Закономерности дегенерации и адаптации сетчатки глаз при экспериментальных ретинопатиях, коррекция биофлавоноидами

Варакута, Елена Юрьевна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Закономерности дегенерации и адаптации сетчатки глаз при экспериментальных ретинопатиях, коррекция биофлавоноидами
ВАК РФ 03.00.25, Гистология, цитология, клеточная биология

Автореферат диссертации по теме "Закономерности дегенерации и адаптации сетчатки глаз при экспериментальных ретинопатиях, коррекция биофлавоноидами"

На правах рукописи

Варакута Елена Юрьевна

ии344ВЬ71

ЗАКОНОМЕРНОСТИ ДЕГЕНЕРАЦИИ И АДАПТАЦИИ СЕТЧАТКИ ГЛАЗ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ РЕТИНОПАТИЯХ, КОРРЕКЦИЯ БИОФЛАВОНОИДАМИ

03.00.25 - гистология, цитология, клеточная биология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук

Томск-2008 2 2 СЕН 2008

003446571

Работа выполнена в ГОУ ВПО Сибирский государственный медицинский университет Росздрава

Научный консультант

доктор медицинских наук, профессор

Логвинов Сергей Валентинович

Официальные оппоненты

доктор медицинских наук, профессор Семченко Валерий Васильевич доктор медицинских наук, профессор Суходоло Ирина Владимировна доктор медицинских наук, профессор, академик РАМН Дыгай Александр Михайлович

Ведущая организация ГУ Научный центр клинической и экспериментальной медицины СО РАМН

Защита диссертации состоится "¿_"_ 2008 г в "//" час на заседании

диссертационого совета Д 208 096 03 при ГОУ ВПО Сибирский государственный медицинский университет Росздрава по адресу 634050, г Томск, Московский тракт, 2

С диссертацией можно ознакомиться в научно - медицинской библиотеке ГОУ ВПО Сибирский государственный медицинский университет Росздрава

Автореферат разослан "-^Г" ¿х 2008

Ученый секретарь диссертационного совета

Герасимов А В

общая характеристика работы актуальность. Проблема комбинированного действия факторов среды на организм человека является одной из ключевых в биологии, медицине и экологии Организм всегда находится под прессом действия комплекса факторов и зачастую трудно оценить приоритетность того или иного фактора в возникновении патологии [Ушаков И Б, 2003] Однако в настоящее время практически отсутствуют адекватные модели взаимодействия факторов, которые помимо теоретического, имели бы практическое значение для человека, что и послужило поводом для создания модели комбинированного влияния света и экспериментального сахарного диабета на сетчатку глаз

Поражение органа зрения при сахарном диабете является актуальной проблемой в связи с ростом частоты диабетической ретинопатии, которая в настоящее время стала ведущей причиной необратимой слепоты [Балаболкин M И , Клебанова Е M , 2000, Галстян Г Р , 2002, Ei-Remessi AB et al, 2006] Морфофункциональные изменения при стойкой гипергликемии касаются практически всех звеньев зрительного анализатора, однако, поражение сетчатки является основной причиной потери зрения [Можеренков В П, Калинин А П , 1991, Жабоедов Г Д и др , 2000, Нестеров А П , 2000] Начальные проявления диабетической ретинопатии возникают уже на ранних стадиях сахарного диабета, что подтверждается электронно-микроскопическими исследованиями ба-зальной мембраны капилляров сетчатки [Anderson HR et al, 1995, Ljubimovv AW et al, 1996, li Q et al, 2002] Экспериментально показано, что изменения касаются в большей степени сосудов микроциркуляторного русла сетчатки и характеризуются нарушениями гемодинамики, а также повреждением сосудистой оболочки глаз [Qaum Т , Xu Q , Joussen AM et al, 2001, Cheung А К H , Fung M К L Lo А С Y et al, 2005, El-Remessy A В , Al-Shabrawey M , Khalifa Y, 2006] Также в некоторой степени страдают радиальные глиоциты, ассоциативные и ганглионарные нейроны сетчатки [Bensaoula Т , Ottlecz А , 2001, Li Q et al, 2002, Martin P M et al, 2004]

В литературе накоплено большое количество сообщений о повреждающем действии света на сетчатку глаз человека и животных Как в клинике, так и на производстве нередки ситуации с потенциальной возможностью возникновения и развития фотодег енерации [Michels M et al, 1990, Arafat A F et al, 1994, Bradham MS et al, 1995] Имеются данные о появлении дегенеративных изменений на глазном дне у пациентов, слишком часто подвергавшихся оф-тальмоскопированию, нарушении сетчатки после глазных операций [Bradham MS et al, 1995, Kohnen S , 2000, Kleinmann G , et al, 2002, Michael R, Wegener A , 2004, Dawson DG et al, 2005] В эксперименте на белых крысах воздействие света высокой интенсивности вызывает деструктивные изменения всех элементов сетчатки глаза Наблюдаются также гемодинамические расстройства, ультраструктурные нарушения эндотелиоцитов, базальной мембраны капилляров, что приводит к нарушению целостности гематоретинального барьера [Логвинов С В и др 2003, Потапов А В , 2006]

Общим в патогенезе диабетической ретинопатии и фотодегенерации сетчатки является нарушение микроциркуляции, а также индукция свободноради-кальных окислительных процессов [Островский МА, 1994, Wolff SP et al, 1991, Baynes J W, 1991, Kashiwagi A, Kikkawa R , 1991]

С точки зрения коррекции возможных нарушений сетчатки при указанных воздействиях вызывают интерес флавоноиды растительного происхождения Это связано в первую очередь с выраженными антиоксидантными свойствами биофлавоноидов [Петров В К идр 1996, Хазанов В А идр 1999, Кондакова Н В и др , 1997, Теселкин Ю О , 2003] В Томском НИИ фармакологии СО РАМН предложены препараты асковертин - смесь диквертина с аскорбиновой кислотой (патент РФ № 2150282, приоритет от 06 11 1998 г) и каровертин -смесь диквертина, аскорбиновой кислоты и бета-каротина Диквертин (дигид-рокверцетин, таксифолин, 3,3,3,4,5,7-пентагидроксифлавон) относится к флаво-ноидам растительного происхождения [Плотников МБ и др , 1999, Плотников М Б и др 2005] В литературе имеются сведения о выраженных церебропро-текторных свойствах асковертина Он обладает антиоксидантным и атигипок-сическим действием, влияет на тонус сосудов, нормализует мозговую гемодинамику, улучшает реологические свойства крови [Плотников МБ и др , 2005] Имеются сведения, что флавоноиды диквертин и танакан повышают активность ферментов антиоксидантной защиты - супероксиддисмутазы и каталазы, тем самым, способствуя замедлению прогрессирования пролиферативной диабетической ретинопатии и улучшению электрофизиологических показателей сетчатки [Балаболкин МИ и др, 2003] Известно также, что витамин С способен усиливать антиоксидантные свойства флавоноидов, в частности, диквертина [Middleton Е , Kandaswami С , 1992, Бобырева JIЕ, 1998, Плотников МБ и др , 2005] Указанные свойства препаратов дают основание предполагать о возможности их использования для патогенетической коррекции фотоповреждения сетчатки на фоне аллоксанового диабета Вместе с тем в доступной литературе отсутствуют сведения о модифицирующем влиянии данных биофлавоноидов на структурные изменения сетчатки глаза при экспериментальных ретинопатиях

цель исследования. Изучить закономерности дегенерации и адаптации клеточно-тканевых элементов сетчатки глаз при экспериментальных ретинопагиях, индуцированных воздействием света различной интенсивности и продолжительности, а также в комбинации с аллоксановым диабетом Установить характер влияния асковертина и каровертина на морфофункциональное состояние компонентов сетчатки белых крыс при указанных воздействиях, сравнить возможные ретинопротекторные свойства данных препаратов

задачи исследования.

1 Создать модели ретинопатий посредством светового воздействия различной интенсивности и продолжительности, а также освещения в комбинации с аллоксановым диабетом на сетчатку глаз Изучить вклад каждого фактора и их взаимодействие с целью выявления общих закономерностей повреждения и репарации тканевых компонентов сетчатки глаз

-32 Установить характер и динамику изменений нейрональной популяции и гли-альных элементов сетчатки, а также глионейрональные взаимоотношения при фотоповреждении на фоне гипергликемии с использованием методов математического моделирования

3 Изучить в динамике ультраструктурные изменения синаптоархитектоники сетчатки при воздействии указанных факторов

4 Исследовать сосудистые реакции сетчатки и ультраструктуру гематорети-нального барьера при фотоповреждении на фоне гипергликемии

5 Определить последовательность и взаимосвязь клеточных реакций для выяснения их роли в тканевых механизмах дегенерации и адаптации при воздействии высоко- и низкоинтенсивного света на фоне гипергликемии

6 Выявить модифицирующее влияние биофлавоноидов асковертина и каро-вертина на сетчатку при воздействии указанных факторов и сравнить возможные ретинопротекторные эффекты препаратов

научная новизна. С помощью гистологических, электронномик-роскопических и морфометрических методов впервые обнаружено, что при световом воздействии и освещении на фоне гипергликемии выраженность деструкции сетчатки в большей степени зависит от интенсивности освещения, а не от его продолжительности При высокоинтенсивном световом воздействии и освещении на фоне гипергликемии в динамике на 7-е сут появляются очаговые изменения сетчатки Выявлено, что наиболее поражаемыми структурами при указанных воздействиях являются нейросенсорные клетки (НСК) и пигментный эпителий (ПЭ) Изменения нейрональной популяции сетчатки при высокоинтенсивном световом воздействии и освещении на фоне гипергликемии характеризуются деструкцией закономерно убывающей в следующей последовательности нейросенсорные клетки - ассоциативные нейроны - ганглионарные нейроны Относительная сохранность ганглионарных нейронов, возможно, связана с высокой активностью в них белка Ьс1-2, в несколько раз превышающая активность гена р-53, что было выявлено при иммуногистохимическом исследовании сетчаток В популяции ассоциативных нейронов наиболее подвержены деструкции амакринные нейроны, минимальной чувствительностью к повреждающим факторам обладают горизонтальные нейроны По результатам исследования удельной площади органелл в биполярных и ганглионарных нейронах показана наибольшая чувствительность гранулярной эндоплазматической сети (ЭПС) и митохондрий, что лежит в основе хроматолитических изменений различной выраженности Межнейрональные связи также высокочувствительны к световому воздействию Обнаружено, что наибольшей деструкции подвержены синапсы наружного сетчатого слоя, а в очагах деструкции нейросенсорных клеток (при освещении 6000 лк) этот слой полностью отсутствует, и тела ассоциативных нейронов смещаются к наружной глиальной пограничной мембране Во внутреннем сетчатом слое отмечается снижение общей численной плотности синапсов преимущественно за счет асимметричных контактов Изменения си-наптического пула сетчатки после длительного низкоинтенсивного светового воздействия на фоне гипергликемии и без нее имеет адаптивный характер, вы-

ражающийся сохранением общей численной плотности синапсов после 7 сут светового воздействия Однако имеет место и деструктивный эффект, характеризующийся снижением количества активно функционирующих искривленных контактов, и сохранность более статичных плоских синапсов После освещения в течение 30 сут наблюдается срыв адаптации, характеризующийся снижением численной плотности синапсов по сравнению с данными после 7 сут светового воздействия В механизмах репарации синаптического пула сетчатки после указанных воздействий ведущую роль играют процессы неосинаптогенеза и созревание контактов ювенильного типа Реакция глиальных элементов сетчатки на воздействие повреждающих факторов неодназначна и характеризуется как регрессивными, так и прогрессивно-пролиферативными изменениями Установлена роль радиальных глиоцитов в изоляции деструктивных элементов от неизмененной ткани посредством образования многослойных глиальных пластин Пустоты, появившиеся вследствие гибели нейронов, также заполнены проли-ферирующими глиальными отростками Выраженность изменений компонентов гематоретинального барьера неодинакова и убывает в ряду пигментоэпите-лиоциты - хориокапилляры - базальный комплекс

Установлено, что курсовое введение биофлавоноидов асковертина и ка-ровертина приводит к уменьшению очагов поражения, что связано с ростом удельной площади открытых сосудов, увеличением функциональной активности пигментного эпителия, большей сохранностью нейросенсорных клеток в обеих экспериментальных группах благодаря выраженным антиоксидантным и гемореологическим свойствам перпаратов Выявлено, что данные антиоксидан-ты улучшают глионейральные и межнейрональные взаимодействия, способствуя снижению деструкции и увеличению регенераторного потенциала радиальной глии, повышая устойчивость нейронов внутренних слоев сетчатки и их си-наптические контакты к повреждению Показано, что наибольший ретинопро-текторный эффект отмечен при однократном высокоинтенсивном воздействии, нежели при длительном непрерывном низкоинтенсивном освещении

Впервые разработана математическая модель, позволяющая оценить изменения клеточных элементов сетчатки при воздействии высоко- и низкоинтенсивного света в комбинации с аллоксановым диабетом в любой момент времени на протяжении эксперимента, а также прогнозировать эти изменения по временному критерию

практическая значимость работы. Получены новые знания о закономерностях морфофункциональных изменений структурных компонентов сетчатки при световом воздействии, освещении на фоне аллоксанового диабета и коррекции биофлавоноидами асковертин и каровертин Данные об усилении альтерации при воздействии света на фоне диабета могут быть использованы для разработки гигиенических стандартов при проведении офтальмологического обследования больных с диабетической ретинопатией Представленные в диссертации данные о протективном эффекте препаратов на сетчатку глаза при воздействии света на фоне аллоксанового диабета могут быть использова-

ны для разработки новых подходов профилактики и патогенетического лечения одного из осложнений сахарного диабета - ретинопатии

Материалы работы используются в учебном процессе при чтении лекций на кафедре гистологии, эмбриологии и цитологии Сибирского государственного медицинского университета по разделу "Органы чувств"

Работа выполнена в соответствии с планом проблемной комиссии Межведомственного научного совета при Президиуме РАМН "Структурно-функциональные основы организации мозга в норме и патологии"

основные положения, выносимые на защиту.

1 Наиболее выраженную дегенерацию сетчатки вызывает кратковременное высокоинтенсивное световое воздействие на фоне экспериментального сахарного диабета Данный эффект характеризуется очаговой гибелью НСК и ПЭ В поздние сроки отмечаются процессы адаптации, характеризующиеся репарацией наружных отростков сохранившихся НСК и фагоцитозом деструктивно измененных фоторецепторов Препараты асковертин и каровертин увеличивают сохранность НСК, приводя к снижению площади очагов поражения

2 Нейроны внутренних слоев сетчатки менее чувствительны к указанным воздействиям по сравнению с НСК При высокоинтенсивном освещении наиболее поражаемы амакринные нейроны, а наименее - горизонтальные При длительном низкоинтенсивном световом воздействии изменения ассоциативных нейронов имеют обратимый характер и проявляются только на ультраструктурном уровне Введение препаратов защищает мембранные структуры нейронов и улучшает межнейрональные взаимодействия

3 Деструкция радиальной глии вносит значительный вклад в дегенерацию нейронной популяции сетчатки, а ее пролиферативная активность приводит к изоляции очагов деструкции от неизмененных тканей, что является отражением адаптации Введение препаратов снижает деструкцию радиальной глии, препятствуя развитию вторичных альтеративных изменений

4 Повреждение сосудов сетчатки и хориоидеи при воздействии указанных факторов, наряду с очаговой деструкцией ПЭ приводит к прорыву гемато-ретинального барьера, а при освещении (6000 лк) развитию неоангиогенеза Введение препаратов предупреждает деструкцию компонентов сосудистой стенки, улучшает состояние гемореологии и вносит вклад в уменьшение площади очагов поражения

апробация. Материалы диссертации доложены на VII Международном конгрессе ассоциации морфологов (Казань, 2004), на научном совещании гистологов на тему "Актуальные проблемы учения о тканях" (Санкт-Петербург, 2006), V съезде по радиационным исследованиям (радиобиология, радиоэкология, радиационная безопасность) (Москва, 2006), VIII Международном конгрессе ассоциации морфологов (Орел, 2006), на конференции посвященной 100-летию со дня рождения проф И С Кудрина (Тверь, 2006), на Всероссийской конференции с международным участием "Структурно-функциональные и ней-

рохимические закономерности асимметрии и пластичности мозга (Москва, 2006, 2007), VII международной научно-практической конференции "Здоровье и образование в XXI веке" (Москва, 2007)

публикации. По теме диссертации опубликована 30 работ, из них 11 статей в журналах, рекомендованных ВАК РФ для опубликования основных результатов диссертации на соискание ученой степени доктора наук

объем и структура диссертации Диссертация состоит из введения, обзора литературы, результатов собственных исследований, обсуждения и выводов Работа изложена на 385 страницах, иллюстрирована 8 таблицами, 175 рисунками Библиографический указатель включает 604 источников из них 177 на русском и 427 на иностранном языках

собственные наблюдения материал и методы исследования

Эксперименты проведены на 310-ти беспородных белых крысах самцах с первоначальной массой 150-180 г, полученных из вивария СибГМУ

До начала эксперимента крыс выдерживали на протяжении двухнедельного карантинного срока в условиях вивария с учетом традиционных требований к содержанию экспериментальных животных на обычном пищевом рационе Для исключения влияния сезонных колебаний эксперимент проводился в осеннее-зимний период Начало экспериментальных воздействий, и взятие материала осуществляли в одно и тоже время суток - в 10-12 часов с учетом известных вариаций зрительных структур Животных содержали в стандартных условиях вивария при световом режиме 12 часов день, 12 часов ночь с искусственным дневным освещением низкой интенсивности 20 лк

При проведении экспериментов животных помещали в специально сконструированную установку из прямоугольных рефлекторов с вмонтированными в них лампами, освещающих клетку с 5-и сторон В ней производилось тотальное кратковременное высокоинтенсивное (6000 лк) и длительное низкоинтенсивное (200 лк) освещение люминесцентными лампами ЛБ-40 с максимумом излучения в желто-зеленой области спектра Перед освещением проводили атропинизацию и дикаинизацию глаз животных Дозиметрический контроль освещенности осуществляли с помощью люксметра

Сахарный диабет моделировали путем однократного внутрибрюшинного введения аллоксана в дозе 15 мг/100 г Критерием тяжести заболевания служили уровень гипергликемии, потеря массы тела, выраженность полиурии Содержание сахара в крови определяли глюкозооксидазным методом с помощью набора "Новоглюк" (г Новосибирск) 1 раз в неделю Средний уровень сахара на 7-е сут после введения аллоксана составил - 20,1 ммоль/л (контроль 5-7 ммоль/л)

В качестве предполагаемых ретинопротекторов использовали препараты "Асковертин" - (патент РФ № 2150282, приоритет от 06 И 1998г) и «Каровер-тин» - (регистрационное удостоверение МЗ РФ № 003406 Р 643 10 2001), разра-

ботанные в НИИ фармакологии ТНЦ СО РАМН коллективом авторов M Б Плотников, О И Алиев, M Ю Маслов и др Асковертин вводили в дозе 70 мг/кг (20 мг/кг - диквертина, 50 мг/кг аскорбиновой кислоты, а каровертин - из расчета 10 мг/кг дигидрокверцетина, 50 мг/кг аскорбиновой кислоты и 1 мг/кг р-каротина в 1 % крахмальной слизи При высокоинтенсивном световом воздействии препараты вводили в течение 5-ти дней ежедневно внутрижелудочно 1 раз в сутки, первое введение препарата осуществляли за двое суток до освещения При длительном низкоинтенсивном световом воздействии - ежедневно на протяжении всего периода освещения

Животных выводили из эксперимента посредством декапитации под эфирным наркозом В максимально короткий срок после умерщвления осуществляли энуклеацию глаз В контрольную группу входили 50 интактных крыс, которых содержали в идентичных условиях вивария с экспериментальными животными График опытов планировался таким образом, что забой экспериментальных животных производился одновременно с контрольной группой крыс

Серии экспериментов 1, 3, 4 и 5 выполнены совместно с кмн А А Жданкиной Эксперименты проводили с соблюдением приказа Министерства здравоохранения СССР за № 755 от 12 08 77 об обеспечении принципов гуманного обращения с животными и федеральным законом РФ "О защите животных от жестокого обращения" от 01 01 1997

Микроскопическое исследование Глазные яблоки фиксировали в жидкости Карнуа и заливали в парафин Отвесные срезы задней стенки глаза окрашивали гематоксилином и эозином [Ромейс Б , 1954], крезиловым фиолетовым по Nissl [Лили Р , 1969] - для выявления хроматофильного вещества в перикарионах нейронов

Иммуногистохимические исследования С целью проведения иммуногистохимического исследования материал фиксировали в 12% нейтральном формалине в течение 24 часов [Эллшшди В H и др , 2002] Далее объекты заливали в парафин по обычной схеме На парафиновых срезах проводили двухэтапные реакции для выявления белков-маркеров апоптоза - р 53 и bcl-2 На первом этапе депарафинированные срезы подвергали предварительной высокотемпературной обработке с целью демаскировки антигена, а затем инкубации с первыми (специфичными) антителами в течение ночи при температуре +4° С На втором этапе проводили инкубацию со вторыми антителами, авидин-биотин-пероксидазным комплексом с последующим выявле- нием пероксидазы хрена диаминобензидином

Готовые срезы докрашивали квасцовым гематоксилином и заключали в канадский бальзам Подсчет р-53 и bel 2- положительных нейронов производили по 4-бальной шкале на 100 клеток с каждой сетчатки при увеличении 10x40 Формула подсчета следующая [Эллиниди, В H, 2002] Histochemical scores = = S P(i) x i где, i - интенсивность окрашивания, выраженная в баллах от 0-4, P(i) -процент клеток, окрашенных с разной интенсивностью

Таблица 1 Распределение животных по сериям эксперимента

№ Серия эксперимента Кол-во животных Сроки взятия материала (сут)

1 Воздействие света (6000 лк, 6 ч ) 20 1,7, 14, 30

2 Аллоксановый диабет (1 месяц) 20 Через 4, 5, 6 и 8 недель после введения аллоксана

3 Световое воздействие (6000 лк, 6 ч) через месяц после введения аллоксана 20 1,7, 14, 30

4 Световое воздействие (6000 лк, 6 ч), коррекция асковертином 20 1,7, 14, 30

5 Световое воздействие (6000 лк, 6 ч ) через месяц после введения аллоксана, коррекция асковертином 20 1,7, 14, 30

6 Световое воздействие (6000 лк, 6 ч), коррекция каровертином 20 1,7, 14, 30

7 Световое воздействие (6000 лк, 6ч) через месяц после введения аллоксана, коррекция каровертином 20 1,7, 14, 30

8 Освещение животных (200 лк) в течение 1, 7, 14, 30 сут 20 После окончания освещения

9 Световое воздействие (200 лк) в течение 1, 7, 14, 30 суток через месяц после введения аллоксана 20 После окончания освещения

10 Освещение животных светом 200 лк в течение 1, 7, 14, 30 сут на фоне введения асковертина 20 После окончания освещения

11 Световое воздействие (200 лк) в течение 1,7, 14, 30 суток через месяц после введения аллоксана, коррекция асковертином 20 После окончания освещения

12 Освещение животных светом 200 лк в течение 1,7, 14, 30 сут на фоне введения каровертина 20 После окончания освещения

13 Световое воздействие (200 лк) в течение 1,7, 14, 30 суток через месяц после введения аллоксана, коррекция каровертином 20 После окончания освещения

Электронно-микроскопическое исследование

Для изучения ультраструктурных изменений заднюю стенку глаз фиксировали в 2,5% растворе глютаральдегида, забуференного на 0,2 М какодилат-ном буфере (рН 7,4) Материал постфиксировали в 2% растворе четырехокиси осмия на холоде в течение 3-х часов, дегидратировали в спиртах восходящей концентрации и заливали в эпон

На осмированных препаратах плохо выявляются филаментозные пара-мембранные образования, поэтому для количественного изучения синаптиче-ского пула на этапе дегидратации, без предварительного осмирования, сетчатки контрастировали в 5% растворе фосфорно-вольфрамовой кислоты (ФВК) на абсолютном спирте в течение 3-х часов

На ультратоме LKB-4 (Швеция) готовили полутонкие и ультратонкие срезы Просмотр и фотографирование полутонких срезов производили на световом микроскопе "Люмам И1" Ультратонкие срезы помещали на медные сетки Осмированные препараты докрашивали уранилацетатом и цитратом свинца (Reynolds, 1963) и изучали в электронном микроскопе JEM - 7А

Морфометрическнй анализ На парафиновых срезах, окрашенных гематоксилином и эозином определяли удельную площадь очагов поражения сетчатки с использованием окулярной сетки Автандилова с 5-ти срезов каждой сетчатки при увеличении 10x40 На срезах, окрашенных крезиловым фиолетовым, подсчитывали процент ганг-лионарных нейронов с очаговым и тотальным хроматолизом на 200 клеток с каждой сетчатки На полутонких, окрашенных толуидиновым синим срезах, производили подсчет НСК клеток с деструкцией ядра (пикноз, рексис, лизис) на 1000 клеток с каждой сетчатки Определяли количество слоев и плотность распределения ядер в (НЯС) Подсчет клеток производили в окулярной рамке на площади 146 мкм2 с 5 срезов каждой сетчатки при увеличении 10x90 Высчитывали удельную площадь среза слоев сетчатки, а также открытых неизмененных и сосудов хориоидеи с явлениями сладжа и тромбоза Определяли глио-нейрональный индекс - отношение числа радиальных глиоцитов к ассоциативным нейронам ВЯС на 50 полях зрения с каждой сетчатки при увеличении 10x90 Высчитывали процент пикноморфных радиальных глиоцитов, нейронов внутреннего ядерного и ганглионарного слоев на 200 клеток с каждой сетчатки На электронных микрофотографиях внутреннего ядерного и ганглионарного слоев определяли удельную плотность ор1анелл ассоциативных и ганглионар-ных нейронов с помощью открытой квадратной тестовой решетки с шагом 5 мм при увеличении 10000

Для оценки изменений синаптоархитектоники фотографировали по 15 случайно выбранных полей зрения внугреннего сетчатого слоя с 5 срезов каждой сетчатки при стандартном увеличении 8500 При конечном увеличении 30000 на сканированных электронно-микроскопических фотографиях определяли количество межнейронных контактов (площадь поля зрения - 50 мкм2) и высчитывали численную плотность синапсов на 100 мкм2 нейропиля Выявленные ФВК-позитивные контакты в зависимости от плоскости среза подразделяли

на ряд категорий Анализировали только те контакты, в которых четко были видны все элементы ССЕ электронноплотный материал пресинаптической зоны, синаптической щели и постсинаптической части В плоскость среза контактов неопределенного вида попадала только часть ССЕ Подсчитывали количество определенных контактов с асимметричной и симметричной организацией ССЕ Для асимметричных контактов характерно дискретное расположение ФВК-позитивного материала пресинаптической зоны в виде плотных проекций (ПП) пресинаптической решетки, а в симметричных контактах электронно-плотный материал персинаптической зоны неорганизован в отдельные фила-ментозные образования Асимметричные контакты, в свою очередь, по степени выраженности ПП дифференцировали на типы А, В, С [Семченко В В , Степанов С С , 1987] В контактах типа А высота ПП пресинаптической решетки была больше 60 им, в контактах типа В соответствовала 50-60 нм, а контактах типа С - меньше 50 нм Длину активной зоны контакта (АЗК), которая на ФВК-контрастированном материале соответствовала всему синаптическому профилю, определяли с помощью тестовой решетки с шагом 3 мм По протяженности АЗК все контакты делили на очень мелкие (<100 нм), мелкие (100-200 нм), малые (200-300 нм), средние (300-500 нм), крупные (500-700 нм) и очень крупные (>700 нм) Подсчитывали численную плотность плоских, "+" и "-" изогнутых синапсов [Семченко В В , Степанов С С , 1995]

Цифровой материал обработан общепринятыми методами вариационной статистики [Автандилов Г Г и др , 1990] Для каждой выборки вычисляли выборочное среднее и стандартную ошибку выборочного среднего С помощью критерия Колмогорова обнаружено отсутствие согласия данных с нормальным распределением, в связи с чем, для оценки различий между независимыми выборками применяли критерий Манна-Уитни Различия считались достоверными при р<0,05 Полученные данные обрабатывали также методом корреляционного анализа Статистическая обработка результатов была проведена с использованием пакета БТАИБИСА 6 0 По данным экспериментов проводилось построение математической модели изменений при помощи методов, реализованных в программной среде таЛСАО (интерполяция, регрессия, аппроксимация) результаты собственных исследований и их обсуждение

Проведенные исследования показали, что световое воздействие вызывает закономерные, зависящие от интенсивности, продолжительности воздействия и времени после освещения изменения всех компонентов сетчатки Аллоксано-вый диабет усиливает деструктивные эффекты света, что в первую очередь связано с патологией сосудов микроциркуляторного русла Наибольшим изменениям после светового воздействия, а также освещения на фоне аллоксанового диабета подвержены пигментный эпителий, нейросенсорные клетки, синапсы и радиальная глия

В первую очередь как при высоко-, так и при низкоинтенсивном воздействии изменения возникают в наружных сегментах НСК, так как они являются первичными акцепторами световых квантов, характеризующиеся крайне высо-

ким содержанием полиненасыщенных жирных кислот и белков Данные изменения характеризуется расслоением, фрагментацией, вакуольной дегенерацией мембран, что отмечают многие исследователи [Логвинов С В и др, 2005, Johnson DD et al, 1986; Mirshahi M et al, 1991, Rosner M et al, 1992, Chen E , 1993, Unoki К et al, 1994, Koutz R et al, 1995, Organisciak D T , et al, 2003] Высокоинтенсивное световое воздействие вызывает очаговый характер изменений сетчатки с практически полным исчезновением в очагах фотосенсорного и наружного ядерного слоев После светового воздействия относительная площадь очагов в срезах составляет 27% от всей сетчатки, освещение на фоне ал-локсанового диабета приводит к увеличению площади поражения в 2 раза Такой мозаичный характер повреждения при изучаемых воздействиях, возможно связан, с изначально различной функциональной активностью сосудов микро-циркуляторного русла и пигментного эпителия сетчатки

На 7-е сут после освещения (6000 лк) в очагах поражения происходит снижение удельной площади фотосенсорного слоя по отношению к контролю в 4 раза и в 5,3 раза в группе после освещения на фоне аллоксанового диабета К 30-м сут в обеих группах в участках, соответствующих очагам, фотосенсорный слой практически отсутствует В обычных условиях в наружных сегментах НСК совершаются первичные процессы зрительной рецепции - возбуждение и адаптация, в экстремальных ситуациях, будь то слишком яркое или длительное освещение, в них разыгрываются процессы окисления При этом обесцвеченный ретиналь, поглощая свет в присутствии кислорода и субстратов окисления - белков и липидов, выступает в качестве фотосенсибилизатора процессов сво-боднорадикального окисления в сетчатке и играет ведущую роль в развитии повреждения мембран наружных сегментов НСК [Островский М А и др , 1991, Островский М А , Федорович И Б , 1982, 1994, Masuda К et al, 1995, Sakmar Т Р , 2002] Кроме того, установлено, что различные изомеры ретиналя являются эффективными фотогенераторами синглетного кислорода В результате его химического тушения ретиналем и фосфоинозитидами мембран НСК образуются их гидроперикисные производные, способные индуцировать реакции сво-боднорадикального окисления липидов [Кулиев И Я , Шведова А А , 1982] Внутренние сегменты на начальных этапах после обоих видов воздействий увеличиваются в размерах, в них происходит деструкция гранулярной ЭПС, что приводит к нарушению синтеза структурных белков, а также транспортных процессов и как следствие - замедление регенерации наружных сегментов Также развивается деструкция митохонрий Сначала наблюдается набухание митохондрий, что является компенсаторно-приспособительной реакцией В последующем отмечена деструкция крист митохондрий, а некоторые из них имеют вид полых мешочков, что с одной стороны приводит к нарушению процессов энергообразования, а с другой стороны активизирует каспазный механизм апоптоза [Zamzami N et al, 1996]

На 14-30-е сут после освещения в очагах поражения внутренние сегменты резко осмиофильны, подвергаются фрагментации и теряют связь с перикарио-ном В некоторых участках фотосенсорный слой полностью отсутствует

Курсовое введение асковертина и каровертина приводит к достоверному снижению площади очагов поражения при световом воздействии в 1,5 раз, при освещениии на фоне аллоксанового диабета в 1,6 раза

Ультраструктурные изменения наружных и внутренних сегментов НСК после освещения в группах животных, получавших препараты, были аналогичны описанным выше, однако проведение количественного анализа позволяет нам сделать вывод об их защитном эффекте

На первые сутки как после светового воздействия, так и после освещения на фоне аллоксанового диабета удельная площадь фотосенсорного слоя значимо не отличалась от контрольных значений На 7-е, 14-е и 30-е сут в очагах поражения наблюдалось достоверное снижение данного показателя, однако он оставался выше значений групп без использования препаратов Наблюдаемые эффекты препаратов асковертин и каровертин в отношении наружных отростков НСК, вероятно, связаны как с их антиоксидантной активностью, так и с проявлением иных свойств, способствующих снижению патологических процессов Во-первых, как было показано выше, высокоинтенсивное световое воздействие запускает процессы фотооксидации в дисках фоторецепторов, в результате чего активируется выработка свободных радикалов Ведущая составляющая препаратов - диквертин является ловушкой радикалов, цепьпреры-вающим агентом [Гюкавкина НА и др , 1995, Теселкин Ю О и др , 1996, 1999, Теселкин Ю О , 2003, Плотников МБ и др , 2005] Во-вторых, наружные сегменты состоят из мембранных дисков, основным компонентом которых являются липиды, относящиеся к легкоокисляющимся субстратам Диквертин имеет способность оказывать "мембраностабилизирующее" действие, улучшая ли-пидный обмен и замедляя образование липидных гидропероксидов Аскорбиновая кислота, входящая в состав препаратов, повышает фармакологическую активность диквертина и сама выступает в роли антиоксиданта, при этом между ними отмечается мощный эффект синергизма [Middleton Е, Kandaswami С, 1992, Плотников МБ и др, 2005] В-третьих, степень восстановления наружных сегментов напрямую зависит от состояния внутренних сегментов [Baker BN et al, 1986, Moria M et al, 1986] Доказано, что применение асковертина в условиях ишемии мозга приводит к снижению деструкции митохондрий и эн-доплазматической сети [Плотников МБ и др, 2000, Пугаченко HB и др, 2000, Логвинов С В и др , 2001] В связи с чем, можно предположить, что использование препаратов при световом воздействии ведет к снижению деструкции митохондрий и гранулярной эндоплазматической сети внутренних сегментов НСК, улучшая ферментативную активность митохондрий и белоксинтези-рующую функцию клетки В состав каровертина входит также антиоксидант ß-каротин в дозе 1 мг/кг Однако ретинопротекторное действие каровертина существенно не отличается от эффектов, вызванных асковертином Возможно, это связано с меньшим, чем в асковертине, содержанием дигидрокверцетина

Более выраженный деструктивный эффект светового воздействия при ал-локсановом диабете в отношении НСК объясняется не только прямым повреждающим действием яркого света, но и опосредованным механизмом, связанным

с сосудистыми изменениями Уже на начальной стадии сахарного диабета наблюдаются патологические изменения хориокапилляров, выражающиеся сужением просвета за счет набухания ядросодержащей части эндотелиоцитов, утолщением базальной мембраны, деструкцией перицитов [Сорокин Е JI, Смо-лякова Г П, 1997, Kern Т S , Engerman R L , 1995, Yang Y et al, 1997, Imesch P D et al, 1997, Dagher Z et al, 2004, Hughes S , et al, 2007] Нарушаются также вязкостные характеристики крови, увеличивается агрегация эритроцитов, снижается их деформируемость, наблюдается гиперфибриногенемия, в связи с чем, происходит ухудшение транспорта кислорода и развивается микроангиопатия [Галенок В А и др , 1987, Евграфов В Ю и др , 2004, Le Devehat С et al, 1994, Antonetti DA et al, 2006] Следует отметить, что в начальный период развития диабета НСК менее подвержены изменениям, чем нейроны внутренних слоев сетчатки, вероятно вследствие того, что их наружные сегменты погружены в пигментный эпителий, обладающий мощной антирадикалыюй защитой Таким образом, фотосенсорный слой остается относительно интактным [Гаджиев В Г, 1998] Однако деструктивные изменения пигментоэпителиоцитов и нарушение их взаимосвязей с НСК при высокоинтенсивном световом воздействии способствуют снижению защитных свойств фоторецепторов, т к известно, что сохранность структуры и функции пигментного эпителия является одним из условий нормального функционирования сетчатки [Думброва НЕ, 1991]

Ядросодержащие части НСК подвергаются деструкции в виде кариопик-ноза, рексиса и лизиса Анализ данного показателя свидетельствует о следующих закономерностях во-первых, тяжесть поражения в большей степени зависит от интенсивности воздействия, нежели от его продолжительности Об этом мы можем судить по показателю деструкции ядер через сутки после светового воздействия Обнаружено, что содержание деструктивно измененных ядер НСК выше после кратковременного высокоинтенсивного светового воздействия по сравнению с таковым при низкоинтенсивном световом воздействии продолжительностью 1,7,14 и 30 сут

Во-вторых, НСК наиболее восприимчивы, как к световому воздействию, так и к освещению на фоне аллоксанового диабета, однако обладают высокой способностью к адаптации, о чем свидетельствует относительная сохранность наружных отростков при низкоинтенсивном световом воздействии, возрастающей продолжительности Основная масса НСК восстанавливает свое строение даже при тотальной деструкции наружных отростков, что является отражением репаративных возможностей НСК

В-третьих, действие препаратов антиоксидантов наиболее эффективно при кратковременном высокоинтенсивном световом воздействии, нежели при длительном низкоинтенсивном

Световое воздействие (6000 лк) вызывает деструкцию ядер НСК уже через сутки после освещения На 7-е сут появляются очаги повреждения, где содержание деструктивных ядер НСК максимально и достигает 49,01±0,47% - при световом воздействии и 77,92±1,31% - при освещении на фоне гипергликемии (контроль 0,4±0,008%, р<0,05) На 21-25 сут по данным магематического моде-

лирования процент дегенеративно измененных ядер НСК снижается, оставаясь выше контрольных значений, что связано с фагоцитозом погибших клеток ПЭ, радиальными глиоцитами, макрофагами, мигрирующими из микроциркулятор-ного русла в сетчатку В последующие сроки отмечена динамика роста данного показателя с максимумом на 35-е сут

Необходимо отметить, что после освещения на фоне аллоксанового диабета изменения НСК более выражены по сравнению с таковыми после светового воздействия Кроме того, математическое моделирование показало более медленное снижение содержания деструктивных ядер НСК с минимумом на 24-26 сут, по сравнению с таковым при изолированном освещении Данный эффект, вероятно, связан с усилением сосудистых нарушений, а также окислительных процессов, что играет существенную роль в патогенезе диабетической ретинопатии [Engerman R, Kern Т, 1995, Fagrell В et al, 1999]

После курсового введения препаратов сохранность НСК значительно повышается Так на 7-е сут количество деструктивных ядер после светового воздействия при введении асковертина составляет 4,98±0,09% и 6,37±0,49% - при введении каровертина, при освещении на фоне аллоксанового диабета с коррекцией асковертином - 7,93±0,39% и 8,8±0,39% - при использовании каровертина, оставаясь достоверно выше контроля (р<0,05)

При низкоинтенсивном световом воздействии ретинопротекторный эффект препаратов менее выражен, что возможно связано со свойством препаратов на основе биофлавоноидов накапливаться в участках с высоким содержанием свободных радикалов и играть роль донора электронов по отношению к радикальному субстрату [Плотников M Б и соавт , 2005]

Таким образом, чем выше активность свободнорадикального окисления, тем эффективнее препарат

В последние годы большинство исследователей доказывают ведущую роль апоптоза в гибели клеток при повреждении сетчатки, не исключая развития некротических изменений [Marti A et al, 1998, Carmody R Jet al, 1999, Kueng-Hitz N. et al, 2000, Reme С E, 2000, Grimm С et al, 2001, J Wu et al, 2002] Полученные нами результаты с одной стороны свидетельствуют в пользу развития некротических изменений нейросенсорных клеток при изучаемых воздействиях, с другой стороны позволяют сделать вывод о немаловажной роли апоптоза в повреждении НСК Известно, что для индукции апоптотической гибели клеток повреждающий стимул должен быть такой силы, чтобы клетка имела энергетические и материальные ресурсы для процессов транскрипции и трансляции проапоптотических белков [Лушников, ЕФ, 2001, Мушкамбаров H H , Кузнецов С Л , 2003]

Высокоинтенсивное световое воздействие является мощным повреждающим фактором, что свидетельствует в пользу некротической гибели НСК Кроме того, при освещении (6000 лк) продукты деградации НСК вызывают миграцию макрофагов и микроглии, являющихся клетками воспаления Что также говорит в пользу некротического характера гибели НСК, так как наличие воспаления является дифференциальным признаком некроза Макрофаги и микро-

глия генерируют свободные радикалы, а микроглиоциты также секретируют провоспалительные цитокины интерлейкин-1 и фактор некроза опухоли, запускающие каспазный механизм апоптотической гибели НСК, что вовлекает в процесс все новые и новые клетки [Snnivasan В, Roque С Н , Hempstead В L , 2004, Zeng Н , Zhu X , Zhang С et al, 2005, Krady J К , et al, 2005] При длительном низкоинтенсивном световом воздействии, по-видимому, доминирующим типом смерти НСК является апоптоз Их гибель не имеет массового характера и не вызывает миграцию фагоцитов

Среди ультраструктурных изменений НСК уже на первые сутки после светового воздействия, а также освещения на фоне аллоксанового диабета нами были выявлены клетки с типичными признаками апоптоза - маргинация хроматина, наличие апоптотических телец в склеральных отростках радиальной глии Хотя иммуногистохимический анализ показал отсутствие в НЯС проапоптоти-ческого гена р-53 и антиапоптотического белка bcl-2, что согласуется с литературными данными об отсутствии влияния гена р-53 на индуцированный светом апоптоз в НСК [Kueng-Hitz N et al, 2000] Вероятно, в индукции апоптоза здесь задействованы другие механизмы - через индукцию c-fos гена, либо активация митохондриальной ветви апоптоза [Paylor R et al, 1994, Roffler-Tarlov S et al, 1996, Hafezi F et al, 1997, Marti A et al, 1998, Kueng-Hitz N et al, 2000, Reme С E , 2000; Choi S et al 2001, Donovan M et al, 2001, Grimm C. et al, 2001, Wu J et al, 2002] Существенный вклад в развитие апоптоза НСК в последнее время отводят лизосомам, индуцирующим этот процесс посредством активации фактора некроза опухоли [Tardy С et al, 2004, Dermaut В , et al, 2005]

Пигментоэпителиоциты, находясь в тесном контакте с НСК, участвуют в утилизации разрушенных наружных сегментов В сетчатке млекопитающих одна клетка фагоцитирует отработанные мембранные диски от 30-ти фоторецепторов [Nandrot Е F , Kim Y , Brodie S Е et al, 2004] В экстремальной ситуации при освещении (6000 лк) уже через сутки наблюдается усиление фагоцитарной активности (ПЭ), выражающееся повышением количества фагосом, гипертрофией апикальных микроворсинок При световом воздействии повышается метаболическая активность ПЭ, что характеризуется увеличением количества пи-ноцитозных пузырьков, посредством которых осуществляется транспорт воды, лактата и других продуктов обмена от фоторецепторов к ПЭ Так, было замечено, что освещение приводит к увеличению объема сетчатки за счет повышенного образования воды, особенно в НЯС и фотосенсорном слое [Huang В, Karwoski C.J , 1992, Li J D et al, 1994] В определенный момент ПЭ не справляется с повышенной функциональной нагрузкой Так, на 1-е сут после освещения (6000 лк) мы наблюдали эпителиоциты с деструкцией митохондрий, исчезновением микроворсинок, и ядрами с маргинально расположенным гетерохро-матином, что характерно для апоптоза По данным R С Geiger et al (2005) не-доокисленные продукты обмена вызывают нерепарируемые повреждения ДНК клеток, осмотический лизис органелл, в частности митохондрий, а также разрушение цитоскелета клетки, а именно актиновых микрофиламентов, большая часть которых сосредоточена в области микроворсинок

Снижение удельной площади ПЭ в срезе сетчатки на 1-е сут после освещения наблюдались только в группе со световым воздействием на фоне гипергликемии до 3,9±0,34% по сравнению с контролем (5,43±0,09%, р<0,05) По мнению некоторых авторов, длительная гипергликемия способствует апоптоти-ческой гибели клеток ПЭ [Turko IV et al, 2003] Возможно, это связано с усилением окислительного напряжения и повышением активности индуцибельной NO-синтазы, ответственной за увеличение синтеза NO [Ellis Е А, Grant M В , Murray F Т , et al 1998, Chiou G С , 2001, Du Y, Miller С M , Kern T S , 2003] В присутствии супероксидного радикала NO превращается в перокснитрит, обладающий довольно значительной окислительной способностью, что приводит к нарушению многих клеточных структур, в том числе ДНК клеток [Реутов В П , Сорокина ЕГ , 1994, 1998, Архипова ММ и др , 2000, Roufail Е et al, 1998] Гибель ПЭ каскадно нарастает, что приводит к срыву адаптации и появлению очагов поражения на 7-е сут после светового воздействия Пигментоэпителио-циты уменьшаются в размерах, повышается осмиофилия ядра и цитоплазмы, в таких клетках исчезает базальная складчатость, в цитоплазме появляются мембранные комплексы Встречаются участки с полным отсутствием пигментного эпителия и фотосенсорного слоя Подобные изменения наблюдаются и при иных видах воздействий - коротковолновым светом, диаминофеноксипента-ном, индоцианом, комбинированным воздействием ионизирующей радиации и света [Логвинов С В , Потапов А В , 2000, Дробатулина Д А , 2004, Li J , et al, 1993, Wang H M , et al, 1994, Masuda К, Watanabe 1, 1995, Ikagawa H , et al, 2005]

Деструкция ПЭ стимулирует миграцию в субретинальное пространство фагоцитов и микроглии, которые с одной стороны участвуют в удалении продуктов деградации наружных сегментов фоторецепторов, а с другой стороны сами оказывают цитотоксическое действие на ПЭ и НСК [Zhang С, Lei В , Lam Т Т, 2004, Zeng H, Zhu X , Zhang С et al, 2005]

К 14-30-м сут после освещения животных в группах без коррекции препаратами большинство ядер пигментоэпителиоцитов в очагах подвержены пик-нозу, наблюдается прогрессирующее снижение удельной площади ПЭ в срезе сетчатки по сравнению с контролем (р<0,05) Вне очагов часть клеток сохраняет нормальное строение, часть гипертрофирована, в последних наблюдается усиление фагоцитарной активности

Курсовое введение препаратов-антиоксидантов при световом воздействии, а особенно при освещении на фоне аллоксанового диабета способствует развитию реактивных изменений ПЭ - гипертрофии клеток и микроворсинок, усилению базальной складчатости, повышению содержания фагосом В связи, с чем происходит увеличение удельной площади ПЭ по сравнению с показателями групп сравнения (р<0,05), а на 7-е и 14-е сут после освещения на фоне гипергликемии при введении асковертина, и с контролем (р<0,05) Высокая сохранность ПЭ, увеличение его фагоцитарной активности, сохранение связи между ПЭ и наружными сегментами НСК а, следовательно, улучшение транспорта метаболитов из хориоидальных сосудов сетчатки при высокоинтенсивном

световом воздействии и в особенности при освещении животных с аллоксано-вым диабетом на фоне введения препаратов, являются на наш взгляд, одними из ведущих факторов, способствующих защите рецепторной и ядросодержащей части НСК от повреждения

При сравнении удельной площади ПЭ в группах с коррекцией асковерти-ном и каровертином отмечено достоверное увеличение данного показателя на 7 и 14-е сут после освещения на фоне гипергликемии в группе с коррекцией ас-ковертином, что вероятно связано с более высоким содержанием в этом препарате основного антиоксиданта дигидрокверцетина, по сравнению с каровертином

В процессах дегенерации ПЭ при длительном низкоинтенсивном световом воздействии определенную роль играет нарушение биоритмов Известно, что сбрасывание дисков НСК и фагоцитоз их ПЭ - это циркадно-зависимый процесс, который контролируется секрецией допамина и мелатонина [Nguyen-Legros J, Hicks D , 2000, Nir I, et al, 2002] В сетчатке крыс преобладают палочковые НСК, которые освобождаются от мембранных дисков в утренние часы, одновременно в ПЭ наблюдается активизация фагоцитарной активности, что приводит к быстрой утилизации источника свободнорадикального окисления и перикисного окисления липидов [Young, R W 1977, Nandrot Е F , Kim Y, Brodle S E , 2004] Срыв этого отлаженного механизма приводит к накоплению в субретинальном пространстве вблизи апикальной поверхности ПЭ отработанных мембранных дисков, находящихся на разных стадиях лизиса уже при освещении в течение 1 сут Часть пигментоэпителиоцитов увеличена в размерах за счет накопления фагосом, микроворсинки гипертрофированы, усилена ба-зальная складчатость, что говорит об активизации фагоцитоза и транспортных процессов В некоторых клетках наблюдается срыв компенсации, и на смену реактивным приходят деструктивные изменения, которые проявляются резкой осмиофилией и вакуолизацией цитоплазмы, исчезновением микроворсинок и пикнозом ядра Такой мозаичный характер изменений наблюдается при увеличении длительности освещения до 7-ми, 14-ти и 30-ти сут Даже при освещении в течение 30-ти сут не обнаруживаются участки, в которых полностью отсутствует ПЭ, что отмечено при высокоинтенсивном воздействии Обращает на себя внимание, также отсутствие существенных отличий по показателю удельной площади пигментного эпителия при освещении в течение 7-ми, 14-ти и 30-ти сут, что возможно связано с адаптацией пигментоэпителиоцитов к постоянному низкоинтенсивному воздействию

Изменения ассоциативных нейронов ВЯС при низкоинтенсивном световом воздействии имеют обратимый характер, что характерно и для микроволнового облучения нетермогенной интенсивности [Логвинов С В , 1993]

При освещении (6000 лк) размер и локализация очагов повреждения наружных слоев сетчатки совпадают с участками деструкции нейронов ВЯС Вероятно, срыв механизмов антиоксидантной защиты приводит к распространению свободных радикалов и продуктов пероксидации во внутренние слои сетчатки, что вызывает повреждение мембранных органелл, восприимчивых к:

окислению Так, ультраструктурный стереометрический анализ удельной площади органелл показал снижение содержания митохондрий и эндоплазматиче-ского ретикулума в биполярных нейронах Активизация свободнорадикального окисления и перикисного окисления липидов вызывает деструкцию высокомембранных структур синаптических контактов наружного сетчатого слоя В отдельных участках он полностью отсутствует, что прерывает трехнейронную цепь и опосредованно вызывает деструкцию нейронов ВЯС, что согласуется с данными М \Vasowicz е1 а1 (2002) По мнению этих исследователей, деструкция ассоциативных нейронов напрямую зависит от степени поражения НСК и объясняется потерей синаптического входа от них и невозможностью выхода трофических факторов и медиаторов Максимальное содержание пикноморф-ных ассоциативных нейронов наблюдается на 7-е сут после освещения и совпадает по срокам с деструкцией НСК

Среди ассоциативных нейронов наиболее подвержены деструкции амак-ринные нейроны Так, количество пикноморфных амакринных нейронов при световом воздействии достигает 26,6± 1,26%, биполярных 17,4±0,69% и горизонтальных 13,6±1,24%, что значимо отличается контроля (р<0,05) Подобные результаты наблюдались после нейтронного воздействия, микроволнового облучения, при диабете [Логвинов С В и соавт 1994, Логвинов С В , 1998, Гад-жиев Р В , 1998] Обращает на себя внимание тот факт, что распределение ядер радиальных глиоцитов во внутреннем ядерном слое происходит неравномерно, основная часть их ядер сконцентрирована у витреального края этого слоя и находится в непосредственном контакте с телами амакринных нейронов Отмечено, что большая часть этих глиоцитов при световом воздействии подвержена деструкции Как известно, глия обеспечивает нормальное функционирование нейронов и ее гибель, косвенно, инициирует деструкцию нейронов Так, например, радиальные глиоциты участвуют в метаболизме нейротрансмиттера глутамата, который в больших концентрациях обладает нейротоксичностью и индуцирует апоптатическую гибель нейронов, что наблюдается как после светового воздействия [вгозЬе ] е1 а1, 1995, с!е Яаас! Б й а1, 1996, \Vasowicz М й а1, 2002], так и при сахарном диабете [Борисова С А , Коломойцева Е М , 2003, Мшйаш М, 1996,1леЛ-А1151а1Г ЕI сЧ а1, 1998]

Возможно деструкция амакринных нейронов, является следствием гибели радиальных глиоцитов Кроме того, проведенный корреляционный анализ выявил сильную зависимость между деструктивными изменениями амакринных и ганглионарных нейронов после светового воздействия интенсивностью 6000 лк Повышение числа пикноморфных ганглионарных нейронов на 1-е сут после освещения приводит к деструкции амакринных клеток на 30-е сут (г=0,68) В группе с коррекцией каровертином увеличение числа пикноморфных ганглионарных нейронов на 14-е сут после освещения вызывает повышение содержания пикноморфных амакринных нейронов на 30-е сут (г=0,65)

Горизонтальные нейроны в меньшей степени подвержены деструкции, чем амакринные и биполярные, что вероятно связано с низким содержанием в

них мембранных органелл - основной мишени высокоинтенсивного светового воздействия [Давыдова Т В , 1984]

Выраженная гипергликемия при сахарном диабете, активация полиолово-го пути метаболизма глюкозы, а также нарушение глутаматного обмена по данным литературы во многом способствует развитию деструктивных изменений нейронов внутренних слоев и их апоптотической гибели [Gamberino W С, 1997, Choi S etal, 2001, Tinghuai W , 2005]

По нашим данным, изменения ассоциативных нейронов при аллоксано-вом диабете продолжительностью 4-8 недель проявляются набуханием части митохондрий, расширением цистерн ондоплазматической сети, исчезновением полисом РВ Гаджиевым [1998] после шестимесячного дитизонового диабета обнаружено, что наибольшая выраженность осциляторных потенциалов принадлежит амакринным нейронам Этот факт позволяет предположить, что первоначальные нарушения возникают именно на их уровне

Вероятно, суммация всех описанных выше процессов приводит к тому, что наиболее выраженные деструктивные изменения нейронов ВЯС по критерию гиперхромия со сморщиванием наблюдаются в группе после освещения на фоне аллоксанового диабета, достигая максимальных значений на 7-е сут -24,7±0,96%, что в 1,2 раза выше данных при одном световом воздействии (р<0,05) К 14-м и 30-м сут после освещения число деструктивно измененных нейронов снижается, и показатели в обеих группах уравниваются, что связано с фагоцитозом погибших нейронов радиальной глией

Степень повреждения ассоциативных нейронов ВЯС в группах с использованием асковертина и каровертина значительно ниже аналогичных данных групп без коррекции, причем значения деструкции у животных после светового воздействия достоверно не отличаются от таковых в группе после освещения на фоне аллоксанового диабета Это вероятно связано с большей сохранностью митохондрий и эндоплазматического ретикулума в цитоплазме ассоциативных нейронов сетчатки животных с коррекцией препаратами, что обнаружено при подсчете удельной площади органелл и как следствие увеличению метаболического и энергетического потенциала клеток Так, на 1 -е сут удельная площадь гранулярной ЭПС в группах с коррекцией асковертином и каровертином достоверно выше аналогичных данных в группах без введения препаратов в 1,3 и 1,5 раза соответственно (р<0,05) Возможно, это связано с ингибированием процессов перекисного окисления липидов в мембранных органеллах ассоциативных нейронов, что способствует устойчивости этих нейронов к повреждающему действию света Угнетение препаратами на основе диквертина полиолового пути метаболизма глюкозы при сахарном диабете [Haraguchi Н et al, 1996], вероятно, является одним из механизмов защиты нейронов внутренних слоев сетчатки от повреждения, что приводит к снижению дегенерации ассоциативных нейронов и нивелирует разницу между показателями деструкции в обеих изучаемых группах

Важную роль в повреждении ганглионарных нейронов играют нарушение микроциркуляции и деструкция астроглии Наиболее чувствительными к ги-

поксии органеллами являются митохондрии, что приводит к нарушению функции тканевого дыхания и развитию окислительного стресса Выход в гиало-плазму цитохрома С, в результате разрушения митохондриальных мембран, активизирует ПОЛ, а также индуцирует апоптоз клетки Второй механизм гибели ганглионаров может быть связан с нарушением нейротрофической стимуляции при повреждении зрительного нерва Так, очаговое повреждение миелиновых оболочек и осевых цилиндров было отмечено при высоко- и низкоинтенсивном световом воздействии, при нейтронном облучении [Логвинов С В и соавт, 1994, Потапов А В , 2006] Имеются данные, что при эмбриональном развитии сетчатки выживают те ганглионарные нейроны, растущие аксоны которых контактируют с латеральным колечатым телом, где, вероятно, терминальные участки их аксонов и подвергаются стимуляции нейротрофическим фактором мозга Те клетки, которые не получили стимуляции вышеназванным фактором, подвергаются апоптозу Так, в эксперименте нейротрофический фактор мозга оказался наиболее действенным при защите ганглионарных нейронов сетчатки от смерти после перерезки их аксонов [Quigley Н, Nickells R, Kerrigan L, 1995]

Поражение ганглионарных нейронов встречается в двух формах - это хроматолиз и повышение осмиофилии со сморщиванием (пикноморфные нейроны) Эти изменения неспецифичны и встречаются при гипоксии мозга [Пуга-ченко Н В, 2000], после воздействия на сетчатку ионизирующей радиации [Логвинов С В , 1998], микроволн [Логвинов С В и соавт 1994], света [Потапов А В , 1998]

При анализе деструкции ганглионарных нейронов отмечены следующие закономерности во-первых, при высокоинтенсивном световом воздействии гашлионарные нейроны менее подвержены деструкции, чем ассоциативные, а при низкоинтенсивном воздействии отмечается обратная динамика

Вероятно, освещение (6000 лк) инициирует очаговую гибель наружных слоев сетчатки, что опосредованно из-за нарушения синаптических связей, вызывает деструкцию ассоциативных нейронов Кроме того, в ганглионарных нейронах отмечена высокая активность белка bcl-2, препятствующего апопто-тической гибели этих клеток Это, по-видимому, способствует увеличению порога чувствительности ганглионарных нейронов к действию патологических факторов

При низкоинтенсивном освещении, вероятно, на первый план выступает нарушение трофики нейронов По мнению М J Eadie et al, [1971] крупные клетки более чувствительны к гипоксии, что обусловлено большим расстоянием от периферии до центра клетки и, следовательно, менее адекватными условиями для диффузии веществ к центру клетки Поэтому авторы полагают, что крупные нервные клетки с большим объемом цитоплазмы и высокой активностью окислительных ферментов более чувствительны к нарушению трофики, чем мелкие клетки

Вторая отличительная особенность повреждающего действия кратковременного высокоинтенсивного и длительного низкоинтенсивного светового воз-

действия заключается в том, что после воздействия низкоинтенсивного света преобладает тотальный хроматолиз, а на ранних сроках после высокоинтенсивного воздействия в большем количестве наблюдаются пикноморфные ганглио-нарные нейроны

По данным H H Боголепова [1979] хроматолитические нейроны могут переходить в осмиофильные Вероятно, высокоинтенсивное воздействие, являясь более агрессивным фактором, чем низкоинтенсивное, минуя хроматолити-ческую стадию (либо она имеет место непродолжительное время) сразу приводит к сморщиванию клетки

В зависимости от распределения и содержания хроматофильного вещества хроматолиз может быть очаговым и тотальным Очаговый хроматолиз является обратимым изменением нейронов и отражает нарушение обмена функциональных белков В дальнейшем он может нарастать, и в процесс вовлекаются структурные белки клеток, что приводит к развитию необратимой стадии - тотального хроматолиза Так, уже на 1-е сут после освещения (6000 лк) наблюдается снижение удельной площади эндоплазматического ретикулума во всех экспериментальных группах, что совпадает с увеличением количества нейронов с очаговым хроматолизом Количество нейронов с тотальным хроматолизом в эти сроки возрастает только в группе с аллоксановым диабетом до 3,65±0,4%, по сравнению с контролем (1,95±0,3%, р<0,05) В этой группе наблюдаются минимальные значения удельной площади гранулярной ЭПС и митохондрий С одной стороны, это, вероятно, связано с усилением сосудистых нарушений, так как основной мишенью при сахарном диабете является микроциркуляторное русло [Нестеров А П , 2000, Астахов Ю С, Лисочкина А Б , Шадричев Ф Е , 2003, Antonetti Ahstair D J et al, 1998, Meier M , King G 1, 2000] С другой стороны авторами Р M Martm et al [2004] обнаружен каспазозависимый апоптоз ганглионарных нейронов сетчаток крыс при стрептозотоциновом диабете Предполагаемые причины апоптоза это - повышение концентрации глутамата и гемоцистеина в стекловидном теле, болеющих диабетом крыс, а также повышение активности протеинкиназы С, оксида азота и окислительный стресс [Ambati J , et al, 1997, LiethAhstair E et al , 1998, Kowluru R A et al, 2001, Moore P et al, 2001, Kowluru R A , 2004, Martin P M et al, 2004]

В дальнейшем при низкоинтенсивном воздействии наблюдается рост содержания нейронов с очаговым и тотальным хроматолизом Обращает на себя внимание тот факт, что после освещения в течение 14 сут наблюдается снижение содержания нейронов с тотальным и очаговым хроматолизом, а содержание пикноморфных ганглионаров существенно не меняется при увеличении продолжительности воздействия Возможно, это связано с фагоцитозом погибших нейронов и восстановлением клеток с очаговым хроматолизом Снижение количества нейронов с тотальным хроматолизом и отсутствие динамики в содержании пикноморфных ганглионаров может быть связано с адаптацией нейронов к изменению трофики

При освещении (6000 лк) мы наблюдали динамику изменения содержания деструктивных нейронов также через 7 14 и 30 сут после воздействия Макси-

мальное увеличение содержания нейронов с тотальным хроматолизом наблюдается на 14-е сут после освещения в очагах поражения, а к 30-м сут происходит снижение этого показателя за счет фагоцитоза погибших клеток Большинство сохранившихся нейронов характеризуются морфологическими признаками компенсаторно-приспособительных реакций, выражающихся в гипертрофии клеток, активации ядрышка, усилением складчатости ядерной мембраны, увеличению удельной площади гранулярной ЭПС и митохондрий Вне очагов изменения ганглионарных нейронов во всех группах незначительны

Применение асковертина и каровертина приводит к значительному снижению процентного содержания нейронов с очаговым, тотальным хроматолизом, а также пикноморфных, что в некоторой степени может быть связано с увеличением активности антиапототического белка bcl-2, которая в несколько раз превышает активность проапототического гена р-53 К 30-м сут после освещения (6000 лк) при введении препаратов содержание нейронов с тотальным хроматолизом значимо не отличается от контрольных значений, а удельная площадь гранулярной ЭПС увеличивается как по сравнению с данными на 1-е сут, так и с соответствующими группами без коррекции В группах же с аллок-сановым диабетом степень патологических изменений нейронов несколько выше, но все же достоверно отличается от показателей группы без использования препаратов Меньшая чувствительность мультиполярных нейронов ганглио-нарного слоя сетчатки крыс к изучаемым нами экспериментальным воздействиям на фоне применения асковертина и каровертина, вероятно объясняется улучшением кровоснабжения внутренних слоев сетчатки А также сохранностью метаболических процессов, связанной с более высокой удельной площадью органелл и синаптических связей между клетками, образующими трехней-ронную цепь сетчатки, по сравнению с группами без использования препаратов

Большое значение в развитии структурных изменений сетчатки при одиночном высокоинтенсивном световом воздействии, а также освещении на фоне аллоксанового диабета имеет повреждение межнейрональных связей, так как степень повреждения синаптического пула, а также способность к восстановлению поврежденных и образованию новых синаптических контактов во многом определяет сохранность нейронной популяции сетчатки

Высокая повреждаемость синапсов при данных воздействиях очевидна в связи с большим содержанием в отростках нейронов мембранных образований По данным В Razdan et al [1993], мембраны пре- и постсинаптических отделов при активации в них перекисного окисления липидов повреждаются сильнее, чем мембраны других участков нейронов Воздействие света приводит также к накоплению Са2т в цитоплазме нервной клетки, вследствие чего происходит дестабилизация синаптических мембран и активация протеолитических ферментов и Са2+-зависимой протеинкиназы, блокирующих энергетические системы синапсов [Edwards D F et al, 1991, Li J et al, 1991, Razdan В et al, 1993, Kristian T et al, 1994] Первоначальная реакция синапсов на любое экстремальное воздействие неспецифична и проявляется в виде набухания отростков, де-

загрегации синаптических везикул, отека митохондрий, т е изменения контактов по светлому типу [Боголепов Н Н„ 1979, Семченко В В , Боюлепов Н Н , Степанов С С , 1995, Семченко В В , Степанов С С , Сергеева Е Д , 1995, Семченко В В , Боголепов Н Н , Степанов С С и др, 2005], что мы наблюдали, как при высоко-, так и при низкоинтенсивном световом воздействии Аналогичные изменения описаны многочисленными авторами и при других видах экспериментальных воздействий - после острой гипоксии, при действии токсических веществ, нейтронном облучении, рентгеновском и световом воздействии [Фельдман Н Г, Вендило М В , 1976, Боголепов Н Н, 1979, Антипов В В и др, 1987, Абдрахманов А А , 1987, Потапов А В , Логвинов С В , 1999, Пугаченко Н В, 2000]

При высокоинтенсивном световом воздействии и освещении на фоне ал-локсанового диабета к 30-м сут в очагах поражения степень дегенеративных изменений синапсов нарастает, в большом количестве появляются контакты, измененные по темному типу, это в первую очередь связано с состоянием нейронов, регулирующих скорость аксонального тока Выраженность нарушений транспорта молекул играет существенную роль в степени деструкции преси-наптических отделов и влияет на их способность к репарации [Боголепов Н Н , 1979] С другой стороны выраженная деструкция синапсов по сравнению с нейронами является своеобразной защитной реакцией, обеспечивающей в некоторой степени сохранность нейронов и их способность к структурно-функциональному обновлению [Боголепов Н Н, 1979]

Количественное исследование активных зон синапсов с помощью контрастирования ФВК через 7 сут после освещения (6000 лк), как в группах без использования препаратов, так и в группах с коррекцией, свидетельствует о значительном снижении общей численной плотности контактов в условной единице площади невропиля в основном за счет деструкции асимметричных положительно и отрицательно изогнутых синапсов, те зрелых активно функционирующих [Семченко В В , Боголепов Н Н , Степанов С С , 1995] Аналогичную динамику наблюдали при экспериментальной ишемии мозга [Семченко В В, Степанов С С , Сергеева Е Д , 1995, Логвинов С В , Пугаченко Н В и др , 2001] Аллоксановый диабет усиливает фотоповреждение синаптического аппарата сетчатки Данный эффект, возможно, связан с наличием общих патогенетических механизмов

Весьма существенным оказывается изменение системы субсинаптических единиц - снижение высоты, размытость контуров и неравномерность прокрашивания плотных проекций Это свидетельствует о протеолитической деструкции данных филаментозных образований и нарушает синаптическую передачу при нормальной структуре синаптических везикул [Акерт К, 1972, Степанов СС, 1986, Семченко ВВ, Боголепов НН, Степанов СС, 1995, Семченко ВВ, Степанов СС, Сергеева ЕД, 1995] К факторам, вызывающим перестройку субсинаптических единиц, относят внутриклеточную аутоинтоксикацию, активацию гидролитических ферментов, перекисное окисление липидов и метаболический ацидоз [Семченко В В , Степанов С С , 1987] Во всех группах

на 7-е еут после освещения уменьшается количество синапсов типа А с высотой плотных проекций > 60 нм и С с высотой плотных проекций <50 нм Длина активной зоны контакта является отражением его функциональной активности и может меняться, изменяя при этом и высоту плотных проекций [Сагуег1еу Я К 8 е1 а1, 1990], что свидетельствует о пластичности синаптического аппарата Функционально активными являются только асимметиричные синапсы Симметричные контакты относят к своеобразному "депо" Эти контакты под действием определенных факторов могут преобразоваться в асимметричные [Логвинов С В и др, 1994, Семченко ВВ, Боголепов НН, Степанов СС, 1995]

На 7-е сутки после высокоинтенсивного воздействия во всех группах преобладают синапсы с длиной АЗК 200-300 мкм и 300-500 мкм, что является компенсаторно-приспособительной реакцией синапсов на повреждение, что особенно ярко выражено в группах с коррекцией Реорганизация синаптической популяции возможна путем восстановления структуры и функции синапсов, их новообразованием, а также усложнением организации синаптических контактов, что было доказано на модели гипоксии головного мозга [Боголепов Н Н, 1979, Семченко В В , Степанов С С , 1997] Однако в отличие от коры головного мозга при восстановлении синаптического пула после повреждения в сетчатке не происходит усложнения межсинаптических связей В частности, отсутствуют сложные гипертрофированные и перфорированные синапсы, наличие которых говорит об усилении информативности сохранившихся контактов Это связано с возможностью одномоментного выделения нейромедиатора сразу несколькими синаптическими пузырьками [Семченко В В , Степанов С С , 1997]

Восстановление синаптического пула сетчатки при фотоповреждении происходит за счет созревания незрелых контактов и появления синапсов юве-нильного типа, являющихся своеобразным синаптическим депо, что также отмечено при ишемическом поражении коры больших полушарий и после микроволнового облучения сетчатки [Логвинов С В , 1994, Семченко В В , Боголепов Н Н , Степанов С С, 1995] К 30-м сут после освещения заметно увеличивается количество мелких новообразованных синапсов с АЗК менее 100 мкм и 100-200 мкм

После освещения при введении асковертина увеличивается численная плотность асимметричных синапсов за счет плоских неактивных контактов, что, вероятно, происходит из-за созревания симметричных синапсов, поэтому общая численная плотность синапсов меняется незначительно Наиболее выраженный протективный эффект наблюдался после курсово1 о введения каровер-тина, что стимулировало неосинаптогенез, созревание незрелых синапсов, а также гипертрофию сохранившихся контактов Эффект антиоксидантов вероятно связан во-первых, с мембраностабилизирующим действием, во-вторых, с большей сохранностью нейронов, что отмечено в сетчатках животных, получавших лечение, в-третьих, с положительным влиянием препаратов на реологию крови, так как наряду с нейронами синаптические контакты наиболее чувствительны к недостатку кислорода [Боголепов Н Н , 1972]

Изменение синаптоархитектоники сетчатки после длительного низкоинтенсивного освещения в течение 7-ми сут имеет адаптивный характер и сопровождается сохранением численной плотности контактов, а также реорганизацией с сохранением зрелых синапсов с длиной АЗК 300-500 мкм и 500-700 мкм После освещения в течение 30 сут наблюдается срыв адаптации, проявляющийся снижением численной плотности контактов Введение препаратов-антиоксидантов стабилизирует синаптоархитектонику сетчатки, препятствует снижению численной плотности синапсов и срыву адаптации Как и при высокоинтенсивном воздействии, наиболее эффективным является каровертин Он в большей степени способствует сохранению активно функционирующих искривленных синапсов

По аналогии с наружными слоями сетчатки, где ИСК и ПЭ образуют единую функциональную систему, во внутренних слоях сетчатки подобием такой системы является глионейрональный комплекс, где осуществляются двунаправленные коммуникативные связи Среди глиальных элементов в сетчатке встречаются олигодендроглиоциты - в слое нервных волокон, микроглиоциты -во внутренних слоях сетчатки, астроглиоциты - по ходу кровеносных сосудов и в области диска зрительного нерва Основным видом глии является радиальная глия, пронизывающая все слои сетчатки и образующая наружную и внутреннюю пограничные мембраны В отличие от нейронов глия обладает пролифера-тивной способностью, поэтому при патологии сетчатки возможны как регрессивные, так и прогрессивно-пролиферативные изменения радиальной глии

В патологических условиях, вызванных световым воздействием, ишеми-еи, а также при эпилепсии наблюдается повышенная стимуляция нейронов, которые выпускают большие количества глутамата и калия [Glass М , Dragunow М, 1995, Nicholson С, Sykov Е 1998, Uckermann О et al, 2004] Одной из функций радиальной глии является удаление избытка калия и глутамата из сетчатки В условиях повышенной нагрузки этот процесс нарушается, что приводит к отеку глиоцита [Uckermann О et al, 2004] Так, во всех экспериментальных группах, как при низко -, так и при высокоинтенсивном световом воздействии (в ранние сроки) наблюдался отек склеральных отростков радиальной глии Витреальные отростки задействованы в меньшей степени, так как находятся в слоях сетчатки, которые менее всего вовлечены в патологический процесс Помимо этого, глутамат активирует АМРА-каинатные рецепторы, что приводит к поступлению натрия в ассоциативные и ганглионарные нейроны и их набуханию [Uckermann О et al, 2004] Так, при высоко- и низкоинтенсивном световом воздействии, а также при освещении на фоне аллоксанового диабета наблюдались отечные "светлые" клетки во ВЯС и ганглионарном слое По данным [Sztnha L , 1986, Olson JE et al, 1990, Nagelhus E A et al, 1993] радиальные глиоциты более склонны к набуханию, чем нейроны, так как они осуществляют транспорт воды, образующийся в результате функционирования нейронов Этот транспорт происходит благодаря водным каналам, образованным аквапорином-4, встроенным в плазмолемму глиоцитов, далее вода удаляется либо через стекловидное тело, либо через интраретинальные кровеносные сосуды [Nagelhus

-26E A et al, 1998] Помимо отека в радиальных глиоцитах наблюдается деструкция органелл, что с одной стороны может быть связано с гипоксией, вследствие нарушения микроциркуляции, которая приводит к образованию свободных радикалов и усилению ПОЛ, мишенью которых являются мембраны органелл С другой стороны - прямым действием свободных радикалов, проникших во ВЯС сетчатки, будучи не нейтрализованными, в ее наружных слоях Грубые нарушения липопротеидных комплексов мембран приводят к потере клеткой воды и сморщиванию, что сопровождается конформационными изменениями белков клетки Это выражается в повышении осмиофилии цитоплазмы и кариоплазмы при продолжающемся уменьшении органелл

Так, уже на 1-е сут во всех экспериментальных группах наблюдалось увеличение содержания пикноморфных радиальных глиоцитов Максимальное их содержание отмечено на 7-е сут при освещении (6000 лк) - 29,5±0,51% в группе со световым воздействием и 28,1±0,85% при освещении на фоне гипергликемии (контроль 2,65±0,13%, р<0,05), что совпадает со временем образования очагов в наружных слоях сетчатки Очевидно, в эти сроки происходит срыв адаптации, и распространение патологического процесса во внутренние слои сетчатки На 14-е и 30-е сут после воздействия отмечается снижение количества пикноморфных глиоцитов, связанное с их утилизацией фагоцитами

Через 6 недель после введения аллоксана увеличивается содержание дегенеративно измененных радиальных глиоцитов, достигая максимальных значений на 8-ой неделе, что возможно связано с усилением сосудистых нарушений, играющих ведущую роль в патогенезе диабетической ретинопатии

Как было сказано выше, помимо деструктивных изменений наблюдается пролиферативная активность радиальной глии По данным D G Puro et al, (1989) активирует пролиферацию глии повышенный вход в клетку ионов кальция, что наблюдается при световом воздействии [Newman Е А, 2005] Пролиферативная активность проявляется в виде митотического деления, а также удлинения и гипертрофии отростков Выраженная глиальная пролиферация наблюдается на 7-е сут после высокоинтенсивного светового воздействия и выражается в прорастании склеральных огростков в наружные слои сетчатки и замещении погибших НСК в очагах поражения Данный факт можно рассматривать как адаптивную реакцию, направленную на защиту неизмененных клеток от действия свободных радикалов Доказано, что чем больше очаг поражения при действии высокоинтенсивного света, тем значительнее глиальная пролиферация [Дробатулина Д А , 2004] Сохранившиеся НСК, а также ассоциативные нейроны окружены многослойными глиальными пластинами, что, возможно, является на начальных этапах компенсаторно-приспособительной реакцией Это связано с выделением радиальными глиоцитами нейротрофических факторов, стимулирующих внутриклеточную репарацию нейронов [Harada Т et al, 2002, Zeiss С J , Johnson E A , 2004, Gauthier R et al, 2005] Косвенным признаком усиления митотической активности может служить повышение глионейро-нального индекса во всех экспериментальных группах по сравнению с контролем и с данными на первые сутки

Применение асковертина и каровертина снижает степень деструкции радиальных глиоцитов, особенно после одного светового воздействия, что, вероятно, объясняется антиоксидантыми и мембраностабилизирующими свойствами препаратов, препятствующих деструктивным изменениям органелл и сохраняющих метаболическую и пролиферативную активность радиальных глиоцитов Наибольший положительный эффект наблюдается после светового воздействия на фоне введения асковертина, причем в этой группе отмечается достаточно медленная динамика роста содержания пикноморфных глиоцитов, их максимальные значения наблюдаются лишь к 30-м сут после воздействия В этой же группе к 30-м сут наблюдается максимальное повышение по отношению к контролю показателя глионейронального индекса до 0,67±0,02% (контроль 0,37±0,007%, р<0,05) Это возможно, связано с одной стороны с фагоцитозом погибших ассоциативных нейронов, с другой - увеличением пролифера-тивной активности радиальной глии, что способствует развитию компенсаторно-приспособительных механизмов сетчатки в ответ на повреждение При низкоинтенсивном воздействии ретинопротекторный эффект отмечен после 1 и 7 сут освещения

Олигодендроглиоциты в слое нервных волокон и астроциты по ходу вит-реально расположенных кровеносных сосудов в ранние сроки после всех воздействий характеризуются изменениями реактивного характера, выражающимися отеком, деструкцией крист митохондрий и расширением цистерн эндо-плазматического ретикулума В более поздние сроки обнаруживаются глиоци-ты с дегенеративными изменениями в виде повышения осмиофилии цитоплазмы и пикноза ядра Обращает на себя внимание однотипность деструктивных изменений астроцитов и ганглионарных нейронов, находящихся в близком контакте друг с другом Вероятно, патологические изменения глиальных клеток приводят к прогрессирующему нарушению трофики нейронов, что в конечном итоге вызывает их гибель

От состояния кровотока и степени повреждения сосудов, а также других элементов гематоретинального барьера при изучаемых экспериментальных воздействиях напрямую зависят характер патологических изменений и репара-тивный потенциал структурных элементов сетчатки

Обнаружено, что наиболее восприимчив к повреждающему действию света и диабета наружный отдел ГРБ, образованный эндотелием хориокапилля-ров, мембраной Бруха и пигментным эпителием, нежели внутренний его отдел, состоящий из эндотелия с базальной мембраной интраретинальных капилляров и отростков радиальной и астроцитарной глии Так, при сахарном диабете отмечено усиление проницаемости наружного отдела гематоретинального барьера, связанное с дисфункцией эндотелия [Qaum Т et al, 2001, Cheung А К Н et al, 2005, El-Remessy А В , Al-Shabrawey М, Khalifa Y, 2006] Ведущую роль в увеличении проницаемости ГРБ отводят активации эндотелиального фактора роста VEGF [Amm R Н et al, 1997, Qaum Т et al, 2001, Cheung А К H et al, 2005] Кроме того, хориокапилляры находятся в непосредственной близости от источника свободных радикалов и продуктов ПОЛ - НСК При повышенной

световой нагрузке происходит срыв адаптации и окислительное повреждение эндотелиоцитов Так, Р Kayatz et al (1999) обнаружили транспорт продуктов пероксидации в хориокапилляры от НСК Т Wu et al (2005) после освещения зеленым светом интенсивностью 3500 1х в течение 3 ч выявили окислительное повреждение ДНК эндотелиоцитов, перицитов и пигментоэпителиоцитов

В ранний период после светового воздействия, а также освещения на фоне гипергликемии эндотелиоциты капилляров подвергаются отеку цитоплазмы, вакуолизации большинства органелл Описанные ультраструктурные изменения сосудов сетчатки неспецифичны и наблюдаются также при других видах экспериментальных воздействий микроволн, гамма - и нейтронном облучении, комбинированном воздействии высокоинтенсивного света и ионизирующего облучения [Абдрахманов А А и др., 1985, Буймова Н П , 1993, Давыдов Г А , Ушаков И Б , 1987, Логвинов С В , 1993, Логвинов С В и др, 1994, Дробатули-на Д А , 2004, Потапов А В , 2006] Дисфункция эндотелия нарушает транспорт метаболитов в ПЭ и обратный транспорт продуктов обмена Это приводит к их накоплению в цитоплазме клетки и гибели пигментоэпителиоцитов Также, повреждение эндотелия стимулирует тромбообразование [Yamashiro К , Tsujikawa А , Ishida S , 2003] Тромбоциты выделяют воспалительные цитокины, вызывая хемотаксис лейкоцитов, те в свою очередь индуцируют апоптоз эндотелиоцитов Свободные радикалы и продукты ПОЛ увеличивают ригидность мембран эритроцитов и снижают их способность к деформации, что приводит к их задержке в микроциркуляторном русле [Плотников МБ и др, 2005] Все перечисленные процессы вызывают увеличение удельной площади сосудов со стазом, сладжем форменных элементов и тромбозом сосудов, а также снижение количества открытых сосудов уже на 1-е сут после высокоинтенсивного и длительного низкоинтенсивного светового воздействия

Нарушение перфузии приводит к ишемии наружных слоев сетчатки, не имеющих собственной сосудистой сети Это, наряду с прямым повреждающим действием света, приводит к очаговому выпадению наружных слоев сетчатки на 7-е сут после высокоинтенсивного светового воздействия Экспериментальный диабет усиливает фотоповреждение сосудов хориоидеи, способствует увеличению доли сосудов с тромбозом, а также со стазом и сладжем форменных элементов и снижению открытых неизмененных сосудов Данный эффект связан с развитием диабетической микроангиопатии, характерными морфологическими признаками которой являются деструкция эндотелия и перицитов, утолщение базальной мембраны, появление аневризм, а также нарушение реологических свойств крови К механизмам, вызывающим эти нарушения, относят неферментативное гликозилирование белков, возрастание активности протеин-киназы С и альдозоредуктазы, изменении метаболизма липидов, активности ростовых факторов, развитие окислительного стресса и тканевой гипоксии [Qaum Т et al, 2001, EI-Remessi А В et al, 2003, Moore T С В et al, 2003, Cheung А КН et al, 2005, Marneros A G etal,2005]

В очагах поражения на 7-е сут после высокоинтенсивного светового воздействия, помимо НСК деструктивные изменения затрагивают ПЭ и мембрану

Бруха Встречаются участки, в которых отсутствуют все наружные слои сетчатки, и ассоциативные нейроны ВЯС оказываются вплотную приближены к мембране Бруха В области дефектов базального комплекса наблюдаются сосудистые почки, что сопровождается прорастанием новообразованных сосудов хо-риоидеи в сетчатку В участках, окружающих дефект, наблюдается усиленная пролиферация ПЭ Обнаружено, что в ПЭ синтезируются два фактора-антагониста Фактор роста ПЭ (PEDF) ингибирует ангиогенез [Dawson D W , Volpert О V , Gillis Р , 1999, King G L et al, 2002] и выделяется через апикальную часть клетки, так как обладает еще нейропротекторным действием Фактор роста эндотелиоцитов (VEGF) при нормальных условиях функционирования выделяется в небольших количествах через базальную часть ПЭ и стимулирует активность эндотелия хориоидеи [Blaauwgeers Н G et al, 1999, Becerra S Р et al, 2004].

Очевидно, в патологических условиях нарушается баланс, и VEGF начинает выделяться в больших количествах, кроме того, гипоксия индуцирует экспрессию HIF-la фактора, что инициирует неоангиогенез [Zeng Y et al, 2007] По данным DN Ausprunk et J Folkman (1977) в новообразованных сосудах практически отсутствует базальная мембрана Они очень хрупкие и легко кровоточат Мы наблюдали новообразованные сосуды, их базальная мембрана очень тонкая, но сохраняется на всем протяжении Возможно, увеличение проницаемости таких сосудов связано с отсутствием глиальных отростков, участвующих в образовании гематоретинального барьера По данным некоторых авторов при фотоповреждении источником образования новых сосудов является внутренняя сосудистая сеть сетчатки, причем они содержат фенестрированный эндотелий [Bellhorn R W et al, 1980, Korre GE et al, 1983] Однако мы отчетливо наблюдали прорастание сосудов из хориоидеи

Наибольшая сохранность ГРБ во внутренних слоях сетчатки, вероятно, связана с защитными свойствами радиальной и астроцитарной глии, которые выделяют трофические факторы, уменьшающие деструкцию эндотелия [Yamada Н et al, 2000], а также с относительной удаленностью от НСК - основного источника свободных радикалов и продуктов ПОЛ

Использование асковертина и каровертина приводит к снижению площади тромбированных и увеличению открытых сосудов хориоидеи, что связано с улучшением реологических свойств крови В первую очередь препараты, проявляя антиоксидантное действие, вероятно, улучшают показатели клеточной реологии Они восстанавливают свободные радикалы, защищая мембраны форменных элементов крови от свободнорадикального окисления, улучшают деформируемость эритроцитов

Математическое моделирование проводилось при помощи методов, реализованных в программной среде mathCAD (интерполяция, регрессия, аппрксимация) За основу брали экспериментальные данные, полученные в ходе эксперимента, проводили сплайн-интерполяцию для создания интерполяционных кривых В последующем подбирали выражение путем сопоставления определенной функции каждому участку кривой, так, чтобы, полученная сис-

тема уравнений удовлетворительно аппроксимировала экспериментальные данные Эту задачу решали при помощи метода обобщенной линейной регрессии В результате проведенной работы было показано, что содержание деструктивных НСК, пикноморфных нейронов и радиальной глии при световом воздействии на фоне аплоксанового диабета и коррекции асковертином и каровер-тином описывается следующей формулой

-1 1

2 3 10

у(Ч) = асое^ 1 + асоеГ 1 1 + асое^ I + асое^ е

у(Ч) - количество пикноморфных клеток,

асоеГ, - коэффициенты полученные при моделировании (для соответствующего пула клеток),

1 - время экспериментального воздействия

Таблица 2 Коэффициенты для пикноморфных нейронов и глии

Вид клеток Acoef 0 АсоеГ 1 АсоеГ2 АсоеГЗ

Свет 6000 лк

НСК 263,747 -33,022 -236,838 14,24

Ассоциативные 10,897 -1,376 -8,464 0,517

нейроны

Ганглионарные 14,746 -1,667 -12,264 0,509

нейроны

Радиальная глия 18,854 -2,371 -9,912 0,626

Свет (6000 лк) + каровертин

НСК 11,104 -1,655 -6,656 0,601

Ассоциативные 47,558 -6,055 -41,669 2,666

нейроны

Ганглионарные 17,244 -2,327 -14,293 1,084

нейроны

Радиальная глия -2,418 -0,285 9,244 0,338

Свет (6000 лк) + асковертин

НСК 6,082 -1,044 -2,445 0,426

Ассоциативные 10,155 -4,985 13,652 3,004

нейроны

Ганглионарные -6,447 -0,219 12,153 0,377

нейроны

Радиальная глия 21,91 -4,567 -0,662 1,861

Диабет + свет (6000 лк)

НСК 342,809 -41,554 -301,396 15,421

Ассоциативные 22,746 -5,005 -4,896 2,447

нейроны

Ганглионарные 12,495 -1,73 -8,978 0,751

нейроны

Радиальная глия -16,831 0,666 31,451 -0,562

Диабет + свет (6000 лк) + каровертин

ИСК -0,881 -1,159 9,23 0,711

Ассоциативные 39,174 -5,191 -33,31 2,386

нейроны

Ганглионарные 8,764 -1,393 -5,3 0,661

нейроны

Радиальная глия 47,84 -5,56 -34,976 1,496

Диабет + свет (6000 лк) + асковертин

НСК 9,335 -1,8 -3,147 0,815

Ассоциативные 87,727 -10,843 -70,936 4,113

нейроны

Ганглионарные 15,177 -2,174 -11,714 1,069

нейроны

Радиальная глия -8,851 0,115 14,515 0,121

Свет 200 лк

НСК -0,911 0,129 1,202 -0,087

Ассоциативные 9,122 -1,281 -7,251 0,642

нейроны

Ганглионарные -4,233 0,393 6,23 -0,094

нейроны

Радиальная глия 3,994 -1,971 6,376 1,288

Свет (200 лк) + каровертин

НСК -0,604 0,093 0,942 -0,078

Ассоциативные 6,352 -0,978 -4,584 0,525

нейроны

Ганглионарные 6,43 -1,062 -3,691 0,473

нейроны

Радиальная глия -1,966 -0,198 7,22 0,204

Свет (200 лк) + асковертин

НСК -1,366 0,112 1,741 -0,02

Ассоциативные 6,899 -1,049 -5,079 0,555

нейроны

Ганглионарные -1,255 -0,14 3,502 0,091

нейроны

Радиальная глия 5,887 -1,218 0,48 0,5

Диабет + свет (200 лк)

НСК 5,398 -0,603 -4,525 0,179

Ассоциативные 6,306 -0,986 -4,48 0,535

нейроны

Ганглионарные -6,575 0,067 10,536 0,175

нейроны

Радиальная глия -26,859 1,031 | 37,807 | 0,405

Диабет + свет (200 лк) + каровертин

НСК 5,791 -0,743 -4,847 0,306

Ассоциативные нейроны 7,227 -1,102 -5,317 0,59

Ганглионарные нейроны 8,016 -1,256 -5,556 0,626

Радиальная глия 4,266 -1,925 5,109 1,341

Диабет + свет (200 лк) + асковертин

НСК 3,178 -0,416 -2,518 0,187

Ассоциативные нейроны 5,833 -0,965 -3,942 0,55

Ганглионарные нейроны -2,646 -0,157 6,104 0,15

Радиальная глия 4,919 -1,109 0,608 0,629

Данная модель является универсальной для сетчатки и позволяет с высокой степенью вероятности оценить состояние того или иного пула клеток в конкретные моменты времени на протяжении всего эксперимента, а также прогнозировать их изменения на определенном отрезке времени

Анализ кривых показал волнообразный характер изменения содержания деструктивных клеток сетчатки при всех видах воздействия, а также в группах с коррекцией При прогнозировании изменений обращает на себя внимание закономерный рост деструкции при увеличении времени после высокоинтенсивного светового воздействия и усиление повреждения при увеличении длительности низкоинтенсивного светового воздействия В нейроналыюй популяции сетчатки при световых (200 лк, 6000 лк) воздействиях, а также освещении на фоне аллоксанового диабета наиболее поражаемыми являются ИСК, а нейроны внутренних слоев сетчатки менее чувствительны к указанным воздействиям Причем при низкоинтенсивном световом воздействии достоверные отличия от контрольной группы (р<0,05) по показателю деструкции ассоциативных нейронов появляются только при увеличении продолжительности освещения до 40-а суток Реакция радиальной глии при высокоинтенсивном световом воздействии характеризуется деструкцией, совпадающей по срокам с гибелью ассоциативных нейронов, а при длительном низкоинтенсивном световом воздействии значительно опережает дегенерацию нейронов Введение препаратов антиоксидан-тов предупреждает деструктивные изменения нейронов и глии сетчатки, о чем свидетельствуют более низкие показатели деструкции нейронов и глии по сравнению с данными групп без коррекции

На основании вышеизложенного нам представляется следующая схема патоморфогенеза сетчатки при световом воздействии на фоне аллоксанового диабета и коррекции антиоксидантами асковертином и каровертином (рис 1) Обращает на себя внимание общность механизмов повреждения сетчатки при данных экспериментальных воздействиях, что в совокупности дает усиление деструктивного эффекта при их комбинации Это, во-первых, активация сво-

боднорадикального (СРО) и ПОЛ, во-вторых, гипоксия сетчатки, связанная с патологическими изменениями микроциркуляторного русла Первой мишенью при воздействии света являются ИСК, а именно их наружные сегменты - основные акцепторы световых лучей В экстремальных ситуациях, будь то слишком яркое или продолжительное освещение, в них активируются процессы СРО и ПОЛ Продукты пероксидации вызывают повреждение мембранных и ядерных структур ИСК, а также ПЭ, осуществляющего антирадикальную защиту Срыв защиты, приводит к распространению свободных радикалов и продуктов пероксидации, как в сторону хориоидеи, вызывая гибель эндотелиоцитов, с последующим тромбообразованием, так и во внутренние слои сетчатки, повреждая мембранные структуры синапсов и радиальных глиоцитов Следствием описанных событии является нарушение межнейрональных и глионейрональ-ных связей, что вызывает деструкцию ассоциативных и ганглионарных нейронов

Аллоксановый диабет в ранние сроки приводит к поражению микроциркуляторного русла, что характеризуется деструкцией перицитов и эндотелиоцитов, утолщением базальной мембраны, а также нарушением реологических свойств крови Нарушение микроциркуляции приводит к развитию стойкой гипоксии, стимулирующей выработку свободных радикалов, повреждающих гли-альные элементы сетчатки, а также ассоциативные и ганглионарные нейроны

Таким образом, во внутренних слоях сетчатки обнаружена "точка пересечения" повреждающих эффектов света и аллоксанового диабета В наружных слоях сетчатки мишенью для обоих видов воздействия является наружный отдел ГРБ Повреждение его компонентов приводит к тромбозу сосудов с образованием ишемических зон сетчатки, что при освещении (6000 лк) приводит к очаговому выпадению наружных слоев сетчатки, так как их питание осуществляется только за счет сосудов хориоидеи Кроме того, гипоксия вызывает не-оангиогенез, следствием чего является усиление дегенерации НСК, нарушение межнейрональных связей, дегенеративные изменения радиальных глиоцитов и нейронов внутренних слоев сетчатки

Антирадикальная активность асковертина и каровертина способствует снижению указанных выше деструктивных изменений Однако более выраженный протективный эффект препаратов в отношении данных структур отмечен больше в группе с изолированным световым воздействием, что, вероятно, связано с различием в механизмах, ведущих к образованию высокоактивных радикалов при световом воздействии и аллоксановом диабете Свет непосредственно запускает механизмы фотооксидации, а гипергликемия приводит к снижению активности антиоксидантных систем, растормаживая выработку свободных радикалов [Островский М А , Федорович И Б , 1982, Можеренков В П , Калинин А П , 1991, Кондратьев Я Ю и др, 1998, Ыое11 К е1 а1, 1966, Ваппара М , 1995] Основной мишенью антиоксидантов являются легкоокисляемые субстраты - радикалы, а на антиоксидантную систему он влияния не оказывает, что несколько снижает его протективный эффект у животных с аллоксановым диабетом [Плотников МБ и др , 2005]

Рис 1 Схема патоморфогенеза сетчатки при световом воздействии, освещении на фоне аллоксанового диабета и их коррекции асковертином и каровертином

Повреждающие эффекты по данным Островский М А и др , 1994, Нестеров А П , 2000, Baynes S W , 1991, Anderson Н R et al ,1995, Thumann G et al, 1999, Linsemeier R A et al, 2000, Dagher Z et al, 2004 -----►

Ретинопротекторные эффекты препаратов по данным Плотников МБ и др , 2005 — — ► и результатам собственных исследований ► Взаимодействие клеточных элементов сетчатки по результатам собственных исследований -►

Существенным в защите сетчатки от повреждения при использовании ан-тиоксидантов, оказалась высокая сохранность ПЭ - важного звена в антиради-калыюй и антигипоксической защите сетчатки, что способствует меньшему повреждению НСК, синапсов, радиальных глиоцитов и эндотелиоцитов хориока-пилляров Это приводит к сохранению межнейрональных и глионейрональных связей и как следствие, защите ассоциативных и ганглионарных нейронов, а также препятствует структурно-функциональным нарушениям ГРБ и процессам неоангиогенеза Кроме того, препараты асковертин и каровертин оказывают положительное влияние на показатели клеточной реологии, улучшая вязкоэла-стические свойства крови, вызывая антиагрегационное и капилляропротектор-ное действие, а также ограничивают свободнорадикальные процессы и ингиби-рует альдозоредуктазу, что приводит к улучшению состояния микроциркуляции, снижению гипоксии

ВЫВОДЫ

1 Сочетанное действие света и аллоксанового диабета на сетчатку значительно отличается от эффектов, вызываемых каждым фактором в отдельности, и зависит от интенсивности освещения и продолжительности действия факторов Максимальная выраженность деструкции при аллоксановом диабете характерна для глиально-сосудистого комплекса, а при световом воздействии -для нейросенсорных клеток и пигментного эпителия сетчатки При высокоинтенсивном освещении на фоне аллоксанового диабета отмечен синергический эффект по критерию деструкции нейросенсорных клеток

2 Изменения нейрональной популяции сетчатки при высокоинтенсивном световом воздействии и освещении на фоне гипергликемии характеризуются деструкцией, закономерно убывающей в ряду нейросенсорные клетки - ассоциативные нейроны - ганглионарные нейроны Очаги деструкции нейросенсорных клеток при освещении (6000 лк) замещаются быстро пролиферирующими отростками радиальной глии При длительном низкоинтенсивном световом воздействии деструкция нейросенсорных клеток не имеет массового характера, а компенсаторно-приспособительные процессы характеризуются репарацией наружных отростков фоторецепторов

3 Изменения нейронов внутренних слоев сетчатки при световом воздействии (6000 лк) и освещении на фоне гипергликемии совпадают по срокам, локализации и динамике с дегенерацией нейросенсорных клеток Наибольшей деструкции подвержены амакринные нейроны, а наименьшей - горизонтальные При длительном низкоинтенсивном освещении изменения ассоциативных нейронов имеют обратимый характер и проявляются только на ультраструктурном уровне

4 Межнейрональные связи высокочувствительны к световому воздействию и освещению на фоне аллоксанового диабета, о чем свидетельствует их ранняя деструкция и снижение общей численной плотности преимущественно за счет асимметричных контактов Реорганизация межнейронных связей характеризу-

ется неосинаптогенезом и созреванием контактов ювенильного типа, что является отражением адаптации при сокращении нейрональной популяции

5 Деструкция радиальной глии при высокоинтенсивном освещении совпадает по срокам с гибелью ассоциативных нейронов, а при длительном низкоинтенсивном световом воздействии значительно опережает дегенерацию нейронов Усиление пролиферативной активности сохранившихся глиоцитов пропорционально росту глионейрональной деструкции и характеризуется разрастанием глиальных отростков с последующим замещением деструктивных клеточных элементов в очагах поражения, что является отражением адаптационных механизмов

6 Световое воздействие и освещение на фоне аллоксанового диабета вызывает повреждение компонентов гематоретинального барьера и гемодинамиче-ские нарушения Наиболее чувствителен к данным воздействиям наружный отдел ГРБ, где очаговая деструкция пигментного эпителия и эндотелия хориока-пилляров приводит к тромбообразованию и прорыву гемагоретинального барьера, что индуцирует сосудистое новообразование Неоангиогенез с одной стороны является адаптивной реакцией, направленной на восстановление кровоснабжения сетчатки, а с другой стороны ставит нейроны сетчатки в необычные условия функционирования и инициирует вторичные дегенеративные изменения

7 Препараты асковертин и каровертин оказывают ретинопротекторное действие, более выраженное при высокоинтенсивном световом воздействии и реализующееся через защиту высокомембранных структур от окисления и улучшение микроциркуляции По влиянию на синаптический аппарат сетчатки наибольшей эффективностью обладает каровертин

8 Предложенная математическая модель является универсальной для изучения повреждения и репарации сетчатки при световом и сочетанном с диабетом освещении в любой момент времени на протяжении эксперимента, а также дает возможность прогнозировать эти изменения по временному показателю

список работ, опубликованных по теме диссертации

1 Закономерности и тканевые механизмы пострадиационных изменений зрительного анализатора при многофакторных воздействиях / С В Логвинов, И С Малиновская, А В Потапов, Е Ю Варакута и др // Актуальные вопросы экспериментальной и клинической морфологии Материалы конференции, посвященной 150-летию со дня рождения А С Догеля / Сибирский гос мед ун-т - Томск, 2002 - Вып 2 - С 46-47

2 Изменение структур глаза при световом воздействии / А В Потапов, Е Ю Варакута, Д А Дробатулина и др //Морфология -2002 -№2-3 - С 128

3 Строение сетчатки и циркадианных пейсмекеров мозга при световых и комбинированных воздействиях / С В Логвинов, А В Потапов, А В Герасимов, Е Ю Варакута, Д А Дробатулина // Морфология - 2002 - № 2-3 - С 94

4 Динамика структурных изменений сетчатки при длительном воздействии яркого света/С В Логвинов, А В Потапов, Е Ю Варакута, Д А Дробату-лина//Бюл эксп биологии и медицины -2003 -№10 - С 463-466

5 Морфологические изменения нейросенсорных клеток сетчатки при низкоинтенсивном световом воздействии /ЕЮ Варакута, Е П Михуля, А А Жданкина и др //Актуальные проблемы биологии, медицины и экологии / Сибирскийгос мед ун-т - Томск,2004 - Т 3 - №4 - С 6

6 Поражения сетчатки глаза при низкоинтенсивном световом воздействии / Е Ю Варакута, Е П Михуля, А В Потапов и др // Морфология - 2004 - № 4 - С 27

7 Структурные изменения сетчатки при комбинированном воздействии ионизирующей радиации и яркого света / С В Логвинов, А В Потапов, Е Ю Варакута и др // Морфология - 2004 - № 4 - С 69

8 Эффекты комбинированного воздействия ионизирующей радиации и света на сетчатку глаза / С В Логвинов, А В Потапов, Е Ю Варакута и др // Радиационная биология, радиоэкология -2004 -Т 44 - №6 - С 661-667

9 Влияние асковертина на морфологические изменения сетчатки крыс при воздействии высокоинтенсивного света / С В Логвинов, M Б Плотников, Е Ю Варакута и др //Бюл эксп биологии и медицины - 2005 - № 11 - С 591-594

10 Изменения сетчатки и зрительного нерва при комбинированном воздействии ионизирующей радиации и высокоинтенсивного света /ЕЮ Аникина, А В Потапов, Е Ю Варакута и др //Вятский медицинский вестник Кировской медицинской академии - Киров, 2005 - С 56

11 Логвинов, С. В Поражение клеток нейральной сетчатки и ретинального пигментного эпителия глаз крыс при воздействии высокоинтенсивного света на фоне аллоксанового диабета / С В Логвинов, Е Ю Варакута, А В Потапов // Радиационная биология, радиоэкология - 2005 - № 6 - С 732-736

12 Структурные изменения сетчатки и стекловидного тела при моделировании пролиферативной витреоретинопатии на фоне аллоксанового диабета / С В Логвинов, О И Кривошеина, И В Запускалов, Е Ю Варакута, А В Потапов //Морфология -2005 -Т 127 -№3 - С 34-37

13 Структурные изменения пигментного эпителия и нейросенсорных клеток сетчатки глаза при воздействии высоко - и низкоинтенсивного света / С В Логвинов, Е Ю Варакута, А А, Жданкина и др // Материалы V съезда по радиационным исследованиям / Москва, 2006 -Т. 3 - С 115

14 Влияние асковертина на структурные изменения ганглионарных нейронов сетчатки глаз крыс при фотоповреждении на фоне аллоксанового диабета / Е Ю Варакута, А А Жданкина А В Потапов и др // Морфология - 2006 -Т 129 -№4 - С 29-30

15 Влияние каровертина на морфофункциональное состояние пигментного эпителия при воздействии яркого света на фоне аллоксанового диабета /ЕЮ Варакута, С В Логвинов, M Б Плотников и др // Морфология - 2006 - Т 130 -№5 -С 31-32

16 Влияние асковертина на изменения синаптоархитектоники сетчатки крыс с аллоксановым диабетом при высокоинтенсивном световом воздействии / С В Логвинов, М Б Плотников, Е Ю Варакута и др // Морфология - 2006 -Т 130 - № 5 - С 59

17 Изменения синапсов сетчатки при комбинированном воздействии ионизирующей радиации и постоянного низкоинтенсивного света / А В Потапов, С В Логвинов, Е Ю Варакута и др //Морфология -2006.-Т 130 - №5 -С 72

18 Изменения сетчатки и зрительного нерва при комбинированном воздействии ионизирующей радиации и света / С В Логвинов, А В Потапов, Е Ю Варакута и др //Морфология -2006 -Т 129 - №4 -С. 76

19 Морфологические изменения клеточных элементов сетчатки глаза при длительном низкоинтенсивном световом воздействии / С В Логвинов, Е Ю Варакута, А В Потапов и др // Бюл сибирской медицины - 2006 - № 3 - С 31-36.

20 Морфологические изменения пигментного эпителия и нейросенсорных клеток сетчатки крыс с аллоксановым диабетом при ярком освещении и их коррекция каровертином / С В Логвинов, М Б Плотников, Е Ю Варакута и др // Структурно-функциональные и нейрохимические закономерности асимметрии и пластичности мозга Материалы Всероссийской конференции с международным участием / ИЗПЦ «Информкнига» - Москва, 2006 - С 165-168

21 Реакция радиальных глиоцитов крыс при фотоповреждении на фоне коррекции асковертином как показатель репарационных механизмов сетчатки / С В Логвинов, А А Жданкина, Е Ю Варакута и др // Актуальные проблемы учения о тканях / Санкт-Петербург, 2006 - С 58-59

22 Реакция гематоретинального барьера на длительное фотоповреждение / С В Логвинов, А В Потапов, Е Ю Варакута и др // Структурно-функциональные и нейрохимические закономерности асимметрии и пластичности мозга Материалы Всероссийской конференции с международным участием / ИЗПЦ «Информкнига» - Москва, 2006 - С 252-255

23 Реакция гематоретинального барьера на комбинированное воздействие ионизирующей радиации и яркого света / А В Потапов, Е Ю Варакута, С В Логвинов и др // Бюл сибирской медицины - 2007 - № 2 - С 42-46 (принята в печать 22 11 2006)

24 Ретинопротекторные эффекты асковертина при световом воздействии в условиях гипергликемии / С В Логвинов, М Б Плотников, Е Ю Варакута и др // Бюл сибирской медицины - 2007 - № 1 - С 39-44 (принята в печать 20 11 2006)

25 Морфологические изменения ассоциативных нейронов сетчатки при фотоповреждении на фоне аллоксанового диабета и их коррекция асковертином / Е Ю Варакута, А А Жданкина, А В Потапов и др // Материалы VII Международной научно-практической конференции "Здоровье и образование в XXI веке" - Москва, 2007 - С 99

26 Влияние каровертииа на реакцию пигментного эпителия и радиальной глии сетчатки при воздействии яркого света / С В Логвинов, М Б Плотников, Е Ю Варакута и др // Бюл эксп биологии и медицины - 2007 - Т 144 - № 7 - С 112-114

27 Структурные изменения компонентов гематоретинального барьера сетчатки крыс при фотоповреждении на фоне аллоксанового диабета и их коррекция асковертином / С В Логвинов, М Б Плотноков, Е Ю Варакута, А А Жданкина // Бюл эксп биологии и медицины -2007 -№12 - С 703-706

28 Ультраструктурные изменения синапсов сетчатки крыс с аллоксановым диабетом при длительном низкоинтенсивном освещении, коррекция кароверти-ном / С В Логвинов, Е Ю Варакута, А А Жданкина и др // Структурно-функциональные, нейрохимические и иммунохимические закономерности асимметрии и пластичности мозга Материалы Всероссийской конференции с международным участием / Изд-во ИКАР -Москва, 2007 - С 364-368

29 Изменения синаптоархитектоники сетчатки при фотоповреждении и их коррекция антиоксидантами растительного происхождения / С В Логвинов, Е Ю Варакута, А А Жданкина, А В Потапов//Морфология - 2008 - Т 133-№ 1 - С 48-50

30 Варакута, Е Ю Структурные изменения радиальной глии сетчатки при фотоповреждении, коррекция биофлавоноидами /ЕЮ Варакута // Университетская наука теория, практика, инновации Материалы 73-й итоговой научной сессии сотрудников КГМУ / Изд-во КГМУ - Курск, 2008 - Т 2 - С 318-321

список используемых сокращений

АЗК - активная зона контакта ВЯС - внутренний ядерный слой ЭПС - эндоплазматическая сеть лк - люкс

ИСК - нейросенсорная клетка НЯС - наружный ядерный слой ПОЛ - перекисное окисление липидов ПЭ - пигментный эпителий сут - сутки

ФВК - фосфорно-вольфрамовая кислота

Тираж 130 Заказ 661 Томский государственный университет систем управления и радиоэлектроники 634050, г Томск, пр Ленина, 40

Содержание диссертации, доктора медицинских наук, Варакута, Елена Юрьевна

ОГЛАВЛЕНИЕ

СПИСОК ИСЩШЬЗУЕМЫХ СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. КЛИНИКО-ЭПИДЕМИОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ 14 ФОТОПОВРЕЖДЕНИЯ СЕТЧАТКИ

1.2. МОРФОЛОГИЯ СЕТЧАТКИ ГЛАЗ ПРИ

ФОТОПОВРЕЖДЕНИИ

1.3. МЕХАНИЗМЫ ФОТОПОВРЕЖДЕНИЯ СЕТЧАТКИ

1.4. ЭПИДЕМИОЛОГИЯ ДИАБЕТИЧЕСКОЙ РЕТИНОПАТИИ

1.5. МЕХАНИЗМ ДИАБЕТОГЕННОГО ДЕЙСТВИЯ АЛЛОКСАНА 36 1.6 ОСОБЕННОСТИ МОРФОЛОГИЧЕСКИХ ИЗМЕНЕНИЙ

СЕТЧАТКИ ГЛАЗА ПРИ ДИАБЕТИЧЕСКОЙ РЕТИНОПАТИИ С ТОЧКИ ЗРЕНИЯ МЕХАНИЗМОВ ЕЕ РАЗВИТИЯ

1.7. СОВРЕМЕННЫЕ НАПРАВЛЕНИЯ ФАРМАКОЛОГИЧЕСКОЙ 50 КОРРЕКЦИИ ДИАБЕТИЧЕСКОЙ РЕТИНОПАТИИ

1.8. ФАРМАКОЛОГИЧЕСКОЕ ДЕЙСТВИЕ 58 ДИГИДРОКВЕРЦЕТИНА

1.9. РЕЗЮМЕ

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

СТРУКТУРНЫЕ ИЗМЕНЕНИЯ СЕТЧАТКИ ГЛАЗ ПРИ (1) ВЫСОКОИНТЕНСИВНОМ (6000 Ж) И (2) ДЛИТЕЛЬНОМ НИЗКОИНТЕНСИВНОМ (200 Ж) СВЕТОВОМ ВОЗДЕЙСТВИИ, ОСВЕЩЕНИИ НА ФОНЕ АЛЛОКСАНОВОГО ДИАБЕТА И ИХ КОРРЕКЦИИ АСКОВЕРТИНОМ И КАРОВЕРТИНОМ 3.1.1. ПИГМЕНТНЫЙ ЭПИТЕЛИЙ В ЭКСПЕРИМЕНТАХ С

ОСВЕЩЕНИЕМ ИНТЕНСИВНОСТЬЮ 6000 Ж

3.1.2. ПИГМЕНТНЫЙ ЭПИТЕЛИЙ В ЭКСПЕРИМЕНТАХ С

ОСВЕЩЕНИЕМ ИНТЕНСИВНОСТЬЮ 200 Ж

3.2.1. ДЕГЕНЕРАЦИЯ И РЕПАРАЦИЯ НЕЙРОСЕНСОРНЫХ 94 КЛЕТОК В ЭКСПЕРИМЕНТЕ С ОСВЕЩЕНИЕМ 6ООО ЛК

3.2.2. ФОТОДЕГЕНЕРАЦИЯ НЕЙРОСЕНСОРНЫХ КЛЕТОК В 120 ЭКСПЕРИМЕНТАХ С ДЛИТЕЛЬНЫМ ОСВЕЩЕНИЕМ 200 Ж

3.3.1. МОРФОЛОГИЯ АССОЦИАТИВНЫХ НЕЙРОНОВ В

ЭКСПЕРИМЕНТАХ С ОСВЕЩЕНИЕМ 6000 Ж

3.3.2 МОРФОЛОГИЯ АССОЦИАТИВНЫХ НЕЙРОНОВ В

ЭКСПЕРИМЕНТАХ С ДЛИТЕЛЬНЫМ ОСВЕЩЕНИЕМ 200 Ж

3.4.1. МОРФОЛОГИЯ ГАНГЛИОНАРНЫХ НЕЙРОНОВ В

ЭКСПЕРИМЕНТАХ С ОСВЕЩЕНИЕМ 6000 Ж

3.4.2 МОРФОЛОГИЯ ГАНГЛИОНАРНЫХ НЕЙРОНОВ В

ЭКСПЕРИМЕНТАХ С ДЛИТЕЛЬНЫМ ОСВЕЩЕНИЕМ 200 Ж

3.5.1 УЛЬТРАСТРУКТУРА МЕЖНЕЙРОННЫХ СИНАПСОВ В 201 ЭКСПЕРИМЕНТАХ С ОСВЕЩЕНИЕМ 6000 Ж

3.5.2 УЛЬТРАСТРУКТУРА МЕЖНЕЙРОННЫХ СИНАПСОВ В 214 ЭКСПЕРИМЕНТАХ С ДЛИТЕЛЬНЫМ ОСВЕЩЕНИЕМ 200 Ж

3.6.1 ГЛИАЛЬНЫЕ РЕАКЦИИ В ЭКСПЕРИМЕНТАХ С 224 ОСВЕЩЕНИЕМ 6000 Ж

3.6.2 ГЛИАЛЬНЫЕ РЕАКЦИИ В ЭКСПЕРИМЕНТАХ С 240 ДЛИТЕЛЬНЫМ ОСВЕЩЕНИЕМ 200 Ж

3.7.1 СОСУДЫ И ГЕМАТОРЕТИНАЛЬНЫЙ БАРЬЕР В 251 ЭКСПЕРИМЕНТАХ С ОСВЕЩЕНИЕМ 6000 Ж

3.7.2 СОСУДЫ И ГЕМАТОРЕТИНАЛЬНЫЙ БАРЬЕР В 265 ЭКСПЕРИМЕНТАХ С ДЛИТЕЛЬНЫМ ОСВЕЩЕНИЕМ 200 Ж

ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ

ВЫВОДЫ

Введение Диссертация по биологии, на тему "Закономерности дегенерации и адаптации сетчатки глаз при экспериментальных ретинопатиях, коррекция биофлавоноидами"

АКТУАЛЬНОСТЬ.

Проблема комбинированного действия факторов среды на организм человека является одной из ключевых в биологии, медицине и экологии. Организм всегда находится под прессом действия комплекса факторов и зачастую трудно оценить приоритетность того или иного фактора в возникновении патологии [163 а]. Однако в настоящее время практически отсутствуют адекватные модели взаимодействия факторов, которые помимо теоретического, имели бы практическое значение для человека, что и послужило поводом для создания модели комбинированного влияния света и экспериментального сахарного диабета на сетчатку глаз.

Поражение органа зрения при сахарном диабете является актуальной проблемой в связи с ростом частоты диабетической ретинопатии, которая в настоящее время стала ведущей причиной необратимой слепоты [13, 34, 443]. Морфофункциональные изменения при стойкой гипергликемии касаются практически всех звеньев зрительного анализатора, однако, поражение сетчатки является основной причиной потери зрения [57, 110, 115].' Начальные проявления диабетической ретинопатии возникают уже на ранних стадиях сахарного диабета, что подтверждается электронно-микроскопическими исследованиями базальной мембраны капилляров сетчатки [191, 207, 283].'' Экспериментально показано, что изменения касаются в большей степени сосудов микроциркуляторного русла сетчатки и характеризуются нарушениями гемодинамики, а также повреждением сосудистой оболочки глаз [183, 443, 588]. Также в некоторой степени страдают радиальные глиоциты, ассоциативные и ганглионарные нейроны сетчатки [217, 268, 283].

В литературе накоплено большое количество сообщений о повреждающем действии света на сетчатку глаза человека и животных, что свидетельствует о возросшем интересе к так называемым фотодегенерациям сетчатки. Изучение условий, в которых видимый свет способен вызывать сложные дегенеративные изменения в глазу человека и животных является важным в связи с тем, что в клинике и на производстве нередки ситуации с потенциальной возможностью возникновения и развития фотодегенерации [200, 422, 493]. Имеются данные о появлении дегенеративных изменений на глазном дне у пациентов, слишком часто подвергавшихся офтальмоскопированию, нарушении сетчатки после глазных операций, при которых использовалась волоконная оптика, обеспечивающая интенсивное освещение операционного поля [267, 371, 421, 428, 493]. В эксперименте на

•Я белых крысах воздействие света высокой интенсивности вызывает деструктивные изменения всех элементов сетчатки глаза пигментоэпителиоцитов и нейросенсорных клеток, приводит к дегенерации части ассоциативных нейронов внутреннего ядерного слоя и мультиполярных нейронов ганглионарного слоя, изменению синаптоархитектоники сетчатки. Наблюдаются гемодинамические расстройства, ультраструктурные нарушения эндотелиоцитов, базальной мембраны капилляров, что приводит к нарушению целостности гематоретинального барьера [47, 128]. Наиболее выраженные изменения наблюдаются при световом воздействии на измененную сетчатку. Поэтому вызывает интерес изучение повреждающего действия света на глаза с изначальными нарушениями, такими как при диабетической ретинопатии.

Однако сообщения о влиянии света на глаза при диабете единичны [359]. Слабо изучены изменения гематоретинального барьера и наружного ядерного слоя сетчатки при световом воздействии на фоне сахарного диабета. В доступной литературе отсутствуют данные о реакции нейронов и глии внутреннего ядерного и ганглионарного слоев, а также синаптического аппарата сетчатки на вышеперечисленные воздействия.

Общим в патогенезе диабетической ретинопатии и фотодегенерации сетчатки является нарушение микроциркуляции, а также индукция свободнорадикальных окислительных процессов [123, 210, 361, 595].

С точки зрения коррекции возможных нарушений сетчатки при указанных воздействиях вызывают интерес флавоноиды растительного происхождения. Это^ связано в первую очередь с выраженными антиоксидантными свойствами биофлавоноидов [70, 78, 161, 168]. В Томском НИИ фармакологии СО РАМН предложены препараты: асковертин - смесь диквертина с аскорбиновой кислотой (патент РФ № 2150282, приоритет от 06.11.1998 г.) и каровертин - смесь диквертина, аскорбиновой кислоты и бета-каротина. Диквертин (дигидрокверцетин, таксифолин, 3,3,3,4,5,7-пентагидроксифлавон) относится к флавоноидам растительного происхождения [27, 126]. В литературе имеются сведения о выраженных церебропротекторных свойствах асковертина. Он обладает антиоксидантным и атигипоксическим действием, влияет на люнус сосудов, нормализует мозговую гемодинамику, улучшает реологические свойства крови [126]. Имеются сведения, что флавоноиды диквертин и танакан повышают активность ферментов антиоксидантной защиты - супероксиддисмутазы и каталазы, тем самым, способствуя замедлению прогрессирования пролиферативной диабетической ретинопатии и улучшению электрофизиологических показателей сетчатки [130]. Известно также, что витамин С способен усиливать антиоксидантные свойства флавоноидов, в частности, диквертина [17, 126, 429]. Указанные свойства препаратов дают основание предполагать о возможности их использования для патогенетической коррекции фотоповреждения сетчатки на фоне аллоксанового диабета. Вместе с тем в доступной литературе отсутствуют сведения о модифицирующем влиянии данных биофлавоноидов на структурные изменения сетчатки глаза при экспериментальных ретинопатиях.

ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ.

Изучить' закономерности дегенерации и адаптации клеточно-тканевых элементов сетчатки глаз при экспериментальных ретинопатиях, индуцированных воздействием света различной интенсивности и продолжительности, а также в комбинации с аллоксановым диабетом. Установить характер влияния асковертина и каровертина на морфофункциональное состояние компонентов сетчатки белых крыс при указанных воздействиях, а также сравнить возможные ретинопротекторные свойства данных препаратов.

ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ.

1. Создать модели ретинопатий посредством светового воздействия различной гинтенсивности и продолжительности, а также освещения в комбинации с аллоксановым диабетом на сетчатку глаз. Изучить вклад каждого фактора и их взаимодействие с целью выявления общих закономерностей повреждения и репарации тканевых компонентов сетчатки глаз.

2. Установить характер и динамику изменений нейрональной популяции и глиальных элементов сетчатки, а также глионейрональные взаимоотношения при фотоповреждении на фоне аллоксанового диабета с использованием методов математического моделирования.

3. Изучить в динамике ультраструктурные изменения синаптоархитектоники сетчатки при воздействии указанных факторов.

4. Исследовать сосудистые реакции сетчатки и ультраструктуру гематоретинального барьера при фотоповреждении на фоне аллоксанового диабета.

5. Определить последовательность и взаимосвязь клеточных реакций для выяснения их роли в тканевых механизмах дегенерации и адаптации при воздействии высоко- и низкоинтенсивного света на фоне аллоксанового диабета.

6. Выявить модифицирующее влияние биофлавоноидов: асковертина и каровертина на сетчатку при воздействии указанных факторов и сравнить ретинопротекторные эффекты препаратов.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА.

С помощью гистологических, электронномикроскопических и морфометрических методов впервые обнаружено, что при световом воздействии и освещении на фоне гипергликемии выраженность деструкции сетчатки в большей степени зависит от интенсивности освещения, а не от его продолжительности. При высокоинтенсивном световом воздействии и освещении на фоне гипергликемии в динамике на 7-е сут появляются очаговые изменения сетчатки. Выявлено, что наиболее поражаемыми структурами при указанных воздействиях являются нейросенсорнын клетки (НСК) и пигментный эпителий (ПЭ). Изменения нейрональной популяции сетчатки при высокоинтенсивном световом воздействии и освещении на фоне гипергликемии характеризуются деструкцией закономерно убывающей в следующей последовательности: нейросенсорные клетки - ассоциативные нейроны - ганглионарные нейроны. Относительная сохранность ганглионарных нейронов, возможно, связана с высокой активностью в них белка bcl-2, в несколько раз превышающая активность гена р-53, что было выявлено при иммуногистохимическом исследовании сетчаток. В популяции ассоциативных нейронов наиболее подвержены деструкции амакринные нейроны, минимальной чувствительностью к повреждающим факторам обладают горизонтальные нейроны. По результатам исследования удельной площади органелл в биполярных и ганглионарных нейронах показана наибольшая чувствительность гранулярной эндоплазматической сети (ЭПС) и митохондрий, что лежит в основе хроматолитических изменений различной выраженности. Межнейрональные связи также высокочувствительны к световому воздействию. Обнаружено, что наибольшей деструкции подвержены синапсы наружного сетчатого слоя, а в очагах деструкции нейросенсорных клеток (при освещении 6000 лк) этот слой полностью отсутствует, и тела ассоциативных нейронов сме1цаются к наружной глиальной пограничной мембране. Во внутреннем сетчатом слое отмечается снижение общей численной плотности синапсов преимущественно за счет асимметричных контактов. Изменения синаптического пула сетчатки после длительного низкоинтенсивного светового воздействия на фоне гипергликемии и без нее имеет адаптивный характер, выражающийся сохранением общей численной плотности синапсов после 7 сут. светового воздействия. Однако имеет место и деструктивный эффект, характеризующийся снижением количества активно функционирующих у искривленных контактов, и сохранность более статичных плоских синапсов. После освещения в течение 30 сут. наблюдается срыв адаптации, характеризующийся снижением численной плотности синапсов по сравнению с данными после 7 суЪ. светового воздействия. В механизмах репарации синаптического пула сетчатки после указанных воздействий ведущую роль играют процессы неосинаптогенеза и созревание контактов ювенильного типа. Реакция глиальных элементов сетчатки на воздействие повреждающих факторов неодназначна и характеризуется как регрессивными, так и прогрессивно-пролиферативными изменениями. Установлена роль радиальных глиоцитов в изоляции деструктивных элементов от неизмененной ткани посредством образования многослойных глиальных пластин. Пустоты, появившиеся вследствие гибели нейронов, также заполнены пролиферирующими глиальными отростками. ■ Выраженность изменений компонентов гематоретинального барьера неодинакова и убывает в ряду: пигментоэпителиоциты - хориокапилляры - базальный комплекс.

Установлено, что курсовое введение биофлавоноидов асковертина и каровертина приводит к уменьшению очагов поражения, что связано с ростом удельной площади открытых сосудов, увеличением функциональной активности пигментного эпителия, большей сохранностью нейросенсорных клеток в обеих экспериментальных группах благодаря выраженным антиоксидантным и гемореологическим свойствам перпаратов. Выявлено, что

•V „ данные антиоксиданты улучшают глионеиральные и межнеирональные взаимодействия, способствуя снижению деструкции и увеличению регенераторного потенциала радиальной глии, повышая устойчивость нейронов внутренних слоев сетчатки и их синаптические контакты к повреждению. Показано, что наибольший ретинопротекторный эффект отмечен при однократном высокоинтенсивном воздействии, нежели при длительном непрерывном низкоинтенсивном освещении.

Впервые разрабфтана математическая модель, позволяющая оценить изменения клеточных элементов сетчатки при воздействии высоко- и низкоинтенсивного света в комбинации с аллоксановым диабетом в любой момент времени на протяжении эксперимента, а также прогнозировать эти изменения по временному критерию.

ОСНОВНЫЕ ПОЛОЖЕНИЯ, ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ.

1. Наиболее выраженную дегенерацию сетчатки вызывает кратковременное высокоинтенсивное световое воздействие на фоне экспериментального сахарного диабета. Данный эффект характеризуется очаговой гибелью НСК и ПЭ. В поздние сроки отмечаются процессы адаптации, характеризующиеся репарацией наружных отростков сохранившихся НСК и фагоцитозом деструктивно измененных фоторецепторов. Препараты асковертин и каровертин увеличивают сохранность НСК, приводя к снижению площади очагов поражения.

2. Нейроны внутренних слоев сетчатки менее чувствительны к указанным воздействиям по сравнению с НСК. При высокоинтенсивном освещении наиболее поражаемы амакринные нейроны, а наименее - горизонтальные. При длительном низкоинтенсивном световом воздействии изменения ассоциативных нейронов имеют обратимый характер и проявляются только на ультраструктурном уровне. Введение препаратов защищает мембранные структуры нейронов и улучшает межнейрональные взаимодействия.

3. Деструкция радиальной глии вносит значительный вклад в дегенерацию нейронной популяции сетчатки, а ее пролиферативная активность приводит к изоляции очагов деструкции от неизмененных тканей, что является отражением адаптации. Введение препаратов снижает деструкцию радиальной глии, препятствуя развитию вторичных альтеративных изменений.

4. Повреждение сосудов сетчатки и хориоидеи при воздействии указанных факторов, наряду с очаговой деструкцией ПЭ приводит к прорыву гематоретинального барьера, а при освещении (6000 лк) развитию Гнеоваскулогенеза. Введение препаратов предупреждает деструкцию компонентов сосудистой стенки, улучшает состояние гемореологии и вносит вклад в уменьшение площади очагов поражения. г

ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ РАБОТЫ.

Получены новые знания о закономерности морфофункциональных изменений структурных компонентов сетчатки при световом воздействии, освещении на фоне аллоксанового диабета и коррекции биофлавоноидами асковертин и каровертин. Данные об усилении альтерации при воздействии света на фоне диабета могут быть использованы для разработки гигиенических стандартов при проведении офтальмологического обследования больных с диабетической ретинопатией. Представленные в диссертации данные о протективном эффекте препаратов на сетчатку глаза при воздействии света на фоне аллоксанового диабета могут быть использованы для разработки новых подходов профилактики и патогенетического лечения одного из осложнений сахарного диабета - ретинопатии.

Материалы работы используются в учебном процессе при чтении лекций на кафедрах гистологии, эмбриологии и цитологии; морфологии с курсом общей патологии Сибирского государственного медицинского университета по разделу "Органы чувств".

АПРОБАЦИЯ.

Материалы диссертации доложены на VII Международном конгрессе ассоциации морфологор (Казань, 2004); на научном совещании гистологов на тему "Актуальные проблемы учения о тканях" (Санкт-Петербург, 2006); V съезде по радиационным исследованиям (радиобиология, радиоэкология, радиационная безопасность) (Москва, 2006); VIII Международном конгрессе ассоциации морфологов (Орел, 2006); на конференции посвященной 100-летию со дня рождения проф. И.С. Кудрина (Тверь, 2006); на Всероссийской конференции 'с международным участием "Структурно-функциональные и нейрохимические закономерности асимметрии и пластичности мозга (Москва, 2006; 2007); VII международной научно-практической конференции "Здоровье и образование в XXI веке" (Москва, 2007).

ПУБЛИКАЦИИ.

По теме диссертации опубликовано 30 работ, из них 11 статей в журналах, рекомендованных ВАК РФ для опубликования основных результатов диссертации на соискание ученой степени доктора наук. у

ОБЪЕМ И СТРУКТУРА ДИССЕРТАЦИИ.

Диссертация состоит из введения, обзора литературы, результатов собственных исследований, обсуждения и выводов. Работа изложена на 385 страницах, иллюстрирована 8 таблицами, 175 рисунками. Библиографический указатель включает 604 источников из них 177 на русском и 427 на иностранном языках.

Заключение Диссертация по теме "Гистология, цитология, клеточная биология", Варакута, Елена Юрьевна

выводы

1. Сочетанное действие света и аллоксанового диабета на сетчатку значительно отличается от эффектов, вызываемых каждым фактором в отдельности, и зависит от интенсивности освещения и продолжительности л действия факторов. Максимальная выраженность деструкции при аллоксановом диабете характерна для глиально-сосудистого комплекса, а при световом воздействии - для нейросенсорных клеток и пигментного эпителия сетчатки. При высокоинтенсивном освещении на фоне аллоксанового диабета отмечен синергический эффект по критерию деструкции нейросенсорных клеток.

2. Изменения нейрональной популяции сетчатки при высокоинтенсивном световом воздействии и освещении на фоне гипергликемии характеризуются деструкцией закономерно убывающей в ряду НСК - ассоциативные нейроны -ганглионарные нейроны. Очаги деструкции НСК при освещении (6000 лк) V замещаются быстро пролиферирующими отростками радиальной глии. При длительном низкоинтенсивном световом воздействии деструкция НСК не имеет массового характера, а компенсаторно-приспособительные процессы характеризуются репарацией наружных отростков фоторецепторов.

3. Изменения нейронов внутренних слоев сетчатки при световом воздействии (6000 лк) и освещении на фоне гипергликемии совпадают по срокам, локализации и динамике с дегенерацией НСК. Наибольшей деструкции подвержены амакринные нейроны, а наименьшей - горизонтальные. При длительном низкоинтенсивном освещении изменения ассоциативных нейронов имеют обратимый характер и проявляются только на ультраструктурном уровне.

4. Межнейрональные связи высокочувствительны к световому воздействию и освещению на фоне аллоксанового диабета, о чем свидетельствует их ранняя деструкция и снижение общей численной плотности преимущественно за счет асимметричных контактов. Реорганизация межнейронных связей характеризуется неосинаптогенезом и созреванием контактов ювенильного типа, что является отражением адаптации при сокращении нейрональной популяции.

5. Деструкция радиальной глии при высокоинтенсивном освещении совпадает по срокам с гибелью ассоциативных нейронов, а при длительном низкоинтенсивном световом воздействии значительно опережает дегенерацию нейронов. Усиление пролиферативной активности сохранившихся глиоцитов пропорционально росту глионейрональной деструкции и характеризуется разрастанием глиальных отростков с последующим замещением деструктивных клеточных элементов в очагах поражения, что является отражением адаптационных механизмов.

6. Световое воздействие и освещение на фоне аллоксанового диабета вызывает повреждение компонентов гематоретинального барьера и гемодинамические нарушения. Наиболее чувствителен к данным воздействиям наружный отдел ГРБ, где очаговая деструкция пигментного эпителия и эндотелия хориокапилляров приводит к тромбообразованию и прорыву гематоретинального барьера, что индуцирует сосудистое новообразование. Неоангиогенез с одной стороны является адаптивной реакцией, направленной на восстановление кровоснабжения сетчатки, а с другой стороны ставит нейроны сетчатки в непривычные условия функционирования и инициирует вторичные дегенеративные изменения.

7. Препараты асковертин и каровертин оказывают ретинопротекторное действие, более выраженное при высокоинтенсивном световом воздействии и реализующееся через защиту высокомембранных структур от окисления и улучшение микроциркуляции. По влиянию на синаптический аппарат сетчатки наибольшей эффективностью обладает каровертин.

8. Предложенная математическая модель является универсальной для изучения повреждения и репарации сетчатки при световом и сочетанном с диабетом освещении в любой момент времени на протяжении эксперимента, а также дает возможность прогнозировать эти изменения по временному показателю. :.

Библиография Диссертация по биологии, доктора медицинских наук, Варакута, Елена Юрьевна, Томск

1. Абдрахманов, А.А. Влияние гамма радиации в сверх высокой дозе на кору1. V"большого мозга крысы (ультраструктурные аспекты) /А.А. Абдрахманов // Архив анатомии, гистологии и эмбриологии. 1988 — Т. 94, № 6. - С. 25-29.

2. Автандилов, Г.Г. Медицинская морфометрия / Г.Г. Автандилов М.: Медицина, 1990. - 384с.

3. Акерт, К. Ультраструктура синапсов / К. Акерт // Архив анатомии. 1972. - Т. 62, вып. 5.-С. 5-8.

4. Анестиади, В.Х. Морфогенез атеросклероза / В.Х. Анестиади, В.А. Нагорнев. -Кишенев: «Штиинца», 1982. 323 с.

5. Антиоксидантные свойства дигидрокверцетина / Ю.О. Теселкин, Б.А. Жамбалова, И.В. Бабенкова и др. // Биофизика.'- 1996. Т. 41, №. 3. - С. 620623.

6. Антиоксидантное действие дигидрокверцетина при тетрахлорметановом гепатите у крыс / Ю.О. Теселкин, И.В. Бабенкова, В.К. Колхир, А.И. Багинская и др. // Вопр. биол., медицин, и фармацевт, химии. 1999. - № 3. - С. 44-47.

7. Антиоксидан-тное действие дигидрокверцетина при общем гамма-облучении / Ю.О. Теселкин, И.В. Бабенкова, Г.И. Клебанов, А.В. Асейчев и др. // Вопросы биологической медицины и фармакологической химии. 1999. - № 2. - С. 45-48.

8. Артыгалиева, Д.М. Морфологические изменения в сетчатке глаза у экспериментальных животных при хронической свинцовой интоксикации: автореф. дис. . канд. мед. наук / Д.М. Артыгалиева. Актюбинск, 1975. - 18 с.

9. L-аргинин в слезной жидкости больных с диабетической ретинопатией и возможная роль оксида азота в патогенезе ишемии сетчатки / М.М. Архипова,

10. Астахов, Ю.С. Современные направления медикаментозного лечения непролиферативной диабетической ретинопатии / Ю.С. Астахов, А.Б. Лисочкина, Ф.Е. Шадричев // Клиническая офтальмология. 2003. - Т 4, № 3.1. C. 96-101.

11. Балаболкин, М.И. Роль окислительного стресса в патогенезе сосудистых осложнений сахарного диабета (лекция) / М.И. Балаболкин, Е.М. Клебанова // Терапевт, архив. 2000. - Т. 73, № 4. - С. 3-8.

12. Н.Бахритбинова, Ф.А. Гемореологические нарушения у больных с диабетической ретинопатией / Ф.А. Бахритбинова // Вестник офтальмологии. 1996. - Т. 112, №2.-С. 33-35.

13. Беляева, М.И. Агрегация эритроцитов у больных с диабетической ретинопатией / М.И. Беляева, В.А. Шестаков // Вестник офтальмологии. 1977. - № 6. - С. 57-60.

14. Беляева, М.И. Роль агрегации эритроцитов в патогенезе микроциркуляторных изменений сетчатой оболочки у больных сахарным диабетом / М.И. Беляева // Вестник офтальмологии. 1988. - Т. 104, № 1. - С. 66-71.

15. Бобырева, JI.E. Антиоксиданты в комплексной терапии диабетических ангиопатий / JI.E. Бобырева // Экспериментальная и клиническая фармакология. 1998. - Т61, №1. - С. 74-80.

16. Боголепов, Н.Н. Патоморфологические изменения межнейрональных контактов при экспериментальной гипоксии / Н.Н. Боголепов // Журнал невропатологии и психиатрии им. С.С. Корсакова. 1972. - Т. 72, № 11. — С. 1653-1655.

17. Боголепов, Н.Н. Ультраструктура мозга при гипоксии / Н.Н. Боголепов. М. : Медицина, 1979. - 168 с.

18. Боровягин, B.JL Субмикроскопическая организация и функциональные особенности мюллеровских клеток сетчатки / B.JI. Боровягин, Г.М. Франк // Биофизика. 1962. - Т. 7, № 1. - С. 42-50.

19. Бородай, А.В. Танакан в лечении диабетических микроангиопатий / А.В. Бородай, Г.Ш. Сабурова, A.M. Ишунина // VII съезд офтальмологов России. Тез. докл., М., 2000. Ч. 1. - С. 304.

20. Борисова, С.А. Апоптоз: патогенетические и биорегуляторные механизмы гибели клетки в норме и при глазной патологии / С.А. Борисова, Е.М. Коломойцева // Вестник офтальмологии. — 2003. № 2. — С. 50-54.

21. Брюне, Б. Апоптическая гибель клеток и оксид азота: механизмы активации и антагонистические сигнальные пути / Б. Брюне, К. Сандау, А. Кнетен // Биохимия.- 1998. Т. 63, вып. 7.- С.966-975.

22. Буймова, Н.П. Структурные нарушения сетчатки глаза при нейтронном облучении / Н.П. Буймова // Структурно-функциональные единицы и их компоненты в органах висцеральной системы в норме и патологии: Тез. док., Харьков, 1993.-С. 36.

23. Водовозов, A.M. Исследование дна глаза в трансформированном свете / A.M. Водовозов. М., 1986. - 256 с.

24. Влияние диквертина на содержание циклических нуклеотидов в тромбоцитах / А.А. Кубатиев, З.Т. Ядигарова, И.А. Рудько, Н.А. Тюкавкина и др. // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 1999. - Т. 128, № 9. - С. 267-269.

25. Влияние экстрактов левзеи сафроловидной на реологические показатели крови / М.Б. Плотников, О.И. Алиев, JI.C. Васильев, М.Ю. Маслов и др. // Бюл. эксп. биологии и медицины. 1999. - Т. 127, № 1. - С. 123-140.

26. Влияние комплекса антиоксидантов на показатели реологии крови и липидной пероксидации у больных гипертонической болезнью / Д.М. Плотников, О.И. Алиев, М.Ю. Маслов и др. // Тромбоз, гемостаз и реология. 2001. - № 3(7) - С. 44-47.

27. Втюрин, Б.В. К вопросу о функциональной морфологии ядерной оболочки и ее пор / Б.В. Втюрин, М.М. Калашников // Архив патологии. — 1972. № 7. - С. 3137.

28. Гаджиев, Р.В. Роль стекловидного тела и состояние сетчатки в патогенезе диабетической ретинопатии: автореф. дисс. . док. мед. наук / Р.В. Гаджиев. -Баку, 1998.-26 с.

29. Гаджиев, Р.В. Влияние некоторых интраокулярных факторов и перекисного окисления липидов на течение диабетической ретинопатии: автореф. дисс. . канд. мед. наук / Р.В. Гаджиев. М., 1985. - 18 с.

30. Галенок, В.А. Гемореология при нарушениях сахарного диабета / В.А. Галенок, Е.В. Гостинская, В.Е. Диккер. Новосибирск: Наука, 1987. - 262 с.

31. Галилеева, В.В. Применение антиоксиданта мексидола у больных с диабетической ретинопатией / В.В. Галилеева, О.М. Киселева // VII съезд офтальмологов России. Тез. докл. М., 2000. Ч. 2. - С. 425-426.

32. Галстян, Г.Р Хронические осложнения сахарного диабета: этиопатогенез, клиника, лечение / Г.Р. Галстян // РМЖ. 2002. - Т. 10, № 27. - С. 7-13.

33. Глуходед, С.В. Роль гемодинамики сетчатки в патогенезе пролиферативной диабетической ретинопатии / С.В. Глухо дед, Н.Н. Пивоваров, К.К. Симонова // Вестник офтальмологии. — 1981.- №4. С. 71-73.

34. Гольдберг, Е.Д. Сахарный диабет: этиологические факторы / Е.Д. Гольдберг. -Томск: Изд-во ТГУ, 1993.- 136 с.

35. Гурина, О.Ю. Механизмы неоваскулогенеза и его регуляция во взрослом организме / О.Ю. Турина, В.В. Куприянов, А.А. Миронов // Архив анатомии. -1985.-№ 1.-С. 9-24.

36. Давыдова, Т.В. Состав и синаптическая организация внутреннего слоя сенсорной оболочки глазного яблока у черепах / Т.В. Давыдова //Архив анатомии гистологии и эмбриологии. 1984. - № 4. - С. 21-27.

37. Давыдова, Т.В. Особенности ультраструктуры мюллеровских клеток в сетчатке водных и наземных черепах / Т.В. Давыдова // Цитология. — 1985. Т. 27, № 6. -С. 647-651.

38. Давыдов, Б.И. Ранние изменения гематоэнцефалического барьера после облучения / Б.И. Давыдов, И.Б. Ушаков // Итоги науки и техники. Сер.: радиационная биология. 1987. - Т. 8. - С. 118-149.

39. Дегтяренко, Т.В. Особенности иммунологического состояния организма и сенсибилизация к антигенам глаза и инсулину у больных с пролиферативной диабетической ретинопатией / Т.В. Дегтяренко // Офтальмологический журнал. -1981.-№2.-С. 95-98.

40. Делягин, В.М. Патогенез диабетической ретинопатии/ретинита / В.М. Делягин, А.Г. Румянцева, М.Б. Мельникова //Вопросы гематологии, онкологии и иммунологии. 2003. - Т. 2, № 4. - С. 67-69.

41. Дедов, И.И. Введение в диабетологию / И.И. Дедов, В.В. Фадеев. М., 1996 -156 с.

42. Дедов, И.И. Диабетическая нефропатия / И.И. Дедов, М.В. Шестакова. М.: Универсум Паблишинг, 2000 - 240 с.

43. Диквертин новое антиоксидантное и капилляропротекторное средство / Колхир В.К., Тюкавкина Н.А., Быков В.А. и др. // Хим. фарм. журн. - 1995. - № 9.-С. 61-64.

44. Диквертин эффективный ингибитор агрегации тромбоцитов флавоноидной природы / А.А. Кубатиев, З.Т. Ядигарова, И.А. Рудько и др. // Вопр. Биологич., медицин, и фармацевтич. химии. - 1999. - № 3. - С. 47-51.

45. Динамика структурных изменений сетчатки мпри длительном воздействии яркого света /С.В. Логвинов, А.В. Потапов, Е.Ю. Варакута, Д.А. Дробатулина // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 2003. - № 10. — С. 463-466.

46. Дмитриев, А.В. Светоиндуцированная гиперполяризация глиальных мюллеровских клеток сетчатки лягушки / А.В. Дмитриев, К.А. Быков, К.Е. Гавриков // Сенсорные системы: Л., 1988. Т. 2, № 1 - С.27-30.

47. Доклиническое токсикологическое изучение диквертина / А.А. Шкаленко, А.А. Белошапка, Ю.Б. Кузнецов, М.В. Боровкова, В.В. Аниканова // Вопр. Биологич., медицин, и фармацевт, химии. 1998. - № 3. - С. 36-39.

48. Дробатулина, Д.А. Морфология сетчатки при длительном ярком освещении в комбинации с воздействием рентгеновского излучения: автореф. дис. . канд. мед. наук / Д.А. Дробатулина. Томск, 2004. - 19 с.

49. Думброва, Н.Е. Современные данные о структуре и функциях пигментного эпителия сетчатки / Н.Е. Думброва, Н.И. Нестерук // Офтальмологический журнал. 1991. - № 4. - С. 243-246.

50. Евграфов, В.Ю. Внутриглазные кровоизлияния диабетического генеза: современные представления о патогенезе ферментотерапии / В.Ю. Евграфов, Ж.Ю. Алябьева // Вестник офтальмологии. — 1995. — Т. 111, № 4. С. 35-37.

51. Евграфов, В.Ю. Диабетическая ретинопатия: патогенез, диагностика, лечение: автореф. дисс. . док. мед. наук /В.Ю. Евграфов. М., 1996. - 47 с.

52. Ефимов, А.С. Сахарный диабет / А.С. Ефимов, Я.Л. Германюк, С.Г. Генес. -Киев: «Здоровье», 1983.-224 с.

53. Ефремова, Л.Л. Применение препарата системной энзимотерапии вобэнзима в лечении гемофтальмов и иридоциклитов: автореф. дис. . канд. мед. наук / Л.Л. Ефремова. Ростов-на-Дону, 2000. - 24 с.

54. Жабоедов, Г.Д. Иммунопатологические процессы в сетчатке при развитии диабетической ретинопатии / Г.Д. Жабоедов, Р.Л. Скрипник, М.В. Сидорова // Вестник офтальмологии. 2000. - № 6. - С. 36-39.

55. Зуева, М.В. О фотодегенеративных изменениях в сетчатой оболочке глаза // М.В. Зуева, А.А. Шведова, О.И. Щербатова // Труды 5-го всесоюзного съезда офтальмологов. Ташкент, 1979. - Т. 3. - С. 121-122.

56. Зуева, М.В. Повреждающее действие видимого света на сетчатку в эксперименте (электрофизиологические и электронномикроскопические исследования) / М.В. Зуева, Т.А. Иванина // Вестник офтальмологии. 1980. -№4.-С. 48-51.

57. Измеров, Н.Ф. Физические факторы. Эколого-гигиеническая оценка и контроль : практическое руководство в 2-х томах / Н.Ф. Измеров, Г.А. Суворов, Н.А. Куралесин. М.: Медицина, 1999. - Т.1. - 325 с.

58. Изменение синапсов при у-облучении головы крыс / В.В. Антипов, В.П. Федоров, И.Б. Ушаков, Б.И. Давыдов // Радиобиология. 1987. - Т. 27, вып. 5. -С. 644-650.

59. Ильенков, С.С. Изменения гемореологических показателей у больных с диабетической ретинопатией и медикаментозные способы их коррекции / С.С. Ильенков, Д.Е. Вайник // VII съезд офтальмологов России. Тез. докл., М., 2000. -4.1.-С. 313-314.

60. Ильюнчик, Т.Ю. Фармакологические и радиозащитные свойства некоторых производных гамма-пиррона / Т.Ю. Ильюнчик, А.И. Хомченко, JI.M. Фригидова // Фармакол. и токсикол. 1975. - Т. 38, № 5. - С. 607.

61. Иммунодиагностика диабетической ретинопатии / Н.С. Зайцева, О.С. Слепова, JI.C. Ли, Л.К. Дудникова // Вестник офтальмологии. 1990. - № 1. - С. 46-49.

62. Индукция аутоантител к глутамату у больных с болезнью Альцгеймера / Т.В. Давыдова, Н.И. Воскресенская, В.Г. Фомина и др. // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2007. - Т. 143, № 2. - С. 140-141.

63. Исследование индуцированной гипоксией экспрессии HIF-la в пигментном эпителии сетчатки / Y. Zeng, G. Li, В. Fan et al. // Бюлл. экспер. биологии и медицины. 2007. - Т. 143, № 3. - С. 293-297.

64. К экспериментальному клиническому изучению фитоэкдистероидов / В.К. Петров, В.Н. Дармограй, А.А. Сысокин и др. // III Росс. Нац. Конгресс "Человек и лекарство": Тезисы докладов, М., 1996. С. 42.

65. Карагезян, К.Г. Окислительные процессы и обмен фосфолипидов в мембранных структурах гепатоцитов при аллоксановом диабете / К.Г. Карагезян, JI.M. Овсепян, К.Г. Адонц // Вопр. мед. химии. 1990. - № 2. - С. 1012.

66. Куприянов, В.В. Ангиогенез. Образование, рост и развитие кровеносных сосудов / В.В. Куприянов, В.А. Миронов, О.Ю. Турина. М.: НИО "Квартет", 1993.-200 с.

67. Кацнельсон, JI.A. Сосудистые заболевания глаз / JI.A. Кацнельсон, Т.И. Форофонова, А.Я. Бунин М.: Медицина, 1990. - 270 с.

68. Киселева, Р.Е. Морфофункциональные изменения зрительного аналдизатора при воздействии различных доз низкоинтенсивного гелий-неонового лазера / Р.Е. Киселева, В.Н. Ковалев, Н.В. Громова // Морфология. 2000. - № 3. - С. 57.

69. Козлов, М.П. Сульфгидрильная активность крови при экспериментальном диабете. / М.П. Козлов. Москва, 1977. - 11 е./ Рукопись депонирована во ВНИИМИ МЗ СССР №1354-77.

70. Комаров, Ф.И. Патология органа зрения при общих заболеваниях / Ф.И. Комаров. М., 1982. - 282 с.

71. Кондакова, Н.В. Антирадикальная активность флавоноидов и других природных соединений на модельных системах разной сложности / Н.В. Кондакова, В.В. Сахарова, Н.В. Рипа и др. // Труды Междунар. симпозиума "Биоантиоксидант", Тюмень, 1997. С. 231-233.

72. Кондратьев, Я.Ю. Полиморфные генетические маркеры и сосудистые осложнения сахарного диабета / Я.Ю. Кондратьев, В.В. Носиков, И.И. Дедов // Проблемы эндокринологии. 1998. - Т.44, №1. - С.43-52.

73. Краснов, M.JI. Терапевтическая офтальмология / M.JI. Краснов, Н.Б. Шульпина -М., 1985.-360 с.

74. Кровоснабжение и гемомикроциркуляция глаза при различных формах и стадиях диабетической ретинопатии / И.Р. Салдан, JI.B. Козина, Н.В. Бакулева, К.Г. Драченко // Офтальмологический журнал. 1982. - № 8. - С. 473-477.

75. Крупчатникова, О.В. Вобэнзим в комплексном лечении сосудистых и посттравматических поражений органа зрения / О.В. Крупчатникова, JI.H. Денисов // VII съезд офтальмологов России: Тез. докл., М., 2000. Ч. 1. -С. 317.

76. Кудряшов, Б.А. Естественный диабетогенный фактор /Б.А. Кудряшов // Советская медицина. 1989. - № 7. - С. 51-54.

77. Кулиев, И.Я. Повреждающее действие света на сетчатку: участие сиглетного кислорода и перекисей липидов / И.Я. Кулиев, А.А. Шведова, В.Е. Каган // Доклады АН СССР. 1982. - Т. 263, № 4. - С. 1005-1009.

78. Куприянов, В.В. Сосудистый эндотелий / В.В. Куприянов. Киев: «Здоровье», 1986.-247 с.

79. Панкин, В.З. Окислительный стресс при атеросклерозе и диабете /В.З. Панкин, М.О. Лисина, Н.Е. Арзанасцева // Бюлл. эксперим. биологии и медицины. -2005.-Т. 139, №7.-С. 48-51.

80. Лейтес, С.М. Патогенез нарушений обмена липидов у больных сахарным диабетом / С.М. Лейтес// Терапевт, архив. 1972. - Т. 44, вып. 5. - С. 16-22.

81. Лекишвили, В.П. Диабетическая ретинопатия / В.П. Лекишвили, Д.Дж. Скотт.- М.: Медицина, 1968. 112 с.

82. Леус, Н.Т. К механизму действия низких энергий монохроматического когерентного света на состояние лизосом сетчатой оболочки / Н.Т. Леус, И.П. Метелицына, Л.А. Линник // Офтальмологический журнал. — 1989. № 4. — С. 238-241.

83. Лилли, Р. Патогистологическая техника и практическая гистохимия / Р. Лилли.- М.: Мир, 1969.-645 с.

84. Логвинов, С.В. Закономерности поражения и репарации зрительного анализитора при воздействии микроволн и ионизирующей радиации: автореф. дисс. . док. мед. наук / С.В. Логвинов. Томск, 1993. - 43 с.

85. Логвинов, С.В. Очерки неионизирующей радионейробиологии: структурно-функциональный анализ / С.В. Логвинов, В.Г. Зуев, И.Б. Ушаков — Томск: Изд-во Том. ун-та, 1994. 208 с.

86. Логвинов, С.В. Радиация и зрительный анализатор: нейроморфологические аспекты / С.В. Логвинов. Томск : изд-во НТЛ, 1998. — 138 с.

87. Логвинов, С.В. Дегенеративные изменения сетчатки глаза белых крыс при воздействии высокоинтенсивного света / С.В. Логвинов, А.В. Потапов, И.С. Малиновская // Морфология. 1998. - Т. 113, № 3. - С. 97.

88. Логвинов, С.В. Фотоповреждение нейросенсорных клеток сетчатки после предварительного рентгеновского облучения / С.В. Логвинов, А.В. Потапов // Бюлл. эксперим. биологии и медицины. 2000. - Т. 130, № 8. - С. 237-240.

89. Логвинов, С.В. Структурные изменения сетчатки при комбинированном воздействии света и рентгеновских лучей / С.В. Логвинов, А.В. Потапов // Морфология. 2000. - Т. 117, вып. 1. - С. 19-23.

90. Логвинов С.В. Изменения синаптоархитектоники коры большого мозга при ишемии и их коррекция асковертином и экстрактом левзеи / С.В. Логвинов, Н.В. Пугаченко, А.В. Потапов // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 2001. -№ ю. - С. 473-476.

91. Лушников, Е.Ф. Гибель клетки (апоптоз) / Е.Ф. Лушников, А.Ю. Абросимов. М.: Медицина, 2001.-192 с.

92. Мазурина, Н.К. Роль гипергликемии в гемодинамических нарушениях сетчатки / Н.К. Мазурина, С.В. Сдобникова // Вестник офтальмологии. 2004. -№ 6. - С. 46-49.

93. Малиновская, И.С. Структурные изменения нервных элементов глаза при комбинированном воздействии света и циклофосфана : автореф. дисс. . канд. мед. наук / И.С. Малиновская. Томск, 1998. - 20 с.

94. Манукян, М. Течение экспериментального сахарного диабета, осложненного острой лучевой болезнью: автореф. дисс. . канд. мед. наук / М. Манукян. -Ереван, 1966. 16 с.

95. Марголис, М.Г. Сахарный диабет и заболевания глаз / М.Г. Марголис. М.: Медицина, 1966. - 174 с.

96. Механизмы фотоповреждения сетчатки / М.В. Зуева, А.В. Кармолин, И.Б. Федорович, М.А. Островский // Патоморфология и биохимия глаза. 1987. — С.38.42.

97. Механизм диквертинопосредованной регуляции функции нейтрофилов у больных сахарным диабетом 2 типа / Н.Ф. Федосова, С.В. Алисиевич, К.В. Лядов и др. // Бюлл. экспер. биологии и медицины. 2004. - Т. 137, № 2. - С. 164-167.

98. Миленькая, Т.М. Диабетическая ретинопатия, диагностика, лечение / Т.М. Миленькая, Л.Н. Щербачева, B.C. Терентьев // РМЖ. 1998. - Т. 6, № 12. - С. 815.

99. Миронова, Э.М. Роль пигментного эпителия и взаимодействующих с ним структур в патогенезе глазных заболеваний: автореф. дис. . .док. биол. Наук / Э.М. Миронова М., 1990. - 41 с.

100. Можеренков, В.П. Диабетические поражения органа зрения / В.П. Можеренков, А.П. Калинин // Офтальмол. журнал. — 1991. № 1. - С. 54-58.

101. Морфологические изменения сетчатой оболочки, вызванные различными источниками света в эксперименте (люминисцентные лампы и лампы накаливания) / И.С. Черкасов, Н.И. Усов, A.M. Солдатова, Л.Л. Ковальчук // Офтальмол. журнал. 1988. - № 6. - С. 362-364.

102. Мушкамбаров, Н.Н. Молекулярная биология : учебное пособие для студентов медицинских ВУЗов / Н.Н. Мушкамбаров, С.Л. Кузнецов. М.: ООО "Медицинское информационное агентство", 2003. - 544 с.

103. Нестеров, А.П. Роль местных факторов в патогенезе диабетической ретинопатии / А.П. Нестеров // Вестн. офтальм. 1994. - Т. 110, № 4. - С. 7-9.

104. Нестеров, А.П. Диабетические нарушения органа зрения / А.П. Нестеров // Проблемы эндокринологии. 1997. - Т. 43, № 3. - С. 16-19.

105. Нестеров, А.П. Диабетическая ретинопатия / А.П. Нестеров // РМЖ. 2000. -Т. 8. - № 1.-С. 10-17.

106. Николаева, М.Я. О причине накопления дегидроаскорбиновой кислоты в крови больных инсулинзависимым сахарным диабетом / М.Я. Николаева, Б.С. Балмуханов, P.M. Пархимович // Проблемы эндокринологии. 1985. - Т 31, № 1.-С. 14-18.

107. Нудьга, Л.И. Комплексное лечение диабетической ретинопатии /Л.И. Нудьга // VII съезд офтальмологов России: Тез. докл., М., 2000. Ч. 2. - С. 472-473.

108. Островский, М.А. Исследования механизмов повреждающего действия видимого света на здоровую сетчатку животных / М.А. Островский, А.И. Богословский, М.В. Зуева // Вестник АМН СССР. 1979. - № 12. - С. 57-61.

109. Островский, М.А. Механизмы повреждающего действия света на фоторецепторы сетчатки глаза / М.А. Островский, И.Б. Федорович // Физиология человека. 1982. -Т. 8, № 4. - С. 572-577.

110. Островский, М.А. Исследование про- и антиоксидантных свойств липорусциновых гранул из клеток ретиналь'ного пигментного эпителия глазачеловека / М.А. Островский, А.Е. Донцов, М. Боултон // Биологические мембраны.-1991.-Т. 8,№ 11.-С. 1198-1200.

111. Островский, М.А. Ретиналь как сенсибилизатор фотоповреждения ретинальсодержащих белков сетчатки глаза/ М.А. Островский, И.Б Федорович

112. Биофизика. 1994. - Т.39, вып. 1. - С. 13-15.

113. Патогенетические особенности простой и пролиферативной диабетической ретинопатии / JI.T. Кашинцева, И.Р. Салдан, А.В. Артемов, Т.В. Дегтяренко // Офтальмол. журнал. 1988. - № 4. с. 193-197.

114. Плешанов, Е.В. Морфологические основы патогенеза микроциркуляторных нарушений при различных стадиях диабетической ангиоретинопатии / Е.В. Плешанов, И.Ф. Гогина // Офтальмол. журнал. 1985. - № 4. - С. 211-214.

115. Плотников, М.Б. Лекарственные препараты на основе диквертина / М.Б. Плотников, Н.А. Тюкавкина, Т.М. Плотникова. Томск: из-во Том. ун-та, 2005. - 228 с.

116. Потапов, А.В. Структурные изменения сетчатки при комбинированном воздействии света высокой интенсивности и ионизирующей радиации: автореф. дисс. . канд. мед. наук / А.В. Потапов Томск, 1998. - 23 с.

117. Потапов, А.В. Общие закономерности и тканевые механизмы поражения сетчатки и зрительного нерва при комбинированном воздействии ионизирующей радиации и света: автореф. дисс. . док. мед. наук / А.В. Потапов Томск, 2006. - 36 с.

118. Преображенский, Л.В. Световые повреждения глаз / Л.В. Преображенский, В.И. Шостак, Л.И. Балашевич. Л., 1986. - 200 с.

119. Применение антиоксидантов из группы флавоноидов в лечении диабетической ретинопатии при сахарном диабете типа 2 / М.И. Балаболкин, М.С. Никишова, А.К. Волкова и др. // Проблемы эндокринологии. 2003. - Т. 49, №36.-С. 3-6.

120. Пугаченко, Н.В. Структурные изменения коры большого мозга при ишемии и их коррекция препаратами растительного происхождения: автореф. дисс. . канд. мед. наук / Н.В. Пугаченко. Томск, 2000. — 19 с.

121. Реутов, В.П. Физиологическая роль цикла окиси азота в организме человека и животных / В.П. Реутов, Е.Г. Сорокина // Физиология человека. 1994. — Т. 20, №3.-С. 165-167.

122. Ромейс, Б. Микроскопическая техника / Б. Ромейс. М.: изд-во иностр. литры, 1953.-719 с.

123. Салдан, И.Р. Клинико-морфологическая характеристика изменений сетчатки у больных сахарным диабетом / И.Р. Салдан, А.В. Артемов // Офтальмологический журнал. 1985. - № 6. — С. 364-367.

124. Салтыков, Б.Б. Патогенетические механизмы диабетической микроангиопатии / Б.Б. Салтыков // Архив патологии. — 1984. Т. XLVI, № 8. — С. 78-83.

125. Сапержинский, И.И. Биополимеры: кинетика радиационных и фотохимических превращений / И.И. Сапержинский. М.: Наука, 1992. - с. 5.

126. Семенова, Г.С. О патогенетических механизмах развития ангиоретинопатии при сахарном диабете / Г.С. Семенова // Вест, офтальмол. 1987. - Т. 103, № 5. -С. 51-55.

127. Семченко, В.В. Синаптоархитектоника коры большого мозга / В.В. Семченко, Н.Н. Боголепов, С.С. Степанов. Омск, 1995. - 167 с.

128. Семченко, В.В. Структурные основы изменения кривизны синаптических контактов сенсомоторной коры и коры мозжечка в норме и при острой ишемии

129. В.В. Семченко, С.С. Степанов, Е.Д. Сергеева // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 1995. - Т. 119, № 4. - С. 443-445.

130. Семченко, В.В. Пластические перестройки синапсов коры большого мозга в постишемическом периоде / В.В. Семченко, С.С. Степанов // Архив анатомии, гистологии и эмбриологии. 1987. - Т.93, № 11. - С. 43-48.

131. Семченко, В.В. Система субсинаптических единиц как универсальный системообразующий и регулирующий фактор синапсов головного мозга / В.В. Семченко, С.С. Степанов // Бюл. эксп. биологии и медицины. 1997. - Т. 124, № 7.-С. 4-12.

132. Сидорова, М.В. Изучение роли нейросенсибилизации в патогенезе диабетической ретинопатии и способы коррекции выявленных нарушений: автореф. дисс. . канд. мед. наук / М.В. Сидорова Киев, 2003. - 20 с.

133. Системный и местный иммунитет у больных с диабетической ретинопатией / В.Ф. Экгардт, JI.H. Тарасова, С.Н. Теплова, Т.В. Алехина // Вестник офтальмологии. 1998. - Т. 114, № 1. - С. 46-47.

134. Скрипка, В.П. Эффективность системной энзимотерапии в лечении больных с диабетической ретинопатией / В.П. Скрипка, А.Н. Тур, Н.А. Угай // VII съезд офтальмологов России: Тез. докл., М., 2000. Ч. 1. - С. 330.

135. Смирнова, Н.Б. Прогноз и лечебная тактика на ранних стадиях диабетической ретинопатии: автореф. дисс. . канд. мед. наук / Н.Б. Смирнова. -М., 1998.-29 с.

136. Солдатова, A.M. Гистологические и гистохимические изменения сетчатой оболочки животных при воздействии различных источников света / A.M.I

137. Сорокин, E.JL Структурно-функциональные особенности нарушения транскапиллярного обмена сетчатки у больных диабетической ретинопатией / E.JI. Сорокин, Г.П. Смолякова // Вест, офтальмол. 1997. - Т. 113, № 2. - С. 1619.

138. Сорокин, E.JI. Система ранней диагностики и лечения диабетической ретинопатии в Приамурье: автореф. дисс. . док. мед. наук / E.JI. Сорокин -Хабаровск, 1998. 52 с.

139. Сорокин, E.JI. Оптимизация лечения манифестных форм диабетической ретинопатии / E.JI. Сорокин // Материалы II Евро-Азиатской конференции по офтальмохирургии, Екатеринбург, 2001. Ч. 1, разд. 1 -5. - С. 184-185.

140. Спектральные характеристики интраокулярных линз и повреждение сетчатки видимым светом / Э.В. Егорова, М.А. Бабижаев, Т.А. Иванина и др. // Биофизика. 1988. - Т. 33, № 6. - С. 1035-1040.

141. Сравнительная оценка эффективности биофлавоноидов диквертина и танакана в терапии сахарного диабета 2 типа / JI.B. Недосугова, А.К. Волкова, И.А. Рудько и др. // Клиническая фармакология и терапия. 2000. — Т. 9, № 4. — С. 65-67.

142. Средство для комплексной терапии заболеваний (диквертин и способ его получения) / Н.А. Тюкавкина, В.А. Хуторянский, Б.Н. Баженов и др. Пат. № 2088256 РФ // Бюлл. изобрет. 1997. - № 5. - С. 11-13.

143. Спесивцева, В.Г. Состояние внутренних органов при сахарном диабете / В.Г. Спесивцева // Ташкент: "Медицина", 1985. 216 с.

144. Степанов, С.С. Синаптоархитектоника коры большого мозга в восстановительном периоде после кратковременной тотальной ишемии: автореф. дисс. . канд. мед. наук / С.С. Степанов Новосибирск, 1986. - 16 с.

145. Стукалов, С.Е. Иммунологические и экологические исследования при сосудистой патологии сетчатой оболочки / С.Е. Стукалов, М.А. Щепетнева, С.А. Куролап. Воронеж, 1998. - 325 с.

146. Стукалов, С.Е. Клинико-иммунологические и экологические исследования при диабетической ретинопатии / С.Е. Стукалов, М.А. Щепетнева, В.Н. Корниенко // Вестник офтальмологии. 2004. - Т. 120, № 1. - С. 36-39.

147. Сыров, В.Н. Сравнительное изучение анаболической активности фитоэкдистероидов, их 6-кетоноаналогов и нерабола в организме экспериментальных животных: автореф. дис. . канд. мед. наук / В.Н. Сыров. -Ташкент, 1979 17 с.

148. Сыров, В.Н. Фитоэкдистероиды: биологические эффекты в организме высших животных и перспектива использования в медицине / В.Н. Сыров // Эксперим. и клинич. фармакология. 1994. - Т. 57, № 5. - С. 61-66.

149. Теселкин, Ю.О. Антиоксидантная активность плазмы крови как критерий оценки функционального состояния антиоксидантной системы организма и эффективности применения экзогенных антиоксидантов: дисс. . док. биол. наук / Ю.О. Теселкин. М., 2003. - 272 с.

150. Тюкавкина Н.А. Дигидрокверцетин как антиоксидант / Н.А. Тюкавкина, Ю.А. Колесник, И.А. Руленко, В.К. // тез. II Рос. нац. конгр. Человек и лекарство, М., 1995. С. 295.

151. Флавоноиды и резвератрол как регуляторы активности Ah-рецептора: защита от токсичности диоксина / В.А. Тутельян, М.М. Гаппаров, Л.Ю. Телегин и др. // Бюл. эксп. биологии и медицины. 2003. - Т. 136, № 12. - С. 604-611.

152. Фотоповреждение молекулы родопсина при окислении SH-групп / И.Д. Погожева, И.Б. Федорович, Н.М. Эммануэль, М.А. Островский // Биофизика. -1981. Т. 26, № 3. - С. 398-403.

153. Функциональная диагностика ретинальной ишемии / В.В. Нероев, М.В. Зуева, И.В. Цапенко и др. // Вестник офтальмологии. 2004. - № 6. - С. 11-13.

154. Хавинсон, В.Х. Пептидные биорегуляторы в лечении диабетической ретинопатии / В.Х. Хавинсон, В.М. Хокканен, С.В. Трофимова СПб: «Фолиант», 1999. - 117 с.

155. Хавинсон, В.Х. Биорегуляторные пептиды в лечении диабетической ретинопатии / В.Х. Хавинсон, С.В. Трофимова // VII съезд офтальмологов России: Тез. докл., М., 2000. Ч. 1. - С. 335.

156. Церебропротекторные эффекты смеси диквертина и аскорбиновой кислоты / Плотников М.Б., Логвинов С.В., Пугаченко Н.В. и др. // Бюл. экспер. биологии и медицины. 2000. - № 11. - С. 543-547.

157. Чернух, A.M. Микроциркуляция / A.M. Чернух// М.: Медицина, 1984. 429 с.

158. Эллиниди, В.Н. Практическая иммуногистоцитохимия (методические рекомендации) /В.Н. Эллиниди, Н.В. Аникеева, Н.А. Максимова. СПб: ВЦЭРМ МЧС России, 2002. - 36 с.

159. Янькова, В.И. Возрастные аспекты состояния пероксидации липидов и антиоксидантной защиты при действии аллоксана / В.И. Янькова, Т.А. Гвозденко // Бюлл. экспер. биологии и медицины. 2005. - Т. 139, № 3. - С. 283286.

160. Aberrant lysosomal carbohydrate storage accompanies endocytic defects and neurodegeneration in Drosophila benchwarmer / B. Dermaut, K.K. Norga, A. Kania etal./JCB. -2005. Vol. 170, № l.-P. 127-139.

161. Adamis, A.P. Shedding light on diabetic retinopathy / A.P. Adamis, RJ. D'Amato // Ophthalmology. 1995. - Vol. 102, № 8. - P. 1127-1128.

162. Adamis, A.P. Is diabetic retinopathy an inflammatory disease? / A.P. Adamis // Br. J Ophthalmol. 2002 - Vol. 86. - P. 363-365.

163. Aiello, L.P. Vascular endothelial growth factor in ocular fluid of patients with diabetic retinopathy and other retinal disorders / L.P. Aiello, R.L. Avery, P.G. Arigg //Engl. J. Med. 1994. - Vol. 331. - P. 1480-1487.

164. Aldose reductase in the BB rat: isolation, immunological identification and localization in the retina and peripheral nerve / S. Chakrabarti, A.A.F. Sima, T. Nakajima et al. // Diabetologia. 1987. - Vol. 30. - P. 244-251.

165. Aldose reductase deficiency prevents diabetes-induced blood-retinal barrier breakdown, apoptosis, and glial reactivation in the retina of db/db mice / A.K.H. Cheung, M.K.L. Fung, A.C.Y. Lo et al. // Diabetes. 2005. - V.54. - P. 3119-3125.

166. Algenstaedt, P. Microvascular alterations in diabetic mice correlate with level of hyperglycemia / P. Algenstaedt, C. Schaefer, T. Biermann // Diabetes. 2003. - Vol. 52. - P. 542-549.

167. Alterations of Muller (glial) cells in dystrophic retinae of RCS rats / W. Ндг-tig, J. Grosche, C. Distler et al. // J. Neurocytol. 1995. - Vol. 24. - P. 507-517.

168. Amelioration of Light-induced-retinal degeneration by calcium overload blocker. Flunarizine / D.F. Edwards, T.T. Lam, S. Shahinfar et al. // Arch. Ophthalmol. -1991.-Vol. 109, №4.-P. 554-562.

169. Amelioration of retinal photic injury by a combination of flunarizine and dimethylthiourea / J. Li, D.P. Edward, T.T. Lam, M.O. Tso // Exp. Eye Res. 1993. -Vol. 56, № 1.-P. 71-78.

170. Aminoguanidine treatment inhibits the development of experimental diabetic retinopathy / H.P. Hammes, S. Martin, K. Federlin et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1991.-V.88.-P. 11555-11558.

171. Aminoguanidine does not inhibit the initial phase of experimental diabetic retinopathy in rats / H.P. Hammes, S. Syed, M. Uhlmann et al. // Diabetologia. -1995.-Vol. 38.-P. 269-273.

172. Amzica, F. Membrane capacitance of cortical neurons and glia during sleep oscillations and spike-wave seizures / F. Amzica, D. Neckelmann // J. Neurophysiol.- 1999 -V.82.- P. 2731-2746.

173. Anderson, J.M. Tight junctions and the molecular basis for regulation of paracellular permeability / J.M. Anderson, C.M. Van Itallie // Am. J. Physiol. 1995.- Vol. 269, № 13. P. 467-476.

174. Ando, H. In vivo response of the rat's retinal pigment epithelium to azide: changes induced by light damage / H. Ando, W.K. Noell // Jpn. J. Physiol. 1993. -Vol. 43, №3.-P. 311-322.

175. Antioxidant nutritient intake and diabetic retinopathy. The San Luis Valley Diabetes Study / E.J. Mayer-Davis, R.A. Bell, B.A. Reboussin et al. // Ophthalmology. 1998. - Vol. 105. - P. 2264-2270.

176. An elevated hematogenous photosensitizer in the preterm neonate / L.A. Bynoe, Y.D. Gottsch, S.R. Sadda et al. // Invest.Ophthalmol. Vis. Sci. 1993. - Vol. 34, № 10.-P. 2878-2880.

177. Apoptotic vascular endothelial cells become procoagulant / T. Bombeli, A. Karsan, J.F. Tait et al. // Blood. 1997. - Vol. 89. - P. 2429-2442.

178. Apoptosis in the retina: the silent death of vision / C.E. Reme, C. Grimm, F. Hafezi et al. // News in Physiological Sciences. 2000. - Vol. 15, № 3. - P.120-124.

179. Apossible mechanism of low level laser-living cell interaction / R. Lubart, Z. Malic, S. Rochkind, T. Fisher // Laser Ther. 1990. - Vol. 2, № 1. - P. 65-68.

180. Aquaporin-4 water channel protein in the rat retina and optic nerve: polarized expression in muller cells and fibrous astrocytes / E.A. Nagelhus, M.L. Veruki, R. Torp et al. // J. Neuroscience. 1998. - Vol. 18, № 7. - P. 2506-2519.

181. Arafat, A.F. Subclinical operating microscope retinopathy: the use of static perumetry in its detection / A.F. Arafat, G.N. Dutton, W.N. Wykes // Eye. 1994. -№8.-P. 467-472.

182. A role for the polyol pathway in the early neuroretinal apoptosis and glial changes induced by diabetes in the rat / V. Asnaghi, C. Gerhardinger, T. Hoehn et al. // Diabetes. 2003. - Vol. 52, № 2. - P. 506-511.

183. Astrocytes increase barrier function and ZO-1 protein expression in cultured retinal capillary endothelial cells / T.W. Gardner, E. Lieth, S.A. Khin et al. // Invest. Ophthalmol Vis. Sci. 1997. - Vol. 38. - P. 2423-2427.

184. Attawia, M.A. Circulating antipericyte autoantibodies in diabetic retinopathy / M.A. Attawia, R.C. Nayak // Retina. 1999. - Vol. 19, № 5. - P. 390-400.

185. Ausprunk, D.H. Migration and proliferation of endothelial cells in preformed and newly formed blood vessels during tumor angiogenesis / D.H. Ausprunk, J. Folkman // Microvasc. Res. 1977. - V. 14, № 1. - P. 53-65.

186. Baker, B.N. Alteration of disk shedding patterns by light-onset of higher than normal intensity / B.N. Baker, M. Moriya, T.P. Williams // Exp. Eye. Res. 1986. -Vol. 42, №6.-P. 535-546.

187. Barinapa, M. Shedding light on blindness / M. Barinapa // Science. 1995. - Vol. 267, №5197.-P. 452-453.

188. Basement membrane abnormalities in human eyes with diabetic retinopathy / A.W. Ljubimov, R.E. Burgenson, RJ. Butkowski et al. // J. Histochem. Cytochem. -1996. Vol. 44, № 12. - P. 1469-1479.

189. Basic mechanisms underlying the production of photochemical lesions in the mammalian retina / W. Ham, H.A. Mueller, J.J. Ruffolo et al // Curr. Eye. Res. —1984.-Vol. 3.-P. 165-174.

190. Baudouin, C. Growth factor in vitreous and subretinal fluid cells fromm patients with proliferative vitreoretinopathy / C. Baudouin, D. Fredj-Reygrobellet, F. Negre // Ophthalmic. Res. 1993. - Vol. 25, № 2. - P. 52-59.

191. Baynes, J.W. Role of oxidative stress in development of complications in diabetes / J.W. Baynes // Diabetes. 1991. - Vol. 40, № 4. - P. 405-412.

192. Bcl-2 promotes regeneration of severed axons in mammalian CNS // D.F. Chen, G.E. Schneider, J.C. Martinou et al. //Nature 1997. - Vol. 385. - P. 434-439.

193. Bcl-xl overexpression blocks bax-mediated mitochondrial contact site formation and apoptosis in rod photoreceptors of lead-exposed mice bcl-xl / L. He, G.A. Perkins, A.T. Poblenz et al. // PNAS. 2003. - Vol. 100, № 3. - P. 1022-1027.

194. Behavioral assessment of с-fos mutant mice / R. Paylor, R.S. Johnson, V.E. Papaioannou et al. // Brain Res. 1994. - Vol. 651. - P. 257-282.

195. Век, Т. Immunohistochemical characterization of retinal glial cell changes in areas of vascular occlusion secondary to diabetic retinopathy / Т. Век // Acta Ophthalmol. Scand. 1997. - Vol. 75, № 4. - P. 388-392.

196. Век, Т. Localised blood-retinal barrier leakage and retinal light sensivity in diabetic retinopathy / Т. Век, H. Lund-Andersen // Br. J. Ophthalmol. 1990. - Vol. 77, №7.-P. 388-392.

197. Bellhorn, R.W. Retinal vessel abnormalities of phototoxic retinopathy in rats / R.W. Bellhorn, M.S. Burns, J.V. Benjamin // Assoc. for Res. in Vis. and Ophthal. -1980. V.19, №6. - P. 584-595.

198. Bensaoula, T. Biochemical and ultrastructural studies in the neural retina and retinal pigment epithelium of STZ-diabetic rats: effect of captopril / T. Bensaoula, A. Ottlecz // J. Ocul. Pharmacol. Ther. 2001. - Vol. 17, № 6. - P. 573-586.

199. Beretz, A. Old and new natural products as the source of modern antithrombotic drugs / A. Beretz, J.P. Cazenave // Planta med. 1991. - V. 12, № 3. - P. 568-572.

200. Blood-retinal barrier dysfunction at the pigment epithelium induced by blue light / B.J. Putting, R. Zweypfenning, G. Vrensen et al. //Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. -1992. Vol. 33, № 12. - P. 3385-3393.

201. Blue light emission from urological equipment. Can it damage the eyes? / T.P. Brigss, C. Parker, R.A. Miller et al. // Exp Eye Res. 1992. - Vol. 52, №2. - P. 139153.

202. Blue-light-induced dysfunction of the blood-retinal barrier at the pigment epithelium in albino versus pigmented rabbits / B.Y. Putting, Y.A. van Best, G.F. Vrensen, Y.A. Oosterhuis // Exp. Eye Res. 1994. - Vol. 58, № 1. - P. 31-40.

203. Boeri, D. Increased prevalence of microtromboses in retinal capillaries of diabetic individuals / D. Boeri, M. Maiello, M. Lorenzi // Diabetes. 2001. - Vol. 50. - P. 1432-1439.

204. Bonilha, V.L. Proteomic Characterization of Isolated Retinal Pigment Epithelium Microvilli / V.L. Bonilha, S.K. Bhattacharya, K.A. West // Molecular & Cellular Proteomics. 2004. - Vol.3. - P. 1119-1127.

205. Boquist, L. Structural beta-cell changes and transient hyperglycemia in mice treated with compounds / L. Boquist //Diabet. Metabol. 1989. - Vol. 15, № 1. - P. 23-29.

206. Borchman, D. Age-related lipid oxidation in human lenses / D. Borchman, M.C. Yappert // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 1998. - Vol. 39, № 6. - P. 1053-1058.

207. Brain-derived neurotrophic factjr gene delivery to Muller glia preserves structure and function of light-damaged photoreceptors / R. Gauthier, S. Joly, V. Pernet et al. // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 2005. -V.46, № 9. - P. 3383-3392.

208. Brandstatter, J.H. Terminal degeneration and synaptic disassembly following receptor photoablation in the retina of fly's compound eye / J.H. Brandstatter, S.R. Shaw, I.A. Mainertzhagen // J. Neurosci. 1991. - Vol. 11, № 7. - P. 1930-1941.

209. Brennan, D.H. Ocular assessment of light induced problems / D.H. Brennan // Hazards light: myth and realities. Eye and skinproc 1-st int. Simp. North. Eye inst., Manchester, 1985-1986.-P. 285-293.

210. Bright light induces mitochondrial fission: relationship to apoptosis.? Photoreceptor repair, and mitochondrial fusion / W.C. Gordon, M.S. Cortina, D.R. Lopez-Osa et al. // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 2005. - Vol. 46. - P. 1687.

211. Bryan, J.A. A retinal pigment epithelial cell-derived growth factor (s) / J.A. Bryan, P.A. Campochiaro // Arch Ophthalmol. 1986. - Vol. 104, № 5. - P. 422-425.

212. Cahill, G.M. Rhythmic regulation of retinal melatonin: metabolic pathways, neurochemical mechanisms, and the ocular circadian clock / G.M; Cahill, M.S. Grace, J.C. Besharse // Cell. Mol. Neurobiol. 1991. - Vol. 11. - P. 529-560.

213. Cahill, G.M. Circadian clock functions localized in Xenopus retinal photoreceptors / G.M. Cahill, J.C. Besharse //Neuron. 1993. - V.10. - P. 573-577.

214. Calkins, J.L. Light-induced damage to the eye // J.L. Calkins, B.F. Hochheimer // Arch.Ophthalmol. 1979. - Vol. 97 - P. 2363.

215. Calkins, J.L. Potential hazards from specific ophthalmic devices / J.L. Calkins, B.F. Hocheimer, S.A. D'Anna // Vision. Res. 1980. - Vol. 20, № 12. - P. 10391053.

216. Campochiaro, P.A. Platelet-derived growth factor in an autocrine growth stimulator in retinal pigmented epithelial cells / P.A. Campochiaro // J. Cell. Sci. -1994. Vol. 107, № 9. - P. 2459-2469.

217. Campochiaro, P.A. The retinal pigmented epithelium and retinal wound repair / P.A. Campochiaro // Basin. Vis. Sci. Symp. 1996. - № 2. - P. 28-34.

218. Carlson, E.C. Scanning and transmission elector microscopic studies of normal and diabetic acellular glomerulal and retinal microvessel basement membranes / E.C. Carlson // Microsc. Res. Tech. 1994. - Vol. 15, № 28(3). - P. 165-177.

219. Carmody, R.J. Reactive Oxygen species as mediators of photoreceptor apoptosis in vitro / RJ. Carmody, A.J. McGowan, T.G. Cotter // Exp. Cell Res. 1999. - Vol. 248.-P. 520-530.

220. Carverley, R.K.S., Jones D.G. Contribution of dendritic spines and perforated synapses to synaptic plasticity / R.K.S. Carverley, D.G. Jones // Brain Res. Rev. — 1990.-Vol. 15.-P. 215-249.

221. Ceriello, A. The emerging role of post-prandial hyperglycaemic spekes in the pathogenesis of diabetic complications / A. Ceriello // Diabet.Med. 1998. - Vol. 15, № 3. - P. 188-193.

222. C-fos controls the "Private Pathway" of light-induced apoptosis of retinal photoreceptors c-fos / A. Wenzel, C. Grimm, A. Marti et al. // J. of Neuroscience. -2000.-Vol. 20, №1.-P. 81-88.

223. Characterization of ATP release from cultures enriched in cholinergic amacrine-like neurons / P.F. Santos, O.L. Caramelo, A.P. Carvalho, C.B. Duarte // J. Neurobiol. 1999. - Vol. 41. - P. 340-348.

224. Characterization of vascular endothelial growth factor's effect on the activation of protein kinase C, its isoforms, and endothelial cell growth / P. Xia, L.P. Aiello, H. Ishii et al. // J. Clin. Invest. 1996. - Vol. 98. - P.2018-2026.

225. Chaturvedi, N. Effect of lisinopril on progression of retinopathy in normotensive people with type I diabetes / N. Chaturvedi, A-K. Sjolie, J.M. Stephenson // Lancet. -1998.-V. 351.-P. 28-31.

226. Chemical Toxicity of Indocyanine Green Damages Retinal Pigment Epithelium / H. Ikagawa, M. Yoneda, M. Iwaki et al. //Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 2005. - Vol. 46.-P. 2531-2539.

227. Chen, W.H. Determination of retinal illumination from operating microscopes and assessment of risk / W.H. Chen, H.R. Zhang // Chung Hua Ко Tsa Chin. 1993. -Vol. 29, №2.-P. 100-102.

228. Chen, S.T. Bcl-2 proto-oncogene protein immunoreactivity in normally developing and axotomized rat retinas / S.T. Chen, L.J. Garey, L.S. Jen // Neurosci Lett. 1994.-Vol. 172.-P. 11-14.

229. Chen, Y.S. Localisation of vascular endothelial growth factor and its receptors to cells of vascular and avascular epiretinal membranes / Y.S. Chen, S.F. Hackett // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 1996. - Vol. 37, № 3. - P. 120-123.

230. Chen, E. Inhibition on enzymes by short-wave optical radiation and its effect on the retina / E. Chen // Acta.Ophthalmol.Suppl. 1993. - № 208. - P. 1-50.

231. Chiou, G.C. Review: effects of nitric oxide on eye diseases and their treatment / G.C. Chiou //J. Ocul. Pharmacol. Ther. 2001. - V.17. - P.189-198.

232. Chronic lan-close glutamate is toxic to retinal ganglian cells: toxicity blocked by memantine / C.K. Vorverk, S.A. Lipton, D. Zurakowsld et al. // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 1996. - Vol. 37. - P. 1618-1624.

233. Circadian-dependet retinal light damage in rats / D.T. Organisciak, R.M. Darrow, L. Barsalou et al. // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 2000. - Vol. 41. - P. 3694-3701.

234. Clearance of apoptotic photoreceptors / T. Hisatomy T. Sakamoto, K. Sonoda et al. // Am. J. Pathol. 2003. - Vol. 162. - P. 1869-1879.

235. Clinical course and visual function in a family with mutations in the RPE65 gene / J. Felius, D.A. Thompson, N.W. Khan et al. // Arch. Ophthalmol. 2002. - Vol. 120. -P. 55-61.

236. Cogan, D.G. Ophthalmology survey of atomic bomb survivors in Japan / D.G. Cogan, S.F. Martin, S.S. Kimura // Trans. Am. Ophthalm. Soc. 1951. - V. 48. - P. 62-67.

237. Collagen activates superoxide anion production by human polymorphonuclear neutrophils / J.C. Monboisse, G. Bellon, J. Dufer et al. // Biochem. J. 1987. - Vol. 246, № 3. p. 246-250.

238. Collier, R.J. Temporal sequence of changes to the gray squirrel retina after near-UV exposure / R.J. Collier, W.R. Waldron, S. Zigman // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 1989. - Vol. 46. - P. 1678.

239. Colwell, J.A. Platelets and diabetic retinopathy / J.A. Colwell // In "Diabetic Retinopathy" Thieme-Stratton Inc. New York, 1983. P. 119-124.

240. Comet Assay of UV-induced DNA damage in retinal pigment epithelial cells / W.P. Patton, U. Chakravarthy, J.H. Davies, D.B. Archer // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 1999. - Vol. 40. - P. 3268-3275.

241. Comparison of light sources for potential to induce photic retinal injury / R. Collier, A.E. Martin, A.R. Lambert et al. // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 2005. -Vol. 30, №4.-P. 631-637.

242. Cordon-Cardo, C. Expression of basic fibroblast growth factor in normal human tissues / C. Cordon-Cardo, I. Veodavsky // Lab. Invest. 1990. - Vol. 63, № 6. - P. 832-840.

243. Cortina, M.S. Differential response of photoreceptor mitochondria to oxidative stress / M.S. Cortina, W.C. Cordon, N.G. Bazan // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. -2005.-Vol. 46.-P. 1689.

244. Cremers, F.P. Molecular genetics of Leber congenital amaurosis / F.P. Cremers, J.A. van den Hurk, A.I. den Hollander // Hum. Mol. Genet. 2002. -Vol. 11. - P. 1169-1176.

245. Dawson, W.W. Retinal photic injury in rat / W.W. Dawson, W.L. Herron // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 1970. - Vol. 9. - P. 89-96.

246. Dawson, W.W. Blue light hazard in rat / W.W. Dawson // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 1976. - Vol. 15, № 8. -P. 795.

247. Dawson, D.G. Long-term histopathologic findings in human corneal wounds after refractive surgical procedures / D.G. Dawson, H.F. Edelhauser, H.E. Grossniclaus // Am. J. Ophthalmol. 2005. - V. 139. - № 1. - P. 168-178.

248. Death of retinal neurons in streptozotocin-induced diabetic mice / P.M. Martin, P. Roon, Т.К. Van Ells et al. // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 2004. - Vol. 45. - P. 3330-3336.

249. Depletion of nitric oxide synthase-containing neurons in the diabetic retina: reversal by aminoguanidine / E. Roufail, T. Soulis, E. Boel et al. // Diabetologia. — 1998.-Vol. 41, № 12.-P. 1419-1425.

250. Development and progression of diabetic retinopathy: adolescents at risk / M. Bonney, S.J. Hing, A.T. Fung et al. // Diabet Med. 1995. - Vol. 12, № 11. - P. 967973.

251. Diabetic retinopathy: morphometric analysis of basement membrane within arterial and venous environments / H.R., Anderson, A.W. Stitt, T. A. Gardiner, D.B. Archer // Br. J. Ophthalmol. 1995. - Vol. 79, № 12. - P. 1120-1123.

252. Differential fate of rods and cones in light-induced retinal damage / W.C. Gordon, M.S. Cortina, S.T. Ragbir, N.G. Bazan // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 2003. - Vol. 44.-P. 5133.

253. DNA damage and repair in light-induced photoreceptor degeneration / W.C. Gordon, D.M. Casey, W.J. Lukiw, N.G. Bazan // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. -2002. Vol. 43. - P. 3511-3521.

254. Does A2E, a retinoid component of lipofiiscin and inhibitor of lysosomal degradative functions, directly affect the activity of lysosomal hydrolases? / M.

255. Bergmann, F. Schutt, F.G. Holz, J. Kopitz // Exp Eye Res. 2001. - Vol.72. - P. 191— 195.

256. Dorchy, H. Glycosylated haemoglobin and diabetes control / H. Dorchy, C. Riedl //ActaPediatr. Belg. 1980. - Vol. 33, № 3. - P. 195-196.

257. Du, Y. Hyperglycemia increases mitochondrial superoxide in retina and retinal cells / Y. Du, C.M. Miller, T.S. Kern // Free Radic. Biol. Med. 2003. - V. 35. - P. 1491-1499.

258. Dunn, J. Necrosis of islets of langerhans produced experimentally / J. Dunn, N. McLetehie, H. Sheehan // Lancet. 1943. - Vol. 244, № 6242. - P. 484-487.

259. Dysfunctional light-evoked regulation of cAMP in photoreceptors and abnormal retinal adaptation in mice lacking dopamine D4 receptors / I. Nir, J.M. Harrison, R. Haque et al. // J. Neurosci. 2002. - Vol. 22. - P. 2063-2073.

260. Dyslipidemia, but not hyperglycemia, induces inflammatory adhesion molecules in human retinal vascular endothelial cells / W. Chen, D.B. Jump, M.B. Grant et al. // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 2003 - V. 44. - P. 5016-5022.

261. Eadi, M.J. Selective vulnerability to ischemiy: studies in quantitative enzyme cytochemistry of single neurons and neuropil / M.J. Eadi, J.H. Tyrer, J.R. Kukums // Brain. 1971. - V. 94. - P. 647-660.

262. Early Treatment Diabetic Retinopathy Study Research Group. Effects of aspirin treatment of diabetic retinopathy. ETDRS Report No 8 // Ophthalmology. 1991. -V.98. - P. 757-765.

263. Early retinal damages in experimental diabetes: electroretinographical and morphological observations / Q. Li, E. Zemel, B. Miller et al. // Exp. Eye Res. -2002. Vol. 74, № 5. - P. 615-625.

264. Early-onset severe rod-cone dystrophy in young children with RPE65 mutations / B. Lorenz, P. Gyurus, M. Preising et al. // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 2000. - Vol. 41.-P. 2735-2742.

265. Early sings of diabetic retinopathy by fluorescein angiography / Y. Yamana, Y. Ohnischi, Y. Taniguchi, M. Ikeda // Jpn. J. Ophthalmol. 1983. - Vol. 27, № 1. - P. 218-227.

266. Effects of oxygen and bFGF on the vulnerability of photoreceptors to light damage / F. Bowers, K. Valter, S. Chan et al. // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 2001. -Vol. 42.-P. 804-815.

267. Effects of high glucose on permeability of retinal capillary endothelium in vitro / M.C. Gillies, T. Su, J. Stayt et al. // Invest. Ophthalmol. Vis Sci. 1997. - Vol. 38, №3.-P. 635-642.

268. Effect of dietary fat on the response of the rat retina to chronic and acute light stress / C.A. Koutz, R.D. Wiegand, L.M. Rapp, R.E. Anderson // Exp. Eye. Res. -1995. Vol. 60, № 3. -P. 307-316.

269. Effect of systemic neuroprotective agents on photoreceptor apoptosis in a rat model of retinal detachment / L. Sobrin, S.I. Pachydaki, A.T. Nakazawa et al. // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 2005. - Vol. 46. - P. 5521.

270. Ellipsoid mitochondrial fission in light-induced photoreceptor apoptosis / D.R. Lopez-Osa, W.C. Gordon, B.M.S. Cortina, N.G. Bazan // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 2004. - Vol. 45. - P. 780.

271. Engerman, R. Retinopathy in animal models of diabetes / R. Engerman, T. Kern // Diabetes Metab. Rev. 1995. - Vol. 11. - P. 109-120.

272. Ennis, S.R. Sucrose Permeability of the blood-retinal and blood-brain barriers. Effects of diabetes, hypertonicity, and lodate / S.R. Ennis, A. L. Berz // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 1986. - V.27. - P. 1095-1102.

273. Evaluation of retinal exposury from repetitively pulsed and scanning lasers / W.T. Ham, H.A. Mueller, M. L. Wolbarsht, D.H. Sliney // Health.Phys. 1988. - Vol. 54, № 3. - P. 337-344.

274. Expression of pigment epithelium-derived factor in normal adult rat eye and experimental choroidal neovascularization / N. Ogata, M. Wada, T. Otsuji et al. // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 2002. - Vol. 43. - P. 1168-1175.

275. Expression of a mutant opsin gene increases the susceptibility of the retina to light damage / M. Wang, T.T. Lam, M.O. Tso, M.I. Naash // Vis. Neurosci. 1997. -Vol. 14, № l.-P. 55-62.

276. Fagrell, B. Disturbed microvascular reactivity and shunting — a major cause for diabetic complications / B. Fagrell, G. Jorneskog, M. Intaglietta //Vascular Medicine. 1999.-Vol.4.-P. 125-127.

277. Fite, K.V. Experimental light damage increases lipofuscin in the retinal pigment epithelium of Japanese quail (Coturnix japonice) / K.V. Fite, L. Bengston, B. Donaghey // Exp. Eye Res. 1993. - Vol. 57, № 4. - P. 448-453.

278. Fluorophotometric assessment of blood-retinal barrier function after white light exposure in the rabbit eye / R.A. Borsje, G.F. Vrensen, Y.A. van Best, Y.A. Oosterhuis // Exp.Eye Res. 1990. - Vol. 50, № 3. - P. 297-304.

279. Frank, R.N. On the pathogenesis of diabetic retinopathy / R.N. Frank// A 1991 update. Ophthalmology. 1991. - Vol. 98, № 5. - P. 586-593.

280. Frank, R.N. Antioxidant enzymes in the macular retinal pigment epithelium of eyes with neovascular age-related macular degeneration / R.N. Frank, R.H. Amin, J.E. Puklin // Am. J. Ophthalmol. 1999. - V.127. - P. 694-709.

281. Freedman, S. Enhanced superoxide radical production by stimulated polymorphonuclear leukocytes in a cat model of diabetes / S. Freedman, D. Hatchell // Exp. Eye Res. 1992. - Vol. 55. - P. 767-773.

282. Fuller, D. Injuries induced by diffuse phodynamic action in retina and choroid of albini rats/ D. Fuller, R. Macheimer, R.W. Knighton // Vis.Res. 1980. - Vol. 20 -P. 1055-1072.

283. Functional rescue of photoreceptors from the damaging effects of constant light by survival-promoting factors in the rat / K. Masuda, I. Watanabe, K. Unoki et al. // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 1995. -Vol. 36, № 10. -P. 2142-2146.

284. Garner, A. Histopathology of diabetic retinopathy in man / A. Garner // Eye. -1993. Vol. 7, № 2. - P. 250-253.

285. Geller, S.F. FGFR1, signaling, and AP-1 expression after retinal detachment: reactive Muller and RPE cells / S.F. Geller, G.P. Lewis, S.K. Fisher // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 2001. - Vol. 42. - P. 1363-1369.

286. Gene expression profiles of light-induced apoptosis in arrestin/rhodopsin kinase-deficient mouse retinas / S. Choi, W. Hao, C-K. Chen, M.I. Simon // PNAS. 2001. -V. 98, №23.-P. 13096-13101.

287. Glass, M. Neurochemical and morphological changes associated with human epilepsy / M. Glass, M. Dragunow // Brain Res. Rev. 1995. - V. 21. - P. 29-41.

288. Glial reactivity in the retina of adult rats / K.R. Huxlin, Z. Dreher, H. Schulz, B. Dreher//Glia.- 1995.-Vol. 15.-P. 105-118.

289. Glutamate-evoked alterations of glial and neuronal cell morphology in the guinea pig retina / O. Uckermann, L. Vargova, E. Ulbricht et al. // Neuroscience. 2004. -Vol. 24, № 45. - P. 10149-10158.

290. Glutamate, NMD A and AMP A induced changes in extracellular space volume and tortuosity in the rat spinal cord / L. Vargov, P. Jendelov, A. Chvatal, E. Sykov //J. Cereb. Blood. Flow. Metab. 2001. - Vol. 21. - P. 1077-1089.

291. Glutathione peroxidase induced in rat retinas to counteract photic injury / A. Ohira, M. Tanito, S. Kaidzu, T. Kondo // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 2003. - Vol. 44.-P. 1230-1236.

292. Grant, M.B. The efficacy of octreotide in the therapy of severe non-proliferative and early proliferative diabetic retinopathy. A randomized controlled study / M.B. Grant, R. Cooper-DeHoff, R.N. Mames // Diabetes Care. 2000. - V.23. - P. 504509.

293. Gorgels, T.G. Ultraviolet and green light cause different types of damage in rat retina / T.G. Gorgels, D. van Norren // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 1995. - Vol. 36,№5.-P. 851-863.

294. Gryglewski, R.J. Secretory function of vascular endothelium / R.J. Gryglewski, S. Moncada //Adv. Prostaglandin. Thromboxane. Leukot. Res. 1987. - V. 17A. - P. 397-404.

295. Habtemariam, S. Flavonoids as inhibitors or enhancers of the cytotoxicity of tumor necrosis factor-alfa in L-929 tumor cells / S. Habtemariam // J. Nat. Prod. -1997. V. 60, № 8. - P. 775-778.j

296. Ham, W.T. Actions spectrum for retinal injury from nearultraviolet radiation in ^ the aphakic monkey / W.T. Ham // Ophthalmol. 1982. - Vol. 93. - P. 299-306.

297. Hanneken, A. Localisation of basic fibroblast growth factor to the developing capillaries of the bovine retina / A. Hanneken, G.A. Lutty, D.S. McLeod // J. Cell. Physiol. 1989.-Vol. 138, № l.-P. 115-120.

298. Hanneken, A. Altered distribution of basic fibroblast growth factor in diabetic retinopathy / A. Hanneken, E.Jr. de Juan, G.A. Lutty // Arch. Ophthalmol. 1991. -Vol. 109, №7.-P. 1005-1011.

299. Hansson, H.A. Ultrastructure studies on rat retinal damage by visible light / H.A. Hansson // Virchous. Archive. 1970. - Vol. 6. - P. 247.

300. Haraguch, H. Inhibition of aldose reductase by dihydroflavonols in Engelhardia chrysolophys and effects on other enzymes / H. Haraguch, I. Ohmi, H. Masuda // Experimentia. 1996. - Vol. 52, № 6. - P. 945-948.

301. Haselton, F.R. Glucose-induced increase in paracellular permeability and disruption of j8-receptor signaling in retinal endothelium / F.R. Haselton, E.J. Dworska, L.H. Hoffinan // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 1998. - Vol. 39, № 9. - P. 1676-1684.

302. Hemoproteins mediate blue light damages in the retinal pigment epithelium / E.L. Pauter, M. Morita, D. Beezley et al. // Photochem. Photobiol. 1990. - Vol. 51, № 5. -P. 599-605.

303. Hennig, B. Lipid peroxidation and endothelial cell injury: implications in atherosclerosis / B. Hennig, C. Chow // Free Radic. Biol. Med. 1988. - Vol. 4, № 2. -P. 99-106.

304. Henry, M.M. A possible cause of cronic cystic meculopathy / M.M. Henry, L.M. Henry // Ann.Ophthalmol. 1977. - Vol. 9, № 4. - P. 455-457.

305. High glucose induced antioxidant enzymes in human endothelial cells in culture. Evidence linking hyperglycemia and oxidative stress / A. Ceriello, dello P. Russo, P. Amstad, P. Cerutti // Diabetes. 1996. - Vol. 45, № 4. - P. 471-477.

306. Hohman, T.C. Aldose reductase and polyol in cultured pericytes of human retinal capillaries / T.C. Hohman, C. Nishimura, W.G. Robinson // Exp. Eye Res. 1989. -Vol. 48. - P. 55-60.

307. Hori, S. Ultrastructural studies on lysosomes in retinal Muller cells of streptozotocin-diabetic rats / S. Hori, T. Nishida, N. Mukai // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci.-1980.-Vol. 19, № 11.-P. 1295-1300.

308. Huang, B. Light-evoked expansion of subretinal space volume in the retina of the frog / B. Huang, C.J. Karwoski // J. Neurosci. 1992. - Vol. 12. - P. 4243-4252.

309. Human Muller glial cells: altered potassium channel activity in proliferative vitreoretinopathy / A. Bringmann, M. Francke, T. Pannicke et al. // Invest.Ophthalmol. Vis Sci 1999. - Vol. 40. - P. 3316-3323.

310. Human retinal pigment epithelium contains two distinct species of superoxide dismutase / D.A. Newsome, E.P. Dobard, M.R. Liles, P.D. Oliver // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 1990. - Vol.31. - P. 2508-2513.

311. Hypoxia protection of photoreceptors against damage by light: signaling of mechanisms / M. Samardzija, A.C. Grimm, A.A. Wenzell et al. // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 2002. - Vol. 43. - P. 3730.

312. Identification of sequential events and factors associated with microglial activation, migration and citotoxicity in retinal degeneration / H. Zeng, X. Zhu, C. Zhang et al. // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 2005. - Vol. 46. - P. 2992-2999.

313. Imesch, P.D. Clinicopathology correlation of intraretinal microvascular abnormales / P.D. Imesch, C.D. Bindley, I.H. Wallow // Retina. 1997. - Vol. 17, №4.- P. 321-329.

314. Immunohistochemical localization of blood-retinal barrier breakdown in human diabetics / S.A. Vinores, C. Gadegbeku, P.A. Campochiaro, W.R. Green // Am. J. Pathol. 1989. - Vol. 134. - P. 231-235.

315. Impaired retinal angiogenesis in diabetes / A.W. Stitt, C. McGoldrick, R.A. McCaldin et al. // Diabetes. 2005. - Vol. 54. - P. 785-794.

316. In vivo protection of photoreceptors from light damage by pigment epithelium-derived factor in vivo / W. Cao, J. Tombran-Tink, R. Elias et al. // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 2001. - V. 42. - P. 1646-1652.

317. Increased susceptibility to light damage in an arrestin knockout mouse model of oguchi disease / J. Chen, M.I. Simon, M.T. Matthes et al. // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 1999. - Vol. 40. - P. 2978-2982.

318. Increased NADH oxidase activity in the retina of the BBZ/Wor diabetic rat / E.A. Ellis, M.B. Grant, F.T. Murray et al. / Free Radic. Biol. Med. 1998. - V.24. - P. 111-120.

319. Increased capillary vulnerability in diabetic retinopathy / U. Fuchs, W. Tirius, S. Gonschorek, J. vom Scheidt // Klin. Monatsbl. Angenheilkd. 1988. - Vol. 192, № 3.-P. 234-236.

320. Increased platelet aggregation in diabetes mellitus / H.C. Kwaan, J.A. Colwell, S. Cruz et al. // J. Lab. Clin. Med. 1972. - Vol.80. - P. 236-246.

321. Increased susceptibility to constant light in nr and pcd mice with inherited retinal degenerations / M.M. LaVail, G.M. Gorrin, D. Yasumura, M.T. Matthes // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 1999. - Vol. 40 - P. 1020-1024.

322. Inhibition of lysosomal degradative functions in RPE cells by a retinoid component of lipofuscin / F.G. Holz, F. Schutt, J. Kopitz et al. // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 1999. - Vol. 40. - P. 737-743.

323. Insulin and Fibroblast Growth Factor 2 activate a neurogenic program in Mtiller Glia of the chicken retina / A.J. Fischer, C.R. McGuire, B.D. Dierks, T.A. Reh // J. Neuroscience. 2002. - V. 22, № 21. - P. 9387-9398.

324. Integrin-mediated neutrophil adhesion and retinal leukostasis in diabetes F.C. Barouch, R. Miyamoto, J.R. Allport et al. // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 2000. -Vol. 41.-P. 1153-1158.

325. Integrin-mediated neutrophiladhesion and retinal leukostasis in diabetes / F. Canas-Barauch, K. Miyamoto, J. Alport et al. // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 2000. -Vol. 41.-P. 1153-1158.

326. Involvement of Caspase-3 in Photoreceptor Cell Apoptosis Induced by In Vivo Blue Light Exposure / J. Wu, A. Gorman, X. Zhou et al. // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 2002. - Vol. 43. - P. 3349-3354.

327. Ishibashi, Т. Platelet aggregation and coagulation in the pedogenesis of diabetic retinopathy in rats / T. Ishibashi, K. Tanaka, Y. Taniguchi // Diabetes. 1981. — Vol. 30, №7.-P. 601-606.

328. Ishibashi, T. Ultrastructural of retinal vessels in diabetic patients / T. Ishibashi, H. Inomata // Br. J. Ophthalmol. 1993. - Vol. 77, № 9. - P. 574-578.

329. Ishibashi, T. Cell Biology of intraocular vascular diseases / T. Ishibashi // Jpn. J. Ophthalmol. 2000. - Vol. 44, № 3. - P. 323-324.

330. Ishikawa, A. Accumulation of gamma- aminobutyric acid in diabetic rat retinal Muller cells evidenced by electron microscopic inmunocyto chemistry / A. Ishikawa, S. Ishiguro, H. Tamai // Curr. Eye Res. 1996. - Vol. 15, № 9. - P. 958-964.

331. Jacobs, H. Hypoglycemic action of alloxan / H. Jacobs // Proc. Soc. Exper. Biol. Med. 1937. - Vol. 37, № 2. - P. 407-409.

332. Johnson, D.D. Photically induced retinal damage in diabetic rats / D.D. Johnson, W.K. O'Steen, Т.Е. Duncan // Curr. Eye Res. 1986. - Vol. 5, № 1. - P. 1-7.

333. Kapusta, N.V. Deterioration of action of oxygen in easy damage retina in white rats / N.V. Kapusta, B.Y. Zak // Biull. Eksp. Biol. Med. 1987. - Vol. 104, № 7. - P. 102-104.

334. Katz, H.L. Retinal light damage reduced autofluorescent pigment deposition in the retinal pigment epithelium / H.L. Katz, G.E. Eldred // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 1989. - Vol. 30, № 1. - p. 37-43.

335. Kayatz, P. Ultrastructural localization of light-induced lipid peroxides in the rat retina / P. Kayatz, K. Heimann, U. Schraermeyer // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. -1999. Vol. 40. - P. 2314-2321.

336. Kern, T.S. Vascular lesions in diabetes are distributed non-uniformly within retina / T.S. Kern, R.L. Engerman // Exp. Eye Res. 1995. - Vol. 60, № 5. - P. 545-549.

337. Kern, T. Pharmacological inhibition of diabetic retinopathy / T.S. Kern, R.L. Engerman // Diabetes. 2001. - Vol. 50. - P. 1636-1642.

338. KGF prevents oxygen-mediated damage in ARPE-19 cells / R.C. Geiger, C.M. Waters, D.W. Kamp, M.R. Glucksberg // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 2005. -V.46, №9. - P. 3435-3442.t

339. Kimura, H. A new model of subretinal neovascularization in rabbit / H. Kimura, T. Sakamoto, D.N. Hinton // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 1995. - Vol. 36, № 10. -P. 2110-2119.

340. King, G. Diabetic vascular dysfunction: a model of excessive activation of protein kinase С / G. King, H. Ishii, D. Koya // Kidney Int. 1997. - Vol. 52, suppl. 60 - P. S77-S85.

341. King, G.L. Pigment-epithelium-derived factor—a key coordinator of retinal neuronal and vascular functions / G.L. King, K. Suzuma // N. Engl. J. Med. 2000. -Vol. 342.-P. 349-351.

342. Kimelberg, H.K. Cell volume in the CNS: regulation and implications for nervous system function and pathology / H.K. Kimelberg // Neuroscientist. 2000. Vol. 6. -P. 14-25.

343. Kohnen, S. Light-induced damage of the retina through slit-lamp photography / S. Kohnen I I Graefes Arch. Clin. Exp. Ophthalmol. 2000 - Vol. 238, № 12. - P. 956959.

344. Korre, G.E. Infrastructure of Blood-Retinal Barrier Permeability in Rat Phototoxic Retinopathy / G.E. Korre, R.W. Bellhorn, M. Burns //Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 1983. - Vol. 24. - P. 962-971.

345. Kowluru, R.A. Abnormalities of retinal metabolism in diabetes or experimental galactosemia. Antioxidant defense system / R.A. Kowluru, T.S. Kern, R.L. Engerman // Free Radic. Biol. Med. 1997 - Vol. 22. - P. 587-592.

346. Kowluru, R.A. Effect of long-term administration of antioxidants on the development of retinopathy / R.A. Kowluru, J. Tang, T.S. Kern // Diabetes. 2001. -Vol. 50.-P. 1938-1942.

347. Kowluru, R.A. Role of Interleukin-1 (beta) in the development of retinopathy in rats: effect of antioxidants / R.A. Kowluru, S. Odenbach // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 2004. - Vol. 45, № 11. - P. 4161-4166.

348. Lai, Y.L. Age-related and light-associated retinal changes in Fischer rats / Y.L. Lai, R.O. Jacoby, A.M. Jonas // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 1978. -Vol. 17. - P. 634-638.

349. LaRochelle, W. Platelet-derived growth factor-A-induced retinal gliosis protects against ischemic retinopathy / W. LaRochelle, D.J. Zack, P.A. Campochiaro // Am. J. of Pathology. 2000. - Vol. 156. - P. 477-487.

350. Lazarow, A. Experimental diabetes / A. Lazarow. Oxford, 1954.- 215 p.

351. Lazarow, A. Protective effects glutathione and cysteine aganist alloxan diabetes in the rat / A. Lazarow // Proc. Soc. Exper. Biol. Med. 1946. - Vol. 61, № 4. - P. 441447.

352. Le Devehat, C. Relationship between hemoreological and microcirculatory abnormalities in diabetes mellitus / C. Le Devehat, T. Kholndabandehlou, M. Vimeux // Diabetes et metabolisme. 1994. - Vol. 20, № 4. - P. 401-404.

353. Leber's congenital amaurosis: an update / E. Fazzi, S.G. Signorini, B. Scelsa et al. // Eur. J. Paediatr. Neurol. 2003. - Vol. 7. - P. 13-22.

354. Leptin stimulates ischemia-induced retinal neovascularization / E. Suganami, H. Takagi, H. Ohashi et al. // Diabetes. 2004. - Vol. 53. - P. 2443-2448.

355. Leschey, K.H. Growth factor responsiveness of human retinal pigment epithelial cells / K.H. Leschey // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 1990. - Vol. 31, № 5. - P. 839846.

356. Lee, F.L. Effect of continuous versus multiple intermittent light exposures on retina / F.L. Lee, D.Y. Yu, M.O. Tso // Curr.Eye.Res. -1990. Vol. 49, № 2-3. - P. 104-111.

357. Leukocyte-mediated endothelial cell injury and death in the diabetic retina / A.M. Joussen, T. Murata, A. Tsujikawa et al.// Am. J. Pathol. 2001. - Vol. 158. - P. 147152.

358. Li, J.D. Light-dependent hydration of the space surrounding photoreceptors in the cat retina / J.D. Li, V.I. Govardovskii, R.H. Steinberg // Vis. Neurosci. 1994. - Vol. 11.-P. 743-752.

359. Li, F. Alleviation of constant-light-induced photoreceptor degeneration by adaptation of adult albino rat to bright cyclic light / F. Li, W. Cao, R.E. Anderson / Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 2003. - Vol. 44. - P. 4968-4975.

360. LiethAlistair, E.S. Glial reactivity and impaired glutamate metabolism in short — term experimental diabetic retinopathy diabetes / E.S. LiethAlistair, AJ. Barber, B. Xu // New York. 1998. - Vol. 47, № 5. - P. 815-823.

361. Light damage in the rat retina: glial fibrillary acidic protein accumulates in Muller cells in correlation with photoreceptor damage / S. de Raad, P.J. Szczesny, K. Munz, C.E. Reme // Ophthalmic. Res. 1996. - Vol. 28, № 2. - P. 99-107.

362. Light-induced changes in the neuroretina and retinal pigment epithelium of the albino rat / T. Gray, W.H. Morgan, S.J. Cringle et al. // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. -2004.-Vol. 45.-P. 769.

363. Light-induced apoptosis: differential timing in the retina and piment epithelium / F. Hafezi, A. Marti, K. Munz, C.E. Reme // Exp. Eye Res. 1997. - V. 64, № 6 - P. 963-970.

364. Light-induced retinal damage in pigmented rabbits-1. Histopathological abservations of the retinal course of healing / J. Kozaki, M. Takeuchi, K. Takehashi et al. // Nippon. Ganka Gakkai. Zasshi. 1994. - Vol. 98, № 8. - P. 738-748.

365. Light-induced cell death of retinal photoreceptors in the absence of p53 / A. Marti, F. Hafezi, N. Lansel et al. // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 1998. - Vol. 39. -P. 846-849.

366. Light damage in the rat retina: effect of a radioprotective agent (WR-77913) on acute rod outer segment disk disruptions / C.E. Reme, U.F. Braschler, J. Roberts, J. Dillon // Photochem. Photobiol. 1991. - Vol. 54, № 1. - P. 137-142.

367. Light induced apoptosisis accelerated in transgenic retina oveexpressing human EAT/mcl-1, an anti-apoptotic bcl-2 related gehe / K. Shinodaa, Y. Nakamuraa, K. Matsushita et al. // Br. J. Ophthalmol. 2001. - Vol. 85 - P. 1237-1243.

368. Light-induced retinal damages in mice. Hydrogen peroxide production and superoxide dismutase activity in retina / H. Yamashita, K. Horie, T. Yamomoto et al. // Retina. 1992. - Vol. 12, № 1. - P. 59-66.

369. Limb, G.A. Distribution of TNF alpha and its reactive vascular adhesion molecules in fibrovascular membranes of proliferative diabetic retinopathy / G.A. Limb, A.H. Chignell, W. Grenn // Br. J. Ophthalmol. 1996. - Vol. 80, № 2. - P. 168173.

370. Linsemeier, R.A. Metabolic dependence of photoreceptors on the choroid in the normal and detached retina / R.A. Linsemeier, L. Padnick-Silver // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 2000. - Vol. 41, № 10. - P. 317-323.

371. Lipofuscin accumulation in an organotypic perfusion culture of porcine fundi under oxidative stress and blue light irradiation / M. Hammer, S. Richter, K. Kobuch et al. // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 2005. - Vol. 46. - P. 251.

372. Lipofuscin accumulation, abnormal electrophysiology, and photoreceptor degeneration in mutant ELOVL4 transgenic mice: A model for macular degeneration / G. Karan, C. Lillo, Z. Yang et al. // PNAS. 2005. - Vol. 102, № 11. - P. 4164-4169.

373. Little, H.L. Role of bloods elements in the pathogenesis of diabetic retinopathy / H.L. Little // In "Diabetic Retinopathy" Thieme-Stratton Inc. New York, 1983. P. 136-147.

374. Long-term Follow-up of iatrogenic phototoxicity / E.A. Postel, J.S. Pulido, A.B. Gordon et al. // Arch. Ophthalmol. 1998. - Vol. 116. - P. 753-757.

375. Long-Term Effects of Light Damage on the Retina of Albino and Pigmented Rats / M. Wasowicz, C. Morice, P. Ferrari et al. // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 2002. -Vol. 43.-P. 813-820.

376. Loss of synchronized retinal phagocytosis and age-related blindness in mice lacking vB5 integrin / E.F. Nandrot, Y. Kim, S.E. Brodie et al. // JEM. 2004. - Vol. 200, № 12.-P. 1539-1545.

377. Ludvigson, M.A. Immunohistochemical localization of aldose reductase II. Rat eye and kidney / M.A. Ludvigson, R.I. Sorenson // Diabetes. -1980. Vol. 29. - P. 450-459.

378. Lucas, D.R. The toxic effect of sodium glutamate on the inner layers of the retina / D.R. Lucas, S.P. Newhouse // Am. Med. Assoc. Arch. Ophthalmol. 1957. - Vol. 58.-P. 193-201.

379. Lutty, G.A. Localisation of vascular endothelial growth factor in human retina and choroid / G.A. Lutty, D.S. McLeod, C. Merges // Arch. Ophthalmol. 1996. -Vol. 114, №8.-P. 971-977.

380. Macular pigment and risk for age-related macular degeneration in subjects from a Northern European population / S. Beatty, I.J. Murray, D.B. Henson et al. // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 2001. - Vol. 42. - P. 439-446.

381. Macular phototoxicity caused by fiberoptic endoillumination during pars plane vitrectomy / M. Michels, H. Lewis, G.W. Abrams et al. // Am. J. Ophthalmol. -1992.-Vol. 14, №3. -P. 287-296.

382. Majka, S. Tumor necrosis factor alpha (TNFa) and protease expression in retinal neovascularisation / S. Majka, J. Gidday, S. Colombo // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 2000. - Vol. 41, № 4. - P. 241-250.

383. Mannose 6-phosphorylated proteins are required for tumor necrosis factor-induced apoptosis / C. Tardy, H. Autefage, V. Garcia et al. //J. Biol. Chem. 2004. -Vol. 279.-P. 52914-52923.

384. Maske, H. Role of zinc in insulin secretion in diabetes / H. Maske / Ed by R.H. Williams, 1960.-P. 46-51.

385. McDonald, H.R. Light-induced maculopathy from the operation microscope in extracapsular cataract extraction and intraocular lens implantation / H.R. McDonald, A.R. Irvine // Ophthalmol. 1983. - Vol. 90. - P. 945-951.

386. Meier, M. Protein kinase С activation and its pharmacological inhibition in vascular disease / M. Meier, G.L. King // Vascular Medicine. 2000. - Vol. 5. - P. 173-185.

387. Meyer-Rochow, V.B. Risks, especially for the eye, emanating from the rise of solar UV-radiation in the Arctic and Antarctic regions / V.B. Meyer-Rochow// Int. J. Circumpolar Health. 2000. - Vol. 59, №1. - P. 38-51.

388. Michels, M. Operating microscope-induced retinal phototoxicity: pathophisiology, chemical manifestations and revention / M. Michels, P.Jr. Sternberg // Surv. Ophthalmol. 1990. - Vol. 34, № 4. - P. 237-252.

389. Microglia-Muller glia cell interactions control neurotrophic factor production during light-induced retinal degeneration / T. Harada, C. Harada, S. Kohsaka et al. // Journal ofNeuroscience. 2002. - Vol. 22, №1. - P. 9228-9236.

390. Middleton, E. Effects of flavonoids on immune and inflammatory cell function/ E. Middleton, C. Kandaswami // Biochem. Pharmacol. 1992. - Vol. 43. - P. 11671179.

391. Miller, J.W. Vascular endothelial growth-factor/vascular permeability factor is temporally and spatially correlated with ocular angiogenesis in primate model / J.W. Miller, A.P. Adamis, D.T. Shima // Am. J. Pathol. 1994. - Vol. 145. - P. 574-584.

392. Miller, J.W. Vascular endothelial growth factor and ocular neovascularization / J.W. Miller //Am. J. Pathol. 1997. - Vol. 151. - P. 13-23.

393. Miceli, M.V. Evaluation of oxidative processes in human pigment epithelial cells associated with retinal outer segment phagocytosis / M.V. Miceli, M.R. Liles, D.A. Newsome // Exp. Cell Res. 1994. - Vol. 214. - P. 242-249.

394. Microscope-induced retinal phototoxicity in cataract surgery of short duration / G. Kleinmann, P. Hoffman, E. Schechtman, A. Pollack // Ophthalmology. 2002. - V. 109, №2.-P. 334-338.

395. Middleton, E. Effects of flavonoids on immune and inflammatory cell function/ E. Middleton, C. Kandaswami // Biochem. Pharmacol. 1992. - Vol. 43. - P. 11671179.

396. Minocycline reduces proinflammatory cytokine expression, microglial activation, and caspase-3 activation in a rodent model of diabetic retinopathy / J.K. Krady, A. Basu, C.M. Allen et al. // Diabetes. 2005. - Vol. 54. - P. 1559-1565.

397. Mitochondrial release of caspase-2 and -9 during the apoptotic process / S.A. Susin, H.K. Lorenzo, N. Zamzami et al. // J. Exp. Med. 1999. - Vol. 189. - P. 381394.

398. Mizutani, M. Accelarated death of retinal microvascular cells in human and experimental diabetic retinopathy / M. Mizutani, T.S. Kern, M. Lorenzi // J. Clin. Invest. 1996. - Vol. 97, № 12. - P. 2883-2890.

399. Mizutani, M. Muller cell changes in human diabetic retinopathy / M. Mizutani, C. Gerhardinger, M. Lorenzi //Diabetes. 1998. - Vol. 47. - P. 445-449.

400. Moriya, M. Progression and reversibility of early light-induced alterations in rat retinal rods / M. Moriya, B.N. Barker, T.P. Williams // Cell and tissue Res. 1986. -Vol. 246, №3.-P. 607-621.

401. Muller cells and diabetic retinopathy / S.A. Schellini, E.A. Gregorio, C.T. Spadello et al. // Braz. J. Mrd. Biol. Res. 1995. - Vol. 28, № 9. - P. 977-980.

402. Multiple Growth factors, cytokines, and neurotrophins rescue photoreceptors from the damaging effects of constant light / M.M. LaVail, K. Unoki, D. Yasumura et al. //Proceedings of the National Academy of Sciences. 1992. - Vol. 89. - P. 1124911253.

403. Mutational analysis and clinical correlation in Leber congenital amaurosis / S.R. Dharmaraj, E.R. Silva, A.L. Pina et al. // Ophthalmic. Genet. 2000. - V. 21. - P. 135-150.

404. Mutations in RPE65 cause autosomal recessive childhood-onset severe retinal dystrophy / S.M. Gu, D.A. Thompson, C.R. Srikumari et al. // Nat. Genet. 1997. -Vol. 17.-P. 194—197.

405. Mutation analysis of 3 genes in patients with Leber congenital amaurosis / A.J. Lotery, P. Namperumalsamy, S.G. Jacobson et al. // Arch. Ophthalmol. 2000. - Vol. 118.-P. 538-543.

406. Mutations in the RPE65 gene in patients with autosomal recessive retinitis pigmentosa or leber congenital amaurosis / H. Morimura, G.A. Fishman, S.A. Grover et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1998. - Vol. 95. - P. 3088-3093.

407. Nagelhus, E.A. Neuronal-glial exchange of taurine during hypo-osmotic stress: a combined immunocytochemical and biochemical analysis in rat cerebellar cortex / E.A. Nagelhus, A. Lehmann, O.P. Ottersen // Neuroscience. 1993. - Vol. 54. - P. 615-631.

408. Nelson, L. Boquist-factors affecting the inhibition by alloxan and effect of streptozotocin on phosphate transport in isolated mouse mitochondria / L. Nelson // Acta diabetol. Latina. 1982. - Vol. 19, № 4. - P. 319-329.

409. Neuroprotective and Blood-Retinal Barrier-Preserving Effects of Cannabidiol in Experimental Diabetes / A.B. El-Remessy, M. Al-Shabrawey, Y. Khalifa et al. // American Journal of Pathology. 2006. V.168. - P. 235-244.

410. Neuroprotective effect of hepatocyte growth factor against Photoreceptor degeneration in rats / S. Machida, M. Tanaka, T. Ishii et al. // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 2004. - Vol. 45. - P. 4174-4182.

411. Neuroprotection of photoreceptors by minocycline in light-induced retinal degeneration / C. Zhang, B. Lei, T.T. Lam et al. // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. -2004. Vol. 45. - P. 2753-2759.

412. Neutrophils are associated with capillary closure in spontaneously diabetic monkey retinas / S.Y. Kim, M.A. Johnson, D.S. McLeod et al. // Diabetes. 2005.1. Vol. 54.-P. 1534-1542.

413. Newman, E. The Muller cell: a functional elements of the retina / E. Newman, A. Reichenbach. Ti'S, 1996. - P. 307-311.J

414. Newman, E.A. Calcium increases in retinal glial cells evoked by light-induced neuronal activity / E.A. Newman // Neuroscience. 2005. - Vol. 25, № 23. - P. 55025510.

415. Nicholson, С. Extracellular space structure revealed by diffusion analysis / C. Nicholson, E. Sykov // Trends Neurosci. 1998. - Vol. 21. - P. 207-215.

416. Nixon, R.A. The neuronal endosomal-lysosomal system in Alzheimer's disease / R.A. Nixon, P.M. Mathews, A.M. Cataldo // J. Alzheimers Dis. 2001. - Vol. 3. - P. 97-107.

417. Ng, T.F. Light-induced migration of retinal microglia into the subretinal space / T.F. Ng, J.W. Streilein // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 2001. - Vol. 42. - P. 33013310.

418. Nguyen-Legros, J. Renewal of photoreceptor outer segments and their phagocytosis by the retinal pigment epithelium / J. Nguyen-Legros, D. Hicks // Int. Rev. Cytol. 2000. - Vol. 196. - P. 245-313.

419. Noji, S. Expression pattern of acidic and basic fibroblast growth factor genes in adult rat eyes / S. Noji, T. Matsuo, E. Kojama // Biochem. Biophys. Res. Commun. -1990. Vol. 168, № 1. - P. 343-349.

420. O'Callaghan, J.P. Quantification of glial fibrillary acidic protein: comparison of slot-immunofinding assays with a novel sandwich / J.P. O'Callaghan // ELISA Neurotox. Zeal. Terabol. 1991. - Vol. 13 - P. 270-281.

421. Occludin: a novel integral protein localizing at light junctions / M. Furuse, T. Hirase, M. Ith et al. // J.Cell Biol. 1993. - Vol. 123. - P. 1777-1788.

422. Ogata, N. Expression of fibroblast growth factor mRNA in developing choroidal neovascularization / N. Ogata, M. Matsushima, Y. Takada // Curr. Eye Res. 1996. -Vol. 15,№ 10.-P. 1008-1018.

423. Ogura, Y. In vivo evaluation of leucocyte dinamics in the retinal and choroidal circulation / Y. Ogura // Jpn. J. Ophthalmol. 2000. - Vol. 44, № 3. - P. 322-323.

424. Oligodendrocyte dysfunction after induction of experimental anterior optic nerve ischemia / N.G. Cohen, Y. Guo, F. Margolis et al. // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. -2005. V.46. - P. 2716-2725.

425. Oliver, P.D. Mitochondrial superoxide dismutase in mature and developing human retinal pigment epithelium / P.D. Oliver, D.A. Newsome // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 1992. - Vol. 33. - P. 1909-1918.

426. Olson, J.E. Brain water content, brain blood volume, blood chemistry, and pathology in a model of cerebral edema / J.E. Olson, L. Mishler, R.V.W. Dimlich // Acta. Neuropathol. 1990. - Vol. 69. - P. 54-65.

427. Orzalesi, N. Exposure to the light of an operating microscope / N. Orzalesi // Graefes Arch. Clin. Exp. Ophthalmol. 1993. - Vol. 231, № 11. - P. 674-679.

428. Overexpression of vascular endothelial growth factor in the retinal pigment epithelium leads to the development of choroidal neovascularization / K. Spilsbury, K.L. Garrett, W.Y. Shen et al. // Am. I. Pathol. 2000. - Vol. 157. - P. 135-144.

429. Oxidative damage and protection of the RPE / J. Cai, K.S. Nelson, PJr. Sternberg et al. // Prog. Retin. Eye Res. 2000. - Vol. 19, № 2. - P. 205-221.

430. Parver, L.M. Sensitivity to retinal light damage and surgical blood oxygen levels / L.M. Parver, R. Mitchard, W.T. Ham // Ann. Ophthalmol. 1989. - Vol. 21, № 10. -P. 386-391.

431. Peripheral choriovitreal neovascularization in proliferative diabetic retinopathy: histopathologic and ultrastructural study / T. Ishibashi, T. Murata, T. Kohno et al. // Ophthalmologics 1999. - Vol. 213, № 3. - P. 154-158.

432. Phillips, G.D. Transforming growth factor- beta stimulation of angiogenesis: an electron microscopic study / G.D. Phillips // J. Submicrosc. Cytol. Pathol. 1993. -Vol. 25, №2.-P. 149-155.

433. Photic injury triggers apoptosis of photoreceptor cells / C.J. Chang, A.S. Abler, J. Ful et al. // Res. Commun. Mol. Pathol. Pharmacol. 1996. - Vol. 92, № 2. - P. 177189.

434. Photodinamic therapy of experimental choroidal neovascularization using lipoprotein-deliverd benzoporphyrin / J.W. Miller, A.W. Walsh, M. Kramer et al. // Arch. Ophthalmol. 1995. - Vol. 113, № 6. - P. 810-818.

435. Photophysical studies on human retinal lipofuscin / E.R. Gaillard, S.J. Atherton, G. Eldered, J. Dillan // Photochem. Photobiol. 1995. - Vol. 61, № 5. - P. 448-453.

436. Photoreceptor autophagy: effects of light history on number and opsin content of degradative vacuoles / C.E. Reme, U. Wolfrum, C. Imsand et al. // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 1999. - Vol. 40 - P. 2398-2404.

437. Pigment epithelium-derived factor in the monkey retinal pigment epithelium and interphotoreceptor matrix: apical secretion and distribution / S.P. Becerra, R.N. Fariss, Y.Q. Wu et al. //Exp Eye Res. 2004. - V.78. - P. 223-234.

438. Pigment epithelium-derived factor: a potent inhibitor of angiogenesis / D.W. Dawson, O.V. Volpert, P. Gillis et al. // Science. 1999. - V.285. - P. 245-248.

439. Photic injury triggers apoptosis of photoreceptor cells / A.S. Abler, C.J. Chang, J. Ful et al. // Res. Commun. Mol. Pathol. Pharmacol. 1996. - V. 92, № 2. - P. 177189.

440. Platelet adhesiveness and aggregation in relation to diabetic retinopathy / H. Heath, W.D. Brigden, J.V. Canever et al. // Diabetologia. 1971. - № 7. - P. 308315.

441. Platelets Accumulate in the Diabetic Retinal Vasculature Following Endothelial Death and Suppress Blood-Retinal Barrier Breakdown / K. Yamashiro, A. Tsujikawa, S. Ishida et al. //Am. J. Pathol. 2003. - Vol. 163. - P. 253-259.

442. Post-traumatic hyperlipofiiscinosis in the human retinal pigment epithelium / M.K. Ко, W.R. Lee, N.M. McKechnie, B. Hall-Parker // Br. J. Ophthalmol. Vis. Sci.- 1991. Vol. 75, № 1. - P. 54-60.

443. Poulsen, J.D. Diabetes and anterior pituitary deficiency / J.D. Poulsen // Diabetes.- 1953.-Vol. 2.-P. 7-12.

444. Power, W. J. Welding arc maculopathy and fluphenazine / W. J. Power, S. P. Travers, D. J. Mooney // Br. J. Ophthalmol. -1991.- Vol. 75, № 7. P. 433-435.

445. Prevalence of micro and macroalbuminuria arterial hypertension, retinopathy and large vessel disease in European type 2 (non-insulin-dependent) diabetic patients /

446. М.А. Gall, P. Rossing, P. Skott et al. // Diabetologia. 1991. - Vol. 34, № 9. - P. 471-477.

447. Prevention of pericyte loss by Trolox in diabetic rat retina / N.H. Ansari, W. Zhang, E. Fulep, A. Mansour // Toxicol. Environ. Health. 1998. - V. 24. - P. 467475.

448. Prevention of photoreceptor apoptosis by activation of the glucocorticoid receptor / A. Wenzel, C. Grimm, M.W. Seeliger et al. // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 2001. -Vol. 42.-P. 1653-1659.

449. Protective effect of halothane anesthesia on retinal light damage: inhibition of metabolic rhodopsin regeneration / C. Keller, C. Grimm, A. Wenzel et al. // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 2001 - Vol. 42. - P. 476-480.

450. Protective effect of alpha-tocopherol in retinal light damage of pigmented rabbits evaluation by nitro blue tetrazolium staining / J. Kozaki, M. Takeuchi, K. Takehashi et al. // Nippon. Ganka Gakkai Zasshi. - 1995. - Vol. 99, № 2. - P. 161-165.

451. Protection by dimethylthiourea against retinal light damage in rats / D.T. Organisciak, R.M. Darrow, Y.I. Yiang et al. // Invest.Ophthalmol. Vis Sci 1992. -Vol. 33, № 5. - P. 1599-1609.

452. Protein tyrosine nitration in the mitochondria from diabetic mouse heart. Implications to dysfunctional mitochondria in diabetes / I.V. Turko, L. Li, K.S. Aulak et al. // J. Biol. Chem. 2003. - Vol. 278, № 36. - P. 33972-33977.

453. Puro, D.G. Retinal glial cell proliferation and ion channels: a possible link / D.G. Puro, F. Roberge, C-C. Chant // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 1989. - Vol. 30, № 3. -P. 521-529.

454. Rassam, S.M. The effect of experimental hypertension on retinal vascular autoregulation in humans: a mechanism for the progression of diabetic retinopathy / S.M. Rassam, V. Patel, E.M. Kohner // Exp. Physiol. 1995. - Vol. 80, № 1. - P. 5368.

455. Rapp, L.M. Separate mechanisms for retinal damage by ultraviolet-A and mid-visible light / L.M. Rapp, B.L. Tolman, H.S. Dhindsa // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. -1990.-Vol. 31, №6.-P. 1186-1190.

456. Rapp, L.M. Evidence aganist melanin as the mediator of retinal phototoxicity by short-wavelenght light / L.M. Rapp, S.C. Smith // Exp. Eye Res. 1992. - Vol. 54, № l.-P. 55-62.

457. Rapp, L.M. Reduced rate of rod outer segments disk synthesis in photoreceptor cells recovering from UVA light damage / L.M. Rapp, P.L. Fisher, H.S. Dhindsa // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 1994. - Vol. 35, № 9. - P. 3540-3548.

458. Relocalization of apoptosis-inducing factor in photoreceptor apoptosis induced by retinal detachment in vivo / T. Hisatomi, T. Sakamoto, T. Murata et al. // Am. J. Pathol. 2001. - Vol. 158: - P. 1271 - 1278.

459. Rescue of photoreceptors from the damaging effects of constant light by midkine, a retinoic acid-responsive gene product / K. Unoki, N. Ohba, H. Arimura et al. // Invest.Ophthalmol. Vis. Sci. 1994. -Vol. 35, № 12. - P. 4063-4068.

460. Response of capillary cell death to aminoguanidine predicts the development of retinopathy: comparison of diabetes and galactosemia / T. Kern, J. Tang, M. Mizutani et al. // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 2000. - V. 41. - P. 3972-3978.

461. Retinal light damage vs. normal aging of rats: altered morphology, intermediate filament expression, and nuclear organization of Muller cells / J. Grosche, D. Grimm, N. Clemens, A. Reichenbach // J. Hirnforsch. 1997. - Vol. 38, № 4. - P. 459-470.

462. Retinal damage induced by visible blue and near-infrared light of an operating microscope / K. Mori, S. Yoneya, T. Iida et al. // Nippon Ganka Gakkai Zasshi. -1992. Vol. 96, № 9. - P. 1112-1119.

463. Retinal damage by light in rats / W.K. Noell, U.S. Walker, B.S. Kang, S. Berman // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 1966. - Vol. 5. - P. 450-473.

464. Retinal light damage in rats exposed to intermittent light. Comparison with continuous light exposure / D.T. Organisciak, Y.L. Jiang, H.M. Wang et al. // Invest. Ophthalmo.l Vis. Sci. 1989. - Vol. 30, № 5. - P. 795-805.

465. Retinal light-damage in albino rats: lysosomal enzymes, rhodopsin and age / Y.S. Penn, B.N. Baker, A.G. Howard, T.P. Williams // Exp.Eye Res. 1985. - Vol. 41, № 3.-P. 275-284.

466. Retinal ganglion cell death in experimental glaucoma and after axotomy occurs by apoptosis / H.A. Quigley, R.W. Nickells, L.A. Kerrigan et al. // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 1995. - Vol. 36: - P. 774 - 786.

467. Retinal damage by light in the golden hamster: an ultrastructural study in the retinal pigment epithelium and Bruch's membrane / G. Thumann, K.U. Bartz-Schmidt, N. Kociok et al. // J. Photochem. Photobiol. 1999. - Vol. 49, № 2-3. - P. 104-111.

468. Reynolds, E. The use of led citrate at hight pH as an electron-opaque stain in electron microscopy / E. Reinolds // J.Cell Biol.- 1963. Vol. 17, № 2. - P. 208-210.

469. Rhodopsin-mediated blue-light damage to the rat retina: effect of photoreversal of bleaching / C. Grimm, A. Wenzel, T.P. Williams et al. // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 2001. - Vol. 42. - P. 497-505.

470. Ribelayga, С. A circadian clock and light/dark adaptation differentially regulate adenosine in mammalian retina / C. Ribelayga, S.C. Mangel // J. Neurosci. 2005. -Vol. 25.-P. 215-222.

471. Robb, S. J. Nitric oxide protects astrocytes from oxidative stress / S. J. Robb, J.R. Connor // Ann. N. Y. Acad. Sci. 2002. - Vol. 962, № 1. - P. 22-38.

472. Rodriguez-Sains, R. Lookin at the sun: A danger to the eyes / R. Rodriguez-Sains // Prim. Care and Cancer. 2001. - Vol. 21, № 5. - P. 34-36.

473. Roffler-Tarlov, S. Programmed cell death in the absence of c-Fos and c-Jun / S. Roffler-Tarlov, JJ.G. Brown, E. Tarlov // Development. 1996. - Vol. 122. - P. 1-9.

474. Role of pyruvate carboxylase in facilitation of synthesis of glutamate and glutamine in cultured astrocytes / W.C. Gamberino, D.A. Berkich, C.S. Lynch et al. // Jn. Rochem- 1997. Vol. 69. - P. 2312-2375.

475. Role of neutrophils in breakdown of the blood-retinal barrier following inbravibreal injection of plabelet-activating factor / D. Smith, E.K. Lee, P. Saloupis et al. // Exp. Eye Res. 1994. - Vol. 59, № 4. - P. 425-432.

476. Romano, C. Delayed excitoboxic neurodegeneration induced by excitatory amino acid agonists in isolated retina / C. Romano, M.T. Price, S. W. Olney // J. Neurochem. 1995.-Vol. 65.-P. 59-67.

477. Ross, W.H. Light-induced maculopathy / W.H. Ross // Am. J. Ophthalmol. -1984. Vol. 98, № 4. - P. 488-493.

478. Ross, R. The biology of platelet-derived growth factor / R. Ross, W. Raines, D.F. Bowen-Pope // Cell. 1986. - Vol. 46, № 2. - P. 155-169.

479. Rosner, M. Therapeutic parameters of methylprednisalone treatment for retinal photic injury in a rat model / M. Rosner, T.T. Lam, M.O. Tso// Res. Commun Chem.

480. Pathol. Pharmacol. 1992. - Vol. 77, № 3. -P. 299-311.

481. Roque, R.S. Isolation and culture of retinal microglia / R.S. Roque, R.B. Caldwell // Curr. Eye. Res. 1993. - Vol. 12, № 3. -P. 285-290.

482. Rowland, S.L. Injuring retinal threshold of cyclic light for all rats / S.L. Rowland, W.W. Dawson // Curr. Eye. Res. 1986. - Vol. 2. - P. 137-147.

483. Rungger-Brandle, E. Glial reactivity, an early feature of diabetic retinopathy / E. Rungger-Brandle, A.A. Dosso, P.M. Leuenberger // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. -2000. Vol. 41, № 7. -P. 1971-1980.

484. Sacmar, T.P. Rhodopsin: insights from recent structural studies / T.P. Sacmar // J. Mol. Biol. 2002. - V. 22316, №3 - P. 693-709.

485. Sanyal, S. Retinal damages by the constant light in chimaeric "mouses ": values for defensive dug melanin / S. Sanyal, G.H. Zeilmaker // Exp. Eye Res. 1988. — Vol. 46, №5.-P. 731-743.

486. Sato, Y. Autocrine activities of basic fibroblast growth factor: regulation of endothelial cells movement, plasminogen activator synthesis, and DNA synthesis / Y. Sato, D.B. Rifkin // J. Cell. Biol. 1988. - Vol. 107, № 3. - P. 1199-1205.

487. Sato, Y., Autocrinological role of basic fibroblast growth factor on tube formation of vascular endothelial cells in vitro / Y. Sato, T. Shimada, R. Takaki // Biochem. Biophys. Res. Com. 1991. - Vol. 180, №2.-P. 1098-1102.

488. Shaban, H. Cytochrome с oxidase inhibition by N-retinyl-N-retinylidene ethanolamine, a compound suspected to cause age-related macula degeneration / H. Shaban, P. Gazzotti, C. Richter // Arch. Biochem. Biophys. 2001. - Vol. 394. - P. 111-116.

489. Shaban, H. A2E and blue light in the retina: the paradigm of age-related macular degeneration / H. Shaban, C. Richter // Biol. Chem. 2002. - Vol. 383. - P. 537-545.

490. Shahinfart, S. A pathologic study of photoreceptor cell death in retinal photic injury / S. Shahinfart, D.P. Edward, M.O. Tso // Curr. Eye. Res. 1991. - Vol. 10, № l.-P. 47-59.

491. Schmidt, R. Der Alloxandiabetes Morphologie, Chemismus und Literatur / R. Schmidt. Harausg. K.Mothes, Leipzig, 1967. -Bd. 1. - 142 s.

492. Schroeder, S. Activated monocytes and granulocytes, capillary nonperfusion and neovascularization in diabetic retinopathy / S. Schroeder, W. Palinski, G. Schmidt-Schonbein//Am. J. Pathol. 1991. - Vol. 139. - P. 81-100.

493. Schultz, G.S. Neovascular growth factors / G.S. Schultz, M.B. Grant // Eye. -1991. Vol. 5, № 2. - P. 170-180.

494. Selektiviti of cinaptocomal membrane function to cerebral cortical hipoxia in newborn piglets / B. Razdan, P.J. Marro, O. Tamella et al. // Brain Res. 1993. - V. 600, №3.-P. 308-314.

495. Sivalingam, A. Basic fibroblast growth factor levels in the vitreous of patients with proliferative diabetic retinopathy / A. Sivalingam, J. Kenney, G.C. Brown // Arch. Ophthalmol. 1990. - Vol. 108, № 6. - P. 869-872.

496. Sliney, D. Safety with lasers and other optical sorces / D. Sliney, H. Wolbarsht // A comprehensive handbook. New York, London: Plenum Press, 1980. P. 1035.

497. Snodderly, D.M. Evidence for protection against age-related macular degeneration by carotenoids and antioxidant vitamins / D.M. Snodderly // Am. J. Clin. Nutr. 1995. - Vol. 62. - P. 1448-1461.

498. Sorbinil Retinopathi Trial Research Group. A randomized trial of sorbinil, an aldose-reductase inhibitor in diabetic retinopathy // Arch. Ophthalmol. 1990. - Vol. 108.-P. 1234-1244.

499. Spectral sensibility of the blood-retinal barrier at the pigment epithelium for blue light in the 400-500 nm range / B.Y. Putting, Y.A. van Best, R.C. Zweipfenning et al. // Graefes Arch. Clin. Exp. Ophthalmol. 1993. - Vol. 231, № 10. - P. 600-606.

500. Srinivasan, B. Microglia-derived pronerve growth factor promotes photoreceptor cell death via p75 neurotrophin receptor / B. Srinivasan, C.H. Roque, B.L. Hempstead // J. Biol. Chem. 2004. - Vol. 279, № 40. - P. 41839-41845.

501. Stevens, B. Response of Schwann cells to action potentials in development / B. Stevens, R.D. Fields // Science. 2000. - Vol. 287. - P. 2267-2271.

502. Stiller, H. Possible damage to the eye caused by light from ophthalmologic equipment / H. Stiller, B. Rassow // Klin. Monatsbl. Augenheilkd. 1991. - Vol. 199, № l.-P. 62-66.

503. Stimulation of neovascularization by the anti-angiogenic factjr PEDF / R.S. Apte, R.A. Bareiro, E. Duh et al. // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 2004. - Vol. 45. - P. 4491-4497.

504. Strauss, O. The retinal pigment epithelium in visual function / O. Strauss // Physiol. Rev. 2005. - Vol. 85. - P. 845-881.

505. Studies of rat and human retinas predict a role for the polyol pathway in human diabetic retinopathy / Z. Dagher, J.S. Park, V. Asnaghi et al. // Diabetes. 2004. - V. 53.-P. 2404-2411.

506. Sulforaphane induces Thioredoxin through the antioxidant-responsive element and attenuates retinal light damage in mice / M. Tanito, H. Masutani, Y-C. Kim et al. // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 2005. - Vol. 46. - P. 979-987.

507. Sullivan, R. Neuronal migration and glial remodeling in degenerating retinas of aged rats and in nonneovascular AMD / R. Sullivan, Ph. Penfold, D.V. Pow // Invest.

508. Ophthalmol. Vis. Sci. 2003. - Vol. 44. - P. 856-865.

509. Sztriha, L. Time-course of changes in water, sodium, potassium and calcium contents of various brain regions in rats after systemic kainic administration / L. Sztriha // Acta. Neuropathol. 1986. - Vol. 70 - P. 169-176.

510. Tate, DJ. Phagocytosis and Н2Ог induce catalase and metallothionein gene expression in human retinal pigment epithelial cells / DJ. Tate, M.V. Miceli, D.A. Newsome // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 1995. - Vol. 36. - P. 1271-1279.

511. Ten-year incidence and progression of diabetic retinopathy / R. Klein, B.E. Klein,

512. E. Moss et al. // Arch. Ophthalmol. 1994. - Vol. 112, № 9. - P. 1217-1228.

513. Terrien, F. De trouble visuel provoque par l'electricite / F. Terrien // Arch. Ophthalmol. 1902. - Vol. 22. - P. 692-696.

514. Thanos, S. Exposure to a solar eclipse causes neuronal death in the retina / S. Thanos, P. Heiduschka, I. Romann // Graefes Arch. Clin. Exp. Ophthalmol. 2001. -Vol. 239, № 10. - P. 794-800.

515. The Diabetic Retinopathy Candesartan Trials (Direct) programme // Diabetes & Metabolism. 2001. - V. 27, №2. - P. 2S4.

516. The TIMAD Studi Group. Ticlopedine treatment reduces the progression of nonproliferative diabetic retinopathy. // Arch. Ophthalmol. 1990. - V. 108. - P. 1577-1583.

517. The DAMAD Study Group. Effect of aspirin alone and aspirin plus dipyridamole in early diabetic retinopathy. A multicentre randomized controlled clinical trial // Diabetes. 1989. - V. 38. - P. 491-498.

518. The role of growyh harmone in the development of diabetic retinopathy / A.A. Alzaid, S.F. Dinnen, LJ. Melton, R.A. Rizza // Diabetes Care. 1994. - Vol. 17, №6.-P. 531-534.

519. The mitochondrial permeability transition / P. Bernardi, R. Colonna, P. Constantini et al. // Biofactors. 1998. - Vol. 8, № 3-4. - P. 273-281,

520. The site of operating microscope light-induced injury on the human retina / R.D. Brod, K.R. Olsen, S.F. Ball, A.J. Packer // Am. J. Ophthalmol. 1989.- V. 107, № 4.- P. 390-397.

521. The effect of ischemic preconditioning on light-induced photoreceptor injury / R.J. Casson, J.P.M. Wood, J. Melena et al. // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 2003. -Vol. 44.-P. 1348-1354.

522. The role of growth factors in proliferative diabetic retinopathy / J.V. Forrester, A. Shafiee, S. Schroder et al. // Eye 1999. - Vol. 7, № Pt2. - P. 276-287.

523. The gene for the retinal pigment epithelium-specific protein RPE65 is localized to human 1рЗ 1 and mouse 3 / C.P. Hamel, N.A. Jenkins, D.J. Gilbert et al. // Genomics.- 1994.-Vol. 20. P. 509-512.

524. The epidemiology of diabetes complications studies IV. Correlates of diabetic background and proliferative retinopathy / J.N. Kostraba, R. Klein, J.S. Dorman et al. //Am. J. Epidemiol. 1991. - Vol. 15, № 4. - P. 381-391.

525. The influence of PH on cellular calcium influx during ischemia / T. Kristian, K. Katsura, G. Gido, B.K. Siesjo // Brain Res. 1994. - Vol. 641, № 2. - P. 295-302.

526. The retina of c-fos"A mice: electrophysiologic, morphologic and biochemical aspects / N. Kueng-Hitz, C. Grimm, N. Lansel et al. // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. -2000.-Vol. 41.-P. 909-916.

527. The role of advanced glycation end products in retinal microvascular leukostasis / T.C.B. Moore, J.E. Moore, Y. Kaji et al. // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 2003. -Vol. 44. - P. 4457-4464.

528. The role of retinal pigments epithelium in the early stage of development of subretinal neovascularization / K. Takahashi, T. Itagaki, K. Yamagishi et al. // Nippon. Ganka. Gakkai. Zasshi. 1990. - Vol. 94, № 1. - P. 3-17.

529. The BB rat: an authentic model of human diabetic retinopathy / A.A.F. Sima, S. Chakrabarti, R. Garcia-Salinas et al. // Curr. Eye Res. 1985. - Vol. 4. - P. 10871092.

530. The combined effects of diabetes and ionising radiation on the rat retina: an ultrastructural study / A.W. Stitt, H.R. Anderson, T.A. Gardiner et al. // Curr. Eye Res.-1994.-Vol. 13, № l.-P. 79-86.

531. The Role of Advanced Glycation End Products in Retinal Microvascular Leukostasis / A.W. Stitt, T.A. Gardiner, D.B. Archer, A.P. Adamis //Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 2003. - Vol. 44. - P. 4457-4464.

532. Time course of neurotrophic factor upregulation and retinal protection against light-induced damage after optic nerve section / K. Valter, S. Bisti, C. Gargini et al. // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. -2005. -Vol. 46. P. 1748-1754.

533. Tinghuai, W. Light-induced oxidative stress in choroidal endothelial cells in mice / W. Tinghuai, J. T. Handa, J.D. Gottsch // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 2005. -Vol. 46.-P. 1117-1123.

534. Tobe, T. A model of experimental choroidal neovascularization in the rat, using krypton laser / T. Tobe, T. Takahashi, H. Ohkuma // Folia. Ophthalmol. Jpn. 1994. -Vol. 45, № 4. - P. 853-856.

535. Tomita, H. Mechanism of protection from light-induced retinal degeneration by the synthetic antioxidant Phenyl-N-tert-Butilnitrone / H. Tomita, Y. Kotake, R.E. Anderson // Invest.Ophthalmol. Vis. Sci. 2005. -Vol. 46. - P. 427-434.

536. Tso, M.O. Retinal photic injury on normal and scorbutic primats / M.O. Tso // Am. J. Ophthalmol. 1987. - Vol. 85. - P. 498-556.

537. Ultrastructural localization of blood-retinal barrier breakdown in diabetic and galactosemic rats / S.A. Vinores, R. McGehee, A. Lee et al. // The J. Histochem. and Cytochem. 1990. - Vol. 38, №. 9. - P. 1341-1352.

538. Under stress, the absence of intermediate filaments from Miiller cells in the retina has structural and functional consequences / A. Lundkvist, A. Reichenbach, C. Betsholtz et al. // J. Cell Science. 2004. - Vol. 117. - P. 3481-3488.

539. Updating on intraoperative light-induced retinal injury / C. Azzolini, R. Brancato, G. Ventury et al. // Int. Ophthalmol. 95. 1994. - Vol. 18, № 5. - P. 269-276.

540. Vascular endothelial growth factor and retinal neovascularisation: a new therapeutic approach for diabetic retinopathy / C. Favard, N. Ortega, F. Bayard, J. Plouet // Diabetes Metab. 1996. - V.22, № 4. - P. 268-273.

541. Vascular endothelial growth factor expression in the retinal pigment epithelium is essential for choriocapillaris development and visual function / A.G. Marneros, J. Fan, Y. Yokoyama et al. // Am. J. of Pathol. 2005. - Vol. 167. - P. 1451-1459.

542. Vascular endothelial growth factor and vascular permeability changes in human diabetic retinopathy / M.K. Mathews, C. Merges, D.S. McLeod et al. // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 1997. - Vol. 38, № 13. - P. 2729-2741.

543. Vascular endothelial growth factor-induced retinal vascular permeability is mediated by intercellular adhesion molecule-1 (ICAM-1) / K. Miyamoto, S. Khosrof, S.E. Bursell, et al. //Am. J. Pathol. 2000. - Vol. 156. - P. 1733-1739.

544. Vascular endothelial growth factor plays a role in hyperpermeability of diabetic retinal vessels / T. Murata, T. Ishibashi, A. Khalil et al. // Ophthalmic. Res. 1995. -Vol. 27, № l.-P. 48-52.

545. VEGF increases retinal vascular ICAM-1 expression in vivo / M. Lu, V. Perez, N. Ma et al. // Invest. Opthalmol. Vis. Sci. 1999. - Vol. 40. - P. 1808-1812.

546. VEGF-initiated Blood-Retinal Barrier Breakdown in Early Diabetes / T. Qaum, Q. Xu, A.M. Joussen et al. // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 2001. - Vol. 42. - P. 2408-2413.

547. Vinores, S.A. Isoforms of platelet-derived growth factor and its receptors in epiretinal membranes: immunolocalization to retinal pigmented epithelial cells / S.A. Vinores // Exp. Eye Res. 1995. - Vol. 60, № 5. - P. 607-619.

548. Wang, H.M. Long-term effect of diaminophenoxypentane in the rat retina protection aganist light damage / H.M. Wang, B.E. Hull, D.T. Organisciak // Curr. Eye. Res. 1994. - Vol. 13, № 9. - P. 655-660.

549. Wangsa-Wirawan, N.D. Retinal oxygen fundamental and clinical acpects / N.D. Wangsa-Wirawan, R.A. Linsenmeier // Arch. Ophthalmol. 2003. - Vol. 121. - P. 547-557.

550. Watkins, D. Effect of sulfhydryl-binding reagents on islet tissue permeability: protection and reversal by thiol compounds / D. Watkins, S. Cooperstein, A. Lazarow // J. Pharmacol. Exper. Ther. 1971. - Vol. 176, № 1-3. - P. 42-51.

551. Williamson, J.R. Basement membrane abnormalities in diabetes mellitus: relationship to clinical microangiopathy / J.R. Williamson, R.G. Tilton, K. Chang //

552. Diabetes metabolism reviews. 1998 - № 4. - P. 339-370.

553. Wolff, S.P. Protein glycation and oxidative stress in diabetes mellitus and ageing / S.P. Wolff, Z.Y. Jiang, J.V. Hunt // Free Radic. Biol. Med. 1991. - Vol. 10, № 5. -P. 339-352.

554. Wu, T. Light-induced oxidative stress in choroidal endothelial cells in mice / T. Wu, J.T. Handa, J.D. Gottsch //Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 2005. - Vol. 46. - P. 1117-1123.

555. Xu, X. The contents of transforming growth factor beta 1 and their receptor cells study in subretinal fluid / X. Xu, H.H. Hu, F. Wang // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. -2000. -Vol. 41, №4. -P. 364.

556. Yanoff, M. Ophthalmology / M. Yanoff, J.S. Dukes. St. Louis, 1999. - 152 p.

557. Yamamoto, S. Effects of TGF-p neutralizing antibody on experimental proliferative vitreoretinopathy / S. Yamamoto, T. Yamamoto, T. Aoki // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 2000. - Vol. 41, № 4. - P. 345. 4

558. Yang, Y. An observation on early morphological changes in retinal microvascular vessels in diabetic rabs / Y. Yang, S. He, Y. Liy // Chung. Hua. Yen. Ко. Tsa. Chin. 1997. - Vol. 33, № 3. - P. 230-232.

559. Young, R.W. The daily rhythm of shedding and degradation of cone outer segment membranes in the lizard retina / R.W. Young //J. Ultrastruct. Res. 1977. -Vol. 61.-P. 172-185.

560. Zamzami, N. Mitochondrial control of nuclear apoptosis / N. Zamzami / J. Exp. Med. 1996. - Vol. 183. - P. 1533-1544.

561. Zeiss, C.J. Proliferation microglia, but not photoreceptors, in the outer nuclear layer of the rd-1 mouse / C.J. Zeiss, E.A. Johnson // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. -2004.-Vol. 45.-P. 971-976.П

Информация о работе

Варакута, Елена Юрьевна
доктора медицинских наук
Томск, 2008
ВАК 03.00.25

Диссертация

Закономерности дегенерации и адаптации сетчатки глаз при экспериментальных ретинопатиях, коррекция биофлавоноидами - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы