Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Влияние препаратов аминокислот на функциональное состояние и неспецифическую резистентность организма телят
ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Влияние препаратов аминокислот на функциональное состояние и неспецифическую резистентность организма телят"

Пронькивд Елена Алексеевна

Влияние препаратов аминокислот на функциональное состояние и неспецифическую резистентность организма телят

03.00.13 - Физиология

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

I

Нижний Новгород - 2005

Работа выполнена в ФГОУ ВПО «Нижегородская государственная сельскохозяйственная академия» Минсельхоза РФ на кафедре анатомии сельскохозяйственных животных и в ГНУ «Всероссийский научно-исследовательский институт физиологии, биохимии и питания сельскохозяйственных животных»

Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор

Великанов Валерий Иванович

Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор

Успенский Александр Николаевич

кандидат биологических наук Кирпичев Валерий Владимирович

Ведущая организация: ГОУ ВПО «Мордовский государственный университет им. Н.П. Огарева»

Защита диссертации состоится « м » ЛСгР/Л-уВ^ 2005 года в /3 часов на заседании диссертационного совета Д 220.047.01 в ФГОУ ВПО «Нижегородская государственная сельскохозяйственная академия» по адресу: 603107, г. Н. Новгород, пр-т Гагарина, д. 97

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГОУ ВПО «Нижегородская государственная сельскохозяйственная академия»

Автореферат разослан « » 2005 года

Ученый секретарь

диссертационного совета Иващенко М.Н.

1Ч16Э

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность проблемы

Вопрос о выращивании здорового молодняка сельскохозяйственных животных является весьма актуальным. Одним из резервов увеличения сохранности сельскохозяйственных животных является повышение их резистентности.

Наблюдение за физиологическими и биологическими процессами, назначение которых сводится к поддержанию гомеостаза и охране организма от всего генетически чужеродного как экзогенного, так и эндогенного происхождения, является функцией иммунной системы (Кузник Б.И. и др., 1989).

Предпочтение отдается эндогенным иммуномодуляторам, поскольку они более эффективны и относятся к числу природных, естественных для организма веществ, что соответствует требованиям, предъявляемым к фармакологическим средствам (Воробьев A.A., Лященко В.А., 1995). Сюда же относятся и аминокислоты, выполняющие в организме не только пластическую и энергетическую роль, но и регуляторную функцию. Аминокислоты, их соли и смеси и произЁодные как препараты метаболической фармакотерапии характеризуются безвредностью, малой выраженностью побочных эффектов и отсутствием аллергнзирующего влияния. Во многих случаях они являются средствами патогенетической профилактики и терапии (Западнюк В.И. и др., 1982).

Особенно важное значение аминокислоты имеют в питании и жизнеобеспечении новорожденных телят, составляя более 2/3 всех питательных веществ молозива и покрывая более половины энергетических затрат организма.

В раннем постнатальном онтогенезе, когда роль пассивного иммунитета уже снижается, а формирование собственного активного находится в начальной стадии, организм животного остается практически незащищенным (так называемая «иммунная брешь»). Именно в этот период наблюдаются вспышки заболеваний различной этиологии, и считается целесообразным применение способов стимуляции иммуногенеза.

В целях повышения неспецифической резистентности в последнее время предлагается в качестве иммуномодулирующих средств отдельные аминокислоты (Харитонов JI.B., Великанов В.И., Пронькин Д.Е. и др., 2001, 2002; Иванов И.С., Шамберев Ю.Н., 2004).

По изучению действия некоторых аминокислот на сельскохозяйственных животных кафедра анатомии сельскохозяйственных животных ФГОУ ВПО «Нижегородская государственная сельскохозяйственная академия» успешно сотрудничает с ГНУ «Всероссийский научно-исследовательский институт физиологии, биохимии и питания сельскохозяйственных животных» (г. Боровск, Калужская обл.) около 10 лет. i wc национальнах i

I Библиотека i

Применение специфических препаратов и медикаментозных средств не всегда дает положительный эффект. Разработка препаратов для коррекции Т- и В-систем иммунитета может коренным образом изменить существующие подходы к профилактике и лечению болезней телят, широко распространенных в хозяйс твах.

Пока в качестве лекарственных средств испытано небольшое количество аминокислот в ветеринарной практике в связи с недостаточной изученностью фармакодинамики и терапевтической эффективности. Этому должно предшсствовап. изучение влияния препаратов аминокислот на различные функции оршлизма в нормальных физиологических условиях, что и явилось предметом наших исследований.

Цель и задачи исследований

Основной целью проведения исследований было изучить влияние препаратов ряда аминокислот на физиологическое состояние и неспецифическую резистентность организма телят молочного периода выращивания.

Для выполнения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:

1. Определить влияние смесей аминокислот глутамат+цистеин+глицин и глутамат+аргинин на интенсивность всасывания иммуноглобулинов молозива у новорожденных телят.

2. Изучи 1Ь влияние смесей аминокислот на физиологическое состояние и неспецифическую резистентность новорожденных телят. Определить возможность использования смеси аминокислот (глутамат+цистеин +глииин), имитирующей состав глутатиона, в качестве метаболической фармакопрофилактики желудочно-кишечных болезней незаразной этиологии у новорожденных телят.

3. Исследовав динамику изменения неспецифической резистентности и здоровье телят-молочников под влиянием применения смеси аминокислот глутамат +аргинин.

4. Определить влияние пролонгированного препарата Ь-аргинина на физиологическое состояние и резистентность телят молочного периода выращивания.

Научная новизна

Впервые изучено сравнительное влияние разных смесей аминокислот на интенсивность поглощения иммуноглобулинов в кишечнике новорожденных телят, их физиологическое состояние и неспецифическую резистентность телят.

Выявлена способность смеси аминокислот глутамат+цистеин+глицин, имитирующей состав глутатиона, повышать неспецифическую резистентность у новорожденных телят и прирост живой массы.

..„,„ • 1 «Г «К-

Впервые проведено комплексное изучение влияния смеси аминокислот глутамат> аргинин и пролонгированной формы аргинина на резистентность, иммунологический статус телят и состояние их роста и развития.

Препарат аргинина в пролонгированной форме, введённый парентерально телятам, повышает неспсцифическую резистентность этих животных, стимулирует прирост массы их пела.

Полученные данные позволяют раскрыть некоторые пути воздействия препаратов аминокислот на организм животных и обосновать возможность применения этих препаратов для стимулирования неспецифической резистентности и роста телят.

Практическая значимость работы

Установлена возможность применения препаратов аминокислот для повышения неспецифической резистентности организма телят молочного периода выращивания и в качестве средства метаболической фармакопрофилактики.

Материалы работы будут использованы при подготовке временного наставления по применению аминокислот в животноводстве и ветеринарии.

Положения, выносимые на защиту

1. Смесь аминокислот глутамат+цистеин+глицин, имитирующая состав глутатиона, при выпаивании новорожденным телятам повышает интенсивность всасывания иммуноглобулинов молозива из кишечника в течение первых суток, а в дальнейшем стимулирует становление неспецифической резистентности и профилактирует нарушение процессов пищеварения с диарейным синдромом.

2. Смесь аминокислот глутамат+аргинин повышает неспепифическую резистентность животных, снижает заболеваемость и стимулирует прирост массы тела.

3. Препарат аргинина в пролонгарованной форме, введённый парентерально телятам, повышает неспецифическую резистентность и иммунологический статус этих животных.

Апробация работы Материалы диссертации доложены на 4-ом конгрессе международной ассоциации морфологов (Санкт-Петербург, 2002), на 15-ой Международной конференции «Новые фармакологические средства в ветеринарии» (Санкт-Петербург, 2002), на 19-м съезде физиологического общества им. И.П. Павлова (Санкт-Петербург, 2004).

Публикации

По материалам диссертации опубликовано 4 статьи, к Структура и объём диссертации

Диссертация изложена на 132 страницах компьютерного набора и состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов, собственных исследований, заключения, выводов и практических предложений, списка

использованной литературы, включающего 191 источников, в том числе 40 иностранных авторов, приложения. Работа иллюстрирована 15 таблицами и 10 рисунками.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ Материалы и методы исследования.

Научно-производственные опыты проводили в СПК «Нижегородец» Нижегородской области в 2002-2005 гг. Основной целью этих исследований было изучение влияния некоторых аминокислот на резистентность новорожденных телят и телят молочного периода выращивания. Для опыта было отобрано 60 животных, группы формировали по методу парных аналогов. Всего проведено 3 опыта.

I опыт проводили на новорожденных телятах с использованием смеси аминокислот - глутамат+цистеин+глицин в соотношении 1:1:1. Было сформировано две группы телят (контрольная и опытная). Смесь аминокислот в форме раствора задавали внутрь новорожденным телятам опытной группы в течение 7 дней: в первый день по 0,35 г смеси три раза в день через 10 минут после выпаивания молозива, в последующие дни по 1,0 г три раза в день. Пробы крови отбирали на 7-й, 14-й и 30-й дни исследования.

Во II опыте изучали действие смеси аминокислот глутамат+аргинин в соотношении 1:1 Сформировали две группы телят (контрольную и опытную). Препарат задавали новорожденным телятам опытной группы в течение 7 дней по методике 1 опыта. Пробы крови отбирали на 7-й, 14-й и 21-й дни исследования.

III опыт выполняли на телятах 21-дневного возраста с введением целлюлозных микросфер L-аргинина, которые в форме масляной суспензии вводили подкожно, однократно в дозе 5 мл (содержание действующего вещества - 40 мг/мл) на животное. Контрольную и опытную группы телят II опыта на 21-й день исследования разделили каждую на две группы, в результате чего получилось четыре группы: 1 группа - контрольная; 2-й группе - на 21-й день исследований вводили препарат аргинина (ранее смесь аминокислот не выпаивали); 3-й группе - выпаивали смесь аминокислот в течение 7 дней (далее препарат аргинина не вводили), группа являлась контролем для 4-й группы; 4-й группе теля г - выпаивали смесь аминокислот в течение 7 дней и на 21-й день исследований вводили препарат аргинина. Пробы крови отбирали на 7-й, 14-й и 21-й дни исследования.

Анализы проб крови выполнялись на кафедре анатомии, фармакологии и токсикологии сельскохозяйственных животных Нижегородской государственной сельскохозяйственной академии, в исследовательском сертификационном центре НГСХА, в лабораториях ВНИИФБиП сельскохозяйственных животных (г. Боровск, Калужская область), в

медицинском центре «Тонус» (г. Н.Новгород), ГУНО «Областная ветеринарная лаборатория» (г. Н.Новгород).

Полученный экспериментальный материал обработан общепринятыми методами вариационной статистики с помощью сервисных программ и статистических функций программы Microsoft Excel операционной системы Windows ХР, досчоверность различий была оценена по критерию Стьюдента при уровне значимости 95 %.

Подопытные телята подвергались общеклиническому осмотру с одновременным проведением морфобиохимического и иммунологического анализа проб венозной крови.

В крови определяли количество форменных элементов в камере Горяева, выводили лейкоцитарную формулу путем подсчёта в мазках крови лейкоцитов разных видов, окрашенных по Романовскому-Гимза. Состояние неспецифичсской резистентности у животных изучали, оценивая следующие иммунобиохимические показатели: лизоцимную и бактерицидную активность сыворотки крови, фагоцитарную активность нейтрофилов, с выведением фагоцитарно [-о индекса.

Использовали следующие методы анализа: лизоцимная активность -фогоэлектроколориметрическим методом в модификации отдела зоогигиены УНИИЭВ с использованием тест-культуры Micrococcus lysodeikticus (Ю.И. Макаров и соавт., 1974); бактерицидная активность сыворотки крови -фотонефелометрическим методом в модификации О.В. Смирновой и Т.А. Кузьминой (1966), с применением тест-культуры Staphylococcus epidermidis; фагоцитарная активность нейтрофилов по Е.А. Кост и М.И. Стенко (Кондрахин И.П. и соавт., 1985); Т-лимфоциты, В-лимфоциты - методом иммунофлуоресценции с применением набора моноклональных и поликлональных антител; общий белок в сыворотке крови рефрактоме грическим методом на рефрактометре ИРФ-20 (Кондрахин И.П. и соавт., 1985); количество гемоглобина - по методу Сали; скорость оседания эритроцитов - по методу Панченкова; глутатион и его фракции - по методу Вудворда Фри (А.В. Петров и соавт., 1973); кальций - тригонометрическим методом с флуорексоном (А.В. Караканов, Е.П. Вичев, 1968); неорганический фосфор - с молибдатом аммония (В.И. Волгин, 1969); свободные аминокислоты крови - на автоматическом анализаторе аминокислот после осаждения белков раствором сульфосалициловой кислоты; сывороточные иммуноглобулины - по реакции помутнения с сульфатом цинка.

Индивидуальное взвешивание телят проводилось при формировании групп для опыта, а затем через каждый месяц. На протяжении всего опыта за животными велось клиническое наблюдение, учитывались длительность и тяжесть желудочно-кишечных заболеваний.

Общий объем исследований составил 1245 пробы физиолого-биохимических анализов.

Результаты исследований

1. Влияние смеси аминокислот глутамат \цистеин+глицин на состояние неспецифической резистентности и здоровье телят

Основной целью I опыта было выяснить влияние смеси аминокислот глутамат+цистеин+глицин, имитирующей состав глутатиона, на становление неспеиифической резистентности и физиологическое состояние телят.

Глутатион - наиболее распространенный природный антиоксидант, играет важную роль в защите клеток против окислительного повреждения, поддерживает функции мембран, влияет на активность ферментов и биосинтез нуклеиновых кислот (Соколовский В.В., 1988; Кулинский В.И., Колесниченко JI.C., 1990; Смирнова Г.В. и др., 2002). Наличие в молекуле цистеина SH-группы обуславливает способность этой аминокислоты оказывать защитное действие oi веществ с высокой окислительной способностью (Западнюк В.И. и др., 1982). Велико значение глутаминовой кислоты как одного из важнейших компонентов ан гиокислительной системы клеток, препятствующей индукции перекисного окисления липидов биомембран (Раевский К.С., Георгиев В.П., 1986).

IIa фоне применения смеси аминокислот был исследован уровень отдельных иммунобиологических показателей крови, отражающих в целом состояние клепочной и гуморальной защиты этих животных.

С целыо определения интенсивности всасывания иммуноглобулинов молозива, на 2-ые сутки у подопытных животных брали кровь из яремной вены. У телят опытных групп в сыворотке крови уровень сывороточных иммуноглобулинов был на 24 % выше, чем в контроле, что было достигнуто увеличением уровня свободных аминокислот в желудочно-кишечном тракте в первые сутки жизни телят. Это привело к стимуляции абсорбции иммуноглобулинов в кишечнике, и накоплению их в организме подопытных животных. Подобное действие ранее наблюдали под влиянием ацетата, бутирата, а гак же ряда веществ, содержащихся в молозиве (Солдатов А.П., Эпштейн H.A., Эдель К.Е., 1989; Bygh L.S., Staley Т.Е., 1980).

Основные гематологические показатели животных подопытных групп находились в пределах физиологической нормы, что подтверждает состояние их здоровья. Вместе с тем в крови телят опытной группы отмечено достоверное увеличение количества эритроцитов, лейкоцитов и гемоглобина (табл. 1, 3), что свидетельствует об улучшении снабжения организма кислородом и более интенсивном течении окислительно-восстановительных процессов в их организме.

Таблица 1

Динамика морфологических показателей крови телят (I опыт)

Показатели 7-й день 14-й день 21-й день

Контроль Опыт Контроль Опыт Контроль Опыт

Эритроциты, млн/мкл 7,17+0,12 7,38+0,15 4,95+0,10 5,7±0,13* 6,55+0,1 4,54+0,18*

Лейкоциты, тыс/мкл 6,60±0,15 7,28+0,14* 5,81±0,11 6,33+0,17* 4,04±0,12 7,55+0,71*

Цветной показатель 0,91 ±0,01 0,95+0,05 0,92+0,01 0,94+0,01 0,90+0,01 0,89+0,01

Лейкоформула, %:

базофилы 0,1 ±0,1 0,3+0,1 2,0±0,7 2,3±0,7 2,0±0,1

эозинофилм 1,6+0,2 1,4±0,4 2,0±0,4 2,4±0,4 4,0±0,1 1,0*0,1

палочкоядерн нейтрофилы 3,6+0,8 4,5±0,5 4,6+0,5 5,3±0,8 4,2+0,1 4,5±0,3

сегментоядерн. нейтрофилы 27,8+1,2 20,7+2,2* 19,0±2,1 19,0±2,5 17,6+1,8 21,0±2,5

лимфоциты 66,9+1,4 71,6±2,7 70,4±2,5 68,6+3,7 69,8±2,0 70,5±2,4

моноциты - 1,5±0,5 2,0±0,5 2,4±0,4 1,4±0,1 1,0+0,1

Примечание: * - здесь и далее в таблицах Р<0,05

У новорожденных телят естественная неспецифическая защита осуществляется в основном за счет клеточных факторов, гуморальные факторы защиты в этот период выражены слабо, низкими величинами характеризуются лизоцимная, бактерицидная и а1тлютинирующая активность сыворотки крови (Никольский В.В ,1968; Сидоров В.Т. и др., 1982; Плященко С.И., 1983).

Морфологические показатели крови в определенной мере нашли отражение в изменениях неспецифической резистентности (табл. 2).

Таблица 2

Динамика показателей неспецифической резистентности телят (I опыт)

Показатели 7 й день 14-й деиь 21-й день

Контроль Опыт Контроль Опыт Контроль Опыт

Бактерицидная активность, % 12,41 ±0,88 18,16±2,14 * 19,26±0,53 * 9,16±0,72 14,59+0,67» 9,18+0,93 12,02+0,82

Лизоцимная активность, % 10,70+1,17 8,47±0,44 15,24+0,47* 7,55±0,83 11,0+0,95*

Фагоци гарная активность, % 56,14+2,71 74,57+1,57 * 56,86+1,71 72,0+0,85* 55,85+1,71 76,68+0,85 *

Фагоцитарный индекс 1,4!±0,13 1,81+0,07* 1,29+0,03 1,807+0,03* 1,32+0,03 2,01+0,05*

Величины показателей неспецифической резистентности крови телят опытной группы на протяжении всего опыта были достоверно выше, чем у контрольных животных.

Бактерицидная активность сыворотки крови животных опытных 1рупп в разные периоды после применения смеси аминокислот была выше на 30-59 отн.%, лизоцимная активность сыворотки крови - на 45-88 отн.%, фагоцитарная

9

активность крови - на 26-37 отн.%, чем у контрольных телят. Фагоцитарный индекс подтверждает повышение фагоцитарной активности клеток лейкоцитарного ряда в опытной группе по отношению к контрольным животным. Вероятно, это связано с активностью внутриклеточных систем фагоцитов и повышением опсонических свойств иммуноглобулинов.

В крови гелят опытной группы на 14-й день исследования (табл. 3) отмечено достоверное повышение общего белка, общего глутатиона и гемоглобина. При дальнейших анализах крови подопытных животных различия основных биохимических показателей были менее выраженными.

Таблица 3

Динамика биохимических показателей крови телят (I опыт)__

Показатели 7-й день 14-й день 21 -й день

Контроль Опыт Контроль Опыт Контроль Опыт

Общий белок, мг% 4,69+0,15 4,99+0,05* 4,73±0,06 5,21±0,14* 4,8+0,19 4,87+0,15

Гемоглобин, мг% 12,66±0,1б 12,53+0,73 9,48+0,25 11,29+0,36* 11,58±0,15 12,00±0,41

Глутатион:

общий, мг% 42.93+4,12 41,75±2,63 26,53±0,79 30,64+1,22* 27,32±1,23 29,07±1,31

восстанов ленный, мг% 30,75+3,28 31,61+2,28 20,00±0,92 22,76+1,44 20,83+1,33 22,4911,09

окисленный, мг% 12.18+2,23 10,14+1,71 6,53±0,92 7,88±1,31 6,49+0,85 6,58+0,87

% к общему

восстановленный 71,95±1,21 76,00±1,17 75,58+1,27 76,02±1,19 76,24±1,47 77,48+1,60

окисленный 28,05+1,19 24,00±1.15 24,42±1,26 23,98+1,17 23,76+1,27 22,52+1.28

Кальций, мг% 8.77+0,17 8,41 ±0,32 9,70+0,10 9,83±0,10 8,23+0,47 7,91+0,20

Фосфор неорг., мг% 4,90+0,39 4,16*0,26 3,94+0,04 3,89+0,05 4,25+0,08 4,18+0,06

Липиды, мг% 154,1+12,3 190,1±13,7* 202,8±15,5 222,4+9,1 231,8+10,4 303,9+16,0*

Резервная щелочность, мг% 244,2+7,5 235,8±8,0 303,1+8,8 348,8+8,2* 288,0+8,5 283,8+3,0

Повышение иммунобиохимических показателей крови и неспецифической резистентное г и телят опытной группы привело к снижению заболеваемости новорожденных телят в первые 10 дней жизни и увеличению прироста живой массы.

Было установлено, что в опытной группе заболело 4 теленка в период до 10-дневного возраста, или 40 %, а в контроле 7, или 70 %, то есть заболеваемость животных опытной группы была ниже в 1,75 раза.

Из-за различной длительности и тяжести заболеваний между контрольными и опытными группами была отмечена разница в приросте живой

массы телят за 1-й месяц выращивания: у телят опытной группы прирост был выше на 15,5 % (431 против 373 г/сут/гол в контрольной ipynne).

Таким образом, смесь аминокислот (глутамат+цистеин+глицин) способствовав усилению неспецифической резистентности организма, бопее лёгкому течению болезни телят или даже её предотвращению, что сказалось на общей жизнеспособности молодняка.

2. Влияние смеси глутамата и аргинина на неспецифическую резистентность и физиологическое состояние новорождённых телят

Целью исследований во II опыте было выяснить влияние выпаиваемой смеси (глугамат+аргинин) на неспецифическую резистентность и физиологическое состояние подопытных животных.

Аргинин активирует цикл мочевины, который служит основным путем детоксикации аммиака и главной формой выделения белкового азота из организма. Использование аргинина обусловлено его важной физиологической ролью в качестве члена цикла мочевинообразования (Ленинджер А., 1974; Najarían J.S., Harper H.A., 1956). Аминокислота аргинин служит главным «сырьем» для производства оксида азота в клетках (Clini Е. et al., 2000). Глутамат помимо медиаторной функции в ЦНС как стимулятора, способствует образованию оксида азота из аргинина. Известна ключевая роль оксида азота в поддержании сосудистого тонуса, регуляции активности клеток иммунной системы, передаче сигналов в нервной системе, а также развитии воспаления, клеточного апоп гоза (Рябченко Н.И. и др., 2002).

Уровень сывороточных иммуноглобулинов в опытной группе животных был на 22 % выше в сравнении с контрольными телятами.

При анализе гематологических показателей телят опытной группы (табл. 4) было отмечено достоверное увеличение количества эритроцитов (на 13 %), лейкоцитов (на 9 %) на 14-й и 21-й дни опыта относительно контрольных животных.

У животных опытной группы на 14-й день опыта наблюдалось повышение процента палочкоядерных нейтрофилов и моноцитов, являющихся предшественниками более активно функционирующих клеток.

Таблица 4

Динамика морфологических показателей крови телят (II опыт)

Показатели 14-й день 21-й день 28-й день

Контроль Опыт Контроль Опыт Контроль Опыт 5,56±0,28

Эритроциты, млн/мкл 5,33±0,05 6,031.0,12* 5,49±0,11 6,17±0,08* 5,73±0,07

Лейкоциты, тыс/мкл 7,39±0,09 8,06±0,05* 7,36+0,09 8,05±0,05* 6,9510,09 7,15±0,14

Цветной показатель 0,81±0,02 0,94±0,01* 0,93±0,03 0,94±0,01 0,84*0,03 О,94±0,06

Лейкоформула, %:

базофилы 2,2±0,3 2,4±0,3 2,2±0,22 1,3+0,1 2,8±0,4 3,2±0,4

эозинофилы 1,7±0,3 1,7+0,2 2,3±0,3 1,1+0,1 3,2x0,6 3,4+0,6

палочкоядери нейтрофилы 4,6±0,5 6,1¿-0,5 6,3±0,4 4,5±0,4 4,6±0,6 5,2x0,6

сегмент оядср нейтрофилы 17,9+0,6 20,6+0,6* 21,7±0,7 22,7+0,4 20,0±0,8 21,8+0,6

лимфоциты 70,8+1,0 65,6+1,3* 63,2+0,9 66,3±0,7 63,6X1,2 61,4+1,0

моноциты 2,8*0,4 3,6*0,4 4,3+0,6 4,1+0,5 5,8*0,4 5,0+0,4

Применение смеси аминокислот оказало стимулирующий э< показатели неспецифической резистентности опытной группы телят (т Показатели неспецифической резистентности телят (II опыт) >фект на 1бл. 5). Габлица 5

Показатели 14-й день 21-й день 28-й день

Контроль Опыт Контроль Опыт Контроль Опыт

Бактерицидная активное! ь, % 19,92+1,16 27,03+1,56* 11,21*0,90 21,21 ±0,63* 12,19+0,57 23,28+0,37 *

Лизоцимная активность, % 21,43+1,41 25,10*1,07 16,96+0,31 18,94+0,79* 12,4210,64 19,29+1,34 *

Фагоцитарная активность,% 47,70±0,90 70,40+0,60* 53,40*0,50 70,60+0,60* 51,40+0,80 61,00+0,80 *

Фагоцитарный индекс 1,09+0,02 2,11+0,03* 1,23+0,21 2,10+0,05* 1,37+0,03 1,77+0,03*

Бактерицидная активность сыворотки крови телят опытной группы оказалась выше на 35 отн.% на 14-й день и па 89 отн.% на 21-й день исследований. Лизоцимная активность плазмы крови опытной группы телят была выше по сравнению с контролем на всем протяжении опыта. Фагоцитарная активность нейтрофильных сегментоядерных лейкоцитов крови по отношению к золотистому стафилококку была выше в опытной группе по сравнению с контролем на 14-й день исследования на 47 отн.% и на 21-й день -на 32 отн.%. Уровень фагоцитарного индекса возрос у животных опытной группы на 93 отн.% и 70 отн.% на 14-й и 21-й дни исследования соответственно.

Иммунологическими исследованиями крови (табл. 6) установлено достоверное увеличение относительного количества Т-лимфоцитов в опытной группе на 5-12 %, а абсолютного значения - на 4-18 % по сравнению с контрольной группой. Уровень В-лимфоцитов в крови опытных групп животных на 15-54 % превышал этот уровень в контрольной группе, при этом на 14-й и 21-й дни эти показатели были достоверными.

Таблица 6

Содержание Т- и В-лимфоцитов в крови телят (II опыт)____

Показатели 14-й день 21-й день 28-й день

Контроль Опыт Контроль Опыт Контроль Опьп

Лимфоциты

% 70,8+1,0 65,6+1,3* 63,2+1,0 66,3+0,8 63,6+1,2 61,4+1,0

тыс/мкл 5,23+0,09 5,26+0,11 4,65+0,09 5,34+0,06* 4,42X0,08 4,39+0,08

Т-клетки

% 64,1+0,9 72,2+0,7* 73,6+0,9 75,5+0,115 65,8X0,8 69,4+0,6*

тыс/мкл 3,35+0,06 3,8210,09* 3,4210,07 4,04±0,08* 2,91 ±0,08 3,05*0,06

В-клстки

% 16.0+0,5 20,310,6* 10, НО,8 15,6±0,7* 11,8*0,4 13,6*0,6

тыс/мкл 0,84*0.04 1,07*0,03* 0,47*0,03 0,83+0,04* 0,5210,02 0,59*0,02*

На 14-й день в опытной труппе Т-клеток на 8 абс.%, а на 28-й день на 13 абс.% было больше, чем в контрольной группе. Содержание В-клегок в опытной группе на 4,3 абс %, или на 27 отн.% выше по сравнению с контролем. На 21 -й день исследования эти показатели также были выше.

Введение смеси аминокислот привело к увеличению концентрации общего белка на 4-21 %, при этом на 14-й и 21-й дни данные были достоверными. В опытной группе концентрация общего белка вначале повысилась относительно первого исследования крови (на 5,8 %), а затем снизилась (на 5,84 %) в сравнении со вторым анализом. Содержание общего и восстановленного глутатиона в крови телят опытной группы в течение всего опыта было выше, чем у контрольной группы (табл. 7).

Таблица 7

Динамика биохимических показателей крови телят (II опыт)

Показатели 14-й день 21-й день 28-й день

Контроль Опыт Контроль Опыт Контроль Опыт

Общий белок, мг% 4,4010,03 5,3410,123* 4,6210,16 5,65*0,04* 5,0810,12 5,32+0,11

Гемоглобин, мг% 10,0410,10 10,99*0,38 10,5810,26 10,97*0,11 9,50*0,34 10,78*0,13*

Глутатион

общий, мг% 42,28*0,84 45,80*1,09 37,12*1,90 39,36*0,56 34,14*0,66 33,79*1,23

восстановленный, мг% 36,54*0,83 40,51*1,22 32,46*1,96 32,51*1,87 29,77*2,76 29,74*0,96

окисленный, мг% 5,7410,50 5,29*0,53 4,6610,25 6,85*1,65 4,37*0,60 4,05*0,68

% к общему

восстановленный 86,42*1,01 88,45*1,16 87,45*0,97 82,6011,40 87,20*1,59 88,0111,47

окисленный 13,5811,06 11,55*1,14 12,55*0,90 17,4011,24 12,80*1,42 11,9911,66

Кальций, мг% 7,04±0,12 6,82*0,140 7,06*0,30 6,73+0,08 8,38+0,160 8,2810,38

Фосфор неорг., М1% 3,80*0,07 4,4210,05 3,98*0,06 3,9110,04 4,1210,15 4,1110,08

Липиды, мг% 122.6*13,3 237,2*3,0 130,112,6 175,8111,5* 290,8*4,1 278,6113,5

Резервная щелочность. мг% 209,3±0,8 230,415,2* 274,313,3 281,511,9 223,8+4,0 244, 017,8

В крови 1елят опытной группы на 21-й день исследований несколько снизилось содержание свободных аминокислот в основном за счет метионина, лизина, лейцина и гистидина, что могло быть связано и использованием этих аминокисто1 на синтез белка в организме, а также серина, глицина и тирозина. Одновременно повысилось относительное содержание глутамата, глутамина и аланина, являющихся глюкогенными аминокислотами.

Стимуляция неспецифической резистентности позволила животным легче переносиib желудочно-кишечные заболевания, наблюдающиеся в этот период, или избежать их

В период до 10-дневного возраста в опытной группе из 10 заболело 3 теленка, или 30 %, а в контрольной 6, или 60 %, т.е. заболеваемость животных опытной группы была ниже в 2 раза.

Из-за различной длительности и тяжести заболеваний между контрольной и опытной группами была отмечена разница в приросте живой массы телят за 1 -й месяц выращивания: у телят опытной группы прирост был выше на 21,5 % (590,2 против 454,1 г/сут/гол в контрольной группе).

Таким образом, смесь аминокислот глутамат+аргинин способствовала повышению иммунною статуса организма животных, усилению сопротивляемости болезням, что сказалось на приросте живой массы и общей жизнеспособности молодняка.

3. Влияние пролонгированной формы препарата аргинина на физиологическое состояние и неспецифическую резистентность телят

Основной целью Ш опыта было изучение влияния пролонгированного препарата аргинина на физиологическое состояние и резистентность телят молочного периода выращивания.

На всем протяжении опыта у животных, которым парентерально вводили аргинин (II и IV группы), было отмечено достоверное повышение числа лейкоцитов на 12 % и 19 % и гемоглобина на 20 % и 6 % относительно животных I и 111 групп, которые являются для них контрольными. Также было зафиксировано увеличение содержания эритроцитов у животных II и IV групп по сравнению с контролем на 6 % и 10 %, хотя значения этого показателя достоверно не различались (табл. 8).

Таблица 8

Динамика морфологических показателей крови телят (1П опыт)

Показатели I группа (контроль) II группа (инъекция аргинина) Ш группа (смесь аминокислот) IV ipynna (смесь АК+ инъекция аргинина)

на 7-й день после начала опыта

Эритроциты, млн/мкл 5,73±0,07 6,08±0,19 5,56*0,28 6,15±0,23

Лейкоциты, тыс/мкл б,95±0,09 7,7 9±0,06* 7,15±0,14 8,56 ¿0,06*..

Цветной показатель 0,84±0,03 1,00*0,06 0,94*0,06 0,85*0,05

Лейкоформула, %•

базофилы 2,8*0,4 2,2*0,4 3,2*0,4 1,8*0,4

эозинофилы 3,2*0,6 2,6*1,0 3,4*0,6 2,2*0,6

палочкоядерные нейтрофилы 4,6*0,6 4,0*0,6 5,2*0,6 4,0+1,0

сегментоядерные нейтрофилы 20,0*0,8 25,6*0,6* 21,8*0,6 24,8*0,6*..

лимфоциты 63,6±1,2 61,8*1,8 61,4*1,0 62,6*2,4

моноциты 5,8*0,4 3,8*0,4* 5,0*0,4 4,6*0,6

на 14-й день после начала опыта

Эритроииты, млн/мкл 5,02*0,15 5,73*0,16* 4,95+0,14 5,20*0,19

Лейкоциты, тыс/мкл 6,87*0,17 8,00*0,10* 7,48*0,13 8,18*0,16*..

Цветной показатель 0,83*0,01 0,79*0,02 0,87*0,02 0,84*0,01

Лейкоформула, %

базофилы 3,4*0,6 2,2*0,2 3,4*0,4 1,6*0,4

эозинофилы 4,6*0,6 2,0*0,4* 3,2*1,0 1,8*0,4

палочкоядерные нейтрофилы 5,0*0,8 4,4*0,4 4,8*0,6 4,0+0,4

сегментоядерные нейтрофилы 24,8*1,2 25,0*1,0 23,8*1,2 22,4*1,0

лимфоциты 57,0*1,2 64,0*1,5* 60,0*1,3 66,6*1,6*..

моноциты 5,2*0,4 2,4*0,6* 4,8*0,4 3,6*0,6

на 21-й день после начала опыта

Эритроциты, млн/мкл 4,94*0,07 5,46+0,05 4,94*0,08 5,41*0,07

Лейкоцит, тыс/мкл 7,02*0,09 7,80*0,15* 7,41*0,05 8,05*0,06*..

Цветной показатель 1,01*0,038 1,10*0,09 0,93*0,02 1,06*0,10

Лейкоформула, %:

базофилы эозинофилы 3,2*0,4 2,0*0,4 3,0*0,4 2,4*0,6

3,4*1,0 3,2*1,0 3,4*0,6 3,0*1,0

палочкоядерные нейтрофилы 5,2*0,6 5,0*0,8 5,0*0,8 4,2*0,4

<Х1 ментоядерные нейтрофилы 28,0*0,6 25,8*0,6 28,0*0,6 24,8*1,0

лимфоциты 55,2*1,4 61,2*0,6* 55,8*1,0 62,4*1,4*

| моноциты 5,0*1,0 2,8*0,4 4,8*0,4 3,2*0,8

Примечание: * - сравнение с I группой;

** - сравнение с III группой, здесь и далее Р<0,05

В условиях нашего опыта бактерицидная, лизоцимная активности и показатели фагоцитоза на всем протяжении опыта (табл. 9) были достоверно выше у телят II и IV групп относительно контрольных I и III групп.

Я

Таблица 9

Динамика показателей неспецифической резистентности (1П опыт)

Показатели 1 группа (контроль) И группа (инъекция аргинина) ГО группа (смесь аминокислот) IV группа (смесь АК+ инъекция аргинина)

на 7-й день после начала опыта

Бактерицидная активность, % 12,19+0,57 16,89*1,39* 13,28*0,37* 17,48*0,64*..

Лизоцимная активность, % 12,42*0,64 21,61*0,80* 19,29*1,34* 22,95+1,05*..

Фагоцитарная активность, % 53,40±0,80 66,00*1,00* 61,00*0,80* 72,80+2,00*..

Фагоцитарный индекс 1,37*0,03 1,80*0,07* 1,77+0,03* 2,19X0,10*..

на 14-й день после начала опыта

Бактерицидная активность, % 13,30*0,84 19,43*0,57* 20,53*0,87* 25,30*0,25*..

Лизоцимная активность, % 11,67*0,46 18,14*0,38* 16,51*0,40* 22,44*0,46*..

Фагоцитарная активность, % 56,80*0,80 67,20*1,00* 60,20*1,00* 70,20*0,80*..

Фагоцитарный индекс 1,31*0,02 2,07*0,06* 1,52*0,04* 2,05+0,07*..

на 21-й день после начала опыта

Бактерицидная активность, % 11,47*0,45 19,61*0,47* 19,80+0,30* 23,36*0,37*..

Лизоцимная активность, % 12,16*0,63 17,93*0,45* 16,61*0,31* 19,89+0,47*..

Фагоцитарная активность, % 53,00*0,80 64,60*0,60* 59,60*0,80* 72,00*1,20*..

Фагоцитарный индекс 1,33*0,02 1,79*0,06* 1,33*0,11* 2,03+0,07*..

Лизоцимная активность за период всего опыта во II группе уменьшилась с 21,6 % до 17,93 %, хотя и превышала этот показатель относительно I группы на 42-73 %; а в IV ípynne aioi ноказа1ель превосходил на 18-35 % контрольную III группу. Лизоцимная акшвнооь коррелирует с содержанием лейкоцитов при коэффициенте корреляции во II группе: г = - 0,709 (Р<0,05), г - - 0,769 (Р<0,05); в III ípynne: г = 0,467 (Р<0,1), г = 0,774 (Р<0,05); в IV группе: г - - 0,481 (РОД), г = - 0,786 (Р<0,05) на 7-й и 14-й дни соответственно.

Фагоцитарная активность нейтрофилов II группы возросла на 18-23 %, а в IV группе - на 16-20 % по сравнению с контрольными животными I и III групп соответственно. Увеличение фагоцитарного индекса подтверждает увеличение фагоцитарной активности лейкоцитарного ряда. Фагоцитарная активность коррелирует с содержанием нейтрофилов при коэффициенте корреляции во II группе: г - - 0,457 (Р<0,1), г = - 0,386 (Р<0,1), г = - 0,505 (Р<0,1); в III группе: г = 0,387 (РОД), г = - 0,654 (Р<0,1), г = 0,522 (Р<0Д); в IV группе: г = - 0,701 (Р<0,05), г = - 0,814 (Р<0,02), г = 0,346 (РОД) на 7-й Д4-й и 28-й дни соответственно.

Бактерицидные свойства по отношению к тест-культуре Staph, epidermidis усиливались во всех пробах сыворотки крови опытных телят, но наиболее выраженное увеличение наблюдалось у животных II группы.

Специфическая иммунореактивность развивающихся животных характеризуется постепенным нарастанием числа Т- и B-лимфоцитов к 21-му дню исследований (табл. 10): абсолютное количество Т-лимфоцитов во II группе - на 25-50 % и в IV группе - на 37-40 %; абсолютное число В-лимфоцитов во И группе - на 51-67 % и в IV группе - на 42-91 % относительно I и III групп соответственно.

Таблица 10

_Содержание Т- и B-лимфоцитов в крови телят (III опыт)

Показатели

I группа (контроль)

II группа

(инъекция

аргинина)

III группа (смесь аминокислот)

IV группа (смесь АК+ инъекция аргинина)

на 7-й день после начала опыта

Лимфоциты

%

тыс./мкл.

Т-клетки

63,6*1,2

4,421 ±0,084

61,8*1,8

4,819*0,162

61,4*1,0

4,393*0,082

_ 62,6*2,4 3,358*0,167*..

%

65,8*0,8

76,0*0,8*

6 9,4*0,6

79,0*0,8*..

тыс /мкл

2,909*0,082

3,660±0,110*

3,047*0,057

4,200*0,029*..

В-клетки

%

11,8±0,4

16,4*0,8*

13,6*0,6*

21,2*0,08*..

тыс/мкл

0,521*0,018

0,791*0,056*

0,592*0,02

1,136*0,069*..

на 14-й день после начала опыта

Лимфоциты %

тыс ./мкл

Т-клетки

%

57,0*1,2

3,919*0,082

66,2*1,0

64,0*0,8*

5,119*0,065*

75,8*0,8*

_60,0*0,8

4,492*0,125

68,4*0,4

66,6±0,8*..

5,4S0±0,080*..

77,4*1,6*..

тыс./мкл

2,593*0,055

3,876*0,033*

3,071*0,093

4,444*0,350*..

В-клетки

%

13,0*0,4

16,6*0,6*

13,6*0,6

17,2*0,8*..

тыс /мкл

0,508*0,011

0,849*0,030*

0,609*0,025*

0,936*0,030*..

на 21 -й день после начала опыта

Лимфоциты

%

тыс /мкл

Т-клетки

55,2*1,4

3,882*0,153

61,2*0,6*

4,777*0,106*

55,8*1,0

4,154*0,073

62,4*1,4*..

5,023*0,132*.,

%

тыс./мкл. В-клетки

63,0*0,8 2,443*0,086

_77,0*0,8*

3,678*0,081*

68,4*0,8*

79,6*0,6*..

2,841*0,072*

3,998*0,093*..

%

14,0*1,0

19,2*0,6*

17,6*0,6*

21,2*0,6*..

тыс./мкл

0,539*0,017

0,918*0,043»

0,731*0,029*

1,043*0,031*..

В результате иммунологических исследований проб крови опытных телят во II и IV группах установлено увеличение относительного количества Т-лимфоцитов на 12-15 % и 13-16 % против показателей телят с I и III групп

соответственно (Р<0,05), при этом наблюдается статистически достоверное нарастание абсолютного числа Т-лимфоцитов у животных опытных групп. Наиболее выраженное нарастание относительного количества Т-лимфоцитов отмечается на 21 -й день исследования во II группе на 22,2 % против 11руппы, в IV группе - на 16,4 % против III группы, в IV группе - на 26,3 % против I группы (Р<0,05). В абсолютном выражении нарастание Т-лимфоцитов наиболее проявилось к концу опыта.

Индуктивная фаза гуморального иммунитета характеризуется пролифирацией В-клсток, которая наиболее выражена в IV 1руппе. В III группе процент увеличения числа В-лимфоцитов на 21-й день исследований самый высокий и составляет 29,4 % (Р<0,05) от показателя на 7-й день опыта. Абсолютный и относительный количественный рост В-клеток отмечается во всех опытных группах на протяжении всего эксперимента, но наиболее выраженное нарас гание аитителообразующих клеток наблюдается во II группе, при этом к 21-му дню исследований относительное содержание в крови В-лимфоцитов превышало на 37,1 % по сравнению с контролем.

Парентеральное введение пролонгированной формы аргинина оказало стимулирующее влияние на обменные процессы в организме (табл. 11).

Таблица 11

Динамика биохимических показателей крови телят (Ш опыт)

Показатели 1 группа (контроль) II группа (инъекция аргинина) III группа (смесь аминокислот) IV группа (смесь АК+ инъекция аргинина)

на 7-й день после начала опыта

Общий белок, мг% 5,08+0,12 5,89+0,078* 5,32+0,11 6,00+0,10*..

Гемоглобин, мг% 9,50+0,34 11,47+0,34* 10,78+0,13* 11,53+0,18*..

Глутатион:

общий, мг% 34,14+0,66 35,76+3,07 33,79+1,23 37,68+0,96

восстановленный, мг% 28,85+2,76 25,11+1,63 29,74+0,96 34,81+0,91

окисленный, М1 % 5,29+0,60 10,65+0,22 4,05+0,68 2,87+0,52

% к общему

восстановленный 84,50+1,59 70,22X1,35 88,01+1,59 92,38+1,41

окисленный 15,50+1,47 29,78+1,46 11,99+1,66 7,62+1,39

Кальций, мг% 8,38+0,16 6,96+0,40* 8,28+0,38 6,72+0,12

Фосфор неорг, мг% 4,11+0,14 4,56+0,12 4,11+0,08 4,43+0,06

Липиды, мг% 290,8+4,1 239,9+16,8* 278,6+13,5 216,7+1,9*..

Резервная щелочность. мг% 223,8+4,0 234,6+1,8 244,0+7,8 234,0+1,2

на 14-й день после начала опыта

Общий белок, мг% 4,66+0,16 5,14+0,11* 4,64+0,23 5,56+0,18*..

Гемоглобин, мг% 8,36+0,33 8,88+0,24 10,53+0,13* 11,41+0,46*

Глутатион.

общий, мг% 34,24+0,56 37,20+0,15* 36,48+=0,55 37,73±0,44*

восстановленный, мг% 29,20+0,76 32,40+0,31* 32,76+0,86 33,59+1,07

окисленный, мг% 5,04+0,36 4,80±0,36 3,72+0,30 4,14+0,70

% к общему

восстановленный 85,28*1,25 87,10*0,96 89,80*0,99 89,03*1,20

окисленный 14,72*1,23 12,90*0,98 10,20*0,98 11,97*1,15

Кальций, мг% 7,94*0,24 7,38*0,08 6,88*0,16 7,28*0,12

Фосфор неорг, мг% 3,72*0,05 3,83*0,04 3,75*0,08 3,59*0,15

Липиды,мг% 234,2*29,2 306,2*6,0 289,9*5,2 261,2*11,7

Резервная щелочность, мг% 400,8*9,0 395,4*21,2 405,4*9,2 344,8*2,0*..

на 21 -й день после начала опыта

Общий белок, М1 % 4,73*0,18 4,93*0,07 4,57*0,11 5,52*0,16*..

Гемоглобин, мг% 9,43+0,42 11,45*0,51» 9,86*0,18 11,84*0,28*..

Глутатион-

общий, мг% 34,79*1,26 38,72*1,22 38,13*1,35 41,85*0,64*

восстановленный, М1% 30,28*1,36 30,37*1,66 29,50*2,48 35,48*2,33

окисленный, мг% 4,51+0,34 8,35*2,64 8,63*3,30 6,37*1,72

% к общему

восстановленный 87,04*1,09 78,43*0,99 74,34*1,14 84,78*1,37

окисленный 12,96*1,12 21,57*0,97 22,63*1,25 15,22*1,24

Кальций, мг% 6,70*0,20 7,03*0,12 6,70*0,36 7,02*0,16

Фосфор неорг, мг% 3,69*0,01 3,57*0,142 3,56*0,07 3,51*0,10

Липиды, мг% 243,4*9,5 227,1*7,6 231,7*12,6 282,5*16,2

Резервная щелочность. мг% 362,5*15,8 421,8*6,2* 463,4*8,4* 408,6*18,0

При анализе гематологических и биохимических показателей крови телят более четко прослеживается влияние именно парентерального введения аргинина. При этом отмечено повышение уровня белка, общего глутшона и гемоглобина в крови у животных опытных групп, что позволяет судшь о благоприятном влиянии препарата аргинина на состояние окислительно-восстановительных процессов в организме этих животных.

За 1-й месяц после введения микросфер аргинина прирост телят II и IV группы был выше на 55,8 % и 119 % по сравнению с контрольными животными I и III групп соответственно. Во второй месяц опыта прирост телят III и IV групп был выше контроля на 37,5 % и 32,4 %, а на третий месяц выращивания различие в приросте животных подопытных групп было выражено в меньшей степени.

Таким образом, аргинин, введенный подкожно телятам в форме пролонгированного препарата, оказал разностороннее действие на организм животных, стимулируя неспецифическую резистентность и процессы роста.

Результаты исследований позволяют рекомендовать смеси аминокислот и пролонгированную форму аргинина в качестве адаптогенных и стимулирующих резистентность телят препаратов, профилактирующих их заболевания, вызванные нарушением технологии содержания и рационального кормления. Отмеченные физиологические предпосылки могут быть использованы в практике животноводства путём разработки соответствующих препаратов аминокислот и методик их применения.

Выводы

1. Смеси аминокислот глутамат+цистеин+глицин и глутамат+аргинин при пероральном введении новорожденным телятам в первые сутки усиливают поглощение иммуноглобулинов молозива из кишечника на 24 % и 22 % соответственно по сравнению с контрольными животными.

2. Пероральное применение экспериментальных смесей аминокислот глутамат+цистеин + глицин и глутамат+аргинин в течение 7 суток новорожденным телятам способствовало повышению их резистентности, что проявилось в увеличении фагоцитарной (на 26-37 % - в I опыте и на 32-47 % - во II опыте), лизоцимной (на 45-88 % - в I опыте и на 11-55 % - во II опыте) и бактерицидной (на 30-59 % - в I опыте и на 35-89 % - во П опыте) активности крови.

3. Иммунологическими исследованиями крови установлено достоверное увеличение относительного количества Т- и В-лимфоцитов при выпаивании смеси аминокислот глутамат+аргинин (на 5-12 %) и введении пролонгированной формы аргинина (на 12-16 %) по сравнению с контрольными группами животных.

4. Пероральное введение смеси аминокислот глутамат+аргинин привело к увеличению концентрации общего белка (на 5,8 %), содержания общего (6-8 %) и восстановленного глутатиона (10 %) в крови теля1 опытной группы на протяжении всего опыта относительно контроля.

5. У телят опытных групп при пероральном применении смесей аминокислот глутамат+цистеин+глицин и глутамат+аргинин сократилась заболеваемость в 1,75 и 2 раза, а также продолжительность болезней желудочно-кишечного тракта в 2 и 2,5 раза по сравнению с контрольными животными.

6. Среднесуточный прирост массы тела за 1-й месяц выращивания повысился на 15,5 % при пероральном использовании смеси аминокислот глутамат+цистеин+глицин и на 21,5 % при применении смеси аминокислот глутамат+аргинин по сравнению с контрольными животными.

7. Аргинин, введенный подкожно телятам в форме пролонгированного препарата, стимулировал повышение среднесуточного прироста массы тела телят за три месяца выращивания в среднем на 36-43,9 % по сравнению с контрольной группой телят.

Практические предложения

1. Для повышения неспецифической резистентности у новорожденных телят предлагается пероральное применение смесей аминокислот глутамат+цистеин+глицин и глутамат +аргинин в течение 7 дней: в первый

день по 0,35 г смеси три раза в день через 10 минут после выпаивания молозива, в последующие дни по 1,0 г три раза в день.

2. Для стимуляции неспецифической резистентности и повышения иммунологического статуса организма телят молочного периода выращивания рекомендуется вводить парентерально однократно препарат аргинина в пролонгированной форме в дозе 5 мл (содержание действующего вещества - 40 мг/мл).

3 Эксперемснтальные материалы по стимуляции иммунитета и становлению резистентности с помощью препаратов аминокислот могут быть использованы в лекционных курсах по физиологии и фармакологии для студентов и специалистов ветеринарного и зоотехнического профиля.

Выражаем глубокую благодарность главному научному сотруднику лаборатории белково-аминокислотного питания ВНИИФБиП сельскохозяйственных животных, д.б.н. Л.В. Харитонову за всестороннюю научно-методическую помощь в выполнении работы.

Список работ, опубликованных по теме диссертации:

1. Харитонов, Л.В. Влияние препаратов аминокислот на функциональное состояние и неснецифическую резистентность организма телят. / Л.В. Харитонов, И.Л. Кузнецов, Е.Л. Пронькина, В.И. Великанов // Труды Всероссийского научно-исследоватсльского института физиологии, биохимии и питания сельскохозяйственных животных. - Боровск, 2002 -С. 83-96.

2. Великанов, В.И. Морфологические и биохимические показатели крови теляг на фоне применения смеси аминокислот. / В.И. Великанов, Е.А. Пронькина, Л.В. Харитонов // Научно-теоретический медицинский журнал «Морфология». - Санкт-Петербург, 2002 - С.31.

3. Великанов, В.И. Влияние препаратов аминокислот на неспецифическую резистентность телят. / В.И. Великанов, И.Л. Кузнецов, Е.А. Пронькина, Л.В. Харитонов, И.Ф. Водопьянов// Материалы XV Международной научно-практической конференции «Новые фармакологические средства в ветеринарии». - Санкт-Петербург, 2003 - С. 101-102.

4. Харитонов, Л.В. Влияние препаратов аминокислот fía общую резистентность животных./ Л.В. Харитонов, Е.А. Пронькина, В.И. Великанов // Рос. физиол. журн. им. И.М. Сеченова. Т.90. № 8. -Екатеринбург, 2004 - С. 485.

Печать офсетная. Тираж 100 экз. Заказ 173

Нижегородская государственная сельскохозяйственная академия 603107, г. Нижний Новгород, проспект Гагарина, 97

Типография НГСХА

»1 2 6 7 4

РНБ Русский фонд

2006-4 14169

"il .•■'•■"■чуч' ' " ''!!'i "t "Г"1;/'; ">'>[!"м » '

•'•!', ч /и- ' ■ ■ ' о« ' 'i hi"' •'*"",

i

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Пронькина, Елена Алексеевна

Введение

1. Обзор литературы

1.1. Особенности пищеварения и обмена веществ у телят

1.2. Становление иммунитета и резистентности у телят

1.3. Физиологическая функция аминокислот в организме

2. Материал и методы исследования

3. Собственные исследования

3.1. Влияние препаратов аминокислот на неспецифическую резистентность и обмен веществ у новорождённых телят

3.1.1. Влияние смеси аминокислот глутамат Na+цистеин+глицин на состояние неспецифической резистентности и здоровье телят ^

3.1.2. Влияние смеси глутамата Na и L-аргинина на естественную резистентность и здоровье новорождённых телят

3.2. Влияние пролонгированного препарата аргинина на физиологическое состояние и неспецифическую резистентность телят

Введение Диссертация по биологии, на тему "Влияние препаратов аминокислот на функциональное состояние и неспецифическую резистентность организма телят"

Актуальность проблемы

Вопрос о выращивании здорового молодняка сельскохозяйственных животных является весьма актуальным. Одним из резервов увеличения сохранности сельскохозяйственных животных является повышение их резистентности.

Наблюдение за физиологическими и биологическими процессами, назначение которых сводится к поддержанию гомеостаза и охране организма от всего генетически чужеродного как экзогенного, так и эндогенного происхождения, является функцией иммунной системы (Кузник Б.И. и др., 1989).

Предпочтение отдается эндогенным иммуномодуляторам, поскольку они более эффективны и относятся к числу природных, естественных для организма веществ, что соответствует требованиям, предъявляемым к фармакологическим средствам (Воробьев А.А., Лященко В.А., 1995). Сюда же относятся и аминокислоты, выполняющие в организме не только пластическую и энергетическую роль, но и регуляторную функцию. Аминокислоты, их соли и смеси и производные как препараты метаболической фармакотерапии характеризуются безвредностью, малой выраженностью побочных эффектов и отсутствием аллергизирующего влияния. Во многих случаях они являются средствами патогенетической профилактики и терапии (Западнюк В.И. и др., 1982).

Особенно важное значение аминокислоты имеют в питании и жизнеобеспечении новорожденных телят, составляя более 2/3 всех питательных веществ молозива и покрывая более половины энергетических затрат организма.

В раннем постнатальном онтогенезе, когда роль пассивного иммунитета уже снижается, а формирование собственного активного находится в начальной стадии, организм животного остается практически незащищенным (так называемая «иммунная брешь»). Именно в этот период наблюдаются вспышки заболеваний различной этиологии, и считается целесообразным применение способов стимуляции иммуногенеза.

В целях повышения неспецифической резистентности в последнее время предлагается в качестве иммуномодулирующих средств отдельные аминокислоты (Великанов В.И., Харитонов JI.B., Пронькин Д.Е. и др., 2001; Шамберев Ю.Н., Иванов И.С., 2004).

По изучению действия некоторых аминокислот на сельскохозяйственных животных кафедра анатомии сельскохозяйственных животных ФГОУ ВПО «Нижегородская государственная сельскохозяйственная академия» успешно сотрудничает с ГНУ «Всероссийский научно-исследовательский институт физиологии, биохимии и питания сельскохозяйственных животных» (г. Боровск, Калужская обл.) около 10 лет.

Применение специфических препаратов и медикаментозных средств не всегда дает положительный эффект. Разработка препаратов для коррекции Т- и В-систем иммунитета может коренным образом изменить существующие подходы к профилактике и лечению болезней телят, широко распространенных в хозяйствах.

Пока в качестве лекарственных средств испытано небольшое количество аминокислот в ветеринарной практике в связи с недостаточной изученностью фармакодинамики и терапевтической эффективности. Этому должно предшествовать изучение влияния препаратов аминокислот на различные функции организма в нормальных физиологических условиях, что и явилось предметом наших исследований.

Цель и задачи исследований

Основной целью проведения исследований было изучить влияние препаратов ряда аминокислот на физиологическое состояние и неспецифическую резистентность организма телят молочного периода выращивания.

Для выполнения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:

1. Определить влияние смесей аминокислот глутамат+цистеин+глицин и глутамат+аргинин на интенсивность всасывания иммуноглобулинов молозива у новорожденных телят.

2. Изучить влияние смесей аминокислот на физиологическое состояние и неспецифическую резистентность новорожденных телят. Определить возможность использования смеси аминокислот (глутамат+ цистеин +глицин), имитирующей состав глутатиона, в качестве метаболической фармакопрофилактики желудочно-кишечных болезней незаразной этиологии у новорожденных телят.

3. Исследовать динамику изменения неспецифической резистентности и здоровье телят-молочников под влиянием применения смеси аминокислот глутамат +аргинин.

4. Определить влияние пролонгированного препарата L-аргинина на физиологическое состояние и резистентность телят молочного периода выращивания.

Научная новизна

Впервые изучено сравнительное влияние разных смесей аминокислот на интенсивность поглощения иммуноглобулинов в кишечнике новорожденных телят, их физиологическое состояние и неспецифическую резистентность телят.

Выявлена способность смеси аминокислот глутамат+цистеин+глицин, имитирующей состав глутатиона, повышать неспецифическую резистентность у новорожденных телят и прирост живой массы.

Впервые проведено комплексное изучение влияния смеси аминокислот глутамат+аргинин и пролонгированной формы аргинина на резистентность, иммунологический статус телят и состояние их роста и развития.

Препарат аргинина в пролонгированной форме, введённый парентерально телятам, повышает неспецифическую резистентность этих животных, стимулирует прирост массы их тела.

Полученные данные позволяют раскрыть некоторые пути воздействия препаратов аминокислот на организм животных и обосновать возможность применения этих препаратов для стимулирования неспецифической резистентности и роста телят.

Практическая значимость работы

Установлена возможность применения препаратов аминокислот для повышения неспецифической резистентности организма телят молочного периода выращивания в качестве средства метаболической фармакопрофилактики.

Материалы работы будут использованы при подготовке временного наставления по применению аминокислот в животноводстве и ветеринарии.

Положения, выносимые на защиту

1. Смесь аминокислот глутамат+цистеин+глицин, имитирующая состав глутатиона, при выпаивании новорожденным телятам повышает интенсивность всасывания иммуноглобулинов молозива из кишечника в течение первых суток, а в дальнейшем стимулирует становление неспецифической резистентности и профилактирует нарушение процессов пищеварения с диарейным синдромом.

2. Смесь аминокислот глутамат+аргинин повышает неспецифическую резистентность животных, снижает заболеваемость и стимулирует прирост массы тела.

3. Препарат аргинина в пролонгированной форме, введённый парентерально телятам, повышает неспецифическую резистентность и иммунологический статус этих животных.

Апробация работы

Материалы диссертации доложены на 4-ом конгрессе международной ассоциации морфологов (Санкт-Петербург, 2002), на 15-ой Международной конференции «Новые фармакологические средства в ветеринарии» (Санкт-Петербург, 2002), на 19-м съезде физиологического общества им. И.П. Павлова (Санкт-Петербург, 2004).

Публикации

По материалам диссертации опубликовано 4 статьи.

Структура и объём диссертации

Диссертация изложена на 132 страницах компьютерного набора и состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов, собственных исследований, заключения, выводов и практических предложений, списка использованной литературы, включающего 191 источников, в том числе 40 иностранных авторов, приложения. Работа иллюстрирована 15 таблицами и 10 рисунками.

Заключение Диссертация по теме "Физиология", Пронькина, Елена Алексеевна

Выводы

1. Смеси аминокислот глутамат+цистеин+глицин и глутамат+аргинин при пероральном введении новорожденным телятам в первые сутки усиливают поглощение иммуноглобулинов молозива из кишечника на 24 % и 22 % соответственно по сравнению с контрольными животными.

2. Пероральное применение экспериментальных смесей аминокислот глутамат+цистеин+глицин и глутамат+аргинин в течение 7 суток новорожденным телятам способствовало повышению их резистентности, что проявилось в увеличении фагоцитарной (на 26-37 % - в I опыте и на 32-47 % - во II опыте), лизоцимной (на 45-88 % - в I опыте и на 11-55 % - во II опыте) и бактерицидной (на 30-59 % - в I опыте и на 35-89 % - во II опыте) активности крови.

3. Иммунологическими исследованиями крови установлено достоверное увеличение относительного количества Т- и В-лимфоцитов при выпаивании смеси аминокислот глутамат+аргинин (на 5-12 %) и введении пролонгированной формы аргинина (на 12-16 %) по сравнению с контрольными группами животных.

4. Пероральное введение смеси аминокислот глутамат+аргинин привело к увеличению концентрации общего белка (на 5,8 %), содержания общего (6-8 %) и восстановленного глутатиона (10 %) в крови телят опытной группы на протяжении всего опыта относительно контроля.

5. У телят опытных групп при пероральном применении смесей аминокислот глутамат+цистеин+глицин и глутамат+аргинин сократилась заболеваемость в 1,75 и 2 раза, а также продолжительность болезней желудочно-кишечного тракта в 2 и 2,5 раза по сравнению с контрольными животными.

6. Среднесуточный прирост массы тела за 1-й месяц выращивания повысился на 15,5 % при пероральном использовании смеси аминокислот глутамат+цистеин+глицин и на 21,5 % при применении смеси аминокислот глутамат+аргинин по сравнению с контрольными животными.

7. Аргинин, введенный подкожно телятам в форме пролонгированного препарата, стимулировал повышение среднесуточного прироста массы тела телят за три месяца выращивания в среднем на 36-43,9 % по сравнению с контрольной группой телят. .

Практические предложения

1. Для повышения неспецифической резистентности у новорожденных телят предлагается пероральное применение смесей аминокислот глутамат+цистеин+глицин и глутамат +аргинин в течение 7 дней: в первый день по 0,35 г смеси три раза в день через 10 минут после выпаивания молозива, в последующие дни по 1,0 г три раза в день.

2. Для стимуляции неспецифической резистентности и повышения иммунологического статуса организма телят молочного периода выращивания рекомендуется вводить парентерально однократно препарат аргинина в пролонгированной форме в дозе 5 мл (содержание действующего вещества - 40 мг/мл).

3. Эксперементальные материалы по стимуляции иммунитета и становлению резистентности с помощью препаратов аминокислот могут быть использованы в лекционных курсах по физиологии и фармакологии для студентов и специалистов ветеринарного и зоотехнического профиля.

Заключение

Одним из резервов увеличения сохранности сельскохозяйственных животных является повышение их резистентности, особенно в условиях несблансированного кормления и нарушений технологии содержания.

Наблюдение за физиологическими и биологическими процессами, назначение которых сводится к поддержанию гомеостаза и охране организма от всего генетически чужеродного как экзогенного, так и эндогенного происхождения, является функцией иммунной системы (Кузник Б.И. и др., 1989).

Предпочтение отдается эндогенным иммуномодуляторам, поскольку они более эффективны и относятся к числу природных, естественных для организма веществ, что соответствует требованиям, предъявляемым к фармакологическим средствам (Воробьев А.А., Лященко В.А., 1995). Сюда же относятся и аминокислоты, выполняющие в организме не только пластическую и энергетическую роль, но и регуляторную функцию. Аминокислоты, их соли и смеси как препараты метаболической фармакотерапии характеризуются безвредностью, малой выраженностью побочных эффектов и отсутствием аллергизирующего влияния. Во многих случаях они являются средствами патогенетической профилактики и терапии (Западнюк В.И. и др., 1982).

Особенно важное значение аминокислоты имеют в питании и жизнеобеспечении новорожденных телят, составляя более 2/3 всех питательных веществ молозива и покрывая более половины энергетических затрат организма.

В раннем постнатальном онтогенезе, когда роль пассивного иммунитета уже снижается, а формирование собственного активного находится в начальной стадии, организм животного остается практически незащищенным (так называемая «иммунная брешь»). Именно в этот период наблюдаются вспышки заболеваний различной этиологии, и считается целесообразным применение способов стимуляции иммуногенеза.

Установлена связь между низким содержанием иммуноглобулинов в крови новорожденных телят и их заболеваемостью. Многие факторы, содержащиеся в молозиве, обеспечивают защиту новорожденных от бактерий и вирусов, а также становление активного иммунитета и повышение естественной резистентности.

Считается, что абсорбция иммуноглобулинов у новорожденных телят протекает лишь в первые 24 часа, а затем эпителиальные клетки кишечника теряют способность к поглощению макромолекул. Наиболее длительно могут всасываться иммуноглобулины класса G, имеющие наименьшую молекулярную массу - около 27 часов, а наиболее короткий период поглощения у иммуноглобулинов класса М, обладающего наибольшей молекулярной массой (около 16 часов).

Абсорбцию иммуноглобулинов стимулируют ряд веществ молозива, например, низкомолекулярные протеиновые фракции, соединения фосфора, соли молочной и ряда летучих жирных кислот. Уменьшают всасывание иммуноглобулинов гистамин, большие количества глюкозы и лактозы (Солдатов А. П. и др., 1989).

В связи с этим, нами была предпринята попытка изучить влияние ряда аминокислот на интенсивность всасывания иммуноглобулинов у новорожденных телят. Об интенсивности всасывания суммы иммуноглобулинов судили по их концентрации в сыворотке крови телят через сутки после рождения.

Использовали две смеси аминокислот: глутамат+глицин+цистеин в соотношении 1:1:1 и глутамат+аргинин в соотношении 1:1, аминокислоты которых входят в состав молока и молозива, хотя и в небольших количествах. Назначение свободных аминокислот молока и молозива точно не установлено.

Высказывается предположение (Бакарадзе Д.С., 1977), что они выполняют роль легкодоступных питательных веществ, однако низкий уровень этих веществ в молоке и молозиве и существенное отличие от аминокислотного состава белков молока позволяют предположить участие свободных аминокислот в регуляции процессов пищеварения, всасывания, выделения гормонов и, возможно, в стимуляции неспецифической резистентности.

После выпаивания смесей новорожденным телятам отмечено одинаковое изменение интенсивности всасывания иммуноглобулинов в течение первых суток после рождения: по сравнению с контрольными животными уровень иммуноглобулинов в крови опытных телят I и II опыта возрос соответственно на 24 % и 22 %. Пока не предоставляется возможным описать механизм обнаруженного воздействия, так как исследований в данном направлении проведено недостаточно. Вероятно изучаемые аминокислоты играют роль своеобразных медиаторов в процессах регуляции пиноцитоза в эпителиальных клетках кишечника, характерных для раннего постнатального периода.

Вероятно, свободные аминокислоты молозива в период возможности всасывания иммуноглобулинов у новорожденных телят играют присущие им физиологические функции и биохимические превращения, характерные для других возрастных периодов животных: стимуляция всасывания глюкозы и ряда аминокислот, микро- и макроэлементов; влияние на моторику желудочно-кишечного тракта и эвакуацию; воздействие на секреторную деятельность желудка, поджелудочной железы и печени; стимуляция выделения интестинальных гормонов и гормонов «общего» действия, и мн. др. При этом физиологический механизм действия использованных в опыте 4 аминокислот сложен и многогранен.

В дальнейшем, продолжая опыты на телятах, смеси аминокислот выпаивали по три раза в день в течение ещё 5-7 дней. Наблюдение за животными продолжалось в течение месяца с периодическим анализом проб крови.

Отмечено, что у телят опытных групп по сравнению с контрольными были достоверно выше показатели неспецифической резистентности на протяжении всего опыта. Предполагается, что выраженное нарастание бактерицидной активности сыворотки крови у телят, которым выпаивали смеси аминокислот, объясняется активацией комплементарной системы крови. Увеличение лизоцимной активности сыворотки крови связано, вероятнее всего, с активацией макрофагов, т.к. лизоцим - необходимый компонент крови секретируется макрофагами и выделяется при дегрануляции полиморфоядерных нейтрофилов. Стимулирующий эффект смесей аминокислот на фагоцитарную активность крови опытных групп был выше контрольных. Вероятно, это связано с активностью внутриклеточных систем фагоцитов и повышением опсонических свойств иммуноглобулинов.

Морфологические показатели крови в определенной мере подтверждают и согласуются с изменениями неспецифической резистентности. В крови телят опытных групп как при применении смеси глутамат+глицин+цистеин, так и при применении глутамат+аргинин отмечено увеличение уровня лейкоцитов, причем на 14-й и 21-й дни исследований это изменение носило достоверный характер. У животных, которым выпаивали глутамат+глицин+цистеин, наблюдали повышение процента палочкоядерных нейтрофилов и моноцитов, являющихся предшественниками более активно функционирующих клеток. Содержание палочкоядерных нейтрофилов также возросло в крови телят при выпаивании смеси глутамат+аргинин.

Заболеваемость телят и длительность болезни при применении смеси глутамат+глицин+цистеин была ниже в 1,75 и 2 раза, а при применении глутамат+аргинин в 2 и 2,5 раза ниже соответственно, чем в контроле. Болезнь сопровождалась расстройством пищеварения. Острые инфекционные болезни исключены ветеринарно-бактериологическими анализами, клиническими исследованиями и анализом эпизоотологической обстановки. Заболевшим телятам опытных групп смесь аминокислот задавалась в тройной дозе, наряду с другими лечебными средствами, применяемыми ветеринарными специалистами хозяйства.

В итоге прирост живой массы телят в I опыте за 1-й месяц выращивания был выше, чем в контроле на 15,5 %, а у животных II опыта на 21,5 %, хотя при этом среднесуточный прирост не превышал 431 г/гол., т.е. был ниже зоотехнической нормы для этого возрастного периода. Следует учесть, что заболеваемость телят даже в опытных группах превышала 40 %. За период болезни животные теряли живую массу из-за плохой переваримости корма и понижения аппетита, усиленного сгорания липидов и белков тела.

Полученные результаты по стимуляции резистентности телят с помощью смесей аминокислот заслуживают, на наш взгляд, внимания и дальнейшего изучения. Следует учесть, • что использовалась лишь одна доза смесей аминокислот, вычисленная с учетом содержания свободных аминокислот в молозиве, потребляемом теленком за сутки. Не имелось предварительных сведений по действию каждой из аминокислот, включенных в смесь, на изучаемые процессы у телят, не найдено оптимальное соотношение аминокислот и их сочетание с другими компонентами питания и препаратами лечебной и профилактической фармакологии.

Для лечебных целей, судя по материалам авторского свидетельства № 1781098 (1992 г.), доза глутаминовой кислоты должна быть более высокой. При этом авторы рассматривают- глутамат лишь в качестве энергосберегающего средства.

Вместе с тем использование глутамата в детской патологии показало, что повышенные дозы препарата оказывают неблагоприятное действие на функцию головного мозга и надпочечников (Маркова И. В., Шабалов Н. П., 1993). Для «смягчения» подобного действия авторы предлагают добавлять к глутамату таурин и подобные по действию препараты, снижать дозы глутамата. На лабораторных животных ранее отмечалось токсическое действие больших доз глутамата, сопровождающееся гибелью нейронов головного мозга и гиперплазией коркового слоя надпочечников.

Как профилактическое и лечебное средство при болезнях телят, сопровождающихся диарейным синдромом, аминокислоты могут оказывать разностороннее влияние на развитие патологического процесса, учитывая многообразие физиологических функций и биохимических свойств этих веществ. Помимо обнаруженной в опытах стимуляции неспецифической резистентности организма телят, аминокислоты могли оказать благоприятное воздействие благодаря детоксикации аммиака, фенолов и других конечных продуктов метаболизма, нейтрализации свободных радикалов и перекисей липидов и белков, обезвреживанию токсинов сальмонелл и кишечной палочки, и многому другому.

Детоксикация аммиака' осуществляется в значительной мере за счет связывания его дикарбоновыми аминокислотами - глутаматом и аспартатом, с образованием соответствующих амидов - глутамина и аспарагина.

Известно, что болезни телят с диарейным синдромом сопровождаются явлениями аммонийного токсикоза и гипоксии в тканях (Захаренко И. А. и др., 1992), в профилактике и устранении которых глутамат и аспартат принимают активное участие (Маркова И. В., Шабалов Н. П., 1993).

Нейтрализация токсинов сальмонелл и кишечной палочки, которую по данным Западнюка В. И. и др. (1982) способны осуществлять глутаминовая и аспарагиновая кислоты, крайне важна при болезнях желудочно-кишечного тракта телят, поскольку в большинстве случаев заболевания не обходятся без участия представителей (штаммов) этой микрофлоры.

В обезвреживания бензойной кислоты участвует глицин с образованием гиппуровой кислоты, которая выводится из организма с мочой.

Кроме того, по данным Белокрылова Г. А. и сотр. (2000), глицин является одной из аминокислот, стимулирующих детоксикацию бензола и афлатоксина за счет лейкоцитов в организме.

При болезнях желудочно-кишечного тракта телят, как и при других патологиях, обычно возрастает образование свободных радикалов и перекисей липидов и белков, в нейтрализации которых может участвовать цистеин как наиболее активный антиоксидант среди аминокислот (Маркова И. В., Шабалов Н. П., 1993). Цистеин обладает также целым рядом других свойств, проявление которых при состоянии пониженной реактивности и болезнях пищеварительного тракта может служить важным фактором в стимуляции резистентности и нормализации процессов пищеварения и межуточного обмена. Сюда можно отнести способность цистеина увеличивать освобождение эндотелиальными клетками простациклина, обладающего сосудорасширяющими и антиагрегационными-антиадгезивными свойствами (Маркова И. В., Шабалов Н. П., 1993).

О стимулирующем влиянии изучаемых аминокислот, особенно глицина, на секрецию сычужных желез у телят, а также процессы всасывания питательных веществ в кишечнике уже упоминалось ранее.

Выявлены определенные различия в воздействии смесей аминокислот на процессы обмена веществ в организме телят и биохимические показатели крови, отражающие эти процессы. Можно отметить увеличение содержания белка, общего глутатиона, при этом в I опыте эти данные были достоверными.

Все эти показатели взаимосвязаны между собой и отражают разнонаправленность воздействия аминокислот в форме смеси.

Известно, что глутаминовая кислота (глутамат) служит предшественником при синтезе белка и других биологически активных соединений, обеспечивая синтез заменимых аминокислот. Она занимает центральное место в процессах переаминирования в организме, связывает азотистый обмен с углеводным, является одним из источников гликогена. До 10 % глутамата подвергается окислительному дезаминированию, а до 90 % переходит в аспарагиновую кислоту.

Простейшей по строению, но активной в обмене является аминокислота глицин. Он участвует в выведении бензойной кислоты, служит предшественником таких биологически важных соединений, как пурины, глутатион, креатин и др. Особое значение имеет глицин в биосинтезе порфиринов, а следовательно, в функционировании гемоглобина и цитохромов. Вызывает усиление желчеобразовательной функции печени (Василевская JL С. и др., 1987), секреторной функции желудка (Шлыгин Г. К. и др., 1988) и сычуга телят (Харитонов JI. В. и др., 1999). Ему принадлежит роль медиатора торможения в центральной нервной системе.

Менее изучены функции цистеина в организме, особенно на сельскохозяйственных животных. Цистеин входит в состав многих белков, следовательно, ферментов, гормонов. Эта аминокислота является предшественником таурина, играющего важную роль в обмене жиров и образовании парных желчных кислот, используется для синтеза кофермента А, участвующего в процессах межуточного обмена, входит в состав глутатиона. У высших животных цистеин не может быть заменен в этом процессе никакими другими соединениями. Характерная особенность цистеина - наличие в молекуле SH- группы, что обуславливает высокую реактивность белков, содержащих эту аминокислоту. Свойство SH-группы легко окисляться обуславливает способность цистеина оказывать защитное действие от веществ с высокой окислительной способностью.

Дефицит цинка, витаминов А и Е сопровождается усиленной экскрецией цистеина с мочой, поскольку эти вещества как антиоксиданты предупреждают окисление цистеина. Функционирует и выводится из организма преимущественно в неизмененном виде. Участвует в регуляции многих функций. На центральную нервную систему оказывает тормозящее влияние. Аргинин активирует цикл . мочевины, который служит основным путем детоксикации аммиака и главной формой выделения белкового азота из организма. Введение аргинина повышает активность аргиназы, которая отщепляет мочевину от аргинина и регенерирует орнитин, что снижает уровень аммиака, увеличивая уровень выделения мочевины. Аргинин служит главным «сырьем» для производства оксида азота в клетках. Известна ключевая роль оксида азота в поддержании сосудистого тонуса, регуляции активности клеток иммунной системы, передачи сигналов в нервной системе, и также развитии воспаления, клеточного апаптоза (Рябченко Н.И. и др., 2002). Аргинин необходим для нормального функционирования гипофиза. Вместе с орнитином, фенилаланином и другими химическими веществами нервной системы, аргинин требуется для синтеза и высвобождения гормона роста гипофиза.

Перечисленные физиологические функции 4 изучаемых аминокислот часто совпадают, или близки по своей направленности и обусловили изменение биохимических и физиологических процессов в организме после введения смесей аминокислот. Было отмечено повышение уровня свободных аминокислот в крови телят при выпаивании смеси глутамат+аргинин. При этом не было увеличения уровня мочевины в крови, что позволяет предположить более эффективное использование аминокислот на синтез белка, чем в энергетических целях, то есть не повысилось дезаминирование (окисление) аминокислот.

Смесь аминокислот глутамат+глицин+цистеин увеличила уровень глутатиона в крови телят. Известно, что этот трипептид включает в себя остатки глицина, глутамата и цистеина, последний из которых чаще всего лимитирует образование глутатиона.

При дальнейших анализах крови подопытных животных различия основных биохимических показателей были менее выраженными, хотя и сохранились в своей основе. Иммунобиохимические показатели крови телят опытных групп, на протяжении периода наблюдения превышали таковые у контрольных животных.

Повышение неспецифической резистентности телят опытных групп привело к снижению заболеваемости новорожденных телят в первые 10 дней жизни. Не исключается повышение активности пищеварительных ферментов под непосредственным влиянием глутаминовой кислоты за счет снижения энергии активации. Возможно, что подобное воздействие осуществляется и на ферменты лейкоцитов.

Глутаминовая кислота активно используются стенкой кишечника на энергетические цели, а также для защиты энтероцитов от воздействия и проникновения бактерий из просвета кишечника (Pierzynowskiea, 1998).

Таким образом, смеси аминокислот глутамат+глицин+цистеин и глутамат+аргинин при пероральном применении новорожденным телятам способствуют корректировке иммунного статуса этих животных, повышают всасывание питательных веществ, повышают уровень неспецифической резистентности и прироста массы тела. Препараты данных аминокислот могут использоваться как средства метаболической фармакопрофилактики и терапии при желудочно-кишечных болезнях с диарейным синдромом у новорожденных телят.

Следующая серия опытов была посвящена изучению влияния пролонгированного препарата аргинина на физиологическое состояние и резистентность телят молочного периода выращивания. Опыт проведен на телятах 20-дневного возраста в условиях хозяйства.

Предпосылкой к проведению опытов послужили работы Белокрылова Г. А. и сотр. (1986, 1999), в которых выявлена способность ряда аминокислот in vitro и на лабораторных животных ускорять дифференцировку предшественников Т-клеток в Т-лимфоциты и усиливать ответ на гетерологические эритроциты. Эти аминокислоты входят в состав ряда иммуноактивкых пептидов и в основном определяют их активность. Наибольшую активность проявляли в этом отношении аспарагиновая и глутаминовая кислоты, аланин, цистеин и др. В детоксикации бензола и афлатоксинов через стимуляцию неспецифической резистентности наибольшую активность проявили глицин, изолейцин, метионин и др. аминокислоты. Авторы считают, что применение препаратов аминокислот более целесообразно по сравнению с пептидами, поскольку последние труднее синтезировать. Однако в своих опытах эти исследователи применяли многократные инъекции растворов аминокислот (в течение 10-15 сут.), что делает невозможным использовать подобный приём в животноводстве. Кроме того, как отмечалось выше, опыты проведены на лабораторных животных, или на спленоцитах in vitro, что затрудняет установление дозировки препаратов для сельскохозяйственных животных.

В связи с этим нами была использована пролонгированная форма препарата аргинина - целлюлозные микросферы в виде масляной суспензии, что позволяло вводить препарат однократно. Дозировка препарата перенесена из опытов Белокрылова Г. А. и сотр. (1999) с учетом особенностей аминокислотного обмена у телят, их массы тела, а также замедленного выхода аминокислоты из микросфер. Тем не менее, использованные дозы были лишь ориентировочными.

В условиях нашего опыта бактерицидная и лизоцимная активности и показатели фагоцитоза на всем протяжении опыта были достоверно выше у телят, которым парентерально вводили аргинин. Специфическая иммунореактивность развивающихся животных характеризуется постепенным нарастанием Т- и В-лимфоцитов к 21-му дню исследований.

В крови телят опытных групп через месяц после введения аргинина наблюдалось увеличение уровня общего глутатиона, белка и гемоглобина. Вероятно, это явилось результатом изменения в регулирующих системах организма телят под воздействием непрерывно поступающих из места введения количеств аргинина. При этом аргинин мог выполнять роль своеобразного медиатора, имитируя действие пептидов, включающих эту аминокислоту.

Стимуляция неспецифической резистентности позволила животным легче переносить различные заболевания, наблюдающиеся в этот период, или избежать их. Не исключается действие аргинина через стимуляцию гормона роста гипофиза, необходимого для работы вилочковой железы (тимуса), и, следовательно, иммунной системы (Минделл Э., 1997).

Результатом повышения неспецифической резистентности телят явилось увеличение прироста массы тела животных, особенно в первые два месяца после введения препарата.

Аргинин, введенный подкожно телятам в форме пролонгированного препарата, оказал разностороннее действие на организм животных, стимулируя неспецифическую резистентность и процессы роста, вероятно, за счет регулирующих свойств в качестве медиатора в этих процессах.

Таким образом, установлено, что целый ряд аминокислот участвуют в - регуляции процессов пищеварения в кишечнике, формировании неспецифической резистентности. Отмеченные физиологические предпосылки могут быть использованы в практике животноводства путём разработки соответствующих препаратов аминокислот и методик их применения.

Результаты исследований позволяют рекомендовать смеси аминокислот и пролонгированной формы аргинина в качестве адаптогенного и стимулирующего резистентность телят препарата, профилактирующего их заболевания, вызванные нарушением технологии содержания и рационального кормления. i 1 • ■ ! п. . .

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Пронькина, Елена Алексеевна, Нижний Новгород

1. Алексеев М.Ю. Автореферат кандидатской диссертации. Боровск, 1977.

2. Анохин Б.М. О сычужном пищеварении телят // Ветеринария, 1973, - № 2, - С. 90-93.

3. Архангельский И.И., Сощенко Л.П., Сипко Т.П. О гуморальных показателях естественной резистентности зубров различных популяций. С.-х. биология, 1993. 2. С.120-123.

4. Асоян С.Г. Уровень белка и активность протеаз в слизистой оболочке сычуга у телят в преднатальном онтогенезе. В кн.: Актуальные проблемы ветеринарии в промышленном животноводстве (Труды ВИЭВ, 1984, - Т. 60,-С. 41-45).

5. Бабкин В.П. Секреторный механизм пищеварительных желез. Л., 1960. (Babkin В.Р. Secretory mechanism of the digestive glands. New York. Ed. Medical Book Departament of Harper & Brothers., 1950).

6. Бакрадзе Д. С. Динамика содержания свободных аминокислот в молозиве коров. Бюллетень ВНИИФБиП. с/х животных, Боровск, 1977, 2 (45), с. 2123.

7. Баранников В.Д., Кириллов Н.К., Петров И.В. Развитие и проблемы скотоводства Чувашской Республики. Чебоксары: Чувашское книжное изд-во, 2001.-491 с.

8. Белокрылов Г.А., Молчанова И.М., Сорочинская Е.И. Аминокислоты как стимуляторы иммуногенеза . Доклады АН СССР, 1986, 2. с. 289

9. Белокрылов Г.А. , Попова О .Я., Сорочинская Е.И., Деревина О.М.,

10. Коровина Р.Н. Детоксикация аминокислотными и пептиднымипрепаратами бензола и афлотоксана В1 у цыплят . Доклады РАСХН, 1999,2, с.51-52

11. Бернет Ф.Н. Клеточная иммунология. М., 1971.

12. Бессарабов Б.Ф., Миролюбова JI.H. Влияние изотизонана естесственную резистентность организма животных/ Ветеринария, 1994, №5, с 50-51.

13. Бирих В.К. Некоторые данные развития пищеварительной системы крупного рогатого скота во внутриутробный период. Труды Пермского с.-х. института, 17, №3, 1966.

14. Боголюбский С.М. Эмбриология сельскохозяйственных животных. М.,1968.

15. Бойд У. Основы иммунологии. М.: Мир, 1969. - 648 с.

16. Бондарев Г.И., Мартинчик А.Н. Особенности межорганного метаболизма глютатиона у крыс при различной обеспеченности белком и метионином // Вопросы питания, 1987, - № 2, - С. 44-47.

17. Вагралик М.В. Гипотамическая регуляция иммунологическойреактивности организма.// Регуляция иммунного гомеостаза. JL, 1982, с. 11-12.

18. Василевская Л. С. Соколова А. Г., Прокопенко О. В. Участие аминокислот в регуляции желудочной секреции. Вопросы питания, 1987, 4:48-53.

19. Василевская Л.С., Лактаева Т.В. Роль симпатикоадреналовой системы в действии парентерально введенных азотистых веществ на секреторную функцию желудка // Вопросы питания, 1981, - № 1, - С. 36-39.

20. Великанов, В.И., Харитонов JI.B., Пронькин Д.Е. Состояние общей резистентности телят под воздействием препаратов аминокислот Тезисы докладов 18-го съезда физиол. об-ва им. И.П.Павлова. Казань, 2001, с. 317

21. Вестер И. Физиология и патология преджелудков у животных. Сельхозиздат М JL, 1936.

22. Воробьев А.А., Васильев Н.Н. Адбюванты. М., 1969

23. Воробьев А.А., Лященко В.А. Иммунобиологические препараты: настоящее и будущее / ЖМЭИ. 1995. - №6, с. 105-111

24. Гапонов Н.Н. К вопросу желудочного пищеварения у здоровых и больных дисперсией новорожденных телят. Сборник научных трудов Рязанского с.-х. института. Выпуск XI, зоотехнический, 1963.

25. Гапонов Н.Н. к вопросу пищеварения в желудке у новорожденных телят. В кн.: Индивидуальное развитие сельскохозяйственных животных и формирование их продуктивности. (Межвузовская научная конференция, тезисы докладов, С. 229-230), Киев. 1966.

26. Гершенкович З.С., Кричевская А.А., Алексеенко Л.П. Андренергические вещества мозга и надпочечников при повышенном давлении кислорода // Украинский биохимический журнал, 1955, - № 1. - С. 3-11.

27. Глинько О.Н., Сысоев Ю.А. Влияние парентерально вводимых аминокислот и их смесей на секреторную деятельность желудка секрецию // Вопросы питания, 1975, - № 6, - С. 11-15.

28. Голосова Т.В., Аникина Т.П. Роль лизоцима в антимикробной резистентности организма. Биологическая роль лизоцима и его лечебное применение. Караганда, 1972. - С. 65 - 67.

29. Горлов И.Ф. Влияние технологических приёмов выращивания на иммунное состояние организма телят. Технология производства и переработка продукции животноводства. Волгоград, 1996. - С. 139-143.

30. Грачева И.М. Технология ферментных препаратов. М., «Пищевая промышленность», 1975.

31. Давлетова JI.B. Биология развития органов пищеварения жвачных и всеядных животных. М: «Наука», 1974.

32. Денисенко В.Н. Динамика лизоцима, комплемента и пропердина у телят. Ветеринария. 1976, 6. - С. 82-84.

33. Денисов А.В. Специалист делится опытом // Ветеринария. М., 1989. - № 7.-С. 65.

34. Езерская М.А. Бактерицидные свойства сыворотки крови и фагоцитоз при хронических лейкозах. Лаб. дело. 1967, 7. - С. 393-395.

35. Емельяненко П.А. Иммунология животных в период внутриутробного развития. М.: Агропромиздат, 1987. - 215 с.

36. Емельяненко П. А. Механизм естественной резистентности новорожденных телят. Ветеринария, 1979, № 1.

37. Емельяненко П. А. Сезонная динамика гуморальных факторов естественной резистентности сыворотки крови новорожденных телят. Докл. ВАСХНИЛ. 1977, 10. - С. 32 - 34.

38. Емельяненко П.А., Грызлова О.Н., Денисенко В.Н. и др. Методические указания по тестированию естественной резистентности телят. Утв. 2. 1980.

39. Жеребцов П.И. Некоторые вопросы возрастной физиологии пищеварения и обмена веществ у жвачных // Сельскохозяйственная биология, 1968, -Т. 3. - № 4, - С. 483-493.

40. Жуковская Н.А., Ликина Т.Н. К вопросу о неспецифическом защитном действии лизоцима на организм. Антибиотики. 1966, т. 11, 10. -С. 920924.

41. Загороднева А.Г. и др. Влияние симпатической нервной системы на обменные процессы в желудке // Физиологический журнал СССР, 1973, -Т. LIX.-6.-C. 940-944.

42. Западнюк В.И., Купраш Л.П., Заика М.У., Безверхая И.С. Аминокислоты в медицине. Киев «Здоров'я», 1982.

43. Зароза В.Г. Эмерихиоз телят/ Всесоюзная академия с.-х. наук имени В.И. Ленина. М. Агропромиздат, 1991, с. 236.

44. Захаренко И.А., Засекин Д.А., Мельничук Д.А., Свинаренко О.И. Энергетический обмен и электролитный состав крови телят при диареи, оральной регидротации и коррекции нарушений обмена веществ. Сельскохозяйственная биология, 1992, 2, с. 88-93

45. Здродовский П.Ф. Проблемы инфекции, иммунитета и аллергии. М. Медгиз. 1963, С. 466.

46. Зильбер Л.А. Основы иммунологии. 3-е изд., переработанное и дополненное. -М.: Медицина, 1958, С. 600.

47. Зотова В.В., Полек А.И., Сизякина Л.П. и соавторы. Об участии высших вегетативных центров в модуляции иммунологических процессов// Регуляция иммунного гомеостаза. -Л., 1982, С. 14 15.

48. Иванов И.С., Шамберев Ю.Н., Гаврищук В.И. Повышение резистентности животных при инъекции аспарагиновой кислоты./ Известия ТСХА, 2004,выпуск 3, С. 101-106.

49. Ивашкин В.Т. Метаболическая организация функций желудка. Л., «Наука», 1981.

50. Игнатенко Л.Г. Влияние аминокислот с разветвленной углеродной цепью на желудочную секрецию // Вопросы питания, 1984, - № 3, - С. 51-53.

51. Игнатьев Л.С., Бондаренко Н.И. Особенности формирования колострального иммунитета у телят и ягнят/ Ветеринария, 1994, №10, С. 21-22.

52. Кавенцки А.Ч. К вопросу о сычужном пищеварении у телят в онтогенезе Докл. ТСХА, 1957, т. 30, с. 60-62

53. Кармолиев Р.Х. Иммуносупрессорные процессы при колостральном иммунитете у телят./ Ветеринария, 1993, №6, с, 27 29.

54. Кармолиев Р.Х. Участие белков крови в биологической адаптации организма крупного рогатого скота к условиям среды./ С.-х. биология. 1990, №2, С. 141-149.

55. Кармолиев Р.Х. Участие белков крови в процессе иммунологической адаптации организма./Ветеринария, 1988, №1, С. 33 34.

56. Карпуть И.М. Иммунологическая реактивность организма свиней в онтогенезе и влияние витамина С и антибиотиков тетрациклиновой группы / Автореферат диссертации доктора ветеринарных наук -Витебск,1975

57. Карпуть И.М., Пивовар JI.M. Иммунология лактации при аутоиммунных заболеваниях и ее роль в этиопатогенезе диспепсии новорожденных . -Вестн. АН БССР. Сер. с.х. наук , 1982, №;, с. 108-110

58. Карр Я. Макрофаги, функция и ультраструктура. — М.: Медицина, 1979. -188 с.

59. Коваленко Я.Р. Формирование иммунобиологического статуса у молодняка сельскохозяйственных животных. Вестник е.— х. науки, 1979, 2. С. 50-58

60. Коляков Я.Е. Ветеринарная иммунология. М.: Агропромиздат,1986. -272 с.

61. Коннов М.Г. Развитие желудка у плодов крупного рогатого скота Труды ТСХА выпуск 31, 1944.

62. Кононов Ю.В. Секреция сычуга у телят в связи с возрастом. В кн.: Индивидуальное развитие сельскохозяйственных животных и формирование их продуктивности. (Межвузовская научная конференция, тезисы докладов, С. 84-85), Киев. 1966.

63. Корнева Е.А., Клименко В.М., Шхинем Э.К. Нейрогуморальное обеспечение иммунного гомеостаза. Л.: Наука, 1978, С. 278.

64. Коротько Г.Ф. Ферменты желудочного сока. Регуляция их образования и выделения. В кн.: Физиология пищеварения, JL, 1974.

65. Кричевская А.А. Биохимические механизмы кислородной интоксикации 1978

66. Криштофорова Б.В., Короблёва Т.Р., Гаврилин П.Н. Статус организма и жизнеспособность новорожденных телят./Ветеринария, 1994. С. 17 21.

67. Кузник Б.И., Васильев Н.Б., Цыбиков Н.Н. Иммуногенез, гемостаз и неспецифическая резистентность организма. М.: Медицина, 1989. - 320 с.

68. Кулинский В.И., Колесниченко JI.C. Биологическая роль глутатиона // Успехи современной биологии, 1990, т. 110, вып. 1(4). - с. 20-33

69. Кульберг А .Я. Молекулярная иммунология. М., 1985.

70. Лебенгарц ЯЗ. Продуктивность, иммунологическая реактивность крупного рогатого скота в зависимости от фактора кормления. С.-х. биология. 1992, 6. С. 96 - 106.

71. Ленинджер А. Биохимия. М., «Мир», 1974.

72. Лихоносова Н.Д. Изучение возрастных изменений процессов желудочного и кишечного пищеварения у телят. Сборник: Физиология питания С.-х. животных. Сельхозгиз, 1953.

73. Лумбунов С.Г., Игнатьев P.P. Морфологический и биохимический состав крови нетелей по периодам стельности. Аграрная наука. 1999, № 6.1. С.22-24

74. Максимюк Н.Н. ПеПтидосодержащий препарат «Пептидамин», его свойства и применение: Автореф. дис. . канд. биол. наук. М.: ВИЭВ, 1993.-24 с.

75. Маркова И.В., Шабалов Н.П. Клиническая фармакология новорожденных. Санкт-Петербург, 1993.

76. Матросова Е.М., Соловьев А.В. Регуляция выделения соляной кислоты. Вкн: Физиология пищеварения, JL «Наука», 1974.

77. Маянский А.Н., Маянский Д.Н. Очерки о нейтрофиле и макрофаге. -Новосибирск: Наука, 1983. 256 с.

78. Минделл Э.Справочник по витаминам и минеральным веществам. М., «Медицина и питание», 1997.

79. Митюшин В.В. Диспепсия новорожденных телят. М., «Росагропромиздат», 1989.

80. Михальцов К.П. Физиологические особенности преджелудков у телят в связи с возрастом. Автореферат, Оренбург, 1971.

81. Мишани Ю.Ф. Иммунобиологические показатели крови коров и телят при нормировании селена в рационе // Вестник с.-х. науки, 1992.- №2. с. 8691

82. Мозжерин В.И., Камимулина Р.Г., Асадулина Ф.Ф., Влияние биостимуляторов на естественную резистентность организма телят. Ветеринария. 2000, 6. - с. 38-41

83. Мотузко Н.С., Никитина Ю.И. Неспецифическая резистентность овец в ранний постнатальный период. Физиология продуктивных животныхрешению продовольственной программы СССР. Материалы Всес. конф. -Тарту, 1989,ч. 1-С. 41-42.

84. Мыш В.Г. Секреторная функция желудка и язвенная болезнь. Новосибирск, «Наука», 1987.

85. Нейланд Я.А., Бекере Р.Я. Изменение протеинограммы сыворотки крови у телят в молозивный период. Повышение резистентности животных в условиях их концентрации. Рига, 1982. - С. 27 - 31.

86. Немец М.Г. Механизм возникновения физиологической зрелости и незрелости организма в период новорожденности // Биологические основы периода новорожденности: Тр. Моск. об-ва испытателей природы.- Т. 29. М.: Наука, 1968. - С. 37-47.

87. Никитченко И.Н., Плященко С.И., Зеньков А.С. Адаптация, стрессы и продуктивность сельскохозяйственных животных. Минск: Ураджай, 1988.- 199 с.

88. Никольский В.В. Основы иммунитета животных. М.: Колос, 1968. -224 с.

89. Никольский В.В. Основы иммунитета сельскохозяйственных животных. -М.: Колос, 1968.

90. Новиков Д.Н. Справочник по клинической иммунологии и аллергологии.- Минск: Беларусь, 1987. 280 с.

91. Ноздрачев А. Д. Физиология вегетативной нервной системы. Л. «Медицина», 1983.

92. Оганова Е.А. Вопросы эмбриогенеза сычуга крупного рогатого скота. Труды Ереванского зооветинститута, вып. XXIII, 1969.

93. Олейник И.И., Пономарёва А.Г., Царёв В.Н., Бородинов Н.В. Экспериментальное и клиническое изучение иммунорегулирующего действия лизоцима. Иммунология. 1982, 3. - С.78 - 81.

94. Осидзе Д.Ф., Простяков А.П. Факторы резистентности организма животных // Ветеринария. 1990. - № 3. - С. 33-35.

95. Павлов И.П. Лекции о работе главных пищеварительных желез (Полн. собр. соч.-Т. 2, кн. 2, С. 8-216), М., Л., 1951.

96. Палазник Н.В., Никитин Ю.И., Гусаков В.К. Активность пищеварительных ферментов в сычуге телят в ранний постнатальный период. В кн.: Физиология и биохимия сельскохозяйственных животных (Сборник научных трудов ЛВИ, Вып. 64, С. 73-77), Л., 1980

97. Петров Р.В. Иммунная система: гормоны и медиаторы // Проблемы эндокринологии. Т. XXI. - 1985. - С. 13-17.

98. Плященко С.И., Голубицкий А.П., Трофимов A.M. Продолжительность подсосного выращивания телят на молочных фермах. Сб. тр. Белорусского НИИЖ. Минск, 1983, т. 24.-С. 136-141.

99. Плященко С.И., Сидоров В.Т. Естественная резистенция организма животных. Л.: Колос, 1979. С. 184.

100. Плященко С.И., Сидоров В.Т. Стрессы у с.-х. животных. М.: Агропромиздат, 1987. - 192 с.

101. Подкопаев В.М., Шишков В.П. Диагностика, лечение и профилактика болезней новорожденных телят. М.: Колос, 1967.

102. Покровский В.И. Приобретенный иммунитет и инфекционный процесс /Покровский В.И., Авербах М.М., Литвинов В.И. и др. М.: Медицина, 1979.-280 с.

103. Попов Н.Ф. (1958) цит. по Н.Н. Гапонов (1963).

104. Пронькин Д.Е. Физиологическое действие препаратов аминокислот на функциональное состояние и неспецифическую резистентность организмателят / Автореферат диссертации кандидата биологических наук -Н.Новгород, 2002

105. Раевский К.С. Георгиев В.П. Медиаторные аминокислоты. М.: Медицина, 1986.

106. Садовникова М.С., Беликов В.М. Применение аминокислот в промышленности и фармакологии. Москва, 1977.

107. Сидоров В.Т. Естественная резистентность телят при желудочно-кишечных заболеваниях. Генетическая устойчивость с.-х. животных к заболеваниям. М., 1983. - С. 30-31.

108. Сидоров В.Т., Смелова А.П., Романова A.M. и др. Показатели неспецифической реактивности организма телят молочного периода в условиях комплекса. Межвед. сб. трудов Белорусского НИИ ж-ва. -Минск, 1982, вып. 2 С. 74 - 78.

109. Сидоров М.А. Основы профилактики болезней новорожденных телят и поросят // Ветеринария. 1967. - № 2. - С. 10-12.

110. Сиротинин Н.Н. Эволюция резистентности и реактивности организма.1. М.: Медицина, 1981. С. 9.

111. Смирнова Г.В., Музыка Н.Г., Закирова О.Н., Октябрьский О.Н. ,Роль глутатиона при стрессах у бактерий Escherichia Coii // VI Международная конференция «Биоаксидант» Тезисы докладов. М. РАН, 2002. - с. 534535

112. Соколовский В.В. Вопросы медицинской биохимии. 34,6 (1988). с. 2-10

113. Соколовъ А.П. К анализу отделительной работы желудка собаки. Дисс. СПб, 1904.

114. Солдатов А.П., Эпштейн Н.А., Эдель К.Е. Биологические свойства и основы рационального использования молозива коров. Обзорная информация. М., 1989, с. 17-28

115. Урбан В.П., Найманов И.А. Болезни молодняка в промышленном животноводстве. М.: 1984, С. 207.

116. Учитель И .Я. Макрофаги в иммунитете. М.: Медицина, 1980. - 199 с.

117. Федий Е.М. Физиология пищеварения животных в онтогенезе. В кн.: Возрастная физиология животных. М., «Колос», 1967.

118. Федоров Ю.Н. Иммунопрофилактика болезней новорожденных телят./ Ветеринария, 1996, №1 i, С. 10 11.

119. Фишзон-Рысс Ю.И. Современные методы исследования желудочной секреции. Л., «Медицина», 1972.

120. Фомина Н.М., Селезнёв С.Б. Возрастная анатомия лимфоидных органов птиц и млекопитающих в сравнительном аспекте./ В сб.: Эколого-экспериментальные аспекты функционирования породной и возрастной морфологии домашних птиц. Воронеж, 1989, С. 147 - 150.

121. Фурдуй Ф.И. Стресс и адаптация сельскохозяйственных животных в условиях индустриальных технологий / Фурдуй Ф.И., Штирбу Е.И., Струтинский Ф.А. и соавт. Кишинев: Штнинца, 1992. - 223 с.

122. Хайрутдинов X. Сычужная секреция крупного рогатого скота. Ташкент, 1967

123. Харитонов Л.В. , Кузнецов И.Л. и др. Влияние препаратов аминокислот на функциональное состояние и неспецифическую резистентность организма телят . Труды ВНИИФБиП, т.41, Боровск,2002,с.83-96

124. Харитонов Л.В., Курилов Н.В. Секреторная функция сычужных желез и ее связь с уровнем рубцовых процессов у овец. В кн.: Труды ВНИИФБиП, Т. VII, - С. 61-68, Боровск, 1970.

125. Харитонов Л.В., Курилов Н.В., Севастьянова Н.А. Возрастные изменения сычужного сокоотделения и рубцового пищеварения у телят. В кн.: Труды ВНИИФБиП, Т. VIII, - С. 149-159, Боровск, 1969.

126. Харитонов Л.В., Харитонова О. В. Роль аминокислот в регуляции сычужного пищеварения у телят. Тезисы доклада научной конференции: Теория и практика использования биологически активных веществ в животноводстве. Киров, 1998. С. 85 87.

127. Хруцкий Е.Т. О нервно-гуморальной регуляции моторной деятельности многокамерного желудка у телят и ягнят. Автореферат, Чкалов, 1950.

128. Хруцкий Е.Т. Образование, развитие и функциональная деятельность желудка жвачных животных в эмбриональном периоде. Труды Оренбургского отделения Всесоюзного физиологического общества им. И.П. Павлова, вып. 3, 1964.

129. Чумаченко В. Резистентшсть тварин i фактори що впливають на И стен. Ветеринарна медицина Украши. 1997, 3. - С. 23 - 25.

130. Чумаченко В.Е. Определение естественной резистентности и обмена веществ у сельскохозяйственных животных / Чумаченко В.Е., Высоцкий A.M., Сердюк Н.А., Чумаченко В.В. К.: Урожай, 1990. - 136 с.

131. Шандрак В.И. Естественные иммуностимуляторы в повышении продуктивности крупного рогатого скота // Новые аспекты участиябиологически активных веществ в регуляции метаболизма и продуктивности сельскохозяйственных животных. Боровск, 1993. - С. 145.

132. Шлыгин Г. К., Василевская JI. С., Игнатенко JI. Г. Влияние глутаминовой кислоты и глутатиона на секреторную функцию желудка. Бюллетень экспериментальной биологии и медицины, 1988, 10, 405-408.i

133. Шлыгин Г.К. Парентеральное питание и пищеварительная система // Успехи физиологических наук, 1981, - № 3, - С. 45-61.

134. Шлыгин Г.К., Василевская JI.C., Игнатенко Л.Г. Влияние глутаминовой кислоты и глютатиона на секреторную функцию желудка // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины, 1988, - № 10, - С. 405-408.

135. Шортанова Т.Х. Гуанидовые соединения в мозгу при гипероксии // Известия СКНЦ ВШ Естественные науки, 1973, - № 3, - С. 70-72.

136. Шугалей B.C., Андреев М.Л. Защитное действие мочевины при гипероксии. В кн.: Влияние повышенного давления кислорода на организм. Ростов н/Д, 1965.

137. Щетинов Л.А. Анатомические компоненты камер желудка крупного рогатого скота красной степной породы в онтогенезе. В кн.: Научные исследования по животноводству и птицеводству (Научные труды Омского СХИ, Т. 128, - С. 15-22), Омск, 1975.

138. Яковлева В.И. Расшифровка структуры лизоцима. Природа. 1966, 6. - С. 58-63.

139. Якубке Х.Д. Ешкайт X. Аминокислоты, пептиды, белки. Москва. «Мир», 1985.

140. Anderson I.C. // Cell Immunol. 1977, 37 №1.Р.145 - 155.

141. Ash R.W. Stimuli influencing the secretion of acid by abomasums of sheep // J.

142. Physiol.-1961,-Vol. 151, P.-185-207.

143. Bell F.R. The mechanisms controlling abomasal emptying and secretion. In Digestive Physiology and Metabolism in Ruminants. Lancaster, 1980, ed. Ruckebuch Y. & Thivend P., England: MTR Press Ltd, P. 81-100.

144. Bell F.R., Green A.R., Wass J.A.H., Webber D.E. Intectinal control of gastric function in the calf: the relation ship of neural and endocrine factors // J. Phisiol. - 1981, - Vol. 321, - P. 603-610.

145. Bell F.R., Mc Leay L.M. The effect of duodenal infusion of milk, casein, lactose and fat on gastric emptying and acid secretion in the milk-fed calf // J. Physiol. 1978, - Vol. 282, - P. 51-57.

146. Bell F.R., Razig S.A.D. Gastric emptying and secretion in the milk-fed calf // J. Physiol. 1973, - Vol. 228, - P. 499-512.

147. Bell F.R., Razig S.A.D. The effect of some molecules and ions on gastric function in the milk-fed calf// J. Physiol. 1973 b, - Vol. 228, - P. 513-526.

148. Bell F.R., Webber D.E. Gastric emptying and secretion in the calf on duodenal infusion of tryptophan, triptamine and 5-hydroxytryptamine // J. Phisiol. -1979,-Vol. 291,-P. 413-423.

149. Berridge J.G., Davis J.G., Kon P.M., Spartling F.R. The production of rennet from lifing calves // J. Dairy Res. 1943,- Vol. 13, - P. 145-161.

150. Bieling R. Resistenz und Immunitat. In: Handbuch der allgemeinen Patologie. - Berlin, Springer, 1956, Bd 1. - S. 601-603.

151. Clini E., Cremona G., Campana et al. Production of endogenous nitric oxide in chronic obstructive pulmonary disease and patients with cor pulmonale // Amer. J. Respir. Crit. Care Med. 2000, - Vol. 162, - P. 446-450.

152. Cooke A.R. Localisation of receptors inhibiting gastring emptying in the gut // Gastroenterology, 1977, - Vol. 72, - P. 875-880.

153. Curtis D.R., Johnston G.A.R. Amino acid transmitters in the mammalian central nervous system. Ergebl. Physiol., 1974, 69, 98 - 188.

154. Debas H.T., Grossman M.I. Chemicals bathing the oxyntic gland area stimulate acid secretion in dog // Gastroenterology, 1975, - Vol. 69, - P. 651-659.

155. Elwin C.-E., Uvnas B. Distribution and local release of gastrin. In: Gastrin. Los Angeles, 1966, Ed. M.I. Grossman, University of California Press.

156. Fruhmann G.I. Endotoxins a leucocyte mobilization. «I. Reticuloendothel Soc».- 1972.-V. 2-P. 62-79.

157. Geers I.I. Colostrum et immuniteit Utrecht. 1984. P. 203 - 209

158. Gerschenovitch J.S., Krichevskaja A.A., Shugalei V.S. The Arginase and Guanidinobutyrateureahydrolase of Rat Brain. // Ensym. Boil. Clin. 1969, -Vol. 10,-P. 181-186.

159. Grosskopf J.F.M. Some factors affecting the secretion of abomasal juice in young dairy calves // Ondersterpoort vet. Res. 1959, - Vol. 28, - P. 133-141.

160. Grossman M.I. (1967) цит. no L.M. McLeay, F.R. Bell (1980).

161. Guilloteau P., Paruelle J.L., Mathieu C.M. Utilisation des proteins par le veau preruminant. III. Influence du replacement des proteins du leit par celles du poisson sur la vidange stomacale // Ann. Zootech., 1975, - Vol. 24, - P. 243253.

162. Guilloteau P., Toullec R. Circadian changes in the abomasal secretion of the preruminant calf// Reprod. Nutr. Develop., -1983, Vol. 23 (6), - P. 967-977.

163. Guillottau P., Le Huerou-Luron I., Blum J.W. Regulatory peptides in the young ruminant // Procc. Soc. Nutr. Physiol. 1994, - Vol. 3, - P. 289-290/

164. Henschel M.J., Hill W.B., Porter J.W.G. Proteolysis of milk and synthetic milks in the abomasums of the young calf (abstract) // Proc. Nutr. Soc. 1961,- Vol. 20, P. xli-xlii.

165. Ivy A.C., Javois A. J. Contributions to the physiology to gastric secretion. V. The stimulation of gastric secretion by amino acids // Am J. Physiol. 1924-1925,-Vol. 71,-P. 591-603.

166. Kim I. Schmidt F., Langhols H., et al Colostral milchaufnahme neugeborener Kalber in der MutterKuhaltung// Geitshzzift. F. Tierzuchtung, guchtungs biologie. 1983 Bol. 100, №3. S. 187-195.

167. Konturek S. J., Rayford P. L., Thompson J.C. Effect of pH of gastric and intestinal meals on gastrig acid and plasma gastrin and sn responses in the dog // Am J. Physiol. 1978, - Vol. 233, - P. E537-E543.

168. Kornell L. On the effects and mechanism of corticosteroids in normal and neoplastic target tissues findes and hypothesis with a review of information on intracellular steroid receptors in general.// Acta Endocrinol., 1973, vol. 78, 7, p.45.

169. Lincoff W.D. Triglis R. P. The bovine Kemplement System. In: The ruminant immuns system (Ed, by Butler I.E.), №4, 1: 1981, p433.

170. Mc Leay L.M., Titcheu D.A. Effects of intraduodenal unsaturated fatty acid on gastric secretion and motility in sheep. In: Proceeding Combined Societies Meeting, part 3, Nutrilion // N.Z. Med. J., 1976. - Vol. 83. - P. 89.

171. Meyer F., Senft В., Manteuffel U. Der Einflub einer restriktiven Futterung auf Parameter des Blutserums Wachsen der Rinder.// Luchtungskunde, 1974.- Bd. 46, y.5 S.339 - 349.

172. Najarian J.S., Harper H.A., «Am J. Med.», 1956, - Vol. 21, - P. 832.

173. Oldendorf W. The blood brain barrier. Exp. Eye. Rec. 25 Syppl., 1977.

174. Pierzynovski S. G. Sjodin A. Perzpektives of glutamin and it derivate as feed additives for farm animals. J. Anim. And Feed Sci:,1998, 7, 79-91.

175. Roberge A., Charlonneau P.L. Metabolisme de rammoniague II. Dishibutionde Pammoniague (NH3) de l'arginine, de la cetrulline et de Puree de differ unts tissue de rats // Rev. Can. Biol. 1969, - Vol. 28, - P. 1-8.

176. Rubin M. Aminoaciduria renal transport. - Amer. S. Dis. child., 1968, V. 115, 169-177

177. Schoolars J., Barlow C., Roth L. The Penetration of carbon 14 urea into cerebrospinal fluid and various areas of the caf brain. // J. Neuropatch. 1960, -Vol. 19,-P. 216-221.

178. Sershen H., Lanchin G., Lajtha A. Cellulas and capillary transport and the regulation of cerebral amino acid pools. // Problems of Brain Biochemistry. -1977,-Vol. 127,-P. 16-28.

179. Siebers R. Characteristics of gastric secretion in suckling calves // Acta Physiol. Pol. -1978, Vol. 29, - P. 581-588.

180. Tizard I Veterinary Immunology. Philadelphia, London, Toronto, 1987, p. 483.