Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Влияние ксенобиотиков на содержание биогенных аминов в гипоталамических структурах, участвующих в регуляции репродукции у самок крыс

ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Автореферат диссертации по теме "Влияние ксенобиотиков на содержание биогенных аминов в гипоталамических структурах, участвующих в регуляции репродукции у самок крыс"

САНКТ-ПЕТЕРБУРГСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ

ггз од

3 и Ш? 19ЯЗ

На правах рукописи

КОРЕНЕВСКИЙ Андрей Валентинович

ВЛИЯНИЕ КСЕНОБИОТИКОВ НА СОДЕРЖАНИЕ БИОГЕННЫХ АМИНОВ П ГИПОТАЛАМИЧЕСКИХ СТРУКТУРАХ, УЧАСТВУЮЩИХ В РЕГУЛЯЦИИ РЕПРОДУКЦИИ У САМОК КРЫС

03.00.04 - Биохимия, 03.00.13 - Физиология челояекя й животных

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Санкт-Петербург П98

Работа выполнена в лаборатории перинатальной биохимии Института акушерства и гинекологии им. Д.О. Orra РАМН.

Научный руководитель -

доктор биологических наук, профессор A.B. Арупонян

Официальные оппоненты:

доктор биологических наук, старший научный сотрудник Н.Д. Ещснко доктор биологических наук H.A. Емельянов

Ведущее учреждение -

Институт мозга человека РАН

Зашита состоится « $ » 1998 г в к, часов на заседании

диссертационного совета К 063.57.09 по зашшс диссертаций на соискание ученой ■ степени кандидата биологических наук в Саикт-Пе1ср0ур1ском государственном университете по адресу: 19903-1. С.-Петербург. Университетская наб.. 7/9, ауд. 90.

С диссертацией можно ознакомиться в научной библиотеке им Л.M Горькою (.'пикт-Петербургского государственного университет

Автореферат разослан « I WS .

Учений секретарь дисге-|>lannoHHoto ичилп кандицлт биожч нчсских m.ivk

I' H КоИ.ЗЖ'НКО

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность проблемы. Проблема гормональной регуляции родуктивной функции в настоящее время активно разрабатывается во многих гественных и зарубежных коллективах [Карш, 1987; Баранникова и др., 1991; ичев, 1995]. Достигнуты значительные успехи в изучении центральной /яящя репродукции путем расшифровки механизмов передачи информации, ючающих нервные стимулы, передаваемые медиаторами различной природы 5ичев, 1995; Apfelbaum, 1987]. Изучены источники образования адолйберина (ГнРГ) в структурах мозга и пути его поступления в гипофиз (Tman et al., 1986]. Между тем многие аспекты рег-уляции половой функции, бенно на уровне гипоталамо-гипофизарного звена, остаются неизученными.

касается регуляции секреции и транспорта ГнРГ через нейрогемальные шы, особенно через сосудистый орган концевой пластинки (СОКП), роли ибиторов и стимуляторов этого процесса, реакции гипофиза на различные мулирующие и тормозные влияния. В настоящее время большая роль эдится влиянию различных биоритмов на физиологические функции, в том ле и на функцию эндокринной системы [Дедов И.И., Дедов В.И., 1992]. Однако чение роли суточных колебаний уровня и скорости обмена различных ромедиаторов в ЦНС, принимающих участие в регуляции половой функции, > только начинается.

В настоящее время ухудшение экологической обстановки на земном шаре ияло глобальный. характер. Активными загрязнителями окружающей среды я юте я разнообразные химические, металлургические предприятия, родуктивпая система является одной из наиболее чувствительных систем анизма к воздействию неблагоприятных факторов внешней среды. Это в мой мере относится к эндокринной системе, поскольку она принимает осредственное участие в регуляции репродуктивной функции. По мнению ряда оров [Бонашевская и др., 1991; Васильковский и др., 1991; Айламазян и др., 7], именно репродуктивная система страдает раньше других систем, поэтому I предлагают использовать действие ксенобйотиков на женскую

репродуктивную систему, особенно при беременности, как Крите] неблагоприятных влияний и прогноза профессиональных заболеваний.

Имеются многочисленные клинические наблюдения, свидетельствующи нарушении менструального цикла, секреции половых стероидов, гонадотрот гормонов, пролактина у женщин, работающих в присутствии паров бек« формальдегида, метилметакрилата, стирола, бензола и других органичес! веществ.

Сложность организации репродуктивной функции, включают центральное (ЦПС), гипофизарное, гонадное звенья в систему органов-мише! половых гормонов, делает се особенно уязвимой для действия неблагоприятт производственных и других экологических воздействий.

Особое внимание следует обращать на самые начальные стадии отклоне! физиологических функций, которые возникают как первичный ответ системь носят функциональный, а не органический характер. Среди таких отклоне! можно отмстить нарушение биоритмов, являющихся одной из наибо. чувствительных функции живого организма [Лурье и др., 1991]. Знача биоригмоп в функции репродуктивной системы изучено еще очень мало.

И связи с изложенным казалось пелесообрашмм исследован, общие специфические черты в действии на рефляцию репрод)»пивной функции р) ксенобиотиков, применяемых в дошх. находящихся на уровне прслс;и допустимой концсшрацни (11ДК) и порога хронического поиенс1Вия (1 пп определяемого по обшстоксикологнчсскнм иоклепелям

Цс.зь н «атячи псглсдопиннн. I{елмо насюяшей рабон.1 явилось и«\ча монолминер! ическнх систем в структурах гншнадамуса. участвующих процессах синима и секреции ГнРГ, в норме и иод влиянием нсблиюприяш факторов внешней сре;и.1. Для достижения пели были поставлены следуют залами

I Ммясннп. характер шменений содержания дофамина (ЛА1. сероюннна I ОГ> и моралреналнна (ИЛ) в зависимости от времени сутк преотнческон области (!!<>) гипоталамуса и срединном во шышенип (С самок крыс.

2. Изучить влияние хронической ингаляции малых (ПДК) и больших (10 ПДК) доз толуола, диоксана-1,4 и формальдегида на содержание биогенных аминов и их метаболитов в указанных структурах мозга и на их биоритмы.

Научная новизна работы. Впервые изучено влияние различных енобиотиков (толуол, диоксан, формальдегид) на нейромедиаторное звено поталамической регуляции репродуктивной функции самок крыс.

Показано, что хроническая ингаляция нейротоксичных ксенобиотиков шуол, диоксан) приводит к изменению содержания биогенных аминов в поталамических областях, связанных с синтезом и секрецией ГнРГ, причем фекты толуола наиболее выражены в ПО, а действие диоксана проявляется как в ), так и в СВ. Наряду с этим обнаружено, что в отличие от толуола диоксан азывает влияние также на гонадное звено регуляции репродукции, вызывая менение массы яичников, особенно выраженное на стадии диэструса.

Впервые установлено, что при одномесячной ингаляции указанных енобиотиков, применяемых в дозах ПДК и 10 ПДК, происходит сбой ркадианного ритма содержания биогенных аминов в исследуемых областях поталамуса, что может быть одной из причин нарушения суточных колебаний креции ГнРГ и гонадотропинов. Наряду с этим, обнаружено, что формальдегид добным действием не обладает, оказывая влияние исключительно на гонадное ;но регуляции репродуктивной функции.

Теоретическая н практическая значимость работы. Представленные в боте экспериментальные данные вносят существенный вклад в понимание ханизмов нарушения гипоталамической регуляции репродуктивной функции ;нского организма под влиянием ксенобиотиков. Полученные результаты идетельствуюТ об участии в этом процессе нейромедиаторных систем поталамических структур, связанных с синтезом и секрецией ГнРГ. Выявление нних функциональных - нарушений центральной регуляции репродуктивной 'нкпни, что удается обнаружить лишь экспериментальным путем, имеет важное акгическое значение при разработке профилактических мер, способствующих

устранению или ослаблению действия повреждающих факторов на органи неблагоприятных экологических условиях.

Основные положения, выносимые на защиту.

1. Хроническое воздействие на самок крыс ксенобиотиков, обладаю нейротоксическим эффектом (одномесячная ингаляция толуола и диокса дозах на уровне ПДК и 10 ПДК) приводит к изменению содержания биоге! аминов и их метаболитов в гипоталамических структурах, ответственны синтез и секрецию ГиРГ (преоптическая область и срединное возвышение).

2. Изменение в уровне биогенных аминов и их метаболитов (дофамин, серото 3,4-диоксифсннлуксусная кислота, 5-оксииндолилуксусная кис/ норадрсналин) сопровождается нарушением циркадианных ритмов содержания, причем действие толуола обнаруживается преимуществен! преоптической области гипоталамуса, тогда как диоксан проявляет себя повреждающий агент как в преоптической области, так и в средин возвышении.

3. Формальдегид в условиях проведенного эксперимента оказывает сл! действие на системы биогенных аминов в исследуемых струкп гипоталамуса, но специфически действует на гонады, вызывая наруин суточного ритма массы яичников.

Апробация работы. Основные положения дисссрглции лоложень обсуждены на научном заседании кафедры Физиологии человека й живог биолого-почвеппого факультет Са и кг - II е I с р С> у р ге к о I о Государстве!» Университета (1998 г.) Отдельные фрагменты диссертационной рабогы б представлены на 11-ой Международной конференции возрасшых пеиро! (Тампере. 1990 г.) и 8-ом Конгрессе нейрохимических обществ Чехии и Слова (Мартин. 1996 г.).

По материалам диссертации опубликовано 9 работ в отечественно! зарубежной печати.

ОГм.ем п структура дтчергапнн. Днссертния »пложена па 110 страни машинописною текста, содержит 7 таблиц, иллюстрирована 16 рисунками. 1'аО состоит из введения, обзора литературы, описании методов исследования, л

разделов собственных исследований, обсуждения результатов, выводов и списка читературы, включающего 163 наименований на русском и иностранных языках.

МАТЕРИАЛЫ К МЕТОД».« ИССЛЕДОВАНИЯ

Эксперименты были выполнены на 320 крысах-самках линии Вистар массой 180-220 г. Животные содержались в виварии с искусственной вентиляцией и сонгролируемым световым режимом (день 8.00-20.00, ночь 20.00-8.00), получали ¡тандартную пищу и воду.

При исследовании воздействия летучих органических веществ на ;одсржание биогенных аминов мозга животных помещали в специальные ютравочные камеры, сконструированные на базе блоков типа 1КА-НЖ [Елкин и •оавт. Рац. предложение №170 от 10.12.1975 г.]. Животные подверг&пись юзденствшо паров химических веществ на заданном уровне в течение 4 часов в (ень по 5 дней в неделю на протяжении 1 месяца. Концентрацию ксенобиотиков юдаерживали на уровне ИДК, установленной гигиенистами для воздуха рабочей оны предприятий, и на порядок ее превышающей - на уровне порога :ронического • воздействия, установленного по общетокснкологическим юказагелям. Дозировку толуола и дноксана осуществляли весовым методом, (озировку формальдегида осуществляли путем забора проб воздуха га камер с юследующим определением его концентрации газохроматографическим пособом. Животных контрольной группы помещали в такие же камеры, но без годачи в них ксенобиотиков. После каждого сеанса • затравки живопшх озвращали в виварий.

Решение задач, поставленных в диссертации, осуществлялось в три этапа. 1а первом этапе изучали токсическое действие толуола, на втором - действие доксана, на третьем - действие формальдегида. Каждый эксперимент включал 3 руппы животных. В первую группу вошли животные, служившие в качестве онтроля по отношению к животным, получавшим ксенобиотики ингаляциотгмм утем. Вторую группу составили животные, подвергавшиеся воздействию сенобиотика на уровне ПДК (толуол - 50 мг/м\ диокслн - 10 мг/м\ формальдегид

- 0,5 мг/м1). Животные третьей группы подвергались воздействию ксенобиотика i уровне 10 ПДК (толуол - 500 мг/м3, диоксан - 100 мг/м5, формальдегид - 5,0 мг/м

Стадию эстралыюго цикла животных в день забоя определяли i влагалищным мазкам, взятым в 10 часов утра. Забой животных производили как утреннее (11-12 часов), гак и в вечернее (17-18 часов) время. Из моз деканнтированных крыс выделяли ПО и CD, как описано ранее [Савченк Данилова, 1979]. Ориентируясь на оптическую хиазму, делали фронтальный ср мозга до и после нее толщиной около I мм. Из него извлекали ПО - учасп треуюлыюй формы массой 2-3 мг, а фрагмент, содержащий СВ, массой 1 > выделяли из серого бугра- После выделения структуры гомогенизировали в 0,5 s 0,1 и. ИСЮ4, содержащей 0,05% мстабисульфита калия, центрифугировали (10 0( g, 7 минут, ( 4°С), осадок отбрасывали, а суиернаттшт переносили в прибор ;и микрофильтрации и фильтровали через капроновый фильтр с диаметром пор 0 мкм, фильтрат подвергали хроматографическому анхтизу в тот же день.

Количественный анализ биогенных аминов и их метаболитов в структур; мозга проводили методом ОЭЖХ с электрохимическим детектирование) Содержание определяемых веществ рассчитывали в натираммах на мнллшрам общего белка. Общий белок определяли но методу Лоури. Для оценки состояния функциональной активности моноаминсргнческих систем моча в исследуемь структурах определяли изменение концентраций соответствуют!* нейромедиаторов и их главных метаболитов, а также соотношение между ними.

Статистическую обработку данных выполняли с нсполыованием i-Kpinepi1 Сп.юдеша. В качестве критерия достоверности принимали р-0.05. Для вычснсш взаимосвяш между различными факторами исполыоватн корреляционный аихти

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛКДОИАНИЯ I. И IV4CIIHC содержании Гпютснных нмшиш и и\ мпаОолитон и гиногпллмическнх структл ра\, обусловливающих сын ir i и сск-ршию

гонллолиГнрмпа.

H ре1\лыаге проведенного исследования обнаружено, что именно в ПС. тл расположен СОКИ, обеспечивающий циркатианные ритмт.т секреции I.nl'l

держание ДА, его метаболита ДОФУК и 5-ОТ достоверно выше этветствующих содержаний в СВ (рис. 1). Так, при определении уровня ДА в хматрнпаемых структурах у контрольных животных было обнаружено высокое гержание этого нейромедиатора (16,8±1,7 нг/мг белка) в ПО, при этом его держание в СВ было достоверно ниже (11,0±1,1 нг/мг белка, р<0,01). держание метаболита ДА - ДОФУК - также достоверно (р<0,05) отличалось в ианных Структурах мозга. Относительно меньшее по сравнению с Злюдаемым в ПО содержание 5-ОТ отмечалось в СВ: 9,0±0,8 нг/мг белка в ПО и ±0,8 нг/мг белка в СВ (р<0,05). Уровни НА и метаболита 5-ОТ - 5-ОИУК - в I не отличались достоверно от таковых в СВ.

Из данных, представленных на рис. 2, видно, что содержание ДА и 5-ОТ в

> гипоталамуса и СВ (объединенные данные по стадиям эстрального цикла) ;вержено суточным колебаниям, причем во всех отмечаемых случаях утреннее (ержание нейромедиатора было выше его вечернего уровня. Так, содержание

> в ПО в утренние часы составляло 20,5±2,5 нг/мг белка, а в вечерние часы >вень нейромедиатора достигал значения 12,5±1,9 нг/мг белка (р<0,05). Та же ономерность наблюдалась при сопоставлении данных о содержании ДА в СВ: 3±1,9 нг/мг белка угром и 8,3±0,7 нг/мг белка вечером (р<0,05). В случае ФУК отмечалась лишь тенденция (р<0,1) к снижению его содержания в ернее время в Г10 гипоталамуса. Аналогичные случаю с ДА закономерности в личин утренних и вечерних уровней в обеих структурах отмечались также в гашении 5-ОТ: 10,9± 1,3 нг/мг белка утром и 6,8±0,7 нг/мг белка вечером в ПО 0,01) и 7,9±1,2 нг/мг белка утром и 4,б±0,8 нг/мг белка вечером в СВ (р<0,05). случае его метаболита - 5-ОИУК - указанная закономерность отчетливо людалась в ПО (р<0,05), в то время как в СВ отмечалась лишь тенденция к [жепнго его уровня в вечернее время. Утреннее содержание НА как в ПО, так и Г В не отличалось достоверно от уровней нейромедиатора в указанных уктурах в вечернее время.

Полученные данные свидетельствуют о различной степени вовлеченности ромедиаторных систем в процессы синтеза и секреции ГнРГ на уровне уктур мозга, участвующих в регу ляции гоназотропной функции гипофиза (ПО

НПО; ®СВ ;

5-0 Г ДОФУК 5-ОИУК

Рис. 1. Содержание биогенных аминов и их метаболитов в гилоталамичес-ких структурах, обусловливающих синтез и секрецию гОнадолибери-на (объединенные данные по времени суток и стадиям астрального цикла. п=28-32).

Примечание: * - р<;0.05; ** - р<0,01 по сравнению с соответствующей величиной в ПО.

"МО

120 !

|

!

юо ! 80 60 40 20

V

Контроль

ПДК

10ПДК

Утро Вечер Утро Вечер Утро Вечер

Рис 3 Динамика содержания ДА в ПО при хроническом воздействий

толуола (диэструс). % от утреннего значения Примечание * - р- 0 05 " - р<0 01 по сравнению с соотг^тствук-чци'/и данными для утреннего времени суток

О

25

20

га

с; 15

<»

ю

X 10

г

5

0

гЬ

НА

I

А

ДА

НЕп

.□а ..1_Й

□ Утро

1

¡0 Вечер)

5-ОТ ДОФУК 5-ОИУК

25 20

га

I «

ю

I 10

I

5 О

К

НА

[Ь

£

ДА

нь

ГТ7Я____

5-ОТ ДОФУК 5-ОИУК

□ Утро , ! О Вечер , ;

ис 2 Содержание биогенных аминов и их метаболитов в ПО (вверху) и

СВ (внизу) в зависимости от времени суток (п=14-16). римечание ' - р<0.05. ** - р<0.01 по сравнению с соответствующей величиной в утренние часы

160 140 120 100 60 60 40 20 0

Утро Вечер Утро Вечер Утро Вечер

Рис. 4. Динамика содержания 5-ОТ в ПО при хроническом воздействии

диоксана (диэструс), % от утреннего значения. Примечание: * - р<0,05; ** - р<0,01 по сравнению с соответствующими данными для утреннего времени суток.

Утро Вечер Утро Вечер Утро Вечер

Рис. 5. Динамика изменения массы яичников при хроническом воздействии

формальдегида (диэструс). Примечание: ** - р<0,02 по сравнению с соответствующими данными для утреннего времени суток

СВ), и о возможном участии ДА и 5-ОТ в формировании циклического ракгера секреции ГнРГ.

2. Влияние ксенобиотнков ня гормональную регуляцию репродуктивной

функцнн.

Изучение влияния ксенобиотиков показало, что действие толуола и океана имеет ряд общих черт, вызывая похожие сдвиги в содержании йромедиаторов в ПО на стадии диэструса. Так, толуол снижает уровень НА, ДА 5-ОТ только в ПО в вечернее время при ингаляции в малых дозах, слабо влияя на держание Зтнх аминов при ингаляции в дозах 10 ПДК. Диоксан, в отличие от пуола, проявляет себя как повреждающий агент в равной мере как в ПО, так и в В ПО отмечаемые при воздействии диоксана изменения идентичны блюлаемым в случае ингаляции толуола. В СВ также на стадии диэструса в Бенине часы ингаляция диоксана приводила к снижению содержания НА и ДА в iMtx исследованных концентрациях и 5-ОТ в дозе 10 ПДК.

Цнркалиапныс pin мм содержания биог енных аминов и их метаболитов гже подвержены и)менеииям под воздействием как толуола, так и диоксана. На 3 покашно влияние толуола на систему ДА в ГК) на стадии диэструса. рактерная для контрольной ¡руппы суточная периодичность в изменении тержапня нейромедиаюра с максимумом в угренние часы и минимумом в lepiine в условиях ингаляции в дотах па уровне ПДК егне сохранялась, а в дозах \ ровне 10 ПДК' с тиснилась недостоверной. В случае метаболита действие нобнотнка вытывало потерю циркадианной ритмичности его содержания швиенчо «»i доты. в которой проводилась ингаляция. Тот же эффект наблюдался i ишалянии .тиоксана. однако ритм самою ДА при этом не нарушался.

Действие диоксана на сисю«у 5-ОГ в 110 на стадии диэструса показано на : I Применение ею в ;ич.т\ на \ровне ПДК изменяло направленность суточных мои содержания как самою иидо.цтмина. kik и его метаболита 5-ОИУК, ючаемых » контроле. в ю время как большие концентрации (10 ПДК) етанлвлиналн прежний Характер ритмов. В случае метаболита, однако, эти iu'hchh» úi.ijih нелос мжернымн.

Гонадотоксическое действие диоксана проявлялось в увеличении м яичников в опытных группах по сравнению с контролем. Толуол в отличи диоксана не вызывал какой-либо существенной реакции со стороны яичник матки.

Формальдегид в отличие от первых двух упомянутых поллютанто] вызывал существенных сдвигов в содержании биогенных аминов и метаболитов в структурах мозга, ответственных за синтез и секрецию ГнРГ. Е ингаляция в дозе на уровне 10 ПДК вызывала достоверное увеличение содерж метаболита серотонина - 5-ОИУК. Воздействие формальдегида на СВ таюк вызывало существенных сдвигов в содержании исследуемых соединений.

Изучение данных содержания биогенных аминов и их метаболитов хроническом воздействии формальдегида не выявило факта нарушения суточ ритма содержания изучаемых нейромедиаторов в обеих исследуемых обла гипоталамуса.

При изучении влияния формальдегида на гонадное звено регул! репродукции было обнаружено нарушение ригма массы яичников в зависим от времени суток, которое не наблюдалось при затравке животных толуол« дноксаном (рис. 5). Так, в диэструсе масса яичников в контроле в утрешше ■ была достоверно ниже величины в вечернее время суток. Действие формальде сглаживало это различие независимо от дозы, в которой проводилась ингалящ проэструсе подобных изменений массы яичников не наблюдалось.

Среди прочих эффектов изученных ксенобиотиков интересно отме действие толуола на содержание ДА в ТЮ по стадиям эстрального цикл. ко!проле наблюдается достоверное снижение уровня нейромедиатора переходе от диэструса к проэструсу. Ингаляция ксенобиотика в о1 исследованных дозах полностью нивелировала имеющееся различие.

ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

Полученные нами результаты о содержании биогенных аминов v метаболитов в областях мозга, осуществляющих центральную регуля репродуктивной функции, представляют интерес с точки зрения развиваем!

тастоящее время представлений о ПО как центре циклической регуляции онадотропной функции гипофиза. Наши наблюдения и литературные данные юдгверждают гипотезу о преимущественно ингибирующем действии ДА и 5-ОТ в 10. В СВ суточные колебания в содержании биогенных аминов не столь ыражены, как в ПО, что понятно, так как СВ в отличие от ПО, будучи основным гейрогемальным органом, выделяющим нейропептиды в портальную ровеносную систему, является по сути дела тоническим цетггром регуляции онадотропной функции гипофиза. Высказывается предположение о том, что силение синтеза и транспорта ГнРГ в вечернее время может быть обусловлено слаблением тормозных влияний исследуемых нами ДА, 5-ОТ и отчасти НА, оторые обычно блокируют выделение нейрогормона в кровь.

Снижение содержания нейромедиаторов при ингаляции нейротоксичными сенобиотиками в дозе на уровне ПДК и восстановление прежнего порядка гличин в дозе на уровне 10 ПДК, вероятно, может указывать на развитие заггпшионной реакции со стороны центральных механизмов регуляции ¿продукции при применении высоких концентраций поллютанта.

Существенно, чю толуол и диоксан вызывали нарушения циркадианной тгмичности только в ПО. что. по-видимому, можно объяснил, тем ктоятельством, что именно эта область гипоталамуса ответственна за ткличеекую секрецию ГнРГ, преде гавляюшую из себя механизм тонкой, так пываемой экстренной, репляпин репродуктивной функции.

Колес широкое действие дноксана. проявляющееся как в ПО, так и в СВ, а лтке ею влияние на гонады говорят о рамичной степени нейротоксичности этих енобиотиков и о более широком спектре токсического действия диоксана по ипнению с толуолом. IIo.in4Chhi.ic рсмулыаты дают основание полагать, что •следуемые нами нейромеднаюрные системы в СВ осуществляют контроль пая ннческой ретуляинсн I нРГ. пила как п ПО. помимо этого, они участвуют также циклической ретуляпии его синима и секреции, Нами установлено, что суточная намика содержания б»иченны\ аминов и ГнРГ. синтез и секреция которого холятся пол их контролем. » норме имеют противоположный характер: низкое лерлсание ] нРГ сппроно.кдлегся высоким уровнем содержания биогенных

аминов в утренние часы, обратная картина наблюдается в вечернее врем Особенно выражена эта закономерность в ПО гипоталамуса, где локализов: СОКП, которому, как было сказано ранее, принадлежит ведущая роль в регулящ циркадианных ритмов секреции ГнРГ и гонадотропных гормонов. Нарушеш привычного суточного ритма содержания ГнРГ в ПО под влиянием ингапяц» нейротропных ксенобиотиков связано, как показали наши исследования, < снижением содержания биогенных аминов, оказывающих тормозное влияние i нейроны ПО. Нарушение суточной ритмики содержания ДА и 5-ОТ п< воздействием обоих ксенобиотиков свидетельствует о деформащ контролирующих механизмов регуляции этими аминами синтеза и секреции Гн! в экологически неблагоприятных условиях.

Полученные нами данные о нарушении циркадианного ритма масс яичников при ингаляции формальдегида служат дополнительным подтверждение существующих в литературе представлений о том, что этот поллютант, как диоксан, обладает гонадотоксическим эффектом.

ВЫВОДЫ

1. В нейрогемальных областях гипоталамуса, участвующих в регул я ц репродуктивной функции у самок крыс (секреция гонадолиберина) бы обнаружены различия в содержании биогенных аминов. Содержание дофами (16,8±1,7 нг/мг белка) и серотонина (9,0±0,8 нг/мг белка) в преоптическ области превышает таковое в срединном возвышении (11,(Ш,1 и б,3±0,8 нг/ белка соответственно), что не наблюдается в отношении норадреналш Уровни дофамина и серотонина изменяются периодически в течение суток, п этом максимум их содержания в обеих структурах гипоталамуса наблюдаете) утренние часы, а минимум - в вечерние.

2. Толуол при одномесячной ингаляции в дозах на уровне ПДК вызывг снижение в преоптической области содержания норадреналина, дофамш серотонина и 5-оксийндолилуксусной кислоты на стадии диэструса в вечер! время суток. В дозах на уровне 10 ПДК толуол вызывает нарушение прсогмической области на стадии диэструса циркадианных ритмов содержа!

дофамина и серотонииа, а в дозах на уровне ПДК и 10 Г1ДК также циркадианного ритма содержания 3,4-диоксифенилуксусной кислоты. Диоксан при одномесячнои ингаляции в дозах на уровне ПДК вызывает снижение в преоптической области содержания серотонина и его метаболита на стадии диэструса в утреннее время суток. В срединном возвышении диоксан снижает содержание норадреналина и дофамина при ингаляции в обеих дозах, а серотонина - в дозах на уровне 10 ПДК. В дозах на уровне ПДК диоксан вызывает также нарушение в преоптической области на стадии диэструса циркадианного ритма содержания серотонина, а в дозах на уровне ПДК и 10 ПДК - циркадианных ритмов содержания метаболитов дофамина и серотонина. Диоксан при одномесячной ингаляции в обеих использопанных концентрациях проявляет гонадотоксйческий эффект, вызывая увеличение массы яичников на стадии диэструса.

Формазьда ид в условиях одномесячнои ингаляции не оказывает влияния на содержание биогенных аминов в гипогаламическнх структурах, ответственных за синтез и секрецию гонадолибернна, но действует на репродуктивные органы, вышвая. в частности, нарушение суточного ритма массы яичников. Полученные результаты свидетельствуют о роли биогенных аминов в I ипотатамической регуляции секреции гонадолибернна и нарушении этого процесса под влиянием нейротокенчных ксенобиотиков (толуол, диоксан-1,4).

СПИСОК* I'AltOT, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

Iriii/iinvun Л Г.. Sicfuiniiv Af (!.. Кчппс\лку , I.1'., I'rokupcnko Г.М.. Oporina T.I. Hie disturbances of circadian rhythms hypothalamic regulation in female rats under lie influence of xenobiotics J. Neurochem. - 1996. - Vol.66. - Suppl. 2. - S89C. Knrcncv\ky /I Г. . inilpmwin .1 I'., Sicptinov MM., Trokopcnko V.M., Oparina T.I. Ihe effect of toluene on hypothalamic teimlation of reproductive function in female ats Int J l)e\l. NeuT.isciencc - IW - Vol I I. - Suppl. I. - 231. ^i>n-iw\'\k\ .11 Bioj.'criic amines vaiiations in hypothalamic structures as a result of :htonic toluene expnsuie // Ihe 8th Int. Congress of the Czccli and Slovac ч'ешосЬет Soe Abst - l'W>. . I'.SO.

4. Арутюнян A.B., Степанов M.Г., Коре невский A.B. Нарушение гипоталамическс регуляции репродуктивной функции самок крыс под влиянием толуола // Ma XXV науч. сессии НИИАГ РАМН «Актуальные вопросы физиологии патологии репродуктивной функции женщины». - СПб, 1996-1997. - С.20-21.

5 Арутюнян A.B., Степанов Ai.Г., Кореневский A.B., Прокопенко В.М., Опарш Т.И., Бурмистров С.О. Нарушение гипоталамической регуляц* репродуктивной функции под влиянием ксенобиотиков // Мат. И съезда биохщ общества РАН. - М„ 1997. - С.400-401.

6. Arutjuiiyan А. V., Stepanov Ai.G., Korenevsky A.V., Prokopenko V.M., Oparina T. The disturbances of circadian rhythms hypothalamic regulation in female rats und the influence of xenobiotics // Teelken A.W., Korf J. (Eds.) Neurochemistry: cellula molecular and clinical aspects! - N.Y.: Plenum Press, 1997. - P.529-534.

7. Arutjunyan A. V., Stepanov Ai.G., Korenevsky A. V., Oparina T.I. Prokopenko V.A. Burmislrov S.O., Senichenkova I.N. Circadian rhythms in hypothalamus are alterir under the influence of xenobiotics // Joint Meeting of the 16th Bien. Meeting of tl Int. Soc. for Neurochem. and 28th Ann. Meeting of the Amer. Soc. for Neurochem Abst. - 1997.-S126A. ;

8. Арутюнян A.B., Степанов М.Г., Кореневский A.B., Прокопенко B.M., Onapui, Т.Н., Бурмистров С.О. Влияние экологически неблагоприятных факторов г репродуктивную систему // Вестник Рос асс. акушеров-гинекологов. - 1997. №4 - С.28-31.

9 Степанов М.Г., Кореневский A.B., Арутюнян A.B. Изменение биоритме нейромедиаторов как одна из причин нарушения центральной регуляци репродуктивной функции в неблагоприятных экологических условиях // Ma VIII междун. симпозиума «Эколого-физиологические проблемы адаптации: Москва, 27-30 января 1998 г. - С.358-359.

Тип M nip /ОС. ¿'J " y¿