Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Возрастные преобразования сократительной активности двенадцатиперстной кишки белой крысы в норме и при химической денервации
ВАК РФ 03.00.13, Физиология
Автореферат диссертации по теме "Возрастные преобразования сократительной активности двенадцатиперстной кишки белой крысы в норме и при химической денервации"
На правах рукописи
ВОРОБЬЕВА ОЛЬГА БОРИСОВНА
ВОЗРАСТНЫЕ ПРЕОБРАЗОВАНИЯ СОКРАТИТЕЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ ДВЕНАДЦАТИПЕРСТНОЙ КИШКИ БЕЛОЙ КРЫСЫ В НОРМЕ И ПРИ ХИМИЧЕСКОЙ ДЕНЕРВАЦИИ
03.00.13 - физиология
03.00.25 - гистология, цитология, клеточная биология
Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук
Ярославль - 2005
Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Ярославский государственный университет им. П.Г. Демидова» Федерального агентства по образованию
Научные руководители:
кандидат биологических наук, доцент Ботяжова Ольга Александровна доктор медицинских наук, доцент Румянцева Татьяна Анатольевна
Официальные оппоненты:
доктор биологических наук, профессор Фатеев Михаил Михайлович кандидат биологических наук Кемоклидзе Константин Гербертович
Ведущая организация
Санкт-Петербургская государственная академия ветеринарной медицины
Защита состоится « 2S » (JWJ^í1_2005 г. в У*^ часов на
заседании диссертационного совета Д 212.307.02 при Ярославском государственном педагогическом университете имени К.Д. Ушинского по адресу: 150000, Ярославль, ул. Республиканская, 108.
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Ярославского государственного педагогического университета имени К.Д. Ушинского.
Автореферат разослан « и » _2005 г.
Ученый секретарь диссертационного совета кандидат биологических наук, доцент И.А. Тихомирова
¿mm
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность темы. Двенадцатиперстная кишка, как известно, занимает центральное положение в системе органов пищеварения и отличается от всех остальных своеобразными и сложными функциями. Установлено, что именно этот отдел тонкой кишки является частью зоны с высокой пейсмекерной активностью, организующей моторно-эвакуаторную функцию всего пищеварительного тракта, и именно этот отдел характеризуется высокой плотностью сетей клеток Кахаля и высокой плотностью и сложностью организации интрамураль-ного нервного аппарата (Нага К. с соавт., 1986; Suzuki N. с соавт., 1986; Langton Р. с соавт., 1989; Seirio R. с соавт., 1991; Ward S.M. с соавт., 1994; Burns A.J. с соавт., 1996; Wang X.Y. с соавт., 2000; Ward S.M., Sanders K.M., 2001).
Данные о влиянии нервной системы на двигательную активность органов желудочно-кишечного тракта многочисленны, но в основном касаются эффектов медиаторов и гуморальных факторов на перистальтический рефлекс (Березина Т.П., Овсянников В.И., 1985; Овсянников В.И., Павлов, 1988; Овсянников В.И., Березина Т.П., 1994; Holmgren, 1982; Solcia Е., Capella С., Buffa R.,1987).
Спонтанная двигательная активность остается до сих пор вне поля зрения исследователей, данные о ней отрывочны, касаются отдельных органов, сведения о становлении её в онтогенезе и о роли нервной системы в её постнаталь-ном развитии малочисленны (Hillemeir С с соавт, 1985; Tomomasa Т с соавт., 1988; Zitterman J, Ryan JP., 1990; Hillemeir С, Bitar KN, Bianci P., 1991; Ward SM с соавт, 1994; Lecoin L с соавт., 1996; Kenny S.E. с соавт, 1998; Thuneberg L., 1999; Lu X, Zhao J, Gregersen H,. 2005).
Исследования отечественных нейроморфологов и физиологов показали различия влияний афферентных и симпатических центров на ткани-мишени, выделили специфику развития дистрофических и компенсаторных изменений при разных видах денервации (Пекарский М.И., 1963; Григорьева Т.А., 1966; Корытный Е.Я., 1966; Червова И.Д., 1966; Крыжановский Н.Г. с соавт., 1973, 1974; Строганова А.Б., 1972; Волкова О.В., 1978 и др.).
В меньшей степени изучены изменения нейроцитов и компенсаторные процессы в ганглиях, которые при нарушении межнейрональных связей также становятся мишенями нейродистрофического процесса (Милохин A.A., 1967; Зайко H.H., 1974; Румянцева Т.А., 2002).
Появление веществ, обладающих избирательным токсическим действием на нейроциты разной природы, позволяет моделировать «чистые» денервации, определить особенности влияния разных частей нервной системы на органы-мишени, выявить особенности дистрофических и компенсаторных процессов в развивающемся организме.
Вопросы о том, когда спонтанная активность двенадцатиперстной кишки достигает дефинитивного состояния, какое влияние оказывают на двигательную активность кишки различные отделы нервной системы, остаются открытыми, что делает проведение исследований в этой области актуальным. Полу-
чение таких данных не только расширяет наши гйЧвЁШНКШН»вЙЛ»К§5нностях
ВИБДИОТЕКА !
Cl
"■ » II .ЩШ
функционировании кишки в разные периоды онтогенеза, но и позволяет прогнозировать её реакции на изменяющиеся условия питания, объяснить частоту дискинезий этого отдела желудочно-кишечного тракта у детей.
Целью настоящей работы является установление закономерностей возрастных преобразований двигательной активности двенадцатиперстной кишки белой крысы в норме и в условиях химической десимпатизации и химической деафферентации.
Для реализации цели исследования были поставлены следующие задачи:
1. Получить нормативные данные о возрастных преобразованиях сократительной активности двенадцатиперстной кишки белой крысы в разные периоды постнатального онтогенеза;
2. Получить нормативные данные о возрастных преобразованиях интра-мурального нервного сплетения двенадцатиперстной кишки белой крысы;
3. Оценить влияние десимпатизации, достигаемой при введении гуанети-дина, и деафферентации, возникающей после введения капсаицина, на характер сократительной активности двенадцатиперстной кишки развивающейся белой крысы;
4. Выявить влияние десимпатизации и деафферентации на морфометри-ческие и гистохимические характеристики интрамурального нервного сплетения двенадцатиперстной кишки развивающейся белой крысы;
5. Изучить морфо-функциональные корреляции между сократительной активностью двенадцатиперстной кишки и состоянием её нервного аппарата в постнатальном развитии белой крысы.
Научная новизна исследования. В результате исследования получены оригинальные данные о возрастных преобразованиях характеристик двигательной активности двенадцатиперстной кишки (ДК) и интрамурального нервного сплетения. Установлены общие черты их развития на первом году жизни крысы, отличия в темпах преобразования и сроках достижения ими дефинитивного состояния.
Впервые показано, что двигательной активности ДК свойственно гетеро-хронное достижение дефинитивного уровня амплитуды и частотного спектра сокращений. Амплитуда сокращений нарастает постепенно, причем периоды интенсивного прироста сменяются периодами стабилизации, и достигает дефинитивного уровня в середине ювенильного возраста (90 сутки). Частота сокращений первого порядка стабилизируется уже в подсосном возрасте (14 суток). Медленные волны достигают дефинитивной спектральной характеристики в инфантильном возрасте (30 суток), мощность колебаний преобладающего диапазона - только в конце молодого возраста (270 сутки). Т.е., частотные характеристики двигательной активности ДК устанавливаются в онтогенезе быстрее амплитудных. Информационный анализ зарегистрировал достижение системой дефинитивного состояния в целом в конце ювенильного возраста (90 суток).
Доказано, что для возрастных преобразований нейроцитов интрамураль-ных ганглиев ДК интактных животных также характерна гетерохрония становления признаков, свойственных дефинитивному состоянию. Быстрее всего происходит становление показателей активности НАДФ-диафоразы и плотности
АХЭ-положительного сплетения - в инфантильном возрасте (30 сутки), позже стабилизируются показатели площади сечения нейроцитов, активности ХЭ и МАО - в начале ювенильного возраста (60 сутки).
Показано, что с учетом информационных характеристик интрамуральное сплетение ДК достигает дефинитивного состояния в начале ювенильного возраста (60 сутки), т.е. на месяц раньше, чем устанавливается дефинитивный уровень двигательной активности ДК.
В работе впервые оценено влияние химической десимпатизации, достигаемой путем введения гуанетидина, на становление двигательной активности и интрамуральпого сплетения ДК в развивающемся организме.
Установлено, что десимпатизация вызывает нарушение нормального становления двигательной активности ДК, что проявляется снижением частоты медленных волн и многократным снижением мощности колебаний преобладающего диапазона. Наибольшая выраженность изменений отмечается сразу после окончания инъекций гуанетидина и в отдаленные сроки - в молодом возрасте (180 суток).
Выявлены особенности нейродистрофического процесса в интрамураль-ном сплетении ДК при десимпатизации. С учетом количества нейроцитов, погибших в ранние сроки при первичном воздействии нейротоксина и в отдаленные сроки вследствие вторичного эффекта, «дистрофического индекса», нарушения активности ферментов, плотности АХЭ-позитивного сплетения, доказано, что десимпатизация вызывает в интрамуральном сплетении кишки прогрессирующий дистрофический процесс, который затрагивает все популяции нейроцитов интрамуральных ганглиев и продолжается в течение всего периода наблюдения.
Получены оригинальные данные о влиянии деафферентации, моделированной путем неонатального введения капсаицина, на возрастные преобразования двигательной активности ДК у белой крысы.
Установлено, что деафферентация вызывает отсроченные нарушения характера двигательной активности ДК у растущей крысы. Отставания темпов прироста амплитуды сокращений, задержка становления дефинитивного спектра медленноволновых сокращений, появление дополнительных диапазонов преобладающих колебаний, многократное отставание мощности колебаний преобладающих диапазонов появляются в инфантильном возрасте (30 сутки) и усугубляются в течение всего периода наблюдения до молодого возраста (180 суток).
Впервые показано, что часть нейроцитов в интрамуральных ганглиях ДК являются первично чувствительными к капсацину. Гибель нейроцитов, задержка роста нейроцитов, снижение активности ферментов (ХЭ, НАДФ-диафоразы, МАО), плотности АХЭ-позитивного сплетения выражены уже в ранние сроки (14-30 сутки). В отдаленные сроки в ганглиях наблюдаются компенсаторные процессы: уменьшение «дистрофического индекса», положительная динамика роста нейроцитов, повышение активности ферментов (ХЭ, МАО, НАДФ-диафоразы), но информационный анализ доказывает, что эта компенсация не-
состоятельна, а в отдаленные сроки диагностируется состояние глубокой дезорганизации.
В результате исследования удалось доказать, что выраженность нарушений системы двигательной активности ДК определяется выраженностью дистрофических изменений в интрамуральных ганглиях, доказана зависимость показателей моторики ДК от состояния нервного аппарата.
Научно-практическая значимость работы. В результате проведенного исследования впервые получены нормативные возрастные характеристики двигательной активности и интрамурального нервного сплетения ДК у крыс на протяжении первого года жизни, которые могут служить основой для морфо-функциональных исследований органов и тканей в эксперименте. Установлено, что часть нейроцитов интрамуральных ганглиев ДК являются гуанетидин-чувствительными и капсаицин-чувствительными, что необходимо учитывать в экспериментальной и клинической работе. Показано, что данные схемы введения нейротоксинов могут использоваться для моделирования состояний приобретенного в периоде раннего развития дефицита симпатоцитов, дефицита афферентных нейроцитов, патологических состояний типа болезни Гиршпрунга и пилоростеноза, дискинезий, в целях фундаментальных исследований структуры и функции органов, адаптивных возможностей организма в целом и отдельных его систем при воздействии различных факторов, а также механизмов действия лекарственных препаратов.
Полученные нормативные данные, данные о динамике развития нейроди-строфического процесса и особенностях компенсаторных преобразований могут использоваться в учебном процессе при реализации программ высшего профессионального образования по специальностям медицинского и биологического профилей.
На защиту выносятся следующие положения:
1. Становление дефинитивного уровня двигательной активности двенадцатиперстной кишки белой крысы зависит от состояния интрамурального нервного сплетения.
2. Выраженность нарушений двигательной активности двенадцатиперстной кишки зависит от характера дистрофических изменений в интрамуральных ганглиях.
3. Возрастные преобразования двигательной активности двенадцатиперстной кишки крысы зависят как от афферентных, так и от симпатических влияний.
Апробация работы. Материалы исследования доложены на Всероссийской научно-практической конференции "Экология физического воспитания" (Тула, 20-23 декабря 1995 года), Юбилейной научной конференции, посвященной 100-летию кафедры нормальной анатомии СПбГМУ им. Акад. И.П. Павлова (С.- Петербург, 11-12 ноября 1997 года), на конференции "Биологические исследования в Ярославском государственном университете" (Ярославль, 29 ноября 1996 года), на 1-м Международном конгрессе по нейронаукам (Берлин, 1996), II открытой городской научной конференции молодых ученых города
Пущино 23-25 апреля 1997, на конференции молодых ученых России с международным участием "Фундаментальные науки и прогресс клинической медицины", посвященной 240-летию ММА им. И.М. Сеченова (Москва, 27-30 апреля 1998), на XVII Всероссийском съезде физиологов (Росгов-на-Дону. 14-18 сентября 1998), на Международном симпозиуме Белорусского республиканского общества анатомов, гистологов и эмбриологов "Развитие и морфологические аспекты нейро-эндокринных и нейро-тканевых отношений в организме" (Минск, 23-24 октября 1998), на Всеросийской научной конференции, посвященной 75-летию П.Ф. Степанова (Смоленск, 1999), на Международной конференции, посвященной 150-летию И.П. Павлова (С.-Петербург, 1999), на Юбилейной научной конференции, посвященной 30-летию Ярославского государственного университета им. П.Г. Демидова «Актуальные проблемы естественных и гуманитарных наук на пороге XXI века» (Ярославль, 2000), на Международной конференции «Структурные преобразования органов и тканей на этапах онтогенеза в норме и при воздействии антропогенных факторов.» (Астрахань, 2000), на Международной конференции, посвященной 75-летию со дня рождения A.M. Уголева, «Механизмы функционирования висцеральных систем» (С.Петербург, 2001), на VII конгрессе международной ассоциации морфологов (Казань, 2004).
Публикации: по теме диссертации опубликовано 29 научных работ, из них 6 в профильных отечественных и зарубежных журналах, 15 - в центральной печати.
Структура и объем работы. Диссертация изложена на 205 страницах машинописного текста, содержит 49 таблиц, иллюстрирована 52 рисунками. Состоит из введения, обзора литературы, главы с описанием методов исследования, 6 глав с изложением полученных результатов, заключения, выводов, списка литературы, который содержит 131 отечественных и 139 зарубежных источников.
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
1. Экспериментальные группы и объект исследования
Исходя из поставленных задач, работа выполнена на 2 40 самка х белых крысах линии Вистар разного возраста. Возраст исследуемых крыс выбирался в соответствии с периодизацией онтогенеза крыс, предложенной И.П. Западню-ком (1974), на основании изменения характера питания, массы и функциональной зрелости систем крысы.
Для проведения исследования использовали 3 группы животных (Табл. 1).
Первая группа - интактные крысы разных возрастов.
Вторая группа - десимпатизированные с рождения крысы. При моделировании десимпатизации использовали следующую схему введения гуанети-дина: новорожденным крысятам с третьих по 29 сутки жизни ежедневно внут-рибрюшинно вводили 0,3 мл водной взвеси гуанетидина, приготовленной на
электромагнитной мешалке, из расчета 60-70 мг/кг (Johnson, Manning, 1984; Румянцева Т.А., Обрезчикова М.Н., 1995; Шилкин В.В. с соавт., 1995).
Таблица 1.
Распределение животных по экспериментальным группам
Возраст в сутках Количество животных
(возрастной период) интактные десимпатизированные деафферентированные
о * о * 0 *
2-3 (новорожденные) 6 7 - - - •
14 (подсосный) 5 7 - - б 4
30 (инфантильный) 5 10 6 6 5 6
60 (начало ювенильного) 7 10 4 5 5 5
90 (середина ювенильного) 5 10 5 7 4 5
120 (конец ювенильного) 6 8 6 6 5 5
180 (начало молодого) 7 10 6 5 5 4
270 (конец молодого) 5 8 4 5 - -
Всего 46 70 31 34 30 29
физиологические исследования, *- гистологические исследования
Третья группа - деафферентированные с рождения крысы.
Для достижения деафферентации в работе использовано однократное подкожное введение новорожденным крысам на вторые или третьи сутки жизни 10% раствора капсаицина в смеси, состоящей из 1 части спирта, 1 части твин-80, 8 частей физиологического раствора в дозе 100 мг/кг (Бап^сюН с соавт., 1992; Вггоголуэк! с соавт., 1995).
Для исследования забирали участок ДК от пилорического сфинктера до окончания нисходящей части.
2. Метод механографической регистрации сократительной активности изолированной кишки по Р. Блатгнеру (1983)
Изолированный участок двенадцатиперстной кишки, помещался в термо-статируемую камеру (138°С) объемом 20 мл с аэрированным раствором Тироде. Дистальный конец кишки фиксировался неподвижно на дне камеры, а проксимальный при помощи шелковой нити соединялся с рычагом фотопреобразователя. Регистрация сократительной активности изолированного участка кишки осуществлялась в ауксотоническом режиме. Сигнал фотопреобразователя подавался на вход компенсационного усилителя постоянного тока типа И-37, регистрация сигнала осуществлялась на ленте милливольтамперметра. В работе использовался фотоэлектрический преобразователь, изготовленный на кафедре физиологии человека и животных ЯрГУ им. П.Г. Демидова. Регистрировалась амплитуда и частота спонтанных сокращений изолированного препарата кишки. Полученные механограммы сканировали и оцифровывали.
3. Методы исследования иитрамурального сплетения
Объектами исследования служили межмышечные сплетения нисходящей части ДК.
Из нейрогистологических методик использована окраска срезов кишки тионином или метиленовым синим по Нисслю.
Из гистохимических методик использовали:
1) реакцию с тиоуксусной кислотой для выявления активности неспецифической холинэстеразы (ХЭ) (метод с тиоуксусной кислотой в модификации Николаева Г.М.и Шилкина В.В.),
2) реакцию с ацетилхолин йодидом для выявления ацетилхолин эстераза-позитивных (АХЭ) волокон в мышечной оболочке ДК по методу Гомори,
3) реакцию с тетразолием по методу Гленнера для выявления активности моноаминоксидазы (МАО),
4) реакцию с никотин-аденин-динуклеотид фосфатом для выявления НАДФ-диафоразы - маркера NO-синтазы - по методу Хоупа.
На срезах, окрашенных тионином, подсчитывалось среднее количество нейроцитов, приходящееся на один интрамуральный ганглий, при постановке гистохимических реакций оценивали количество ХЭ-положительных, НАДФ-диафораза-позитивных нейроцитов в исследуемых ганглиях.
Для оценки размеров и формы нейроцитов ганглиев использовали группу морфометрических параметров, выраженность ферментативной активности (ХЭ, МАО, НАДФ-диафоразы) оценивали по оптическим показателям, которые измеряли с помощью программно-технологического комплекса "Bioscan" (Минск, Конако, 1994). Плотность АХЭ-позитивных волокон оценивали при помощи окулярной сетки.
Выбранный набор методик позволяет оценить количественный состав нейроцитов в ганглиях ДК, плотность иитрамурального сплетения, выявить патологические и компенсаторно-приспособительные изменения по морфологическим и гистохимическим критериям, оценить активность ферментов и характер распределения конечного продукта реакции, как критериев интенсивности белкового синтеза и медиаторного обмена.
4. Методы математической и статистической обработки данных
На основании полученных механограмм ДК с помощью анализа Фурье, проведенного по программе PSIPLOT, с частотой дискретизации 0,75 с, выделяли преобладающие диапазоны частот, оценивали мощность колебаний (амплитуда2) в этих диапазонах.
Полученные спектрограммы животных одной возрастной группы усредняли по правилам описательной статистики. Достоверность различий групповых спектрограмм оценивали по критерию Стъюдента, используя статистический пакет ANOVA.
Полученные при видеоанализе срезов ДК цифровые массивы также обрабатывали методом описательной статистики, используя программу Excel (описательная статистика, сравнение выборок с использованием критерия Стыоден-
та). Для характеристики клеточного состава ганглиев использовали метод гистограмм.
Для установления сроков достижения ДК по показателям двигательной активности и морфогистохимическим характеристикам дефинитивного состояния использовали информационный анализ (Леонтюк A.C., Кадыров Х.К , 1981; Антомонов Ю.Г., 1 974). Этот же анализ проводили для оценки направленности наблюдаемых изменений и оценки эффективности компенсаторных процессов в ДК при денервациях.
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
1. Возрастные преобразования двигательной активности и
интрамурального нервного сплетения двенадцатиперстной кишки
белой крысы
Спонтанная двигательная активность ДК выявляется уже у новорожденных крысят (Рис. 1).
Средняя амплитуда сокращений составляет 3,2±0,08 мм, максимальные значения достигают 6 мм.
Рис.1. Механограмма двигательной активности ДК у новорожденной крысы.
(По оси ординат - амплитуда в мм, по оси абсцисс - время в с).
Существование ритмической двигательной активности ДК опровергает мнение части исследователей об отсутствии двигательной активности ЖКТ в таком раннем возрасте у животных (Кобакова, 1968, Liu LW, Thuneberg L, Huizinga JD., 1998) и подтверждает данные о раннем появление периодической активности в органах ЖКТ (Hillemeir С с соавт., 1985; Tomomasa Т с соавт., 1988; Zitterman J, Ryan JP., 1990; Torihashi S, WardSM, Sanders KM, 1997).
Проведенный анализ механограмм ДК позволяет утверждать, что в процессе развития животного наблюдается постепенное увеличение средней амплитуды колебаний ДК, которое происходит ступенчато с периодами интенсивного увеличения амплитуды (2-30 сутки, 60-90 сутки) и периодами стабилизации - 30-60 сутки. В 90 суточном возрасте средние значения амплитуды стабилизируются, достигая дефинитивного уровня, и впоследствии достоверно не изменяются до 270 суток наблюдения (Рис.2).
Отмечается ранняя стабилизация средней частоты сокращений первого (высокочастотного) порядка, которая минимальна у новорожденных (0,40 Гц, 24 сокр/мин), но уже в подсосном возрасте, увеличиваясь, достигает дефинитивного уровня (0,52-0,61 Гц, 37-42 сокр/мин). Наши данные согласуются с
данными З.ОЫаш (1994), отмечавшего у 7 суточных крыс спектральную частоту ДК 26,8, а у взрослых крыс - 33,9 сокращений в минуту.
24 22 20 18 16 14 12 10 8 6 4 2 0
1,5 31,5 61,5 91,5 121,5 151,5 181,5 211,5 241,5 271,5 301,5 331,5 361,5 е
Рис. 2. Механограмма двигательной активности ДК у крысы ювенильного возраста (120 суток). (По оси ординат - амплитуда в мм, по оси абсцисс -время в с).
Ранняя стабилизация параметра частоты сокращений ДК, свидетельствует об его выраженной независимости от других влияний. По мнению ряда авторов, именно эти высокочастотные колебания обеспечиваются пейсмекерной активностью клеток Кахаля второго типа (Ward SM, Burns AJ, Torihashi S, Sanders KM., 1994; Burns AJ с соавт., 1996; Thuneberg L., 1999, Wang XY с соавт., 2000).
Анализ Фурье позволил выявить низкочастотные колебания ДК.
Этот медленно волновой ритм колебаний, по мнению Thuneberg L. (1999), обусловлен пейсмекерной активностью клеток Кахаля первого типа, клеток обеспечивающих продольные, перистальтические сокращения мышечной оболочки кишки и расположенных в мышечных слоях органов ЖКТ. Именно им приписывается роль передатчиков нервных влияний на гладкомышечные клетки (Ward SM, Burns AJ, Torihashi S, Sanders KM., 1994; Burns AJ с соавт., 1996; Sanders KM с соавт., 1999; Wang XY с соавт., 2000; Ward SM с соавт., 2000).
Низкие частоты («медленные волны»), характеризующие диапазон с максимальными значениями мощности колебаний, имеют возрастные особенности: у новорожденных и 14 суточных крыс - от 0,0052 до 0,0260 Гц, в остальных возрастных группах от 0,0153 до 0,0573 Гц. Т.е., происходит увеличение частоты медленных волн с возрастом (Рис. 3).
Медленные волны, наблюдаемые в ДК, достигают дефинитивной спектральной характеристики по частоте в инфантильном возрасте. Мощность час-
тот преобладающего диапазона, связанного с медленными волнами, с возрастом увеличивается, достигая максимума в конце молодого возраста (270 сутки).
мощность
02 015 0,1 0,05 0
0,005 0,031 0,057 0,083 0,109 0,135 0,161 0,188 0,214 0,240 0,266 0,292 0,318
частота (гц)
Рис 3 Спектрограмма двигательной активности ДК у новорожденных, мощность
Г ~~ _ ----
—._л, ■ WW-ГЧ—,Лт 0+ ______
0,005 0,031 0,057 0,083 0,109 0,135 0,161 0,188 0,214 0,240 0,266 0,292 0,318
частота (гц)
Рис. 4. Спектрограмма двигательной активности ДК у крыс начала ювенильного возраста (60 суток).
Увеличение частоты этих колебаний происходит на фоне увеличения активности ХЭ в нейроцитах интрамуральных ганглиев и увеличения плотности АХЭ-позитивных сплетений в мышечной оболочке кишки, а также снижения уровня активности МАО в ганглиях (Табл. 2). Сочетание этих изменений позволяет утверждать, что увеличение частоты медленных колебаний обусловлено повышением холинергических влияний.
Сократительная активность ДК у новорожденных крысят характеризуется наличием нескольких диапазонов преобладающих частот в спектрограмме. Кроме высокочастотных и низкочастотных колебаний в раннем возрасте крыс (новорожденные и 14 суточные) отмечается ещё один диапазон преобладающих частот, который занимает промежуточное положение на спектрограмме (Рис.3)
Эти колебания исчезают в инфантильном возрасте. Их происхождение сложно объяснить. Но, возможно, они вызываются ещё одним водителем ритма, который проявляется из-за недостаточности тормозных влияний NO в возрасте 2-14 суток, что доказывается низким уровнем активности НАДФ-диафоразы в нейроцитах ДК в этом возрасте (Табл.2).
Отчасти это подтверждается работами Regina S. с соавт. (1998), которые установили разную пейсмекернуго активность в проксимальной и дистальной частях ДК, а также работами Богача П.Г. (1965), отмечавшего появление учащенного ритма сокращений вблизи мест разобщения интрамуральной иннервации поперечными перерезками стенок ДК.
Попытаемся сопоставить динамику амплитуды с возрастными преобразованиями интрамурального межмышечного нервного сплетения ДК.
Средняя площадь сечения нейроцитов интрамуральных ганглиев увеличивается в течение 270 суток жизни крысы в 4 раза. Увеличение средней площади сечения нейроцитов интрамуральных ганглиев ДК интактных крыс происходит неравномерно, наблюдается постепенное снижение интенсивности роста, сменяемое периодами относительной стабилизации. Промежутками интенсивного роста нейроцитов являются 2-14 и 14-30 сутки жизни крыс, менее активного роста - 30-60 и 180-270 сутки, периодом стабилизации 60-180 сутки жизни крысы. Дефинитивное состояние по площади достигается в начале юве-нильного возраста (60 сутки).
Также фазно изменяется и активность ХЭ в нейроцитах межмышечных ганглиев ДК. У новорожденных активность фермента минимальна, в подсосном возрасте - возрастает, в инфантильном возрасте (до 30 суток) сохраняется без достоверных изменений, а в начале ювенильного возраста средние значения активности ХЭ достоверно увеличиваются, переходя на максимальный уровень. Достигнутый на 60 сутки уровень активности ХЭ сохраняется до 270 суток без изменений (Табл.2).
В периодах интенсивного увеличения амплитуды (до 30 суток) наблюдается увеличение плотности АХЭ-позитивных волокон и увеличение активности НАДФ-диафоразы в цитоплазме нейроцитов в мышечной оболочке кишки, а также уменьшение активности МАО в ганглиях.
Оказывается, что наблюдаемые изменения амплитуды колебаний, площади сечения нейроцитов и активности ХЭ являются синхронными и почти полностью совпадают по периодам интенсивного увеличения и стабилизации. Учитывая, что холинергические нервы оказывают стимулирующее влияние на моторику кишки, можно утверждать, что волнообразное увеличение амплитуды сокращений ДК обусловлено таким же волнообразным становлением дефинитивного уровня нервного контроля.
Таблица 2.
Основные показатели двигательной активности и ннтрамурального
__нервного сплетения ДК в норме и в эксперименте___
Показатель Экспериментальная группа Возраст (сутки)
2-3 14 30 60 90 120 180 270
Амплитуда (мм) интактные 3,2±0,08 5,5±0,13* 9,2±0,17* 9,6±0,35 18,1 ±0,48* 14,8±0,27* 14,3±0,32 17,7±0,45
десимпат. 6,1±0,13° 7,3±0,12° 10,6±0?22*° 12,8±0,31 18,4±0,53*°
деафферент. 4,0±0,09 12,2±0,31* 7,9±0,14*° 7,8±0,19° 10,5±0,23*° 10,6±0,29°
частота сокращений первого порядка (Гц) интактные 0,40±0,015 0,57±0,010* 0,61±0,018 0,56±0,023 0,52±0,04б 0,58±0,018 0,52±0,018 0,54±0,020
десимпат. 0,56±0,02 0,51 ±0,05 0,5б±0,01 0,52±0,03 0,52±0,04
деафферент. 0,55±0,01 0,52±0,05 0,55±0,01 0,56±0,03 0,54±0,01 0,47±0,02*
Активность ХЭ (опт.ед.) интактные 29,7±0,27 38,6±0,66* 36,9±0,75 41,2±0,69* 40,8±0,70 45,4±1,15 38,6±0,66 44,2±0,76
десимпат. 29,9±0,39° 34,4±0,47*° 34,2±0,53° 38,5±0,44° 41,2±0,44 44,2±0,37*
деафферент. 27,7±0,33° 2б,2±0,17° 35,1 ±0,61*° 31,6±0,45° 32,1±0,47°
Плотность АХЭ сплетения (отн.ед.) интактные 112±0,80 186±1,21* 210±0,87* 203±0,87 210±1,06 194±1,65 204±1,85 187±1,87*
десимпат. 190±17,6° 186±14,6*° 190±13,9° 162±16,6*° 169±12,8° 165±17,1°
деафферент. 183±1,33 167±0,85*° 159±0,87° 152±1,00° 140±0,93*°
Активность МАО (опт.ед.) интактные 48,5±1,13 41,5±1,07* 38,2±0,76 28,9±0,65* 25,8±0,81 25,9±0,79 26,2±0,68 29,4±0,77
десимпат. 30,5±0,74° 33,6±0,61° 37,4±0,32*° 36,0±0,84° 44,3±0,98*° 41,9±1,44®
деафферент. 31,5±0,67° 39,9±1,09* 34,0±0,92*° 30,6±0,59*° 35,7±1,17*°
Активность НАДФ- диафораэы интактные нет 44±7,3 64±9,1* 59±8,9 б2±9,0 6б±9,5 61 ±8,7
десимпат. 55±8,5 37±5,3 35±4,9 47±6,7 54±8,0
деафферент. 28±5,3" 36±7,1 32±6,2° 58±7,0* 76±14,7*°
Площадь Нейроцитов (мкм2) интактные 63,9±1,71 125,1±5,13* 153,6±6,09* 185,1 ±7,38* 202,4±7,19 211,7±5,62 229,9±7,45 258,1±13,06*
десимпат. 138,5±5,41° 154,7±6,67*° 165г3±7,91° 171,2*8,51° 174,3±5,21° 199,4±6,75*°
деафферент. 85,2±4,01 82,3±2,36 196,0±5,10* 155,6±4,78* 169,4±4,91*
* различия достоверны по сравнению с предыдущим сроком наблюдения, р<0,05 различия достоверны по сравнению с контролем, р<0,05
Это вполне объяснимо, т.к. амплитуда является производным от толщины мышечной оболочки, от сократительной способности гладких мышц и от нервных влияний (Овсянников В.И., Березина Т.П., 1994; Hille-meir С., Bitar K.N., Bianci P., 1985, 1991; Tomomasa Т., Hyman P.E., Snape W.J., 1988; Hyman P.E. с соавт., 1989; Zitterman J., Ryan J.P., 1990; Lu X., Zhao J., Gregersen H., 2005).
Увеличение амплитуды колебаний также происходит на фоне снижения МАО-активности в ганглиях, но стабилизация активности фермента происходит раньше, чем амплитуды, на 60 сутки.
Активность НАДФ-диафоразы - маркера NO-синтазы - появляется позже других ферментов, а стабилизируется также на 60 сутки. Возможно, что усиление ингибирующего влияния NO и ограничивает дальнейший рост амплитуды сокращений ДК.
2. Влияние химической десимпатизации на возрастные преобразования двигательной активности и интрамурального нервного сплетения двенадцатиперстной кишки белой крысы
Длительное введение гуаиетидииа вызывает выраженные изменения сократительной активности и морфогистохимических характеристик интрамурального нервного сплетения ДК, которые проявляются уже на момент окончания инъекций, т.е. в инфантильном возрасте.
Частота сокращений первого порядка в инфантильном возрасте составляет 0,56 Гц (33,6 сокр/мин), что не отличается от возрастного контроля. Достоверных изменений частоты этих сокращений в течение всего периода наблюдений не отмечается (Табл.2). Такая монотонность показателя характерна и для интактных крыс.
Выявленная стабильность ритма низкочастотных колебаний при десимпатизации ещё раз доказывает выраженную независимость пейсмекер-ной активности клеток Кахаля второго типа от нервных влияний.
Медленноволновые колебания ДК к моменту окончания инъекций гуанетидина не исчезают, но имеют пониженную частоту в диапазоне характерном для спектрограмм интактных новорожденных и 14 суточных крыс. С возрастом эта особенность медленноволновых колебаний у десим-патизированных животных не исчезает. Даже в молодом возрасте (180 сутки) частота медленных колебаний остается сниженной. Кроме снижения частоты медленных сокращений отмечается многократное снижение мощности колебаний в преобладающем диапазоне частот.
Другой особенностью спектрограмм при десимпатизации является наличие дополнительного диапазона преобладающих колебаний с частотой выше «главного». Этот диапазон появляется при десимпатизации не сразу, а в середине ювенильного возраста (Рис.5).
Введение гуанетидина вызывает снижение средней амплитуды сокращений кишки в течение неполовозрелого периода жизни крыс, с после-
дующим возрастанием этого показателя у молодых животных выше контроля.
Эти изменения происходят на фоне повреждения нервного сплетения
ДК.
мощность
1--
0,005 0.031 0,057 0,083 0,109 0,135 0,161 0,188 0,214 0,240 0.266 0,292 0,318
частота (гц)
Рис. 5. Спектрограмма двигательной активности ДК у крыс ювенильного
возраста (120 суток) при десимпатизации.
Ведущим изменением при десимпатизации является гибель значительной части нейроцитов, которая происходит фазно: во время введения гуанетидина гибнет 28% нейроцитов, в течение трех месяцев после - ещё 30%, затем (на 120 сутки) популяция стабилизируется. Причем отмечается разная чувствительность ферментопозитивных нейроцитов к гуанетидину.
Так, убыль ХЭ-позитивных нейроцитов при десимпатизации составляет 9,5% в инфантильном и возрастает до 40% в молодом возрасте. Убыль НАДФ-позитивных нейроцитов в инфантильном возрасте не отмечена, она проявляется позднее - в середине ювенильного возраста и достигает 50%.
Введение гуанетидина вызывает снижение активности ХЭ, которое сохраняется длительно, до 120 суток жизни крыс. Но активность ХЭ в течение всего срока наблюдения постепенно возрастает и в отдаленные сроки достигает контрольного уровня (Табл.2).
Плотность АХЭ-позитивного сплетения при десимпатизации изменяется ступенчато. Первое снижение регистрируется на момент окончания инъекций, т.е. оно происходит во время введения токсина. Второе снижение приходится на окончание ювенильного возраста, через три месяца после окончания инъекций.
Введение гуанетидина вызывает снижение активности МАО, которое компенсируется уже через месяц после окончания инъекций, а к концу наблюдения активность фермента превосходит контроль в 1,5 раза. При десимпатизации замедляется рост нейроцитов. Это отставание сохраняется
весь период наблюдения, не компенсируется даже на 180 сутки жизни крыс.
Особенностью реакции нейроцитов интрамуральных ганглиев и АХЭ-позитивного сплетения ДК является фазность: изменения, происходящие во время введения гуанетидина, и отдаленные изменения вследствие вторичной гибели нейроцитов в ответ на десимпатизацию и нарушение местных межнейрональных контактов.
Изменения активности НАДФ-диафоразы имеют при десимпатиза-ции особую динамику. Так, к окончанию инъекций гуанетидина активность диафоразы понижается, в ювенильном возрасте различия нарастают, а в отдаленные сроки динамика активности НАДФ-диафоразы меняется на положительную. К концу наблюдения активность фермента превосходит контроль.
Сопоставление изменений двигательной активности ДК с изменениями её нервного аппарата выявляет следующие взаимосвязи.
Снижение частоты медленных волн у десимпатизированных крыс наблюдается на фоне убыли количества ХЭ-позитивных нейроцитов, низкой активности ХЭ и снижения плотности АХЭ-позитивных волокон, что ещё раз подтверждает их взаимозависимость.
Наблюдаемое в отдаленные сроки повышение активности ХЭ в ней-роцитах, достигающее контрольных значений, не может компенсировать последствия вторичной гибели ХЭ-позитивных нейроцитов. Этим объясняется сохранение низкой частоты медленных волн при десимпатизации и в отдаленные сроки.
Появление дополнительного диапазона преобладающих колебаний ДК в середине ювенильного возраста является признаком усугубления нарушений сократительной активности ДК. Можно предположить, что это связано с приходящейся на 90 сутки гибелью НАДФ-позитивных нейроцитов и снижением активности НАДФ-диафоразы.
Изменения этого фермента отражают недостаточность ингибирую-щих влияний, опосредованных N0, на пейсмекерную активность в ДК. Дефицит ингибирующих влияний и приводит, вероятно, к проявлению дополнительных, менее мощных пейсмекерных зон. К концу наблюдения активность НАДФ-диафоразы в сохранившихся нейроцитах превышает контроль, но это не может компенсировать гибели 40% ферменто-позитивных нейроцитов. Что и объясняет сохранение дополнительных волн в спектрограмме молодых крыс.
Сравнивая показатели средней амплитуды сокращений кишки при десимпатизации с ростом нейроцитов, стоит отметить параллелизм наблюдаемой динамики.
Отмечается прямая зависимость амплитуды от активности ХЭ: длительное снижение активности ХЭ при сохранении положительной возрастной динамики сопровождается отставанием от контроля амплитуды сокращений с последующим увеличением её выше контрольного уровня.
Введение гуанетидина вызывает снижение активности МАО, которое нивелируется уже через месяц после окончания инъекций, а к концу наблюдения активность фермента превосходит контроль в 1,5 раза. Хотя МАО участвует в том пути обмена катехоламинов, который не является ведущим для периферической нервной системы, наблюдаемая динамика изменений её активности при десимпатизации позволяет утверждать, что этот путь становиться компенсаторным.
Изменения сократительной активности ДК и её нервного аппарата, наблюдаемые при десимпатизации в ранние сроки после введения гуанетидина являются непосредственной реакцией на симпатолитик.
Системное необратимое истощение синтеза катехоламинов не приводит к увеличению проявлений холинергических влияний, что можно было ожидать, учитывая данные об ингибирующем влиянии катехоламинов на сократительную активность органов желудочно-кишечного тракта (Курцин И.Т., 1962; Крепе O.K., 1963; Полтырев С.С., Курцин И.Т., 1980; Авакян О.М., 1988; Булекбаева Л.Э. и др., 1993). Мы не отмечали ни усиления сократительной активности ДК, ни активизации обмена ацетилхоли-на, а наоборот, гибель части ХЭ-позитивных нейроцитов, снижение плотности АХЭ-позитивных сплетений.
Аналогичный эффект гуанетидина - снижение активности ХЭ во время введения - отмечали в интрамуральных ганглиях желудка, в прямой кишке, в спинномозговых ганглиях, в узлах тройничного нерва, в шейно-грудных ганглиях и другие исследователи (Nozdrachev A.D.,1998; Аккура-тов Е.Г. с соавт.,1995, Румянцева Т.А, 2002). Вероятно, это последствия нарушения межклеточных взаимоотношений, где выпадение одного звена неизбежно приводит к нарушению в других (Джипа Я И , 1970, 1976; Волкова О.В., 1978, Руденок В.В., Сысов A.B., 1991).
Введение гуанетидина вызывает не только первичную реакцию, эффекты десимпатизации с возрастом нарастают. По-видимому, нарушение нервных влияний вызывает в ткани-мишени развитие изменений, комплекс которых принято называть «нейродистрофический процесс» (Гинецинский А.Г., 1923; Орбели Л.А., 1923; Сперанский А.Д., 1930; Григорьева Т.А., Лебединский A.B., 1963; Аничков C.B. с соавт., 1969; Зайко H.H., 1966, 1974; Ажипа Я.И., 1970, 1976; Волкова О.В., 1978).
Развитие нейродистрофического процесса проявляется в первую очередь тем, что постепенно изменения захватывают даже те популяции нейроцитов, которые не реагировали на непосредственное введение гуанетидина - НАДФ-диафораза - позитивные нейроциты. Нарушения характера сократительной активности ДК - появление дополнительных волн, отставание средней амплитуды сокращений, резкое падение мощности колебаний в диапазонах преобладающих частот, свидетельствует о развитии дистрофического процесса и в мышечной оболочке кишки.
Регистрируемые изменения подтверждают положение об адаптационно-трофическом влиянии симпатического отдела вегетативной нервной системы на органы и ткани-мишени.
3. Влияние химической деафферентации на возрастные преобразования двигательной активности и интрамурального нервного сплетения двенадцатиперстной кишки белой крысы
Неонатапьное введение капсаицина в дозе 100 мг/кг вызывает гибель 30-50% (в зависимости от возраста) нейроцитов в первом грудном спинномозговом ганглии, гибель части популяции нейроцитов в тройничном ганглии и в каудальном ганглии блуждающего нерва у крыс, что позволяет говорить о «частичной» системной деафферентации (Румянцева Т.А. с соавт., 1999; Brzozowski с соавт., 1995; Geirsson с соавт., 1995).
Становление сократительной активности ДК в условиях денервации приобретает особые черты.
Частота сокращений первого порядка при деафферентации в течение неполовозрелого периода составляет 0,52-0,56 Гц (31-33 сокр/мин) и не отличается от контроля, а в молодом возрасте достоверно снижается до 0,47 Гц (28 сокр/мин).
Медленные волны ДК в подсосном возрасте по частоте не отличались от нормы, для которой характерна низкая частота колебаний «главного» преобладающего диапазона. С 30 по 120 сутки отмечается отставание частоты колебаний медленных волн от контроля. У деафферентированных 30 суточных крыс она не изменяется, по сравнению с подсосным возрастом, а в норме постепенно возрастает. В конце наблюдения на 180 сутки частота «главного» медленноволнового диапазона возрастает, достигая контроля.
Особенностью медленных волн во все сроки наблюдения является очень низкая мощность (Рис.6), причем с возрастом эти различия только усугубляются (Табл.2).
мощность
частота (гц)
Рис. 6. Спектрограмма двигательной активности ДК у крыс ювенильного возраста (60 суток) при деафферентации.
В спектрограмме ДК при деафферентации отмечается дополнительный диапазон преобладающих колебаний, Но эти колебания присущи не всем возрастам. У 14 суточных второй диапазон преобладающих колебаний в спектрограмме является нормой. В инфантильном возрасте в контроле он должен исчезать, но при деафферентации сохраняется. Почти полное исчезновение второго диапазона наблюдается только в начале ювенильно-
го возраста (60 сутки). У 90 суточных он также не выражен. Зато у 120 суточных крыс, и, особенно у 180 суточных животных, в спектрограмме второй диапазон преобладающих частот проявляется очень резко.
Средняя амплитуда сокращений ДК у деафферентированных крыс в течение периода молочного кормления (до 30 суток) достоверно не отличается от контроля, а в ювенильном возрасте снижается и по отношению к показателям 30 суточных экспериментальных крыс и относительно контроля. Положительная возрастная динамика появляется в конце ювениль-ного возраста, но показатели остаются сниженными (Табл.2).
Изменения сократительной активности ДК при деафферентации происходят на фоне следующих изменений интрамурального нервного аппарата кишки.
Введение капсаицина вызывает гибель значительного количества (32%) нейроцитов в течение первого месяца жизни крыс. В отдаленные сроки убыль нейроцитов незначительна (7% за пять месяцев).
Разные популяции нейроцитов обладают разной чувствительностью к нейротоксину.
Убыль ХЭ-позитивных нейроцитов в течение первого месяца составляет 28% и в отдаленные сроки достигает 53%. Большая часть нейроцитов, в том числе ХЭ-позитивных, гибнет в течение месяца после введения капсаицина, т.е. их можно считать первично чувствительными к капсаицину, но и в отдаленные сроки в этой популяции отмечается значительная убыль ХЭ-позитивных клеток, как реакция на дефицит афферентации.
Активность ХЭ длительное время после введения капсаицина резко снижена, в начале ювенильного возраста увеличивается, но в отдаленные сроки не достигает контроля.
Плотность АХЭ-позитивного сплетения при деафферентации уменьшается на 30 сутки и различия с контролем в отдаленные сроки нарастают.
Убыль НАДФ-диафораза-поэитивных нейроцитов имеет фазный характер: снижение количества НАДФ-диафораза позитивных нейроцитов в 3 раза (66%) в периоде молочного кормления, в 1,5-2 раза (33%) в ювенильном и в 6 раз (83%) в молодом возрастах. Эту фазность можно объяснить восстановлением позитивности части нейроцитов в ювенильном возрасте.
Активность НАДФ-диафоразы в нейроцитах ганглиев ДК при деафферентации в ранние сроки наблюдения достаточно длительно (до 60 суток) была понижена, затем постепенно возрастала, превышая в молодом возрасте контроль.
Активность МАО в ганглиях ДК при деафферентации имела отличную от других ферментов динамику: в ранние сроки наблюдения была понижена (14 сутки), затем повышалась у 30 суточных крыс до уровня контроля. А в отдаленные сроки превышала контрольные значения.
Введение капсаицина изменяет нормальную возрастную динамику параметра площади сечения нейроцитов. Основной тенденцией является
длительная задержка роста нейроцитов, положительная динамика площади появляется только на 60 сутки, но и в молодом возрасте значения параметра не достигают контроля.
Сопоставление изменений сократительной активности ДК с изменениями состояния интрамурального нервного аппарата при деафферентации выявляет следующие взаимозависимости изученных характеристик.
Влияние деафферентации сказывается на большинстве параметров ДК не сразу, а к концу первого месяца наблюдения, т.е. в инфантильном возрасте.
Для медленных волн дефицит нервных влияний - массовая гибель нейроцитов всех изученных популяций - сказывается сохранением низкой частоты, характерной для подсосного возраста в течение всего неполовозрелого периода. Важную роль в этом отставании развития ритма играет, по-видимому, снижение плотности АХЭ-сплетения и резкое снижение активности ХЭ, отражающее низкий уровень ацетилхолина.
При объяснении наличия в спектрограммах второго преобладающего диапазона можно выделить две причины. Во-первых, сохранение второго диапазона в инфантильном возрасте можно считать признаком задержки становления нервных влияний на сократительную активность ДК в условиях массовой гибели нейроцитов и высокой чувствительностью НАДФ-диафораза-позитивной популяции нейроцитов к нейротоксину. Во-вторых, появление этого диапазона в отдаленные сроки можно считать проявлением вторичного нейродистрофического процесса в денервированной ткани и необратимым влиянием этого процесса на НАДФ-диафораза-позитивную популяцию (гибель 83% нейроцитов).
Отсутствие второго диапазона преобладающих частот в спектрограмме ювенильных животных возможно связано с восстановлением ак-тивноти НАДФ-диафоразы в части нейроцитов, сохранившихся после первичного действия капсаицина.
Сравнение динамики показателя средней амплитуды сокращений кишки с ростом нейроцитов и активностью ХЭ выявляет определенный параллелизм изменений этих параметров (Табл.2).
Изменения, выявленные в характере сократительной активности и в интрамуральных ганглиях ДК при химической деафферентации капсаици-ном, подтверждают, что афферентная иннервация оказывает стимулирующее действие на мишень иннервации, обеспечивая процессы роста и развития, в соответствии с меняющимися функциональными требованиями (Никифоров А.Ф., 1973; Волкова О.В., 1978; Елецкий Ю.К., 1984; Шаши-рина М.И., 1986; Подольская Л.А., 1989; Fike 4lh, Simons, Boswell, Smith, 1992; Hiura, López-Villalobos, Ishizuka, 1992).
Анализ последствий химических денерваций показал, что существует выраженная зависимость возрастных преобразований спонтанной двигательной активности ДК от афферентных и эфферентных нервных влияний.
выводы
1. Сократительная активность ДК выявляется у крыс уже при рождении и приобретает дефинитивные черты в конце ювенильного возраста (90 сутки). Механограмма ДК характеризуется высокочастотными низкоамплитудными и медленными высокоамплитудными колебаниями. Основными тенденциями возрастных преобразований сократительной активности ДК являются увеличение средней амплитуды сокращений и увеличение частоты и мощности медленных волн.
2. Интрамуральные межмышечные ганглии ДК гетерогенны по составу нейроцитов. В них выявляются ХЭ-позитивные, НАДФ-диафораза-позитивные и ферменто-негативные субпопуляции.
3. Для возрастных преобразований нейроцитов интрамуральных ганглиев ДК белых крыс характерна гетерохрония становления признаков. Становление показателей активности НАДФ-диафоразы и плотности АХЭ-положительного сплетения происходит в инфантильном возрасте (30 сутки), позже стабилизируются показатели площади сечения нейроцитов, активности ХЭ и МАО - в начале ювенильного возраста (60 сутки). В целом интрамуральное сплетение ДК достигает дефинитивного состояния в начале ювенильного возраста (60 сутки).
4. Десимпатизация вызывает нарушение нормального становления двигательной активности ДК, что проявляется снижением частоты медленных волн и многократным снижением мощности колебаний преобладающего диапазона, появлением в 90 суточном возрасте дополнительного диапазона преобладающих частот. Изменения отмечаются сразу после окончания инъекций гуанетидина - в инфантильном возрасте (30 сутки), и в последующем прогрессивно нарастают, достигая максимальных проявлений в отдаленные сроки - в молодом возрасте (180 суток).
5. Десимпатизация вызывает в интрамуральном сплетении кишки прогрессирующий дистрофический процесс, который затрагивает все популяции нейроцитов интрамуральных ганглиев и продолжается в течение всего периода наблюдения, проявляясь гибелью нейроцитов в ранние сроки при первичном воздействии нейротоксина и в отдаленные сроки вследствие вторичного эффекта, высоким «дистрофическим индексом», нарушением активности ферментов, плотности АХЭ-позитивного сплетения, задержкой роста сохранившихся нейроцитов.
6. Деафферентация вызывает отсроченные нарушения характера двигательной активности ДК у растущей крысы. Отставания темпов прироста амплитуды сокращений, задержка становления дефинитивного спектра медленноволновых сокращений, появление дополнительных диапазонов преобладающих колебаний, многократное отставание мощности колебаний преобладающих диапазонов появляются в начале ювенильного возраста (60 сутки) и усугубляются в течение всего периода наблюдения до молодого возраста (180 суток).
7. Часть нейроцитов в интрамуральных ганглиях ДК являются первично чувствительными к капсацину. Гибель нейроцитов, задержка роста нейроцитов, снижение активности ферментов (ХЭ, НАДФ-диафоразы, МАО), плотности АХЭ-позитивного сплетения выражены уже в ранние сроки (1430 сутки). В отдаленные сроки в ганглиях наблюдаются компенсаторые процессы: уменьшение «дистрофического индекса», положительная динамика роста нейроцитов, повышение активности ферментов (ХЭ, МАО, НАДФ-диафоразы), но информационный анализ доказывает, что эта компенсация несостоятельна, а в отдаленные сроки диагностируется состояние глубокой дезорганизации.
8. Сравнение характеристик двигательной активности ДК, состояния интрамурального нервного сплетения ДК, данных информационного анализа в норме и в эксперименте показывает, что выраженность нарушений системы двигательной активности зависит от глубины дистрофических изменений в интрамуральных ганглиях ДК, и изменения сократительной активности развиваются позже изменений интрамурального сплетения.
Список работ, опубликованных по теме диссертации
1. Воробьева О.Б., Ноздрачев А.Д., Румянцева Т.А. и др. Влияние химической десимпатизации на афферентные нейроциты и нейромышечный синапс // Докл. Акад. наук, 1995. - Т. 343. - № 4. - С. 555-556.
2. Воробьева О.Б., Ноздрачев А.Д., Румянцева Т.А. и др. Морфология и реактивные изменения нервных структур при химической десимпатизации // Физиол. журн. им. И.М. Сеченова, 1995. - Т. 81. - № 10 - С. 44-50.
3. Воробьева О.Б., Аккуратов Е.Г., Румянцева Т.А. и др. Морфометриче-ские изменения в чувствительных и симпатических нейронах при воздействии гуанетидина на взрослую крысу // Матер. Всеросс. научно-практической конф. "Экология физического воспитания" Тула, 20-23 декабря 1995 года. - Тула, 1995. - С. 87-88.
4. Vorobiova О.В., Akkuratov E.G. The changes of morphometrical characteristics of afferent neurocytes under the chemical symphathectomy // Kongres der Neurowisschaftlichen Gesellschafit in Berlin. Berlin 24-27. 02. 1996 - Berlin,
1996.-P. 215.
5. Воробьева О.Б., Румянцева Т.А. Гистохимическое исследование активности щелочной фосфатазы в микрососудах желудка и двенадцатиперстной кишки крысы при различных моделях химической десимпатизации // Матер, юбилейной науч. конф., посвященной 100-летию кафедры нормальной анатомии СПбГМУ им. Акад. И.П. Павлова. Санкт- Петербург, 11-12 ноября 1997 года. - С,- Петербург, 1997. - Т. 2. - С. 82-84.
6. Воробьева О.Б., Ботяжова О.А. Спонтанная моторика двенадцатиперстной кишки крысы и воздействие на нее препаратов медиаторной природы // Тез. конф "Биологические исследования в Ярославском государственном университете" Ярославль, 29 ноября 1996 года. - Ярославль,
1997.-С. 58-60.
7. Воробьева О.Б., Румянцева Т.А. Распределение щелочной фосфатазы в периферических и интрамуральных ганглиях крысы // Тез. докл. II открытой городской научной конференции молодых ученых города Пу-щино. 23-25 апреля 1997 года. - Ярославль, 1997. - С. 132-133.
8. Worobjeva О.В., Nozdrachev A.D., Shilkin V.V. и др. The changcs in the neurous structures under the chemical sympathectomy with gyanetidine // J. Auton. Nerv. Syst., 1998, 11, 74(2-3), 82-85.
9. Воробьева О.Б., Румянцева Т.А. Влияние химической десимпатизации на оптические показатели АХЭ-позитивных структур интрамуральных ганглиев крысы // Конф. молодых ученых России с междунар. участием "Фундаментальные науки и прогресс клинической медицины", поев. 240-летию ММА им. И.М. Сеченова. Москва, 27-30 апреля 1998 года. -Москва, 1998. - С.337.
10. Воробьева О.Б., Румянцева Т.А., Перегородина Н.В. и др. Активность ацетилхолинэстераза-позитивных структур интрамуральных узлов желудка и двенадцатиперстной кишки крысы в условиях химической десимпатизации // Морфология, 1998. - Т.113. - № 3. - С. 33.
11. Воробьева О.Б. Относительная плотность ацетилхолинэстераза-позитивных структур интрамуральных узлов двенадцатиперстной кишки крысы в условиях химической десимпатизации // Морфология, 1998. -Т.113. -№3.- С. 12.
12. Воробьева О.Б., Ботяжова О.А, Чижова С.А. Чувствительность изолированной двенадцатиперстной кишки крысы к препаратам медиатор-ной природы в постнатальном онтогенезе // Матер. XVII Всеросс. съезда физиологов. Ростов-на-Дону. 14-18 сентября 1998. - Ростов-на-Дону, 1998.-С. 205.
13. Воробьева О.Б., Румянцева Т.А., Филимонов В.И., Шилкин В.В. Изменения некоторых структур периферической нервной системы при химической десимпатизации // Матер, междунар. симп. Белорусского республиканского общества анатомов, гистологов и эмбриологов "Развитие и морфологические аспекты нейро-эндокринных и нейро-тканевых отношений в организме" под ред. чл.-корр. БАМН, проф. П.И.Лобко. Минск, 23-24 октября 1998 года. - Минск, 1998. - С. 19-20.
14. Воробьева О.Б., Перегородина Н.В. Влияние внутриутробной химической десимпатизации на АХЭ-позитивные структуры интрамуральных ганглиев крысы //1 Всеросс. конф. студ. и асп. морфологических кафедр медицинских вузов и НИИ России, поев. 200-летию Военно-медицинской академии. Санкт-Петербург 23 октября 1998 года. - С-Петербург, 1998. - С. 38-39.
15. Воробьева О.Б., Ботяжова O.A. Двигательная активность и состояние интрамурального нервного аппарата двенадцатиперстной кишки крысы в постнатальном онтогенезе // Современные проблемы биологии и химии. Сб. научн. трудов молодых ученых. - Ярославль, 1998. - С.72-76.
16. Воробьева О.Б., Р умянцева Т.А. Влияние химической десимпатизации на постнатальное развитие интрамуральных ганглиев желудка и
двенадцатиперстной кишки крысы //Тез. докл. всеросс. науч. конф., поев. 75-летию П.Ф. Степанова, Смоленск, 1999. - Смоленск, 1999. - С. 67-68.
17. Воробьева О.Б., Румянцева Т.А., Ковригина Т.Р. и др. Влияние введения капсаицина на нейроциты спиномозговых ганглиев // Сб. науч. работ «Макро и микроморфология», вып 4, поев. 90-летию морфологических кафедр Саратовского медицинского университета 1999. - Саратов, 1999. - Вып 4. - С 117-119.
18. Воробьева О.Б., Румянцева Т.А. Активность моноаминоксидазы в интрамуральных ганглиях желудка и двенадцатиперстной кишки при химической десимпатизации // Сб. научных работ «Макро и микроморфология», поев. 90-летию морфологических кафедр Саратовского медицинского университета 1999. - Саратов, 1999. - Вып. 4. - С 94-97.
19. Воробьева О.Б., Ботяжова O.A. Активность ферментных систем интрамуральных ганглиев и чувствительность двенадцатиперстной кишки к веществам медиаторной природы в постнатальном онтогенезе крысы // Матер, междунар. конф., поев. 150 -летию И.П. Павлова Санкт-Петербург, 1999. - С-Петербург, 1999. - С. 62-63.
20. Воробьева О.Б., Шилкин В.В., Румянцева Т.А. и др. Нейроциты ганглиев и нейромышечный синапс десимпатизированной и деафферентиро-ванной белой крысы // Механизмы функционирования висцеральных систем. Сб. работ междунар. конфер., поев. 150-летию И.П. Павлова. -Санкт-Петербург, 1999. - С. 409-410.
21. Воробьева О.Б., Румянцева Т.А. Изменения нейроцитов интрамуральных ганглиев желудка и двенадцатиперстной кишки крысы при химической десимпатизации // Механизмы функционирования висцеральных систем. Сб. работ междунар. конфер., поев. 150-летию И.П. Павлова 23-25 сентября, 1999. - Санкт-Петербург, 1999. - С. 77-78.
22. Воробьева О.Б. Особенности роста нейроцитов интрамуральных ганглиев двенадцатиперстной кишки в постнатальном онтогенезе белой крысы // Сб. тез. юбилейной науч. конф., поев. 30-летию Ярославского государственного университета им. П.Г. Демидова «Актуальные проблемы естественных и гуманитарных наук на пороге XXI века». - Ярославль, 2000. - С. 99-101.
23. Воробьева О.Б. Особенности роста нейроцитов интрамуральных ганглиев двенадцатиперстной кишки крысы при химической десимпатизации // Современные проблемы биологии и химии. Сб. тр. молодых ученых. - Ярославль, 2000. - С. 6-11.
24. Воробьева О.Б., Румянцева Т.А. Влияние химической деафферента-ции на постнатальное развитие нейроцитов интрамуральных ганглиев желудка и двенадцатиперстной кишки // Сб. матер, междунар. конф. «Структурные преобразования органов и тканей на этапах онтогенеза в норме и при воздействии антропогенных факторов. Экология и здоровье населения. Актуальные проблемы биологии и медицины». - Астрахань, 2000.-С. 137.
25. Воробьева О.Б. Влияние химической десимпатизадии на моторику изолированной двенадцатиперстной кишки крысы // Механизмы функционирования висцеральных систем. Матер, междунар. конф., поев. 75-летию со дня рождения A.M. Уголева. - С.-Петербург, 2001. - С. 66-67.
26. Воробьева О.Б. Изменения интрамуральных ганглиев и моторики двенадцатиперстной кишки крысы при химической десимпатизации // Морфология, 2001. - Т. 120. - № 4. - С. 107.
27. Воробьева О.Б. Состояние интрамурального нервного аппарата и двигательной активности двенадцатиперстной кишки крысы после химической десимпатизации // Морфология, 2001. - Т. 119. - № 2. - С. 68.
28. Vorobiova О. В., Botyazhova O.A. The effect of dennervation defesiensy on intramural ganglia and motility of rat duodenum // Ecology and life (Science, Education, Culture) international Journal Issue 6, 2nd Edition, Novgorod the Great, 2002, P.78-79.
29. Воробьева О.Б., РумянцеваТ.А., Агаджанова JI.C. и др. Активность холинэстеразы в нейроцитах интрамуральных ганглиев органов пищеварения у белой крысы // Тез. докл. VII конгр. междунар. ассоциации морфологов, Казань, 16-18 сентября 2004. - Морфология, 2004. - Т. 126. - № 4. - С. 107.
Список сокращений
АХЭ - ацетилхолин эстераза ДК - двенадцатиперстная кишка ЖКТ - желудочно-кишечный тракт ИКК - интерстициальные клетки Кахаля МАО - моноаминоксидаза
НАДФ - никотин-аденин-динуклеотидфосфат-диафораза ХЭ - холинэстераза
1 9F
РНБ Русский фонд
2006-4 8254
Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Воробьева, Ольга Борисовна
ВВЕДЕНИЕ 4
I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 12
1.1. Характеристика двигательной активности органов желудочно-кишечного тракта 12
1.2. Онтогенетические особенности двигательной активности органов желудочно-кишечного тракта 16
1.3. Нейро-гуморальная регуляции моторики органов желудочно-кишечного тракта 20
1.4. Морфологические особенности и нейронная организация интрамуральных ганглиев 27
1.5. Возрастные особенности интрамуральных ганглиев 33
1.6. Компенсаторно-приспособительные изменения нейроцитов интрамуральных ганглиев при денервациях 37
1.7. Нарушения двигательной активности органов желудочно-кишечного тракта при денервациях 42
II. МАТЕРИАЛ И МЕТОДИКИ ИССЛЕДОВАНИЯ 45
2.1. Обоснование методик денервации 46
2.2. Физиологические методики, использованные в работе 51
2.3. Методы исследования интрамурального сплетения 52
III. Возрастные преобразования двигательной активности двенадцатиперстной кишки белой крысы 59
IV. Возрастные преобразования межмышечного сплетения двенадцатиперстной кишки белой крысы 70
V. Влияние химической десимпатизации на возрастные преобразования двигательной активности 95-104 двенадцатиперстной кишки белой крысы
VI. Влияние химической десимпатизации на возрастные преобразования нейроцитов интрамуральных ганглиев 105-130 двенадцатиперстной кишки белой крысы
VII. Влияние химической деафферентации на возрастные преобразования двигательной активности 131-141 двенадцатиперстной кишки белой крысы
VIII. Влияние химической деафферентации на возрастные преобразования нейроцитов интрамуральных ганглиев 142-165 двенадцатиперстной кишки белой крысы
Введение Диссертация по биологии, на тему "Возрастные преобразования сократительной активности двенадцатиперстной кишки белой крысы в норме и при химической денервации"
Двенадцатиперстная кишка, как известно, занимает центральное положение в системе органов пищеварения и отличается от всех остальных своеобразными и сложными функциями. Установлено, что именно этот отдел тонкой кишки является частью зоны с высокой пейсмекерной активностью, организующей моторно-эвакуаторную функцию всего пищеварительного тракта, и характеризуется высокой плотностью сетей клеток Кахаля и сложностью организации интрамурального нервного аппарата (Нага К. с соавт., 1986; Suzuki N. с соавт., 1986; Langton Р. с соавт., 1989; Seirio R. с соавт., 1991; Ward S.M., Burns A.J., Torihashi S., Sanders K.M., 1994; Burns A.J. с соавт., 1996; Wang X.Y. с соавт., 2000; Ward S.M., Sanders K.M., 2001).
Данные о влиянии нервной системы на двигательную активность органов желудочно-кишечного тракта многочисленны, но в основном касаются эффектов медиаторов и гуморальных факторов на перистальтический рефлекс (Березина Т.П., Овсянников В.И., 1985; Овсянников В.И., Павлов О.Г., 1988; Овсянников В.И., Березина Т.П., 1994; Holmgren, 1982; Solcia Е., Capeila С., BuffaR., 1987).
Спонтанная двигательная активность желудочно-кишечного тракта остается до сих пор вне поля зрения исследователей, данные о ней отрывочны, касаются отдельных органов, сведения о становлении сократительной активности в онтогенезе и о роли нервной системы в её постнатальном развитии малочисленны (Hillemeir С., Bitar K.N., Biancani D.P., 1985, 1991; Tomomasa T., Hyman P.E., Snape W.J., 1988; Zitterman J., Ryan J.P., 1990; Ward S.M., Burns A.J., Torihashi S., Sanders K.M., 1994; Lecoin L., Gabella G., Le Douarin N., 1996; Kenny S.E. с соавт, 1998; Thuneberg L., 1999; Lu X., Zhao J., Gregersen H., 2005).
Вопросы о том, когда спонтанная активность двенадцатиперстной кишки достигает дефинитивного состояния, какое влияние оказывают на двигательную активность кишки различные отделы нервной системы, остаются открытыми, что делает проведение исследований в этой области актуальным. Получение таких данных не только расширяет наши представления об особенностях функционирования кишки в разные периоды онтогенеза, но и позволяет прогнозировать реакции ДК на изменяющиеся условия питания, объяснить частоту дискинетической патологии этого отдела ДК у детей.
Исследования отечественных нейроморфологов и физиологов показали различия влияний афферентных и симпатических центров на ткани-мишени, выделили специфику развития дистрофических и компенсаторных изменений при разных видах денервации (Пекарский М.И., 1963; Григорьева Т.А., 1966; Корытный Е.Я., 1966; Червова И.Д., 1966; Крыжановский Н.Г. с соавт., 1973, 1974; Строганова А.Б., 1972; Волкова О.В., 1978 и др.).
Известно, что деафферентация вызывает комплекс изменений, являющихся типичными для различного рода органов (Григорьева Т.А., 19511967; Зайденберг М.Д., 1963; Пекарский М.И., 1963; Волкова О.В., 1973, 1978; Елецкий Ю.К., 1984; и др.), определяемых как асептическое воспаление. Нарушения симпатической иннервации приводят к нарушению адаптационных реакций (Гинецинский А.Г., 1923; Орбели JI.A., 1923; Червова И.А., 1966; Говырин В.А., 1967; Cannon с соавт., 1929, 1949).
В меньшей степени изучены изменения нейроцитов и компенсаторные процессы в ганглиях, которые при нарушении межнейрональных связей также становятся мишенями нейродистрофического процесса (Милохин
A.A., 1967; Зайко H.H., 1974; Румянцева Т.А., 2002).
Некоторые авторы указывали на реакцию нейроцитов в ганглиях при хирургической денервации органов (Рудик Е.А., 1952; Картавенко А.Н., 1955; Ярыгин Н.Е., Шепелева Н.С., 1957; Зайденберг М.Д., 1960; Мосеев
B.П., 1970; Елецкий Ю.К., 1984; Когут Б.М., 1984; Шаширина М.И., 1986; Оррин Т. с соавт., 1998; Schmid, van der Zypen, Keller, 1979; Suzuki с соавт., 1997), в единичных работах показано влияние внутриутробной химической десимпатизации или химической десимпатизации половозрелых крыс на нейроциты чувствительных ганглиев (Руденок В.В., Сысов A.B., 1991; Шилкин В.В. с соавт., 1999; Румянцева Т.А., 2002), иммунологической де-симпатизации на интрамуральные нейроциты сердца и матки у мышей (Волкова О.В., 1978), химической деафферентации на симпатоциты шейно-грудных ганглиев, на нейроциты интрамуральных ганглиев желудка (Румянцева Т.А., 2001).
Появление веществ, обладающих избирательным токсическим действием на нейроциты разной природы, позволяет моделировать «чистые» де-нервации, определить особенности влияния разных частей нервной системы на органы-мишени, выявить особенности дистрофических и компенсаторных процессов в развивающемся организме.
Целью настоящей работы является установление закономерностей возрастных преобразований двигательной активности двенадцатиперстной кишки белой крысы в норме и в условиях химической десимпатизации и химической деафферентации.
Для реализации цели исследования были поставлены следующие задачи:
1. Получить нормативные данные о возрастных преобразованиях сократительной активности двенадцатиперстной кишки белой крысы в разные периоды постнатального онтогенеза;
2. Получить нормативные данные о возрастных преобразованиях ин-трамурального нервного сплетения двенадцатиперстной кишки белой крысы;
3. Оценить влияние десимпатизации, достигаемой при введении гуа-нетидина, и деафферентации, возникающей после введения капсаицина, на характер сократительной активности двенадцатиперстной кишки развивающейся белой крысы;
4. Выявить влияние десимпатизации и деафферентации на морфомет-рические и гистохимические характеристики интрамурального нервного сплетения двенадцатиперстной кишки развивающейся белой крысы;
5. Изучить морфо-функциональные корреляции между сократительной активностью двенадцатиперстной кишки и состоянием её нервного аппарата в постнатальном развитии белой крысы.
Работа выполнена на 240 самках белых крыс линии Вистар.
Возрастные особенности двигательной активности и морфологические и гистохимические особенности интрамурального нервного сплетения ДК изучены на 116 белых крысах. Для исследования брали крыс в возрасте от 2 до 270 суток, в соответствии с периодизацией онтогенеза крыс, предложенной И.П. Западнюком (1974).
Десимпатизацию проводили путем длительного введения гуанетиди-на, что позволяло достичь 95-97% убыли нейроцитов в шейно-грудном ганглии, т.е. создать модель «полной десимпатизации».
Химическую деафферентацию проводили путем однократного введения капсаицина новорожденным крысам, что позволяет достичь гибели почти 50% нейроцитов спинномозговых ганглиев, т.е. создать модель «частичной деафферентации».
У крыс каждой экспериментальной группы (всего 116 животных) оценивали состояние двигательной активности ДК по средней амплитуде колебаний, спектрограммам, построенным с помощью анализа Фурье, состояние интрамуральных сплетений ДК - по морфометрическим характеристикам нейроцитов, окрашенных по Нисслю, плотности АХЭ-позитивного сплетения в мышечной оболочке кишки, активности и характеру распределения конечного продукта реакции на МАО, ХЭ, НАДФ-диафоразу в цитоплазме нейроцитов. Животных выводили из опыта в разные сроки - от 14 до 270 суток жизни.
Для оценки стабильности, упорядоченности, зрелости системы двигательной активности ДК и нейроцитов интрамуральных ганглиев проводили информационный анализ (Кадыров Х.К., Антомонов Ю.Г., 1974; Jle-онтюк A.C., Леонтюк JI.A., Сыкало А.И., 1981; СлукаБ.А., 1983).
В результате исследования получены оригинальные данные о возрастных преобразованиях характеристик двигательной активности ДК и ин-трамурального нервного сплетения. Установлены как общие черты их развития на первом году жизни крысы, так и отличия в темпах преобразования и сроках достижения дефинитивного состояния.
Впервые показано, что двигательной активности ДК крысы свойственно гетерохронное достижение дефинитивного уровня амплитуды и частотного спектра сокращений. Амплитуда сокращений нарастает постепенно, причем периоды интенсивного прироста сменяются периодами стабилизации. Дефинитивный уровень достигается в середине ювенильного возраста (90 сутки). Частота сокращений первого порядка стабилизируется уже в подсосном возрасте (14 суток). Медленные волны достигают дефинитивной спектральной характеристики в инфантильном возрасте (30 суток), мощность колебаний преобладающего диапазона - только в конце молодого возраста (270 сутки).
Таким образом, частотные характеристики двигательной активности ДК устанавливаются в онтогенезе белой крысы быстрее амплитудных. Информационный анализ показал, что в целом система достигает дефинитивного состояния в конце ювенильного возраста на 90 сутки.
Доказано, что для возрастных преобразований нейроцитов интраму-ральных ганглиев ДК интактных животных также характерна гетерохрония становления признаков, свойственных дефинитивному состоянию. Быстрее всего происходит становление показателей активности НАДФ-диафоразы и плотности АХЭ-положительного сплетения - в инфантильном возрасте (30 сутки), позже - в начале ювенильного возраста (60 сутки) стабилизируются показатели площади сечения нейроцитов, а также активности ХЭ и МАО.
Показано, что с учетом информационных характеристик дефинитивного состояния интрамуральное сплетение ДК достигает в начале ювенильного возраста (60 сутки), т.е., на месяц раньше, чем устанавливается дефинитивный уровень двигательной активности ДК.
В работе впервые оценено влияние химической десипатизации, достигаемой путем введения гуанетидина, на становление двигательной активности и интрамурального сплетения ДК в развивающемся организме.
Установлено, что десимпатизация вызывает нарушение нормального становления двигательной активности ДК, что проявляется снижением частоты медленных волн и многократным снижением мощности колебаний преобладающего диапазона. Наибольшая выраженность изменений отмечается сразу после окончания инъекций гуанетидина и в отдаленные сроки - в молодом возрасте (180 суток). Информационные характеристики регистрируют в начале наблюдения повышение лабильности системы, затем относительную стабилизацию, переходящую в молодом возрасте в дезорганизацию.
Выявлены особенности нейродистрофического процесса в интраму-ральном сплетении ДК при десимпатизации. С учетом количества нейроци-тов, погибших в ранние сроки при первичном воздействии нейротоксина и в отдаленные сроки вследствие вторичного эффекта, «дистрофического индекса», нарушения активности ферментов, плотности АХЭ-позитивного сплетения, доказано, что десимпатизация вызывает в интрамуральном сплетении кишки прогрессирующий дистрофический процесс, который затрагивает все популяции нейроцитов интрамуральных ганглиев и продолжается в течение всего периода наблюдения.
Получены оригинальные данные о влиянии деафферентации, моделированной путем неонатального введения капсаицина, на возрастные преобразования двигательной активности ДК у белой крысы.
Установлено, что деафферентация вызывает отсроченные нарушения характера двигательной активности ДК у растущей крысы. Отставания темпов прироста амплитуды сокращений, задержка становления дефинитивного спектра медленноволновых сокращений, появление дополнительных диапазонов преобладающих колебаний, многократное отставание мощности колебаний преобладающих диапазонов появляются в инфантильном возрасте (30 сутки) и усугубляются в течение всего периода наблюдения до молодого возраста (180 суток). Информационные характеристики при деаффе-рентации отражают постепенность развития нарушений двигательной активности ДК, регистрируя в ранние сроки лабильность системы, затем нарастающую дезорганизацию, последующую относительную стабилизацию, сменяемую состоянием тяжелой дезорганизации.
Впервые показано, что часть нейроцитов в интрамуральных ганглиях ДК являются первично чувствительными к капсацину. Гибель нейроцитов, задержка роста нейроцитов, снижение активности ферментов (ХЭ, НАДФ-диафоразы, МАО), плотности АХЭ-позитивного сплетения выражены уже в ранние сроки (14-30 сутки). В отдаленные сроки в ганглиях наблюдаются компенсаторные процессы: уменьшение «дистрофического индекса», положительная динамика роста нейроцитов, повышение активности ферментов (ХЭ, МАО, НАДФ-диафоразы), но информационный анализ доказывает, что эта компенсация несостоятельна, а в отдаленные сроки диагностируется состояние глубокой дезорганизации.
В результате исследования удалось доказать, что выраженность дистрофических изменений в интрамуральных ганглиях определяет степень нарушения системы двигательной активности ДК, доказана зависимость показателей моторики ДК от состояния нервного аппарата.
В результате проведенного исследования впервые получены нормативные возрастные характеристики двигательной активности и интраму-рального нервного сплетения ДК у крыс на протяжении первого полугодия жизни, которые могут служить основой для морфо-функциональных исследований органов и тканей в эксперименте. Установлено, что часть нейроцитов интрамуральных ганглиев ДК являются гуанетидин-чувствительными и капсаицин-чувствительными, что необходимо учитывать в экспериментальной и клинической работе. Показано, что использованные схемы введения нейротоксинов могут использоваться для моделирования состояний приобретенного в периоде раннего развития дефицита симпатоцитов и афферентных нейроцитов, патологических состояний типа болезни Гиршпрунга, пи-лоростеноза, дискинезий, в целях фундаментальных исследований структуры и функции органов, адаптивных возможностей организма в целом и его отдельных систем при воздействии различных факторов, а также механизмов действия лекарственных препаратов.
Полученные нормативные данные, данные о динамике развития ней-родистрофического процесса и особенностях компенсаторных преобразований могут использоваться в учебном процессе при реализации программ высшего профессионального образования по специальностям медицинского и биологического профилей.
На защиту выносятся следующие положения:
1. Становление дефинитивного уровня двигательной активности двенадцатиперстной кишки белой крысы зависит от состояния ин-трамурального нервного сплетения.
2. Выраженность нарушений двигательной активности двенадцатиперстной кишки зависит от характера дистрофических изменений в интрамуральных ганглиях.
3. Возрастные преобразования двигательной активности двенадцатиперстной кишки крысы зависят как от афферентных, так и от симпатических влияний.
I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
Заключение Диссертация по теме "Физиология", Воробьева, Ольга Борисовна
выводы
1. Сократительная активность ДК выявляется у крыс уже при рождении и приобретает дефинитивные черты в конце ювенильного возраста (90 сутки). Механограмма ДК характеризуется высокочастотными низкоамплитудными и медленными высокоамплитудными колебаниями. Основными тенденциями возрастных преобразований сократительной активности ДК являются увеличение средней амплитуды сокращений и увеличение частоты и мощности медленных волн.
2. Интрамуральные межмышечные ганглии ДК гетерогенны по составу нейроцитов. В них выявляются ХЭ-позитивные, НАДФ-диафораза-позитивные и ферменто-негативные субпопуляции.
3. Для возрастных преобразований нейроцитов интрамуральных ганглиев ДК белых крыс характерна гетерохрония становления признаков. Становление показателей активности НАДФ-диафоразы и плотности АХЭ-положительного сплетения происходит в инфантильном возрасте (30 сутки), позже стабилизируются показатели площади сечения нейроцитов, активности ХЭ и МАО - в начале ювенильного возраста (60 сутки). В целом интра-муральное сплетение ДК достигает дефинитивного состояния в начале ювенильного возраста (60 сутки).
4. Десимпатизация вызывает нарушение нормального становления двигательной активности ДК, что проявляется снижением частоты медленных волн и многократным снижением мощности колебаний преобладающего диапазона, появлением в 90 суточном возрасте дополнительного диапазона преобладающих частот. Изменения отмечаются сразу после окончания инъекций гуанетидина - в инфантильном возрасте (30 сутки), и в последующем прогрессивно нарастают, достигая максимальных проявлений в отдаленные сроки - в молодом возрасте (180 суток).
5. Десимпатизация вызывает в интрамуральном сплетении кишки прогрессирующий дистрофический процесс, который затрагивает все популяции нейроцитов интрамуральных ганглиев и продолжается в течение всего пе
181 риода наблюдения, проявляясь гибелью нейроцитов в ранние сроки при первичном воздействии нейротоксина, и в отдаленные сроки, вследствие вторичного эффекта, высоким «дистрофическим индексом», нарушением активности ферментов, плотности АХЭ-позитивного сплетения, задержкой роста сохранившихся нейроцитов.
6. Деафферентация вызывает отсроченные нарушения характера двигательной активности ДК у растущей крысы. Отставания темпов прироста амплитуды сокращений, задержка становления дефинитивного спектра медлен-новолновых сокращений, появление дополнительных диапазонов преобладающих колебаний, многократное отставание мощности колебаний преобладающих диапазонов появляются в начале ювенильного возраста (60 сутки) и усугубляются в течение всего периода наблюдения до молодого возраста (180 суток).
7. Часть нейроцитов в интрамуральных ганглиях ДК являются первично чувствительными к капсацину. Гибель нейроцитов, задержка роста нейроцитов, снижение активности ферментов (ХЭ, НАДФ-диафоразы, МАО), плотности АХЭ-позитивного сплетения выражены уже в ранние сроки (14-30 сутки). В отдаленные сроки в ганглиях наблюдаются компенсаторные процессы: уменьшение «дистрофического индекса», положительная динамика роста нейроцитов, повышение активности ферментов (ХЭ, МАО, НАДФ-диафоразы), но информационный анализ доказывает, что эта компенсация несостоятельна, а в отдаленные сроки диагностируется состояние глубокой дезорганизации.
8. Сравнение характеристик двигательной активности ДК, состояния ин-трамурального нервного сплетения ДК, данных информационного анализа в норме и в эксперименте показывает, что выраженность нарушений системы двигательной активности зависит от глубины дистрофических изменений в интрамуральных ганглиях ДК, и изменения сократительной активности развиваются позже изменений интрамурального сплетения.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
В результате проведенного исследования установлены закономерности возрастных преобразований сократительной активности ДК, и получены объективные характеристики состояния нейроцитов межмышечных ганглиев ДК у белой крысы в норме и при воздействии гуанетидина и кап-саицина, которые используются в эксперименте в целях десимпатизации и деафферентации.
Оказалось, что уже у новорожденных крыс существует ритмическая двигательная активность ДК, что опровергает мнение части исследователей
06 отсутствии двигательной активности ЖКТ в таком раннем возрасте у животных (Кобакова, 1968, Liu L.W., Thuneberg L., Huizinga J.D., 1998) и подтверждает данные большинства исследователей, отмечавших раннее появление периодической активности в органах ЖКТ (Hillemeir С., Bitar K.N., Biancani D.P., 1985, 1991; Tomomasa T., Hyman P.E., Snape W.J., 1988; To-momasa T. с соавт., 1988; Zitterman J., Ryan J.P., 1990; Torihashi S., Ward S.M., Sanders K.M., 1997).
Сократительная активность ДК у новорожденных крысят характеризуется наличием нескольких диапазонов преобладающих частот в спектрограмме.
Частота сокращений первого порядка у новорожденных крысят составляет 0,40 Гц или 24 сокр/мин. Частота этих сокращений уже в подсосном возрасте, увеличиваясь, достигает дефинитивного уровня 0,57 Гц (34 сокр/мин).
Наши данные согласуются с данными S.Ohtani (1994), отмечавшего у
7 суточных крыс спектральную частоту ДК 26,8, а у взрослых крыс - 33,9 сокращений в минуту.
Ранняя стабилизация параметра частоты сокращений ДК свидетельствует об его выраженной независимости от других влияний. По мнению ряда авторов, именно эти высокочастотные колебания обеспечиваются пейсме-керной активностью клеток Кахаля второго типа (Ward S.M., Burns A.J.,
Torihashi S., Sanders K.M., 1994; Burns A.J. с соавт., 1996; Thuneberg L., 1999, Wang X.Y. с соавт., 2000).
Кроме высокочастотных сокращений, в ДК отмечается медленно волновой ритм колебаний, который, по мнению Thuneberg L. (1999), обусловлен пейсмекерной активностью клеток Кахаля первого типа, клеток обеспечивающих продольные, перистальтические сокращения мышечной оболочки кишки и расположенных в мышечных слоях органов ЖКТ. Именно им приписывается роль передатчиков нервных влияний на гладкомышечные клетки (Ward S.M. с соавт., 1994, 2000; Burns A.J. с соавт., 1996; Sanders K.M. с соавт., 1999; Wang X.Y. с соавт., 2000).
При анализе спектрограмм установлено, что медленные волны ДК имеют возрастные особенности. У новорожденных и 14 суточных крыс их частота находится в диапазоне от 0,0052 до 0,0260 Гц, в остальных возрастных группах - от 0,0153 до 0,0573 Гц. Т.е., происходит увеличение частоты медленных волн с возрастом. Дефинитивного уровня их характеристика достигает в инфантильном возрасте. Увеличение частоты этих колебаний происходит на фоне увеличения активности ХЭ в нейроцитах интрамураль-ных ганглиев и увеличения плотности АХЭ-позитивных сплетений в мышечной оболочке кишки, а также снижения уровня активности МАО в ганглиях. Сочетание этих изменений позволяет утверждать, что увеличение частоты медленных колебаний обусловлено повышением холинергических влияний.
Кроме высокочастотных и низкочастотных колебаний в раннем возрасте у крыс (новорожденные и 14 суточные) отмечается ещё один диапазон преобладающих частот, который занимает промежуточное положение на спектрограмме. Эти колебания исчезают в инфантильном возрасте. Их происхождение сложно объяснить. Но, возможно, они вызываются ещё одним водителем ритма, который проявляется из-за недостаточности тормозных влияний NO в возрасте 2-14 суток, что доказывается низким уровнем активности НАДФ-диафоразы в нейроцитах ДК в этом возрасте. Отчасти это подтверждается работами Regina S. с соавт. (1998), которые установили разную пейсмекерную активность в проксимальной и дистальной частях ДК, а также работами Богача П.Г. (1965), отмечавшего появление учащенного ритма сокращений вблизи мест разобщения интрамуральной иннервации поперечными перерезками стенок ДК.
Достижение дефинитивного уровня по средней амплитуде сокращений ДК происходит намного позже, чем по частоте, к 90 суткам жизни крысы. Постепенное ступенчатое увеличение средней амплитуды колебаний происходит с периодами интенсивного увеличения амплитуды (2-30 сутки, 60-90 сутки) и периодами стабилизации - 30-60 сутки, 90-270 сутки.
Попытаемся сопоставить динамику амплитуды с возрастными преобразованиями интрамурального межмышечного нервного сплетения ДК (Рис. 9.1).
Рис. 9.1. Средняя амплитуда сокращений ДК в норме и при денервациях.
Средняя площадь сечения нейроцитов интрамуральных ганглиев увеличивается в течение 270 суток жизни крысы в 4 раза. Увеличение средней площади сечения нейроцитов интрамуральных ганглиев ДК интактных крыс происходит неравномерно, наблюдается постепенное снижение интенсивности роста, сменяемое периодами относительной стабилизации
Рис. 9.2). Промежутками интенсивного роста нейроцитов являются 2-14 и 14-30 сутки жизни крыс, менее активного роста - 30-60 и 180-270 сутки, периодом стабилизации 60-180 сутки жизни крысы. Дефинитивное состояние по площади достигается в начале ювенильного возраста (60 сутки).
Также фазно изменяется и активность ХЭ в нейроцитах межмышечных ганглиев ДК (Рис. 9.5). У новорожденных активность фермента минимальна, в подсосном возрасте - возрастает, в инфантильном возрасте (до 30 суток) сохраняется без достоверных изменений, а в начале ювенильного возраста средние значения активности ХЭ достоверно увеличиваются, переходя на максимальный уровень. Достигнутый на 60 сутки уровень активности ХЭ до 270 суток не изменяется.
Рис. 9.2. Средняя площадь нейроцитов интрамуральных ганглиев ДК в норме и при денервациях.
В периодах интенсивного увеличения амплитуды (до 30 суток) наблюдается увеличение плотности АХЭ-позитивных волокон и увеличение активности НАДФ-диафоразы в цитоплазме нейроцитов в мышечной оболочке кишки, а также уменьшение активности МАО в ганглиях.
Оказывается, что наблюдаемые изменения амплитуды колебаний, площади сечения нейроцитов и активности ХЭ являются синхронными и почти полностью совпадают по периодам интенсивного увеличения и стабилизации.
Учитывая, что холинергические нервы оказывают стимулирующее влияние на моторику кишки, можно утверждать, что волнообразное увеличение амплитуды сокращений ДК обусловлено таким же волнообразным становлением дефинитивного уровня нервного контроля.
Это вполне объяснимо, т.к. амплитуда является производным от толщины мышечной оболочки, от сократительной способности гладких мышц и от нервных влияний (Овсянников В.И., Березина Т.П., 1994; Hillemeir С, Bitar KN, Bianci P., 1985, 1991; Tomomasa T, Hyman РЕ, Snape WJ., 1988; Hyman РЕ с соавт., 1989; Zitterman J, Ryan JP., 1990; Lu X, Zhao J, Gregersen H,. 2005).
Увеличение амплитуды колебаний также происходит на фоне снижения МАО-активности в ганглиях (Рис. 9.3), но стабилизация активности фермента происходит раньше, чем амплитуды, на 60 сутки.
Рис. 9.3. Активность МАО в интрамуральных ганглиях ДК в норме и при денервации.
Активность НАДФ-диафоразы - маркера >Ю-синтетазы - появляется позже других ферментов, а стабилизируется также на 60 сутки (Рис.9.4).
Возможно, что усиление ингибирующего влияния и ограничивает дальнейший рост амплитуды сокращений ДК. опт.ед.
14 30 60 90 120 180 возраст (сутки) контроль.десимпатизация----деафферентация
Рис. 9.4. Активности НАДФ-диафоразы в нейроцитах интрамуральных ганглиев ДК в норме и при денервациях.
Длительное введение гуанетидина вызывает выраженные изменения сократительной активности и морфо-гистохимических характеристик ин-трамурального нервного сплетения ДК, которые проявляются уже на момент окончания инъекций, т.е. в инфантильном возрасте.
Частота сокращений первого порядка в инфантильном возрасте составляет 0,56 Гц (33,6 сокр/мин), что не отличается от возрастного контроля. Достоверных изменений частоты этих сокращений в течение всего периода наблюдений не отмечается. Такая монотонность показателя характерна и для интактных крыс.
Выявленная стабильность ритма низкочастотных колебаний при де-симпатизации ещё раз доказывает выраженную независимость пейсмекер-ной активности клеток Кахаля второго типа от нервных влияний.
Медленноволновые колебания ДК к моменту окончания инъекций гуанетидина не исчезают, но имеют пониженную частоту в диапазоне характерном для спектрограмм интактных новорожденных и 14 суточных крыс. С возрастом эта особенность медленноволновых колебаний у десим
171 патизированных животных не исчезает. Даже в молодом возрасте (180 сутки) частота медленных колебаний остается сниженной. Кроме снижения частоты медленных сокращений отмечается многократное снижение мощности колебаний в преобладающем диапазоне частот.
Другой особенностью спектрограмм при десимпатизации является наличие дополнительного диапазона преобладающих колебаний с частотой выше «главного». Этот диапазон появляется при десимпатизации не сразу, а в середине ювенильного возраста.
Введение гуанетидина вызывает снижение средней амплитуды сокращений кишки в течение неполовозрелого периода жизни крыс с последующим возрастанием этого показателя у молодых животных выше контроля.
Эти изменения происходят на фоне повреждения нервного сплетения
ДК.
Ведущим изменением при десимпатизации является гибель значительной части нейроцитов, которая происходит фазно: во время введения гуанетидина гибнет 28% нейроцитов, в течение трех месяцев после - ещё 30%, затем (на 120 сутки) популяция стабилизируется. Причем отмечается разная чувствительность ферментопозитивных нейроцитов к гуанетидину.
Так, убыль ХЭ-позитивных нейроцитов при десимпатизации составляет 9,5% в инфантильном и возрастает до 40% в молодом возрасте. Убыль НАДФ-позитивных нейроцитов в инфантильном возрасте не отмечена, она проявляется позднее - в середине ювенильного возраста и достигает 50%.
Введение гуанетидина вызывает снижение активности ХЭ, которое сохраняется длительно, до 120 суток жизни крыс. Но активность ХЭ в течение всего срока наблюдения постепенно возрастает и в отдаленные сроки достигает контрольного уровня (Рис. 9.2).
Плотность АХЭ-позитивного сплетения при десимпатизации изменяется ступенчато. Первое снижение регистрируется на момент окончания инъекций, т.е. оно происходит во время введения токсина. Второе снижение приходится на окончание ювенильного возраста, через три месяца после окончания инъекций.
Введение гуанетидина вызывает снижение активности МАО, которое компенсируется уже через месяц после окончания инъекций, а к концу наблюдения активность фермента превосходит контроль в 1,5 раза. опт.ед. 50 т
20--------------------------------------- -----------------
10---------------------------------
0 -I-1-1-1-1
14 30 60 90 120 180 возраст (сутки)
-контроль.десимпатизация----деафферентация
Рис. 9.5. Активность ХЭ в нейроцитах интрамуральных ганглиев в норме и при денервации.
При десимпатизации замедляется рост нейроцитов при сохранении положительной возрастной динамики. Это отставание сохраняется весь период наблюдения, не компенсируется даже на 180 сутки жизни крыс.
Особенностью реакции нейроцитов интрамуральных ганглиев и АХЭ-позитивного сплетения ДК является фазность: изменения, происходящие во время введения гуанетидина, и отдаленные изменения вследствие вторичной гибели нейроцитов в ответ на десимпатизацию и нарушение местных межнейрональных контактов.
Изменения активности НАДФ-диафоразы имеют при десимпатизации особую динамику. Так, к окончанию инъекций гуанетидина активность диафоразы понижается, в ювенильном возрасте различия нарастают, а в отдаленные сроки динамика активности НАДФ-диафоразы меняется на положительную. К концу наблюдения активность фермента превосходит контроль.
Сопоставление изменений двигательной активности ДК с изменениями её нервного аппарата выявляет следующие взаимосвязи.
Снижение частоты медленных волн у десимпатизированных крыс наблюдается на фоне убыли количества ХЭ-позитивных нейроцитов, низкой активности ХЭ и снижения плотности АХЭ-позитивных волокон, что ещё раз подтверждает их взаимозависимость.
Наблюдаемое в отдаленные сроки повышение активности ХЭ в ней-роцитах, достигающее контрольных значений, не может компенсировать последствия вторичной гибели ХЭ-позитивных нейроцитов. Это объясняет сохранение низкой частоты медленных волн при десимпатизации и в отдаленные сроки.
Появление дополнительного диапазона преобладающих колебаний ДК в середине ювенильного возраста является признаком усугубления нарушений сократительной активности ДК. Можно предположить, что это связано с приходящейся на 90 сутки гибелью НАДФ-позитивных нейроцитов и снижением активности НАДФ-диафоразы.
Изменения этого фермента отражают недостаточность ингибирую-щих влияний, опосредованных N0, на пейсмекерную активность в ДК. Дефицит ингибирующих влияний и приводит, вероятно, к проявлению дополнительных, менее мощных пейсмекерных зон.
К концу наблюдения активность НАДФ-диафоразы в сохранившихся нейроцитах превышает контроль, но это не может компенсировать гибели 40% ферменто-позитивных нейроцитов, что и объясняет сохранение дополнительных волн в спектрограмме молодых крыс.
Сравнивая показатели средней амплитуды сокращений кишки при десимпатизации с ростом нейроцитов, стоит отметить параллелизм наблюдаемой динамики.
Отмечается прямая зависимость амплитуды от активности ХЭ: длительное снижение активности ХЭ при сохранении положительной возрастной динамики сопровождается отставанием от контроля амплитуды сокращений с последующим увеличением её выше контрольного уровня.
Введение гуанетидина вызывает снижение активности МАО, которое нивелируется уже через месяц после окончания инъекций, а к концу наблюдения активность фермента превосходит контроль в 1,5 раза. Хотя МАО участвует в том пути обмена катехоламинов, который не является ведущим для периферической нервной системы, наблюдаемая динамика изменений её активности при десимпатизации позволяет утверждать, что этот путь становиться компенсаторным.
Изменения сократительной активности ДК и её нервного аппарата, наблюдаемые при десимпатизации в ранние сроки после введения гуанетидина являются непосредственной реакцией на симпатолитик.
Системное необратимое истощение синтеза катехоламинов не приводит к увеличению проявлений холинергических влияний, что можно было ожидать, учитывая данные об ингибирующем влиянии катехоламинов на сократительную активность органов желудочно-кишечного тракта (Курцин, 1962; Крепе, 1963; Полтырев, Курцин, 1980; Авакян, 1988; Булекбаева и др., 1993). Мы не отмечали ни усиления сократительной активности ДК, ни активизации обмена ацетилхолина, а наоборот, гибель части ХЭ-позитивных нейроцитов, снижение плотности АХЭ-позитивных сплетений.
Аналогичный эффект гуанетидина - снижение активности ХЭ во время введения - отмечали в интрамуральных ганглиях желудка, в прямой кишке, в спинномозговых ганглиях, в узлах тройничного нерва, в шейно-грудных ганглиях и другие исследователи (Nozdrachev A.D., 1998; Аккура-тов Е.Г. с соавт.,1995, Румянцева Т.А, 2002). Вероятно, это последствия нарушения межклеточных взаимоотношений, где выпадение одного звена неизбежно приводит к нарушению в других (Ажипа Я.И., 1970, 1976; Волкова О.В., 1978, Руденок В.В., Сысов A.B., 1991).
Введение гуанетидина вызывает не только первичную реакцию, эффекты десимпатизации с возрастом нарастают. По-видимому, нарушение нервных влияний вызывает в ткани-мишени развитие изменений, комплекс которых принято называть «нейродистрофический процесс» (Гинецинский А.Г., 1923; Орбели Л.А., 1923; Сперанский А.Д., 1930; Лебединский A.B., Саввин Н.Г., 1945; Коштоянц Х.С., 1950; Григорьева Т.А., Лебединский
A.B., 1963, Аничков C.B., Заводская И.С., 1965; Аничков C.B. с соавт., 1969; Зайко H.H., 1966,1974; АжипаЯ.И., 1970, 1976; Волкова О.В., 1978).
Развитие нейродистрофического процесса проявляется в первую очередь тем, что постепенно изменения захватывают даже те популяции ней-роцитов, которые не реагировали на непосредственное введение гуанетидина - НАДФ-диафораза - позитивные нейроциты. Нарушения характера сократительной активности ДК - появление дополнительных волн, отставание средней амплитуды сокращений, резкое падение мощности колебаний в диапазонах преобладающих частот, свидетельствует о развитии дистрофического процесса и в мышечной оболочке кишки.
Регистрируемые изменения подтверждают положение об адаптационно-трофическом влиянии симпатического отдела вегетативной нервной системы на органы и ткани-мишени.
Неонатальное введение капсаицина в дозе 100 мг/кг вызывает гибель 30-50% (в зависимости от возраста) нейроцитов в первом грудном спинномозговом ганглии, гибель части популяции нейроцитов в тройничном ганглии и в каудальном ганглии блуждающего нерва у крыс, что позволяет говорить о «частичной» системной деафферентации (Румянцева Т.А., Шилкин
B.В., Ковригина Т.Р., Филимонов В.И., 1999; Brzozowski с соавт., 1995; Geirsson с соавт., 1995).
Становление сократительной активности ДК в условиях денервации приобретает особые черты.
Частота сокращений первого порядка при деафферентации в течение неполовозрелого периода составляет 0,52-0,56 Гц (31-33 сокр/мин) и не отличается от контроля, а в молодом возрасте достоверно снижается до 0,47 Гц (28 сокр/мин).
Медленные волны ДК в подсосном возрасте по частоте не отличались от нормы, для которой характерна низкая частота колебаний «главного» преобладающего диапазона. С 30 по 120 сутки отмечается отставание частоты колебаний медленных волн от контроля. У деафферентированных крыс она не изменяется, по сравнению с подсосным возрастом, а в норме постепенно возрастает. В конце наблюдения на 180 сутки частота «главного» медленноволнового диапазона возрастает, достигая контрольного уровня.
Особенностью медленных волн во все сроки наблюдения является очень низкая мощность, причем с возрастом эти различия только усугубляются.
В спектрограмме ДК при деафферентации отмечается дополнительный диапазон преобладающих колебаний. Но эти колебания присущи не всем возрастам. У 14 суточных второй диапазон преобладающих колебаний в спектрограмме является нормой. В инфантильном возрасте в норме он должен исчезать, но при деафферентации этот диапазон сохраняется. Почти полное исчезновение второго диапазона наблюдается только в начале ювенильного возраста (60 сутки). У 90 суточных он также не выражен. Зато у 120 суточных крыс, и, особенно у 180 суточных животных, в спектрограмме второй диапазон преобладающих частот проявляется очень резко.
Средняя амплитуда сокращений ДК у деафферентированных крыс в течение периода молочного кормления (до 30 суток) достоверно не отличается от контроля, а в ювенильном возрасте снижается и по отношению к показателям 30 суточных крыс и относительно интактных крыс. Положительная возрастная динамика появляется в конце ювенильного возраста, но показатели остаются ниже контроля.
Изменения сократительной активности ДК при деафферентации происходят на фоне следующих изменений интрамурального нервного аппарата кишки.
Введение капсаицина вызывает гибель значительного количества (32%) нейроцитов в течение первого месяца жизни крыс. В отдаленные сроки убыль нейроцитов незначительна (7% за пять месяцев).
Разные популяции нейроцитов обладают разной чувствительностью к нейротоксину.
Убыль ХЭ-позитивных нейроцитов в течение первого месяца составляет 28% и в отдаленные сроки достигает 53%. Большая часть нейроцитов, в том числе ХЭ-позитивных, гибнет в течение месяца после введения капсаицина, т.е. их можно считать первично чувствительными к капсаицину, но и в отдаленные сроки в этой популяции отмечается значительная убыль ХЭ-позитивных клеток, как реакция на дефицит афферентации.
Активность ХЭ длительное время после введения капсаицина резко снижена, в начале ювенильного возраста увеличивается, но в отдаленные сроки не достигает контроля.
Плотность АХЭ-позитивного сплетения при деафферентации уменьшается на 30 сутки и различия с контролем в отдаленные сроки нарастают.
Убыль НАДФ-диафораза-позитивных нейроцитов имеет фазный характер: снижение количества НАДФ-диафораза позитивных нейроцитов в 3 раза (66%) в периоде молочного кормления, в 1,5-2 раза (33%) в ювениль-ном и в 6 раз (83%) в молодом возрастах. Эту фазность можно объяснить восстановлением позитивности части нейроцитов в ювенильном возрасте.
Активность НАДФ-диафоразы в нейроцитах ганглиев ДК при деафферентации в ранние сроки наблюдения достаточно длительно (до 60 суток) была понижена, затем постепенно возрастала, превышая в молодом возрасте контроль.
Активность МАО в ганглиях ДК при деафферентации имела отличную от других ферментов динамику: в ранние сроки наблюдения была понижена (14 сутки), затем повышалась у 30 суточных крыс до уровня контроля. А в отдаленные сроки превышала контрольные значения.
Введение капсаицина изменяет нормальную возрастную динамику площади сечения нейроцитов. Основной тенденцией является длительная задержка роста нейроцитов, положительная динамика площади появляется только на 60 сутки, но и в молодом возрасте значения параметра не достигают контроля.
Сопоставление изменений сократительной активности ДК с изменениями состояния интрамурального нервного аппарата при деафферентации выявляет следующие взаимозависимости изученных характеристик.
Влияние деафферентации сказывается на большинстве параметров ДК не сразу, а к концу второго месяца наблюдения, т.е. в начале ювениль-ного возраста.
Для медленных волн дефицит нервных влияний - массовая гибель нейроцитов всех изученных популяций - сказывается сохранением низкой частоты, характерной для подсосного возраста в течение всего неполовозрелого периода. Важную роль в этом отставании развития ритма играет, по-видимому, снижение плотности АХЭ-сплетения и резкое снижение активности ХЭ, отражающее низкий уровень ацетилхолина.
При объяснении наличия в спектрограммах второго преобладающего диапазона можно выделить две причины. Во-первых, сохранение второго диапазона в инфантильном возрасте можно считать признаком задержки становления нервных влияний на сократительную активность ДК в условиях массовой гибели нейроцитов и высокой чувствительностью НАДФ-диафораза-позитивной популяции нейроцитов к нейротоксину. Во-вторых, появление этого диапазона в отдаленные сроки можно считать проявлением вторичного нейродистрофического процесса в денервированной ткани и необратимым влиянием этого процесса на НАДФ-диафораза-позитивную популяцию (гибель 83% нейроцитов).
Отсутствие второго диапазона преобладающих частот в спектрограмме ювенильных животных объясняется восстановлением активности НАДФ-диафоразы в части нейроцитов, сохранившихся после первичного действия капсаицина.
Сравнение динамики показателя средней амплитуды сокращений кишки с ростом нейроцитов и активностью ХЭ выявляет определенный параллелизм изменений этих параметров (Рис. 9.1 и 9.2).
Изменения характера сократительной активности и в интрамураль-ных ганглиях ДК, выявленные при химической деафферентации капсаици-ном, подтверждают, что афферентная иннервация оказывает стимулирующее действие на мишень иннервации, обеспечивая процессы роста и развития в соответствии с меняющимися функциональными требованиями (Никифоров А.Ф., 1973; Волкова О.В., 1978; Елецкий Ю.К., 1984; Шаширина М.И., 1986; Подольская Л.А., 1989; Fike 4th, Simons, Boswell, Smith, 1992; Hiura, López-Villalobos, Ishizuka, 1992).
Анализ последствий химических денерваций показал, что существует выраженная зависимость возрастных преобразований спонтанной двигательной активности ДК от афферентных и эфферентных нервных влияний.
Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Воробьева, Ольга Борисовна, Ярославль
1. Авакян О.М. Фармакологическая регуляция функций адренорецепторов.-М.: Медицина, 1988. 256 с.
2. Автандилов Г.Г. Морфология в патологии. М: Медицина, 1973. 248 с.
3. Ажипа Я.И. Нейро-гуморальные отношения при нейродистрофическом процессе. Дисс. д-ра мед. наук. М., 1970. 1082 с.
4. Ажипа Я.И. Трофическая функция нервной системы. М.: Медицина, 1990.672 с.
5. Ажипа Я.И.Нервы желез внутренней секреции и медиаторы регуляций эндокринных функций. М.: Наука, 1976. 440 с.
6. Аккуратов Е.Г., Воробьева О.Б., Ноздрачев А.Д., Обрезчикова М.Н., Румянцева Т.А., Филимонов В.И., Шилкин В.В. Морфология и реактивные изменения нервных структур при химической десимпатизации // Физи-ол.журн.им. И.М.Сеченова.- 1995. №10. - С.44-50.
7. Александров А.Н., Овсянников В.И. О возбуждающих эффектах стимуляции пресинаптических бета-адренорецепторов подвздошной кишки у наркотизированных кроликов // Успехи физиол. наук, 1993. №10. -с.341-345.
8. Амвросьев А.П. Анатомия афферентных систем пищеварительного тракта.
9. Минск: Наука и техника, 1972. 312 с.
10. Амвросьев А.П. Морфология периферической нервной системы. Минск.,1966.- С. 37-49.
11. Амвросьев А.П. В кн.: Нервные и гуморальные механизмы рефлекторных реакций. Минск., 1968, 127 с.
12. Амвросьев А.П., Рыхликова Г.Г. Строение афферентного звена периферических висцеро-висцеральных рефлекторных механизмов поперечной ободочной кишки//ДАН БССР. 1973. - Т. 17. -№ 11.-С. 1061-1065.
13. Амвросьева С.П. Структурная организация иннервационного аппарата тощей кишки// Функциональная нейроморфология. Фундаментальные и прикладные исследования. К 100-летию академика Д.М. Голуба. Минск, 2001. С. 39-41.
14. Аничков C.B., Заводская И.С. Фармакотерапия язвенной болезни. JI., 1965.
15. Аничков C.B., Заводская И.С., Морева Е.В., Веденеева З.И. Нейрогенныедистрофии и их фармакотерапия. Л., 1969.
16. Арчакова Л.И. Изучение передачи нервных импульсов по кишечнику в условиях его денервации на различном протяжении // В сб.: Нервные и гуморальные механизмы рефлекторных реакций. Минск, 1968. С.50.
17. Бабурин В.Э., Суворова Л.В. Ферментативная активность нейронов разных отделов пищеварительной трубки в постнатальном онтогенезе крыс // Архив анат.,гист.,эмбриол., 1988. Т. 95, № 8. - С. 27-32.
18. Березина Т.П., Овсянников В.И. Влияние ацетилхолина на сократительные реакции подвздошной кишки кошки, вызванной серотонином, до и после блокады холинорецепторов // Физиол. журн. СССР, 1983.- Т. 69. -№11.- С.1491-1497.
19. Березина Т.П., Овсянников В.И. Роль адренергических механизмов в проявлении сократительных эффектов гладкой мускулатуры подвздоший кишки, вызванной серотонином // Физиол. журн. СССР, 1985.- Т. 71. № 6. - С.1769-1776.
20. Билич И.Л., Хамитов Х.С. Ацетилхолин, серотонин в норме и патологии желудочно-кишечного тракта. — Казань: Татар.кн.изд-во, 1977. 280 с.
21. Блаттнер Р., Классен X., Ценерт X., Деринг X. Эксперименты на изолированных препаратах гладких мышц. Москва, «Мир», 1983. 206 с.
22. Богач П.Г. Природа и физиологическое значение периодической деятельности пищеварительного аппарата// В кн.: Периодическая деятельность пищеварительного аппарата. Докл.симпозиума. Киев: Изд-во КГУ, 1965. С. 22-26.
23. Борисов М.М., Мухаммедов А., Родионов И.М., Ярыгин В.Н. Исследование деструкции симпатических ганглиев при введении гуанетидина новорожденным крысам и мышам // Онтогенез. 1977 Т.8. - №3. - С.311-313.
24. Булекбаева Л.Э., Хантурин М.Р., Лакпаева Ш.Г. Механизмы адренергических и холинергических влияний на лимфатические сосуды рептилий // Физиол. журн. им.И.М.Сеченова. 1993. - Т.79. - № 10. - С.55-59.
25. Булыгин И.А. Афферентное звено интероцептивных рефлексов. Минск:1841. Наука и техника, 1971.
26. Булыгин H.A. Афферентные пути интероцептивных рефлексов. Минск: Наука и техника, 1970. 289 с.
27. Булыгин H.A. Рефлекторная функция вегетативных ганглиев. Минск: Наука и техника, 1976. 304 с.
28. Виноградова О.Н. Рецепторы пищеварительного тракта лошади // Архив анат., гист., эмбр.- 1952.- Т. 29.,№4.- С. 48-53.
29. Волкова О.В. Гистофизиология эндокринной системы при нарушении механизмов нервной регуляции // Архив АГЭ 1973.- т. 65.-№ 10.- С. 19-36.
30. Волкова О.В. Нейродистрофический процесс. М., Медицина, 1978. 256 с.
31. Гилинский Е.Я. Материалы по морфологии рецепторного аппарата желудка позвоночных. M.-JL, 1958.
32. Гинецинский А.Г. Влияние симпатической нервной системы на функцию поперечно-полосатой мышцы //Русск. Физиол. Журнал.- 1923.-т.6.-№ 1-З.-С. 139.
33. Гиниатуллин P.A. Критический уровень секреции медиатора в нервно-мышечном синапсе теплокровных и холоднокровных животных // Успехи физиологических наук.- 1994.-Т.25.-№ 1.- С.102-103.
34. Гнетов A.B., Ноздрачев А.Д., Степанова Т.П. Механизмы регуляции активности продольного слоя гладких мышц кишки мальмы // Физиологический журнал им.И.М.Сеченова. 1991. - Т.77. - № 8. - С. 122-129.
35. Гнетов A.B., Степанова Т.П., Ноздрачев А.Д. Спонтанная и вызванная раздражением экстраорганных нервов моторика желудка мальмы // Физиологический журнал им.И.М.Сеченова. 1990. - Т.76. - № 10. - С.1432-1439.
36. Говырин В.А. Трофическая функция симпатических нервов и скелетных мышц. JL: Наука, 1967. 132 с.
37. Григорьева Т.А. Морфологические изменения лимфатических узлов при их чувствительной денервации // Лимфоидная ткань в восстановительных и защитных процессах. М.- 1966.- С. 105.
38. Григорьева Т.А. О причине трофических расстройств в лишенных чувствительности участках организма // Докл. АН СССР. 1951. - Т. 78. - № 2. -С. 387-390.
39. Дьячкова Л.И. Чувствительная иннервация и состояние тканевых элементов в стенке желудка при перерезке блуждающих нервов // Архив анат.,185гист., эмбр.- 1963.- № 12. С. 30-34.
40. Елецкий Ю.К., Цибулевский А.Ю., Сиротин И.А. Изменения тонкой кишки крыс в условиях нарушения симпатической и парасимпатической иннервации // Морфология.- 1994.- Т.107, вып. 7-12.- С.100-110.
41. Жаботинский Ю.М. Нормальная и патологическая морфология вегетативных ганглиев. М.: Изд-во АМН СССР, 1953. 292 с.
42. Жук В.В. Реиннервация желудка после ваготомии //Автореф. дисс.канд.мед.наук. Минск, 1988. 24 с.
43. Зайденберг М.Д. Морфологические изменения в слизистой оболочке тонкого кишечника после удаления чувствительных спинномозговых узлов // Бюлл.эксперим.биол. и мед.-1963 т. 55.-№ 1.- С. 118-121.
44. Зайденберг М.Д. Об изменения х слизистой оболочки желудка при его чувствительной денервации // Бюлл. Москов. об-ва испыт. природы. Отдел. биол.- 1960.-Т.65.- № 2.- С. 159-160.
45. Зайко H.H. Нервная трофика и нейродистрофический процесс // Патологическая физиология пищеварительной системы печени, эндокринной и нервной системы.- М, 1966. № 4. - С. 513-536.
46. Зайко H.H. Патологические проблемы нервной трофики. Киев: Киев.мед инс-т, 1974. С.43-46.
47. Западнюк И.П., Западнюк В.И., Захария Е.А. Лабораторные животные. Разведение, содержание, использование в эксперименте // Киев, «Вища школа», 1974, 304 с.
48. Зуга М.В. Нитрооксидсинтетаза легких и значение NO-ергического механизма в регуляции проходимости бронхов. Автореф.канд.дис., Владивосток, 1996.
49. Иванов Н.М., Чаиркин И.Н. Нервный аппарат мочевого пузыря в норме и при перевязке внутренней подвздошной артерии // В сб.: Структура и функции вегетативной нервной системы. Материалы 1-го международного симпозиума.- Воронеж.-1995.-С.36-37.
50. Иванова Т.С. Рецепторная иннервация тонкой кишки // Наука.-1967.-С.139186
51. Исаханов Г.И. Изменения периодической моторной деятельности желудка после перерезок кишечника на разных уровнях // Бюл.эксп.биол. и мед.-1968.- Т.66, № 7.-С. 45-48.
52. Кадыров Х.К., Антомонов Ю.Г. Синтез математических моделей биологических и медицинских систем. Киев: Наукова думка.-1974.-224 с.
53. Картавенко А.Н. Роль неврогенного фактора в патогенезе и клинике язвенной болезни желудка и 12-перстной кишки. Дисс.докт., Смоленск, 1955.
54. Князева JI.A., Ван Хэмин, Чарыева И.Г., Гаман С.А., Пылаев A.C. SIF-клетки вегетативных ганглиев//В сб.: Структура и функции вегетативной нервной системы. Материалы 1-го международного симпозиума.-Воронеж.-1995.-С.43-44.
55. Кобакова Е.М. Нервная регуляция двигательной функции тонкого кишечника в онтогенезе. — JL: Наука, 1968. 368 с.
56. Коваль JI.M. Экспериментально-морфологическое изучение проводящих и межнейронных связей верхнего шейного симпатического узла кошки. Автореф. дис. канд. биол. Наук. Белая Церковь, 1975. 26 с.
57. Колосов Н.Г., Забусов Г.И. Zur Frage über den Bau des autonomen Nerversystems // Anat. Anz.-1932.-Bd.74.-S.417.
58. Корочкин Л.И. Дифференцировка и старение вегетативного нейрона. М.-Л. 1965.
59. Корытный Е.Я. Значение симпатического нейрона в восстановительном процессе поврежденной скелетной мышцы // Некоторые вопросы морфологии и физиологии.-Минск, 1966.-С.106-110.
60. Косицкий Г.И., Червова И.А. Сердце как саморегулирующаяся система (Интрамуральная нервная система и ее роль в регуляции функции сердца). М.: Медицина, 1968. 131с.
61. Коштоянц X.С. Основы сравнительной физиологии. М.-Л. 1950.
62. Крепе O.K. Фармакология. Курс лекций. М.: Медицина, 1963. - 293 с.
63. Крохина Е.М. Функциональная морфология и гистохимия вегетативной иннервации сердца. М.: Медицина, 1973. 231 с.
64. Кругляков П.П. Вегетативная система млекопитающих животных и человека в онтогенезе. Автореф.докт.дисс., Саранск. 1996. 36 с.
65. Кругляков П.П., Одыванова JI.P. Чаиркина И.Н., Гуски Г., Швалев В.Н., Сосунов A.A. Межнейрональные взаимоотношения в вегетативных ганглиях (ультраструктурные аспекты) // Морфология.-1997.-T.III., N. 1.-С. 35-39.
66. Крыжановский Г.Н. Дистрофический процесс // Арх. Пат.-1974.-№ 5 — С.3-13.
67. Крыжановский Г.Н. Некоторые общие вопросы теории нервной трофики и нервных дистрофий // Вестн. АМН СССР.-1973.-№ 9.-С.67-77.
68. Кулькин С.Г. К эмбриогенезу нервного аппарата мочевого пузыря человека. Автореф. канд. дисс. Волгоград, 1957. 23 с.
69. Курцин И.Т. Механорецепторы желудка и работа пищеварительного аппарата. М.; Л.: Изд-во АН СССР, 1952. 350 с.
70. Лакин Г.Ф. Биометрия. М., «Высшая школа», 1990, С.352.
71. Лапша В.И. Роль интрамуральных ганглиев и сплетений в осуществлении периферических рефлексов с желудка на кишечник //В сб.: Нервные и гуморальные механизмы регуляции функций. Минск.-1969.-С.61.
72. Лебединский A.B., Саввин Н.Г. О механизме возникновения нейрогенных дистрофий. Л., 1945.
73. Ле-Ван Минь Строение и связи нервных сплетений желудка у человека и животных. Автореф.дисс.канд.мед.наук. Киев, 1978. 20 с.
74. Леонтюк A.C., Леонтюк Л.А., Сыкало А.И. Информационный анализ в морфологических исследованиях. Минск, 1981. 160 с.
75. Лойко Л.А. Структурно-функциональные особенности аффрентных систем илеоцекального отдела кишечника. Автореф. канд. дис. Минск, 1972. 26 с.
76. Марков В.Н., Древаль A.A., Ярыгин В.Н. Радиографический и электрон-номикроскопический анализ симпатических нейроцитов после частичной химической десимпатизации крыс разного возраста // Архив анат., гист., эмбр.-1982.-Т.83., Вып. 10.-С.35-42.
77. Медведев М.А., Патюков А.Г. Влияние гистамина, серотонина и бради-кинина на электрофизиологические и сократительные свойства гладких мышц двенадцатиперстной кишки собаки // Физиологический журнал им.И.М.Сеченова. 1983. - Т.69. - № 10. - С.1371-1375.
78. Мельман Е.П. Функциональная морфология иннервации органов пищеварения. М.: Медицина. 1970. 328 с.
79. Мещеряков A.M. Вегетативное нервное сплетение таза (экспериментально-морфологическое исследование). Автореф. докт. дисс. Казань, 1951.
80. Милохин A.A. Интерорецепторы пищеварительного тракта некоторых низших позвоночных. M.-JI. 1963.
81. Милохин A.A. К вопросу о собственной рефлекторной дуге кишечника // Докл. АН СССР.1953.-Т.93, N5.-C.933-935.
82. Милохин A.A. Чувствительная иннервация вегетативных нейронов. Новое в представлении о структурной организации вегетативного ганглия. JL: Наука, 1967. 68 с.
83. Михельсон М.Я., Зеймаль Э.В. Ацетилхолин. JL: Наука, 1970. - 97 с.
84. Мосеев В.П. Морфологические и функциональные изменения желудка после частичной его денервации Дисс.канд.мед.наук, Ярославль, 1970. 269 с.
85. Мотавкин П.А., Зуга М.В. Окись азота и её значение в регуляции легочных функций // Морфология.-1998.-Т.114, №5.-С.99-111.
86. Никифоров А.Ф. Афферентный нейрон и нейродистрофический процесс. М., Медицина. 1973. - 192 с.
87. Николаев Г.М.и Шилкин В.В. Опыт определения активности ацетилхоли-нэстеразы в структурах периферической нервной системы // Проблемы морфогенеза периферических нервов: сб. трудов ЯМИ.-Ярославль.-1983.-С.64-72.
88. Ноздрачев А.Д. Адренэргические, холинэргические, серотонинэргические и пептидэргические нейроны метасимпатической нервной системы // Фи-зиол. журн. СССР.-1984.-Т.70, N5.-C.649-661.
89. Ноздрачев А.Д. Анатомическая структура вегетативной нервной системы // Физиология вегетативной нервной системы. Л.: Наука, 1981. С. 31-34.
90. Ноздрачев А.Д. Физиология вегетативной нервной системы. JL: Медицина, 1983.296с.
91. Овсянников В.И., Павлов О.Г. Возбуждающие ß-адренорецепторы на хо-линергических интернейронах миэнтерального сплетения // Физиол. журн. им.И.М.Сеченова. 1988. - Т.74. - № 5. - С.671-680.
92. Оррин Т., Роосаар П., Аренд А., Сепп Э., Хуссар Ю. Изменения слизистой оболочки желудка у крыс в отдаленные сроки после стволовой ваго-томии и пилоропластики// Морфология.-1998.-Т.114, №6.-С.63-67.
93. Пекарский М.И. Реакция костного мозга на смешанную, симпатическую и чувствительную денервацию. Дисс.канд.мед.наук. М., 1963.
94. Пилипенко В.И. Материалы к функциональной морфологии периферической нервной системы // Бюлл. экспер. биол. и мед., 1957.-Т.41, № 5.-С.70.
95. Подольская J1.A. Влияние реактивной перестройки спинальных нейронов на структуру и функцию своих чувствительных отростков.// Структурные превращения нейрона пр раздражающих воздействиях. JL, «Наука».-1989.-С.61-68.
96. Полтырев С.С., Курцин И.Т. Физиология пищеварения. М.: Высшая школа, 1980. 256 с.
97. Родионов И.М., Ярыгин В.Н., Мухаммедов А.А Иммунологическая и химическая десимпатизация. М.: Наука, 1988. 152 с.
98. Руденок В.В., Сысов A.B. Строение нейронов шейных спинномозговых узлов плода белой крысы при химической десимпатизации гуанетидином беременной самки // 2-й съезд анатомов, гистологов, эмбриологов Белоруссии: Тез.докл. Минск, 1991. С. 150.
99. Рудик Е.А. Морфологические изменения желудка при перерезке блуждающих нервов. //Архив патол.-1952.-Т.14, №6.-С.59-63.
100. Румянцева Т.А. Влияние введения капсаицина на развитие нейроцитов чувствительных узлов белой крысы // Функциональная нейроморфоло-гия. Фундаментальные и прикладные исследования. К 100-летию академика HAH Беларуси Д.М.Голуба. Минск. 2001.-С. 163-166.
101. Румянцева Т.А. Влияние химической десимпатизации и деафферента-ции на нейроциты экстра- и интрамуральных ганглиев в постнатальном онтогенезе белой крысы. Дисс. докт. Ярославль, 2002. 384 с.
102. Румянцева Т.А. Изменения нейроцитов интрамуральных ганглиев желудка у десимпатизированной и деафферентированной белой крысы // Морфология.-2001 -Т.120, № 4.-С.82-83.
103. Румянцева Т.А., Шилкин В.В., Ковригина Т.Р., Филимонов В.И. Влияние введения капсаицина на нейроциты спинномозговых ганглиев белой крысы // Российские морфологические ведомости.-1999.-№1-2.-С.167-168.
104. Русова Э.М. Состояние интрамуральной нервной системы сердца при воздействии инадекватного раздражителя на некоторые органы // Вопросы морфологии в теоретической и клинической медицине. Труды Крымского медицинского института.-1982.-Т.91.-С.30-33.
105. Ряховская JI.B., Адамацкий А.И. Связи нейронов симпатических ганглиев с миэнтеральным нервным сплетением ободочной кишки млекопитающих // Архив АГЭ.-1986.-Т.91, №10.-С.15-21.
106. Слука Б.А. Информационный анализ нейроцитов некоторых периферических ганглиев и критические периоды их функционирования // Архив АГЭ.-1983.-Т.84, №2.-С. 16-22.
107. Слука Б.А. Структура нейронов симпатических ганглиев при химической десимпатизации гуанетидином // Архив АГЭ.-1987.-Т. 93, B.9.-C.64-70.
108. Смирнов В.М. Гипотеза о серотонинергической иннервации желудка и кишечника // В сб.:Механизмы функционирования висцеральных систем. Тез.докл. междунар. Конференции, посвящен. 150-летию И.П.Павлова, СП6.-1999.-С.350-351.
109. Солтанов В.В. Электрофизиологический анализ афферентных систем желудочно-кишечного тракта. Автореф. докт. дис. Минск, 1975.
110. Сперанский А.Д. Нервная система и патология. М., 1930.
111. Столяров В.А. Микроморфология интрамуральной нервной системы тонкой кишки у новорожденных телят // Современные проблемы нейробиологии. Матер.З-го международ, симпозиума, 21-22 июня 2001 г., Саранск. Тез.докл. Саранск, 2001.-С.72.
112. Стрелков A.A. Источники иннервации грудного отдела пищевода кошки // Морфология.-1998.-Т.113,-№ 3.-С.116.
113. Строганова А.Б. Регенерация экзокринного отдела поджелудочной железы в норме и в условиях поддиафрагмальной ваготомии. Дисс. канд. мед. наук. М, 1972.
114. Струков А.И., Ярыгин Н.Е., Лапин С.К. Вопросы классификации структурных изменений элементов нервной системы // В кн.: Вопросы морфологии нервной системы. М.-1960.-С.69.
115. Тельцов Л.П., Кизим Э.В. Периодизация развития нервной ткани стенки тонкого и толстого кишечника// Современные проблемы нейробиологии. Матер.З-го междунар. симпозиума, 21-22 июня 2001 г., Саранск. Тез.докл. Саранск.-2001.-С.74-75.
116. Устинов В.Н. Конфигурация биопотенциалов гладких мышц желудка и двенадцатиперстной кишки // Физиол. журн. СССР, 1974. Т.60. - С. 961-971.
117. Червова И.А. Экспериментальный анализ нейрогенных поражений сердца. Дисс. докт, М., 1966, 322 с.
118. Червонная И.П. Сердечная деятельность у неонатально десимпатизиро-ванных животных // В сб.: Механизмы функционирования висцеральных систем. Тез. докл. междунар. конференции, посвящен. 150-летию И.П.Павлова, СП6.-1999.-С.394-395.
119. Чумасов Е.И., Майстренко H.A. Изменения интрамурального нервного192аппарата желудка и желчного пузыря в отдаленные сроки после вагото-мии // Архив анат., гист., эмбриол.-1990.-№11.-С.28-35.
120. Шаширина М.И. Реакция нейронов интрамуральных ганглиев поджелудочной железы морской свинки на нарушение их связей с ЦНС// Архив анат.,гист.,эмбр.-1986.-Т.91, №10.-С.11-15.
121. Шилкин В.В., Румянцева Т.А., Ковригина Т.Р., Филимонов В.И. Влияние введения капсаицина на нейроциты спинномозговых ганглиев белой крысы // Российские морфологические ведомости.-1999.-№1-2.-С.167-168.
122. Ярыгин Н.Е., Шепелева Н.С. Отдаленные результаты при двусторонней ваготомии // Архив патол.-1957.-Т.19, № 7.-С.41-44.
123. Ярыгин Н.Е., Ярыгин В.Н. Патологические и приспособительные изменения нейрона. М., Медицина, 1973. 190 с.
124. Aberg G., Eranko O. Localization of noradrenaline and acetylcholinesterase in the taenia of the guinea-pig caecum // Acta Physiol. Scand. 1967.- V.69.-P. 383.
125. Adnot S., Raffestin В., Eddahibi S. NO in the lung // Respir.Physiol.-1995.-V.101, № 2.-P. 109-120.
126. Aim P., Ekstrom J. Outgrowth of cholinergic nerves in the rat urinary bladder either partially denervated or partially denervated and decentralized // Acta Physiol. Scand.-1981 .-V. 112, №2.-P. 179-183.
127. Alvarez WC: Functional variation in contractions of different parts of the small intestine // Am J Physiol.-1974.-V.35.-P.177-193.
128. Angeletti P.U., Levi-Montalcini R. Growth inhibition of sympathetic cells by some adrenergic blocking agents // Proc. Nat. Acad. Sci. 1972. -Vol. 69, N 1. - P. 86-88.
129. Arbuckle J.B., Docherty R.J. Expression of tetrodotoxin-resistant sodium channels in capsaicin-sensitive dorsal root ganglion neurons of adult rats // Neurosci. Lett. 1995. - 185 (1).- P. 70-73.
130. Auberson S., Lundberg J.M. Lactic acid-induced plasma protein extravasation in rat airways by stimulation of sensory nerves and NK1 receptor activation//Pharmacol.Toxicol. 1993 - 73(6). - P. 305-310.
131. Baltazar E.T., Kitamura N., Hondo E., Yamada J., Maala C.P., Simborio L.T. Immunohistochemical study of endocrine cells in the gastrointestinal tract of the Philippine carabao (Bubalus bubalis) // Anat. Histol. Embryol.-1998.-V.27, №6.-P.407-411.
132. Berthoud H.R., Patterson L.M., Neumann F., Neuhuber W.L. Distribution and structure of vagal afferent intraganglionic laminar endings (IGLEs) in the rat gastrointestinal tract // Anat. Embryol. (Berl).-1997.-V.195, №2. P. 183191.
133. Bojo L., Lefebvre R. A., Nellgard P., Cassuto J. Involvement of vasoactive intestinal polypeptide in gastric reflex relaxation // Eur. J. Pharmacol. 1993. -V.236.-P. 443^48.
134. Boyd I.D. Intermediate sympathetic ganglia // Brit. Med. Bull.-1957.-V.13.-P.207.
135. Brzozowski T., Kontirek S.J., Pytko-Polonczyk J., Warzecha Z. Gastric adaptation to stress: role of sensory nerves, salivary glands and adrenal glands // Scand. J. Gastroenterol., 1995. 30 (1). - P. 6-16.
136. Bueno L., Ruckebush Y: Perinatal development of investinal myoelectric activity in dogs and sheep // Am. J. Physiol.-1979.-V.237.-P.61-67.
137. Burns A.J., Lomax A.E.J., Torihashi S., Sanders K.M., Ward S.M. Interstitial cells of Cajal mediate inhibitory neurotransmission in the stomach // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.-1996.-V. 93. P.12008-12013.
138. Burnstock I. 1986. / Цит.: Гнетов A.B., Ноздрачев А.Д., Степанова Т.П. Механизмы регуляции активности продольного слоя гладких мышц кишки мальмы // Физиологический журнал им.И.М.Сеченова. 1991. - Т.77. — № 8. — С. 122-129.
139. Cajal S.R. Histologic du syste'me nerveux de l'homme et des verte'bre's // Paris: Maloine.- 1911.-V.2. P.891-942.
140. Carlson A.J., The control of hunger in health and diseases // Chicago: Univ. of Chicago Press. 19I6.-P. 319.
141. Chard P.S., Bleakman D. Capsaicin-induced neurotoxicity in cultured dorsal root ganglion neurons: involvement of calcium-activated proteases // Neuroscience. 1995. 65 (4). - P. 1099-1108.
142. Collier В., Iohnson G., Quik M., Welner S. Effect of chemical destruction of mechanisms in adult rat sympathetic ganglia // Brit. J. Pharmacol.- 1984.- V. 82, N4.-P. 639-646.
143. Cracco C., Filogamo G. Quantitative study of the NADPH-diaphorase-positive myenteric neurons of the rat ileum // Neuroscience.-1994.-V.61, №2.-P.351-359.
144. Crowe R., Burnstock G., Light J.K. Intramural ganglia in the human urethra //J. Urol.-1988.-V.140, N°l.-P. 183-187.
145. Daniel E.E., Berezin I. Interstitial cells of Cajal: are they major players in control of gastrointestinal motility? // J Gastrointest Motil .-1992.-4.-P. 1-24.
146. Daniel E.E., Berezin I., Allescher H.D., Manaka H., Daniel V.P. Morphology of the canine pyloric sphincter in relation to function // Can. J. Physiol. Pharmacol.-1989.- V.67.-P. 1560-1573.
147. Der-Silaphet Malysz T.J., Hagel S., Arsenault L.A., Huizinga J.D. Interstitial cells of Cajal direct normal propulsive contractile activity in the mouse small intestine // Gastroenterology.-1998.-V. 114.-P. 724-736.
148. Dickens E.J., Edwards F.R., Hirst G.D. Vagal inhibition in the antral region of guinea pig stomach // Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol.-2000.-V. 279.- P. 388-399.
149. Dixon J.S., Jen P.Y., Gosling J.A. A double-label immuno-histochemical195study of intramural ganglia from the human male urinary bladder neck // J. Anat.-1997.-V.90, №Pt 1.-P.125-134.
150. Domoto T., Gonda T., Oki M., Yanaihara N. Coexistence of substance P-and methionine5-enkephalin-like immunoreactivity in nerve cells of the myenteric ganglia in the cat ileum // Neurosci. Lett.-1984.-V.l, №47(1).-P.9-13.
151. Ekblad E., Ekelund M., Graffner H., Hakanson R., Sundler F. Peptide-containing nerve fibers in the stomach wall of rat and mouse // Gastroenterology .-1985.-V.89, №l.-P.73-85.
152. Ekblad E., Ekman R., Hakanson R., Sundler F. Projections of peptide-containing neurons in rat colon // Neuroscience.-1988.-V.27, №2.-P.655-674.
153. Ekblad E., Mei Q., Sundler F. Innervation of the gastric mucosa // Microsc. Res. Tech.-2000.-V.l, №48(5).-P.241-257.
154. Ekblad E., Winther C., Ekman R., Hakanson R., Sundler F. Projections of peptide-containing neurons in rat small intestine // Neuroscience.-1987.-V.20, №1.-P.169-188.
155. Epperson A., Hatton W.J., Callaghan B., Walker R., Sanders K.M., Ward S.M., Horowitz B. Molecular components expressed in cultured and freshly isolated interstitial cells of Cajal// Am. J. Physiol. Cell Physiol.-2000.-V. 279.-P. 529-539.
156. Evans B.K., Burnstock G. Chronic guanethidine treatment of female rats including effects on the femus // J. Reprod. and Fert. 1979. V. 56, N 2. - P. 715724.
157. Fang S., Christensen J. Distribution of NADPH diaphorase in intramural plexuses of cat and opossum esophagus // J. Auton. Nerv. Syst.-1994.-V.46, №1-2.- P.123-133.
158. Fike E.A. 4th, Simons E., Boswell C., Smith P.G. Sensory nerves impair196sympathetic reinnervation and recovery of smooth muscle function // Exp-Neurol. 1992. Oct; 118(1). - P. 85-94.
159. Fox E.A., Phillips R.J., Martinson F.A., Baronowsky E.A., Powley T.L. Vagal afferent innervation of smooth muscle in the stomach and duodenum of the mouse: morphology and topography // J. Comp. Neurol.-2000.-V. 428. -P. 558-576.
160. Furness J.B., Costa M., Gibbins I.L., Llewellyn-Smith I.J., Oliver J.R. Neu-rochemically similar myenteric and submucous neurons directly traced to the mucosa of the small intestine // Cell Tissue Res.-1985.-V.241,№l. P.155-163.
161. Furness J. B., Costa M. The Enteric Nervous SystemNew York: Churchill Livingstone, 1987. 306 p.
162. Ganchrow J.R., Seltzer Z. The effect of neonatal treatment on gustatory behavior in the albino rat // Physiol. Behav., 1992 52 (6). - P. 1037-1042.
163. Geirsson G., Fall M., Sullivan L. Clinical and urodynamic effects of intravesical capsaicin treatment in patients with chronic traumatic spinal detrusor hy-perreflexia//J. Urol., 1995.-154 (5). P. 1825-1829.
164. Gonella J. The physiological role of peripheral serotoninergic neurones. A review//J. Physiol. (Paris)-1981.-V.77, №2-3.-P.515-519.
165. Grunditz T., Ekman R., Hakanson R., Sundler F., Uddman R. Neuropeptide Y and vasoactive intestinal peptide coexist in rat thyroid nerve fibers emanating from the thyroid ganglion // Regul. Pept.-1988.-V.23, №2.-P.193-208.
166. Guarini S., Bazzani C., Tagliavini S., Bertolini A., Ferrari W. Capsaicin prevents the adrenocorticotropin-induced improvement of cardiovascular function and survival in hemorrhage-shocked rats //Neurosci. Lett., 1992. 143 (1-2). -P. 181-184.
167. Hanani M., Lernau O. Z., Zamir O., Nissan S. Nerve mediated responses to drugs and electrical stimulation in aganglionic muscle segments in Hirschsprung's disease// J. Pediatr. Surg.-1986.-V. 21.-P.848-851.
168. Hara K., Kubo M., Szurszewski J.H: Electrophysiology of smooth muscle of the small intestine of some mammals // J Physiol (Lond).-1986.-V.372.-P.501197
169. Henderson R.M., Duchon G., Daniel E.E. Cell contacts in duodenal smool muscle layers // Am. J. Physiol. 1971. - August, 221 (2). - 564-74.
170. Hillemeir C., Bitar K.N., Biancani P. Developmental characteristics of the kitten antrum // Gastroenterology.-1991.-V.101.-P.339-343.
171. Hillemeir C., Evens M., Behar J., Biancani D.P. Mechanical and pharmacological properties of the developing antrum of tht cat // Gastroenterology.-1985.-V.88.-P. 14-18.
172. Hiura A., Ishizuka H., Sakamoto Y. Electron microscopic study of the effect of capsaicin on the mouse chorda tympani nerves // Arch.C)ral.Biol.-1990.-V.35, №11.-P.913-916.
173. Hiura A., Lopez-Villalobos E., Ishizuka H. Age-dependent attenuation of the decrease of C fibers by capsaicin and its effects on responses to nociceptive stimuli // Somatosens-Mot-Res.- 1992. 9(1). -P. 37-43.
174. Holmgren S. The effect VIP, Sub P, ATP on isolated muscle strips from the stomack of the rainbow // Acta Physiol. Scand. 1982. Vol. 114. № 2. P.39A.
175. Huizinga J.D., Ambrous K., Der-Silaphet T. Co-operation between neural and myogenic mechanisms in the control of distension-induced peristalsis in the mouse small intestine // J Physiol (Lond) 506: 843-856, 1998.
176. Huizinga J.D., Thuneberg L., Kluppel M., Malysz J., Mikkelsen H.B., Bernstein A. W/kit gene required for interstitial cells of Cajal and for intestinal pacemaker activity //Nature.-1995.-V. 373.-P. 347-349.
177. Imaizumi M., Hama K. An electromicroscopic study on the interstitial cells of the gizzard in the love bird (Uronloncha domestica) // Z Zellforsch Mikrosk Anat .-1969.-V.97.-P.351-357.
178. Johnson I.E., Manning P.T. Guanethidine-induced destruction of sympathetic neurons // Intern.Rev.Neurobiol.-1984.-V.25 .-P. 1-37.
179. Juul P., Melsaac R.L. The effect of guanethidine on the noradrenaline content of the adult rat superior cervical ganglion // Acta pharmacol.et toxicol.-1973.- V. 32.- N 5.-P. 382-389.
180. Keef K.D., Murray D.C., Sanders K.M., Smith T.K. Basal release of nitric oxide induces an oscillatory motor pattern in canine colon // J. Physiol. (Lond).-1997.-V. 499.-P. 773-786.
181. Keller H. The development of the intramural nerve plexus of the gastrointestinal tract//Anat. Embryol. (Berl).-1976.-V.22, №150(l).-P.l-6.
182. Komuro T. Three-dimensional observation of the fibroblast-like cells associated with the rat myenteric plexus, with special reference to the interstitial cells of Cajal // Cell Tissue Res.-1998.-V. 255.-P. 343-351.
183. Krantis A., Glasgow I., McKay A.E., Mattar K., Johnson F. A method for simultaneous recording and assessment of gut contractions and relaxations in vivo // Can. J. Physiol. Pharmacol.-1996.-V. 74.-P. 894-903.
184. Krantis A., Mattar K., Glasgow I. Rat gastroduodenal motility in vivo: interaction of GABA and VIP in control of spontaneous relaxations // Am. J. Physiol. 1998. - V.275 (Gastrointest. Liver Physiol. 38). - G897-G903.
185. Kubota M., Ito Y., Ikeda K. Membrane properties and innervation of smooth muscle cells in Hirschsprung's disease // Am. J. Physiol.-1983.-V. 244 (Gastrointest. Liver Physiol. 7).- G406-G415.
186. Kyosola K., Veijola L., Rechardt L. Cholinergic innervation of the gastric wall of the cat//Histochemistry.-1975.-V. 16, №44 (l).-P.23-30.
187. Kyosola K., Veijola L., Rechardt L. Immunohistochemical demonstration of choline acetyltransferase of a peripheral type (pChAT) in the enteric nervous system of rats // Acta Biol.Med.Ger.-1980.-V.39, №6.-P.687-696.
188. Langton P., Ward S.M., Carl A., Norelle M.A., Sanders K.M: Spontaneous electrical activity of interstitial cells of Cajal isolated from canine colon // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.-1989.-V.86.-P.7280-7284.
189. Lecoin L., Gabella G., Le Douarin N. Origin of the c-kitpositive interstitial cells in the avian bowel // Development.-1996.-V. 122.-P.725-733.
190. Lefebvre R.A., Hasrat J., Gobert A. Influence of NG-nitro-L-arginine methyl ester on vagally induced gastric relaxation in the anaesthetized rat // Br. J. Pharmacol.-1992.-V. 105.-P. 315-320.
191. Leff P., Wood B.E., O'Connor S.E. Suramin is a slowly-equilibrating but199competitive antagonist at P2x-receptors in the rabbit isolating ear artery // Br. J. Pharmacol.-1990.-V. 101.-P.645-649.
192. Lerman S.H., Jacobowitz D.M., Mason G.R., Garber H.I., Ormsbee H.S. 3d. Gastric and pyloric motor response to sympathetic nerve stimulation after chemical sympathectomy // J.Auton.Nerv.Syst.-1981.-V.4, №3.-P.207-215.
193. Liu L.W., Thuneberg L., Huizinga J.D. Development of pacemaker activity and interstitial cells of Cajal in the neonatal mouse small intestine //Dev. Dyn.-1998.-V.213.-P. 271-282.
194. Lu X., Zhao J., Gregersen H. Small intestinal morphometric and biome-chanical changes during physiological growth in rats // J. Biomech. Mar.-2005.-38(3).-P.417-26
195. Maeda H., Yamagata A., Nishikawa S., Yoshinaga K., Kobayashi S., Nishi K., Nishikawa S. Requirement of c-kit for development of intestinal pacemaker system // Development.-1992.-V. 116.-P.369-375.
196. Manzini S., Maggi C.A., Meli A. Pharmacological evidence that at least two different non-adrenergic non-cholinergic inhibitory systems are present in the rat small intestine // Eur. J. Pharmacol. 1986.-V. 123.-P. 229-236.
197. Matharu M.S., Hollingsworth M. Purinoceptors mediating relaxation and spasm in the rat gastric fundus // Br. J. Pharmacol.-1992.-V. 106.-P. 395-403.
198. Mercier-Parot L., Tuchmann-Duplessis H. Abortifactent and teratogenic effect of suramin, a trypanocide //Comptes Rendus des Seances de la Societe de Biologie et de Ses Filiales 167: 1518-1522, 1973.
199. Nagy I., Pabla R. Cobalt uptake enables identification of capsaicin- and bra-dykinin-sensitive subpopulations of rat dorsal root ganglion cells in vitro // Neuroscience.-1993.-V.56, №1.-P.241-246.
200. Nakajima K., Tooyama I., Yasuhara O., Aimi Y., Kimura H. Immunohisto-chemical demonstration of choline acetyltransferase of a peripheral type200pChAT) in the enteric nervous system of rats // J. Chem.Neuroanat.-2000.-V.18, №l-2.-P.31-40.
201. Nakanishi Y., Tooyama I., Yasuhara O., Aimi Y., Kitajima K., Kimura H. Immunohistochemical localization of choline acetyltransferase of a peripheral type in the rat larynx// J. Chem. Neuroanat. 1999 - 17 (l).-21-32.
202. Nelson D.K., Service J.E., Studelska D.R., Brimijoin S., Go V.L. Gastrointestinal neuropeptide concentrations following guanethidine sympathectomy // J.Auton.Nerv.Syst.-1988.-V.22, №3.-P.203-210.
203. Nichols K., Krantis A., Staines W. Histochemical localization of nitric oxide-synthesizing neurons and vascular sites in the guinea-pig intestine // Neu-roscience.-192.-V. 51.-P. 791-799.
204. Nichols K., Staines W., Krantis A. Nitric oxide synthase distribution in the rat intestine: a histochemical analysis // Gastroenterology.-1993.-V. 105.-P.1651-1661.
205. Nichols K., Staines W., Wu J.-Y., Krantis A. Immunopositive GABAergic neural sites display nitric oxide synthase-related NADPH diaphorase activity in the human colon // J. Auton. Nerv. Syst.-1995.-V. 50.-P. 253-262.
206. Nielsen G.D. Guanethidine induced sympathectomy in the adult rat. I. Functional effects following subacute administration // Acta pharmacol. et toxicol.-1977a. V. 41, N 3. -P. 203-208.
207. Nirasawa Y., Yokoyama J., Ikawa H., Morikawa Y., Katsumata K. Hirschsprung's disease: catecholamine content, a-adrenoceptors, and the effect of electrical stimulation in aganglionic colon. //J. Pediatr. Surg.-1986.-V. 21.-P. 136-142.
208. Ohtani S., Iwafuchi M., Homma S. Development of the motor activity of the rat gastrointestinal tract by in vitro measurement // Jpn. J. Physiol.- 1994-V. 44(5)- P. 501-508.
209. Orloff L.A., Orloff M.S., Bunnett N.W., Walsh J.H. Dopamine and norepinephrine in the alimentary tract changes after chemical sympathectomy and surgical vagotomy // Life Sci.-1985.-V.29, №36 (17).-P. 1625-1631.
210. Ouyang A., Zimmerman K., Wong K.L., Sharp D., Reynolds J.C. Effect of celiac ganglionectomy on tachykinin innervation, receptor distribution and intestinal responses in the rat // J.Auton.Nerv.Syst.-1996.-V.14, №61 (3).-P.292-300.
211. Patterson J.T., Chung K., Coggeshall R.E. Further evidence for the existence of the long ascending unmyelinated primary afferent fibers within the dorsal funiculus: effects of capsaicin // Pain, 1992.- 49 (l).-P. 117-120.
212. Regina S., Bento J., Tormena A., Araujo R. Comportamento motor mulo farmacol;gico, de segmentos duodenais papilar de ratos albinos // Acta Cir. Bras.- Apr./May/June 1998.- V.13, N.2.-P.237-243
213. Sanders K.M., Ordog T., Koh S.D., Torihashi S., Ward S.M. Development and plasticity of interstitial cell of Cajal // Neurogastroenterol Motil.-1999.-V. 11.-P. 311-338.
214. Sanders K.M. A case for interstitial cells of Cajal as pacemakersand mediators of neurotransmission in the gastrointestinal tract // Gastroenterology.-1996.-V. 111.-P. 492-515.
215. Santicioli P., Del-Bianco E., Geppetti P., Maggy C.A. Release of calcitonin gene-related peptide-like immunoreactivity from rat isolated soleus muscle by low PH, capsaicin and potassium //Neurosci. Lett.- 1992.- 143 (1-2).- P.19-22.
216. Simonsen U., Triguero D., Garcia-Sacristan A., Prieto D. Cholinergic modulation of non-adrenergic, non-cholinergic relaxation in isolated, small coronary arteries from lambs // Pflugers.Arch.-1999.-V.438, №2.-P.177-186.
217. Smith D.C. Sinaptic sites in sympathetic and vagal cardioaccelerator nerves of the dog//Amer. J.Physiol.-1970.-Vol.218, №6.-P.16.
218. Solcia E., Capella C., Buffa R. Endocrine cells of the digestive system // Physiology of the gastrointestinal tract. New York.- 1987.- V.I.- P.67-109.
219. Suzuki N., Prosser C.L., Dahms V. Boundary cells between longitudinal and circular layers // Essential for electrical slow waves on cat intestine // Am. J.202
220. Physiol.-1986.-V.254.-P.287-294.
221. Thuneberg L. One hundred years of interstitial cells of Cajal // Microsc. Res. Tech.-1999.-V. 47.-P. 223-238.
222. Tomomasa T., Hyman P.E., Snape WJ. Development of agonist mediated gastric smooth muscle contraction // Gastroenterology.-1988.-V.94.-P.463.
223. Torihashi S., Ward S.M., Nishikawa S.I., Nishi K., Kobayashi S., Sanders K.M. c-kit-dependent development of interstitial cells and electrical activity in the murine gastrointestinal tract // Cell Tissue Res .-1995.-V.280.-P. 97-111.
224. Torihashi S., Ward S.M., Sanders K.M. Development of c-Kit-positive cells and the onset of electrical rhythmicity in murine small intestine //Gastroenterology .-1997.-V.112.-P.144-155.
225. Vanderwinden J.M., Rumessen J.J., Liu H., Descamps D., De Laet M.H., Vanderhaeghen J.J. Interstitial cells of Cajal in human colon and in Hirschsprung's disease// Gastroenterology.-1996.-V. 11 l.-P. 901-910.
226. Vanderwinden J.M., De Laet M.H., Schiffmann S.N., Mailleux P., Lowen-stein C.J., Snyder S.H., Vanderhaeghen J.J. Nitric oxide synthase distribution in the enteric nervous system of Hirschsprung's disease // Gastroenterology.-1993.-V. 105.-P. 969-973.
227. Vanderwinden J.M., Mailleux P., Schiffmann S.N., Vanderhaeghen J.J., De Laet M. H. Nitric oxide synthase activity in infantile hypertrophic pyloric stenosis.//N. Engl. J. Med.-1992.-P. 327.-P.511-515.
228. Vantrappen G., Hostein H., Janssens J., Vandeweerd M., DeWever I. Do slow waves induce mechanical activity? // Gastroenterology.-1983.-V.84.-P.1341.
229. Vizzard M.A., Erdman S.L., de Groat W.C. Localization of NADPH diaphorase in bladder afferent and postganglionic efferent neurons of the rat // J.Auton.Nerv.Syst.-1993.-V.44, №l.-P.85-90.
230. Wakade A.R. Recent developments in degeneration of the sympathetic neuron // Gen.Pharmacol.-1979.-Vol. 10, №5.-P.351-357.
231. Ward S.M., Beckett E.A., Wang X., Baker F., Khoyi M., Sanders K.M. Interstitial cells of Cajal mediate cholinergic neurotransmission from enteric motor neurons // J. Neurosci.-2000.-V. 20.-P.1393-1403.
232. Ward S.M., Burns A.J., Torihashi S., Sanders K.M. Mutation of the proto-oncogene c-kit blocks development of interstitial cells and electrical rhythmic-ity in murine intestine// J. Physiol. (Lond).-1994.-V. 480.-P.91-97.
233. Ward S.M., Morris G., Reese L., Wang W.Y., Sanders K.M. Interstitial cells of Cajal mediate enteric inhibitory neurotransmission in the lower esophageal and pyloric sphincters // Gastroenterology.-1998.-V. 115.-P.314-329.
234. Ward S.M., Ordog T., Bayguinov J.R., Horowitz B., Epperson A., Shen L., Westphal H., Sanders K.M. Development of interstitial cells of Cajal and pacemaking in mice lacking enteric nerves // Gastroenterology.-1999.-V. 117.-P. 584-594.
235. Wester T., O'Briain S., Puri P. Morphometric aspects of the submucous plexus in whole-mount preparations of normal human distal colon // J.Pediatr.Surg.-1998.-V.33, №4.-P.619-622.
236. White C.B., Roberts A.M., Joshua I.G. Arteriolar dilation mediated by capsaicin and calcitonin gene-related peptide in rats // Am.J.Physiol., 1993, 265 (4 pt.2),p.l411-1415.
237. White T.D. Role of adenine compounds in autonomic neurotransmission // Pharmacol. Ther.-1988.-V. 38.-P. 129-168.
238. Windscheif U., Pfaff O., Ziganshin A.U., Hoyle C.H.V., Baumert H.G.,204
239. Mutschler E., Burnstock G., Lambrecht G. Inhibitory action of PPADS on relaxant responses to adenine nucleotides or electrical field stimulation in guinea-pig taenia coli and rat duodenum // Br. J. Pharmacol.-1995.-V. 115.-P. 1509-1517.
240. Yamamoto H., Kuwahara A., Yamamoto I., Fujimura M., Maeda T., Fu-jimiya M. Motor activity of vascularly perfused rat duodenum. 1. Characteristics of spontaneous movement // Neurogastroenterol Motil.- 1999 Jun.-ll(3).-P.227-34.
241. Young H.M., McConalogue K., Furness J.B., De Vente J. Nitric oxide targets in the guinea-pig intestine identified by induction of cyclic GMP immuno-reactivity // Neuroscience.-1993.-V. 55.-P. 583-596.
242. Zhou Y., Tan C.K., Ling E.A. Distribution of NADPH-diaphorase and nitric oxide synthase-containing neurons in the intramural ganglia of guinea pig urinary bladder// J.Anat.-1997.-V. 190, Pt. l.-P. 135-145.
243. Zitterman J., Ryan J.P. Development of gastric antral smooth muscle contractility in newborn rabbits // Am. J. Physiol.-1986.-V.372.-P.501-520.
-
Воробьева, Ольга Борисовна
-
кандидата биологических наук
-
Ярославль, 2005
-
ВАК 03.00.13
- Постнатальный морфогенез обонятельных луковиц белой крысы в норме и после химической деафферентации
- Характер и темпы возрастных изменений системы ацетилхолин-ацетилхолинэстераза в тонком кишечнике у поросят в связи с его морфофизиологическим становлением
- Роль аксоплазмы блуждающих нервов в структурно-функциональном становлении внутренних органов у овец и кроликов в раннем постнатальном онтогенезе
- Морфогенез изменений двенадцатиперстной кишки при хронических нарушениях ее проходимости и после их коррекции в эксперименте
- Характеристика холинергической системы пищеварительного аппарата животных (крупного рогатого скота, кролика, морской свинки) в раннем постнатальном онтогенезе
