Влияние озона на перекисное окисление липидов в тканях экспериментальных животных

Нурахова, Алма Дандыбаевна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Влияние озона на перекисное окисление липидов в тканях экспериментальных животных
ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Автореферат диссертации по теме "Влияние озона на перекисное окисление липидов в тканях экспериментальных животных"

НАЦИОНАЛЬНАЯ АКАДЕМИЯ НАУК РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН рЦАЩШЬфДЦЕНП' РЕГИОНАЛЬНЫХ ПРОБЛЕМ ПИТАНИЯ

На правах рукописи

НУРАХОВА Л Л МЛ ДАНДЫБАЕВНА

ВЛИЯНИЕ ОЗОНА НА ПЕРЕКИСНОЕ ОКИСЛЕНИЕ ЛИПИДОВ В ТКАНЯХ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ЖИВОТНЫХ

03.04.00 — Биологическая химия

АВТОРЕ Ф Е Р А Т

диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Алматы, 1994

Работа выполнена в Алматинском'ордена Трудового Красного Знамени Государственном медицинском институте им. С. Д. Асфендкяров.а.

Научные руководители —доктор"медицинских наук,

заслуженный работник народного образования

, -Республики Казахстан, профессор С. М. ПЛЕШКОВА.

— доктор медицинских наук, профессор Э. А. АПСАТАРОВ.

Ведущая организация- —Республиканский центр охраны здоровья

матери и ребенка Республики Казахстан.

Официальные оппоненты — доктор медицинских наук, профессор

Ж. С. ТАЖИБАЕВ,

— доктор биологических наук, профессор О. В. ЕСЫРЕВ.

Защита состоится « 1995 г. в часов

иа заседании -специализированного соЕета Д 53.28.01 в Научном центре региональных проблем питания HAH Республики Казахстан (480008, г. Алмаггы, ул. Клочкова, 66). ' '

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Научного центра региональных проблем питания HAH Республики Казахстан.

Автореферат разослан «

. 1994 г.

Ученый секретарь специализированного совета, кандидат медицинских наук

Е. Ю. СМАГИЛОВА

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИК, РАБОТЫ

Лктульность проблемы.

Перитонит является тяжелым осложнением абдоминальной хирургической патологии. Показатели летальности при перитоните, з данным ряда авторов, составляют 70-80% (Шуркалин Б.К. и со-зт.1983; Hoffman J., 1988; Palasciano N., 1988; Hallak A., 389) и не имеют тенденции к снижению. Поскольку в основб 'iTpTT^hmi;.^«'«eftftoD в брюпной 'полости, сопровождающихся гритонлтом л мембранных

груктур. целостность и функцк.оналы.ал гделяется переписным окислением липидов (ПОЛ) (Меерсоп Ф. о. >авт.. 1983), болыве внимания обращалось на исследование пе-жисного окисления.

В лечении перитонита применяются разнообразные методы, шако.использование физических методов таких, как лазерное лучение, ультразвук, . иагнитотерапкя. криотерапия не нашло ¡рокого применения в практической медицине' из-за отсутствия >рогостоящей аппаратуры, необходимой для их использования.

Применять озон в лечебных целях стали с начала нашего голетия. Но быстрый и выраженный успех антибактериальной хп-ютерапии приостановил исследования в области озонотерапии. ¡ледствие появления в последнее время большого количества ан-!биотикорезистентных штаммов микроорганизмов, усилились поис-i эффективных бактерицидных методов воздействия, к числу ко->рых относится озйнотерапия ¿Работнова И.Л. и др., 1972; Вокк Д. и соавт.. 1382; Чен Тхи Сьюнг, 1982): -

, В бактерицидном действии озона на микробные клетки важную )ль играет окислительное повреждение мембранных структур, ¡он массированно разрушает биологические мембраны. Обработка юном затрагивает в той или иной ■ степени практически все иссн биомолекул, которнё входят в их ¿остав. В эксперимен-IX, проводившихся на мембранах эритроцитов, показано, что под шянпем озона образуются различные продукты перекисного окис-?ния липидов (Freeman В. A. et al., 1979). ' \

В норме ПОЛ протекает постоянно на определенном стацио-фном уровне (Козлов Ю. П.. и др., 1983; Васс D. A. et al., (77; Tappel A.L.. Dillard С. J.. 1981). так как в клетках су- ■ . ' • 1 ■•■■.'. • ■■

чествуют различные регуляторные системы, контролирующие сю рость свободнорадикального окисления (СРО) липидов. К их нис. принадлежит антиоксидантная система (АОС), включающая в се! ферментные и нефе'рыентные вещества. Активация АОС при тех и. иных патологических состояниях является адаптационной,реакцш организма, направленной на поддержание нормального иетаболиз! ■ в условиях повышения ПОЛ.

Хотя в последнее время озонация все чаще с успехом прим; няется в терапии различных гнойных хирургических заболеванШ в литературе существуют немногочисленные сведения об использ< вании озонирования для лечения гнойных перитонитов., .

По-видимому, в силу малой эффективности известных -спос< бов лечения перитонитов использование новых методов иредста! ляет большой практический интерес Для хирургов, акушеров-гши кологов и всех врачей, сталкивающихся с этой патологией.

Озонотерапия на сегодняшний день применяется преимущес венно на практическом уровне, и до сих пор нет исследовали! раскрывающих биохимические, микробиологические и морфологиче« кие аспекты влияния озона, которые имеют первостепенное знач( ьие для определения его механизмов действия, научнообосноваш го использоваия озокотерапии, а также выяснения возможных о-рицательных эффектов этогб метода лечения и разработки пут< их профилактики. •

Цель исследования.

. . Установить влияние.озона на состояние ПОЛ и АОС в орг. низме здоровых животных и при развитии экспериментального П1 ритонита.

Основные задачи исследования:

1. Исследовать уровень ПОЛ и активность ферментов АОЙ органах и тканях здоровых животных, подвергнутых озонировали! и выяснить длительность сохранения изменений после прекращен! озонации.

2.-.Определить уровень ПОЛ и активность антиоксидантн! ферментов в органах и тканрх крыс с экспериментальным перит нитом. •

3. Изучить влияние озонотерапин на состояние ПОЛ " и А1 при экспериментальном перитоните в динамике.

4. На модели экспериментального перитонита определить д

анику высевания микроорганизмов при нелеченном перитоните и ри озонотераюш перитонита: изучить морфологическую картт'ну ри указанных состояниях.

Научная новизна.

Впервые установлено, что Еведенне озона здоровье! экспери-ентальным кивотным вызывало развитие дистрофических изменений печени, сохранявшихся на 1. 3 и 5 сутки после завершения "■•.пп^сгс;"'0 ПияЕлено. что причиной этих изменения могла быть кгйй^пл 1КМ « оигЗзгг»- -пишЛ^-П^п^ппванинх яивотннх; обус-овленная озонацией. •

Показано, что развитие экспериментального калс^;'.,, лср"-онита сопровождалось значительны;«! деструктивными изменениями печени и почках; которые, вероятно, явились результатом влитая повышенного уровня ПОЛ, наблюдавшегося при перитоните, и зздействия микробных токсинов.

Впервые установлено, что озонирование брвгшоП полости жи-)тных с экспериментальна?.! каловый перитонитом оказывало четко факенное бактерицидное действие, в первую очерель на ецнег-зйнуаз палочку, что приводило к ' клиническому Енздсрсвшпж. >дтвер:хденному микробиологическими и морфологическими исслз-юанияии.

Показано, что озонотерапия усиливала регенераторные про-гссы в печени и способствовала исчезновению зернистой дистрс-:и эпителия извитых канальцев почек на 5 и 7 дни перитонита, онация брюеттой полости рвотных с экспериментальным перито-том сопровождалась умеренной активацией ПОЛ после первых се-сов озонотерапия и нормагазацией зтнх. процессов, _ начиная с тикратного озонирования.

Практическая ценность.

Выявленные: бактерицидное действие озона, умеренная актация при этом ПОЛ, усиление регенераторных процессов в печени исчезновение структурных изменений в печках при озокации юшной полости животных с экспериментальны-! перитонитом поз-ляют обосновать закономерность клинического применения озо-

Установленные нами дистрофические изменения в печени при энироваши здоровых крыс и длительность сохранения этих калений после прекращения введения озона дают право рекокендо-

вать хирургам применять этот метод у больных с поражениями пе чеии с предельной осторожностью.

Основные положения диссертации, выносимые на защиту:

1. Озон вызывал интенсификацию ПОЛ и компенсаторную актс вацию антиоксидантных ферментов в органах и тканях здоров! экспериментальных животных, сопровождавшиеся развитием дистр< ■фических изменений в печени, • которые сохранялись на 1, 3 и сутки после прекращения озонации.

2. Развитие экспериментального перитонита приводило к ai тивации ПОЛ и ферментов АОС, вероятно, вследствие гипоксга ишемии и действия микробных токсинов.

3. Развитие экспериментального перитонита вызывало знач: тельные деструктивные нарушения в печени и почках животных.

4. Увеличение скорости ПОЛ при озонотерапии экспериме тального перитонита было менее выражено, чем при нелеченн перитоните^ после 5 и 7 сеансов озонотерапии перитонита уров нь ПОЛ нормализовался во всех исследованных тканях.

5. Применение озона при экспериментальном перитоните ок зывало четкое бактерицидное действие, приводившее к резко снижению бактериальной обсемененности брюшной полости крыс.

6. Озонотерапия экспериментального перитонита стимулир вала развитие, регенераторных процессов в печени.

7. Местное воздействие озона на брюшную полость крыс i ляется эффективным методом лечения перитонита в эксперименте

Апробация работы.

Материалы исследования доложены на заседании профессор ко-преподавательского состава кафедры биохимии АГМИ (октяС 1994 г.), диссертация была рецензирована членами межлаборатс ного специализированного совета Научного центра регионалы . проблем питания HAH PK (ноябрь 1994 г.).

Публикации.

По теме диссертации опубликовано 5 печатных работ.

Внедрение.

Результаты исследования внедрены в практическую деяте. ность БСМП города Алматы; теоретические положения диссерта: используются в учебном процессе на кафедре госпитальной хир гии Алматинского Государственного медицинского института,

Структура и объем диссертации.

Работа состоит из введения, 4 глав, выводов, списка лите-1туры. Изложена на /¿Г/ страницах машинописного текста, ил-ютрирована 45. таблицами. 19 фотографиями. 12 рисунками. Ука-1тель литературы включает 239 источников, из которых 139 работ •ечественных авторов, 100 - иностранных. Материалы и методы исследования.

, В работе использованы материалы экспериментов, проведен-ЕХ на 177 половозрелых крысах-самцах линии Август. Все живот-иа^дс-с"" "я гпуппы. Первая группа - интактные крысы, оруп группу ее CT"01* "И ка^тйг^гки.с;^;. "™ияподйдся под-р доз озона, .апробированы три дозы: G.C1Z :т'п: <-.CZZ 035 иг/л. В последующем в эксперименте использовалась доза она - 0.025 мг/л как наиболее оптимальная. Третья группа -ысы, подвергнутые озонации однократно в продолжении 1. 3. 5 7 суток. Четвертая группа - животные, на которых определясь последействие озона, этих крыс озонировали однократно на отяжении 5 и 7 суток, забивали их через 1. 3 и 5 суток после вершения введения озона. Пятая группа - животные с перитони-м, исследовавшиеся на 1, 3. 5 и 7 сутки. Шестая группа -ысы с перитонитом, которых исследовали после 1. 3. 5 и 7 се-сов озонотерапии.

Животные содержались на обычном виварном рационе, забивать декапитацией. Для проведения биохимических методик пе~ 4Ь. почки погружали в сильно охлажденный 1,15% раствор KCl; эбирки с кровью помещались в холодную воду. Из каждого органа холоде готовили гомогенаты в 1 . 1555 KCl, из эритроцитов говили гемолизат. ' '

Острый перитонит воспроизводили по методике С. С.Ременника 365) в нашей модификации. .. В брюшную полость крыс одно- и )гократно вводили каловую взвесь на физиологическом растворе щентрацией 2%,. объемом 1,5 - 2 мл. Озон вводили от озонато-шприцем в брюшную полость. Коллективом кафедры госпитальной >ургии АГМИ в содружестве с конструкторами НПО им. С.М.Киро-был разработан озонатор, который,представляет собой лере-:ное изолированное устройство размером'40x25x7 см и весом 7 Аппарат легкий, портативный и высокопроизводительный. Его ио использовать в больницах, поликлиниках и полевых услови-

ях, таи, где имеется электрическая сеть с напряжением 220 Вт Он состоит из'трубчатых электродов с помещенной между ним пластиной из диэлектрика. По зазору между электродами продува ют кислород, а на электроды подается высокое напряжение. Н выходе из прибора концентрация озона поддерживается да задан ном уровне - 5 мг/л. •

Развитие перитонита подтверждали морфологически. Кусоч* печени и почек, извлеченные у животных, фиксировали в 1С растворе нейтрального формалина, срезы окрашивали гематоксу лин-эозином. Гистологическое описание микропрепаратов проведе но совместно с заведующей группы патоморфологии ЦНИЛ АШ к. м.н. Д.М.Артыгалиецой. Кроме того, осуществляли микробиолс гическое подтверждение наличия перитонита. Посевы производи.» по общепринятым методикам (Штибен В.Д.. Бабич И.К., 1955), р£ зультаты которых были обработаны нами вместе с с.н.с. груш микробиологии ЦНИЛ АГМИ, к.м.н. Л.Ф.Хмель.

Интенсивность эндогенного ПОЛ оценивали по уровню коне1 ных флуоресцирующих продуктов свободнорадикального окислен! липидов - шиффовых оснований (ШО) Ф111агс1 С.3., Тарре1 А.Ь. 1984). Состояние антиоксидантной системы исследовали путем 01 ределения активности следующих ферментов: суперокснддисмута; (СОД) по методу Е.Е, Дубининой и соавт. (1983); каталазы (КАТ по методу Н. ШсК (1975); глутатионпероксидазы (ГПО) по мето; С.С.МШб (1959); глутатионредуктазы (ГР) по-методу 1.Саг1Ье| в1 В.Маппегу1к (1975).

Полученные результаты обработаны общепринятыми метода! информационной статистики с нахождением критерия Стыодента.

Результаты собственных исследований.

Проведенные на здоровых животных эксперименты показал! что введение им в брюшную полость озона а дозе 0.025 мг/л течение 1. 3. 5 и 7 суток однократно не вызывало никаких юн нических изменений в их состоянии.' Поведение и внешний В1 этих крыс не отличались от таковых интактных животных. Кры были подвижны, живо реагировали на внешние раздражители, име, хороший аппетит. Шерсть у них была сухой, гладкой.

После однократного введения озона уровень ШО возрастал : всех тканях, причем значительнее всего в почках (181%). Э происходило на фоне активации антиоксидантных Ферментов,

исключением СОД .гемолизата (98%) и печени (76%). каталазы печени (7856), ГР печени (5136) и почек (57%). Таким образом, озон вызвал усиление ПОЛ и ответную активацию ферментов аос. О.Е.Колесова с соавт. (1992) при внутрибрюшинном введении экспериментальным животным Физиологического раствора с концентрацией озона 6-Ю мг/л обнаруживали снижение содержания диеновых коньюгатов. малонового, диальдегида (мда), шо крови; одновременно у""п!'и«пялся уровень низкомолекулярных пероксидов, пе-рекисних радикчлов, bawiSScs,. üp" sium лтоячали возрас-

тание активности СОД и каталазы в крови и >»;,„,„ z::t"~

оксидантную активность плазмы. ■ обусловленную увеличением в ней концентрации ß-липопротеидов, церулоплазмина, альбумина, серо-тонина. В печени животных возрастало содержание глутатиона, цитохрома.Р-450, высокой была активность ГПО и СОД. Существуют литературные данные о том. что окислительное повреждение мембранных структур часто рассматривается как ведущий фактор гибели микробных клеток под влиянием озона. При взаимодействии озона с клеткой мембране принадлежит важная роль барьера, в значительной мере поглощающего молекулы 03 за счет реакций окисления мембранных компонентов (Конев C.B. и др., 1985). Протекающая при этом окислительная деструкция выражается в быстром накоплении продуктов ПОЛ и в интенсивном образовании иежбелковых и липид-белковых ковалентных сшивок (Конев C.B. и ооавт., 1982). Бактерицидная эффективность озона зависит от физиологического, состояния клеток микробов (Christensen Е., 31es A.C.,' 1954). При этом наиболее высокой чувствительностью к 03 обладают "молодые" почкующиеся клетки (Корогодина Ю. В. и цр., 1975: Mudd J.B. et al., 1971). Действие озона на изолированные плазматические мембраны г;;еет неспецифический характер (Конев C.B. и соавт., 1982:. Chan P.C. et al., 1977).

■ На вскрытии озонированных здоровых животных патологичес-£их изменений нами не выявлено.

Ранее В.К.Матус с соавт. (1982) методами электронной микроскопии изучали влияние озона на ультраструктуру, дрожжевых <леток ' Candida mills и обнаружили выраженные изменения в тлазматических мембранах. Эти ; изменения проявлялись в, значительном уменьшении числа сколов, проходящих вдоль сердцевины «емранного бислоя, и соответствующем увеличении количества по-

перечных. По мнению авторов, указанное уменьшение числа сколо! может быть связано с образованием поперечных сшивок типа белок-белок или белок-липид в процессах ПОЛ под действием озона, причем сшивающим агентом, вероятно, является МДА (Матус В. К. i др.,' 1980). Процесс сшивания белков,может быть вызван таю» образованием 3.3-дитирозина - продукта окисления озоном тиро-•зиновых остатков белков (Игнатенко A.B., Черенкевич С.Н. 1985). При окислении последних озоном образуется дофахинон, который способен взаимодействовать как с одной, так и с двум; аминогруппами аминокислотных остатков, что приводит к межмоле кулярному сшиванию белков. Кроме того, в результате окисли тельного разрушения тирозина 03 образуются ненасыщенные альде гиды,. диальдегиды и альдегидо-кислоты, которые, реагируя < NHZ-группами белков, способствуют возникновению шиффовых осно ваний.. • I :

В.К.Матусом и соавт. (1982) были установлены существенны изменения внутриклеточной структурной организации Candida u ti lis, которые прогрессировали с увеличением длительности озони рования и приводили к полной дезорганизации ультраструкту клетки, что выражалось во Фрагментации цитоплазматическо: мембраны, расширении периплазматического пространства, набуха нии митохондрий, разрушении внутриклеточных структур, расслое нии цитоплазматического матрикса на очень плотные и почт: просветленные участки, появлении в периплазматическом прост ранстве осмиофильных гранул.

При микроскопическом изучении печени крыс нами выявлено что в цитоплазме гепатоцитов обнаруживались мелкие и крупны вакуоли - мелко- и крупнокапельная жировал дистрофия. В почка: структурных изменений не установлено.

Высокая концентрация флуорофоров во всех тканях отмена лась и при трехкратном введении озона. Это сопровождалось ак тивацией каталазы в исследованных ббьектах, однако активност главного компонента защитной АОС - СОД не отличалась от конт роля в гемолизате (100%), была ингибирована в печени (11%) практически сравнима с контролем-в почках (10635). активност ГПО несколько увеличивалась в гемолизате (121%), но мало отли чалась от контрольного уровня в печени (107%) и почках (10756) ГР проявляла высокую активность в гемолизате (310%) и печен

(215%), но фермент был ингибнрован наполовину в почках (50%). Го есть интенсификация ПОЛ, вызванная однократным озонировани-,. ;», продолжалась. Это. могло привести к структурным изменениям з тканях.

На вскрытии животных данной группы в грудной и брюшной юлостях макроскопических изменений не обнаружено.

" При печени установлена мел-

îo- и крупнсгапельнал t ' г?т™тпии .a*.

зоструктура почек не изменена.

С.В.Конев и соавт. (1982) также установили, что в результате озонолиза дрожжевых клеток изменяется структурно-функцио-{альное состояние плазматических мембран, причем повреждение «ёмбран, приводящее* к. нарушениям барьеров проницаемости для {уклеотидов. по-видимому, не идентично повреждениям, qôyonoB-шванщим окраску клеток метиленовым синим, последнее свидетельствует о гибели клеток. Кроме того, исследователи выявили. 1то подпороговые дозы озона, не влиявшие на общую физиологи-шскую активность, тем не менее способны вызывать скрытые на-)ушенпя мембран.

О том. что в действии озона на клетки важно усиление ПОЛ, чторят исследования (Зорина Т.Е. и др., 1981), показавшие, гго при озонировании липосом наблюдалось интенсивное накоплена продуктов ПОЛ. В отдельных работах (Конев C.B. и соавт., [985) изучали значение оз'он-нндуцированного сброса протонного градиента на мембране в гибели клеток Candida utllis. Было установлено. что по мере окисления мембранных липидов при озона-ши непрерывно ■ возрастает поток Н* внутрь клеток, последнее шзывает сброс трансмембранного градиента рН. Это. а также фоисходящая после утечка внутриклеточного К* до равновесного юстояния (Halllwell В., Gutteridge J.M.С. .1984) быстро приво-WT- к развитию, полной деэиергнзации мембраны и изменению ее ¡труктурных характеристик' (Thomas M.J. et- al,. 1978).

. При пятикратном • введении озона содержание конечных флуо-->есцирующих продуктов' ПОЛ сохранялось на повышенном, уровне в 'емолизате (157S5); несколько снижалось в печени (104%) и поч-сах (135%) в сравнении с 1 и 3 сутками озонации. К этому.сроку жтивировались СОД. каталаза в тканях, однако в глутатионовой _ ¡истеме отмечалась диссоциация:' ГПО' была ингибирована, а ГР

проявляла значительную активность.

На вскрытии животных указанной группы органы грудной и брюшной полостей расположены правильно. Оболочки органов гладкие. блестящие. При гистологическом исследовании печени определялись дистрофические изменения в - гепатоцитах. В почках структурных изменений не установлено.

При семикратном введении•;озона уровень ШО в изученных объектах аналогичен предыдущему сроку. Активность ферментоЕ АОС во всех тканях была сравнима с таковой в предшествовавшей группе.

На вскрытии патологические изменения отсутствовали. При морфологическом изучении печени отмечена тенденция к восстановлению структуры. Лишь в единичных дольках было нарушено балочное строение. В этих же дольках на ограниченных участка> было установлено развитие зернистой дистрофии в гепатоцитах. Микроскопич.еская структура почек не изменена. j ■

Таким образом, озон, являясь сильным окислителем, вызывав усиление процессов ПОЛ, начиная с однократного озонирования, i ответ на это наблюдалась умеренная активация ферментов АОС. однако недостаточная, поскольку интенсивность ПОЛ продолжала нарастать при трехкратном введении озона. Но. возможно, к этому сроку происходила, некоторая адаптация антиоксидантных ферментов. и их активность возрастала в большей степени, чем npi однократной озонации. Наконец, при пятикратном и семикратно» введении озона отмечалась адекватная реакция со стороны главного фермента АОС - СОД. была повышена активность каталазы, ГР. По-видимому, поэтому увеличение скорости процессов ПОЛ, судя по концентрации ШО. уравновешивалось активацией защитно! антиоксидантной ферментной системы, что препятствовало накоплению конечных продуктов ПОЛ в исследованных тканях.

По результатам гистологического изучения можно заключить, что введение озона не оказывалось безразличным для организм, крыс и приводило к определенным структурным изменениям в пече ни. Максимальное развитие этих нарушений отмечено на 5 сутки На 7 сутки происходило уменьшение выраженности патологически процессов.

Для выяснения длительности сохранения установленных изме нений состояния ПОЛ и АОС, а также морфологического строени

»зученных объектов озонированных здоровых крыс были исследована биохимические и морфологические показатели после прекраще-шя озонации. Животные " этой серии получали озон однократно в течение 5 и. .7 .суток, исследования проводились через 1, .3, 5 ток после завершения озотфования. *

^Т^Шад^что»«-Дочсг^дг.^??«*»« стоков посла прекраще-шя озонирования, бйохййичбсйй '^пэ^^и^^пг:?««™ "«впс^ :охранялись.. . но намечалась тенденция к их устранена. В от<;^ ше от установленных наг«! при. озонации здоровых крыс микроско-шческих изменения печени, при введении озона собакам с искус-5твенишкровообращением (Зеленое Д. М. и соавт.. 1992) происхо-дало: уМекьшенивстепени выраженности дистрофических изменений: 5 гепатоцитах и; нефроцитах по сравнению с клеткамипечени и ючек животных с искусственный кровообращением, не подвергается Действию озона. Н.П.Лебковой с соавт. (1992) показана :тимуляция под влиянием озона в клетках печени в условиях го-года структурно-функциональных механизмов, преобразующих жиро-ше энергетические субстраты в углеводные, которые легче ис-юльзуются в экстремальных и патологических условиях. При этом шижаетея вероятность развития аировой дистрофии и образования токсичных кетоновых продуктов из гарных кислот. Возможно, вы-шленные нами.гастологичесгаю изменения были обусловлены тем. гго при ввёдёнии озона яайшвйайась'активация ПОЛ.. а продукта ЮЛ оказывали детергентное дейстагс на мембраны клеток.^ Ранее фи изуч.ещо!.. влияния ПОЛ на ультраструктуру саркоплазматичес -

.изменения:- исчезновений-' йй' Ггй^вурофдСМкА. субчастиц. - срответствувдих :ипопр6тё1ШшМ комплексам ;Са-АТФазы: увеличение толщины мемб-)аны; Фрагментация ..мембранных везикул (Козлов Ю.п: и до.. :983); . Все эти. эффекты были вызваны накоплением в гидрофобной йзе мембраны -полярных продуктов ПОЛ, обладающих детергентным действием. Установленные дистрофическиэ изменения в печени и 1родолжительность их сохранения свидетельствовали о необходи-(Ости осторожного применения озона.

. Изучали' состояние крыс в условиях нелеченного экспериментального перитонита. Выявлено, что в первые сутки развития ка-^-гового пери-пйпгга- животные были гиподинамичными. Имели плохой , шпетит. Шерсзъгвняа тусклой, слежавшейся. - .

При исследовании посевов из брюшной полости получ сплошной рост бактерий: грамположительные палочки, грамполож тельные нити.

Уровень ШО был высоким в гемолитазе (165%) : и почк (125Х), низким в печени (7255). Интенсификация ПОЛ происходи несмотря на активацию практически всех Ферментов АОС в изуче ных объектах.

На вскрытии животных этой группы в брюшной полости оСн руживался мутный выпот со зловонным запахом, серо-белые рыхл массы - нити фибрина. Внутренние органы были дряблыми, тускл ми. Определялся спаечный процесс в кишечнике.

При гистологическом изучении печени установлено резко в раженное венозное полнокровие, нарушена балочная структура п чени. .В гепатоцитах - зернистая и жировая дистрофия. Наблюл лись многочисленные фокусы некроза различных размеров. Имели очаги балонной дистрофии. В почках определялось венозное по нокровие и зернистая дистрофия эпителия извитых канальцев.

Вероятно, в данный срок развития перитонита усиление П обусловлено не ослаблением АОС, а избыточным образованием тканях кислородных радикалов в результате гипоксии, котор носила комбинированный характер. С одной стороны, циркулято ная гипоксия, обусловленная системой "стрессовой" гиперкатех ламинемии, нарушением реологических свойств крови вследств сладка форменных элементов и тромбоцитов в микрососудах, другой - резкая активация ;;атаболизма углеводов и липидов п влиянием той же гиперкатехоламинемии, сопровождающей перитон (Попов В.А.. 1985) и увеличивающей потребность тканей в кисл роде. Известно, что высокие дозы катехоламинов. которые акт вируют систему аденилатциклаза - ц-АМФ - протеинкиназа, усил вают ПОЛ в различных органах и тканях (Шепелев А.П.. 1978; М ерсон Ф. з., 1981). При избытке в организме катехоламинов и н рушении их метаболизма могут образовываться смбоднорадикал ные компоненты, которые, атакуя ненасыщенные жирные кисло (НЖК) окружающих мембран, способствуют генерализации ПОЛ в р личных тканях с последующим повреждением их структуры и функ Кроме того, при перитоните ПОЛ индуцируется и другими биомол лярными механизмами (Храпова Н.Г., 1981: Del Maestro R.F 1980). Во-первых, клеточный липолиз. активируемый ц-АМФ п

ojuuiiuieri п'.перкатехоламинемип. сопровоздается висво5ояллН!«?« ненасыщенных жирных кислот, составляв?!* биохимический субстрат ПОЛ. Во-вторых, фосфслипилная реакция дает толчок к образованна ттоостагландинсп через стали.» эндоперекисей. стимулирующих ПОЛ. В-третьих, распэд ЯФ з ионизированных клетках активирует ксантиноксидазу - один из наиболее мощных индуктороп ппл. Более того, гипоксия клеток сопровождается избыточна н?-"•n,,Jlcritlci.f ~ ""^"»""«^г,,.;; ггс,,гацлг'леиных ферм HAD и коэмзика Q, такяе иидуцпрукйил ЙС.1. Пег""?»« " ио^Тс*' С?"?«««»« ПОЛ располагают нейтрофилькыо гранулоциты, ин'ильтру?-""*- тпг*" в йатологическом очаге. В свою очередь, активация свободнора-дикального окисления приводит к лабилизации, а затем - к деструкции плазмалеммы и. мембран органелл клеток. При этом порагл-ются митохондрии, что усугубляет угнетение клеточного метаболизма (Биленко Н.В.. Чуракова Т.Д., 1982). Нарушаются также мембраны лизосогт; что приводит к выходу лизосомальных ферментов в цитоплазму и цитолизу. Так разЕЙваптея-вторичная тканевая деструкция.

На третьи сутки перитонита поведение-, внешние данные крыс и микробиологические результаты были такими же, что и в предшествовавшей группе.

Содержание флуорофоров продолжало pacr>t и составляло в гемолизате 148%, в печени - иг?., ч почках - 139%. Это происходило на фоне,активации СОД и ГР go всех тканях, катэлазы п гемолизате. печени, ГПО в "печени." -

На вскрытии определялись тс г? признаки перитонита, что и у животных предыдущей группы. Морфологическая картина печени v почек, мало отличалась от их структуры а перЕые сутки развития перитонита. ••.:-

На пятые сутки-перитонита животные оставались вялыми, не реагировали на пнешние раздражители, не принимали пищу. Шерсть была тусклой, .слежавшейся. У одной крысу наблюдалось атональное состояние. .

.-■ . Получен сплошной рост микроорганизмов в посевах из брюа-ной полоста: грамположительные палочки, грамположительные ни-ги. ,■,';■■"-•:■ .

К этому сроку интенсивность ПОЛ значительно снизилась в . гемолизате и печени, где уровень ШО составлял 77 и 93% соот-

ветственно. Однако содержание флуорофоров в почках (182%) был высоким, что. 'возможно, свидетельствовало о выведении послед них почками. Установленное снижение концентрации ШО, вероятно вызвано активацией всех ферментов АОС в тканях, только активность СОД гемолизата (70%) была ниже крнтрольной. По-видимому реакция со стороны АОС сдерживала нарастание концентрации про . дуктов ПОЛ, и процесс свободнорадикального окисления стабили зировался на новом уровне.

На вскрытии в брюшной полости определялись нити фибрина Имел место спаечный процесс. Внутренние органы были дряблой консистенции.

При микроскопическом изучении печени установлено наруше ние балочной структуры. Резко выражена зернистая дистрофия ге патоцитов вплоть до очагов некроза. В почках значительно раз вилась зернистая дистрофия эпителия извитых канальцев.

Поведение и внешний вид животных на седьмые сутки перито нита были как у крыс предыдущей группы. У трех крыс наблюда лось агональное состояние.

При микробиологическом исследовании определялся сплошно рост микробов: грамположительные палочки, грамположительны нити.

Содержание конечных - флуоресцирующих продуктов ПО (табл. 1) было сравнимо с их концентрацией в тканях животнь предшествовавшей группы. Это отмечалось на фоне высокой актив ности каталазы, ГПО во всех тканях и ГР в гемолизате (93835) печени (209%), хотя ГР в почках (70%) и СОД в крови и органа ингибированы (табл. 2).

На вскрытии в брючной полости определялись нити фибрина дряблые органы, спайки кишечника. При гистологическом нзуче'ни печени установлено совершенно нарушенное балочное строение, гепатоцитах в значительной степени выражена зернистая (белко вая) дистрофия. В почках выявлена зернистая дистрофия эпители • извитых канальцев, в просвете отдельных канальцев - - белок слущенный эпителий..

Таким образом, в продолжении указанных сроков у животнь обнаруживались клинические признаки интоксикации. Результат микробиологических исследований свидетельствовали о значитель ной обсемененности брюшной полости крыс и подтверждали наличи

Таблица 1

Показатели ПОЛ в крови и органах крыс на седьмые сутки развития перитонита

Объект исследования

ЕД.

п изме-

рения

шо

Пик,

Сумма

пиков

Гемолизат

л п.

Печень

% к Почки

% к

7 ед.флуо- 75.0'»2.0 пйпиеншш

"" п^ , - Т- ---

257,0+14,0 г48.0"+14.о 1еа.У С 721.?"

•15,5

7 , -"- 301,0*+4,0 307,5*+2.5 324. О*+3.5 932,5' +

18.0

157

152

123

148

Примечание: ' - различия с контрольной группой статистически значимы при Р<0.05

Габлииа 2

Показатели АОС в кроЕН и органах крыс на седьмые сутки развития перитонита

Показа- 1 п ! Ед. изме- { Гемолизат Печень Почки

теля | | рения 1 *

сод 7 ед/уд гем. 9. 22+0. 78 0. 41+0. 06 0, 39* г.о. 05

ед/г тк.

- л 45 62 72

! а 7 :;л/н.1 п;м. 1709, 39* 143.': ! и-3, < 724. п.* 1*.л,

ед/г тк. 10(1, 01

я К • 104 161 147

. по " "кМ/кл гем 376.88+26. 9 239,09+94,21 178,0+42,36

•<кМ/г ТК.

'136 1ЪЬ 117

гр 7 мкЫ/'ил гем. 1,351*10.12 0,16510,01 0.03^10.01

мкМ/г тк.

»' •» 038 209 70

Примечание: * - различия с контрольной группой статистически значимы при Р<0.05

перитонита. Морфологическая картина при перитоните характеризовалась развитием вторичного токсического гепатита в'печени и зернистой дистрофии эпителия извитых канальцев почек. Происходило повышение интенсивности ПОЛ и изменение активности ДОС. которые являются одними из биохимических показателей, свидетельствующих о присутствии деструктивного процесса в брюшной полости (Конюхова С.Г. и соавт., 1990).

Исследованиями некоторых.авторов (Линденберг A.A.. 1985: Синовец A.A., 1986) показано, что перитонит сопровождается эндогенной интоксикацией, определяющей прогноз заболевания. Интоксикация вызывается микробными токсинами, которые, в свою очередь, способствуют высвобождению классических медиаторов неспецифической воспалительной реакции - биологически высокоактивных веществ - гистамина, серотонина, плазменных и тканевых кининов. -.простагландинов. . лизосомальных ферментов и др. (Люткин H.H. и соавт.. 1980; Seyfer А.Е. et al... 1977). Под влиянием многочисленных вазоактивных веществ нарушается микроциркуляция. изменяются реологические свойства крови с исходом в диссеминированное внутрисосудистое свертывание. В результате развивается вторичная тканевая.гипоксия. .Ее усугубляет цирку- • ляция в крови эндотоксинов, угнетающих процесс клеточного окислительного фосфорилирования (Рыбачков В. В.. Малафеева Э.В., 1986). ."'."■•'

Нарушение окислительно-восстановительных, реакций резко ■: снижает энергетические ресурсы клетки,' содержание АТФ. Ш. креатинфосфата. Угнетается фосфорилирующая и дыхательная активность митохондрий. Возникает анаэробная трансформация гликолиза. Активируются распад тканевых липидов, катаболизм белков, дезаминйрование и переаминирование аминокислот. Это приводит к отрицательному азотистому балансу, гиперкётонемии, ' ацидозу. Клетки утрачивают способность удерживать воду, электролиты. Развивается клеточная дегидратация. В тканях усиливаются процессы ПОЛ, приводящие к функциональной несостоятельности и в конечном итоге к деструкции биологических мембран, а значит к новому поступлению во внутренние среды , организма высокотоксичных продуктов нарушенного клеточного, метаболизма.г Кроме того, продукты ПОЛ способствуют развитию диссеминирован-' ного внутрисосудистого свертывания и распространению его на

крупные сосуда . (Ерюхин.Л.А. и др.. 1989).

Из вышеперечисленного следует вывод о важности ликвидации микробных токсинов и их источников. С этой целью используются различные методы. К ним относится и озонотерапия. поскольку применение озона вызывает значительный бактерицидный эффект.

Поэтому мы исследовали биохимические, клинические, микро-пмгчинп?.?'чил.пФл.ппгические изменения в динамике у крыс о иеритшштск. полу»«»^* -.«¿ч*..;;;; с;с!!?*? , в »«».«» 0.ZZZ иг/я.

В первые сутки развития перитонита после одного сеанса озонотератш животные были вялыми, гиподинамичными, с плохим аппетитом. Шерсть была тусклой, слежавшейся. Их внешний вид и' поведение не отличались от таковых у животных с перитонитом, не подвергавшихся лечению озоном.

При микробиологическом исследовании посевов из брюшной полости получен сплошной рост бактерий, в том числе выявленй колонии Е.Coll. не подлежащие подсчету. Данные результаты аналогичны полученным при пернтоните без озонотерапии.

Концентрация ШО в гемолизате (185%) была значительно высока. в печени (100%) не наблюдалась активация ПОЛ, в почках (95%) уровень флуорофоров был несколько ниже контрольного. Указанные показатели содержания конечных флуоресцирующих продуктов ПОЛ практически были сравнимы с таковыми при нелечениом перитоните. Со стороны ферментов AGC повышалась активность ка-талази и ГР а тканях, активность СОД и ГПО в крови и органах. Сила ниже контроля или приближалась к нему. В условиях перитонита без озонотерапии наблюдалась Солее выраженная активация антиоксидантных Ферментов.

На вскрытии в.брюшной полости определялся мутный выпот со зловонным запахом, рыхлые серо-белого цвета массы - нити Фибрина.

При морфологическом изучении печени обнаруживались нарушенная балочная структура и большое количество гепатоцитов двуядерных или с однкн крупным ядром, что свидетельствовало о регенераторных процессах. Это отсутствовало при нелеченном перитоните. Возможно, озон вызывает усиление регенерации. В почках определялась зернистая дистрофия эпителия извитых канальцев.

На третьи сутки перитонита после трех сеансов озрнотера-пии животные начинали принимать лищу и .были более подвижны, чем крысы без лечения. Их шерсть тусклая; слежавшаяся. ••".

Число высеваемых микроорганизмов резко уменьшилось/ . составляло минимально 1150000 колония в 1 мл. из юис 440000 коло- . кий синегнойной палочки и 710000 колоний Б.СоИ. В то время как при . перитоните без озонотерапии к этому сроку определялся сплошной рост микробов. Следовательно, озонирование резко снижает бактериальную обсемененность брюшной полости при экспериментальном перитоните.^

Содержание ШО возросло в гемолизате - 119%. в печени -161%. в почках - 150Ж. Хотя к этому сроку активность антиокси-дантных ферментов в изученных объектах была высокой, за исклю-„ чением активности СОД и ГПО ,гемолизата. ГПО почек. Данные об интенсивности ПОЛ и активности Аре были похожи на показатели ■ при велеченном перитоните. Вероятно, высокая концентрация ШО V также определялась не несостоятельностью АОС. а усилением об-' ; разования свободных радикалов, которое наблюдается той перитоните. Кроме того, дополнительным фактором, обусловливающим активацию свободнорадикальных процессов, могло явиться введение озона. Показано, что первичным продуктом реашш озона с соединениями. имеющими двойные связи, является нестойкое вещество, которое быстро распадается на биполярный ион и карбонильное соединение (альдегид или кетон). Биполярный ион способен участвовать во многих реакциях. Например, он легко реагирует со спиртами, кислотами, водой и некоторыми другими веществами, образуя различные перекиси (Разумовский С.Д., ЗаиковТ.Е..

• 1974). '' .•' -:"ЛУ--11-';" ">"

На вскрытии в брюшной полости наблюдались, нити фибрина и : спайки кишечника. В печени отмечалась активная регенерация ге-патоцитов, с наличием : двуядерных клеток или гепатоцитов с крупным ядром. Вместе :с темимела место очаговая зернистая : дистрофия печеночных клеток. В почках выявлена-зернистая даст- . . рофия эпителия извитых канальцев.

К пятам суткам перитонита посла пятигееашжвчезенотерагти животные в отличйе от:нелеченных ггсаали тчшдоааее, лрринимали л; пищу. :'.':/'

. Количество выеёвае^;йз5йрил^^ •• •.•

ЛЧ8

шилось. Наименьшее число микроорганизмов было в чашке f! 36 -70000 серо-белых колоний в 1 мл (грамположительные кокки гроздями, Staph. " aureus). То есть обсемененность брюшной полости продолжала снижаться, изменялся качественный состав микробов: в посевах уже не определялась синегнойная палочка и Е.Со-

1 <

^ ^ - -- --Интенсивной!!» ПОЛ ?»««"•.с - Концентрация ШО в гемолизате составила уз,ч. а ¡ючснп - »u „ пс""-" -141% их уровень был высоким. По-видимому, это обусловлено тем. что продукты ПОЛ выводились почками. К этому сроку была повышена активность всех ферментов АОС в тканях, за исключением СОД гемолизата. ГР печени и почек. Содержание флуорофоров и уровень активности антиоксидантных ферментов были сравнимы с этими показателями при перитоните без озонотерапии.

Снижение скорости свободнорадикального окисления, возможно, было обусловлено устранением гиперкатехоламинемии. поскольку, вероятно, к этому сроку миновало состояние стресса как в ответ на развитие перитонита, так и на проведение озонирования. Бактерицидное действие озона приводило к устранению патологических процессов, вызываемых микробными токсинами: Это сопровождалось уменьшением фагоцитоза микроорганизмов или других частиц, осуществляющегося с метаболическим:, или дыхательным;.'"взрывом" (Rossi F. et al., 1980; Rossi F. et al.. 1981a, 15816), который проявляется в увеличении потребления кислорода и окислении глюкозы через глюкозомонофосфатный шунт. Кроме того при действии озона уменьшалась гипоксия (Боев К.В., Лебе-дянцев Н. А. , 1992; Зеленов Д.М. и соавт.. 1992; Перетяган С. П., 1992; Шахов Е. В. и др., 1992). Снижение интенсивности ПОЛ сыворотки и эритроцитов крови больных в терминальной стадии хронической. почечной недостаточности при применении гемодиализа с озонированием отмечали Е.В.Шахов с соавт. (1992). Это происходило на фоне увеличения активности антиоксидантных систем, в том числе за счет молекул средней массы(МСМ). Л.М.Алексеева с соавт. (1992) показали, что озон как при непосредственном контакте с кровью, так и при внутрибрюшинном введении в организм крыс вызывал активацию глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы и повышал антиоксидантные свойства крови.

На вскрытии в брюшной полости наблюдался спаечный процесс

кишечника. Внутренние органы не изменены. В печени наряду с очаговой зернистой дистрофией гепатоцитов установлено усиление регенераторных процессов. Вместе с отдельными клетками-регенератами определялись узлы-регенераты. В почках структурные изменения не выявлены.

На седьмые сутки перитонита после семи сеансов озонотера-пии крысы были подвижны, имели хороший аппетит.

К этому сроку получены отрицательные результаты исследования посевов из брюшной полости. То есть применением только одного озона была достигнута стерильность брюшной полости животных. При этом не использовались ни антибактериальные средства, ни какие-либо другие методы лечения.

Скорость перекисного окисления липидов была низкой, поскольку концентрация флуорофоров в гемолизате составила 84% от контроля (табл. 3). в печени - 100%, в почках - 9235. Одновременно была повышена активность всех изученных антиоксидантных ферментов (табл. 4), за исключением СОЛ, активность которой в гемолизате и печени была ниже контрольной. Интенсивность сво-боднорадикальных процессов при нелеченном перитоните была практически такой же, как при данном сроке, только в почках уровень 11)0 оставался высоким, что. вероятно, свидетельствовало о выведении ими этих продуктов. Состояние АОС при нелеченном перитоните было аналогично вышеописанному при перитоните и озонотерапии.

На вскрытии в брюшной полости определялись спайки кишечника. При морфологическом изучении печени отмечалась очаговая, зернистая дистрофия гепатоцитов. Кроме того, установлено наличие узлов-регенератов и клеток-регенератов в паренхиме. В поч- . ках микроскопическая структура не изменена.

Таким образом, при проведении озонотерапии крысам с перитонитом наступало клиническое выздоровление животных. Об этом, говорили итоги микробиологических исследований, свидетельствовавшие о выраженном бактерицидном действии озона, который значительно снижал бактериальную обсемененность брюшной полости. При патоморфологическом изучении не было установлено развитие вторичного токсического гепатита, наблюдавшегося в группе животных с перитонитом, более того, обнаруживались' признаки, указывавшие на усиление регенераторных процессов, в почках на ■

Таблица 3

Показатели ПОЛ в крови и органах крыс при озонотерапии на седьмые сутки развития перитонита

Обьект Ел: ШС

исследо- п изме-

вания рения ПИК] Пик2 Пик3 Сумма

пиков

Ремгчт.чя! . 7 С "У-- Qft o+fi. О

?5 к Печень

Ж к Почки

319.0+19.0 314.0+17.5 302.5+34.5 932.5+

62.5

112

100

7 , -"- 160,0*+11,5 167,0" +11,0 203.0+33.0 578,0+

17,5

Примечание: * - различия с контрольной группой статистически значимы при Р<0,05

Таблица 4

Показатели АОС в крови и органах крыс при озонотерапии на седьмые сутки развития перитонита

Показа- п Ед. изме- Гемолизат Печень Почки

тели рения

СОД ? ед/мл гг-н.; 13.91±Я,69 0,44+0.03 0,59+0,2

. од/г тк.

я к ' 67 67 109

КАТ 7 ед/мл гем.: 1890.65+98,97 1125,06+ 664,21+118,44

ед/г ТК. 202,73

I К ' '11? 161 135

гао 7 мкМ/мд гем.; 354, 03i59, 31 195, 36 + 50. 19 168.64 + 21. 24 мкМ/г тк.

; ¡I 123 129 111

ГР 7 мкН/мл гем.; 1.049*+0,02 0.45'+0.08 0,413*10,06 мкН/г тк.

% К 729 • 570 293

Примечание: ' - различия с контрольной группой статистически значимы при Р<0,05

пятые сутки перитонита и озонотерапии не отмечались структурные изменения. Эти данные согласуются с результатами проведенного И.П.Лебковой (1992) методами цитохимии и электронной микроскопии исследования влияния озона на печень крыс. Ею установлено. что парентеральное введение озонированного физиологического раствора благоприятно влияет на печень животных при перитональном воспалений, поддерживая пластический и энергетический гомеостаз гепатоцитов. При этом важным механизмом действия озона, по мнению автора, является стимуляция разных путей использования внутриклеточного жира в энергетических целях.

Биохимические исследования показали, что при озонотерапии экспериментального перитонита концентрация ШО возрастала меньше, чем при нелеченном перитоните. Более того, после пяти и ° семи сеансов озонотерапии экспериментального перитонита происходила нормализация содержания флуорофоров во всех изученных тканях. Активность антиоксидантных ферментов при озонотерапии перитонита мало отличалась от уровня активности этих ферментов при нелеченном перитоните. Все это позволяет полагать, что озонотерапия при экспериментальном перитоните у крыс эффективна.

Полученные данные предоставляют возможность обосновать закономерность клинического применения озона. При проведении озонирования крыс с перитонитом установлено значительное . усиление ПОЛ, происходившее с активацией антиоксидантных ферментов. Согласно существующим литературным сведениям при использовании озонации в эксперименте и клинике также не обнаруживалась значительная интенсификация свободнорадикального окисления, и определялось повышение активности АОС. В ряде исследований показано благоприятное влияние озона на гистологическое строение тканей животных. Нами тоже выявлено улучшение микроскопической структуры печени и почек больных перитонитом крыс, подвергнутых озонированию. Наконец, мы получили подтверждение бактерицидного действия озона, механизмы которого еще предстоит изучить. Однако уже сейчас ясна важная роль в этом ПОЛ. Все выше перечисленное в определенной степени объясняет высокую эффективность озонотерапии, свидетельствует о правомерности и необходимости ее применения.

В и В О Д и:

1. Введение озона здоровым экспериментальным животным вызывало усиление ПОЛ и компенсаторную активацию ферментов АОС во всех исследованных тканях, при этом наблюдались дистрофические процессы в печени. Указанные изменения сохранялись в

ж. С :: ? ^«тлк после прекращения озонации. Тенденция к их уменьш^н.1й 3"-гт«™-пт«.».

2. Развитие экспериментального перш^.-.т-тенсификации ПОЛ и активации антиоксидантных ферментов во всех изученных объектах, сильнее всего выраженным в почках и гемо-лизате соответственно.

3. При экспериментальном' перитоните отмечались значительные деструктивные изменения в органах: вторичный токсический гепатит в печени, зернистая дистрофия эпителия извитых канальцев почек.

4. Проведение озонотерапии при экспериментальном перитоните сопровождалась менее выраженным усилением ПОЛ. чем при нелеченном перитоните; в последние сроки - после 5 и ? сеансов озонотерапии перитонита уровень ПОЛ во всех исследованных тканях нормализовался.

5. При озонировании животных с перитонитом в тканях определялась активация Ферментов АОС. практически сравнимая с уровнем этих ферментов-при нелеченном перитоните.

0. озон значительно снижал бактериальную обсемененность Зршкой полости при экспериментальном перитоните. Еызнвап развитие регенераторных процессов в печени, способствовал исчезновению зернистой дистрофии эпителия извитых канальцев почек.

7. Оптимальным сроком озонации крыс при экспериментальном перитоните являлось семикратное введение в дозе 0,025 мг/л.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Нурахова А. Д. Патоморфологические аспекты озонотерапии при экспериментальном перитоните // Здравоохранение Казахстана. - 1994. - N 10. - с. 62-63.

2. Нурахова А.Д., Хмель Л. Ф.. Кункаева А. Критерии эффек-

тивности озонотерапии при экспериментальном перитоните ' // Здравоохранение Казахстана. - 1994. - N 11. - с. 68-70.

3. Плешкова С.М.. Апсатаров Э.А., Нурахова А. Д. Изменение ферментной антиоксидантной системы под влиянием озона при экспериментальном перитоните // Здравоохранение Казахстана. -1995. - N 1. - С. 65-69.

4. Нурахова А.Д. Влияние озона на перекисное окисление липидов и морфологическое строение тканей интактных животных.

- Рукопись депонирована в КазгосИНТЙ. - г. Алматы,

- 08.11.1994г. - 8 с. - Регистрационный номер 5471-Ка94.

5. Нурахова А.Д. Биохимические, микробиологические и морфологические изменения при экспериментальном перитоните у крыс и при озонотерапии перитонита. - Рукопись депонирована в Каз-

° госИНТИ. - г. Алматы. 08.11.1994. - 10 с. - Регистрационный номер 5472-Ка94.

Hurahova Alma Dandlbaevna OZO'iE IFLUEKCE OH LIPIDS PEROXIDE OXIDATION IU THE EXPERIMENTAL ANIMALS TISSUES Smnmary

- - «Br-, a sflvere complication of the abdominal sur-

gical pathology, car;0«* ¡iv „.icr"^'' >.m c^rc"""^ nf the great amount of antibiotic resistant mleroU. t in the search of the efficient antibacterial means, ozone therapy is referred to them.

Ozone influence on the lipids peroxide oxidation (LPO) in the healthy experimental animals tissues and rats, ill with peritonitis, is investigated In this work. Morphological structure of the liver and Kidneys of the anlmal3 Is studed. Microbiological examination of the crops from*the abdominal cavity of the rat3 in case of peritonitis development and during peritonitis ozone therapy was carried out.

Ozone Introduction to the healthy experimental animals was determined to cause dystrophycal changes In the liver, preserved for 1, 3 and 5 nights after ozonizatlon completion. LPO activation, called by the ozonizatlon, was found out to cause these chandes In the organs and tissues of the examined animals.

The development of experimental fecal peritonitis was accompanied by the considerable destructive changes in the liver 8nd kidneys, which, perhaps, './ere the result of LPO Increased level unfluence, observed during peritonitis and microbe .toxins influence.

The ozonizatlon of the abdominal cavity of the experimental animals with experimental fecal peritonitis exerted clearly marked bactericidal influence, first of all, on the blue purulent rod. it resulted in the clinical recovery, confirmed by the microbiological and morphological data.

Ozone therapy strengthened regenerative processes in the liver and structural changes in the kldheyes were noted simultaneously with it on the 5-th and 7-th-seances of ozone introduction. The animals abdominal cavity ozonizatlon was established to be accompanied by the LPO moderate activation during the first days of ozone therapy and by these procceses normalization beginning from the fifth ozone lnroductlon day.

Нурахова Алма Дандхбай - цызы

ТЭЖ1РИБЕЛ1 ЖАНУАРЛАР ТКАН1НДЕГ1 ЛИ1ЩТЕРД1Н АСй^Ш ТОТЫВДНА ОЗОННЫН ЭСЕР!

КОРЫТЫНДЫ

Перитонит - KYPcaK куысыныц микробтар цоздыратьщ ауыр ас-цынган хирургиялыц патологиясы.Микрооргачизмдердщ аитибиотиктерге ts3Íhhí штамдарыныц кеп мелшерде пайда болуы, тихццг бактерио-цидт! твс!лдердт !здеуге акеледг, оныч цатарына озонотерапия жа~ тады, оса згагдай зерттеуд!ц мацыздылыгын аньщтайда.

Осы жумыста тзжхрибе ínrpri3ineTÍH денх cay жануарлар мен пе-ритонитпен ауирган егеукуйрьщтардьщ ткандергндег! липидтерд!н " аскын тотыгуына озонныц эсер ету! зерттелген.Жануарлардан бауы-ры мен бУйроктер{н1н морфологияльщ курылысы зерттелд!.Перитонит-т!ц дамуы мен перитонита озонмен емдеу кез!нде егеут^йры^тар-даи курсам цуысыйан себу арцылы микробиологиялыц зерттеу mrpri-з}лген.

Ден1 cay тэжгрибелг жануарларга озонды енгхзгенде кане озонмен емдеудт ая^таганнан ксйхн ,олардыц бауырында 1,3 хане 5 тэултккке дей1н санталеткн дистрофиялыц езгер1стерд}ц болатын-дыгь; аны^талды.Бул езгерхстсрдхн себебх зерттелген жануарлар-дан шгггелершдег! жэне ткандергндегг липидтердщ ас^ын тотыгу-ынын (ЛАТ) озон асершен активтену1 окендхГ1 айцындалды.

Тэж1рибел1 нэжхстх перитониттщ дамуы бауырда жэне бтйрек-терде бхрчатар деструктивtí earepicTepre акеледх, бул esrepic-терр,1ц себебх, мтмкш .перитонитте байцалган ЛАТ-тыц жогарлауы-ньщ жэне микробтардан токсиндерхнщ acepi.

Т?жхрибел1 нэжхстг перитонит^ жануарлардач Чурсац куысьш озондаганда,онын бактериоцидтх acepi анык байцалды, б!р!ншх ке-зекте как ipi« тая^каларга. ЖануарлардЫц клиникалыц сауыгуы ш-кробиологиялыц жэне морфологиялщ зерттеулермен далелденд!.

Озонмен емдеу бауьфдагы_регенераторлык_.процестердх кгшейтгх жэне 6ecÍHrai, жетхншх рет . опондаганча буйректердецурылым-дьщ езгерхстер жгрдЬ Таяхрнбел! перитонитт! жануарлардан курса«; куысын озонмен емдегенде, емдеудхщ бхршп! ктнхнде ЛАТ-тиц . ортагаа актиателгэнд1гх акыцталди,бул процестердгц цалпына келух озонмен емдеудхч fiecinmi таулхгхнде байцалады.

Гб • "• " '

ПЕРЕЧЕНЬ СОКРЛШЕНИЙ

- здоисзшш! ¿ос^ориа;» кислота ДОС - антзюксидаитиая еиогсы^

- икислота ГПО -

ГР - глутатионродуктаза

КАТ - каталаза

МДА - иашюЕЫй диальдегид

КСН - молекулы средней массы

ПАШ - восстановленный никотинамидаденшщшугслеотид

Ш - ненасыщенные' кирные кислоты

ИОЛ - гтсрекиоисс окисление липидов

СОЛ - супероксиддисмутаза