М. Икоев, О.В. Матийцо // Российский журнал кожных и венерических болезней. 2000. - №2. - С. 65-67.

88. Парфенова Г.А. Клиническое значение определения активности эластазо- и химотрипсиноподобных протеиназ в плазме крови у больных неспецифическим аортоартериитом и атеросклерозом/ Г.А.Парфенова, О.Г.Оглоблина//Кардиология.-1989.-Т.29,№ 9,-С.94-96.

89. Приваленко С.В. Метаболизм основного вещества соединительной ткани и коллагеновых белков у больных псориазом/ С.И. Приваленко, В.В.Бадонин// Вестник дерматологии венерологии.-1990.-№ 10.-С.11-17.

90. Юб.Пасхина Т.С. Кининовая система. Функция в плазме крови. Возможные пути направленного воздействия и регуляции / Т.С. Пасхина // Целенаправленный поиск новых сердечно-сосудистых препаратов. Рига, 1980. - С. 50 - 70.

91. Пасхина Т.С. Определение активности калликреина и калликреиногена в сыворотке крови человека / Т.С. Пасхина, А.В. Кринская // Под ред. В.Н. Ореховича. М.: Медицина, 1977. - С. 66- 70.

92. Патология кожи / Под ред. В.Н. Мордовцева, Г.М. Цветковой. М.: Медицина, 1993. - В 2 т.-818с.

93. Пехтерева Е.В. Состояние кининогенеза и иммунного статуса у детей с язвенной болезнью и хроническим гастродуоденитом / Е.В. Пехтерева, Л.П. Бушмелева, О.Е. Акбашева // Сибирский журнал гастроэнтерологии и гепатологии. 2000. - №10. - С. 63 - 64.

94. ПО.Пилинчук B.H. Роль а г протеиназного ингибитора в развитие наследственно детерминированных заболеваний легких / В.Н. Пилинчук, Т.М. Сердюк // Проблемы туберкулеза. - 1991. - №1. - С. 71 -73.

95. Ш.Позднев В.Ф. Новые дипептидные флуорогенные субстраты тканевого калликреина человека / В.Ф. Позднев, С.Э. Рабинович, Т.С. Пасхина//Биорганическая химия. 1991. - Т.17, №10. - С. 1352 - 1356.

96. Прокопенко Л.Г. Протеолитические ферменты и их ингибиторы как модуляторы иммунных реакций. / Л.Г. Прокопенко, Г.А. Чалый // Фармакология и токсикология. 1987. - №5. - С. 93 - 99.

97. ПЗ.Протеиназы как фактор патогенеза при воспалительных процессах в тканях парадонта. / Т.Н. Езикян, В.К. Леонтьев, Н.И. Соловьева, Н.Я. Косорукова // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. -1991.-№9.-С. 254-256.

98. Прохоренков В.И. Экзема / В.И. Прохоренков, Т.А. Яковлева. -Красноянск: «ПИК», 1994. 255 с.

99. Проценко Л.В. Антипротеолитическая активность а2 -макроглобулина. / Л.В. Проценко // Украинский биохимический журнал. 1984. - Т.56, №5. - С. 546 - 549.

100. Проценко В. А. Ингибиторы протеолитических ферментов -протекторы клеточных повреждений/ В.А.Проценко, С.И. Шпак //Успехи современной биологии.-1988.-Т.106, вып. 2(5).-С.255-262.

101. Разнотовский И.М. О патогенезе кожных высыпаний при псориазе / И.М. Разнотовский // Вестник дерматологии и венерологии. 1988. -№9. - С. 9 - 11.

102. Ротанова Т.В. Энергозависимый селективный внутриклеточный протеолиз / Т.В. Ротанова // Вопросы медицинской химии. 2001. -Т.47, №1. - С.З - 19.

103. Рывняк В.В. Электронно-гистохимическая локализация коллагеназы в печени/ В.В.Рывняк, B.C. Гудман, Е.С.Оня //Бюллетень экспериментальной биологии и медицины.-1996.-№ 1.-С.98-100.

104. Самохина JI.M. ai-ингибитор протеиназ в оценке эффективного применения лазартана у больных с гипертензией. / JI.M. Самохина // www.users.kharkiv.com/gold/genhome/wnyiter.html

105. Самсонов В.А. Псориаз. Заболевания кожи: диагностика, лечение, профилактика. / В.А. Самсонов, А.Ф.Знаменская // www.medi.ru. 2001. - №2.

106. Семейство макроглобулинов / Н.А. Зорин, P.M. Зорина, B.C. Горин и др. // Клиническая лабораторная диагностика. 1993. - №1. - С. 52 - 56.

107. Сергеев ЮВ. Атопический дерматит. Роль ингибиторов протеиназ в патогенезе, оценке тяжести и прогнозе заболевания / Ю.В. Сергеев, Ю.П. Резликов // Вестник дерматологии и венерологии. 1990. - №2. -С. 93 - 99.

108. Серов В.В. Соединительная ткань / В.В. Серов, А.Б. Шехтер. М.: Медицина, 1981. - С. 85 - 96.

109. Скрипкин Ю.К. Кожные и венерические болезни / Ю.К. Скрипкин, А.Л. Машкиллейсон, Г.Я. Шарапова. М: Медицина, 1997. - 462с.

110. Соловьева Н.И. Основные металлопротеиназы соединительно -тканного матрикса / Н.И. Соловьева // Биоорганическая химия. 1994. - Т.20, №2. - С. 143 - 152.

111. Сравнительная характеристика серпина ai -протеиназного ингибитора сыворотки крови человека и мышей/ Т.А.Короленко, О.А.Левина. О.В.Фаломеева. З.С.Толочко и др.//Российский физиологический журнал им. И.М.Сеченова.- 2003.-Т.89,№4.-С.420-426.

112. Соловьева Н.И. Протеолитические ферменты и их биологические функции / Н.И. Соловьева, Ю.А. Елисеева, Л.А. Локшина // Вестник РАМН. 1995. - №2. - С. 3 - 9.

113. Степанов В.М. Протеиназы и протеолиз / В.М. Степанов // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопрокталогии. 1998.-Т.8,№1.-С. 37-41.

114. Суровикина М.С. Клиническое значение изменений активности калликреин-кининовой системы / М.С. Суровикина // Врач. 1995. -№3.-С.7-10.

115. Суханова Г.А. Состояние кининогенеза и влияние брадикинина на содержание глюкокортикоидов плазмы крови облученных крыс/ Г.А. Суханова//Радиобиология.-1990.-Т.З0,№ 1.- С.127-129.

116. Суханова Г.А. Активность АПФ и калликреина при сахарном диабете I типа у детей. / Г.А. Суханова, Е.И. Кондратьева, JI.B. Спирина // Вопросы медицинской химии. 2002. - Т. 48, вып. 4. - С. 408 - 409.

117. Суханова Г.А. Активность протеолитических ферментов и их ингибиторов в плазме крови мышей при опухолевом росте / Г.А. Суханова, О.Е. Акбашева // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1999. - Т. 128, №7. - С. 69 - 72.

118. Суханова Г.А. Ингибиторы протеолиза как показатели обратимости патологических реакций / Г.А. Суханова, О.Е. Акбашева, Е.В. Дюкова // Тезисы докладов III съезда физиологов Сибири и Дальнего Востока. -Новосибирск, 1997. С. 224 - 225.

119. Суханова Г.А. Показатели протеолиза в оценке эффективности лечения язвенной болезни / Г.А. Суханова, О.Е. Акбашева, Е.В. Пехтерева // Клиническая лабораторная диагностика. 1998. - №8. - С. 49.

120. Суханова Г.А. Показатели протеолиза для оценки состояния онкологических больных / Г.А. Суханова, О.Е. Акбашева // Фундаментальные и прикладные аспекты современной биохимии / Под. ред. И.Г. Щербак. СПб.: СПбГМУ, 1998. - С. 207 - 208.

121. Суханова Г. А. Регуляция брадикинином метаболизма клеток лимфоидных органов: Автореферат дисс. .докт. биол. наук. Томск, 1993.-34с.

122. Ткаченко Е.И. Применение антикалликреиновых-антикининовых препаратов в неотложной терапии / Е.И. Ткаченко // Военно-медицинский журнал. 1982. - № 6- С. 12 - 15.

123. Участие нейтрофилов в патогенезе аллергического воспаления: ингибиторно-протеазноый индекс в оценке и прогнозировании атопических заболеваний / С.Г. Пужко, B.JI. Доценко, Е.А. Нешкова и др. // Вопросы медицинской химии. 1994. - № 5. - С. 37-41.

124. Федоров С.М. Псориаз: клинические и терапевтические аспекты / С.М. Федоров // www.medlinks.ru

125. Фильченков А.А. Каспазы: регуляторы апоптоза и других клеточных функций/ А.А.Фильченков//Биохимия.-2003.-Т.68,№ 4.-С.453-466.

126. Хасигов П.З. Металлопротеиназы матрикса нормальных тканей человека/ П.З.Хасигов, О.В.Подобед, С.А.Кцоева// Биохимия.-2001.-Т.66, № 2.- С. 167-179.

127. НЗ.Хасигов П.З. Роль металлопротеиназ матрикса и их ингибиторов в процессах опухолевой инвазии и метастазирования// П.З.Хасигов, О.В.Подобед, Г.С.Грачева// Биохимия.-2003.-Т.68,№ 7.-С.869-877.

128. Хазизов И.Е. К механизмам воспалительных изменений в коже при экземе и экземоподобных процессах / И.Е. Хазизов, O.K. Шапошников // Вестник дерматологии и венерологии. 1991. - №10. - С. 8 - 11.

129. Хазизов И.Е. Концепция патогенеза экземы, атопического дерматита и псориаза / И.Е. Хазизов // Здравоохранение Казахстана. 1992. - №11. - С. 45 - 48.

130. Хазизов И.Е. Общепатологический подход к проблеме патогенеза экземы и экземоподобных состояний / И.Е. Хазизов, O.K. Шапошников // Вестник дерматологии и венерологии. 1991. - №6. - С. 4 - 8.

131. Худзик Л.Б. Применение препаратов ингибиторов протеолитических ферментов при бронхолегочных заболеваниях/Л.Б.Худзик, Т.И.Морозова //Прблемы туберкулеза.-1991 .-№ 1 .-С.68-71.

132. Чалимова Р.А. Фибринолитические компоненты в здоровой коже/ Р.А.Чалимова// Вестник дерматологии и венерологии.- 1976.-С.20-23.

133. Чесноков Н.Б. Основные ингибиторы протеиназ при офтальмогерпесе/ Н.Б.Чесноков, Б.С.Касавина, Ю.Ф. Майчук //Вопросы медицинской химии. -1981-№5.-С.663т665.

134. Черевко Н.А. Способ дифференциальной диагностики вариантов течения атопической бронхиальной астмы у детей/ Н.А.Черевко // Бюлл. информ.-1994.-№24.-С.27-31.

135. Чернух А.М. Воспаление / A.M. Чернуха. М.: Медицина, 1979. -248с.

136. Чернух A.M. Кожа / A.M. Чернуха. М.: Медицина, 1982. - 336с.

137. Чернышов В.Н. Характеристика микробной флоры кожи при различных клинических вариантах аллергических дерматозов у детей /

138. B.Н. Чернышов, А.Е. Эссель, А.А. Лебеденко // Вестник дерматологии и венерологии. 1991. - №10. - С. 35 - 39.

139. Чесноков Н.Б. Эластазоподобная активность в ткани глаза и сыворотке крови. Антипротеазы при ожоге роговицы. / Н.Б. Чесноков, Н.Е. Сосулина // Вопросы медицинскрй химии. 1986. - №4. - С. 110113.

140. Чубинская С.Г. Активность эластазы при росте, метастазировании опухоли и некоторых фармакологических воздействиях у мышей//

141. C.Г.Чубинская// Экспериментальная онкология.-1990.-№1.- С.53-55.

142. Шараев П.Н. Определение коллагенолитической активности плазмы крови / П.Н. Шараев, В.И. Пишков, Н.Г. Зворыгина // Лабораторное дело.-1983. -№1.-С. 60-61.

143. Шарапова Г.Я. О патогенезе экземы и псориаза / Г.Я. Шарапова, Н.А. Смирнова, Е.Г. Круглова // Советская медицина. 1989. - №9. - С. 106 -109.

144. Яровая Г.А. Калликреин-кининовая система: новые факты и концепции / Г.А. Яровая // Вопросы медицинской химии. 2001. - Т.47, №1.-С. 20-42.

145. Яровая Г.А. Контактная система. Новые представления о механизмах активации и биорегулирующих функциях// Г.А. Яровая, Е.А.Нешкова// Биохимия.-2002.-Т.67,№ 1 .-С. 16-30.

146. A critical role for neutrophil elastase in experimental bullous pemphigoid / Z. Liu, S. Shapiro, X. Zhou et al. // Clin. Invest. 2000. - Vol. 105, N1. - P. 113-123

147. Activation of Neutrophil Collagenase in Periodontitis / R. Romanelli, S. Mancini, C. Laschinger et al. // Infect. Immun. 1999. - Vol. 67, N5. - P. 2319-2326.

148. Activation of rinin system in ovary during ovulation : role of endogenous progesterone / D.W. Brann, L.M.Greenbaum, V.B. Mahesh, X.X.Ga. // BMC Physiol. 2002. - Vol. 2, N1. - P. 7 -13.

149. Adam A. Kinins: their nature and their potential role in the cardiovascular effects of angiotensin converting enzyme inhibition / A. Adam, C. Blais, G. Loute // Nephrologie. 2000. - Vol.21, №4. - P. 163 - 172.

150. Aimes R.T. Matrix metalloproteinase-2 is an interstitial collagenase. / R.T. Aimes, J.P. Quigley // J. Biol.Chem. 1995. - Vol, 270, N11. - P. 5872 -5876.

151. Akutsu H. Concentrative relationship between polymorphonuclear elastase and urinary trypsin inhibitor in amniotic fluid / H. Akutsu, H. Iwama // Arch. Gynecol. Obstet. 2000. - Vol. 263, N4. - P. 156 - 159.

152. Alkemada J. SKALP/elafm is inducible proteinase inhibitor in human epidermal keratinocytes / J. Alkemada, H. Molhuizen, M. Ponec // J. Cell Sci. 1994. - Vol.104, № 8. - P. 2335 - 2342.

153. Bach J. Eczema and other skin disorders / J. Bach I I London, Grafton books, 1987.- 191p.

154. Bader M. Molecular interactions of vasoactive systems in cardiovascular damage / M. Bader // J. Cardiovasc. Pharmacol. 2001. - Vol.38, №11. - P. 7-9.

155. Barret F.J. a2 -macroglobulin / F.J. Barret // Meth. Enzimol. 1981. -Vol.80. - P.737-754.

156. Bieth J.G. Investigation of the active center of rat pancreatic elastase / J.G. Bieth, S. Dining, M. Jung // Biochim. Biophys. Acta. 1989. -Vol.99, № l.-P. 6-74.

157. Bonnefoy A. Proteolysis of subendothelial adhesive glycoproteins (fibronectin, thrombospondin, and von Willebrand factor) by plasmin, leukocyte cathepsin G, and elastase / A. Bonnefoy, C. Legrand // Thromb. Res. 2000. - Vol.98, N4. - P. 323 - 332.

158. Borth W. a2 -Macroglobulin in connectiv tissue matrix metabolism / W. Borth // Collagen Rel. Res. 1984. - N 12. - P. 257 - 317.

159. Bos J.D. Pathogenesis of atopic exzema / J.D. Bos,.M.L. Kapsenberg, J.H. Sillevis-Smith//Lancet.- 1994.-Vol. 343. P.1338 - 1341.

160. Bouloc A. Increased fibroblast elastase activity in acquredcutis laxa / A. Bouloc, G. Ciodeau, J. Zeller // Dermatology. 1999. - Vol.198, N4. - P. 346 - 350.

161. Brach M. Influence of elastin on the ingibitor of leucocyte elastase by alfa-1 -proteinase ingibitor and bronchial ingibitor / M. Brach, J.G. Bieth // J. Biochem. 1986. - Vol.238, № 1. - P. 269 -273.

162. Briggeaman K. Degradation of the epidermal-dermal junction by proteolytic enzymes from human skin and human polymornonuclear leucocyte/ K. Briggeaman, N.M. Schechter// J.E.M.-1984.-Vol.l60,N3.-P1027-1042.

163. Brew К. Tissue inhibitors of metalloproteinases: evolution, structure and function/K.Brew, D.Dinakarpandian, H. Nagase// Biochim Biophys Acta.-Vol. 1477, N.1-2.-P.267-283.

164. Campbell D.J. Towards understanding the kallikrein-kinin system: insights from measurement of the kinin peptide / D.J. Campbell // Braz. J. Med. Biol. Res. 2000. - Vol. 33, №6. - P. 665-677.

165. Chang A. Elastase-inhibiting activity is scaling skin disorders/A. Chang, J. Schalkwi, R. Happl// Acta.derm. venerol.-1990.- Vol. 70, N 2.-P/147-151.

166. Chao J. Tissue kallikrein inhibitors in mammals. / J. Chao, K. Chai, L. Chao // Immunopharmacology. 1996. - Vol. 32, N1-3. - P. 67 - 72.

167. Chen V. Roles of the P| , P2 and P3 residuess in determining inhibitory specificity of kallistatin toward human tissue kallikrein / V. Chen, L. Chao // J. Biol. Chem. 2000. - Vol. 275, N49. - P. 38457 - 38466.

168. Coakeey R. a-1-antitrypsin deficiency: biological answers to clinical questions/ R. Coakeey, C. Taggart// Am. J. Med. Sci. 2001. - Vol.321, N1. -P. 33-41.

169. Colandrea Di. Epidermal expression of collagenase delays wound -healing in transgenic mice / Di. Colandrea, L. Wang // J. Invest. Dermatol. -1998.-Vol. Ill,№6.-P. 1029- 1033.

170. Comparative fourier transform and dichroism spectroscopik analis of ai -proteinase inhibitor and ovoalbumin / A. Dong, J. Meyer, J. Brown, M. Manning // Arch. Biohcem. Biophys. 2000. - Vol. 383, N1. - P. 148 - 155.

171. Condacci I. In-vitro syntesis of a2 -makroglobulin by human gingival fibroblasts/ I.Condacci, G.Cimansoni, M.Rey// Arch. oral.Biol.-1988.-Vol.33,N6.-P.407- 412.

172. Coumarinic derivatives as mechanism-based inhibitors of alpha-chymotrypsin and human leukocyte elastase / L. Pochet, C. Doucet, G. Dive et al. // Bioorg Med Chem. 2000. - Vol. 8, N6. - P.l 4891 - 1501.

173. Cuvelier A. Proteins of the inter-alphatrypsin inhibitor family. A miyor role in the biology of the extracellular matrix / A. Cuvelier, J. Muir, J. Martin // Rev. Mai. Respir. 2000. - Vol.17, N2. - P.'437 - 446.

174. Duffi M. Metalloproteinase: role in breast carcinogenesis, invasion and metastasis / M. Duffi, T.M. Mugurre // Breast. Cancer. Res. 2000. - Vol. 2, N4.-P. 252-257.

175. Effects of antidepressant treatments on polymorphonuclear elastase levels in patients with depression / M. Bekaroglu, O. Deger, S.C. Karahan et al. // J. Affect. Disord. 2000. - Vol.59, N3. - P. 175 - 182.

176. Effects of serpin binding on the target proteinase. / G. Kaslik, J. Kardos, E. Szado, L. Szilagyi // Biochemistry. 1997. - Vol. 36, N18. - P. 5455 - 5464.

177. Elastase-inhibiting activity in scaling skin disorders / A. Chang, J. Schalkwijk, R. Happle, P.C. van de Kerkhof // Acta. Derm. Venereol. -1990.-Vol. 70, N2.-P. 147-151.

178. Evidence for a crucial role of neutrophil-derived serine proteases in the inactivation of interleukin-6 at sites of inflammation / U. Bank, B. Kupper, D. Reinhold et al. // FEBS Lett. 1999. - Vol.461, N.3. - P. 235-240.

179. Farmer S.G. Pharmacology of bradykinin receptors in bradykinin antagonists: basic and clinical research / S.G. Farmer, R.M. Burch // Ed. By R.M. Burch. Marcel Dekker Inc., N.Y., 1991. - Vol. 3. - P. 1 - 32.

180. Fretzayas A. Polimorfonuclear elastase as a diognostic marcer pylonepritis in children / A. Fretzayas, M. Moustaki // Pediatrics. 2000. - Vol.105, N2. -P. 28-31.

181. Fries E. Bicunin-not just a plasma proteinase inhibitor. / E. Fries, A.M. Blom // J. Biochem. Cell Biol. 2000. - Vol. 32, N2. - P.125 - 137.

182. Ganter U. Repression of a2-macroglobulin and stimulation of human mononuclear phagocytes by endotoxin / U. Ganter // Eur. J. Biochem. -1987.-Vol. 169.-P. 13-20.

183. Gerge M. Molecular cloning of the human kallikrein 15 gene / M. Gerge // J.Biol.Chem. 2001. - Vol.276, N1. - P. 53 - 61.

184. Gibson T.L. Inflammation-related neutrophil proteases, cathepsin G and elastase, function as insulin-like growth factor binding protein proteases / T.L. Gibson, P. Cohen // Growth Horm. IGF Res. 1999. - Vol. 9, N4. - P. 241 -253.

185. Griesbacher T. Kallikrein-kinin system in acute pancreatitis: potential role of B(2)-bradykinin antagonists and kallikrein inhibitors / T. Griesbacher // Pharmacology.- 2000.- Vol. 60, №3.- P.l 13-20.

186. Grobelny D. Inhibition of human skin fibroblasts collagenase, thermolysin and Pseudomonas aeruginosa elastase dy peptide hydroxamatic acids. / D. Grobelny, L. Poncz, R. Galardy // Biochemistry. 1992. - Vol. 31.-P. 7152-7154.

187. Gross J. Aspects of the animal collagenase / J. Gross // J. Biochemistry. -1976. Vol.150, № 7. - P. 275 - 317.

188. Herrman J. microassay for the detection of elastase activity in the gingival crevice/J. Herrman, J. Gonzales, R. Boedeker// J.Clin. peridontol.-2001.-Vol.28, N 1.-P.31-37.

189. Human neutrophil elastase regulates the expression and secretion of elafin (elastase-specific inhibitor) in type II alveolar epithelial cells / P.T. Reid, M.E. Marsden, G.A. Cunningham et al. // FEBS Lett. 1999. - Vol. 457, N1.- P. 33 -37.

190. Human psoriatik skin in organ culture / J. Varani, S. Kang, S. Stoll, J.

191. Edler // Pathobiology. 1998. - Vol.66, №6. - P. 253 - 259.

192. Huntington J. Structure of a serpin -protease complex show inhibition by deformation / J. Huntington, R. Read, R. Carrell // 'Nature. 2000. - Vol. 407, N6806. - P. 923 - 926.

193. Identification and occurrence of mRNAs for components of the kallikrein-kinin system in human skin and skin disease. / E. Schemmer-Danninger, A. Hermann, E. Fink et al. // Immunopharmaccology. 1999. - Vol. 43, N23. -P. 287-291.

194. Induction of functional bradykinin b(l)-receptors in normotensive rats and mice under chronic angiotensin-converting enzyme inhibitor treatment / M.E. Marin-Castano, J.P. Schanstra, F.Neau et al // Circulation.- 2002.- Vol. 5, №2. P. 627 - 632.

195. Involvement of region near valine-69 of tissue inhibitor of metalloproteinase (TIMP)-l in interaction with matrix metalloproteinase 3 (stromelysin 1) / H. Nagase, K. Suzuki, T. Cawston, K. Brew // J. Biochem. 1997. - Vol.325. - P. 163 - 167.

196. James K. a2 -Macroglobulin and its possible importanse in immune sustems / K. James // Immunol. Today. 1990. - Vol.11, №5. - P. 163 - 167.

197. Janciauskiene S. Conformational properties of serin proteinase inhibitors (serpins) confer multiple pathophysiological roles/ S.Janciauskiene // Biochim.Biophys.Akta.-2001 .-V. 1535,N3.-P.221 -235.

198. Jiang A. Regulation of membrane type matrix metalloproteinase-1 activity by dinamin-mediated endocytosis / A. Jiang, K. Lehti, X. Wang // Proc Natl. Acad. Sci.USA. 2001. - Vol. 98, N24. - P. 13693 - 13698.

199. Kang K. Molecular characteristics of the inhibition of human neutrophil elastase by nonsteroidal antiinflammatory drugs / K. Kang, S.J. Bae, W.M. Kim et al. // Exp. Mol. Med. (Korea). 2000. - Vol. 32, N3. - P.146 - 154.

200. Karelina T. Interstional collagenase ED-8 oncofetal domain of fibronenectin are markers of angiogenesis in human skin tumors / T.

201. Karelina, A.Z. Eisen // Cancer Detect Prev. 1998. - Vol. 22, N5. - P. 438 -444.

202. King A.E. Presence of secretory LPI in human endometrium and first trimester deciduas suggests an antibacterial protective role. / A.E. King, H. Gritchley, R. Kelly // Mol. Hum. Reprod. 2000. - Vol. 6, N2. - P. 191 -196.

203. Kobayashi T. Immonolocalizainions of MMP-9! and TIMP in normal epidermise and epidermal tumors / T. Kobayashi, N. Onoda //Arch. Dermatol. Res. 1996. - Vol. 288, N5-6. - P. 239 - 244.

204. Kraine S. Different Coll. Gene have Different Rolss in Degradation of Type I collagen / S. Kraine, M. Byrne, V. Lemaitre // JBC. 1996. -Vol.271,№45.-P. 11-18.

205. Kuijpers A.L. SKALP is decreased in pustular forms of psoriasis / A.L. Kuijpers, P.L. Zeeuwen //Arch. Dermatol. Res. 1996. - Vol.288, N1 l.-P. 641 - 647.

206. Liu Z. A critical role for neutrophil elastase in experimental bullous pemphigoid/ Z.Liu, S.Shapiro // J.Clin.Invest.-2000.-Vol.l05, N.l.-P.l 13123.

207. Lopes-Cortes F. Aktivity of kallikrein in ascetic carcinoma cells / F. Lopes-Cortes// Clin. Infekt. Disias. 1995. - Vol.20, № 3. - P. 525 - 534.

208. Machovich R. An elastes-dependent pathway of plasminogen activation / R. Machovich, W. Owen // J. Biochemistry. 1989. - Vol.28, №19. - P. 4517-4522.

209. Margolius H.S. Kallikreins, kinins and cardiovascular diseases: a short review / H.S. Margolius // Biol. Res.- 1998.- Vol. 31; №3.- P. 135-41.

210. Microassay for the detection of elastase activity in the gingival crevice / J.M. Herrman, J.R. Gronzales, R.H. Boedeker, J. Vonholdt // J. Clin. Periodontal. 2001. - Vol. 28, N1. - P. 31 - 37.

211. Molhuizen H. Strukture, biohemical and cell biological aspects of the serin proteinase inhibitor SKALP/Elafm/ES. / H. Molhuizen, J. Schalknijk // M. Biol. Chem. 1995. - Vol. 376, № 1. - P. 1 - 7.

212. Nagase H. Matrix Metalloproteinases / H. Nagase, J.F. Woessner // J.B.C. -1999. Vol. 274, N31. - P. 21491 - 21494.

213. Neuman J. Protease and inhibitors / J. Neuman, O. Inbar, D. Creter // Ann. Allergy. 1984. - Vol.53, № 4. - P. 351 - 354.

214. Neutrophil elastase may play a key role in developing symptomatic disseminated intravascular coagulation and multiple organ failure in patients with head injury / H. Takahasi, T. Urano, N. Nagai et al. // J. Trauma. 2000. - Vol. 49, N1. - P. 86 - 91.

215. Nquyen M. Active and tissue inhibitor of matrix metalloproteinase-free gelatinase is accumulates within human microvascular endotelian vesicles / M. Nquyen, J. Azkell, C. Jackson // J. Biol Chem. 1998. - Vol. 273, N9. -P. 5400 - 5404.

216. Nwomen B.C. MMP-8 is predominant collagenase in healing wounds and nonleading ulcers / B.C. Nwomen, M.X. Liang, I.K. Cohen // J. Surg. Res. -1999. Vol. 81, N92. - P. 189 - 195.

217. Nwomen B.C., Liang M.X. Dinamics of the matrix metalloproteinase MMP-1 and MMP-8 in acute open human dermal wounds/ B.C.Nwomen B, M.X. Liang // Wound repair regen .-1998.-6(2).-P.127-134.

218. Parmar J. a-1-antitrypsin deficiency, the- serpinopathies and conformational disease / J. Parmar, D.-J. Lomas // R. Coll. Physicians Lond. 2000. - Vol. 34, N3. - P. 295 - 300.

219. Peres-Tamayo R. Patology of collagen degradation / R. Peres-Tamayo // Am.J.Path. 1978. - Vol.92. - P. 508 - 566.

220. Petersen M. Regulation and inhibition of collagenase expression by long -wavelength u ltaviolet radiation in cultured human skin fibroblast / M. Petersen, T. Hamilton // Photochem. Photobiol. 1995. - Vol.62, №3. - P. 444 - 448.

221. Pilcher B. Collagenase -1 and collagen in epidermal repair/B.Pilcher B. Sudbeck, J. Dumin //Arch.dermatol.res.-1998.- 290.-P.837-846.

222. Podlich D. Different susceptibility of human tissue prokallikrein to cleavage by neutrophil proteinases / D. Podlich, M. Kemme // Immunopharmacology. 1999. - Vol. 45, N1-3. - P. 95 - 101.

223. Regulation of allergic inflammation by skin-homing T cells in allergic eczema. / C.A. Akdis, M. Akdis, H.U. Simon, K. Blaser // Int Arch. Allergy Immunol. 1999. - Vol.118, № 2-4. - P. 140 - 144.

224. Reunanen N. Enhancement of Fibroblast collagenase gene expression by ceramide is mediated by extracellular signal-regulated and stress-activated protein kinase pathways / N. Reunanen, J. Wester // J.Biol.Chem. 1998. -Vol. 273,№9.-P. 5137-5145.

225. Rossing N. Interstitial fluid: exchange of macromolecules between plasma and skin interstitium/N. Rossing, A.M. Worm// Clin.Physiol.-1981.-V.l, N3.-P.275-284.

226. Sallinave J. Isolation of elafin and elstase specific inhibitor from bronchial secretions. / J. Sallinave, M. Marsden, A. Ryle // Biol. Chem. Hoppe Seyler. 1992. - Vol. 373, N1. - P. 27 - 33.

227. Salter J. Schistosome Invasion of Human Skin and Degradation of Dermal Elastin Are Madiated by Single Serine Protease / J. Salter, K. Lim, E. Hansel // J. Biol. Chem. 2000. - Vol. 275, № 49. - P. 38667 - 38673.

228. Schechter N.M. Structure of the dermal-epidermal junction and potential mechanisms for its degradation: the possible role of inflammatory cells. / N.M. Schechter // Immunol. Ser. 1989. - Vol. 46. - P. 477 - 507.

229. Serum alpha 1 antitrypsin and pulmonary emphysema / A. Shahid, A.A. Siddiqui, S. Aziz et al // J. Рак. Med. Assoc. 1996.- Vol. 46, №5,- P. 102106.

230. Serum alpha-1-antitrypsin concentration during normal and diabetic pregnancy / B. Lisowka-Myiak, C. Sytowicz, B. Wolf et al. // Eur. J. Gynecol. Reprod. Biol. 2001.- Vol. 99, №11.- P. 53 - 56.

231. Serum elastase activity is elevated in migraine / C. Tzourio, M. El Amrani, L. Robert, A. Alperovitch // Ann. Neurol. 2000. - Vol. 47, N5. - P. 648 -651.

232. Sharp J.L. The current of ai-antitrypsin, a protease inhibitor, in gastrointestinal disease / J.L. Sharp // J. Gastroenterol. 1986. - Vol.70, №4. -P.611 -621.

233. Schaikwijk J. Skin-derived antileikoprotease/ J. Schaikwijk// Br.J.Dermatol.-1990.-Vol. 122, N 5, P.631-641.

234. Starcher B. Inhibition of neutrophil elastese suppreses the development of skin tumors / B. Starcher, P. O'Neal, R.D. Grastein // J. Invest. Dermatol. -1996.-Vol.107, N2.-P. 159- 163.

235. Statisaitis D. Does alpha-1-proteinase inhibitor play a protective role in coronary atherosclerosis / D. Statisaitis, V. Basys, R. Benetis // Med. Sci .Monit. 2001. -Vol.7, N4.- P. 701-711.

236. Streit V. Antiprotease activiti in urine of patients with inflammatory skin disorders// V. Streit, O. Wiedow // J.invest. dermatol.-1995.-105(4).-P.562-566.

237. Sun L. Kallikrein stimulates arachidonuc acid release and production of prostoglandins from endocrine thymic epithelial cells / L. Sun, A. Piltct, J. Hayashy//J. Biochem. -1989. Vol .258, N2. - P. 351 - 355.

238. Teronen O. Human neutrophill collagenase MMP-8 in peri-implantant suleus fluid and its inhibition by clodronate. / O. Teronen, Y. Konttinen // J. Dennol. Reseach. 1997. - Vol.76. - P. 1529 - 1537.

239. Turk В. Bovine Stefm С, a~New Member of the Stefm family/ B. Turk, I.Krisaj, B.Kralj// J. Biol. Chem.-1993.-V.268,N 10.-P.7323-7329.

240. Vaalomo M. Enhanced expression of human metalloelastase in cutaneus granulemas and macrofhage migration / M. Vaalomo, A.L. Kazineiemi, S.D. Shapiro //J. Invest Dermatol. 1999. - Vol. 112, N4. - P. 499 - 505.

241. Van Leuven F.V. Human a2 Macroglobulin: structure and function / F.V. Van Leuven // Trends. Biochem. Sci. 1982. - Vol. 52. - P. 185 - 187.

242. Vitto V.J.Salivary collagenase. Origin, characteristics and relationship to periodontal health. / V.J. Vitto, K. Suomalainen, T. Sorsa // J. Periodontal. Res. 1990. - Vol. 25, N3. - P. 135 - 142.

243. Webb E.C. Enzym Nomenclature. / E.C. Webb. N.Y., 1984.

244. Wiedow O. Antileikoprotease in human skin: an antibiotik peptide constitutively prodused by keratinocytes / O. Wiedow, J. Harder, J. Bartels // Biohem. Biophys. Res. Commun. 1998. - Vol. 248, N3. - P. 904 - 909.

245. Wiedow O. Lesional elastase activity psoriasis, atopic dermatitis and contact dermatitis/ O. Wiedow, F.Wiese, V. Streit// J. Invest. Dermatol.-1992.-Vol.99,N3.-P.306-309.

246. Ying Q. Kinetics of the inhibition of human leukocyte elastase by elafin a 6-kilodalton elastase-specific inhibitor from human skin / Q. Ying, S. Simon // Biochemistry. 1993. - Vol. 32, N7. - P.' 1866 - 1874.

247. Yoshimura Y. The affects of bradikinin on ovulation and prostaglandin production / Y. Yoshimura, L. Espey // Endocrinology. 1988. - Vol.122, № 6. - P. 2540 - 2546.

248. Zuccollo A. The involvement of kallikrein-kinin system in diabetes type I (insulitis) / A. Zuccollo, M. Navarro, M. Frontera // Immunopharmacology. -1999. Vol. 45, №12. - P. 69 - 74.