Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Влияние детоксикантов растительного происхождения на аккумуляцию антропогенных загрязнителей (свинца и кадмия) в организме крыс

ВАК РФ 03.02.08, Экология (по отраслям)

Автореферат диссертации по теме "Влияние детоксикантов растительного происхождения на аккумуляцию антропогенных загрязнителей (свинца и кадмия) в организме крыс"

На правах рукописи

Васильцова Ирина Васильевна

ВЛИЯНИЕ ДЕТОКСИКАНТОВ РАСТИТЕЛЬНОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯ НА АККУМУЛЯЦИЮ АНТРОПОГЕННЫХ ЗАГРЯЗНИТЕЛЕЙ (СВИНЦА И КАДМИЯ) В ОРГАНИЗМЕ КРЫС

03.02.08 - экология (биология)

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

1 6 ИЮН 2011

Красноярск-2011

4850243

Работа выполнена на кафедре химии ФГОУ ВПО «Новосибирский государственный аграрный университет».

Научный руководитель

доктор биологических наук, профессор Бокова Татьяна Ивановна

Официальные оппоненты:

доктор биологических наук, член-корреспондент РАСХН, профессор Мотовилов Константин Яковлевич

доктор биологических наук, профессор Лесовская Марина Игоревна

Ведущая организация -

ФГАОУ ВПО «Сибирский федеральный университет»

Защита состоится «30» июня 2011 г. в 9 0 часов на заседании диссертационного совета Д 220.037.04 при ФГОУ ВПО Красноярский государственный аграрный университет по адресу: 660049, г. Красноярск, проспект Мира, 90. Тел./факс: (391)227-36-09.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГОУ ВПО «Красноярский государственный аграрный университет».

Автореферат разослан 2011 г.

Ученый секретарь диссертационного совета, доктор биологических наук, профессор

Г.А. Демиденко

Актуальность темы. Отрицательные антропогенные факторы воздействуют не только на экосистемы, но и способствуют снижению здоровья на индивидуальном и популяционном уровнях, росту специфической патологии и появлению новых форм экологических болезней (Экосинформ. Государственный доклад о состоянии здоровья населения РФ, 1993; Киприянов H.A., 1997; Кравченко О. К., 1998; Панин М.С., 2002; Дабахов М.В., 2005; Комаров В.И., 2006).

Значительную группу токсикантов, во многом определяющую антропогенное воздействие на экологическую структуру среды и на самого человека, составляют тяжелые металлы и их соединения, т.к. они не разлагаются, включаются в пищевые цепи и аккумулируются в живых организмах (Авцын А.П., 1991; Колесников В.А., Колесникова Е.В., 2002).

В связи с этим весьма актуальна проблема детоксикации организма. Перспективными технологическими приемами являются поиск и внедрение в производство субстанций природного происхождения, обладающих одновременно технологической и физиологической функциональностью (Бокова Т.Н., 2004; Носенко Д.Л., 2007; Желтышева О.С., 2008; Коршунова В.В., 2010).

Перспективу в данном направлении представляет природное сырье, богатое биологически активными веществами, витаминами и обладающее способностью связывать и выводить токсичные соединения. Эффективность биологически активных веществ заключается в том, что они содержатся в растительном сырье в естественных комплексах, прошедших биологический фильтр, и не являются чужеродными для человека (Телятьев В.В., 1991; Вахонина Т.В., 1995; Березовская Ю.В., 2002; Прида А.И., 2004; Тимофеева В.Н., 2006).

Поиск новых детоксикантов растительного происхождения является актуальным.

Цель исследования - изучить влияние прополиса (Propolis), листьев и почек березы (Betula pendula), почек и хвои сосны (Pinus sylvestris L.) и их экстрактов на аккумуляцию антропогенных загрязнителей (свинца и кадмия) в организме лабораторных животных.

Задачи исследований:

1. Определить фоновое содержание токсичных элементов в прополисе, почках и листьях березы, почках и хвое сосны по Новосибирской области.

2. Изучить способность прополиса, почек и листьев березы, почек и хвои сосны связывать ионы свинца и кадмия в опытах in vitro.

3. Установить антиоксидантную активность препаратов на основе прополиса {Propolis), листьев и почек березы (Betula pendula), почек и хвои сосны (Pinus sylvestris L.).

4. Определить влияние природных объектов (прополиса, почек и листьев березы, почек и хвои сосны) на снижение содержания свинца и кадмия в опытах in vivo.

5. Установить воздействие прополиса, почек и листьев березы, почек и хвои сосны на биохимические и физиологические показатели лабораторных животных при интоксикации тяжелыми металлами.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Растения Новосибирской области содержат свинец и кадмий в концентрации, не превышающей ПДК. Миграция тяжелых металлов из сырья в экстракты незначительная.

2. Обоснование снижения концентрации свинца и кадмия прополисом, почками и листьями березы, почками и хвоей сосны на модельных растворах. Уменьшение содержания свинца и кадмия при скармливании растительных экстрактов в органах и тканях лабораторных животных как подтверждение их сорбционных свойств.

3. Использование препаратов на основе прополиса, почек и листьев березы, почек и хвои сосны на фоне повышенного содержания свинца и кадмия в рационе животных улучшает показали роста и развития и нормализует биохимические показатели крови крыс.

Научная новизна. Впервые получены данные о содержании свинца и кадмия в почках и листьях березы (Betulapendula), почках и хвое сосны (Pinns sylvestris L.) по Новосибирской области. Результаты позволяют прогнозировать содержание свинца и кадмия в данной экосистеме в случае антропогенного загрязнения.

В опыте in vitro установлены наиболее эффективные детоксиканты растительного происхождения с целью максимального уменьшения содержания ионов свинца и кадмия в растворах.

Впервые исследованы изменения содержания антропогенных загрязнителей (свинца и кадмия) в органах и тканях лабораторных животных на фоне интоксикации тяжелыми металлами при использовании экстрактов на основе прополиса {Propolis), листьев и почек березы (Betula pendula), почек и хвои сосны (Pinus sylvestris L.).

Практическая значимость. Предложены научно обоснованные способы детоксикации тяжелых металлов в растворах. Доказано, что прополис, почки и листья березы, почки и хвоя сосны уменьшают подвижность ионов тяжелых металлов и переход их в экстракты.

Результаты суммарной антиоксидантной активности природного сырья позволяют рекомендовать их для практического использования при комплексной терапии свободнорадикальных патологий, нормализации обмена веществ в организме животных.

При использовании экстрактов прополиса, почек и листьев березы, почек и хвои сосны в организме лабораторных животных аккумуляция свинца снижается на 13,7-76,2%, кадмия - на 10,4-90,5%.

Работа выполнялась в соответствии с планом НИР № 01200962244 «Изучить влияние биологически активных детоксикантов растительного происхождения на аккумуляцию антропогенных загрязнителей в организме крыс».

Подана заявка на изобретение № 2010129884 «Способ одновременного выведения свинца и кадмия из организма лабораторных животных».

Апробация работы. По теме диссертации опубликовано 20 печатных работ, в том числе 3 в изданиях, рекомендованных ВАК. Результаты исследований представлялись на международных, региональных научных и научно-практических конференциях: Краснообск, 2008, 2009; Уфа-Абзаково, 2008; Красноярск, 2009; Абакан, 2009; Сургут, 2009; Новосибирск, 2009; Орел, 2009; Омск, 2009; Кемерово, 2009; Семей, 2010; Барнаул, 2010.

Структура и объем работы. Работа состоит из введения, обзора литературы, материала и методики исследований, результатов исследования и их обсуждения, заключения, выводов, предложений, списка использованной литературы и приложений. Диссертация изложена на 127 страницах, включает в себя 26 таблиц и 18 рисунков. Библиографический список состоит из 234 источников, из них 22 на иностранных языках.

Личный вклад автора. Представленная работа является обобщением научных исследований, проведенных автором лично. Автор принимала активное личное участие при проведении исследований, систематизации, обработке, анализе и интерпретации полученных результатов.

Благодарности. Автор выражает благодарность научному руководителю доктору биологических наук, профессору Т.И. Боковой за ценные советы и помощь в проведении работы; сотрудникам вивария ФГУ «ННИИТО Росмедтехнологий» за помощь при проведении физиологического опыта на лабораторных животных, сотрудникам ООО «НПП Полиант» г.Томска за методические консультации по определению биологической активности природных объектов.

Глава 1. Литературный обзор

Представлен аналитический обзор современной отечественной и зарубежной литературы по антропогенным загрязнителям, включая тяжелые металлы (ТМ), особое внимание уделено свинцу и кадмию.

Проанализированы основная антиоксидантная защитная система организма, физиологически активные группы природных объектов, содержание биологически активных веществ в природных объектах. Обоснована возможность использования биологически активных веществ, содержащихся в прополисе, почках и листьях березы, почках и хвое сосны, в качестве детоксикантов растительного происхождения.

Глава 2. Материал и методы исследований

Исследования проведены в 2007 - 2010 гг. Экспериментальная часть работы проводилась в Новосибирском государственном аграрном университете, в условиях вивария ФГУ «ННИИТО Росмедтехнологий» и на базе ООО «НПП Полиант» г. Томска (рис.1).

Первая серия экспериментов направлена на оценку содержания свинца и кадмия в прополисе, почках и листьях березы, почках и хвое сосны, собранных в различных районах Новосибирской области, и в их 40%-х спиртовых экстрактах, а также на определение комплексообразующей способности природного сырья по отношению к кадмию и свинцу на модельных растворах. Опыт проводился по методике И.Г. Мохначева.

Во второй серии экспериментов определена антиоксидантная активность прополиса, почек и листьев березы, почек и хвои сосны с целью выявления препаратов, обладающих наивысшей антиоксидантной активностью. Антиоксидантную активность (АОА) экстрактов растительных препаратов определяли методом катодной вольтамперометрии, на анализаторе АОА «Антиоксидант».

Для модельных исследований третья серия экспериментов проведена на 7 группах крыс (род Яаинч, семейство мышеобразных Мипс1ае, линия \Vistar) в возрасте 8 недель. Схема опыта представлена в табл. 1.

Во всех сериях экспериментов свинец и кадмий определяли методом инверсионной вольтамперометрии на приборе ТА-07.

Таблица 1. Схема физиологического опыта

Группа Режим кормления, день эксперимента

1 -10 11-42

Контрольная Основной рацион (ОР)

1-я опытная ОР

2-я опытная ОР+25,0 мг РЬ/кг массы + 2,5 мгС(1/кг массы ОР + 0,5 мл экстракта прополиса

3-я опытная ОР + 0,5 мл экстракта почек березы

4-я опытная ОР + 0,5 мл экстракта листьев березы

5-я опытная ОР + 0,5 мл экстракта хвои сосны

6-я опытная ОР + 0,5 мл экстракта почек сосны

7-я опытная ОР + 0,5 мл спирта

Результаты исследований обработаны методами вариационной статистики на персональном компьютере с помощью пакета прикладных программ З^ОЕСОЯ (Лакин Г.Ф., 1973; Сорокин В.Г., 1992; Васильева Л.А., 2001).

Установление

влияния растительного сырья на снижение

концентрации РЬ и Cd в опытах in vitro

Определение загрязнений ТМ в системе природный объект - экстракт

Определение биологической активности

Установление

влияния растительных экстрактов на снижение концентрации РЬ и Сс! в организме лабораторных животных

1

Объекты исследования: сырье природного пр березы, почки сосны, хвоя сосны), растительн линии оисхождения (прополис, почки березы, листья ые экстракты, лабораторные животные (крысы \Vistar)

Изучаемые показатели

Безопасность

Антиоксидантн ая активность

Рост и развитие животных

Содержание РЬ и Cd в органах и тканях

свинец кадмий

водных экстрактов спиртовых экстрактов

живая масса масса

внутренних органов

X

Биохимический анализ крови

печень

почки

селезенка

сердце

мышечная

ткань

костная

ткань

общий

белок

альбумин

холестерин

мочевина

щелочная

фосфатаза

глюкоза

кальций

фосфор

Выводы и предложения

Рис. 1. Общая схема исследований

Глава 3. Результаты исследований и их обсуждение 3.1. Содержание свинца и кадмия в природном сырье

Новосибирская область обладает значительным экономическим потенциалом, что обусловливает повышенную техногенную нагрузку на окружающую среду. Получены экспериментальные данные об аккумуляции свинца в природном сырье (табл. 2).

Таблица 2. Содержание свинца в природном сырье и его экстрактах

Изучаемый объект: сырье, мг/кг экстракт (М±т)*10'2, мг/л Район сбора

Новосибирский Коченевский Чулымский Краснозерский

Прополис 2,95±0,20*** 2,6±0,5 1.72±0.15*** 1,8±0,3 0.56±0.07*** 1,0±0,2 0.17 ±0.01 1,1 ±0,2

Березовые почки 1.30±0.12*** 1,5±0,3 1.13±0.11»** 2,0±0,3 0.46±0.01*** 1,1±0,3 0.08±0.01*** 0,9±0,1

Листья березы 1.44±0.10*** 1,7±0,4 1.36±0.11** 1,9±0,3 0,69±0.03*** 1,3±0,2 0.23±0.02 1,1 ±0,2

Почки сосны 1,41±0.10*** 2,5±0,3 0.96±0.09** 2,1 ±0,2 0.65±0.08* 2,0±0,1 0.38±0.05 1,6±0,2

Хвоя сосны 1,00±0,13** 1,4±0,3 0,75±0,07** 1,9±0,4 0.58±0.06* 1,2±0,3 0.27±0.05 2,1±0,4

*р>0,95; **р>0,99; ***рг0,999.

Самое высокое содержание свинца отмечалось в Новосибирском районе, где напряженная экологическая ситуация: в прополисе в 23,4 раза больше (р > 0,999), чем в условно чистой зоне; в почках березы в 15,9 раз выше (р > 0,999), в листьях березы - в 6,3 (р > 0,999), в почках сосны - в 1,7 (р > 0,999), в хвое -в 3,7 раза (р > 0,99) больше условно чистой зоны. При сравнении табличных данных отмечено более высокое содержание свинца в листьях березы, чем в почках, в 1,1 - 2,8 раза; концентрация свинца в почках сосны выше, чем в хвое, в 1,1 - 1,4 раза.

Концентрация кадмия в прополисе в Новосибирском районе превышала этот показатель в условно чистой зоне в 25,0 раз (р > 0,999), в березовых почках - в 13,8 (р > 0,95), в листья березы - в 8,5 (р > 0,95), в почках сосны - в 9,9 (р > 0,99), в хвое сосны - в 15,7 раза выше контрольного значения (р > 0,99). При сравнении табличных данных отмечено более высокое содержание кадмия в листьях березы, чем в почках, в 1,1 - 2,1 раза. Концентрация кадмия в почках сосны выше, чем в хвое, в 1,8 - 3,6 раза.

Уровень содержания свинца и кадмия не превышал значений ПДК, предусмотренных для данных природных объектов. В результате исследований установлено, что содержание свинца и кадмия в экстрактах изучаемых образцов было до 137 раз меньше, чем в самом сырье и не превышало ПДК, нормируемую СанПин 2.3.2.1078-01.

3.2. Влияние растительного сырья на детоксикаиию свинца и кадмия в

опытах in vitro

Результаты исследований на модельных растворах по определению влияния растительного сырья по отношению к ионам свинца и кадмия представлены в табл. 3.

Таблица 3. Остаточная концентрация ионов свинца и кадмия после взаимодействия с растительным сырьем, (М ±т)*10"', мг/л

Вариант Концентрация ионов

свинец кадмий

150 мл бидистилированной воды + 100 мл солей кадмия или свинца 15,8±0,8 1,35±0,04

150 мл бидистилированной воды + 1 г прополиса + 100 мл соли кадмия или свинца 6,7±0,2*** 1,11 ±0,08*

150 мл бидистилированной воды + 1 г почек березы + 100 мл соли кадмия или свинца 7,0±0,5*** 1,15±0,06*

150 мл бидистилированной воды + 1 г листья березы + 100 мл соли кадмия или свинца 5,9±0,7*** 1,10±0,04**

150 мл бидистилированной воды + 1 г почек сосны + 100 мл соли кадмия или свинца 5,2±0,2*** 0,10±0,03**

150 мл бидистилированной воды + 1 г хвои сосны + 100 мл соли кадмия или свинца 4,3±0,1*** 1,22±0,02*

*р>0,95; **р>0,99; ***р>0,999.

Наиболее эффективно снижалось содержание ионов свинца с использованием хвои сосны - от 71,5 до 78,4% (р>0,999). При использовании почек сосны концентрация ионов свинца снижалась от 57,6 до 67,4% (р>0,999), почек березы - от 52,3 до 59,4 (р>0,999), прополиса - от 52,3 до 57,6% (р>0,999). Использование листьев березы снижало концентрацию ионов свинца от 56,3 до 62,4% (р>0,999). Результаты исследований свидетельствуют о том, что растительное сырье способно сорбировать ионы свинца. При использовании почек сосны происходило снижение содержания ионов кадмия от 9,0 до 26,0 % (р > 0,99). Применение почек березы снижало концентрацию ионов кадмия от 8,8 до 14,8% (р<0,01). Снижение остаточной концентрации ионов кадмия наблюдалось и при использовании прополиса, листьев березы, хвои сосны: от 7,1 до 17,7; от 18,0 до 19,3; от 8,6 до 17,1% (р<0,05) соответственно. По результатам исследований была доказана целесообразность применения прополиса, почек и листьев березы, почек и хвои сосны для детоксикации свинца и кадмия.

3.3. Определение биологической активности природных объектов

Биологическая эффективность экстрактов определяется особенностями химической структуры соединений, входящих в экстракт, которые могут инактивировать активные кислородные радикалы. Проведена оценка

суммарной антиоксндантной активности (САОА) различных растений флоры Сибири (рис. 2).

-зJ i г 3 4 5

Сырье: 1-прополис, 2-почки березы, 3-листья березы, 4-почки сосны, 5-хвоя сосны

Рис. 2. Коэффициенты суммарной антиоксндантной активности водных и водно-спиртовых экстрактов природного сырья, К мкмоль/л*мин

Исследования САОА водных и водно-спиртовых извлечений из сырья природного происхождения показали, что спиртовые экстракты проявляют наиболее высокую САОА.

3.4. Оценка влияния экстрактов растительного сырья на детоксикацию свинца и кадмия в опыте in vivo

Получены данные по эффективности применяемых детоксикантов под воздействием повышенных доз кадмия и свинца в организме крыс (табл. 4).

Использование экстракта прополиса уменьшило концентрацию кадмия в органах и тканях крыс от 27,8 до 89,1% (р<0,001) по сравнению с животными 1-й опытной группы. По отношению к кадмию экстракт листьев березы показал себя эффективнее, чем экстракт почек: содержание токсиканта во внутренних органах снизилось от 59,3 до 88,0% (р<0,001) по отношению к животным 1-й группы.

Применение в качестве детоксиканта экстракта хвои сосны снижало концентрацию кадмия в органах и тканях лабораторных животных от 27,8 до 90,5% (р<0,05; 0,001) относительно крыс 1-й опытной группы, нормализуя содержание металла в сердце, почках, селезенке и печени. Менее эффективно произошло снижение ионов кадмия в органах лабораторных животных при применении экстракта почек сосны - от 45,8 до 89,2% (р<0,05-0,001) по сравнению с другими детоксикантами.

Использование экстракта прополиса уменьшило концентрацию свинца в органах и тканях крыс от 13,7 до 73,8% (р<0,05-0,001) по сравнению с 1-й группой. По отношению к свинцу экстракт листьев березы показал себя эффективнее, чем экстракт почек: содержание токсиканта во внутренних органах снизился от 43,9 до 76,2% (р<0,05-0,001). Применение в качестве детоксиканта экстракта хвои сосны снижало концентрацию свинца в органах и тканях лабораторных животных от 30,1 до 71,4% (р<0,05; 0,01) относительно

крыс 1-й группы, нормализуя содержание металла в сердце, почках, селезенке и печени. Менее эффективно произошло снижение ионов свинца в органах лабораторных животных при применении экстракта почек сосны - от 40,5 до 60,0% (р<0,05; 0,01) по сравнению с другими используемыми детоксикантами.

Таблица 4. Содержание кадмия в органах и тканях лабораторных животных, (М ±т)*10 "2, мг/кг

Группа Сердце Мышечная ткань Селезенка Печень Почки

Контрольная 0,49±0,04 0,16±0,03 0,21±0,07 0,25±0,06 0,64±0,08

1-я опытная 3,59±0,16*** 0,31±0,07 0,54±0,07* 7,60±0,14*** 33,48±0,26***

2-я опытная 0,39±0,09 0,17±0,02 0,31±0,03 2,41±0,11*** 24,17±0,36***

3-я опытная 0,28±0,05* 0,21±0,04 0,37±0,05 3,58±0,28*** 30,01±1,17***

4-я опытная 0,42±0,07 0,19±0,04 0,22±0,03 2,19±0,36*** 17,76±1,67***

5-я опытная 0,35±0,05 0,18±0,03 0,24±0,03 2,87±0,47*** 23,79±1,33***

6-я опытная 0,45±0,07 0,27±0,02* 0,29±0,04 2,78±0,27*** 19,97±1,93***

7-я опытная 2,11±0,48*** 0,28±0,03* 0,5б±0,06* 6,25±0,90** 31,74±1,86***

р<0,05; ** р<0,01; *** р<0,001.

Масса крыс после нагрузки ТМ была меньше на 3,5-4,5%, чем масса животных контрольной группы (р<0,05). Взвешивание животных во время физиологического опыта не обнаружило достоверной разницы по живой массе между крысами контрольной группы и животными, получавшими растительные экстракты.

Среднесуточный прирост крыс в исследуемых группах на протяжении всего опыта колебался от 2,1 до 2,6 г. Результаты эксперимента показали, что токсичные элементы влияют на величину среднесуточного прироста живой массы крыс, уменьшая ее на 17,5%. В сравнении с крысами 1-й опытной группы экстракт прополиса нормализовал массу тела животных на 16,1%, почек березы - на 5,5, листьев березы - на 21,2, почек сосны - на 14,8, хвои сосны - на 12,9%. Наиболее эффективными детоксикантами, нормализующими физиологическое развитие животных, являются экстракты прополиса, листьев березы, почек и хвои сосны.

Данные по массе внутренних органов относительно массы тела животных представлены на рис. 3.

Отмечено увеличение массы почек на 19,5% (р<0,001) в 1-й опытной группе по сравнению с животными контрольной группы. У животных, получавших растительные экстракты, масса почек увеличилась незначительно: от 7,3 до 12,3% (р<0,05; р<0,01). По сравнению с 1-й опытной группой у животных 4, 5, 6-й опытных групп масса почек уменьшилась от 9,0 до 13,2% (р<0,05; р<0,01), то есть наблюдалась тенденция к нормализации массы органа.

к 1 2 3 4 5 6 Группа

□ сердце 0 почки Щ селезенка Рис. 3. Масса внутренних органов, г на 100 г живой массы

У крыс 1-й группы наблюдалось увеличение массы селезенки на 26,7% (р<0,001); у животных 7-й группы, получавших ТМ и водный раствор спирта, отмечалось повышение массы селезенки на 24,2% (р<0,001) относительно животных контрольной группы. Во 2 - 4-й группах, получавших растительные экстракты, отмечалось повышение массы селезенки от 8,6 до 13,4% относительно крыс контрольной группы. Нормализация массы селезенки наблюдалась у крыс 5, 6-й групп: этот показатель достоверно не отличался от показателя контрольной группы (р>0,05).

Под воздействием повышенных концентраций свинца и кадмия произошло увеличение массы печени крыс 1-й труппы на 21,0% относительно животных контрольной группы (р<0,001). Значительное увеличение массы печени наблюдалось у крыс в 7-й группе, подвергшейся токсикации ТМ и этанолом, - на 22,5% (р<0,01). У крыс 2, 3, 6-й групп печень увеличилась на 8,3, 15,8, 11,5% по сравнению с животными контрольной группы (р<0,05; р<0,01). Экстракты листьев березы и хвои сосны проявили свое антитоксичное действие у крыс 4 и 5-й опытных групп, у которых масса печени достоверно не отличалась от массы печени крыс контрольной группы (р>0,05). Растительные экстракты положительно влияли на массу печени: относительно лабораторных животных 1-й группы, в остальных опытных группах произошло уменьшение массы печени: во 2-й группе - на 13,9% (р<0,001), в 4-й - на 16,3 (р<0,001), в 5-й - на 11,5 (р<0,001), в 6-й группе - на 10,7% (р<0,01).

У животных, подвергавшихся свинцовой и кадмиевой интоксикации, отмечалась тенденция к увеличению массы внутренних органов. Однако в группах, где добавляли детоксиканты на основе экстрактов природного сырья, отмечалась тенденция к снижению массы органов, по сравнению с группой, получавшей только тяжелые металлы.

Биохимические показатели сыворотки крови крыс представлены в табл.5.

Таблица 5. Биохимические показатели сыворотки крови

Группа Общи й белок, г/л Альбу мин, г/л Мочеви на, моль/л Глюкоза, ммоль/л Холестер ин, ммоль/л Кальций, ммоль/л Фосфор, ммоль/л

Контрольная 75±1 33±1 8,3±0,3 6,75±0,31 1,41±0,12 2,2410,05 1,3410,07

1 -я опытная 64±1** 24±1** 6,7±0,4* 3,94±0,23** 2,15±0,07** 2,7610,11* 2,1110,14*

2-я опытная 70±2 21 ±2 7,9±0,3 5,52±0,50 1,6110,13 2,57Ю,09* 1,73±0,09*

3-я опытная 6811* 2611** 7,5±0,2 4,2010,46* 1,7610,10 2,6910,10* 1,7910,06*

4-я опытная 72±1 30±1 8,510,5 6,01±0,62 1,4810,12 2,3110,07 1,4410,11

5-я опытная 7212 31±2 8,4±0,4 5,8310,48 1,5710,08 2,4210,12 1,5210,08

6-я опытная 6611" 2512* 7,0±0,5 4,35Ю,39** 1,8410,09* 2,6110,14 1,8210,06*

7-я опытная 61±2** 22±2» 6,6±0,3* 4,18±0,27** 2,28±0,05** 2,45±0,22 1,77±0,13

р<0,05; ** р<0,01, *** р<0,001.

У животных 1-й группы при интоксикации наблюдалось снижение концентрации общего белка на 14,7% (р<0,01). Значительное снижение уровня общего белка в крови отмечено у крыс 7-й группы, получавшей, кроме ТМ, водный раствор спирта: на 18,7% (р<0,01). При введении животным экстракта почек березы и почек сосны концентрация белка уменьшилась на 9,3 (р<0,05) и 12,0% (р<0,01) соответственно относительно животных контрольной группы. Во 2, 4 и 5-й группах содержание общего белка восстановилось до значения контрольной группы, а при добавлении в рацион экстрактов листьев березы и хвои сосны общий белок увеличился на 11,1% (р<0,05) относительно животных 1-й группы.

Снижение концентрации альбумина наблюдалось в 1-й опытной группе на 29,0, в 7-й - на 33,3% (р<0,01) относительно интактных животных. Менее сильное снижение отмечалось у крыс, получавших экстракты почек березы и сосны: на 21,2 (р<0,01) и 24,2% (р<0,05) соответственно. Данный показатель нормализовался у животных 2-й опытной группы, рацион которых содержал экстракт прополиса (р>0,05). Введение экстрактов листьев березы и хвои сосны повышало содержание альбумина относительно 1-й опытной группы на 25,0 и 22,6% (р>0,05) соответственно.

Снижение содержания мочевины наблюдалось в 1-й группе на 19,3%, в 7-й группе на 20,5 (р<0,05). Вследствие действия экстрактов у лабораторных животных 2 - 6-й групп концентрация мочевины восстановилась до значения контрольной группы (р>0,05).

В результате скармливания опытным животным повышенных доз свинца и кадмия наблюдалось уменьшение концентрации глюкозы в сыворотке крови на 41,6% (р<0,01) в 1-й опытной группе, на 37,3 (р<0,05) - в 3-й, на 35,6 (р<0,01) - в 6-й, на 38,1 (р<0,01) - в 7-й, что согласуется с нарушением функции печени и снижением уровня белка, а у крыс 2, 4, 5-й опытных групп содержание глюкозы увеличилось в 1,4-1,5 раза относительно животных 1-й группы (р<0,05).

Концентрация холестерина в сыворотке крови увеличилась у крыс 1-й опытной группы на 34,4% (р<0,01), 6-й - на 23,4 (р<0,05), 7-й - на 38,2 (р<0,01) относительно животных контрольной группы. В остальных опытных группах концентрация холестерина достоверно не отличалась от данного показателя у крыс контрольной группы (р>0,05). Относительно 1-й группы концентрация холестерина уменьшилась во 2 - 5-й группах от 18,1 до 31,2% (р<0,05).

Резкое снижение активности щелочной фосфатазы в 1-й группе животных на 51,7%, в 7-й - на 53,3 (р<0,001) по сравнению с контрольной группой свидетельствует о нарушении функции печени, почек. Применение экстрактов листьев березы и хвои сосны в 4 и 5-й группах крыс восстановило этот показатель до контрольного значения, смягчив токсичное действие свинца и кадмия.

Результаты биохимического исследования показали, что во всех опытных группах баланс кальция и фосфора был нарушен. В контроле соотношение кальций : фосфор равнялось 1:1,7, в 7-й группе 1:1,4, в 1-й опытной группе оно еще больше сдвинулось к фосфору и составило 1:1,3, а добавление детоксикантов в опытных группах способствовало улучшению этого показателя: во 2-й - 1,5:1; в 3-й - 1,5:1; в 4-й- 1,6:1; в 5-й- 1,6:1; в 6-й- 1,4:1.

Заключение

Проведенные исследования загрязнения тяжелыми металлами природных объектов дают информацию о распространении металлов в различных районах Новосибирской области. Полученные результаты суммарной антиоксидантной активности сырья природного происхождения свидетельствуют о высокой антиоксидантной активности исследуемых объектов.

Систематизируя литературные данные и собственные исследования, установили, что прополис, почки и листья березы, почки и хвоя сосны показали достаточно эффективные результаты по уменьшению аккумуляции свинца и кадмия на модельных растворах. По результатам проведенных исследований доказана целесообразность применения прополиса, почек и листьев березы, почек и хвои сосны для детоксикации свинца и кадмия.

В физиологическом опыте рассматривали совместное влияние тяжелых металлов свинца и кадмия на организм крыс и изменение содержания тяжелых металлов под влиянием растительных экстрактов, которые животные получали в качестве детоксикантов. Исследования, показали, что изучаемые экстракты обладают детоксикационной способностью по отношению к ионам свинца и кадмия.

Выводы:

1. Установлена зависимость содержания тяжелых металлов от антропогенной нагрузки и удаленностью от мегаполиса. Наиболее высокий уровень содержания свинца и кадмия обнаружен в образцах исследуемых природных объектов в Новосибирском районе, где отмечается напряженная экологическая ситуация. Наименьший уровень тяжелых металлов - в

Краснозерском районе, в соответствии положению «розы ветров» и наиболее удаленного от мегаполиса.

2. Выявлено отсутствие миграции тяжелых металлов из сырья в экстракты. Содержание свинца в экстрактах природного сырья составляло от 0,010 до 0,026 мг/л, кадмия - от 0,0010 до 0,0036.

3. Сырье природного происхождения снижало концентрацию ионов свинца в модельных растворах на 52,3-78,4, кадмия на 7,1-26,0%. Наиболее эффективно содержание ионов свинца снижалось при использовании хвои сосны, ионов кадмия - при использовании почек сосны. В результате исследований установлено, что растительное сырье более эффективно связывает ионы свинца, чем кадмия.

4. Установлено, что все образцы экстрактов прополиса, почек и листьев березы, почек и хвои сосны обладают высокой антиоксидантной активностью. Наивысшей антиоксидантной активностью обладают 96%-е спиртовые экстракты прополиса, почек березы, 70%-е спиртовые экстракты почек и хвои сосны, 40%-е спиртовые экстракты листьев березы.

5. Установлено, что все экстракты на основе природного сырья проявили свои детоксикационные свойства по отношению к ионам свинца и кадмия, однако наиболее эффективными детоксикантами свинца и кадмия являются экстракты прополиса, листьев березы, хвои сосны.

6. Установлено, что органы и ткани обладают избирательностью в аккумуляции свинца: костная ткань —» почки —> печень —► сердце —» мышечная ткань —* селезенка. По степени накопления кадмия в органах и тканях крыс установлена следующая закономерность: почки —> печень —> сердце —> селезенка —> мышечная ткань —► костная ткань.

7. Включение в рацион крыс солей свинца и кадмия в повышенных концентрациях отрицательно сказывается на росте и развитии животных. Токсичные элементы влияют на величину среднесуточного прироста живой массы крыс, уменьшая его на 17,5% (р<0,05). Наиболее эффективными детоксикантами, нормализующими физиологическое развитие животных, являются экстракты прополиса, листьев березы, почек и хвои сосны.

8. Поступление в организм крыс в повышенных концентрациях свинца и кадмия приводит к негативным изменениям биохимических показателей крови лабораторных животных. Применение экстрактов природного сырья в качестве детоксикантов нормализует биохимический статус животных относительно группы крыс, подвергавшихся свинцовой и кадмиевой интоксикации.

Практические рекомендации:

1. Западно-Сибирскому центру мониторинга загрязнения окружающей среды, Новосибирскому областному комитету по экологии и природным ресурсам рекомендуем использовать результаты работы как контрольные данные при проведении мониторинговых исследований.

2. Материалы диссертационной работы используются при проведении учебного курса «Экология» в ФГОУ ВПО «Новосибирский государственный аграрный университет (акт внедрения).

3. Институту экспериментальной ветеринарии Сибири и Дальнего Востока СО РАСХН целесообразно использовать экстракты на основе природного сырья, а именно прополиса, почек и листьев березы, почек и хвои сосны при разработке методов лечения и профилактики отравлений тяжелыми металлами (свинцом и кадмием).

4. ГНУ СибНИИП СО Россельхозакадемии рекомендуем использовать полученные экстракты при разработке функциональных продуктов питания, обладающих антиоксидантными свойствами.

Основные положения диссертации опубликованы в работах:

Издания, рекомендованные ВАК РФ

1. Васшъцова И.В. Миграция свинца и кадмия в системе прополис-экстракт/ И.В. Васильцова, Т.И. Бокова, Е.И. Иванова// Вестник НГАУ. - 2009. - № 2 (10). - С.5-9.

2. Васильцова И.В. Влияние экстрактов из почек и хвои сосны на организм животных при экспериментальном токсикозе свинцом/ И.В. Васильцова// Сиб. вестник с.-х. науки. - 2010. - №9. - С. 126-129.

3. Васильцова И.В. Эффективность детоксикации организма лабораторных животных растительными экстрактами при экспериментальном токсикозе/ H.A. Шкиль, Т.И. Бокова, И.В. Васильцова// Сиб. вестник с.-х. науки. -2010. - № 10. - С. 65-70.

Из публикаций в других изданиях основными являются:

1. Васильцова И.В. Определение биологической активности растительного сырья/ И.В. Васильцова, Т.И. Бокова// Тр. XI Междунар. науч.-практ. конф. Россельхозакадемия. Сиб. отд-ние.- Новосибирск, 2008. - С. 418422.

2. Васильцова И.В. Возможность использования водных экстрактов растительного сырья в качестве биологически активных добавок/ И.В. Васильцова, Т.И. Бокова// Новейшие направления развития аграрной науки в работах молодых ученых: тр. III конф. молодых ученых СО РАСХН. -Новосибирск, 2008. - С. 445-449.

3. Васшъцова И.В. Прополис - перспективный источник биологически активных веществ, обладающих антиоксидантными свойствами/ Е.И. Короткова, O.A. Аврамчик, И.В. Васильцова// «ЭМА-2008»: материалы VII Всерос. конф. по электрохим. методам анализа с междунар. участием. -Уфа-Абзаково, 2008. - С.64.

4. Васшъцова И.В. Изучение миграции антропогенных загрязнителей в системе растительное сырье-экстракт/ И.В. Васильцова, Т.И. Бокова// Наука и

инновации XXI века: материалы IX окружной конф. молодых ученых. - Сургут, 2009.-С. 121-122.

5. Васильцова И.В. Содержание антропогенных загрязнителей (свинца и кадмия) в лекарственном сырье в зависимости от места сбора/ И.В. Васильцова, Т.И. Бокова, Л.И. Тюлюпина// II Междунар. (заоч.) науч.-практ. конф. молодых ученых «Инновационные тенденции развития агропромышленного комплекса России». - Красноярск, 2009. - С.73-77.

6. Васильцова И.В. Влияние растительных экстрактов на аккумуляцию тяжелых металлов в организме лабораторных животных/ И.В. Васильцова, Т.И. Бокова// Пища. Экология. Качество: тр. VI Междунар. науч.-практ. конф./ КемТИПП. СибНИПТИП. - Кемерово, 2009. - С. 70-72.

7. Васшьцова И.В. Влияние растительного сырья на детоксикацию свинца и кадмия в опытах in vitro/ Т.И. Бокова, И.В. Васильцова// Инновации -приоритетный путь развития АПК: сб. материалов 8-й междунар. науч.-практ. конф./ Кемеров. ГСХИ. - Кемерово, 2009. - С. 70-71.

8. Васшьцова И.В. Определение антиоксидантной активности природных объектов/ Т.И. Бокова, И.В. Васильцова// Материалы Всерос. науч.-практ. конф. «Лесной и химический комплексы - проблемы и решения». -Красноярск, 2009. - С. 349-355.

9. Васильцова И.В. Влияние растительных экстрактов на толерантность крыс к ионам свинца и кадмия/ Т.И. Бокова, И.В. Васильцова// VI Междунар. практ. конф. «Тяжелые металлы и радионуклиды в окружающей среде». - Семипалатинск, 2010. - С. 12-15.

Подписано в печать 11 мая 2011 г. Формат 60 x 84 1/16. Объем 1,0 уч. - изд. л., 1,0 усл. -печ. л. Тираж 120 экз. _Заказ №256_

Издательство НГАУ «Золотой колос» 630039, Новосибирск, ул. Добролюбова, 160, оф.106 Тел. (383)267-09-10, 2134539@mail.ru

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Васильцова, Ирина Васильевна

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Тяжелые металлы и их токсичное действие на окружающую среду

1.2. Основная антиоксидантная защитная система организма

1.3. Содержание биологически активных веществ в природных 28 объектах

1.4. Анализ литературных данных

2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1. Содержание ионов тяжелых металлов в природных объектах

3.2. Влияние растительного сырья на детоксикацию свинца и 52 кадмия в опытах in vitro

3.3. Определение биологической активности природных 54 объектов

3.4. Оценка влияния экстрактов растительного сырья на 57 детоксикацию свинца и кадмия в опыте in vivo

3.4.1. Физиологические показатели лабораторных животных при 57 хронической интоксикации свинцом и кадмием

3.4.2. Биохимические показатели крови лабораторных животных 63 при хронической интоксикации свинцом и кадмием

3.4.3. Детоксикационная способность растительных экстрактов в организме лабораторных животных

4 ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ

Введение Диссертация по биологии, на тему "Влияние детоксикантов растительного происхождения на аккумуляцию антропогенных загрязнителей (свинца и кадмия) в организме крыс"

В мировых классификаторах в настоящее время насчитывается более шести тысяч нозологических форм болезней, причем более 80% из них являются производными от экологического напряжения. Отрицательные антропогенные факторы воздействуют не только на экосистемы, но и способствуют снижению резервов здоровья на индивидуальном и популяционном уровнях, нарастанию степени психофизиологического и генетического напряжения, росту специфической патологии и появлению новых форм экологических болезней, а в некоторых регионах - нарастанию явлений депопуляции (Экосинформ. Государственный доклад о состоянии здоровья населения РФ, 1993; Кравченко О. К., 1998).

Новосибирская область обладает значительным экономическим потенциалом, что обуславливает повышенную техногенную нагрузку на окружающую среду. В таком крупном индустриальном центре, как Новосибирск, работали и работают многочисленные предприятия, загрязнявшие и загрязняющие окружающую среду тяжелыми металлами. Загрязнение почвенного покрова чаще всего происходит за счет атмосферных выбросов заводов цветной и черной металлургии, ТЭЦ, предприятий по производству оборудования, станков и т.д. В этом процессе велика доля автотранспорта. Попадая в почву, тяжелые металлы в основном закрепляются в ней. Их содержание, которое фиксируется в данный момент, есть результат накопления за годы работы местной промышленности и автотранспорта [5,11,24,42,46,206].

По данным сети мониторинга качества воздуха, Новосибирск входит в число городов, включенных Росгидрометом в перечень промышленных центров с особо высоким уровнем загрязнения атмосферы воздуха. В 2004 году город занимал двенадцатое место из 49 городов с повышенным уровнем загрязнения атмосферы [136]. В Новосибирской области в 2009 году объем выброса в воздух загрязняющих веществ составил около 592 тыс. тонн, что на 2,4 тыс. тонн выше, чем в 2008 году. По расчетам экологов, 75% городских жителей Новосибирской области проживают в условиях высокого и очень высокого уровня загрязнения атмосферы [104].

Антропогенное вмешательство в природные циклы ТМ имеет два основных следствия. Во-первых, эти элементы являются ценным и редким сырьем для высокотехнологических отраслей промышленности. Количество металлов, каждый год вовлекаемое в мировое производство, сопоставимо с их разведанными запасами. В связи с этим большое значение приобрело их вторичное использование. Во-вторых, эти металлы при избыточном попадании в объекты окружающей среды ведут себя как токсиканты и экотоксиканты [85,147,156, 183].

Многие заболевания часто являются следствием нарушения движения химических элементов по пищевой цепи [7,21]. Загрязнение тяжелыми металлами объектов биосферы является причиной накопления их в пищевом сырье животного и растительного происхождения и как следствие в организмах людей [23,29,52,97,167,179].

В связи с этим весьма актуальной является проблема детоксикации организма с помощью специальных веществ — детоксикантов. Вещества - детокси-канты должны отвечать ряду требований: не должны иметь побочных эффектов, быть дешевыми и доступными, самое главное, эффективно уменьшать в организме содержание токсиэлемента [22,57,87].

Перспективным технологическим приемом является поиск и внедрение в производство субстанций природного происхождения, обладающих одновременно технологической и физиологической функциональностью [101,166].

Перспективу в данном направлении представляют природное сырье, богатые биологически активными веществами, витаминами и обладающие способностью связывать и выводить токсичные соединения. Хотя в настоящее время имеется большое количество высокоэффективных синтетических лекарственных препаратов, лекарственные растения продолжают занимать одно из ведущих мест в арсенале лечебных средств.

Цель исследования - изучить влияние прополиса {Propolis), листьев и почек березы {Betlilapendula), почек и хвои сосны (Pinus sylvestris L.) и их экстрактов на аккумуляцию антропогенных загрязнителей (свинца и кадмия) в организме лабораторных животных.

Задачи исследований:

1. Определить фоновое содержание токсичных элементов в прополисе, почках и листьях березы, почках и хвое сосны по Новосибирской области.

2. Изучить способность прополиса, почек и листьев березы, почек и хвои сосны связывать ионы свинца и кадмия в опытах in vitro.

3. Установить антиоксидантную активность препаратов на основе прополиса {Propolis), листьев и почек березы {Betula pendula), почек и хвои сосны {Pinus sylvestris L.).

4. Определить влияние природных объектов (прополиса, почек и листьев березы, почек и хвои сосны) на снижение содержания свинца и кадмия в опытах in vivo.

5. Установить воздействие прополиса, почек и листьев березы, почек и хвои сосны на биохимические и физиологические показатели лабораторных животных при интоксикации тяжелыми металлами.

Основные положения, выносимые на защиту

1. Растения Новосибирской области содержат свинец и кадмий в концентрации, не превышающей ПДК. Миграция тяжелых металлов из сырья в экстракты незначительная.

2. Обоснование снижения концентрации свинца и кадмия прополисом, почками и листьями березы, почками и хвоей сосны на модельных растворах. Уменьшение содержания свинца и кадмия при скармливании растительных экстрактов в органах и тканях лабораторных животных как подтверждение их сорбционных свойств.

3. Использование препаратов на основе прополиса, почек и листьев березы, почек и хвои сосны на фоне повышенного содержания свинца и кадмия в рационе животных улучшает показали роста и развития и нормализует биохимические показатели крови крыс.

Научная новизна

Впервые получены данные о содержании свинца и кадмия в почках и листьях березы (Betula pendula), почках и хвое сосны {Pinus silvestris L.) по Новосибирской области. Результаты позволяют прогнозировать содержание свинца и кадмия в данной экосистеме в случае антропогенного загрязнения.

В опыте in vitro установлены наиболее эффективные детоксиканты растительного происхождения с целью максимального уменьшения содержания ионов свинца и кадмия.

Впервые исследованы изменения содержания антропогенных загрязнителей (свинца и кадмия) в органах и тканях лабораторных животных на фоне интоксикации тяжелыми металлами при использовании экстрактов на основе прополиса {Propolis), листьев и почек березы {Betula pendula), почек и хвои сосны {Pinus silvestris L.).

Практическая значимость

Предложены научно обоснованные способы детоксикации тяжелых металлов в растворах. Доказано, что прополис, почки и листья березы, почки и хвоя сосны уменьшают подвижность ионов тяжелых металлов и переход их в экстракты.

Результаты суммарной антиоксидантной активности природного сырья позволяют рекомендовать их для практического использования при комплексной терапии свободнорадикальных патологий, нормализации обмена веществ в организме животных.

При использовании экстрактов прополиса, почек и листьев березы, почек и хвои сосны в организме лабораторных животных аккумуляция свинца снижается на 13,7-76,2%, кадмия - на 10,4-90,5%.

Подана заявка на изобретение № 2010129884 «Способ одновременного выведения свинца и кадмия из организма лабораторных животных».

Работа выполнялась в соответствии с планом НИР № 01200962244 «Изучить влияние биологически активных детоксикантов растительного происхождения на аккумуляцию антропогенных загрязнителей в организме крыс».

Апробация работы

По теме диссертации опубликовано 20 печатных работ, в том числе в рецензируемых научных журналах и изданиях, определенных ВАК, - 2. Результаты исследований представлялись на международных, региональных научных и научно-практических конференциях: «Новейшие направления развития аграрной науки в работах молодых ученых СО РАСХН», Краснообск, 2008; «ЭМА-2008», Уфа-Абзаково, 2008; «Инновационные тенденции развития агропромышленного комплекса России», г. Красноярск, 2009; «Экология Южной Сибири и сопредельных территорий», Абакан, 2009; «Наука и инновации ХД1 века», Сургут, 2009; «Инновационный потенциал молодых ученых в развитии агропромышленного комплекса Сибири», Новосибирск, 2009; «Фундаментальные и прикладные исследования в АПК на современном этапе развитии химии», Орел, 2009; «Реализация государственной программы развития сельского хозяйства и регулирование рынков сельскохозяйственной продукции, сырья и продовольствия: инновации, проблемы, перспективы», Омск, 2009; «Инновации - приоритетный путь развития АПК», Кемерово, 2009; «Лесной и химический комплексы — проблемы и решения», Красноярск, 2009; «Тяжелые металлы и радионуклиды в окружающей среде», Семей, 2010; «Пища. Экология. Качество», Краснообск, 2008, 2009; «Аграрная наука — сельскому хозяйству», г.Барнаул, 2010.

Структура и объем работы

Работа состоит из введения, обзора литературы, материала и методики исследований, результатов исследования и их обсуждения, заключения, выводов, предложений, списка использованной литературы и приложений. Диссертация изложена на 129 страницах, включает в себя 26 таблиц и 18 рисунков.

Заключение Диссертация по теме "Экология (по отраслям)", Васильцова, Ирина Васильевна

выводы

1. Установлена зависимость содержания тяжелых металлов от антропогенной нагрузки и удаленностью от мегаполиса. Наиболее высокий уровень содержания свинца и кадмия обнаружен в образцах исследуемых природных объектов в Новосибирском районе, где отмечается напряженная экологическая ситуация. Наименьший уровень тяжелых металлов — в Краснозерском районе, в соответствии положению «розы ветров» и наиболее удаленного от мегаполиса.

2. Выявлено отсутствие миграции тяжелых металлов из сырья в экстракты. Содержание свинца в экстрактах природного сырья составляло от 0,010 до 0,026 мг/л, кадмия - от 0,0010 до 0,0036.

3. Сырье природного происхождения снижало концентрацию ионов свинца в модельных растворах на 52,3-78,4, кадмия на 7,1-26,0%. Наиболее эффективно содержание ионов свинца снижалось при использовании хвои сосны, ионов кадмия - при использовании почек сосны. В результате исследований установлено, что растительное сырье более эффективно связывает ионы свинца, чем кадмия.

4. Установлено, что все образцы экстрактов прополиса, почек и листьев березы, почек и хвои сосны обладают высокой антиоксидантной активностью. Наивысшей антиоксидантной активностью обладают 96%-е спиртовые экстракты прополиса, почек березы, 70%-е спиртовые экстракты почек и хвои сосны, 40%-е спиртовые экстракты листьев березы.

5. Установлено, что все экстракты на основе природного сырья проявили свои детоксикационные свойства по отношению к ионам свинца и кадмия, однако наиболее эффективными детоксикантами свинца и кадмия являются экстракты прополиса, листьев березы, хвои сосны.

6. Установлено, что органы и ткани обладают избирательностью в аккумуляции свинца: костная ткань —> почки —> печень —> сердце —> мышечная ткань —> селезенка. По степени накопления кадмия в органах и тканях крыс установлена следующая закономерность: почки —» печень —> сердце —» селезенка —» мышечная ткань —> костная ткань.

7. Включение в рацион крыс солей свинца и кадмия в повышенных концентрациях отрицательно сказывается на росте и развитии животных. Токсичные элементы влияют на величину среднесуточного прироста живой массы крыс, уменьшая его на 17,5% (р<0,05). Наиболее эффективными детоксикантами, нормализующими физиологическое развитие животных, являются экстракты прополиса, листьев березы, почек и хвои сосны.

8. Поступление в организм крыс в повышенных концентрациях свинца и кадмия приводит к негативным изменениям биохимических показателей крови лабораторных животных. Применение экстрактов природного сырья в качестве детоксикантов нормализует биохимический статус животных относительно группы крыс, подвергавшихся свинцовой и кадмиевой интоксикации.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Проведенные исследования загрязнения тяжелыми металлами природных объектов дают информацию о распространении металлов в различных районах Новосибирской области. Полученные результаты суммарной антиоксидантной активности сырья природного происхождения свидетельствуют о высокой антиоксидантной активности исследуемых объектов.

Систематизируя литературные данные и собственные исследования, установили, что прополис, почки и листья березы, почки и хвоя сосны показали достаточно эффективные результаты по уменьшению аккумуляции свинца и кадмия на модельных растворах. По результатам проведенных исследований доказана целесообразность применения прополиса, почек и листьев березы, почек и хвои сосны для детоксикации свинца и кадмия.

В физиологическом опыте рассматривали совместное влияние тяжелых металлов свинца и кадмия на организм крыс и изменение содержания тяжелых металлов под влиянием растительных экстрактов, которые животные получали в качестве детоксикантов. Исследования, показали, что изучаемые экстракты обладают детоксикационной способностью по отношению к ионам свинца и кадмия.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Васильцова, Ирина Васильевна, Новосибирск

1. Абдуллин И.Ф., Турова E.H., Будников Г.К. Органические антиоксиданты как объекты анализа// Заводская лаборатория. 2001. Т.67. №6. С. 3-13.

2. Абрамова Ж.И., Оксенгендлер Г.И. Человек и противоокислительные вещества. Л.: Наука, 1985. 230 с.

3. Аветисян Г.А. Пчеловодство/ Г.А. Аветисян. М.: Колос, 1975. 160 с.

4. Авраменко П.Т. Загрязнение почвы тяжелыми металлами и их накопление в растениях/ П.Т. Авраменко, C.B. Лукин// Агрохимических вестник. 1999. №2. С. 31-32.

5. Аврамчик OA. Закономерности процесса электровосстановления кислорода в присутствии антиоксидантов и их применение в аналитической практике: автореф. дис. . канд.хим.наук. Томск, 2006. 21 с.

6. Авцын А.П. Микроэлементозы человека : этиология, классификация, ор-ганопатология/ А.П. Авцын, A.A. Жаворонков, М.А. Риш, Л.С. Строчкова. М.: Медицина, 1991. С. 361-393.

7. Агроэкология / Под ред. В.А. Черникова. М.: Колос, 2000. 536 с.

8. Адам A.M. Природные ресурсы и экологическая безопасность Западной Сибири/А.М. Адам, Р.Г. Мамин. М.: НИА-Природа, 2001. 172 с.

9. Алданазаров А.Т. Изменения системы крови при сатурнизме. Алма-Ата, 1966. 286 с.

10. Алексеев Ю.В. Тяжелые металлы в почвах и растениях. Л.: Агропромиз-дат, 1987. 142 с.

11. Алексеенко В.А., Алещукин A.C. Цинк и кадмий в окружающей среде. М.: Наука, 1992. 200 с.

12. Андрианова Т.Г. Морфологические изменения в органах крыс при поступлении в организм соединений свинца и кадмия// Пища. Экология. Человек: материалы V Междунар. науч.-техн. конф. М.: МГУПБ, 2003. С. 238-240.

13. Асафова H.H. Физиологически активные продукты пчелиной семьи. Н.Новгород, 2001. С. 142.

14. Ахмадеев А.Н. Ветеринарная экология/ А.Н. Ахмадеев, И.М. Колесников, В.Ф. Сысоев и др./ Под ред. Д.Н. Уразаева и В.И. Трухачева. М.: Колос, 2002. 239 с.

15. Барабой В.А. Перекисное окисление и стресс/ В.А. Барабой, И.И. Брех-ман, В.А. Голотин, Ю.Б. Кудряшов. СПб.: Наука, 1992. 148 с.

16. Баранников В.Д. Экологическая безопасность сельскохозяйственной продукции/ В.Д. Баранников, Н.К. Кириллов. М.: Колос, 2005. 352 с.

17. Белова JI.M. Морфофизиологический анализ биологической активности продуктов пчелиной семьи: автореф. дис. . канд.биол.наук. Н.Новгород, 2002. 22 с.

18. Берёза пушистая Betula pubescens Ehrh. Электронный ресурс.: Экологический центр «Экосистема»/ сост. A.C. Боголюбов. [1999-2009]. www.ecosystema.ru (дата обращения 07.07.2008).

19. Березовская Ю.В. Исследование химического состава и разработка методик анализа растительного сырья некоторых видов берез: автореф. дис. . канд.хим.наук. Пятигорск, 2002. 21 с.

20. Биологическое и токсическое действие химических элементов и их неорганических соединений на организм человека: учеб. пособие/ Под ред. канд. хим. наук Т.И. Рыбкиной. НИ РХТУ им. Д.И. Менделеева. Новомосковск, 1999. 96 с.

21. Бокова Т.И. Закономерности детоксикации антропогенных загрязнителей (тяжелых металлов) в системе почва растение - животное — продукт питания человека: автореф. дис. . д-ра биол. наук. Красноярск, 2005. 31 с.

22. Бокова Т.И. Перспективы получения экологически безопасной продукции с использованием детоксикантов/ Пища. Экология. Качество: материалы II Междунар. науч.-практ. конф. Новосибирск, 2002. С. 306-308.

23. Бокова Т.И. Эколого-технологические аспекты поведения тяжелых металлов в системе почва — растение — животное — продукт питания человека. Новосибирск: 2004. 204 с.

24. Большая медицинская энциклопедия: В 30 т. АМН СССР. Гл. ред. Б.В. Петровский. 3-е изд. М.: Советская энциклопедия. Т.23. САХАРОЗА-СОСУДИСТЫЙ. Тонус, 1984. 544 с.

25. Ботаника. Энциклопедия «Все растения мира»: Пер. с англ. = Botanica / ред. Д. Григорьев и др. М.: Könemann, 2006 (русское издание). С. 142 144. — ISBN 3-8331-1621-8

26. Биологически активные продукты пчеловодства и их использование. Сборник научных трудов. Горький, 1990. 124 с.

27. Братан JI. Влияние ингредиентов растительного сырья на способность пектинов связывать кадмий / JI. Братан, Н.С. Краснова, П.И. Бульмага // Хранение и переработка сельхозсырья. 2004. №1. С. 23-25.

28. Бурлакова JI.M. Экотоксиканты в системе «почвы растения - животные» (на примере отдельных зон Алтайского края): Монография / JIM. Бурлакова, О.И. Антонова, Н.Г. Деев, Г.Г. Морковкин и др. Барнаул: Изд-во АГАУ, 2001.236 с.

29. Бурмистров А.Н. Медоносные растения и их пыльца: справочник / А.Н. Бурмистров, В.А. Никитина. М: Росагропромиздат, 1990. 92 с.

30. Бурмистрова JI.A. Тяжелые металлы и фракции прополиса / Л.А. Бурми-строва, Е.А. Вахонина // Пчеловодство. 2004. №4. С. 188-192.

31. Ваганов П.А. О содержании тяжелых металлов в продуктах пчеловодства вблизи крупного промышленного центра // Геохимия. 1998. №2. С. 138-145.

32. Васильев С.Н. Экстрактивные вещества древесной зелени Picea abies ( L ) Karst / С.Н. Васильев, В.И. Рощин, С. Фелеке //Растительные ресурсы, вып. 1-2, 1996. С. 151-175.

33. Вахонина Т.В., Бодрова Р.Н., Душкова Е.С. Контроль качества прополиса и перспективы стандартизации // Пчеловодство. 1976 № 6. С. 42 — 44.

34. Вахонина Т.В. и др. Вопросы стандартизации биологически активных продуктов пчеловодства // Биологически активные продукты пчеловодства и их использование (межвузов, сб. науч. тр.). Горьковский гос. с.-х. Институт, 1990. С. 29 37.

35. Вахонина Т.В. Незаменимая добавка к пище // Пчеловодство. 1997. №5. С. 49-51

36. Вахонина Т.В. Прополис: состав, свойства и возможности практического использования// Мин-во сельского хозяйства РСФСР. Научно-исследовательский институт пчеловодства, 1976. 144 с.

37. Вахонина Т.В. Пчелиная аптека. Санкт-Петербург: «Лениздат», 1995. С. 29 47.

38. Ведерников Д.Н., Рощин В.И., Кошкин A.B. Экстрактивные вещества березы и направления их использования // Химия и технология растительных веществ: тез. докл. Всерос. конф. Сыктывкар, 2000. С. 35.

39. Вершняк В.М., Степень P.A. Содержание и состав эфирного масла в различных органах Betula pendula Roth из Центральной Якутии// Растительные ресурсы. 1992. Вып. 3. С. 86-92.

40. Волончук С.К. Состояние и проблемы переработки растительного сырья / Пища. Экология. Качество. Сб. материалов Междунар. науч.-практ. конф. Новосибирск, 2001. С. 18-19.

41. Волошин Е.И. Аккумуляция кадмия и свинца в почвах и растениях / Е.И. Волошин // Агрохимический Вестник. 2000. № 3. С. 23-26

42. Владимиров Ю.А., Арчаков А.И. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах. М.: Наука, 1972. 252 с.

43. Владимиров Ю.А., Азизова O.A., Деев А.И., Козлов A.B., Осипов А.Н., Рощупкин Д.И. Свободные радикалы в живых системах// Итоги науки и техники. Серия биофизика / ВИНИТИ. 1991. Т.29. №1. С. 1-252.

44. Вронский В.А. Экология: словарь-справочник. Изд. 2-е, Ростов н/Д: Феникс, 2002. 576 с.

45. Гордон М.Н. Природные соединения с противовирусной активностью/ М.Н Гордон, В.Г Платонов., И.М. Прозорова// Сб. материалов симпозиума "Новые подходы к целенаправленному конструированию противовирусных препаратов". СПб., 1994. С. 18.

46. ГОСТ 28886-90. Прополис. Технические условия. М.: Госстандарт России, 1991

47. ГОСТ 51301-99. Продукты пищевые и продовольственное сырье. Инвер-сионно-вольтамперометрические методы определения содержания токсических элементов (Cd, Pb, Cu, Zn). M.: Госстандарт России, 1999.

48. Георгиевский В.П. и др. Биологически активные вещества лекарственных растений / Георгиевский В.П., Комисаренко Н.Ф., Дмитрук С.Е. Новосибирск: Наука, Сиб.отд-ие, 1990. С.ЗЗЗ.

49. Гигиенические требования безопасности и пищевой ценности пищевых продуктов. СанПин 2.3.2.10 78-01. Новосибирск , 2002. 210 с.

50. Дабахов М.В. Тяжелые металлы: экотоксикология и проблемы нормирования/ М.В. Дабахов, Е.В. Дабахова, В.И. Титова. Н-Новгород: изд-во Волго-Вятской акад. гос. службы, 2005. 164с.

51. Давыдова С.Л. Ртуть, олово, свинец и их органические производные в окружающей среде/ C.J1. Давыдова, Ю.Т. Пименова, Е.Р. Милаева. Астрахань: изд-во АГТУ, 2001. 148с.

52. Давыдова C.JI. Тяжелые металлы как супертоксиканты XXI века: учеб. пособие/ C.JI. Давыдова, В.И. Тагасов. М.: Изд-во РУДН, 2002. 140 с.

53. Дадали В.А. Минорные компоненты пищевых растений как регуляторы детоксикационных и метаболистических систем организма/ В.А. Дадали// Вест

54. Мицык В.Е. Рациональное питание и пищевые продукты/ В.Е. Мицык, А.Ф. Невольниченко. Киев: Урожай. 1994. 334 с.

55. Могунова О.В. Влияние солей тяжелых металлов на прорастание семян/ О.В. Могунова, Ю.А. Горюнова // Сб. науч. тр. ЯГСХА. 4.1. Ярославль. 1998. С. 36-40.

56. Москалев И.Ю. Минеральный обмен. М: Медицина, 1985. 287 с.

57. Мотовилов К.Я. Детоксикация тяжелых металлов в системе: почва — растение — животное продукт питания человека: метод, рекомендации/ К.Я. Мо-товилов, Т.И. Бокова, И.И. Бочкарева. Новосибирск, 2005. 39 с.

58. Мотузова Г.В. Соединения микроэлементов в почвах: системная организация, экологическое значение, мониторинг. М., Эдиториал УССР, 1999. 168 с.

59. Мохначев И.Г. Оценка комплексообразующих свойств биологических объектов/ И.Г. Мохначев, В.П. Гранатова// Хранение и переработка сельхозсы-рья. 1998. №3. С. 35-36.

60. Мур Д. В., Рамамурти Д.С. Тяжелые металлы в природных водах. М.: Мир, 1987.288 с.

61. Набиванец Ю.Б. Формы нахождения цинка и свинца в природных водах // Гидробиологический журнал. 1989. Т. 25. №3. С. 80-83.

62. Некоторые вопросы токсичности ионов металлов: Пер. с англ./ ред. Х.Зигель. М.: Мир, 1993. С. 5-23.

63. Прополис. Бухарест, 1987. 256 с.

64. Прополис. Сборник статей. Апимондия, 1990. 254 с.

65. Прополис ценный продукт пчеловодства. Бухарест: Апимондия, 1985. 176 с.

66. Просянникова О.И. Ксенобиотики: характеристика, загрязнение плодово-овощного сырья тяжелыми металлами/ О.И. Просянникова, В.М. Позняковский, Григорьева Т.И. Кемерово: Кузбассвузиздат. 2008. 219 с.

67. Посыпанов Г.С. Растениеводство /Г.С. Посыпанов, В.Е. Долгодворов, Г.В. Коренев и др.: под ред. Т.С. Посыпанов . М.: Колос, 1997. 448 с.

68. Рапп O.A. Исследование фармакологической активности препаратов березы: автореф. канд. .биол. наук. Томск, 1993. 21 с.

69. Растения, стимулирующие иммунитет/ ред. проф. Д.Н.Лазарева. Уфа, 2005. 96 с.

70. Ратников И.Н. Закономерности перехода тяжелых металлов в системе «почва — растение — животное — продукция животноводства»// Химия в сельском хозяйстве. 1995. №4. С. 25-28.

71. Результаты апробации лечебно-профилактической эффективности биологически-активной композиции из хвои Лесмина /Л.В. Осидак и др.// Традиционная медицина - 2000: Сб. материалов конгресса г. Элиста, 27-29 сентября 2000г. М., 2000. С. 173-175.

72. Рейли К. Металлические загрязнения пищевых продуктов: перевод с англ. М.:Агропромиздат, 1985. С. 3-99.

73. Реутова Е.А. Изменение биохимических и морфологических показателей крови у животных: учеб. пособие/ Е.А. Реутова, Л.Н. Стацевич. Новосибирск, 2005. 132 с.

74. Рибаров С. Гемолитическое действие свинца в опытах in vitro// Фармакология и токсикология. 1980. Т.43. №5. С.620-622.

75. Рогинский В.А. Фенольные антиоксиданты. Реакционная способность и эффективность. М.: Наука, 1988. 247 с.

76. Рыбалко К.С. Природные сесквитерпеновые лактоны. М.: Медицина, 1978. 320 с.

77. Руководство по профессиональным заболеваниям/ под ред. Н.Ф. Измеро-вой. М.: Медицина, Т. 1. 1983. 320 с.

78. Рэуце Н., Кырста С. Борьба с загрязнением почвы. М.: Агропромиздат, 1986. 221 с.

79. Скальный A.B. Диагностика, профилактика и лечение отравлений свинцом/ A.B. Скальный, А.Т. Быков, Б.В. Лимин. М.: Защита, 2002. 52 с.

80. Скальный A.B., Кудрин A.B. Радиация, микроэлементы, антиоксиданты и иммунитет. М.: Мир-Макет, 2000. 421 с.

81. Скальный A.B. Микроэлементозы человека: гигиеническая диагностика и коррекция// Микроэлементы в медицине. 2000. №1. С. 2-8.

82. Скипин Л.Н. Загрязнением кадмием и свинцом почв в зоне автомагистрали/ Л.Н. Скипин, A.A. Ваймер, Ю.А. Квашнина и др.// Плодородие. 2007. №3. С. 37-38.

83. Скопичев В.Г. Морфология и физиология животных: учебное пособие/ В.Г. Скопичев, Б.В. Шумилов. СПб.: Лань, 2004. 416 с.

84. Скопичев В.Г. Физиология животных и этология/ В.Г. Скопичев, Т.А., Т.А. Эйсымонт, Н.П. Алексеев и др. М.: Колос, 2003. 720 с.

85. Смирнов A.A. К вопросу о снижении поступления тяжелых металлов в продукцию растениеводства/ A.A. Смирнов, З.А. Кирасиров, Н.В. Криушин, Д.Н. Белов// Достижения науки и техники АПК. 2009. №5. С. 24-25.

86. Снакин В.В. Свинец в почвах и растениях России/ В.В. Снакин, A.B. Кузнецов и др.// Проблемы окружающей среды и природных ресурсов. 1998. Вып. 11. С. 73-90.

87. Соколов O.A. Экологическая безопасность и устойчивое развитие/ O.A. Соколов, В.А. Черников. Пущино: ОНТИ ПНЦ РАН, 1999. 164 с.

88. Специфическая активность фракции фенольных соединений из древесной зелени ели европейской / С.А. Фелике и др.// Грипп- XXI век: Материалы Юбилейной междунар. науч. конф. СПб. 1997. С. 57.

89. Спринчак Д.В. Детоксикация тяжелых металлов (свинца и кадмия) в системе почва — растение — животное: автореф. дис. . канд. биол. наук. Красноярск, 2005. 22 с.

90. Софронов В.Г. Морфологические и биохимические показатели крови при отравлении белых крыс соединениями свинца, кадмия и ртути В.Г.Софронов, В.В. Титов, P.M. Хасанова, Р.Ф. Набиев// Актуальные проблемы ветеринарной науки. М., 1999. С. 73-74.

91. Стеняева В.В. Сравнительное фотохимическое исследование лекарственного растительного сырья березы бородавчатой: автореф. дис. . канд. фарм. наук. Самара, 2005. 22 с.

92. Телятьев В.В. Целебные клады: растения, продукты животного и минерального происхождения Центральной Сибири и их лечебные свойства. Иркутск, 1991. 398 с.

93. Тимирбаева Е.И. Экологическая роль тяжелых металлов (цинк, кадмий, ( ртуть, свинец)/ Е.И.Тимирбаева// Проблемы экологии и экологического образования Уральского федерального округа. 2008. С. 225-229.

94. Тимофеев В. П. Старейший опыт географических культур сосны обыкновенной // Лесное хозяйство, № 8. 1974. С. 35-39

95. Тимофеева В.Н. Использование перспективного сырья для производства продуктов профилактического назначения/ В.Н. Тимофеева, M.JI. Зенкова// Хранение и переработка с.-х. сырья. 2006. №9. С. 66-68.

96. Титова В.И. Экотоксикология тяжелых металлов/ В.И. Титова, М.В. Даб-ахов, Е.В. Дабахова/ Учебное пособие. Н.Новгород: НГСХА, 2002. 135 с.

97. Титов А.Ф. Влияние тяжелых металлов на растения: эколого-физиологические аспекты/ А.Ф.Титов, В.В. Таланова, Г.Ф. Лайдинен// Наземные и водные экосистемы Северной Европы: управление и охрана. Петрозаводск. 2003.С. 152-158.

98. Токаев Э.С., Манукьян Г.Г. Сравнительная характеристика антиокси-дантной активности растительных экстрактов// Хранение и переработка сель-хозсырья. 2009. №9. С.36-38.

99. Трахтенберг И. М. Тяжелые металлы во внешней среде: современные гигиенические и токсилогические аспекты/ И.М. Трахтенберг, B.C. Колесников, В.Р. Луковенко. Минск: Наука и техника, 1994. С. 285.

100. Урьяш В.Ф. Изучение процесса сорбции свинца и кадмия рядом продуктов из растительного сырья/ В.Ф Урьяш, А.Е. Груздева, В.А. Маслова и др. // Пища. Экология. Человек. Тезисы докладов 2-ой Междунар. науч.-техн. конф. Москва, 1997. С. 32.

101. Хохлова А.И. Свинец как экологическая опасность почв городского ландшафта/ А.И. Хохлова, Т.П. Спицина, И.Ю. Хохлов// Аграрная наука на рубеже веков: материалы регионал. науч.-практ. конф. Красноярск, 2007. 379 с.

102. Хмельницкий Г.А. Терапия животных при отравлениях. Киев: Урожай, 1990.214 с.

103. Флавоноиды пыльцевой обножки/ Л.А. Осинцева и др.// Пчеловодство. 2007. №3. С. 50-51.

104. Челтыгмашева И.С. Качество растениеводческой продукции в условиях загрязнения тяжелыми металлами / И.С. Челтыгмашева, H.A. Черных. М.: Орг-сервис-2000, 2004. 95 с.

105. Черепнин В.JI. Изменчивость семян сосны обыкновенной. Новосибирск: Наука, 1980. 183 с.

106. Черных H.A. Влияние различного уровня содержания цинка, свинца и кадмия в почве на состав и качество растительной продукции. Москва, 1988. 27 с.

107. Черных H.A. Содержание тяжелых металлов в почвах и растительном покрове городских экосистем/ Н. А. Черных, Л. Л. Поповичева, Эдмон Сика Aya// Всерос. конф.: "Актуальные проблемы экологии и природопользования". Сб. науч. трудов. М., 2000. С. 224-226.

108. Черняева Г. Н., Долгодворова С. Я., Бондаренко С. М. Экстрактивные вещества берёзы/ Отв. ред. Чудинов Б. С.; АН СССР, Сиб. отд-ние, Ин-т леса и древесины им. В. Н. Сукачёва. Красноярск, 1986. 122 с.

109. Шеметков Ф.М., Данусевич И.К. Продукты пчеловодства и здоровье человека/ Ф.М. Шеметков, И.К. данусевич, С.Н. Шапиро. Минск: Урожай. 1987. 100 с.

110. Экологическая химия/ Под ред. Ф.Корте. М.Мир, 1997. 396 с.

111. Эккерт Р. Физиология животных: Механизмы и адаптация. Т.2/ Р. Эккерт, Д. Рэндел, Дж. Огастин. М.: Мир, 1992. 344 с.

112. Ягодин Б.А. Тяжелые металлы в системе почва-растение/ Б.А. Ягодин, В.В. Кидин, Э.А. Цвирко и др.// Химия в сел. хозяйстве. 1996. №5. С. 43-45.

113. Bartelt R. Zu den Vergiftungen der Wiederkäuer mit den schwermetallen blei, cadmium, quecksilber, thallium, arsen und molybdan. Hannover. - 1984. - 163 p.

114. Cash S.B., Goddard E.W., Lerohl M. Canadian Health and Food: The Links between Policy, Consumers, and Indastry// Canad.J.agr.Econ. 2006. Vol.54, № 4. P. 605-629.

115. Eichorn G.L, et all. The effect of metal ions on the structure oa nucleic acids. // Bionorg. Chem, 1974.

116. Eriksson J.E. Factors influencing absorption and plant uptake of cadmium from agricultural soils. Uppsala, 1990. 29 p.

117. Ewers U. Schlipkoeter H. W. Lead // Metals and Their Compounds Environ.: Occurenca, and Biol. Relevance. Weinheim etc. 1991. P. 971-1014.

118. Harada M. Yoxocoty of heavy metals in the environment. Part I (E.F. Oehme, ed.), Marceil Dekker, N.Y., 1978. P. 261-302.

119. Helmut S. Metal ions in biological systems. New York, 1986. P.84-92.

120. Heo Y., Lee W.T., Lawrence D.A. In vivo the environtmental pollutants lead and mercury induce oligocinonal T cell responses skewed toward type-2 reactivities // Cell Immunol. 1997. V.179. №2. P. 185-195.

121. Hornburg V. Untersuchungen zur mobilitat und Verfügbarkeit von cadmium, zink, mangan, blei und kupfer in boden. Bonn. 1991. — 228.

122. Jalkanen R., Aalto T., Kurkela T. Revealing past needle density in Pinus spp. // Scand. J. Forest Res, 1998. № 13. P. 292—296.

123. Korenekova B. Comparizon of cadmium, lead and nickel accumulation in liver, breast and leg muscler of pheasants/ B. Korenekova, M. Skalicka, I. Kozarova and other// Slovak j. of animal sciens. 2008. Vol. 41 n 4. P. 184 186.

124. Leblanc J.-C. Estimation of dietary intake of pesticide residues, lead, cadmium, arsenic and radionuclides in France/ J.-C. Leblanc, I. Malmauret, T. Guerin and other// Food additives contaminants. 2000. Vol. 17, n 11. P. 925 932.

125. Muir D.C.G. Arctic marine ecosystem contamination/ D.C.G. Muir, R. Wagemann , V.T. Hargrave, S.D. Thomas, D.B. Peakall, R.T. Norstrom // Sei. Environ, 1992. Vol. 122. P.75-134.

126. Nriagu J.O. Global inventory of natural and anthropogenic emissions of trace metals to the atmosphere // Nature, 1979. P. 409-411.

127. Phipps D.A. Metals and metabolism. Oxford: Clarendon press, 1976, 134 p.

128. Piskator M. Cadmium and hypertension Lancet. 1976. V.2, № 7981. P. 370371.

129. Rudio C., Handisson A. Toxicologia del plomo y su presencia en los alimentos// Alimentaria. 1999. 361. №305. P. 77-85.

130. Sahu S.C. Role of oxygen free radicals in the molecular mechanisms of carcinogenesis: a review. // Environmental carcinogenesis and ecotoxicology reviews. — 1991. V.9,№ l.P. 83-112.

131. Satarug S., Haswell-Elkins M.R., Moore M.R. Safe levels of cadmium intake to prevent renal toxity in human subjects // Br. J. Nutr. 2000. V.84. №6. P. 791-802.

132. Venugopal B., Luckey T.D. Metal toxicity in mammal. — New York: Plenum press. Vol. 2. P. 409.

133. Witz G. Active oxygen species as factors in multistage carcinogenesis. // Proceedings of the Society for Experimental Biology and Medicine. 1991. V.198, № 7. P. 675-682.