Активность альдегиддегидрогеназы печени и эритроцитов крыс в норме и при ожоговой токсемии

Соловьева, Анна Геннадьевна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Активность альдегиддегидрогеназы печени и эритроцитов крыс в норме и при ожоговой токсемии
ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Активность альдегиддегидрогеназы печени и эритроцитов крыс в норме и при ожоговой токсемии"

На правах рукописи

СОЛОВЬЕВА Айн« Геннадьевна

АКТИВНОСТЬ АЛЬДЕГИДДЕГИДРОГЕНАЗЫ ПЕЧЕНИ И ЭРИТРОЦИТОВ КРЫС В НОРМЕ И ПРИ ОЖОГОВОЙ ТОКСЕМИИ

03.00.13. - Физиология 03.00.04. - Биохимия

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Нижний Новгород 2005

Работа выполнена в Нижегородском государственном университете им. Н.И.Лобачевского и Нижегородском научно-исследовательском институте травматологии и ортопедии МЗ РФ

Научные руководители:

доктор биологических наук, профессор В.Н.Крылов доктор медицинских наук Ю.В.Зимин

Официальные оппоненты:

доктор биологических наук, профессор В.В.Новиков доктор медицинских наук, профессор В.П.Смирнов

Ведущая организация: Нижегородская государственная медицинская академия

Защита состоится " МаЛтСО 2005г. в тУ^часов на заседании диссертационного совета ДО 12. ^бб. 15 Нижегородского государственного университета им. Н.И.Лобачевского по адресу: 603950, Нижний Новгород, пр. Гагарина, 23.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Нижегородского государственного университета им. Н.И.Лобачевского по адресу: 603950, Нижний Новгород, пр. Гагарина, 23.

Автореферат разослан "ЛЗ" 2005г.

Ученый секретарь диссертационного совета, кандидат биологических наук,

доцент

А.С. Корягин

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность темы

Проблема термических повреждений занимает одно из центральных мест в хирургии и травматологии, оставаясь актуальной и по сей день. Ведущим звеном в патогенезе ожоговой болезни является эндогенная интоксикация, которая развивается с первых часов после термической травмы и сопровождает все без исключения стадии и периоды заболевания, во многом определяя его тяжесть и исход (Уао, 1993; Нои е1 а1., 1994; Козинец и др., 2004).

Эндогенная интоксикация - сложный многокомпонентный процесс, обусловленный патологической активностью ряда эндогенных продуктов, в котором действуют источник токсемии, биологические барьеры, предупреждающие проникновение токсинов за пределы источника, механизмы переноса токсичных продуктов к "мишеням" через кровь и лимфу, а также механизмы депонирования, нейтрализации и выделения токсинов (Марусянов и др., 1995). Суть эндогенной интоксикации состоит в накоплении в крови токсичных биологически активных компонентов в результате усиления катаболиче-ских процессов при снижении эндогенной детоксикации (Копытова и др., 1991). В частности, увеличивается содержание таких промежуточных метаболитов как альдегиды (Малахова, 2000). Альдегиды в повышенных концентрациях вызывают ряд отрицательных эффектов. Они нарушают структуру и функции плазматических и внутриклеточных мембран, выступают в качестве ингибиторов активности многих ферментов мембран и сыворотки крови, в результате прямого взаимодействия модифицируют белки крови и тканей, вызывают внутри- и межмолекулярные сшивки полипептидов(Божко, 1990). Токсичные среднецепочечные альдегиды: алканали, алкенали и 4-гидроксиалкенали генерализуются в течение липидной пероксидации, которая усиливается при термической травме (ЯекИагс! е1 а!., 2000; То\УП5еш1 е( а1., 2001).

Основная роль в утилизации альдегидов принадлежит альдегиддегид-рогеназе (АлДГ) (Сатановкая, 1990; ¥овЫ(1а е( а1., 1998). Многие ткани млекопитающих содержат АлДГ: печень, почка, матка, надпочечники, тонкий кишечник, мозг, сердце, жировая ткань, легкие (Груздева и др., 1991; Кйвоп Ке, 1996). Активность фермента обнаружена в митохондриях, цитозоле и микросомах. Наибольшая активность фермента характерна для клеток печени. Нарушение функций печени является исключительно важным звеном в патогенезе ожоговой токсемии, поскольку печень является главным детокси-цирующим органом. Известно, что сразу после термической травмы печень подвергается влиянию токсических продуктов на фоне резко сниженной ее антитоксической функции (Федоров и др., 1985).

Наряду с печенью альдегиддегидрогеназной активностью обладает также и кровь (Матвеева и др., 1991). Поскольку эритроциты более доступны для исследования, чем печень, определение активности АлДГ в эритроцитах в ранние сроки после термической травмы может являться важным прогно-

РОС. НАЦИОНАЛЬНАЯ 6И6.Я "'»ТЕКЛ С Петербург

аоо(>к_

стическим признаком и служить дополнительным критерием в оценке синдрома эндогенной интоксикации.

Однако работы по изучению АлДГ печени и эритроцитов при термической травме в проанализированной литературе отсутствуют. Таким образом, исследование активности АлДГ в печени и крови является актуальным в решении проблемы эндогенной интоксикации при ожоге.

В последнее время в медицине при лечении ряда заболеваний, в том числе и ожоговой травмы, широко используют низкоинтенсивные электромагнитные излучения (ЭМИ) (Герасимова, 2000). В связи с этим представляет интерес исследование их влияния на активность АлДГ при ожогах. Наряду с физиотерапией при ожогах также применяют различные химические вещества, способные связывать токсины. В этом плане привлекает внимание глицин, однако его роль в метаболизме альдегидов и влияние на активность АлДГ не изучены.

Цель и задачи исследования

Целью данной работы являлось исследование активности АлДГ в ранний период после термической травмы и воздействия низкоинтенсивных ЭМИ и глицина на исследуемый фермент.

В работе были поставлены следующие задачи:

1 .Исследовать активность и кинетические свойства альдегиддегидрогеназы печени и эритроцитов крыс в ранний период после термической травмы (1 час).

2.Изучить влияние молекул средней массы (МСМ), полученных из обожженной печени (МСМоп) на активность и кинетические свойства альде-гиддегидрогеназы в опытах in vitro и при внутрибрюшинном введении крысам МСМоп.

3. Исследовать активность альдегиддегидрогеназы эритроцитов в крови больных с ожогами.

4. Определить активность и кинетические свойства альдегиддегидрогеназы печени и эритроцитов крыс с термической травмой после воздействия низкоинтенсивных электромагнитных излучений в опытах in vitro и in vivo.

5. Изучить влияние глицина, введенного до и после термической травмы, на активность альдегиддегидрогеназы в печени и эритроцитах крови крыс.

Научная новизна

Установлено, что термическая травма сопровождается изменением активности и кинетических свойств АлДГ наряду со снижением активности ЛДГ и АДГ в различных фракциях гепатоцитов и эритроцитах. Выявлено, что лактат оказывает положительное, а пируват отрицательное влияние на активность АлДГ.

Показано, что термическая травма вызывает снижение активности и каталитической эффективности АлДГ в эритроцитах крови ожоговых больных.

Впервые установлено ингибирующее действие МСМ обожженной печени на активность АлДГ в субклеточных фракциях печени и эритроцитах. Ожоговые токсины, образующиеся при термической травме и входящие в состав МСМ, связываясь с сульфгидрильными группами активного центра АлДГ, снижают ее активность, что доказано в опытах с тетурамом.

Разработан способ диагностики эндогенной интоксикации при ожоге в эксперименте, заключающийся в том, что в гемолизате эритроцитов определяют активность альдегиддегидрогеназы и, если ее активность ниже нормы, делают вывод о токсичности крови.

Показано, что облучение in vitro субклеточных фракций печени крыс с ожогом ППЛ и красным светом, а также введение крысам облученной эрит-роцитарной массы (ЭМ) приводит к увеличению активности АлДГ. Установлено, что излучение ППЛ в опытах in vitro и in vivo вызывает повышение каталитической эффективности и сродства АлДГ к субстрату.

Выявлено протекторное и корригирующее действие глицина на активность АлДГ при термической травме в эксперименте.

Теоретическая и практическая значимость работы

Полученные данные об изменении активности и кинетических свойств АлДГ углубляют представления о роли ферментов биотрансформации в развитии эндогенной интоксикации при ожогах. Исследование активности лак-татдегидрогеназы (ЛДГ) и алкогольдегидрогеназы (АДГ) позволяет оценить их влияние на активность АлДГ и метаболизм альдегидов. Полученные результаты свидетельствуют, что одной из причин, приводящих к снижению активности АлДГ, может быть повышение уровня МСМ при ожоге.

Определение активности АлДГ в ранний период после термической травмы имеет важное диагностическое значение и может быть использовано как дополнительный тест для лабораторной диагностики эндогенной интоксикации.

На основе полученных данных изменения активности АлДГ эритроцитов крыс разработан способ оценки эндогенной интоксикации при термической травме в эксперименте, который может найти применение в экспериментальной биологии и медицине для оценки степени тяжести эндотоксемии.

Исследование влияния излучения красного света и полупроводникового лазера (ППЛ) выявило положительный эффект их воздействия на метаболизм ксенобиотиков и может найти применение для восстановления активности АлДГ при лечении ожоговых больных. Установленное защитное действие глицина на активность АлДГ позволяет рекомендовать использование глицина в качестве вспомогательного средства при оказании помощи тяже-лообожженным.

Основные положения, выносимые на защиту

Термическая травма сопровождается снижением активности и изменением кинетических показателей АлДГ. При ожоге уменьшается активность не только АлДГ, но и ЛДГ и АДГ в различных фракциях гепатоцитов и эритроцитах. В опытах in vitro установлено, что лактат оказывает положительное, а пируват - отрицательное влияние на активность АлДГ. В опытах in vitro и in vivo показано ингибирующее действие МСМ, выделенных из обожженной печени, на активность АлДГ.

В исследованиях in vivo in и vitro при ожоговой болезни выявлено, что излучение низкоинтенсивного красного света и полупроводникового лазера способствует увеличению активности АлДГ экспериментальных животных.

Показано, что глицин оказывает защитное действие на каталитические свойства АлДГ печени и эритроцитов крыс при ожоге в эксперименте.

Апробация работы

Основные положения диссертации доложены на Международном конгрессе «Комбустиология на рубеже веков» (Москва, 2000), Всероссийской научно-практической конференции «Новые технологии в медицине» (Саратов, 2001), Всероссийской конференции «Проблемы медицинской энзимоло-гии. Современные технологии лабораторной диагностики нового столетия» (Москва, 2002), VI Международном медицинском конгрессе студентов и молодых ученых (Тернополь, 2002), Российской научно-практической конференции с международным участием «Клинические и теоретические аспекты острой и хронической боли» (Н.Новгород, 2003), VIII Всероссийская научно-практической конференции «Проблемы лечения тяжелой термической травмы» (Н.Новгород, 2004).

По теме диссертации опубликовано 13 печатных работ, получен патент на изобретение «Способ диагностики эндогенной интоксикации при ожогах в эксперименте» (№ 2217753 от 27.11.2003).

Структура и объем диссертации

Диссертация состоит из введения, 3 глав: обзора литературы, материалов и методов исследования, результатов и их обсуждения; заключения, выводов и списка литературы.

Текст диссертации изложен на_страницах машинописного текста,

содержит_таблиц и_рисунков. Библиографический указатель включает

_источников, из которых_иностранных.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Эксперименты 'были проведены на 284 белых нелинейных крысах-самцах массой 180-200 г. Все животные под тиопенталовым наркозом (30 мг/кг массы) получали ожог пламенем на тщательно освобожденных от шерсти 10%-ах поверхности кожи, экспозиция - 45с. Через час после ожога печень и кровь забирали для исследований. Активность АлДГ определяли в

эритроцитах, гомогенате и субклеточных фракциях печени (цитозоле, Ml и М2-митохондриях). Из литературы известно о гетерогенности митохондрий по морфологии, плотности, участии в апоптозе клетки и старении. В животной клетке одновременно присутствуют «молодые» - диаметром менее 1 мкм (Ml) и «зрелые» - диаметром более 1 мкм (М2) митохондрии. Митохондрии разного размера обладают сходством по таким показателям, как интенсивность дыхания, состав дегидрогеназ, фосфорилирование АДФ, состав белков, что свидетельствует о тесном родстве этих органелл. В то же время, митохондрии разного размера отличаются по NADH-дегидрогеназной и фосфори-лирующей активности, по содержанию нескольких белков, что отражает процесс созревания митохондрий (Шишмаков и др., 2004). Ml и М2-митохондрии получали путем дифференциального центрифугирования в градиенте плотности сахарозы.

Раствор глицина в дозе 250 мг/кг массы вводили крысам внутрибрю-шинно (Бунятян и др., 1999).

В качестве источников ЭМИ использовали полупроводниковый лазер Микрон С-01 "Сполох" (А. = 890 нм, мощность - 0,5 мВт) и источник на основе двухслойных полимерных оптоволокон с люминесцентными добавками в керне (X = 600-800 нм с максимумом 630 нм, интенсивность излучения - 1,5 мВт/см2).

В опытах in vitro гомогенат и субклеточные фракции, полученные из печени обожженных крыс, облучали 1 мин в камере для экстракорпорального облучения. В опытах in vivo животным с ожогом через 1 час после термотравмы вводили донорскую эритроцитарную массу (2,5 мг/кг), предварительно облученную (время экспозиции - 1 мин). Контролем служили животные с ожогом, которым через час после термотравмы вводили необлученную донорскую эритроцитарную массу в той же дозе.

Фракцию МСМ получали из гомогената обожженной in vitro печени по М.Я.Малаховой (1995). Контроль представлен фракцией МСМ, выделенной аналогично из необожженной печени крыс (МСМнп). Полученные МСМоп и МСМнп вводили интактным крысам внутрибрюшинно в дозе 5 мл/кг массы. Через 1 час после введения животных забивали путем декапитации. В опытах in vitro МСМ, полученные вышеописанным способом, вводили непосредственно в среду для определения активности ЛДГ, АДГ и АлДГ в количестве 0,1 мл на пробу объемом 3 мл.

Универсальный ингибитор активности апьдегиддегидрогеназы тетурам вводили внутрибрюшинно в дозе 0,2 г/кг массы тела интактным крысам и крысам, получившим термическую травму (по Волошину и др., 1991).

В условиях in vitro изучалось влияние лактата Na (0,45М) и пирувата Na (0,18М) на активность АлДГ интактных крыс и крыс с термической травмой. Данные вещества вносили непосредственно в среду для определения активности АлДГ (0,1 мл на пробу объемом 3 мл).

Кроме того исследования in vitro проводили на 30 образцах крови больных, находящихся на лечении в Российском ожоговом центре ГУ ННИИТО МЗ РФ. Кровь больных с площадью поражения от 20 до 60% по-

верхности тела исследовали сразу после поступления. Для определений использовали гемолизат эритроцитов в дистиллированной воде в соотношении 1:40.

В работе были использованы следующие методы исследования: приготовление гомогенатов печени и выделение субклеточных фракций (Ещенко, 1982; Финдлей, Эванз,1990); определение активности апьдегиддегидрогеназы (ацетальдегид:НАД-оксидоредуктаза; КФ1.2.1.3.) (Кершенгольц, Серкина (1981); лактатдегидрогеназы (Ь-лактат:НАД-оксидоредуктаза; КФ 1.1.1.27.) с использованием в качестве субстатов молочной и пировиноградной кислот (Кочетов, 1980); алкогольдегидрогеназы (алкоголь:НАД-оксидоредуктаза; КФ 1.1.1.1.) с использованием в качестве субстрата ацетапьдегида (Koivusalo et al., 1989); определение кинетических характеристик ферментов (Kt - время полупревращения субстрата для ферментативной реакции, мин; Vmax -максимальная скорость накопления продукта реакции при полном расходовании субстрата, мкмоль НАДН/мин; Vmax/Kt - коэффициент каталитической эффективности ферментативной реакции, мкмоль НАДН/мин2) (Kostir, 1985), определение концентрации белка по методу Лоури в модификации (Coakley et al., 1978; Dawson et al., 1984).

Результаты исследований обрабатывали с использованием t-критерия Стьюдента, рассчитывали коэффициент корреляции. Обработку данных осуществляли на персональном компьютере с помощью программы BIOSTAT. При расчете t-критерия Стьюдента применяли поправку Бонферрони, позволяющую устранить ошибку первого рода, возникающую при сравнении более чем двух выборок данным методом (Гланц, 1998).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Активность и кинетические свойства АлДГ, ЛДГ, АДГ печени и эритроцитов крыс при термической травме

В проведенных опытах было показано, что основная активность АлДГ интактных животных обнаруживается в цитоплазматической фракции печени, в которой сосредоточено 71% суммарной активности АлДГ, в М1-митохондриях - 10%, в М2-митоходриях 19%. Распределение активности АлДГ у животных с термической травмой аналогично распределению активности альдегиддегидрогеназы в печени интактных крыс (табл. 1) на фоне более низкой общей активности во всех фракциях печени.

При ожоге падает не только общая, но и удельная активность фермента, что видно из таблицы 1. Удельная активность АлДГ в цитозоле и митохондриях печени крыс с ожогом достоверно уменьшается в 2 раза по сравнению с интактными животными. Уменьшение активности АлДГ при термической травме сопровождается снижением каталитической эффективности (Vmax/Kt) АлДГ в цитозоле в 2 раза, в Ml и М2-митохондриях также в 2 раза, в гомогенате в 1,4 раза.

Таблица 1

Активность и кинетические показатели АлДГ, ЛДГ и АДГ печени крыс в норме и при ожоге (удельная акт-ть - нмоль НАДН/минхмг белка; общая

акт-ть - мкмоль НАДН/минхГ ткани; Ю - мин; Утах/Ю - мкмоль НАДН/мин2)__

Фракции клеток печени Интактные животные. п=21 животные с ожогом, п=10

АлДГ ЛДГпр ЛДГ обр АДГобр АлДГ ЛДГпр ЛДГобр АДГобр

Гомог енат Общая акт-ть 6.97 +0,28 65,39 ±0,51 164,89 ±4,94 27,72 ±2,84 4,45 ±0,12 38,56 ±2,38 34,56 ±0,36 18,11 ±0,34

Удель ная акт-ть 65,47 17,07 669,15 ±35.23 1739,70 ±50,59 260,54 ±10,89 31,81 ±0,85» 286,41 ±23,145 247,94 ±2,225 129.35 ±2,175

К( 8,54 +2,36 1,76 +0,04 0,60 +0,08 2,17 +0,18 7,91 +1,40* 1,10 ±0,04* 0,18 +0,02* 0,65 ±0,045

Ут/К1 0,92 +0,08 9,61 ±0,13 34,90 ±4,18 4,40 ±0,44 0,68 ±0,03* 6,56 +0,36 5 17.20 ±1,10« 3.91 ±0,19

Цитоп лани, фракция Общая кт-ть 4,14 ±0,25 27,15 ±1,16 110,41 ±4,47 21,70 ±1,45 2,61 ±0,00 26,37 ±2,80 21,76 +0.43 11,07 ±2.08

Удель ная акт-ть 76,70 ±4,81 500,69 ±22,36 2030,97 ±81,11 508,1 1 ±37,71 52,65 ±4,36 470,5 ±31,52 1312,68 +65,07« 193.13 128,96*

Ю 3,16 +0,66 0,65 +0,02 19,11 +5,37 5,37 Л,63 2,58 +0,01 0,66 +0,03 2,58 +1.57« 14,48 +2.03*

Уга/К1 5,02 +0,30 24,77 +0,85 18,17 + 1,22 4,09 +0,62 2,37 + 1,15* 24,05 +1,99 13.67 +1,72« 1,18 +0,18*

М1 Общая акт-ть 0,57 +0,04 1,86 ±0,09 5,22 ±0,35 2,38 ±0,17 0,23 ±0,04 1,28 +0,09 4,49 +0,90 1.17 ±0,09

Удель ная акт-ть 127,42 ±17,43 395,42 ±32,85 1060,77 ±61.68 501,34 +52 82 53,95 +8,99» 356,06 +44 86 10744 2 + 116,20 246,02 ±45,05

К( 5,79 + 1,12 4,30 +1.42 6,16 +1,58 2,13 +0,51 13,66 +4.77» 5,27 +2.29 5,65 + 1,05 2,09 +0,12

Уга/К1 2,00 +0,15 4,41 +0,28 1,56 +0,11 0,81 +0,06 1.10 +0,11* 2,88 +0,32* 1,32 41.31 0.34 +0,02*

М2 Общая акт-ть 1,09 ±0,08 2,75 ±0,16 8.92 ±0,65 2,21 ±0,11 0,63 ±0.07 1.21 ±0,20 6,57 +0.08 1,76 ±0.30

Удель ная акт-ть 47,51 +2,35 119,02 ±4,99 391,26 ±27.18 100,01 ±5,57 25,98 ±3,28* 41,62 +9,09* 226,63 ±32.365 64,27 ±4.64«

К1 8,77 ±1,37 1,78 +0,18 17,89 ±0,22 9,42 ±1,32 3,81 ±0.46* 5,30 +0,45« 4,53 +0.18* 2,06 ±0,36

Уш/К1 3,12 +0,25 6,58 ±0,39 2,46 ±9,25 0,88 ±0,16 1,57 ±0,30» 2,66 +0,675 1,97 +0,32 0.55 ±0,01

Примечание: * - различия достоверны по сравнению с интактными жи-

вотными (р< 0,05); (* - р <0,01)

Из полученных результатов видно, что основная активность АлДГ митохондрий интактных животных и животных с ожогом обнаруживается в

«зрелых» митохондриях. Общая активность АлДГ в М2-митохондриях в 2 раза выше, чем в М1-митохондриях. Наряду с этим основная удельная активность АлДГ приходится на «молодые» митохондрии, активность которых в 2 раза больше активности АлДГ «зрелых» митохондрий. Это характерно и для других исследуемых оксидоредуктаз: ЛДГ и АДГ (табл. 1). Д.А. Шишмаков и др. (2004) в своей работе также указывают на более высокую активность мелких частиц и объясняют это тем фактом, что диаметр М1-митохондрий в среднем в несколько раз меньше, чем М2-митохондрий, следовательно, суммарная поверхность мембран у этих частиц больше, чем у М2-митохондрий (при одинаковой концентрации по белку), что должно приводить к большей удельной активности ферментов.

В эритроцитах крыс активность АлДГ при термической травме снижается в 16 раз по сравнению с интактными животными при значительно более низких абсолютных значениях удельной активности фермента (табл. 2). Наибольшее падение активности АлДГ в эритроцитах по сравнению с гепатоци-тами, обусловлено, вероятно, тем, что кровь является той тканью, которая в первую очередь подвергается действию токсических веществ, возникших в очаге поражения. Установлено, что АлДГ эритроцитов крови интактных крыс по своим кинетическим показателям сходна с АлДГ М1-митохондрий печени.

Таблица2

Активность и кинетические показатели АлДГ и ЛДГ эритроцитов крыс

в норме и при ожоге

Показатели Интактные животные, п=20 Животные с ожогом, п=10

АлДГ ЛДГпр ЛДГобр АлДГ ЛДГпр ЛДГобр

Удельная акг-ть, нмоль НАДН/мин*мг белка 12,31 ±1,46 27,76 ±1,10 174,78 ±21,99 0,77 ±0,02* 23,42 ±1,45 78,37 ±7,43*

К1, мин 6,03 ±1,19 4,59 ±0,42 17,26 ±1,17 0,96 ±0,01* 5,56 ±0,52 3,87 ±0,61*

Углах, мкмоль-ПАДН/мин 8,37 ±0,56 6,42 ±0,88 20,47 ±1,35 1,42 ±0,01* 7,43 ±0,11 1,16 ±0,04*

Ушах/К1, мкмоль ПАДН/мии2 1,53 ±0,12 1,59 ±0,09 1,32 ±0,25 1,49 ±0,01 1,38 ±0,13 0,49 ±0,02*

Примечание: * - различия достоверны по сравнению с интактными животными (р< 0,05)

В метаболизме альдегидов помимо АлДГ может участвовать и АДГ. В физиологических условиях АДГ образует, а не потребляет эндогенный этанол и таким образом активно регулирует уровень эндогенного ацетальдегида. В значительной мере эта ситуация напоминает факт известный для ЛДГ и двух ее субстратов пирувата и лактата. Количество пирувата в тканях на 2-3

порядка ниже, чем лактата, а сам пируват, подобно ацетапьдегиду, легко вступает в различные биохимические реакции. АДГ катализирует реакции восстановления альдегидов до спиртов в присутствии НАДН. Одним из поставщиков последнего является гликолиз. В регуляции анаэробного и аэробного гликолиза участвует ЛДГ, находящаяся на развилке путей метаболизма углеводов. Обратимость лактатдегидрогеназной реакции и высокая активность фермента позволяют паре субстратов лактат-пируват играть важную роль в контроле над отношением окисленных и восстановленных форм НАД в клетке. Таким образом, ЛДГ и АДГ оказывают существенное влияние на окислительно-восстановительный потенциал клетки, регулируя внутриклеточное соотношение НАД/НАДН, от которого зависит и активность АлДГ. Поэтому наряду с определением активности АлДГ, нами исследовалась активность ЛДГ и АДГ.

Кроме того, естественные продукты лактатдегидрогеназной реакции, лактат и пируват, в аномально высоких концентрациях считаются компонентами МСМ (Корячкин, Страшное, 2002). Нами установлено, что при ожоге происходит снижение активности не только АлДГ, но и ЛДГ как в прямой, так и в обратной реакции и АДГ в разных фракциях гепатоцитов и эритроцитах (табл. 1,2). Проведен корреляционный анализ между величинами активности АлДГ и ЛДГ. При термической травме существует высокая степень положительной корреляции между активностями ЛДГ в прямой реакции и АлДГ в М2-митохондриальной фракции (г = 0,995; р< 0,0001). В опытах in vitro выявлено, что лактат оказывает положительное, а пируват - отрицательное влияние на активность АлДГ печени и эритроцитов интактных (рис.1) и ожоговых крыс (рис.2).

541 34

□ ЛлД1 ■ ЛлДГлактат РЛлД! мир)ваг

гомогенат цитоюль

М2

Рис. I. Влияние лактата, пирувата в опытах in vitro на активность АлДГ печени интактных крыс: * - различия достоверны по сравнению с исходной активностью АлДГ (р <0,05)

□ АлДГ

■ АлДГлактат

□ АлДГпируват

Рис. 2. Влияние лактата, пирувата в опытах in vitro на активность АлДГ печени крыс с термической травмой: ** - различия достоверны по сравнению с интактными животными (р <0,05); * - различия достоверны по сравнению с исходной активностью АлДГ (р <0,05)

Однако снижение активности ЛДГ в прямой и обратной реакциях при термической травме сопровождается увеличением соотношения активностей ЛДГ в прямой реакции к активности ЛДГ в обратной реакции в гомогенате и цитозоле печени, а также в эритроцитах, что приводит к повышению содержания пирувата и уменьшению количества НАД, который расходуется в прямой лактатдегидрогеназной реакции. Увеличение количества пирувата и снижение НАД, являющегося коферментом для АлДГ, отрицательно сказываются на активности АлДГ.

В литературе отмечено, что при интоксикации уменьшается отношение активностей АлДГ/АДГ наряду с изменениями каталитических параметров ферментов и изоферментного спектра АлДГ, что определяет увеличение содержания в крови ацетальдегида (Кершенгольц и др., 1985).

Активность и кинетические свойства АлДГ печени и эритроцитов крыс при введении МСМ, выделенных из обожженной in vitro печени

Относительно причин уменьшения активности АлДГ печени и крови при патологии высказываются различные предположения, сводящиеся к инактивации ферментов вследствие деградации клеточных структур и появлению биогенных ингибиторов ферментов (Кершенгольц и др.. 1985). К числу последних, вероятно, можно отнести молекулы средней массы (МСМ), образующиеся в организме при ожоговой интоксикации. Чтобы проверить это предположение нами проведена серия экспериментов, в которой мы ис-

следовали влияние МСМ, полученных из обожженной печени, на активность АлДГ.

В модельных экспериментах нами было показано, что введение МСМоп вызывает снижение активности АлДГ в гомогенате, цитоплазмати-ческой, М1 и М2-митохондриальных фракциях. Введение же крысам внутри-брюшинно МСМнп приводит к увеличению активности АлДГ в большинстве фракций печени (табл. 3). Введение МСМоп вызывает снижение активности АлДГ в эритроцитах на 87% по сравнению с введением МСМнп, и на 85% по сравнению с контролем.

Таблица 3

Активность АлДГ в печени интактных крыс при введении МСМ (нмоль __НАДН/минхмг белка) _

Фракции клеток печени Контроль п=10 МСМнп п=10 МСМоп п=10

Гомогенат 67,32+1,57 89,05+2,07** 64,97+1,28*

Цитозоль 101,85+2,93 94,73+4,39 52,17+3,17**/*

М1 110,03+4,10 169,95+9,93** 84,47+6,04*

М2 62,12+4,60 68,54+3,29 14,50+1,94**/*

Примечания: * - различия достоверны по сравнению с МСМнп (р <0,05); ** - различия достоверны по сравнению с контролем (интактные животные + физиол. р-р);

Таким образом, нами продемонстрирована возможность экспериментального моделирования начального периода ожоговой болезни. По данным литературы токсичность экстрактов обожженных органов связана с действием ряда веществ, присутствующих в МСМ. Одни из них имеются в МСМоп и МСМнп. Другие - собственно ожоговые токсины - возникают в результате термического воздействия, обладают чрезвычайно высокой активностью и определяют качественное отличие обожженной печени от нормальной (Мовшев, Недошивина, 1974; Федоров и др., 1985). Образовавшийся в обожженном организме или введенный извне ожоговый токсин вызывает не только собственный токсический эффект, но и способствует образованию или проявлению активности токсинов иной природы. Возможно, именно этим объясняется двухфазный характер токсической активности сыворотки после ожоговой травмы, выявленный H.A. Федоровым и др. (1985).

Следующим этапом нашего исследования явилось выяснение возможного механизма действия ожоговых токсинов на активность АлДГ. С этой целью нами проведены опыты с тетурамом, ингибитором АлДГ. Предварительное введение тетурама перед ожогом сопровождалось повышением ак-

тивности АлДГ по сравнению с введением тетурама интактным крысам (до 44,30+4,53 нмоль/мин на мг белка), но осталась достоверно ниже активно-стиАлДГ по сравнению с контрольной группой животных на 34%. Тетурам, как полагают некоторые авторы (Кораблев и др., 1981; Божко, Хоменко, 1988; Волошин и др., 1991), блокирует сульфгидрильные группы ферментов. Как известно, активный центр АлДГ содержит 2 сульфгидрильные группы, с которыми может связываться альдегид с образованием тиополуацетапей (Метаболические..., 1988).

В наших опытах тетурам действительно снижает активность АлДГ. Более низкий эффект ингибирующего воздействия тетурама на активность АлДГ при термической травме мы объясняем повышением при ожоге концентрации соединений, взаимодействующих с сульфгидрильными группами фермента. К числу токсичных веществ, содержание которых увеличивается при патологии и которые формируют ковалентные связи с SH-группами, относят ареноксиды, образующиеся в ходе биологического окисления ароматических углеводородов, и одновременно активирующие перекисное окисление липидов биологических мембран (Куценко , 2002). Аналогично ареноксидам fia клетки действуют N-оксиды, нитрозамины, гидроксиламины. Действием вышеперечисленных веществ можно объяснить ингибирующее влияние термической травмы на активность альдегиддегидрогеназы.

С другой стороны, препятствовать ингибирующему влиянию тетурама могут низкомолекулярные вещества, образующиеся в организме (аминокислоты, содержащие сульфгидрильные группы - цистеин, цистин и другие соединения). Мы полагаем, что при ожоге повышается содержание веществ, содержащих SH-группы, с более низкой по сравнению с белками молекулярной массой. Сульфгидрильные группы низкомолекулярных веществ легче вступают в реакцию с тетурамом. В результате образующиеся при ожоге и входящие в состав МСМ продукты распада белков нейтрализуют действие тетурама, что в конечном итоге и приводит к снижению его ингибирующего эффекта по отношению к АлДГ.

Таким образом, активность АлДГ снижается под влиянием первичных МСМ, что способствует накоплению вторичных токсинов, промежуточных метаболитов обмена веществ, в том числе альдегидов, вызывая порочный круг развития интоксикации. Поэтому, очевидно, отсутствует ожидаемое повышение активности АлДГ в ответ на увеличение содержания альдегидов.

Активность и кинетические показатели АлДГ эритроцитов крови больных с термической травмой

Выявленные нами изменения активности АлДГ в эритроцитах крови крыс побудили нас исследовать активность фермента в эритроцитах крови больных с термической травмой как возможный показатель развития интоксикации. Полученные результаты свидетельствуют, что термическая травма вызывает достоверное снижение активности АлДГ (на 76%). При ожоге достоверно снижаются максимальная скорость накопления продукта АлДГ-реакции и каталитическая эффективность АлДГ (табл. 4).

Таблица 4

Активность и кинетические показатели АлДГ в эритроцитах крови __здоровых людей и больных с термической травмой_

Показатели Здоровые, п=19 Ожог, п =26

Активность, нмоль НАДН/ми1кмг белка 22,53+3,08 5,34+1,29*

Kt, мин 4,24+0,49 2,67+0,71 *

Vmax, мкмоль НАДН/мин 1,85+0,24 0,74+0,17*

Vmax/Kt, мкмоль НАДН/мин2 0,47+0,04 0,30+0,02*

Примечание: * - различия достоверны по сравнению со здоровыми людьми (р <0,05);

Поскольку от активности АлДГ зависит накопление в крови высокотоксичных альдегидов, то исследование активности АлДГ в ранние периоды после термической травмы может служить дополнительным критерием в оценке степени эндогенной интоксикации у больных с термической травмой.

Влияние низкоинтенсивного лазерного излучения на активность АлДГ печени и эритроцитов крыс с термической травмой

В опытах с ППЛ установлено активирующее воздействие излучения данного источника ЭМИ на активность АлДГ (табл. 5). Облучение ППЛ in vitro субклеточных фракций печени крыс с ожогом способствует увеличению активности и каталитической эффективности альдегиддегидрогеназной реакции. Активность АлДГ после воздействия ППЛ возрастает достоверно в ци-тозоле, Ml и М2-митохондриях печени соответственно на 31%, 95%, 64% и в эритроцитах более чем на 100% по сравнению с активностью АлДГ ожоговых крыс до облучения.

Предполагаемый механизм действия ППЛ заключается в том, что. поглощаясь тканями, излучение ППЛ практически целиком превращается в тепловую энергию молекул. Даже кратковременное повышение колебательных движений под влиянием температуры в критических участках молекулы приведет к ее переводу в новое конформационное состояние с другой реакционной способностью (Бердышев, 1989), вызывая изменение активности ферментов. Тот факт, что низкоинтенсивное лазерное излучение ближней ИК-области спектра вызывает более выраженное повышение активности мем-бранносвязанной формы фермента - митохондриальной АлДГ. очевидно свидетельствует о том, что излучение ППЛ может оказывать не только прямое действие на молекулу АлДГ, но и на структуру мембран органелл, тисни тем самым активность связанных с ними ферментов.

Таблица 5

Изменение активности АлДГ в печени и эритроцитах крыс с термической

травмой под влиянием ППЛ в опытах in vitro (нмоль НАДН/минхмг белка)

Объект, п=10 До облучения (ожог) После облучения ППЛ (ожог)

Гомогенат 31,18+1,35** 29,93±1,08**

Цитозоль 35,51 ±1,49** 46,62±1,53*/**

Ml 82,81±2,05 219,48+9,06*/**

М2 31,39±1,48** 51,48±1,83*

Эритроциты 0,13±0,00** 1,76±0,72*/**

Примечания: * - различия достоверны между группами до и после облучения (р <0,05); ** - различия достоверны по сравнению с интактными животными (р <0,05);

Низкоинтенсивное излучение ППЛ получило широкое применение в клинической практике и успешно используется в лечении ряда заболеваний. Определяющим моментом для исследования активности АлДГ под влиянием ППЛ данной дозы и времени экспозиции послужил тот факт, что излучение ППЛ в дозе 0,5 мВт и при времени экспозиции 1 мин оказывает активирующее влияние на функции тромбоцитов, проявляющееся в увеличении их агре-!ации и усилении ретракции сгустка крови, исходно сниженных по сравнению с нормой. Под влиянием ППЛ нормализуется агрегация эритроцитов: уменьшается повышенная и возрастает пониженная (Кирпичева, 1999).

Аналогично излучению ППЛ, облучение in vitro красным светом субклеточных фракций и эритроцитов крови крыс с ожогом вызывает увеличение активности АлДГ в печени и эритроцитах (табл. 6). Так, после облучения красным светом активность АлДГ достоверно увеличивается в гомогенате на 80%, в М2-митохондриях - на 44%, в Ml-митохондриях и эритроцитах - более чем на 100%.

Положительный эффект красного света на активность АлДГ можно объяснить изменением свободно-радикального баланса. ВК свет оказывает благоприятное влияние на интенсивность липопероксидации, уменьшая содержание вторичных продуктов ПОЛ, что может быть вызвано активацией am иоксидантпой системы (каталаза, церулоплазмин). Повышение активности xaiariaiw при воздействии облучения ВК, отмеченное М.И. Баталовой и Г.Я Левиным (1998), связано вероятнее всего с наличием у данного фермента одного из максимумов поглощения в области 633 нм. Это доказывает предположение Н Ф.Гамалеи (1989) о том, что ряд веществ-акцепторов света разных длин волн может относиться к системам антиоксидантной защиты.

Таким образом, ВК повышает активность ферментов антиоксидантной защиты, вызывая уменьшение перекисного окисления липидов, и как следствие, снижение образования альдегидов, ингибирующих в избыточном количестве активность альдегиддегидрогеназы (В^Жап е( а!., 1998). Проводимое на кафедре медицинской физики и информатики Нижегородской государственной академии изучение эффектов действия данного источника видимого красного света выявило способность красного света предупреждать интенсификацию процессов ПОЛ в миокарде в период реперфузии (Другова и др., 1999). Ранее нами также было показано, что излучение ВК света приводит к снижению количества вторичных продуктов ПОЛ, в частности МДА (Кирпичева, 1999).

Таблица 6

Изменение активности АлДГ в печени и эритроцитах крыс с термической травмой под влиянием излучения красного света (нмоль НАДН/минхмг

белка)

Объект, п=10 До облучения (ожог) После облучения

Гомогенат 30,25+0,75** 54,59+1,18*

Цитозоль 70,23+1,56 68,56+1,48

Ml 26,05+2,89** 80,56+5,73*/**

М2 78,35+1,82** 112,97+2,41*/**

Эритроциты 7,9+1,27** 19,60+1,79*/**

В следующей серии экспериментов исследовали активность (табл. 7) и кинетические свойства АлДГ печени и эритроцитов крыс с ожогом после введения им эритроцитарной массы, облученной in vitro ППЛ и красным светом.

Введение крысам эритроцитарной массы, облученной in vitro ППЛ, вызывает достоверное увеличение активности АлДГ в гомогенате, Ml и М2-митохондриальных фракциях и по сравнению с активностью АлДГ при введении крысам донорской эритроцитарной массы, и по сравнению с активностью АлДГ интактных крыс (с физиологическим раствором). При этом, введение крысам и донорской эритроцитарной массы и эритроцитов, облученных ППЛ, вызывает увеличение активности АлДГ по сравнению с активностью АлДГ при термической травме. Введение эритроцитов, облученных ППЛ, приводит к увеличению активности АлДГ по сравнению с ожогом во всех исследуемых фракциях печени более чем на 100%.

Таблица 7

Влияние облученной in vitro ЭМ на активность АлДГ печени и эритроцитов крыс при ожоге (нмоль НАДН/минхМГ белка, п=12)_

Серии экспе- Гомогенат Цитозоль Ml М2 эритроци-

риментов ты

ГИнгактные 67,32 101,85 110,03 62,12 13,40

ЖИВ01- +1,57 +2,93 +4,10 ±4,60 ±0,70

ные+фи ).р-р

II. Ожот+физ. 32,18 43,37 30,86 25,98 0,77

Р-Р) ±4,18** +6,90** +9,49** ±3,28** +0,03**

III. Ожо! f 60,18 96,01 120,13 64,31 10,71

ЭМ +2,57*** ±6,77*** ±5,40 *** ±2,91*** ±0,80 * * * *

IV. Ожог + 98,52 108,32 ~~ 191,95 110,03 59,52

облученная +4,41 +10,73 +8,60 ±9,95 ±1,31*/**

ППЛЭМ *## * 1* * *

V. Ожог + 68,45 85,38 213,01 125,57 71,71

облученная +8,81*** ±2,08 ±50,58 ±2,29 ±5,45

красным сие- * ** * * * * *

юм ЭМ

Примечания' * - различия достоверны по сравнению с III (р <0,05);

** - различия достоверны по сравнению с I (р <0,05); *** - различия достоверны по сравнению с II (р <0,05);

Введение крысам облученной in vitro ППЛ ЭМ вызывает достоверное увеличение активности АлДГ эритроцитов и по сравнению с активностью АлДГ >ри|роцитов крыс при введении им необлученной ЭМ, и по сравнению с ак1ивнос1ыо АлДГ -»ритроциюв крыс с термической травмой - более, чем на 100%.

Введение крысам ЭМ, облученной in vitro красным светом, вызывает достоверное увеличение активности АлДГ лишь в Ml и М2-митохондриях cooiBciciHciuio на 77% и 95% по сравнению с активностью АлДГ крыс, ко-юрым вводили донорскую ЭМ. По сравнению с активностью АлДГ при термической фавме введение облученной in vitro красным светом ЭМ способст-Byei достоверному увеличению активности фермента во всех исследуемых фракциях: в юмо1снаге - на 99%, в цитозоле - на 97%, в Ml-митохондриях и в М2-ми юхондриях - более чем на 100%.

11о сравнению с термической травмой (+физиол. р-р) введение ОЭМ способствует увеличению активности АлДГ в эритроцитах более чем на 100%.

Наряду с положи 1сльным влиянием лазерного и (лучения на активность АлД1 необходимо учитывать вклад самих эритроцитов в этот процесс. По сравнению с ожогом (-»физиологический раствор) введение крысам донорской «рифоцшарной массы способствует увеличению активности АлДГ в

гомогенате, цитоплазматической, М1 и М2-митохондриальных фракциях соответственно на 87, 88, 98 и 91%, в эритроцитах более чем на 100%. Известно, что переливание донорской эритроцитарной массы оказывает выраженный детоксикационный эффект (Лифшиц, 1987). Так как наряду с детоксика-ционной функцией трансфузия эритроцитов способствует снижению степени сопутствующей ожоговой болезни, гипоксии и гиповолюмии, донорская эритроцитарная масса представляет собой одну из универсальных трансфу-зионных сред (Остапенко, 1995).

Результаты по распределению эритроцитов в растворе верографина свидетельствуют, что излучение ВК света и ППЛ повреждающего действия на эритроциты не оказывает (Кирпичева, 1999), что также отражено в работе Н.П.Александровой и О.И.Сличенко (1994).

Активность и кинетические показатели АлДГ печени и эритроцитов крыс с термической травмой при введении глицина

Показано улучшение каталитических и кинетических свойств АлДГ печени и эритроцитов при введении крысам глицина до ожога. Введение глицина после ожога также вызывает увеличение активности АлДГ в печени (табл. 8) и эритроцитах. Введение глицина и до, и после ожога не влияет на характер распределения активности АлДГ.

Таблица 8

Влияние раствора глицина на активность АлДГ печени крыс (нмоль _НАДН/минхмг белка, п=10)__

Серии экспериментов Гомогенат Цитозоль Ml M2

I. Интактные животные+физ. Р-Р 67,32+1,57 101,85+2,93 110,03+4,10 62,12+4,60

II. Ожог+физ. Р-Р 32,18+4,78 ** 43,37+6,90 ** 30,86+9,49 ** 25,98+3,28 **

III. Интакт-ные+глицин 55,50+4,25 89,85+1,35 *** 216,45+10,84 116,41+26,26 ««у***

IV-Глицин +ОЖОГ 85,95+13,61 87,96+4,20 *** 149,54+5,48 90,57+1,64

V. Ожог +ГЛИЦИН 54,31+4,38 **/***/# 84,23+6,09 *** 134,41+5,61 40,91+2,04 ¡ff

Примечания: * - различия достоверны по сравнению с III (р< 0,05); ** - различия достоверны по сравнению с I (р <0,05); *** - различия достоверны по сравнению с II (р< 0,05); # - различия достоверны по сравнению с IV (р <0,05);

Можно предположить, что повышение активности АлДГ под действием глицина объясняется его способностью к связыванию (конъюгированию) различных токсинов. Известно, что глицин образует устойчивые нетоксичные комплексные соединения - сложные эфиры. Это обусловливает связывание функциональной группы альдегидов. Образовавшиеся соединения (конъюгаты) подвергаются дополнительной ферментативной модификации, т.е. происходит метаболическая трансформация в биогенные вещества, которые включаются в обычный ход метаболизма (Горлова, 2000). Таким образом, выявлено защитное свойство глицина, проявляющееся в повышении активности АлДГ. Активность АлДГ крыс, которым после ожога вводили глицин, в несколько раз меньше активности АлДГ крыс, которым вводили глицин до ожога.

Таким образом, показано протекторное и корригирующее действие глицина на активность АлДГ при термической травме.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В результате проведенных исследований установлено, что термическая гравма вызывает уменьшение общей и удельной активности апьдегиддегид-рогеназы в печени и эритроцитах крыс, что сопровождается снижением каталитической эффективности фермента. Наряду со снижением активности АлДГ в печени и эритроцитах уменьшается активность АДГ и ЛДГ как в прямой, так и в обратной реакциях. Понижение активности ЛДГ при термической травме сопровождается увеличением соотношения активностей ЛДГ в прямой реакции к активности ЛДГ в обратной реакции в гомогенате и цито-золе печени, а также в эритроцитах, что приводит к возрастанию содержания пирувата и снижению количества НАД, который расходуется в прямой лак-гатдегидрогеназной реакции. В опытах in vitro выявлено, что лактат оказывает положительное, а пируват - отрицательное влияние на активность АлДГ печени и эритроцитов интактных и ожоговых крыс.

Полученные результаты свидетельствуют, что термическая травма вызывает достоверное снижение активности и кинетических показателей (максимальная скорость и каталитическая эффективность) АлДГ в эритроцитах людей с термической травмой. Поскольку от активности АлДГ зависит накопление в крови высокотоксичных альдегидов, то исследование активности АлДГ в ранние периоды после термической травмы может служить дополни-юльным критерием в оценке степени эндогенной интоксикации у больных с термической травмой.

Таким образом, один из возможных механизмов развития эндогенной интоксикации при термической травме заключается в снижении активности альдегидде! идрогеназы и как следствие накоплении в организме высокотоксичных альдегидов. Участие АлДГ в развитии эндогенной интоксикации при ожогах можно июбразить в виде схемы (рис. 3).

Термическая травма

-Повреждение ткани ■

{ Гликолиз | АДГобр | Первичные токсины Усиление | ПОЛ

| ЛДГпр, ЛДГобр

~ | лактат/ пируват

I НАД/НА,

1 АлДГ"

е>|

Альдегиды^

| Вторичные токсины —

Рис. 3. Схема участия АлДГ в развитии эндогенной интоксикации при термической травме

Одной из причин, приводящих к снижению активности АлДГ, может быть повышение уровня МСМ при ожоге. Нами предложен способ диагностики эндогенной интоксикации при ожоге в эксперименте, заключающийся в том, что в гемолизате эритроцитов определяют активность альдегиддегид-рогеназы и, если его активность ниже нормы, делают вывод о токсичности крови. Предложены способы повышения активности альдегиддегидрогеназы, включающие в себя облучение биологических жидкостей ЭМИ и введение препарата глицин.

ВЫВОДЫ

1 .Термическая травма приводит к снижению активности АлДГ в печени и эритроцитах экспериментальных животных. Уменьшение активности фермента сопровождается снижением сродства АлДГ к субстрату и каталитической эффективности фермента. Установлено, что АлДГ эритроцитов

крови интактных крыс по кинетическим показателям сходна с АлДГ М1-митохондрий печени.

2.Лактат оказывает положительное, а пируват - отрицательное воздействие на активность АлДГ печени и эритроцитов интактных животных и животных с ожогом. При ожоге происходит снижение активности ЛДГ как в прямой, так и в обратной реакции и АДГ в разных фракциях гепатоцитов и эритроцитах.

3.Разработан способ диагностики эндогенной интоксикации при ожоге в эксперименте, заключающийся в том, что в гемолизате эритроцитов определяют активность альдегиддегидрогеназы и, если его активность ниже нормы, делают вывод о токсичности крови.

4.Введение интактным крысам МСМоп, также как и термическая травма, вызывает снижение активности АлДГ в печени и эритроцитах, изменение кинетических показателей АлДГ-реакции. Введение крысам МСМнп приводит к увеличению активности АлДГ в гомогенате и М1-митохондриях и оставляет без изменений активности АлДГ в цитозоле и М2-митохондриях по сравнению с активность АлДГ в контроле. МСМнп увеличивают сродство АлДГ к субстрату и каталитическую эффективность фермента.

5.Снижение активности АлДГ в печени и эритроцитах при термической травме связано с увеличением соединений, взаимодействующих с SH-(руппами активного центра фермента, что показано в опытах с тетурамом. Предварительное введение блокатора SH-групп тетурама перед ожогом повышает активность и каталитическую эффективность АлДГ по сравнению с введением тетурама интактным животным.

6 В опытах in vitro доказана возможность повышения активности АлДГ при термической травме низкоинтенсивными ЭМИ. Облучение ППЛ субклеточных фракций печени крыс с ожогом приводит к увеличению активности, сродства фермента к субстрату и каталитической эффективности альдегиддегидрогеназы. Облучение красным светом субклеточных фракций и >ритроцитов крови крыс с ожогом вызывает увеличение активности АлДГ на фоне неизменных кинетических параметров альдегиддегидрогеназы.

7. Введение крысам эритроцитарной массы, облученной как ППЛ, так и ВК, ньнывает увеличение активности, каталитической эффективности и сродства АлДГ к субстрату.

8. Показано протекторное и корригирующее действие глицина на активность АлДГ при термической травме в эксперименте.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ А.Г. Соловьевой (Кирпичевой)

I. Кирпичева, А.Г. Влияние лазерного излучения на функциональную активное(ь эритроцитов / А.Г.Кирпичева, М.И. Баталова, Левин // Международный конгресс «Комбустиология на рубеже веков», Москва, 9-12окт. 2000. - Москва, 2000. - С. 48-49.

2. Кирпичева, А.Г. Механизм агрегации тромбоцитов под влиянием лазерного излучения / Л.Г. Кирпичева, М.И. Баталова, Г.Я. Левин // Эфферентная терапия. - 2000. - Т.6, №4. - С. 31 -34.

3. Зимин, Ю.В. Молекулярная диагностика стадий ожоговой болезни / Ю.В. Зимин, А.Г. Кирпичева //Новые технологии в медицине: Материалы Всероссийской научно-практической конференции, Саратов. - Саратов, 2001. -С. 116-117.

4. Зимин, Ю.В. Энзиматический тест в диагностике ожоговой болезни / Ю.В. Зимин, А.Г. Кирпичева // Клиническая лабораторная диагностика. -2002.-№10.-С. 17.

5. Кирпичева, А.Г. Особенности регуляции альдегиддегидрогеназы печени крыс в раннем периоде после термической травмы / А.Г. Кирпичева, Ю.В. Зимин // Труды Всероссийской конференции «Проблемы медицинской энзимологии. Современные технологии лабораторной диагностики нового столетия», Москва, 28-31 мая 2002. - Москва: Авиаиздат, 2002. - С. 121-122.

6. Зимин, Ю.В. Энзимомодулирующее действие надмолекулярной регуляции оксидоредуктаз печени в норме и патологии / Ю.В. Зимин, А.Г. Кирпичева // Труды Всероссийской конференции «Проблемы медицинской энзимологии. Современные технологии лабораторной диагностики нового столетия», Москва, 28-31 мая 2002. - Москва: Авиаиздат, 2002. - С. 97-98.

7. Кирпичева, А.Г. Фоторегулирующее влияние лазерного излучения на активность альдегиддегидрогеназы печени у крыс с термической травмой / А.Г. Кирпичева // VI Международный медицинский конгресс студентов и молодых ученых, Тернополь, 21-23 мая 2002. - Украина, Тернополь, 2002. -С. 232.

8. Кирпичева, А.Г. Альдегиддегидрогеназная система биотрансформации печени крыс в раннем периоде после термической травмы /А.Г. Кирпичева, Ю.В. Зимин // Успехи современного естествознания. - 2003. - №2. - С. 48-52.

9. Кирпичева, А.Г. Изменение активности альдегиддегидрогеназы печени крыс при термической травме /А.Г. Кирпичева, Ю.В. Зимин, В.Н. Крылов // Клинические и теоретические аспекты острой и хронической боли: Тезисы докладов российской научно-практической конференции с международным участием, Н.Новгород. - Н.Новгород, 2003. - С. 12-13.

10. Кирпичева, А.Г. Физико-химический механизм действия излучения полупроводникового лазера на альдегиддегидрогеназу печени крыс с термической травмой /А.Г. Кирпичева, Ю.В. Зимин, В.Н. Крылов //Вестник Нижегородского университета им. Н.И.Лобачевского. Серия Биология. - 2003. -Вып. 1 (6).-С. 37-43.

11. Пат. 2217753 РФ, МПК в 01 N 33/49, 33/68, 33/52. Способ диагностики эндогенной интоксикации при ожогах в эксперименте/ А.Г. Кирпичева, Ю.В. Зимин (РФ). - №2002101351/14; Заявлено 10.01.2002; Опубл. 27.11.2003, Бюл. №33.

12. Кирпичева, А.Г. Протекторное действие глицина на альдегиддегидрогеназу печени крыс при ожоге /А.Г. Кирпичева, Ю.В. Зимин // Проблемы

лечения тяжелой термической травмы: VIII Всероссийская научно-практическая конференция. Приложение к Нижегородскому медицинскому журналу, Н.Новгород, 22-24 сентября 2004. - Н.Новгород, 2004. - С.76-77.

13. Кирпичева, А.Г. Влияние молекул средней массы на альдегидде-гидрогеназную систему печени и эритроцитов в эксперименте /А.Г. Кирпичева, Ю.В. Зимин // Успехи современного естествознания. - 2004. - №4. -С.21-24.

14. Кирпичева, А.Г. Молекулярный механизм действия термической травмы на активность альдегиддегидрогеназы печени животных /А.Г. Кирпичева, Ю.В. Зимин // Успехи современного естествознания. - 2004. - №1. -С. 100-101.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

АлДГ - альдегиддегидрогеназа АДГ - алкогольдегидрогеназа ВК - видимый красный свет ЛДГ - лактатдегидрогеназа МСМ - молекулы средней массы

МСМнгт - молекулы средней массы, полученные из нормальной печени крыс

MCMori - молекулы средней массы, полученные из обожженной печени

ППЛ - полупроводниковый лазер

ОМ - эритроцитарная масса

(ЮМ - облученная эритроцитарная масса

')МИ - электромагнитные излучения

Подписано в печать 2S.01.200S. Формат 60x84 1/16. Бумага офсетная. Печать офсетная. Усл. печ. л. 1. Зак. 84. Тир. 100.

Типография Нижегородского госуниверситета Лицензия № 18-0099 603000, Н. Новгород, ул. Б. Покровская, 37.

i I

i *

t i

! ?

1 t

t ¡

РНБ Русский фонд

2005-4 45034

16 ФЕВ 2005

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Соловьева, Анна Геннадьевна

Введение.

1. Обзор литературы.

1.1. Эндогенная интоксикация при ожоговой болезни.

1.1.1. Химические соединения - маркеры эндогенной интоксикации.*. '

1.1.2. Возникновение первичных токсинов при ожоговой болезни.

1.1.3. Роль печени в процессе детоксикации при ожоговой болезни.

1.1.4. Роль альдегиддегидрогеназы в детоксикационном процессе при ожоговой токсемии.

1.2. Альдегидцегидрогеназа.

1.3. Коррекция ожоговой токсемии лазерным излучением и медикаментозными препаратами.

2. Материалы и методы исследования.

2.1 Постановка эксперимента.

2.2. Методы исследования.

2.2.1. Приготовление гомогенатов печени и выделение субклеточных фракций.

2.2.2. Определение активности альдегиддегидрогеназы.

2.2.3. Определение активности лактатдегидрогеназы.

2.2.4.0пределение активности алкогольдегидрогеназы.

2.2.5. Определение кинетических характеристик ферментов.

3. Результаты исследований и их обсуждение.

Ф 3.1. Активность и кинетические показатели альдегиддегидрогеназы печени и эритроцитов крыс в норме и при ожоге.

3.2. Активность и кинетические свойства альдегиддегидрогеназы печени и эритроцитов крови крыс

Ь при введении им "молекул средней массы".

3.3. Активность и кинетические показатели альдегиддегидрогеназы печени крыс при инкубации in vitro субклеточных фракций печени с "молекулами средней массы".

3.4. Активность и кинетические показатели альдегиддегидрогеназы эритроцитов крови больных с термической травмой.

3.5. Влияние излучения полупроводникового лазера в опытах in vitro на активность и кинетические показатели д, альдегиддегидрогеназы печени и эритроцитов крыс с термической травмой.

3.6. Влияние излучения низкоинтенсивного красного света (люмир) in vitro на активность и кинетические свойства альдегид дегидрогеназы печени и эритроцитов крыс с ожогом.

3.7. Изменение активности и кинетических показателей альдегиддегидрогеназы печени и эритроцитов крыс с ожогом под влиянием эритроцитарной массы, облученной ^ in vitro полупроводниковым лазером и красным светом.

3.8. Влияние глицина на активность и кинетические показатели альдегиддегидрогеназы печени и эритроцитов крыс с термической травмой.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Активность альдегиддегидрогеназы печени и эритроцитов крыс в норме и при ожоговой токсемии"

Актуальность темы. Проблема термических повреждений занимает одно из центральных мест в хирургии и травматологии, оставаясь актуальной и по сей день. Ведущим звеном в патогенезе ожоговой болезни является эндогенная интоксикация, которая развивается с первых часов после термической травмы и сопровождает все без исключения стадии и периоды заболевания, во многом определяя его тяжесть и исход (Уао, 1993; Нои е1 а!., 1994; Козинец и др., 2004).

Суть эндогенной интоксикации состоит в накоплении в крови токсичных биологически активных компонентов в результате усиления катаболиче-ских процессов при снижении эндогенной детоксикации (Копытова и др., 1991). В частности увеличивается содержание таких промежуточных метаболитов как альдегиды (Малахова, 2000). Альдегиды в повышенных концентрациях вызывают ряд отрицательных эффектов. Они нарушают структуру и функции плазматических и внутриклеточных мембран, выступают в качестве ингибиторов активности многих ферментов мембран и сыворотки крови, в результате прямого взаимодействия модифицируют белки крови и тканей. Токсичные среднецепочечные альдегиды: алканали, алкенали и 4-гидроксиалкенали генерализуются в течение липидной пероксидации, которая усиливается при термической травме (ПнсЬак! е! а1., 2000; Толушепс! е! а1., 2001).

Основная роль в утилизации альдегидов принадлежит альдегиддегид-рогеназе (Сатановкая, 1990; УовЫёа е1 а1., 1998). Наибольшая активность фермента характерна для клеток печени. Нарушение функций печени является исключительно важным звеном в патогенезе ожоговой токсемии, поскольку печень является главным детоксицирующим органом. Известно, что сразу после термической травмы печень подвергается влиянию токсических продуктов на фоне резко сниженной ее антитоксической функции (Федоров и др., 1985).

Однако работы по изучению АлДГ при термической травме в пранали-зированной литературе отсутствуют. Таким образом, исследование активности АлДГ в печени и крови является актуальным в решении проблемы эндогенной интоксикации при ожоге.

В последнее время в медицине при лечении ряда заболеваний, в том числе и ожоговой травмы, широко используют низкоинтенсивные электромагнитные излучения (ЭМИ). В связи с этим представляет интерес исследование их влияния на активности АлДГ при ожогах. Наряду с физиотерапией при ожогах также применяют различные химические вещества, способные связывать токсины. В этом плане привлекает внимание глицин, однако его роль в метаболизме альдегидов и влияние на активность АлДГ не изучены.

Цель и задачи исследования. Целью данной работы являлось исследование активности АлДГ в ранний период после термической травмы и воздействия низкоинтенсивных ЭМИ и глицина на исследуемый фермент.

В работе были поставлены следующие задачи:

1.Исследовать активность и кинетические свойства альдегидцегидроге-назы печени и эритроцитов крыс в ранний период после термической травмы (1 час).

2.Изучить влияние молекул средней массы (МСМ), полученных из обожженной печени (МСМоп) на активность и кинетические свойства альде-гидцегидрогеназы в опытах in vitro и при внутрибрюшинном введении крысам МСМоп.

3. Исследовать активность альдегиддегидрогеназы эритроцитов в крови больных с ожогами.

4. Определить активность и кинетические свойства альдегиддегидроге-назы печени и эритроцитов крыс с термической травмой после воздействия низкоинтенсивного электромагнитного излучения в опытах in vitro и in vivo.

5. Изучить влияние глицина, введенного до и после термической травмы, на активность альдегидцегидрогеназы в печени и эритроцитах крови крыс.

Научная новизна. Установлено, что термическая травма сопровождается изменением активности и кинетических свойств АлДГ наряду со снижением активности ЛДГ и АДГ в различных фракциях гепатоцитов и эритроцитах. Выявлено, что лактат оказывает положительное, а пирувэт отрицательное влияние на активность АлДГ.

Впервые установлено ингибирующее действие МСМ обожженной печени на активность АлДГ в субклеточных фракциях печени и эритроцитах. Ожоговые токсины, образующиеся при термической травме и входящие в состав МСМ, связываясь с сулъфгидрилъными группами активного центра АлДГ, снижают ее активность, что доказано в опытах с тетурамом.

Разработан способ диагностики эндогенной интоксикации при ожоге в эксперименте, заключающийся в том, что в гемолизате эритроцитов определяют активность альдегидцегидрогеназы и, если ее активность ниже нормы, делают вывод о токсичности крови.

Показано, что облучение in vitro субклеточных фракций печени крыс с ожогом IIIUI и красным светом, а также введение крысам облученной эрит-роцитарной массы (ЭМ) приводит к увеличению активности АлДГ. Установлено, что излучение ППЛ в опытах in vitro и in vivo вызывает повышение каталитической эффективности и сродства АлДГ к субстрату.

Теоретическая и практическая значимость работы. Полученные данные об изменении активности и кинетических свойств АлДГ углубляют представления о роли ферментов биотрансформации в развитии эндогенной интоксикации при ожогах. Исследование активности лактатдегидрогеназы (ЛДГ) и алкогольдегидрогеназы (АДГ) позволяет оценить их влияние на активность АлДГ и метаболизм альдегидов. Полученные результаты свидетельствуют, что одной из причин, приводящих к снижению активности АлДГ, может быть повышение уровня МСМ при ожоге.

Исследование влияния излучения красного света и полупроводникового лазера (ПИЛ) выявило положительный эффект их воздействия на метаболизм ксенобиотиков и может найти применение для восстановления активности АлДГ при лечении ожоговых больных. Установленное защитное действие глицина на активность АлДГ позволяет рекомендовать использование глицина в качестве вспомогательного средства при оказании помощи тяже-лообожженным.

Апробация работы. Основные положения диссертации доложены на Международном конгрессе «Комбустиология на рубеже веков» (Москва, 2000), Всероссийской научно-практической конференции «Новые технологии в медицине» (Саратов, 2001), Всероссийской конференции «Проблемы медицинской энзимологии. Современные технологии лабораторной диагностики нового столетия» (Москва, 2002), VI Международном медицинском конгрессе студентов и молодых ученых (Тернополь, 2002), Российской научно-практической конференции с международным участием «Клинические и теоретические аспекты острой и хронической боли» (Н.Новгород, 2003), VIII Всероссийская научно-практической конференции «Проблемы лечения тяжелой термической травмы» (Н.Новгород, 2004).

Основные положения, выносимые на защиту. Термическая травма сопровождается снижением активности и изменением кинетических показателей АлДГ. При ожоге уменьшается активность не только АлДГ, но и ЛДГ и АДГ в различных фракциях гепатоцитов и эритроцитах. В опытах in vitro установлено, что лактат оказывает положительное, а пируват - отрицательное влияние на активность АлДГ. В опытах in vitro и in vivo показано ингиби-рующее действие МСМ, выделенных из обожженной печени, на активность АлДГ.

Показано, что глицин оказывает защитное действие на каталитические свойства АлДГ печени и эритроцитов крыс при ожоге в эксперименте. Библ. 327 названий

1. Обзор литературы

Заключение Диссертация по теме "Физиология", Соловьева, Анна Геннадьевна

ВЫВОДЫ

1.Термическая травма приводит к снижению активности АлДГ в печени и эритроцитах экспериментальных животных. Уменьшение активности фермента сопровождается снижением сродства АлДГ к субстрату и каталитической эффективности фермента. Установлено, что АлДГ эритроцитов крови интактных крыс по кинетическим показателям сходна с АлДГ М1-митохондрий печени.

4. Введение интактным крысам МСМоп, также как и термическая травма, вызывает снижение активности АлДГ в печени и эритроцитах, изменение кинетических показателей АлДГ-реакции. Введение крысам МСМнп приводит к увеличению активности АлДГ в гомогенате и Ml-митохондриях и оставляет без изменений активности АлДГ в цитозоле и М2-митохондриях по сравнению с активность АлДГ в контроле. МСМнп увеличивают сродство АлДГ к субстрату и каталитическую эффективность фермента.

5.Снижение активности АлДГ в печени и эритроцитах при термической травме связано с увеличением соединений, взаимодействующих с SH-группами активного центра фермента, что показано в опытах с тетурамом. Предварительное введение блокатора SH-rpyim тетурама перед ожогом повышает активность и каталитическую эффективность АлДГ по сравнению с введением тетурама интактным животным.

6. В опытах in vitro доказана возможность повышения активности АлДГ при термической травме низкоинтенсивными ЭМИ. Облучение ППЛ субклеточных фракций печени крыс с ожогом приводит к увеличению активности, сродства фермента к субстрату и каталитической эффективности аль-дегиддегидрогеназы. Облучение красным светом субклеточных фракций и эритроцитов крови крыс с ожогом вызывает увеличение активности АлДГ на фоне неизменных кинетических параметров альдегиддегидрогеназы.

7. Введение крысам эритроцитарной массы, облученной как ППЛ, так и ВК, вызывает увеличение активности, каталитической эффективности и сродства АлДГ к субстрату.

182

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В результате проведенных исследований установлено, что термическая травма вызывает снижение общей и удельной активности альдегиддегидро-геназы в печени и эритроцитах крови крыс, что сопровождается снижением каталитической эффективности альдегиддегидрогеназы. Наряду со снижением активности АлДГ в печени и эритроцитах снижается активность ЛДГ как в прямой, так и в обратной реакциях и АДГ в печени и эритроцитах. Понижение активности ЛДГ при термической травме сопровождается увеличением соотношения активностей ЛДГ в прямой реакции к активности ЛДГ в обратной реакции в гомогенате и цитозоле печени, а также в эритроцитах, что приводит к возрастанию содержания пирувата и снижению количества НАД, который расходуется в прямой лактатдегидрогеназной реакции. В опытах in vitro выявлено, что лактат оказывает положительное, а пируват - отрицательное влияние на активность АлДГ печени и эритроцитов интактных и ожоговых крыс.

Полученные результаты свидетельствуют, что термическая травма вызывает достоверное снижение активности и кинетических показателей (максимальная скорость и каталитическая эффективность) АлДГ в эритроцитах людей с термической травмой. Поскольку от активности АлДГ зависит накопление в крови высокотоксичных альдегидов, то исследование активности АлДГ в ранние периоды после термической травмы может служить дополнительным критерием в оценке степени эндогенной интоксикации у больных с термической травмой.

Таким образом, один из возможных механизмов развития эндогенной интоксикации при термической травме заключается в снижении активности альдегиддегидрогеназы и как следствие накоплении в организме высокотоксичных альдегидов. Участие АлДГ в развитии эндогенной интоксикации при ожогах можно изобразить в виде схемы (рис. 10).

Термическая травма 1

Повреждение ткани 1 Гликолиз [ АДГобр | Первичные токсины Усиление I ПОЛ ЛДГпр, ЛДГобр I | лактат/ пируват | НАД/НАДН

4 АлДГ н4 Вторичные токсины

Рис. 10. Схема участия АлДГ в развитии эндогенной интоксикации при термической травме

180

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Соловьева, Анна Геннадьевна, Нижний Новгород

1. Александрова, Н.П. Морфофункциональное состояние эритроцитов после экстракорпорального облучения крови / Н.П. Александрова Н.П., О.И. Сличенко // Успехи физиол. наук. 1994. - Т.25, №1. - С. 25-27.

2. Анисимов, A.A. Основы биохимии: Учебник для студентов биол. специальностей ун-тов/ A.A. Анисимов, А.Н. Леонтьева, И.Ф. Александрова и др. -М.: Высш. шк. 1986. -551с.

3. Бакаринов, П.В. Модификация гепарином токсического действия ацеталь-дегида/ П.В. Бакаринов //http://rpe. Fibkh. Serpukhov. Su/Ys 99/ Tesis/ Bio-med/ Ust/ Bakarinov. Html. 1999.

4. Банкова, B.B. Деградация малонового диальдегида в эритроцитах и ее возрастные, сезонные и суточные изменения / В.В. Банкова, Т.М. Никано-рова, С.Д. Поляков, Т.А. Тагиева // Вопросы мед. химии. 1988. — Т. XXXIV, №6.-С. 27-30.

5. Баньковский, A.A. Изоферменты альдегидцегидрогеназы печени и их роль в предпочтении крысами этанола/ A.A. Баньковский, Ю.М. Островский, В.И. Сатановская // Вопросы мед. химии. -1986. Т. 32, № 2. - С. 34-36.

6. Бардахчьян, Э.А. Структурно-функциональные изменения печени и мозга при эндотоксиновом шоке (ультраструктурное исследование) / Э.А. Бардахчьян, Н.Г. Харланова // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. 1997. - №1. - С. 17-21.

7. Ю.Бардина, JI.P. Активность ферментов метаболизма этанола и ацетальдеги-да у крыс с различной изначальной чувствительностью к алкоголю / JI.P. Бардина, В.И. Сатановская, П.С. Пронько, А.Б. Кузьмич // Укр. биохим. журнал. 1997. - Т.69, №1. - С.94-98.

8. Беляков, H.A. Верификация эндотоксикоза у больных с разлитым перитонитом / H.A. Беляков, А.Г. Мирошниченко, М.Я. Малахова, О.Г. Изотова // Эфферентная терапия. 1995. - Т.1, №2. - С. 14-19.

9. Бердышев, Г.Д. Гипотезы о системных механизмах действия лазерного излучения / Г.Д. Бердышев // Действие низкоэнергетического лазерного излучения на кровь: Тез. докл. Всесоюзной научно-практ. конф., Киев, 2729 сент. 1989. -Киев: Б.и., 1989. С. 3-4.

10. Божко, Г.Х. Роль ацетальдегида в механизмах действия этанола / Г.Х. Божко // Успехи физиологических наук. 1990. - Т.21, №3. - С. 98-114.

11. Божко, Г.Х. Сравнение взаимодействия этанола и ацетальдегида с компонентами хроматина ядер клеток печени крыс / Г.Х. Божко, Е.И. Хоменко // Вопр. мед. химии. -1988. -Т.34, №2. -С.19-23.

12. Боев, С.С. Влияние внутривенной гелий-неоновой лазерной терапии на антиоксидантную систему у больных стабильной стенокардией напряжения и постинфаркным кардиосклерозом / С.С. Боев, В.Г. Селивоненко // Клиническая медицина. -1997. Т.75, №12. - С. 30-32.

13. Брискин, Б.С. Влияние низкоинтенсивного лазерного излучения на метаболические и репаративные процессы в организме / Б.С. Брискин, А.К. Полонский, И.М. Алиев и др. // Клиническая медицина. 1996. - Т. 74, №1. - С. 54-55.

14. Быковицкий, Д.М. Лазеротерапия в комплексе реабилитационных мероприятий после острого инфаркта миокарда / Д.М. Быковицкий, В.Н. Фе-филов // Клиническая медицина. 1996. - Т.74, №1. - С.50-53.

15. Бышевский, А.1И. Биохимия для врача / А.Ш. Бышевский, O.A. Терсенов. Екатеринбург: Издательско-полиграфическое предприятие "Уральский рабочий", 1994.-384с.

16. Буйлин, В.А. Низкоинтенсивное лазерное излучение в терапии алкогольного абстинентного синдрома и алкоголизма: Информационно-методический сборник / В.А. Буйлин. М.: ТОО "Фирма "Техника", 1998. -73с.

17. Бунягян, Н.Д. Природные антиоксид анты как гепатопротекторы / Н.Д. Бунятян, O.A. Герасимова, Т.С. Сахарова, Л.В.Яковлева // Экспериментальная и клиническая фармакология. - 1999. - Т. 62, № 2. - С. 64-67.

18. Василенко, Д.В. Диагностика эндогенной интоксикации / Д.В. Василенко, М.В. Пашков, И.А. Тюркин // http:// www. Vsma. Ас. Ru/ publ/ 1998/801 vsmast/partl .html. 2001.

19. Вальдман, Б.М. Среднемолекулярные пептиды крови, как нейрхотропные факторы острой ожоговой токсемии / Б.М. Валь дман, И.А.Волчегорский, Р.И.Лифшиц // Патологическая физиология и экспериментальная терапия.- 1985. -Вып.6. С. 39-42.

20. Ветров, В.В. Синдром эндогенной интоксикации при позднем гистозе (обзор литературы) / В.В. Ветров, Г.К. Бутаев // Журнал акушерства и женских болезней. 2000. - T. XLIX, №3. - С. 23-25.

21. Виноградов, P.A. Регионарная сорбционная детоксикация при распрстра-ненном гнойно-фиброзном перитоните: Дисс. канд. мед наук / P.A. Виноградов. -Иркутск, 1998. 132с.

22. Владимиров, Ю.А. Три гипотезы о механизме действия лазерного облучения на клетки и организм человека / Ю.А. Владимиров // Эфферентная медицина: Сб. ст. -М.: ИБМХ РАМН, 1994. С. 51-67.

23. Волошин, П.В. Роль ацетальдегида в действии алкоголя на центральные катехоламинергические механизмы / П.В. Волошин, Т.П. Бойко, Г.Х. Божко // Журнал невропатологии и психиатрии им. С.С.Корсакова. -1991.- Т.91, №10. С.63-65.

24. Волчегорский, И.А. Средние молекулы как эндогенные модуляторы стресса / И.А. Волчегорский, Ю.К. Костин, H.A. Скобелева // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. 1994. - №4. - С.23-26.

25. Воронов, П.П. Этанолметаболизирующие ферменты семенников человека /П.П. Воронов, A.M. Хоха//Биохимия. 1990. -Т.55, №8. -С.1451-1460.

26. Галактионов, С.Г. Пептиды группы "средних молекул" / С.Г. Галактионов, В.М. Цейтин, В.И. Леонова // Биоорганическая химия. 1984. - Т. 10, №1. -С.5-16.

27. Гамалея, Н.Ф. Световое облучение крови фундаментальная сторона проблемы / Н.Ф. Гамалея // Действие низкоэнергетического излучения на кровь: Тез. докл. Всесоюзной научно-практ. конф., Киев, 27-29 сент. 1989. -Киев: Б.и., 1989.-С.180-181.

28. Герасимова, Л.И. Лазеры в хирургии и терапии термических ожогов: Руководство для врачей / Л.И. Герасимова. М.: Медицина, 2000. - 224с.

29. Генкин, В.М. Влияние низкоэнергетического лазерного излучения на состояние белков крови / В.М. Генкин, В.Ф. Новиков, Л.В. Парамонов, Б.И. Элькина // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. — 1989. -Т.108, №8. С. 188-190.

30. Гланц, С. Медико-биологическая статистика / С. Гланц. М.: Практика. — 1999.- 459с.

31. Горлова, И.Ф. Биологическая ценность основных пищевых продуктов животного и растительного происхождения / И.Ф. Горлова. Волгоград: Изд-во ВолГУ. - 2000. - 135с.

32. Гостищев, В.К. Перитонит / В.К. Гостищев, В.П. Сажин, А.Л. Авдовенко. М.: Медицина, 1992. - 223с.

33. Гостищев, В.К. Непрямая электрохимическая детоксикация в комплесном лечении гнойных заболеваний в хирургии / В.К. Гостищев, Н.М. Федоровский // Хирургия. 1994. - №4. - С.48-50.

34. Груздева, К.Н. Ферменты окисления этанола и его метаболитов при острой алкогольной интоксикации и иммобилизационном стрессе / К.Н. Груздева, В.Е. Высокогорский, В.Г. Купор // Вопросы наркологии. 1991. - №4. - С. 2-4.

35. Гулак, П.В. Гепатоцит: Функционально-метаболические свойства / П.В. Гулак, А.М. Дудченко, В.В. Зайцев и др. -М.: Наука, 1985. 272с.

36. Девягков, Н.Д. Физикохимические механизмы биологического действия лазерного излучения / Н.Д. Девятков, С.М Зубкова, И.Б. Лапрун, Н.С. Макеева // Успехи совр. биологии. 1998. - №103. - С.31-43.

37. Девяткина, Т.А. Влияние пирацетама на биохимические показатели печени в условиях стресса / Т.А. Девяткина, Р.В. Луценко, Е.М. Важничая // Тез. Докл. VII Республиканской научно-практ. конференции «Человек и лекарство», Москва. М., 2000. - С.401.

38. Деменко, С.Ю. Эффективность внутрисосудистой лазеротерапии в ранние периоды ожоговой болезни / С.Ю. Деменко // Интенсивное лечение тяже-лообожженных: Тез. международной конф., Москва, 25-26 февраля. Москва, 1992. -С.75-76.

39. Деменко, С.Ю. Внутрисосудистое лазерное облучение крови в комплексном лечении тяжелообожженных: Автореф. дис.канд. мед. наук / С.Ю. Деменко. Самара, 1993. - 16с.

40. Дерюгина, A.B. Исследование элекрофоретической подвижности и агре-гационных свойств эритроцитов при действии пчелиного яда и его препаратов: Дисс. канд. биол. наук: 03/00/13 / A.B. Дерюгина. Н.Новгород, 1998. - 126с.

41. Другова, О.В.Воздействие низкоинтенсивного люминесцентного красного света на состояние процессов перекисного окисления липидов в миокарде после ишемии при реперфузии / О.В.Другова, В.А.Монич,

42. С.Л.Малиновская и др. // Тезисы II Съезда биофизиков России, Москва. -Москва, 1999.-С.З.

43. Другова, О.В. Эффекты воздействия красного света на постишемический миокард при реперфузии / О.В.Другова, В.А.Монич, О.В.Житников // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2001. - Т. 131, №4. -С. 386-388.

44. Евсеев, Л.П. Лактатдегидрогеназа X специфический фермент семенников / Л.П. Евсеев, Е.А. Севрюков // Вестн. РАМН. - 1994. - №3. - С. 57-61.

45. Егоров, С.Ю. Фотогенерация синглетного молекулярного кислорода компонентами производного гематопорфирина / С.Ю. Егоров, А.Ю. Таубер, A.A. Красновский и др. // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. -1989. Т. 108, №10. - С. 440-442.

46. Елагин, Е.В. Внутривенное лазерное облучение крови на этапах анесезио-логического обеспечения при оперативном лечении хронического гематогенного остеомиелита у детей: Автореф. дисс. канд. мед. наук / Е.В. Елагин.-М., 1997.-15с.

47. Есакова, Т.В. Взаимодействие комплекса ЛДГ НАД — пируват с мембранами легкого саркоплазматического ретикулума / Т.В. Есакова, М.В. Иванов // Биохимия. - 1994. - Т. 59, №4. - С.543-550.

48. Ещенко, Н.Д. Выделение митохондриальной и цитоплазматической фракций тканей для анализа активности ферментов / Н.Д. Ещенко // Методы биохимических исследований. Ленинград: Изд-во Ленинградского ун-та, 1982. - С.29-33.

49. Жибурт, Е.Б. Некоторые клнточные механизмы действия лазерного облучения крови / Е.Б. Жибурт, Н.Б. Серебряная, E.H. Рождественская и др. // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. 1998. - №3. -С.6-7.

50. Жминько, П.Г. Влияние кротонового альдегида на функциональное состояние печени при остром о хроническом ингаляционном воздействии /

51. B.А. Лавров, А.И. Марчук, И.М. Носова // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. -1990. Т. CIX. - №1. - С. 27-30.

52. Зиматкин, С.М. Активность альдегиддегидрогеназы в барьерных структурах мозга / С.М. Зиматкин, Ю.М. Островский // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. -1988. T.CYI, №9. - С. 283-284.

53. Зиматкин, С.М. Особенности альдегидокисляющей системы мозга крыс, различающихся устойчивостью к алкоголю / С.М. Зиматкин, К.О. Линд-рос // Вопросы наркологии. 1990. - №3. - С. 20-23.

54. Зиматкин С.М., Активность альдегиддегидрогеназы мозга крыс в онтогенезе / С.М. Зиматкин, P.E. Лис // Архив анатомии, гистологии и эмбриологии. -1990. -Т.98, №5. С. 27-33.

55. Зимин, Ю.В. Молекулярные механизмы метаболической адаптации патологически измененной печени при токсическом гепатите / Ю.В. Зимин,

56. Илларионов, В.Е. Основы лазерной терапии / В.Е. Илларионов. М.: Изд-во "Респект" Объединения ИНОТЕХ-Прогресс, 1992. - 122с.

57. Ищук, В.В. Комбинированное лазерное лечение ожоговых ран в условиях управляемой абактериальной среды / В.В. Ищук // Интенсивное лечение тяжелообожженных: Тез. международной конф., Москва, 25-26 февраля. — Москва, 1992. С.242-243.

58. Казакова, Т.Б. Физико-химические и функциональные особенности ДНК из разных типов митохондрий печени крыс / Т.Б. Казакова, М.М. Гачава, К.А. Маркосян // Биохимия. 1969. - Т.34, №5. - С. 1000-1007.

59. Калинина, Е.В. Метаболитный препарат МР-ЗЗ-индуктор внутриклеточного уровня глутатиона и глутатионзависимых ферментов / Е.В. Калинина, М.Д. Новичкова, И.А. Комиссарова // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1999. - Т. 128, №7. - С.56-60.

60. Карандашов, В.И. Изменение реологических свойств крови при ее облучении гелий-неоновым лазером / В.И. Карандашов, Е.Б. Петухов // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1996. - Т. 121, №1. - С. 17-20.

61. Карандашов, В.И. Экстракорпоральное облучение полного объема циркулирующей крови низкоэнергетическим гелий-неоновым лазером / В.И. Карандашов, Е.Б. Петухов, И.А. Финько, Ю.А. Попов и др. // Вестник Российской Академии мед. наук. 1994. - №4. - С. 51-54.

62. Кару, Т.Й. О молекулярном механизме терапевтического действия излучения НИЛИ / Т.Й. Кару // Доклады АН СССР. 1986. - Т.291, №5. с. 1025-1028.

63. Кару, Т.Й. Влияние излучения He-Ne лазера на адгезивные свойства клеточной мембраны / Т.Й. Кару, Л.В. Пятибрат, Г.С. Календо // Бюллетеньэкспериментальной биологии и медицины. 1993. - Т. 115, №6. - С. 120122.

64. Келети, Е. Основы ферментативной кинетики / Е. Келети. М.: Мир, 1990. -350с.

65. Кершенгольц, Б.М. Некоторые причины уменьшения активности альде-гиддегидрогеназы печени и крови крыс при хронической алкогольной интоксикации / Б.М. Кершенгольц, В.Г. Алексеев, Е.М. Гаврилова, Н.Г. Ли // Вопросы мед. химии. 1985. -Т31, №1. - С. 47-51.

66. Кершенгольц, Б.М. Некоторые методические подходы к изучению метаболизма этанола / Б.М. Кершенгольц, Е.В. Серкина // Лабораторное дело. -1981. -№2. -С.126.

67. Кирпичева, А.Г. Влияние излучения полупроводникового и гелий-неонового лазеров на клеточный гемостаз: Дипломная работа / А.Г.Кирпичева. Н.Новгород, 1999. - 73с.

68. Кисличенко, B.C. Роль минеральных веществ в организме человека / B.C. Кисличенко // http:// provisor. Kharkov. Ua/ archive/ 1999/ №12/ minerals. Htm.-2002.

69. Кислова, О.В. Сравнительная характеристика мембранных форм альдегиддегидрогеназы / О.В. Кислова, Е.Г. Виноградова, Г.А. Пхакадзе // Украинский биохимический журнал. 1995. - Т.67, №6. - С. 38-45.

70. Клебанов, Г.И. Влияние эндогенных фотосенсибилизаторов на лазер-индуцированный прайминг лейкоцитов крови / Г.И. Клебанов, И.В. Страшкевич, Т.В. Чичук и др. // Биологические мембраны. 1998. - Т. 15, №3. - С. 273-285.

71. Клебанов, Г.И. Клеточные механизмы прайминга и активации фагоцитов / Г.И. Клебанов, Ю.А. Владимиров // Успехи современной биологии. -1999. Т. 119, №5. - С. 462-475.

72. Клебанов, Г.И. Влияние низкоинтенсивного лазерного излучения на функциональный потенциал лейкоцитов / Г.И. Клебанов, Ю.О. Теселкин, И.В. Бабенкова и др. // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1997. - Т. 123,№4. - С. 395-398.

73. Клебанов, Г.И. Лазеротерапия: клиническая эффективность и молекуляр-но-клеточные механизмы / Г.И. Клебанов, М.В. Крейнина, М.Г. Мархолия и др. // http:// www. Health-service ги/ medical/ kvant/ viewlaseroterapyhtml. 2003.

74. Козинец, Г.И. Ожоговая интоксикация. Дифференцированные подходы к детоксикационной терапии / Г.П. Козинец, C.B. Слесаренко, Б.С. Шейман // http:// burn. Ru/ libraryprint/ ni6/ original/ kozinets/ index, html. 2004.

75. Копытова, T.B. Значение среднемолекулярных пептидов сыворотки крови при острых формах ишемической болезни сердца / Т.В. Копытова, H.A. Добротина, H.H. Боровков, О.В. Четверкина // Лабораторное дело. 1991. -№10.-С. 18-21.

76. Козлов, В.И. Лазеротерапия / В.И. Козлов, В.А. Буйлин. М.: Центр АСТР, 1993. - 148с.

77. Корнеев, A.A. О биологическом значении ацетальдегида как клеточного регулятора дыхательной цепи митохондрий / A.A. Корнеев, И.А. Комиссарова // Успехи современной биологии. 1994. - Т.114, №2. - С.212-221.

78. Коноплицкая, К.Л. Субклеточное распределение и свойства альдегидде-гидрогеназы печени крыс / К.Л. Коноплицкая, Г.И. Кузьмина, Л.А. Кузь-менко // Украинский биохимический журнал. 1984. - Т.56, №6. - С.624-628.

79. Коноплицкая, К.Л. Ферменты основного пути метаболизма этанола и их ингибиторы / К. Л. Коноплицкая. Киев: Наукова думка, 1992. - II 6с.

80. Коноплицкая, К.Л. Влияние циклопропилэтилсодержащих аминов и амидов на изоферментные формы альдегиддегидрогеназы печени крыс / К.Л. Коноплицкая, О.В. Кислова, Е.Г. Виноградова и др. // Химикофармацев-тический журнал. 1994. - Т.28, №1. - С. 7-10.

81. Кожекин, В.В. Внутривенное лазерное облучение крови и кислородтранс-портная функция / В.В. Кожекин, O.A. Решедько, А.М. Ткачев, С.А. Жук // Анестизиология и реаниматология. 1995. — №1. — С. 42-43.

82. Козинец, Г.П. Ожоговая интоксикация. Патогенез, клиника, принципы лечения / Г.П. Козинец, C.B. Слесаренко, А.П. Радзиховский и др. К.: Феникс, 2004. - 272с.

83. Кочетов, Г. А. Практическое руководство по энзимологии / Г.А. Кочетов. М.: Высшая школа, 1980. - 272с.

84. Корячкин, В.А. Интенсивная терапия угрожающих состояний / В.А. Корячкин, В.И. Страшнов, В.Н. Чуфаров. СПБ: СПб. Мед. изд-во, 2002. -288с.

85. Корякина, И.К. Изучение токсических свойств сыворотки у крыс после ожога / И.К. Корякина, Р.В. Недошивина // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1980. - Т. LXXXX, №7. - С.27-28.

86. Комиссарова, И. А. Молекулярные механизмы действия лекарственного препарата "Глицин" / И.А. Комиссарова, Я.Р. Нарциссов //Terra Medica. -2001. -№1. -С.21.

87. Кулинский, В.И. Активные формы кислорода и оксидативная модификация макромолекул: польза, вред и защита / В.И. Кулинский // http://www. Pereplet. Ru/ obrazovanie/ stsoros/ 696. Html. 2002.

88. Куценко, C.A. Основы токсикологии / С.А. Куценко. СПб, 2002. -302с.

89. Линдрос, К.О. Альдегиддегидрогеназа мозга и ее возможное участие в патогенезе алкоголизма / К.О. Линдрос, Дж. Д. Синклер // Фармакология экспериментального алкоголизма: Сб. ст. Москва, 1982. - С. 112-118.

90. Лиопо, A.B. Связывание ацетальдегида при его инкубации с эритроцитами человека у больных хроническим алкоголизмом / A.B. Лиопо, А.Е.

91. Тейтельбаум, Ю.М. Островский // Вопросы наркологии. 1992. - №1. -С.62-63.

92. Лифшиц, Р.И. Метаболические основы ожоговой интоксикации и пути дезинтоксикационной терапии / Р.И. Лифшиц // Казанский мед. журнал. -1987. №6. - С.405-407.

93. Логинов, A.C. Перекисное окисление липидов при ее патологии / A.C. Логинов, Б.Н. Матюшин, В.Д. Ткачев, Н.М. Павлова // Терапевтический архив. 1985. - T.LVII, №2. - С.63-67.

94. Малахова, М.Я. Эндогенная интоксикация как отражение компенсаторной перестройки обменных процессов в организме / М.Я. Малахова // Эфферентная терапия. 2000. - Т.6, №4. - С.3-14.

95. Малахова, М.Я. метод регистрации эндогенной интоксикации (пособие для врачей) / М.Я. Малахова. СПб: Изд-во СПб. Мед. академии последипломного образования, 1995. -34с.

96. Мансурова, И.Д. Содержание этанола, малонового диальдегида и активность этанолокисляющей системы в сывороике крови больных алкоголизмом при лечении тетурамом / И.Д. Мансурова, М.С. Истамкулов // Вопросы мед. химии. 1986. - Т.32, №2. - С. 14-16.

97. Марусанов, В.Е. Характеристика стадий эндогенной интоксикации / В.Е. Марусанов, В.А. Михайлович, И.А. Доманская, С.Л. Гуло // Эфферентная терапия. 1995. - Т. 1, №2. - С.26-30.

98. Матвеева, И.М. Активность альдегиддегидрогеназы в эритроцитах больных алкоголизмом / И.М. Матвеева, М.А. Петрова, М.С. Усатенко и др. // Лабораторное дело. -1991. №6. - С. 20-24.

99. Матюшин, Б.Н. Антиоксидантные энзимы печени при ее хроническом поражении / Б.Н. Матюшин, A.C. Логинов, В.Д. Ткачев // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. 1992. - №2. - С. 41-42.

100. Матюшин, Б.Н. Активность глутатионзависимых ферментов в биоптате печени при хроническом поражении гепатоцитов / Б.Н. Матюшин, A.C. Логинов, В.Д. Ткачев // Клиническая лабораторная диагностика. 1998. -№4.-С. 16-18.

101. Мертвецов, Н.П. Регуляция экспрессии генов стероидными гормонами / Н.ПМертвецов. Новосибирск: Наука, 1990. - 265с.

102. Метаболические предпосылки и последствия потребления алкоголя/ Под ред. Ю.М. Островского, В.И. Сатановской, С.Ю. Островского и др. — Минск: Наука и техника, 1988. 263с.

103. Мовшев, Б.Е. Токсичность экстрактов обожженной кожи в зависимости от способа их приготовления и хранения / Б.Е. Мовшев, Р.В. Недошивина // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. 1973. - №6. -С. 59-61.

104. Мовшев, Б.Е. Влияние термической обработки in vitro на токсические свойства экстрактов кожи / Б.Е. Мовшев, Р.В. Недошивина // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. 1975. - №3. - С. 42-46.

105. Мовшев, Б.Е. Влияние температуры и pH среды на токсические свойства экстрактов обожженной и нормальной кожи / Б.Е. Мовшев, Р.В. Недошивина // Патологическая физиология и экспериментальная терапия . — 1974. №4. - С.38-41.

106. Москвитина, Т.А. Исследование цитозольной моноаминоксидазы печени крысы / Т.А. Москвитина, А.Е. Медведев // Вопросы мед. химии. — 2000. Т.46, №1. - С. 48-51.

107. Недошивина, Р.В. Изучение токсичности крови обожженных собак методом биотестирования на мышах с блокированной ретикулоэндотелиаль-ной системой / Р.В. Недошивина // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. 1972. - №2. - С. 39-41.

108. Немцев, И.З. Некоторые механизмы действия экстракорпорального гелий-неонового лазерного облучения при острых экзогенных отравления / И.З. Немцев, Е.А. Лужников, В.П. Лапшин и др. И Анестизиология и реаниматология. 1997. - №4. - С. 33-35.

109. Николайчик, В.В. Способ определения "средних молекул" / В.В. Нико-лайчик, В.М. Моин, В.В. Кирковский и др. // Лабораторное дело. 1991. -№10.-С. 13-18.

110. Осадчая, Л.М. Выделение субклеточных фракций из мозга крыс / Л.М.Осадчая // Методы биохим. исследований. Л.: ЛГУ, 1982. - С. 3643.

111. Остапенко, В.А. Механизмы лечебного действия гемосорбции / В.А. Остапенко // Эфферентная терапия. 1995. - Т. 1, №2. - С. 20-25.

112. Островский, С.Ю. Изучение роли гистидина в неферментативной инактивации ацетальдегида / С.Ю. Островский, В.И. Кондаков // Химико-фармацевтический журнал. 1987. - №9. - С. 1034-1038.

113. Парамонов, Б.А. Ожоги: Руководство для врачей / Б.А. Парамонов, Я.О. Порембский, В.Г. Яблонский. СПб: Изд-во "СпецЛит", 2000. -487с.

114. Панченко, Л.Ф. Активируемая клофибратом альдегиддегидрогеназа пе-роксисом печени крысы / Л.Ф. Панченко, C.B. Пирожков, В.Д. Ангонен-ков // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1982. - Т. XCIV, №9. - С. 52-55.

115. Патологическая физиология и биохимия: Учебное пособие для вузов / Под ред. И.П.Ашмарина, Е.П.Каразеева, М.А.Карабасова и др. М.: Изд-во «Экзамен», 2005. - 480с.

116. Пескова, Е.Б. Внутрипероксисомальная локализация алкогольоксидазы длинноцепочечных спиртов / Е.Б. Пескова, A.A. Шарышев // http:// bio. Psn. Ru/ ЕР/ Ysci/ d250. Html. 2000.

117. Пирожков, C.B. Роль альдегиддегидрогеназ в метаболизме малонового диальдегида в печени крысы / C.B. Пирожков, Л.Ф. Панченко // Биохимия. 1988. - Т.53, №9. - С. 1443-1448.

118. Повстяной, Н.Е. Патогенез и основы направленной терапии острого периода ожоговой болезни у детей / Н.Е. Повстяной, Г.П. Козинец // Клинт-ческая хирургия. 1989. - №3. - С. 22-25.

119. Плакунов, В.К. Основы энзимологии / В.К. Плакунов. М.: Логос, 2001.-128с.

120. Прикладная лазерная медицина. Учебное и справочное пособие/ Под ред. Х.П. Берлиена, Г.Й. Мюллера: Пер. С нем. М.: АО "Интерэксперт", 1997.-356с.

121. Райдер, К. Изоферменты: Пер. с англ. / К. Райдер, К. Тейлор. М.: Мир, 1983.-106с.

122. Сатановская, В.И. Способ диагностики злокачественных прцессов в репродуктивной системе женщин / В.И. Сатановская // http:// ifttp. Bas-net. Ву/ ~ kost/ activities/ anbdev 95/ d 95 omed. Html. -1995.

123. Сатановская, В.И. Система обмена этанола и ацетальдегида печени крыс при развитии толерантности к этанолу / В.И. Сатановская // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1990. - Т. СIX, №2.-С. 161-162.

124. Сеферова, Р.И. Внутриклеточные окислительно-восстановительные процессы в тканях при гипертермии / Р.И. Сеферова, И.Д. Маленкова, Н.Л. Аветисова // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. 1993. — №2. - С. 25-27.

125. Симбирцев, С.А. Патофизиологические аспекты эндогенной интоксикации / С.А. Симбирцев, H.A. Беляков // Эндогенные интоксикации: Тезисы международного симпозиума. СПб, 1994. - С. 5-9.

126. Смирнов, C.B. Эндотоксемия и критерии ее объективизации у больных с ожогами / C.B. Смирнов, Н.И. Габриелян, C.B. Игнатов // Клиническая медицина. 1989. - T. LXVII, №5. - С. 128-131.

127. Соколовский, В.В. Механизмы действия отраженного гелий-неонового лазерного излучения / В.В. Соколовский, И.Н. Ушкова, Л.П. Родионова и др. // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. — 1987. -№4.-С. 60-64.

128. Трещалина, Е. Морфологическая и биохимическая характеристика хо-лангиоцеллюлярного рака РС-1 при подкожной и внутрипеченочной трансплантации / Е. Трещалина, В. Кобляков, Т. Дюжева и др. // Экспериментальная онкология. 2001. - №2. - С. 23-25.

129. Трусова, Н.Ф. Роль окислительно-восстановительных ферментов тканей глаза и мозга в механизме действия низкоинтенсивного ИК-лазерного излучения / Н.Ф. Трусова, В.А. Кашуба // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. -1987. №1. - С. 16-19.

130. Туликова, З.А. Влияние СМ, выделенных из сыворотки крови обожженных пациентов, на состояние процессов перекисного окисления липидов в тканях животных / З.А. Туликова, В.К. Осипович // Вопросы мед. химии. -1990. Т. 36, №3. - С. 24-26.

131. Утц, С.Р. Низкоинтенсивная лазеротерапия в дерматологии / С.Р. Утц, В. А. Волнухин. Саратов: Изд-во Саратовского ун-та, 1998. - 92с.

132. Федоров, H.A. Ожоговая аутоинтоксикация. Пути иммунологического преодоления / H.A. Федоров, Б.Е. Мовшев, Р.В. Недошивина, И.К. Корякина. М.: Медицина, 1985. - 256с.

133. Филлипович, Ю.Б. Множественные формы ферментов насекомых и проблемы сельскохозяйственной энтомологии / Ю.Б. Филлипович, A.C. Коничев. М.: Наука, 1987. - 168с.

134. Финдлей, Дж. Биологические мембраны. Методы : Пер. с англ. / Дж. Финдлей, У. Эванз. М.: Мир, 1990. - 424с.

135. Хорнец, В.И. Состояние глутатионового обмена в тканях полушарий головного мозга при травме / В.И. Хорнец, JI.T. Лысый, А.П. Мукуца и др. // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. 1998. - №3. -С. 22-24.

136. Хочачка, П. Биохимическая адаптация. Пер. с англ. / П. Хочачка, Дж. Сомеро. М.: Мир, 1988. - 586с.

137. Чаленко, В.В. Возможные причины повышения концентрации молекул средней массы при патологии / В.В. Чаленко // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. -1991. №4. - С. 13-14.

138. Шабанов, П.Д. Биология алкоголизма / П.Д. Шабанов, С.Ю. Калише-вич. СПб.: Изд-во "Лань", 1998. - 272с.

139. Шишмаков, Д.А. Некоторые свойства протомитохондрий / Д.А. Шиш-маков, Р.Л. Анисимов, Н.Л. Векшин // Биологические мембраны. 2004. — Т.21, №5. - С.374-380.

140. Agarwal, DP. Aldehyde dehydrogenase from human erythrocytes: structural relationship to the liver cytosolic isozyme / DP. Agarwal, P. Cohn, HW. Goedde, J. Hempel // Enzyme. 1989. - Vol. 42, №1. - P. 47-52.

141. Ahvazi, B. Crystal structure of the NADP+-dependent aldehyde dehydrogenase from Vibrio harveyi: structural implications for cofactor specificity and affinity / B. Ahvazi, R. Coulombe, M. Delarge et a!.// Biochem. J. 2000. -Vol.349, №1.-P. 853-861.

142. Alexander, M. Relationships between burn size, immunosuppression, and macrophage hyperactivity in a murine model of thermal injury / M. Alexander, IH Chaudry, M.G. Schwacha // Cell Immunol. 2002. - Vol. 220, № 1. - P.63-69.

143. Ambroziak, W. Human Aldehyde Dehydrogenase. Activity with aldehyde metabolites of monoamines, diamines and polyamines / W. Ambroziak, R. Pietruszko // The Journal of biological chemistry. -1991. Vol. 266, №20. - P. 13011-13018.

144. Ambroziak, W Metabolic role of aldehyde dehydrogenase / W. Ambroziak, R. Pietruszko // Adv Exp Med Biol. 1993. - №328. - P. 5-15.

145. Arslan, E. The relationship between tumor necrosis factor (TNF)-alpha and survival following granulocyte colony stimulating factor (G-CSF) administration in burn sepsis / E. Arslan, M. Yavuz, C. Dalay // Burns. - 2000. - Vol. 26, №6.-P. 521-524.

146. Bankey, PE. Interleukin-6 production after thermal injury: evidence for nonmacrophage sources in the lung and liver / PE. Bankey, JG. Williams, KS. Guice, SN. Taylor//Surgery. 1995. - Vol. 118, №2. -P. 431-438.

147. Bassi, AM. Changes of CYP 1A1, GST, and ALDH3 enzymes in hepatoma cell lines undergoing enhanced lipid peroxidation / AM. Bassi, S. Ledda, S. Penco et al. // Free Radic Biol Med. 2000. - Vol. 29, №11. - P. 1186-1196.

148. Basoglu, M. Recombinant human growth hormone modulates the hepatic acute-phase response and P-selectin in burned rats / M. Basoglu, A. Kiziltunc, MI. Yildirgan et al. // Burns. 2002. - Vol. 28, №8. - P. 760-764.

149. Bernier, J. Decreased corticosteroid-binding globulin in burn patients: relationship with interleukin-6 and fat in nutritional support / J. Bernier, N. Jobin, A. Emptoz-Bonneton et al // Crit Care Med. 1998. - Vol. 26, №3. - P. 452460.

150. Bilgihan, K. Corneal aldehyde dehydrogenase and glutathione S-transferase activity after excimer laser keratectomy in guinea pigs / K. Bilgihan, A. Bilgihan, B. Hasanreisoglu, N. Turkozkan // Br J. Ophthalmol. 1998. - Vol. 82, №3. -P. 300-302.

151. Borde, VD. Effects of dietary fatty acids on burn-induced immunosuppression / VD. Borde, J. Bernier, DR. Garrel // Cell Immunol. 2002. - Vol. 220, №2.-P. 116-124.

152. Burneil, J.C. Purification and steady state kinetic characterization of human liver alcohol dehydrogenase / J.C. Burnell, T.K.Li, W.F.Boson // Biochemistry. - 1989. - V.28, №17. - P. 6810-6815.

153. Canuto, RA. Increase in class 2 aldehyde dehudrogenase expression by ara-chidonic acid in rat hepatoma cells / RA. Canuto, M. Ferro, RA. Salvo et al. // Biochem J. 2001. - Vol. 357, №3. - P. 811-818.

154. Carlson, DL. Burn plasma mediates cardiac myocyte apoptosis via endotoxin / DL. Carlson, E. Jr. Lightfoot, DD. Bryant et al. // Am J. Physiol Heart Circ Physiol. 2002. - Vol. 282, №5. - P. 1907-1914.

155. Cenedella, RJ. Specific Labeling of Lens Aldehyde Dehydrogenase Class 1 from (3) H-Cholesterol or its Derivatives / RJ. Cenedella // Ophthalmic Res. -2001. Vol.33, №4. - P. 210-216.

156. Chen, H. The postburn changes of the plasma levels of PGE2 and TNF-r alpha in burn patients / H. Chen, G. Qiu, W. Xu // Zhonghua Shao Shang Za

157. Zhi. -2001. Vol. 17, №5. -P. 304-306.

158. Chen, G. Clinical observation of the protective effect of oral feeding of glutamine granules on intestinal mucous membrane / G. Chen, W. Xie, H. Jiang // Zhonghua Shao Shang Za Zhi. 2001. - Vol. 17, №4. - P. 210-211.

159. Cheng, L. Inhibition of alcohol dehydrogenase by thiol compouds / L. Cheng, L. Lek // FEBS Lett. 1992. - V.300, № 3. - P. 251-253.

160. Childs, C. Patterns of Staphylococcus aureus colonization, toxin production, immunity and illness in burned children / C. Childs, V. Edwards-Jones, DM. Heathcote et al. //Burns. 1994. - Vol. 20, №6. -P.514-521.

161. Childs, C. Toxic shock syndrome toxin-1 (TSST-l) antibody levels in burned children / C. Childs, V. Edwards Jones, M. Dawson, PJ. Davenport // Burns. 1999. - Vol. 25, №6. - P. 473-476.

162. Cho, K. Parallel self-induction of TNF-alpha and apoptosis in the thymus of mice after burn injury / K. Cho, LK. A damson, DG. Greenhalgh // J. Surg Res. -2001. Vol. 98, №1. -P.9-15.

163. Chrostek, L. Alcohol and aldehyde dehydrogenase activity in the stomach and small intestine of rats poisoned with methanol / L. Chrostek, D. Szczepura, M. Szmitkowski et al.// Hum Exp Toxicol. 2001. - Vol.20, №5. - P. 255-258.

164. Cui, XL. Arginine supplemented diet decreases expression of inflammatory cytokines and improves survival in burned rats / XL. Cui, M. Iwasa, Y. Iwasa, S. Ogoshi // JPEN J Parenter Enteral Nutr. - 2000. - Vol. 24, №2. - P.89.96.

165. Davis, AJ. Tim 23p contains separate and district signals for targeting to mitochondria and insertion in to the inner membrane / AJ. Davis, KR. Ryan, RE. Jensen // Molecular Biology of the Cell. 1999. - №9. -P. 2577-2593.

166. Dawson, J.M. Lowry method of protein quantification Evidence for Photosensitivity / J.M. Dawson, P.L. Heatlic // Anal. Biochem. 1984. - Vol. 140, №2.-P. 391-393.

167. Dickinson, FM. Aldehyde dehydrogenase: kinetics and mechanism / FM. Dickinson // Biochem Soc Trans. 1989. - Vol. 17, № 2. - P. 299-300.

168. Drost, AC. Plasma cytokines after thermal injury and their relationship to infection / AC. Drost, DG. Burleson, WG Jr .Cioffi et al.// Ann Surg. 1993. -Vol. 218, №1. -P. 74-78.

169. Durbin, EA. The role interleukin-6 in interferon-gamma production in thermally injured mice / EA. Durbin, MS. Gregory, KA. Messingham et al. // Cytojkine. 2000. - Vol. 12, №11. - P. 1669-1675.

170. Dyck, LE. Isoenzymes of aldehyde dehydrogenase in human lymphocytes / LE. Dyck // Alcohol Clin Exp Res. 1990. - Vol. 14, №4. - P. 534-538.

171. Eckey, R. New aspects of acetaldehyde metabolism in human tissues and erythrocytes / R. Eckey, DP. Agarwal, P. Cohn et al. // Beitr Gerichtl Med. -1989.-№47.-P. 397-402.

172. Elzaim, HS. Generation of neutralizing antipeptide antibodies to the enzy-4 matic domain of Pseudomonas aeruginosa exotoxin A / HS. Elzaim, AK. Chopra, JW. Peterson et al. // Infect Immun. 1998. - Vol. 66, №5. - P. 2170-2179.

173. Endo, S. Are plasma endotoxin levels related to burn size and prognosis? / S. Endo, K. Inada, M. Kikuchi et al. // Burns. 1992. - Vol. 18, №6. - P. 486489.

174. Endo, S. Plasma levels of interleukin-1 receptor antagonist (IL-Ira) and severity of illness in patients with burns / S. Endo, K. Inada, Y. Yamada et al.// J. Med. 1996.- Vol. 27, №1-2. -P. 57-71.

175. Fang W, The significance of the expressions of lipopolysaccharide dinding protein mRNA and lipopolysaccharide receptor CD 14 mRNA in the liver of burned rat / W. Fang, Y. Yao, Z. Shi // Zhonghua Shao Shang Za Zhi. 2000. -Vol.16, №3.-P. 157-160.y

176. Fang, EH. The significance of changes in high mobility group-1 protein mRNA expression in rats after thermal injury / EH. Fang, YM. Yao, ZG. Shi et al. // Shock. 2002. - Vol. 17, №4. - P. 329-333.

177. Fang, CW. Lipopolysaccharide-binding protein and lipopolysaccharide receptor CD 14 gene expression after thermal injury and its potential mechanisms / CW. Fang, YM. Yao, ZG. Shi et al. // J. Trauma. 2002. - Vol.53, №5. - P. 957-967.

178. Farkas, B. Reduction of acute photodamage in skin by topical application ofa novel PARP inhibitor / B. Farkas, M. Magyarlaki, B. Csete et al. // Biochem Pharmacol. 2002. - Vol. 63, №5. - P. 921-932.

179. Feng, J. The significance and the role of TNF-alpha and NO in the early renal damage in burned rats complicated with endotoxemia / J. Feng, Y. Liu, X. Wang // Zhonghua Shao Shang Za Zhi. 2000. - Vol. 16, №2. - P. 89-92.

180. Floret, D. Current problems posed by staphylococcal infections in pediatric r' patients / D. Floret, Y. Gillet, G. Lina // Presse Med. 2001. - Vol. 30, №37.1. P. 1836-1843.

181. Goldberg, JB. Avirulence of a Pseudomonas aeruginosa alg C mutant in a burned-mouse model of infection / JB. Goldberg, MJ Jr. Coyne, AN. Neely, IA. Holder // Infect Immun. -1995. Vol. 63, №10. - P. 4166-4169.

182. Gwen, V. Mitochondrial Substructure / V. Gwen, Ph. D. Childs // http:// cellbio. Utmb. Edu/ cellbio/mitochondrial.htm. 1996.

183. Gwen, V. The Mitochondrial Life cycle / V. Gwen, Ph. D. Childs // http:// cellbio. Utmb. Edu/ cellbio/ mitoch 2. htm. -1996/

184. Hammen, P.K. Multiple conformations of NAD+ and NADH when bound to human cytosolic and mitochondrial aldehyde dehydrogenase / P.K. Hammen, A. Allali Hassani, K. Hallenga et al. //Biochemistry. - 2002. - №41. - P. 7156-7168.

185. Harvey, JJ. Laser light scattering and ultracentrifuge studies on sheep liver cytosolic aldehyde dehydrogenase / JJ. Harvey, PD. Buckley, JA. Lewis, ND. Pinder // Adv Exp Med Biol. 1997. - №414. - P. 171-179.

186. He, L. The effect of escharectomy during burn shock stage on the expression of ICAM-1 and TNF-alpha mRNA of rat pulmonary tissue / L. He, Z. Guo, Y. Lu // Zhonghua Shao Shang Za Zhi. 2000. - Vol. 16, №1. - P. 30-33.

187. Helander, A. Use of leukocyte aldehyde dehydrogenase activity to monitor inhibitory effect of disulfiram treatment / A. Helander, S. Carlsson // Alcohol Clin Exp Res. 1990. - Vol. 14, № 1. - P.48-52.

188. GT. Heneban, KF. Tipton // Biochem Pharmacol. 1991. - Vol. 42, №5. -P.979-984.

189. Hiroki, Y. Escherichia coli endotoxin enhances acute renal failure in rats after thermal injury / Y. Hiroki, K. Toshiro, S. Hiroaki, T. Noriyuki // Burns. -2003. Vol. 29, № 2. -P.133-138.

190. Holzheimer, RG. Circadian rhythm of cytokine secretion following thermal injury in mice: implications for burn and trauma research / RG. Holzheimer, P. Curley, IB. Saporoschetz et al. // Shock. 2002. - Vol. 17, №6. - P. 527-529.

191. Hou, R. Changes in blood endotoxin levels after scald in rats / R. Hou, P. Situ, H. Goa // Zhonghua Zheng Xing Shao Shang Wai Ke Za Zhi. 1994. -Vol. 10, №1. -P.76-78.

192. Hurley, T.D. Human alcohol dehydrogenase: of secondary alcohol oxidation on the amino acids at positions 93 and 94 / T.D. Hurley, W.F. Bosron // Bio-chem. And Biophys. Res. Commun. -1992. V. 183, № 1. - P. 93-99.

193. Hurley, T.D. Three-dimensional structure of mitochondrial aldehyde dehydrogenase: mechanistic implications / T.D. Hurley, C.G. Steinmetz, H. Weiner //Adv. Exptl. Med & Biol. 1999. - № 463. - P. 15-25.

194. Jelski, W. Human aldehyde dehydrogenase (ALDH) / W. Jelski, L. Chrostek, M. Szmitkowski // Postepy Hig Med Dosw. 2001. - Vol. 55, №2. -P.339-348.

195. Jobin, N. Improved immune functions with administration of a low-fat dietin a burn animal model / N. Jobin, DR. Garrel, J. Champoux, J. Bernier // Cell Immunol. 2000. - Vol. 206, №2. -P.71-84.

196. Johanson, D. Toxic shock syndrome following cessation of prophylactic antibiotics in a child with a 2% scald / D. Johnson, PD. Pathirana // Burns. 2002. -Vol. 28, №2.-P. 181-184.

197. Johansson, B. Distribution of disulfiram and its chief metabolites over eryth-r rocyte cell membranes and inactivation of erythrocyte aldehyde dehydrogenaseactivity / B. Johansson // Pharmacol Toxicol. 1990. - Vol. 66, №2. - P. 104108.

198. Kitson, KE. Ethanol and acetaldehyde metabolism: past, present, and future / KE. Kitson // Alcohol Clin Exp Res. 1996. - Vol. 20, №8. - P. 82-92.

199. Kitson, KE. Regulation of alcohol and aldehyde dehydrogenase activity: a metabolic balancing act with important social consequense / KE. Kitson // Alcohol Clin Exp Res. 1999. - Vol. 23, №6. - P. 958-962.

200. Koivusalo, M. Evidence for the identity of glutathione-dependent formaldehyde dehydrogenase and class in alcohol dehydrogenase / M. Koivusalo, M. Baumann, L. Votila//FEBS Lett. -1989. Vol.257, №1. -P. 105-109.

201. Koller, M. Major injury induces uncreased production of interleukin-10 in human granulocyte fractions / M. Koller, B. Clasbrummel, E. Kollig et al. // Langenbecks Arch Surg. 1998. - Vol. 383, №6. - P. 460-465.

202. Kosaka, K. Leukotoxin, a linoleate epoxide: its implication in the late death of patients with extensive burns / K. Kosaka, K. Suzuki, M. Hayakawa et al. // Mol Cell Biochem. -1994. Vol. 139, №2. - P. 141-148.

203. Kostir, J. Prime stanoveni michaelisovy Konstanty / J. Kostir // Chemicke Listy. 1985. - Vol.79, №9. - P. 989-991.

204. Kuang, X. The significance of postbum changes in plasma levels of ICAM-1, EL-10 and TNFalpha during early postburn stage in burn patients / X. Kuang, K. Ma, T. Duan // Zhonghua Shao Shang Za Zhi. 2002. - Vol. 18, №5. - P. 302-304.

205. Lewis, WH. Hypertrophic scar: a genetic hypothesis / WH. Lewis, KK. Sun // Bums. 1990. - Vol. 16, №3. - P. 176-178.

206. Li, H. The significance and characteristics of the internal distribution of Staphylococcal enterotoxin B in burned rats with sepsis / H. Li, Y. Yao, Z. Shi // Zhonghua Shao Shang Za Zhi. 2000. - Vol. 16, №2. - P. 85-88.

207. Li, H. The change in CD 14 mRNA expression in rats with scald injury and Staphylococcus aureus challenge / H. Li, Y. Yao, Z. Shi et al. // Zhonghua Shao Shang Za Zhi. 2002. - Vol. 18, №2. - P. 88-91.

208. Lindahl, R. Rat liver aldehyde dehydrogenase. T. Isolation and characterization of four high Km normal liver isozymes / R. Lindahl, S. Evces // The Journal of biological Chemistry. -1984. Vol. 259, № 19. - P. 11986-11990.

209. Lindahl, R. Rat liver Aldehyde Dehydrogenase. II. Isolation and characterization of four inducible isozymes / R. Lindahl, S. Evces // The Journal of biological Chemistry. 1984. - Vol. 259, №19. - P. 11991-11996.

210. Liu, XS. The significance of changes in serum tumour necrosis factor (TNF) activity in severely burned patients / XS. Liu, ZH. Luo, ZC. Yang et al. // Burns. 1994. - Vol. 20, №1. - P. 40-44.

211. Liu, J. The dynamic change in the expression of interleukin 18 mRNA in the tissue of scalded rats after delayed resuscitation / J. Liu, W. Gao, Y. Yao //f Zhonghua Shao Shang Za Zhi.-2001.-Vol. 17,№5.-P. 286-288.

212. Liu, DH. Downregulation of glucocorticoid receptors of liver cytosols and the role of the inflammatory cytokines in pathological stress in scalded rats /

213. DH. Liu, YP. Su, W. Zhang et al. // Bums. 2002. - Vol. 28, №4. - P. 315320.

214. Liu, Q. An exploration of the preventive effects on lanthanum chloride on enteral bacterial translocation in scalded rats / Q. Liu, Y. Zhang, G. Li et al. // Zhonghua Shao Shang Za Zhi. 2002. - Vol. 18, №2. - P. 81-83.

215. Lubart, R. A possible mechanism of low-level laser-living cell interaction / R. Lubart, Z. Malik, S. Rochkind, T. Fisher // Laser Theor. 1990. - Vol.2, №1. - P. 65-68.

216. Lubec, G. Reduced aldehyde dehydrogenase levels in the brain of patients with Down syndrome / G. Lubec, O. Labudova, N. Cairns et al. // J. Neural Transm Suppl. -1999. № 57. - P. 21-40.

217. Maas, DL. IL-1 beta and IL-6 act synergistically with TNF-alpha to alter cardiac contractile function after burn trauma / DL. Maas, J. White, JW. Horton // Shock. 2002. - Vol. 18, №4. - P. 360-366.

218. MacKerell, AD Jr. Human aldehyde dehydrogenase: kinetic identification of the isozyme for wich biogenic aldehydes and acetaldehyde compete / AD Jr. MacKerell, EE. Blatter, R. Pietruszko // Alcohol Clin Exp Res. 1986. - Vol. 10, №3.-P. 266-270.

219. Mandrup-Poulsen, T. Circulating interleukin-1 receptor antagonist concentrations are increased in adult patients with thermal injury / T. Mandrup-Poulsen, LD. Wogensen, M. Jensen et al. // Crit Care Med.- 1995. Vol. 23, №1. - P. 26-33.

220. Manthous, Ca. Endotoxin in human disease. Part I: Biochemistry, assay, and possible role in diverse disease states / Ca. Manthous, JB. Hall, RW. Samsel // Chest. 1993. - Vol. 104, №5. - P. 1572-1581.

221. Marodi, L. Staphylococcal enterotoxin A involvement in the illness of a 20-month-old burd patient / L. Marodi, R. Kaposzta, F. Rozgonyi, MS. Bergdoll // Pediatr Infect Dis. 1995. - Vol. 14, №7. - P. 632-634.

222. Markert, C.L. Lactate dehydrogenase. Biochemistry and function of lactate dehydrogenase / C.L. Markert // Cell. Biochem. and Funct. 1984. - V. 2, № 3. -P. 131-134.

223. Michiharu, I. Isolation and Characterization of Aldehyde Dehydrogenase Isozymes from Usual and Atypical Human Livers /1. Michiharu, C. Chaka, W. Gordon, Y. Akira // The Journal of Biological Chemistry. 1983. - Vol. 258, №10.-P. 6282-6287.

224. Miller, D. An Introduction to Medical Lasers / D. Miller // Biophotonics International. 1997. - №9. - P. 50-51.

225. Mcpherson, J.D. Evidence for glycation of horse liver alcohol dehydrogenase in vivo / J.D. Mcpherson, B.H. Shilton, D.J. Walton // Biochem. and Biophys. Res. Commun. 1988. -V. 152, № 2. -P. 711-716.

226. Murphy, JT. Thermal injury alters endothelial vasoconstrictor and vasodilator response to endotoxin / JT. Murphy, S. Duffy, GF. Purdue, JL. Hunt // J. Trauma. 1999. - Vol. 47, №3. - P. 492-498.

227. Nakae, H. Expression of heme oxygenase-1 in the lung and liver tissues in a rat model of bums / H. Nakae, H. Inaba // Burns. 2002. - Vol. 28, №4. - P. 305-309.

228. Ni, L. Human liver mitochondrial aldehyde dehydrogenase: three-dimensional structure and the restoration of solubility and activity of chimeric forms / L. Ni, J. Zhou, TD. Hurley, H. Weiner // Protein Sci. 1999. - Vol. 8, №12.-P. 2784-2790.

229. Ninfali, P. Acetaldehyde oxidation by aldehyde dehydrogenase loaded ery-trocytes / P. Ninfali, L. Rossi, L. Baronciani et al. // Adv Exp Med Biol. 1992. -№326.-P. 165-173.

230. Nomura, T. Aldehyde dehydrogenase 2 and glutathione S-transferase Ml polymorphisms in relation to the risk for oral cancer in Japanese drinkers / T. Nomura, H. Noma, T. Shibahara et al. // Oral Oncol. 2000. - Vol. 36, №1. -P. 42-46.

231. Ohlin, H. Atherosclerosis and acetaldehyde metabolism in blood / H. Ohlin, L. Brattstrom, B. Israelsson et al. // Boichem Med Metab Biol. 1991. - Vol. 46, №3.-P.317-328.

232. Ohta, S. Roles of mitochondrial dysfunctions in Alzheimers disease-contribution of deficiency of ALDH2 / S. Ohta // Rinsho Shinkeigaku. 2000. -Vol. 40,№12. - P. 1231-1233.

233. Oyake, S. Staphylococcal scalded skin syndrome developing during burn treatment / S. Oyake, T. Oh-i, M. Koga // J. Dermatol. 2001. - Vol. 28, №10. -P. 557-559.

234. Pallua, N. Pathogenic role of interleukin-6 in the development of sepsis. Part I: Study in a standardized contact burn murine model / N. Pallua, D. von Heim-burg//Crit Care Med.-2003.-Vol. 31,№5.-P. 1490-1494.

235. Park, KS. Proteomic alterations of the variants of human aldehyde dehydrogenase isozymes correlate with hepatocellular carcinoma / KS. Park, SY. Cho, H. Kim, YK. Paik // Int J Cancer. 2002. - Vol. 97, 32. - P. 261-265.

236. Pietruszko, R. Nitrate esters as inhibitors and substrates of aldehyde dehydrogenase / R. Pietruszko, N. Mukeijee, E. Blatter, T. Lehmann // Adv Exp Med Biol. 1995. - №372. - P. 25-34.

237. Pocker, Y. Kinetics and mechanism of methan and formaldehyde interconversion and formaldehyde oxidation catalyzed wy liver alcohol dehydrogenase / Y. Pocker, H. Li // Enzymol. and Mol. Biol. Carbon. Matal. 3. -N.Y., London? 1991.-P. 315-325.

238. Pruitt, BA Jr., Bum wound infections: current status / BA Jr. Pruitt, AT. McManus, CW. Goodwin, SH. Kim // World J Surg. 1998. - Vol. 22, № 2. -P. 135-145.

239. Reichard, JF. Characterization of 4-hydroxy-2-nonenal metabolism in stellate cell lines derived from normal and cirrhotic rat liver / JF. Reichard, V. Va-siliou, DR. Petersen // Biochim Biophys Acta. 2000. - Vol. 1487, № 2-3. - P.jJ222.232.

240. Ren, J. Effects of early enteral feeding and L-arginine supplementation on liver albumin synthesis in burned rats / J. Ren, S. Wang, J. Li, A. Li // Zhonghua Shao Shang Za Zhi. 2000. - Vol. 16, №4. - P. 206-209.

241. Riveros-Rosas, H. Enzymology of ethanol and acetaldehyde metabolism in mammals / H. Riveros-Rosas, A. Julian-Sanchez, E. Pina // Arch Med Res. -1997. Vol. 28, №4. - P. 453-471.

242. Rumbaugh, KP. The effects of infection of thermal injury by Pseudomonasaeruginosa PAOl on the murine cytokine response / KP. Rumbaugh, JA. Col-mer, JA. Griswold, AN. Hamood // Cytokine. 2001. - Vol. 16, №4. - P. 160168.

243. Sanz, M.C. Kinetic behavior of soluble and mitochondrial bound lactate dehydrogenase / M.C. Sanz, M.L. Sagrista, C. Liuis // Ital. J. Biochem. 1990. -V. 39, №1.-P. 21-29.

244. Sasaki, J. Prior burn insult induces lethal acute lung injury in endotoxemicmice: effects of cytokine inhibition / J. Sasaki, S. Fujishima, H. Iwamura et al. // Am J. Physiol Lung Cell Mol Physiol. 2003. - Vol. 284, №2. - P. 270-278.

245. Schwacha, MG. Resistance of macrophages to the suppressive effect of in-terleukin-10 following thermal injury / MG. Schwacha, CP. Schneider, KI. Bland, IH. Chaudiy //Am J Physiol Cell Physiol. -2001. Vol. 281, №4. - P. 1180-1187.

246. Seishiro, W. Aldehyde dehydrogenase-2 genotypes and HLA haplotupes in Japanese patients with esophageal cancer / W. Seishiro, S. Katsuyuki, K. Fumi-hiko, et al. // Oncology reports. 2002. - №9. - P. 1063-1068.

247. Sengezer, M. Cerium nitrate bathing prevents TNF-2 elevation following burn injury (experimental study) / M. Sengezer, M. Deved, M. Eski // Annals of Burns and Fire Disasiers. 1998. Vol. 11, №4. - P. 165-169.

248. Sharpe, AL. Substrate specificity of rat liver aldehyde dehydrogenase with chloroacetaldehydes / AL. Sharpe, DE. Carter // J Biochem Toxicol. 1993. -Vol. 18, №3. -P. 155-160.

249. Shimizu,T. The role of bacterial translocation on neutrophil activation during hemorrhagic shock in rats / T. Shimizu, T. Tani, K. Hanasawa et al. // Shock. -2001. Vol. 16, №1. -P. 59-63.

250. Shoeman, DW. Reaction of nitroxyl, an aldehyde dehydrogenase inhibitor, with N-acetyl-L-cysteine / DW. Shoeman, FN. Shirota, EG. DeMaster, HT. Nagasawa//Alcohol.-2000.-Vol. 20, №1.-P. 55-59.

251. Spies, M. Role of TNF-alpha in gut mucosal changes after severe burn / M. Spies, VL. Chappell, MR. Dasu et al. // Am J. Physiol Gastrointest Liver Physiol. 2002. - Vol. 283, №3. - P. 703-708.

252. Sroka, M. Effects on the mitosis of normal and tumor cells induced by light treatment of different walengths / M. Sroka, P.M. SchafTer, E. Duhmke, R. Baumgarter // Laser Surg Med. 1999. - Vol. 25, №3. - P. 263-271.

253. Steinmetz, C. Structure of mitochondrial aldehyde dehydrogenase / C. Steinmetz, P. Xie, H. Weiner, T.D. Hurley // Structure. 1997. - №5. - P. 701711.

254. Thomas, JA. TLR4 inactivation and rBPI (21) block burn-induced myocardial contractile dysfunction / JA. Thomas, MF. Tsen, DJ. White, JW. Horton // Am J. Physiol Heart Circ Physiol. 2002. - Vol. 283, № 4. - P. 1645-1655.

255. Tiina, K. Primary and secondary mechanisms of action of visible and near infra red radiation on cells / K. Tiina // J. Photochem Photobiol. 1999. - Vol. 49, №1.-P. 1-17.

256. Tsai, HJ. Effects of arginine supplementation on antioxidant enzyme activity and macrophage response in burned mice / HJ. Tsai, HF. Shang, CL. Yeh, SL. Yeh // Burns. 2002. - Vol. 28, № 3. - P. 258-263.

257. Tumage, RH. Mechanisms of pulmonary microvascular dysfunction during severe burn injury / RH. Turnage, F. Nwariaku, J. Murphy et al.// World J. Surg. 2002. - Vol. 26, №7. - P. 848-853.

258. Ulrich, D. Plasma endotoxin, procalcitonin, C-reactive protein, and organ functions in patients with major burns / D. Ulrich, EM. Noah, N. Pallua // Handchir Mikrochir Plast Chir. -2001. Vol. 33, №4. -P. 262-266.

259. Vallari, R.C. Interaction of Mg2+ with Human Liver Aldehyde Dehydrogenase. I. Species difference in the mitochondrial isozyme / R.C. Vallari, R. Pietruszko // The Journal of Biological Chemistry. 1984. - Vol. 259, № 8. -P. 4922-4926.

260. Vallari, R.C. Interaction of Mg2+ with Human Aldehyde Dehydrogenase. II. Mechanism and site of interaction / R.C. Vallari, R. Pietruszko // The Journal of Biological Chemistry. -1984. Vol. 259, № 8. - P. 4927-4933.

261. Viviane, D. B. Effects of dietary fatty acids on burn-induced immunosuppression / D. B. Viviane, B. Jacques, R.G. Dominique // Cellular Immunology. 2002. Vol. 220, №2. - P. 116-124.

262. Wang, X. Experimental study on the early liver injury and expression of TNF-alpha mRNA after burns complicated by endotoxemia / X. Wang, Y. Liu, J. Feng // Zhonghua Zheng Xing Shao Shang Wai Ke Za Zhi. -1999. Vol. 15, №2.-P. 95-98.

263. Wang, S. An experimental study of antibiotic-induced endotoxin release in Pseudomonas aeruginosa bacteremia inburned rats / S. Wang, B. Wu, F. Huang // Zhonghua Shao Shang Za Zhi. 2000. - Vol. 16, №2. - P. 93-95.

264. Wang, S. The influence of stress inhibition on the plasma levels of LPS, proinflammatory and Th 1/ Th 2 cytokines in severely scalded rats / S. Wang, W. Xu, Q. Cao // Zhonghua Shao Shang Za Zhi. 2001. - Vol. 17, №3. - P. 177180.

265. Wang, G. The role of Kupffer cells on the postburn production of TNFalpha, IL-1 beta and IL-6 in severely scalded rats / G. Wang, J. Tian, H. Tang et al. // Zhonghua Shao Shang Za Zhi. 2002. - Vol. 18, №5. - P. 282-284.

266. Wu, J. Dynamic changes of interleukin-1, interleukin-6 and tumor necrosis ^ factor in intermingled skin graft in burned rats / J. Wu, Y. Zhao, B. Hu et al. //

267. Chin J. Traumatol. 2001. - Vol. 4, №1. - 31-36.

268. Wu, Y. The change in plasma concentration of free amino acids during early postburn stage in severely scalded rats / Y. Wu, J. Chai, J. Li, L. Diao // Zhonghua Shao Shang Za Zhi. 2001. - Vol. 17, №4. - P. 215-218.

269. Xia, P. The effects of gutorigin lipopolysaccharide translocation on the apoptosis of lymphocytes in scalded rats / P. Xia, J. Zheng, H. Zhou et al. // Zhonghua Shao Shang Za Zhi. 2001. - Vol. 17, №4. - P. 228-230.

270. Xia, P.Y. Relationship between lymphocyte apoptosis and endotoxin translocation after thermal injury in rats / P.Y. Xia, J. Zheng, H. Zhou et al. // World J. Gastroenterol. -2002. Vol. 8, №3. - P. 546-550.

271. Xu, N. An experimental study of the LPS release from gram-negative bacteria induced by antibiotics (Part two) / N. Xu, J. Yuan, G. Xiao et al. // Zhonghua Shao Shang Za Zhi. 2002. - Vol. 18, №2. - P. 92-94.

272. Yadavalli, GK. Deactivation of the innate cellular immune response following endotoxic and surgical injury / GK. Yadavalli, JJ. Auletta, MP. Gould et al. // Exp Mol Pathol. 2001. - Vol. 71, №3. - P. 209-221.

273. Yamada, Y. Tumor necrosis factor-alpha and tamor necrosis factor receptor I, II levels in patients with severe burns / Y. Yamada, S. Endo, K. Inada et al. // Burns. 2000. - Vol. 26, №3. - P. 239-244.

274. Yamaguchi, H. Escherichia coli endotoxin enhances acute renal failure in rats after thermal injury / H. Yamaguchi, T. Kita, H. Sato, N. Tanaka // Burns. -2003. Vol. 29, №2. - P. 133-138.

275. Yao, YM. Endotoxemia in severely burned patients / YM. Yao // Zhonghua Wai Ke Za Zhi. 1993. - Vol. 31, №7. - P. 435-438.

276. Yao, Y. The protective effects and its underlying mechanism of 2,4-diamino-6-hydroxy-pyrimidine on postburn Staphylococcus aureus sepsis in rats / Y. Yao, H. Li, N. Dong et al. // Zhonghua Shao Shang Za Zhi. 2002. -Vol. 18, №2.-P. 84-87.

277. Yin, S J. Substrate binding pocket structure of human aldehyde dehydro-genase. A substrate specificity approach / SJ. Yin, MF. Wang, CL. Han, SL. Wang//Adv Exp Med Biol.- 1995. -№372.-P. 9-16.

278. Yoshida, A. Human aldehyde dehydrogenase gene family / A. Yoshida, A. Rzhetsky, C. Lily, C. Cheng // Eur. J. Biochem. 1998. - №251. - P. 549-557.

279. Zhang, Q. The dynamic changes of serum TNF alpha level in scalded rats after the administration of rh GH during the early postburn stage / Q. Zhang, Z. Liao, J. Liu // Zhonghua Shao Shang Za Zhi. 2001. - Vol. 17, №3. - P. 146*> 148.

280. Zhao, W. An experimental study on the relationship between early myocardial injury and the in situ expression of TNFalpha mRNA in burned rats withendotoxemia / W. Zhao, Y. Liu, S. Wang // Zhonghua Shao Shang Za Zhi. -2001.-Vol. 17, №2. — P. 114-117.

281. Zhou, J. The N-terminal portion of mature aldehyde dehydrogenase affects protein folding and assembly / J. Zhou, H. Weiner // Protein Sci. 2001. -Vol.10, №8.-P. 1490-1497.

282. Zong, G. Clinical study on the early and short-term use of antibiotics with broad spectrum in severely burned patients / G. Zong, M. Zhang, G. Zhang // Zhonghua Shao Shang Za Zhi. 2001. - Vol. 17, №2. -P. 99-101.

283. Zorzano, A. Differences in the kinetic properties and sensitivity to inhibitors of human placental, erythrocyte, and major hepatic aldehyde dehydrogenase isoenzymes / A. Zorzano, E. Herrera // Biochem Pharmacol. 1990. - Vol. 39, №5.-P. 873-878.

Информация о работе

Соловьева, Анна Геннадьевна
кандидата биологических наук
Нижний Новгород, 2005
ВАК 03.00.13

Диссертация

Активность альдегиддегидрогеназы печени и эритроцитов крыс в норме и при ожоговой токсемии - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы