Бесплатный автореферат и диссертация по сельскому хозяйству на тему

Влияние антигельминтика аверсект-2 на иммунный, биохимический и микробный статусы организма животных

ВАК РФ 06.02.02, Кормление сельскохозяйственных животных и технология кормов

Автореферат диссертации по теме "Влияние антигельминтика аверсект-2 на иммунный, биохимический и микробный статусы организма животных"

И04602925

На правах рукописи

КОРОТКИХ МАРИНА НИКОЛАЕВНА

ВЛИЯНИЕ АНТИГЕЛЬМИНТИКА АВЕРСЕКТ-2 НА ИММУННЫЙ, БИОХИМИЧЕСКИЙ И МИКРОБНЫЙ СТАТУСЫ ОРГАНИЗМА

ЖИВОТНЫХ

06.02.02 - ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

- 3 июн 2010

Благовещенск-2010

004602925

Работа выполнена на кафедре паразитологии, эпизоотологии и организации ветеринарного дела Бурятской государственной сельскохозяйственной академии им. В.Р. Филиппова.

Научный руководитель

доктор ветеринарных наук, профессора Евдокимов Петр Иванович

Официальные оппоненты:

доктор ветеринарных наук, профессор Цыдыпов Виктор Цыбанович;

кандидат ветеринарных наук, заведующий лабораторией вирусологии и иммунологии

Шульга Николай Николаевич

Ведущая организация

Иркутская государственная сельскохозяйственная академия

Защита диссертации состоится «2» июня 2010 г. в 10 час. 00 мин. на заседании диссертационного совета ДМ 220.027.04 при ФГОУ ВПО «Дальневосточный государственный аграрный университет» по адресу: 675005, г. Благовещенск, ул.Политехническая, 86.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Даль ГАУ

Автореферат разослан «_»

2010 г.

Ученый секретарь диссертационного совета

Землянская Н.И.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность работы. Интенсивный путь ведения сельского хозяйства невозможен без применения профилактических и лекарственных препаратов. Одними из широко используемых в ветеринарной практике химиотерапевтических средств являются противопаразитарные препараты, в частности антигельминтики.

Применение антигельминтиков обуславливает высокая экономическая эффективность - затраты на противопаразитарные обработки животных многократно окупаются увеличением продуктивности, снижением смертности и повышением качества животноводческой продукции. Кроме того, снижение инвазированности животных уменьшает риск заражения паразитами людей (A.A. Кузьмин, 2004).

Дегельминтизация как способ борьбы с распространением гельминтозов, проводимая человеком, является антропогенным фактором, имеющим ряд взаимопротивоположных воздействий и неоднозначных последствий, поэтому требует детального и тщательного изучения с разных экологических позиций. Антропогенный фактор в антигельминтной химиотерапии способен работать против популяции хозяина. В связи с этим, необходимо изучить влияние дегельминтизации на окружающую среду и понять, как экологические факторы, и какие из них, могут изменить сущность этого санитарно-эпидемического мероприятия. Целевой установкой дегельминтизации является стерилизация окружающей среды от инвазионного материала. Но наличие нежелательных побочных результатов химиотерапии гельминтозов связано с токсическим воздействием антигельминтиков на ткани хозяина, с «залповым» выбросом антигенного материала и аллергенов, с дестабилизацией гомеостатических систем организма, трансформировавшихся и адаптированных к хроническому паразитированию гельминтов (A.A. Кузьмин, 2004).

В связи с этим, изучение влияния антигельминтиков на биохимический, иммунный и микробный статусы организма животных представляет научный и практический интерес.

Многие авторы (М.М. Ахмедов, 1968; A.C. Бессонов, 2002; В.В. Горохов, 2003; В.В. Горохов, 2006; ЯЗ. Кенигсберг, 1985; М.А. Макарук, Ж.М. Сак, 1985; A.A. Миронова, Н.В. Стрельцов, 2009; A.A. Миронова, Е.А. Мирончук, 2009; Ю.Ф. Петров, 1988; В.А. Прискока, 1993; А.П. Красиков с соавт., 2005; А.М. третьяков, B.J1 Украинец, 2006; В.П. Урбан, 1985; Е. Malvoz, J. Lambinet, 1918 и др.) указывают значительную роль инвазионного процесса в запуске механизмов инфекции. Поэтому разработка и внедрение

комплексного системного подхода в профилактике инвазионных и инфекционных заболеваний приобрели актуальность с позиции ветеринарной экологии (С.М. Апатенко, 1990; П.И. Евдокимов с соавт., 2003; A.M. Третьяков, 2001; В.В. Филиппов, 1988).

Различного рода нарушения физиологического гомеосгаза организма, происходящие при использовании гельминтоцвдных средств, влияющие на лечебный эффект препаратов и формирование иммунного ответа при вакцинации, требуют дальнейшего детального изучения.

Это указывает на своевременность и актуальность проводимых нами исследований по определению влияния антгельминтиков на биохимический, иммунный и микробный статусы организма, а также на механизм формирования иммунного ответа при разных сроках дегельминтизации.

Данная диссертационная работа является самостоятельным разделом комплексной программы Бурятской государственной сельскохозяйственной академии им. В.Р. Филиппова «Мониторинг ветеринарного благополучия и получения животноводческой продукции высокого санитарного качества» (№ гос. регистрации 0120.0712173).

Цель исследований. Целью данных исследований выступает изучение влияния антигельминтика аверсект-2 на биохимический, микробный и иммунный статусы организма овец, а также поиск оптимальных схем дегельминтизации, с наименьшими нарушениями гомеостаза, для формирования полноценного иммунного ответа при вакцинации против лептоспироза и бруцеллеза.

Указанная цель определяет следующие задачи исследований:

1. Изучить влияние антгельминтика аверсект-2 на биохимический, иммунный и микробный статус организма овец.

2. Дать оценку влияния дегельминтизации аверсектом-2 на формирование поствакцинального иммунитета против лептоспироза и бруцеллеза овец.

3. Проанализировать динамику биохимического, иммунного и микробного статусов организма овец при вакцинации сухой живой вакциной из штамма 19 В. abortus и поливалентной вакциной «ВГНКИ» против лептоспироза в зависимости от сроков дегельминтизации.

4. Обосновать оптимальную схему проведения дегельминтизации и вакцинации овец против лептоспироза и бруцеллеза.

Научная новизна. Впервые в регионе озера Байкал изучено влияние антгельминтика аверсект-2 на антителогенез при вакцинации овец против бруцеллеза вакциной из штамма 19 В. abortus и против лептоспироза вакциной «ВГНКИ», определены оптимальные сроки проведения вакцинации и противопаразитарной обработки животных. Установлено влияние

аверсекта-2 на биохимический, иммунный и микробный статус организма овец. Впервые изучено влияние антгельминтика аверсект-2 ВК 20%-ной концентрации на энтеробиоценоз свиней.

Практическая и теоретическая значимость работы. Результаты исследования расширяют представления о степени влияния антгельминтиков на клинико-биохимический, иммунологический и микробный статусы организма животных.

Выявленные особенности формирования поствакцинального иммунитета при разных сроках дегельминтизации могут учитываться при организации и проведении противопаразитарных лечебно-профилактических мероприятий в овцеводческих хозяйствах республики Бурятия.

С учетом полученного материала, может быть снижен риск побочных явлений при применении антигельминтика аверсект-2 и вакцин и проведена их коррекция, что позволяет оперативно управлять эпизоотической ситуацией по инфекционным и паразитарным болезням сельскохозяйственных животных и вносить соответствующие коррективы в проведение профилактических и оздоровительных мероприятий.

На основе проведенных исследований разработана технологическая схема проведения диагностических и ветеринарно-профилактических мероприятий используемых в хозяйствах Республики Бурятия. Разработаны и утверждены методические рекомендации: «Иммуногенность поливалентной вакцины «ВГНКИ» против лептоспироза в зависимости от сроков дегельминтизации овец» (утверждена 15.11.2009 г. научно-техническим советом Управления ветеринарии республики Бурятия, протокол № 5, одобрена ученым советом ФВМ ФГОУ ВПО БГСХА протокол № 22 от 27 сентября 2009 г.).

Реализация результатов исследований. Результаты исследований используются в хозяйствах и ветеринарных учреждениях Республики Бурятия при проведении ветеринарных лечебно-профилактических мероприятий по основным инфекционным и паразитарным болезням.

Материалы диссертационной работы применены для усовершенствования схемы ветеринарно-санитарных мероприятий в хозяйствах региона при составлении ветеринарно-технологических карт противоинвазионных обработок и вакцинаций.

Основные материалы диссертационной работы используются в учебном процессе: при чтении лекций и проведении лабораторно-практических занятий со студентами и слушателями ФПК по эпизоотологии, микробиологии и паразитологии Бурятской государственной

сельскохозяйственной академии им. В.Р. Филиппова, Иркутской государственной сельскохозяйственной академии и Дальневосточного государственного аграрного университета.

На защиту выносятся следующие положения:

1. Особенности биохимической и иммунологической реактивности при использовании антгельминтика аверсект-2.

2. Состояние микробиоценоза желудочно-кишечного тракта животных при использовании антгельминтика аверсект-2.

3. Результаты сравнения эффективности разных схем дегельминтизации и вакцинации животных против бруцеллеза и лептоспироза.

Апробация работы. Основные положения диссертации доложены и обсуждены на ежегодных научно-практических конференциях факультета ветеринарной медицины Бурятской государственной сельскохозяйственной академии им. В.Р. Филиппова (г. Улан-Удэ, 2006-2010); научно-практической конференции преподавателей, сотрудников и аспирантов, посвященной 75-летию БГСХА им. В.Р. Филиппова (Улан-Удэ, 1-6 февраля 2007 г.); международной научно-практической конференции, посвященной 70-летию образования кафедры паразитологии, эпизоотологии и организации ветеринарного дела факультета ветеринарной медицины Бурятской ГСХА им. В.Р. Филиппова (Улан-Удэ, 27-29 июня 2008 г.); международной научно-практической конференции, посвященной 35-летию образования факультета ветеринарной медицины Кубанского государственного аграрного университета «Достижения современной ветеринарной науки и практики в области охраны здоровья животных» (Краснодар, 16-19 июня 2009 г.); международной научно-практической конференции, посвященной 70-летию заведующего кафедрой терапии и клинической диагностики профессора Ю.А. Тарнуева (Улан-Удэ, 26-28 июня 2009 г.).

Публикации. Основные результаты и положения диссертации опубликованы в четырех статьях, в том числе в журнале по перечню ВАК (Труды Кубанского ГАУ) и одной научной рекомендации.

Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 152 страницах компьютерного текста и состоит из следующих разделов: введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения результатов, выводов, практических предложений, библиографии и приложений. Диссертация включает 17 таблиц, 18 рисунков. В работе использовано 163 литературных источника, из них 20 иностранных.

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 1. Материалы и методы исследований

Исследования проводились с 2005 по 2010 год на кафедре паразитологии, эпизоотологии и организации ветеринарного дела Бурятской ГСХА, серологическом отделе Бурятской республиканской научно-производственной ветеринарной лаборатории и лаборатории клинической иммунологии, биохимии и бактериологии республиканской больницы им. Н.А. Семашко.

На первом этапе исследований по изучению влияния антигельминтика аверсект-2 (1%-ного) на морфологический, биохимический состав крови, энтеробиоценоз и иммунный статус организма подопытными животными служили овцы бурятского типа забайкальской тонкорунной породы в возрасте двух лет массой 45 кг (п = 5), кролики породы серый великан в возрасте полтора года массой 3-3,5 кг (п = 5). Опыты по изучению влияния 20%-ного аверсекта-2 ВК на микрофлору желудочно-кишечного тракта проводили на свиньях крупной белой породы в возрасте четырех месяцев массой 50 кг (п = 3).

1%-ный аверсект-2 вводили овцам подкожно однократно на внутренней поверхности бедра в дозе 1 мл на 50 кг массы; кроликам - подкожно однократно в заднюю треть шеи в дозе 0,02 мл на 1 кг массы. Для дегельминтизации свиней применяли 20%-ный аверсект-2 ВК внутрикожно в дозе 0,1 мл на 100 кг массы (0,2 мг/кг по ДВ) при помощи безигольного механического инъектора в области верхней трети шеи.

Второй этап эксперимента по изучению влияния разных сроков дегельминтизации аверсектом-2 (1%-ный) и вакцинации сухой живой вакциной из штамма 19 В. abortus и поливалентной вакциной «ВГНКИ» против лептоспироза на формирование иммунного ответа, биохимический, морфологический состав крови и микробный статус организма проводился на овцах бурятского типа забайкальской тонкорунной породы в возрасте 2 лег массой 45 кг. Животных разбивали на четыре группы (табл. 1).

Таблица 1. - Схема применения аверсекта-2 и вакцин в разных группах овец

№ группы Количество животных в группе Схема дегельминтизации и вакцинации овец

1 5 Дегельминтизация за семь дней до вакцинации

2 5 Дегельминтизация через семь дней после вакцинации

3 5 Дегельминтизация через 14 дней после вакцинации

4 5 Одновременная дегельминтизация и вакцинация

Аверсект-2 (1%-ный) вводили подкожно однократно на внутренней поверхности бедра в дозе 1 мл на 50 кг массы. Для вакцинации применяли: в первом случае - сухую живую вакцину из штамма 19 В. abortus в дозе 2 см3 подкожно и во втором случае - поливалентную вакцину «ВГНКИ» против лептоспироза (вариант 2) в дозе 3 см3 внутримышечно.

Пробы крови отбирали непосредственно перед началом опыта (контроль), а затем на 7,14,21,28 и 35 дни после вакцинации.

Кормление и содержание животных в период проведения опыта осуществлялось согласно зоотехническим нормам.

Для биохимических исследований на общий белок, билирубин применяли колориметрический метод; на сахар, холестерин - ферментативно-колориметрический; на мочевину, АЛТ, ACT, ЛДГ, КФК и щелочную фосфатазу - кинетические методы и на креатинин - кинетический колориметрический метод.

Анализы проводили на аппарате-анализаторе «Сапфир 400». Пробой являлась негемолизированная сыворотка, которую отделяли после центрифугирования крови в течение 40-50 минут при 1500 - 2000 об/мин.

Общий подсчет лейкоцитов проводили с использованием камеры Горяева. под малым увеличением микроскопа при затемненном поле зрения в 100 ' больших квадратах. Дифференциальный подсчет лейкоцитов проводили под иммерсионной системой микроскопа в предварительно окрашенном по Романовскому-Гимзе мазке крови.

Микробиологические исследования фекалий осуществляли согласно методическим рекомендациям Э.П. Косаткиной, Л.А. Тараненко и А.А. Воронина (1996).

Фекалии для исследования отбирали в стерильные флаконы непосредственно из прямой кишки с использованием стерильных перчаток. Готовили основное и ряд последовательных разведений от 102 до 10 ю. Из полученных разведений делали посевы на питательные среды.

Иммунологические исследования проводили следующим образом.

Выделение лимфоцитов осуществляли на фиколле по методу А. Boyum (1968).

Определение количества Т-лимфоцитов (CD3), Т-хелперов (CD4), Т-супрессоров (CDS), натуральных киллеров (NK, CD16) и В-лимфоцитов (CD22) проводили методом непрямой реакции поверхностной иммунофлюоресценции на предметном стекле с лунками с применением моноклональных антител (E.L. Reinherz et al., 1979).

Для дифференциации клеток использовали стандартные моноклональные антитела: СДз -Т-лимфоциты - МКА ИКО-90; СД22 -В-лимфоциты - МКА

ИКО-22; СД, -Т-хелперы - МКА ЖО-86; ОД -Т-супрессоры - МКА ИКО-31 ; NK - натуральные киллеры - МКА ИКО-112.

Содержание циркулирующих иммунных комплексов в сыворотке определяли по реакции с полиэтиленгликолем (Ю.А. Гриневич, А.Н. Алферов, 1981).

Фагоцитарную активность лейкоцитов крови исследовали при помощи светового микроскопа по переваривающей способности нейтрофилов крови в отношении микробной тест культуры после их совместной инкубации (Н.В. Васильев, Ю.Н. Одинцов, Ю.В. Федоров, 1972).

Серологические исследования на бруцеллез производили при помощи реакции агглютинации и реакции связывания комплемента; на лептоспироз -реакции микроагглютинации по общепринятым методикам.

Фотографирование проводили с помощью цифрового фотоаппарата марки «Samsung». Экспериментальный материал обрабатывали при помощи компьютерных программ Microsoft Office Excel 2003, Statistica, и использованием литературных источников «Биометрия» (Г.Ф. Лакин, 1980) и «Пособие по основам биометрии» (Р.З. Сиразиев, 2004).

2. Результаты исследований

2.1 Влияние антигельминтика аверсект-2 на биохимический, иммунный и микробный статусы организма животных

Морфологические изменения в крови овец носили реактивный характер и проявлялись выраженной нейтропенией, при этом количество палочкоядерных нейтрофилов максимально снижалось с 3,00±0,38 до 1,2±0,20 %, сегментоядерных нейтрофилов с 29,60±1,80 до 10,80±1,40 %; лимфоцитозом с максимальным колебанием показателей от 62,40±2,56 до 85,00±1,75 %; моноцитопенией с полным исчезновением клеток в период с четвертого по пятнадцатый день исследований. При этом наиболее выраженные изменения отмечались на четвертый день исследований с тенденцией к нормализации к 25 дню эксперимента.

В биохимическом составе крови, в опытах на овцах наиболее выраженные изменения также возникали на четвертый день после введения аверсекта-2. Достоверно снижалось содержание глюкозы с 3,18±0,29 до 2,18±0,24 ммоль/л, мочевины с 2,74±0,22 до 2,56±0,15 ммоль/л, креатинина со 109,00±5,01 до 92,80±0,51 мкмоль/л и увеличивалась концентрация холестерина с 1,52±0,39 до 2,14±0,35 ммоль/л со снижением его количества на 15-25 день. Ферментативная активность крови характеризовалась ростом активности аланинаминотрансферазы с 121,60±10,32 до 129,80±7,62 ед/л и снижением - лактатдегидрогеназы с 1235,60±133,30 до 994,80±147,20 ед/л.

Особенно сильно были выражены изменения концентрации альфа-амилазы. Ее содержание на четвертый день возрастало в 2,60 раза и сохраняло свои высокие значения на протяжении всего опыта. Стабилизация биохимических показателей наблюдалась к 15-25 дню исследований.

Результаты исследований по влиянию аверсекта-2 на биохимический статус крови у кроликов согласуются с выше изложенным материалом и выражаются ь снижении количества мочевины, креатинина и лактатдегидрогеназы. Это служит подтверждением закономерности влияния препарата на биохимический состав крови.

Применение антигельминтика провоцировало нарушения биоценотического гомеостаза желудочно-кишечного тракта (таб. 2). Происходило снижение численности бифидобактерий, рост количества кишечной палочки и увеличение численности клосгридий. На 4-15 дни после дегельминтизации в фекалиях появлялись плесневые грибы.

Таблица 2 - Количественный и качественный состав микрофлоры кишечника овец под влиянием антгельминтика аверсект-2, КОЕ/г_

Микробные клетки Сроки исследований после инъекции

Контроль, М±т На 4 день, М±т На 15 день, М±т На 25 день, М±т

Бифидобактерии (12,60±120)х хЮ' (8,60±105)х х10(* (9,60*0,80) хЮ8* (10,00±1,25) хЮ8*

Лактобактерии (0,12±0,01)х хЮ5 (0,08±0,006)х хЮ5 (0,06±0,01)х хЮ5 (0,09±0,009)х хЮ5

Кишечная палочка (203,60±8,07) хЮ3 (349,40±22,50)х 103** (387,00±24,31) хЮ3*** (371,20±33,40)х 103**

Стафилококк золотистый — — — —

Плесневые грибы — (0,01±0,003)х ХЮ5 (0,004±0002) х10$ —

Клостридии (29,4=£2,46)х Х103 (34,80±2,91)х хЮ3* (37,60±2Д1)х хЮ3** (31,80±2 36)х хЮ3

Обозначения: * - Р < 0,1; ** - Р < 0.01; *** - Р < 0,001

В опытах на свиньях с применением аверсект-2 ВК (20 %-ного) выявлено, что препарат как и большинство прочих антигельминтиков оказывает влияние на кишечную микрофлору. Наиболее выражено оно по отношению к клостридиям, кишечной палочке и плесневым грибам, количество которых после применения препарата значительно возрастало.

Иммунологические реакции на инъекцию аверсекта-2 выражались снижением с четвертого по 15 дни исследований абсолютного числа лейкоцитов с 7,81±0,33 до 6,45±0,38; Т-лимфоцитов с 42,60±2,95 до 34,90±2,96 %; В-лимфоцитов с 30,40±1,34 до 24,30±1,70 % и ростом количества циркулирующих иммунных комплексов с 207,60±6,14 у.е. до

312,60±19,26 у.е. К 25 дню эксперимента наблюдалась относительная нормализация указанных иммунных характеристик. Показатели фагоцитарной активности к четвертому дню опыта снижались с 56,8±3,11 до 40,60±1,45 % и сохранялись на данном уровне до его окончания.

2.2 Влияние антигельминтика аверсект-2 на формирование поствакцинального иммунитета при разных сроках дегельминтизации на фоне вакцинации против лептоспироза и бруцеллеза В ходе эксперимента с применением вакцины против бруцеллеза из штамма 19 В. abortus (табл. 3) было выяснено, что наиболее выраженный антителогенез наблюдался у животных, которым дегельминтизацию проводили через две недели после вакцинации (группа №3). Стабильные результаты в данной группе были получены на седьмой день после вакцинации и сохранялись в течение всего периода эксперимента при исследовании по РА (средний титр антител за период опыта 1:193,33). Объяснением данного факта может являться более стабильное становление за этот период иммунных механизмов.

Таблица 3 - Динамика антителообразования при разных сроках дегельминтизации овец антгельминтиком аверсект-2 на фоне вакцинации

ротив б руцеллеза

№ группы Мет од Сроки исследований после вакцинации

контроль на 7 день на 14 день на 21 день на 28 день на 32 день

1 РА отр. 1:83,30± ±16,77** 1:100,00± ±0,00 1:50,00± ±0,00 — —

РСК отр. — — — — —

2 РА отр. 1:133,33± ±33,36** 1:100,00± ±0,00 1:50,00± ±0,00 1:50,00± ±0,00 —

РСК отр. — — — — —

3 РА отр. 1:166,67± ±33,37** 1:200,00± ±0,00 1:200,00± ±0,00 1:200,00± ±0,00 1:200,00± ±0,00

РСК отр. 1:6,00± ±4,01** 1:22,00± ±4,51** 1:6,00± ±1,00** 1:6,00± ±1,00** 1:6,00± ±1,00**

4 РА отр. 1:50,00± ±0,00 1:50,00± ±0,00 1:50,00± ±0,00 — —

РСК отр. — — - — —

Обозначения: * - Р <0,1; ** -Р <0,01; *** - Р <0,001

Синтез антител у овец при дегельминтизации через семь дней после вакцинации (группа №2) имел сравнительно высокую интенсивность только на седьмой день опыта (без применения антигельминтика), но начиная с 14 дня и до окончания исследований их уровень снижался (средний титр антител 1:83,33). Последний факт явно указывает на угнетение антителогенеза антигельминтиком аверсект-2.

У овец, дегельминтизацию которых проводили за семь дней до вакцинации (группа №1) антитела выявляли в низких титрах с дальнейшим их снижением (средний титр антител 1:77,77).

При одновременном применении препаратов (группа №4) титр антител был стабильно низким на протяжении всего опыта (средний титр антител 1:50,00).

Аналогичные исследования с применением вакцины «ВГНКИ» против лептоспироза дали следующие результаты (табл. 4).

Таблица 4. - Формирование поствакцинального иммунитета при дегельминтизации овец аверсектом-2 на фоне вакцинации против лептоспироза вакциной «ВГНКИ»_

№ группы Серогрупп а легггоспир Сроки исследований после вакцинации

контроль на 7 день на 14 день на 21 день на 28 день на 35 день

1 Ротопа отр. 1:41,60± ±8,32** 1:83,30± ±16,77** 1:100,00± ±0,00 - -

Тагаэзст отр. - 1:50,00± ±0,00 1:83,30± ±16,77** - -

ОпррсиурИоз а отр. - 1:33,30± ±8,34** 1:50,00± ±0,00 - -

Бе^го отр. 1:41,60± ±8,32** 1:83,30 ±16,77** 1:100,00± ±0,00 - -

2 Ротопа отр. - 1:83,30± ±16,77** 1:83,30± ±16,77** 1:100,00 ± ±0,00 -

Тага^ст отр. 1:33,30± ±8,34** 1:50,00± ±0,00 1:50,00± ±0,00 1:50,00± ±0,00 -

Опрро1урЬо5 а отр. 1:33,30± ±8,34** 1:41,60± ±8,32** 1:41,60± ±8,32** 1:50,00± ±0,00 -

Бдго отр. — - ' - - -

3 Ротопа отр. 1:41,60± ±8,32** 1:166,67 ± ±33,37** 1:100,00± ±0,00 1:100,00 ± ±0,00 1:100,00 ± ±0,00

ТагаввоУ! отр. 1:41,60± ±8,32** 1:50,00± ±0,00 1:50,00± ±0,00 1:50,00± ±0,00 1:50,00± ±0,00

Спрро1ур1нм а отр. 1:41,60± ±8,32** 1:100,00 ± ±0,00 1:100,00± ±0,00 1:100,00 ± ±0,00 1:83,30± ±16,77**

Эфо отр. - - 1:33,30± ±8,34** 1:41,60± ±8,32** 1:83,30± ±16,77**

4 Ротопа отр. 1:50,00± ±0,00 1:50,00± ±0,00 1:100,00± ±0,00 - -

ТагаввоУ! отр. - 1:50,00± ±0,00 1:50,00± ±0,00 - -

□пррйурЬоз а отр. - 1:41,60± ±8,32** 1:41,60± ±8,32** - -

Sejro отр. - - - - -

Обозначения: * - Р <0,1; ** - Р< 0,01; *** - Р < 0,001

Независимо от условий применения антигельминтика наиболее выраженной антителогенез наблюдается к лептоспирам серогруппы Pomona. Антитела в данном случае выявлялись на седьмой день опыта практически у всех животных и имели максимальный

титр. Антигенная активность лептоспир серогруппы Tarassovi была низкой во всех исследуемых группах. Положительная динамика антител к лептоспирам серогруппы Grippotyphosa отмечалась лишь в третьей группе овец, где дегельминтизация проводилась через 14 дней после вакцинации. Антитела к лептоспирам серогруппы Sejro были выявлены только в двух исследуемых группах, но имели тенденцию к росту.

Антитела в PMA у овец первой группы, где дегельминтизация проводилась за неделю до вакцинации, были обнаружены к лептоспирам всех исследуемых серогрупп (Pomona и Sejro - седьмой, а к Tarassovi и Grippotyphosa - на 14 день) с постепенным увеличением титров за исследуемый период. Титры антител у овец, иммунизированных по второй схеме, к лептоспирам серогрупп Tarassovi, Grippotyphosa и Pomona на протяжении опыта нарастали. При этом антитела к лептоспирам первых двух серогрупп выявлялись на седьмой, а к последней только на 14 день. У овец третьей группы, обработанной аверсектом-2 через 14 дней после вакцинации, антитела к лептоспирам серогрупп Pomona, Tarassovi и Grippotyphosa выявлялись на седьмой день опыта, а к лептоспирам серогруппы Sejro на 21 день. На 14 день исследования отмечали рост титров к лептоспирам выявленных серогрупп. После введения антигельминтика происходило снижение титра антител к лептоспирам серогруппы Pomona; антителогенез к лептоспирам серогруппы Tarassovi сохранялся на прежнем уровне до окончания исследований; титр антител к лептоспирам серогруппы Grippotyphosa снижался лишь к 35 дню. Титр антител к лептоспирам серогруппы Sejro в период с 21 по 35 дни нарастал.

23 Динамика биохимического, иммунного и микробного статусов организма при вакцинации против бруцеллеза вакциной из штамма 19 В. abortus

Динамика морфологического состава крови у всех исследуемых групп овец, вакцинированных вакциной из штамма 19 В. abortus с фоновым применением 1%-ного антгельминтика аверсект-2, характеризовалась эозинопенией, лимфоцитозом, нейтропенией со снижением сегментоядерных и исчезновением палочкоядерных форм.

Биохимические изменения крови при вакцинации овец вакциной из штамма 19 В. abortus на фоне дегельминтизации аверсектом-2 (схема №1)

Динамика иммунологических показателей в первой группе овец характеризовалась угнетением ее Т-клеточного звена, но с активацией его хелперной и супрессорной популяций; стимуляцией В-клеточного звена; угнетением фагоцитарной активности; снижением количества натуральных киллеров и ростом числа циркулирующих иммунных комплексов. Во второй экспериментальной группе отмечалось снижение числа лейкоцитов; увеличение относительного количества Т-клеток после вакцинации и снижение после дегельминтизации, при снижении абсолютных величин на протяжении всего периода исследований; рост количества Т-хелперов и Т-супрессоров; угнетение В-клеточного звена после вакцинации и активизация его аверсектом-2; снижением уровня натуральных киллеров и фагоцитарного показателя и ростом количества циркулирующих иммунных комплексов. В третьей группе овец происходила активизация клеточного иммунитета после вакцинации и угнетение под действием антигельминтика, при этом на протяжении всего опыта увеличивалось относительное количество Т-хелперов и абсолютное число Т-супрессоров и снижалось абсолютное число Т-хелперов и относительное число Т-супрессоров. Количество В-клеток и циркулирующих иммунных комплексов снижалось после вакцинации и возрастало после инъекции антигельминтика. Уменьшалось содержание натуральных киллеров; снижалась фагоцитарная активность. В четвертой группе происходил рост количества Т-лимфоцитов, В-лимфоцитов, абсолютного числа натуральных киллеров и циркулирующих иммунных комплексов; снижение фагоцитарной активности и относительного количества натуральных киллеров.

2.4 Динамика биохимического, иммунного и микробного статусов

организма при вакцинации против лептоспироза вакциной «ВГНКИ»

В морфологическом составе крови при вакцинации против лептоспироза вакциной «ВГНКИ» на фоне дегельминтизации аверсектом-2 отмечался лимфоцитоз у овец второй, третьей и четвертой группы на протяжении всего периода исследований, а у первой - с кратковременной лимфоцитопенией на четвертый день эксперимента. Количество эозинофилов с 11 дня снижалось во всех исследуемых группах, но в первой и четвертой группах на четвертый день отмечали значительный его рост. Палочкоядерные нейтрофилы с четвертого дня после вакцинации не выявлялись у всех исследуемых групп, но после инъекции антигельминтика (11 день у второй группы и 18 день у третьей) отмечали их появление. Количество сегментоядерных нейтрофилов у второй и третьей группы снижалось на фоне вакцинации и возрастало при

последующей дегельминтизации, в первой группе изменялось циклически, а в четвертой группе - снижалось на протяжении всего опыта.

Динамика биохимических показателей характеризовалась следующими особенностями. При вакцинации через семь дней после дегельминтизации (схема №1) отмечался рост количества общего белка в крови на четвертый день с последующим снижением с 11 дня. Содержание глюкозы на четвертый день после введения вакцины снижались по отношению к контролю в 2,05 раза с последующим увеличением к 11 дню и до конца опыта выше контрольных показателей. Концентрация мочевины в период опыта была понижена. Содержание в крови креатинина на четвертый день повышалось, а к 11 дню снижалось ниже контрольных показателей. Значительно, на четвертый день увеличивалось количество холестерина и снижалось на 18 день содержание триглицеридов. Активность ACT увеличивалась в течение 11 дней опыта, а к 18 дню снижалась. Концентрация AJTT увеличивалась на четвертый день, на 11 день с последующим снижением к 18 дню.

При дегельминтизации овец через семь дней после вакцинации (схема №2) отмечалось снижение количества глюкозы, мочевины, ДДГ с тенденцией к росту с 18 дня исследований; рост содержания общего белка, холестерина, креатинина и а-амилазы с последующим снижением к 18 дню исследований; концентрация триглицеридов, ACT, AJÏT после вакцинации повышалась, а после инъекции аверсекта-2 уменьшалась.

При дегельминтизации овец через 14 дней после вакцинации (схема №3) на протяжении всего периода исследований стереотипно снижение параметров мочевины и ЛДГ. Вакцинация вызывала увеличение в крови количества креатинина, триглицеридов, ACT, АЛТ, а дегельминтизация их снижение. Концентрация холестерина и а-амилазы в начале исследований увеличивалась, а к 25 дню снижалась. Концентрация общего белка на четвертый день после вакцинации увеличивалась, на 11 день снижалась, а после дегельминтизации вновь возрастала. Содержание в крови глюкозы имело противоположную динамику.

При одновременной вакцинации и дегельминтизации овец (схема №4) отмечались снижение в крови количества глюкозы, креатинина, триглицеридов, ACT, ЛДГ и рост содержания общего белка, мочевины, холестерина, АЛТ, а-амилазы.

Изменения энтеробиоценоза при дегельминтизации овец аверсектом-2 на фоне вакцинации поливалентной вакциной «ВГНКИ» против лептоспироза имели следующие общие моменты: снижение числа бифидобактерий и появление плесневых грибов. При этом динамика остальных сочленов энтероценоза зависела от сроков дегельминтизации. Снижение количества

лактобактерий на протяжении всего опыта отмечалось у овец первой и второй групп. Для животных третьей группы было характерно снижение данных показателей с кратковременным ростом на 11 день после введения вакцины и вновь уменьшение после инъекции аверсекта. У овец четвертой группы количество лактобактерий возрастало. Численность кишечной палочки у овец первой группы снижалось; второй и третей группы -снижалась после вакцинации и увеличивалась после дегельминтизации; четвертой группы - возрастала на всем протяжении опыта. Динамика количества клостридий была аналогичной.

Динамика иммунологического статуса у овец, дегельминтизация которых проводилась за семь дней до вакцинации, характеризовалась снижением числа лейкоцитов, Т-лимфоцитов, МК, фагоцитарного показателя. Количество Т-хелперов, Т-супрессоров, В-лимфоцитов возрастало. Показатели содержания циркулирующих иммунных комплексов на четвертый день опыта снижались, с последующим увеличением.

Дегельминтизация через семь дней после вакцинации влекла за собой снижение на протяжении всего периода исследований абсолютного числа Т-лимфоцитов, абсолютного и относительного числа натуральных киллеров и фагоцитарного показателя; увеличение популяции Т-хелперов и Т-супресеоров. Динамика относительного количества Т-лимфоцитов характеризовалась ростом показателей после вакцинации и снижением после дегельминтизации; абсолютного и относительного числа В-лимфоцитов уменьшением после вакцинации и ростом после дегельминтизации и количества циркулирующих иммунных комплексов после применения вакцины и увеличением после инъекции аверсекта-2.

Динамика иммунологических показателей овец третьей группы заключалась в снижении абсолютного количества Т-хелперов и относительного числа Т-супрессоров. Происходило увеличение относительного количества Т-хелперов и абсолютного числа Т-супрессоров. Количество Т-лимфоцитов после вакцинации возрастало, а после инъекции антгельминтика снижалось. Динамика В-лимфоцитов была противоположной. Фагоцитарный показатель возрастал на четвертый день эксперимента и снижался в последующие три недели опыта. Количество циркулирующих иммунных комплексов, напротив, на четвертый день снижалось, а с 11 по 32 день возрастало.

Одновременное применение препаратов сопровождалось увеличением относительного и абсолютного количества Т-лимфоцитов и их хелперной и супрессорной популяций, В-лимфоцитов, снижением фагоцитарной

активности, содержания натуральных киллеров и циркулирующих иммунных комплексов.

Таким образом, антигельминтик аверсект-2 вызывает существенную дестабилизацию гомеостатических систем организма. Поэтому знание механизмов его влияния на биохимический, иммунный и микробный статусы животных поможет сориентироваться при проведении лечебно-профилактических мероприятий.

ВЫВОДЫ

1. Применение антигельминтика аверсект-2 (1 %-ный) овцам в лечебной дозе влекло за собой существенные изменения морфологического состава крови, выражаясь нейтропенией, лимфоцитозом и исчезновением моноцитов в течении 25 дней. Это свидетельствует о существенном влиянии антигельминтика аверсект-2 на костно-мозговой нейтропоэз и угнетение фагоцитарных защитных механизмов, что негативно сказывается на иммунологической реактивности организма.

2. Антигельминтик вызывал существенные нарушения углеводного (снижение уровня глюкозы и стойкое повышение концентрации фермента альфа-амипазы), липидного обмена (повышение холестерина) и в меньшей степени белкового обмена (незначительные изменения концентрации общего белка и кратковременное понижение показателей креатинина). Изменялась и энзиматическая активность крови в результате чего, на протяжении всего периода исследований, отмечается повышенное содержание фермента аланинаминотрансферазы и пониженное - лакгатдегидрогеназы. Большинство перечисленных характеристик свидетельствует о токсическом влиянии препарата на печень и поджелудочную железу.

3. Антигельминтики аверсект-2 (1%-ный) и аверсект-2 ВК (20%-ный) вызывали схожие дисбиотические нарушения в пищеварительном тракте, выражавшиеся увеличением популяционного уровня условно-патогенных микробов (кишечной палочки и клостридий), снижением полезной флоры (бифидобакгерий) и появлением или увеличением численности плесневых грибов. Это приводит к угнетению защитных и физиологических функций кишечника.

4. Применение аверсекта-2 приводило к иммунодифицитному состоянию, вызывая супрессию клеточного и гуморального звеньев иммунитета, стойкое угнетение фагоцитарной активности. Увеличение количества циркулирующих иммунных комплексов связано с функциональными дефектами фагоцитарной системы и печени под действием антигельминтика.

5. Антигельминтик аверсект-2 (1%-ный) препятствует полноценному синтезу антител против лептоспироза при дегельминтизации через семь дней после вакцинации, а против бруцеллеза при дегельминтизации через семь дней после вакцинации и за семь дней до нее. При одновременном применении аверсекта-2 и вакцин иммунный ответ характеризуется низкими титрами без тенденции к росту. Наиболее выраженный и стабильный антителогенез наблюдался при вакцинации против бруцеллеза и лептоспироза за 14 дней до дегельминтизации, что может объясняться более стабильным становлением за этот период иммунных механизмов. Достаточно выражен иммунный ответ, в сравнительном аспекте, при дегельминтизации овец за семь дней до вакцинации против лептоспироза. -Титры антител у овец данной группы начинают увеличиваться с 14 дня исследований, что связано с ослаблением негативного влияния аверсекта-2, персистенция которого в организме происходит в течение двух недель.

6. Аверсект-2 вызывал значительный дисбаланс морфологического состава крови. Его влияние при применении вакцины из штамма 19 В. abortus сводилось к явлениям эозинопении, лимфоцитоза, нейтропении во всех исследуемых группах животных.

Влияние аверсекта-2 на морфлогический состав крови при использовании в опыте поливалентной вакцины «ВГНКИ» против лептоспироза выражлось лимфоцитозом, эозинопенией, увеличением количества палочнкоядерных нейтрофилов, ростом числа сегментоядерных нейтрофилов при дегельминтизации через семь и 14 дней после вакцинации, цикличностью данного процесса при вакцинации за семь дней до вакцинации и снижением при одновременном применении препарата. Характерный для полноценного вакцинального процесса нейтрофильный лейкоцитоз отмечался только в группе овец вакцинация которых против лептоспироза проводилась за 14 дней до дегельминтизации.

7. Существенно влияние антигельминтика на биохимический состав крови животных. Общая динамика при применении вакцины против бруцеллеза из штамма 19 В. abortus и вакцины «ВГНКИ» против лептоспироза и дегельминтизацией аверсектом-2 выражалась нарушением активности ферментативных систем, ростом концентрации холестерина, триглицеридов и креатинина и снижением содержания глюкозы и мочевины в первой половине исследований с противоположной динамикой - во второй. Рост количества общего белка при вакцинации являлся закономерным процессом, а его снижение при последующей дегельминтизации негативно сказывалось на формировании иммунного ответа.

8. Дегельминтизация 1%-ным аверсектом-2 на фоне вакцинации против бруцеллеза вакциной из штамма 19 В. abortus или вакциной «ВГНКИ» против лептоспироза характеризовалась нарушением энтеробиотического гомеостаза. Применение аверсекта-2 на фоне вакцины из штамма 19 В. abortus приводило к достоверному росту количества кишечной палочки; снижению количества бифидобактерий и уменьшению количества клостридий независимо от сроков дегельминтизации. Дегельминтизация овец аверсектом-2 на фоне вакцинации против лептоспироза вакциной «ВГНКИ» сопровождалась снижением числа бифидобактерий; ростом количества лактобактерий и кишечной палочки. Данные нарушения количественного и качественного состава микробного биоценоза приводят к снижению колонизирующей резистентности микрофлоры и как следствие ослаблению барьерной функции кишечника.

9. Применение антигельминтика аверсект-2 вызывало нарушения иммунологического статуса организма. Во всех исследуемых группах отмечалось угнетение неспецифических факторов защиты (снижение фагоцитарного показателя и количества натуральных киллеров) в течение 1832 дней. Вакцинация стимулировала Т-клеточное звено иммунитета, а дегельминтизация приводила к его угнетению. Динамика гуморального иммунитета была противоположной.

10. Наиболее приемлемой схемой дегельминтизации при вакцинации против бруцеллеза и лептоспироза является схема №3, где дегельминтизацию проводили через 14 дней после вакцинации. В данном случае отмечались более высокие титры антител, иммунологические показатели свидетельствовали о полноценном течении вакцинального процесса и наблюдался характерный нейтрофильный лейкоцитоз.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Предложена и внедрена в хозяйстве оптимальная схема комплексных ветеринарных мероприятий профилактики при инфекционных и паразитарных болезнях сельскохозяйственных животных в условиях Республики Бурятия.

По результатам полученных данных разработана оптимальная схема профилактики лептоспироза и бруцеллеза в ассоциации с инвазионными заболеваниями животных

Результаты исследования использованы при разработке нормативно-технических документов и методических рекомендаций, предложенных для практического использования. «Иммуногенность поливалентной вакцины «ВГНКИ» против лептоспироза в зависимости от сроков дегельминтизации

овец (утверждена 15.11.2009 г. научно-техническим советом Управления ветеринарии республики Бурятия, протокол № 5, одобрена ученым советом ФВМ ФГОУ ВПО БГСХА протокол № 22 от 27 сентября 2009 г.)

С учетом полученного материала, может быть снижен риск побочных явлений при применении антигельминтика аверсект-2 и вакцин и проведена их коррекция, что позволяет оперативно управлять эпизоотической ситуацией по инфекционным и паразитарным болезням сельскохозяйственных животных и вносить соответствующие коррективы в проведение профилактических и оздоровительных мероприятий.

Материалы диссертационной работы используются в учебном процессе при чтении лекций и проведении лабораторно-практических занятий по эпизоотологии, микробиологии, паразитологии в Бурятской ГСХА, Дальневосточном ГАУ.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Коротких, М.Н. Влияние антгельминтного препарата аверсект-2 на биохимические показатели крови кроликов: материалы науч.-практ. конф., 16 февр. 2007 г. - Улан-Удэ: Изд-во БГСХА им. В.Р. Филиппова, 2007.- С. 196198

2. Коротких, М.Н. Оценка биохимической реакции овец при дегельминтизации аверсектом - 2: материалы междунар. науч.-практ. конф., 27-29 июня 2008 г. - Улан-Удэ: Изд-во БГСХА им. В.Р. Филиппова, 2008.- С. 48-51

3. Коротких, М.Н. Влияние антгельминтика аверсект - 2 на иммунный статус организма овец Z М.Н. Коротких, A.M. Третьяков, П.И. Евдокимов ZZ Труды Кубанского ГАУ. Серия: Ветеринарные науки № 1: Ч. I. - Краснодар: Издательство Куб ГАУ, 2009. - С. 160-162

4. Коротких, М.Н. Динамика фагоцитарного показателя и количества циркулирующих иммунных комплексов в зависимости от сроков дегельминтизации при вакцинации овец поливалентной вакциной «ВГНКИ» против легггоспироза (вариант 2): материалы междунар. науч.-практ. конф., 26-28 июня 2009 г. - Улан-Удэ: Изд-во БГСХА им. В.Р. Филиппова, 2009.- С. 137-140

5. Коротких, М.Н. Иммунологическая активность поливалентной вакцины «ВГНКИ» против лептоспироза в зависимости от сроков дегельминтизации овец: метод, рекоменд. Z М.Н. Коротких. - Улан-Удэ: Изд-во БГСХА им. В.Р. Филиппова, 2010,-13 с.

Коротких Марина Николаевна

ВЛИЯНИЕ АНТИГЕЛЬМИНТИКА АВЕРСЕКТ-2 НА ИММУННЫЙ, БИОХИМИЧЕСКИЙ И МИКРОБНЫЙ СТАТУСЫ ОРГАНИЗМА ЖИВОТНЫХ

Автореферат

Лицензия ЛР 020427 от 25.04.1997 г. Подписано к печати 28.04.2010 г. Формат 60x90/16. Уч.-изд.л. - 1,0. Усл.-п.л. - 1,5. Тираж 100 экз. Заказ 120.

Отпечатано в отделе оперативной полиграфии издательства ДальГАУ 675005, г. Благовещенск, ул. Политехническая, 86

Содержание диссертации, кандидата ветеринарных наук, Коротких, Марина Николаевна

ВВЕДЕНИЕ.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1. Влияние антигельминтных препаратов на иммунную систему животных и синтез поствакцинальных антител.

2. Микрофлора организма животных в норме и влияние на нее дегельминтизации и вакцинации.

3. Биохимический статус организма и его изменения под влиянием дегельминтизации и вакцинации.

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.

4. Материал и методы исследования.

5. Результаты исследований.

5.1. Влияние антигельминтика аверсект-2 (1%-ный) на морфологический состав крови овец.

5.2. Влияние антигельминтика аверсект-2 (1%-ный) на биохимический статус организма овец.

5.3. Динамика биохимических показателей крови кроликов под влиянием антигельминтика аверсект-2 (1%-ный).

5.4. Динамика количественного и качественного состава микрофлоры кишечника овец под влиянием антигельминтика аверсект-2 (1%-ного).

5.5. Влияние антигельминтного препарата аверсект-2 ВК (20%-ный) на энтеробиоценоз свиней.

5.6. Влияние антигельминтика аверсект-2 (1%-ный) на иммунный статус организма овец.

5.7. Влияние аверсекта-2 (1%-ного) на антителообразование при иммунизации овец против бруцеллеза вакциной из штамма 19 В. abortus.

5.8. Формирование поствакцинального иммунитета при дегельминтизации овец аверсектом-2 (1%-ный) на фоне вакцинации поливалентной вакциной «ВГНКИ» против лептоспироза.

5.9. Изменение морфологического состава крови при разных сроках дегельминтизации овец антигельминтиком аверсект-2 (1%-ный) на фоне вакцинации против бруцеллеза вакциной из штамма 19 В.abortus.

5.10. Динамика морфологического состава крови при разных сроках дегельминтизации овец антигельминтиком аверсект-2 (1%-ный) на фоне вакцинации против лептоспироза вакциной «ВГНКИ».

5.11. Влияние разных сроков дегельминтизации овец антигельминтиком аверсект-2 (1%-ный) и вакцинации сухой живой вакциной из штамма 19 В. abortus на биохимические показатели крови.

5.12. Динамика биохимических показателей крови при разных сроках дегельминтизации овец антигельминтиком аверсект-2 (1%-ный) на фоне вакцинации вакциной «ВГНКИ» против лептоспироза.

5.13. Изменения качественного и количественного состава микрофлоры кишечника при разных сроках дегельминтизации овец аверсектом-2 (1%-ный) на фоне вакцинации против бруцеллеза вакциной из штамма

19 В. abortus.

5.14. Влияние антгельминтика аверсект-2 (1%-ный) на качественный и количественный состав микрофлоры кишечника при разных сроках дегельминтизации овец на фоне вакцинации поливалентной вакциной «ВГНКИ» против лептоспироза.

5.15. Изменения иммунного статуса при разных сроках дегельминтизации овец аверсектом-2 (1%-ный) на фоне вакцинации сухой живой вакциной из штамма 19 В. abortus.

5.16. Динамика иммунного статуса при разных сроках дегельминтизации овец аверсектом-2 (1%-ный) на фоне вакцинации поливалентной вакциной «ВГНКИ» против лептоспироза.

ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ.

ВЫВОДЫ.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ.

Введение Диссертация по сельскому хозяйству, на тему "Влияние антигельминтика аверсект-2 на иммунный, биохимический и микробный статусы организма животных"

Актуальность работы. Интенсивный путь ведения сельского хозяйства невозможен без применения профилактических и лекарственных препаратов. Одними из широко используемых в ветеринарной практике химиотерапевтических средств являются противопаразитарные препараты, в частности антигельминтики.

Применение антигельминтиков обуславливает высокая экономическая эффективность - затраты на противопаразитарные обработки животных многократно окупаются увеличением продуктивности, снижением смертности и повышением качества животноводческой продукции. Кроме того, снижение инвазированности животных уменьшает риск заражения паразитами людей [71].

Дегельминтизация как способ борьбы с распространением гельминтозов, проводимая человеком, является антропогенным фактором, имеющим ряд взаимопротивоположных воздействий и неоднозначных последствий, поэтому требует детального и тщательного изучения с разных экологических позиций. Антропогенный фактор в антигельминтной химиотерапии способен работать против популяции хозяина. В связи с этим, необходимо изучить влияние дегельминтизации на окружающую среду и понять, как экологические факторы, и какие из них, могут изменить сущность этого санитарно-эпидемического мероприятия. Целевой установкой дегельминтизации является стерилизация окружающей среды от инвазионного материала. Но наличие нежелательных побочных результатов химитерапии гельминтозов связано с токсическим воздействием антигельминтиков на ткани хозяина, с «залповым» выбросом антигенного материала и аллергенов, с дестабилизацией гомеостатических систем организма, трансформировавшихся и адаптированных к хроническом}' паразитированию гельминтов [71].

В связи с этим, изучение влияния антгельминтиков на биохимический, иммунный и микробный статусы организма животных представляет научный и практический интерес.

Многие авторы [7, 11, 30, 31, 55, 81, 87, 88, 96, 99, 103, 106, 122, 123, 124, 125, 127, 132, 142, 155, 161 и др.] указывают значительную роль инвазионного процесса в запуске механизмов инфекции. Поэтому разработка и внедрение комплексного системного подхода в профилактике инвазионных и инфекционных заболеваний приобрели актуальность с позиции ветеринарной экологии [5, 23, 40, 67, 109, 110, 124, 129].

Различного рода нарушения физиологического гомеостаза организма, происходящие при использовании гельминтоцидных средств, влияющие на лечебный эффект препаратов и формирование иммунного ответа при вакцинации, требуют дальнейшего детального изучения.

Это указывает на своевременность и актуальность проводимых нами исследований по определению влияния антгельминтиков на биохимический, иммунный и микробный статусы организма, а также на механизм формирования иммунного ответа при разных сроках дегельминтизации.

Данная диссертационная работа является самостоятельным разделом комплексной программы Бурятской государственной сельскохозяйственной академии им. В.Р. Филиппова «Мониторинг ветеринарного благополучия и получения животноводческой продукции высокого санитарного качества» (№ гос. регистрации 0120.0712173).

Цель исследований. Целью данных исследований выступает изучение влияния антигельминтика аверсект-2 на биохимический, микробный и иммунный статусы организма овец, а также поиск оптимальных схем дегельминтизации, с наименьшими нарушениями гомеостаза, для формирования полноценного иммунного ответа при вакцинации против лептоспироза и бруцеллеза.

Указанная цель определяет следующие задачи исследований:

1. Изучить влияние антгельминтика аверсект-2 на биохимический, иммунный и микробный статусы организма овец.

2. Дать оценку влияния дегельминтизации аверсектом-2 на формирование поствакцинального иммунитета против лептоспироза и бруцеллеза овец.

3. Проанализировать динамику биохимического, иммунного и микробного статуса организма овец при вакцинации сухой живой вакциной из штамма 19 В. abortus и поливалентной вакциной «ВГНКИ» против лептоспироза в зависимости от сроков дегельминтизации.

4. Обосновать оптимальную схему проведения дегельминтизации и вакцинации овец против лептоспироза и бруцеллеза.

Научная новизна. Впервые в регионе озера Байкал изучено влияние антгельминтика аверсект-2 на антителогенез при вакцинации овец против бруцеллеза вакциной из штамма 19 В. abortus и против лептоспироза вакциной «ВГНКИ», определены оптимальные сроки проведения вакцинации и противопаразитарной обработки животных. Установлено влияние аверсекта-2 на биохимический, иммунный и микробный статус организма овец.

Впервые изучено влияние антгельминтика аверсект-2 ВК 20%-ной концентрации на энтеробиоценоз свиней.

Практическая и теоретическая значимость работы. Результаты исследования расширяют представления о степени влияния антгельминтиков на клинико-биохимический, иммунологический и микробный статусы организма животных.

Выявленные особенности формирования поствакцинального иммунитета при разных сроках дегельминтизации могут учитываться при организации и проведении противопаразитарных лечебно-профилактических мероприятий в овцеводческих хозяйствах республики Бурятия.

С учетом полученного материала, может быть снижен риск побочных явлений при применении антигельминтика аверсект-2 и вакцин и проведена их коррекция, что позволяет оперативно управлять эпизоотической ситуацией по инфекционным и паразитарным болезням сельскохозяйственных животных и вносить соответствующие коррективы в проведение профилактических и оздоровительных мероприятий.

На основе проведенных исследований разработана технологическая схема проведения диагностических и ветеринарно-профилактических мероприятий используемых в хозяйствах Республики Бурятия. Разработаны и утверждены методические рекомендации: «Иммуногенность поливалентной вакцины «ВГНКИ» против лептоспироза в зависимости от сроков дегельминтизации овец» (утверждена 15.11.2009 г. научно-техническим советом Управления ветеринарии республики Бурятия, протокол № 5, одобрена ученым советом ФВМ ФГОУ ВПО БГСХА протокол № 22 от 27 сентября 2009 г.).

Реализация результатов исследований. Результаты исследований используются в хозяйствах и ветеринарных учреждениях Республики Бурятия при проведении ветеринарных лечебно-профилактических мероприятий по основным инфекционным и паразитарным болезням.

Материалы диссертационной работы применены для усовершенствования схемы ветеринарно-санитарных мероприятий в хозяйствах региона при составлении ветеринарно-технологических карт противоинвазионных обработок и вакцинаций.

Основные материалы диссертационной работы используются в учебном процессе: при чтении лекций и проведении лабораторно-практических занятий со студентами и слушателями ФПК по эпизоотологии, микробиологии и паразитологии Бурятской государственной сельскохозяйственной академии им. В.Р. Филиппова, Иркутской государственной сельскохозяйственной академии и Дальневосточного государственного аграрного университета.

На защиту выносятся следующие положения: 1. Особенности биохимической и иммунологической реактивности при использовании антгельминтика аверсект-2.

2. Состояние микробиоценоза желудочно-кишечного тракта животных при использовании антгельминтика аверсект-2.

3. Результаты сравнения эффективности разных схем дегельминтизации и вакцинации животных против бруцеллеза и лептоспироза.

Апробация работы. Основные положения диссертации доложены и обсуждены на ежегодных научно-практических конференциях факультета ветеринарной медицины Бурятской государственной сельскохозяйственной академии им. В.Р. Филиппова (г. Улан-Удэ, 2006-2010); научно-практической конференции преподавателей, сотрудников и аспирантов, посвященной 75-летию БГСХА им. В.Р. Филиппова (Улан-Удэ, 1-6 февраля 2007 г.); международной научно-практической конференции, посвященной 70-летию образования кафедры паразитологии, эпизоотологии и организации ветеринарного дела факультета ветеринарной медицины Бурятской ГСХА им. В.Р. Филиппова (Улан-Удэ, 27-29 июня 2008 г.); международной научно-практической конференции, посвященной 35-летию образования факультета ветеринарной медицины Кубанского государственного аграрного университета «Достижения современной ветеринарной науки и практики в области охраны здоровья животных» (Краснодар, 16-19 июня 2009 г.); международной научно-практической конференции, посвященной 70-летию заведующего кафедрой терапии и клинической диагностики профессора Ю.А. Тарнуева (Улан-Удэ, 26-28 июня 2009 г.).

Публикации. Основные результаты и положения диссертации опубликованы в четырех статьях, в том числе в журнале по перечню ВАК (Труды Кубанского ГАУ) и одной научной рекомендации.

Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 152 страницах компьютерного текста и состоит из следующих разделов: введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения результатов, выводов, практических предложений, библиографии и приложений. Диссертация включает 17 таблиц, 18 рисунков. В работе использовано 163 литературных источника, из них 20 иностранных. г j г 9

Заключение Диссертация по теме "Кормление сельскохозяйственных животных и технология кормов", Коротких, Марина Николаевна

Результаты исследования использованы при разработке нормативно-технических документов и методических рекомендаций, предложенных для практического использования. «Иммуиогенность поливалентной вакцины «ВГНКИ» против лептоспироза в зависимости от сроков дегельминтизации овец (утверждена 15.11.2009 г. научно-техническим советом Управления ветеринарии республики Бурятия, протокол № 5, одобрена ученым советом ФВМ ФГОУ ВПО БГСХА протокол № 22 от 27 сентября 2009 г.)

С учетом полученного материала, может быть снижен риск побочных явлений при применении антигельминтика аверсект-2 и вакцин и проведена их коррекция, что позволяет оперативно управлять эпизоотической ситуацией по инфекционным и паразитарным болезням сельскохозяйственных животных и вносить соответствующие коррективы в проведение профилактических и оздоровительных мероприятий.

Материалы диссертационной работы используются в учебном процессе при чтении лекций и проведении лабораторно-практических занятий по эпизоотологии, микробиологии, паразитологии в Бурятской ГСХА, Иркутской ГСХА и Дальневосточном ГАУ.

Библиография Диссертация по сельскому хозяйству, кандидата ветеринарных наук, Коротких, Марина Николаевна, Улан-Удэ

1. Акимкин, В.Г. Дисбактериоз кишечника как фактор риска заболеваний нозокомиальным сальмонеллезом / В.Г. Акимкин // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. - 1997. - №3. - С. 105-106.

2. Акимкин, В.Г. Микроэкологические нарушения толстого кишечника у больных гастроэнтерологического профиля / В.Г. Акимкин, Г.И. Заболотнова, Г.К. Антонова // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии.- 1997. №2. - С. 85-86.

3. Алексеев, С.А. Анализы крови и мочи и их интерпретация: пособие для врачей / С.А. Алексеев, Ю.М. Гаин. -М.: ООО «Юнипресс», 2002. 144 с.

4. Анализ крови и мочи. Как его интерпретировать?: руководство для практикующих врачей / Под ред. Г.И. Козинца, Л.М. Гиндмана. М.: Мир, 2001.-106 с.

5. Апатенко, С.М. Смешанные инфекции сельскохозяйственных животных / С. М. Апатенко. 2-е изд., перераб. и доп.- Киев: Ураджай, 1990. - 172 с.

6. Ахмедов, М.М. Белки сыворотки крови при инфекционных болезнях животных / М.М. Ахмедов. М.: Колос, 1968.

7. Ахмедов, М.М. Иммунитет при лептоспирозе животных / М.М. Ахмедов // Проблемы ветеринарной иммунологии: сб. ст. / ВАСХНИЛ. М.: Агропромиздат, 1987. - С 91-93.

8. Беклемишев, Н. Д. Иммунопатология и иммунорегуляция (при инфекциях, инвазиях и аллергиях). М.: Медицина, 1986. - 256 с.

9. Березовский, B.C. Дегельминтизация овец ассоциированными антгельмин-тиками при смешанной инвазии / B.C. Березовский // Химиопрофилактика, патогенез и эпизоотология паразитозов с.-х. животных: сб. науч. тр. / Казахский НИВИ. Алма-Ата, 1984. - С 34-38

10. Беспятых, О.Ю. Изучение стимуляции бутандиовой кислотой поствакцинального противосальмонеллезного иммунитета у красной лисицы / О.Ю. Беспятых, З.Н. Бельтюкова, Ю.А. Березина // Тр. КубГАУ/ Кубанский гос. аграр. ун-т.- 2009. Вып.1. - С. 21-23.

11. П.Бессонов, А.С. Антипаразитарные вакцины: современное состояние и перспективы коммерциализации / А.С.Бессонов // Ветеринария. 2002. - №11.- С. 24-27.

12. Биохимические исследования в клинике / Под ред. Ф.И. Комарова, Б.Ф. Коровкина. М.: «МЕДпресс-информ», 2001. - 216 с.

13. Блохина, И.Н. Дисбактериозы / И.Н. Блохина, В.Г. Дорофейчук. JL, 1979.- 176 с.

14. Боднарчук, В.Г. Трансаминазная активность крови овец в норме и при дегельминтизации / В.Г. Боднарчук // Диагностика, лечение и профилактика заболеваний с.-х. животных: науч. тр. / Ставропольский СХИ. 1973. - Т. 5. - Вып. 36. С. 74-76.

15. Бочкарев, В.Н. Картина крови под действием тетрамизола / В.Н. Бочкарев, Д.Э. Эшимов, Ш.У. Абдуганиев // Инвазионные болезни с.-х.: сб. науч. тр./ Ташкентский СХИ. Ташкент. - 1986. - С. 71-72.

16. Бунин, К.В. Прививочные реакции при иммунизации живыми вакцинами / К.В. Бунин, К.Г. Гапочко. М., 1970. - 295 с.

17. Бутова, С.А. Иммунобиологические аспекты патогенеза гельминтозов лошадей / С.А. Бутова, Н.С. Беспалова // Тр. КубГАУ/ Кубанский гос. аграр. ун-т. 2009.- Вып.2.- С. 256-258.

18. Бухарбаев, К. Эффективность камбендазола при диктиокаулезе и кишечных цестодозах овец / К. Бухарбаев // Химиопрофилактика, патогенези эпизоотология паразитозов с.-х. животных: сб. науч. тр./ Казахский НИВИ. -Алма-Ата, 1981. С Л 9-21.

19. Вавилова, Т.П. Биохимия в вопросах и ответах: учеб. пособие для студ. мед. вузов / Т.П. Вавилова. 2-е изд-е перераб. и доп. - М.: Веди, 2005. - 128 с.

20. Васильева, В.А. Клиническая биохимия сельскохозяйственных животных /

21. B.А. Васильева. М.: Россельхозиздат, 1984. - 192 с.

22. Васильев, Н.А. Овцеводство и технология производства шерсти и баранины / Н.А. Васильев, В.К. Целютин. 2 изд-е, испр. и доп. - М.: Агропромиздат, 1990. - 320 с. - (Наука - производству).

23. Влияние ивермека на показатели иммунного ответа у животных / Э.Х. Даугалиева и др. // Ветеринария. 2000. - № 12. - С. 29-31.

24. Влияние цидектина, ивомека и аверсекта на иммунную систему / П.Н. Смирнов и др. // Ветеринария. 1995. - № 9. - С. 48-51.

25. Галлиулина, A.M. Влияние антгельминтной терапии на микроценоз и микробиологические процессы в рубце / А.М.Галлиулина, Б.А. Галимова, И. Н. Фархутдинов // Современные вопросы ветеринарной медицины и биологии: сб. науч.тр. Уфа. - 2000. - С. 21-22.

26. Глухова, М.В. Применение селенита натрия при осложнениях у коров после дегельминтизации против фасциолеза / М.В. Глухова, Т.П. Веселова // Ветеринария. 1995. - № 7. - С. 36-37.

27. Голубев, И.Е. Взаимодействие организма и условий внешней среды на течение бруцеллезной инфекции у лошадей / И.Е. Голубев // Ветеринария. 1949. - № 9.1. C.20-23.

28. Горковенко, Н.Е. Особенности ассоциаций грамотрицательных микроорганизмов, выцеленных от телят / Н.Е. Горковенко, Ю.А Макаров // Тр. КубГАУ / Кубанский гос. аграр. ун-т. 2009. - Вып. 1.- С. 37-39.

29. Горохов, В.В. Прогноз ситуации по основным гельминтозам животных в России на конец пастбищного сезона 2005 года / В.В. Горохов // Ветеринарный консультант. 2003. - № 15. - С. 3.

30. Горохов, В.В. Прогноз эпизоотической ситуации по основным гельминтозам в

31. России на 2006 год / В.В. Горохов / Ветеринарный консультант. 2006. - № 9. -С.З.

32. Данилова, Л.А. Анализы крови и мочи / Л.А.Данилова.- 2-е изд., перераб. и доп. СПб. : Деан, 1999. - 128 с. - (Настольная книга врача-лаборанта).

33. Даугалиева, Э.Х. Иммунный статус и пути его коррекции при гельминтозах / Э.Х. Даугалиева // Иммунитет с.-х. животных: сб. науч. тр. / ВНИИ экспериментальной ветеринарии им. Я.Р. Коваленко. М., 1989. - Т. 67.-С. 78-81.

34. Даугалиева, Э.Х. Иммунологическая толерантность в патологии и эпизоотологии гельминтозов / Э.Х. Даугалиева // Вестник с.-х. науки. 1982. -№Ц. с. 115-121.

35. Даугалиева, Э.Х. Особенности иммунитета животных при гельминтозах / Э.Х. Даугалиева, К.Г. Курочкина, А.В. Аринкин // Ветеринария.- 1996.-№ 7. -С. 37-38.

36. Даугалиева, Э.Х. Теоритические основы иммунопрофилактики гельминтозов сельскохозяйственных животных / Э.Х. Даугалиева, К.Г. Курочкина, В. В. Филиппов // Вестник с.-х. науки. 1991. - № 10. - С. 136141.

37. Джорджеску, П. Биохимические методы диагноза и исследования / П. Джорджеску, Е. Пэунеску. Бухарест: Медиздат, 1963. - 500 с.

38. Долгов, И.А. Численность и ферментативная активность некоторых групп микроорганизмов в разных отделах пищеварительного тракта ягнят / И.А. Долгов // Вопросы физиологии и биохимии питания овец: науч. изд. ВАСХНИЛ. М: Колос, 1981. - С. 65-68.

39. Дранник, Г.Н. Клиническая иммунология и аллергология / Г.Н. Дранник. М.: ООО «Медицинское информационное агентство», 2003. - 604 с. - (Пособие для практикующих врачей).

40. Евдокимов, П.И. Паразитологические и микробиологические аспекты животных в регионе озера Байкал: науч. издание / П.И. Евдокимов, A.M. Третьяков, В.Ц. Цыдыпов; ФГОУ ВПО « Бурятская ГСХА им. В.Р.

41. Филиппова». Улан-Удэ: Изд-во БГСХА, 2003. - 150 с.

42. Ершов, B.C. Проблемы иммунитета и аллергии при гельминтозах / B.C. Ершов // Проблемы ветеринарной иммунологии: сб. ст./ ВАСХНИЛ. М.: Агропромиздат, 1985. - С. 17-22.

43. Земсков, В.М. Структура и функции макрофагов / В.А.Земсков // Проблемы ветеринарной иммунологии: сб. ст. / ВАСХНИЛ. М.: Агропромиздат, 1985. - С. 36-40.

44. Иванов, М.М. Сравнительная иммуногенная оценка применения бруцеллезных вакцин / М.М. Иванов, Р.В. Складчиков // Ветеринария. 1970. - № 4. - С. 53-57.

45. Иванова О.М. Действие антигельминтиков на микробный и иммунный статус организма животных в регионе озера Байкал: автореф. дис. канд. ветеринарю наук / О.М. Иванова. Благовещенск. - 2004. - 23 с.

46. Игнатов, П.Е. Иммунитет и инфекция / П.Е.Игнатов. М.: Время, 2002. - 352 с.

47. Иммунопаразитан обоснования к применению / В.А. Сергеев и др. // Ветеринария. - 2004. - № 32. - С. 16-17.

48. Иммуноферментный анализ в ветеринарии: сб. ст. / Под ред. Г.Ф. Коромыслова / ВЕ1ИИ экспериментальной ветеринарии им. Я.Р.Коваленко. -М.: 1985,-Вып. 58. -68 с.

49. Интернациональная система единиц измерения (СИ) в ветеринарной диагностике. М.: Белая Церковь, 1987.

50. Исаев, Б.И. Овцеводство Забайкалья / Б.И. Исаев, А.П. Кузовлев, П.Н. Тельпов. Иркутск: Вост. - Сиб. книжное изд-во, 1984. - 128 с.

51. Исследование крови животных и клиническая интерпретация полученных результатов. М.: Белая Церковь, 1987.

52. Исследование системы крови в клинической практике / Под ред. Г.И.

53. Кожнца, В А. Макарова. М.: Триада-Х, 1997. - 480 с.

54. Калугин, Г.А.Физиология питания / Г.А. Калугин. М.: Колос, 1980.- 173 с.

55. Камышников, B.C. Клинико-биохимическая лабораторная даагаостака/ В.С.Камышников.- Минск: Интерпрессервис,2003.1. Т.1. -431с. Т.2.-496 с.

56. Кенигсберг, Я.З. Влияние дибазола и метилурацила на иммунитет / Я.Э. Кенигсберг // Проблемы ветеринарной иммунологии: сб. науч. тр. / ВАСХНИЛ. М.: Агропромиздат, 1985. - С. 50-52.

57. Кишкун, А.А. Иммунологические и серологические исследования в клинической практике / А.А. Кишун. М.: ООО «Медицинское информационное агентство», 2006. - 536 с.

58. Клиническая лабораторная диагностика в ветеринарии / И.П. Кондрахин и др.. М: Агропромиздат. - 1985. - 287 с.

59. Козинец, Г.Л. Интерпретация анализов крови и мочи: пособие для практикующих врачей / Г.Л.Козинец. М.: Триада-Х, 1997. - 104 с.

60. Комаров, Ф.И. Биохимические исследования в клинике / Ф.И. Комаров, Б.Ф. Коровкин, В.В. Меньшиков. М.: Элиста; АЛЛ «Джангар», 2001.- 216 с.

61. Конопаткин, А.А. Эпизоотологические проблемы смешанных инфекций в современном животноводстве / А.А. Конопаткин // Патология органов дыхания и пищеварения с.-х. животных: сб. науч. тр. / MBA.- М., 1983.- С. 3-9.

62. Коняев, М.Т. Бифидумбактерии для профилактики и лечения диспепсии телят / М.Т. Коняев // Ветеринария. -1974. № 3. - С. 83-85.

63. Копанев, Ю. А. Дисбактериоз кишечника: микробиологические, иммунологические и клинические аспекты микробиологических нарушений у детей / Ю. А. Копанев, А. Л. Соколов. М.: Медицина. - 2000. - 148 с.

64. Косаткина, Э.П. Бактериологическая диагностика дисбактериоза кишечника у детей, больных сахарным диабетом: методические рекомендации / Э.П. Косаткина, J1.A. Тараненко, А.А. Воронин. М.: Минздрав. - 1996. - 17 с.

65. Костин, А.П. Физиология сельскохозяйственных животных / А.П.Костин. -М.: Колос, 1983.-479 с.

66. Костинов, М.П. Иммунобиологические препараты: клинико-иммунологическая эффективность / М.П. Костинов, Н.В. Медуницин. М.: Миклош, 2008. - 256 с.

67. Красноголовец, В.Н. Дисбактериоз кишечника: учебное пособие / В.Н. Красноголовец. М.: Медицина.- 1989.- 120 с.

68. Кудрявцев, А.А. Клиническая гематология животных / А.А. Кудрявцев, Л.А. Кудрявцева. М.: Колос, 1974. - 399 с.

69. Кузьмин, А.А. Антгельминтики в ветеринарной медицине / А.А.Кузьмин. -М. : Агропромиздат, 2000. 144 с.

70. Кузьмин, В.В. Практические занятия по ветеринарной микробиологии / В.В. Кузьмин, А. Панкратов. М.: Сельхозгиз, 1959. - 204 с.

71. Лабинская, А.С. Миробиология с техникой микробиологических исследований: пособие для учащихся фельдшерско-лабораторных отделений медицинских учреждений / А.С. Лабинская. М.: Медицина. - 1972. - 480 с.

72. Лабораторная гематология / А.С. Луговская, Т.В. Морозова, М.Б. Почтарь, В.В. Долгов. М.: Юнимед-пресс, 2002. - 120 с. 1

73. Лабораторные исследования в ветеринарии: биохимические и микологические : справочник / Под ред. Б.И.Антонова; Сост. Б.И.Антонов и др.. М.: Агропромиздат, 1991. - 287 с. ,

74. Лакин, Г.Ф. Биометрия / Г.Ф.Лакин. М.: Высшая школа, 1980. - 293 с.

75. Ленцнер, А.А. Лактофлора животного организма и ее защитная функция / А.А. Ленцнер // Теоретические и практические аспекты гнотобиологии. М.: Агропромиздат, 1986. - С .195-196.

76. Лея, Ю.Л. Оценка результатов клинических анализов крови и мочи / Ю.Л. Лея. М.: Медпресс, 2000. - 192 с.

77. Лифшиц, В.М. Биохимические анализы в клинике: справочник / В.М. Лифшиц. М: Триада-Х, 2002. - 208 с.

78. Лифшиц, В.М. Медицинские лабораторные анализы: справочник / В.М. Лифшиц. М.: Триада-Х, 2003. - 312 с.

79. Мазур, О.Е. Иммунобиологическая реактивность овец при эймериозно-гельминтозной инвазии и на фоне антгельминтной терапии в республике Бурятия: автореф. дис. канд. биол. наук / О.Е. Мазур. Чита, 1998. - 23 с.

80. Макарук, М.А. Состояние неспецифических факторов защиты организма у телят и коров породы шароле в зависимости от содержания животных / М.А. Макарук, Ж.М. Сак // Проблемы ветеринарной иммунологии: сб. ст. / ВАСХНИЛ. М.: Агропромиздат, 1985. - С.52-54.

81. Малахов, Ю.А. Лептоспироз животных / Ю.А.Малахов. М.: Агропромиздат, 1992. - 239 с.

82. Манджиев, О.Х. Аверменктинсодержащие препараты против гельминтозов овец / О.Х. Манджиев // Ветеринария. 2004. - № 3. - С. 11.

83. Манджиев, О.Х. Эффективность ниавета при паразитозах крупного рогатого скота / О.Х. Манджиев, Н.Т. Гусейнов // Ветеринария. 2005. - № 8 С. 12-13.

84. Медицинские лабораторные технологии и диагностика / Под ред. А.И. Карпищенко. СПб: Интермедика, 2002. - 408 с.

85. Методические рекомендации по микробиологической диагностике дисбактериозов кишечника в лечебно-диагностических учреждениях армии и флота: методические рекомендации / В.М. Добрынин и др..- СПб: СПб. НИИ эпидемиологии и микробиологии. 1999. - 36 с.

86. Миронова, А.А. Морфологические и биохимические показатели крови свинейпри ассоциативном течении эймериоза и трихоцефалеза // А.А. Миронова, Н.В. Стрельцов // Тр. КубГАУ/ Кубанский гос. аграр. ун-т.- 2009. Вып. 1. - С. 173-175.

87. Миронова, А.А. Морфологические и биохимические показатели крови нутрий при ассоциативном течении эймериоза и стронгилоидоза / А.А. Миронова, Е.А. Мирончук // Тр. КубГАУ/ Кубанский гос. аграр. ун-т.- 2009. -Вып. 1.-С. 168-170.

88. Нагаев, Ю.М. Племенная работа в овцеводстве Бурятии / Ю.М.Нагаев. -Улан-Удэ, 1982. 96 с.

89. Нехуров, Л.Б. Адаптационные механизмы устойчивости организма животных / Л.Б. Нехуров; ФГОУ ВПО «Бурятская ГСХА им. В.Р.Филиппова». Улан-Удэ: Изд-во БГСХА, 2000.- 60с.

90. Нехуров, Л.Б. Лептоспироз домашних животных: эпизоотология, этиопатогенез и меры борьбы / Л. Б. Нехуров, А.С. Хангажинов, Д. И. Наиманов; ФГОУ ВПО « Бурятская ГСХА им. В.Р.Филиппова». Улан-Удэ: Изд-во БГСХА, 2002,- 40 с.

91. Новиков, Б.В. Основные параметры иммунного статуса клинически здоровых свиней / Б.В. Новиков, В.В. Дмитренко // Ветеринария. 1993. - № 2. - С. 22-25.

92. Панасюк, Д.И. Проблемы ассоциации гельминтов, патогенныхпростейших и микрофлоры при интенсивном ведении животноводства / Д.И. Панасюк, В.В. Филиппов, П.В. Радионов. М.: Изд-во ВАСХНИЛ, 1978. -278 с.

93. Панин, Ф.Н. Формирование кишечного микробиоценоза у цыплят / Ф.Н. Панин, Н.И. Малик, И.П. Степаненко // Ветеринария. 2000. - №7. - С. 23-25.

94. Пауликас, В.Ю. Паразитоценоз желудочно-кишечного тракта свиней. М.: ВО Агропромиздат, 1990. - 81 с.

95. Петров, Ю.Ф. Паразитоценозы и ассоциативные болезни сельскохозяйственных животных. Л.: Агропромиздат, 1988. - 176 с.

96. Петровская, В.Г. Микрофлора человека в норме и при патологии / В.Г. Петровская, О.П. Марко. М., 1976. - 227с.

97. Пешкус, Ю.К. Иммунные комплексы сыворотки крови крупного рогатого скота при лейкозе/Ю.К. Пешкус, В.И. Жилайтис, В.И. Тамошюнас // Проблемы ветеринарной иммунологии: сб. ст. / ВАСХНИЛ. М.: Агропромиздат, 1985.-С. 67-70.

98. Плешакова, В.И. Показатели иммунитета свиней и их коррекция иммуномодуляторами / В.И. Плешакова, М.Ю. Нелепова, Д.А. Шустов // Тр. КубГАУ / Кубанский гос. аграр. ун-т.- 2009. Вып. 1. - С. 126-128.

99. Полетаев, А.Б. Клиническая и лабораторная иммунология: избранные лекции / А.Б.Полетаев. М.: ООО «Медицинское информационное агентство», 2007. - 184 с.

100. Поствакцинальный иммунитет при лептоспирозе у сельскохозяйственных животных / Ю.А. Малахов и др. // Проблемы ветеринарной иммунологии: сб. ст./ ВАСХНИЛ. М.: Агропромиздат, 1985. -С.94-96.

101. Прискока, В.А. Система исследований при смешанных инфекциях / В.А. Прискока // Ветеринария. -1993. № 2. - С. 24.

102. Пяткин, К.Д. Руководство к практическим занятиям по медицинской микробиологии / К.Д. Пяткин, Н.С. Маркова, Н.Д. Трофимова. М.: Медицина. -1969. - 256 с.

103. Расшифровка клинических лабораторных анализов / К. Хиггинс; пер. с англ.; под ред. проф. В. Л. Эмануэля. 3-е изд., испр. - М.: БИНОМ. Лаборатория знаний, 2008. - 376 с.

104. Роль микропаразитоценозов в эпизоотологии инфекционных болезней / А.П. Красиков и др. // Ветеринарный консультант. 2005. - №4. - С. 8-9.

105. Сакалаускайте, Ю.А. Иммунный ответ хозяина на паразитирование трихинелл и его изменение под воздействием мебендазола / Ю.А. Сакалаускайте // Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1978. - №6.1. С. 23-28.

106. Саушкин, В.В. Влияние ивермага и альбазена на иммунологическую реактивность организма овец/В.В. Саушкин, А.С. Топала // Ветеринария. -2007.- № 12.-С. 30-32.

107. Сидоров, М.А. Нормальная микрофлора животных и ее коррекция пробиотиками/М.А. Сидоров, В.В. Субботин, Н.В. Данилевская // Ветеринария. 2000.- № 11. - С. 17-19

108. Сидоров, М.А. Определитель зоопатогенных микроорганизмов / М.А. Сидоров. М.: Колос, 1995. - 319 с.

109. Сизова, А.В. Значение микрофлоры желудочно-кишечного тракта и использование бактерий симбионтов в животноводстве / А.В. Сизова. М., 1974. - 79 с.

110. Сиразиев Р.З. Пособие по основам биометрии / Р.З. Сиразиев, Л.М.

111. Малакшинова, Г.А. Игумнов; ФГОУ ВПО Бурятская ГСХА им. В.Р. Филиппова. Улан-Удэ: Изд-во БГСХА, 2004. - 48 с.

112. Скала, JI.3. Практические аспекты современной клинической микробиологии / J1.3. Скала, С.В. Сидоренко, А .Г. Нехорошева. М.: ТОО «Лабинформ». - 1997. - 218 с.

113. Справочник основных клинических лабораторных показателей. -Кишинев.: Картя молдовеняскэ, 1990. 234 с.

114. Справочник специалиста ветеринарной лаборатории / Н.В.Коротченко и др.; Под ред. Ю.П.Смияна. Киев: «Урожай», 1981. - 367 с.

115. Степин, B.C. Иммуногенез при бруцеллезе крупного рогатого скота / B.C. Степин // Ветеринария. 1970. - № 5. - С. 59-60.

116. Терас, Ю.Х. О способности простейших инактивировать патогенные для человека и животных вирусы. / Ю.Х. Терас, З.В. Калласс, Л.Ю. Кеса // Теоретические и практические вопросы паразитологии: сб. науч. тр. / Эстонская СХА. -Тарту: 1979. - С. 46-47.

117. Третьяков A.M. Бактерионосительство гельминтами и влияние антгельминтиков на микробный статус организма животных (жкт) : дисс. канд. вет. наук/А.М.Третьяков . Улан-Удэ, 2001. - 161 с.

118. Урбан, В.П. Иммунопрофилактика инфекционных болезней животных / Проблемы ветеринарной иммунологии: сб. ст./ ВАСХНИЛ.- М.: Агропромиздат, 1985. С. 13-17.

119. Успенский А.В. Паразитологическая ситуация в России ипо новым и возвращающимся гельминтозам / А.В. Успенский, В.В. Горохов, В.П. Сергеев // Ветеринария. 2006. - № 3. - С. 3-6

120. Филиппов, В.В. Эпизоотология гельминтозов сельскохозяйственных животных / В.В.Филиппов. М: Агропромиздат, 1988. - 208 с.

121. Финохин, А.В. Дисбактериоз кишечника при микробной экземе: автореф. дис. канд. мед. наук. / А.В. Финохин .- Саратов. 1989. - 159 с.

122. Функционирование и иммунологическая характеристика лимфоидных клеток костного мозга крупного рогатого скота / Г.Ю. Гирюнас и др. // Проблемы ветеринарной иммунологии: сб. науч. тр. / ВАСХНИЛ. М.: Агропромиздат, 1985. - С. 61-64.

123. Хлопицкий, В.П. Эффективность ивермага при смешанных паразитозах крупного рогатого скота / В.П. Хлопицкий // Ветеринария. 2004. - № 12. - С. 10-11.

124. Холод, В.М. Белки сыворотки крови в клинической и эксперимен -тальной ветеринарии / В.М.Холод. Минск: Ураджай, 1983. - 123 с.

125. Холод, В.М. Справочник по ветеринарной биохимии. Минск:1. Ураджай», 1988. 168 с.

126. Цыдыпов, В.Ц. Краевая эпизоотология и микробиология Восточной Сибири РФ и Монголии: монография / В.Ц. Цыдыпов A.M. Третьяков, О.Б. Бадмаева; ФГОУ ВПО « Бурятская ГСХА им. В.Р.Филиппова». Улан-Удэ: Изд-во БГСХА, 2008. - 358 с.

127. Цынко, Т.Ф. Анализы говорят о вашем здоровье / Т.Ф.Цынко. Ростов-н/Д: Феникс, 2006. - 224 с.

128. Цынко, Т.Ф. Диагностика заболеваний по анализам крови и мочи / Т.Ф. Цынко . Ростов-н/Д: Феникс, 2005. - 160 с.

129. Шелякин И.Д. Биохимические показатели крови коров при фасциолезе / И.Д. Шелякин, В.Н. Кузьмичева // Ветеринарный консультант. 2005. - № 7. -С. 13-14.

130. Шигина, Ю.И. Иммунология / Ю.И.Шигина. М.: РИОР, 2007. - 183 с.

131. Шишков, В.П. Иммунология и современные проблемы ветеринарии / В.П.Шишков // Проблемы ветеринарной иммунологии: сб. ст./ ВАСХНИЛ.-М.: Агропромиздат, 1985.-С.3-9.

132. Эльмурадов Б.А. Смешанные инфекции телят / Б.А. Эльмурадов // Ветеринарная патология. № 2. - С. 52-53.

133. Энциклопедия клинических лабораторных тестов. М.: Лабинформ, 1997.-126 с.

134. Эффективность антгельминтиков при миксинвазии свиней/ В.П. Иванюк и др. // Ветеринария. 2007. - № 3. - С. 29-31.

135. Barber, Н. R. К. Immunobiology for the Clinician / H. R. К. Barber H. R. К. // A Wiley Medical Publication John Wiley & Sous. New-York.- London- Sydney-Toronto, 1977. p. 227.

136. Boud, W.S. Fundamentals of immunology Fourth Edition Intersciense publiscers

137. New-York-London-Sydney, 1966.- 648 p.

138. Burnet, F. Cellular immunologi. Cambridge university press, 1969. 544 p.

139. Finegold S.M. Interaction of antimicrobial therapy and intestinal flora / S.M. Finegold // Am.J.Clin.Nutr. 1979. - Vol.-23(l 1). -P. 514-519.

140. Hayward A.C. The Morphology and Relationships of Lactobacillus bifidum / A.C. Hayward, C.M. Hael, K.A. Bisset // L. Gan. Microbial. 1955. - Vol. 13. -№ 2. -P. 282-294.

141. Heaton K.W. Dile Salts in Healht ahd Disease / K.W.Heaton, Edinburg. -1972

142. Hill M. Normal and pathological microbial flora in the upper gastrointestinal tract / M. Hill // Scand. J. Gastrointestinal. 1988. - Vol. - 20. Suppl. - P. 1-5

143. Ho Chester S. An Understanding of the forces in the adhesion of microorganisms to surfaces / S. Ho Chester // Process Biochem. 1986. - Vol. 2Г

144. Hosono A., Lee J., Amertani A., Natsume M. Characterization of a water soluble polysaccharide fraction with immunopotentiating activity from Bifidobacterium adolescentis Ml01-4 // Biosci. Biotechnol. Biochem 1997. -Vol. 61(2).-P. 312-316.

145. Kadooka Y., Fujiwara S., Hirota T. Immunopotentiating properties of Bifidobacterium longum S6T2928 // Int. Bifrdobacter. Conf. Tokyo, 1990. -Abstr.-P.61.

146. Malvoz E., Lambinet J. Infections microbionees consecutives a la penetration cutanee des larves de L. Ankylostome. Ann. Inst. Pasteur, 1918, Paris, v. 32.

147. Savage D.C. Microbial ecology in the gastrointestinal tract. / D.C. Savage // Amer.J.Clin.Nutr. 1979. - Vol. 32. - P. 547-451.

148. Savage D.C. Microbial ecology in the gastrointestinal tract. / D.C. Savage // Amer. J. Clin. Nutr. 1979. - Vol. 32. - P. 547-451

149. Schiffrin E.J., Brassart D., Servin A.L. Immune modulation of blood leukocytes in humanis by lactic acidi bacteria: criteria for strain selection // Am. J. Clin. Nutr. 1997. - Vol. 66. - P. 515-520.

150. Suzuki Т., Kaneko T. Inhibition of bacterial translocation fromgastrointestinal tract of mice by oral administration of a culture condensate of Bifidobacterium longum // J. Vet. med. Sci. 1997. - Vol. 59 (8). - P. 665-669

151. Tannock G.W. The normal microflora: new concepts in health promotion. / G.W. Tannock. // Microbiological Sci.-1988.-vol. 5.- №1,- P.4-8.

152. Urban J.F. Influence of helmynth parasite exposure and strategic application of antgelmintics on the development of immunity and growth of swine / J.F. Urban, R.D. Romanovski, N.C. Steele // J.Anim.Sc. 1989. - № 67. - P. 166-167.

153. Van der Waaij D. Evidence of der immunoregulation of the composition of intestinalnmicroflora and its practical conseguences / D. Van der Waaij // Eur.J.Clin.Microbiol.Infect.Dis. 1988. - Vol. 7.

154. Van Furth R., Van der Meer J.W.M., Van Oud Albas et. al. Development of mononuclear phagocytes. // Self-defense mechanisms. Role macrophages. -Tokyo; Amsterdam, 1982. P. 25-41.