Влияние сыворотки крови человека на M-холино- и α-, β-адренореактивность гладких мышц желудка крысы

Куншин, Алексей Александрович

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Влияние сыворотки крови человека на M-холино- и α-, β-адренореактивность гладких мышц желудка крысы
ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Влияние сыворотки крови человека на M-холино- и α-, β-адренореактивность гладких мышц желудка крысы"

На правах рукописи

Куншин Алексей Александрович

Влияние сыворотки крови человека на М-холино-и а-, Р* адренореактивность гладких мышц желудка крысы

03.00.13 - физиология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Киров - 2006

Работа выполнена на кафедре нормальной физиологии Кировской государственной медицинской академии и в лаборатории мышц и биологически активных веществ кафедры анатомии, физиологии и валеологик Вятского государственного гуманитарного университета

Научный руководитель:

доктор медицинских наук профессор Циркин Виктор Иванович

. Официальные оппоненты:

1 .доктор медицинских наук профессор Азии Александр Леонидович 2.кандидат биологический наук доцент Туманова Татьяна Витальевна

Ведущая организация:

Российский государственный медицинский университет

Защита состоится « декабря 2006 года в /V часов на заседании

диссертационного совета K20S.036.01. при ГОУ ВПО «Кировская государственная кешшинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному раэмпмю» по адресу: 610027, г. Киров, ул. К. Маркса, д.112., ауд. 230.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Кировской государственной медицинской академии по адресу: 610027, г. Киров, ул. Карла Маркса, 137.

Автореферат разослан «_ » ноября 2006 года

Ученый секретарь диссертационного совета кандидат медицинских наук доцент

Хлыбова Светлана Вячеславовна

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность исследования, работы последних лет, выполненные, главным образом, на гладкомышечных полосках рога матки крысы (Брэтухина C.B., 1997; Циркин ВЛ, Дворянский С.А., 1997; Осокина A.A., 1998; Сизова E.H., 1998, 2005; Туманова Т.В., 1998; Гусева Е.В., 1999; Морозова М.А., 2000; Мальчикова C.B., 2002; Сазанова МЛ., 2002; Трухин А.Н., 2003; Кононова Т.Н., 2004; Снигнрева НЛ. к соавт, 2004; Сизова ЕЛ., Циркин В.И., 2006), а также коронарных артерий свиньи (Сизова E.H., 199S, 2003), артерий и вены пуповины человека (Сазанова M.JL, 2002), почечной артерии коровы (Сиигарева НЛ. и соавт., 2004, Кашин Р.Ю. и соавт., 2006), трахеи коровы (Сизова E.H., 199$, 2005; Кононова Т.Н., 2004) и на изолированном сердце лягушки (Трухин А.Н., 2003; Пенки на Ю.А. и соавт., 2006), свидетельствуют о наличии в крови и других жидких средах организма человека системы эндогенных модуляторов хемореактивности прямого действия, в том числе повышающих эффективность активации соответствующих клеточных рецепторов, т.е. эндогенных сенсибилизаторов и снижающих ее, т.е. эндогенных блокаторов. Получены доказательства существования эндогенных сенсибилизаторов ß- и а-адренорецепторов (ЭСБАР, ЭСААР), М-холинорецепторов (ЭСМХР) и гистаминовых рецепторов (ЭСГР), а также эндогенных блокаторов р-АР (ЭББАР), а-АР (ЭБААР) и М-ХР (ЭБМХР). В частности, установлено, что 10-, 50-, 100- и 500-кратные разведения сыворотки крови человека способны обратимо и дозозависимо снижать сократительную реакцию на ацетилхолин (АХ) миометрия крысы (Циркин

B.И. Дворянский СЛ., 1997; Осокина A.A., 1998; Сизова E.H. и соавт., 2003, 2004; Кононова Т.Н., 2004; Сизова E.H., Циркин В.И., 2006) и сердца лягушки (Трухин А Л., 2003; Сизова E.H., Циркин В Л., 2006). Ранее подобный эффект был выявлен в опытах с изолированным сердцем лягушки и кролика при воздействии сыворотки крови лягушки, крысы и кролика (Zvezdtna N. et al., 1978; Суслова И.В. и соавт., 1995; Проказова Н.В. и соавт., 1998), что также указывает на наличие в крови ЭБМХР.

Вопрос о физиологической роли ЭСБАР, ЭББАР, ЭБМХР и других модуляторов, их природе, участии в патогенезе заболеваний, а также об их клиническом применении остается открытым. Показано, что при инфаркте миокарда (Мальчикова СЛ. и соавт., 2002), бронхиальной астме (Кононова Т.Н., 2004), гипертонической болезни (Снигирева HJI. и соавт., 2004, 2005), слабости родовой деятельности (Братухмна C.B., 1997) и угрозе преждевременных родов (Осокина A.A., 1998) содержание ЭСБАР, ЭББАР и ЭБМХР изменено. Установлено, что ЭСБАР-подобную активность проявляют гистидин, триптофан и тирозин, в связи с чем эти аминокислоты рассматриваются как компоненты ЭСБАР, а также триметазидин и милдронат {Циркин ВЛ., Дворянский СЛ., 1997; Ноздрачев АД. и соавт, 1998; Туманова Т.В., 1998; Сизова E.H., Циркин ВЛ„ 2006). Предполагается, что компонентом ЭБМХР является лизофосфатидклхолин, или ЛФХ (Мальчикова

C.B. и соавт., 2002; Кононова Т.Н., 2004; Сизова E.H. и соавт., 2004).

Влияние эндогенных модуляторов хемореакгивности на гладкие мышцы желудка не исследовалось, так же как и не изучался вопрос об их участии в патогенезе заболеваний ЖКТ, в том числе кислого зависимых заболеваний (КЗЗ), при которых, как известно (Ефименко Н.В., 1990, 2005; Маев И.В. н соавт., 2000; Филимонов PJ3., 2005), снижена моторная функция желудка. Поэтому мы считали возможным провести изучение этих вопросов, используя в качестве тест-объекта гладкие мышцы крысы, свойства которых описаны в литературе (Богач ПХ. н соавт., 1971;Медведев М.А„ 1975; Boev К. et al., 1976; Petroianu A., Weinberg J.,

1986; Ohta Т. et al, 1991). Однако анализ этих работ показал, что ряд вопросов физиологии гладких мышц желудка крысы, важных в методическом отношении для исследования эндогенных модуляторов хемореактивности, недостаточно изучены, в частности, вопрос о зависимости М-холинореактнвности мноцитов желудка от их локализации в соответствующем слое и в регионе желудка (Богач П.Г. и соавт., 1971; Boev К. et al., 1976) и о характере сократительных эффектов катехоламннов (Golenhofen К., Wegner Н, 1975; Mandrek К, Kreis S., 1992; Fulop К. et al, 2005).

Цель исследования - изучить влияние сыворотки крови человека (как источника эндогенных модуляторов хемореактивности) на М-холино и я- и ß-адренореактивность гладких мышц различных отделов желудка крысы и оценить способность лизофосфатидилхолнна изменять их М-холииореактивность.

Задачи исследования.

1. Изучить влияние ацетилхолина (АХ, Ю"8 - 10's г/мл) на сократительную активность (CA) продольно и циркулярно иссеченных гладкомышечиых полосок фундуса, корпуса и антрума желудка крысы и способность 1000-, 500-, 100- и 50-кратных разведений сыворотки пуповинной крови новорожденных изменять сократительные ответы полосок на АХ (10"6 г/мл).

2. Оценить способность 1000-, 500-, 100- и 50-кратных разведений сыворотки крови здоровых людей и пациентов с кислотозависимыми заболеваниями (КЗЗ) желудочно-кишечного тракта изменять сократительные ответы циркулярных полосок фундуса желудка крысы и продольных полосок рога матки небеременных крыс на АХ (10* г/мл).

3. Исследовать способность лизофосфаткдилхолина (ЛФХ, 10"* - 10^ г/мл), фосфатндилхолнна (Ю'МО"4 г/мл) и 1000-, 500-, 100- и 50-кратных разведений водного раствора куриного яичного желтка (как источника ЛФХ) изменять сократительные ответы циркулярных полосок фундуса желудка крысы на АХ (10~* г/мл).

4. Изучить сократительные ответы полосок фундуса желудка крысы при селективной активации адреналином (10"' - 10"6 г/мл) p-адренорецепторов (на фоне блокады а-АР ннцерголином, 10"* г/мл) или а-адренорецепторов (на фоне блокады ß-AP обзнданом, 10 г/мл) и влияние на них сыворотки крови человека.

Новизна исследования. Впервые показано, что чувствительность гладких мышц желудка крысы к АХ зависит от их локализации (она самая высокая у гладкомышечиых полосок корпуса и самая низкая - у полосок антрума), но не зависит or пространственной ориентации гладкомышечиых пучков

Впервые установлено, что сыворотка пуповинной крови новорожденных за счет наличия в ней ЭБМХР проявляет М-холиноблокирующую активность в опытах с гладкими мышцами желудка. Чувствительность полосок желудка к ЭБМХР зависит от их локализации - она максимальна у продольных и циркулярных полосок фундуса и минимальна - у циркулярных полосок корпуса и антрума.

Впервые отмечено, что сыворотка крови здоровых людей (1:1000,1:500,1:100 и 1:50) обладает такой же ЭБМХР-активностью в отношении гладких мышц желудка крысы, как и в отношении гладких мышц матки крысы. Сыворотка крови пациентов с КЗЗ ЖКТ проявляет подобную активность (в опытах на полосках желудка и матки крысы) только в разведениях 1:100 и 1:50, что указывает на 10-кратное снижение у них содержания в крови ЭБМХР. Впервые показано (совместно с Т.В, Помаскнной), что содержание ЭБМХР в сыворотке крови у больных КЗЗ после прохождения 21-дневного курса лечения ПМВ «Ннжнеивкинская-2К» в условиях санатория возвращается к значениям, характерным для здоровых, что

сопровождается улучшением состояния пациентов. Эти данные доказывают причастность ЭБМХР к развитию КЗЗ пищеварительного тракта.

Впервые установлено, что ЛФХ в концентрациях 10 и 10"7 г/мл не влияет на сократительный эффект АХ (10~* г/мл) в отношении гладких мышц желудка крысы, в концентрации 10 ЛФХ повышает его, т.е. проявляет ЭСМХР-активность, а в концентрациях Ю '-Ю"4 г/ил снижает его, т.е. проявляет ЭБМХР-актвносгь. Фосфатнпияхолин как предшественник ЛФХ проявлял лишь ЭСМХР-активность (в концентрации Ю-6 г/мл), а куриный яичный желток как источник неферментативного образования ЛФХ демонстрировал лишь ЭБМХР-активность (в разведениях 1:500, 1:100 и 1:50). Все это подтверждает предположение о ЛФХ как одном из компонентов ЭБМХР и указывает на то, что продукты питания могут влиять на М-холиномоду пирующие свойства крови.

Впервые показано, что селективная активация р-АР (на фоне ницерголина, 10' 6 г/мл) адреналином (10"' и 10"6 г/мл) снижает тонус полосок желудка, вызванный гиперкалиевым (60 мМ КС1) раствором Кребса, а сыворотка пуповинной крови (1:100, 1:50) снижает этот эффект, т.е. проявляет ЭББАР-активность. Селективная активация а-АР (в присутствии Р-адреноблокатора обзидана, 10"4 г/мл) адреналином ((О'4 г/мл) повышает у полосок желудка базальный тонус и тонус, вызванный гиперкалиевым (60 мМ КС1) раствором Кребса нли сывороткой крови человека (1:1000, 1:500, 1:100, 1:50). Следовательно, катехоламнны могут не только ингибировать СА гладких мышц желудка, но и повышать ее, что может иметь место при высоком уровне ЭББАР в крови или при наличии в ней Р-адреноблокагоров как лекарственных препаратов.

Впервые показано, что сыворотка крови человека в разведениях 1:1000, 1:500, и 1:100 проявляет а-адреноб локирующий эффект, который объясняется наличием в крови ЭБААР.

Впервые установлено, что мноцнтстнмулирующая активность сыворотки крови человека (1:1000, 1:500, 1:100 и 1:50), обусловленная наличием в ней эндогенного активатора сократимости мноцитов (ЭАСМ), проявляется на гладких мышцах желудка крысы.

Таким образом, впервые показано, что эндогенные модуляторы хемореактивкости, в частности, эндогенные бяокаторы (ЭБМХР, ЭББАР и ЭБААР), а также ЭАСМ могут участвовать в регуляции моторной функции желудка. Недостаточное или избыточное содержание этих факторов может быть причиной дисфункции и/или патологии желудка.

Научная и практическая значимость работы. Результаты исследования расширяют представление об эндогенных модуляторах хемореактивности прямого действия, в частности о возможном участии в регуляции моторики желудка ЭБМХР, ЭББАР и ЭБААР и их роли в развитии патологии желудка, что может учитываться при создании новых диагностических, профилактических и лечебных технологий в гастроэнтерологии. Они углубляют знание о ЛФХ как вторичном посреднике, в частности, об его участии в модуляции М-холинореакгивности, а также о роли а- и Р-адренергических механизмов в регуляции моторной функции желудка. Результаты работы важны в методическом отношении, так как демонстрируют возможность использования гладких мышц желудка крысы в качестве тест-объекта при оценке содержания в биологических жидкостях ЭБМХР, ЭСМХР и ЭАСМ, Результаты исследования могут представлять интерес для физиологии, фармакологии, внутренних болезней и гастроэнтерологи и как учебных дисциплин.

Положения, выносимые на защиту.

]. Сыворотка крови человека проявляет М-холи неблокирующую, а- и р-адреноблокирующую н миоцнтстимулирующую активность в отношении гладких мышц желудка крысы. Это означает, что содержащиеся в крови человека эндогенные блокаторы М-холинорецепторов (ЭБМХР) и а- и р-адренорецегт>ров (ЭББАР, ЭБААР), а также эндогенный активатор сократимости миоцитов (ЭАСМ) могут участвовать в регуляции сократительной деятельности желудка.

2. ЭБМХР-аргивкость сыворотки крови человека может снижаться при патологии (в частности, при кислого зависимых заболеваниях пищеварительного тракта), что указывает на возможность участия ЭБМХР в развитии патологического процесса.

3. Лизофосфатидилхолин (ЛФХ) в высоких концентрациях (10"'-КГ1 г/мл) проявляет ЭБМХР-активность, что позволяет рассматривать его как компонент ЭБМХР. В низких концентрациях ЛФХ (10"4 г/ил), как и фосфатидилхолнн (10"6 г/мл), повышает эффективность взаимодействия ацетилхолина с М-холннорецепторами (ХР), т.е. проявляет свойства эндогенного сенсибилизатора М-ХР (ЭСМХР).

4. Адреналин за счет активации а-адренорецепторов гладких мышц желудка может повышать их сократительную деятельность, особенно в условиях блокады р-адренорецепторов.

Внедрение. Результаты исследования используются в учебной и научной деятельности кафедры нормальной физиологии, кафедры поликлинической терапии с курсом физиотерапии и курортологии Кировской государственной медицинской академии, кафедры анатомии, физиологии человека н валеологин Вятского государственного гуманитарного университета и кафедры медико-биологических дисциплин Вятского социально-экономического института.

Апробация работы. Результаты работы были представлены в материалах 19 съезда физиологического общества им. И.П. Павлова (Екатеринбург, 2004), I съезда физиологов СНГ «Физиология и здоровье человека» {Сочи, 2005), IX международного конгресса «Парентеральное и энтераяьное питание» (Москва, 2005), научной юбилейной конференции Российской Академии Естествознания (Москва, 2005), IV и V молодежных научных конференций «Физиология человека и животных; от эксперимента к клинической практике» (Сыктывкар 2005, 2006), 9-й Всероссийской медико-биологической конференции молодых исследователей (С-Петербург, 2006), л также доложены на всероссийской конференции молодых исследователей «Физиология и медицина» (С-Петербург, 2005), на VI съезде научного общества гастроэнтерологов России (Москва, 2006) и на заседании Кировского отделения Физиологического общества им. И.П. Павлова (Киров, 2006).

По материалам диссертации опубликовано 11 работ.

Структура и объем работы. Диссертация изложена на 133 страницах машинописного текста и 60 страницах приложения к результатам исследований и состоит из введения, 4 глав (обзор, методы исследования, результаты исследований, обсуждение), заключения, выводов и списка литературы, включающего ИЗ работ на русском языке и 178 на иностранных языках. Работа иллюстрирована 24 таблицами н 44 рисунками, составляющими приложение к результатам исследований.

Объекты и методы исследования.

Проведено 9 серий исследований, включающих регистрацию СА 419 полосок желудка 189 крыс (самки, без учета фазы астрального цикла), 68 продольных полосок рога матки 30 небеременных крыс в фазе мегаэструса пли диэструса,

определяемые по картине влагалищного мазка (Кнршенблат ЯД., 1969), а также , оценку хемомодулирующих свойств 1000-, 500-, 100- и 50-кратных разведений сыворотки 144 образцов пуповинной крови новорожденных и 48 образцов сыворотки венозной крови взрослых людей.

Все гладкомышечные полоски (продольно и циркулярно иссеченные из фундуса, корпуса и антрума желудка и продольно иссеченные из рога матки) имели длину 5-8 мм и ширину 2-3 мм. Забой животных осуществляли в соответствие с . "Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных" (приказ Министра здравоохранения СССР от 12.08.77).

Регистрацию СА полосок желудка и матки крысы провопили по методике Циркина В.И. и соавт, (1997) на б-канальном «Миоцитографе» конструкции АХ. Гусева и В.И. Циркина (решение о выдаче патента на изобретение от 29.06.94 по заявке №5065631/14/045781 от 0S.10.92 "Устройство для исследования гладких мышц «Миоцитограф») при 38вС, скорости перфузии раствора Кребса со скоростью 0,7 мл/мин и пассивной аэрации рабочей камеры. Исходная нагрузка для полосок составляла, как правило, 500мг (4,9 мН).

Оценку М-холино- и а- и р-адренореактвностн тсст-объектов проводили по методике Циркина В.И. и соавт. (1996, 1997, 2004), используя ацетнлхолина хлорид (АХ, Россия; 10"*- 10"! г/мл) и адреналина гидрохлорцд (Россия, 10"*-10^ г/мл). При исследовании фоновой М-холиноре активности полосок опыты проводили по схеме: раствор Кребса —» исследуемая концентрация АХ раствор Кребса (при длительности каждого этапа — не менее 10 минут). На одной полоске исследовали последовательно, как правило, все 4 концентрации АХ (начиная с минимальной), реже 1-2 концентрации. При оценке М-холиномодулирующих свойств сыворотки крови опыты вели по схеме: раствор Кребса —» АХ (10 г/мл) —► АХ + исследуемое разведение сыворотки крови —+ АХ —► раствор Кребса. Аналогичную схему опытов применяли при исследовании М-холиномодулирующей активности атропина сульфата (Россия, 10*'°- 10*7 г/мл), лнзофосфатндилхолина (ЛФХ, Украина, Ю^'Ю*4 г/мл), фосфатндилхолина (ФХ, Украина, 10' -Ю-4 г/мл) и куриного яичного желтка, который разводили дистиллированной водой (1:1), а затем раствором Кребса в 50, 100, 500 и 1000 раз. Адренореактнвность и ее изменение под влиянием сыворотки крови оценивали при действии адреналина в условиях блокада ft-AP и pj-AP обзиданом (Германия, 10"® г/мл) или блокады <Х|-АР и а^-АР ницерголином (Россия, Ю"6 г/мл), в том числе при повышении базального тонуса полосок гиперкалиевым (60 мМ КС1) раствором Кребса (ГРК) или сывороткой крови. При этом использовали тот же принцип процедуры тестирования, как и в опытах с АХ. Во всех опытах использовали раствор Кребса (рН=7,4), содержащий (мМ); NaCl - 136, KCI — 4,7, CaClj—2,52, MgClj— 1,2, KHjPO«—0,6, NáHCOj—4,7, CtHtíOt- 11.

Пуповинную кровь, остающуюся после благоприятного рождения плода, получали (по 7-10 мл) в Кировском областном клиническом перинатальном центре, а венозную кровь (по 7-10 мл, при добровольном согласии) — у доноров крови Кировского НИИ гематологии и переливания крови (средний возраст - 55,6±1,9 лет; 5 женщин и 6 мужчин) и у пациентов с КЗЗ (59,1±13 года; 22 женщины и 15 мужчин), находящихся на лечении в санатории «Нижнее-Ивкнно». Сыворотку получали путем центрифугирования при 1000 об/мин в течение 15 минут. Бе разводили раствором Кребса в 50,100,500 и 1000 раз и исследовали в течение 6-24 часов от момента ее забора.

Результаты тестирований полосок оценивали по механограммам (качественно и количественно). Изменение тонической активности полосок выражали в мН или в процентах к одному из этапов эксперимента, указанном в соответствующем разделе работы. Константу диссоциации (Кд) для АХ т.е. концентрацию, при которой эффект достигал 50% от максимального, рассчитывали по общепринятой методике (Сергеев П.В. и соавт., 1999).

Статистический анализ результатов исследования провощили на персональном компьютере Pentium-Ш с помощью статистической программы Primer of Biostat ist i es (version 4.03), рассчитывая среднее арифметическое (M), среднее квадратическое отклонение (о), ошибку среднего (m) и критерий Стьюдента (t) по общепринятым формулам (Гланц С. 1999; Гусаров В.М., 2001). Различия показателей оценивали по критериям Стьюдента, Тьюки и Hьюмена-КеЯлса, считая их достоверными при р<0,05. -

Результаты исследования н нх обсуждение

1. Влияние ацетилхолина на сократительную активность гладкомышечных полосок различных регионов желудка крысы. Показано (рис, 1), что продольные и циркулярные полоски всех трех регионов желудка в условиях их перфузии раствором Кребса проявляют низкий базальный тонус, на фоне которого (это более характерно для полосок корпуса и антрума) могут генерироваться низкоамплитудные фазные сокращения. Все это согласуется с данными литературы, полученными в опытах с полосками из фундуса и антрума желудка крысы (Богач П.Г, и соавт., 1971), морской свинки (Богач П.Г. и соавт., 1971; Hennig G. et al., 2004), кошки (Кочемасова H.Г., и соавт. 1970), собаки (Boev К., Milenov К., 1972) и свиньи (Mandrek К., Mitenov К., 1991). На циркулярных и продольных полосках фундуса, корпуса и антрума желудка АХ (10"1 - lO'Vwi) доэозависимо и обратимо повышал базальный тонус (рис. 1А). На его фоне (в основном, на полосках корпуса н антрума) могли наблюдаться низкоамплитудные фазные сокращения. Величина тонуса полосок при воздействии АХ в концентрациях 10**, Ю'7,10~° и 10~* г/мл варьировала соответственно в пределах 0,36 - 0,88 мН, 0,98 - 1,87 мН, 1,79 - 4,81 мН и 2,77 - 6,81 мН (табл. 1). Тонотропный эффект АХ наблюдали и другие авторы в опытах с полосками желудка крысы, кролика, кошки, собаки и человека (Petroianu A., Weinberg J., 1986; Burches Е., et al., 1992; Mandrek К., Kreis 1992), а индукция фазной активности под влиянием АХ отмечена Ohta T. et al. (1991) в опытах на крысах.

Атропин (10*'°, 10**, 10"*, I0"7 г/мл) дозозавненмо снижал реакцию полосок на АХ (10"® г/мл, рис. 1Б), что согласуется с данными Golenhofen К., Wegner H. (1975). Следовательно, реализация тонотропного эффекта АХ происходит за счет активации М-ХР, которые, с учетом данных Напаек С., Pfeiffer А.(1990) и Wang Вч Cheng F. (2001), вероятнее всего, относятся к подтипу Mi-XP и Mj-XP.

Константа диссоциации (Кд) для АХ у циркулярных и продольных полосок фундуса, корпуса и антрума варьировала от 240 до 915 нг/мл (табл. 1). Наиболее высокая М-холинореактнвность была у полосок корпуса (Кд - 240 и 502 нг/мл), средняя — у полосок фундуса (Кд- 635 и 710 нг/мл), а самая низкая - у полосок антрума (Кд- 615 и 915 нг/мл). Во всех регионах циркулярные полоски обладают такой же М-холинореактивностью, как и продольные, что согласуется с данными Boev К. et al. (1976), полученными в опытах с полосками фундуса желудка крысы.

Таким образом, все полоски желудка, независимо от их локализации (фундус, корпус, антрум) и ориентации (слои) обладают относительно высокой М-

холжюреакгивностью. Это позволяет использовать их в качестве тест-объекта при исследовании М-холиномодулирукнцей активности сыворотки крови.

Табл. 1. Тонус (мН), вызываемый АХ (10"5 г/мл), и константа диссоциации для

Регионы желудка Продольные полоски Циркулярные полоски

Тонус, мН Кд. нг/мл Тонус, мН Кд. кг/мл

в М4п и М±т п M*m л М±ш

Фундуе 6 «,81*1,70 24 7Iftfc]20 4 4,41+1,05 24 635*130

Корпус 5 4,01*0,78. 20 240*160* 6 2,77+0,24 24 502*140

Антрум 6 4,65±0.74 24 615*130 i 4,01*0,96 20 915*140"

(к) достоверно (р>0,05) покритсрию Тьюки; п- число полосок. А.

АХ-в

АХ-7

АХ-6

АХ-5

' ■ - АХ-в

Ат-е

Рис.1. Мехлиотраммы циркулярных полосок фундуса желудка грисы, демонстрирующие доаозависиыый эффект ацетиихояяна в конце и фации 10"*, КГ7,10"6 и 10'3 г/мл (аЗс-8.,,АХ-5) и его блокирование атропином (ат-8, 10 i/мл), Калибровка — 10 мН, 10 мин.

Забегая вперся, отметим, что сократимость гладкомышечных полосок желудка крысы, суда по тонотропным эффектам АХ (Ю-5 г/мл), гиперкалиевого (60 мМ КС1) раствора Кребеа и сыворотки кроен человека (1:50), не зависит от места их иссечения и пространственной ориентации.

2. Влияние сыворотки пуповннной крови новорожденных на тонотропный эффект яцетнлхолнва (Ю-* г/мл). В опытах с продольными и циркулярными полосками фундуса, корпуса н антрума желудка крысы показано, что 1000-,. 500-, 100- и 50-краггные разведения сыворотки пуповннной крови человека снижают тонотропный эффект - АХ, (10 г/мл), тje. проявляют М-холиноблокирукицую активность (рис.2, табл. 2). Ее степень повышалась с уменьшением кратности разведения. Так, АХ-выэ ванный тонус продольных полосок фундуса снижался соответственно до 71,30%, 61,73%, 3830% и 18,09% от его первоначального (табл. 2). На полосках из разных регионов и слоев желудка АХ-вызванный тонус под влиянием разведения 1:50 снижался до 5,41% - 39,06% От первоначального, что сопоставимо с М-холиноблокнрующнм эффектом атропина, используемого в концентрациях 10"* - ЮЛУмл (рнс.1 н 2 ).

Показано (табл; 2), что на продольных н циркулярных полосках фундуса сыворотка крови достоверно (рк0,05, по критерию Тьюки) проявляла М-холиноблокирующую активность в разведениях 1:1000, 1:500, 1:100 и 1:50, на продольных полосках корпуса н антрума — в разведениях 1:500, 1:100 и 1:50, а на циркулярных полосках этих регионов - в разведениях 1:100 н 1:50. Это означает, что

чувствительность полосок желудка к сыворотке как блокатору М-ХР зависит от их локализации • она максимальна у продольных и циркулярных полосок фундуса, обладающих, как отмечено выше, средним уровнем М-холинореактивностн, и минимальна - у циркулярных полосок корпуса и антрума, имеющих соответственно высокую и низкую М-холинореактивность.

А. ■...,-...:

Л*"6 сыв 1:103

м 1:500

АХ-6

сыв 1:100

АХ«

сыв 1:50

АХ-6 сыв 1:10* АХ"6 сыв 1:500

Рис. 2. Механограммы циркулярных полосок фундуса (панели А и Б) и антрума (панель В) желудка крысы, демонстрирующие наличие (панели А и Е) М-хслнноблоккруюздей активности сыворотки пуповин ной крови на фоне ацетияхолина (10"® т/мл, АХ-6) или ее отсутствие (панель В). Сыв 1:10?,...,1:50 - разведения сыворотки 1:1o3, 1:500, 1:100 и 1:50. Калибровка - 10 мН, 10 мин (панель А, Б), 5 мН,10 мин (панель В).

Табл. 2. Величина тонуса полосок желудка крысы, вызванного ацстилхолином (10"6 г/мл), при действии 4 разведений сыворотки пуповинной крови новорожденных

Полоски сыворотка 1:1000 сыворотка 1:500 сыворотка 1:100 сыворотка 1:50

п М±т п М*т п М±т п М*т

I продольные 10 7U0±9,49* 11 61,73*7,84* 10 38,30*7,61* 11 18,09*5,66*

циркулярные 13 64,69±4,8Э* 13 60,85*3,42* 13 19,38*6,65' 12 5,41*3,09*

Корпус j продольные 10 94,50*7,83 13 88,50tfc3,70* 13 SS,3S±6v32* ,11 33,45*8,38'

циркулярные 9 100,80*12.11 12 92¿3*S¿1 11 52^7*4,31* 10 39,06*8,06*

i продольные 13 90,23*10,43 И 66,38*9,49* 14 20,50*6.63* 12 4,58*3,10*

циркулярные 10 U4,0t8,04 10 86,40*5,98 11 51.0*8,37*" 10 23,20*4,43*"

Примечание; * - различие с первоначальной величиной тонуса достоверно (р<0,05) по критерию Тьюки. # • различие с продольными полосками достоверно (р<0,05) по критерию СТьюдента.

Полагаем, что выявленная нами М-холиноблокирующая активность сыворотки крови подобна той, что ранее была отмечена в отношении гладких мышц матки крысы, трахеи коровы, коронарной артерии свиньи (Циркнн В.И. н соавт.,

1996,2002^003; Циркнн В.И., Дворянский С.А., 1997; Осокнна А.А., 1998; Мальчикова C.B., 2002; Сазонова МЛ., 2002; Кононова Т.Н., 2004; Снигирева H Л. а соавт., 2005; Сизова Е.Н., Циркнн В.И., 2006) и изолированного сердца лягушки, крысы и кролика (Zvezdina'N. et al„ 1978; Суслова И.В. и соавт., 1995; Проказова Н.В. и соавт., 1998; Трухни А.Н., 2003) и обусловлена наличием в ней ЭБМХР. Это означает, что I) гладкие мышцы желудка крысы, независимо or их локализации, восприимчивы к действию - ЭБМХР; 2) их активность может регулироваться эндогенными модуляторами М-холинореактивностн (ЭБМХР, и вероятно, ЭСМХР); 3) эти мышцы можно использовать как тест-объскт для идекгнфикации ЭБМХР и ЭСМХР и дня оценки их содержания в жидких средах организма человека и животных.

Э. Оценка М-холнномодулирующей активности сыворотки крови здоровых людей и пациентов с КЗЗ в опытах с циркулярными полосками фундуса желудка н продольными полосками poní мягки небеременных крыс. Сыворотка крови здоровых людей в разведениях 1:1000, 1:500, 1:100 и 1:50 достоверно (р<0,05, по критерию Тьюки) и доэозависимо снижала вызванную АХ (10"6 г/мл) тоническую СА циркулярных полосок фундуса (табл. 3) и фазио-тоническую СА продольных полосок poní матки (рис. 3, табл. 4), что говорит об идентичности влияния ЭБМХР на миошпы матки н желудка крысы. Сыворотка крови пациентов с КЗЗ, полученная до начала лечения ПМВ, на обоих тест-объектах достоверно проявляла ЭБМХР-активносгь лишь в разведениях 1:100 и 1:50, а полученная после окончания 21-дневного курса приема ПМВ, — в разведениях 1:1000, 1:500, 1:100 и 1:50, т.е. как и сыворотка здоровых людей. Это позволяет заключить, vio при КЗЗ содержание ЭБМХР снижается в 10 раз (или возрастает содержание ЭСМХР). Это может способствовать более выраженному влиянию вагуса на секреторную функцию желудка и проявляться в увеличения кислотности желудочного сока, что, в свою очередь, согласно данным литературы (Ефименко Н.В_, 1990; Филимонов Р.В., 2005), может тормозить моторику желудка. Очевидно, что 21-курс лечения ПМВ нормализует содержание ЭБМХР (или ЭСМХР) и тем самым уменьшает чрезмерное действие вагуса на кислотопродуцирующие клггки желудка. Это, в целом, улучшает деятельность желудка и желчного пузыря, о чем свидетельствуют клинические наблюдения (Помаскина Т.В., 2004; Гуляева С.Ф. и соавт., 2006). Таким образом, можно полагать, что эндогенные модуляторы М-холннореактнвности причастны к формированию патологии ЖКТ. -

Табл. 3. Величина тонуса полосок желудка крысы, вызванного АХ (№* г/мл),

Группы исследуемых Разведения сыворотки

1:1000 1:500 1:100 1:50

в М±т N №т в М*т в М±т

Здоровые люди 10 : 83.00*6,75" 10 7230=1:11,99" 11 33,90*5,34" II 16.09±6.074

Пациенты «КЗЗ: -да лечения ПМВ 17 98.67±8(16 18 SgJJ±6,00 21 34,72±5,10' 22 16ДШ.77*

-после лечения ПМВ 10 65,90*9,08"* 11 SO^Ot^lO** 121 36¿3±5,38" 12 29,73±8,58"

Примечание: * -различие с первоначальной величиной тонуса достоверно (р<0,05) по критерию Тьюки. * - различие с пациентами с КЗЗ до лечения достоверно (р<0,05) tío критерию Сгьюдснта; ПМВ—питьевые минеральные воды.

АХ« ^ АХ-6

Рис. 5. Мсханограммы циркулярных полосок фундуса желудка крысы, демонстрирующие М-холи нос«неибнлнзирующуто активность фосфзпшилхолнка (ФХ) в концентрации КГ4 г/мл (панель А) и ее отсутствие у ФХ в концентрации 10~* г/мя (панель Б), Калибровка—5 мН, 10 ынн.

Курнныв яичный желток (ЯЖ) в разведении 1:1000 не влияя на АХ-вызваняый тонус циркулярных полосок фундуса желудка, а в разведениях 1:500, 1:100 и 1:50 дозо зависимо а обратимо снижал его (рис, 6, табл, 5), т.е. подобно сыворотке крови в ЛФХ проявлял М-холиноблокирукнцую активность.

Л**® ЯЖ 1:100 АХ-в ЯЖ1:50

Рис. 6. Механограмма циркулярной полоски фундуса желудка крысы, демонстрирующая М-холиноблокирующий эффект 100- и 50-кратного разведения куримого яичного желпш(ЯЖ 1:100 и ЯЖ 1:50). Калибровка-5 м!1, Юмип.

Эти результаты коррелируют с данными, полученными в нашей лаборатории в опытах с продольными полосками рога матки крыш (Кононова Т.Н., 2004; Сизова ЕЛ, Цирки н В .И., 2006), согласно которым спиртовой распор ЯЖ в разведениях 1:500, 1:100 и 1:50, не влияя на параметры спонтанной СА полосок, достоверно снижал стимулирующий эффект АХ, Это означает, что М-холиноблокирукицая активность ЯЖ, которая наблюдается в отношении миоцнтов различных органов, обусловлена наличием в ЯЖ фактора, который можно рассматривать в качестве компонента ЭБМХР. С учетом того, что ЯЖ богах фосфатиднлхолином (Суслова И В. и соавт., 1995; Проказова Н.В. и соавт., 1998), из которого в результате нефермеиютивного гидролиза образует» ЛФХ, мы полагаем, что наши результаты подтверждают предположение о ЛФХ как об одном из компонентов ЭБМХР и указывают на то, что характер питания человека может влиять на интенсивность проявления М-холиномодулирующей активности крови.

. 5. Сократитсяьные эффекты адреналина (МгМог* г/мл) в опытах с циркулярными полосками фундуса желудка при селективной активации р-АР миоцнтов (на фоне блокады а-АР ннцерголнном, 19"* г/мл) и влияние на них сыворотки крови человека.. В литературе сгпиечено, что при активации р-АР адреналин снижает тонус мышц желудка (Александров А.Н., Овсянников В.И., 1993). Поэтому, учитывая, что гладкие мышцы желудка имеют низкий базальный тонус, опыты проводили на полосках, тонус которых был повышен гиперкалиевым (60 мМ КС1) раствором Кребса (ГРК). Как и в опытах других авторов (Реьо1апи А„ Weinbeгg Лч 1986; 5сЬи1ге-Г>е)пеи К-, БЫпш 1987; ОЫа Т.. е1 а1-, 1991), в наших экспериментах при действии ГРК все полоски развивали относительно стойкое и обратимое повышение тонуса, величина которого варьировала от 6,64 мН до 10,01 мН (рис. 7, табл. 6).

еоммка лдр-8+обз-б

еоммха

Адр-7+Обз-б

Рис. 7. Механограммы циркулярных полосок фундуса желудка крысы, демонстрирующие действие адреналина (10", 10"*,10'7 и Ю г/ил, Адр-9.-6) в смеси с ницерголкном (Ю-4 г/мл, Ниц-б, панели А и Б) или обзиданом (10 г/мл, Обз-б, панель. В) на фоне пшеркалиевого раствора Кребса (60 мМ КС1). Калибровки —10 мИ, 10 мин.

Табл. 6. Величина тонуса циркулярных полосок фундуса желудка при действии гиперкалиевого (60 мМ КС1) раствора Кребса (ГРК), в мН, и адреналина

Этапы эксперимента Конце етраиия ал) кналива, г/ил

10"(п-7> ЮЧп-9) 10'(п-9> Win-«

1-й ГРК 6,64±0,7Э 8,49±1,1б 10,01^0,78

2-й ГРК -1- адреналин + ницерголин 122,10*10,51' 108,30*6^1 82,0*2,7»' 43,67*6,4 i'

Примечание: * - различие с 1-м этапом достоверно (р<0.05) по критерию Стьюдента.

В этих условиях и при блокаде а-АР ннцерголином (10*4 г/мл), т.е. при активации интактных ß-AP адреналин в концентрации 10"® г/мл (рис. 7А; табл. б) повышал тонус полосок (до 122,10% от первоначального). Подобное явление описано и другими авторами (Grassby P., Broadly К, 1984; Гройсман СД., Красильников К.В, 1986; Kostka Р. et а!., 1989), которые объясняли его активацией р-АР, локализованных на холннергических интернейронах энтеральной нервной системы, что с нашей точки зрения, могло иметь место и в наших опытах. В концентрации 10"® г/мл адреналин не влиял на тонус полосок (рис. 7А,К, табл. б), а в концентрациях 10'1 и 10"* г/мл - доэозавнснмо снижал его (соответственно до 82,0% и 43,67% от первоначального). Ранее подобный эффект наблюдали и другие исследователи (Медведев М.А., 197S; Golenhofen К., Wegner Н., 1975; Fandriks L, Jons on С, 1987), которые объясняли его активацией ß-AP миощпов желудка. Очевидно, что такая трактовка приемлема и в отношении наших результатов.

Показано, что релаксирующнй эффект адреналина (10"4 г/мл) в присутствии ницерголина (М-® г/мл) частично блокируется 100- и 50-кратными разведениями сыворотки пуповинной крови новорожденных: если исходно адреналин снижал КС1-вызванный тонус циркулярных полосок фундуса желудка до 61,73±2,66%* от первоначальной величины (п»11, рис. 8Б), то на фоне этих разведений сыворотки крови адреналин снижал тонус соответственно лишь до 80,0±4,67% и 81,88±6,11% от первоначального (рис. 8А). Это означает, что. выявленная ранее на полосках миомегрня крысы р-адреноблокнрующая активность сыворотки крови (Циркин В .И., Дворянский СЛ., '1997; Сазонова МЛ, 2002; Сизова Е.Н., Циркин В.И., 2006) проявляется и в отношении гладких мышц желудка крысы. Наиболее вероятно, что такая активность сыворотки обусловлена наличием в ней ЭББАР. А.

1И00 А^Ф^ЖИМ ка-ммп. сыв1ЛО д^ЗЩ^Г

ка-бомш

Адр-6+Нвщ-б

Рис.8.Мехаиогрвымы циркулярных полосок фундуса желуяка крысы, демонстрирующие р-адреноблокнрующую активность 100- и 50-кратных разведений сыворотки пуповннной крова (сыв 1:100, 1:50) на фоне гклерюлневого раствора Кребса (KCI - 60 мМ). Адр-6 + Ниц-6 - адреналин (Ю г/мл) + ютаерголин (10"6 г/ил). Калибровка —10 мН, 10 мин.

В другой серии опытов, проведенной с циркульными полосками фундуса желудка, было установлено (рис 9, табл. 7), что базальный тонус полосок дозоэависимо возрастает под влияние» 1000-, 500-, 100- и 50-кратных разведений сыворотки кроен человека (пациенты с КЗЗ) - соответственно до 1,51 мН, 1,73 мН, 2,30 мН и 2,30 мН. Мы объясняем этот эффект наличием в крови фактора, увеличивающего тонус миоцитов желудка. Ранее Cirstea M (1973) обнаружил в СЫВОрОТКе КРОВИ фаКТОр, ПОВЫШаЮЩИЙ ТОНУС ГПаДКИХ ММ1Щ подвздошной кишки морской свинки, а в нашей лаборатории была выявлена способность 500-, 100- 50-кратных разведений сыворотки крови человека повышать исходный тонус и фазную СА продольных полосок рога матки небеременных крыс, что объяснялось наличием в крови ЭАСМ, т.е. эндогенного активатора сократимости миоцитов (Братухина C.B., 1997; Циркин В .И., Дворянский СЛ., 1997; Сизова БЛЧ 1998,2005; Туманова Т.В., 1998; Морозова MA, 2000; Мальчнкова СЛ. и соавт., 2003; Сизова Е.Н., Циркин В .И., 2006). Наши данные указывают на то, что ЭАСМ может оказывать миоцитстимулирующую активность и на гладкие мышцы желудка крысы. На поносках миомегрия крысы (совместно с ЕЛ. Сизовой) нам удалось показэть(Сизова Б Л., Циркин В .И., 2006), что ЭАСМ-активность сыворотки крови снижается под влиянием б локатора кальциевых каналов дилтиазема (10 rfoin). Это указывает на то, что ЭАСМ повышает вход Са2+ в клетки. С учетом данных литературы о способности и но зитолтри фосфата активировать кальциевые каналы миоцитов (Авакян А.Э., Ткачу к В .А., 2003; Мушкамбаров Н.Н^ Кузнецов CJl.t 2003), мы не исключаем, что этот вторичный посредник и является одиим из компонентов ЭАСМ.

В этой же серии опытов нами показано, что на фоне тонуса, вызванного 1000-, 500-, 100- и 50-кратными разведениями сыворотки крови пациентов с КЗЗ, адреналин (10"* г/мл) в присутствие ницерголина (10* г/мл) снижает- этот тонус соответственно до 47,17%, 23 ¿7%, 55,50% и 55,70%.(рис 9, табл. 7). Следовательно, активация (3-АР приводит к снижению тонуса, вызванного не только ГРК, но и сывороткой крови. Важно отметить, что на фоне низких разведений сыворотки крови (1:50 и 1:100) релаксируюзднй эффект адреналина был достоверно (р<0,05, по критерию Тькжи) меньше (тонус снижался до 55,5-55,7% от исходного уровня), чем на фоне разведения 1:500 (23,27%). Выявленная особенность, с нашей точки зрения, объясняется способностью сыворотки крови (за счет наличия в ней ЭББАР) проявлять Р-адреноблокнрующую активность. Мы также не исключаем, что более выраженный релаксирующий эффект разведения 1:500 обусловлен наличием в крови ЭСБАР.

В целом, результаты работы демонстрируют способность адреналина за счет активации {3-АР релаксироватъ гладкие мышцы желудка, но эта способность существенно снижается за счет наличия в крови ЭББАР.

Адр^+Ннц-б ~ Адр^+Ннд-6

Рис. 9. Мехаяограмма циркулярных полосок фундуса желудка крысы, демонстрирующая миоцитстимулнрующую и р-адреноблокнрующую активность сыворотки крови (больных КЗЗ) в разведениях 1:100 и 1:50 (сыв 1:100,1:50). Адр-6 +Ннц-6 - адреналин (10*6 г/мл) + ницерголнн (10"® г/мл). Калибровка—2 мН, 10 мин.

Табл. 7. Величина тонуса циркулярных полосок фундуса желудка при действии сыворотки крови пациентов КЗЗ, в мН, и адреналина (10* г/мл) совместно

Этапы эксперимента Разведения сыворотки

1:1000(п-12) 1:500 (п-И) 1:100 (п-Ю) 1:50(я-10)

1-й Сыворотка 1,51*0,18 1,73*0.26 2,30*0,28 2,30*0,25

2-й Сыворотка + адреналин + ницерголнн 47,17*8,36* 23,27*7,90*® 55,50*8,54* 55,70*10,06*

различие с разведениями 1:100 и 1:50, достоверно (р<0,05) по критерию Тьюки.

6. Сократительные эффекты адреналина (Ю'МО"6 г/мл) в опытах с циркулярными и продольными полосками фундуса желудка при селективной активации а-АР (на фоне блокады fl-AF обзкданом, 10Г* г/мл) и влияние на них сыворотки крови человека. Так как в литературе сообщалось, что при активации а-АР катсхоламины вызывают релаксацию гладких мышц желудка (Baxter A. ct al., 1987; Fandriks L, Jonson С, 1987; Fulop К. et al, 2005), первоначально опыты проводили на полосках, тонус которых был повышен под влиянием ГРК. Как и в опытах, описанных в разделе 5, ГРК стойко и обратимо повышал тонус циркулярных (до 5,51-7,70 мН) н продольных (до 7,74-8,52 мН) полосок (рис. 7В; табл. 8). Вопреки ожиданию, адреналин ни в одной из исследуемых концентраций (Ю'МО-6 г/мл) не снижал тонус (табл. 8). Более того, в концентрации 10* г/мл он достоверно повышал его у циркулярных полосок (до 113,60 % от первоначального). Это означает, что миоциты всех слоев желудка (и, вероятно, всех его областей) помимо р-АР содержат

а-АР, активация которых приводит к росту CA полосок. Этот вывод подтвержден и в опытах с интактными циркулярными полосками фундуса желудка (рнсЛОА, заключительный фрагмент) - адреналин (№"* г/мл) совместно с обзиданом (10"6 г/мл) повышал их базальный тонус до 2,01 ±0,22 мН (п=10). Ранее подобное явление отметили Mandrek К., Kreis S. (1992).

Табл. 8. Величина тонуса циркулярных и продольных полосок фундуса желудка при действии гнперкалиевого (60 мМ КС1) раствора Кребса (ГРК), в мН, и адреналина (10"* г/мл, Адр.) совместно собзиданом (10"* г/мл, Обз), в % к 1-му этапу

Этапы эксперимента Концентрация адреналина, г/мл

10" I 1<Г I 1СР

Ц« [ркулярные полоски Ф1 индуса желудка

1-й ГРК п М±т л M±m n M±m

5,51 ±1,03 & 7,59±С,91 7 7,70±0,95

2-й ГРК +■ Адр + Обз 7 107,0*9,16 109,30*6,72 U3,60±4,39'

п зодольные полоски фундуса желудка

1-й ГРК п М±ш п M±m n M±m

5 7,74*1,29 i 8,52*2,03 5 7,93*1,96

2-Й ГРК + Адр + Обз 101,20*7,63 107,0*4,11 102,40*6,27

Примечание: * - различие с 1-м этапом достоверно (р<0,05) по критерию Стъюдеита.

Исследование влияния 1000-, 500-, 100- и 50-кратных разведений сыворотки крови человека на стимулирующий- эффект адреналина (10 г/мл) при наличии в среде обзидана (10"6 г/мл) было проведено на циркулярных полосках фундуса желудка в двух вариантах — на фоне ГРК-вызванного тонуса (пуповинная кровь) и на интактных полосках (венозная кровь пациентов с КЗЗ).

На фоне ГРК-вызванного тонуса (рис. 10Б, табл. 9), величина которого варьировала от 5,30 мН до 7,84 мН, 1000-, 500- и 50-крагные разведения сыворотки пуповинкой крови дополнительно повышали тонус (соответственно до 135,70%, 118,60% и 117,50% от первоначального).

Табл. 9. Величина тонуса циркулярных полосок фундуса желудка при действии гиперкалиевого (60 мМ КС!) раствора Кребса (ГРК), в мН, сыворотки пуповинной крови и адреналина (Ю-6 г/мл) совместно с обзиданом (10"* г/мл), в % к

Этапы эксперимента Разведения сыворотки крови

1:1000 (п=б) 1:500 («1=9) 1:100 (п-8) 1:50 (п-13)

1-й ГРК 5,30*0,59 7,84*0,77 7,04*0,93 7,04*0,95

2-й ГРК + сыворотка 135,70±9,52* 118,60*3,57* 103,90*6,19 117,50*3,99*

3-й ГРК + сыворотка + Адрсиалии-к обзкдан 127,0*8,04* 113,80*6,64* 102,10*6,89 111,80*4,57

Примечание: * • различие с 1-м этапом достоверно (р<0,05) по критерию Тьюки.

И хотя 100-кратное разведение не изменяло тонус полосок (103,90%), эти данные подтверждают наличие в крови ЭАСМ и впервые демонстрируют его способность повышать СА миоцитов даже в условиях нх деполяризации, вызванной

ГРК. В этих опытах было также показано (рис. 10Б, табл. 9), что дополнительное введение на фоне ГРК и сыворотки крови адреналина (10"6 г/мл) совместно с обзиданом <10"* г/мл) не меняло достоверно тонус полосок. Это означает, что содержащиеся, согласно данным нашей лаборатории (Сазонова МЛ., 2003; Кашин Р.Ю. и др., 2006), в сыворотке крови человека эндогенные модуляторы а-адренореактнвности (ЭСААР, ЭБААР), не способны в этих условиях проявить характерную для них активность.

В опытах на интакткых циркулярных полосках фундуса желудка показано (рис. ЮА; табл. 10), что 1000-, 500-, 100- и 50- кратные разведения сыворотки крови пациентов с КЗЗ повышают базальный тонус полосок (соответственно до 0,79 мН, 1,42 мН, 1,59 мН и 2,01 мН), что также доказывает наличие ЭАСМ в сыворотке крови. Адреналин (Ю46 г/мл) совместно с обзиданом (10"® г/мл) в отсутствие сыворотки крови повышал тонус полосок до 2,01мН, а при наличии 1000-кратного разведения сыворотки — лишь до 1,89 мН, что составляет 108,9% от этой величины; при наличии 500-, 100- и 50-кратного разведений сыворотки адреналин повышал тонус соответственно до 2,54 мН, 2,63 мН и 3,48 мН или до 126,40%, 122,10% И 179,90% от этой величины (различие с контролем было достоверно лишь в опытах с разведением 1:50). Если бы сыворотка крови не содержала ЭБААР, то во всех случаях тонус, вызываемый адреналином на фоне сыворотки, был бы не меньше аддитивной величины, т.е. суммы тонуса, вызываемого сывороткой, и тонуса, вызываемого адреналином (соответственно 2,80 мН, 3,43 мН, 3,60 мН и 4,02 мН). Однако реально он оказался меньше (в среднем, на 0,90 мН), особенно при действии адреналина на фоне разведений 1:1000, 1:500 и 1:100. Косвенно, эти данные свидетельствуют о наличии в сыворотке крови ЭБААР, который может снижать а-стимулирующий эффект адреналина. В целом же, полагаем, что вопрос о влиянии ЭБААР и ЭСААР на а-адренореакгнвноегь гладких мышц желудка требует дальнейших исследований.

Табл. 10. Величина тонуса циркулярных полосок фундуса желудка при действии сыворотки крови пациентов с КЗЗ, в мН, а также сыворотки крови совместно с адреналином (Ю-6 г/мл) и обзиданом (10*6 г/мл), в мН и в % к тонусу, вызванному адреналином (10*4 г/мл) совместно с обзиданом (Ю-6 г/мл) в отсутствие сыворотки

Этапы эксперимента Разведения сыворотки

1:1000 (п=8) 1:500 (п=10) 1:100 (п=8) 1:50 (п=9)

141 Сыворотка крови мН 0,79*0,27 1,42*0,21 1,59*0,24 2,01*0,40

2-Й Сыворотка + адреналин + обзчлзи мН 1,89*0,32* 2.54*0,45' 2,63*0,31" 3,48±0,6f

% 108,90*18,01 126,40*15.95 122,10*11,82 179,90*23,66''

Примечание: * • различие с 1-м этапом достоверно (р<0,05) по критерию Тьюки. различие с разведениями 1:100 и 1:50 достоверно (р<0,05) по критерию Тьюки.

Наши .данные о стимулирующем влиянии а-адренергических воздействий позволяет предположить, что в условиях организма характер и эффективность аоренергических влияний на сократительную деятельность желудка будет зависеть от соотношения популяций а-АР и р-АР, a также от наличия эндогенных и экзогенных модуляторов адренореактивности. Например, адренергическне воздействия могут повышать СА желудка у больных, принимающих (3-адреноблокаторы, и существенно снижаггь СА желудка у беременных женщин, так как у них, согласно данным нашей лаборатории (Братухина C.B., 1997; Сизова Е.Н.,

Циркин В.И., 2006), повышено содержание ЭСБАР, за счет которого возрастает эффективность активации р-АР.

АяННХМ

60мМКС1"швТ5О*

во мм ко :

_ СЫВ 1.100 ддр.4+06^ - СЫв1^и Алр-<гЮвэ-6

Рис. 10. Механограымы циркулярных полосок фундуса желудка крысы, демонстрирующие мноцитстнмулирующую активность сыворотки крови (больных КЗЗ) в разведениях 1:10% 1:300, 1:100 и 1:50 на интактных полосках (панель А) и сыворотки пуповиниой крови на фоне ГРК (60 мМ КС1; панель Б). Калибровки - 3 мН, 10 мин (панель А), 10 мН, 10 мин (панель Б).

Наши данные, дополняя гипотезу о наличии в крови системы эндогенных модуляторов хемореактквности и демонстрируя их способность (в частности ЭБМХР, ЭСМХР, ЭББАР и ЭСААР), а также ЭАСМ и ЛФХ участвовать в регуляции моторной функции желудка, свидетельству ют о перспективности дальнейшего изучения роли эндогенных модуляторов М-холино, а- и р-адренореакти вности в условиях нормы и патологии, их природы, а также поиска их аналогов среди используемых в медицине лекарственных средств.

Выводы.

¡.Продольные и циркулярные гладкомышечные полоски из фундуса, корпуса и антрума желудка крысы имеют низкий базальный тонус, на фоне которого генерируются низкоамплитудные фазные сокращения. Ацегклхолин (АХ, ¡0'* - 10'* г/мл) дозозависимо повышает их тонус. Чувствительность гладких мышц к АХ зависит от их локализации (она самая высокая у мышц из корпуса и самая низкая - у мышц нз антрума), но не зависит от их пространственной ориентации.

2.Сократнмость гладкомышечных полосок желудка крысы, судя по тонотропным эффектам АХ (10'5 г/мл), гиперкалиевого (60 мМ КС!) раствора Кребса и сыворотки крови человека (1:50), не зависит от места их иссечения и пространственной ориентации.

3.Сыворотка пу повинной крови новорожденных проявляет М-холинеблокирующую активность в опытах с продольными и циркуля рными полосками всех регионов желудка крысы, что объясняется наличием в ней ЭБМХР. Чувствительность полосок к ЭБМХР зависит от места иссечения - она максимальна у продольных и циркулярных полосок фундуса (ЭБМХР-активность проявляют разведения 1:1000, 1:500, 1:100 и 1:50) и минимальна - у циркулярных полосок корпуса и антрума (1:100,1:50).

4.Сыворотка крови здоровых людей (1:1000, 1:500, 1:100 и 1:50) обладает такой же ЭБМХР-активностью в отношении гладких мышц желудка крысы (циркулярные полоски фундуса), как и в отношении гладких мышц рога метки крысы (продольные полоски). Сыворотка крови пациентов с кислогозависнмыми заболеваниями (КЗЗ) пищеварительного тракта проявляет, подобную активность на этих тест-объектах, но лишь в разведениях 1:100 н 1:50. После 21-дневного курса лечения питьевыми минеральными водами «Нижнеивкннская-2К» ЭБМХР-активность сыворотки становится такой же, как у здоровых. Все это указывает на то, что снижение содержания ЭБМХР может быть одной из причин формирования КЗЗ, так как в этих условиях возрастает влияние вагуса на деятельность желудка.

5 Лизофосфагидилхолин (ЛФХ) в концентрациях 10"* и 10"' г/мл не влияет на сократительный эффект АХ (Ю-6 г/мл) в отношении гладких мышц желудка крысы, в концентрации 10"6 ЛФХ повышает его, т.е. проявляет ЭСМХР-активность, а в концентрациях 10**-10"* г/мл снижает его, т.е. проявляет ЭБМХР-активность. Фосфатидилхолин (10~7 - 10й г/мл) как предшественник ЛФХ проявляет лишь ЭСМХР-активность (в концентрации 10"* г/мл), а куриный яичный желток как источник неферментативного образования ЛФХ проявляет лишь ЭБМХР-активность (1:500, 1:100 и 1:50). Все это указывает на то, что ЛФХ (в соответствующих концентрациях) может быть компонентом как ЭБМХР, так и ЭСМХР, и свидетельствует о способности продуктов питания влиять на М-холнномодулирующие свойства крови.

6.Селекхивная активация р-адренорецепторов (на фоне ннцергопкна, 10-* г/мл) адреналином в концентрациях 10 н 10~* г/мл снижает тонус полосок желудка, вызванный гиперкалиевым (60 мМ КС1) раствором Кребса, Сыворотка пуповиниой крови (1:100,1:50) уменьшает этот эффект, т.е. проявляет ЭББ АР-актявность.

7.Селективная активация а-АР (на фоне р-адреноблокатора обзидана, 10"4 г/мл) адреналином (Ю46 г/мл) повышает у полосок желудка их базальный тонус, а также тонус, вызванный 60 мМ КС1 или сывороткой крови (1:1000, 1:500, 1:100 и 1:50). Следовательно, катехоламнны могут не только ингибировать СА гладких мышц желудка, но и повышать ее, особенно в условиях блокады р-адренорецепторов. Этот эффект адреналина снижается под влиянием сыворотки крови человека (1:1000,1:500, и 1:100), что объясняется наличием в ней ЭБААР.

8.Сыворотаа крови человека (1:1000, 1:500, 1:100 и 1:50) проявляет миоцктстнмулирующую активность в опытах с гладкомышечнымн полосками желудка крысы, в том числе в условиях деполяризации. Этот эффект объясняется наличием в ней эндогенного активатора сократимости миоцитов (ЭАСМ).

9.ЭБМХР, ЭББАР, ЭБААР и другие эндогенные модуляторы хемореактмвиостн, а также ЭАСМ могут участвовать в регуляции сократительной активности гладких мышц желудка. Их недостаточное или избыточное содержание в крови может быть одной из причин дисфункции и/или патологии желудка.

Практические рекомендации

¡.Гипотезу о наличии в крови системы эндогенных модуляторов хемореакшвности рекомендуется использовать как методологическую основу исследований в области физиологии возбудимых тканей и висцеральных систем, при разработке вопросов физиологии и патологии моторной и секреторной функции желудка и создании новых диагностических, профилактических и лечебных технологий в гастроэнтерологии.

2.Рекомендуется учитывать представление о том, что ЛФХ, как вторичный посредник при передаче сигнала от клеточных рецепторов внутрь клетки, образование которого возрастает при активации ПОЛ, может быть компонентом эндогенных модуляторов М-холинореактивности.

3.В клинической практике целесообразно учитывать данные о возможности стимулирующего (за счет активации а-АР) влияния адренер гнческих воздействий на гладкие МЫШЦЫ желудка в условиях постоянного приема ß-адреноблокаторов или на фоне высокого уровня в крови ЭББАР.

4.Рекомендуётся использовать гладкие мышц желудка крысы в качестве тест-объекта при оценке содержания в биологических жидкостях эндогенных модуляторов (ЭБМХР, ЭББАР и ЭБААР) и ЭАСМ

Список основных работ по теме диссертации

1. Куншин А .А, Влияние сыворотки пуповинной крови человека на М-холинореактив ность гладких мышц фундального отдела желудка крысы // Тезисы докладов 19 съезда физиологического общества им. ИЛ. Павлова - Российский физиолог, журн. им. И.М. Сеченова, 2004.- Т.90, № 8,часть 2. — С. 15.

2. Куншин АЛ.., Циркин В.И. Влияние сыворотки пуповинной крови человека на М-холннореактивность гладких мышц корпуса и антрума желудка крысы // Физиология человека и животных: от эксперимента к клинической практике. Тезисы докладов IV молодежной научной конференции ИФ Коми НЦ Уро РАН.-Сыктывкар, 2005.- С. 33.

3. Куншин A.A., Циркин В Л. Влияние сыворотки пуповинной крови человека на М-холинореактивность гладких мышц антрального н фундального отделов желудка крысы // Вестник молодых ученых: Сборник материалов Всероссийской конференции молодых исследователей «Физиология и медицина»,— СПб, 2005.- С. 62.

4. Циркин ВЛ, Сизова E.H., Хлыбова C.B., Дворянский СЛ., Кононова Т.Н., Куншин A.A., Мальчикова C.B., Сазанова MJL, Сннгирева Н.Л., Трухин А.Н. Роль эндогенных модуляторов ß-здрено- и М-холиноре активности в регуляции деятельности возбудимых структур Я Научные труды I съезда физиологов СНГ- М.: Медицина - Здоровье, 2005.- Т. 2.- С.54-55.

5. Циркин В.И., Сизова Eil., Кононова Т.Н., Куншнн АЛ., Мальчикова CS., Снигирева HJL, Помаскина Т.В., Гуляева С.Ф., Тарловская Е.И. Содержание эндогенных модуляторов ацрено- и холинореактнвности в сыворотке крови при инфаркте миокарда, бронхиальной астме, артериальной гипертензии и хроническом гастрите // Успехи современного естествознания. - 2006,- Т. 33, № t.—С. 83-84.

6. Куншин АЛ., Кононова Т.Н., Циркин В.И. Куриный яичный желток снижает М-холинореакти вность гладких мышц желудка и матки // Парентеральное н энгеральное питание: Тезисы докладов IX международн. конгресса.-М.: 2005.- С 42.

7. Куншин АЛ., Кононова Т.Н., Циркин В.И., Дворянский СЛ., Гуляева СФ. Эндогенный блокатор М-холинорецепторов снижает М-холинореактивность гладких мышц желудка // Тезисы VI съезда научного общества гастроэнтерологов России - _М.: Анахарснс, 2006.- С. 13.

8. Гуляева С.Ф., Циркин В.И., Гуляев П.В., Помаскина ТВ., Куншин A.A., Червоткина ЛЛ. К механизму действия питьевых минеральных вод на моторику желудка у больных кисяотозавнсимыми заболеваниями // Там же,- С. 32.

9. Куншин АЛ., Проказова Н.В., Трухина С.И. Влияние фосфзгиднлхолина и лнзофосфатидилхолина на М-холинореактивность гладких мышц фундального

отдела желудка крысы // Физиология человека и животных: от эксперимента к клинической практике: Тезисы докладов V молодежной научной конференции ИФ Коми НЦ УрО РАН. - Сыктывкар, 2006. - С. 75-76.

10. Куншин A.A. Влияние сыворотки крови на альфа-адренореактивность гладких мышц фундального отдела желудка крысы // Человек и его здоровье: Тезисы 9-й Всероссийской медико-биологической конференции • молодая исследователей.- СПб: СПбГУ, 2006. - С. 170-171.

11.Куншин АЛ., Циркин В Л., Трухина С.И., Дворянский СЛ. Способность сыворотки пу повинной крови новорожденных детей снижать М-холннореактивность гладких мышц желудка // Здоровье ребенка - здоровье шиши: сборник научных работ. - Киров, КГМА, 2006. - С. 18-19.

Список сокращений:

а-АР - а-адренорецепторы Р-АР — р-адреиорецепторы

АХ - ацетилхолин

ГРК -гиперкалиевый раствор Кребса

ЖКТ - желудочно-кишечный тракт

КЗЗ — кислотозавнсимые заболевания

Л11ВГТ, ЛПНП - лнпопротсиды высокой, низкой плотности

ЛФХ - лизофосфатидилхолнн

М-ХР — М-холинорецепторы

ПМВ — питьевые минеральные воды

CA - сократительная активность

ФХ - фосфатидилхолии

ЭАСМ - эндогенный активатор сократимости миоцнтов ЭБ AAP—эндогенный блокатор а-адрено рецепторов ЭББАР—эндогенный блокатор ß-ацреиорецепторов ЭБМХР - эндогенный блокатор М-холинорецепторов ЭСААР — эндогенный сенсибилизатор а-адренорецепторов ЭСБ АР — эндогенный сенсибилизатор ß-адренорецепторов ЭСМХР - эндогенный сенсибилизатор М-холинорецепторов ЯЖ - личный желток

Отпечатано в типографии Кировской ГМА. г. Киров, ул. К. Маркса, 112. Тираж 100 экз. Заказ 358.

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Куншин, Алексей Александрович

Введение.

Глава 1. Физиологические свойства гладких мышц желудка и эндогенные модуляторы хемореактивности (обзор литературы).

1.1. Морфологические особенности гладких мышц желудка человека и экспериментальных животных.

1.2. Электрическая активность гладких мышц желудка человека и экспериментальных животных.

1.3. Сократительная деятельность желудка человека и экспериментальных животных.

1.4. Влияние вегетативной нервной системы на сократительную активность гладких мышц желудка.

1.5. Влияние различных факторов на сократительную активность гладких мышц желудка.'.

1.6. Эндогенные модуляторы хемореактивности.

Глава 2. Объекты и методы исследования.

Глава 3. Результаты исследований.

3.1. Влияние ацетилхолина на сократительную активность гладкомышечных полосок различных регионов желудка крысы.

3.2 Влияние сыворотки пуповинной крови новорожденных на тонотропный эффект ацетилхолина (10"6 г/мл).

3.3. Влияние сыворотки крови здоровых людей и пациентов с КЗЗ на сократительный эффект АХ в опытах с циркулярными полосками фундуса желудка и продольными полосками рога матки небеременных крыс.

3.4. Исследование природы ЭБМХР. Влияния лизофосфатидилхолина (ЛФХ), фосфатидилхолина (ФХ) и куриного яичного желтка (ЯЖ) на сократительные эффекты АХ в опытах с циркулярными полосками фундуса желудка крысы.

3.5. Сократительные эффекты адреналина (10"9-10'6 г/мл) в опытах с циркулярными полосками фундуса желудка при селективной активации а- и

Р-адренорецепторов миоцитов и влияние на них сыворотки крови человека.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Влияние сыворотки крови человека на M-холино- и α-, β-адренореактивность гладких мышц желудка крысы"

Актуальность исследования. Работы последних лет, выполненные, главным образом, на гладкомышечных полосках рога матки крысы (Братухина C.B., 1997; Циркин В.И, Дворянский С.А., 1997; Осокина A.A., 1998; Сизова E.H., 1998; Туманова Т.В., 1998; Гусева Е.В., 1999; Морозова М.А., 2000; Мальчикова C.B., 2002; Сазанова М.Л., 2002; Трухин А.Н., 2003; Кононова Т.Н., 2004; Снигирева H.JI. и соавт, 2004; Сизова E.H., Циркин В.И., 2006), а также коронарных артерий свиньи (Сизова E.H., 1998, 2005), артерий и вены пуповины человека (Сазанова МЛ., 2002), почечной артерии коровы (Снигирева H.JI. и соавт., 2004, Кашин Р.Ю. и соавт., 2006), трахеи коровы (Сизова E.H., 1998; Кононова Т.Н., 2004) и на изолированном сердце лягушки (Трухин А.Н., 2003; Пенкина Ю.А. и соавт., 2006), свидетельствуют о наличии в крови и других жидких средах организма человека системы эндогенных модуляторов хемореактивности прямого действия, в том числе повышающих эффективность активации соответствующих клеточных рецепторов, т.е. эндогенных сенсибилизаторов и снижающих ее, т.е. эндогенных блокаторов. Получены доказательства существования эндогенных сенсибилизаторов ß- и а-адренорецепторов (ЭСБАР, ЭСААР), М-холинорецепторов (ЭСМХР) и гистаминовых рецепторов (ЭСГР), а также эндогенных блокаторов ß-AP (ЭББАР), а-АР (ЭБААР) и М-ХР (ЭБМХР). В частности, установлено, что 10-, 50-, 100- и 500-кратные разведения сыворотки крови человека способны обратимо и дозозависимо снижать сократительную реакцию на ацетилхолин (АХ) миометрия крысы (Циркин В.И. Дворянский С.А., 1997; Осокина A.A., 1998; Сизова E.H. и соавт., 2003, 2004; Кононова Т.Н., 2004; Сизова E.H., Циркин В.И., 2006) и сердца лягушки (Трухин А.Н., 2003; Сизова E.H., Циркин В.И., 2006). Ранее подобный эффект был выявлен в опытах с изолированным сердцем лягушки и кролика при воздействии сыворотки крови лягушки, крысы и кролика (Zvezdina N. et al., 1978; Суслова И.В. и соавт., 1995; Проказова Н.В. и соавт., 1998), что также указывает на наличие в крови ЭБМХР.

Вопрос о физиологической роли ЭСБАР, ЭББАР, ЭБМХР и других модуляторов, их природе, участии в патогенезе заболеваний, а также об их клиническом применении остается открытым. Показано, что при инфаркте миокарда (Мальчикова C.B. и соавт., 2003), бронхиальной астме (Кононова Т.Н., 2004), гипертонической болезни (Снигирева H.JI. и соавт, 2004, 2005), слабости родовой деятельности (Братухина C.B., 1997) и угрозе преждевременных родов (Осокина A.A., 1998) содержание ЭСБАР, ЭББАР и ЭБМХР изменено. Установлено, что ЭСБАР-подобную активность проявляют гистидин, триптофан и тирозин, в связи с чем эти аминокислоты рассматриваются как компоненты ЭСБАР, а также триметазидин и милдронат (Циркин В.И., Дворянский С.А., 1997; Ноздрачев А.Д. и соавт, 1998; Туманова Т.В., 1998; Сизова E.H., Циркин В.И., 2006). Предполагается, что компонентом ЭБМХР является лизофосфатидилхолин, или ЛФХ (Мальчикова C.B. и соавт., 2003; Кононова Т.Н., 2004; Сизова E.H. и соавт., 2004).

Влияние эндогенных модуляторов хемореактивности на гладкие мышцы желудка не исследовалось, так же как и не изучался вопрос об их участии в патогенезе заболеваний ЖКТ, в том числе кислотозависимых заболеваний (КЗЗ), при которых, как известно (Ефименко Н.В., 2005; Маев И.В. и соавт., 2000; Филимонов P.M., 1990, 2005), снижена моторная функция желудка. Поэтому мы считали возможным провести изучение этих вопросов, используя в качестве тест-объекта гладкие мышцы крысы, свойства которых описаны в литературе (Богач П.Г. и соавт., 1971;Медведев М.А., 1975; Boev К. et al., 1976; Petroianu A., Weinberg J., 1986; Ohta T. et al., 1991). Однако анализ этих работ показал, что ряд вопросов физиологии гладких мышц желудка крысы, важных в методическом отношении для исследования эндогенных модуляторов хемореактивности, недостаточно изучены, в частности, вопрос о зависимости М-холинореактивности миоцитов желудка от их локализации в соответствующем слое и в регионе желудка (Богач П.Г. и соавт., 1971; Boev К. et al., 1976) и о характере сократительных эффектов катехоламинов (Golenhofen К., Wegner Н., 1975; Mandrek К., Kreis S., 1992; Fulop К. et al., 2005).

Цель исследования - изучить влияние сыворотки крови человека (как источника эндогенных модуляторов хемореактивности) на М-холино- и а- и ß-адренореактивность гладких мышц различных отделов желудка крысы и оценить способность лизофосфатидилхолина изменять их М-холинореактивность.

Задачи исследования.

8 5

1. Изучить влияние ацетилхолина (АХ, Ю-*-10" г/мл) на сократительную активность (CA) продольно и циркулярно иссеченных гладкомышечных полосок фундуса, корпуса и антрума желудка крысы и способность 1000-, 500-, 100- и 50-кратных разведений сыворотки пуповинной крови человека изменять сократительные ответы полосок на АХ (10'6 г/мл).

2. Оценить способность 1000-, 500-, 100- и 50-кратных разведений сыворотки крови здоровых людей и пациентов с кислотозависимыми заболеваниями (КЗЗ) желудочно-кишечного тракта изменять сократительные ответы циркулярных полосок фундуса Желудка крысы и продольных полосок рога матки небеременных крыс на АХ (10"6 г/мл).

О J

3. Исследовать способность лизофосфатидилхолина (ЛФХ, 10" - 10" г/мл), фосфатидилхолина (10"7-10"4 г/мл) и 1000-, 500-, 100- и 50-кратных разведений водного раствора куриного яичного желтка (как источника ЛФХ) изменять сократительные ответы циркулярных полосок фундуса желудка крысы на АХ (10"6 г/мл).

4. Изучить сократительные ответы полосок фундуса желудка крысы при селективной активации адреналином (10'9- 10'6 г/мл) ß-адренорецепторов (на фоне блокады а-АР ницерголином, 10"6 г/мл) или а-адренорецепторов (на фоне блокады ß-AP обзиданом, 10"6 г/мл) и влияние на них сыворотки крови человека.

Новизна исследования. Впервые показано, что чувствительность гладких мышц желудка крысы к АХ зависит от их локализации (она самая высокая у гладкомышечных полосок корпуса и самая низкая - у полосок антрума), но не зависит от пространственной ориентации гладкомышечных пучков

Впервые установлено, что сыворотка пуповинной крови новорожденных за счет наличия в ней ЭБМХР проявляет М-холиноблокирующую активность в опытах с гладкими мышцами желудка. Чувствительность полосок желудка к ЭБМХР зависит от их локализации -она максимальна у продольных и циркулярных полосок фундуса и минимальна - у циркулярных полосок корпуса и антрума.

Впервые отмечено, что сыворотка крови здоровых людей (1:1000, 1:500, 1:100 и 1:50) обладает такой же ЭБМХР-активностью в отношении гладких мышц желудка крысы, как и в отношении гладких мышц матки крысы. Сыворотка крови пациентов с КЗЗ ЖКТ проявляет подобную активность (в опытах на полосках желудка и матки крысы) только в разведениях 1:100 и 1:50, что указывает на 10-кратное снижение у них содержания в крови ЭБМХР. Впервые показано (совместно с Т.В. Помаскиной), что содержание ЭБМХР в сыворотке крови у больных КЗЗ после прохождения 21-дневного курса лечения ПМВ «Нижнеивкинская-2К» в условиях санатория возвращается к значениям, характерным для здоровых, что сопровождается улучшением состояния пациентов. Эти данные доказывают причастность ЭБМХР к развитию КЗЗ пищеварительного тракта.

Впервые установлено, что ЛФХ в концентрациях 10"8 и 10"7 г/мл не влияет на сократительный эффект АХ (10"6 г/мл) в отношении гладких мышц желудка крысы, в концентрации 10"6 ЛФХ повышает его, т.е. проявляет ЭСМХР-активность, а в концентрациях 10"5-10"4 г/мл снижает его, т.е. проявляет ЭБМХР-активность. Фосфатидилхолин как предшественник ЛФХ проявлет только ЭСМХР-активность (в концентрации 10'6 г/мл), а куриный яичный желток, как источник неферментативного образования ЛФХ, демонстрирует только ЭБМХР-активность (в разведениях 1:500, 1:100 и 1:50). Все это подтверждает предположение о ЛФХ как одном из компонентов ЭБМХР и указывает на то, что продукты питания могут влиять на М-холиномодулирующие свойства крови.

Впервые показано, что селективная активация Р-АР (на фоне

6 7 6 ницерголина, 10" г/мл) адреналином (10" и 10" г/мл) снижает тонус полосок желудка, вызванный гиперкалиевым (60 мМ КС1) раствором Кребса, а сыворотка пуповинной крови (1:100, 1:50) снижает этот эффект, т.е. проявляет ЭББАР-активность. Селективная активация а-АР (в присутствии адреноблокатора обзидана, 10" г/мл) адреналином (10"6 г/мл) повышает у полосок желудка базальный тонус и тонус, вызванный гиперкалиевым (60 мМ КС1) раствором Кребса или сывороткой крови человека (1:1000, 1:500, 1:100, 1:50). Следовательно, катехоламины могут не только ингибировать СА гладких мышц желудка, но и повышать ее, что может иметь место при высоком уровне ЭББАР в крови или при наличии в ней Р-адреноблокаторов как лекарственных препаратов.

Впервые показано, что сыворотка крови человека в разведениях 1:1000, 1:500, и 1:100 проявляет а-адреноблокирующий эффект, который объясняется наличием в крови ЭБААР.

Впервые установлено, что миоцитстимулирующая активность сыворотки крови человека (1:1000, 1:500, 1:100 и 1:50), обусловленная наличием в ней эндогенного активатора сократимости миоцитов (ЭАСМ), проявляется на гладких мышцах желудка крысы.

Таким образом, впервые показано, что эндогенные модуляторы хемореактивности, в частности, эндогенные блокаторы (ЭБМХР, ЭББАР и ЭБААР), а также ЭАСМ могут участвовать в регуляции моторной функции желудка. Недостаточное или избыточное содержание этих факторов может быть причиной дисфункции и/или патологии желудка.

Научная и практическая значимость работы. Результаты исследования расширяют представление об эндогенных модуляторах хемореактивности прямого действия, в частности о возможном участии в регуляции моторики желудка ЭБМХР, ЭББАР и ЭБААР и их роли в развитии патологии желудка, что может учитываться при создании новых диагностических, профилактических и лечебных технологий в гастроэнтерологии. Они углубляют знание о ЛФХ как вторичном посреднике, в частности, об его участии в модуляции М-холинореактивности, а также о роли а- и р-адренергических механизмов в регуляции моторной функции желудка. Результаты работы важны в методическом отношении, так как демонстрируют возможность использования гладких мышц желудка крысы в качестве тест-объекта при оценке содержания в биологических жидкостях ЭБМХР, ЭСМХР и ЭАСМ. Результаты исследования могут представлять интерес для физиологии, фармакологии, внутренних болезней и гастроэнтерологии как учебных дисциплин.

Положения, выносимые на защиту.

1. Сыворотка крови человека проявляет М-холиноблокирующую, а- и Р-адреноблокирующую и миоцитстимулирующую активность в отношении гладких мышц желудка крысы. Это означает, что содержащиеся в крови человека эндогенные блокаторы М-холинорецепторов (ЭБМХР) и а- и адренорецепторов (ЭББАР, ЭБААР), а также эндогенный активатор сократимости миоцитов (ЭАСМ) могут участвовать в регуляции сократительной деятельности желудка.

2. ЭБМХР-активность сыворотки крови человека может снижаться при патологии (в частности, при кислотозависимых заболеваниях пищеварительного тракта), что указывает на возможность участия ЭБМХР в развитии патологического процесса.

3. Лизофосфатидилхолин (ЛФХ) в высоких концентрациях (10'5-10"4 г/мл) проявляет ЭБМХР-активность, что позволяет рассматривать его как компонент ЭБМХР. В низких концентрациях ЛФХ (10"6 г/мл), как и фосфатидилхолин (10"6 г/мл), повышает эффективность взаимодействия ацетилхолина с М-холинорецепторами (ХР), т.е. проявляет свойства эндогенного сенсибилизатора М-ХР (ЭСМХР).

4. Адреналин за счет активации а-адренорецепторов гладких мышц желудка может повышать их сократительную деятельность, особенно в условиях блокады Р- адренорецепторов.

Внедрение. Результаты исследования используются в учебной и научной деятельности кафедры нормальной физиологии, кафедры поликлинической терапии с курсом физиотерапии и курортологии Кировской государственной медицинской академии, кафедры анатомии, физиологии человека и валеологии Вятского - государственного гуманитарного университета и кафедры медико-биологических дисциплин Вятского социально-экономического института.

Апробация работы. Результаты работы были представлены в материалах 19 съезда физиологического общества им. И.П. Павлова (Екатеринбург, 2004), I съезда физиологов СНГ «Физиология и здоровье человека» (Сочи, 2005), IX международного конгресса «Парентеральное и энтеральное питание» (Москва, 2005), научной юбилейной конференции Российской Академии Естествознания (Москва, 2005), IV и V молодежных научных конференций «Физиология человека и животных: от эксперимента к клинической практике» (Сыктывкар 2005, 2006), 9-й Всероссийской медико-биологической конференции молодых исследователей (С-Петербург, 2006), а также доложены на всероссийской конференции молодых исследователей «Физиология и медицина» (С-Петербург, 2005), на VI съезде научного общества гастроэнтерологов России (Москва, 2006) и на заседании Кировского отделения Физиологического общества им. И.П. Павлова (Киров, 2006).

По материалам диссертации опубликовано 11 работ.

Заключение Диссертация по теме "Физиология", Куншин, Алексей Александрович

Выводы

1.Продольные и циркулярные гладкомышечные полоски из фундуса, корпуса и антрума желудка крысы имеют низкий базальный тонус, на фоне которого генерируются низкоамплитудные фазные сокращения. ь о *

Ацетилхолин (АХ, 10"-10* г/мл) дозозависимо повышает их тонус.

Чувствительность гладких мышц к АХ зависит от их локализации (она самая высокая у мышц из корпуса и самая низкая - у мышц из антрума), но не зависит от их пространственной ориентации.

2.Сократимость гладкомышечных полосок желудка крысы, судя по тонотропным эффектам АХ (10*5 г/мл), гиперкалиевого (60 мМ КС1) раствора Кребса и сыворотки крови человека (1:50), не зависит от места их иссечения и пространственной ориентации.

3.Сыворотка пуповинной крови новорожденных проявляет М-холиноблокирующую активность в опытах с продольными и циркулярными полосками всех регионов желудка крысы, что объясняется наличием в ней I

ЭБМХР. Чувствительность полосок к ЭБМХР зависит от места иссечения -она максимальна у продольных и циркулярных полосок фундуса (ЭБМХР-активность проявляют разведения 1:1000, 1:500, 1:100 и 1:50) и минимальна -у циркулярных полосок корпуса и антрума (1:100, 1:50).

4.Сыворотка крови здоровых людей (1:1000, 1:500, 1:100 и 1:50) обладает такой же ЭБМХР-активностью в отношении гладких мышц желудка крысы (циркулярные полоски фундуса), как и в отношении гладких мышц рога матки крысы (продольные полоски). Сыворотка крови пациентов с кислотозависимыми заболеваниями (КЗЗ) пищеварительного тракта проявляет подобную активность на этих тест-объектах, но лишь в разведениях 1:100 и 1:50. После 21-дневного курса лечения питьевыми минеральными водами «Нижнеивкинская-2К» ЭБМХР-активность сыворотки становится такой же, как у здоровых людей. Все это указывает на то, что снижение содержания ЭБМХР может быть одной из причин формирования

КЗЗ, так как в этих условиях возрастает влияние вагуса на деятельность желудка. о п

5.Лизофосфатидилхолин (ЛФХ) в концентрациях 10" и 10" г/мл не влияет на сократительный эффект АХ (10"6 г/мл) в отношении гладких мышц желудка крысы, в концентрации 10"6 ЛФХ повышает его, т.е. проявляет ЭСМХР-активность, а в концентрациях 10"5-10'4 г/мл снижает его, т.е.

7 4 проявляет ЭБМХР-активность. Фосфатидилхолин (10"-10" г/мл), как предшественник ЛФХ, проявляет лишь ЭСМХР-активность в концентрации 10"6 г/мл. Куриный яичный желток, как источник неферментативного образования ЛФХ, проявляет лишь ЭБМХР-активность (1:500, 1:100 и 1: 50). Все это указывает на то, что ЛФХ (в соответствующих концентрациях) может быть компонентом как ЭБМХР, так и ЭСМХР, и свидетельствует о способности продуктов питания влиять на М-холиномодулирующие свойства крови.

6.Селективная активация Р-адренорецепторов (на фоне ницерголина, 1 (\ 10 г/мл) адреналином в концентрациях 10" и 10* г/мл снижает тонус полосок желудка, вызванный гиперкалиевым (60 мМ КС1) раствором Кребса.

Сыворотка пуповинной крови (1:100, 1:50) уменьшает этот эффект, т.е. проявляет ЭББАР-активность.

7.Селективная активация а-АР (на фоне Р-адреноблокатора обзидана, 10"6 г/мл) адреналином (10"6 г/мл) повышает у полосок желудка их базальный тонус, а также тонус, вызванный 60 мМ КС1 или сывороткой крови (1:1000, 1:500, 1:100 и 1:50). Следовательно, катехоламины могут не только ингибировать СА гладких мышц желудка, но и повышать ее, особенно в условиях блокады Р- адренорецепторов. Этот эффект адреналина снижается под влиянием сыворотки крови человека (1:1000, 1:500, и 1:100), что объясняется наличием в ней ЭБААР.

8.Сыворотка крови человека (1:1000, 1:500, 1:100 и 1:50) проявляет миоцитстимулирующую активность в опытах с гладкомышечными полосками желудка крысы, в том числе в условиях деполяризации. Этот эффект объясняется наличием в ней эндогенного активатора сократимости миоцитов (ЭАСМ).

9.ЭБМХР, ЭББАР, ЭБААР и другие эндогенные модуляторы хемореактивности, а также ЭАСМ могут участвовать в регуляции

• сократительной активности гладких мышц желудка. Их недостаточное или избыточное содержание в крови может быть одной из причин дисфункции и/или патологии желудка.

Практические рекомендации

1.Гипотезу о наличии в крови системы эндогенных модуляторов хемореактивности рекомендуется использовать как методологическую основу исследований в области физиологии возбудимых тканей и висцеральных систем, при разработке вопросов физиологии и патологии моторной и секреторной функции желудка и создании новых диагностических, профилактических и лечебных технологий в I гастроэнтерологии.

• З.В клинической практике целесообразно учитывать данные о возможности стимулирующего (за счет активации а-АР) влияния адренергических воздействий на гладкие мышцы желудка в условиях постоянного приема Р-адреноблокаторов или на фоне высокого уровня в крови ЭББАР.

§ 4.Рекомендуется использовать гладкие мышц желудка крысы в качестве тест-объекта при оценке содержания в биологических жидкостях эндогенных модуляторов (ЭБМХР, ЭББАР и ЭБААР) и ЭАСМ.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Куншин, Алексей Александрович, Киров

1. Авакян А.Э., Ткачук В.А. Структурная и функциональная организация систем передачи сигнала через рецепторы, сопряженные с G-белками // Рос. физиол. жури. 2003.- Т.89, №2,- С. 219-239.

2. Авдонин П.В., Ткачук В.А. Рецепторы и внутриклеточный кальций,- М.: Наука, 1994. С. 29-42.

3. Агаджанян H.A., Тель Л.З., Циркин В.И., Чеснокова С.А. Физиология человека,- М.: Медицинская книга. 2001. - 527 с.

4. Александров А.Н., Овсянников В.И. Эффект стимуляции альфа-адренорецепторов и блокады миоэлектрической активности тонкой кишки и пилорического сфинктера // Физиол. журн. СССР им. И.М. Сеченова 1990.Т. 76, № 12.-С. 1691-1700.

5. Александров А.Н., Овсянников В.И. О возбуждающих эффектах стимуляции пресинаптических ß-адренорецепторов подвздошной кишки у наркотизированных кроликов // Бюлл. эксп. биол. и медиц. 1993. - № 10. - С. 341-343.

6. Барашкова Г.М. Гастрин, холецистокинин-панкреозимин, секретин и взаимодействие моторной функции желудка, двенадцатиперстной кишки и желчевыделительного аппарата // Физиол. журн. СССР им. И.М.Сеченова. -1975,-Т. 61, №5,-С. 763-773.

7. Белова Л.А., Оглоблина О.Г., Белов A.A., Кухарчук В.В. Процессы модификации липопротеинов, физиологическая и патогенетическая роль модифицированных протеинов // Вопросы медицинской химии. 2000,- Т. 46, № 1.-С. 8-22.

8. Богач П.Г., Каплуненко H.A., Чайченко Г.М., Миленов К.Т. Электрическая активность гладких мышц желудка и тонкой кишки // Физиологический журнал СССР им. И.М.Сеченова.- 1971,- Т. 57, №2.-С. 276-283.

9. Братухина C.B. Адренергический механизм при беременности и в родах, его роль в патогенезе слабости родовой деятельности / Автореф. дисс.канд. мед. наук,- М., 1997. 22 с.

10. Ванин А.Ф., N0 в биологии: история, состояние и перспективы исследований. //Биохимия,- 1998.- Т.63, вып. 7.- С. 867-869.

11. Войцицкий А.Н. Роль симпатической нервной системы в патогенезе пептических язв желудочно-кишечного соустья: автореф. дис. канд. мед. наук. С.-Пб, 1997 - 19 с.

12. Волин М.С., Дэвидсон К.А., Камински П.М., Фейнгерш Р.П., Мохаззаб-Х K.M. Механизмы передачи сигнала оксидант-оксид азота в сосудистой ткани // Биохимия. 1998.- Т. 63, вып.7,- С. 958-965.

13. Волкова Т.А., Захарченко Д.И. Влияние типа вегетативного реагирования на характер гастродуоденальной патологии // Вопросы педиатрии. Ярославль, - 1995. - С. 74.

14. Выскребенцева С.А. Алферов В.В., Ковалева H.A., Пасечников

15. B.Д. Нарушения моторики желудка при гастроэзофагеальной рефлюксной болезни // Росс. журн. гастроэнтерол., гепатол., колонопроктол. 2005.- №6.1. C. 35-39.

16. Гастроэнтерология 1. Пищевод, желудок. Пер с англ. / Под ред. Барона Дж. X., Муди Ф.Г. М.: Медицина, 1985,- 304 с.

17. Гланц С. Медико-биологическая статистика. Перевод с англ.-М.:.Практика, 1999.-459 с

18. Гройсман С.Д., Красильников К.Б. Исследование действия катехоламинов на моторную функцию желудка и двенадцатиперстной кишки ненаркотизированных собак // Автон. Нерв. Система. 1986.- Т. 17, № 1,- С. 33-44.

19. Гройсман С.Д., Губкин В.А., Стан Э. Ингибирование моторики желудочно-кишечного тракта низкомолекулярными пептидами из к-казеина // Физиол. Журн. СССР им. И.М. Сеченова. 19896,- Т. 75, № 5,- Р. 725-733.

20. Гуляева С.Ф., Циркин В.И., Гуляев П.В. К механизму действия питьевых минеральных вод на моторику желудка у больных кислотозависимыми заболеваниями // Мат. VI съезда научного общества гастроэнтерологов России. М.: Аиахарсис, 2006. - С. 32.

21. Гусаров В.М. Статистика: Учеб. пособие. М.: Юнити, 2001.463 с.

22. Гусева Е.В. Клиническое значение определения Р-адренозависимой скорости оседания эритроцитов у беременных женщин и рожениц. Автореф. дисс.канд. медицинских наук,- Казань, 1999,- 20 с.

23. Гуска Н.И. Закономерности и механизмы рефлекторной регуляции деятельности органов пищеварения / Автореф. дисс. Кишинев: 1971,- 19 с.

24. Давидовська Т.Д., Цимбалюк О.В., М1рошниченко М.С. Токсин стафилококка модулирует регуляторные механизмы сокращения-расслабления кольцевых гладких мышц толстого кишечника // Биополимеры и клетка. 2001Т. 17, № 1.- С.36-42.

25. Дмитриева Л.Е., Полякова Л.А., Бурсиан А.В., Кулаев Б.С. Особенности соматовисцеральных реакций в раннем постнатальном онтогенезе // Ж. эволюц. биохимии и физиол. 2000.- Т. 36, № З.-С. 241-245.

26. Дудникова Э.В. Роль вегетативной нервной системы и факторов агрессии и защиты в патогенезе хронической гастродуоденальной патологии у детей в начале пубертатного периода: дис. док.мед. наук, Ростов-на-Дону, 1991 -258 с.

27. Захаров С.Н., Вебер В.Р., Свитич Ю.М. Состояние вегетативной регуляции у больных язвенной болезнью желудка и двенадцатиперстной кишки // Клиническая хирургия. 1982.- №8,- С. 27-29.

28. Киршенблат Я.Д. Практикум по эндокринологии. М.: Высшая школа, 1969.- 256 с.

29. Климов П.К., Слобожанин А.Д., Фокина А.А., Ютин А.И. О гуморальной регуляции моторной функции органов пищеварительного тракта // Физиологический журнал СССР им. И.М. Сеченова. 1971.- Т.57, № 2,- С. 270-275.

30. Климов П.К. Функциональные взаимосвязи в пищеварительной системе. Л.: «Наука», 1976,- 272 с.

31. Клыкова Е.В. Состояние моторики желудка и двенадцатиперстной кишки и оценка эффективности различных схем лечения больных с функциональной диспепсией / Дисс. канд. мед. наук М., 2002. - 158 с.

32. Кокуева О.В., Корючанская Н.В. Сравнительная характеристика личностных особенностей больных язвенной болезнью желудка и двенадцатиперстной кишки //Язвенная болезнь желудка. Краснодар, 1996. -С. 69-71.

33. Комиссаров И.В., Самойлович И.М., Шовтута В.И. Использование параметров ионной проницаемости и механической активности для оценки взаимодействия ацетилхолина с М-холинорецепторами гладких мышц // Фармакол. Токсикол. 1976,- Т. 39, № 4.-С. 417-420.

34. Комптон К.К. Гастрит: новое в патоморфологической классификации и диагностике // Рос. Журн. Гастроэнтерол. Гепатол. Колонопроктол. 1998,- № 4,- С. 84-89.

35. Кононова Т.Н. Роль эндогенных Р-адрено- и М-холиномодуляторов в регуляции деятельности систем организма человека / Автореф.канд. биол. наук,- Киров, 2004.- 20 с.

36. Коротько Г.Ф. Введение в физиологию желудочно-кишечного тракта. «Медицина» УзССР - Ташкент., 1987.- 221 с.

37. Кочемасова Н.Г., Шуба М.Ф., Боев К.К. Электрическая и сократительная активность гладких мышц желудка кошки // Физиол. журн. СССР им. И.М. Сеченова. 1970,- Т. 56, № 2,- С. 238-243.

38. Лаврова З.С., Овсянников В.И. Влияние гистамина на моторные и сосудистые эффекты, вызавнные ацетилхолином // Физиол. Журн. СССР им. И.М. Сеченова. 1985,- Т. 71, № 9.- С. 1156-1163.

39. Левин Г.Л. Болезни органов пищеварения. Л.: 1975. - 115 с.

40. Лоранская И.Д., Вишневская В.В. Изучение моторной функции желчевыделительной системы и гастродуоденальной зоны при патологии билиарного тракта // Русский медицинский журнал. 2005,- Т.7, № 1С. 2-7.

41. Маев И.В., Вьючнова Е.С., Лебедева Е.Г. Гастроэзофагеальная рефлюксная болезнь: учебно-методическое пособие. М.: ВУНМЦ МЗ РФ, 2000. - 52с.

42. Малкоч A.B., Майданник В.Г., Курбанова Э.Г. Физиологическая роль оксида азота в организме. Часть 1 // Нефрология и диализ 2000,- № 2. -С. 1-2.

43. Мальчикова С. В. Характеристика адаптационных процессов у больных ИБС на диспансерно-поликлиническом этапе реабилитации с использованием физических тренировок / Автореф. .канд.мед.наук. -Киров, 2002.- 17 с.

44. Медведев М.А. Эндокринная регуляция моторной функции желудка. Томск: Изд-во ТГУ, 1975. - 172 с.

45. Морозова М.А. Роль нервных и гуморальных факторов в срочной регуляции ß-адренореактивности миометрия человека и животных. / Авторефе. дис. канд. биол. наук.- М.- 2000,- 18 с.

46. Мушкамбаров H.H., Кузнецов С.Л. Молекулярная биология . Учебное пособие М. ООО Медицинское информационное агентство, 2003.- 544 с.

47. Недоспаев A.A. Биогенный NO в конкурентных отношениях // Биохимия. 1998,- Т.63. вып.7,- С. 881-904.

48. Ноздрачев А.Д. Физиология вегетативной нервной системы,- Л.: Медицина, 1983,- 296 с.

49. Ноздрачев А.Д. Некоторые элементы построения теории метасимпатической нервной системы // Физиол. Жури. им. И.М. Сеченова. -1987,-Т. 73, №2.-С. 190-201.

50. Ноздрачев А.Д., Туманова Т.В., Дворянский С.А., Циркин В.И., Дармов И.В., Дробков В.И. Активность ряда аминокислот как возможных сенсибилизаторов ß-адренорецепторов гладкой мышцы // Доклады РАН. -1998,- Т. 363, № 1.-С.133-136.

51. Ноздрачев А.Д. (ред.) Начала физиологии. СПб.: Изд-во «Лань». -2001,- 1088с.

52. Ноздрачев А.Д., Поляков В.Л. Анатомия крысы (Лабораторные животные) СПб.: Изд-во «Лань». - 2001. - 464 с.

53. Орлов P.C., Ноздрачев А.Д. (ред) Нормальная физиология: Учебник / М.: ГЭОТАР-Медиа, 2005. 696 с.

54. Осокина A.A. Клинико-лабораторная характеристика ß-адренергического механизма при угрозе преждевременных родов. -Автореф. дис. канд. мед. наук,- Казань, 1998,- 20 с.

55. Папазова М., Атанасова Е. Возбуждающее и тормозное действие стимуляции блуждающего нерва на электрическую активность желудка в хроническом эксперименте // Физиологический журнал СССР им. И.М.Сеченова. 1974,- Т. 60, № 6.- С. 963-971.

56. Пастухов В.А. Эффекты серотонина на моторную функцию органов желудочно-кишечного тракта // Физиол. Журн. Им. И.М.Сеченова. -1987,-Т. 73, № П.-С. 1577-1580.

57. Полтырев С.С., Курцин И.Т. Физиология пищеварения: Учеб. пособие.- М.: Высш. школа, 1980,- 256 с.

58. Помаскина Т.В. Влияние Нижне-Ивкинской минеральной воды на моторно-эвакуаторную функцию желудка, желчного пузыря // Материалы научной сессии Кировского филиала РАЕ и КОО РАЕН. Киров, 2004,- С. 113-114.

59. Помаскина Т.В. Влияние сульфатно-кальциевой минеральной воды «Нижне-Ивкинская 2К» на моторно-эвакуаторную функцию желудка ижелчевыделительную систему (клинико-физиологическое исследование) / Автореф. канд. мед. наук. Киров, 2006,- 23 с.

60. Проказова Н.В., Звездина Н.Д., Коротаева A.A. Влияние люофосфатидилхолина на передачу трансмембранного сигнала внутрь клетки. Обзор // Биохимия. 1998а. - Т.63, вып. 1.- С. 38 - 46.

61. Рапопорт С.И., Лакшин С.И., Ракитин Б.В. рН-метрия пищевода и желудка при заболеваниях верхних отделов пищеварительного тракта / под. ред. Ф.И. Комарова. М.: Медпрактика, 2005. - 208 с.

62. Решетилов Ю.И. Состояние вегетативной нервной системы и гастродуоденальная моторика // Врач. Дело. 1990.- С. 61-64.

63. Сазанова МЛ. Влияние сыворотки пуповинной крови человека на гладкие мышцы матки и сосудов пуповины // Автореф. канд. биол. наук,-Киров, 2002.-17с.

64. Сапин М.Р., Билич Г.Л. Анатомия человека / М.: Гэотар Медицина,2002.- 600 с.

65. Сергеев П.В., Шимановский Н.Л., Петров В.И. Рецепторы физиологически активных веществ. Волгоград: «Семь ветров», 1999. - 640с.

66. Сизова E.H. Физиологическая характеристика эндогенного сенсибилизатора ß-адренорецепторов и других гуморальных компонентов ß-адренерецепторного ингибирующего механизма / Автореф. дисс. канд. биолог. наук.-М., 1998,- 16с.

67. Сизова E.H., Циркин В.И., Трухин А.Н. Наличие в крови и ликворе человека эндогенных модуляторов М-холинорецепторов // Вестник Поморского университета. 2004,- № 2(6).- С. 22-31.

68. Сизова E.H., Циркин В.И". Физиологическая характеристика эндогенных модуляторов ß-адрено- и М-холинореактивности. Киров: Изд-во ВСЭИ, 2006.- 183 с.

69. Стан Э., Гройсман С.Д., Красильников К.Б., Черников М.П. Действие каппа-казеинового гликомакропептида на желудочно-кишечную моторику собаки // Бюлл. Эксп. Биол. и Мед. 1983.- № 7.- С. 10-12.

70. Степанов Ю.М., Кононов H.H., Журбина А.И., Филиппова А.Ю. Аргинин в медицинской парктике (Обзор литературы) // Журн. АМН Украши- 2004.Т.10, №2. С. 339- 351. .

71. Суслова И. В., Коротаева А. А., Проказова Н. В. Изменение параметров равновесного связывания 3Н.-хинуклидинилбензилата на мембранах предсердия кролика под действием лизофосфатидилхолина // Докл. РАН. 1995.- Т. 342, № 2.- С. 273—276.

72. Ткачук В.А., Авакян А.Э. Молекулярные механизмы сопряжения в-белков с мембранными рецепторами и системами вторичных посредников //Росс, физиол. журн. им. И.М. Сеченова. -2003,- Т.89,№ 12,- С. 1478-1490.

73. Трухии А.Н. Влияние эндогенных модуляторов Р-адрено- и М-холинорецепторов на хемореактивность миометрия, миокарда и вариабельность сердечного ритма / Автореф .канд. биол. наук,- Киров,-20036,-20с.

74. Туманова Т.В. Изучение природы эндогенного сенсибилизатора Р-алдренорецепторов и других факторов, регулирующих сократимость иадренореактивность гладкой мускулатуры: Дис.к.б.н.- Киров, 1998.- 236с.

75. Турскова И.И. Гастроинтестинальная моторика и связь ее с некоторыми показателями вегетативного баланса при язвенной болезни // Клин. мед. 2002,- Т.80, № 8, С. 38-41.

76. Устинов В.Н. Исследование моторной функции желудка и двенадцатиперстной кишки Автореф. . канд. мед. наук. Л.: 1972.- 20 с.

77. Устинов В.Н. Конфигурация биопотенциалов гладких мышц желудка и двенадцатиперстной кишки // Физиологический журнал СССР им. И.М.Сеченова. 1974.- Т.60, № 6,- С. 963-971.

78. Устинов В.Н., Котельникова В.И. Взаимосвязь биоэлектрической и моторной активности желудка, двенадцатиперстной кишки и желчного пузыря // Физиологический журнал СССР им. И.М.Сеченова. 1971,- Т. 57, №2.-С. 284-291.

79. Ушкалова В.Н. и соавт. Контроль перекисного окисления липидов. -Новосибирск: изд-во Новосиб. ун-та, 1993. 182 с.

80. Филимонов P.M. Подростковая гастроэнтерология Руководство для врачей.- М.: Медицина, 1990 г.- 216 с.

81. Филимонов P.M. Гастродуоденальная патология и проблемы восстановительного лечения. М.: Мед.-информ. агентство, 2005. - 392с.

82. Фролькис A.B. Функциональные заболевания желудочно-кишечного тракта JI., 1991.-251 с.

83. Хавинсон В.Х., Кожемякин А.Л., Федин А.Н. Фомичев С.Н. Релаксирующий эффект олигопептидов, изолированных из мукозы трахеи и паренхимы легких, на гладких мышцах изолированной трахеи крысы // Бюл. эксп. биол. и мед.- 1992,- Т.113, № 5.- С.483-486.

84. Циммерман Я.С., Михайловская Л.В., Циммерман И.Я. Актуальные вопросы патогенеза и лечения язвенной болезни желудка. // Язвенная болезнь желудка. Краснодар, 1996. - С. 159-160.

85. Циркин В.И., Дворянский С.А., Осокина A.A. и др. Способность сыворотки крови человека ингибировать сократительную реакцию миометрия на ацетилхолин // Лекарственное обозрение (Киров).- 1996.- № 4.-С.49-54.

86. Циркин В.И., Дворянский С.А. Сократительная деятельность матки (механизмы регуляции). Киров., 1997. - 270 с.

87. Циркин В.И., Дворянский С.А., Ноздрачев А.Д. ß-адреномодулирующие эффекты крови, ликвора, мочи, слюны и околоплодных вод человека// Доклады РАН,- 1997.- Т.352, №1.- С. 124-128.

88. ЮЗ.Циркин В.И., Трухина С.И. Физиологические основы психической деятельности и поведения человека. / Учебник, М.: Медицинская книга; Н. Новгород,: изд-во НГМА, 2001. 524 с.

89. Ю4.Циркин В.И., Ноздрачев А.Д., Сизова E.H., Дворянский С.А., Сазанова M.JI. Система эндогенной модуляции, регулирующая деятельность периферических автономных нервных структур // Доклады РАН.- 2002.- Т. 383, №5.-С. 698-701.

90. Ю5.Циркин В.И., Ноздрачев А.Д., Сазанова МЛ., Дворянский С.А., Хлыбова C.B. Утероактивные, ß-адреномодулирующие и М-холиномодулирующие свойства сыворотки пуповинной крови человека // Доклады РАН. 2003а,- Т. 388, № 5.- С. 704-707.

91. Ю7.Циркин В.И., Ноздрачев А.Д, Сизова E.H., Туманова Т.В. Изучение физиологических свойств эндогенного сенсибилизатора ß-адренорецепторов (ЭСБАР) и его возможных компонентов // Доклады РАН. -2004,-Т. 398, №4.-С. 563-566.

92. Черниговский В.Н., Климов П.К., Ноздрачев А.Д. Вагусная афферентация и моторно-эвакуаторная деятельность желудка // Физиологический журнал СССР им. И.М.Сеченова. 1972.- Т. 58, № 3.-С. 297-304.

93. Чернякевич С. А. Моторная функция желудка и двенадцатиперстной кишки при дуоденальной язве и ее осложнениях // Росс, журн гастроэнтерол., гепатол., колопроктологии. 1995.- № 4.- С. 55-60.

94. Шемеровский К.А. Влияние пентагастрина на миоэлектрическую активность гастродуоденальной зоны в условиях активации и блокады М-холинорецепторов // Физиол. Журн. СССР им. И.М. Сеченова. 1987,- Т. 73, № 7.- С. 947-953.

95. Шушканова Е.Г. Механизмы регуляции адренореактивности миометрия человека и животных. / Автореф. дисс.канд. биолог, наук. М.-1997,- 17 с.

96. Ш.Юрченко О.П., Турпаев Т.М., Курчиков АЛ. Роль внутриклеточных процессов в регуляции чувствительности холипорецепторов нейронов моллюсков // Междунар. конф. "Рецепция и внутриклеточная сигнализация", Пущино, 21-25 сент., 1998,- С. 198-200.

97. Andersson S., Rosell S., Hjelmquist U., Chang D., Folkers K. Inhibition of gastric and intestinal motor activity in dogs by (GIn4) neurotensin // Acta Physiol. Scand. 1977.- Vol. 100, № 2,- P. 231-235.

98. Atanassova E., Kortezova N., Lolova I., Petrov I. Changes in the myoelectric complex of the stomach and the small intestine under the influence of the intrinsic nervous system // Acta Physiol. Pharmacol. Bulg. 1980.- Vol. 6, № 3.- P. 11-18.

99. Baccari M., Calamai F., Staderini G. Non-adrenergic, non-cholinergic influences on rabbit gastric tone // Funct. Neurol. 1990.- Vol. 5, № 3.- P. 197199.6

100. Baccari M., Calamai F., Staderini G. Modulation of cholinergic transmission by nitric oxide, VIP and ATP in the gastric muscle // Neuroreport. -1994,- Vol. 14, №8.-P. 905-908.

101. Baccari M., Nistri S., Quattrone S., Bigazzi M., Bani Sacchi Т., Calamai F., Bani D. Depression by relaxin of neurally induced contractile responses in the mouse gastric fundus // Biol. Reprod. 2004.- Vol. 70, № 1.- P. 222-228.

102. Bali J., Magous R., Anmor S. Anti-tissue antigera (ser 292, ser 278) cause contraction of isolated smooth muscle cells from gastric antrum // Eur. J. Pharmacol. 1990.- Vol. 183, P.2186.

103. Bass P., Code C., Lamberte H. Electric activity of gastroduodenal junction // Am. J. Physiol. 1961,- Vol. 201, P. 587-592.

104. Baysal F., Onder S. Ozgul M., Toygar A. The effect of potassium on frog stomach muscle // Br. J. Pharmacol. 1979.- Vol. 66, № 2,- P. 303-306.

105. Bedi B., Debas H., Wasunna A., Buxton B., Gillespie 1. Secretin and cholecystokin-pancreozymin in combination in the inhibition of gastric acid secretion//Gut. 1971,- Vol. 12, № 12,- P. 968-972.

106. Bertaccini G., Coruzzi G., Adami M., Pozzoli C., Gambarelli E. Histamine H3 receptors: an overview // Ital. J. Gastroenterol. 19916.- Vol. 23, № 6. P. 378-385.

107. Bertaccini G., Coruzzi G., Poli E. Review article: the histamine H3-i receptor: a novel prejunctional receptor regulating gastrointestinal function //

108. Aliment. Pharmacol. Ther. 1991a.- Vol. 5, № 6,- P. 585-591.

109. Boden G., Wilson R., Essa-Koumar N., Owen O. Effects of protein meal, intraduodenal HC1 and oleic acidon portal and periferial venous secretion and on pancreatic bicarbonate secretion // Gut. 1978,- Vol. 19, P. 277-283.

110. Boev K., Kortezova N., Papasova M. Coordination between the * longitudinal and circular layers of the stomach during the excitator-contractileprocess // Acta Physiol. Pharmacol. Bulg. 1976.- Vol. 2, № 3,- P. 15-22.

111. Bouryi V., Lewis D. Adrenaline modulates multiple conductances in both identified rat gastric vagal motoneurones and other vagal motoneurones in vitro // J. Physiol. Proc. 2000,- Vol. 523, P. 203.

112. Bredt D., Snyder D. Nitric oxide: a physiologic messenger molecule // Annu. Rev. Biochem. 1994,- Vol. 63, P. 175-195.

113. Brigham K. Oxygen radicals an important mediator of sepsis and septic shock//Klin. Wochensch. -1991,- Vol. 69,№ 21-23,- P. 1004 -1008.

114. Brooks F. Control of gastrointestinal function (An introduction to the physiology of the gastrointestinal tract). London, 1970.- P. 544.

115. Brown B., Ketelaar M., Schulze-Delrieu K., Abu-Yousef M., Brown C. Strenuous exercise decreases motility and cross-sectional area of human gastric antrum. A study using ultrasound // Dig. Dis. Sci. 1994.- Vol. 39, № 5,- P. 940945.

116. Burches E. et al. Effects of calcium antagonists on rat normal and skinned fundus // J. Pharm. Pharmacol. 1992.- Vol. 44, № 6.- P. 500-506.

117. Burgi W., Kaufmann H., Clemencon G. Isolation, identification and quantitative determination of lysolecithin in the human gastric juice // Schweiz. Med. Wochenschr. 1975,- Vol. 105, № 52.- P. 1814-1819.

118. Burks T., Fox D., Hirning L., Shook J., Porreca F. Regulation of gastrointestinal function by multiple opioid receptors // Life Sci. 1988,- Vol. 43, № 26,- P.2177-2181.

119. Buyukafsar K., Levent A. Involvement of Rho/Rho-kinase signalling in the contractile activity and acetylcholine release in the mouse gastric fundus // Biochem Biophys Res Cominun. 2003,- Vol. 303, № 3.- P. 777-781.

120. Chang H., Pandolfino J., Shi G., Boeckxstaens G., Joehl R., Kahrilas P. The effect of glucagon-induced gastric relaxation on TLOSR frequency // Neurogastroenterol. Motil. -2003.- Vol. 15, № 1,- P.3-8.

121. Chen J., Richards R., McCallum R. The cutaneous electrogastrograin reveals important information about gastric motility // Gastroenterology. 1990.-Vol.99, P.1208.

122. Chen J., Schinner B., McCallum R. Serosal and cutaneous recordings of gastric myoelectrical activity in patients with gastroparesis // Amer. J. Physiol. -1994.- Vol.266, P.90-98.

123. Cliua A., Keeling P. Cholecystokinin hyperresponsiveness in functional dyspepsia // World J. Gastroenterol. 2006,- Vol. 12, № 17,- P. 2688-2693.

124. Cirstea M. An unidentified serum factor with smooth muscle stimulating properties // Rev. roum. Physiol. 1973,- Vol. 10, № 4.- P. 309-315.

125. Code C., Carlson H. Motor activity in the stomach // In: Handbook of Physiology. Washington: 1968.- Sect. 6,4,- P. 1963.

126. Code C., Marlett J. The interdigestive myo-electric complex of the stomach and small bowel of dogs // J. Physiol. 1975.- Vol. 246, № 2,- P. 289-309.

127. Cummins A. Applied anatomy and physiology of the stomach // Gastroenterology. 1968,- № 1.- P. 265.

128. De Ponti F., Gibelli G., Crema F., Lecchini S. Functional evidence for the presence of beta 3-adrenoceptors in the guinea pig common bile duct and colon // Pharmacology. 1995.- Vol. 51, № 5,- P. 288-297.

129. Delbro D., Lisander B., Andersson S. Atropine-sensitive gastric smooth muscle excitation by mucosal nociceptive stimulation--the involvement of an axon reflex? // Acta Physiol. Scand. 1984,- Vol. 122, № 4. P. 621-627.

130. Delbro D., Lisander B., Andersson S. Bradykinin-induced atropine-sensitive gastric contractions. Activation'of an intramural axon reflex? // Acta Physiol. Scand. 1986,- Vol. 127, № l.-P. 111-117.

131. Dobreva G., Bayginov 0., Atanassova E. Character of the nerve transmission in different stomach regions // Acta Physiol. Pharmacol. Bulg. -1982,- Vol. 8, № 3.- P. 45-51.

132. Duane W., McHale A., Sievert C. Lysolecithin-lipid interactions in disruption of the canine gastric mucosal barrier // Am. J. Physiol. 1986.- Vol. 250, №3.- P. 275-259.

133. Dudec R.R., Conforfo A., Bing R.J. Lypophosphatidylcholine-induced vascular relaxation of cGMF are mediated by endothelium-derived factor // Proceeding of the Society for Exper. Biol. And Medicine. 1993,- Vol. 203, № 4,-p. 474-479.

134. Duquette R., Wray S. pH regulation and buffering power in gastric smooth muscle // Pflugers Arch. 2001.- Vol. 442, № 3.- P. 459-466.

135. Eklund S., Jodal M., Lundgren O., Sjoqvist A. Effects of vasoactive 'intestinal polypeptide on blood flow, motility and fluid transport in the gastrointestinal tract of the cat // Acta Physiol. Scand. 1979.- Vol. 105, № 4.- P. 461-468.

136. Ercan Z., Turker R. A comparison between the prostaglandin releasing effects of angiotensin II and angiotensin III // Agents Actions. 1977.- Vol. 7, №5-6,- P. 569-572.

137. Esparmer V., Melchiorri P. Active polypeptides of the amphibian skin and their synthetic analogues // Pure and Applied Chemistry. 1973,- Vol. 35, P. 463-494.

138. Fandriks L., Jonson C. Effects of adrenoceptor antagonists on vagally induced gastric and duodenal HCO3" secretions in the cat // Acta Physiol. Scand. -1987,- Vol. 130, № 2,- P. 243-249.

139. Fasth S., Hulten L., Jahnberg T., Martinson J. Comparative studies on the effects of bradykinin and vagal stimulation on motility in the stomach and colon // Acta Physiol. Scand. 1975.- Vol. 93, № 1P. 77-84.

140. Feczko P., Simms S., Iorio J., Halpert R. Gastroduodenal response to low-dose glucagons //Am. J. Roentgenol. 1983.- Vol. 140, № 5.- P. 935-940.

141. Feldman M., Goldschmiedt M. Effect of potassium chloride on gastric acid secretion and gastrin release in humans // Aliment. Pharmacol. Ther. 1992.-Vol.6,№4.-P. 407-414.

142. Flavahan N. Lysophosphatidylcholine modifies G protein-dependent signaling in porcine endothelial cells // Am. J. Physiol. 1993.- Vol. 264, № 3,- P. 722-727.

143. Fleming I., Gray G., Stoclet J. Influence of endothelium on induction of the L-arginine-nitric oxide pathway in rat"aortas // Am. J. Physiol. 1993.- Vol. 264, №4.- P. 1200-1207.

144. Fox J., Daniel E. Exogenous opiates: their local mechanisms of action , in the canine small intestine and stomach // Am. J. Physiol. 1987.- Vol. 253, №l.P. 179-188.

145. Fulop K., Zadori Z., Ronai A.; Gyires K. Characterisation of alpha2adrenoceptor subtypes involved in gastric emptying, gastric motility and gastric mucosal defence //Eur. J. Pharmacol. 2005,- Vol. 528, № 1-3,- P. 150-157.

146. Gielkens H., Nieuwenhuizen A., Biemond I., Lamers C., Masclee A. Interdigestive antroduodenal motility and gastric acid secretion // Aliment.

147. Pharmacol. Ther. 1998,- Vol. 12, № 1.- P. 27-33.

148. Golenhofen K. Intrinsic rhythms of the gastrointestinal tract // In: Gastrointestinal motility. N.Y.-London, 1971.- P. 23-35.

149. Golenhofen K., Wegner H. Spike-free activation mechanism in smooth muscle of guinea-pig stomach // Pflugers Arch. 1975,- Vol. 354. P. 29-37.

150. Grassby P., Broadley K. Characterization of beta-adrenoceptors mediating relaxation of the guinea-pig ileum // J. Pharm. Pharmacol. 1984.- Vol. 36, № 9. p. 602-607.

151. Gregory R.A., Tracy H.J. The constitution and properties of two gastrins extracted from hog antral mucosa // Gut. 1964,- № 5,- P. 103-117.

152. Grider J., Makhlouf G. Identification of opioid receptors on gastric muscle cells by selective receptor protection // Am. J. Physiol. 1991.- Vol. 260, № l.-P. 103-107.

153. Guo H., Cui X., Cui Y., Kim S., Cho K., Li Z., Xu W. Inhibitory effect of C-type natriuretic peptide on spontaneous contraction in gastric antral circular smooth muscle of rat // Acta Pharmacol. Sin. 2003,- Vol. 24, № 10,- P. 10211026.

154. Hanack C., Pfeiffer A. Upper gastrointestinal porcine smooth muscle expresses M2- and M3-receptors // Digestion. 1990,- Vol. 45, № 4,- P. 196-201.

155. Hellstrom P. Vagotomy inhibits the effect of neurotensin on , gastrointestinal transit in the rat // Acta Physiol. Scand. 1986.- Vol. 128, № 1,- P.47.55.

156. Hennig G., Hirst G, Park K., Smith C., Sanders K., Ward S„ Smith T. Propagation of pacemaker activity in the guinea-pig antrum // J. Physiol. 2004,-Vol. 556, Pt 2,- P. 585-599.

157. Hirst G., Edwards F. Electrical events underlyuing organized myogenic 9 contractions of the guinea pig stomach // J. Physiol. 2006,- Jul 27; Epub aheadof print.

158. Hirst G., Garcia-Londono A., Edwards F. Propagation of slow waves in the guinea-pig gastric antrum // J. Physiol. 2006,- Vol. 571, № 1.- P. 165-177.

159. Holzer-Petsche U., Moser R. Participation of nitric oxide in the I relaxation of the rat gastric corpus // Naunyn Schmiedebergs Arch. Pharmacol.1996.- Vol. 354, № 3. p.348-354.

160. Hoque A., Hoque N., Hashizume H., Abiko Y. A study on dilazep: II. Dilazep attenuates lysophosphatidylcholine-induced mechanical and metabolicderangements in the isolated, working rat heart // Jpn. J. Pharmacol. 1994. - V. 67,- P.233-241.

161. Itano N., Neya T. The effect of cecal volume change on gastric motility in rats // Acta Med. Okayama. 1985,- Vol. 39, № 2.- P. 91-98.

162. Jopres E., Mutt V., Toczko K. Further purification of cholecystokinin and pancreozymin // Acta Chem. Scand.- 1964.- Vol. 18, P. 2408-2410.

163. Jopres J., Mutt V. On the biological activity and amino acid composition of secretin// Acta Chem. Scand. 1964.- Vol. 15, P.1790-1791.

164. Jopres J., Mutt V. On the biological assay of secretin. The reference standard // Acta Chem. Scand. 1966,- Vol. 66, P. 316-325

165. Kabarowski J., Zhu K.„ Le L., Witte O., Xu Y. Lysophosphatidylcholine as ligand for immunoregulatory receptor G2A //Science 2001,- Vol. 293, № 5530,- P. 618-619.

166. Kamerling I., Van Haarst A., Burggraaf J., Schoemaker H., Biemond I., Jones R., Cohen A., Masclee A. Dose-related effects of motilin on proximalgastrointestinal motility 11 Aliment. Pharmacol. Ther. 2002.- Vol. 16, № 1.- P. 129-135.

167. Kelly K., LaForce R. Pacing the canine stomach with electric stimulation // Amer. Journ. of Phys. 1972,- Vol. 222, P. 588-594.

168. Kikuta K., Sawamura T., Miwa S., Hashimoto N., Masaki T. High-affinity arginine transport of bovine aortic endothelial cells is impaired by ^phosphatidylcholine // Circ. Res. -1998.- Vol. 83, № 1.- P. 1088-1096.

169. Kishioka S., Tamura A., Inoue N., Miyamoto M., Fukunaga Y., Maeda T., Yamamoto H. Electrical field stimulation-induced contraction and relaxation of circular smooth muscle from guinea-pig stomach body // Wakayama Med. rep. -1998,- Vol. 39, №4. p.1-16.

170. Konturek J., Fischer H., Gromotka P., Konturek S., Domschke W. Endogenous nitric oxide in the regulation of gastric secretory and motor activity in humans // Aliment Pharmacol Ther. 1999.- Vol. 13, № 12.- P. 1683-1691.

171. Kristev A., Mitkov D., Lukanov Y. Effect of butyric short-chain fatty acids on the bioelectric and contractile activity of gastrointestinal smooth muscle tissues // Folia Med. (Plovdiv). 1996,- Vol. 38, № 2.- P. 49-55.

172. Lamb K., Kang Y., Gebhart G., Bielefeldt K. Gastric inflammation triggers hypersensitivity to acid in awake rats // Gastroenterology. 2003.- Vol. 125, №5,-P. 1410-1418.

173. Lamers C. Clinical and pathophysiological aspects of somatostatin and the gastrointestinal tract // Acta Endocrinol. Suppl. (Copenh.). 1987.- Vol. 286, P. 19-25.

174. Langton S., Cesáreo S. Helicobacter pylori associated phospholipase A2 activity: a factor in peptic ulcer production? // J. Clin. Pathol. 1992.- Vol. 45, №3,-P. 221-224.

175. Leonarduzzi G., Arkan M., Basaga H., Chiarpotto E., Sevanian A., Poli G. Lipid oxidation products in cell signaling // Free Radie. Biol, and Med. 2000,-Vol. 28, № 9.-P. 1370-1378.

176. Lidberg P. On the role of substance P and serotonin in the pyloric motor control. An experimental study in cat and rat // Acta Physiol. Scand. Suppl. -1985.- Vol. 538, №1.- P. 69.

177. Lind J., Duthie H., Schlegel J., Code C. Motility of the gastric fundus // Am. J. Physiol. 1961,- Vol. 201, P. 197-202.

178. Ludtke F., Golenhofen K., Kohne C. Direct effects of cholecystokinin on human gastric motility//Digestion. 1988,- Vol. 39, № 4,- P. 210-218.

179. Ludtke F., Lammel E., Mandrek K., Peiper H., Golenhofen K. Myogenic basis of motility in the pyloric region of human and canine stomachs // Dig. Dis. 1991.- Vol. 9, № 6.- P. 414-43 \.

180. Manara L., Croci T., Landi M. Beta 3-adrenoceptors and intestinal motility // Fundam. Clin. Pharmacol. 1995,- Vol. 9, № 4,- P. 332-342.

181. Mandrek K., Kreis S. Regional differentiation of gastric and of pyloricsmooth muscle in the pig: mechanical responses to acetylcholine, histamine, substance P, noradrenaline and adrenaline // J Auton Pharmacol. 1992,- Vol. 12, № 1.-P.37-49.

182. Mandrek K., Milenov K. Responses of porcine gastric and duodenal smooth muscle to VIP // J. Auton. Pharmacol. 1991,- Vol. 11, № 6,- P. 353-364.

183. Matsuo S., Neya T., Yamasato T. Antroduodenal coordinated contractions as studied by chemical ablation of myenteric neurons in the gastroduodenal junctional zone // Acta Med. Okayama. 1991.- Vol.5, №1,- P. 2127.

184. McLaughlin J., Grazia Luca M., Jones M., D'Amato M., Dockray G.,

185. Thompson D. Fatty acid chain length determines cholecystokinin secretion andeffect on human gastric motility // Gastroenterology. 1999,- Vol. 116, № 1,- P. 46-53.

186. Mearadji B., Straathof J., Biemond I., Lamers C., Masclee A. Effects of somatostatin on proximal gastric motor function and visceral perception // Aliment. Pharmacol. Ther. 1998.- Vol. 12, № 11,- P. 1163-1169.

187. Melchiorri P. Bombesin and bombesin-like peptides of amphibian skin // In: Gut Hormones edited by S.R. Bloom, P.534-540. Edinburgh, Churchill Livingstone, 1978.

188. Mikkelsen K., Eriksen P., Bone J. Gastric motility and emptying following parietal cell vagotomy and selective gastric vagotomy. Experimentalinvestigation // Acta Radiol. Diagn.(Stockh). 1976,- Vol. 17, №5,- P. 714-722.

189. Milenov K., Bocheva A., Vassileva M. Effects of somatostatin and motilin on the motor and myoelectrical activity of the canine stomach and small intestine in vivo Acta Physiol. Pharmacol. Bulg. 1990,- Vol. 16, № 2,- P.48-54.

190. Milenov K., Todorov S., Vassileva M., Zamfirova R., Shahbazian A. Different effects of Hi and H2 blockers on the tone and the contractile activity of guinea pig stomach fundus // Methods Find. Exp. Clin. Pharmacol. 1995,- Vol. 17, №9,- P.609-613.

191. Mochiki E., Nakabayashi T., Suzuki H., Haga N., Asao T., Kuwano H., Itoh Z. Prostaglandin E2 stimulates motilin release via a cholinergic muscarinicpathway in the dog // Neurogastroenterol. Motil. 2000,- Vol. 12, № 6.- P. 523530.

192. Nakamura E., Kito Y., Hashitani H., Suzuki H. Metabolic component of the temperature-sensitivity of slow waves recorded from gastric muscle of the guinea-pig // J. Smooth Muscle Res. 2006,- Vol. 4, № 2.- P. 33-48.

193. Naslund E., Gutniak M., Skogar S., Rossner S., Hellstrom P. Glucagon-like peptide-I increases the period of postprandial satiety and slows gastric emptying in obese men // Am. J. Clin. Nutr. 1998,- Vol. 68, № 3,- P. 525-530.

194. Nilsson B., Svenberg T., Tollstrom T., Hellstrom P., Samuelson K., Schnell P. Relationship between interdigestive gallbladder emptying, plasma motilin and migrating motor complex in man // Acta Physiol. Scand. 1990.- Vol. 139, № 1.- P. 55-61.

195. Nilsson G., Yalov R., Berson S. Distribution of gastrin in the gastrointestinal tract of human, dog, cat and hog // Front, of Gastrointest. Horm. Res. Stocholm, Almquist and Wiksell: 1973,- P. 95-101.

196. Nishimura E., Buchan A., Mcintosh C. Autoradiographic localization of opioid receptors in the rat stomach // Neurosci. Lett. 1984.- Vol. 50, № 1-3,-P. 73-78.

197. Papasova M., Atanassova E., Boev K. Disturbances in the electrical and contractile gastric activities after bilateral transthoracic vagotomy // Acta Physiol. Pharmacol. Bulg. 1976,- Vol. 2, № 1.- P. 15-22.

198. Papasova M., Lukanov Y., Boev K. Antagonism between Ca and Na ions in the smooth muscle of the stomach in cats (experimens in vitro) // Bulletin of the institute of physiology. 1973.- Vol. XV, № 1,- P. 112-123.

199. Papasova M., Velkova V., Atanassova E. Character of the gastric and duodenal electrical activity after blocking of the adrenoreactive structures // Acta Physiol. Pharmacol. Bulg. 1979,- Vol. 5, № 2,- P. 3-10.

200. Petkov G., Boev K. Control of the phasic and tonic contractions of guinea pig stomach by a ryanodine-sensitive Ca store // Eur. J. Pharmacol. -1999,- Vol. 367, № 2-3,- P. 335-341.

201. Petroianu A., Weinberg J. Motility of isolated mammalian gastric fundus // Comp. Biochem. Physiol. 1986,- Vol. 85, № 1. P. 57-59.

202. Pogrzeba B., Mandrek K., Ludtke F., Lepsien G., Golenhofen K. Contractile action of gastrin-releasing peptide on isolated preparations of human gastroduodenal muscle // Dig. Dis. 1991.- Vol. 9, № 6.- P. 354-359.

203. Polak J., Ghatei M., Wharton J., Bishop A., Bloom S., Solicia E., Brown M., Pearse A., Bombesin-like immunoreactivity in the gastrointestinal tract, lung and central nervous system // Scand. Journ. of Gastroenterol. 1978.- Vol. 13, P. 148.

204. Poole D., Van Nguyen T., Kawai M., Furness J. Protein kinases expressed by interstitial cells of Cajal // Histochem. Cell Biol. 2004,- Vol. 121, № 1,-P. 21-30.

205. Prosser C., Bortoff A., Electrical activity of intetinal muscle in vitro conditions // In: Handbook of Physiology. Washington: 1968.- Sect. 6, 4.- P. 2025.

206. Ren J., Harty R. Presynaptic muscarinic receptors modulate acetylcholine release from rat antral mucosal/submucosal nerves // Dig. Dis. Sci. -1994,- Vol. 39, № 5.- P. 1099-1106.

207. Rikitake Y., Hirata K., Kawashima S., Takeuchi S., Shimokawa Y., Kojima Y., Inoue N., Yokoyama M. Signaling mechanism underlying COX-2 induction by lysophosphatidylcholine // Biochem.boiphys. res. commun. 2001.-Vol. 281, № 5.- P.1291-1297.

208. Rogausch H. The effect of lysolecithin on contractile force of isolated gastric smooth muscle // Res. Exp. Med. (Berl). 1978.- Vol. 173, № 1.- P. 9-15.

209. Sanders K. A case for intersticial cells of Cajal as pacemakers and mediators of neural transmission in the gastrointestinal tract // Gastroenterology. -1996.-Vol. Ill, P.492-515.

210. Sarna S. Myoelectrical and contractile activities of the gastrointestinal tract // Schuster atlas of gastrointestinal motility in health and disease. London: Hamilton, 2002.

211. Sarosiek J., Slomiany B., Slomiany A., Gabryelewicz A. Lysolecithin and glyceroglucolipids in gastric secretion of patients with gastric and duodenal ulcer// Scand. J. Gastroenterol. 1983,- Vol. 18, № 7,- P.935-938.

212. Schofield G. Anatomy of muscular and neural tissues in the alimentary canal // In: Handbook of Physiology. Washington: 1968.- Sect.6,4,- P. 1579.

213. Schulze-Delrieu K., Lepsien G. Depression of mechanical and electrical activity in muscle strips of opossum stomach and esophagus by acidosis // Gastroenterology. 1982.- Vol. 82, № 4.- P. 720-724.

214. Schulze-Delrieu K., Shirazi S. Pressure and length adaptations in isolated cat stomach // Am. J. Physiol. 1987,- Vol. 252, № 1. P. 92-99.

215. Sengupta S., Piotrowski E., Slomiany A., Slomiany B. Role of adrenergic and cholinergic mediators in gastric mucus phospholipid secretion // Biochem. Int. -1991,- Vol. 24, № 6.- P. 1145-1153.

216. Sim S., Choi J., Min D., Rhie D., Yoon S., Hahn S., Kim C., Kim M., Jo Y. Effect of ethanol on spontaneous phasic contractions of cat gastric smooth muscle // Scand. J. Gastroenterol. 2002.-Vol. 37, № 1.- P. 23-27.

217. Sugimoto M, Yamasato T, Nakayama S. Effects of afferent stimulation of the lingual nerve on gastrointestinal motility in the rat // Acta Med. Okayama. -1987,- Vol. 41, №3,- P. 89-97.

218. Sum C., Park P., Wells J. Effects of N-ethylmaleimide on conformational equilibria in purified cardiac muscarinic receptors // J. Biol. Chem. -2002.- Vol. 277, №39.-P. 188-203.

219. Suzuki H., Hirst G. Regenerative potentials evoked in circular smooth muscle of the antral region of guinea-pig stomatch // J. Physiol. 1999.- Vol. 517, № 2.- P.563-573.

220. Svatos A., Queisnerova M., Vokac V. Paper electrophoresis of cholecystokinin, urocholecystokinin, villikinin and urovillikin // Pathol. Biol. (Paris). I960.- № 8,- P. 1193-1196.

221. Tack J. Motilin and the enteric nervous system in the control of interdigestive and postprandial gastric motility // Acta Gastroenterol. Belg. -1995.- Vol. 58, №1.- P. 21-30.

222. Takeuchi K, Ohuchi T, Okabe S. Effects of nitric oxide synthase inhibitor NG-nitro-L-arginine methyl ester on duodenal alkaline secretory and ulcerogenic responses induced by mepirizole in rats // Dig. Dis. Sci. 1995,- Vol. 40, №3,-P. 670-677.

223. Tamura T., Sano I., Satoh M., Mizumoto A., Itoh Z. Pharmacological characterization of 5-hydroxytryptamine-induced motor activity (in vitro) in the guinea pig gastric antrum and corpus // Eur. J. Pharmacol. 1996,- Vol. 308, № 3,-P. 315-324.

224. Tang Y., Lu R., Li Y., Peng C., Deng H. Effect of calcitonin gene-related peptide-induced preconditioning on attenuated endothelium-dependentvasorelaxation induced by lysophosphatidylcholine // Zhongguo yaoli xuebao.-1997.-Vol. 18, №5.- P.405-407.

225. Thompson M., Debas H., Walsh J., Grossman M. Release of antral gastrin by infusion of of liver extract into the small intestine of dogs // Gut.1976,- Vol. 17, P. 393.

226. Thor K., Rokaeus A. Antroduodenal motor response induced by (Gln4)-neurotensin in man // Acta Physiol. Scand. 1983.- Vol. 118, № 4.- P. 369-372.

227. Thulin L., Johansson C. Gastrointestinal hormones // Acta Cliir. Scand. Suppl. 1978,- Vol. 482, P. 69-72.

228. Torgersen J. The muscular build and the movements of the stomach and the duodenal bulb // Acta Radiol. Suppl. 1942,- Vol. 45, P. 1-12.

229. Trifonov B., Kristev A., Roussev G., Kamberov E. Altered bioelectrical and mechanical activities of rat gastric smooth muscle preparations by inhibiting enterocytogenin // Regul. Pept. 1996,- Vol. 61, № 2. P. 119-123.

230. Undrovinas A., Fleidervish I., Makielski J. Inward sodium current atresting potentials in single cardiac myocytes induced by the ischemic metabolitelysophosphatidylcholine // Circ. Res. 1992,- Vol. 71, № 5.- P. 1231-1241.

231. Wang B., Cheng F. Subtypes of muscarinic receptors and functions of intestinal smooth muscles // Zhongguo bingli shengli zazhi. 2001,- Vol. 17, № 11.-P. 1093-1096.

232. Wang H., Eberle-Wang K., Simansky K., Friedman E. Serotonin-induced muscle contraction in rat stomach fundus is mediated by a G alpha z-like guanine nucleotide binding protein // J. Pharmacol. Exp. Ther. 1993.- Vol. 267, №2,- P. 1002-1011.

233. Wang H., Zeng S., Qiu P. Development of muscarinic M3 and M4 receptor antibodies with pharmacological activities // Zhongguo yaoli xuebao.1998,-Vol. 19,№6.-P.523-526.

234. Ward S., Sanders K., Hirst G. Role of interstitial cells of Cajal in neural control of gastrointestinal smooth muscles // Neurogastroenterol. Motil. 2004,-Vol. 16, №1. p. 112-117.

235. Won K., Sanders K., Ward S. Interstitial cells of Cajal mediate mechanosensitive responses in the stomach // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2005.-Vol. 102, № 41.- P.14913-14918.

236. Wood J., Galligan J. Function of opioids in the enteric nervous system

237. Neurogastroenterol. Motil. 2004,- Vol. 16, Suppl. 2.- P. 17-28.

238. Xue L., Fukuta H., Yamamoto Y., Suzui H. Properties of junction potentials in gastric smooth muscle of the rat // Jap. J. Physiol. 1996.- Vol. 46, № 2,- P.123-130.

239. Yaktubay N. et al. Possible stimulation of Na+-K+-ATPase by NO produced from sodium nitrite by ultraviolet light in mouse gastric fundal strip //

240. Gen. Pharmacol. 1999,- Vol. 32, № 1.- P. 159-162.

241. Sept. 16-19, 1997-Hypertension.- 1998,-Vol.31, № 1,-P.248-253.

242. Yamamoto Y., Suzuki H. Two types of stretch-activated channel activities in guinea-pig gastric smooth muscle cells // Jap. J. Physiol. 1996.- Vol. 46, №4. P. 337-345.

243. Yasuda T., Hirohara J., Okumura T., Saito K. Purification and characterization of phospholipase A2 from rat stomach // Biochim. Biophys. Acta. 1990.- Vol. 1046, № 2,- P. 189-194.

244. Yazdani A., Takahashi T., Bagnol D., Watson S., Owyang C. Functional significance of a newly discovered neuropeptide, orphanin FQ, in rat gastrointestinal motility // Gastroenterology. 1999,- Vol. 116, № 1.- P. 108-117.

245. Zhang L., Gu Z., Pradhan T., Jensen R., Maton P. Characterization of opioid receptors on smooth muscle cells from guinea pig stomach // Am. J. Physiol. 1992,- Vol. 262, № 1.- P. 461-469.

246. Zvezdina N. D., Prokazova N. V., Vaver V. A., Bergelson L D., Turpaev T. M. Effect of lysolecithin and lecithin of blood serum on the sensitivity of heart to acetylcholine // Biochem. Pharm.- 1978,- V. 27, № 10.- P. 2793-2801.

Информация о работе

Куншин, Алексей Александрович
кандидата биологических наук
Киров, 2006
ВАК 03.00.13

Диссертация

Влияние сыворотки крови человека на M-холино- и α-, β-адренореактивность гладких мышц желудка крысы - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы