Адипонектин в генезе атерогенной дислипидемии при метаболическом синдроме

Танянский, Дмитрий Андреевич

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Адипонектин в генезе атерогенной дислипидемии при метаболическом синдроме
ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Автореферат диссертации по теме "Адипонектин в генезе атерогенной дислипидемии при метаболическом синдроме"

ТАНЯНСКИЙ ДМИТРИЙ АНДРЕЕВИЧ

АДИПОНЕКТИН В ГЕНЕЗЕ АТЕРОГЕННОЙ ДИСЛИПИДЕМИИ ПРИ МЕТАБОЛИЧЕСКОМ СИНДРОМЕ

Специальность 03.00.04 - Биохимия

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание учёной степени кандидата медицинских наук

Санкт-Петербург 2009

003463951

Работа выполнена в отделе биохимии Государственного учреждения Научно-исследовательский институт экспериментальной медицины РАМН, Санкт-Петербург (директор - академик РАМН Ткаченко Борис Иванович).

Научный руководитель:

доктор медицинских наук, профессор Денисенко Александр Дорофеевич

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор Гуревич Виктор Савельевич доктор медицинских наук, профессор Галебская Людвига Вячеславовна

Ведущее учреждение:

ФГУ «Федеральный центр сердца, крови

и эндокринологии имени В.А. Алмазова Росмедтехнологий»

заседании Диссертационного с , , . ,

искание ученой степени кандидата наук при ГУ Научно-исследовательский институт экспериментальной медицины РАМН по адресу: 197376, Санкт-Петербург, Каменноостровский пр., д.69/71.

С диссертацией можно ознакомиться в научной библиотеке Научно-исследовательского института экспериментальной медицины РАМН по адресу: 197376, Санкт-Петербург, ул. Акад. Павлова, д.12.

Защита диссертации состоится

Автореферат разослан

Учёный секретарь

Диссертационного совета Д 001.022.03 доктор биологических наук, профессор Пучкова Л.В.

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Ишемическая болезнь сердца (ИБС), в основе которой лежит атеросклероз коронарных артерий, остается ведущей причиной смерти в индустриально развитых и во многих развивающихся странах, несмотря на заметный прогресс в диагностике, лечении и профилактике данного заболевания [Эпидемиология..., 1989; Tyroler et al, 2000]. Кроме того, с каждым годом увеличивается распространенность ожирения [Mokdad et al, 2003], являющегося самостоятельным фактором риска ИБС [Hubert et al, 1983]. Избыточная масса тела (МТ) также увеличивает вероятность развития других риск-факторов данного заболевания, таких как инсулинорезистентность (ИР) и СД 2 типа, атерогенная дислипидемия (аДЛП), артериальная гипертензия (АГ), про-тромботическое состояние [Kissebah, Krakower, 1994; Wajchenberg, 2000]. Комплекс этих нарушений, которые часто сочетаются друг с другом, увеличивая тем самым вероятность развития ИБС и смерти от нее, был назван синдромом инсулинорезистентности, синдромом X, или метаболическим синдромом (МС) [Reaven, 1988; Haffner et al, 1992; Чазова И.Е., Мычка В.Б., 2004].

Патогенез МС до настоящего времени полностью не изучен. Предполагается, что важную роль в его развитии играет изменение продукции адипоцито-кинов (липокинов, адипокинов) - биологически активных белков, которые образуются в жировой ткани и поступают в кровь [Lau et al, 2005]. Среди них особый интерес вызывает адипонектин, который, как показали исследования на трансгенных мышах, обладает антиатерогенным и антидиабетогенным действием [Yamauchi et al, 2003]. Согласно популяционным исследованиям содержание адипонектина в крови отрицательно коррелирует с уровнем триглицеридов (ТГ) и положительно - с концентрацией холестерина (ХС) липопротеинов (ЛП) высокой плотности (ХС ЛВП) [Abbasi et al, 2004; Hotta et al, 2000; Демидова Т.Ю. и др., 2006; Ерохина Е.Н., 2007]. Однако малоизученным остается вопрос о природе данных связей. В частности, до конца не ясно, оказывает ли адипонектин прямое действие на образование ЛВП и ТГ, или наблюдаемые взаимосвязи обусловлены влиянием данного адипокина на ИР, способствующей развитию аДЛП. Поскольку в патогенезе ИР и аДЛП при МС существенная роль отводится другому адипокину - лептину, нам казалось целесообразным проводить изучение влияния адипонектина с учетом содержания в крови лептина.

Цель и задачи исследования. Целью настоящего исследования является выявление роли адипонектина в развитии нарушений липидного обмена при метаболическом синдроме. В связи с этим были поставлены следующие задачи:

1. Изучить взаимосвязь содержания в крови адипонектина и лептина с наличием метаболического синдрома и показателями углеводного и липидного обмена у мужчин и женщин с различной массой тела.

2. Провести сравнительную оценку взаимосвязи концентрации в крови общего, мультимерного (ММ), олигомерного (ОМ) адипонектина и отношения ММ/общий адипонектин с показателями углеводного и липидного обмена.

3. Изучить возможную роль адипонектина в развитии инсулинорезистентно-сти.

4. Выявить метаболические пути, через которые адипонектин может оказывать воздействие на содержание в крови ТГ и ХС ЛВП.

5. Изучить влияние адипонектина на секрецию ТГ, апоВ, апоА-1, а также синтез мРНК апоА-1 клетками гепатомы человека (линия Нер02).

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Содержание адипонектина в крови у мужчин в наибольшей степени связано с концентрацией неэстерифицированных жирных кислот (НЭЖК) и является ее независимой детерминантой. У женщин содержание данного адипокина имеет преимущественную связь с ИР.

2. Взаимосвязь концентрации адипонектина с метаболическими параметрами реализуется за счет ММ, но не ОМ формы данного адипокина. При этом концентрация ММ адипонектина и отношение ММ/общий адипонектин не являются более значимыми маркерами метаболических нарушений, чем содержание общего адипонектина.

3. На связь концентрации адипонектина в крови с метаболическими параметрами значительное влияние оказывает пол и масса тела.

4. Концентрации в крови адипонектина, лептина и НЭЖК у женщин являются независимыми детерминантами индекса НОМА; у мужчин только уровень НЭЖК оказывает независимое влияние на этот показатель. Адипонектин у мужчин может оказывать воздействие на индекс НОМА косвенно - путем влияния на уровень НЭЖК.

5. Концентрации адипонектина и лептина в крови не оказывают прямого воздействия на содержание в крови ТГ и ХС ЛВП. При этом адипонектин влияет на содержание указанных липидов, воздействуя на метаболизм НЭЖК и глюкозы.

6. Добавление адипонектина к клеткам линии Нер02 приводит к снижению секреции апоВ и ТГ. При этом наблюдается снижение синтеза мРНК апоА-1 в этих клетках.

Научная новизна работы. Впервые выявлена независимая обратная связь содержания в крови адипонектина с концентрацией НЭЖК, которая наблюдалась у мужчин. Показано при этом, что содержание адипонектина является независимой детерминантой концентрации НЭЖК.

Впервые установлено, что у женщин концентрации в крови адипонектина, лептина и НЭЖК являются независимыми детерминантами ИР.

Установлено, что на связь концентрации в крови адипонектина с метаболическими параметрами значительное влияние оказывает ожирение. Так, содержание адипонектина обратно коррелирует с концентрацией НЭЖК у мужчин и индексом НОМА у женщин только при нормальной МТ. Вместе с тем при ожирении имеет место выраженная взаимосвязь концентрации адипонектина с частотой СД 2 типа.

Показано, что связь содержания адипонектина в крови с метаболическими параметрами реализуется за счет ММ формы данного вещества. При этом концентрация ММ адипонектина, либо отношение ММ/общий адипонектин, не яв-

ляются более значимыми маркерами метаболических нарушений, чем содержание общего адипонектина.

Впервые установлено, что адипонектин при добавлении к культивируемым клеткам линии Нер02 подавляет секрецию как апоВ, так и ТГ. Кроме того, выявлено, что под действием адипонектина происходит значительное снижение синтеза мРНК апоА-1 в этих клетках.

Теоретическое и практическое значение работы. Результаты, полученные в исследовании, расширяют представления о роли адипонектина в развитии аДЛП при МС. Так, выявленная независимая обратная связь содержания в крови данного адипокина с уровнем НЭЖК у мужчин является подтверждением гипотезы, согласно которой адипонектин, стимулируя в мышцах окисление НЭЖК, снижает их уровень в крови. Кроме того, в данной работе подтверждается положение о прямом, независимом от ряда других метаболических факторов, эффекте адипонектина на инсулинчувствительность. Так, установлено, что концентрация в крови адипонектина у женщин является независимой от содержания лептина и НЭЖК детерминантой ИР. Показано, что у представителей обоих полов содержание адипокинов в крови может оказывать воздействие на концентрации ТГ и ХС ЛВП посредством влияния на метаболизм НЭЖК и глюкозы. При этом независимой связи между содержанием адипокинов и уровнями этих липидов не наблюдается.

Наличие у лиц с нормальной МТ, но не у пациентов с ожирением, обратной корреляции содержания в крови адипонектина с ИР и с концентрацией НЭЖК позволяет предполагать, что данный адипокин оказывает воздействие на эти параметры в норме и на ранних этапах развития МС. Тем самым, по мере увеличения МТ и прогрессирования ИР у пациентов с исходно более низким уровнем адипонектина в большей степени возрастает риск развития таких нарушений, как СД 2 типа и аДЛП.

В исследовании на культуре клеток уточняются механизмы влияния адипонектина на липидный обмен. Показано подавляющее действие адипонектина как на продукцию гепатоцитами апоВ, так и ТГ. Выявленный подавляющий эффект адипонектина на экспрессию апоА-1 ставит под сомнение гипотезу, согласно которой положительная связь между концентрациями в крови адипонектина и ХС ЛВП объясняется воздействием адипокина на образование гепатоцитами ЛВП.

Показано, что определение содержания в крови ММ адипонектина не является более информативным в качестве оценки метаболических нарушений по сравнению с определением концентрации общего адипонектина.

Апробация работы. По теме диссертации опубликовано 10 работ (из них 4 статьи). Материалы диссертации докладывались и обсуждались на 11-й Всероссийской медико-биологической конференции молодых исследователей "Человек и его здоровье" (Санкт-Петербург, 2008), V конференции молодых ученых России с международным участием "Фундаментальные науки и прогресс клинической медицины" (Москва, 2008), IV Всероссийском диабетологическом конгрессе (Москва, 2008). Результаты диссертации также были опубликованы в сборниках материалов конференции "Современная кардиология: наука и прак-

тика" (Санкт-Петербург, 2007), конференции МАПО "Актуальные вопросы клинической и экспериментальной медицины" (Санкт-Петербург, 2007), 10-го Юбилейного научно-образовательного форума "Кардиология 2008" (Москва, 2008).

Работа поддержана грантами РФФИ 06-04-90818 и 08-04-01715.

Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из следующих разделов: Введение, Обзор литературы, Материалы и методы, Результаты исследований и их обсуждение, Заключение, Выводы, Список цитируемой литературы и Приложения. Работа изложена на 147 страницах машинописного текста, иллюстрирована 18 рисунками и 22 таблицами. Библиографический список использованной литературы содержит 240 источников.

Личный вклад. Соискатель самостоятельно проводил большинство экспериментов, включая работу на клиническом материале и культуре клеток, использовал статистические методы исследования, в том числе дисперсионный, корреляционный, регрессионный анализы. Соискатель по теме диссертационного исследования проводил анализ литературных данных и сопоставление с ними собственных результатов.

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Пациенты

В исследование включено 155 пациентов (89 женщин и 66 мужчин) в возрасте 29 - 83 (57,5 ± 9,2) лет. МС, который был выставлен согласно критериям ATP III [Executive Summary..., 2001], наблюдался у 104 (67%) человек. Остальные пациенты, у которых МС не был выявлен, вошли в состав группы контроля. У всех больных была диагностирована АГ согласно критериям, представленным на 7 докладе Объединенного Национального Комитета США по профилактике, выявлению, оценке и лечению АГ (JNC 7) [Chobanian et al, 2003]. У 90 (58%) пациентов наблюдалась стабильная стенокардия 1 - 3 ф. к. 35 (23%) пациентов находилось на лечении с СД 2 типа, выставленном согласно критериям ВОЗ 1999 года [World Health Organization..., 1999]. Данное заболевание у всех лиц проходило в стадиях компенсации и субкомпенсации, без выявленных осложнений. На момент обследования пациенты соблюдали гипогликемиче-скую диету, сахароснижающие и гиполипидемические препараты не принимали. Ожирение (индекс МТ (ИМТ) > 30 кг/м2) имело место у 67 (43%) человек, среди них ожирение II и III степени - у 20 (30%) и 4 (6%) пациентов, соответственно. ИМТ рассчитывали по формуле: ИМТ = масса тела, кг / рост2, м2.

В исследование не включали пациентов с гиперфункцией щитовидной железы, холестазом и наличием декомпенсированного СД.

Автор приносит глубокую благодарность врачу-кардиологу клиники ГУ НИИ Экспериментальной Медицины РАМН Фировой Эльвире Михайловне за подбор пациентов.

Определение биохимических показателей в образцах плазмы крови пациентов

Определение уровня глюкозы, показателей липидного спектра (кроме НЭЖК) проводили в плазме венозной крови, взятой утром натощак после 12-часового голодания. В качестве антикоагулянта использовали 3,8%-й раствор цитрата. Затем образцы были заморожены и хранились при t = -20°С для дальнейшего определения содержания общего адипонектина и его ММ формы, леп-тина, инсулина и НЭЖК.

Показатели липидного спектра крови - общий ХС (ОХС), ммоль/л, и ТГ, ммоль/л, определяли энзиматическими наборами реактивов "Биокон" (Германия) на анализаторе "ChemWell" (США). Концентрацию ХС ЛВП, ммоль/л, определяли прямым методом с использованием антител к ЛВП набора реактивов "Биокон" (Германия) на том же анализаторе. Содержание ХС ЛП низкой плотности (ХС ЛНП), ммоль/л, рассчитывали по формуле Фридвальда в модификации Д. Б. Шестова: ХС ЛНП = ОХС - (ТГ/2,2 + ХС ЛВП) [Friedewald et al, 1972; Шестов Д.Б., 1985]. Показатель коэффициента атерогенности (КА) рассчитывали по формуле: КА = (ОХС - ХС ЛВП)/ХС ЛВП [Климов А.Н., 1977]. Концентрацию НЭЖК, ммоль/л, определяли колориметрическим методом с помощью ферментных наборов фирмы "Randox" на спектрофотометре СФ-26 "ЛОМО" (Россия).

Концентрацию глюкозы, ммоль/л, определяли на биохимическом анализаторе "EOS-BRAVO" фирмы "Hospitex" (Швеция) глюкозооксидазным методом. Содержание инсулина, мкЕД/мл, и лептина, нг/мл, оценивали "сэндвич"-вариантом иммуноферментного анализа (ИФА) с использованием наборов фирмы "DRG" (Германия) на микропланшетном ридере "Е1х800" фирмы "Фин-Био" (Финляндия). Для более точной оценки степени ИР рассчитывали индекс НОМА (Homeostasis model assessment) по формуле: НОМА = инсулин, мкЕД/мл * глюкоза, ммоль/л /22,5 [Matthews et al, 1985]. Для оценки функции р-клеток рассчитывали индекс HOMA-pcell по формуле: 20 * инсулин, мкЕД/мл /(глюкоза, ммоль/л - 3,5) [Matthews et al, 1985].

Содержание адипонектина, мкг/мл, определяли конкурентным вариантом ИФА с использованием наборов фирмы "BioVendor" (Чехия), а концентрацию ММ адипонектина, мкг/мл, - "сэндвич"-вариантом ИФА с использованием наборов фирмы "LINCO Research" (США) на микропланшетном ридере "Е1х800" фирмы "ФинБио" (Финляндия). Содержание ОМ адипонектина, мкг/мл, определяли расчетным путем: ОМ адипонектин = Общий адипонектин - ММ ади-понектин.

Определение содержания глюкозы, ТГ, ОХС и ХС ЛВП проводилось в лаборатории клиники НИИЭМ РАМН. В связи с этим автор приносит благодарность заведующей данной лаборатории к. б. н. Шатилиной Ларисе Владимировне.

Работа с клеточной культурой Материалы исследования

Культура клеток гепатомы человека, HepG2, была получена из Американской коллекции клеточных культур (АТСС, "Национальные институты здоровья NIH", США), хранилась и поддерживалась в отделе клеточных культур Института цитологии РАН. Рекомбинантный адипонектин человека, который экс-прессировался в клетках линии НЕК293 (Human embryonic kidney cell line), был получен из фирмы "BioVendor" (Чехия). Эмбриональная телячья сыворотка, культуральная среда - Dulbecco's modified Eagle's medium (DMEM), фосфатно-солевой буфер (ФСБ) - фирмы "Биолот" (Санкт-Петербург). Планшеты для культивирования клеток - фирмы "Sarstedt" (Германия), для ИФА - фирмы "Nunc" (Дания). Для определения концентрации ТГ использовали наборы фирмы "Randox" (Великобритания). Антитела к апоВ человека, конъюгаты апоВ и апоА-1 с пероксидазой хрена получены в отделе биохимии НИИЭМ РАМН и предоставлены его сотрудниками (Суконина В.Е., Архипова О.Ю.). Антитела к апоА-1 - из фирмы "AbD Serotec" (Великобритания). Для приготовления блокирующего буфера (блок неспецифического связывания) использовали 70%-й казеин (ГосНИИ Особо Чистых Биопрепаратов, Санкт-Петербург, любезно предоставлен Родиным C.B.). В качестве стандарта использовали калибратор аполипопротеинов, полученный из фирмы "Chronolab" (Швейцария).

Методы исследования

Культивирование клеток

Культивирование клеток проводили в С02-инкубаторе (содержание С02 -5%) при 37°С. Клетки культивировали в среде DMEM, содержащей 10% эмбриональной телячьей сыворотки, на 24-луночном планшете в течение 3-х суток. После этого среду из лунок удаляли и заменяли ее средой DMEM без сыворотки с добавлением и без добавления адипонектина. Инкубировали клетки в течение суток. Затем среду из лунок отбирали для последующего определения в ней содержания ТГ, апоВ, апоА-1. Монослой клеток отмыли 3 раза 0,01М ФСБ (pH 7,4), добавляли 50 мкл деионизованной воды и производили его замораживание при t = -70°С. После оттаивания при комнатной температуре клеточные лизаты центрифугировали, а образцы надосадочной жидкости использовали для определения белка по методу Брэдфорд [Bradford, 1976].

Определение содержания ТГи аполипопротеинов в кулътуральной среде

Содержание ТГ в культуральной среде определяли энзиматическим колориметрическим методом. Концентрации апоВ и апоА-1 определяли путем использования "сэндвич-варианта" ИФА, разработанного в отделе биохимии НИИЭМ РАМН (Суконина В.Е., Архипова О.Ю).

Определение экспрессии мРНК апоА-1

Тотальную РНК из культивируемых клеток выделяли с использованием RNA STAT-60 реагента ("Tel-Test inc.", США) в соответствии с инструкциями изготовителя. После обработки ее ДНКазой I, свободной от РНКазы ("Roche Applied Science", Германия), для получения одноцепочечной кДНК проводили реакцию обратной транскрипции с РНК (2 мкг) с использованием oligo(dT) праймера и обратной транскриптазы ("Invitrogen", США). ПЦР в реальном времени проводили на анализаторе нуклеиновых кислот "АНК-32" ("Синтол", Москва) с референсным красителем ROX. Праймеры подбирали по программе "Primer3" (Whitehead Institute/MIT Center of Genome Research, США). В качестве внутреннего контроля прохождения ПЦР использовали уровень экспрессии мРНК глицеральдегидфосфат-дегидрогеназы. Для апоА-1 использовали праймеры ("Синтол", Москва): прямой - 5'-CCTTGGGAAAACAGCTAAACC-3', обратный - 5'-CAGCTTGCTGAAGGTGGAG-3' и в качестве флуоресцентного зонда - 5'-FAM-AGCTCCTTGACAACTGGGACAGCGT-BHQl-3'; для глице-ральдегидфосфат-дегидрогеназы - прямой - 5-AAGGGCATCCTGGGCTAC-3', обратный - 5'-GTGGAGGAGTGGGTGTCG-3', в качестве флуоресцентного зонда - 5'-Cy5-TGAGCACCAGGTGGTCTCCTCTGAC-RTQ2-3'.

Автор выражает глубокую благодарность вед. н. е., к. б. н. Диже Элле Борисовне и с. н. е., к. б. н. Орлову Сергею Викторовичу за помощь в проведении этой части работы.

Статистическая обработка результатов

Статистическая обработка полученных данных проведена на компьютере с использованием пакета программ "Statistica 6.0" ("StatSoft", США). Данные представлены в виде средних арифметических значений и стандартных отклонений (M ± SD). В статистическом анализе все параметры, за исключением возраста и показателей антропометрии, для увеличения нормальности распределения трансформировали в логарифмированную форму. Анализ отличий антропометрических и метаболических показателей между 2-мя группами пациентов проводили с помощью непарного t-критерия Стьюдента. Анализ отличий показателей среди 3-х и более групп обследуемых оценивали с помощью однофак-торного дисперсионного анализа (one-way ANOVA test). Среди показателей, у которых выявили в группах достоверные изменения (Р < 0,05), для попарных сравнений использовали апостериорный критерий Bonferroni (Post hoc Bon-ferroni test). Для относительных величин (частота СД 2 типа, соотношение полов) применяли критерий у?. Для выявления взаимосвязей между различными параметрами проводили корреляционный анализ по Пирсону, в том числе с контролем по полу, возрасту и ИМТ, а также множественный регрессионный анализ. В опытах на культуре клеток при анализе отличий в группах использовали непарный t-критерий Стьюдента.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Содержание адипонектина и лептина у пациентов с метаболическим синдромом

В начале исследования мы оценили содержание в крови адипонектина и лептина у пациентов с МС. Выяснилось, что по сравнению с контрольной группой у мужчин и женщин с МС наблюдалось более низкое содержание в крови адипонектина и более высокое - лептина (рис. 1).

Контроль МС Контроль МС

Рис. 1. Содержание адипонектина (А) и лептина (Б) у мужчин (Ш) и женщин (И) с метаболическим синдромом

Примечание: * — р < 0,001 и ** — р < 0,0001 - достоверность половых различий, # - р < 0,05, ## - р < 0,01 и ### — р < 0,0001 по сравнению с контролем.

Таким образом, у пациентов с МС обнаружен адипокиновый дисбаланс, что согласуется с данными других авторов [Gannage-Yared et al, 2006; You et al, 2008]. Адипокиновый дисбаланс, вероятно, может иметь определенное значение в патогенезе целого ряда нарушений при МС, в частности аДЛП. В связи с этим на дальнейших этапах работы основное внимание было сконцентрировано на выявлении взаимосвязи содержания в крови адипонектина с различными параметрами обмена углеводов и липидов и оценке возможной роли данного ади-покина в развитии аДЛП.

Взаимосвязь содержания адипокинов с показателями углеводного и липидного обмена

Для того чтобы выявить взаимосвязь содержания в крови адипонектина с параметрами обмена углеводов и липидов, пациенты были разделены на 3 группы (тертили) по концентрации в крови данного адипокина (табл. 1 и 2).

Таблица 1. Клшшко-метаболическне показатели у мужчин с различными концентрациями адипонектина в плазме крови

Показатели Тертили Р1

I (п = 23) 11 (п = 21) 111 (п = 22)

Адипонектин, мкг/мл 2,80 ± 0,40 (1,90-3,40) 4,13 ±0,35 (3,55-4,69) 7,31 ±3,13 (4,70- 14,59) -

Возраст, годы 51,61 ±8,65 55,43 ±7,14 60,23 ± 10,95" <0,01

ИМТ, кг/мг 29,45 ± 3,24 29,02 ± 3,97 27,09 ±5,19 Н.д.

ОТ, см 100,45 ± 10,03 100,05 ±11,82 93,91 ± 15,70 Н.д.

ОТ/ОБ 1,00 ±0,07 0,99 ± 0,08 0,94 ± 0,09' <0,05

Частота СД 2 типа, % 39,13 4,76'" 9,09'" -

Глюкоза, ммоль/л 7,06 ± 2,79 5,73 ± 1,39 5,45 ± 0,86' <0,05

Инсулин, мкЕД/мл 13,14 ±7,95 10,08 ±5,26 9,06 ± 6,54 Н.д.

НОМА 4,03 ± 2,53 2,60 ± 1,46 2,25 ± 1,72" <0,05

НЭЖК, ммоль/л 0,46 ±0,27 0,36 ± 0,20 0,23 ±0,10"'* <0,0001

ТГ, ммоль/л 4,05 ±3,48 3,28 ±2,68 1,73 ±0,74"* <0,01

ОХС, ммоль/л 6,14 ± 1,30 6,36 ± 1,95 5,85 ± 1,09 Н.д.

ХС ЛНП, ммоль/л 3,34 ± 1,36 3,83 ± 1,53 3,96 ± 1,12 Н.д.

ХС ЛВП, ммоль/л 0,97 ±0,13 1,04 ±0,18 1,10± 0,18' <0,05

КА 5,46 ±1,58 5,24 ±2,19 4,53 ±1,42 Н.д.

Лептин, нг/мл 7,23 ± 3,00 7,80 ±5,38 8,16 ±7,96 Н.д.

Примечание: п - количество пациентов,5 — значения достоверности отличий среди групп, определенные согласно однофакторному дисперсионному анализу. Отличия достоверны по сравнению с первой группой при: — р < 0,05, — р < 0,01, — р < 0,001 и по сравнению со второй группой при * — р < 0,05. Н.д. - не достоверно.

Оказалось, что у мужчин увеличение содержания адипонектина в крови сопровождалось снижением уровня глюкозы, уменьшением индекса НОМА и частоты СД 2 типа (табл. 1). Кроме того, у пациентов с высоким уровнем адипонектина отмечалось более низкое содержание в крови ТГ и НЭЖК и более высокое - ХС ЛВП. Обращает также на себя внимание более высокий возраст и более низкий показатель "окружность талии/окружность бедер" (ОТ/ОБ) у этих лиц. При этом отличия по ИМТ и окружности талии (ОТ) по сравнению с пациентами с низким содержанием адипонектина носили недостоверный характер. У женщин, в отличие от мужчин, при данном анализе была выявлена обратная связь содержания адипонектина с ИМТ и обоими показателями абдоминального ожирения (АО) (табл. 2). Кроме того, также как и у мужчин, у женщин с высоким уровнем адипонектина отмечались более низкие концентрации в крови глюкозы, НЭЖК и ТГ, более низкая частота СД 2 типа, а также меньшие значения индекса НОМА и КА.

Таблица 2. Клинико-метаболические показатели у женщин с различными концентрациями адипонектина в плазме крови

Показатели Тертили Р5

I (п = 28) II (п = 30) III (п = 31)

Адипонектин, мкг/мл 3,51 ±0,83 (2,00-4,69) 6,30 ±1,00 (4,70 - 7,97) 11,65 ±3,06 (8,18-19,79) _

Возраст, годы 56,11 ±8,19 58,87 ± 9,25 61,10 ±8,34 Н.д.

ИМТ, кг/м" 31,09 ±4,23 30,54 ±5,95 26,92 ±5,14"* <0,01

ОТ, см 99,14 ± 10,29 97,93 ± 14,64 90,71 ± 16,99' <0,05

ОТ/ОБ 0,98 ± 0,08 0,96 ± 0,09 0,91 ± 0,12" <0,01

Частота СД 2 типа, % 50 20"- 10'" -

Глюкоза, ммоль/л 6,25 ± 1,42 5,82 ±1,58 5,13 ±0,73" <0,01

Инсулин, мкЕД/мл 13,82 ± 11,62 9,69 ±4,63 6,71 ±2,87""* < 0,0001

НОМА 3,76 ±2,56 2,59 ± 1,63' 1,57 ±0,77"'* <0,0001

НЭЖК, ммоль/л 0,42 ±0,15 0,39 ±0,15 0,29 ±0,09"* <0,01

ТГ, ммоль/л 2,93 ± 1,5 2,66 ±1,50 1,80 ±0,91*"* <0,01

ОХС, ммоль/л 7,34 ± 1,84 6,48 ± 1,43 6,62 ± 1,54 Н.д.

ХС ЛНП, ммоль/л 4,89 ± 1,93 4,39 ±1,12 4,72 ±1,48 Н.д.

ХС ЛВП, ммоль/л 1,00 ±0,11 1,01 ±0,12 1,08 ±0,19 Н.д.

КА 6,44 ± 2,21 5,72 ±1,78 5,34 ± 1,97' <0,05

Лептин, нг/мл 25,78 ± 19,85 22,34 ± 15,11 26,11 ±25,28 Н.д.

Примечание: Отличия достоверны по сравнению с первой группой при: * — р < 0,05," — р < 0,01, *" - р < 0,001 и по сравнению со второй группой при: * - р < 0,05. Остальные обозначения - как в предыдущей таблице.

Представленные результаты в целом подтверждаются данными корреляционного анализа, согласно которому у пациентов обоего пола содержание в крови адипонектина обратно коррелировало с параметрами антропометрии, частотой СД 2 типа, концентрациями глюкозы, НЭЖК, ТГ и положительно - с содержанием ХС ЛВП. Кроме того, у женщин содержание адипонектина отрицательно коррелировало с концентрацией инсулина и индексом НОМА.

В отличие от адипонектина, содержание в крови лептина положительно коррелировало с параметрами антропометрии, индексом НОМА, концентрациями инсулина и ТГ. При этом связь содержания лептина с параметрами антропометрии являлась наиболее выраженной среди всех изучаемых показателей (г = 0,5 - 0,6). В связи с этим вполне вероятно, что выявленные корреляции содержания в крови лептина, как и адипонектина, с метаболическими параметрами отражают взаимосвязь данных адипокинов с ожирением. С другой стороны, не исключено, что содержание адипокинов может быть независимым образом связано с метаболическими параметрами. Для выявления независимых связей концентраций адипокинов с метаболическими параметрами были рассчитаны частные корреляции с контролем по ИМТ. Выяснилось, что после выравнивания по возрасту и ИМТ у мужчин достоверная корреляция сохранилась только между концентрациями в крови адипонектина и НЭЖК, тогда как у женщин значимые, хотя и менее выраженные, чем до выравнивания, корреляции наблю-

дались между содержанием адипонектина и индексом НОМА, частотой СД 2 типа, уровнями глюкозы, инсулина и ТГ. Содержание в крови лептина при этом коррелировало только с концентрацией инсулина и гомеостатическими параметрами "инсулин - глюкоза" (индексы НОМА и НОМА-рсе11). Таким образом, в отличие от лептина, содержание в крови адипонектина после выравнивания по ИМТ связано с некоторыми параметрами липидного обмена.

Взаимосвязь содержания различных молекулярных форм адипонектина с метаболическими параметрами

Известно, что адипонектин в крови находится в низкомолекулярной (три-мерной), среднемолекулярной (гексамерной) и высокомолекулярной (ММ) формах. Предполагается, что биологические эффекты адипонектина отражают действие его ММ формы [Lara-Castro et al, 2006; Blücher et al, 2007]. В связи с этим мы решили выяснить, является ли содержание ММ адипонектина в крови или отношение его концентрации к общему более информативным в качестве маркера метаболических нарушений по сравнению с концентрацией общего адипонектина.

Установлено, что концентрации общего и ММ адипонектина коррелировали с большинством метаболических параметров в одинаковой степени. Однако у мужчин концентрация в крови ММ адипонектина более выраженно, чем концентрация общего, коррелировала с уровнем инсулина и индексом НОМА. У женщин содержание ММ формы адипонектина более сильно, чем содержание общего, коррелировало с концентрацией НЭЖК. При этом концентрация ОМ адипонектина практически ни с одним из рассмотренных показателей углеводного и липидного обмена не была связана. Однако после выравнивания по возрасту и ИМТ корреляции содержания ММ адипонектина, как и общего, с уровнем инсулина и индексом НОМА у мужчин и с концентрацией НЭЖК у женщин утратили достоверность.

Следует также отметить, что отношение MM/общий адипонектин не являлось более значимым показателем, чем содержание ММ, либо общего адипонектина. Так, хотя у мужчин после выравнивания по возрасту и ИМТ отношение MM/общий адипонектин в большей степени по сравнению с содержанием ММ адипонектина коррелировало с параметрами ИР, данный показатель не был связан с уровнем НЭЖК. Сходным образом, у женщин данное отношение в несколько большей степени по сравнению с содержанием ММ адипонектина коррелировало с уровнем НЭЖК, однако с ИР этот параметр не был связан.

Таким образом, результаты представленного анализа свидетельствуют о том, что концентрация ММ адипонектина, либо отношение MM/общий адипонектин, не являются более значимыми маркерами метаболических нарушений, чем содержание общего адипонектина.

Взаимосвязь содержания адипокинов с метаболическими параметрами у пациентов с нормальной массой тела и у пациентов ожирением

Далее мы попытались более подробно проанализировать, зависит ли влияние содержания в крови адипонектина на показатели обмена углеводов и липидов от МТ. С этой целью мы сопоставили корреляции изученных параметров в группах пациентов с ожирением (ИМТ> 30 кг/м2) и без ожирения (ИМТ < 27 кг/м2). Оказалось, что у мужчин содержание адипонектина коррелировало с уровнем НЭЖК только в группе с нормальной МТ (рис. 2А). Сходным образом у женщин связь содержания адипонектина с такими параметрами, как индекс НОМА (рис. 2Б) и уровень инсулина, имела место только при нормальной МТ.

без ожирения: г = -0,45, р = 0,02 с ожирением: г = -0,19, р = 0,3

0,2 г

ад И н

И |

В I 2

0,0 -0,2 -0,4 -0,6 -0,8 -1,0

"о-, без ожирения: г =-0,53, р = 0,001 с ожирением: г = -0,18, р = 0,3 1,0 0,8 У 0,6

< 0,4 0,2 0,0 -0,2 -0,4

0,2 0,4 0,6 0,8 1,0 1,2 Адипонектин, мкг/мл, ^

Л,2 0,4 0,6 0,8 1,0 1,2 1,4

Адипонектин, мкг/мл, 1%

Рис. 2. Корреляции содержания адипонектина с концентрациями НЭЖК у мужчин (А) и индексом НОМА у женщин (Б) без ожирения, ИМТ < 27 кг/м2 (о), и с ожирением, ИМТ > 30 кг/м2 (•)

Однако у пациентов с ожирением высокое содержание адипонектина ассоциировалось с более низкой частотой СД 2 типа (рис. 3).

50 и

«<г 40 ^

н 30

ся

и 20 -

с: Н

о н 10 -

¡г о -

г? 50 -

к 40 -

С4

ч 30 -

СС 20 -

н V ю -

5- о -

без ожирения с ожирением

Рис. 3. Частота СД 2 типа при нормальной массе тела (ИМТ < 27 кг/м ) и ожирении (ИМТ > 30 кг/м2) у мужчин (А) и женщин (Б) с низким (□) и высоким (ш) уровнем адипонектина. Группы с высоким н низким уровнем адипоиектина были разделены по медиане концентрации данного адипокина.

Примечание: * — р < 0,01, **-р<0,001.

Таким образом, между группами пациентов с нормальной МТ и с ожирением наблюдаются различия в степени связи содержания адипонектина с метаболическими параметрами. Наличие у лиц с нормальной МТ корреляции содержания адипонектина с ИР и с концентрацией НЭЖК позволяет предполагать, что данный адипокин оказывает воздействие на эти параметры при нормальной МТ, то есть в норме и на ранних этапах развития МС. При этом по мере увеличения МТ и прогрессирования ИР у пациентов с более низким уровнем адипонектина в большей степени возрастает риск развития СД 2 типа. Отсутствие на этом фоне корреляции содержания адипонектина с ИР у пациентов с ожирением можно объяснить несколькими причинами. Во-первых, низкими концентрациями адипонектина и их небольшими колебаниями у пациентов с ожирением, что естественно приводит к снижению степени воздействия данного адипокина на ИР. Во-вторых, влиянием на развитие ИР значительного числа других факторов (НЭЖК, другие адипокины), уровень которых при ожирении повышен. Хотя, согласно нашим данным, содержание лептина, также как и содержание адипонектина, коррелировало с индексом НОМА только у пациентов без ожирения (г = 0,47, р < 0,05 и г = 0,29, р = 0,14 у мужчин с нормальной МТ и ожирением; г = 0,51, р <0,01 и г = 0,2, р = 0,2-у женщин в тех же группах).

Итак, ожирение оказывает воздействие не только на содержание адипоки-нов и на значения метаболических параметров, но и на взаимосвязи между ними. Вклад адипонектина в развитие ИР и аДЛП может при этом зависеть и от того, какую роль в развитии данных нарушений оказывают другие факторы, такие как НЭЖК, лептин, уровень которых повышается при ожирении.

Роль адипонектина в развитии инсулинорезистентности

Показатель ИР - индекс НОМА - положительно коррелировал со степенью АО, КА, с концентрациями в крови ТГ, ОХС и обратно - с ХС ЛВП (табл. 3). Кроме того, индекс НОМА положительно был связан с концентрациями НЭЖК и лептина и отрицательно — с уровнем адипонектина. Причем каждый из этих параметров коррелировал с индексом НОМА независимо от ИМТ (табл. 3).

У пациентов с ожирением содержание в крови НЭЖК, в отличие от содержания адипонектина и лептина, выраженно коррелировало с индексом НОМА, в то время как у лиц без ожирения наблюдалась только тенденция к положительной связи (г = 0,3, р = 0,15 и г = 0,56, р < 0,001 у мужчин с нормальной МТ и ожирением; г = 0,34, р = 0,055 и г = 0,51, р < 0,001 - у женщин в тех же группах). Таким образом, можно предположить, что повышение уровня НЭЖК является одним из тех факторов, которые перекрывают эффекты адипонектина и лептина на развитие ИР у лиц с ожирением.

Таблица 3. Корреляции индекса НОМА с клинико-метаболическими показателями до и после выравнивания по полу, возрасту и ИМТ

Параметр Без выравнивания После выравнивания по полу, возрасту и ИМТ

Возраст, годы -0,2' -

ИМТ, кг/м^ 0,42" -

ОТ, см 0,47' 0,23'

ОТ/ОБ 0,38' 0,17'

Лептин, нг/мл 0,29' 0,24"

Адипонектин, мкг/мл -0,39' -0,25'

НЭЖК, ммоль/л 0,47' 0,39'

ТГ, ммоль/л 0,40" 0,20'

ОХС, ммоль/л 0,23' 0,20'

ХС ЛНП, ммоль/л 0,02 0,08

ХС ЛВП, ммоль/л -0,38' -0,26'

КА 0,33" 0,25'

Примечание: корреляции достоверны при — р < 0,05.

Для более детальной оценки роли НЭЖК и адипокинов в развитии ИР был проведен регрессионный анализ. Установлено, что у женщин концентрации в крови НЭЖК ((3 = 0,39, р < 0,0001), лептина (Р = 0,42, р < 0,0001) и адипо-нектина (р = -0,34, р < 0,0001) являлись независимыми детерминантами индекса НОМА (г2 = 0,53, р < 0,0001). При этом у женщин содержание в крови адипо-нектина являлось независимой детерминантной как концентрации инсулина, так и глюкозы. Вместе с тем у мужчин из этих параметров достоверное влияние на индекс НОМА оказывала только концентрация НЭЖК (Р = 0,52, р < 0,0001; г2 = 0,43, р < 0,0001). Таким образом, на основании представленных данных можно сделать предположение о независимой роли адипокинов в развитии ИР у женщин. Однако у мужчин, в отличие от женщин, содержание адипокинов не оказывает непосредственного влияния на ИР. Вместе с тем адипонектин у мужчин, вероятно, способен воздействовать на ИР через влияние на уровень НЭЖК. Так, согласно результатам регрессионного анализа, после включения в модель в качестве независимых переменных возраста, ИМТ, концентраций глюкозы, инсулина, адипонектина и лептина, а в качестве зависимой - содержания НЭЖК, оказалось, что у мужчин концентрации в крови глюкозы (Р = 0,27, р < 0,05) и адипонектина (Р = -0,23, р < 0,05) являлись независимыми предикторами содержания НЭЖК (г2 = 0,43, р < 0,0001).

Роль адипонектина в развитии атерогеннон дислипидемин

Для данного исследования были сформированы группы пациентов с нор-молипидемией (п = 14), изолированной гипертриглицеридемией (иГТГ, п = 32) и комбинированной гиперлипидемией (кГЛП, п = 39). У пациентов с иГТГ и кГЛП наблюдались АО, увеличенная частота СД 2 типа, повышение индекса НОМА и КА, а также содержания в крови глюкозы, инсулина, НЭЖК, ТГ и снижение - ХС ЛВП. Помимо этого, выяснилось, что снижение уровня адипонектина при аДЛП наблюдалось у мужчин и у женщин, в то время как увеличение уровня лептина имело место только у женщин, причем достоверное - только при кГЛП (рис. 4). Эти данные в целом согласуются с результатами предыдущего анализа, согласно которому содержание адипонектина в большей степени по сравнению с концентрацией лептина связано с липидными показателями. Кроме того, нужно учитывать, что выявленный адипокиновый дисбаланс у пациентов с аДЛП в значительной степени обусловлен влиянием на него ИМТ.

ч 16

Е 14

и £ 12

я 10

£ 8

а 6

Б 4

4 2

***

хг

— —1 К иГТГ кГЛП

в"

в н 20

п 10

т— I

К иГТГ кГЛП

Рис. 4. Содержание адипонектина (А) и лептина (Б) у мужчин (□) и женщин (И) при изолированной гипертриглнцеридемии и комбинированной гиперлипидемии

Примечание: К - контроль (нормолипидемия), иГТГ - изолированная ГТГ, кГЛП - комбинированная ГЛП; * — р < 0,05, ** -р < 0,01,*** — р < 0,001 по сравнению с контролем.

При расчете частных корреляций с контролем по полу, возрасту и ИМТ выяснилось, что содержание в крови ТГ коррелировало с индексом НОМА (г = 0,20, р < 0,05), концентрациями глюкозы (г = 0,36, р < 0,05), НЭЖК (г = 0,33, р < 0,05) и адипонектина (г = -0,22, р < 0,05), в то время как содержание ХС ЛВП было связано с индексом НОМА (г = -0,26, р < 0,05), концентрациями инсулина (г = -0,20, р < 0,05), глюкозы (г = -0,22, р < 0,05), НЭЖК (г = -0,29, р < 0,05). Результаты регрессионного анализа показали, что у мужчин на содержание в крови ТГ оказывали независимое влияние ИМТ (Р = 0,36, р < 0,05), концентрации глюкозы (Р = 0,25, р < 0,05) и НЭЖК (0 = 0,25, р < 0,05), а у женщин - ИМТ (Р = 0,46, р < 0,05) и концентрация глюкозы (Р = 0,23, р < 0,05). На уровень в крови ХС ЛВП у мужчин оказывала влияние концентрация глюкозы (Р = -0,28, р < 0,05), а у женщин - НЭЖК (Р = -0,27, р < 0,05).

На основании проведенного анализа можно представить следующую вероятную схему участия адипонектина в генезе аДЛП в обследованной клинической группе (рис. 5). Снижение в крови концентрации адипонектина у мужчин приводит к повышению содержания в крови НЭЖК, что влечет за собой как увеличение продукции ТГ печенью, так и замедление их катаболизма (так как НЭЖК являются ингибиторами липопротеинлипазы). Помимо этого снижение уровня адипонектина влечет за собой увеличение ИР с повышением уровней глюкозы и инсулина, которые также посредством воздействия на данные механизмы способствуют повышению уровня ТГ в крови. Увеличение концентрации ТГ, в свою очередь, посредством активации белка, переносящего эфиры ХС, (БП-ЭХС) приводит к усилению катаболизма ЛВП. Снижению уровня ХС ЛВП также способствует высокая концентрация в крови НЭЖК (путем активации БП-ЭХС), а также гипергликемия (путем ингибирования липопротеинлипазы).

f [лептина] ! [адипонектина]

инсулинорезистентность Т [НЭЖК]

Рис. 5. Гипотетическая схема участия адипонектина в генезе аДЛП

Примечание: [ ] - концентрация вещества, | — увеличение, [ — снижение.

Влияние адипонектина на секрецию клетками HepG2 ТГ, апоВ и апоА-1

Как было отмечено, у обследованных нами пациентов содержание в крови адипонектина не являлось независимой детерминантой концентраций ТГ и ХС ЛВП. Однако во многих других исследованиях между этими параметрами и содержанием адипонектина были найдены независимые корреляции [Schulze et al, 2004; Tschritter et al, 2003]. Вследствие этого становится актуальной задача проверки гипотезы о прямом эффекте адипонектина на обмен ТГ и ЛВП. Для решения данной задачи клетки линии гепатомы человека, HepG2, инкубировали с адипонектином и определили в их культуральной среде содержание ТГ, апоВ и апоА-1 (рис. 6).

Контроль 10 мкг/мп 30 мкг/мл 0,20 -,

I °'15

| | одо-

&<о о,05 -

рН

а 0,00

Контроль 10 мкг/мп 30 мкг/мл

« 0,8

хо

0,6 -

1н 0,4 -

о> 0,2 -

и 0 -1

Контроль 10 мкг/мл 30 мкг/мл

120 100 5 80

I 60-| § «

1 20 " о

□

Контроль

30 мкг/мл

Рис. 6. Влияние адипонектниа на содержание в культуральной среде НерС2 ТГ (А), апоВ (Б) и апоА-1 (В) и синтез в этих клетках мРНК апоА-1 (Г)

Примечание: * — р < 0,05, ** - при р < 0,0001 по сравнению с контролем. Каждая точка-среднее из 4-х опытов. Уровень экспрессии апоА-1 нормировали по уровню экспрессии гли-церальдегидфосфат-дегидрогеназы.

Выяснилось, что добавление адипонектина к этим клеткам приводило к снижению в культуральной среде уровней ТГ и апоВ. Максимальный эффект наблюдался при концентрации адипонектина в среде 30 мкг/мл, в то время как концентрация вещества 10 мкг/мл оказывала лишь тенденцию к воздействию. При этом добавление адипонектина оказывало слабое влияние (р = 0,07) на секрецию клетками апоА-1. Вместе с тем был выявлен выраженный подавляющий эффект адипонектина на синтез в клетках мРНК этого белка (рис. 6Г). Представленные данные указывают на то, что адипонектин способен оказывать прямое подавляющее воздействие на секрецию гепатоцитами ЛП очень низкой плотности, что может объяснять часто выявляемую обратную связь между концентрациями в крови адипонектина и ТГ. Отсутствие при этом стимулирующего влияния адипонектина на секрецию апоА-1 говорит о том, что положительная связь между концентрациями в крови адипонектина и ХС ЛВП обусловлена, вероятно, другими механизмами.

Заключение

Таким образом, на основании результатов проведенного исследования можно сделать следующее предположение о роли адипонектина в развитии

аДЛП. С одной стороны, как показали исследования на клинической группе, снижение в крови уровня адипонектина, которое наблюдается при МС, способствует инсулинорезистентности и изменению метаболизма НЭЖК, что приводит к развитию аДЛП. Эти данные согласуются с представлениями о прямом влиянии адипонектина на утилизацию тканями глюкозы и НЭЖК. С другой стороны, как следует из исследования на клетках, адипонектин способен также напрямую подавлять секрецию ТГ гепатоцитами. Данное воздействие адипонектина объясняет часто выявляемую в ряде популяций обратную взаимосвязь между концентрациями в крови адипонектина и ТГ. Вместе с тем обнаруженный подавляющий эффект адипонектина на экспрессию апоА-1 ставит под сомнение гипотезу, согласно которой положительная связь между концентрациями в крови адипонектина и ХС ЛВП объясняется стимулирующим воздействием адипокина на образование гепатоцитами ЛВП. В связи с этим, по-видимому, адипонектин оказывает влияние на концентрацию ХС ЛВП опосредованно -путем изменения метаболизма ТГ. Дальнейшее изучение механизмов действия адипонектина, в частности на пути регуляции синтеза и катаболизма ТГ в гепа-тоцитах, позволит еще в большей степени приблизиться к пониманию антиате-рогенного действия данного вещества.

4. ВЫВОДЫ

1. Метаболический синдром характеризуется наличием адипокинового дисбаланса (повышение содержания в крови лептина и снижение - адипонектина), который тесно связан с различными параметрами обмена углеводов и липидов, при этом на данные взаимосвязи значительное влияние оказывает пол и масса тела. Наиболее отчетливые, обратные, связи выявлены для адипонектина с концентрациями НЭЖК, глюкозы, инсулина, индексом НОМА и частотой СД 2 типа. Содержание в крови лептина положительно связано с концентрацией инсулина и индексом НОМА.

3. По результатам регрессионного анализа установлено, что у женщин концентрации в крови адипонектина, лептина и НЭЖК являются независимыми детерминантами индекса НОМА; у мужчин только уровень НЭЖК оказывает независимое влияние на этот показатель. В свою очередь, концентрация НЭЖК у них определяется независимым влиянием уровня адипонектина.

4. Согласно результатам регрессионного анализа, изменение содержания в крови адипонектина и лептина не оказывает прямого воздействия на концентрации в крови ТГ и ХС ЛВП. При этом адипонектин влияет на содержание указанных липидов, воздействуя на метаболизм НЭЖК и глюкозы.

5. Адипонектин подавляет секрецию апоВ и ТГ клетками линии Нер02 и снижает синтез мРНК апоА-1 в этих клетках.

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. Танянский Д.А., Фирова Э.М., Шаталина JI.B., Денисенко А.Д. Адипонектин: снижение содержания при метаболическом синдроме и независимая связь с гипертриглицеридемией. // Кардиология. - 2008. - № 12. - С. 20 - 25.

2. Танянский Д.А., Фирова Э.М., Шаталина JI.B., Денисенко А.Д. Связь содержания адипонектина в крови мужчин с обменом углеводов и липидов. // Мед. Акад. Журн. - 2008. - Т. 8. - № 3. - С. 96 - 102.

3. Танянский Д.А., Фирова Э.М., Шаталина JI.B., Денисенко А.Д. Связь уровня адипонектина с обменом липидов и углеводов у женщин: роль массы тела. // Вестн. С.-Петерб. Ун-та. Сер. 11. - 2008. -№ 4. - С. 53 - 61.

4. Фирова Э.М., Танянский Д.А., Шаталина Л.В., Денисенко А.Д. Связь показателей обмена липидов и углеводов с толерантностью к физической нагрузке у пациентов с ИБС. // Вестник СПбГМА им. И.И. Мечникова. - 2008. - № 1. -С. 76- 80.

5. Танянский Д.А., Фирова Э.М. Адипонектин: связь с метаболическими показателями и роль в обмене жирных кислот у мужчин. // Сборник тезисов 11-й Всероссийской медико-биологической конференции молодых исследователей «Человек и его здоровье», Санкт-Петербург, 2008. - С. 358 - 359.

6. Танянский Д.А., Фирова Э.М., Денисенко А.Д. Адипокины у больных с нарушениями углеводного обмена: содержание в крови и возможная роль в развитии сахарного диабета 2 типа. // Материалы IV Всероссийского Диабето-логического Конгресса, Москва, 2008. - С. 73.

7. Танянский Д.А., Фирова Э.М., Денисенко А.Д. Адипонектин и лептин: независимая роль в развитии инсулинорезистентности у женщин. // Тезисы V конференции молодых ученых России с международным участием «Фундаментальные науки и прогресс клинической медицины», Москва. - Вестник РАМН. - 2008. - № 6 (прил.). - С. 426.

8. Фирова Э.М., Абышев P.A., Танянский Д.А. Влияние инсулиннезависи-мого сахарного диабета на тяжесть течения ишемической болезни сердца у пациентов с диагностированным метаболическим синдромом. // Сборник тезисов к научно-практической конференции «Актуальные вопросы клинической и экспериментальной медицины», МАПО, Санкт-Петербург, 2007. - С. 93 - 95.

9. Фирова Э.М., Танянский Д.А., Денисенко А.Д. Уровень адипонектина у пациентов с метаболическим синдромом. // Материалы научно-практической конференции «Современная кардиология: наука и практика». - Вестник СПбГМА им. И.И. Мечникова. - 2007. - № 2 (2). - С. 184 - 185.

10.Фирова Э.М., Танянский Д.А., Денисенко А.Д. Оценка метаболических показателей у пациентов с ИБС и метаболическим синдромом: связь с показателями велэргометрии. // Материалы 10-го Юбилейного научно-образовательного форума «Кардиология 2008», Москва, 2008. - С. 101 - 102.

ЛР№ 020365

Подписано в печать 12.02.2009 г. Заказ № 1507 Формат бумаги 60x84. Тираж 100 экз. усл. п.л. 1,0

Санкт-Петербургская государственная медицинская академия им. И.И. Мечникова Типография ООО «КАРО» Санкт-Петербург, Красногвардейская пл., д. 3

Содержание диссертации, кандидата медицинских наук, Танянский, Дмитрий Андреевич

ИСПОЛЬЗОВАННЫЕ СОКРАЩЕНИЯ.

1. ВВЕДЕНИЕ.

1.1. Актуальность.

1.2. Цель и задачи исследования.

1.3. Основные положения, выносимые на защиту.

1.4. Научная новизна работы.

1.5. Теоретическое и практическое значение работы.

1.6. Апробация работы.

1.7. Личный вклад.

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

2.1. Метаболический синдром: концепция и критерии диагностики.

2.2. Пути развития атерогенной дислипидемии при метаболическом синдроме.

2.2.1. Гипертриглицеридемия.

2.2.1.1. Повышение уровня неэстерифицированных жирных кислот

2.2.1.2. Инсулинорезистентность.

2.2.1.3. Сниженная активность липопротеинлипазы.

2.2.2. Снижение содержания ЛВП.

2.2.3. Повышение содержания мелких, плотных ЛНП.

2.3. Адипокины и их роль в патогенезе атерогенной дислипидемии при метаболическом синдроме.

2.3.1. Адипокины: понятие, связь с проявлениями метаболического синдрома.

2.3.2. Лептин.

2.3.3. Адипонектин.

2.3.3.1. Обнаружение, структура.

2.3.3.2. Регуляция экспрессии.

2.3.3.3. Взаимосвязь между содержанием адипонектина и показателями углеводного и липидного метаболизма.

Выявление ведущих метаболических факторов, взаимосвязанных с содержанием адипонектина.

Оценка потенциальной роли адипонектина в развитии инсулинорезистентности и атерогенной дислипидемии.

Анализ проспективных исследований.

2.3.3.4. Биологические эффекты и механизмы действия адипонектина

Исследования in vivo.

Исследования in situ и in vitro.

2.3.3.5. Роль мультимерного адипонектина.

3. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

3.1. Пациенты.

3.2. Определение биохимических показателей в образцах плазмы крови пациентов.

3.3. Работа с клеточной культурой.

3.3.1. Материалы исследования.

3.3.2. Методы исследования.

3.3.2.1. Культивирование клеток.

3.3.2.2. Определение содержания ТГ и аполипопротеинов в культуральной среде.

3.3.2.3. Определение экспрессии мРНК апоА-1.

3.4. Статистическая обработка результатов.

4. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ.

4.1. Содержание адипонектина и лептина у пациентов с метаболическим синдромом.

4.2. Взаимовязь содержания адипокинов с показателями углеводного и липидного обмена.!.

4.3. Взаимовязь содержания адипокинов с метаболическими параметрами у пациентов с нормальной массой тела и у пациентов с ожирением.

4.4.' Роль адипонектина в развитии инсулинорезистентности.

4.5. Роль адипонектина в развитии атерогенной дислипидемии.

4.6. Роль мультимерного адипонектина.

4.7. Влияние адипонектина на секрецию клетками HepG2 ТГ, апоВ и апоА-1.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Адипонектин в генезе атерогенной дислипидемии при метаболическом синдроме"

Ишемическая болезнь сердца (ИБС), в основе которой лежит атеросклероз коронарных артерий, на сегодня остается ведущей причиной смерти в индустриально развитых и во многих развивающихся странах, несмотря на заметный прогресс в диагностике, лечении и профилактике данного заболевания [Эпидемиология., 1989; Tyroler et al, 2000]. Кроме того, с каждым годом увеличивается распространенность ожирения и вслед за ним - инсули-норезистентности (ИР) и сахарного диабета (СД) 2 типа [Mokdad et al, 2003]. Помимо того, что ожирение является самостоятельным фактором риска (ФР) ИБС [Hubert et al, 1983], избыточная масса тела (МТ) также увеличивает вероятность развития других риск-факторов этого заболевания, таких как СД 2 типа, атерогенная дислипидемия (аДЛП), артериальная гипертензия (АГ), протромботическое состояние [Kissebah, Krakower, 1994; Wajchenberg, 2000]. Комплекс этих нарушений, которые часто сочетаются друг с другом, увеличивая тем самым вероятность развития ИБС и смерти от нее, был назван синдромом инсулинорезистентности, синдромом X, или метаболическим синдромом (МС) [Reaven, 1988; Haffner et al, 1992; Чазова И.Е., Мычка В.Б., 2004].

Патогенез МС до настоящего времени полностью не изучен. Предполагается, что важную роль в его развитии играет изменение продукции адипо-цитокинов (липокинов, адипокинов) — биологически активных белков, которые образуются в жировой ткани и поступают в кровь [Lau et al, 2005]. Среди них особый интерес вызывает адипонектин, поскольку, как показали исследования на трансгенных мышах, обладает антиатерогенным и антидиабето-генным действием [Yamauchi et al, 2003Ь]. Согласно популяционным исследованиям содержание адипонектина в крови отрицательно коррелирует с уровнем триглицеридов (ТГ) и положительно — с концентрацией холестерина (ХС) липопротеинов (ЛП) высокой плотности (ЛВП) [Abbasi et al, 2004; Hotta ег ей, 2000; Демидова Т.Ю. и др., 2006; Ерохина Е.Н., 2007]. Однако малоизученным остается вопрос о природе данных связей. В частности, до конца не ясно, оказывает ли адипонектин прямое действие на образование ЛВП и ТГ, или наблюдаемые взаимосвязи обусловлены влиянием данного адипокина на ИР и метаболизм неэстерифицированных жирных кислот (НЭЖК), способствующих развитию аДЛП. Поскольку в патогенезе ИР и аДЛП при МС важная роль отводится снижению чувствительности тканей к лептину - лептиноре-зистентности, требуется также изучение роли адипонектина с учетом влияния на развитие данных нарушений лептина.

1.2. Цель и задачи исследования

Целью настоящего исследования является выявление роли адипонектина в развитии нарушений липидного обмена при МС. В связи с этим нами были поставлены следующие задачи:

1. Изучить взаимосвязь содержания в крови адипонектина и лептина с наличием МС и показателями углеводного и липидного обмена у мужчин и женщин с различной МТ.

3. Изучить возможную роль адипонектина с учетом концентрации лептина и НЭЖК в развитии ИР.

5. Изучить влияние адипонектина на секрецию клетками гепатомы человека (линия НерС2) ТГ, апоВ, апоА-1 и синтез в этих клетках мРНК апоА-1.

Заключение Диссертация по теме "Биохимия", Танянский, Дмитрий Андреевич

6. выводы

1. Метаболический синдром характеризуется наличием адипокинового дисбаланса (повышение содержания в крови лептина и снижение — адипонек-тина), который тесно связан с различными параметрами обмена углеводов и липидов, при этом на данные взаимосвязи значительное влияние оказывает пол и масса тела. Наиболее отчетливые, обратные, связи выявлены для ади-понектина с концентрациями НЭЖК, глюкозы, инсулина, индексом НОМА и частотой СД 2 типа. Содержание в крови лептина положительно связано с концентрацией инсулина и индексом НОМА.

5. Адипонектин подавляет секрецию апоВ и ТГ клетками линии НерС2 и снижает синтез мРНК апоА-1 в этих клетках.

5. ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Таким образом, на основании результатов проведенного исследования можно сделать следующее предположение о роли адипонектина в развитии аДЛП. С одной стороны, как показали исследования на клинической группе, снижение в крови уровня адипонектина, которое наблюдается при МС, способствует инсулинорезистентности и изменению метаболизма НЭЖК, что приводит к развитию аДЛП. Эти данные согласуются с представлениями о прямом влиянии адипонектина на утилизацию тканями глюкозы и НЭЖК. С другой стороны, как следует из исследования на клетках, адипонектин способен также напрямую подавлять секрецию ТГ гепатоцитами. Данное воздействие адипонектина объясняет часто выявляемую в ряде популяций обратную взаимосвязь между концентрациями в крови адипонектина и ТГ. Вместе с тем обнаруженный подавляющий эффект адипонектина на экспрессию апоА-1 ставит под сомнение гипотезу, согласно которой положительная связь между концентрациями в крови адипонектина и ХС ЛВП объясняется стимулирующим воздействием адипокина на образование гепатоцитами ЛВП. В связи с этим, по-видимому, адипонектин оказывает влияние на концентрацию ХС ЛВП опосредованно - путем изменения метаболизма ТГ. Дальнейшее изучение механизмов действия адипонектина, в частности на пути регуляции синтеза и катаболизма ТГ в гепатоцитах, позволит еще в большей степени приблизиться к пониманию антиатерогенного действия данного вещества.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата медицинских наук, Танянский, Дмитрий Андреевич, Санкт-Петербург

1. Алмазов В.А., Благосклонная Я.В., Шляхто Е.В., Красильникова Е.И. Роль абдоминального ожирения в патогенезе синдрома инсулинорези-стентности. // Тер. Архив. 1999. - № 10. - С. 18 - 22.

2. Гинзбург М.М., Крюков H.H. Ожирение. Влияние на развитие метаболического синдрома. Профилактика и лечение. — М.: Медпрактика-М, 2002.-128 с.

3. Демидова Т.Ю., Селиванова A.B., Аметов A.C. Роль жировой ткани в развитии метаболических нарушений у больных сахарным диабетом 2-го типа в сочетании с ожирением. // Тер. Архив. 2006. - № 11. - С. 64 -69.

4. Ерохина E.H. Роль инсулинорезистентности в развитии макрососуди-стых осложнений сахарного диабета 2 типа и пути ее коррекции. // Ав-тореф. дисс. . канд. мед. наук. М., 2007. - 25 с.

5. Климов А.Н. Причины и условия развития атеросклероза. // В кн. Превентивная кардиология. Под ред. Г.И.Косицкого. — М.: Медицина, 1977.-С. 260-321.

6. Климов А.Н., Никульчева Н.Г. Обмен липидов и липопротеинов и его нарушения. СПб.: Питер Ком, 1999. - 505 с.

7. Фролова Ю.В., Агеева Е.В., Виноградова Т.В. и др. Роль активности липопротеинлипазы, гиперинсулинемии и уровня неэстерифицирован-ных жирных кислот в развитии дислипидемий. // Мед. Акад. Журн. -2005. Т. 5. - № 4. - С. 43 - 49.

8. Чазова И.Е., Мычка В.Б. Метаболический синдром. М.: Медиа Медика, 2004.-166 с.

9. Шестов Д.Б. Расчет холестерина липопротеидов низкой плотности в миллимолях. // Лабораторное дело. 1985. - № 6. - С. 381.

10. Эпидемиология и факторы риска ишемической болезни сердца. // Под ред. А. Н. Климова. Л.: Медицина, 1989. - 176 с.

11. Abbasi F., Chu J., Lamendola С. et al. Discrimination between obesity and insulin resistance in the relationship with adiponectin. // Diabetes. 2004. -Vol. 53.-P. 585 -590.

12. Ahima R.A. Metabolic actions of adipocyte hormones: focus on adiponectin. ' //Obesity.-2006.-Vol. 14.-Suppl. l.-P. 9S-15S.

13. Ahren В., Mansson S., Gingerich R.L., Havel P .J. Regulation of plasma lep-tin in mice: influence of age, high-fat diet, and fasting. // Am. J. Physiol. -1997. Vol. 273. - P. 113 - 120.

14. Alberti K.G., Zimmet P., Shaw J., and IDF Epidemiology Task Force Consensus Group. The metabolic syndrome — a new worldwide definition. // Lancet. 2005. - Vol. 366. - P. 1059 - 1062.

15. Arnri E.-Z., Teboul L., Vannier C. et al. Fatty acids regulate the expression of lipoprotein lipase gene and activity in preadipose and adipose cells. // Bi-ochem. J. 1996. - Vol. 314. - P. 541 - 546.

16. Ardern C.I., Katzmarzyk P.T., Janssen I., Ross R. Discrimination of health risk by combined body mass index and waist circumference. // Obes. Res. -2003.-Vol. 11.-P. 135-142.

17. Arita Y., Kihara S., Ouchi N. et al. Paradoxical decrease of an adipose-specific protein, adiponectin, in obesity. // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1999. - Vol. 257. - P. 79 - 83.

18. Banerji M.A., Faridi N., Atluri R. et al. Body composition, visceral fat, and insulin resistance in Asian Indian man. // J. Clin. Endocrinol. Metab. 1999. -Vol. 84.-P. 137-144.

19. Baratta R., Amato S., Degano C. et al. Adiponectin relationship with lipid metabolism is independent of body fat mass: evidence from both cross-sectional and interventional studies. // J. Clin. Endocrinol. Metab. 2004. — Vol. 89.-P. 2665-2671.

20. Berg A.H., Combs T.P., Du X. et al. The adipocyte-secreted protein Acrp30 enhances hepatic insulin action. // Nat. Med. 2001. - Vol. 7. - P. 947 -953.

21. Berg A.H., Combs T.P., Scherer P.E. ACRP30/adiponectin: an adipokine regulating glucose and lipid metabolism. // Trends. Endocrinol. Metab. -2002.-Vol. 13.-P. 84-89.

22. Bjorbaek C., El-Haschimi K., Frantz J.D., Flier J.S. The role of SOCS-3 in leptin signaling and leptin resistance. // J. Biol. Chem. 1999. - Vol. 274. -P. 30059-30065.

23. Bjursell M., Ahnmark A., Bohlooly-Y. et al. Opposing effects of adiponectin receptors 1 and 2 on energy metabolism. // Diabetes. 2007. - Vol. 56. - P. 583-593.

24. Bluher M., Brennan A.M., Kelesidis T. et al. Total and high-molecular weight adiponectin in relation to metabolic variables at baseline and in response to an exercise treatment program. // Diabetes Care. 2007. - Vol. 30. -P. 280-285.

25. Bobbert T., Rochlitz H., Wegewitz U. et al. Changes of adiponectin oligomer composition by moderate weight reduction. // Diabetes. 2005. -Vol. 54.-P. 2712-2719.

26. Bourgeois C.S., Wiggins D., Hems R., Gibbons G.F. VLDL output by hepatocytes from obese Zucker rats is resistant to the inhibitory effect of insulin. // Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab. 1995. - Vol. 269. - P. E208 -E215.

27. Bradford M.M. A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding. // Anal. Biochem. 1976. - Vol. 72. - P. 248 - 254.

28. Bruun J.M., Lihn A.S., Verdich C. et al. Regulation of adiponectin by adipose-tissue derived cytokines: in vivo and in vitro investigations in humans. //Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab.-2003.-Vol. 285.-P. E527-E533.

29. Campfield L.A., Smith F.J., Guisez Y. et al. Recombinant mouse ob protein: evidence for a peripheral signal linking adiposity and central neural networks. // Science. 1995. - Vol. 269. - P. 546 - 549.

30. Carey A.L., Steinberg G.R., Macaulay S.L. et al. Interleukin-6 increases insulin-stimulated glucose disposal in humans and glucose uptake and fatty acid oxidation in vitro via AMP-activated protein kinase. // Diabetes. 2006. — Vol. 55.-P. 2688-2697.

31. Caro J.F., Kolaczynski J.W., Nyce M.R. et al. Decreased cerebrospinal-fluid/serum leptin ratio in obesity: a possible mechanism for leptin resistance. // Lancet. 1996. - Vol. 348. - P. 159-161.

32. Ceddia R.B., Koistinen H.A., Zierath J.R., Sweeney G. Analysis of paradoxical observations on the association between leptin and insulin resistance. // FASEB J. 2002. - Vol. 16. - P. 1163 - 1176.

33. Ceddia R.B., Somwar R., Maida A. et al. Globular adiponectin increases GLUT4 translocation and glucose uptake but reduces glycogen synthesis in rat skeletal muscle cells. // Diabetologia. 2005. - Vol. 48. - N. 1. - P. 132 - 139.

34. Chan D.C., Watts G.F., Ng T.W.K. et al. Adiponectin and other adipocyto-kines as predictors of markers of triglyceride-rich lipoprotein metabolism. // Clin. Chem. 2005. - Vol. 51. - P. 578 - 585.

35. Chandran M., Phillips S.A., Ciaraldi T., Henry R.R. Adiponectin: more just another fat cell hormone? // Diabetes Care. 2003. - Vol. 26. - P. 2442 -2450.

36. Chen G., Koyama K., Yuan X. et al. Disappearance of body fat in normal rats induced by adenovirus-mediated leptin gene therapy. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1996. - Vol. 93. - P. 14795 - 14799.

37. Chen H., Charlat O., Tartaglia L.A. Evidence that the diabetes gene encodes the leptin receptor: identification of a mutation in the leptin receptor gene in db/db mice. // Cell. 1996. - Vol. 84. - P. 491 - 495.

38. Chen H., Montagnani M., Funahashi T. et al. Adiponectin stimulates production of nitric oxide in vascular endothelial cells. // J. Biol. Chem. 2003. -Vol. 278. - N. 45. - P. 45021 - 45026.

39. Chobanian A., Bakris G., Black H. et al. Seventh report of the Joint National Committee of prevention, detection, evaluation and treatment of high blood pressure. // Hypertension. 2003. - Vol. 42. - P. 1206 - 1252.

40. Choi K.M., Lee J., Lee K.W. et al. Serum adiponectin concentrations predict the developments of type 2 diabetes and the metabolic syndrome in elderly Koreans. // Clin. Endocrinol. (Oxf.). 2004a. - Vol. 61. - P. 75 - 80.

41. Choi K.M., Lee J., Lee K.W. et al. The associations between plasma adiponectin, ghrelin levels, and cardiovascular risk factors. // Eur. J. Endocrinol. 2004b. - Vol. 150.- P. 715-718.

42. Choy L., Rosen B., Spiegelman B.M. Adipsin and an endogenous pathway of complement from adipose cells. // J. Biol. Chem. 1992. - Vol. 267. - P. 12736- 12741.

43. Clinical i Guidelines omthe identification^ evaluation j and treatment of overweight and obesity in! adults: The evidence report. NIH publication. -1998.-N. 98 -4083.-228 p.

44. Cnopp M:, Havel P.J., Utzschneider K.M. et al: Relationship of adiponectim to body fat distribution, insulin sensitivity and plasma lipoproteins: evidence for independent roles of age and sex. // Diabetologia. 2003 . - Vol: 46. - P: 459-469:

45. Colditz G.A., Willett W.C., Rotnitzky A., Manson J.E. Weight gain as a risk factor for clinical diabetes mellitus in women. // Ann. Intern. Med. 1995. — Vol. 122. — N. 7. — P. 421 -426.

46. Colombo C., Cutson J.J., Yamauchi T. et al. Transplantation of adipose tissue lacking leptin is unable to reverse the metabolic abnormalities associated with lipoatrophy. // Diabetes. 2002. - Vol. 51. - P. 2727 - 2733.

47. Combs T.P., Berg A.H., Obici S. et al. Endogenous glucose production, is inhibited by the adipose-derived protein Acrp30i // Ji Clin. Invest. 2001. -Vol. 108.-P. 1875 - 1881.

48. Combs T.P., Pajvani U.B., Berg A.M. et al. A transgenic mouse with a deletion in the collagenous domain of adiponectin displays elevated' circulatingadiponectin and improved insulin sensitivity. // Endocrinology. 2004. -Vol. 145.-P. 367-383.

49. Considine R.V., Considine E.L., Williams C.J. et al. Evidence against either a premature stop codon or the absence of obese gene mRNA in human obesity. // J. Clin. Invest. 1995. - Vol. 95. - P. 2986 - 2988.

50. Considine R.V., Sinha M.K., Heiman M.L. et al. Serum immunoreactive-leptin concentrations in normal-weight and obese humans. // N. Engl. J. Med. 1996. - Vol. 334. - P. 292 - 295.

51. Daimon M., Oizumi T., Saitoh T. et al. Decreased serum levels of adiponectin are a risk factor for the progression to type 2 diabetes in the Japanese population. // Diabetes Care. 2003. - Vol. 26. - P. 2015 - 2020.

52. Dashti N., Williams D.L., Alaupovic P. Effects of oleate and insulin on the production rates and cellular mRNA concentrations of apolipoproteins in HepG2 cells. // J. Lipid Res. 1989. - Vol. 30. - P. 1365 - 1373.

53. Dashti N., Wolfbauer G. Secretion of lipids, apolipoproteins, and lipoproteins by human hepatoma cell line, HepG2: effects of oleic acid and insulin. // J. Lipid Res. 1987. - Vol. 28. - P. 423 - 436.

54. Debard C., Laville M., Berbe V. et al. Expression of key genes of fatty acid oxidation, including adiponectin receptors, in skeletal muscle of type 2 diabetic patients. // Diabetologia. 2004. - Vol. 47. - N. 5. - P. 917 - 925.

55. Degawa-Yamauchi M., Bovenkerk J.E., Juliar B.E. et al. Serum resistin (FIZZ3) protein is increased in obese humans. // J. Clin. Endocrinol. Metab.- 2003. Vol. 88. - P. 5452 - 5455.

56. Delporte M.-L., Funahashi T., Takahashi M. et al. Pre- and post-translational negative effect of P-adrenoreceptor agonists on adiponectin secretion: in vitro and in vivo studies. // Biochem. J. 2002. - Vol. 367. - P. 677 - 685.

57. Delporte M.-L., Mkadem S.A.E., Quisquater M., Brichard S.M. Leptin treatment markedly increased plasma adiponectin but barely decreased plasma resistin of ob/ob mice. // Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab. — 2004.- Vol. 287. P. E446 - E453.

58. Despres J.P., Ferland M., Moorjani S. et al. Role of hepatic-triglyceride lipase activity in the association between intra-abdominal fat and plasma HDL cholesterol in obese men. // Arteriosclerosis. 1989. - Vol. 9. - P. 485 -492.

59. Dixon J.L., Furukawa S., Ginsberg H.N. Oleate stimulates of apolipoprotein B-containing lipoproteins from Hep G2 cells by inhibiting early intracellular degradation of apolipoprotein B. // J. Biol. Chem. 1991. - Vol. 266. -N. 8. -P. 5080-5086.

60. Dobbins R.L., Szczpaniak L.S., Zhang W., McGarry J.D. Chemical sympathectomy alters regulation of body weight during prolonged ICV leptin infusion. // Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab. 2003. - Vol. 284. - P. E778 - ' E787.

61. Dube M.G., Beretta E., Dhillon H. et al. Central leptin gene therapy blocks high-fat diet-induced weight gain, hyperleptinemia, and hyperinsulinemia. // Diabetes.-2002.-Vol. 51.-P. 1729- 1736.

62. Duncan B.B., Schmidt M.I., Pankow J.S. et al. Adiponectin and the development of type 2 diabetes. The Atherosclerosis Risk in Communities Study. // Diabetes. 2004. - Vol. 53. - P. 2473 - 2478.

63. Ebihara K., Ogawa Y., Masuzaki H. et al. Transgenic overexpression of leptin rescues insulin resistance and diabetes in a mouse model of lipoatro-phic diabetes. // Diabetes. 2001. - Vol. 50. - P. 1440 - 1448.

64. Fasshauer M., Klein J., Neumann S. et al. Adiponectin gene expression is inhibited by beta-adrenergic stimulation via protein kinase A in 3T3-L1 adipocytes. // FEBS Lett. 2001. - Vol. 507. - P. 142 - 146.

65. Fasshauer M., Klein J., Neumann S. et al. Hormonal regulation of adi-ponectin gene expression in 3T3-L1 adipocytes. // Biochem. Biophys. Res. Commun. 2002. - Vol. 290. - P. 1084 - 1089.

66. Fisher F.F., Trujillo M.E., Hanif W. et al. Serum high molecular weight complex of adiponectin correlates better with glucose tolerance then total serum adiponectin in Indo-Asian males. // Diabetologia. 2005. - Vol. 48. -N. 6.-P. 1084-1087.

67. Flegal K.M., Carroll M.D., Ogden C.L. Prevalence and trends in obesity among US adults, 1999 2000. // JAMA. - 2002. - Vol. 288. - P. 2723 -2727.

68. Folsom A.R., Kushi L.H., Anderson K.E. Associations of general and abdominal obesity with multiple health outcomes in older women. // Arch. Intern. Med. 2000. - Vol. 160.-P. 2117-2128.

69. Ford E.S., Giles W.H., Dietz W.H. Prevalence of the metabolic syndrome among US adults: findings from the Third National Health and Nutrition Examination Survey. // JAMA. 2002. - Vol. 287. - P. 356 - 359.

70. Friedewald W.T., Levy R.I., Fredrickson D.S. Estimation of the concentration of low-density lipoprotein cholesterol in plasma, without use of preparation ultracentrifuge. // Clin. Chem. 1972. - Vol. 18. - P. 499 - 509.

71. Fu Y., Luo N., Klein R.L., Garvey W.T. Adiponectin promotes adipocyte differentiation, insulin sensitivity, and lipid accumulation. // J. Lipid Res. -2005. Vol. 46. - P. 1369 - 1379.

72. Fukuhara A., Matsuda M., Nishizawa M. et al. Visfatin: a protein secreted by visceral fat that mimics the effects of insulin. // Science. 2005. - Vol. 307.-P. 426-430.

73. Furler S.M., Gan S.K., Poynten A.M. et al. Relationship of adiponectin with insulin sensitivity in humans, independent of lipid availability. // Obesity. -2006. Vol. 14. - N. 2. - P. 228 - 234.

74. Ginsberg H.N., Zhang Y.-L., Hernandez-Ono A. Metabolic syndrome: focus on dyslipidemia.//Obesity. 2006. - Vol. 14. - Suppl. 1. -P. 41S -49S.

75. Goldberg I.J. Diabetic dyslipidemia: causes and consequences. // J. Clin. Endocrinol. Metab. 2001. - Vol. 86. - N. 3. - P. 965 - 971.

76. Guo Z.K., Hensrud D.D., Johnson C. M., Jensen M.D. Regional postprandial fatty acid metabolism in different obesity phenotypes. // Diabetes. 1999. -Vol. 48.-P. 1586- 1592.

77. Haffner S.N., Valdez R.A., Hazuda H.P. et al. Prospective analysis of the insulin-resistance syndrome (syndrome X). // Diabetes. 1992. - Vol. 41. — P. 715-722.

78. Halaas J.L., Boozer C., Blair-West J. et al. Physiological response to long-term peripheral and central leptin infusion in lean and obese mice. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1997. - Vol. 94. - P. 8878 - 8883.

79. Halleux C.M., Takahashi M., Delporte M.L. et al. Secretion of adiponectinrand regulation of apMl gene expression in human visceral adipose tissue. // Biochem. Biophys. Res. Commun. 2001. - Vol. 288. - P. 1102 - 1107.

80. Hanley A.J.G., Bowden D., Wagenknecht L.E. et al. Associations of adiponectin with body fat distribution and insulin sensitivity in nondiabetic His

81. Hispanics and Africa-Americans. // J. Clin. Endocrinol. Metab. 2007. -Vol. 92.-P. 2665-2671.

82. Hanley A .J.G., Karter A.J., Festa A. et al. Factor analysis of metabolic syndrome using directly measured insulin sensitivity. The Insulin Resistance Atherosclerosis Study. // Diabetes. 2002. - Vol. 51. - P. 2642 - 2647.

83. Hardie D.G. The AMP-activated protein kinase pathway — new players upstream and downstream. // J. Cell Sci. 2004. - Vol. 117. - P. 5479 - 5487.

84. Havel P.J. Update on adipocyte hormones. Regulation of energy balance and carbohydrate/lipid metabolism. // Diabetes. 2004. - Vol. 53. - Suppl. 1. -P. S143-S151.

85. Heymsfleld S.B., Greenberg A.S., Fujioka K. et al. Recombinant leptin for weight loss in obese and lean adults. // JAMA. 1999. - Vol. 282. - N. 16. -P. 1568- 1575.

86. Hotamisligil G.S. The role of TNFa and TNF receptors in obesity and insulin resistance. // J. Int. Med. 1999. - Vol. 245. - P. 621 - 625.

87. Hotta K., Funahashi T., Arita Y. Plasma concentrations of a novel, adipose-specific protein, adiponectin, in type 2 diabetic patients. // Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. 2000. - Vol. 20. - P. 1595 - 1599.

88. Hu E., Liang P., Spiegelman B.M. AdipoQ is a novel adipose-specific gene dysregulated in obesity. // J. Biol. Chem. 1996. - Vol. 271. - P. 10697 -10703.

89. Hubert H.B., Feinleib M., McNamara P.M., Castelli W.P. Obesity as an independent risk factor for cardiovascular disease: a 26-year follow-up of participants in the Framingham Heart Study. // Circulation. 1983. - Vol. 67. -P. 968 - 977.

90. Hukshorn C.J., Saris W.H.M., Westerterp-Plantenga M.S. et al. Weekly subcutaneous pegylated recombinant native human leptin (PEG-OB) administration in obese men. // J. Clin. Endocrinol. Metab. 2000. - Vol. 85. - P. 4003-4009.

91. Kadota A., Hozawa A., Okamura T. et al. Relationship between metabolic risk factor clustering and cardiovascular mortality stratified by high blood glucose and obesity. NIPPON DATA90, 1990 2000. // Diabetes Care. -2007. - Vol. 30. - P. 1533 - 1538.

92. Kadowaki T., Yamauchi T. Adiponectin and adiponectin receptors. // En-docr. Rev. 2005. - Vol. 26. - P. 439 - 451.

93. Kadowaki T., Yamauchi T., Kubota N. et al. Adiponectin and adiponectin receptors in insulin resistance, diabetes, and the metabolic syndrome. // J. Clin. Invest.-2006.-Vol. 116.-N. 7.-P. 1784- 1792.

94. Kantartzis K., Fritsche A., Tschritter O. et al. The association between plasma adiponectin and insulin sensitivity in humans depends on obesity. // Ob-es. Res. -2005. -Vol. 13.-N. 10.-P. 1683 1691.

95. Kantartzis K., Rittig K., Balletshofer B. et al. The relationships of plasma adiponectin with a favorable lipid profile, decreased inflammation, and less ectopic fat accumulation depend on adiposity. // Clin. Chem. 2006. - Vol.52.-P. 1934- 1942.

96. Kaplan N.M. The deadly quartet. Upper-body obesity, glucose intolerance, hypertriglyceridemia, and hypertension. // Arch. Intern. Med. — 1989. Vol. 149.-N. 7.-P. 1514- 1520.

97. Karlsson C., Lindell K., Ottosson M. et al. Human adipose tissue expresses angiotensinogen and enzymes required for its conversion to angiotensin II. // J. Clin. Endocrinol. Metab. 1998. - Vol. 83. -N. 11. - P. 3925-3929.

98. Kazumi T., Kawaguchi A., Hirano T. et al. Serum adiponectin is associated width high-density lipoprotein cholesterol, triglycerides, and low-density lipoprotein particle size in young healthy men. // Metabolism. 2004. - Vol.53.-P. 589-593.

99. Kelley D.E., Goodpaster B.H. Skeletal muscle triglyceride. An aspect of regional adiposity and insulin resistance. // Diabetes Care. 2001. - Vol. 24. -P. 933 -941.

100. Kelley D.E., Williams K.V., Price J.C. et al. Plasma fatty acids, adiposity, and variance of skeletal muscle insulin resistance in type 2 diabetes mellitus. //J. Clin. Endocrinol. Metab.-2001.-Vol. 86.-P. 5412-5419.

101. Kempen H.J., Imbach A.P., Giller T. et al. Secretion of apolipoproteins A-l and B by HepG2 cells: regulation by substates and metabolic inhibitors. // J. Lipid Res. 1995. - Vol. 36. - P. 1796 - 1806.

102. Kern P.A., Mandic A., Eckel R.H. Regulation of lipoprotein lipase by glucose in primary cultures of isolated human adipocytes. Relevance to hypertriglyceridemia of diabetes. // Diabetes. 1987. - Vol. 36. -N. 11. - P. 1238- 1245.

103. Kieffer T.J., Habener J.F. The adipoinsular axis: effects of leptin on pancreatic p-cells. // Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab. 2000. - Vol. 278. - P. El -E14.

104. Kissebah A.H., Krakower G.R. Regional adiposity and mortality. // Physiol. Rev. 1994. - Vol. 74. - N. 4. - P. 761 - 811.

105. Kharroubi I., Rasschaert J., Eizirik D.L., Cnop M. Expression of adiponectin receptors in pancreatic p-cells. // Biochem. Biophys. Res. Commun. 2003. -Vol. 312.-P. 1118-1122.

106. Knobler H., Benderly M., Boyko V. et al. Adiponectin and the development of diabetes in patients with coronary artery disease and impaired fasting glucose. // Eur. J. Endocrinol. 2004. - Vol. 154. - P. 87 - 92.

107. Knutson V.P. The release of lipoproten lipase from 3T3-L1 adipocytes is regulated by microvessel endothelial cells in an insulin-dependent manner. // Endocrinology. 2000. - Vol. 141. - N. 2. - P. 693 - 701.

108. Kovar J., Fejfarova V., Pelikanova T., Poledne R. Hyperglycemia downregulates total lipoprotein lipase activity in humans. // Physiol. Res. -2004.-Vol. 53.-P. 61-68.

109. Krakoff J., Funahashi T., Stehouwer C.D.A. et al. Inflammatory markers, adiponectin, and risk of type 2 diabetes in .the Pima Indian. // Diabetes Care. 2003. - Vol. 26. - P. 1745 - 1751.

110. Kubota N., Terauchi Y., Yamauchi T. et al. Disruption of adiponectin causes insulin resistance and neointimal formation. // J. Biol. Chem. 2002. — Vol. 277.-P. 25863-25866.

111. Lagrost L., Florentin E., Guyard-Dangremont V. et al. Evidence for non-esterified fatty acids as modulators of neutral lipid transfers in normolipi-demic human plasma. // Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. 1995. - Vol. 15. -P. 1388- 1396.

112. Lara-Castro C., Luo N., Wallace P. et al. Adiponectin multimeric complexes and the metabolic syndrome trait cluster. // Diabetes. — 2006. Vol. 55. - P. 249-259.

113. Lau D.C.W., Dhillon B., Yan H. et al. Adipokines: molecular links between obesity and atheroslcerosis. // Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 2005. -Vol. 288. - P. H2031 - H2041.

114. Lewis G.F., Carpentier A., Adeli K., Giacca A. Disordered fat storage and mobilization in the pathogenesis of insulin resistance and type 2 diabetes. // Endocr. Rev. 2002. - Vol. 23. - N. 2. - P. 201 - 229.

115. Lewis G.F., Uffelman K.D., Szeto L.W. et al. Interaction between free fatty acids and insulin in the acute control of very low density lipoprotein production in humans. // J. Clin. Invest. 1995. - Vol. 95. - P. 158 - 166.

116. Lewis G.F., Uffelman K.D., Szeto L.W., Steiner G. Effects of acute hyperin-sulinemia on VLDL triglyceride and VLDL apoB production in normal weight and obese individuals. // Diabetes. 1993. - Vol. 42. -N. 6. - P. 833 -842.

117. Leyva F., Godsland I.F., Ghatei M. et al. Hyperleptinemia as a component of a metabolic syndrome of cardiovascular risk. // Arterioscler. Thromb. Vase. Biol.-1998.-Vol. 18.-P. 928-933.

118. Lihn A.S., Bruun J.M., He G. et al. Lower expression of adiponectin mRNA in visceral adipose tissue in lean and obese subjects. // Mol. Cell. Endocrinol. 2004. - Vol. 219. - P. 9 - 15.

119. Lihn A.S., Ostergard T., Nyholm B. et al. Adiponectin expression in adipose tissue is reduced in first-degree relatives of type 2 diabetic patients. // Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab. 2003. - Vol. 284. - P. E443 - E448.

120. Lindsay R.S., Funahashi T., Hanson R.L. et al. Adiponectin and development of type 2 diabetes in the Pima Indian population. // Lancet. 2002. -Vol. 360.-P. 57-58.

121. Ma K., Cabrero A., Saha P.K. et al. Increased p-oxidation but no insulin resistance or glucose intolerance in mice lacking adiponectin. // J. Biol. Chem. 2002. - Vol. 277. - P. 34758 - 34661.

122. Maeda K., Okubo K., Shimomura I. et al. cDNA cloning and expression of a novel adipose specific collagen-like factor, apM-1 (adipose most abundant gene transcript 1). // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1996. - Vol. 221. -P. 286-289.

123. Maeda N., Shimomura I., Kishida K. et al. Diet-induced insulin resistance in mice lacking adiponectin/ACRP30. // Nat. Med. 2002. - Vol. 8. - P. 731 -737.

124. Maeda N., Takahashi M., Funahashi T. et al. PPARy ligands increase expression and plasma concentrations of adiponectin, an adipose-derived protein. // Diabetes. 2001. - Vol. 50. - P. 2094 - 2099.

125. Mantzoros C.S. The role of leptin in human obesity and disease: a review of current evidence. // Ann. Intern. Med. 1999. - Vol. 130. - P. 671 - 680.

126. Martin L.J., Woo J.G., Daniels S.R. et al. The relationships of adiponectin with insulin and lipids are strengthed with increasing adiposity. // J. Clin. Endocrinol. Metab. 2005. - Vol. 90. - P. 4255 - 4259.

127. Matsubara M., Katayose S., Maruoka S. Decreased plasma adiponectin concentrations in nondiabetic women with elevated homeostasis model assessment ratios. // Eur. J. Endocrinol. 2003. - Vol. 148. - P. 343 - 350.

128. Matsubara M., Maruoka S., Katayose S. Decreased plasma adiponectin concentrations in women with dyslipidemia. // J. Clin. Endocrinol. Metab. -2002a. Vol. 87. - P. 2764 - 2769.

129. Matsubara M., Maruoka S., Katayose S. Inverse relationship between plasma adiponectin and leptin concentrations in normal-weight and obese women. // Eur. J. Endocrinol. 2002b. - Vol. 147. - P. 173 - 180.

130. Matsuura F., Oku H., Koseki M. et al. Adiponectin accelerates reverse cholesterol transport by increasing high density lipoprotein assembly in the liver. // Biochem. Biophys. Res. Commun. 2007. - Vol. 358. - P. 1091 -1095.

131. Matsuzawa Y., Funahashi T., Kihara S., Shimomura I. Adiponectin and metabolic syndrome. // Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. 2004. - Vol. 24. -P. 29-33.

132. Matthews D.R., Hosker J.P., Rudenski A.S. et al. Homeostasis model assessment: insulin resistance and beta-cell function from fasting plasma glucose and insulin concentrations in man. // Diabetologia. 1985. - Vol. 28. -P. 412-419.

133. Meigs J.B., D'Agostino R.B., Wilson P.W. et al. Risk variable clustering in the insulin resistance syndrome. The Framingham Offspring Study. // Diabetes. 1997. - Vol. 46. - P. 1594 - 1600.

134. Meigs J.B., Mittelman M.A., Nathan D.M. et al. Hyperinsulinemia, hyperglycemia, and impaired hemostasis. The Framingham Offspring Study. // JAMA. 2000. - Vol. 283. - N. 2. - P. 221 - 228.

135. Minokoshi Y., Kim E.B., Peroni O.D. et al. Leptin stimulates fatty-acid oxidation by activating AMP-activated protein kinase. // Nature. 2002. - Vol. 415. -P. 339-343.

136. Mittendorfer B., Patterson B.W., Klein S. Effect of sex and obesity on basal VLDL-triacylglycerol kinetics. // Am. J. Clin. Nutr. 2003. - Vol. 77. - P. 573 -579.

137. Mizuno A., Murakami T., Doi T., Shima K. Effect of leptin on insulin sensitivity in the Otsuka Long-Evans Tokushima Fatty rat. // Regul. Pept. 2001. -Vol. 99.-P. 41 -44.

138. Mokdad A.H., Ford E.S., Bowman B.A. et al. Prevalence of obesity, diabetes and obesity-related health-risk factors, 2001. // JAMA. 2003. - Vol. 289.-P. 76-79.

139. Montague C.T., Farooqi I.S., Whitehead J.P. et al. Congenital leptin deficiency is associated with severe early-onset obesity in humans. // Nature. — 1997. Vol. 387. - P. 903 - 908.

140. Mostaza J.M., Vega G.L., Snell P., Grundy S.M. Abnormal metabolism of free fatty acids in hypertriglyceridaemic men: apparent insulin resistance of adipose tissue. // J. Intern. Med. 1998. - Vol. 243. - P. 265 - 274.

141. Muoio D.M., Dohm G.L., Fiedorek F.T. et al. Leptin directly alters lipid partitioning in skeletal muscle. // Diabetes. 1997. - Vol. 46. - P. 1360 - 1363.

142. Murray I., Sniderman A.D., Cianflone K. Enhanced triglyceride clearance with intraperitoneal human acilation stimulating protein in C57BL/6 mice. // Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab. 1999. - Vol. 277. - P. E474 - E480.

143. Nakano Y., Tobe T., Choi-Miura N-H. et al. Isolation and characterization of GBP28, a novel gelatin-binding protein purified from human plasma. // J. Biochem.-1996.-Vol. 120.-P. 803-812.

144. Nakashima R., Kamei N., Yamane K. et al. Decreased total and high molecular adiponectin are independent risk factors for the development of type 2 diabetes in Japanese-Americans. // J. Clin. Endocrinol. Metab. 2006. -Vol. 91.-P. 3873-3877.

145. Nawrocki A.R., Rajala M.W., Tomas E. et al. Mice lacking adiponectin show decreased hepatic insulin sensitivity and reduced responsiveness to peroxisome proliferator-activated receptor y agonists. // J. Biol. Chem. 2006. -Vol. 281.-P. 2654-2660.

146. Neumeier M., Sigruener A., Eggenhofer E. et al. High molecular weight adiponectin reduces apolipoprotein B and E release in human hepatocytes. // Biochem. Biophys. Res. Commun. 2007. - Vol. 352. - P. 543 - 548.

147. Ng T.W.K., Watts G.F., Farvid M.S. et al. Adipocytokines and VLDL metabolism. Independent regulatory effects of adiponectin, insulin resistance, and fat compartments on VLDL apolipoprotein B-100 kinetics? // Diabetes. 2005. - Vol. 54. - P. 795 - 802.

148. Nishizawa H., Shimomura I., Kishida K. et al. Androgens decrease plasma adiponectin, an insulin-sensitizing adipocyte-derived protein. // Diabetes. —2002. Vol. 51. - P. 2734 - 2741.

149. Oral E.A., Simha V., Ruiz E. et al. Leptin-replacement therapy for lipodystrophy. // N. Engl. J. Med. 2002. - Vol. 346. - P. 570 - 578.

150. Osei K., Gaillard T., Schuster D. Plasma adiponectin levels in high-risk African-Americans with normal glucose tolerance, impaired glucose tolerance, and type 2 diabetes. // Obes. Res. 2005. - Vol. 13. - P. 179 - 185.

151. Ouchi N., Kihara S., Funahashi T. et al. Reciprocal association of C-reactive protein with adiponectin in blood stream and adipose tissue. // Circulation.2003. Vol. 107. - P. 671 - 674.

152. Parhofer K.G., Barrett P.H.R. What we have learned about VLDL and LDL metabolism from human kinetics studies. // J. Lipid Res. 2006. - Vol. 47. — P. 1620- 1630.

153. Park K.G., Park K.S., Kim MJ. et al. Relationship between serum adiponectin and leptin concentrations and body fat distribution. // Diabetes Res. Clin. Pract. 2004. - Vol. 63. - P. 135 - 142.

154. Patsch W., Tamai T., Schonfeld G. Effect of fatty acids on lipid and apoprotein secretion and association in hepatocyte cultures. // J. Clin. Invest. — 1983. Vol. 72. - P. 371 - 378.

155. Pelleymounter M.A., Cullen M.J., Baker M.B. et al. Effects of obese gene product on body weight regulation in ob/ob mice. // Science. 1995. - Vol. 28.-P. 540-543.

156. Pietzsch J., Julius U., Nitzsche S., Hanefeld M. In vivo evidence for increased apolipoprotein A-l catabolism in subjects with impared glucose tolerance. // Diabetes. 1998. - Vol. 47. - P. 1928 - 1934.

157. Pykalisto O.J., Smith P.H., Brunzell J.D. Determinants of human adipose tissue lipoprotein lipase. Effect of diabetes and obesity on basal- and diet-induced activity. // J. Clin. Invest. 1975. - Vol. 56. - N. 5. - P. 1108 -1117.

158. Rajala M.W., Obici S., Scherer P.E., Rossetti L. Adipose-derived resistin and gut-derived resistin-like molecule-P selectively impair insulin action on glucose production. // J. Clin. Invest. 2003. - Vol. 111. - P. 225 - 230.

159. Rasmussen M.S., Lihn A.S., Pedersen S.B. et al. Adiponectin receptors in human adipose tissue: effects of obesity, weight loss, and fat depots. // Obesity. 2006. - Vol. 14. - P. 28 - 35.

160. Ravussin E., Pratley R.E., Maffei M. et al. Relatively low leptin concentrations precede weight gain in Pima Indians. // Nat. Med. 1997. - Vol. 3. — P. 238 - 240.

161. Reaven G.M. Role of insulin resistance in human disease. // Diabetes. -1988. Vol. 37. -P. 1595 - 1607.

162. Reilly M.P., Rader D.J. The metabolic syndrome: more than the sum of its parts?//Circulation.-2003.-Vol. 108.-P. 1546- 1551.

163. Ruige J.B., Ballaux D.P., Funahashi T. et al. Resting metabolic rate is an important predictor of serum adiponectin concentrations: potential implications for obesity-related disorders. // Am. J. Clin. Nutr. 2005. - Vol. 82. -P. 21-25.

164. Ruige J.B., Dekker J.M., Blum W.F. et al. Leptin and variables of body adiposity, energy balance, and insulin resistance in a population-based study. // Diabetes Care. 1999. - Vol. 22. - P. 1097 - 1104.

165. Saad M.F., Damani S., Gingerich R.L. et al. Sexual dimorphism in plasma leptin concentration. // J. Clin. Endocrinol. Metab. 1997. - Vol. 82. - P. 579-584.

166. Salas-Salvado J., Granada M., Bullo M. et al. Plasma adiponectin distribution in a Mediterranean population and its association with cardiovascular risk factors and metabolic syndrome. // Metabolism. 2007. — Vol. 56. - P. I486 - 1492. ■

167. Satoh H., Nguyen M.T.A., Trujillo M. et al. Adenovirus-mediated adiponectin expression augments skeletal muscle insulin sensitivity in male Wistar rats.//Diabetes.-2005.-Vol. 54.-P. 1304- 1313.

168. Scherer P.E., Williams S., Fogliano M. et al. A novel serum protein similar to Clq, produced exclusively in adipocytes. // J. Biol. Chem. — 1995. Vol. 270.-P. 26746-26749.

169. Schulze M.B., Rimm E.B., Shai I. et al. Relationship between adiponectin and glycemic control, blood lipids, and inflammatory markers in men with type 2 diabetes. // Diabetes Care. 2004. - Vol. 27. - P. 1680 - 1687.

170. Schutte A.E., Huisman H.W., Schutte R. et al. Differences and similarities regarding adiponectin investigated in African and Caucasian women. // Eur. J. Endocrinol. 2007. - Vol. 157. - P. 181 - 188.

171. Schwartz M.W., Baskin D.G., Bukowski T.R. et al. Specificity of leptin action on elevated blood glucose levels and hypothalamic neuropeptide Y gene expression in ob/ob mice. //Diabetes. 1996.-Vol. 45. - P. 531 - 535.

172. Semenkovich C.F., Wims M., Noe L. et al. Insulin regulation of lipoprotein lipase activity in 3T3-L1 adipocytes is mediated as posttranscriptional and posttranslational levels. // J. Biol. Chem. 1989. - Vol. 264. - N. 15. - P. 9030-9038.

173. Shimabukuro M., Koyama K., Chen G. et al. Direct antidiabetic effect of leptin through triglyceride depletion of tissues. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1997. - Vol. 94. - P. 4637 - 4641.

174. Shimomura I., Funahashi T., Takahashi M. et al. Enhanced expression of PAI-I in visceral fat. Possible contributor to vascular disease in obesity. // Nat. Med. 1996. - Vol. 2. - P. 800 - 803.

175. Shklyaev S., Aslanidi G., Tennant M. et al. Sustained peripheral expression of transgene adiponectin offsets the development of diet-induced obesity in rats. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2003. - Vol. 100. - P. 14217 - 14222.

176. Sinha V., Szczepaniak L.S., Wagner A.J. et al. Effect of leptin replacement on intrahepatic and intramyocellular lipid content in patients with generalized lipodystrophy. // Diabetes Care. 2003. - Vol. 26. - P. 30 - 35.

177. Snehalatha C., Mukesh B., Simon M. et al. Plasma adiponectin is an independent predictor of type 2 diabetes in Asian Indians. // Diabetes Care. -2003. Vol. 26. - P. 3226 - 3229.

178. Snijder M.B., Heine R.J., Seidell J.C. et al. Associations of adiponectin levels with incident impaired glucose metabolism and type 2 diabetes in oldermen and women. The Hoorn Study. // Diabetes Care. 2006. - Vol. 29. - P. 2498-2503.

179. Sparks J.D., Sparks C.E. Insulin modulation of hepatic synthesis and secretion of apolipoprotein B by rat hepatocytes. // J. Biol. Chem. 1990. - Vol. 265. - N. 15. - P. 8854 - 8862.

180. Spranger J., Kroke A., Mohlig M. et al. Adiponectin and protection against type 2 diabetes. // Lancet. 2003. - Vol. 361. - P. 226 - 228.

181. Staiger H., Kaltenbach S., Staiger K. et al. Expression of adiponectin receptor mRNA in human skeletal muscle cells is related to in vivo parameters of glucose and lipid metabolism. // Diabetes. 2004. - Vol. 53. - P. 2195 -2201.

182. Steinberg G.R., Parolin M.L., Heigenhauser G.J.F., Dyck D.J. Leptin increases FA oxidation in lean but not obese human skeletal muscle: evidence of peripheralleptin resistance. // Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab. 2002. — Vol. 283.-P. E187-E192.

183. Steppan C., Bailey S., Bhat S. et al. The hormone resistin links obesity to diabetes. // Nature. 2001. - Vol. 409. - P. 307 - 312.

184. Tartaglia L.A. The leptin receptor. // J. Biol. Chem. 1997. - Vol. 272. - P. 6093 - 6096.

185. Tschritter O., Fritsche A., Thamer C. et al. Plasma adiponectin concentrations predict insulin sensitivity of both glucose and lipid metabolism. // Diabetes. 2003. - Vol. 52. - P. 239 - 243.

186. Tsuchida A., Yamauchi T., Ito Y. et al. Insulin/Foxol pathway regulates expression levels of adiponectin receptors and adiponectin sensitivity. // J. Biol. Chem. 2004. - Vol. 279. - N. 29. - P. 30817 - 30822.

187. Tyroler H.A. Coronary heart disease epidemiology in the 21st century. // Epidemiol. Rev. 2000. - Vol. 22. - P.' 7 - 13.

188. Van Gaal L., Rillaerts E., Creten W., De Leeuw I. Relationship of body fat distribution pattern to atherogenic risk factors in NIDDM. Preliminary results. // Diabetes Care. 1988. - Vol. 11. - N. 2. - P. 103 - 106.

189. Van Heek M., Compton D.S., France C.F. et al. Diet-induced obese mice develop peripheral, but not central, resistance to leptin. // J. Clin. Invest. -1997. Vol. 99. - P. 385 - 390.

190. Vozarova B., Stefan N., Lindsay R.S. et al. Low plasma adiponectin concentrations do not predict weight gain in humans. // Diabetes. 2002. - Vol. 51. - P. 2964 - 2967.

191. Vozarova B., Weyer C., Hanson K. et al. Circulating interleukin-6 in relation to adiposity, insulin action, and insulin secretion. // Obes. Res. — 2001. — Vol. 9.-P. 414-417.

192. Wajchenberg B.L. Subcutaneous and visceral adipose tissue: their relation to the metabolic syndrome. // Endocr. Rev. 2000. - Vol. 21. - P. 697 - 738.

193. Waki H., Yamauchi T., Kamon J. et al. Impaired multimerization of human adiponectin mutants associated with diabetes. Molecular structure and multimer formation of adiponectin. // J. Biol". Chem. 2003. - Vol. 278. - P. 40352-40363.

194. Weyer C., Funahashi T., Tanaka S. et al. Hypoadiponectinemia in obesity and type 2 diabetes: close association with insulin resistance and hyperinsu-linemia. // J. Clin. Endocrinol. Metab. 2001. - Vol. 86. - P. 1930 - 1935.

195. World Health Organization Report. Definition, diagnosis and classification of diabetes mellitus and its complications. Part 1: Diagnosis and classification of diabetes mellitus. WHO, Geneva, 1999. - 59 p.

196. Wu X., Motoshima H., Mahadev K. et al. Involvement of AMP-activated protein kinase in glucose uptake stimulated by the globular domain of adi-ponectin in primary rat adipocytes. // Diabetes. 2003. - Vol. 52. - P. 1355 - 1363.

197. Xu H., Barnes G.T., Yang K. et al. Chronic inflammation in fat plays a crucial role in the development of obesity-related insulin resistance. // J. Clin. Invest.-2003.-Vol. 112.-P. 1821 1830.

198. Yamamoto Y., Hirose H., Saito I. et al. // Adiponectin, an adipocyte-derived protein, predicts future insulin resistance: two-year follow-up study in Japanese population. // J. Clin. Endocrinol. Metab: 2004. - Vol. 89. - P. 87 -90.

199. Yamauchi T., Kamon J., Ito Y. et al. Cloning of adiponectin receptors that mediate antidiabetic metabolic effects. // Nature. — 2003a. — Vol. 423. P. 762-769.

200. Yamauchi T., Kamon J., Minokoshi Y. et al. Adiponectin stimulates glucose utilization and fatty-acid oxidation by activating'AMP-activated protein kinase. // Nat. Med. 2002. - Vol. 8. - N. 11. - P. 1288 - 1295.

201. Yamauchi T., Kamon J., Waki H. et al. The fat-derived hormone adiponectin reverses insulin resistance associated with both lipoatrophy and obesity. // Nat. Med. 2001. - Vol. 7. - N. 8. - P. 941 - 946.

202. Yamauchi T., Kamon J'., Waki H. et al. Globular adiponectin protected ob/ob mice from diabetes and apoE-deficient mice from atherosclerosis. // J. Biol. Chem. 2003b. - Vol. 278. - N. 4. - P. 2461 - 2468.

203. Yang W.-S., Lee W.-J., Funahashi T. et al. Weight reduction increases plasma levels of an adipose-derived anti-inflammatory protein, adiponectin. // J. Clin. Endocrinol. Metabi -2001. Vol. 86. - P. 3815 - 3819.

204. You T., Nicklas B J., Ding J. et al. The metabolic syndrome is associated with circulating adipokines in older adults across a wide range adiposity. // J. Gerontol. A Biol. Sci. Med. Sci. 2008. - Vol. 63. - P. 414 - 419.

205. Yu J.G., Javorschi S., Hevener A.L. et al. The effect of thiazolidinediones on plasma adiponectin levels in normal, obese, and type 2 diabetic subjects. // Diabetes. 2002. - Vol. 51. - P. 2968 - 2974.

206. Zakrzewska K.E., Cusin I., Sainsbury A. Glucocorticoids as counterregula-tory hormones of leptin: toward an understanding of leptin resistance. // Diabetes. 1997. - Vol. 46.-P. 717-719.

207. Zhang Y., Proenca R., Maffei M. et al. Positional cloning of the mouse obese gene and its human homologue. // Nature. 1994. - Vol. 372. - P. 425 -432.

208. Zhou H., Song X., Briggs M. et al. Adiponectin represses gluconeogenesis independent of insulin in hepatocytes. // Biochem. Biophys. Res. Commun. 2005. - Vol. 338. - P. 793 - 799.

Информация о работе

Танянский, Дмитрий Андреевич
кандидата медицинских наук
Санкт-Петербург, 2009
ВАК 03.00.04

Диссертация

Адипонектин в генезе атерогенной дислипидемии при метаболическом синдроме - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы