Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Возрастные особенности аутоиммунных реакций у жителей региона, прилегающего к Семипалатинскому ядерному полигону

ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Возрастные особенности аутоиммунных реакций у жителей региона, прилегающего к Семипалатинскому ядерному полигону"

. .. . >.3

Го-

УЯ7.ЧТ5С МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН

^¿ЕМИгАМТИНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ ШДЩИВСШЙ ИНСТИТУТ >£С£Ктг----:-;-—-

На правах рукописи

КОЖАЕЕКОВ БАГДАГ ТОКТАБУЛАТОВИЧ

УДК: 612.017.1-616-097-001.28/29-577. 73

ВОЗРАСТНЫЕ ОСОБЕННОСТИ АУТОИММУННЫХ РЕАКЦИЙ У ШЕЛЕП РЕГИОНА, ПРИЛЕГАЮЩЕЮ К СЕМИПАЛАТИНСКОМУ ЯДЕРНОМУ ПОЛИГОНУ

03.00.13 - физиология человека и животных

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Семипалатинск - 1993 г.

Работа выполнена в Семипалатинском Государственном медицинском институте и в Научно-исследовательском институте медицинской радиологии РАМН (г.Обнинск)

Научный руководитель: доктор медицинских наук, профессор

ТАПЕЕРГЕНОВ С. О.

Официальные оппоненты: доктор медицинских наук, профессор

Архипов Г. С.

кандидат биологических наук, доцент Гайнанова Е К.

Ведущая организация: Алма-Атинский Государственный медицинский институт

Защита состоится." -¿^ " и^рм^ 1993 ГОда

в "_ " часов ка заседании специализированного совета

Я 084.52.01 при Семипалатинском Государственном медицинском институте по специальности. 03.00.13 - физиология человека и животных (490019, г.Семипалатинск, у. Абая Кунанбаева, 103).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Семипалатинского Государственного медицинского института.

Автореферат разослан "_"_ 1993 года.

Ученый секретарь Специализированного Совета, кандидат медицинских наук, доцент

Т. А. Хлебутина

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

АКТУАЛЬНОСТЬ ПРОБЛЕМЫ. Изучение механизмов биологического старения и влияний на этот шогофакторный процесс условия внешней среды является важнейшей задачей современной биологии и медицины (Г.М.Бутенко, 1987; ЕСинадер, 1987).

Вторая половина XX века в результате создания атомной промыпшености, агомкой энергетики, медицинской и бытовой радиационной аппаратуры внесла в среду обитания непрерывно нарастак>-щее количество искусственных радиоактивных веп^ств. Загрязнение Земли этими вещества).® в реаудьтсге испытаний ядерного оружия и крупньч аварий на ядерных установках призело к появлг":ио регионов с повышенным уровнем радкации. Большие контингента людей вынуждены существовать в условиях предельно допустимых доз (они, как'известно выработаны для профессионалов) и доз, превы-кащих рсазаяный выше уровень (Ю. И. Москалев, 1991). В частности, в течей:- 40 лет (с 1949 г. по 1989 г.) на Семипалатинском ядерном полигоне проводились испытания ядерного оружия, причем с 1949 по 1964 ■ годы испытания велись в атмосфере и на земле. Всего по имеющемся данным около 3CQ взрывов в результате которых облучение подверглось около 10-15 тыс. человек (из Справки о результатах комплексного обследования состояния экологической обстановки и здоровья населения Семипалатинской области Казахской ССР, - г.Обнинск, 1989). В связи с этим встает-вопрос об отдаленном влиянии облучения иоиизирущэй радиацией на здоровье и продолжительность жизни в этих популяциях. Хотя известно, что радиация приводит' к сокращению продолжительности жизни через специфические ( опухолевые) последствия (КХ И. Москалев, 1991),

- 1 -

остается открытым вопрос- о механизмах развития кеспецифических (неопухолевых) отдаленных последствий облучения в диапазоне малья доз радиации, в частности о роли аутоиммунных процессов, сопутствующих и являющихся одним из патогенетических звеньев естественного старения. Также отсутствие адекватных скрининго-вых методов оценки темпов и меры старения популяций и детекции отдаленных последствий радиационного воздействия на организм побудили нас для выполнения настоящей работы, являющейся попыткой решить поставленные вопросы.

ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ: изучение возрастных особенностей аутоиммунных реакций в нормальной и облученной популяциях людей для оценки темпов биологического старения.

ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ:

1. Разработать способы количественной и качественной оценки адренорецепции лимфоцитов.

2. Изучить возрастные особенности адренорецепции лимфоцитов здоровых лиц разного гада.

3. Оценить состояние общего (орган-неспецифичёского) и локального (орган-специфического, щитовидная железа)' аутоиммунитета у- лиц разного пола к .возраста.в облученной и контрольной по' радиационному фе ору прпуля-

• ПИЯХ.

4. Изучить'различия орган-специфических (шитг-вчдная жпле-за) аутоиммунных, реакций по "спектру" ангк- л у жителей, сравниваемых регионов

НАУЧНАЯ НОВИЗНА.

Проведенное исследование адренорецепции лимфоцитов здоро-- 2 -

вых лиц равного возраста и пола позволило выявить развивавшуюся по мере старения автономизацию лимфоцитов, более выраженную у лиц женского пола. Впервые показана разнонаправленная возрастная динамика качественных и количественных показателей адрено-рецепции лимфоцитов здоровых лиц.

Выявлены однонаправленные изменения локального (орган-специфического) и общего (орган-неспецифического) аутоимму-нитета - увеличение частоты серопозитивных аутоиммунных реакций с возрастом в здоровой популяции. Впервые изучены аутоиммунные реакции у лиц, пострадавших в результате ядерных испытаний, показано увеличение антител к денатурированной ДНК (дДНК) в облученной популяции. Установлен факт преждевременного старения жителей региона, прилегающего к Семипалатинскому ядерному полигону, подвергшихся неоднократному облучении в диапазоне малых

1

доз, по показателям общего и локального аутоиммунитета в сравнении с кителями контрольного региона.

Впервые показана возрастная динамика ассоциации общего и локального аугоиммунитета в здоровой и облученной популяциях. Впервые предпринята попытка оценить "спектры" антител к микросомам щитовидной железы серополоиительных сывороток жителей, сравниваемых регионов, . с целью диффсрепиировки последств!1й лу чевого воздействия от идиотипических аутоиммунных процессов.

ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ.

Разработаны и внедрены доступные для практической работы способы оценки адренорецепции лимфоцитов.

Обосновано применение методов оценки аутоиммунитета да определения степени влияния ионизирующей радиации на темпы био- 3 -

логического (естественного) старения.

ОСНОВНЫЕ ПОЛОЖЕНИЯ, ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ:

1. Развивающиеся с возрастом дисрегуляторные процессы в иммунной системе.(изменение количества адренорецепторов и функционального ответа смеси лимфоцитов на норадреналин) предрасполагают к возрастной аутоиымунизации (увеличение частоты ор-ган-неспецифаческих и орган-специфических аутоиммунных реакций). Данные процессы более выражены у'лиц ленского пола

2. Ионизирующая радиация , приводет к увеличению аутоиммунного компонента в функционировании иммунной системы (увеличение титра естественных ("нормальных") аутоантител к дДНК) и усугубляет возрастную аутоиммунизацюо - происходит преждевременное старение по показателям общего и локального аутоиммунитета.

3. йэнизируквдая радиация не имеет специфических "маркеров" лучевого воздействия по спектру антител реагирующих с ыик-росомаш щитовидной железы в реакциях иммуноблоттинга.

ОСНОВНЫЕ ПОЛОЖЕНИЯ РАБОТЫ ДОЛОЖЕНЫ И ОБСУЖДЕНЫ НА:

- УШ .Международном Конгрессе иммунологов (Будапешт, Венгрия, 1992)

- на заседании проблемной комиссии медикотбиологического цикла Семипалатинского медицинского института (протокол И 3 от 10 декабря 1992 г.).

ПУТИ РЕАЛИЗАЦИИ РАБОТЫ И ВНЕДРЕНИЕ:

Разработанные методы оценки адренорецепции лимфоцитов внедрены в практику работы иммунологических лабораторий г. Семипалатинска и г. Павлодара. Офоридека заявка на изобретение, N4751242/14 разрешение Госкомитета СССР по делам изобретений и

-4- '

открытий на открытую публикацию получено. Оформлено 2 рационализаторских предложения: "Способ определения рецепторов к норадреналину", N 1211 от 12.06.87 г. и "Способ определения чувствительности рецепторов к норадреналину", N 1423 от 12. Об. 89 г.. Издан 1 информационный листок " Способ определения рецепторов к норадреналину на лимфоцитах методом ро-зеткообразования", N 12-92.

Работа является частью республиканской программы "Состояние здоровья населения в регионах, прил&гавдих к Семипалатинскому полигону", N Госрегистрации 01900068117. Самостоятельно автором выполнены следующие разделы: отбор исследуемого контингента и взятие материалов; постановка и наладка всех методов исследования; статистическая обработка, обобщение и группировка показателей адренорецепции и результатов аутоиммунных реакций.

ПУБЛИКАЦИИ.

1Ь теме диссертации опубликовано 4 научных работ, в том числе 3 в международной печати..

ОБЪЕМ И СТРУКТУРА ДИССЕРТАЦИИ.

Диссертация состоит из введения, обзора литературы, глав, включающих материал и методы исследования, заключение, выводов,

указателя литературы, включающего _ работ. Объем диссертации

без указателя литературы _ страниц машинописного текста.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Адренорецепции изучали у 154 практически здоровых доно--5-

ров, жителей г.Семипалатинска (90 жен., 64 мух), поделенных на 3 возрастные группы: 41-50 лет (41 жан., 21 муж.), 51-60 (29, 24) и 61-70 лет'(20, 19), методом роэеткообразования с нагруженными норадреналиком эритроцитами быка, радиодигандным методом (Т. Л Красникова с соавт., 1986) и проводили функциональный тест - реакцию торможения миграции лимфоцитов в присутствии различных концентраций норадрекалина.

Показатели аутоиммунитета исследовались у жителей 3 сед Семипалатинской области : с. Кайнар, с. Караул Абайского района и с. Кокпекгы Кокпектинского района. По доступным данным жители сел Кайнар и Караул подвергались неоднократному лучевому воздействию , особенно в период с 1953 по 1963 гг. ( со времени первого испытания термоядерного устройства до начала подземных взрывов). Средние эквивалентные дозы для жителей этих сел распределились таким образом: 0,37 Гр - с. Караул и 0,24 Гр -с. Кайнар.

В качеств© 'относительного контроля бьши взяты жители с. Кокпекты, где в проведенные оценки показали , что за период с 1949 г. ( начало испытаний ) по-настоящее время средние дополнительные дозы облучения были "существенно меньше, годового, предела дозы для категории Б, в связи с чем данный, населенный пункт может рассматриваться как контрольный (из Справки о результатах комплексного обследования состояния экологической обстановки и здоровья населения Семипалатинской области Казахской ССР. - г.Обнинск, 1989). Обследовано в с. Кайнар : всего 91, зкенщин 63, мужчин 28; в с. Караул ¡всего 112, женщин 72, «умчин 40; в с. Кокпекгы: всего 73, женщин 48, мужчин 25. Были выделены

- б -

следующие возрастные .группы : группа 41-50 лет в нее вошли лица, родившиеся до 1953 г.; группа 51-60 лет и группа 61 и более лет. На момент взятия крови у обследованных, отсутствовали признаки острых и обострения хронических заболеваний.

Наличие и уровень антител к д-ДНК определяли иммунофер-ментным методом, в качестве антигена использовали денатурированный препарат ДНК из тимуса телят. К надфоновым относили результаты, превышающие показатели донорского пула на две сигмы и выше, серопозитивными считали случаи с титром антител, более чем в два раза превышающим средний уровень донорского пула

Антитела к ыикросомам щитовидной железы определяли следующими методами а) в РИГА с куриными эритроцитами , сенсибилизированными микросомальной фракцией экстракта щитовидной железы человека, а также при помовд коммерческих диагностикумов фирм tfellkome, Англия и Fujirebio Inc. , агония ; б) иммуноферментным гетодом (Y. Kohno et al. 1986) с испотзор.анкем полистиролових планшетов (Nunc, Данян), сенсибилизированных микросомальной фракцией экстракта щитовидной келезы человека. Серопозитивными в РПГА считались пробы , где титр превышал 1:100, в иммунофер-ментном методе превышающие титр доноров в 3 раза' и' выше.

Белковый гельэлектрофорез микросом щитовидной мелезы в толиакрилачидном геле с додецилом сульфата На по Laenrali (1970) Лммуноблоттинг с серопозитивныш сыворотками реагирующими с иикросомами щитовидной железы по Tovibin et al. (1979)

Обработку результатов исследования проводили на Ш-61 (I0L Я. Иванов и О. Н. Погорелкк, 1990) и на IBM PC, используя статистические и графические пакеты программ.

- 7 -

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ При исследовании розеткообразующих клеток смеси лимфоци- . тов здоровых доноров разного возраста с эритроцитами сенсибилизированными норадреналином (рис. 1) выявлены следующие закономерности: с возрастом происходит увеличение процента, вышеназванных клеток у лиц обоего пола, причем пик роэеткообразущих клеток у женщш приходится на группу 51-60, у мужчин 61- 70 лет.

Анализ результатов РТМЛ с СопА, в присутствии норадрена-лина различных концентраций, смеси лимфоцитов здоровых доноров

РОИ СО

м

40'

3320' В

а

женаты

i

» -X-'N

мчжчина

S 11-50 В З'-вО

SB 6I-7Q лат

рис. изнзрястняя динамика х рек с норшшпина»

показал снижение индекса миграции в обоих, половых группах с воарастом (рис. 2): в ответ, на понимание концентрации норадре-налина в инкубационной среде 2x10 и 2x10 X в возрастных группам происходит достоверное (р<0.05) снижение индекса миграции лимфоцитов.

Количественный и качественный анализ лимфоцитарных рецеп-- 8 -

торов к норадреналину здоровых доноров, выявил таким образом следующие возрастные закономерности: у мужчин происходит увеличение количества рецепторов на фоне снижения ответа смеси лимфоцитов на экзогенный норадреналин (in vitro) в PTMJL Ш видимому увеличение экспрессии рецепторов является компенсаторным процессом в ответ на снижение их чувствительности (нарушение пострецепторного ввена) и возможно как следствие снижения с возрастом регуляторных механизмов внутри системы иммунитета (инволюция тимуса, нарушение функционирования внутрисистемных медиаторов, например 1L-2). У женщин обнаружена тале закономерность до 51-60 лет, в дальнейшем наблюдали снижение обоих показателей. Пик экспрессии рецепторов к норадреналину был как бы смешен на 10 лет в более молодые группы по сравнению с мужчинами. У мужчин гипотетически мокно предположить аналогичное сни-

1!П«Л С!) 50!

О

i.ti* ».Л* гй* iti* 11-50я«т - - - - 51-60л«т

» ■iff С Ш ..........61-70л«т

рис. 2. чувствительность смеси лимфоцитов к экзогенном« норддре-- нялимм to Titro в ртпл здоровых лш в рязпичиые. возрастные периоды

.жение лет).

количества рецепторов в старческом возрасте (71 и старше Данная особенность у женщин по видимому обусловлена гор-' -'9 -

мональными возрастными перестройками женского организма. Полученные результаты демонстрируют общие механизмы дисрегуляции системы иммунитета и автономиэацию лимфоцитов с возрастом у здоровых людей, более выраженную у лиц женского пола. Обуславливающие, возможно, увеличение частоты аутоиммунных реакций с возрастом в здоровой популяции, а также большую частоту и раннее проявление аутоиммунных реакций у женщин по сравнению с мужчинами.

В селах Кайнар и Караул, прилегавших к Семипалатинскому . ядерному полигону, обнаружено достоверное (р<0.05) повышение частоты реакций с дДНК, превышающих на 2Б0 (стандартных отюю-. нения) фоновые значения (средний титр антител к дДНК донорского пула сывороток) в общей и в обоих половых группах по сравнению с жителями контрольного по радиационному фактору села Кокпекгы (рис. 3). Во всех возрастных группах жителей села Караул данный

§Ц всего женвмны ¡Щ мажчнны

• РИС.3. ЧвСТОТЙ РЕАКЦИЙ С «ДИК, ПРЕВЫШАВШИХ НИ 2 50 СРЕДНИЙ ТИТР ДОНОРСКОГО пиля СЫВОРОТОК (ФОНОВЫЙ уровень)

показатель бьш достоверно выше (р<0.05) по сравнению с анало-

-10-

гичными группами жителей села Кокпекты (рис. 4а). В селе Кайнар зарегистрировано достоверное (р<0.05) повышение в группах 51-60 и 61 и более лет. У женщин (рис. 4Ь) в селе Караул также показатели надфонових реакций с дДНК во всех возрастных группах были достоверно выше (р<0.05) контрольных значений. Для жительниц села Кайнар повышение достоверно (р<0. 05) лишь в группах 51-60 и 61 и более лет. У мужчин (рис. 4с) села Кайнар достоверное (р <0.05) повышение в группе 51-60 лет, села Караул 41-50 и 51-60 лет по сравнению с кителями контрольного села Кокпекты.

кокпекты

61-.,.я«т

рмс.4. воэростняя яинямикя частоты реакций с бдих, превьийойих

фоноаьт уровень о в сеней полчляции ь> ы жеконн с) и МУЖЧИН

Для возрастной динамики частоты надфоновых реакций с дДНК в контрольном селе характерна тенденция к повышению у мужчин и к понижению у женщин по мере старения (рис. 4Ь,с), со сдвигом пика у женщин в более молодой возраст по сравнению с мужчинами: мы видим как бы две стороны одной кривой возрастной динамики в разных половых группах. Для мужчин села Кайнар и Караул можем отметить смещение пика частоты надфоновых-реакций в молодые группы по сравнению с аналогичными группами жителей контрольного по радиационному фактору села Нокпекты.

Обнаруженное у жителей сед Кайнар и Караул достоверное увеличение (р<0.05) частоты реакций с дДНК, превышающих "фоновые" значения, во всех возрастных и половых группах указывает на увеличение титра антител реагирующих с дДНК в этих селах по

Р«С.5, ЧАСТОТА СЕРВПОЗИТНвНЫХ РЕАКЦИЯ С дДНК

сравнению с жителями контрольного по радиационному фактору села Кокпекты. И может свидетельствовать об увеличении поликлональ-ной (неспецифической) активации В-лимфоцитов жителей пострадавших регионов и о росте аутоиммунного компонента в функциониро-

- 12 -

вании иммунной системы, возможно радиационного генеэа.

Возрастная динамика частоты "надфоновых" реакций с дДНК у кителей контрольного села, имевшая разнонаправленный характер -у женшин снижение, у мужчин повышение по мере старения, со сдвигом пига частоты у женшин в более молодую группу позволяет

0 . ЕЭ 11-30лат ЕЗя-ВОлог ЕЩ 81-...лот

——.......- линия рагрвссим

рис.о. вазрястияя диняннкя частоты СЕропоэитивиых реакция с дднк

а) В ОЕЯЕЙ ПОПУЛЯЦИИ ЫУ ЖЕННИН С) и Ж)ЖЧИН

сделать заключение о зависимости аутоиммнных реакций от пола, в частности от возрастных изменений уровня и соотношения половых гормонов.

Анализ частоты серопозщ'ивных реакций с дДНК не выявил - 13 -

достоверных различий в сравниваемых регионах (рис. 5).

Обнаружена разнонаправленная возрастная динамика данного показателя: в селах Кайнар и Караул происходит снижение, а в селе Кокпекты повышение частоты серопозитивных реакций с дДНК по мере старения в общих группах и у мужчин (рис. 6а,с). В селах, прилегающих к Семипалатинскому ядерному полигону наблюдали сдвиг пика частоты на 10 лет в молодые группы во всех выборках (рис. 6). Для контрольного села было характерен сдвиг пика частоты серопозитивных реакций с дДНК у женщин в молодые группы (41-50 лет) по сравнению с мужчинами (61 и старше лет)(рис. 6Ь, с), в селах Кайнар и Караул у мужчин и женщин пик частоты приходится на группу 51-60 лет (рис. 6Ь,с).

Не выявлено достоверных различий по частоте серопозитивных реакций с микросомами щитовидной делезы (МсПШ) между жителями, сравниваемых регионов (рис. 7). Обращает на себя внимание достоверно (р<0. 05) большая частота данных реакций у женщин в

кокпекты

га всего

женщины

ркс.7. чястотя серопозитивных реакций с микросоидми внто-вняной железы

контрольном селе в общей группе (рис. 7) и в группах 41-50 и 51

— 14 -

-60 лет Срис. 8Ь,с) по отношению к мужчинам этого населенного пункта. В возрастном аспекте обнаружена разнонаправленная динамика частоты серопозитивных реакций с МсЩН в сравниваемых регионах - для сел Кайнар и Караул тенденция к ; снижению, в селе Кокпекты к повышению по мере старения во всех выборках (рис. 8а,Ь,с), фи чем пик частот серопозитивных реакций с №Щ1

^Цц-ЗОявт Е351-60л«т ВЦб1-...«т

.................. линия регрессии

рис.9. возросшая дмняимкй члстоть серопозыти0кых реакция с сшчро-

соияпм вмтовйдной железы а> в оввея популяции ь> и женщин с) а нажчнн

для жителей села Кайнар • приходится на 41-50 лет возрастную группу, села Караул 51-60 лет,* для жителей контрольного по радиационному фактору села Кркпекты на группу 61 и более лет во

- 15 -

всех выборках (рис. 8а,Ь,с).

Анализ частоты серопозитивных реакций с дДНК и МсЩЖ хотя и не выявил достоверных различий у жителей сравниваемых регионов. Однако обнаруженные возрастные эаконбмерности динамики этих показателей позволяют сделать следующие заключения: у женщин контрольного села Кокпекты аутоиммунные реакции проявляются в более молодом возрасте по сравнению с мужчинами, причем разница частоты серопозитивных реакций с МсЩЕ достоверно выше у лиц женского пола (р<0.05), что, как указывалось выше вероятно связано с онтогенетическими особенностями гормонального статуса лиц разного пола. В селах Кайнар и Караул сдвиг пика частот се-

г ■

м-

____

•Л-

и-0.1'

-0.1 • -м- «АД' » 'ч «

-о-

-ал-

■«. с - ВОЗРАСТНЫЕ ГРИППЫ . -КАМУЛ

-ПИНИЯ РЕГРЕССИИ ---- КОКПЕКТЫ .

РНС.9. ВОЗРАСТНАЯ ДИНЛНИКЯ ТЕТРОХОРНЧЕСКОГО ПОКАЗАТЕЛЯ СВЯЗМ СЕРОПОЗИТИВНЫХ РЕАКЦИЯ С ИсвХС И КЯДФВНВВЫХ РЕАКЦИЯ С а ДНК

. ропозитивных реакций с обоими аутоантигенами у лиц мужского пола в более молодые группы и отсутствие достоверной разницы между частотными показателями мужчин и женщин свидетельствует о нарушении полового распределения этих признаков.

Обнаруженная разница возрастной динамики частоты серопозитивных реакций с дДНК и №Щ1 в сравниваемых регионах - в се- 16 - ;

дах Кайяар и Караул тенденция к снижению, в селе Кокпекты - повышение по мере старения, а также сдвиг пика частот у жителей первых сел в молодые группы указывает на преждевременное "старение" жителей пострадавших регионов по показателям общего (неспецифического) и локального (органспецифического) аутоимму-китета по сравнению с жителями контрольного по радиационному фактору села Кокпекты.

Показатель тетрахорического коэффициента ассоциации серо-позитивных реакций с МсЩ1 и реакциями с дДНК, превышающими фоновые значения, имел достоверную величину для жителей села Караул г-О. 182±0. 092 (р-О. 05) , у жителей села Кокпекты данный показатель связи был недостоверен г—0.034±0.117 (р>0.10). Воз-ростная динамика данного коэффициента в сравниваемых населенных пунктах ждала однонаправленный характер - снижение по мере старения и линейную зависимость от возраста (г-0.98, р< 0.001) (рис. 9). Однако данный показатель у жителей села Караул во всех возрастных группах имел положительные значения, в отличии от села Кокпекты, где показатель претерпевал динамику от положительных значений в груше 41-60 лет до отрицательных в группе 61 и более лет. А также указанный показатель связи был достоверно выш (р<0.05) в группах 51-60 и 61 и более лет жителей села Караул по сравнению с аналогичными возрастными группами контрольного села Кокпекты (рис. 9).

Обнаружанная диссоциация но тетрахорическому показателю овяаи ееропоэитивных реакций с ШВД и реакций с дДНК; превышающих "фоновые" значения, с возрастом, позволяет сделать заключение об ослаблении идиотип-идиотипических взаимодействий общей и

ь

- 17 -

локальной аутореактивностей в возрастном аспекте, обусловленное по видимому различным ююнальным происхождением, исследованных аутоантител. Однонаправленность данного процесса и линейная зависимость его с возрастом у жителей, сравниваемых регионов, говорит об однотипности развивающихся возрастных процессов в обоих популяциях. Однако в с. Караул показатель связи во всех группах имел положительные значения и для общэй группы был достоверен (р-0.05), что вероятно связано с общим этиопатогенезом этих двух процессов, возможно радиационным.

вотографии электрофореграмы (рис. 10) экстракта щитовидной железы, на различных этапах выделения ышфосоыальной фракции, демонстрируют, что тиреоглобулин (и. в. 220 кЛа второй

-103

я - коллкзранты нол. веся б - иикроссиы в - гюшгенят

Я Б В

рис. ю. алектрофорегрйнпы фореэов в полмкритяшаноп геле

овряэцов, взятых ня различных этяпях выделения никросон

актавидно» хосзн

субъединицы) теряется на стадиях отмывки микросомальной фракции

- 18 -

и в реакциях иммуноблоттинга участия не принимает. Белковый электрофорез в градиентном гтолиакриламидном геле с додецилом-сульфатом Na микросомальной фракции экстракта щитовидной железы позволяет разделить до 40 отдельных белковых антигенов, в диапазоне от 220 до 18. 5 kDa, среди них стрелкой обозначен микро-сомальный антиген (пероксидаза) щитовидной железы (м.в. 103-110 kDa) (рис. 10), один из яутоянгигенов еитоецдпой яеле-

off

Чаеашпый анализ результатов ишуноблоттинга с серопози-тнвными сыворотками (в ИФА с МсЩЯ) (рис. 11) не выявил достоверных различий в спектрах аутоантител у зштелей сравниваемых регионов. На рис. 11 видно, что кроме микросомального антигена

«г,р,одл (п-ю) ■ КЯШР(л-7> коклеитисп^в)

О 3 0 5 О 5

230

из мо

173 153

М-В. Oíd) из-

нзо 7530' 25-<10-

РМС.И. мястотныя дияпиэ результатов икжмовлоттш'.гя с никросомяни аитовидноя железы серспозитивних сывороток в мфя

в реакциях принимает участие около 12 различных белковых антигенов микросомальной фракции, в диапазоне от 190 до 20 кВа. • С микросомальным антигеном реагируют 2 из 10 жителей села Караул, 2 из 7 и 3 из 8 сывороток жителей сел Кайнар и Кокпекты, еоот-

-419 -

ветственно. Результаты иммуноблоттинга позволяют сделать вывод о том, что облучение ионизирующей радиацией не приводит к образованию специфических "маркеров"-аутоантител.

Таким образом, мы можем заключить об 'индуцирующем и ускоряющем действии ионизирующей радиации на закономерно происходящие возрастные процессы в иммунной системе, в частности на возрастную аутоиммунизацига.

ВЫВОДУ

1. Возрастные изменения количества и чувствительности рецепторов к норадреналину лимфоцитов здоровых мужчин-доноров имели разнонаправленный характер - увеличение с возрастом количества и снижение чувствительности; для женщин данная закономерность наблюдается до 51-60 лет, в более старшей группе (61-70 лет) происходят однонаправленные изменения - снижение ■обоих показателей.

г. С возрастом увеличивается частота неспецифических и йрганспецифических (щитовидная железа) серопозитивных аутоиммунных реакций. У женщин данная- закономерность более выражена чем у мужчин - начинается в более молодом возрасте.

3. У жителей сел, прилегающих к Семипалатинскому полигону (Кайнар и Караул) обнаружено достоверное увеличение частоты неспецифических аутоиммунных реакций (Ат-дДНК), превышающих фоновый уровень, во всех половых и возрастных группах по сравнению с жителями контрольного села Кокпекты.

4. В селах Кайнар и Караул наблюдается нарушение полового распределения аутоиммунных реакций - увеличение частоты у мужчин в более молодом возрасте (41-50 лет), по сравнению с мужчи-

- 20 - ...

нами контрольного по радиационному фактору села Кокпекты.

5. Обнаружена возрастная диссоциация связи неспецифических и органспецифических аутоиммунных реакций (Ат-дДНК и Ат-йзЩЯ), слабо выраженная в облученной популяции, что может свидетельствовать об их общем этиопатогенезе, возможно радиационном.

6. Разнонаправленная возрастная динамика частоты серопозитивных реакций с МсШЖ и с дДНК - в селах Кайнар и Караул снижение, в контроле (с. Кокпекты) увеличение, со сдвигом "пика" в первых селах в молодые группы свидетельствует о преждевременном "старении" жителей этих сел по показателям неспецифического и органспецифического аутонммунитета, обусловленное вероятно радиационным фактором.

7. Спектры аутоантител к микросомам щитовидной железы серопозитивных сывороток жителей сравниваемых регионов не имели достоверных различий, т.е. ионизирувдая радиация не имеет специфических "маркеров" (последствий) в развитии органспецифических (щитовидная железа) аутоиммунных реакций.

8. Ионизирующая радиация является ускоряющим фактором "нормально" протекающих процессов старения.

■СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. йожабеков Б. Т., Шймарданов Е К , Тапбергенов С. О. Возрастные показатели оСеэго и локального аутоиммунитета в популяциях людей, проживающих в. близи Семипалатинского полигона // Сборник тезисов I Съезда иммунологов России. Новосибирск, 1992. с. 64.

- Ъ. -

2. Кожабеков Б.Т., Тапбергенов С.О. Состояние общего и локального аутоиммунитета у жителей регионов, прилегающих к Семипалатинскому ядерному полигону /7 Сборник тез. международного симпозиума по иммунологии и аллергологии. Алма-ата, сентябрь 1992. с. 75.

3. Вебер В. Р., Тапбергенов Т. С., Кожабеков Б. Т., Мусина Г. Способ определения рецепторов к норадреналину на лимфоцитах методом розеткообразования // Информ Листок, 12-92, ЦНТИ Семипалатинск.

4. Bagdat Т. Kozhabekov, Nurlan К. Shaimardanov, Salavat 0. Tapbergenov State of general and local autoimmunity in population of regions close to Semipalatinsk nuclear range // Abstract. YIII International Congress of Immunology, Budapest, August 1992, p. 617.

/

r

Подписано к печати Тираж 100 экз. '

Заказ объем 2 п. л.

БОП ОУС г.Семипалатинск