Влияние метилфосфоновой кислоты на основе звенья гомеостаза белых лабораторных мышей

Плотникова, Ольга Михайловна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Влияние метилфосфоновой кислоты на основе звенья гомеостаза белых лабораторных мышей
ВАК РФ 03.01.04, Биохимия

Автореферат диссертации по теме "Влияние метилфосфоновой кислоты на основе звенья гомеостаза белых лабораторных мышей"

На правах рукописи

005015159

ПЛОТНИКОВА ОЛЬГА МИХАЙЛОВНА

ВЛИЯНИЕ МЕТИЛФОСФОНОВОЙ КИСЛОТЫ НА ОСНОВНЫЕ ЗВЕНЬЯ ГОМЕОСТАЗА БЕЛЫХ ЛАБОРАТОРНЫХ МЫШЕЙ

03.01.04 - Биохимия

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук

1 2 МАР 2012

Казань-2012

005015159

Работа выполнена в Федеральном государственном учреждении «Российский научный центр «Восстановительная травматология и ортопедия» имени академика ГЛ. Илизарова» (РНЦ «ВТО») Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации.

Научный консультант: доктор биологических наук, профессор

Лунёва Светлана Николаевна,

Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор

Чернова Ольга Александровна

доктор биологических наук, профессор Ральченко Ирина Викторовна

доктор медицинских наук Мустафин Ильшат Ганеевич

Ведущая организация:

ГБОУВПО «Челябинская государственная медицинская академия»

Защита диссертации состоится « 29 » марта 2012 г. в _13 часов на заседании диссертационного совета Д 212.081.08 при Казанском (Приволжском) федеральном университете по адресу: 420008, г. Казань, ул. Кремлевская, 18.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке им. Н.И.Лобачевского Казанского (Приволжского) федерального университета.

Автореферат разослан «. /4> ОЯг 2012 г.

Ученый секретарь диссертационного совета,

доктор биологических наук, профессор " (З И Абрамова)

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность исследования. В современном мире в повседневной жизни используются десятки новых не имеющих аналогов в природе органических веществ - ксенобиотиков, которые не входят в биотический круговорот, а являются прямым или косвенным продуктом хозяйственной деятельности человека. Это - химические отравляющие вещества, пестициды, детергенты, полиароматические углеводороды, синтетические красители, пищевые добавки и др. Попадая в окружающую природную среду, ксенобиотики могут нарушать обмен веществ, вызвать аллергические реакции и снижать иммунитет, изменять наследственные признаки и приводить к гибели организмов. Кроме того, вследствие биотрансформации и деградации в живых организмах и во внешней среде ксенобиотики могут образовывать не менее токсичные метаболиты (В.П. Ившин, 2005; С.А. Куценко, 2004; Е.И. Савельева, 2002; В.И. Юрин, 2001). Поэтому в настоящее время являются актуальными исследования устойчивости живых организмов к действию загрязняющих веществ антропогенного характера.

Среди загрязняющих веществ особое место занимают фосфорорганические соединения (ФОС), среди которых важнейшими являются производные алкилфосфоновых кислот, широко используемые в промышленности, строительстве, медицине, сельском хозяйстве (М.И. Кабачник, 1974; H.H. Мельников, 1995; Э.Е. Нифантьев, 1996). Это инсектициды карбофос, хлорофос, дихлофос и гербициды - особенно глифосат (фосфонометилглицин), применяемый с невиданным размахом для борьбы с сорняками во всем мире (С. Caroline, 1998; С. Сох, 2004). К производным алкилфосфонатов относятся и фосфорорганические отравляющие вещества (зарин, зоман и ви-икс) химического оружия, которое в настоящее время планомерно широкомасштабно уничтожается в рамках выполнения ФЦП «Уничтожение запасов химического оружия в Российской Федерации».

Продуктами деструкции фосфорорганических отравляющих веществ и некоторых пестицидов, а также их метаболитами в биологических средах являются метилфосфоновая кислота (МФК), ее соли и эфиры. Эти вещества являются достаточно устойчивыми соединениями. МФК была обнаружена спустя 10 лет после загрязнения на полигоне Дагуэй, а диизопропилмегилфосфонат - в грунтовых водах на территории арсенала РоккиМаунтин (США) (Е.И. Савельева, 2002; J. DeFrank, 2003; В. Frei, 1993; N.B. Munro, 1999). В силу особой устойчивости МФК принято считать одним из важнейших маркеров содержания продуктов распада ФОС в природной среде (О.Ю. Расстегаев, 2009).

животного. Однако, после ряда исследований влияния МФК на дикорастущие растения, ячмень, пелюшку, мхи, некоторые тест-организмы (Т.Я. Ашихмина, 2009; С.Ю. Огородникова, 2007) абсолютная безопасность МФК стала подвергаться сомнению. Был разработан биокатализатор, способный осуществлять деградацию МФК в присутствии источника углерода с разрывом С-Р связи до фосфата, который используется клетками как источник фосфора (А.Т. Харченко, 2000; E.N. Efremrnko, 2008).

Особое строение и свойства метилфосфоновой кислоты (МФК) -наличие малополярной фосфор-углеродной связи (С-Р-связи), близкие к фосфорной кислоте константы диссоциации, бифильность, могут приводить к ее неоднозначному влиянию на биологические объекты [C.B. Кононова 2002; H.H. Мельников, 1987; Е.И. Савельева, 2002].

Малополярная СН3-Р-связь МФК способна расщепляться в определенных условиях по гемолитическому механизму с образованием свободных радикалов. Метальный и фосфонатный радикалы могут реагировать с другими радикалами как «ловушки», с активными формами кислорода с образованием более токсичных соединений, быть инициатором цепных радикальных процессов в организме даже при низких концентрациях (10 -10" ). Информация о воздействии МФК и ее эфиров на метаболизм и антиоксидантную систему теплокровных животных и человека в литературе отсутствует.

Существуют отдельные данные о влиянии МФК на рост и ферментативную активность растений (С.Ю. Огородникова, 20047; H.H. Серебрякова, 2007). Ряд исследований, доказывающие существование микроорганизмов с С-Р-лиазной ферментативной активностью, подтверждают возможность участия веществ со связью С-Р в метаболических процессах (E.H. Ефременко, 2007; C.B. Кононова, 2002; И С Кравцов, 2006; C.B. Матыс, 2003; E.N. Efremrnko, 2008; T. Hidaka 1990- J DeFrank, 2003). ' ' '

Таким образом, широкое применение производных МФК в различных сферах деятельности человека, уничтожение химического оружия и связанная с этим проблема утилизации отходов, появление фосфорорганических ксенобиотиков в компонентах природной среды в малых дозах, с одной стороны, а также уникальное строение фосфонатов, их особая реакционная способность, возможность прямого и опосредованного действия на метаболизм животных и малая изученность такого влияния, с другой стороны, вызывает необходимость детального изучения влияния этих веществ на теплокровные организмы на уровне метаболических процессов.

аналитическими методами невозможно из-за очень низких концентраций. Важно уметь оценить влияние загрязнения в биологических объектах на самой ранней стадии, что имеет значимость как с точки зрения безопасности уничтожения ФОВ, так и с социальной стороны.

Цель исследования. Охарактеризовать изменения биохимических показателей метаболизма белых лабораторных мышей линии СВА после введения метилфосфоновой кислоты в различных дозах в остром, долговременном и хроническом периодах эксперимента, выявить наиболее информативные биохимические тесты, пригодные для лабораторной диагностики и мониторинга изменения состояния животных при влиянии м етилф осф о натов.

Задачи исследования.

1. Определить значения важнейших биохимических показателей углеводного, белкового и липидного обменов, антиоксидантной системы у здоровых белых лабораторных мышей линии СВА, содержащихся в стандартных условиях вивария.

2. Изучить влияние высокой дозы МФК (2 мг/кг) на биохимические показатели углеводного, белкового и липидного обменов, АОС белых лабораторных мышей в разные сроки острого эксперимента и определить временные интервалы максимального ответа в изменениях биохимических показателей крови и тканей.

3. Выявить изменения показателей метаболизма после введения различных доз МФК в остром эксперименте и определить дозы, оказывающие наибольшее влияние.

4. Оценить возможность нормализации биохимических показателей метаболизма белых лабораторных мышей в долговременном эксперименте после однократного введения МФК в высоких и низких дозах.

5. Изучить влияние различных доз МФК в хроническом эксперименте (12 недель) на активность некоторых ферментов, характеризующих функции печени, белых лабораторных мышей при различных способах введения.

6. Показать влияние пола на биохимический статус белых лабораторных мышей линии СВА в ответ на введение МФК.

7. Определить наиболее информативные биохимические показатели углеводного, белкового и липидного обменов, антиоксидантной системы белых лабораторных мышей, которые могут быть пригодными для лабораторной диагностики и мониторинга состояния животных при влиянии МФК. Оценить роль перекисного окисления липидов и белков при воздействии ксенобиотиков с С-Р связью.

Основные положения, выносимые на защиту: 1. МФК оказывает влияние на основные процессы метаболизма у лабораторных мышей, приводя к изменениям биохимических показателей, характеризующих углеводный, липидный и белковый обмен и работу антиоксидантной системы.

2. МФК обладает выраженным дозозависимым действием с максимальным влиянием на показатели метаболизма животных в диапазонах высоких и низких доз. После однократного введения высоких и низких доз МФК через 30 суток у лабораторных мышей происходит нормализация большинства показателей метаболизма.

3. Ответ на введение МФК во всех исследуемых дозах зависит от половой принадлежности животных.

4. Биохимические показатели метаболизма могут быть рекомендованы как биохимические маркеры при оценке воздействия на теплокровные организмы метилфосфонатов в высоких и низких дозах.

Научная новизна. Впервые комплексно исследовано влияние метилфосфоновой кислоты на важнейшие показатели обмена веществ, перекисного окисления липидов (ПОЛ) и белков (ПОБ), антиоксидакгной системы (АОС) белых лабораторных мышей. Показано, что МФК оказывает влияние на основные процессы метаболизма у мышей линии СВА, приводя к изменениям биохимических показателей, характеризующих углеводный, липидный и белковый обмен и работу антиоксидантной системы.

Впервые выявлены закономерности в изменениях показателей метаболизма под влиянием различных доз МФК в остром, долговременном и хроническом периодах эксперимента.

Впервые обнаружено, что ответ на введение МФК во всех исследуемых дозах зависит от половой принадлежности животных. Выявлено, что в ответ на воздействие МФК организм самцов реагировал на введение МФК более реактивно, и в остром эксперименте после однократного введения МФК в дозе 2 мг/кг первый максимум в изменении исследуемых показателей в остром периоде эксперимента отмечался через 12 часов у самцов и через 24 часа у самок. Впервые изучено, что у самцов через 12 часов после введения МФК в дозе 2 мг/кг происходили типичные для острого стресса изменения белкового обмена, рост маркеров окислительного распада белков при снижении активности СОД, через сутки - восстановление основных показателей метаболизма, снижение продуктов окислительного распада и увеличение активности СОД. Впервые показано, что особенностью изменения показателей метаболизма у самцов и самок через 72 часа после введения высоких доз МФК являлось снижение продуктов ПОБ и ПОЛ и повышение активности эритроцитарной СОД; снижение уровня гликогена в печени при повышении содержания пирувата в сыворотке; увеличение гликогена мышц у самцов и снижение у самок; снижение у самцов активности ферментов, характеризующих функцию печени, холинэстеразы и апанинаминотрансферазы.

Впервые показано, что МФК обладает выраженным дозозависимым действием с максимальным влиянием на показатели метаболизма животных в диапазонах высоких (2 и 103 мг/кг) и низких (10 9, 10"12 и 10"15 мг/кг) доз и минимальным - на уровне средних и очень низких (10~6 и 10~18 мг/кг) доз. Выявлено, что после введения низких доз МФК у самцов через 72 часа 6

происходило снижение уровня продуктов ПОЛ и рост продуктов ПОБ при повышении активности СОД, увеличение содержания средних молекул в плазме и эритроцитах. Изучено, что после введения низких доз МФК у самок через 72 часа активность СОД и уровень продуктов ПОБ оставались в пределах значений контрольных групп при снижении уровня продуктов ПОЛ; при этом содержание средних молекул повышалось только в эритроцитах, оставаясь в пределах нормы в плазме.

Впервые изучено влияние на мышей линии СВА высоких и низких доз МФК в долговременном эксперименте. Показано, что после однократного подкожного введения высоких и низких доз МФК через 18 суток у лабораторных мышей большинство показателей метаболизма нормализовалось. Выявлено, что через 30 суток после введения МФК в высоких и низких дозах на фоне нормализованных значений для большинства показателей метаболизма происходила активация перекисного окисления липидов и белков, а после введения МФК в низкой дозе -увеличение кетопроизводных белковых молекул.

Впервые показано, что хроническое поступление в виде подкожных инъекций в течение 12 недель высоких и низких доз МФК вызывало у самцов лабораторных мышей повышение активности ACT, АЛТ и холинэстеразы, максимально для холинэстеразы после введения низких доз МФК. Обнаружено, что у самок, наоборот, происходило снижение активности этих ферментов, максимально для АЛТ в 1,5 раза. Выявлено, что хроническое пероральное введение различных доз МФК не приводило у самцов к значимым изменениям в активности холинэстеразы и аминотрансфераз; у самок пероральное введение МФК в низкой дозе вызывало повышение активность ACT.

На основании полученных данных оценена возможность использования биохимических показателей метаболизма теплокровных организмов в качестве индикаторов антропогенного воздействия в районах влияния органических соединений с фосфор-углеродной связью. Впервые предложено, что в качестве биохимических показателей при оценке воздействия на теплокровные организмы метилфосфонатов в высоких и низких дозах могут быть использованы: маркеры работы АОС - продукты ПОБ в виде АФГ и КФГ, продукты ПОЛ виде МДА в плазме, активность эритроцитарной СОД и интегральные индексы свободно-радикального окисления СОД/ПОБ и СОД/МДА; маркеры эндогенной интоксикации -ВНСММ и ОП в плазме и эритроцитах и интегральный индекс интоксикации; энергетические маркеры - тканевый гликоген, пируват и лактат в сыворотке; активность ферментов-маркеров состояния печени - холинэстеразы, аланин-и аспартатаминотрансфераз.

Практическая значимость работы.

метаболизма, перекисного окисления липидов и белков, состояния АОС у теплокровных животных, а также по влиянию низких доз МФК. Полученные данные могут быть применены при оценке токсичности ФОС с использованием лабораторных мышей как тест-объектов.

Оценено дозозависимое действие МФК с максимальным влиянием на показатели метаболизма животных в диапазонах высоких (2 и 10"3 мг/кг) и низких (10 , 10" и 10"' мг/кг) доз и минимальным - на уровне средних и очень низких (10 6 и 10"18 мг/кг) доз.

Оценена информативность ряда биохимических показателей метаболизма теплокровных животных, которые могут быть использованы в качестве индикаторов воздействия нерегистрируемых приборами низких концентраций ФОС. Это может быть использовано при проведении мониторинга состояния здоровья людей, работающих с ФОС или проживающих в районах применения фосфорорганических пестицидов, особенно глифосата, и расположения объектов уничтожения фосфорорганических отравляющих веществ, а также при проведении экологического мониторинга животного мира для раннего обнаружения загрязнения ФОС окружающей среды.

Внедрение результатов исследования. Результаты исследования были использованы:

- для разработки в Межрегиональной лаборатории экотоксикологии РЦ СГЭКиМ по Курганской области трех методик, аттестованных ФГУП «Уральский научно-исследовательский институт метрологии»: «Методики выполнения измерений биохимических показателей в плазме (сыворотке) крови мелких теплокровных животных фотометрическим методом» (свидетельство об аттестации № 224.11.03.052/2009), «Методики определения гематологических показателей в крови мелких теплокровных животных микроскопическим методом» (свидетельство об аттестации № 224.11.17.025/2010), «Методики измерений активности ферментов в плазме (сыворотке) крови мелких теплокровных животных фотометрическим методом» (свидетельство об аттестации № 224.0474/01.00258/2011);

- при проведении исследований при обследовании объекта бывшего хранения химического оружия в Удмуртской Республике и мест прошлого уничтожения химического оружия в Пензенской области»;

- при проведении экотоксикологического мониторинга мелких грызунов в зонах защитных мероприятий объектов уничтожения химического оружия с фосфорорганическими отравляющими веществами в Курганской, Пензенской, Кировской областях в 2009-2011 годах.

Полученные результаты представляют практический интерес для природоохранных структур разного уровня и в дальнейшем могут стать основой для их внедрения в систему государственного экотоксикологического мониторинга химического загрязнения ФОС.

Апробация и публикации. Основные результаты диссертационного исследования доложены: на VII Всероссийской научно-практической 8

конференции «Проблемы региональной экологии в условиях устойчивого развития» (Киров, 2009); на VIII Всероссийской научно-практической конференции «Современные проблемы биомониторинга и биоиндикации» (Киров, 2010); на Юбилейной научной конференции, посвященной 80-летию Химфака МГУ «Химия и общество. Грани взаимодействия: вчера, сегодня, завтра» (Москва, 2009); на международной научно-практической конференции «Экология. Риск. Безопасность» (Курган, 2010); на Всероссийской молодежной научной конференции «Биология будущего: традиции и инновации» (Екатеринбург, 2010); на международной конференции «Антропогенная трансформация природной среды» (Пермь, 2010), на научно-практической конференции, посвященной 200-летию со дня рождения Н.И. Пирогова (Курган, 2010); на Всероссийской научно-практической конференции «Химическая безопасность Российской Федерации в современных условиях» (Санкт-Петербург, 2010); на международной научно-практической конференции «Состояние окружающей среды и здоровье населения» (Курган, 2011); на Всероссийской научно-практической конференции «Биологический мониторинг природно-техногенных систем» (Киров, 2011); на II Международной конференции по физиологии и медицине (Санкт-Петербург, 2011); на IX Всероссийской научно-практической конференции «Зыряновские чтения» (Курган, 2011).

По теме диссертации опубликовано 63 печатных работы, в числе которых 1 монография и 10 статей в изданиях, рекомендованных ВАКом РФ для публикации результатов диссертационных исследований.

Объем и структура работы. Работа изложена на 266 страницах машинописного текста, состоит из введения, 5 глав, заключения, практических рекомендаций, выводов, списка литературы, включая 38 таблиц и 106 рисунков. Библиографический указатель включает 512 источников: из них 407 - отечественных, 105 - зарубежных. Диссертационное исследование выполнено по плану НИР ФГБУ «РНЦ «ВТО» им. акад. Г.А. Илизарова», номер госрегистрации 0120.0802849.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Материалы и методы исследования. Работа выполнена на базе клинико-экспериментального лабораторного отдела ФГБУ РНЦ «ВТО» и Межрегиональной лаборатории экотоксикологии РЦ СГЭКиМ по Курганской области, которая аккредитована в Системе аккредитации аналитических лабораторий на техническую компетентность и независимость в проведении аналитических биохимических исследований с использованием биологического материала, полученного от мелких грызунов (аттестат аккредитации РОСС RU.0001.517720 в соответствии с ГОСТ Р ИСО/МЭК 17025-2006).

Экспериментальные исследования проведены на здоровых взрослых половозрелых белых лабораторных мышах (самцах и самках) линии СВА

(1900 животных) в возрасте 2-3 месяцев массой от 22 до 30 г с интервалом массы животных в сериях опытов ±2 г. Материалом исследования служили мышечная ткань, печень, сыворотка и плазма крови, эритроцитарная масса крови. Мыши содержались в однотипных изолированных клетках, единовременно получали сбалансированное питание (зерно, крупы, корма животного происхождения, корнеплоды) и воду в достаточном количестве.

Исследуемые нейтрализованные гидроксидом натрия растворы МФК (реактив МФК фирмы Sigma-Aldrich Fluka, Германия) вводили животным подкожно в брюшинной области в период с 9 до 12 часов, в хроническом эксперименте применяли перорапьное введение. Контрольным группам вводили эквивалентный объем физиологического раствора.

Эвтаназию проводили методом декапитации.

На проведение экспериментальных исследований получено разрешение комитета по этике при ФГБУ «РНЦ «ВТО» им. акад. Г.А. Илизарова». Все работы с лабораторными мышами проводили согласно принципам гуманного отношения к животным в соответствии с «Международными рекомендациями по проведению медико-биологических исследований с использованием животных», «Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных» и «Правилами лабораторной практики в Российской Федерации» (приказу МЗ РФ № 267 от 19.06.2003).

Для изучения влияния МФК на биохимические показатели метаболизма лабораторные мыши были разделены на пять серий: 1 серия интактных условно здоровых животных; 2 серия для установления оптимального времени максимальных и достоверных изменений изучаемых показателей; 3 серия для изучения «дозозависимого эффекта» в остром эксперименте; 4 серия для определения биохимических показателей метаболизма в долговременном эксперименте (30 суток); 5 серия для определения изменения активности некоторых ферментов после введения МФК в хроническом эксперименте (табл. 1). Внутри 1-3 серий опытов животных делили на три группы для изучения показателей белкового, липидного и углеводного обменов. В опытных и контрольных группах мышей делили на подгруппы самцов и самок.

Изучение влияния МФК в дозе 2 мг/кг на биохимические показатели метаболизма лабораторных мышей проводили через 12, 24, 48, 72, 96 и 120 часов после введения растворов .МФК. Долговременный и хронический эксперименты проводили в течение 30 дней: долговременный - после однократного введения МФК, а хронический - при еженедельном введении МФК. При изучении «дозозависимого эффекта» мышам вводили растворы МФК из расчета 10 10'6, 10"9, 10"'2, 10"15, 10 18 мг/кг массы животного, т.е. с «шагом» в три порядка, что составляет тысячные доли от ЛД50 (N.B. Munro, 1999). Опытные группы самцов и самок в зависимости от времени исследования после введения МФК обозначены как «12<?» и «12Ç», «24с?» и «24Ç» и т.д., и вводимой дозы — « 10 3<5'» и «10"3Ç», «1()"6с?» и «10"б$» и т.д. (табл. 1).

Собранную цельную кровь центрифугировали при 3000 об/мин в для разделения плазмы (сыворотки) и эритроцитарной массы. В течение 15 мин после отбора крови брали на анализ печень и скелетные мышцы бедра, определение гликогена в которых проводили в течение часа после забоя животных. В цельной крови лабораторных мышей определяли число эритроцитов и количество гемоглобина в эритроцитах.

В плазме крови определяли: показатели белкового обмена - общий белок и белковые фракции (альбумин и al-, a2-, ß-, у-глобулины); показатели эндогенной интоксикации и перекисного окисления белков - олигопептиды (ОП) и вещества низкой и средней молекулярной массы (ВНСММ) в плазме и эритроцитах, продукты перекисного окисления белков (ПОБ) в белковом осадке в виде альдегидо- и кето-2,4-динитрофенилгидразонов (АФГ и КФГ); показатели липидного обмена и перекисного окисления липидов (ПОЛ) -общие липиды, общий холестерин, триглицериды, малоновый диальдегид (МДА); активность ферментов - каталазы, аланин- и аспартатаминотрансфераз, холинэстеразы. Общий белок определяли спектрофотометрически биуретовым методом Кингслея-Вейксельбаума при 540 нм; электрофоретическое разделение белковых фракций проводили на системе Paragon (Beckman, США). В супернатанте определяли олигопептиды методом Лоури с регистрацией оптической плотности окрашенных комплексов при 750 нм; ВНСММ - путем регистрации спектра поглощения в ультрафиолете в диапазоне 238-298 нм с шагом в 1 нм по методу М.Я. Малаховой (1987); продукты ПОБ - в белковом осадке после осаждения трихлоруксусной кислотой по реакции с 2,4-динитрофенилгидразином - при 270 нм АФГ, при 363 и 370 нм КФГ. Общие липиды определяли спектрофотометрически с фосфованшшновым реактивом при Х=540 нм; общий холестерин - энзиматическим колориметрическим метод Триндера с 4-аминоантипирином при >.=500 нм; триглицериды - энзиматическим методом с помощью набора реактивов «Триглицериды-Ново» фирмы «Вектор-БЭСТ» (г. Новосибирск); содержание МДА - по реакции с тиобарбитуровой кислотой при 532 нм. Для определения активности ферментов в плазме использовали: для каталазы - метод М.А. Королюка, основанный на определении скорости разложения перекиси водорода; для ACT и АЛТ - унифицированный кинетический УФ-метод, основанный на реакциях переаминировании с дальнейшим восстановлением оксалоацетата или пирувата с участием НАДН; для холинэстеразы - кинетический метод с гексацианоферратом (III) калия в качестве хромогена.

Таблица 1

Серии Группы Особи лабораторных мышей Кол-во

1 серия Референтные значения Интактные группы, здоровые животные 60 с?

60 ? 120

2 серия Установление времени максимального изменения изучаемых показателей Группы Срок эксперимента

12 ч 24 ч 48 ч 72 ч 96 ч 120 ч

Опытные группы, введение МФК в дозе 2 мг/кг массы 3-10 з з-10(5 3-10 3 З-Ю с? З-Ю с? З-Ю с? 720

3-10 ^ 3-10$ 3-10$ з-ю 2 3-Ю9 з-ю 9

Контрольные группы, введение физраствора 3-10 3 3-Ю 3 3-10 5 З-Ю С? З-Ю с? З-Ю С?

3-10? 3-10? 3-10 2 з-ю9 3-10$ з-ю 2

3 серия Изучение дозозависи-мого эффекта Группы Дозы МФК. мг/кг 480

10 10"6 ю-" Ю-12 10"ь Ю-1*

Опытные группы, введете МФК в различных дозах 3-10 с? з-ю 3 3*10 сЗ 3-10 С? 3-10 с? З-ю С?

з-ю 9 3*10$ 3-10 $ з-ю9 з-ю 9 з-ю 9

Контрольные группы, введение физраствора 3-20 3

3-20 <?

4 серия Изучение периода нормализации биохимически х показателей Группы Доза МФК, мг/кг Срок эксперимента 300

3 сут 6 сут 12 сут 18 сут 30 сут

Опытные группы, белковый обмен КГ1 10(5 Юс? Юс? Юс? 10 3

ю-15 Юс? Юс? Юс? Юс? юз

Опытные группы, углеводный обмен 10* Ю5 10 2 10 9 Ю9 ю 2

Ю-12 10? 10 9 10 9 Ю9 Ю 2

Опытные группы, липидный обмен 2 ю 9 10 $ 10 9 ю 2 10 2

ю-15 ю 2 10 $ Ю9 ю 9 10 2

Контрольные группы, введение физраствора - 2-10 с? Юс? Юс? -

- 4-10 $ 2-10 9 2-ю 9 - -

5 серия Изучение активности печеночных ферментов Острый эксперимент Дозы МФК. мг/кг 280

2 10Г* 10 1(Ги Ю-14 Ю-18

Опытные группы, введение МФК в различных дозах 20 с? 20 с? 20 с? 20 с? 20 с? 20 с? 20 с?

Контрольная группа 20 с?

Хронический эксперимент Доза МФК 10"3 мг/кг Доза МФК 10"15 мг/кг

В нутримышечное введение МФК ю 3 10? Юс? 10 2

Пероралыюе введение МФК Юс? 10? Юс? Ю9

Контрольные группы ю (5 и ю $

Всего животных в эксперименте: 1900

В печени количественное определение гликогена проводили с антроновым реактивом прямым методом, в мышцах - после двукратного переосаждения спиртом. В скелетных мышцах содержание креатина определяли по реакции с диацетилом, креатинфосфата - по содержанию фосфора в безбелковом экстракте.

В сыворотке крови определяли содержание продуктов гликолиза -пирувата (ПВК) и лактата, а также активность ферментов -лактатдегидрогеназы (ЛДГ) и креатинкиназы (КК). Определение концентрации ПВК проводили модифицированным методом Умбрайта при 440 нм, лактата - энзиматическим методом с 4-аминоантипирином при 505 нм. Активность ферментов ЛДГ и КК определяли спектрофотометрическим методом при А.=340 нм с помощью наборов фирм DiaSys Diagnostic и Vital Diagnostic (Россия) соответственно.

В эритроцитах определяли активность СОД по реакции, основанной на способности фермента конкурировать с нитросиним тетразолием (НСТ) за супероксидные анионы, образующиеся в результате аэробного взаимодействия НАДН и феназинметсульфата, за единицу активности СОД принимали количество фермента необходимого для 50% ингибирования реакции восстановления НСТ (Г.И. Назаренко, 2006; B.C. Камышников, 2004).

Статистическую обработку данных проводили с использованием критериев непараметрической статистики: при исключении выбросов использовали метод Титьена-Мура, проверяя минимум и максимум значений выборки; достоверность различий между двумя выборками определяли по W-критерию Вилкоксона-Манна-Уитни для независимых выборок. Критический уровень значимости при проверке статистических гипотез принимали менее 0,05. Результаты анализов усредняли с помощью медианы, на основании которой считали различия в процентах (%) опытных и контрольных групп. Корреляционную зависимость между выборками, подчиняющимися нормальному распределению, оценивали по критерию Пирсона, не подчиняющимися закону распределения - по критерию Кендалла. Результаты корреляционного анализа представляли в виде коэффициента корреляции с уровнем значимости р<0,05 и уравнения регрессии. Факторный анализ проводили методом главных факторов, метод оценки общностей - анализ главных компонент (Гайдышев, 2001; Гланц, 1998). Для облегчения интерпретируемости факторов матрицу факторных коэффициентов преобразовывали методом Varimax-вращения в матрицу факторного отображения. При статистической обработке результатов исследования был использован интегратор модульной программы AtleStat 1.0 для программы Microsoft Excel, разработанный в лаборатории информационно-вычислительного центра ФГУН «РНЦ «ВТО» им. академика Г.А. Илизарова» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации И.П. Гайдышевым.

Результаты исследования

Особенности изменений показателей метаболизма белых лабораторных мышей после введения метилфосфоиовой кислоты в дозе 2 мг/кг в разные сроки острого эксперимента.

В течение первых суток острого эксперимента реакция организма животных в ответ на введение МФК напрямую ярко зависела от половой принадлежности.

В остром эксперименте через 12 часов после введения МФК в дозе 2 мг/кг у самцов наблюдали типичные для острого стресса изменения биохимических показателей: гиперпродукцию альфа- и бета-глобулинов при уменьшении гамма-глобулиновой фракции на 35% (рис. 1), увеличение содержания ОП в эритроцитах в 2 раза и ВНСММ в плазме в 1,4 раза с резким увеличением катаболической фракции, рост маркеров окислительного распада белков - продуктов ПОБ, особенно кетопроизводных - в 1,9 раза (рис. 2).

—&—Альбумин —О—уЛ-Г —о—а2-Г

Рис. 1. Изменение содержания белковых фракций в плазме кроки самцов в зависимости от времени после введения МФК в дозе 2 мг/кг. Примечание: К - контрольная группа; по оси абсцисс - срок окончания эксперимента после введения МФК; значения отличий в процентах указаны в случае статистически значимых различий при р<0,05.

Рис. 2. Изменение содержания ВНСММ в плазме и ОП в эритроцитах, продуктов ПОБ в виде АФГ и КФГ в плазме крови самцов в зависимости от времени после введения МФК в дозе 2 мг/кг. Примечание см. рис. 1.

К 12 ч 24 ч 48 ч 72 ч 96 ч 120 ч

-О—ОПэр —я— внемм™

К 12 ч 24 ч 48 ч 72 ч 96 ч 120 ч —й— АФГ —Ж— КФГ

Наблюдаемые изменения происходили при снижении активности СОД на 22% и указывали на развитие синдрома эндогенной интоксикации за счет накопления эндотоксинов, что подтверждает возросший в 1,9 раза индекс интоксикации (рис. 3); при этом рост ВНСММ в плазме предполагает ускорение биотрансформации (утилизации) ОП до более мелких молекул, а снижение уровня ВНСММ в эритроцитах в это время указывает, скорее всего, об успешной работе детоксицирующей функции печени. Характеризующий соотношение основного ферментного антиоксидантного фактора с показателем патогенного действия свободных радикалов функциональный показатель свободно-радикального окисления СОД/ПОБ был снижен на 37% в отличие от СОД/МДА, который имел тенденцию к росту из-за уменьшившегося на 47% уровня продуктов ПОЛ.

о юо и

^ 50 0

; 1741

/ 114

78 ' _62_

К 12ч 24 ч 48 ч 72 ч 96 ч 120 ч -»—СОД

I" 150

а &

^ 100

| 190 !

|/ \ 1

/' Л / 1 1 \ Р

| \ 1 1 > I 1 1 1 72 76

К 12 ч 24 ч 48 ч 72 ч 96 ч 120 ч -о—ИИ

Рис. 3. Изменение активности СОД и индекса интоксикации в плазме крови самцов в зависимости от времени после введения МФК в дозе 2 мг/кг. Примечание см. рис. 1.

Для важнейших энергетических субстратов гликолиза - гликогена в печени и мышцах, ПВК в сыворотке крови, идущих, в том числе, для обеспечения специфической и неспецифической резистентности организма, через 12 часов после введения МФК в дозе 2 мг/кг у самцов отмечалось снижение их уровня, сопровождающееся значительным повышением активности КК (рис. 4).

Через 24 часа после введения МФК происходило восстановление уровня гликогена печени и мышц при увеличении скорости гликолиза (уровень ПВК увеличивался в 1,38 раза) и уменьшении роли креатин-киназного пути энергообеспечения мышц. Обращает на себя внимание, что активность ЛДГ после введения МФК в дозе 2 мг/кг менялась недостоверно или незначительно при любом сроке эксперимента (рис. 4) что связано, видимо, с особой ролью ЛДГ в регулировании состояния протонного пула, влияющего на рН плазмы.

¡2 ч 24 ч -о— ПВК

Рис. 4. Изменение содержания гликогена в печени и мышцах, ПВК, активности ЛДГ КК в сыворотке крови, креатинфосфата и креатина самцов в зависимости от времени после введения МФК в дозе 2 мг/кг. Примечание см. рис. 1.

К 12 ч 24 ч 48 ч 72 ч 96 ч 120 ч Гликоген печени —й— Гликоген мышц

250

гг

§21»

£ 150

н о 100

К 12 ч 24 ч 48 ч 72 ч 96 ч 120 ч —й—Креатин —о—Креатинфосфат

К концу первых суток происходило постепенное уменьшение белков острой фазы (рис. 1) и продуктов ПОБ (рис. 2) при значительном (в 1,7 раза) увеличении активности СОД (рис. 3). Одновременное уменьшение содержания средних молекул и ОП в эритроцитах и повышение ОП в плазме указывало на накопление продуктов распада белковых молекул (рис. 5). Катаболическая составляющая средних молекул была после введения МФК в дозе 2 мг/кг максимально (в 1,76 раза) повышена.

Рис. 5. Изменение содержания олигопептидов (ОП) и веществ _________ __ _____

молекулярной массы (ВНСММ) в плазме и эритроцитах крови самцов в зависимости от времени после введения МФК в дозе 2 мг/кг. Примечание см. рис. 1.

12 ч 24 ч -ОПпл

В отличие от самцов у самок через 12 часов после введения МФК отмечена лишь гипер-у-глобулинемия, сопровождаемая снижением а1-16

глобулинов, а также незначительное повышение ОП и средних молекул в плазме при снижении их в эритроцитах (рис. 6).

Рис. 6. Изменение содержания альбумина (Ал) и а1-, а2-, |3-, у-глобулииов, ОН и ВНСММ в плазме и эритроцитах крови самок в зависимости от времени после введения МФК в дозе 2 мг/кг. Примечание см. рис. 1.

К 12м 24 'I 48 ч 72 ч 96 ч 120 ч —Ал —о— ч2-Г —ж—Р-Г

12 ч 24 ч 48 ч 72 ч 96 ч 120 ч - ВНСММпл -а— ОПш!

12ч 24 ч 48 ч 72 ч ВНСММ эр —й-

В это же время происходило уменьшение продуктов ПОБ при снижении активности СОД в 2 раза (рис. 7). Содержание МДА было в пределах нормы. Однако пониженные функциональные показатели свободно-радикального окисления (ФП СРО) - СОД/МДА в 2 раза, СОД/ПОБ в 1,6 раза указывали на разрушительное действие свободных радикалов.

ь 50

121^- .13- ч Ш

51 —-

К 12 ч 24 ч 48 ч 72 ч 96 ч 120 ч —Л~ А ФГ —ж— КФГ

К 12 ч 24 ч 48 ч 72 ч 96 ч 120 ч —•—СОД

Рис. 7. Изменение содержания продуктов ПОБ в виде АФГ и КФГ в плазме и активность СОД в эритроцитах крови самок в зависимости от времени после введения МФК в дозе 2 мг/кг. Примечание см. рис. 1.

Из энергетических субстратов у самок через 12 часов после введения МФК изменялось (уменьшалось на 10-30%) только содержание легко мобилизуемых по анаэробному пути креатина и КрФ (рис. 8).

]/Д2<Г -^¿27

79\ ЙЧ / *

200

« 150

§■

о 100 6

S 50

К 12ч 24ч 48ч 72ч 96ч 120ч ]— Гликоген печени —й— Гликоген мышц

100

; 70 J 82

; !

К 12ч 24ч 48ч 72ч 96ч 120ч -6— Креатин —«— Креэтннфосфаг

200

« 150

f 100

£ 50 0

--,--1--1 leo-i-1- i i i 1 1

or* ' ' / "¡i-A-Л. ' Я ; " ; 73 ' '77

i i i : ;

К 12ч 24ч 48ч 72ч 96ч 120ч —о—Г1ВК —й— ЛДГ

К 12ч 24ч 48ч 72ч %ч 120ч -Ж-КК

Рис. 8. Изменение содержания гликогена в печени и мышцах, пирувэта, активности ЛДГ и креагинкиназы в сыворотке, креатина и креатинфосфата в мышцах у самок в зависимости от времени после введения МФК в дозе 2 мг/кг. Примечание см. рис. 1.

Через 24 часа после введения МФК у самок отмечено небольшое увеличение уровня альбуминов и острофазовых белков при снижении у-глобулиновой фракции (рис. 6). В это же время активность СОД оставались в пределах значений в контрольной группе, а уровень кетопроизводных в плазме (рис. 7) и ОП в эритроцитах нарастали (рис. 6), свидетельствуя об окислительной модификации белков.

Значения большинства показателей, как у самцов, так и у самок, через 48 часов после введения МФК либо достоверно не отличались от контроля, либо отличалось от таковых не более чем на 20%. Для самцов было отмечено гипер-а 1 -глобулинемия, рост уровня общих липидов и гликогена в тканях, особенно в мышцах (в 1,7 раза), а для самок - гипо-а1-глобулинемия при росте у-глобулиновой фракции, снижение уровня общих липидов и гликогена в тканях. Со стороны работы АОС у самцов было отмечено снижение активности СОД при пониженном на треть ФП СРО (СОД/ПОБ и СОД/МДА); а у самок - повышенная активность СОД, способствовавшая снижению уровня всех продуктов перекисиого окисления и повышению ФП СРО в 1,5-1,8 раза.

Через 72 часа после введения МФК в дозе 2 мг/кг у самцов и самок наблюдался второй максимум в изменениях изучаемых показателей 18

У самцов через трое суток после введения МФК в дозе 2 мг/кг развивалась гиперглобулинемия при понижении уровня альбумина, как основного резервного белка в организме (рис. 1), что связано, скорее всего, с ускорением его катаболизма для высвобождения аминокислотного пула, необходимого для достаточного синтеза острофазовых белков в печени. Уровень ОП и средних молекул в крови самцов был также понижен (рис. 5). Об активации работы АОС в это время свидетельствуют высокие показатели свободно-радикального окисления (рис. 9) за счет пониженного уровня продуктов ПОБ и ПОЛ при повышенной активности СОД (рис. 3).

зависимости от времени после введения МФК в дозе 2 мг/кг. Примечание рис. см. 1.

У самок гиперпродукция глобулинов была менее выражена на фоне повышения уровня альбуминов (рис. 6), ответственных за транспорт, в том числе эндотоксинов, таких как, ОП, средние молекулы, продукты ПОБ в плазме - у самок их уровень был ниже, чем у самцов. При повышении активности СОД (рис. 7) это предполагает в ответ на введение МФК более эффективную работу АОС (интегральные индексы свободно-радикального окисления возросли почти в 2 раза, рис. 9). Увеличение уровня ВНСММ в эритроцитах на фоне снижения этих веществ в плазме у самок (рис. 6), очевидно, указывает на достаточную сорбционную емкость эритроцитов.

Через трое суток после введения МФК в дозе 2 мг/кг у самцов и самок происходила активация гликогенолиза и гликолиза - уровень гликогена в печени падал с одновременным увеличением содержания ПВК и активности ЛДГ в крови. Однако при этом в скелетных мышцах у самцов активизировались анаболические процессы, а у самок - расход мышечного гликогена со снижением его уровня почти в 5 раз (рис. 4, 8).

Влияние МФК в период 96-120 часов после ее введения в организм животных минимизировалось. У самцов и самок через 120 часов после введения МФК в дозе 2 мг/кг показатели, указывающие на белковую деградацию, имели недостоверно отличающиеся значения по сравнению с контрольными группами. Однако для самцов повышенный уровень МДА при снижении уровня общих липидов и холестерина на 20-25%

свидетельствовали о влиянии окислительного стресса при позднем сроке эксперимента на липидные компоненты плазмы крови. У самцов преобладали процессы образования гликогена в тканях - повышение составило 138 и 165% в печени и мышцах соответственно; содержание ПВК и активность ЛДГ в сыворотке были повышены на 10-20% при уменьшении уровня субстратов креатинфосфатного энергообеспечения в мышцах (рис. 4). У самок в этот период отмечен повышенный в 1,27 раза уровень печеночного гликогена и при незначительном, но достоверном росте альбумина гипер-у-глобулинемия (рис. 6, 8).

В целом анализ изменений биохимических показателей метаболизма лабораторных мышей после подкожного введения МФК в дозе 2 мг/кг в разные периоды острого эксперимента показал, что в ответ на воздействие МФК организм самцов реагировал на введение МФК более реактивно, а для самок по сравнению с самцами характерна большая стресс-устойчивость.

Максимальные отклонения значений изучаемых показателей относительно контроля наблюдалось через 72 часа, что наглядно было показано при применении коэффициента, характеризующего степень изменений (рис. 10). Поэтому следующий этап работы - дозозависимый эксперимент - проводили через 72 часа.

I 2,5

I Г

1Г 0,5 0,0

1,9 1

А;

_ 1,0

0,6 ; о,б

2,5 2,0

8 3 1,5

I * 0,0

/ V

1.1 1 /; \

—1° 1 : V

12ч 24ч 48ч 72ч 96ч 120ч Самцы

12ч 24ч 48ч 72ч 96ч 120ч Самки

Рис. 10. Изменение рассчитанного коэффициента степени изменений биохимических показателей в зависимости от времени после введения МФК в дозе 2 мг/кг.

Особенности изменений показателей метаболизма белых лабораторных мышей через 72 часа после введения различных доз метилфосфоновой кислоты. При изучении дозовой зависимости нами было отмечено, что у самцов и самок лабораторных мышей в ответ на введение различных доз МФК изменения в содержании общего белка и белковых фракций были, в основном, схожими, но менее выраженными у самок (рис. 11). Уровень общего белкау самцов и у самок был повышен на 10-15% после введения всех доз МФК, а уровень альбумина был в пределах значений в контрольных группах и различался лишь после введения МФК в высокой (2 мг/кг) дозе - у самцов он понижался, а у самок на почти треть повышался. Основные изменения в белковом обмене в ответ на введение различных доз МФК через 72 часа у самцов происходили за счет всех фракций глобулинов, а у самок было отмечено увеличение глобулинов острофазовых альфа2- и бета- фракций при снижении уровня гамма-глобулинов при действии низких 20

доз МФК, что наблюдается, как правило, при иммунодефицитных состояниях (рис. 11).________

150 |25

3100

ь-

75 50

118

гШ

2 103 10° 1015 дозьг М ФК, мг/кг

□ Альбумин Па1- Е1 сс2-

150

1ПП ---

о 100

н о

75 50

пз

ШГ'

2 10 10 10' дозы МФК. мг/кг

а|5- ш у-

Самцы

200

с;

1 150 8

4 100 50

] 202

150 ; 1

127 1 ! П-1 : ^ 1—1 в _

2 10 10 дозы МФК, мг/кг О Альбумин Оа1-Г ¡3 а2-Г'

150

§ 125 а

I >°°

Ь-

| 15 50

Шипи га га

11 «II

«1 79

2 10 10 дозы МФК, мг/кг □ р-Г Оу-Г

_Самки _

Рис. 1Т7Йзменеиие содержания белковых фракций: альбумина, а1-, а2-, Р-, у-глобулипов в плазме крови самцов и самок через 72 часа после введения различных доз МФК. Примечание: указаны проценты в случае достоверных отличий при р<0,05.

Характеризуя работу АОС и глубину протекания процессов ПОЛ и ПОБ, было отмечено, что после введения различных доз МФК у самцов активность СОД была повышена - на 14-18% под действием высоких доз и на 28-57% под действием низких доз МФК (рис. 12).

200

^150

^100 50

157 ;

114 га 118 118 И . . И : ш

! 1 ' ил 89

105 ю" 10" 10 " 10"

дозы МФК, мг/кг

а сод

„-9

«12

200

!'50 и

¡е юо 50

лгч—,----

159

¡26,

-гш:

тг

XГ

2 10 10 10 10 10 дозы МФК, мг/кг

□ СОД/МДА □ СОД/ПОБ

,-15

Рис. 12. Изменение активности СОД в эритроцитах крови самцов и показателей свободно-радикального окисления белков и липидов (СОД/ПОБ и СОД/МДА) через 72 часа после введения различных доз МФК. Примечание см. рис. 11.

Концентрация продуктов перекисного окисления белков и липидов в плазме крови самцов под действием высоких доз МФК существенно

снижались (рис. 13). Вероятно, МФК в высоких дозах выступает как ловушка свободных радикалов. Повышенная в 1,57 раза активность СОД после введения МФК в дозе 10"12 мг/кг сдерживала рост продуктов перекисиого окисления и белков и липидов, содержание которых не отличалось от значений в контрольных группах. Повышение активности СОД в 1,28 раза после введения МФК в дозе 1(Г15 мг/кг, тем не менее, не способствовало снижению уровня продуктов ПОБ в виде АФГ и КФГ, содержание которых увеличилось в 1,35 и 1,77 раза соответственно. Однако при этом происходило уменьшение МДА. Функциональные показатели свободно-радикального окисления были, в основном, повышены, что является хорошим прогностическим фактором (рис. 12). Увеличение продуктов ПОБ наряду с увеличением активности СОД свидетельствовало, скорее всего, о появлении дополнительного источника радикального влияния, которым стала МФК -источник свободных радикалов («СН3 и -РОз^) при разрыве С-Р связи. Образовавшиеся радикалы -СН, и -РОЛЬ выступили, по-видимому, как «ловушки» радикалов с обрывом цепи радикальных процессов ('СН3 + «ОН -> СН3ОН и 'РОзН2 + ЮН -> Н3Р04), и как источники электронов с образованием супероксидного анион-радикала 02'" ('Р03Н2 - е + 02+ Н20 -» 02' + Н3Р04 или 'СН3 + 02 -» СНз" + 02").

— ; чтг

Па» ПЕН

1 и--

59 28

о ю 10"" 10" ю

дозы М ФК, мг/кг □ АФГ ЭКФГ

-150

£100

133 ...........

70 ■ т ; 1 93

10"' 10'® 10"'! 10"' дозы МФК, мг/кг И МДА

Рис. 13. Изменение содержания продуктов ПОБ (в виде АФГ и КФГ) и ПОЛ в виде МДА в плазме крови самцов через 72 часа после введения различных доз МФК Примечание см. рис. 11.

Анализ изменений маркеров эндогенной интоксикации в крови самцов лабораторных мышей показал, что введение различных доз МФК приводило к повышенному образованию ОП, уровень которых в плазме был всегда выше, чем в эритроцитах (рис. 14).

200 150

* 100 6

190

П6 143

1*Г га Гга 110 111)

2 10" 10° 10' 10'12 10'" 10"' дозы МФК, мг/кг □ ОПпи Я ОПэр

.15

200

5 150

§ 100 6

* 50 0

СГ

„.6

,15

2 10 10 10" 10 10 10

дозы МФК. мг/кг ОВНСММпл ЫВНСММэр

Олигопсптиды

Вещества низкой и средней массы

Рис. 14. Изменение содержания ОГ1 и ВНСММ в плазме и эритроцитах крови самцов через 72 часа после введения МФК в различных дозах. Примечание см. рис. 11.

Одновременное повышение содержания ВНСММ в плазме и эритроцитах на 47 и 20% соответственно было отмечено у самцов только после введения низкой (1015 мг/кг) дозы МФК, повышение в плазме происходило за счет катаболической составляющей, уровень которой возрастал в 1,5 раза. Этот факт вкупе с особенно резким повышением уровня ОП в плазме самцов при незначительном росте в эритроцитах (при дозе МФК 10 " мг/кг) свидетельствовало об усилении интоксикации.

У самок достоверно активность СОД повышалась только в ответ на воздействие высоких доз МФК (на 137 и 114% после введения МФК в дозах 2 и 10"3 мг/кг соответственно) (рис. 15).

Ё 50

| ЕВ из п

щ 7Ж 41 78 85 ЬИ '»1 70

46 21

10 10 10 дозы МФК. мг/кг

150

о 50

129 ; Ш ' 1,0 Ш

1 ш ш 69

65 |

10 10 10' 10 * 10 Ю дозы МФК, мг/кг

0МДА

^150

5100

¡5

£ 50 О

137 :

1 1 ™ <3 ' ЙЙ

92 ш

69 :

10" 10° 10"' 10"'г 10" 10 дозы МФК, мг/кг

а сод

,-15

200

I150 2 100

160

(«и

тг

с=ст 92

2 103 10"' 10® 10"'! Ю" дозы М ФК, мг/кг

а содеидА □ сод/поб

Рис. 15. Изменение содержания продуктов ПОБ в виде АФГ и КФГ и ПОЛ в виде МДА в плазме, активности СОД в эритроцитах крови самок и показателя свободно-радикального окисления через 72 часа после введения различных доз МФК. Примечание см. рис. 11.

Это сопровождалось существенным снижением продуктов перекисного окисления белков и липидов - на 19-27% альдегидопроизводных, 54-79% кетопроизводных, на 20-35% МДА. Повышение на треть продуктов перекисного окисления при снижении активиости СОД происходило лишь при действии МФК в дозе 109 мг/кг. В дозе 10"'5 мг/кг у самок в отличие от самцов активность СОД повышалась незначительно, что сопровождалось небольшим ростом продуктов окисления белков до альдегидопроизводных (повышение АФГ на 13%) при снижении продуктов ПОЛ в виде МДА в 3 раза. По-видимому, это указывает на более эффективную работу АОС у самок и наличие у них более гибких адаптивных систем, что позволяет лучше приспосабливаться к действующему негативному фактору.

У самок введение МФК не вызывало столь значительного образования ОП как у самцов, особенно в плазме, а после введения МФК в дозе 2 мг/кг отмечено даже снижение их уровня в плазме в 2 раза (рис. 16). В отличие от самцов, МФК в дозе 10"15 мг/кг привело к увеличению ОП только в плазме на 30%. В этой же дозе МФК способствовала накоплению средних молекул только в эритроцитах - в 1,4 раза за счет катаболической составляющей. Накопление средних молекул у самок в основном в эритроцитах является свидетельством, скорее всего, нормального функционирования гликокаликса эритроцитов как переносчиков эндотоксинов.

| МО

■ 50

(21

129

10»:

131

130"

ю'3 10" 10" 10"* 10"'

дозы МФК, мг/кг □ ОПпл И О пэр

,,-6

л-12

150

§ о

1*100

о у

| 50 0

122

2 Ю"3 10° 10' 10" 10"

до1ы МФК, мг/кг □ ВНСММпл ВНСММ^р

„-6

,-12

Олигопептиды

Вещества низкой и средней массы

Рис. 16. Изменение содержания ОП и ВНСММ в плазме и эритроцитах крови самок через 72 часа после введения МФК в различных дозах. Примечание см. рис. 11.

Эти данные позволили нам утверждать, что самцы более подвержены влиянию МФК, особенно в низкой дозе - для них характерно развитие синдрома эндогенной интоксикации. Так, после введения дозы МФК 10"3 мг/кг индекс интоксикации (ИИ) у самцов возрастал в 1,4, у самок падал в 1,2 раза, после введения низкой дозы МФК (1015 мг/кг) у самцов ИИ возрастал в 2,3, а у самок - только в 1,4 раза (рис. 17). Тем не менее, ИИ оставался повышенным даже после введения МФК в дозе 10"18 мг/кг независимо от половой принадлежности животных.

10 10 Ю"9 10"'2 10"'

дозы МФК, мг/кг О ИИ

10 10 10 10 10 дозы МФК, мг/кг □ ИИ

Самцы

Самки

Рис. 17. Изменение интегрального индекса эндогенной интоксикации (ИИ) в крови самцов и самок после введения различных доз МФК. Примечание см. рис. 11.

У самцов после введения высоких доз МФК в тканях печени гликогенез, сопровождающийся повышением концентрации в крови лактата и пирувата (рис. 18). Для гликогена, выделенного их мышечной ткани у самцов, характерно волнообразное изменение - под действием высокой и низких доз МФК преобладал гликонеогенез, на что указывало снижение лактата и пирувата при увеличении активности ЛДГ. Содержание креатина и КрФ было, в основном, понижено. Изменения энергетических субстратов указывают, скорее всего, на регуляторное действие МФК.

2 10"3 106 10"' 10"12 10'5 10"" дозы МФК, мг/кг В Гликоген мышц

ю-3 ю-6 ю-9 Ю"12 ю-'5 1018

дозы МФК, мг/кг 0 Гликоген печени

2 10"3 10"' 10"' 10"'2 1015 Ю-18 дозы МФК, мг/кг К2ИПВК К5ИЛактат —•—ЛДГ

2 10"' 10* 10"' 10"" 10"'5 Ш"18 дозы М ФК, мг/кг С££Я КрФ Ш£.а Креатин —КК

Рис. 18. Изменение содержания субстратов углеводного обмена - гликогена в печени и ПВК, лактата и активности ЛДГ, КК в сыворотке, гликогена, креатина и КрФ в мышцах у самцов опытных групп через 72 часа после введения различных доз МФК. Примечание см. рис. 11.

Влияние МФК практически во всех дозах на углеводный обмен у самок приводило к распаду гликогена в тканях, особенно в мышцах (рис. 19). Содержание пирувата при действии низких доз МФК уменьшалось в 2-3 раза, что указывает, вероятно, на перераспределение энергетических ресурсов в ответ на стресс. Содержание анаэробного макроэрга КрФ в мышцах изменялось, в основном, недостоверно и было повышено только после введения МФК в дозе 10"12 мг/кг при неспецифическом снижении активности КК (рис. 19). Активность сывороточной ЛДГ оставалась незначительно повышенной независимо от вводимой дозы МФК, что подтверждает особую роль ЛДГ - катализировать обратимую стадию гликолиза (ПВК<->МК) и быть индикатором буферной емкости всех систем организма.

КК в сыворотке, гликогена, креатина и КрФ в мышцах у самок опытных групп через 72 часа после введения различных доз МФК. Примечание см. рис. 11.

Сравнительный анализ изменений биохимических показателей метаболизма у самцов и самок лабораторных мышей через 72 часа после введения МФК в дозах 2, 103, 10"6, 10"9, 10"12, 10 '5, 10 18 мг/кг показал, что однократное введение различных доз МФК вызывало достоверное изменение большинства изучаемых показателей. При этом была отмечена закономерность волнообразного характера с максимальным влиянием МФК в диапазонах высоких (2 и 10 3 мг/кг) и низких (10~9, К)12 и 1015 мг/кг) доз и минимальным влиянием на уровне 10~6 и 10"18 мг/кг доз МФК (рис. 20).

Самцы

Самки

Рис. 20. Изменение коэффициента степени изменений биохимических зависимости от вводимых доз МФК самцам лабораторных мышей.

Факторный анализ биохимических показателей метаболизма мышей линии СВА через 72 часа после введения МФК в дозе 10"3 мг/кг выявил наличие 2-х групп факторов (табл. 2). Эти факторы названы нами для самцов - фактором мембранного транспорта (ВНСММ, ОП, холестерин, общие липиды) и мышечной деградации (гликоген мышц и ВНСММ в эритроцитах) и для самок - фактором функции печени (гликоген печени и общие белки) и ПОЛ с нарушением мембранных липидов (МДА, СОД и холестерин).

Таблица 2

Факторные нагрузки биохимических показателей лабораторных мышей через 72 часа после введения МФК в дозе 10'3 мг/кг_______

Самцы 1 2 Самки 1 2 3

Холестерин 0,949 Гликоген печени -0,828

ОП в плазме 0,873 Общий белок 0,775

Общие липиды 0,835 МДА 0,967

ВНСММ в плазме 0,733 СОД 0,569

ВНСММ в эритроцитах -0,912 Холестерин 0,555

Гликоген мышц -0,965 Гликоген мышц 0,904

Выделенные дисперсии,% 26 20 Выделенные дисперсии, % 22 20 16

'ШЫ II, /о___и, /ц____

Примечание. Факторные нагрузки признаков, значения которых в повернутой матрице факторного отображения не превышают по модулю 0,5, и выделенные дисперсии в прямой матрице не превышающие 10% не показаны.

Через 72 часа после введения МФК в дозе 10~'5 мг/кг у самцов и у самок показатели группировались возле одного фактора, который у самцов реализовывался нагрузками ОП и ВНСММ в эритроцитах («фактор сорбции эндотоксинов эритроцитами»), а у самок - нагрузками энергетических показателей, в основном, гликогеном мышц (табл. 3).

Таблица 3

Факторные нагрузки биохимических показателей лабораторных мышей через 72 часа после введения МФК в дозе 10"15 мг/кг. __________

Самцы 1 Самки 1

ОП в эритроцитах 0,933 Гликоген мышц 0,806

Креатинфосфат 0,848 Триглицериды 0,576

пв К 0,796

ВНСММ в эритроцитах 0,720

Гликоген мышц -0,565

Выделенные дисперсии, % 30 Выделенные дисперсии, % 24

Примечание см. табл. 2.

Изменение биохимических показателей метаболизма белых лабораторных мышей под влиянием метилфосфоновой кислоты в условиях долговременного эксперимента. Для оценки адаптационных возможностей организма и временного промежутка необходимого для нормализации показателей метаболизма у лабораторных мышей после однократного подкожного введения высоких и низких доз МФК нами был проведен долговременный эксперимент длительностью 30 суток с отбором биоматериала через 6, 12, 18 и 30 суток. Условия этого эксперимента (вводимые дозы и пол животного) зависели от результатов, полученных при изучении времени максимального достоверного отклика и дозозависимого эффекта воздействия МФК с учетом количества достоверно изменяющихся показателей и коэффициента степени их изменений.

Результаты изучения показателей углеводного обмена у самок показали, что через 6 суток достоверно изменялось содержание гликогена в мышцах (снижалось на 21% и увеличивалось на 19% после введения высокой и низкой дозы МФК соответственно), КрФ в мышцах (снижалось на 20-25%) и лактата в сыворотке (увеличивалось на 10 и 28%). Через 12 суток после введения как высокой, так и низкой дозы МФК, достоверно уменьшалось содержание КрФ в мышцах и лактата в сыворотке (рис. 21). Этот факт, видимо, указывает на особую роль гликолиза, как механизма бескислородного энергообеспечения, и универсального анаэробного макроэрга и фосфагена креатинфосфата, входящего в клетки с многообразной функциональной активностью, и, в первую очередь, в клетки скелетных мышц для обеспечения мышечной работы. К 18-м суткам все энергетические показатели не отличались от контрольных значений.

140 ■

120 -

1(1(1 -

* 80

60 -

Ш I

111 п I

И®1 гта

"82 1 I

6 сут 12сут 18 сут ЗОсут В ВД О НД

Лактат

140

120

----

1 75 Й~88 к\\М 1

80 81 |

6сут 12 сут 18 сут ЗОсут В ВД О НД

Креатинфосфат

Рис. 21. Изменение содержания лактата и креатинфосфата у самок через 6, 12, 18, 30 суток после подкожного введения высокой 10° (ВД) и низкой 10"12 (НД) мг/кг доз МФК. Примечание см. рис. 11.

Нормализация субстратов липидного обмена (общих липидов, холестерина и триглицеридов) у самок в ответ на введение МФК в дозе 2 мг/кг наступала к 18-м суткам эксперимента, а в дозе 10"15 мг/кг - к 12-м суткам. Активность ферментов АОС не отличалась от контроля лишь на 30

сутки, при этом активность каталазы оставалась выше активности СОД (рис. 22).

150

а;

§■125-

о ¡к ь о

100 -

из

6 сут 12сут 18 сут □ СОД □ Каталаза

Доза МФК 2 мг/кг

30 сут

175 -150 125 100 75

6 сут 12 сут 18 сут 30 сут В СОД О Каталаза

Доза МФК 10 15 мг/кг

Рис. 22. Изменение активности СОД в эритроцитах и каталазы в плазме крови самок через 6, 12, 18 и 30 суток после введения самкам МФК в дозах 2 и 10'15 мг/кг. Примечание см. рис. 11.

Однако содержание МДА даже на 30-е сутки после введения как высокой, так и низкой доз МФК, оставалось на треть выше контрольных значений (рис. 23), что отразилось на функциональном показателе свободно-радикального окисления, который был ниже контроля в 1,5 раза, что говорит об истощении резервов АОС или срыве долгосрочной адаптации.

150 в 125

о &

5 100

^ 75 -50 -

5 сут 12 сут 18 сут 30 сут Н БД МФК ОВД МФК

МДА__

200 а 175

| 150 -И

а 125

о 100 -75 ■ 50

Ж.

6 сут 12 сут 18 сут 30 сут ИВДМФК ИНД МФК

СОД/МДА (ФП СРО)_

Рис. 23. Изменение содержания МДА и показателя свободно-радикального окисления (СОД/МДА) в плазме крови самок через 6, 12, 18 и 30 суток после введения высокой (ВД, 2 мг/кг) и низкой (НД, 10"15 мг/кг) доз МФК. Примечание см. рис. 11.

На фоне практических нормальных значений общего белка, начиная с 12-х суток, отмечался постепенный рост как раннего маркера (АФГ), так и позднего маркера (КФГ) окислительной деструкции белков. Содержание АФГ в плазме, увеличившись на треть, достигло максимума через 30 суток после введения высоких и низких доз МФК (рис. 24). Это указывало на одинаковую интенсивность окислительной модификации белков, как через трое суток, так и через 30 суток после введения низких доз МФК,

свидетельствуя о срыве адаптивных механизмов, обеспечивающих работу А ОС.

5 125

° 100

* 75 50

: 128 : 129

й)9 1» ; ж га : В§ ; ||5

бсут 12сут 18сут 30 сут ИАФГ О КФГ

>-3 ,

Доза МФК 1(Г мг/кг

150

125 100 75 50

Н 1

13< 133 г

109

1_1 1

бсут 12 сут О АФГ

18 сут 30 сут □ КФГ

Доза МФК 10~'5 мг/кг

Рис. 24. Изменение содержания продуктов ПОБ в виде АФГ и КФГ через 6, 12, 18 и 30 суток после подкожного введения МФК в высокой 10"3 и низкой 10~15 мг/кг дозах. Примечание: см. рис. 11.

Данные об изменении содержания ОП в плазме и эритроцитах крови мышей опытных групп к 30 суткам после введения высоких и низких доз МФК позволили сделать вывод о нормализации процессов образования ОП (рис. 25).

I «5

3 100 ё

^ 75

] 13

; 111 П

с ■ г: 1

78 | - 8<Г 1

бсут 12сут 18 сут □ ВДМФК Ш1ДМФК

30 сут

ОП в плазме

I 125

3 100

г? 75 50

.....и< 14 .....г..............!........................1

:1,6 их - - - 1

; ГТ1 .

! 1 1 ' 93 91 ;

• • 1

___!

6 сут 12 сут 18 сут 30 сут □ ВДМФК РИД МФК

ОН в эритроцитах

Рис. 25. Изменение содержания ОП в плазме и эритроцитах крови самцов через 6, 12, 18 и 30 суток после подкожного введения МФК в дозах 10"3 (ВД)и 10~15(НД) мг/кг. Примечание см. рис. 10.

О сложном и неоднозначном протекании адаптивных процессов в организме мышей опытных групп указывали и маркеры эндогенной интоксикации - ВНСММ в плазме и эритроцитах (рис. 26). После введения МФК в дозе 10"3 мг/кг- уровень ВНСММ в плазме и эритроцитах незначительно отличался от контроля, а после введения МФК в дозе 10~15 мг/кг изменения в содержании ВНСММ в плазме были особенно значительны (повышены в 1,36-1,84 раза) до 18-х суток. Достоверное повышение содержания ВНСММ в эритроцитах крови мышей через 30 суток после введения МФК как в высокой, так и низкой дозах при отсутствии отличий в плазме может свидетельствовать о нарушении процессов десорбции эндотоксинов эритроцитами в печени.

6 сут !2сут 18 сут 30 сут □ ВДМФК ИНД МФК

6 сут !2 сут 18 сут 30 сут

а вдмфк андмФК

ВНСММ в плазме

ВНСММ в эритроцитах

Рис. 26. Изменение содержания ВНСММ в плазме и эритроцитах крови самцов через 6, 12, 18, 30 суток после подкожного введения высокой 10"3 (ВД) и низкой 10'15 (НД) мг/кг доз МФК. Примечание см. рис. 11.

Таким образом, разовое подкожное введение самцам лабораторных мышей такого специфического поллютанта как МФК, провоцирующего в организме состояние окислительного стресса, привело к истощению его резервно-адаптационных возможностей, что сопровождалось активацией перекисного окисления белков, содержание которых было повышено даже через 30 суток после введения МФК. Причем, глубина изменений биохимических показателей ПОБ более выражена при введении МФК в низкой дозе 10"'5 мг/кг массы животного. Воздействие в таких низких дозах имеет, видимо, регуляторный характер, приводя к срыву адаптивных механизмов.

Так как проведенные исследования показали, что МФК влияет на показатели, связанные с функциями печени, поэтому нами было изучено влияния различных доз МФК на активность важнейших ферментов -маркеров состояния печени - холинэстеразы, аспартат- и аланинаминотрансфераз. При этом было выявлено, что МФК во всех дозах, в том числе очень низкой (10~18 мг/кг), влияла на активность этих ферментов (рис. 27). Наблюдался волнообразный характер изменений с минимальными значениями для большинства показателей после введения МФК в средних дозах 106 и 10"9 мг/кг массы животного. Активность АЛТ оставалась во всех вариантах опытов ниже значений в контроле, уменьшаясь примерно одинаково (на 27-45%) после введения как высоких, так и низких доз МФК. Понижение активности АЛТ, вероятно, может быть вызвано дефицитом его кофермента - пиридоксальфосфата за счет переэтерификации с МФК, а также при состояниях, связанных с повреждением гепатоцитов, способных синтезировать АЛТ.

g 125

о |

g 100 H

SS 75

2 10° 10"6 10"9 1012 1015 lO"'8

дозы МФК, мг/кг И Холинэстераза О ACT □ AJ1T

Рис. 27. Изменение активности холинэстеразы, ACT, AJ1T в плазме крови самцов через 72 часа после введения различных доз МФК. Примечания см. рис. 11.

Активность холинэстеразы снижалась после введения высоких и низких доз МФК, максимально в 1,7 раза после введения дозы 10 15 мг/кг (рис. 27). Снижение активности холинэстеразы в сыворотке крови характерно при отравлениях фосфорорганическими инсектицидами, которые необратимо ингибируют активный центр этого фермента. Можно предположить, что МФК в активном центре холинэстеразы взаимодействует с гидроксилыюй группой серина, приводя к обратимому ингибированию.

Изменение биохимических показателей метаболизма белых лабораторных мышей под влиянием метилфосфоновой кислоты в условиях хронического эксперимента. Для доз МФК 10~3 и 10'15 мг/кг, которые вызвали наибольшее число достоверных и максимальных изменений в изучаемых показателях, был выполнен хронический эксперимент. Для определения возможных различий в реакции организма животного на способ введения токсиканта применяли подкожное и пероральное введение МФК.

Еженедельное введение в течение 12 недель самцам подкожно высокой дозы МФК приводило к повышению активности только АЛТ, а в низкой дозе - к увеличению активности ACT и особенно ХЭ, что может быть связано с необходимостью синтеза белков (прежде всего альбумина), из-за их повышенного распада по пути окислительной модификации. Пероральное введение самцам высокой и низкой доз МФК не вызывало достоверных изменений в активности изученных ферментов (рис. 28).

У самок подкожное введение МФК приводило снижение активности АЛТ в 1,5 раза, а пероральное - для низкой дозы МФК к повышению активности ACT (рис. 28).

Эти данные позволили нам утверждать, что самцы более подвержены влиянию МФК, особенно в низкой дозе, которое направлено, в основном, на белковые молекулы, что сопровождается повышением активности ХЭ для восполнения модифицированных белков. Пероральное введение МФК по сравнению с подкожным введением существенно меньше влияет на организм

животных, что связано с особенностями процесса трансмембранного переноса МФК в желудочно-кишечном тракте.

р. 150

В §

S 100

1 171

148 !

129

2 10 дозы МФК, мг/кг подкожно S Холинэстераза □ АСГ И АЛТ

9 100

ixxxl |

2 10 дозы МФК. мг/кг перорально И Холинэстераза □ ACT D АЛТ

Самцы

150 ■

S 100

.......«............1

2 10 лозы МФК. мг/кг подкожно Н Холинэстераза □ ACT О АЛТ

о? ч о Р- 150

100

2 10" дозы МФК, мг/кг перорально 3 Холинэстераза □ ACT □ АЛТ

Самки

Рис. 28. Изменение активности холинэстеразы и аминотрансфераз ACT, АЛТ в плазме крови самцов и самок через 12 недель после еженедельного подкожного и перорального введения высокой (2 мг/кг) и низкой (10"'5 мг/кг) доз МФК. Примечание см. рис. 11.

Результаты факторного анализа изменений биохимических показателей белых лабораторных мышей в процентах от значений в контрольных группах выявили особенности реакции организма самцов и самок в ответ на введение различных доз МФК (табл. 4).

Факторные нагрузки у самцов и самок группировались возле 3-х факторов и, в общем, были представлены показателями работы АОС (активность СОД, продукты ПОБ и ПОЛ), продуктами катаболизма биомолекул (ОГ1, ВНСММ) и показателями анаэробного энергообеспечения (гликоген в печени и мышцах, КрФ, лактат, ПВК, ЛДГ, КК). Первый фактор у самцов объединил показатели гликолиза (лактат, ПВК, ЛДГ) и окислительной модификации белков (АФГ и КФГ) - фактор «анаэробного энергообеспечения» и «системы ПОБ-АОС»; у самок - холестерин, МДА, СОД - фактор «системы ПОЛ-АОС», которые, в том числе, входят в клеточные плазматические мембраны. Второй и третий факторы у самцов были нами определены как «катаболизм белков и сорбция эндотоксинов эритроцитами», «энергообеспечение мышц» и «система ПОЛ-АОС», а у самок - фактор гликолиза, «система ПОБ-АОС» и «сорбция эндотоксинов эритроцитами».

Таблица 4

Факторные нагрузки изменений биохимических показателей лабораторных мышей через 72 часа после введения различных доз МФК_

Самцы 1 2 3 Самки 1 2 3

Лактат 0,951 Холестерин 0,891

КФГ -0,870 МДА 0,840

ПВК 0,709 сод -0,825

лдг -0,592 КК -0,953

АФГ -0,508 лдг 0,939

ОП эритроцитов -0,971 Гликоген печени -0,861

Гликоген мышц 0,957 ВНСММ в плазме -0,730

КК 0,876 АФГ -0,567

Креатинфосфат 0,815 Креатинфосфат 0,883

ОП в плазме -0,514 ОП в эритроцитах -0,868

МДА -0,771

Выделенные дисперсии, % 30 26 22 Выделешше дисперсии, % 30 23 19

Примечание см. табл. 2.

Анализ полученных результатов в целом показал, что в качестве биохимических показателей при оценке воздействия на теплокровные организмы метилфософнатов в высоких и низких дозах могут быть использованы:

маркеры работы АОС - продукты ПОБ в виде АФГ и КФГ, продукты ПОЛ виде МДА в плазме, активность эритроцитарной СОД и интегральные индексы свободно-радикального окисления СОД/ПОБ и СОД/МДА;

маркеры эндогенной интоксикации - ВНСММ и ОП в плазме и эритроцитах и интегральный индекс интоксикации;

энергетические маркеры - тканевый гликоген, пируват и лактат в сыворотке;

активность ферментов-маркеров состояния печени - холинэстеразы, аланинаминотрансферазы и аспартатаминотрансферазы.

ВЫВОДЫ

1. Метилфосфоновая кислота (МФК) обладает выраженным дозозависимым действием с максимальным влиянием на показатели метаболизма животных в диапазонах высоких (2 и 10"3 мг/кг) и низких (1012 и 10"15 мг/кг) доз и минимальным - на уровне средних и очень низких (10~6 и 10"18 мг/кг) доз.

МФК вызывает у самцов по сравнению с самками большие изменения в белковом обмене и работе антиоксидантной системы.

3. У самцов через 12 ч после введения МФК в дозе 2 мг/кг наблюдаются типичные для острого стресса изменения белкового обмена: гиперпродукция а- и р-глобулинов на 20-40% при уменьшении на треть у-глобулиновой фракции; рост маркеров окислительного распада белков до кетопроизводных в 2 раза при снижении активности СОД; увеличение содержания олигопептидов в плазме и эритроцитах в 1,2 и 2 раза (соответственно) и ВНСММ в плазме в 1,4 раза за счет катаболической составляющей. Эти процессы сопровождаются уменьшением уровня гликогена в печени и мышцах. У самок наблюдается дисглобулинемия, выражающаяся в увеличении у-глобулинов на 30% и уменьшении а1- и р-глобулинов, сопровождающаяся снижением продуктов ПОБ и активности СОД.

Через 24 ч у самцов происходит восстановление основных показателей метаболизма при снижении продуктов окислительного распада и увеличении активности СОД в 1,7 раза. У самок наблюдается повышение альбуминов и острофазовых белков при снижении в 1,5 раза уровня у-глобулинов, сопровождающееся ростом маркеров перекисного окисления белков в плазме и олигопептидов в эритроцитах.

4. Особенностью изменений показателей метаболизма у самцов и самок после введения высоких доз МФК (через 72 ч) является достоверное понижение на треть продуктов перекисного окисления белков и липидов при повышении активности эритроцитарной СОД; снижение уровня гликогена в печени (в среднем на 20%) при повышении содержания пирувата в сыворотке на 20-80%. Для самцов характерно увеличение, а для самок снижение в 2,7 и в 4,8 раза (соответственно) мышечного гликогена. В этот период у самцов происходит снижение активности ферментов холинэстеразы и АЛТ (на 2040%), характеризующих функцию печени.

5. Особенностью изменений показателей метаболизма у самцов после введения таких доз МФК (через 72 ч) является достоверное снижение уровня продуктов ПОЛ и рост продуктов ПОБ в 1,4-1,8 раза при повышении активности СОД (в 1,5 раза); увеличение содержания средних молекул в плазме и эритроцитах, сопровождающееся повышением индекса интоксикации (в 2,3 раза). У самок активность СОД и уровень продуктов ПОБ остаются в пределах значений контрольных групп при снижении уровня продуктов ПОЛ на треть; содержание средних молекул увеличивалось в 1,4 раза только в эритроцитах, оставаясь в пределах нормы в плазме.

суток на фоне нормальных значений большинства показателей происходит активация перекисного окисления - рост уровня МДА на 30-40%, альдегидопроизводных молекул - на 30-35%, Увеличение кетопроизводных молекул на 70% отмечено только после введения МФК в низкой дозе.

7. Поступление высоких и низких доз МФК (в виде подкожных инъекций) в течение 12 недель у самцов вызывает достоверное повышение активности ферментов - ACT, AJIT и холинэстеразы, максимально (в 1,7 раза) для холинэстеразы после введения низких доз МФК. У самок происходит снижение активности этих ферментов, максимально для АЛТ в 1,5 раза. Хроническое пероральное введение различных доз МФК не приводит к значимым изменениям в активности холинэстеразы и аминотрансфераз у самцов; у самок введение МФК в низкой дозе вызывает повышение активность ACT в 1,6 раза.

8. В качестве биохимических показателей воздействия на теплокровные организмы метилфосфонатов (высоких и низких дозах), предлагается использовать:

• маркеры работы АОС - продукты ПОБ и ПОЛ в плазме; активность эритроцитарной СОД; интегральные индексы свободно-радикального окисления - СОД/ПОБ и СОД/МДА;

• маркеры эндогенной интоксикации - ВНСММ и ОП в плазме и эритроцитах; интегральный индекс интоксикации;

• энергетические маркеры - тканевый гликоген, пируват и лактат в сыворотке;

• активность ферментов-маркеров состояния печени - холинэстеразы, аланин- и аспартатаминотрансферазы.

Основные работы, опубликованные по теме диссертации

Работы, опубликованные в рецензируемых журналах, рекомендованных ВАК РФ:

1. Плотникова, О.М. Особенности влияния различных доз метилфосфоновой кислоты на основные биохимические показатели метаболизма лабораторных мышей / О.М. Плотникова, И.В. Савинова, H.H. Матвеев, A.M. Корепин, А.Н. Евдокимов, С.Н. Лунева // Вестник Челябинского государственного педагогического университета. - 2011. -№ 1. -С. 307-316.

2. Плотникова, О.М. Оценка влияния низких доз метилфосфоната на теплокровных животных по биохимическим показателям крови мышей / О.М. Плотникова, H.H. Матвеев, И.В. Савинова, A.M. Корепин, С.Н. Лунева // Естественные и технические науки. - 2011. -№ 1 (51). -С. 32-37.

3. Плотникова, О.М. Маркеры эндогенной интоксикации в крови лабораторных мышей при интоксикации различными дозами метилфосфоната / О.М. Плотникова, A.M. Корепин, H.H. Матвеев, С.Н. Лунева // Вестник Челябинского государственного педагогического университета. -2011. -№ 2. -С. 346-353.

4. Савинова И.В. Изучение некоторых показателей углеводного обмена лабораторных мышей при интоксикации метилфосфонатом / И.В. Савинова, О.М. Плотникова, С.Н. Лунева // Естественные и технические науки. - 2011. -№1 (51). -С. 38-41.

5. Плотникова, О.М. Оценка токсикологического воздействия метилфосфоната на показатели метаболизма лабораторных мышей / О.М. Плотникова, A.M. Корепин, И.В. Савинова, H.H. Матвеев, С.Н. Лунева // Проблемы региональной экологии. - 2011. -№ 3. -С. 138-142.

6. Плотникова, О.М. Экотоксикологический мониторинг состояния мелких грызунов в районе расположения объекта уничтожения химического оружия в Щучанском районе курганской области / О.М. Плотникова, М.А. Григорович, А.Н. Евдокимов, Б.И. Кудрин // Проблемы региональной экологии. - 2011.-Ks 2,- С. 75-78.

7. Плотникова, О.М. Активность печеночных ферментов после введения метилфосфомовой кислоты самцам лабораторных мышей / О.М. Плотникова, А.Н. Евдокимов, М.А. Григорович // Вестник Челябинского государственного педагогического университета. -2011. -№ 7. -С. 231-327.

8. Плотникова, О.М. Биохимические показатели крови в оценке влияния метилфосфоната на лабораторных мышей в долговременном эксперименте / О.М. Плотникова, A.M. Корепин, H.H. Матвеев, С.Н. Лунева II Теоретическая и прикладная экология. -2011. -№ 3. -С. 65-70.

9. Плотникова, О.М. Биохимические показатели лабораторных мышей в зависимости от времени интоксикации метилфосфонатом / О.М. Плотникова, H.H. Матвеев, A.M. Корепин, И.В. Дуплякина // Теоретическая и прикладная экология.- 2010,- № 1. -С. 81-86.

10. Чупис, В.Н. Оценка уровня генотоксичности в экологическом мониторинге / В.Н. Чупис, Н.В. Емельянова, Е.А. Танайлова, Н.В. Полухина, Т.А. Шингаренко, О.М, Плотникова // Теоретическая и прикладная экология. -2010. -№ 1. С. 77-80.

11. Плотникова, О.М. Свободнорадикальное окисления белков и липидов и энергетический обмен у лабораторных мышей при воздействии метилфосфонатов как специфических поллютантов / О.М. Плотникова, A.M. Корепин, H.H. Матвеев, И.В. Дуплякина, С.Н. Лунева // Бюллетень Московского общества испытателей природы. - 2009. -Т. 114, Вып. 3 (Ч. 3). -С. 162-165.

12. Плотникова, О.М. Оценка экотоксичности специфических загрязняющих веществ по изменению биохимических показателей живых организмов/О.М. Плотникова, A.M. Корепин, И.В. Дуплякина, H.H. Матвеев // Теоретическая и прикладная экология. 2008. № 4. С. 42-47.

Монографии:

13. Плотникова, О.М. Биологическая активность алкилфосфонатов: влияние метилфосфоновой кислоты на гомеостаз, методы исследования: Монография / О.М. Плотникова, С.Н. Лунева, A.M. Корепин, H.H. Матвеев, И.В. Савинова.- Курган: Изд-во Курганского гос. ун-та, 2011. - 120 с.

Публикации в сборниках материалов конференций, научных и научно-практических журналах и изданиях:

14. Плотникова, О.М. Влияние различных доз метилфосфоновой кислоты на показатели перекисного окисления липидов и белков у лабораторных мышей / О.М. Плотникова, H.H. Матвеев, A.M. Корепин // Высокие технологии, фундаментальные и прикладные исследования в физиологии и медицине: Сб. статей II Международной научно-практ. конф. -СПб, 2011. -Т. 3. -С. 224-226.

15. Плотникова, О.М. Влияние метилфосфоната в высоких и малых дозах на основные биохимические показатели метаболизма лабораторных мышей / О.М. Плотникова, С.Н. Лунева, A.M. Корепин, H.H. Матвеев, И.В. Савинова, А.Н. Евдокимов // Вестник Курганского университета. Серия «Естественные науки». - 2010. -Вып. 3. -С. 81-85.

16. Лунева, С.Н. Перекисное окисление белков и содержание маркеров эндогенной интоксикации при введении метилфосфоновой кислоты лабораторным мышам / С.Н. Лунева, О.М. Плотникова, A.M. Корепин, H.H. Матвеев, И.В. Савинова // Мат-лы научно-практ. конф., поев. 200-летию со дня рожд. Н.И. Пирогова. -Курган, 2010. -С. 254-256.

17. Евдокимов, А. Н. Биохимические показатели полевки обыкновенной (Microtus arvalis Pall.) в санитарно-защитной зоне объекта уничтожения химического оружия в курганской области / А.Н. Евдокимов, О.М. Плотникова, М.А. Григорович, Б.И. Кудрин // Фундаментальные науки и практика: Сб. научных, трудов. -Томск.-2010. -Т. 1, № 3. -С. 42-43.

18. Плотникова, О.М. Изучение показателей перекисного окисления липидов в крови лабораторных мышей при интоксикации метилфосфоновой кислотой / О.М. Плотникова, H.H. Матвеев // Экологические проблемы промышленных городов: сб. научных трудов. / Саратов, 2009. -Ч. 2. -С. 196197.

19. Плотникова, О.М. Изучение показателей системы лактат-пируват-активность лактатдегидрогеназы у лабораторных мышей при интоксикации метилфосфонатом / О.М. Плотникова, И.В. Дуплякина // Экологические проблемы промышленных городов: сб. научных трудов. / Саратов, 2009.- 4.2. -С. 198-199.

20. Плотникова, О.М. Изучение показателей активности перекисного окисления липидов при интоксикации метилфосфоновой кислотой / О.М. Плотникова // Проблемы региональной экологии в условиях устойчивого развития: мат-лы Всероссийской научно-практ. конф. -Киров.-2007. -Ч. 1. -С. 285-287.

21. Плотникова, О.М. Использование биохимических показателей живых организмов для оценки загрязнения природной среды зоны защитных мероприятий объекта уничтожения химического оружия / О.М. Плотникова // Региональные проблемы природопользования и охраны окружающей среды: Мат-лы региональной научно-практ. конф. -Курган, 2008. -С. 198-203.

22. Плотникова, О.М. Изучение показателей энергетического обмена лабораторных мышей при интоксикации метилфосфоновой кислотой / О.М. 38

Плотникова, И.В. Дуплякина // Региональные проблемы природопользования и охраны окружающей среды: мат-лы региональной научно-практ. конф. -Курган, 2008. -С. 213-216.

23. Плотникова, О.М. Влияние метилфосфоновой кислоты на биометрические показатели овса Avena sativa L. / О.М. Плотникова, А.П. Ларионова, Э.В. Гладкова // VI Зыряновские чтения: мат-лы Всероссийской научно-практ. конф. -Курган, 2008. -С. 170-171.

24. Дуплякина, И.В. Содержание гликогена в печени и мышцах при интоксикации организма мышей линии СВА метилфосфоновой кислотой. / И.В. Дуплякина, О.М. Плотникова, С.Н. Лунева // Проблемы региональной экологии в условиях устойчивого развития: мат-лы Всероссийской научно-практ. конф. -Киров, 2009. -Ч. 2. -С. 55-57.

25. Корепин, A.M. Изучение содержания общего белка и олигопептидов у лабораторных мышей при интоксикации метилфосфоновой кислотой / A.M. Корепин, О.М. Плотникова, С.Н. Лунева // Проблемы региональной экологии в условиях устойчивого развития: мат-лы Всероссийской научно-практ. конф. -Киров, 2009. -Ч. 2,- С. 58-60.

26. Матвеев, Н.Н. Влияние малых концентраций метилфосфоновой кислоты на содержание триглицеридов в плазме крови лабораторных мышей / Н.Н. Матвеев, О.М. Плотникова, С.Н. Лунева // Проблемы региональной экологии в условиях устойчивого развития: мат-лы Всероссийской научно-практ. конф. - Киров, 2009. -Ч. 2. -С. 61-62.

27. Евдокимов, А.Н. Изменение активности некоторых ферментов печени у мышей линии СВА при действии метилфосфонатов / А.Н. Евдокимов, О.М. Плотникова // Проблемы региональной экологии в условиях устойчивого развития: мат-лы Всероссийской научно-практ. конф,-Киров, 2009. Ч. 2. С. 63-65.

28. Плотникова, О.М. Биохимические показатели в оценке качества окружающей среды / О.М. Плотникова, Н.Н. Матвеев // Химия и общество. Грани взаимодействия: вчера, сегодня, завтра: мат-лы Юбилейной научной конф., поев. 80-летию химфака МГУ. -Москва, 2009. -С. 102.

29. Plotnikova, О.М. Small rodents as bioindicators for the buffer zone at the objects of storage and destruction of chemical weapons / O.M. Plotnikova, I.V. Dupliakina, A.M. Korepin, N.N. Matveev, B.I. Kudrin, A.N. Evdokimov // BIOINDICATORS 17 (17th International Conference on Environmentel Bioindicators: Book of Abstract). //Moscow: MSU, 2009. -P. 81.

30. Shpanov, N.Y. Availability of Microtus arvalis Pall, as bioindicator of pollution in terrestrial ecosystems in the process of chemical weapons distraction / N.Y. Shpanov, O.M. Plotnikova, N.V. Plotnikov // BIOINDICATORS 17 (17th International Conf. on Environmentel Bioindicators: Book of Abstract).// Moscow: MSU, 2009. -P. 88.

31. Плотникова, O.M. Изменение активности холинэстеразы у лабораторных мышей при интоксикации метилфосфоновой кислотой / О.М. Плотникова, А.Н. Евдокимов // Состояние окружающей среды и здоровье

населения: мат-лы II Всероссийской научно-практ. конф. - Курган, 2009. -С. 43-44.

32. Плотникова, О.М. Изучение содержания общего белка и альбуминов у лабораторных мышей при интоксикации метилфосфоновой кислотой / О.М. Плотникова, A.M. Корепин // Состояние окружающей среды и здоровье населения: Мат-лы II Всероссийской научно-практ. конф. -Курган, 2009.- С. 45-47.

33. Чупис, В.Н. Комплексная оценка экологического состояния территорий бывшего хранения и прошлого уничтожения химического оружия / В.Н. Чупис, C.B. Миллер, И.В. Кондаков, Н.В. Полухина, Н.В. Емельянова, Е.А. Танайлова, Т.А. Шингаренко, О.М. Плотникова // Научно-технические аспекты обеспечения безопасности при уничтожении, хранении и транспортировке химического оружия: Сб. тезисов V научно-практ. конф. -Москва, 2010.-С. 132-134.

34. Полухина, Н.В. Оценка экологического состояния на территории объекта хранения и уничтожения химического оружия / Н.В. Емельянова, Е.А. Танайлова, Т.А. Шингаренко, О.М. Плотникова / Химическая безопасность Российской Федерации в современных условиях: сб. трудов Всероссийской научно-практ. конф. //СПб, 2010. -С. 310-311.

35. Дуплякина, И.В. Влияние интоксикации метилфосфонатом на энергетический обмен в организме мелких теплокровных животных /И.В. Дуплякина, A.A. Абзаева, О.М. Плотникова //Экологобезопасные и ресурсосберегающие технологии и материалы: мат-лы региональной научно-практ. конф. -Улан-Удэ, 2010. -С. 87-88.

36. Евдокимов, А.Н. Использование биохимических показателей мелких грызунов в оценке качества природных экосистем в зонах защитных мероприятий опасных химических производств / А.Н. Евдокимов, А.И. Арефьев, С.А. Мельников, О.М. Плотникова // Экологобезопасные и ресурсосберегающие технологии и материалы: мат-лы региональной научно-практ. конф. -Улан-Удэ, 2010. -С. 88-90.

37. Корепин, A.M. Динамика содержания маркеров эндогенной интоксикации в крови при воздействии метилфосфонатов на лабораторных мышей / A.M. Корепин, О.М. Плотникова // Экологобезопасные и ресурсосберегающие технологии и материалы: Мат-лы региональной научно-практ. конф. -Улан-Удэ, 2010. -С. 91-93.

38. Матвеев, H.H. Влияние интоксикации метилфосфонатом на базовые показатели липидного обмена /H.H. Матвеев, О.М. Плотникова // Экологобезопасные и ресурсосберегающие технологии и материалы: мат-лы региональной научно-практ. конф. -Улан-Удэ, 2010. -С. 99-101.

39. Григорович, М.А. Биохимические и морфологические показатели крови мелких грызунов в санитарно-защитной зоне объекта уничтожения химического оружия в Щучанском районе / М.А. Григорович, О.М. Плотникова, А.Н. Евдокимов, Б.И. Кудрин // Экология. Риск. Безопасность: мат-лы междунар. научно-практ. конф. -Курган, 2010,- Т. 2. -С. 130-131.

40. Плотникова, О.М. Активность некоторых ферментов печени при воздействии на лабораторных мышей специфических загрязняющих веществ / О.М. Плотникова, А.Н. Евдокимов, E.H. - Курган, 2010. -Т. 2. -С. 153.

41. Кудрин, Б.И. Морфологические и биохимические показатели крови коров зоны защитных мероприятий объекта уничтожения химического оружия в Щучанском районе / Б.И. Кудрин, C.B. Зюзин, О.М. Плотникова, А.Н. Евдокимов, М.А. Григорович // Экология. Риск. Безопасность: мат-лы междунар. научно-практ. конф. -Курган, 2010. -Т. 2. -С. 140-141.

42. Корепин, A.M. Влияние различных концентраций метилфосфоновой кислоты на содержание основных маркеров развития эндогенной интоксикации у самцов белых лабораторных мышей / A.M. Корепин, С.Н. Лунева, О.М. Плотникова // Экология. Риск. Безопасность: Мат-лы междунар. научно-практ. конф. -Курган, 2010. -Т. 2. -С. 138-139.

43. Корепин, A.M. Влияние метилфосфоната на белковый обмен лабораторных мышей на примере адаптации к разовому введению различных доз / A.M. Корепин, О.М. Плотникова И Биология будущего: традиции и инновации: мат-лы Всерос. науч. конф. с междунар. участием. -Екатеринбург, 2010. -С. 138-139.

44. Савинова, И.В. Изменение некоторых показателей углеводного обмена лабораторных мышей в ответ на введение метилфосфоната /И.В. Савинова, О.М. Плотникова // Биология будущего: традиции и инновации: Мат-лы Всероссийской научной конф. с междунар. участием. -Екатеринбург, 2010. -С. 141-142.

45. Матвеев, H.H. Влияние введения метилфосфоновой кислоты в дозах 2 и Ixio45 мг/кг на показатели перекисного окисления липидов и антиоксидантную систему лабораторных мышей / H.H. Матвеев, О.М. Плотникова // Биология будущего: традиции и инновации: мат-лы Всероссийской научной конф. с междунар. участием. -Екатеринбург, 2010. -С. 137-138.

46. Плотникова, О.М. О возможности использования показателей крови лабораторных мышей для оценки степени токсичности почвогрунтов / О.М. Плотникова, М.А. Григорович, Б.И. Кудрин // Антропогенная трансформация природной среды: мат-лы междунар. конф. -Пермь, 2010. -Т. 1,4. 2. -С. 127-132.

47. Плотникова, О.М. К вопросу возможного влияния на мелких грызунов метилфосфонатов - особой группы веществ антропогенной природы / О.М. Плотникова, A.M. Корепин, H.H. Матвеев, И.В. Дуплякина // Антропогенная трансформация природной среды: мат-лы междунар. конф. -Пермь, 2010. -Т.1, Ч. 2,- С. 133-140.

48. Корепин, A.M. Динамика содержания общего белка и олигопептидов у лабораторных мышей при интоксикации метилфосфонатом / A.M. Корепин, О.М. Плотникова, С.Н. Лунева // Мат-лы XXI съезда физиологического общества им. И.П. Павлова. -Москва-Калуга, 2010. -С. 295.

49. Лунева, С.Н. Изучение содержания гликогена лабораторных мышей при введении метилфосфоновой кислоты / С.Н. Лунева, О.М. Плотникова, И.В. Савинова, H.H. Матвеев, A.M. Корепин // Мат-лы научно-практ. конф., поев. 200-летию со дня рожд. Н.И. Пирогова. -Курган, 2010. -С. 253-254.

50. Лунева, С.Н. Влияние интоксикации метилфосфонатом на основные биохимические показатели метаболизма у лабораторных мышей / С.Н. Лунева, О.М. Плотникова, A.M. Корепин, H.H. Матвеев I! Мат-лы научно-практ. конф., поев. 200-летию со дня рожд. Н.И. Пирогова. -Курган, 2010.- С. 256-257.

51. Плотникова, О.М, Использование показателей функционального состояния организма лабораторных мышей для оценки степени токсичности экстрактов почв и грунтов / О.М. Плотникова, М.А. Григорович, Б.И. Кудрин, А.Н. Евдокимов // Современные проблемы биомониторинга и биоиндикации: Сб. матер. VIII Всерос. научно-практ. конф. -Киров: ООО «Лобань», 2010. -Ч. 10. -С. 199-202.

52. Григорович, М.А. Морфологические и биохимические показатели крови полевки обыкновенной в ЗЗМ объекта по уничтожению химического оружия в г. Щучье Курганской области / М.А. Григорович, Б.И. Кудрин, А.Н. Евдокимов, О.М. Плотникова // Современные проблемы биомониторинга и биоиндикации: Сб. VIII Всерос. научно-практ. конф. -Киров: ООО «Лобань», 2010. -Ч. 1.-С. 18-20.

53. Савинова, И.В. Влияние подкожного введения метилфосфоновой кислоты на некоторые показатели углеводного обмена лабораторных мышей линии СВА / И.В. Савинова, О.М. Плотникова, С.Н. Лунева // Современные проблемы биомониторинга и биоиндикации: Сб. матер. VIII Всероссийской научно-практ. конф. -Киров: ООО «Лобань», 2010. -Ч. 1. -С. 196-198.

54. Григорович, М.А. Влияние токсичных почвогрунтов на морфологические показатели внутренних органов / М.А. Григорович, О.М. Плотникова, Б.И. Кудрин П Состояние окружающей среды и здоровье населения: Мат-лы III Международной научно-практ. конф. -Курган, 2011. -С. 39-44.

55. Григорович, М.А. Влияние метилфосфоновой кислоты на содержание иммуноглобулина-G в плазме крови белых мышей / М.А. Григорович, Б,И. Кудрин, О.М. Плотникова, М.Ю. Голубицкая // Состояние окружающей среды и здоровье населения: Мат-лы III Международной научно-практ. конф. -Курган, 2011. -С. 98.

56. Матвеев, H.H. Показатели обмена липидов мелких грызунов при интоксикации метилфосфоновой кислотой в различных дозах / H.H. Матвеев, О.М. Плотникова И Состояние окружающей среды и здоровье населения: Мат-лы III Международной научно-практ. конф. -Курган, 2011. -С. 110-112.

57. Плотникова, О.М. Активность холинэстеразы плазмы крови у мелких грызунов при интоксикации моноэтаноламином / О.М. Плотникова, А.Н. Евдокимов, А.И. Арефьев // Состояние окружающей среды и здоровье

населения: Мат-лы III Международной научно-практ. конф.- Курган, 2011. -С. 113-114.

58. Матвеев H.H. Биохимические показатели у мышей через сутки после интоксикации метилфосфоновой кислотой / H.H. Матвеев, И.В. Савинова, A.M. Корепин, О.М. Плотникова // Экологобезопасные и ресурсосберегающие технологии и материалы: Мат-лы Всероссийской научно-практ. конф. с междунар. участ. -Улан-Удэ, 2011. -С. 188-189.

59. Григорович, М.А. Показатели крови мышевидных грызунов в зоне защитных мероприятий объекта уничтожения химического оружия в Курганской области в 2008-2010 г.г. / М.А. Григорович, Б.И. Кудрин, О.М. Плотникова // IX Зыряновские чтения: Мат-лы научно-практ. конф.- Курган, 2011.-С. 175-176.

60. Евдокимов, А.Н. Изменение активности ферментов печени при влиянии специфических токсикантов уничтожения химического оружия фосфорорганических отравляющих веществ / А.Н. Евдокимов, О.М. Плотникова, М.А. Григорович // Биологический мониторинг природно-техногенных систем: Мат-лы Всерос. научно-практ. конф. с междунар. участ. Киров, 2011.-С. 170-172.

61. Плотникова О.М. Активность некоторых ферментов в ответ на введение метилфосфоната лабораторным мышам /О.М. Плотникова, А.Н. Евдокимов // Экологические проблемы промышленных городов: сб. научных трудов / под ред. Е.И. Тихомировой/ Саратов, 2011. -Ч. 1. -С. 278.

62. Савинова, И.В. Показатели энергетического обмена в долгосрочном эксперименте после введения метилфосфоната лабораторным мышам / И.В. Савинова, О.М. Плотникова // Экологические проблемы промышленных городов: сб. научных трудов / под ред. Е.И. Тихомировой/ Саратов: Саратовский гос. ун-т, 2011,- Ч. 1. -С. 289-290.

63. Плотникова, О.М. Экотоксикологический мониторинг в районе расположения объекта уничтожения химического оружия в г. Щучье Курганской области / О.М. Плотникова, М.А. Григорович, А.Н. Евдокимов // Экологические проблемы промышленных городов: сб. научных трудов / под ред. Е.И. Тихомировой. /Саратов: Саратовский гос. ун-т, 2011. Ч. 1. -С. 125-

126.

ИИ

КК

КрФ

КФГ

ЛДГ

АЛТ и ACT

ВНСММ

АО С АФГ

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ СОКРАЩЕНИЙ

СТ аланин- и аспартатаминотрансферазы антиоксидантная система альдегидофенилгидразоны 1 вещества низкой и средней молекулярной массы

индекс интоксикации креатинкиназа креатинфосфат кетофенилгидразоны лактатдегидрогеназа

МДА малоновый диальдегид

МФК метилфосфоновая кислота

НСТ нитросиний тетразолий

ОП олигопептиды

ПВК пировиноградная кислота, пируват

ПОБ перекисное окисление белков

ПОЛ перекисное окисление липидов

СОД супероксиддисмутаза

ТХУ трихлоруксусная кислота

ФОС фосфорорганические соединения

ФП СРО функциональный показатель свободно-радикального окисления

ЭИ эндогенная интоксикация

а1-, а2-, Р-, у- фракции глобулинов

<3 и $ символьное обозначение самцов и самок

Отзывы на автореферат просим высылать по адресу: 420008, г. Казань, ул.Кремлевская, 18; КФУ, отдел аспирантуры ученому секретарю диссертационного совета Д212.081.08 Абрамовой З.И.

Тираж 100 экземпляров Отпечатано в редакционно-издательском центре Курганского государственного университета г. Курган, ул. Гоголя, 25.

Содержание диссертации, доктора биологических наук, Плотникова, Ольга Михайловна

ВВЕДЕНИЕ.

Глава 1. ВОПРОСЫ ОСОБОЙ БИОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ ФОСФОРОРГАНИЧЕСКИХ КСЕНОБИОТИКОВ, ИХ ПРИМЕНЕНИЯ И ВЛИЯНИЯ НА ЖИВЫЕ ОРГАНИЗМЫ (обзор литературы).

1.1. Практическое применение фосфорорганических ксенобиотиков и их влияние на живые организмы.

1.2. Вопросы особой биологической активности фосфорорганических соединений.

1.3. Некоторые аспекты защитных и детоксикационных систем организмов и их маркеры. 27~

1.4. Особенности действия биологически активных веществ в низких дозах на живые организмы.

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Материалы и структура исследования.

2.2. Методы исследования.

Глава 3. КОМПЛЕСНАЯ БИОХИМИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА МЕТАБОЛИЗМА БЕЛЫХ ЛАБОРАТОРНЫХ МЫШЕЙ ПОСЛЕ ВВЕДЕНИЯ МЕТИЛФОСФОНОВОЙ КИСЛОТОЙ В ВЫСОКОЙ ДОЗЕ

В РАЗЫЕ СРОКИ ОСТРОГО ЭКСПЕРИМЕНТА.

3.1. Результаты изучения основных биохимических показателей метаболизма у самцов лабораторных мышей в разные сроки острого эксперимента после введения МФК в дозе 2 мг/кг.

3.2. Результаты изучения основных биохимических показателей метаболизма у самок лабораторных мышей в разные сроки острого эксперимента после введения МФК в дозе 2 мг/кг.

3.3. Изменение основных биохимических показателей метаболизма у лабораторных мышей после введения МФК в дозе 2 мг/кг в остром эксперименте в зависимости от пола.

Глава 4. ДОЗОЗАВИСИМЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ ВЛИЯНИЯ МЕТИЛФОСФОНОВОЙ КИСЛОТЫ НА МЕТАБОЛИЗМ БЕЛЫХ ЛАБОРАТОРНЫХ МЫШЕЙ В ОСТРОМ ЭКСПЕРИМЕНТЕ.

4.1. Оценка влияния различных доз МФК на основные биохимические показатели метаболизма у самцов лабораторных мышей через 72 часа после введения.

4.2. Изменение активности некоторых ферментов, характеризующих функции печени, у самцов лабораторных мышей через 72 часа после введения различных доз МФК.

4.3. Оценка влияния различных доз МФК на основные биохимические показатели метаболизма у самок лабораторных мышей через 72 часа после введения.

4.4. Изменения основных биохимических показателей метаболизма у лабораторных мышей в зависимости от пола в остром эксперименте после введения различных доз МФК.

Глава 5. ИЗМЕНЕНИЕ БИОХИМИЧЕСКИХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ МЕТАБОЛИЗМА БЕЛЫХ ЛАБОРАТОРНЫХ МЫШЕЙ ПОД ВЛИЯНИЕМ МЕТИЛФОСФОНОВОЙ КИСЛОТЫ В УСЛОВИЯХ ДОЛГОВРЕМЕННОГО И ХРОНИЧЕСКОГО ЭКСПЕРИМЕНТА.

5.1. Влияние МФК в высоких и низких дозах на основные показатели углеводного обмена у самок лабораторных мышей в долговременном эксперименте.

5.2. Влияние МФК в высоких и низких дозах на основные показатели липидного обмена у самок лабораторных мышей в долговременном эксперименте.

5.3. Влияние МФК в высоких и низких дозах на основные показатели белкового обмена у самцов лабораторных мышей в долговременном эксперименте.

5.4. Изменение активности некоторых ферментов, характеризующих функции печени, у самцов лабораторных мышей после введения различных доз МФК в хроническом эксперименте.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Влияние метилфосфоновой кислоты на основе звенья гомеостаза белых лабораторных мышей"

Актуальность исследования.

В современном мире в повседневной жизни используются десятки новых не имеющих аналогов в природе органических веществ -ксенобиотиков, которые не входят в биотический круговорот, а являются прямым или косвенным продуктом хозяйственной деятельности человека. Это - химические отравляющие вещества, пестициды, детергенты, полиароматические углеводороды, синтетические красители, пищевые добавки и др. Попадая в окружающую природную среду, ксенобиотики могут нарушать обмен веществ, вызвать аллергические реакции и снижать иммунитет, изменять наследственные признаки и приводить к гибели организмов. Кроме того, вследствие биотрансформации и деградации в живых организмах и во внешней среде ксенобиотики могут образовывать не менее токсичные метаболиты [154, 200, 201, 327, 344, 407]. Поэтому являются актуальными исследования устойчивости живых организмов к действию загрязняющих веществ антропогенного характера.

Среди загрязняющих веществ особое место занимают фосфорорганические соединения (ФОС), среди которых важнейшими являются производные алкилфосфоновых кислот, широко используемые в промышленности, строительстве, медицине, сельском хозяйстве [87, 157, 240, 269]. Это инсектициды карбофос, хлорофос, дихлофос и гербициды -особенно глифосат (фосфонометилглицин), применяемый с невиданным размахом для борьбы с сорняками во всем мире [420, 424, 448]. К производным алкилфосфонатов относятся фосфорорганические отравляющие вещества (зарин, зоман и ви-икс) химического оружия, которое в настоящее время планомерно широкомасштабно уничтожается в рамках выполнения ФЦП «Уничтожение запасов химического оружия в Российской Федерации» [367, 368].

Низкие концентрации отравляющих веществ и различных ксенобиотиков, а также продуктов их трансформации, безопасные в рамках санитарно-гигиенических нормативов и сложно идентифицируемые по стандартным методикам количественного химического анализа могут являться значимыми для экосистем [47, 49, 99, 174, 207, 361, 389].

Продуктами деструкции фосфорорганических отравляющих веществ и некоторых пестицидов, а также их метаболитами в биологических средах являются метилфосфоновая кислота (МФК), ее соли и эфиры. Эти вещества являются достаточно устойчивыми соединениями. МФК была обнаружена на полигоне Дагуэй спустя 10 лет после загрязнения, а диизопропилметил-фосфонат - в грунтовых водах на территории арсенала РоккиМаунтин (США) [327, 431, 445, 480]. В силу устойчивости МФК принято считать одним из важнейших маркеров содержания продуктов распада ФОС в природной среде [312].

Действие на теплокровные организмы этих соединений практически не изучалось в силу их малой, как считалось долгое время, токсичности. Для МФК установлена низкая токсичность для млекопитающих и водных организмов. ЛД50 для крыс при пероральном введении МФК составляет 5000 мг/кг массы животного. Однако, после ряда исследований влияния МФК на дикорастущие растения, ячмень, пелюшку, мхи, некоторые тест-организмы абсолютная безопасность МФК стала подвергаться сомнению [277, 336]. Был разработан биокатализатор, способный осуществлять деградацию МФК в присутствии источника углерода с разрывом С-Р связи до фосфата, который используется клетками как источник фосфора [128, 132, 379, 435].

Особое строение и свойства метилфосфоновой кислоты - наличие малополярной фосфор-углеродной связи (С-Р-связи), близкие к фосфорной кислоте константы диссоциации, бифильность, могут приводить к ее неоднозначному влиянию на биологические объекты [182, 240, 327].

Малополярная С-Р-связь МФК способна расщепляться в определенных условиях по гомолитическому механизму с образованием свободных радикалов [209, 291]. Метальный и фосфонатный радикалы могут реагировать с другими радикалами как «ловушки», с активными формами кислорода с образованием более токсичных соединений, быть инициатором цепных радикальных процессов в организме даже при низких концентрациях. Информация о воздействии МФК и ее эфиров на метаболизм и антиоксидантную систему животных и человека в литературе отсутствует.

Существуют данные о влиянии МФК на рост и ферментативную активность растений [277, 278, 336]. Ряд исследований, доказывающие существование микроорганизмов с С-Р-лиазной активностью, подтверждают возможность участия веществ со связью С-Р в метаболических процессах [129, 130, 183, 191, 234, 379, 435, 459, 462, 470, 475].

При этом актуальным является изучение биохимических показателей крови животных и поиск маркеров, пригодных для лабораторной диагностики и мониторинга изменения состояния животных в районах применения фосфорорганических пестицидов или уничтожения фосфорорганических отравляющих веществ, где в окружающей среде могут появляться и накапливаться метилфосфонаты, обнаружение которых аналитическими методами невозможно из-за очень низких концентраций. Однако важно уметь оценить влияние загрязнения в биологических объектах на самой ранней стадии. Это имеет значимость как с точки зрения безопасности уничтожения ФОС, так и с социальной стороны.

Цель исследования.

Охарактеризовать изменения биохимических показателей метаболизма белых лабораторных мышей линии СВА после введения метилфосфоновой кислоты в различных дозах в остром, долговременном и хроническом периодах эксперимента, выявить наиболее информативные биохимические тесты, пригодные для лабораторной диагностики и мониторинга изменения состояния животных при влиянии метилфосфонатов.

Задачи исследования.

1. Определить значения важнейших биохимических показателей углеводного обмена (гликогена печени, гликогена, креатина и креатинфосфата мышц, лактата, пирувата, лактатдегидрогеназы и креатинкиназы), белкового обмена (общего белка, белковых фракций, олигопептидов, веществ низкой и средней молекулярной масс), липидного обмена (общих липидов, холестерина, триглицеридов), антиоксидантной системы (супероксиддисмутазы, каталазы, малонового диальдегида, продуктов перекисного окисления белков) у здоровых белых лабораторных мышей линии СВА, содержащихся в стандартных условиях вивария.

2. Изучить влияние высокой дозы МФК (2 мг/кг) на биохимические показатели углеводного, белкового и липидного обменов, антиоксидантной системы белых лабораторных мышей в разные сроки острого эксперимента и определить временные интервалы максимального ответа в изменениях биохимических показателей крови и тканей.

3. Изучить изменения показателей метаболизма после введения различных доз МФК в остром эксперименте и определить дозы, оказывающие наибольшее влияние.

6. Изучить влияние пола на биохимический статус белых лабораторных мышей линии СВА в ответ на введение МФК.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. МФК оказывает влияние на основные процессы метаболизма у лабораторных мышей, приводя к изменениям биохимических показателей, характеризующих углеводный, липидный и белковый обмен и работу антиоксидантной системы.

3. Ответ на введение МФК во всех исследуемых дозах зависит от половой принадлежности животных.

Объекты исследования:

Работа выполнена на базе клинико-экспериментального лабораторного отдела ФГУ «Российского научного центра «Восстановительная травматология и ортопедия» (РНЦ «ВТО») им. академика Г.А. Илизарова»

Минздравсоцразвития и Межрегиональной лаборатории экотоксикологии Регионального центра по обеспечению государственного экологического контроля и мониторинга объектов по хранению и уничтожению химического оружия (РЦ СГЭКиМ) по Курганской области, которая аккредитована в Системе аккредитации аналитических лабораторий (СААЛ) на техническую компетентность и независимость в проведении аналитических биохимических исследований с использованием биологического материала, полученного от мелких грызунов (аттестат аккредитации в системе СААЛ РОСС БШ.0001.517720).

Экспериментальные исследования проведены на здоровых взрослых половозрелых лабораторных мышах (самцах и самках) линии СВА (1900 животных) в возрасте 2-3 месяцев массой от 22 до 30 г с интервалом массы животных в сериях опытов ±2 г. Материалом исследования служили: мышечная ткань, печень, сыворотка (плазма) и эритроцитарная масса крови. Все работы с лабораторными мышами проводили согласно принципам гуманного отношения к животным в соответствии с «Международными рекомендациями по проведению медико-биологических исследований с использованием животных» и «Правилами лабораторной практики в Российской Федерации» [304]. Мыши содержались в стандартных условиях вивария согласно «Санитарным правилам по устройству, оборудованию и содержанию экспериментальных биологических клиник» [330].

Научная новизна исследования.

Впервые комплексно исследовано влияние МФК на важнейшие показатели обмена веществ, перекисного окисления липидов и белков, антиоксидантной системы белых лабораторных мышей. Показано, что МФК оказывает влияние на основные процессы метаболизма у мышей линии СВА, приводя к изменениям биохимических показателей, характеризующих углеводный, липидный и белковый обмен и работу антиоксидантной системы. Впервые выявлены закономерности в изменениях показателей метаболизма под влиянием различных доз МФК в остром, долговременном и хроническом периодах эксперимента.

Впервые обнаружено, что ответ на введение МФК во всех дозах зависит от половой принадлежности животных. Выявлено, что в ответ на воздействие МФК организм самцов реагировал МФК более реактивно, и в остром эксперименте после однократного введения МФК в дозе 2 мг/кг первый максимум в изменении показателей в остром периоде эксперимента отмечался через 12 часов у самцов и через 24 часа у самок. Впервые показано, что у самцов через 12 часов после введения МФК в дозе 2 мг/кг происходили типичные для острого стресса изменения белкового обмена, рост маркеров окислительного распада белков при снижении активности СОД, через сутки - восстановление основных показателей метаболизма, снижение продуктов окислительного распада и увеличение активности СОД. Впервые выявлено, что у самцов и самок через 72 часа после введения высоких доз МФК падал уровень продуктов ПОБ и ПОЛ, и повышалась активность эритроцитарной СОД, что сопровождалось у самцов увеличением уровня гликогена мышц и у самок его снижением. У самцов в это время снижалась активность ферментов холинэстеразы и АЛТ.

Впервые показано, что МФК обладает выраженным дозозависимым действием с максимальным влиянием на показатели метаболизма животных в

3 9 12 15 диапазонах высоких (2 и 10" мг/кг) и низких (10" , 10" и 10" мг/кг) доз и

6 18 минимальным - на уровне средних и очень низких (10" и 10" мг/кг) доз. Выявлено, что после введения низких доз МФК у самцов через 72 часа происходило снижение уровня продуктов ПОЛ и рост продуктов ПОБ при повышении активности СОД, увеличение содержания средних молекул в плазме и эритроцитах. Изучено, что после введения низких доз МФК у самок через 72 часа активность СОД и уровень продуктов ПОБ оставались в пределах значений контрольных групп при снижении уровня продуктов ПОЛ; при этом содержание средних молекул увеличивалось только в эритроцитах, оставаясь в пределах нормы в плазме.

Впервые показано, что хроническое поступление в виде подкожных инъекций в течение 12 недель высоких и низких доз МФК вызывало у самцов лабораторных мышей повышение активности ACT, AJIT и холинэстеразы, максимально для холинэстеразы после введения низких доз МФК. Обнаружено, что у самок, наоборот, происходило снижение активности этих ферментов. Выявлено, что хроническое пероральное введение различных доз МФК не приводило у самцов к значимым изменениям в активности холинэстеразы и аминотрансфераз; у самок пероральное введение МФК в низкой дозе вызывало повышение активность ACT.

Практическая значимость исследования, область внедрения.

Полученные данные могут быть использованы для расширения области знаний о влиянии МФК как представителя фосфорорганических ксенобиотиков с фосфор-углеродной связью на важнейшие показатели метаболизма, перекисного окисления липидов и белков, состояния АОС у теплокровных животных, а также по влиянию низких доз МФК. Полученные данные могут быть применены при оценке токсичности ФОС с использованием лабораторных мышей как тест-объектов.

Оценено дозозависимое действие МФК с максимальным влиянием на показатели метаболизма животных в диапазонах высоких (2 и 10" мг/кг) и низких (10"9, 10"12 и 10"15 мг/кг) доз и минимальным - на уровне средних и очень низких (10" и 10" мг/кг) доз.

Результаты проведенного исследования были использованы: - для разработки в Межрегиональной лаборатории экотоксикологии РЦ СГЭКиМ по Курганской области трех методик, аттестованных ФГУП «Уральский научно-исследовательский институт метрологии»: «Методики выполнения измерений биохимических показателей в плазме (сыворотке) крови мелких теплокровных животных фотометрическим методом» (свидетельство об аттестации № 224.11.03.052/2009), «Методики определения гематологических показателей в крови мелких теплокровных животных микроскопическим методом» (свидетельство об аттестации № 224.11.17.025/2010), «Методики измерений активности ферментов в плазме (сыворотке) крови мелких теплокровных животных фотометрическим методом» (свидетельство об аттестации № 224.0474/01.00258/2011);

Апробация работы. Основные результаты диссертационного исследования доложены: на VII Всероссийской научно-практической конференции «Проблемы региональной экологии в условиях устойчивого развития» (Киров, 2009); на VIII Всероссийской научно-практической конференции «Современные проблемы биомониторинга и биоиндикации» (Киров, 2010); на юбилейной научной конференции, посвященной 80-летию Химфака МГУ «Химия и общество. Грани взаимодействия: вчера, сегодня, завтра» (Москва, 2009); на международной научно-практической конференции «Экология. Риск. Безопасность» (Курган, 2010); на Всероссийской научной конференции «Биология будущего: традиции и инновации» (Екатеринбург, 2010); на международной конференции

Антропогенная трансформация природной среды» (Пермь, 2010), на научно-практической конференции, посвященной 200-летию со дня рождения Н.И. Пирогова (Курган, 2010); на Всероссийской научно-практической конференции «Химическая безопасность Российской Федерации в современных условиях» (Санкт-Петербург, 2010); на международной научно-практической конференции «Состояние окружающей среды и здоровье населения» (Курган, 2011); на Всероссийской научно-практической конференции «Биологический мониторинг природно-техногенных систем» (Киров, 2011); на II международной конференции по физиологии и медицине (Санкт-Петербург, 2011); на IX Всероссийской научно-практической конференции «Зыряновские чтения» (Курган, 2011).

Декларация личного участия автора. Постановка проблемы и задач, разработка методов их решения, экспериментальные химико-токсикологические и лабораторно-полевые исследования выполнялись автором лично или при непосредственном его участии. Обработка данных, их интерпретация и оформление осуществлены автором самостоятельно.

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 63 печатных работы, в числе которых 1 монография и 12 статей в изданиях, рекомендованных ВАКом РФ для публикации результатов диссертационных исследований.

Объем и структура работы. Работа изложена на 266 страницах машинописного текста, состоит из введения, 5 глав, заключения, практических рекомендаций, выводов, списка литературы, включая 38 таблиц и 106 рисунков. Библиографический указатель включает 512 источников: из них 407 - отечественных, 105 - зарубежных. Диссертационное исследование выполнено по плану НИР ФГУ «РНЦ «ВТО» им. акад. Г.А. Илизарова» Минздравсоцразвития (номер госрегистрации 0120.0802849) и Межрегиональной лаборатории экотоксикологии РЦ СГЭКиМ по Курганской области.

Заключение Диссертация по теме "Биохимия", Плотникова, Ольга Михайловна

выводы

1. Метилфосфоновая кислота (МФК) обладает выраженным дозозависимым действием с максимальным влиянием на показатели метаболизма животных в диапазонах высоких (2 и 10"3 мг/кг) и низких (10"12 и 10"15 мг/кг) доз и минимальным - на уровне средних и очень низких (10"6 и 10"18 мг/кг) доз.

2. У мышей линии СВА ответ на введение МФК зависит от половой принадлежности животных. Наибольшие изменения метаболизма в остром периоде эксперимента после однократного введения МФК в дозе 2 мг/кг происходят у самцов через 12 часов, у самок через 24 часа. Действие низких доз МФК вызывает у самцов по сравнению с самками большие изменения в белковом обмене и работе антиоксидантной системы.

3. У самцов через 12 часов после введения МФК в дозе 2 мг/кг наблюдаются типичные для острого стресса изменения белкового обмена: гиперпродукция а- и |3-глобулинов на 20-40% при уменьшении на треть у-глобулиновой фракции; рост маркеров окислительного распада белков до кетопроизводных в 2 раза при снижении активности СОД; увеличение содержания олигопептидов в плазме и эритроцитах в 1,2 и 2 раза (соответственно) и ВНСММ в плазме в 1,4 раза за счет катаболической составляющей. Эти процессы сопровождаются уменьшением уровня гликогена в печени и мышцах. У самок наблюдается дисглобулинемия, выражающаяся в увеличении у-глобулинов на 30% и уменьшении а1- и {3-глобулинов, сопровождающаяся снижением продуктов ПОБ и активности СОД.

Через 24 часа у самцов происходит восстановление основных показателей метаболизма при снижении продуктов окислительного распада и увеличении активности СОД в 1,7 раза. У самок наблюдается повышение альбуминов и острофазовых белков при снижении в 1,5 раза уровня углобулинов, сопровождающееся ростом маркеров перекисного окисления белков в плазме и олигопептидов в эритроцитах.

4. Особенностью изменений показателей метаболизма у самцов и самок после введения высоких доз МФК (через 72 часа) является достоверное понижение на треть продуктов перекисного окисления белков и липидов при повышении активности эритроцитарной СОД; снижение уровня гликогена в печени (в среднем на 20%) при повышении содержания пирувата в сыворотке на 20-80%. Для самцов характерно увеличение, а для самок снижение в 2,7 и в 4,8 раза (соответственно) мышечного гликогена. В этот период у самцов происходит снижение активности ферментов холинэстеразы и АЛТ (на 2040%), характеризующих функцию печени.

5. Особенностью изменений показателей метаболизма у самцов после введения низких доз МФК (через 72 часа) является достоверное снижение уровня продуктов ПОЛ и рост продуктов ПОБ в 1,4-1,8 раза при повышении активности СОД (в 1,5 раза); увеличение содержания средних молекул в плазме и эритроцитах, сопровождающееся повышением индекса интоксикации (в 2,3 раза). У самок активность СОД и уровень продуктов ПОБ остаются в пределах значений контрольных групп при снижении уровня продуктов ПОЛ на треть; содержание средних молекул увеличивалось в 1,4 раза только в эритроцитах, оставаясь в пределах нормы в плазме.

6. В долговременном эксперименте (через 18 суток) после однократного введения высоких и низких доз МФК для большинства отмечается нормализация, либо тенденция к нормализации показателей метаболизма: увеличение активности СОД и каталазы сопровождает снижение продуктов перекисного окисления, особенно липидов. Через 30 суток на фоне нормальных значений большинства показателей происходит активация перекисного окисления - рост уровня МДА на 30-40%), альдегидопроизводных молекул - 30-35%. Увеличение кетопроизводных молекул на 70% отмечено только после введения МФК в низкой дозе.

7. Поступление высоких и низких доз МФК (в виде подкожных инъекций) в течение 12 недель у самцов вызывает достоверное повышение активности ферментов - ACT, AJ1T и холинэстеразы, максимально (в 1,7 раза) для холинэстеразы после введения низких доз МФК. У самок происходит снижение активности этих ферментов, максимально для AJIT в 1,5 раза. Хроническое пероральное введение различных доз МФК не приводит к значимым изменениям в активности холинэстеразы и аминотрансфераз у самцов; у самок введение МФК в низкой дозе вызывает повышение активность ACT в 1,6 раза.

• маркеры эндогенной интоксикации - ВНСММ и ОП в плазме и эритроцитах; интегральный индекс интоксикации;

• энергетические маркеры - тканевый гликоген, пируват и лактат в сыворотке;

• активность ферментов-маркеров состояния печени - холинэстеразы, аланин- и аспартатаминотрансферазы, индекс АСТ/АЛТ.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ И ВНЕДРЕНИЕ

РЕЗУЛЬТАТОВ

В качестве биохимических индикаторов при воздействии на теплокровные организмы метилфосфонатов в высоких и низких дозах могут быть использованы показатели метаболизма теплокровных животных. Это может быть использовано при проведении мониторинга состояния здоровья людей, работающих с ФОС или проживающих в районах применения фосфорорганических пестицидов, особенно глифосата, и расположения объектов уничтожения фосфорорганических отравляющих веществ, а также при проведении экологического мониторинга животного мира для раннего обнаружения загрязнения ФОС окружающей среды.

Изучение биохимических показателей лабораторных мышей как тест-объектов может быть использовано при оценке токсичности индивидуальных ФОС, а также нативных экстрактов из отходов и почв, загрязненных ФОС.

Результаты проведенного исследования и данные рекомендации были успешно апробированы на практике. Для чего в Межрегиональной лаборатории экотоксикологии РЦ СГЭКиМ по Курганской области были разработаны и аттестованы ФГУП «Уральский научно-исследовательский институт метрологии» «Методика выполнения измерений биохимических показателей в плазме (сыворотке) крови мелких теплокровных животных фотометрическим методом» (свидетельство об аттестации № 224.11.03.052/2009), «Методика определения гематологических показателей в крови мелких теплокровных животных микроскопическим методом» (свидетельство об аттестации № 224.11.17.025/2010), «Методика измерений активности ферментов в плазме (сыворотке) крови мелких теплокровных животных фотометрическим методом» (свидетельство об аттестации № 224.0474/01.00258/2011).

С 2009 года проводится экотоксикологический мониторинг состояния мелких грызунов в зонах защитных мероприятий объектов уничтожения фосфорорганических отравляющих веществ в Курганской, Кировской, Пензенской и саратовской областях.

В 2009-2011 годах проводились токсиколого-гигиенических исследования почв и отходов при обследовании объекта бывшего хранения химического оружия в Удмуртской Республике и мест прошлого уничтожения химического оружия в Пензенской области».

Полученные результаты представляли практический интерес для природоохранных организаций разного уровня и в дальнейшем могут стать основой для их внедрения в систему государственного экотоксикологического мониторинга для прогнозирования возможных последствий химического загрязнения ФОС.

Библиография Диссертация по биологии, доктора биологических наук, Плотникова, Ольга Михайловна, Курган

1. Абакумова, Ю.В. Физиологическое и патологическое свободиорадикальное окисление: сущность, методика распознавания, теоретическое и практическое значение /Ю.В. Абакумова // Врачевание и его методология. Саратов. 1996. С. 33-52.

2. Абдувахабов, A.A. Антиферментное действие и детоксикация фосфорорганических ингибиторов холинэстераз / A.A. Абдувахабов, С. Михайлов, A.C. Садыков и др. Ташкент: Фан, 1989. 180 с.

3. Абрамова, Ж.И. Человек и противоокислительные вещества / Ж.И. Абрамова, Г.И. Оксенгендлер. Ленинград: Наука, 1985. 230 с.

4. Активация свободнорадикального окисления эфферентное звено типовых патологических процессов / Под ред. Н. П.Чесноковой, М. Ю. Ледванова. Саратов: Изд-во Саратов, мед. ун-та, 2006. 177 с.

5. Александров, В.Н. Отравляющие вещества / В.Н. Александров, В.И. Емельянов. М.: Воениздат, 1990. 268 с.

6. Альбумин сыворотки крови в клинической медицине / Под ред. Ю.А. Грызунова, Г.Е. Добрецова. М., 1994. С. 131-134.

7. Альдебель, М. М. Биохимические показатели крови почек крыс с экспериментальным хроническим гломерулонефритом: Автореф. дис. . докт. наук. СПб., 2000. 32 с.

8. Анищенко, Т.Г. Половые аспекты стресса и адаптации / Т.Г. Анищенко // Успехи современной биологии. 1991. Т. 111. № 4. С. 460-475.

9. Анищенко, Т.Г. Половые различия в чувствительности белых крыс к адреналину / Т.Г. Анищенко, Е.В. Гудкова // Бюллетеньэкспериментальной биологии и медицины. 1992. № 6. С. 577-579.

10. Анищенко, Т.Г. Половые различия холинергического статуса у белых крыс / Т.Г. Анищенко, Б.Н. Мамонтов, J1.H. Шорина // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1992. № 10. С. 353-355.

11. Антонов, Н.С. Химическое оружие на рубеже двух столетий / Н.С. Антонов. М.: Прогресс, 1994. 174 с.

12. Арбузов, А.Е. Избранные труды по химии фосфорорганических соединений / А.Е. Арбузов. М.: Наука, 1976. 559 с.

13. Ардаматский, H.A. Методика определения физиологического и патологического перекисного окисления / H.A. Ардаматский, Ю.В. Абакумова, E.H. Корсунова // Экоген, 1994. №4. с.9.

14. Асташова, Т.А. Хромато-масс-спектрофотометрический анализ продуктов ПОЛ в органах и тканях в условиях модели токсикоза / Т.А. Асташова, В.В. Асташов, С.В. Морозов // Вопросы биологической медицины и фармакологической химии. 1998. № 4. С. 52-55.

15. Ашмарин, И.П. Нейропептиды / И.П. Ашмарин, Е.П. Каразеева // Биохимия мозга. СПб.: Изд-во СПбГУ, 1999. С. 232-266.

16. Бабаскин, Б.С. Определение пировиноградной кислоты модифицированным методом Умбрайта / Б.С. Бабаскин // Лабораторное дело. 1976. №3. С. 76.

17. Бабаханян, Р.В. Токсикология ряда новых фосфорорганических соединений: Автореф. дис. канд. биол. наук, Л., 1973. 16 с.

18. Бабийчук, Г.А. К концепции экзистоэнцефалической системы охлажденного мозга. Часть. 2. Биоритмы холодового стресса / Г.А. Бабийчук, B.C. Марченко, Л.Н. Марченко и др. // Проблемы криобиологии. 2000. № 3. С. 21-27.

19. Бадюгин, Н.С. Неспецифические механизмы действия антихолинэстеразных ФОС / Н.С. Бадюгин, Р.Я. Хамитова, Н.Я. Макаров // Военно-медицинский журнал. 1979. № 4. С. 47-49.

20. Бак, 3. Химическая передача нервного импульса / 3. Бак. М.: Мир, 1977.118с.

21. Балеста, П.С. Гербицидные свойства фосфорсодержащих аминокислот / П.С. Балеста, В.К. Промоненков, Т.А. Мастрюкова. Черкассы. 1987. 45 с.

22. Балуда, В.П. Лабораторные методы исследования системы гемостаза / В.П. Балуда, З.С. Баркаган, Е.Д. Гольдберг и др. Томск: Медицина, 1980. 310 с.

23. Барабой, В.А. Перекисное окисление и стресс / В.А. Барабой, И.И. Брехман, В.Г. Голотин. СПб.: Наука, 1992. 148 с.

24. Барабой, В.А. Перекисное окисление и радиация / В.А. Барабой, В.Э. Орел, И.И. Карнаук. Киев: Наукова думка, 1991. 252 с.

25. Баркаган, З.С. Геморрагические заболевания и синдромы / З.С. Баркаган. Москва, Медицина, 1988. 528 с.

26. Баркаган, З.С. Основы диагностики нарушений гемостаза / З.С. Баркаган, А.П. Момот. М.: Ньюдиамед, 1999. 285 с.

27. Барышников, А. Ю. Иммунологические проблемы апоптоза / А.Ю. Барышников, Ю.В. Шишкин. М.: Эдиториал УРСС, 2002. 320 с.

28. Белавинцев, М.А. Особенности разрабатываемых технологий уничтожения химического оружия / М.А. Белавинцев, Л.В. Мишанов // Федеральные и региональные проблемы уничтожения химического оружия. М.: ВИНИТИ, 1999. № 1. С. 81-83.

29. Белецкая, И.П. Химическое оружие России: перспективы хранения и уничтожения / И.П. Белецкая // Химическое оружие. Экологические проблемы уничтожения. М.: ВИНИТИ, 1997. Вып. 1. С. 65-75.

30. Белокуров, Ю.Н. Прогнозирование течения эндогенной интоксикации в неотложной хирургии / Ю.Н. Белокуров, В.В. Рыбачков // Вестникхирургии. 1991. № 6. С. 3-7.

31. Белоногов, Р.Н. Изменение содержания карбонильных производных белков у больных раком легкого / Р.Н. Белоногов, Н.М. Титова // Сибирский онкологический журнал. 2007. № 2. С. 20-21.

32. Беляков, H.A. Концентрация в крови и биологическая активность молекул средней массы при критических состояниях / H.A. Беляков, A.C. Владыка, М.Я. Малахова // Анестезиология и реаниматология. 1987. № 3. С. 41-44.

33. Беляков, H.A. Критерии и диагностика эндогенной интоксикации / H.A. Беляков, М.Я. Малахова // Эндогенные интоксикации: Тезисы докладов Международного симпозиума. СПб. 1994. С. 60-62.

34. Бересткин, А.П. Комбинированный вид ингибирования холинэстераз фосфорорганическими соединениями / А.П. Бересткин, H.H. Годовиков // Успехи химии. 1978. Т. 47. № 9. С. 1609-1627.

35. Бересткин А.П. О роли гидрофобного взаимодействия в ингибировании холинэстераз / А.П. Бересткин // Химия и применение фосфорорганических соединений. М.: Наука, 1973. С. 322-323.

36. Блюменфельд, JI.A. Понятие конструкции в биологической физике. К вопросу о механизме действия сверхмалых доз / JI.A. Блюменфельд // Российский химический журнал. 1999. Т. XLIII. Вып. 5. С. 15-20.

37. Биохимия / Под ред. Е.С. Северина. М.: Гэотар-Мед, 2003. 779 с.

38. Бобкова, Р.Г. Фосфонометилглицин и некоторые его производные / Р.Г. Бобкова, М.И. Михалкина, Н.И. Швецов-Шиловский и др. Черкассы. 1986. 40 с.

39. Болдырев, А. А. Введение в биохимию мембран / A.A. Болдырев. М.: Высш. шк, 1986. 112 с.

40. Болдырев, A.A. Окислительный стресс и мозг / A.A. Болдырев // Соросовский образовательный журнал. 2001. № 4. С. 21-28.

41. Бресткин, А.П. Особенности строения активного центра пропионилхолинэстеразы сыворотки крови кур / А.П. Бресткин, Т.В. Пархоменко // Биохимия. 1973. Т. 38. № 3. С. 467-470.

42. Буеверов, А.О. Лекарственные поражения печени / А.О. Буеверов // Русский медицинский журнал. 2001. № 13/14. С. 608-610.

43. Буканова, Ю.В. Влияние хлорофоса на высокопороговые калиевые и кальциевые каналы нейрональной мембраны / Ю.В. Буканова, Е.И. Солнцева // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1996. Т. 121. № 1.С. 59-62.

44. Бурлакова, Е.Б. Влияние ингибиторов радикальных реакций окисления липидов на электрическую активность нейрона виноградной улитки / Е.Б. Бурлакова, Т.Н. Греченко, E.H. Соколов и др. // Биофизика. 1986. Т. 31. № 5. С. 921-923.

45. Бурлакова, Е.Б. Воздействие химических агентов в сверхмалых дозах на биологические объекты / Е.Б. Бурлакова, A.A. Конрадов, И.В. Худяков // Известия РАН. Серия биологическая. 1990. № 2. С. 184-193.

46. Бурлакова, Е.Б. Действие сверхмалых доз биологических активных веществ и низкоинтенсивных физических факторов / Е.Б. Бурлакова, A.A. Конрадов, Е.Л. Мальцева // Химическая физика. 2003. Т. 22. № 2. С. 74-77.

47. Бурлакова, Е.Б. Действие сверхмалых доз биологических активных веществ и низкоинтенсивных факторов / Е.Б. Бурлакова, A.A. Конрадов, Е.Л. Мальцева // Механизмы действия сверхмалых доз: Материалы IV Международного симпозиума. Москва. 2008. С. 390-424.

48. Бурлакова, Е.Б. Особенности действия сверхмалых доз биологически активных веществ и физических факторов низкой интенсивности / Е.Б. Бурлакова // Российский химический журнал. 1999. Т. XLIII. Вып. 5. С. 3-11.

49. Бурлакова, Е.Б. Перекисное окисление липидов мембран и природныеантиоксиданты / Е.Б. Бурлакова, Н.Г. Храпова // Успехи химии. 1985. Т. 54. С. 1540-1558.

50. Бурлакова, Е.Б. Эффект сверхмалых доз / Е.Б. Бурлакова // Вестник Российской академии наук. 1994. Т. 64. № 5. С. 425-431.

51. Бурмистров, С.О. Значение определения средних молекул в моче при нормальной и осложненной беременности и у новорожденных с гипоксией / С.О. Бурмистров, К.А. Габелова, A.A. Андреева и др. // Клиническая лабораторная диагностика. 2001. № 6. С. 10-12.

52. Васильев, А.Н.Применение сверхмалых доз антител к гамма-интерферону в лечении и профилактики вирусных инфекций / А.Н. Васильев, С.А. Сергеева, М.В. Качанова и др. // Антибиотики и химиотерапия. 2008. Т. 53. № 3-4. С. 32-35.

53. Ведунова, М.В. Уровень эндогенной интоксикации при метаболическом синдроме / М.В. Ведунова, К.Н. конторщикова, H.A. Добротина // Вестник Нижегородского ун-та им. Н.И. Лобачевского. 2008. № 2. С. 87-90.

54. Вельтищев, Ю.Е. Биологически активные фосфоновые кислоты и их производные / Ю.Е. Вельтищев, Э.А. Юрьева, А.Н. Кудрин // Химико-фармацевтический журнал. 1983. Т. 18. № 3. С. 282-290.

55. Верещагин, А.Л. О механизме ростостимулирующего действия сверхмалых доз природных органических кислот / А.Л. Верещагин, В.В. Кропоткина, А.Н. Хмелева // Вестник Алтайского гос. аграрного унта. 2010. № 1.С. 46-48.

56. Вершигора, А.Е. Общая иммунология / А.Е. Вершигора. Киев: Высшая школа, 1990. 735 с.

57. Виру, A.A. Динамика реакции гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковой системы при стрессе / A.A. Виру // Успехи современной биологии. 1979. Т. 87. № 2. С. 271-288.

58. Виру, A.A. О динамике адренокортикальной активности при воздействии стрессора / A.A. Виру // Стресс и его патогенетические механизмы. Кишинев: Штинца, 1973. С. 254-255.

59. Владимиров, Ю.А. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах / Ю.А. Владимиров. М.: Медицина, 1972. 252 с.

60. Владимиров, Ю.А. Свободно-радикальное окисление липидов и физические свойства липидного бислоя биологических мембран / Ю.А. Владимиров//Биофизика. 1987. № 5. С. 830-834.

61. Владимиров, Ю.А. Свободные радикалы и антиоксиданты / Ю.А. Владимиров // Вестник Российской академии медицинских наук. 1998. №7. С.43-51.

62. Владимиров, Ю.А. Свободные радикалы в живых системах. Итоги науки и техники / Ю.А. Владимиров, O.A. Азизова, А.И. Деев и др. // Биофизика. 1991. Т. 29. 250 с.

63. Владыка, A.C. Средние молекулы и проблема эндогенной интоксикации при критических состояниях различной этиологии / A.C. Владыка, Э.Р. Левицкий, Л.П. Поддубная и др. // Анестезиология и реаниматология. 1987. №2. С. 37-41.

64. Власов, В.В. Реакция организма на внешние воздействия: общие закономерности развития и методические проблемы исследования / В.В. Власов. Иркутск: Изд-во Иркутского ун-та, 1994. 344 с.

65. Военная токсикология и медицинская зашита от ядерного и химического оружия / Под ред. В. В. Жеглова. М.: Воениздат, 1992. 366 с.

66. Военная токсикология и токсикология экстремальных ситуаций: учебник / Под ред. A.A. Бова, С.С. Горохова, В.Н. Яблонского. Минск: БГМУ, 2005. 662 с.

67. Военная токсикология, радиология и медицинская защита / Под ред. Н.В. Саватеева. Л.: Военная мед. академия, 1987. 356 с.

68. Волков, Н.И. Биохимия мышечной деятельности / Н.И. Волков, Э.Н. Несен, A.A. Осипенко, С.Н. Корсун. Киев: Олимпиадная литература, 2000. 503 с.

69. Волчегорский, И.А. Возрастная динамика липопероксидации в различных отделах центральной нервной системы / И.А. Волчегорский,

70. С.Е. Шемяков, И.Б. Телешева и др. // Физиология человека. 2005. Т. 31, № 2. С. 108-114.

71. Воронина, Т.А. Экспериментальный анализ транквилизирующего действия сверхмалых доз феназепама / Т.А. Воронина, Г.М. Молодавкин // Российский химический журнал. 1999. T. XLIII. № 5. С. 89-95.

72. Вьюшина, A.B. Перекисное окисление белков в сыворотке крови у пренатально стрессированных крыс / A.B. Вьюшина, И.Г. Герасимова, М.А. Флеров // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2004. Т. 138. №7. С. 41-44.

73. Вяселева, С.М. Антибактериальные свойства органических соединений фосфора / С.М Вяселева, O.A. Игнатьева, И.В. Заиконникова и др. // Химия и применение фосфорорганических соединений: Труды II Всесоюзной конференции. М.: 1962. С. 532-539.

74. Габриэлян, Н.И. Диагностическая ценность определения средних молекул в плазме крови при нефрологических заболеваниях / Н.И. Габриэлян, A.A. Дмитриев, Г.П. Кулаков и др. // Клиническая медицина. 1981. Т. 59.№ 10. С. 38-42.

75. Гаврилов, В.Б. Определение тирозин и триптофан содержащих пептидов в плазме крови по поглощению в УФ-области спектра / В.Б. Гаврилов, Н.Ф. Лобко, C.B. Конев // Клиническая лабораторная диагностика. 2004. № 3. С. 12-16.

76. Гаврилов, В.Б. Оценка интоксикации организма по нарушению баланса между накоплением и связыванием токсинов в плазме крови /

77. B.Б. Гаврилов, М.М. Бидула, Д.А. Фурманчук и др. // Клиническая лабораторная диагностика. 1999. № 2. С. 13-17.

78. Гаврилова, Е.А. Штамм бактерий Bacillus megaterium, предназначенный для деструкции фосфорорганических пестицидов / Е.А. Гаврилова, Т.О. Лисина, Ю.В. Круглов // Патент 1735359 RU. 23.05.1992.

79. Гайдышев, И.П. Анализ и обработка данных: специальный справочник / И.П. Гайдышев. СПб: Питер, 2001. 750 с.

80. Галактионов, О.Г. Пептиды группы "средних молекул" / О.Г. Галактионов, В.М. Цейтлин, В.Н. Монова и др. // Биоорганическая химия. 1984. Т. 10, № 1. С. 5-17.

81. Галактионов, С.Г. Средние молекулы эндотоксины пептидной природы /

82. C.Г. Галактионов, В.В. Николайчик, В.М. Цейтлин и др. // Химико-фармацевтический журнал. 1983. № 11. С. 1286-1288.

83. Гараев, P.C. Глицифон лекарственное средство для лечения рака и предраковых заболеваний кожи / P.C. Гараев, Л.Н. Залялютдинова, В.Р. Гильмутдинова, И.А. Студенцова // Казанский медицинский журнал. 2004. Т. LXXXV. № 6. С. 401-405.

84. Гараев, P.C. Изыскание новых лекарственных средств в рядах фосфорорганических соединений / P.C. Гараев // Казанский медицинский журнал. 2008. Т. LXXXIX. № 5. С. 585-590.

85. Гараев, P.C. Отдаленные результаты лечения больных базально-клеточным раком глицифоновой мазью / P.C. Гараев, Р.Ш. Хасанов, Л.Н. Залялютдинова, В.Р. Гильмутдинова // Казанский медицинский журнал.2010. Т. 91. №4. С. 511-615.

86. Гланц, С. Медико-биологическая статистика / С. Гланц. М.: Практика, 1998. 459 с.

87. Глушков, С.И. Нарушения системы глутатиона и их роль в патогенезе острых интоксикаций ксенобиотиками с различными механизмами токсического действия: Автореф. дис. . д-ра мед. наук. СПб., 2006. 47 с.

88. Годовиков, H.H. Антихолинэстеразные свойства некоторых фосфорорганических соединений / H.H. Годовиков // Химия и применение фосфорорганических соединений. М.: Наука, 1972. С. 423-431.

89. Голиков, С.Н. Общие механизмы токсического действия / С.Н. Голиков, И.В. Саноцкий, Л.А. Тиунов. Л.: Медицина, 1986. С. 280.

90. Голиков, С.Н. Холинэстеразы и антихолинэстеразные вещества / С.Н. Голиков, С.Д. Заугольников. Л.: Медицина, 1970. 382 с.

91. Гончаров, Н.В. Механизмы токсического действия фторацетата и экспериментальная терапия острых отравлений: Автореф. дис. .докт. биол. наук. Пущино, 2008. 29 с.

92. Гончаров, Е.И. Современные представления о токсикологии фторацетата / Е.И. Гончаров, A.B. Кузнецов, A.C. Радилов // Токсикологический вестник. 2005. № 5. с. 31.44.

93. Гончарова, Е.И. Белки цитоскелета эритроцитов / Е.И. Гончарова, Г.П. Пинаев // Цитология. 1988. Т. 30. № 1. С. 5-18.

94. Горбатова, E.H. Изучение эффектов сверхмалых доз фенозана / E.H. Горбатова, Ф.С. Духович, В.К. Курочкин // Российский химический журнал. 1999. Т. XLIII. № 5. С. 80-81.

95. Городецкая, И.В. Тиреоидные гормоны и антистресс-система организма: Дис. . докт. биол. наук. СПб, 2006. 318 с.

96. Готовский, Ю.В. Особенности биологического действия физических факторов малых и сверхмалых интенсивностей и доз / Ю.В. Готовский, Ю.Ф. Перов. М., 2000. 118 с.

97. ЮО.Граник, В.Г. Метаболизм экзогенных соединений. Лекарственныесредства и другие ксенобиотики / В.Г. Граник. М.: Вузовская книга, 2006. 526 с.

98. Граник, В.Г. Метаболизм эндогенных соединений / В.Г. Граник. М.: Вузовская книга, 2006. 528 с.

99. Граник, В.Г. Токсикология лекарств / В.Г. Граник. М.: Вузовская книга, 2009. 440 с.

100. ЮЗ.Грапов, А.Ф. Фосфорорганические фунгициды / А.Ф. Грапов, H.H. Мельников. М.: НИИТЭХим, 1972. 46 с.

101. Григорьева, Г.М. Пропионилхолинэстеразы мозга брюхоногих моллюсков. Взаимодействие с субстратами и ингибиторами / Г.М. Григорьева//Биохимия. 1980. Т. 45. Вып. 12. С. 2176-2188.

102. Грицюк А.И. Практическая гемостазиология / А.И. Грицюк, E.H. Амосова, И.А. Грицюк. Киев: Здоровье, 1994 г. 256 с.

103. Юб.Гублер, Е.В. Применение непараметрических критериев статистики в медико-биологических исследованиях / Е.В. Гублер, A.A. Генкин. Л.: Медицина, 1973. 141 с.

104. Губский, Ю.И. Взаимодействие антиоксидантов различной химической структуры с фосфолипидным биослоем / Ю.И. Губский, А.Г. Горюшко, Э.В. Шурко и др. // Украин. биохим. журнал. 1994. Т. 66. № 2. С. 53-58.

105. Губский Ю.И. Токсикологические последствия окислительной модификации белков при различных патологических состояниях / Ю.И. Губский, И.Ф. Беленичев, Е.Л. Левицкий и др. // Современные проблемы токсикологии. 2005. № 3. С. 20-26.

106. Гудим, В.И. Клиническое значение средних молекул в патогенезе нефрогенной анемии / В.И. Гудим, П.И. Сигалла // Терапевтический архив. 1983. №6. С. 78-82.

107. Гуляева, Л.Ф. Ферменты биотрансформации ксенобиотиков в химическом канцерогенезе. Аналитический обзор / Л.Ф. Гуляева, В.А. Вавилин, В.В. Ляхович. Новосибирск: ГПНТБ, 2000. 90 с.

108. Ш.Гуревич, К.Г. Закономерности и возможные механизмы действиясверхмалых биологически активных веществ / К.Г. Гуревич // Вестник Московского ун-та. Серия «Химия». 2001. Т. 42. № 2. С. 131-134.

109. Давыдов, В.В. Особенности свободнорадикальных процессов в печени взрослых и старых крыс при стрессе / В.В. Давыдов // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2004. Т 137. № 2. С. 160-163.

110. Диксон, М. Ферменты / М. Диксон, Э. Уэбб. М.: Мир, 1982. Т. 1. 392 с.

111. Дорожко, Д.Е. Поведение актинидов и осколочных элементов в экстракционных системах с моно- и бидентными фосфорорганическими соединениями в процессе фракционирования высокоактивных отходов: Автореф. дис. . канд. хим. наук. М., 2007. 22 с.

112. Доутерман, У. Биологические и небиологические превращения фосфорорганических соединений / У. Доутерман // Бюллетень ВОЗ. 1972. Т. 44. № 1.С. 135-152.

113. Дубинина, Е.Е. Антиоксидантная система плазмы крови / Е.Е. Дубинина // Украинский биохимический журнал. 1992. Т. 64. № 2. С. 3-14.

114. Дубинина, Е.Е. Продукты метаболизма кислорода в функциональной активности клеток (жизнь и смерть, созидание и разрушение). Физиологические и клинико-биохимические аспекты / Е.Е. Дубинина. СПб.: Изд. Мед. пресса, 2006. 400 с.

115. Дубинина, Е.Е. Окислительная модификация белков / Е.Е. Дубинина, И.В. Шугалей // Успехи современной биологии. 1993. № 1. С. 71-79.

116. Дубинина, Е.Е. Окислительные модификации белков сыворотки крови человека, метод ее определения / Е.Е. Дубинина, С.О. Бурмистров, Д.А. Ходов и др. // Вопросы медицинской химии. 1995. № 1. С. 24-26.

117. Дубинина, Е.Е. Окислительная модификация белков: окисление триптофана и образование битирозина в очищенных белках сиспользованием системы Фентона / Е.Е. Дубинина, Е.В. Гавровская, С.В. Кузьмич и др. // Биохимия. 2002. Т. 67. Вып. 3. С. 413-421.

118. Дубинина Е.Е. Роль активных форм кислорода в качестве сигнальных молекул в метаболизме тканей при состояниях окислительного стресса / Е.Е. Дубинина // Вопросы медицинской химии. 2001. № 6. С. 561-581.

119. Дэвени, Т. Аминокислоты, пептиды и белки / Т. Дэвени, Я. Гергей. М.: Мир, 1976. 368 с.

120. Дятлова, Н.М. Применение комплексонов в нефтедобывающей промышленности: Обзорная информ.: реактивы и особо чистые вещества / Н.М. Дятлова, Л.Т. Дытюк, Р.Х. Самакаева. М.: НИИТЭХим, 1983. 47 с.

121. Евдокушкин, А. Военные ученые рассмотрели актуальные вопросы уничтожения химического оружия в России // Российская газета. Федеральный выпуск. 2010. 24 окт. (№ 5344 (265)).

122. Европейская конвенция по защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и других целей // Вопросы реконструктивной и пластической хирургии. 2003. № 4. С. 18-22.

123. Ефременко, E.H. Гетерогенные биокатализаторы на основе иммобилизованных клеток микроорганизмов: фундаментальные и прикладные аспекты: Автореф. дис. .докт. биол. наук. Москва, ИБХФ РАН, 2009. 51 с.

124. Ефременко E.H. Органофосфатгидролаза фермент, катализирующий деградацию фосфорсодержащих отравляющих веществ и пестицидов / E.H. Ефременко, С.Д. Варфоломеев // Известия АН. Серия «Химия». 2001. № 10. С. 1743-1749.

125. Ефременко, E.H. Способ ферментативного гидролиза боевых отравляющих веществ / E.H. Ефременко, Ю.А. Вотчицева, И.Н. Курочкин,

126. С.Д. Варфоломеев и др. // Патент РФ № 2296164. 27.03.2007.

127. Ефременко, E.H. Ферменты деструкции фосфорорганических нейротоксинов / E.H. Ефременко, С.Д. Варфоломеев // Успехи биол. химии. 2004. Т. 44. С. 307-340.

128. Жвирблис, В.Е. Большие эффекты малых доз / В.Е. Жвирблис // Экология и жизнь. 1999. №2. С. 1-4.

129. Жигачева, И.В. Влияние фосфорорганического регулятора роста растений на структурные характеристики мембран растительного и животного происхождения / И.В. Жигачева, Л.Д. Фаткуллина // Биологические мембраны. 2008. Т. 25. № 2. С. 128-134.

130. Забродский, П.Ф. Механизмы иммунотропных эффектов фосфорорганических соединений / П.Ф. Забродский // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1993. Т. 116. № 8. С. 181-183.

131. Забродский, П.Ф. Роль антихолинэстеразного механизма в супрессии антителообразования при острой интоксикации фосфорорганическими соединениями / П.Ф. Забродский, В.Ф. Киричук, В.Г. Гермачук // Фармакология и токсикология. 2001. Т. 131. № 5. С. 551-553.

132. Зайчик, А.Ш. Основы общей патологии. Часть 2. Основы патохимии / А.Ш. Зайчик, Л.П. Чурилов. СПб.: ЭЛБИ, 2001. 688 с.

133. Западнюк, И.П. Лабораторные животные. Разведение, содержание, использование в эксперименте / И.П. Западнюк, В.И. Западнюк, Е.А. Захария и др. Киев, 1983. 383 с.

134. Заугольников, С.Д. Материалы к токсикологии фосфорорганических соединений / С.Д. Заугольников // Химия и применение фосфорорганических соединений: Труды II Всесоюзной конф., Казань, 1959. М.: Изд-во АН СССР, 1962. С.480-484.

135. Зенков, H.K. Окислительный стресс. Биохимический и патофизиологический аспекты / Н.К. Зенков, В.З. Панкин, Е.Б. Меныцикова. М.: МАИК, Наука/Интерпериодика. 2001. 343 с.

136. Зилва, Дж.Ф. Клиническая химия в диагностике и лечении / Д.Ф. Зилва, П.Р. Пеннел. М.: Медицина, 1988. 528 с.

137. Иванова, Н.В. Оценка состояния эндогенной интоксикации у детей, проживающих в регионах экологического неблагополучия / Н.В. Иванова,

138. B.М. Аксенова // Материалы научной сессии Пермской гос. мед. академии. Пермь, 2000. С. 173-174.

139. Ивашкин В.Т. Лекарственно-индуцированное поражение печени: универсальные структурные маркеры / В.Т. Ивашкин, Г.И. Непомнящих,

140. C.B. Айдагулова и др. // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. 2009. N 2. С. 20-29.

141. Ившин, В.П. Диоксины и диоксиноподобные соединения: пути образования, свойства, способы деструкции: монография / В.П. Ившин, Р.В. Полушин. Йошкар-Ола, 2005. 320 с.

142. Итоги работы объекта по уничтожению химического оружия «Щучье» // Открытый электронный журнал «Химическое разоружение» // http://chemdisarm.ru/articles/4348. 15.02.2011.

143. Российская газета" Федеральный выпуск №5498 (122) http://www.rg.ru/201 l/06/08/himrazoruzhenie.html. 25.11.2011.

144. Кабачник, М.И. Влияние фосфорорганических веществ на передачу нервно-мышечного возбуждения / М.И. Кабачник // Вестник АН СССР.1968. № 5. С. 86-94.

145. Кабачник, М.И. Фосфорорганические комплексоны / Кабачник М.И., Медведь Т.Я., Дятлова Н.М. и др. // Успехи химии. 1974. Т. 43. № 9. С. 1554-1574.

146. Каган, Ю.С. О ранних проявлениях и механизме нейротоксического действия фосфорорганических пестицидов /Ю.С. Каган, Н.В. Кошкарева, И.И. Ткаченко // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1986. №9. С. 310-312.

147. Каган, Ю.С. Роль монооксидазной системы в метаболизме и механизме действия некоторых пестицидов / Ю.С. Каган, Е.А. Ершова, О.Б. Леоненко и др. // Вестник АМН СССР. 1988. № 1. С. 70-76.

148. Каган, Ю.С. Токсикология фосфорорганических пестицидов / Ю.С. Каган. М.: Медицина, 1977. 293 с.

149. Казимирко, В.К. Антиоксидантная система и ее функционирование в организме человека / В.К. Казимирко, В.И. Мальцев // Медицинская газета «Здоровье Украины». 2004. № 98.

150. Камилов, Р.Ф. Свободно-радикальное окисление и антиоксидантная защита при воздействии органических растворителей в производстве / Р.Ф. Камилов, Т.В. Ханов, В.П. Кудрявцев и др. // Клиническая лабораторная диагностика. 2009. № 1. С. 9-13.

151. Камышников, B.C. Справочник по клинико-биохимическим исследованиям и лабораторной диагностике / B.C. Камышников. М.: МЕДпресс-информ, 2004. 920 с.

152. Капашин, В.П. Химическое разоружение. Технологии уничтожения отравляющих веществ: монография / В.П. Капашин, В.П. Севостьянов, Н.П. Шебанов и др. Саратов: Изд-во ГосУНЦ «Колледж», 2000. 143 с.

153. Карговский, A.B. Водные кластеры: структуры и оптические колебательные спектры / A.B. Карговский // Известия вузов. Прикладная нелинейная динамика. 2006. Т. 14. № 5. С. 122-131.

154. Карговский, A.B. Структуры и оптические спектры водных кластеров:

155. Автореф. дис. . канд. физ.-мат. наук. 2006. Москва. 19 с.

156. Каркищенко, H.H. Основы биомоделирования / H.H. Каркищенко. М.: Изд-во ВПК, 2005. 608 с.

157. Карякина, Е.В. Молекулы средней массы как интегральный показатель метаболических нарушений (обзор литературы) / Е.В. Карякина, C.B. Белова // Клиническая лабораторная диагностика. 2004. № 3. С. 4-8.

158. Каспаров, A.A. Токсикометрия химических веществ, загрязняющих окружающую среду / A.A. Каспаров, И.В. Саноцкий. М.: 1986. С. 10.

159. Кения, М.В. Роль низкомолекулярных антиоксидантов при окислительном стрессе / М.В. Кения, А.И. Лукши, Е.П. Гуськов // Успехи современной биологии. 1993. Т. 113. № 4. С. 456-469.

160. Кибри, А. Органическая химия фосфора / А. Кибри, С. Уоррен. М.: Мир, 1971.403 с.

161. Кислый, Н.Д. Динамика факторов неспецифической резистентности у больных хроническим алкоголизмом / Н.Д. Кислый, Т.С. Самгина, H.H. Макаров // Вестник РУДН. Серия «Терапия». 1999. № 1. С. 52-54.

162. Клебанов, Г.И. Антиоксидантная активность сыворотки крови / Г.И. Клебанов, Ю.О. Теселкин, И.В. Бабенкова и др. // Вестник Российской академии медицинских наук. 1999. № 2. С. 15-22.

163. Клещенко, Е. Снова о сверхмалых дозах / Е. Клещенко // Химия и жизнь, 2000, № 11/12, с. 31-33.

164. Клиническая биохимия / Под ред. В.А. Ткачука. М.: ГЭОТАР-Мед, 2004. 512 с.

165. Климов, А.Н. Обмен липидов и липопротеидов и его нарушения / А.Н. Климов, Н.Г. Никульчева. СПб.: Питер, 1999. 512 с.

166. Ковалевский, А.Н. Замечания по скрининговому методу определения молекул средней массы / А.Н. Ковалевский, O.E. Нифантьев // Лабораторное дело. 1989. № 10. С. 35-39.

167. Ковальчук, А.П. Состав для ингибирования солеотложений и коррозии / А.П. Ковальчук, H.A. Иванова // Патент РФ 2115631. 20.07.1998.

168. Кожевников, Ю.Н. Нарушение гомеостаза организма при перекисном окислении / Ю.Н. Кожевников // Вопросы медицинской химии. 1990. Т. 31. №5. С. 179-186.

169. Козлова, Н.М. Окисление мембранных белков и изменение поверхностных свойств эритроцитов / Н.М. Козлова, Е.И. Слобожанина, Е.А. Черницкий // Биофизика. 1998. Т. 43. № 3. С. 480-483.

170. Конвенция о запрещении разработки, производства, накопления и применения химического оружия и о его уничтожении. GE. 92-61926, Париж, 1993. 133 с.

171. Кононова С.В. Обнаружение С-Р-лиазной активности в бесклеточном экстракте бактерий Escherichia coli / С.В. Кононова, С.М. Трутко, К.С. Лауринавичюс // Прикладная биохимия и микробиология. 2007. Т. 43. № 4. С. 437-442.

172. Кононова С.В. Фосфонаты и их деградация микроорганизмами / С.В. Кононова, М.А. Несмеянова // Биохимия. 2002. Т. 67, № 2, С. 220-233.

173. Копытова, Т.В. Значение перекисного окисления липидов в биологических субстратах для оценки обменных процессов при псореазе / Т.В. Копытова, Е.П. Абалихина, Н.А. Щелчкова // Клиническая лабораторная диагностика. 2007. № 11. С. 20-23.

174. Копытова, Т.В. Лабораторная диагностика эндоинтоксикации при хронических дерматозах / Т.В. Копытова, Н.А. Добротина, Л.Н. Химкина и др. // Клиническая лабораторная диагностика. 2000. № 1. С. 14-16.

175. Копытова, Т.В. Окислительная модификация белков и олигопептидов у больных хроническими дерматозами и синдроном эндогенной интоксикации / Т.В Копытова, О.Н. Дмитриева, Л.Н. Химкина и др. // Фундаментальные исследования. 2009. № 6. С. 25-29.

176. Коржеев, А.А. О механизме повреждающего действия гипоксии на дыхательную цепь и способы ее фармакологической коррекции / А.А. Коржеев, И.А. Комисарова // Экспериментальная и клиническая фармакология. 1994. Т. 57. № 1. С. 45-47.

177. Королюк, M.А. Метод определения активности каталазы / М.А. Королюк, Л.И. Иванова, И.Г. Майорова// Лабораторное дело. 1988. № 1. С. 16-19.

178. Корякина, Е.В. Молекулы средней массы как интегральный показатель метаболических нарушений (обзор литературы) / Е.В. Корякина, C.B. Белова // Клиническая лабораторная диагностика. 2004. № 2. С. 3-8.

179. Котык, А. Мембранный транспорт / А. Котык, К. Яначек. М.: Мир, 1980. 341 с.

180. Кравцов, И.С. Выделение из окружающей среды микроорганизмов, способных разлагать фосфонаты / И.С. Кравцов, С.Н. Янов, И.В. Дармов // Журнал химической и биологической безопасности. 2006. № 6 (30). С. 3-9.

181. Кувардин, Н.В. Действие сапонинов в сверхмалых дозах на некоторые физико-химические свойства их растворителя и на физико-химическое состояние мембран эритроцитов: Автореф. дис. . канд. хим. наук. Курск, 2007.

182. Куликов, В.Д. Определение антиокислительной активности сыворотки крови / В.Д. Куликов, Л.В. Молчанова // Лабораторное дело. 1980. № 7. С. 419-421.

183. Кулинский, В.И. Активные формы кислорода и окислительная модификация макромолекул / В.И. Кулинский //Соросовский образовательный журнал. 1999. №1. С. 2-7.

184. Кулинский, В.И. Обезвреживание ксенобиотиков / В.И. Кулинский // Соросовский образовательный журнал, 1999, №1, с. 8-12.

185. Курляндский, Б.А. О некоторых закономерностях развития хронических интоксикаций промышленными органическими веществами (к проблеме токсических воздействий малой интенсивности): Дис. . д-ра мед. наук. М., 1970.

186. Курочкин, В.К. Классификация информации по химическим веществам и военной токсикологии в контексте проблем химического разоружения / В.К. Курочкин, H.A. Лошадкин, А.Г. Попов и др. // Токсикологический вестник. 1994. № 3. С. 19-23.

187. Курцева, A.A. Репаративная и иммунотропная активность глицил-гистидил-лизина в условиях кожных ран / A.A. Курцева, М.Ю. Смахтин,

188. A.B. Иванов и др. // Курский научно-практический вестник «Человек и его здоровье». 2008. № 1. С. 36-40.

189. Кухарь, В.П. Фосфорные аналоги аминокарбоновых кислот / В.П. Кухарь,

190. B.А. Солоденко // Успехи химии. 1987. Т. 56. № 9. С. 1504-1532.

191. Куценко, С.А. Военная токсикология, радиобиология и медицинская защита / С.А. Куценко. СПб.: Изд-во ФОЛИАНТ, 2004. 628 с.

192. Куценко, С.А. Основы токсикологии / С.А. Куценко. СПб.: Изд-во «Фолиант», 2004. 720 с.

193. Кшикун, A.A. Клиническая оценка результатов лабораторных исследований / A.A. Кшикун. М.: Медицина, 2002. 544 с.

194. Лабораторная диагностика нарушений обмена белков / Под ред. В.В. Долгова, О.П. Шевченко. М.: РМАПО, 1997. 67 с.

195. Лабораторные методы исследования в клинике: Справочник / ред. В.В. Меньшикова. М.: Медицина, 1987. 368 с.

196. Ланкин, В.З. Оксидативный стресс / В.З. Ланкин // Здоровье. Медицинская экология. Наука. 2005. Т. 21. № 1. С. 48-51.

197. Ланкин, В.З. Свободнорадикальные процессы в норме и при патологических состояниях: пособие для врачей / В.З. Ланкин, А.К. Тихазе, Ю.Н. Беленков. М.: Медицина, 2001. 78 с.

198. Лебедева, Н.Е. Эффекты фентанила в сверхмалых дозах / Н.Е. Лебедева, Т.В. Головкина, E.H. Горбатова и др. // Химическая и биологическая безопасность. М.: ВИНИТИ. 2003. № 9-10. С. 7-8.

199. Лебкова, Н.П. Современные представления о внутриклеточных механизмах обеспечения энергетического гомеостаза в норме и патологии / Н.П. Лебкова // Вестник РАМН. 2000. № 9. С. 16-22.

200. Левин, Я. А. Гомолитическая химия фосфора / Я. А. Левин, Е.И. Воркунова. М.: Наука, 1978. 320с.

201. Левицкий, Е.Л. Свободнорадикальные повреждения ядерногогенетического аппарата клетки / E.JI. Левицкий, Ю.И. Губский // Украинский биохимический журнал. 1994. Т. 66. № 4. С. 18-30.

202. Лелекова, Т.В. Действие сверхмалых доз тиролиберина на микровязкость липидного компонента биологических мембран / Т.В. Лелекова,

203. H.Г. Богданова, Н.П. Пальмина // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2000. № 1. С. 38-40.

204. Ленинджер, А. Основы биохимии: в 3 т. / А. Ленинджер. М.: Мир, 1985. Т.1367 с. Т. 2. 368 с. Т. 3.320 с.

205. Леонтьев, Д.С. Половые особенности митохондриального метаболизма в условиях покоя и острого стресса: Дис. . канд. биол. наук. 2005. Саратов. 129 с.

206. Литвицкий, П.Ф. Патофизиология: в 2 т. / П.Ф. Литвицкий. М.: ГЭОТАР-МЕД, 2003. Т.1. 752 с. Т.2. 808 с.

207. Лошадкин, H.A. Классификация токсичных веществ, вызывающих различные типы гипоксий на начальных стадиях интоксикации / H.A. Лошадкин, С.С. Абнизов // Токсикологический вестник. 1995. № 3. С. 25-27.

208. Лужников, Е.А. Клиническая токсикология / Е.А. Лужников. М.: Медицина, 1982. 368 с.

209. Луйк, А.И. Сывороточный альбумин и биотранспорт ядов / А.И. Луйк,

210. B.Д. Лукьянчук. М.: Медицина, 1984. 224 с.

211. Лукьянова, Л. Д. Новые подходы к созданию антигипоксантов метаболического действия / Л.Д. Лукьянова // Вестник РАМН. 1999. № 3.1. C. 18-25.

212. Лысенко, A.B. Возрастные особенности влияния пептидов на адаптацию организма к экстремальным воздействиям: дис. . докт. биол. наук, СПб,2006. 244 с.

213. Майер, К.П. Гепатит и последствия гепатита / К.П. Майер. М.: ГЭОТАР Медицина, 1999. 432 с.

214. Малахова, М.Я. Методы биохимической регистрации эндогенной интоксикации / М.Я. Малахова // Эфферентная терапия. 1995. Т. 1. № 2. С. 61-64.

215. Малахова, М.Я. Определение фракции молекул средней массы в сыворотке крови осаждением белков ТХУ и ультрафильтрацией / М.Я. Малахова, A.B. Соломенников, H.A. Беляков и др. // Лабораторное дело. 1987. № 3. С. 224-227.

216. Малахова, М.Я. Оценка эндогенной интоксикации у населения, проживающего в различных экологических условиях севера и северо-запада России / М.Я. Малахова, О.В. Зубаткина, С.Л. Совершаева // Эфферентная терапия. 1998. Т. 4. № 2. С. 50-55.

217. Малахова, М.Я. Формирование биохимического понятия «субстрат эндогенной интоксикации» / М.Я. Малахова // Эндогенные интоксикации: Тезисы международного симпозиума. СПб., 1994. С. 38.

218. Малахова, М.Я. Эндогенная интоксикация как отражение компенсаторной перестройки обменных процессов в организме / М.Я. Малахова // Эфферентная терапия. 2000. Т. 6. № 4. С. 3-14.

219. Мальцева, Е.Л. Различия в действии большой и сверхмалой доз а-токоферола на протеинкиназу С по кинетическим параметрам субстратной зависимости / Е.Л. Мальцева, Е.Б. // Биологические мембраны. 1992. № 10-11. С. 1028-1030.

220. Мари, Р. Биохимия человека: в 2 т. / Р. Мари, Д. Греннер, П. Мейес,

221. B. Родуэл. М.: Мир, 2004. Т. 1. 381 с. Т.2. 414 с.

222. Маршалл, В.Дж. Клиническая биохимия / В.Дж. Маршалл. М.-СПб.: Бином-Невский диалект, 2000. 386 с.

223. Матвеев, С.Б. Интегральная оценка эндогенной интоксикации у больных гнойным медиастинитом / С.Б. Матвеев, И.В. Александрова, С.И. Рей и др. // Клиническая лабораторная диагностика. 2008. № 8. С. 12-13.

224. Матвеев, С.Б. Критерии оценки эндогенной интоксикации при ожоговой травме / С.Б. Матвеев, Т.Г. Спиридонова, Е.В. Клычникова Е.В. и др. // Клиническая лабораторная диагностика. 2003. № 10. С. 3-6.

225. Матвеев, С.Б. Показатели эндогенной интоксикации в оценке риска развития пневмоний при острых отравлениях азалептином /

226. C.Б. Матвеев, К.К. Ильяшенко, Т.В. Ермохина и др. // Клиническая лабораторная диагностика. 2007. № 6. С. 28-30.

227. Матыс, С.В. Деградация метилфосфоната Е. coli: физиологические и биохимические аспекты: Дис. . канд. наук. Пущино, 2003. 104 с.

228. Матыс, С.В. Катаболизм метилфосфоновой кислоты и его физиологическая регуляция у Escherichia coli / С.В. Матыс, К.С. Лауринавичюс, М.А. Несмеянова // Микробиология. 1996. Т. 65. № 4. С. 481-487.

229. Махаева, Г.Ф. Исследование связи структура-антихолинэстеразная активность в ряду О-фосфорилированных оксимов. II. Диалкилфосфаты и метилфосфонаты / Г.Ф. Махаева, В.В. Малыгин, Ш.М. Якубов и др. // Химико-фармацевтический журнал. 1994. Т. 28. С. 14-18.

230. Машин, В.А. Методические вопросы использования факторного анализа на примере спектральных показателей сердечного ритма / В.А. Машин // Экспериментальная психология. 2010. № 4. С. 119-138.

231. Медицинская биохимия: лабораторный практикум / Под ред. Н. А. Семиколеновой. Омск: Изд-во ОмГУ, 2005. 76 с.

232. Меерсон, Ф.З. Генерализованное накопление стресс-белков при адаптации организма к стрессорным воздействиям / Ф.З. Меерсон, И.Ю. Малышев,

233. A.B. Замотринский // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1993. Т. 116. № 10. С. 231-233.

234. Мельников, H.H. Пестициды и регуляторы роста растений / H.H. Мельников. М.: Химия, 1995. 576 с.

235. Меныцикова, Е.Б. Антиоксиданты и ингибиторы радикальных окислительных процессов / Е.Б. Меныцикова, Н.К. Зенков // Успехи современной биологии. 1993. № 4. С. 442-455.

236. Меныцикова, Е.Б. Биохимия окислительного стресса. Оксиданты и антиоксиданты / Е.Б. Меныцикова, Н.К. Зенков, С.М. Шергин. Новосибирск, 1994. 203 с.

237. Меныцикова, Е.Б. Окислительный стресс. Прооксиданты и антиоксиданты / Е.Б. Меньшикова, В.З. Ланкин, Н.К. Зенков и др. М.: Слово, 2006. 553 с.

238. Метаболические аспекты действия на организм индустриальных химических соединений // Сборник научных трудов Красноярского мед. ин-та. Красноярск, 1988. С. 86-91.

239. Методика выполнения измерений биохимических показателей в плазме (сыворотке) крови мелких теплокровных животных фотометрическим методом; свидетельство об аттестации МВИ № 22.11.03.052/2009.

240. Методика определения гематологических показателей в крови теплокровных животных микроскопическим методом»; свидетельство об аттестации МВИ № 224.11.17.025/2010

241. Методы ветеринарной клинической лабораторной диагностики / Под ред. И.П. Кондрахина. М.: КолосС, 2004. 520 с.

242. Методы определения токсичности и опасности химических веществ (токсикометрия) / Под ред. И.В. Саноцкого. М.: Медицина, 1970. 334 с.

243. Мецлер, Д. Биохимия: в 3-х т. / Д. Мецлер. М.: Мир, 1980. Т.1. 407 с. Т.2. 606 с. Т.З. 488 с.

244. Мещишен, И.Ф. Окислительная модификация белков как один из патогенетических механизмов развития вирусных гепатитов /

245. И.Ф. Мещишен, О.В. Мироник, A.M. Сокол // Вестник научных достижений. Украина. 1999. № 1. С. 89-91.

246. Милаева, Е.Р. Молекулярные механизмы действия ртутьорганических соединений на электрон-транспортную цепь митохондрий / Е.Р. Милаева,

247. B.Ю. Тюрин, Е.В. Харитонашвили и др. / Материалы XVI Менделеевского съезда по общей и прикладной химии. СПб. 1998. С. 102.

248. Миллер, Ю.И. Связывание ксенобиотиков альбумином сыворотки крови / Ю.И. Миллер // Клиническая лабораторная диагностика. 1993. № 1.1. C. 34-40.

249. Мироник, О.В. Сравнение интенсивности окислительной модификации белков у больных острыми гепатитами В и С / О.В. Мироник // Буковинський медицинский вестник. 2001. № 2. С. 118-120.

250. Михайлов, В.В. Основы патологической физиологии: руководство для врачей / В.В. Михайлов. М.: Медицина, 2001. 704 с.

251. Михайлов, С.С. Метаболизм фосфорорганических ядов / С.С. Михайлов, И.Г. Щербак. М.: Медицина, 1983. 112 с.

252. Молочкина, Е.М. Biochemical Changes in Mice Brain Synaptosomes after Low-Dose Whole-Body g-Irradiation of Various Intensities / Е.М. Молочкина, O.M. Джаман, И.Б. Озерова // Радиационная биология. Радиоэкология. 1995. Т. 35. Вып. 6. С. 860-868.

253. Моралев, С.Н. Активный Центр холинэстераз. Статистический анализ вариабельности структуры / С.Н. Моралев // Журнал эволюционнойбиохимической физиологии. 2001. № 1. С. 21-27.

254. Моралев, С.Н. Ацильный карман активного центра холинэстераз и диалкилфосфаты. Исследование: взаимодействия статистическими методами / С.Н. Моралев // Журнал эволюционной биохимической физиологии. 2001. Т. 37. № 2. С. 92-100.

255. Моралев, С.Н. Современные представления о структуре и каталитических свойствах холинэстераз позвоночных и беспозвоночных / С.Н. Моралев, Е.В. Розенгарт // Журнал эволюционной биохимической физиологии. 1999. Т. 35. № 3. С. 3-15.

256. Моралев, С.Н. Сравнительное исследование структуры и функционирования активного центра холинэстераз позвоночных и беспозвоночных: Автореф. дис. . док. биол. наук. СПб, 2004. 39 с.

257. Мусийчук, Ю.И. Медико-гигиенические аспекты уничтожения фосфорорганических отравляющих веществ / Ю.И. Мусийчук. М.-СПб, 1998. 62 с.

258. Назаренко, Г.И. Клиническая оценка результатов лабораторных исследований / Г.И. Назаренко, A.A. Кишкун. М.: Медицина, 2006. 544 с.

259. Николаев, A.A. Средние молекулы и их фракции при астраханской риккетсиозной лихорадке / A.A. Николаев, Д.В. Поршнев, А.П. Меснянкин и др. // Клиническая лабораторная диагностика. 1999. №6. С. 41-42.

260. Николайчик, В.В. Способ определения «средних молекул» /

261. B.В. Николайчик, В.М. Моин, В.В. Кирковский и др. // Лабораторное дело. 1991. № 10. С. 13-17.

262. Нифантьев, Э.Е. Фосфорорганические соединения / Э.Е. Нифантьев // Соросовский образовательный журнал. 1996. № 7. С. 39-46.

263. Нифантьев, Э.Е. Химия гидрофосфорильных соединений / Э.Е. Нифантьев. М.: Наука, 1983. 263 с.

264. Нифантьев, Э.Е. Химия фосфорорганических соединений / Э.Е. Нифантьев. М.: Изд-во Московского ун-та, 1971. 352 с.

265. Новожилова, Т.Н. Действие некоторых цитотоксинов в сверхмалых концентрациях на клеточное звено иммунитета / Т.И. Новожилова,

266. C.И. Малекин, В.К. Курочкин и др. // Российский химический журнал. 1999. Т. XLIII. № 5. С. 96-99.

267. Общая токсикология / Под ред. Б.А. Курляндского, В.А. Филова. М.: Медицина, 2002. 608 с.

268. Одинцов, B.C. Биохимические основы применения фосфорорганических инсектицидов / B.C. Одинцов. Киев: Наукова думка. 1972. 175 с.

269. Огородникова, С.Ю. Реакции растений на действие метилфосфоновой кислоты / С.Ю. Огородникова, Т.К. Головко, Т.Я. Ашихмина // Теоретическая и прикладная экология. 2007. № 1. С. 78-93.

270. Огородникова, С.Ю. Реакции растений на фосфорорганический ксенобиотик метилфосфоновую кислоту / С.Ю. Огородникова, Т.К. Головко, Т.Я. Ашихмина // Научные доклады. Сыктывкар: Коми НЦ УрО РАН. 2004. Вып. 464. 24 с.

271. Олдридж, В. Механизм взаимодействия фосфорорганических соединений и карбаматов с эстеразами / В. Олдридж // Бюллетень ВОЗ. 1972. Т. 44. № 1/3. Ч. 1.С. 27-33.

272. Оразаев, Н.Г. Методы оценки эндогенной интоксикации при гриппе / Н.Г. Оразаев. Нальчик, Изд-во Кабардино-Балкарского гос. ун-та, 2007. 98 с.

273. Осипова, В.П. Ингибирующее действие ртутьорганических соединений на процессы клеточного и митохондриального дыхания / В.П. Осипова, Ю.Т. Пименов, Н.Т. Берберова и др. // Токсикологический вестник. 1999. № 1. С. 21-26.

274. Осипович, В.К. Сравнительная оценка экспресс методов определения средних молекул / В.К. Осипович, З.А. Туликова, И.М. Маркелов // Лабораторное дело. 1987. № 3. С. 221-224.

275. Остерман, Л. А. Методы исследования белков и нуклеиновых кислот: электрофорез и ультрацентрифугирование / Л.А. Остерман. М.: Наука, 1981. 288 с.

276. Панасенко, О.М., Сергиенко В.И. Гипохлорит, окислительная модификация липопротеинов крови и атеросклероз / О.М. Панасенко, В.И. Сергиенко // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2001. Т. 131. №5. С. 484-493.

277. Панин, Л.Е. Биохимические механизмы стресса / Л.Е. Панин. Новосибирск: Наука, 1983. 232 с.

278. Панин Л.Е. Энергетические аспекты адаптации / Л.Е. Панин. Л: Медицина, 1978. 192 с.

279. Парфенкова, Г.А. Средние молекулы маркер эндогенной интоксикации / Г.А. Парфенкова, И.Ф. Чернядьева, В.К. Ситина // Врачебное дело. 1987.4. С. 72-77.

280. Пасечник, И.Н. Окислительный стресс как компонент формирования критических состояний у хирургических больных: Автореф. дис. . докт. мед. наук. М., 2004. 46 с.

281. Патологическая физиология / Под ред. А.Д. Адо, М.А. Адо, В.И. Пыцкого и др. М.: Триада-Х, 2000. 574 с.

282. Пеньковский, В.В. Свободные радикалы соединений фосфора /

283. B.В. Пеньковский // Успехи химии. 1975. Т. 44. № 6. С. 969-1002.

284. Перцев, С.С. ПОЛ в головном мозге и печени крыс при острой стрессорной нагрузке и введении мелатонина / С.С. Перцев, Г.В. Пирогова // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2004. Т. 138. № 7.1. C. 19-23.

285. Перцева, М.Н. Молекулярные основы развития гормонокомпетентности / М.Н. Перцева. Л. Наука. 1989. 251 с.

286. Петров, К.А. Аминоалкильные фосфорорганические соединения / К.А. Петров, В.Л. Чаузов, Т.С. Ерохина // Успехи химии. 1974. Т. 43. № 11. С. 2045-2087.

287. Петров, К.А. Свойства ангидридов фосфиновых кислот. I. Моноалкил(арил)фосфонаты / К.А. Петров, P.A. Баскова, Л.В. Хорхояну и др. // Журнал общей химии. 1963. Т. 35. № 4. С. 723-728.

288. Пищухина, A.M. Острофазовые белки сыворотки и хламидийная инфекция при остром коронарном синдроме: Дис. . канд. мед. наук. Астрахань, 2007. 125 с.

289. Плеснева С.А. Аденилатциклазный сигнальный механизм действия пептидов инсулинового суперсемейства у позвоночных и беспозвоночных: Автореф. дис. . докт. биол. наук. СПб., 2007. 39 с.

290. Плотникова, О.М. Биологическая активность алкилфосфонатов: влияние метилфосфоновой кислоты на гомеостаз, методы исследования / О.М. Плотникова, С.Н. Лунева, А.М. Корепин и др. // Курган: Курганский гос. ун-т, 2011. 120 с.

291. Повещенко, А.Ф. Цитокины факторы нейроэндокринной регуляции / А.Ф. Повещенко, В.В. Абрамов, В.В. Козлов // Успехи физиологических наук. 2007. Т. 38. № 3. С. 40-46.

292. Подколзин, A.A. Система антиоксидантной защиты организма и старение / A.A. Подколзин и др. // Профилактика старения. 2000. №3. С. 46-52.

293. Покровский, В.М. Физиология человека / В.М. Покровский, Г.Ф. Коротько. М.: Медицина, 2007. 656 с.

294. Поляк, М.С. Антибиотики группы фосфоновой кислоты / М.С. Поляк // Антибиотики. 1987. Т. 32. № 1. С. 66-75.

295. Правила лабораторной практики в Российской Федерации: приложение к приказу МЗ РФ № 267 от 19.06.2003. Правила проведения работ с использованием экспериментальных животных: приложение к приказу МЗ СССР № 755 от 12.03.1977.

296. Правдин, Н.С. Методика малой токсикологии промышленных ядов / Н.С. Правдин. М.: Медгиз, 1947. 219 с.

297. Практикум по биохимии / Под ред. С.Е. Северина, Г.А. Соловьевой. М.: Изд-воМГУ, 1989. 509 с.

298. Прозоровский, В.Б. Неантихолинэстеразные механизмы действия антихолинэстеразных веществ / В.Б. Прозоровский, Н.В. Саватеев. М.: Медицина, 1976. 160 с.

299. Прозоровский, В.Б. Некоторые теоретические и клинические проблемы токсикологии фосфорорганических инсектицидов / В.Б. Прозоровский, Г.А. Ливанов // Токсикологический вестник. 1997. № 3. С. 2-10.

300. Пудовик, А.Н. Реакция Арбузова и ее развитие в работах Казанской школы химиков / А.Н. Пудовик, Т.Х. Газизов // Известия АН СССР. Серия

301. Химия». 1977. Вып. 9. С. 1945-1964.

302. Пудовик, А.Н. Фосфорорганические соединения с активной метиленовой группой / А.Н. Пудовик, Г.Е. Ястребов // Успехи химии. 1970. Т. 39. № 7. С. 1190-1219.

303. ЗП.Пурдела, Д. Химия органических соединений фосфора / Д. Пурдела, Р. Вылчану. М.: Химия, 1972. 752 с.

304. Расстегаев, О.Ю. Фосфорорганические отравляющие вещества. Свойства и методы определения / О.Ю. Расстегаев, В.Н. Чупис, В.И. Марьин и др. Саратов: Фиеста-2000, 2009. 219 с.

305. Рожинская, Л.Я. Постменопаузальный и сенильный остеопороз: современные возможности диагностики, профилактики и лечения // Consilium medicum. 2003. Т. 5. № 12. // http://www.consilium-medicum.com. 27.03.2010.

306. Розенгарт, В.И. Избирательная токсичность фосфорорганических инсектоакарицидов (сравнительно-биохимические аспекты) / В.И. Розенгарт, О.Е. Шерстобитов. Л.: Наука: Лен. отд., 1978. 176 с.

307. Розенгарт, В.И. Метаболизм фосфорорганических соединений в организме животных / В.И. Розенгарт // Химия и применение фосфорорганических соединений: Труды III Всесоюзной конф. М.: Наука, 1972. С. 89-97.

308. Розенгарт, В.И. Пути метаболических превращений фосфорорганических пестицидов / В.И. Розенгарт // Химия в сельском хозяйстве. 1978. Т. 16. № 1.С. 54-64.

309. Рослый, И.М. Биохимические показатели в оценке цитолических механизмов и метаболических процессов на примере инфекционного мононуклеоза / И.М. Рослый // Эпидемиология и инфекционные болезни.2005. №5. С.33-41.

310. Ротенберг, Ю.С. Ингибирование процессов дыхания и фосфорилирования производными малеимида / Ю.С. Ротенберг, Г.Я. Кельман // Биохимия. 1975. Т. 40. Вып. 3. С. 489-496.

311. Ротенберг, Ю.С. Классификация ксенобиотиков по локализации их действия на ферментные системы митохондрий / Ю.С. Ротенберг // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1982. № 9. С. 42-45.

312. Ротенберг, Ю.С. Особенности действия оловоалкилов на дыхание и окислительное фосфорилирование митохондрий печени крыс / Ю.С. Ротенберг, В.Т. Мазаев, Т.Г. Шлепинина // Украинский биохимический журнал. 1978. Т. 50. № 6. С. 695-700.

313. Ротенберг, Ю.С. Проблема влияния промышленных токсических веществ на биоэнергетические процессы организма в гигиене и токсикологии: Автореф. дис. . д-ра мед. наук. М., 1980. 35 с.

314. Руководство по клинической лабораторной диагностике / Под ред.

315. B.В. Менщикова. М.: Медицина, 1982. 576 с.

316. Руководство по токсикологии отравляющих веществ / Под ред.

317. C.Н. Голикова. М: Медицина, 1972. 470 с.

318. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / Под ред. Р.У. Хабриева. М.: Медицина, 2005. 832 с.

319. Рыболовлев, P.C. Роль эстератических участков холинорецепторов в блокирующем действии некоторых инсектицидов / P.C. Рыболовлев // Гигиена и токсикология пестицидов и клиника отравлений. Киев: Здоровья, 1965. С. 452-458.

320. Садыков, A.C. Холинэстеразы. Активный центр и механизм действия / A.C. Садыков, Е.В. Розенгарт, A.A. Абдувахабов и др. // Ташкент: ФАН. 1976. 206 с.

321. Санитарные правила по устройству, оборудованию и содержанию экспериментально-биологических клиник (вивариев): утв. 06.04.1973 № 1945-73.

322. Сборник методических документов по проблеме уничтожения химического оружия. Ч. 2. Фосфорорганические отравляющие вещества / Под ред. В.Д. Ревы. М.: Медбиоэкстрем, 2001. 279 с.

323. Селье, Г. Стресс без дистресса / Г. Селье. Рига: Виеда, 1992. 109 с.

324. Семенова, М.А. Роль половых гормонов в вегетативной регуляции сердечно-сосудистой системы у крыс в условиях покоя и стресса: Автореф. дис. канд. биол. наук. Саратов, 2005. 22 с.

325. Семина, И.И. Особенности антидепрессивного эффекта O-ß-хлорэтил-napa-N-диметиламинофенилфосфинилуксусной кислоты (Амфазида) / И.И. Семина, А.З. Байчурина, P.C. Гараев // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1996. Т. 121. № 5. С. 538-540.

326. Серебрякова, H.H. Влияние ксенобиотиков на физиологию и биохимию листостебельных мхов / H.H. Серебрякова // Вестник Оренбургского государственного университета. Оренбург, 2007. № 12. С. 71-75.

327. Середенин, С.Б. Фармакологическая защита генома / С.Б. Середенин,

328. A.Д. Дурнев. М.: ВИНИТИ, 1992. 161 с.

329. Сидорин, Г.И. Нитрилы: токсикокинетика, токсичность и опасность / Г.И. Сидорин, И.М. Суворов, J1.B. Луковникова и др. // Токсикологический вестник. 1996. № 1. С. 19-22.

330. Сидоров, П.И. Эндотоксикоз при острых алкогольных психозах / П.И. Сидоров, А.Г. Соловьев, E.H. Синицкая // Наркология. 2002. № 4. С. 16-21.

331. Смотряева, М.А. Structural and Biochemical Parameters of Mice after Low Dose g-Irradiation of Different Intensities / М.А. Смотряева, K.E. Круглякова, Л.Н. Шишкина и др. // Радиационная биология. Радиоэкология. 1996. Т. 36. Вып. 1. С. 21-29.

332. Современные методы в биохимии / Под ред. В.Н. Ореховича. М.: Мед, 1977. 392 с.

333. Соколовский, В.В. Тиоловые антиоксиданты в молекулярных механизмах неспецифической реакции организма на экстремальное воздействие /В.В. Соколовский // Вопросы медицинской химии. 1998. Т. 6, № 34. С. 2-11.

334. Сондерс, Б. Химия и токсикология органических соединений фосфора и фтора / Б. Сондерс. М.: Мир, 1961. 424 с.

335. Сорокин, В.А. Протеасомная система деградации и процессинга белков /

336. B.А. Сорокин, Е.Р. Ким, Л.П. Овчинников // Успехи биологической химии. 2009. Т. 49. С. 3-76.

337. Справочник по лабораторным методам исследования / Под ред. Л.А. Даниловой. СПб.: Питер, 2003. 733 с.

338. Степанова, С.И. Биоритмические аспекты проблемы адаптации /

339. C.И. Степенова. М.: Наука, 1986. 244 с.

340. Строев, Ю.И. Классические и современные представления о метаболическом синдроме. Ч. 1. Критерии, эпидимиология, этиология / Ю.И. Строев, Л.П. Цой, Л.П. Чурилов и др. // Вестник Санкт-Петербургского ун-та. 2007. Сер. 11. Вып. 1. С. 3-15.

341. Суворов, A.B. Справочник по клинической токсикологии / A.B. Суворов. Н.Новгород: Изд-во НГМА, 1996. 180 с.

342. Судаков, В.К. Новые акценты классической концепции стресса / В.К. Судаков // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1997. № 2. С. 124-130.

343. Сыромятникова, Е.Д. Показатели эндотоксикоза при отравлениях психотропными препаратами различной тяжести / Е.Д. Сыромятникова, Н.В. Федорова, К.К. Ильяшенко и др. // Клиническая лабораторная диагностика. 2004. № 9. С. 81.

344. Сятковский, В.А. Влияние молекул средней массы на механизм гемостаза / В.А. Сятковский, В.А. Змачинский, Л.П. Василенко и др. // Гематология и трансфузиология. 1989. Т. 34. № 6. С. 45-49.

345. Терехова, С.Ф. Регуляция функционального состояния нейрона сверхмалыми дозами различных биологически активных веществ. Неспецифический эффект / С.Ф. Терехова, Т.Н. Греченко // Радиационная биология. Радиоэкология. 2003. Т. 43. № 3. С. 315-319.

346. Титов, В.Н. Альбумин, транспорт насыщенных жирных кислот и метаболический стресс-синдорм / В.Н. Титов // Клиническая лабораторная диагностика. 1999. № 4. С. 3-11.

347. Титов, В.Н. С-реактивный белок: гетерогенность и функциональная связь с окислительным стрессом как с маркером воспаления / В.Н. Титов //

348. Клиническая лабораторная диагностика. 2004. № 7. С. 3-12.

349. Титов, В.Н. Экзогенные и эндогенные патологические факторы (патогены) как причина воспаления / В.Н. Титов // Клиническая лабораторная диагностика. 2004. № 5. С. 3-10.

350. Титов, В.Н. Электрофорез белков сыворотки крови / В.Н. Титов,

351. B.А. Амелюшкина. М.: Оптимум Пресс, 1994. 124 с.

352. Тодоров, И.Н. Митохондрии: окислительный стресс и мутации митохондриальной ДНК в развитии патологий, процессе старения и апоптозе / И.Н. Тодоров // Российский химический журнал. 2007. №1.1. C. 97-103.

353. Токсикологическая химия. Метаболизм и анализ токсикантов / Под ред. Н.И. Калетиной. М.: ГЭОТАР-Медиа, 2008. 1008 с.

354. Точилкина, Л.П. Феномен сверхмалых доз, гомеопатия и ФОВ / Л.П. Точилкина // Химическая и биологическая безопасность. М.: ВИНИТИ, 2007. № 1 (31). С. 4-14.

355. Требования Международного комитета по науке по использованию в экспериментальных исследованиях лабораторных животных // Бюллетень ИКЛАС. 1978. № 24. С. 4-5.

356. Уайт, А. Основы биохимии: в 3 т. / А. Уайт, Ф. Хендлер, Э.Смит и др. М.: Мир, 1981. Т. 1. 534 с. Т.2. 617 с. Т.З. 320 с.

357. Ушкалова, Е.А. Лекарственные поражения печени / Е.А. Ушкалова // Врач. 2007. № 3. С. 22-26.

358. Фалл ер, Д.М. Молекулярная биология клетки: руководство для врачей / Д.М. Фаллер, Д. Шилдс. М.: БИНОМ, 2006. 256 с.

359. Федеральный закон «Об уничтожении химического оружия» №76-ФЗ от 02.05.1997 г. (ред. от 18.12.2006 г. №232).

360. Федеральные и региональные проблемы уничтожения химического оружия / Под ред. Ю.М. Арского. М.: ВИНИТИ, 1999. Вып. № 1; 2000. Вып. .№ 2.

361. Федеральная целевая программа «Уничтожение запасов химическогооружия в Российской Федерации». Постановление Правительства РФ № 305 от 21.03.1996 г., и № 510 от 05.07.2001 г.

362. Федоров, JI.A. Химическое оружие в России: история, экология, политика / JI.A. Федоров. М.: Центр экологической политики России, 1994. 220 с.

363. Филиппович, Ю.Б. Практикум по общей биохимии / Ю.Б. Филиппович, Т.А. Егорова, Г.А. Севастьянова. М.: Просвещение, 1982. 311 с.

364. Формазюк, В.Е. Влияние перекисного окисления липидов на структуру сывороточных липопротеидов / В.Е. Формазюк, Ю.Г. Осис, А.И. Деев и др. //Биохимия. 1983. Т. 48. № 2. С. 331-338.

365. Франке, 3. Химия отравляющих веществ / 3. Франке. М.: Мир, 1973. Т. 2. 406 с.

366. Франков, И.А. Зависимость токсичности и антихолинэстеразных свойств от химического строения в ряду алкиламидов диалкилфосфорных кислот / И.А. Франков // Химия и применение фосфорорганических соединений. М.: Изд. АН СССР, 1957. С. 366-371.

367. Фролова, А.Д. Изучение процессов биологического окисления in vitro для ускорения прогнозирования метаболической активности промышленных ядов / А.Д. Фролова, JI.B. Луковникова // Токсикологический вестник. 1994. № 4. С. 20-24.

368. Фукуто, Т. Зависимость между строением фосфорорганических соединений и их ингибиторной активностью в отношении ацетилхолинэстераз/ Т. Фукуто // Бюллетень ВОЗ. 1972. Т. 44. № 1-3. Ч. 1. С. 33-44.

369. Хадсон, Р. Структура и механизм реакций фосфоросоединений / Р. Хадсон. М.: Мир, 1967. 360 с.

370. Хамитова, Р.Я. Современное состояние вопроса о влиянии пестицидов на здоровье людей / Р.Я. Хамитова, P.M. Шигапов // Казанский медицинский журнал. 1999. № 1. С. 67-69.

371. Харман, Г. Современный факторный анализ / Г. Харман. М.: Статистика. 1972. 487 с.

372. Харченко, А.Т. Штамм Pseudomonas species 78 Г, предназначенный для деградации продуктов деструкции фосфорорганических отравляющих веществ / Харечко А.Т., Мягких В.И., Колесников И.О. и др. // Патент 2154103 RU. 10.08.2000.

373. Химическое оружие. Экологические проблемы уничтожения / Под ред. Ю.М. Арского. М.: ВИНИТИ, 1997, 1998.

374. Химия и применение фосфорорганических соединений: Труды Н-ой Всесоюзной конф., Казань, 1959. М.: Изд-во АН СССР, 1962. 631 с.

375. Химия и применение фосфорорганических соединений: Труды III, IV Всесоюзной конф. М.: Наука, 1972. 511 е., 415 с.

376. Хочачка, П. Биохимическая адаптация / П. Хочачка, Д. Самеро. М.: Мир. 1988. 568 с.

377. Цимоха, A.C. Протеасомы: участие в клеточных процессах / A.C. Цимоха // Цитилогия. 2010. Т. 52. № 4. С. 277-300.

378. Черепнев, Г.В. Оценка мутагенного действия глицифона / Г.В. Черепнев, И.В. Шалашова, A.A. Муслинкин и др. // Ученые записки Казанского университета. Серия: Естественные науки. 2008. № 2. 251-257.

379. Чернышов, В.А. Патофизиология / В.А. Чернышов, Б.Г. Юшков. М: Вече, 2001. 703 с.

380. Чистяков, Б.Е. Фосфорсодержащие поверхностно-активные вещества: Тематический обзор / Б.Е. Чистяков, И.Т. Полковниченко, П.Е. Чапланов и др. М.: ЦНИИТЭИ ИНП, 1979. 54 с.

381. Чмырь, И.М. Гербициды на основе производных фосфоновых, фосфиновых и фосфористых кислот / И.М. Чмырь, Е.В. Туманова, Г. Джилкибаева. М., 1987. 45 с.

382. Шанин, В.Ю. Клиническая патофизиология / В.Ю. Шанин. СПб.: Специальная литература, 1998. 569 с.

383. Шевченко, О.П. Белки острой фазы воспаления / О.П. Шевченко // Лаборатория. 1996. № 1. С. 3-6.

384. Шерлок, Ш. Заболевания печени и желчных путей / Ш. Шерлок. М.: ГЭОТАР Медицина, 1999. 864 с.

385. Шестакова, H.H. Зависимость антиацетилхолинэстеразной эффективности фосфорорганических ингибиторов от доступности атома фосфора / H.H. Шестакова, Е.В. Розенгарт, B.C. Жоров // Биоорганическая химия. 1992. Т. 18. №4. С. 596-603.

386. Шестакова, H.H. Конформационо-функциональные отношения холиновых эфиров карбоновых кислот как субстратов ацетилхолинэстеразы / H.H. Шестакова, Е.В. Розенгарт // Доклады АН. 1996. Т. 346. С. 266-267.

387. Шиффман, Ф.Дж. Патофизиология крови / Д.Ф. Шиффман. М.-СПб: Изд-во БИНОМ-Невский Диалект, 2000. 448 с.

388. Шкодич, П.Е. Эколого-гигиенические аспекты проблемы уничтожения химического оружия / П.Е. Шкодич, В.Ф. Желтобрюхов, В.В. Клаучек. Волгоград: Изд-во ВолГУ, 2004. 236 с.

389. Шугаев, А.И. Эндогенная интоксикация при остром панкреатите и методы ее тестирования / А.И. Шугаев, A.C. Абдулхаликов // Эфферентная терапия. 1998. Т. 4. № 4. С. 10-14.

390. Шульпекова, Ю.О. Лекарственные поражения печени / Ю.О. Шульпекова // Справочник поликлинического врача. 2008. № 8. С. 29-32.

391. Экспериментально-клиническая фармакология сверхмалых доз антител к эндогенным регуляторам функций: Приложение / Под ред. М.Б. Штарка // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2009. 207 с.

392. Экспрессные методы определения токсичности и опасности химических веществ / Под ред. Заугольникова С.Д., Кочанова М.М., Лойт А.О. // М.: Медицина, 1978. 184 с.

393. Электрофорез в клинической лаборатории. М.: Реафарм, 2006. Т.1. 160 с.

394. Эпштейн, О.И. Противовирусная активность сверхмалых доз антител к гамма-интерферону / О.И. Эпштейн, Ю.Л. Дугина, М.В. Качанова и др. // Вестник Международной академии наук (Русская секция). 2008. № 2. С. 20-23.

395. Юдакова, О.В. Интенсивность перекисного окисления липидов и антиоксидантная активность, уровень молекул средней массы как показатели эндогенной интоксикации при распространенном перитоните /

396. В. Юдакова, Е.В. Григорьев // Клиническая лабораторная диагностика. 2004. № 10. С. 20-22.

397. Юделевич, В.И. Фосфорорганические лекарственные препараты / В.И. Юделевич, Е.В. Комаров, Б.И. Ионин // Химико-фармацевтический журнал. 1985. Т. 20. № 6. С. 668-685.

398. Юрин, В.М. Основы ксенобиологии / В.М. Юрин. Мн.: БГУ, 2001. 234 с.

399. Allen, R.G. Oxidative stress and gene regulation / R.G. Allen, M. Tresini // Free Radic. Biol. Med. 1999. V. 28. № 3. p. 463-499.

400. Aust, S.D. Ferritin as a source of iron and protection from iron-induced toxicities / S.D. Aust// Toxicol. Lett. 1995. V. 82-83. P. 941-944.

401. Ballou, S. C-reactive protein and the acute phase response / S. Ballou,

402. Kushner//Adv. Intern. Med. 1992. V. 37. P. 313-336.

403. Barja, G. Oxidative damage to mitochondrial DNA is inversely related to maximum life span in the heart and brai of mammals / G. Barja, A. Herrero //

404. FASEB J. 2000. V. 14. P. 312-318.

405. Basaga, H.S. Biochemicals aspects of free radicals / H.S. Basaga // Biochem. Cell Biol. 1990. v. 68. P. 989-998.

406. Bergstrom, J. Uremic toxins / J. Bergstrom, P. Fürst // Replacement of Renal Function by Dyalysis. Boston, 1983. P. 354-390.

407. Bizzigotti G.B. Parameters for Evaluation of the Fate, Transport, and Environmental Impacts of Chemical Agents in Marine Environments / G.B. Bizzigotti, O. George, H. Castelly, et al. // Chem. Rev. 2009. V. 109. № 1. P. 236-256.

408. Boelsterli, U.A. Mechanistic Toxicology: The Molecular Basis of How Chemicals Disrupt Biological Targets, Second Edition / U.A. Boelsterli. CRC Press: Taylor & Francis. 2007. 416 p.

409. Borras, C. Mitochondrial oxidant generation is involved in determining why females live longer than males / C. Borras, J. Gambini, J. Vina // Front Biosci. 2007. № l.P. 1008-1013.

410. Burlakova, E.B. Effect of Chemical Agents in Ultra-Low Doses on Biological Objects Text. / E.B. Burlakova, A.A. Kondratov, I.V. Khudyakov // Journal of Nonlinear Biologi. 1990. V. 1. P. 77-90.

411. Cadenas, E. Mitochondrial free radical generation, oxidative stress, and aging / E. Cadenas, K.J. Davies // Free Rad. Biol. Med. 2000. V. 29. P. 222-230.

412. Caroline, C. Glyphosate (Roundup) / C. Caroline // Journal of pesticide reform. 1998. V. 18. №3. P. 2.

413. Casperson, G.F. Biochemical and Molecular Genetic Analysis of HormoneSensitive Adenylyl Cyclase / G.F. Casperson, H.R. Bourne // Annual Review of Pharmacology and Toxicology. 1987. V. 27: 371-382.

414. Cook, A.M. Phosphanate utilization by bacteria / A.M. Cook, C.G. Daughton,

415. M. Alexander. J. Bacteriol. 1978, V. 133. P. 85-90.

416. Cox, C. Glyphosate ("Roundup") / C. Cox // J. Pesticide Reform. Autumn. 1998. V. 18. №3. P. 3-16.

417. Cox, C. Herbicide factsheet «Glyphosate» / C. Cox // J. Pesticide Reform. Winter. 2004. V. 24. № 4. P. 11-15.

418. Crozatier, B. Role of creatine kinase in cardiac excitation-contraction coupling: studies in creatine kinase-deficient mice / B. Crozatier, T. Badoual, E. Boehm, et al. // FASEB J. 2002. V. 16. P. 653-660.

419. Curry, Y.D. Oligophosphonates / Y.D. Curry, D.A. Nicholson // Topics Phosphorus Chem. 1972. V. 7. P. 37-102.

420. Daruich, J. Effect of the herbicide glyphosate on enzymatic activity in pregnant rats and their fetuses / J. Daruich, F. Zirulnik, M.S. Gimenez // Environ. Res. 2001. A. V. 85. P. 226-231.

421. Davenas, E. Human basophil degranulation triggered by very diluted antiserum against Ig E. / E. Davenas, F. Bauvais, J. Amara, et al. // Nature (international weekly journal of science). 1988. V. 333. № 6176. P. 816-818.

422. Dean, R.T. Free radical damage to proteins: the influence of the relative localization of radical generation, antioxidants, and target proteins / R.T. Dean, J.V. Hunt, A.J. Grant // Free Radical Biology & Medicine. 1991. V. 11. № 12. P. 161-165.

423. DeFrank, J.J. Biodégradation of VX/Water Hydrolysate / J.J. DeFrank, I.J. Fry, J.P. Earley, et al. // U.S. Army Edgewood Chemical Biological Center Aberdeen Proving Ground. MD 21010-5424. 2003. P. 6.

424. DeLeve, L.D. Mechanisms of drug-induced liver disease / L.D. DeLeve, N. Kaplowitz // Gastroenterol Clin. N. Am. 1995. № 24. P. 787-810.

425. Dictionary of organophosphorous compounds / Ed. R.S. Edmundson. L.:

426. Chapman and Hall, 1987. 1000 p.

427. Drapier, J.C. Modulation by nitric oxide of metalloprotein regulatory activities / J. Drapier, C. Bouton // BioEssays. 1999. V. 18. № 7. P. 549-556.

428. Emsley, J. The chemistry of phosphorus / J. Emsley, D. Hal. L.: Harper and Row, 1976. 563 p.

429. Eto, M. Organophosphorous pesticides: organic and biological chemistry / M. Eto. Cleveland, Ohio: CRC Press, 1974. 387 p.

430. Eto, K. Role of NADH Shuttle System in Glucose-Induced Activation of Mitochondrial Metabolism and Insulin Secretion / K. Eto, Y. Tsubamoto, Y. Terauchi, et al. // Science. 1999. V. 283. № 5404. P. 981-985.

431. Fest, Ch. The chemistry of organophosphorus pesticides / C. Fest, K.J. Schvidt. Berlin Springer, 1982. 447 p.

432. Finkel, T. Oxidants, oxidative stress and the biology of ageing / T. Finkel, N. Holbrook // Nature. 2000. V. 408. P. 239-247.

433. Frank, J. Histochemical visualization of oxidant stress / J. Frank, A. Pompella, H.K. Biesalski // Free Radie. Biol. Med. 2000. V. 29. № 11. P. 1096-1105.

434. Freedman, L.D. The preparation and properties of phosphonic acids / L.D. Freedman, G.O. Doak // Chem. Rev. 1957. V. 57. № 3. P. 479-523.

435. Frei, B. Natural antioxidants in human health and disease / B. Frei. Orlando (FL): Academic Press. 1993. 588 p.

436. Frei, B. Antioxidant defenses and lipid peroxidation in human blood plasma / B. Frei, R. Stocker, B.N. Ames // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1988. V. 85. P. 9748-9752.

437. Fry, I.J. Process biodégradation of hydrolyzed zarin by the GB2 microbial consortium / I.J. Fry, J.J. DeFrank, J.P. Earley // Proc. ERDEC Sci. Conf.

438. Chem. Biol. Def. Res. 1998. P. 629-633.

439. Fukuto, T.R. Isomerization of fiethylmercaptoethyl diethyl thionophosphate / T.R. Fukuto, R.L. Metcalf// J. Am. Chem. Soc. 1954. V. 76. P. 5103-5106.

440. Glyphosate and Standard Toxicology Studies // Monsanto Company, Backgrounder. 2002. P. 1-5 // http://monsanto.com/products/ techandsafety/herbicidescipubs. 23.05.2008.

441. Glyphosate. Herbicide factsheet // Journal of pesticide reform. 2004. V. 24. №4. P. 10-15.

442. Glyphosate. The Pesticide Manual // American chemical society. 1997. P. 56.

443. Goncharov, N.V. Toxicology of fluoroacetate: a review, with possible directions for therapy research / N.V. Goncharov, R.O. Jenkins, A.S. Radilov // J. Appl. Toxicol. 2006. V.26. № 2. P.148-161.

444. Goncharov, N.V. Fluoroacetate: Search for effective therapy / N. Goncharov, A. Kuznetsov, L. Glashkina, et al. // The Toxicologist. 2006. V. 90. № 1. P.479.

445. Goncharov, N.V. New therapy to treating acute intoxications with fluoroacetate and other poisons / N.V. Goncharov, A. Kuznetsov, L. Glashkina, et al. // The Toxicologist. 2007. V. 96. № 1. P.208.

446. Grob, D. Anticholinesterase intoxication in man and its treatment / D. Grob. Berlin: Springer Verlag. 1963. P. 989.

447. Gruñe, T. Increased levels of 4-hydroxynonenal modified proteins in plasma of children with autoimmune diseases / T. Grune, P. Michel, N. Sitte, et al. // Free Radie. Biol. Med. 1997. Vol. 23. № 3. P. 357-360.

448. Gutteridge, J.M.C. Historical Look to the Future. Free Radicals and Antioxidants / J.M.C. Gutteridge, B. Halliwell // Annals N.Y. Academy of sci. 2000. V. 899. P. 136-147.

449. Halliwell, B. Free radicals in biology and medicine / B. Halliwell, J.M.C. Gutteridge. London: Clarendon Press, 1990. 560 p.

450. Halliwell, B. Lipid peroxidation, oxygen radicals, cell damage, and antioxidant therapy / B. Halliwell, J.M.C. Gutteridge // Lancet. 1984. P. 1396-1398.

451. Hardell, L.A Case-Control Study of Non-Hodgkin Lymphoma and Exposure to Pesticides / L. Hardell, M. Eriksson // Cancer. 1999. V. 85. № 6. P. 1353-1360.

452. Harkness, D.R. Bacterial growth on aminoalkylphosphonic acids / D.R. Harkness // J. Bacteriol. 1966, V. 92. P. 623-627.

453. Harman, D. Free radical theory of aging: an update: increasing the functional life span / D. Harman // Ann N.Y. Acad. Sci. 2006. V. 1067. P. 10-21.

454. Heath, D.F. Organophosphorus poisons. Anticholinesterases and related compounds / D.F. Heath. Oxford: Pergamon press, 1961. 404 c.

455. Hidaka, T. Carboxyphosphonoenolpyruvate phosphonomutase, a novel enzyme catalyzing C-P bond formation / T. Hidaka, S. Imai, O. Hara, et al. // J. Bacteriol. 1990. V. 172. P. 3066-3072.

456. Hidaka, T. Sequence of a P-methyltransferase-encoding gene isolated from a bialaphos-producing Streptomyces hygroscopicus / T. Hidaka, M. Hidaka, T. Kuzuyama, et al. // Gene. 1995. V. 158. P. 149-150.

457. Jbilo, O. Acetylcholinesterase and butyrylcholinesterase expression in adult rabbit tissues and during development / O. Jbilo, Y. L'Hermite, V. Talesa, et al. // Eur. J. Biochem. 1994. V. 225. N 1. P. 115-124.

458. Joenje, H. Genetic toxicology of oxygen / H. Joenje // Mutat. Res. 1989. V. 214. №4. P. 193-208.

459. Kafarski, P. Aminophosphonates: natural occurrence, biological properties / P. Kafarski, P. Mastalerz // Beitr. Wirkstofforsch. 1984. № 21. P. 3-110.

460. Kafarski, P. Phosphonopeptides synthesis and biological activity / P. Kafarski, B. Leiczak, P. Mastalerz // Beitr. Wirkstofforsch. 1985. № 25. P. 3-77.

461. Kamigiri, K. Studies on the biosynthesis of bialaphos (SF-1293) 12. C-P bond formation mechanism of bialaphos: discovery of a P-methylation enzyme / K. Kamigiri, T. Hidaka, S. Imai, et al. // J. Antibiot. 1992. V. 45. P. 781-787.

462. Kohen, R. Oxidation of biological systems: oxidative stress phenomena, antioxidants, redox reactions, and methods for their quantification / R. Kohen, A. Nyska // Toxicol. Pathol. 2002. V. 30. №6. P. 620-650.

463. Kreider, R.B. Effects of creatine supplemtntation on performance and training adaptations // Cell. Biochem. 2003. V. 244. P. 89-94.

464. Krinsky, N. L. Membrane antioxidants / N.L. Krinsky // Ann. NY. Acad. Sci. 1988. V. 551. P. 17-33.

465. Kukhar, V.P. Aminophosphonic and Aminophosphonic acids, Chemistry and Biological Activity / V.P. Kukhar, H.R. Hudson. New York: John Wiley & Sons, 2000. 634 p.

466. Lee, K.S. Evidence for two phosphonate degradative pathways in Enterobacter aerogenes / K.S. Lee, W.W. Metcalf, B.L. Wanner // J Bacterid., 1992, V. 174. P. 2501-2510.

467. Limbrid L.E. Activation and attenuation of adenylatecyclase / L.E. Limbrid // Biochem. J. 1981. V. 195. P. 1-13.

468. Lin, V. Roundup inhibits steroidogenesis by disrupting steroidogenic acute regulatory (StAR) protein expression / V. Lin, V. Garry // Environ. Health Persp. 2000. V. 108. P. 769-776.

469. Maier, L. Advances in the chemistry of aminophosphonic acids / L. Maier // Phosph. and Sulf. 1983. V. 14. № 3. P. 295-322.

470. Milts, J.F. The endocrinology of stress. Sviat / J.F. Milts // Space Environ. Vtd. 1985. V. 56. P. 642-650.

471. Munro, N.B. The Sources, Fate, and Toxicity of Chemical Warfare Agent Degradation, Products / N.B. Munro, S.S. Talmage, G.D. Griffin, et al. // Environmental Health Perspectives. 1999. V. 107. № 12. P. 933-974.

472. Obendorf, S.K. Distribution of pesticide residues within homes in central New York state / S.K. Obendorf, A.T. Lemley, A. Hedge, et al. //Arch. Environ.

473. Contam. Toxicol. 2006. V. 50. № 1. P. 31-44.

474. Paganelli, A. Glyphosate-based herbicides produce terato-genic effects on vertebrates by impairing retinoic acid signaling / A. Paganelli, V. Gnazzo, H. Acosta, et al. // Chem. Res. Toxicol., 2010, 23 (10), pp 1586-1595.

475. Piroddi, M. Oxidatively-modified and glycated proteins as candidate proinflammatory toxins in uremia and dialysis patients / M. Piroddi, I. Depunzio, V. Calabrese // Amino Acids. 2007. V. 32. № 4. P. 573-592.

476. Prajer, K. a-Aminophosphonsaure / K. Prajer, J. Rachon // Ztschr. Chem. 1975. Bd. 15. S. 209-215.

477. Redmore, D. The chemistry of C-P-N systems / D. Redmore // Topics Phosphorus Chem. 1976. V. 8. P. 515-585.

478. Rodriguez, H. Mapping of Cu/H202-induced DNA damage at nucleotide resolution in human genomic DNA by ligation- mediated polymerase chain reaction / H. Rodriguez, R. Drouin, G.P. Holmquist, et al. // J. Biol. Chem. 1995. V. 270. P. 17633-17640.

479. Rock, K.L. Inhibitors of the proteasome block the degradation of most cell proteins and the generation of peptides presented on MHC class I molecules / K.L. Rock, C. Gramm, L. Rothstein // Cell. 1994. V. 78. P. 761-771.

480. Rosch, P.J. Stress, the immune system and psychiatry / P.J. Rosch / Eds. B. Leonard, K. Miller. N.Y., 1995. P. 208-231.

481. Shringarpure, R. Protein turnover by the proteasome in aging and disease / R. Shringarpure, K.J. Davies // Free Radie. Biol. Med. 2002. V. 32. P. 1084-1089.

482. Shringarpure, R. Ubiquitin conjugation is not required for the degradation of oxidized proteins by proteasome / R. Shringarpure, T. Gruñe, J. Mehlhase, et al. //J. Biol. Chem. 2003. V. 278. P. 311- 318.

483. Shulman, R.G. Glycogen turnover forms lactate during exercise / R.J. Shulman

484. Exerc. Sport Sci. Rev. 2005.V. 33. № 4. P. 157-162.

485. Shulman, R.G. The «glycogen shunt» in exercising muscle: A role for glycogen in muscle tntrgetics and fatigue / R.G. Shulman, D.L. Rochman // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2001. V. 98. № 2. P. 457-461.

486. Sies, H. Role of reactive oxygen species in biological processes / H. Sies // Klin. Wochenschr. 1991. V. 69. P. 965-968.

487. Sies, H. // Oxidative stress /H. Sies. N.Y.: Academic Press. 1985.

488. Silver, A. The biology of cholinesterases / A. Silver. Amsterdam: North Holland Publishing Co. 1974. 574 p.

489. Springett, J.A. Effect of repeated low doses of biocides on the earthworm. Aporrectodea caliginosa in laboratory culture / J.A. Springett, R.A. Gray //Soil, biol. biochem. 1992. V. 24. № 12. P. 1739-1744.

490. Squier, T.C. Oxidative stress and protein aggregation during biological aging / T.C. Squier // Exp Gerontol. 2001. V. 36. № 9. P. 1539-1550.

491. Starkov, A.A. Regulation of the energy coupling in mitochondria by some steroid and thyroid hormones / A.A. Starkov, R.A. Simonyan, V.I. Dedukhova, et al. // Biochim. Biophys. Acta. 1997. V. 1318. P. 173-183.

492. Stocker, R. Endogenous antioxidant defences in human blood plasma // Oxidative stress: oxidants and antioxidants / R. Stocker, B. Frei. London: Academic Press. 1991. P. 213-243.

493. Tanahashi, K. Phagocytic activity and oxygen radicals production of neutrophils in patients with chronic renal failure / K. Tanahashi, A. Imada // Nippon. Jinzo. Gakkai. Shi. 1991. V. 33. № 6. P. 565-574.

494. Taylor, J.L. Conformers of acetylcholinesterase: a mechanism of allosteric control // Mol. Pharmacol / J.L. Taylor, R.T. Mayer. 1994. V. 45. P. 74-83.

495. Terr, A.I. Inflammation / A.I. Terr // Basic and Clinical Immunology / D.P. Stites, A.I. Terr, T.G. Parslow. Norwalk: Appleton & Lange, 1994. P. 137-150.

496. Vaca, C.E. Interaction of lipid peroxidation products with nuclear macromolecules / C.E. Vaca // Biochem. Biophys. Acta. 1989. V. 1001. № 1. P. 35-43.

497. Vina, J. Modulation of longevity-associated genes by estrogens or phytoestrogens: Review / J. Vina, J. Sastre, F.V. Pallardo, et al. // Biol. Chem. 2008. V. 389. № 3. P. 273-277.

498. Wackett, L.P. Bacterial carbon-phosphorus lyase: products, rates, and regulation of phosphonic and phosphinic acid metabolism / L.P. Wacket, S.L. Shames, C.P. Venditti, et al. // J. Bacterid., 1987. V. 169. P. 710-717.

499. Wolf, D. Free radicals in the physiological control of cell function / D. Wolf // Physiol. Rev. 2002. V. 82. P. 47-95.

500. Wolff, S.P. Fragmentation of proteins by free radicals and its effect on their susceptibility to enzymic hydrolysis / S.P. Wolff, R.T. Dean // Biochem J. 1986. V. 234. № 2. P. 399-403.

501. Worms, K.H. Phosphonic acids and derivatives / K.H. Worms, M. Schmidt-Dunker // Organic phosphorus compounds / Ed. G.M. Kosolapoff, L. Maier. N.Y.: Wiley, 1973.V. 7. 849 p.

502. Wyss, M. Mitochondrial creatine kinase: a kay enzyme of aerobic energy metabolism / M. Wyss, J. Smeitink, R.A. Wevers, et al. // Biochim. Biophys. Acta. 1992. V. 1102. P. 119-166.

503. Zeleznick, L.D. Growth of E. coli on methyl- and ethyl-phosphonic acids / L.D. Zeleznick, T.C. Myers, E.B. Titchener. BBA, 1963. V. 78. P. 546-547.

504. Zukowska-Grojec, Z. Cardiovascular, neuropeptid Y, and adrenergic responses in stress are sexually differentiated / Z. Zukowska-Grojec, G. Shen, P. Capraro, et al. // Physiology and Behavior. 1991. V. 49. P. 771-777.

Информация о работе

Плотникова, Ольга Михайловна
доктора биологических наук
Курган, 2012
ВАК 03.01.04

Диссертация

Влияние метилфосфоновой кислоты на основе звенья гомеостаза белых лабораторных мышей - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы