Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Влияние прегнадиена и его сочетаний с другими гормональными средствами на воспроизводительную способность самок

ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Влияние прегнадиена и его сочетаний с другими гормональными средствами на воспроизводительную способность самок"

На правах рукопжсв

о ÍQ4S

.V J Г , - ' I

Е23БСРОДОВ Николаи Васшьавзч

УДК 636.2.081/082:615.361

ВЛИЯНИЕ ПРЕШДИШ. И ЕГО СОЧЕТАНИЙ '

с далии гогиашыши свдсшш вл

ВОСНРШЗВОДНТЕШШ) СПОСОБНОСТЬ CÀUOIC

03.00.13 - фазжогогня человека в жив отдых

Автореферат

диссертации на сопсканно ученой стопоки доктора бпоготгчооких наук

Белгород - 1996

Работа внполнена на кафедр» фазжологин к фариакологжж Белгородской государственной сельскохозяйственной акедеижж.

Научнн4 хонсультант: заслуженный деятель надо Рв доктор биоло1 ческнх наук профессор Г.И.Горшков.

Офкцжахьш» оппоненты: доктор бяологжчеокжх наук профессор Ю.Д.Клжнскжй;

доктор <5жологжчеожах наук профессор Ю.Н.ШажЗерев;

доктор *5*адогжчеоких неук профессор В.В.Кослфев.

Ведущее предприятие - Воронежский государственны! аграрный университет.

в <2*2 Завдгеа состойся ^сссы^ 1996 г. в /О часов

на заседании специализированного ученого совета Д X20.62.0I црж

Белгородской государственной сельскохозяйственной академик.

Адрео: 309103, Белгородская область, Белгородокий район,

ооо. Майский, Вавилова, I, Сельхозакадемии

С диссертаций южно ознакомиться э библиотеке академии. Автореферат разослан "/$ " ХЭ96 г.

Ученый секретарь специализированного совета црофесоор

В.Г.Нютников

I. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

1.1. Актуальность теми. Эконоыичаское и со-1Льнов развитие страны в большой степени зависит 07 обеспече-

1 населения доброкачественннаа я в достаточной количестве )дуктами животноводства. Выполнение этой задачи возможно лниь I внедрении в яявотноводство высоЕОйнтенсшэннх технологий, Дарующихся на специализации производства. Однако при иктенсифи-52П ППЗОТПОЕОДСтаа ВОСПРОЯЗЕОДЕТОЛЬПЛЭ ¡^ЦЗДЦД ЗЕВОТНЫХ ОЕЕЗЦ-отся пошиенньша, сервис-период увеличивается, возрастает чнс-даей бесплодия. В связи о этим неизмеримо возрастает потребить в эффективных методах предотвращения не благоприятного воз-Зствия факторов промышленной технологии на здоровье, продук-зность г воспроизводятвльнуп способность животных.

Современные исследования в,области физиологии, зндокрпно-гаи, гинекологии значительно расширили наши представления о эцессах, сопровоздавашх становление половой функции самок, связи с этим актуальное значение приобретают исследования, правленные па разработку п внедрение в црактягу мзропрШй55, е среда многих мер важным звеном является использование гор-нальных препаратов.

С целью восстановления расстройств воспроизводительной акции у коров предложены различные гормональные средства, также их сочетания с другшга биологически активныш препара-ма (Б.М.Завадовский, 1945; А.П.Студенцов, 1953; И.Ф.Заянчяовс-й, 1964; Д.Д.Логвинов, 1964; П.И.Шаталов, 1965; В.С.Шипилов, 68; А.А.Сысоев, 1971; Г.АЛерешкишов, 1972; Т.А.Кононов, 76; Ю.Д.Юшнский, 1977; В.А.Акатов, 1977; Н.И.Додянцев, 1978; Н.Шамберев, 1979; 14.И.Прокофьев, 1983; А.И.Гладкова, 1986; Г.Нежданов, 1996,а др.).

г

Как доказывают физиологические исследования гормональных орвдохв, стероидные соединения способны через высшие центры нейро-эндокринной регуляции создавать в крови животного повышенный уровень гонадотропных гормонов, способствующих росту фолликулов н овуляции.

Одним из гормональных средств, перспективных для коррекц восцроизводительной функции сельскохозяйственных животных, яв ляется прегнадиен, синт е зированный в Харьковском НИИ зндохри» логин и химии гормонов. Он рекомендован для восстановления эс ральних циклов у женщин и как оральный контрацептив. Его црви муцество веред другими гормональными средствами по отсутствии сев сибклжзнрувдюс свойств на повторное введение (чего нельзя оказать, например, о СХК), выраженное специфическое действие, несложная технология промышленного производства (в сравнении с простагландинами), а также относительная дешевизна послужил] основанием для более глубокого изучения его физиологической аз тивности по регуляции воспроизводительной функции самок.

1.2. Ц е л ь и задачи исследования. Цахьл ваших исследований было выявление особенностей механизм; влияния прегнадаэна на воспроизводительные функции самок с таь чтобы обооновать возможность применения его отдельно или в сочетаниях о другими биологически активными средствами для упрах ления половой цикличностью у коров. В задачи исследований входило: - обоснование оптимальной дозы прегнадиена, способной корректировать гормональный фон в крови коров, имеющих функцио нальные расстройства яичников, до физиологического уровня, характерного для стадии возбуждения подового цикла, и стимулировать течку, охоту и овуляцию;

~ изучение влияния прегнадиана на сократительную активность тки у лабораторию: животных и коров;

- выявление характера изменений Н-холинолитшсом половой «личности у саыок;

- определение гормонального статуса крови на фоне внключ«-я Н-холинореактивных систем;

- изучение особенностей действия гормональных средств, овмадявна, дигятола) на фоне блокад?! Н-хотагоредзптороз з ясненив роли Н-холинореактивных систем в регуляции половой кличности;

- выявление возможных гистоморфологичоских изменений в го-талиях коров после инъекций прегнадиена;

- изучение биохимического, в т.ч. гормонального статуса овн при действии прегнадиена;

- экспериментальное обоснование возиохкостя включения югнадаена в схему обработки коро?-доноров с целью супэровуля-д;

- разработка показаний к пртдэнэнн» прегнадиена душ коррек-ж дисфункций яичников, предупреждения задержания последа и ла-¡ния коров при эндометритах;

- совершенствование техники нехирургичесяой трансплантации ¡брионов у коров-доноров.

1.3. Научная новизна и ценность а 6 о т ы. Впервые изучено влияние црегнадаена на воопроизво-стелыша функции у коров и объяснены процессы, ледащпо в осно-> этого влияния. Доказана эффективность прт.еие:шл препарата ш нормализации половой цикличности при дасфункиги яичнзкоз, тают для синхронизации охоты а повышения качества эыбргояов )в супорокуляции коров-доноров.

ч

Впервые изучены ыоюряиа натки, гистоморфологические иэме нения в репродуктивных органах к биохимический статус крови пр дейотвик прегнадиена.

На основании экспериментальных исследований предложены но вые способы гормональной коррекции воспроизводительной функцш и торможение сократительной активности матки у коров.

По данным изменений гормонального статуса крови, гисто-структуры яичников-, продолжительности отдельных фаз полового цикла, сроков проявления охоты в результатов суперовуляции на фоне действия гормональных средств и Н-холинолитика определен роль холинореактивных оистем в регуляции половой цикличности, что позволяет считать обоснованными пути поиска модуляторов половых циклов среди нейротрошгах средотв, .вмешивающихся в синоптические процессы, которые обеспечивают прямую и обратнух связь центральной нервной системы о гонадами.

Предложены также усовершенствованные инструменты для неи рургического извлечения эмбрионов и оригинальные методы регнм рации сокращений матки и биопсии ее эндометрия.

Новизна материалов диссертационной работы подтверждена 8 авторскими свидетельствами и патентами, выданными Госкомизобр< тений. СССР и патентным ведомством России.

1.4. Практическое значение работ Разработаны способы применения с целью индукции половой охоты восстановления половой цикличности, нарушенной персистенцией желтого тела или гипофункцией яичников, одного црегнадиена (оплодотворение 74,0 и 67,ОХ соответственно) или его сочетании с хорионическим гонадотропиноы человека (оплодотворение 70,5 и 70,0? соответственно), сывороточным гонадотрошшом и эстрогеном (оплодотворение 85,0 и 83,3? соответственно). Предлагается применять прегнадиен для синхронизация охоты, профилакти

вдерхания последа после родов совместно с витамином А а )Д-ф2, при лечении эндометритов совместно с дигитолом и биоса-т.

Практические аспекты работы отражены в методических реко-эндациях и пособиях: "Трансплантация эмбрионов крупного рога-эго скота" (Ыосква, 1990), "Основные направления улучшения непроизводительной функции коров" (Москва, 1990), "Нарушения згуляшш воспроизводительной функции у коров и их фармаконор-экпия" (Ыосква, 1991), "Стероиды пролонгированного действия ри восстановлении полового цикла у животных" (Белгород, 1995).

1.5. Апробация работы. Материалы диссертации или представлены на Еоесоюзной научно-практической конференции Эндокринная система организма и вредвне факторы внешней среды" Ленинград, 1987), Международной конференции "Биологические ос-овы высокой продуктивности сельскохозяйственных животных" (Бо-овск, 1990), Всесоюзной научной конференции "Повышение продук-ивности сельскохозяйственных животных и совершенствование мер орьбы с болезнями в условиях интенсивного ведения животновод« а и создания фермерских хозяйств" (Харьков, 1991), научно-прак нческой конференции "Биотехнология и воспроизводство в животно одстве" (Горки, 1991), 6-й Межгосударственной межвузовской на-чно-практической конференции "Новые фармакологические средства i ветеринарии" (С.-Петербург, 1994), отчетных и научно-произ-юдственннх конференциях при Белгородском сельскохозяйственном [нституте (Белгородокой сельскохозяйственной академии) по пла-ювой тематике НИР (Ш гос. регистрации 01.88.0125985;

II.86.0125978), на расширенном заседании кафедры физиологии и •армакологии Белгородской сельскохозяйственной академии (1996;.

1.6. Структура и объем работы. Диосер-'ация изложена на 416 страницах машинописного текста, содержит

68 таблиц а 53 рисунка. Структурно она состоит из введения, глав обзора литературы, описания материала и методов исследований, результатов исследований а их обсуждения, выводов и прахт* ческих предложений. Список использованной литературы включает 602 работы, в ток числе 199 отечественных авторов.

2. МАТЕРИМ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Исследования проведены в 1985-1995 гг. В работе использовг но 24 белые шшш, 250 белых крыс, 26 кроликов, 3 собаки, 777 по ловозралнх телок г коров. Подопытные животные содержались в лаборатории кафедры и на физиологической комплексе сельхозакадеми иди в производственных условиях - в учхозе "Центральное", на фермах ¿0 "Красная Нива" и "Новая жизнь" Белгородского района и -колхозе им. Дзержинского Яковлевского района Белгородской области.

Алгоритм проведенных наследований представлен на схеме.

. Изучался прегнадаен, синтезированный в Харьковском НИИ э. «ринологии и химия гормонов я выпускаемый в форме 0,3#-ного масляного раствора. Другие препараты были заводского производст ва.

Острую и хроническую токсичность прегнадиена определяли на белых мышах и крысах. Препарат вводили перорально. Учитывали из менения з поведении животных, массу тела, выживаемость, а также гематологические показатели, морфологические и гистоструктурные характеристики внутренних органов, в т.ч. яичников и матки. При этом использовались общепринятые методы исследования, описанные в руководствах В.Н.Никитина.(1956), А.Я.Альтгаузена (1962), В.С.Роюгаа (1968), М.Д.Рыловой (1956), И.В.Саноцкого (1970), О.Н.Елизаровой (1971) и других.

Гестагенная активность проверялась на кроликах и учитывалась по тесту Клауйерга.

АЛГОРИТМ ИССЛЕДОВАНИЯ

I.ИСХОДНЫЕ ЭКСПЕРИМЕНТЫ

Скршшнг.

Первичный - сопоставление химической структуры в раду рестагенов. Общее действие. Раздражающе* влияние. Острая и хроническая токсичность. Эмбриотоигичность. СпещфлескиЗ: ¿¿>У\

угеротропное влияние на ч

(иеггорика,био-половую ( ■ ]0 потенциалы) Г Л цикличность ^^

гЦЕЛВБЫК ЭКСПЕГИМВНТЫ Вы!«у отпали«* дни - 5 мф пот«

Коррекция половых циклов

гестагенное влияние

О од

Положи янхжроюггъ

О®

Суперовуляция (стенде рдаая схема)

©

Анафродизия .. / 11ерсистентное желтое тело

Оф^х 5- О ©о

ФШ" схема) яичников *

¡инхронизацияоЗ^гт ^

о V и V

Выяснение иехжшпмя дейетая

уктура: Супероэуляцл я Нормальные циххы Анэстральные циклы

"0@©я о о- Оо

Мзрфо (гисто) струетура: гона л. эндометрия, внутренних органов

Суги^ювуляция

Г|рМ1ШЛиОШ глпус Ш1Ж1МЫ к^п

Прогестерон, эстрадной, ЯГ, кортиэол, тестостерон, пролак-гин

Нормал)

М|( Димпи а

Эритроциты, лейюоииты, лейюограика; гаюгж&тн, глюют; белок и его фракции, ююгоы. иммуноглобулины; общие липияы, фосфолн! илы, холестерол, триацилгяицерияы; беггери11идная.и лнэоиимная аэегивностъ сьяоротта^.

ДТО®

З.ПРИКЛЛДНЫВ ИССЛЕДОВАНИЯ

Профяталмка задеркиш* вослед а

д АСА _ Биосам

Плацебо

витамин А

ол

©

А

Йодвисмутсульф?тщ биосан

Пенициллин Стрептомицин

Ихтиол Оюзитоцин

Публикации в научной литературе - 21

4. ВЫХОД Авторсютх свидетельств и патентов - 8

Рекомендаций по применению в производстве 4

СГ"1

Обозначен

прегнадиен прогестерон - -мепрегенола ацетат ^ -эстрофан Н-Н-холиношт«е

ни*

Л. -хорюничесгай гоиааот-ппкн а -сывороточный гонадой ,;ТИН Д -яигитоя Ф-фопликупии П-литуитрин

г

Биоэлектрическую и сократительную активное» матки регис: рировали при помощи специально сконструированных устройств (а. 1386165 и 1625485) и прибора УБИ-4 с самописцем КСП-4 и Н-308. Утерограммы получены на кроликах, собаках и коровах.

Половую цикличность у крыс определяли с учетом частоты встречаемости течки, продолжительности э с тральных циклов (ЭЦ) и их фаз - проэструса, эструса, метэструса (ЫЭ) и диэструса (ДЭ). По этим фазам выводили циклограмму. В опытах использовались как нормально цитирующие, так и анэетралыше животные.

Влияние прегнадаена в различных дозах и его сочэтаний с другими оредствами изучалось на половозрелых телках либо коровах: нормально циклирупцих. используемых для синхронизации охо ты V супэровуляции, имеющих дисфункции яичников (персистентное желтое тело, гипофункция), а также больных послеродовыми эндометритами. После введения препарата определяли время прихода в охоту, количество осеменений, процент плодотворно осемененных, индекс осеменения. Проводили биопсию эндометрия и овариоэктомш Для проведения биопсии использовали биотом собственной конструз дии (а.с. 1493253). Из извлеченных яичников и биоптата готовил! гиотопрепараты, которые окрашивали гематоксилином и эозином и изучали под микроскопом.

Суперовудяцию вызывали по стандартной схеме (французская методика). Ддя вымывания эмбрионов применяли устройство нашей конструкции (а.о. 1015890). Количество овулировавших фолликулов определяли при ректальном исследовании и после овариоэкто-мии. Качество вымытых эмбрионов оценивали по пятибалльной системе. Использовалаоь среда Дюльбакко.

Влияние прегнадаена сопоставлялось о прогестероном и меп-регенола ацетатом, Прегнадиен в целевых экспериментах применялся отдельно или в сочетании о такими средствами, как эстро$ан,

ионический или сывороточный гонадотропин, дигитол, фоллику-[, питуитрин, а в прикладных исследованиях - с АСД-$2, вита-юм А, дигитолом и биосаном (а.с. I60I833).

Для выявления ролл Н-холинороактивных систем в регуляции . совой цикличности, суперовуляторных процессов а действии ¡гнадазна и дигитола применяли' бензогексоний в форме 2,5%-'о раствора в дозах 0,1 мл/гол каждые 6 ч внутримышечно на ияхении 15 сут для крыо и 10 мл/гол 2%-аого раствора для >ов внутримышечно каждые 6 ч в течение 3 сут.

При нормальной и нарушенной половой цикличности, синхроня-гаш охоты и суперовуляции, на фоне выключения Н-холинореак-¡ных систем и после применения прегнадаена и сочетаемых о i других средств изучались биохимические показатели крови.

Содержание в плазме крови прогестерона, эстраднола, ЛГ, ¡тгзола, тостостеропа а прозактгна определяла радиоаммуноло-¡есккм методой (наборы КИТов фирмыр Jot-in*, Франция-Италая; сов А.Д. и др., 1988).

Содержание в цельной крови гемоглобина и глакозы, в ез цша - обукх лнпидов, фосфолшшдов, холестерола и триацил-шеридов, в сыворотка - белка и его фракций, иммуноглобули-!, бактерицидную к лизощшлув активность определяла общэпри-•ыми методами, описанными С.П.Кулаченко, 3." Коган (1979). В ¡отэ использовались аминокислотный анализатор ААД-381 (произ-icxao ЧССР), аппарат (камера) для электрофореза, 4ЭК.

Исследования крови на содержааие гормонов проводили в )Ьковском НИИ эндокринологии и химии гормонов, на другие био-шческие показатели - в лаборатории биологических коследова-t Белгородской государственной сельскохозяйственной академии.

Цифровые данные, полученные при выполнении исследований,

рораоотагш статистическими методами в описании М.Д.Беленького (1963). Сравнительный анализ между вариантами опытов проведен по ¿-критерию Стывдента. Достоверными считались различия при р^ 0,05.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1. Общее действие и токсичность прегнадиена

После однократного перорального введения белым мышам прегнадиена в дозах 2,5; 5 и 10 г/кг массы тела гибели хивотнь не наблюдалось. Их внешний вид, поведение и масса тела в конце наблюдения (на 14-е сут) достоверно не отличалась от контроля.

При пероральном введении прегнадиена самцам и самкам белы крыс (по 8-10 гол. в группе) в дозах 0,2; 2 и 5 ыг/гол через каждые сутки на протяжении двух месяцев гибель отмечена лишь у 3 самок из 8, получавших дозу 5 иг/гол. Остальные' животные по внешнему виду, поведению и масса тела не отличались от контрольных, который тем же путем параллельно вводили изотонический раствор натрия хлорида. Не выявлено каких-либо характерных изменений гистоструктуры печени, почек, селезенки, надпочечников, сердца и легких. У крыс, получавших препарат в дозе 0,2 и 5 мг, обнаружены существенные функциональные изменения в яичниках: почти полностью отсутствовали характерные дан контрольных самок пршаорднальные п созреваяде фолликул», встречались лишь едшшч ные атретические фыдакулы; количество гхолтых тел было намного больше, чем в контроле; отмечались слабо развитая патерствциаль ная основа яичников, резкая гиперемия сосудов, местами очаговые кровоизлияния.

На гистосрэзах матки подопытных крыс эндометрий выглядел утолщенным, имел складчатость и множество железистых крипт. Ииометрий, как в у контрольных крыс, был слабо выражен, но в

н

I толще встречалась отдельные халознстнэ образования. Крове-¡ныв сосуда всех слоев матки значительно расширены.

В семенниках подопытных крыс отмечалась незначительная цержка сперматогенеза (зрелых сперпнев иепьпш, чей в коитрол»:

При изучении состава крови (гемоглобин, эритроциты, лейко-■н; лейкограима) после двухмесячного применения прегнадиена ¡уммарных дозах 6, 60 н 150 ыг на крысу отмечено статистачэс значимое (р < 0,05) увеличение содержания гемоглобипа лишь дозы 60 мг. В остальных случаях различия с контролем не под-до дались статистически (табл. I).

Посла однократного перорального введения прегнадиена кро-сам в дозах 0,0125; .0,025; 0,05; 0,1; 0,2; 0,3 и 0,6 мг/гол третьи сутки явная гестагенная активность по Клаубергу обна-швалась от дозы 0,0125, сильная - от 0,05-0,1, резко выра-шая - от 0,2 мг. Через 7 сут явно выраженная активность ротировалась у большинства крольчих от дозы 0,1 мг. Спустя сут она оставалась очень слабо выраженной даже от больших з.

3.2. Половая цикличность у крыс и ее регуляция

3.2.1. Влияние Н-холинолитика

У нормально цинлирувдих крыс в среднем за 15 сут наблэдв-1 частота встречаемости течки была 3,33, продолжительность - 4,96, П+Э - 1,87, МЭ+ДЭ - 3,03 сут.

Выключение Н-холшшре активных систем у этих же крыс ас. I) вызывало изменение цикличности: уменьшалась частота гречаемости течки н количество ЭЦ доходило до одного у 83,4%, рвый ЭЦ после начала инъекций бензогексония удлинялся и увешивалась продолжительность межтечкового периода; у 16,оа-к за время наблюдения половые циклг отсутствовали, во втором

Таблица I

Морфологически! состав перш£ерической хровж нрнс после двухмесячного применения прегнадиена

Показатели 1 Контроль -. .тоэдарата В.ЛРЭ»___

. ■ !. ! 0,2 мг/гол ! 2 мг/гол ! 5 мг/гол

Эрятроцктн, клж/мм3 8,4*7^2,46 8,56±0,18 8,10^0,41 8,32*0,13

Гемоглобин, . Е,10±0,20 15,30±0,20 Ш,10±Р,23* 14,80*0,23

Лейжоцжтн, тыс/мм3 16,37±0,67 18,57±1,33 16,41±1,03 Г7,15±1,13

Лейкограмма,

базофялы 0,4±0,Ю 0,5±0,10 0»5±0,Ю 0,4^0,10

эозинофилн 4,9±0,92 3,8±0,72 4,4^0,62 3,8±0,41

нейтрофилы

палочкоядерные 3,Ь0,31 3,1±0,41 2,8±0,41 2,6±0,41

сегментоядерные 19,9±1,13 21,111,13 -20,8±1,64 21,0^1,85

лимфоциты 69,4*1,74 69,5±1,74 6Э,Х±1,64 70,2±1,33

моноциты 2,2±0,20 2,0±0,51 2,4*0,41 2,0±0,31

Примечание: в каждой группе исследовано по 10 животных; различия между опытными группами ж контролем по всем показателяв_1шали низкую статистическую значимость (р>- 0,05), за исключением рмюшюЯвия -» п п^

Рис. I. ВЛИЯНИЕ Н-ХШШНОЛИТИКА НА ЭЦ У КРЫС С РЕШЯРНШ ЦИТИРОВАНИЕМ

половом цикле у 50% нарушалась синхронность проявления Э ( >■ 1,0 оут).

При спонтанной анафродизии, как и следовало ожидать, ас 15 оут наблюдения ЭЦ не регистрировались. После выключение Н-холинореактивных систем происходили следующие изменения: восстанавливались ЭЦ, продолжительность и фазовая структура которых не имела достоверных различий с контролем (рис. 2); течка появлялась у всех крыс на 3-й сут от начала введения Н-холинолитика, т.е. при высокой степени синхронности; время до начала первой течки было даже короче, чем у нормально цик ЛИруЮЩИХ ЖИВОТНЫХ. ОДНаКО НО ВТОРОМУ ЭСТрусу СИНХРОННОСТЬ ОТ' сутствовала у 33,4£ крыс. Количество ЭЦ доходило до двух за период наблюдения.

На способ восстановления воспроизводительной функции у нецишшрувдих самок с помощью выключения Н-холинореактивных систем получено положительное решение на выдачу патента за * 94020596/15.

»

3.2.2. Влияние прегнадаена

После'инъекции прегнадаена крысам при анафродизии отмеча лись существенные изменения (рис. 3). Появились ЭЦ. Частота встречаемости течки составила 2,0*0,0. ЭЦ продолжался в среда 7,5*1,06 сут, или на 5С$ больше, чем у кнтактных самок. Время протекания П+3 и ii+Д составило 1,63*0,27 и 5,5*1,05 сут соответственно.

Первая течка наступала через 5,83*1,06 сут.

Индукция прегнадиеном появления астральных циклов у нецш лнрувдих крыс сопровождалась проявлением одного полового цикл» за исследуемый период, синхронность отсутствовала ( >. 1,0 оут] в первом эструсе у 33,3, во втором - у 16,6$ самок.

Рас. 2 . ВЛИЯНИЕ Н-ХОДИНОЛИТИКА НА- ЭЦ КРЫС СО СПОНТАННЫМ НАРУШЕНИЕМ ЦИКЛИЧНОСТИ Обозначения как и на предвдущш рисунке

! Су га I ..

£ / 1Г 14 И & 11 № В ! 7 6 Г В г / / г 3 У 5 6 7 9 3 ю п 12 13 1¥ »Г

лик.. )

2 Й" <¿39

3

Ч

Г

6

Иг то, [ЯП 1 г пп* '(ИТ 1ИР П|И етг пр< 1ГЯ злиенг

- .1 1

Рис. 3. ВЛИЯНИЕ ПРЕШДИША НА ЭЦ КРИС ПРИ СПОНТАННО! ОТСУТСТВИИ цикличности

Обозначения те хе

, п

Пойле инъекции прагнадиена к блокаде Н-холинореактивных систем у нркс с анафродизией (рис. 4) ЭЦ тоже восстанавливались, но частота встречаемости течки была несколько pozo (2,17*0,18), чем при действии одного прегнадиена. Продолжительность ЭЦ составила 7,0+0,71 сут, или превышала физиологическое значение на 40£. Время проявления П+Э и М+Д равнялось 1,62+0,27 и 5,42*0,53 сут соответственно. При этом меньше, чем на фойе действия одного прогвадяена, приходилось времени в основном на П+3 (на II,5Í). тогда как на М+Д оно уменьшалось всего лишь на 1,Ъ%.

Появление первого зструса отмечалось через 4,33*0,71 сут.

Наступившая цикличность характеризовалась наличием одного полового цикла за исследуемый период у 83,4$ самок, отсутствием синхронности ( > 1,0 сут) в первом эструсе у 33,3, во втором -у IS.SS самок.

3.2,3. Влияние дагитола

После кнгекшгя датктола крнсан с акафродтаией (рис. 5} чао тота встречаемости течкз за 15 сут увеличивалась па 2о,СЙ з срак нгаяи с действием црегнадиева з составила 2,5*0,13. ЗЦ продолжался б среднем 6,92+0,38 сут, щ дольше, чем по принятии фвзколо-гзчеохям. нормам, па 33,4$, по короче, чп на фоне прогяадаена, на 1,1%. Время на П+Э достигало 2,5+0,32, на Ы+Д - 4,08*0,89 сут. П+Э проявлялись бо.гзг! продолхятельноо время (на Sfi,6¿), а период М+Д оказался короче на £5,02, чаи ах прегаадаена. Sepsuü огхрус .наступал в среднем через 1,83+0,18 сут, иди раньше чем от прегнадиена на 68,1%.

Индуцированная дятеголш кшапнвсть тела следа tuuo локзда тели: у 66,6? крно за вретля наблюдения проявлялся один половой ипкл; синхронность появления первого эструоа у всех крыс: били ь пределах I су г.

При воздействии дагитола в сочетании с блокадой Н-холино

тк к

/Г 14 и 11 II /О 9 % 7 6 Г V Ъ 1 / / г 3 Ч £ 6 7 ! $ 10 п 11 13 ч /г

у-т

1

X

V

Г

6 а фон!

Ис ¡сод НО! с зет от те н . (ей ЬТТ ИИ эгт ад :вн \ В

м КЛ] те ш Н- кш ОШ ЦК :иниых сжст ш

Рис. 4. ВЛИЯНИЕ ПРЕПОДИЕНАНА ФОНЕ Н-ХОЛИНОЛИТИКА НА ЭЦ КРЫС ПРИ СПОНТАННОМ ОТСУТСТВИИ ЦИКЛИЧНОСТИ

Обозначения те же

Pao. 5. ВЕШНИЕ ДИГЕТОЛА НА. ЭЦ КРЫС ПРИ СПОНТАННО:!

ОТСУТСТВИИ ЦШИЧ1ЮСШ

Обозначения ie ао

го

реактивных оистш у крыс с анафродизгей появлялись половые ш лы (рио. 6). Частота встречаемости течки бала 2,5±0,13 или та нал же, как после применения одного дигитола. ЭЦ продолжался : среднем 6,3±1,06 сут, или на 8,6^ короче. Время проявления П+1 сокращалось до 1,62+0,18, пли было короче на 35,2;!. На М+Д пр: ходилооь 4,78±1,24 сут, пли на 17,1$ больше,, чем при действии одного дигитола.

Первый эструс появлялся в средней на 3,0+0,53 сут, т.е. позке на 1,17 сут, еле на 64,0%,чзм при действии дигитола в

условиях интактных Н-холипорвактивию:- систем.

1 j

Влияние дигитола на фона вшихтакия Н-холянореактивных оистем характеризовалось проявлением одного ЭЦ за исследуемый период у 83,4$ сшдок при о-гсутстваг синхронности ( 1,0 сут) в первом эструсо у 33,3;? самок.

3.2.4. Обобщенно

Проведенные исследования показали, что нрагнадаоя так жа как и дагатол, способен восстанавливать половые циклк у нецнк-ларухщах самок. Однако частота встречаемости течки прк действии црегнаднепа оказалась резе, à продолжительность ЭЦ дольше за счет растягивания стадан уравновешивания (М+Д) и сокращена времени на подготовку и проявление зструса.

Влшшкэ дагвгола частично было опосредовано через Н-холи-вореактгваыо система, Тан, поело блокады Н-холпнорецепторов частота встречаемости течки не изменялась, но общая нродолаи-тольность 'ЭЦ сокращалась .за счет уменьшения времени проявлена) стадии возбуждения (П+Э). Стадия se уравновешивания (М+Д) задергивалась. Следовательно, реализация влияния дигитола на половое возбуждение, возмогно, не полностью, но в значительной мора осуществляется через Н-холинореактявныз системы.

Рно. 6. ВШШЕ ДИГЙВДА НА ФОВЗ Н-ХОШОШИКА НА Ш КРЫС ПРИ СПОНТАННОМ ОТСУТСТВИИ ЦИКЛИЧНОСТИ

Обозначения тэ жэ

гг

О роли Н-холинореактивных систем южно судить по сому, что их выключение восстанавливало половые циклы у спонтанно нециклшрупцих крыо. Причем частота встречаемости течки на эхом фоне мало уступала таковой в груша, получавшей дигитол или его сочетание с бензогексонием. Продолжительность же ЭЦ была короче (на 15,в£), чем от дигитола, но .только за счет сокращения стадии возбуждения. Поскольку бензогексоний относит ся к негорыоналыгаи средствам, можно полагать, что спонтанная задержка половых циклов у подопытных животных имела нейроген-нув природу,

3.3. Влияние прегнадиена на моторику матки

У крольчих, получавших перорально прегнадавя один раз в день в дозе 0,08 мг/кг, ва протяжении 5 сут сокращения матки заметно ослабевали уже после первого введения препарата: снижалась амплитуда и уменьшалась частота особенно кратковременных сокращений. Продолжительность периодов моторной деятельное ти вначале не изменялась, а к окончанию срока применения препа рата даже несколько увеличивалась. Однако реакция на подкожное введение 0,5 ЕД питуитрина полностью сохранялась.

От доз 0,4 ж 0,8 мг/кг на протяжении всех 5 сут црименени отмечалось более выраженное угнетение моторики. Оно проявлалоо и на фоне предварительного трехкратного (через каждые сутки) введения фолликулина (500 ЫЕ/кг) и сохранялось еще 3-4 сут после отмены прегнадиена.

7 коров начиная со вторых суток от начала инъекций прегнадиена в дозе 0,0В мг/кг отмечено углубляющееся снижение ам-ллитуды к в меньшей мере замедление ритма сокращений. После од нократной инъекции депрессия моторики длилась в среднем 4 сут. К атому времени .еократихелышя деятельность восстанавливалась,

г затем нарастала и я ?-ч сут регистрировалось ее усиление

как при спонтанной охоте.

Харгмар дойстбей прегяадкепа по ¿аменяяоя как при испытания ого з стадии покоя, так к при спонтанной охоте.

ч

7 й-ззстрадьных норов доминирующая частота бкозотеютавоз доходила до 19 Гц, а амплитуда одиночного ДЦ - до 360 миВ. После прегяадиена (0,08 мг/кг) частота биопотенциалов составляла 2 срздясм 20 Гц, амплитуда - 240 мкВ яри час-юге юс сладоги-ния не более 6 за сек.

Таким образом, прегнадиен оказывает выраженное угнетающее влияние как на спровоцированную эстрогеном, так и на спонтанно поддерживаемую моторг.ку матки. На основания этих данных предложен "Способ торможения сократительной деятельности матки у самок" (патент Р5 1781864).

3.4. Изучение содержания в крови гормонов, регулирующих половую цикличность

3.4.1. У нормально цитирующих крыс и прк индуцированном Н-холинолитиком нроэструсе

Содержание в крови прогестерона, тестостерона и эстрадно-ла по фазам полового цикла, а также при спонтанной анафродизии (НЦ) к после введения нециклнруициа крысам бензогехсоняя предо -тавлено в табл. 2.

Как вядво из таблицы, в $азу диэструса по сравнению с про-эструсом отмечалось повышенное содержание в крови прогестерона и сниженное тестостерона и эстрадиола. Такая же картина наблюдалась л дря спонтанной анафроднэии.

На фоне первого проэструса, индуцированного выключением Н-холанореантивных систем у нецшшгрупдих самок, в кров1 оо~' деряалось .прогестерона в 4 раза меньше, чем без введения бен--

Горюнаклнй статус кровж самок крно

Таблжц» Z

! !Статнстя-!____Горкэны,_нмоль/д_ _ _ _ |____ _ _0хноиенже_

g'j воаЙВ l^tJnporeoTepoHj^ jg" j Ь j ц , т

1 Интактныв, проэотруо H .m ' 13 34,16 7,19 13 2,05 . 0,24 12 1,15 0,12 - 0.33 0,56

2 Интактныв, К- •', ' II m pI-2 14 37,69 ' 6*53 >0,1 • 15 1,12 <0,002 13 0,68 0,09 <0,01 0,18 0,61 -

3 Интактныв. джэогруо . А- M /ГУ |l-3 » 13 87,63 5^33 <0,05 <0,05 13 1,80 0,19 >0,Г <0,02 10 0,78 0,09 <0,05>0,1 >0,1 0,09 0,43 К

4 ^нтактнне, . к* Ii Ht- pI-4 7 57,46 25,31 =»0,1 >0,1 1« -.4* 0,23 0,12 < 0|05>0,1 <0*01 >0,1 >0,1 0,11 . 0,45

5 Введение Н-холжно-джтхка HQ, проэструо индуцированный fU" 11 m- §1-6 ?4-5 6 14,13 3,12 <0)02 6 0,74 0,06 <0,02 <0,001 6 0,08 0,28 >0,1 >0,1 0,69 1,32

Примечание: А^Р - прогестерон, Т - тестоотвроа, Ег - эстрадиоа, НЦ - неадклирувднв

2Г

зогексоння, а эстрадиаха - в 1,5 раза больое; соотношение между эстрадиолои и прогестероном увеличивалось в 6 раз и даже в 2 раза превышало таковое у нормально цитирующих крно в фазу проэструса.

Увеличение уровня эстрадазла в условиях выключения Н-холи-нореак?:лвш£Х систем скорее всего связано с активацией ферментативных систем, участвующих в биосинтезе эстрогенов. Подтверждением этого служат сназааао содьрг&шя тестостерона ц прогестерона, являющихся, как известно, предшественниками эстрогенов.

Таким образом, выключение Н-холннореактивных систем способствовало восстановлению нарушенного ЗЦ и синхронному наступлении течки у крыс. Проэструс у крыс, обработанных бензо-гексонжен, характеризовался соответствующим для предовулятор-ного состояния гормональна фоном.

3.4.2..У коров поело прэгнадаена а его сочетаний с другими средствами

Как известно, фуякпЕональшгэ нарушения з органах репродуктивной системы являются результатом дисбаланса гормонов, контролирующих половой панл. Поэтому дая целенаправленной регуляции воспроизводительной функции важное значение имеют знания гормональных изменений в крови под воздействием средств, предназначенных для коррекции этих нарушений.

Исследования показали (табл. 3), что однократная инъекция прегнадиена (5 мл/гол 0,Энного раствора) коровам с перснотент-ным желтым телом яичнилов индухзруот зыброс зстраднола э кровь и снижает содерзание здесь прогестерона. На 8-е сут после его введения эстрадиола было 'в 7 раз больше, а прогестерона в 2,3 раза меньше, чем в исходном состоянии. Существенно (в 2 раза) увеличивалось и содержание в крови кортизола. Характер этих изменений при меньших различиях сохранялся до 20 оут.

Табзида Ъ

Гормональные нзмэеэеея в крова коров с лэрсзстентшш гелтнм телом

Показателя

! ! * После введения через

I До введения Г " 7 ~ 8 ста Т ! цршщрата !----— _ _ л. - ,— £ ь?!----1

Л__1 . в .средней Л.,, .р ! в д-рэдвеи 1 р 1

_ _ 20_суг__

в сроднен 1

Прогесторон, пг/кя

КОРГЕЭОЛ, ПГ/И?

Эстрадоя, шуш ЛГ, ВД/ш;

Посла текли прогестерона

4037,5+976,01 1144,75+778,29<0,05 3,79+ 0,53 11,95+ 3»02<0,05 139,75+10,22 75,75+ 7,950,01 0,75+ 0 13 1,655 О,63>0,2

1068,00+441,46<0,05 3,649+ 1,58*0,5 67,25" 4,33<0,001 0,565 0,15^0,5

1359,66+826,44?0,1 5,182+ 0,84т0,2 86,50+*10,27<0,02 1,825 1.46Ю.5

Псоле яеъохци ША

Прогестерон, пг/глд КортЕзол, нг/кз Эстрадаол, пг/кл Ж1, Ш/ил

2557,6+1073,92 1652,89+536,24 >0,5 5,671+ 1,18 6,523+ 0,85>0,5 109,0+" 11,59 90,50+ 19,98 >0,5 1,1+ 0;29 1,03+ 0*29 >0,5

756.88+265,48 >0,1 6,385+ 1,51 >0,5 82,50+ 7,83 Я),I 2,25+ 0,42 <0,05

617,30±235,10 >0,1 ЗД50± 0,49 >0,1 75,70+ 3,73<0,02 1,72± 0,62 .>0,5

К

Прогестерон, пг/ел Кортжзол, НГ/1ЛД Эстраднол, пг/мл ЛГ, Ш/ш

После ЕЕьекаЕнГйрегаадяена

4103,3 4.555,16 3350,5 +663,92 >0,5 1773,6 +355,47 <0,01 1869,0 +272,02 <0,01 3,92т 1,19 7,97+ 1,401к0,05 8,13+ 1,47 <0,05 6,13+ 1,68 >0,5 69,2 + 4,11 65,3 + 4,88 >0,5 493,3 +199,73 <0,05 167,0 + 11,69 <0,001 3,22+ 0¡41 2,76+ 0,42 >0,5 3,375 0,21 >0,5 3,09± 0,37>0,5

Л7

В параллельно проведенных исследованиях с применением маарегенола ацетата (5 мл/гол 0,12-ного раствора) и прогесто-рсна (Ю мл/гол 1.»~ного раствора) тоже отмечалось снижение содержания прогестерона в крова • однако не было такого как от прошадшша подъема уровня эстрадаола, д&'хе если учесть по »тому гормону более высокие исходные показатели. В содержании кортизола, за исключением первых двух суток при действии прогестерона, таете не отиечено заслуживавших внимшшя изменений.

Й^^ГЯО , ЧТО урчяггеядо ШКШбиЖОМ ныЛййСА

эстрадаола на 8-е сут связано с его первоначальным действием па гипоталамус и снижением здесь синтеза Гп-РГ. Затем по мере снятия прзгнадненового прессинга по механизму обратной связи синтез Гн-РГ усиливался, происходила стимуляция фолликулов и интенсивно нарабатывался зстрадиол, который поступад в кровь.

В цсследукцЕХ опытах изучалось содержанке гормонов в кро-юслв иводовкк пузгпгипзнг. я сочтнпя о ХГ н да?кхс«<гл.

При ржофутакя яшашоэ дрогнадпеа вводак д?аяда: по 5 ;.'л/гел с язтсрпхзж £ На 13-о су-г тем ке короз^< дояол-шггелхке шъеиероведя вдгсряоштао 2С00 ЕД/гея го рзежпе скоро 1'онадотропина. Получеьяко результаты' представлена з ?р<5л. 4

Как видно из таблицы, через 6 сут после введения грэгка-даена отмечалось повышение содержания, в крова эстрадаола а 3,3, тестостерона - з 2 раза. 3 но" су? гсг.»? повторного введения преиздхеиа. эстрадкола содержалось ек-з больше (в 7 раз к исходному), уровень тестостерона снизился до исходного.

Дополнительное введение ХГ способствовало сп;о болыве^у выбросу з кровь эсградкола. Его концентрация чзроз 5 су? превышала предыдущее значение в 2 раза. Одновременно с этим увеличивалось содержание в кровд а тестостерона (в 3 раза к исходному)-

Тайлица 4

Содержание горюнов в I мя шшзкн крови коров о гипофункцией яичников после зшьекдаи' прагнадвена и ХГ

Вводамнй препарат 1лнь&ш LÄ !тес=Рон.| эсда. !препарата1 крови Июхазатеяа! ^^ J шоль ! Пролакмн, I isce I ЛГ, j use

Прегнадаен : I I Яг ■ X $9 8 2,090 0,240 6 648,0 ' 120,360 7 83,420 21 . 8 . 6,420

Прегнадиен 6 6 в- si 8 4Д70 0,310 <0,001 •8 2X62,500. 672,0 < 0,001 ' 5 81,400 25,030 >0,1 . .8 6,360 1.370 >0,1

ХГ 13 13 п. si Ï" 8 2,170 0,200 ^0,1 <0,001 0,05 7 5611,0 1331,833 . <0,001 < 0,05 >oîi ■ 5 68,0 24,390 > 0,1 >0,1 >0,1 7 9.750 2,170 >0,1

18 & X - SX Ь-ч 7 -6,420 1,080 <0,001 <• 0,05 < 0,001 11371,0 3412,600 <0,001 >0,1 ^0,1 7 . 89,280 3i;550. >0,1 ^0,1 > 0,1 3,280 0,610 *0,05 <r 0,05 >0,1

В динамика содержания пролактина различий с исходными и посла-дупдикз данными не выявлено. До 1Г отмечалось'достоверное снижение концентрации на 18-е сут наблюдения.

При лерспстентнои'желтом толо яичников (табл.51 ) реакция на двукратное введение прегиадиеНа была в основном такой же, как и у коров с гипофункцией яичников, за исюттониеи изменений концентрации тестостерона (она не повышалась после первой инъекции препарата, а, наоборот, вмела тенденцию к сяикению).,

После дополнительного введения ХГ (2000 ЕД/гол) и дагитода (4 мл/гол 0,7^-ного раствора) отатистическн значимым было только продолгащееся снижение с о дергания в крови тестостерона.

Содержание гормонов определялось также при сочетании двукратного введения прагнадиеда (через 3 оут) с сывороточным го-надотропином в дозе 4000 ЕД/гол и эстрофанои в дозе 2 ил/гол, инъецируемых на 7-е сут после 1-й инъекции прэгнадаеяа; однократного введения прегнадиена с эстрофанои (на 7-е гут) ила зстрофансм и дигитолом з вышеуказанных дозах (на 7-е сут).

Наилучшие показатели оалодотворяеиооти были получены в варианте, где прегнадивн применялся дважды, & через 7 сут после его второй инъекции вводился еще и ХГ. В этом случае повидалось содержание не только эстрадиола, но и тестостерона, что, очевидно, объясняется стимуляцией хорионичеоким гонадотро-пином фолликулогенеза и активацией биосинтеза эстрогенов, для которах тестостерон может быть предшественником.

Повышенное содержание кортизола на 8-е оут после инъекции одного прегнадивна свидетельствует об активизации глвкокорти-коидной функции коры надпочечников, что обычно происходит в критические дни лизиса желтого 'тела и в начале астрального цикла. После включения в схему обработки дополнительно к пгтна-диену на 3-й оут гонадотрошша и простагландина биосинтез

Таблкца 5

Содерагнме горюнов в I sa пдазш крова норов о перскотентннм желтым телом после жпьекцав прегнедеена, 2Г я дагнтола

¡ggS ¡Ä VSSSST препарат ¿препарата! крова !показателя! вмоль ! Эотраднол, пыоль { Пролактзш, j I ш j . лг. ккв

Прегнадхеа I I & X S3с 6 2,87 . 0,80 7 1004,2 246,0 7 76,57 14,64 8 9,81 2,42

Прегнаджен 6 6 1 SX Рг-6 6 1,67 0,58 >0,1 8 4362,5 976,8 >0,1 7 71,5 31,92 >0,1 8 9,81 2,42 >0,1 ■

ХГ + диштож 13 13 п-X Sx Pr-r 5 1,79 0,509 >0,1 >0,1 8 4280,0 1071,84 >0,1 >0,1 4 160,0 23,0 >0,1 < 0,05 7 7,67 1,51 >0,1 >0,1

18 . _ _ Er X Sx p'1 3 0,45 0,10 -¿0.02 -s 0,05 < 0,05 < 0,001 8 . 1438,57 268,7£ >0,1 . с 0,02 с 0,05 <с 0,02 7 97,28 26,27 >0,1 >0,1 >0,1 >0,1 6 5,95 0,92 >0,1 >0,1 >0,1 <0,05

эстрогенов не стимулировался, х их концентрации на 8-е сут била сниженной в 2,3 раза с одновременным падением уровня кортизона.

3.5. Биохимические изменения в крови после применения прегнадиена и его сочетаний с другими средствами

Белок и его фракции, лшшды, бактерицидная и лизоцишая активность сыворотки крови нзучалиоь при дисфункциях яичников у коров в исходном состояния и на 7-е, 15-е и 23-и сут после применения прогестерона, ША, прегнадиена и его сочетаний о хо-рионичесгаш гонадотропином и эстрофаном.

В лучшем варианте по восстановлению половой цикличности я проценту плодотворно осемененных коров (852) после однократной инъекции прегнадиена при персистентном желтом теле яичников в общем белке сыворотки крови повышалась доля гаюла-глобулинов за счет альфа- а бвта-фракций. По лишдному обмену наиболее характерным было снижение содержания триацилглицеридов и в ряде вариантов холестерола. Общая резистентность существенно не изменялась.

При гипофункции яичников заслуживающих внимания изменений в белковом и дипидном спектре сыворотки крови после введения прегнадиена в сочетания о ХГ не наблюдалось.

Данные по биохимическому анализу крови можно считать обоснованием для утверждения' о том, что ни известные прогеотагены, ни прегнадиен или его сочетания о другими гормональными средствам в исследованных нами дозах не оказывают отрицательного влияния на белковый и лшшдный обмен, не снижают неспепифичес-кую резистентность организма коров и могут применяться при функциональных нарушениях яичников без каких-либо других ограничений, кроме степени их специфической эффективности.

зг

3.6. Изучение возможности вклйчения прагнадиена

и других средств в схему обработки коров-доноров

Во всех опытах за основу была взята стандартная (французская) схема обработки коров с целью суперовуляции: 4-кратное ежедневное введение ФСГ, начиная с 10-х сут полового цикла, в дозах 12, 9, 7 и 4 мг и однократное - ПГ 2>2-альФа в Д°зе 0,5 мг на 13-е сут. Дополнительно или взамен ФСГ использовались в различных вариантах прегнадиен, дигитол или ХГ. В каждом варианте было по. 3 коровы. Осеменение проводили на 14-е, а извлечение эмбрионов - на 21-е сут ЭЦ.

Результаты исследования представлены в табл.6 .

Как видно из таблицы,- по количеству овулировавших фолликулов на I донора лучшей оставалась стандартная схема. Дополнительное введение црегнадиена с первой дозой ФСГ давало в среднем иа донора на один фолликул меньше, но качество полученных эмбрионов оказалось существенно выше. По качеству эмбрионов к стандартной схеме приближался вариант, где ФСГ на 4-й инъекции .заменялся диги.'олоы, но при этом число овулировавших фолликулов еще больше уменьшалось.

Сочетания црегнадиена с дигитолом или ХГ были неэффективными ни по числу овулировавших фолликулов, ии по качеству полученных эмбрионов.

Следовательно, в начальной стадии стимуляции фолликулоге-неза прегнадиен оказывал положительное влияние. Дополнительная же эстро(андро)генизация на фоне завершающегося влияния ФСГ и начавшейся лютеолизации мало изменяла ход суперовуляционного процесса. Однако пропуск инъекции ФСГ и замена его дигитолом или хорионическим гонадотропином оказались малоэффективными.

Для установления характера гормонального обеспечения су-

а

й

. р< ' w

I л °

¡НО г)

S Cl (i, î «fe}«

a

â

о

й

о

а

о

я

с: Г}! —

■у а п

!>' El о

оо и

ий§

« со о, «¡P.4

Si «

орчик

о«

§ S S

СО СО со

8

со

А

N M

О со

8

о

ю

о

«V

с-

см

CT со о о М ta

» »

со « г- со

M M M

о

ец

s

M Ю Ç! £4 О lOOftJ* o mí HI n

ми ùww rt w

toepilao ofco

ы I л n 1 m I л « i

Í4

ni Ö

£ !

© C9

M О

a

H

ы ü M

wo

и

оо

g W SJM

a

a a

6H

op h ri о « о, I

si*a вам sa

rariotjto

' S/**. г4.* -

Й rariotjto ra Mi Я m .....

HiO do Pid йога p<o rf о адяол И н (Цен инпйЯ дяойи

W и о п? о <з о I

SM ñ «и â 2 Э1-1 оЧЯН

l'J см

з4

перовуляционного процесса я выявления причин надой эффективности отдельных вариантов дополнений или замены. ФСГ мы определяли содержание в плазме крови обрабатываемых коров эстрадиола, прогестерона, кортизола и ДГ.

Результаты этих исследований по 3 вариантам представлены в табл.7. v

Как видно из представленных таблиц, от четвертых к девятым суткам полового цикла во всех группах коров наблюдались либо тенденция к снижению, либо достоверное снижение содержанка в плазме крови эстрадиола а ДГ. По прогестерону и кортизо-лу наблюдалась прямо противоположная картина. Эти данные полностью согласуются со сложившимися представлениями о том, что в пчрвке дна. после овуляции на месте лопнувшего фолликула идет развитие желтого тела, усиленный синтез лютеоцитами прогестерона и поступление его в кровь. Прогестерон подавляет секрецию и снижает частоту выбросов в кровь ДГ за счет ослабления чувствительности рецепторов гипофиза к гидоталашческим рилизинг-факторам. Он подавляет'также синтез, эстрогенов и способствует действию ЖЕГ {Sto/Mnuxüu /£.</„ 1971-, Sehort Я. В., i97Ъ > •

Ка третьи сутки после двух инъекций ®СГ изменения той же направленности щ?одолгагш нарастать: по прогестерону отмечалось повышение концентрации, по ДГ - снижение, кортизол и эст-радиол оставались на том же уровне. Введение в схему обработки дрегнадазна приводило к более существенному снижению содержания эстрадиола, уровень прогестерона повышался, по кортизолу и ДГ изменения были несущественными. В варианте о ХГ не отмечено изменений концентрации прогестерона,.кортизола и эстрадиола, но зато-происходил сильный выброс ДГ, .что можно связать с ослаблением прогестеронового "прессинга".

К моменту индуцированной половой охоты (на 14-е сут ЭЦ)

Таблица 7

Двнаьака содерзшяая горюнов в плазме вровх коров, подвергнутых суперовулядаа по стандартной охеда

! Ваятае проб кроха от начала половой охоты через

с _ 51У1 _: I: _ § сут::: :г: 1111,11101*11111

._| в среднем 1 в среднем ! р I в среднем ! р ! в среднем I р

Эетрадаол, лг/мл 348,00+112.74 245,00+68,94 =>0,5 223,50+27,42 >0,5 169,00+88,86<=0,05

Прогестерон, нг/ш 1,50+0,15 3,5(5 0,25 <0,01 5,80± 0,75 <0,02 1,40+ 0,76 >0,5

Корта зол, нг/ыл 8,43±1,65 12,10+1,97 >-0,5 12,05± 0,7В >0,2 12,47? 4,14>0,5

Ж? МЕ/мкл 0,87+0,05 0,55± 0,13^0,1 0,35± 0,06 <0,01 2,23± 1,41 <0,05

Дополнительно прегнадпен о 1-2 хньекдаей ФСГ

Эетрадаол, пг/мл 93,50*6,45 71,00+6,08 <0,05 28,67+8,09 < 0,05 64,67+3,67 <0,05

Пюмстврон, нг/м» 1,55+0,2 4,2350,64 <0,02 5,1340,77 < 0,02 1,35«),38>0,5

Кортлзол, нг/ил . 4,65+0,95 16,80+5,23 >0,1 11,4052,78 >0,1 11,20 Я,88<0,05

ТГТМЕДШЛ 0,47+0,01 0;3770,Ю ^-0,5 0;3930,Ю >0;5 2,19_«,71<0,05

Дополнительно Ерагнадаёя о 1-й инъекцией 5СГ + замена двух жвъекфй ФСГ на ХГ

Эстрадной, ПГ/щ 96,50+13.57 68,00+4,58 >0,2 63,67+18,89 >0,2 67,00+8,62 >0,2

Прогестерон, ,вг/ил 2,70+0,81 3,40+0,38 > 0,5 3.93т 0,82 >0,5 1,11*0,55 >0,2

^ризол, нг/кл 8,65^-0,61 12,10^0,95 <0,05 13,00+0.83<0,05 13,43+2,82 >0,5

ЛГТвд/цкл 0,41+0,04 0,35|0,04 >0,5 2,18*0,62 <0,05 1,80*0.30 <0,05

резко снижался уровень прогестерона (во всех вариантах практически до одинаковых значений), ЛГ было больше, чем в исходном состоянии, но менее всего в случае с применением ХГ. Кортизола содержалось во всех случаях больше, чем в начале цикла.

Отмеченные гормональные изменения перед началом половой охоты совпадают.с данными, полученными другими исследователями ( Mateó S.6.,id6Z; УСамрпал. ЛЯ., /066 ).

Изучение аминокислотного состава плазмы крови при суперовуляции показало, что у коров, предназначенных для провокации оуперовуляции, с 3-я по 10-е сут после спонтанной охоты аминокислотный соотав крови неоколько изменялся. Происходило достоверное снижение содержания лизина, треонина и аргинина и повышение фенилаланина н тирозина, что можно связать с перестрой- -кой обмена в процессе полового цикла.

После полного курса инъекций ФСГ и завершающего введения пррстагландяна уже через сутки от этих изменений осталось только увеличение содержания фенилаланиаа.

В последующие сутки ониаалось содержание лизина, тирозина и треонина, но на 16-е сут остались те se изменения только по треонину.

Следовательно, несмотря на несомненные перепады гормонального фона, в крови-поддерживался своего рода."аминокислотный гоыеостаз".

У коров, которым вводилась дополнительно прегнадиен и ди-гитол.с началом обработки достоверное уменьшение содержания было только по глицину. -По завершении обработки животных ФСГ и проетагландином и через 2-е сут после инъекции дигитола в аминокислотном составе крови происходили резкие имущественные изменения: каждой определяемой аминокислоты, без единого исключения, содержалось в 2-4 раза меньше, чем в начале ¡толового цикла

В группе коров, предназначенной дня изучения блокада Н-хо-линореактивных систем, с 3-х по 10-е сут цикла также не отмечалось больших изменений. Содержание лишь лейшша и пролина достоверно увеличивалось. По завершении обработки коров ФОТ и • простаглавдиноц и на 2-е сут после блокады Н-холинореактивных систем содержание всех изучаемых аминокислот, за исключением лейцина г аланина, снижалось в 1,5-2, а треонина в 3 раза. Однако на 3-я. сут щищенэнга Н-холлнодгтвка р&цгя сглаживалась: содержание аланина и лейцина бшго на исходном уровне, по треонину, фенллаланину и пролину оставалось недостоверное снижение, по остальным аминокислотам статистически значимое снижение не превышало 50-100^. После 4-й инъекции Н-холинолитика картина оставалась той же.

Таким образом, более низкие показатели суперовуляции в варианте с прегнадиеном и дигитолом по сравнению со стандартной схемой, помгмо разницы гормонального фона, объясняются также резким снижением содержания свободных аминокислот в крови, необходимых для роста и развития эмбрионов.

Яри изучении морфологии и гистоструктуры яичников установлено, что в варианте, где прегнадиен сочетался с ХГ, они были увеличенных размеров, но по масса не достигали контрольных. В яичниках обнаруживалось значительно меньше желтых тел, выявлены фолликулярные киоты. В то же врем морфо(гисто)структура яичников коров, обработанных по стандартной схеме, оказалась типичной для послеовуляционной фазы: увеличение в размерах, значительное количество желтых тел, васку ляризашя мозгового вещества и пр.

Состояние яичников после введения в схему обраоотки одного прегнадиена ничем не отличалось От контрольного варианта, но овулировавших фолликулов в них обнаруживалось меньше.

ы

3.7. Суперовуляция на фоне блокады Н-холинореактивных оистем

Суперовуляцию в контрольной и опытных группах вызывали путей обработки хоров ФСГ и простагландином по стандартной схеие. В опытной группе сразу по завершении обработки в течение 3 сут через каждые 6 ч инъецировался внутримышечно бензо-гексоний (по 10 ил/гол ¡¡Й-ного раствора). Проводили ректальное исследование коров, а на 3-й сут после индуцированной охоты -овариозктошш и биопсию эндометрия. Полученный материал фиксировали формалином, получали гиотосрезы, которые окрашивали по Мадлори и Моури.

Как показали исследования, после выключения Н-холинореактивных систем число овулировавших фолликулов в обоих яичниках было намного меньше (на 35,3£), чем в контроле, а качество эмбрионов хуже (средний балл 3,68 против 3,81).

На 3-й сут после индуцированной охоты эпителий эндометрия многорядный, подэпителиальная основа состоит из рыхлой соединительной ткани,очень насыщенной клеточными элементами. Эндометрий пронизан густой сеть» кровеносных сосудов. Железистые образования имеет активную секрецию.

На основании полученных данных можно полагать, что механизмы регуляции овуляционных и послеовуляционных процессов имеют звенья, замыкающиеся в недиаторных структурах холинерги-ческой природа. Скорее всего это будут Н-холинореактивные системы гипоталамуса или гипофиза, но не исключена здесь также роль блокады импульсов, идущих по вегетативным нервам к гонадам и матке и участвующих в регуляции трофики этих органов и переотройки эндометрия. Роль Н-холинореактивных систем может быть также опосредована через окситопин и вазопрессин, выделение ко- ,

торых в кровь, по общепринятым представлениям (М.Д.Машковскнй, 1993), блокируется.

3.8. Применение прегнадиена для синхронизации охоты

Телкам, достигшим физиологической зрелости, прегнадиен вводили внутримышечно в форме 0,3^-ного раствора одно- и двукратно в дозах 15 и 30 мл/гол в различные сроки от начала полового цикла.

Из всех испытанных вариантов лучшим оказалось однократно« введение препарата в доза 30 мл/гол на 11-15-е сут полового цикла. Спровоцированная охота наступила на 16-20-е сут, ее разброс по группе коров составил двое суток. По своим проявлениям охота ничем не отличалась от спонтанной.

Более раннее введение прегнадиена не только отдаляло срок от его инъекции до появления охоты, что вполне закономерно, но и увеличивало разброс индивидуальных показателей, т.е. синхронизирующий эффект терялся. То жэ происходило и в случаях с двукратными инъекциями меньшей и тем более удвоенно'З дозы.

Следовательно, коррекция сроков охоты у телок была болоо эффективной тогда, когда прегнадиен вводился на предполагаемом пике подъема концентрации в крови прогестерона. Здесь происходила своего рода суперпозиция прогестагенов, что по механизму обратной связи способствовало лютеолизации и пароходу стадии уравновешивания в стадию возбуждения. Прегнадиен оказался достаточно эффективным средством, ускоряющим этот переход.

3.9. Испытание прегнадиена кая оредетва

коррекции дисфункций яичников

Испытаны дозы прегнадиена 2,5; 5,0 и 8,0 мл/гол. По количеству коров, приходящих в охоту, и результатам их осеменения наиболее элективной оказалась доза 5 мл/гол (пришло в охоту

Но

87 £ коров, из них плодотворно осеменены ¿¡¡[6$). От инъекции 2 ид/год число коров, приходящих в охоту, оказалось меньше, время от введения препарата до плодотворного осеменения дольше, а процент плодотворно осемененных бил в 2 раза нихе. Более высокая доза (8 мл/гол) давала достаточный эффект, но в целом он не имел значимых преимуществ перед результатами однократной инъекция 5 мл/гол. После двукратного введения 5 мл/гол время от момента первой инъекции до прихода коров в охоту увеличивалось, а процент плодотворно осемененных снижался.

Более высокая, чем у известных прогестагенов, эффективность прегнадиена (655? плодотворных осеменений у коров с дисфункциями яичников) объясняется особенностями его химической структуры. На способ восстановления воспроизводительной функции у коров вами получено положительное решение на выдачу патента « 5012200/15. •

В последующем испытаны сочетания: одно- и двукратной инъекции прегнадиена с сывороточным гонадотрошшом, ХГ, дигито-лом и эстрофаном,инъецируемыми в различных сочетаниях. Параллельно также испнтывались прогестерон, мепрегёнола ацетат, эстрофан.

Наилучшим вариантом было стартовое введение прегнадиена в дозе 5 мл/гол, затем через 16 сут инъекция сывороточного го-надотропина и эстрофана. Процент плодотворно осемененных при таком сочетании гормонов при персистентном желтом теле, достигал 85,0, при гипофункции яичников - 83,3. Близкими х этому варианту по конечному, результату оказались сочетания двукратных инъекций прегнадиена о ХГ и прегнадиена с дигитолом и эстрофаном, но при этом процент плодотворно осемененных был существенно ниже (70,0 и 72,7). Уступали также сочетанию прегнадиена о сывороточным гонадотрошшом к эстрофаном по проценту

плодотворно осемененных отдельно взятые прогестерон <5—1058),

МПА (50-55#) и эстрофан (15,0-77,4р.

ЗЛО. Применение прегнадиена и его сочетаний о другими средствами для предупреждения задержания последа

Прегнадаен, введенный дважды (по 5 мл/гол) за 10-15 сут до отела, предупреждал задержание последа, что способствовало в дальнейшем проявлении более полноценной охоты и овуляции. Однако сроки от отела до плодотворного осеменения сокращались мало. Прегнадиен оказался менее эффективным, чем дигитол, эстрофан или комбинация витамина А с АСД.

Самым же эффективным было сочетание прегнадиена с витамином А и АСД. В группе, "где испытывался этот вариант, случаев задержания последа не било, индекс осеменения составил 1,0, плодотворное осеменение отмечено у 57% коров. По продолжительности времени от отела до плодотворного осеменения и проценту плодотворно осемененных коров такой вариант уступал только сочетанию витамина А с АСД без прегнадиена, и в этом случае задержание последа регистрировалось у '¿А,0£ коров против 74,2 в контрольной группе.

Эффективное применение прегнадиена с -целью профилактики задержания последа определило необходимость характеристики предшествующей отелам биохимической картины крови.

После трехкратного внутримышечного введения витамина А и \СД не выявлено каких-либо статистически значимых изменений в содержании гемоглобина крови, иммуноглобулинов и бактерицидной активности сыворотки. После инъекции дигитола существенно не изменялось содержание гемоглобина, общего белка и бактерицидной активности. Через 7 сут оотавадаоь повышенной только лизоцимная активность, а на 10-е сут повышался уровень глюкозы

в крови. В отличие от этих вариантов, прегнадиен практически не изменял биохимическую картину крови. Из всех изучаемых показателей отмечено лишь кратковременное уменьшение в сыворотке крови иммуноглобулинов (на 2-е оут) и повышение в крови глюкозы (на 7-е и 10-е сут).

Применение комплекса препаратов (прегнадиен, витамин А и АСД), дающее лучшие результаты по предупреждению задержаний последа, почти не отражалось на биохимическом статусе крови.

3.II. Применение прегнадиена в сочетании с другими средствами для восстановления половой цикличности при эндометритах

Изучена сравнительная эффективность йодвисмутсульфамида, биосана, сочетаний биосана о дигитолом, ихтиола с антибиотиками и окситоцином, прегнадиена с биосаном и дигитолом.

Восстановление половой цикличности у всех леченных коров, 100£-ная их оплодотворяемое» при индексе осеменения 1,0 и 1гамени от начала лечения до оплодотворения в среднем 20 сут . отмочено после применения прегнадиена в комбинации с биосаном и дигитолом. Без прегнадиена только о помощью биосана и диги-тола удалось восстановить половую цикличность и добиться опло-дотворяемости у 90% коров. Далее в убывающем порядке располагались биосан (80 и 70i соответственно), йодвисмутсульфамид (60 и 50£) и ихтиол в сочетании с антибиотиками и окситоцином (502 по обоим показателям). Почти в таком же порядке определялся и уровень естественной резистентности организма после проведенного лечения коров.

Высокую лечебную эффективность сочетания прегнадиена с биосаном и дигитолом можно объяснить политропностью их действия (антимикробное действие, стимуляция миометрия, коррекция

чъ

гормонального фона).

Таким образом, проведенные исследования показала, что прегнадиегг по своему гестагенному действию превосходит прогестерон и мепрегенола ацетат, способен восстанавливать половуп цикличность у анэстраяъных самок и синхронизировать половуп охоту. Будучи введенным в схему обработки коров-доноров, он улучшает качество извлекаемых эмбрионов. Его можно использовать в сочетании о другими средствами для профняактжн задержания последа и леченая коров при эндометритах.

Влияние прегнадиена на воспроизводителыше функции связано о изменениями содержания в крови прогестерона, эстрадиола, отчасти кортизола и других гормонов, ответственных за половую цикличность. Оно частично опосредовано через Н-холинореактив-ные системы. •

Прэгнадиен иа вызывает нежелательных изменений содерхшния л крови белковых и лияидпых метаболитов, не ослабляет естест-леш1у;о резистентность организма, практичзскн но токсичен п ио-?;ет применяться коровам s рокс.".эцдуе:.йк нами дезах и г.оказаш».-ях без каких-либо ограничений.

Экономический эффект, полученный в иаапх опытах и вычисленный по методическим рекомендация!! MCI СССР (1979), состав:^ 23 руб. чистой прибыли на I руб. затрат при соотношении цен 1935 года, чю ладного баяь&э, чем при использовании другими исследователями традиционных средств при тех ае показаниях.

ВЫВОДЫ

I. Прегаадиоц - малотоксичаий горпонадышй препарат с выраженными гестагеннюш свойствами, не вызывающий в'мосте его

кч

инъекции раздражения тканей. Его гестагенная активность у крыс проявляется через '3 сут после однократного перорального введения в дозе 0,0125 мг/гол.

2. Прегяадиен обладает пролонгированным действием. После однократного перорального его введения крольчихам в дозе 0,1 мг/гол гестагенная активность ослабевала только на 10-е сут. По гестагенному тесту он в 20 раз активнее оксипрогестерона.

3. С помощью датчиков давления и устройств дня снятия биопотенциалов зарегистрировано снижение прегнадаеном потенциала действия, амплитуды, частоты и длительности сокращений матки. Выраженное угнетение отмечалось на вторые сутки и продолжалось в среднем 4 сут, сменяясь активизацией моторики.

4. При исследовании яичников, Извлеченных оперативным путем (овариоэктомия) после инъекций коровам прегнадиека и прогестерона, выявлены сходные изменения гистоструктуры 'яичников и ярко выраженные пролнферативные процессы в эндометрии, соответствующие таковым цри спонтанной течке.

5. Для восстановления половых циклов, нарушенных в резуль-1ате дисфункции яичников, оптимальная доза 0,3%-иого раствора прегнадиена для коров составляет 5 мл/гол. После ее однократной инъекции в среднем через 15 сут проявлялась охота, наступала овуляция а плодотворно осеменялись 68,5^ коров при индексе осе-ыенения 1,0.

6. В стадии уравновешивания полового цикла в плазме крови коров содержалось эстрадиола 69,2, прогестерона - 4103,3 пг/мл; при спонтанной охоте концентрация эстрадиола повышалась в 3 раза/а прогестерона в 4 раза снижалась. На фоне спровоцированной прегнадаеном охоты концентрация эстрадиола возрастала в 7 раз, а прогестерона снижалась в 2,3 раза.

7. При отсутствии половой цикличности, связанном о задерж-

кой инволюции желтого тела, нрегнадиен вызывал более выраженное, чей прогестерон и мепрегенола ацетат, смещение соотношения между эстрадиолом и прогестероном (в пользу первого), что влекло за собою более высокий процент приходящих в охоту и плодотворно осемененных коров.

Эффективность коррекции гормонального фона была выше в весенне-летних условиях содержания коров, чем зимой.

8. При испытании на анэстральных коровах прогестерона, мепрегенола ацетата или эстрофана в отдельности, а также сочетаний прегнадиена с хорионическим или сывороточным гонадотропн-ном, дигитолом или эстрофаном, вводимыми в различные сроки, лучшим вариантом было стартовое введение прегнадиена, дополненное через 16 оут инъекциями сывороточного гонадотропина и эстрофана. Процент плодотворно осемененных коров составил при перснс-тентноы желтом теле яичников - Ь5,0, при гипофункции яичников

- 83,3.

9. Сочетание прегнадиена с хорионическим гонадотропнном повышало к началу индуцированной охоты у анэстральных коров уровень тестостерона в плазме крови в три, а эстрадиола в 18 раз. Добавление к этому сочетанию.дигитола или комбинация прегнадиена с хорионическим гонадотропнном и эстрофаном ухудшало гормональный статус в начале половой охоты.

10. Прегнадиен способствовал синхронизации охоты у половозрелых телок. Наиболее эффекту зной была доза 30 иг/гол, однократно вводимая подкожно на 11-15-е сут полового цикла.

11. Прегнадиен не вызывал нежелательные изменения в белковом и липидном обмене, не снижал неспзцифическую резистентность организма. После его введения коровам с 30-суточной стельностью изменения гормонального фона в плазма крови были назначит иными: на 5-е сут - выброс ЛГ, на 10-е и 20-е сут - повышение кон-

центрации кортизона, однако беременность ве нарушалась, в роды проходили нормально.

12. Дополнительное включение прегнадиена на первой инъекции ФСГ при стандартной обработке коров-доноров давало в среднем на один овулировавший фолликул меньше, но качество вымытых эмбрионов оказалось выше на 0,15 балла. Более позднее введение прегнадиена, а такие сочетание его с дигитолом ели хорионичес-ким гонадотропином снижало суперовуляционный эффект за счет меньшего выброса лют еиниаирупцего горюна к началу индуцированной охоты, уменьшения числа овуяировавших фолликулов и развития в яичниках фолликулярных кист. Сочетание прегнадиена с дигито-дсч также резко снижало содержание свободных аминокислот в крови, то несомненно отрицательно сказывалось на первых стадиях развития оплодотворенной яйцеклетки и эмбриона.

13. Инъекции прегнадиена за 10-15 оут до отела в комплексе о ЛСД и витамином А в 100£ случаев предупреждает задержание и*. чдаых оболочек в ватке при последующем плодотворном осеменении хоров к индексе осеменения, равном 1,0.

. 14. Прегнадиен, введенный однократно в комплексе с биоса-нои и дигитолом, через 20 сут восстанавливает половую цикличность в в последующем ошсодотворяемость у 100$ коров с острой формой гнойно-катаральных эндометритов.

15. На фоне блокады Н-холинореактивных систем у нормально цитирующих крыс уменьшалась частота астральных циклов; цри спонтанной анафродизии полностью восстанавливалась половая цикличность , содержание в крови прогестерона и тестостерона в фазу цроэотруса снижалось в 2-3 раза, а эстрадиола в 1,5 раза повышалось; провоцируемая дигитолом первая-течка задерживалась, а время активных фаз восстанавливаемых половых^циклов сокращалось.

16. Блокада Н-холкнореактивных систем на 14-16-е сут после

&

йодной обработки коров с целью суперовуляции (по стандартной схеме) зедерзивала овуляцию фодликулов. В яичниках среди желтых тел к моменту вымывания эмбрионов располагались созревающие фолликулы и кисты, число вымытых эмбрионов било меньше, а их качество ниве.

17. Проведенные исследования позволяют дополнить общепринятые представления о механизмах регуляции половых циклов и действии гормональных препаратов следующими ноекул даютг.га:

а) состояние анафродазии может быть связано С торможением цикличности, которое реализуется через Н-холинореактивные струк туры;

б) механизмы запуска суперовуляционных процессов и последующего развития эмбрионов включают звенья, замыкающиеся через медиаторнне системы холинергической природы;

в) в центральном влиянии дигитола имеется нейрогенний хо.чи нергический компонент, блокада которого влечет за собою сократи ние активных фаз полового цикла;

г) прямое влияние половых гормонов на гонада осуществляв) ся без участия Н-холинореактивных систем.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕД1ЮлШНИЯ

Гормональный препарат прегнадиен в форме 0,3^-ного масляного раствора рекомендуется к применению путем внутримышечных инъекций коровам:

- с целью создания гормонального фона в крови, характерно го для стадии возбуждения полового цикла, пндукцю: половой охо ты и овуляции при задержавшемся желтом теле и гипофункции нич ников (однократно в дозе 5 мл/гол);

- дня профилактики задержания последа однократно в донн 5 шг/гол самостоятельно или в сочетании с витамином А

kt

(300 тыс. MB/гол) и ЛСД-Ф2 (2 ил/гол), вводимых трехкратно о интервалом 2-е сут;

- для лечения клинически выраженных эндометритов (однократно в доэб 5 ил/гол) в сочетании с биосаном (20 мл/гол) и дигитолом (5 ид/гол);

- при гормональной обработке коров-доноров о целью повышения качества получаемых эмбрионов (5 мл/гол на 10-е сут полового цикла);

- при синхронизации охоты, обеспечивающей синхронность ±2 сут у 100* телок (введение на IO-15-e сут полового цикля в доае 30 мг/гол однократно).

Способность прегнадиена в дозе 5 мл/гол снижать сократительную активность матки и активизировать пролиферативные процессы в эндометрия может быть использована о целью предупреждения ранней эмбриональной смертности после искусственного осеменения.

Предлагаются оригинальные устройства для биопсии слизистое оболочки натки, катетеры для вымывания эмбрионов, датчики для регистрации сокращений и отведения биопотенциалов матки, защищенные авторскими свидетельствами я патентами.

СПИСОК (ЖЕДИКОВАШЫХ РАБОТ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Устройство для нехирургического извлечения зигот у животных //A.c. I0I5890. - 1933.

2. Использование радаотелеметрнческого устройства для регистрации состояния матки у коров //полочное и мясное скотоводство. - 1986. - JS 5. - С. 37.

3. Биотом для биопсии слизистой оболочки матки у коров //A.c. 1337058. - 1987.

4. Датчик для регистрации сокращений матки крупного рогатого окота /соавт.. Г.И.Горшков //A.c. I386IGo. - 1987.

«в

5. Применение дигитола при задержании последа и с целью выявления и лечения эндометритов у коров /соавт. Г.И.Горшков, Г.Н.Мартынов //Сборник научных трудов /Белгород. - 1988. -

С. 51-57.

6. Устройство для отведения биопотенциалов матки /соавт. . Г.И.Горшков //A.c. 1625485. - 1990.

7. Основные направления улучшения воспроизводительной функции коров /соавт. З.И.Савина, Г.И.Горшков //Методические рекомендации /Москва. - 1990.-19с.

8. Трансплантация эмбрионов крупного рогатого скота /соавт. 3.И.Савина, Г.Й.Гориков //Методические рекомендации /Иосква. - 1990. - 0. 4-8.

9. Влияние прогестагенных препаратов на гормональный фон, моторику матки и биохимический состав крови у бесплодных коров /соавт. Г.И.ХЪршков //Тезисы докладов международной конференции /Боровск. - 1990. - С. 4.

10. Способ восстановления воспроизводительной функции у бесплодных коров /соавт. Г.И.Горшков //Патент РФ 2050159. -Бгал. изобретений № 35. - 1995. - С. 154.

11. Способы восстановления репродуктивной функции при задержании последа у коров /соавт. Г.И.Горшков, М.Г.Еаманова, Г.Н.Мартынов //Методическое пособие /Белгород. - 1991.- 15с.

12. Восстановление воспроизводительной функции коров гормо нальнымз препаратами //Тезисы докладов Всесоюзной научной конференции /Харьков. -. 1991. - С. 83.

13. Изучение эффективности новых препаратов для коррекции воспроизводительной функции у коров /соавт. Г.И.Горшков, Ц.Г.Жааанова //Тезисы докладов научно-практической конференции /Горки. - 199I. - С. 9-II.

14. Биохимическая картина крова после инъекции бесплодным коровам гормональных препаратов /соавт. Г.И.Горшков //Межвузовский сборник трудов /Белгород. - 1991. - С. 69 ~76.

15. Способ торможения сократительной деятельности матки у самок животных /соавт. Г.И.Горшков, Л.Н.Воловельский //Патент РФ 1781864. - 1993.

16. Биохимические показатели крови после лечения бесплодных коров дигктолом и прегнадиеном //Ветеринария. - 1993. -

а з. - с. 32-33.

17. Влияние прегнадиена Е дигитола на биохимические показе

€Ь

толи крови бесплодных коров /соавт. Г.И.Горшков //Тезисы докладов к 5-й межгосударственной научно-практической конференции "Новые фармакологические средства в ветеринарии" /С.-Петербург.

- 1993. - С. 102.

13. Эффективность новых биологически активных препаратов при установлении астрального цикла у крыс на фоне ганглиоблока-тора //Тезисы докладов в 2-й межгосударственной межвузовской научно-практической конференции "Новые фармакологические средства в ветеринарии" /С.-Петербург. - 1993. - С. 103.

19. Гормональный статус у самок крыс со спонтанным нарушением астрального цикла под влиянием гаяглиоблокатора //Тезисы докладов к 6-й межгосударственной межвузовской научно-практической конференции "Новые фармакологические средства в ветеринарии" /С.-Петербург. - 1994. - С. 8.

20. Эффективность новых биологически активных препаратов при восстановлении астрального цикла у крыс на фоне гаяглиоблокатора /соавт. Г.И.Горшков //Тезисы докладов к 6-й межгосударственной межвузовской научно-практической конференции "Новые фармакологические средства в ветеринарии" /С.-Петербург.

- 1994. - С. 8.

21. Способ регуляции воспроизводительной функции у самок /соавт. Г.И.Горшков //Решение на ввдачу патента РФ й 94020596/15. - 1994.

22. Профилактика задержаний последа у коров //Депонирование во ВНИИТЭИ /Москва. - 1995. - » 16081.

23. Эффективность прегнадиена при восстановлении воспроизводительной функции у бесплодных коров //Депонирование во ВНИИТЭИ /Москва. - 1995. - И 16080.

24. Вызывание суперовуляции у коров-доноров //Депонирование во ВНИИТЭИ /Москва. - 1995. - й 16079.

■ 25. Стероиды пролонгированного действия при восстановлении полового цикла у животных //Методическое пособие /Белгород.

- 1995.-39с.

26. Утеротропное влияние прегнадиена //Тезисы докладов межвузовской конференции /Белгород. - 1995. - С. 51.

27. Гормональный отатус коров-доноров при различных схемах индукции оуперову'ляции //Тезисы докладов межвузовской конференции /Белгород. - 1995. - С. 49.

28. Прегяадиен - новый гестагенный препарат для лечения ко-

ров, тлеющих функциональные расстройства яичников //Тезисы докладов к 7-й межгосударственной научно-практической конференции "Новые фармакологические средства в ветеринарии" /С.-Петербург.

- 1995. - С. б.

29. Биохтгачоскио показателя крови коров при фармакопрофя-лактике задержания последа //Тезисы докладов международной научно-драктичеокой конференции /Харьков. - 1995. - С. 63.

Ротапринт Белгородской государственной технологической академии строительных материалов. 308012, Белгород, ул. Костюкова 46.

Объем 2, Ь уч.-изд.д.

Заказ \ \

Формат 60 х 84 /16 Тираж 100