Бесплатный автореферат и диссертация по сельскому хозяйству на тему

УСОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ ТЕХНОЛОГИИ ПОЛУЧЕНИЯ ЗДОРОВОГО ИСХОДНОГО МАТЕРИАЛА ДЛЯ ПЕРВИЧНОГО СЕМЕНОВОДСТВА КАРТОФЕЛЯ

ВАК РФ 06.01.11, Защита растений

Автореферат диссертации по теме "УСОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ ТЕХНОЛОГИИ ПОЛУЧЕНИЯ ЗДОРОВОГО ИСХОДНОГО МАТЕРИАЛА ДЛЯ ПЕРВИЧНОГО СЕМЕНОВОДСТВА КАРТОФЕЛЯ"

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ АГРОПРОМЫШЛЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

МОСКОВСКАЯ ОРДЕНА ЛЕНИНА И ОРДЕНА ТРУДОВОГО КРАСНОГО ЗНАМЕНИ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННАЯ АКАДЕМИЯ имени К. А. ТИМИРЯЗЕВА

На правах рукописи

КИНЯКИН Николай Федорович

УДК 632..93 : 633.491

УСОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ ТЕХНОЛОГИИ ПОЛУЧЕНИЯ ЗДОРОВОГО ИСХОДНОГО МАТЕРИАЛА ДЛЯ ПЕРВИЧНОГО СЕМЕНОВОДСТВА КАРТОФЕЛЯ

Специальность 06.01.11 —защита растений от вредителей и болезней

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата сельскохозяйственных наук

МОСКВА 1989

' /

С/

■УШГ лЯТ;

Работа выполнена на кафедре фитопатологии Московской ордена Ленина и ордена Трудового Красного Знамени сельскохозяйственной академии им. К. А. Тимирязева.

Научный руководитель — кандидат биологических наук, доцент В. А. Шмыгля.

Официальные оппоненты: доктор сельскохозяйственных наук, профессор Ю. И. Помазков; кандидат сельскохозяйственных наук, ст. н. с. Л. Т. Харченко.

Ведущее предприятие — Научно-исследовательский институт картофельного хозяйства Госагропрома РСФСР.

Защита диссертации состоится « \2» . чкуш .... 1989 г. в час. мин. на заседании специализиро-

ванного совета К-120.35.03 в Московской сельскохозяйственной академии им. К. А. Тимирязева.

Адрес: 127550, Москва, ул. Тимирязевская, 47. Ученый совет ТСХА.

С диссертацией можно ознакомиться в ЦНБ ТСХА.

Автореферат разослан «'' » . . . . . . ,1989 г.

Ученый секретарь специализированного совета — л .

доцент ___.—■—

^^ Н. К. Торянская

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА. РАБОТЫ -

■ Актуальность теми../ Среди вирусных заболеваний сельскохозяйственных культур наиболее распространенными и вредоноешми' являются вируеше болезни картофеля. Они приводят к ежегодным значительны:.! потерям урожая и ухудшеншэ качества продукции.

Именно по этой причине во многих странах мира проблеме вирусных болезней картофеля уделяется самое серьезное внимание. В нашей стране ведется большая работа по переводу семеноводства картофеля на безвирусную основу. Многие районированные сорта уже •• оздоровлены от вирусов методом кудьтури апикальной меристе;ял, однако эта работа должна продолжаться постоянно, так как-появляются ноше сорта, а в перспективе ставится задача перевода на здо-.-ровую основу всей культуры картофеля, включая селекции и сортоиспытание. Методика оздоровления картофеля имеет рлд существенных недостатков, в их числе: большие затраты времени, значительный процент отхода материала. Поэтому важно постоянно совершенствовать методы оздоровления с целью повышения их эффективности, сокращения материальных и трудовых затрат. - • ;

^Внедрение безвирусного семеноводства картофеля и его oффeк- , ' тивнocть полностью зависят от. количества и качества оздоровленного исходного материала/ передаваемого в элитовырациващие хозяйства. ■;.''■•. ■■ . ■. •.-. ■ ■■■■..' ■.,>■■ ■

Размножение безвирусного исходного материала в условиях закрытого грунта требуют затрат труда и средств, которые примерно 8 10 раз выше затрат,>требуемых на выращивание картофеля в полевых условиях. Поэтому очень важно найти оптимальнее сочетания существующих методов размножения и разработать ноше приемы, .

л- ядз1$~

Центр, научная С::1г;стс:;л I Мэм. сгл^зоз.

гхзд. кн. "К." Д. кгшекегз

обеспечивающие поучение наибольшего биологического коэффициента размкокения за сопоставимые отрезки времени, наиболее эффективное использование сооружений зачищенного грунта, то есть наибольший выход клубней (по количеству) с единицы полезной площади, наименьшие затраты труда и средств на выращивание клубней, пригодных для высадки в открытый грунт. ,

Цель и задачи исследований. Целью нашей работы было усовершенствование некоторых элементов технологии выращивания оздоровленного исходного материала для первичного семеноводства картофеля, главным образом - оздоровления и ускоренного размножения. При этом ставились следующие задачи: -

I. Разработать приемы повышения эффективности оздоровления '. картофеля от вирусов на основе сочетания культуры апексов, термотерапии и химиотерапии.

. 2. Изучить возможность использования физиологически активных веществ для размножения картофеля в культуре "ин витро".

3. Испытать метод листовых черенков при ускоренном размножении оздоровленного исходного материала картофеля.

■ 4. Испытать применение черной полиэтиленовой пленки при размножении картофеля в защищенном грунте.

5. Провести сравнительную оценку клубневого материала, полученного с применением различных методов ускоренного размножения на зараженность вирусными болезнями.

Научная новизна. Впервые показана эффективность комплекс- • ного применения термотерапий, химиотерапии и культуры апексов в

оздоровлении картофеля от вирусов. ..........■

Показана высокая эффективность метода "листовых черенков" отдельно ив сочетании с другими методами ускоренного размноже-. ния^ оздоровленного исходного материала.

• •Впарзкг испытан'регулятор.роста'-,дропп в размножении картофеля..' •

'Испытано применение черной полиэтиленовой пленки-для мульчирования ■■: почвы пси размножении, картофеля-в завиденном грунте. •••-.• ■ -

:-Практическая- ценность работы. В'результата, исследования показана " высокая объективность -сочетания ингибитора вирусов - 1ГГ с термотерапией и культурой апексов з-оздоровлении картоДеля от'глрусоз. Сочетание'тярмо-•.терапии и • химиотерапии повыгает. эффективность оздоровления картофеля'-----методом культуры а'пяксов, позволяет улеличить. размер последних до 1,0 и при отом сохранить достаточно высокий процент бгзеирусных растений. Это облегчает работу по выделению эксплантатов, повышает.процент их выживания и регенерация на 30 - ЗДд!, сокращает сроки регенерации растений на 25% в сравнении с обычной методикой. * ; •••.••-.:

..Показано, что комбинирование методов ускоренного размножения оздоровленного материала: черенкования в пробирках и метода листов«» черенков позволяет достигнуть'коэффициента размножения не-менве 1:4000 в течение срока, соответствующего продолжительности вегетационного периода средне-■ спелых сортов картофеля. Применение регулятора роста - дропп повывает

производительность труда при размножении картофеля ,"шг витро"-на 25-ЗОй.

.Применение:черной полиэтиленовой пленки,снижает затраты.труда на 35% при ускоренном размножении оздоровленного исходного матгршла ,».-■-картофеля в закрытом грунте. -•.-.' . - -. . ••.. ■ . •-•

■Результаты проведенных исследований по .ускоренному, размножения, г::лгч;щ в рекомендации по. выращиванию.безвирусного исходного,материала для первичного семеноводства картофеля и внедрены з Лаборатории:запиты растений ТСХ А.

'• ''Апробация работы ;; ;0сноаные: материалы диссертации.:¿ила -долс*енк ненаучных* конференциях;ТСХА, в--1987,"и гг. уЛвгар-.б'ыл ..-« : - .!■■•■

участником отраслемлх шставок на в 1357, ,ГЭБ8 и 1969 гг., награгден бронзовой и серебряной медалями. - . ■ -

•.л\ - Публикация результатов. По материалам диссертации опубликовано Ь статей. . ■ • .-.

Структура диссертационной работы. Диссертация состоит из введения, 5 глав, синодов и предложений производству. Список использованной литература включает 253 источника, в том числе 94 иностранных. Диссертация изложена на страницах машинопис- •

ного-токста, включает 15 таблицей 8 рисунков.

• - Содержание работы. '

Введение. .....' >..."- . '■ < > ■ ■••-•■

Дана краткая характеристика современного состояния защиты картофеля от вирусных болезней. Обоснована необходимость дальнейшего совершенствования технологии выращивания здорового исходного материала. ' '■'■ .■ ■ •.•:"■/ .-'-Ч..,' Уг\;: '

В главе I - "Обзор литература" - рассмотрена и обсуждена отечественная и зарубежная литература по изучавшимся вопросам. Изложены современные сведения о распространенности, вредоносности вирусшх болезней, методах их диагностики, способах оздоровления и ускоренного размножения исходного материала. Приведены данные об использовании ингибиторов вирусов в борьбе с вирусными болезнями растений и методах их применения. * < ■:

■ Глава 2 - "Материал, обцие методики и условия проведения

■.' ; •' . исследований" ' . Л . ..г'- '' .л

Опыты проводили в 1985-1983 гг. на кафедре фитопатологии и : в!лаборатории.заднти растений ТСХА.

й качестве подопытного материала использовали сорта Бирюза и Невский; В хачсстг<о-ингибитора вирусов использовали антивирусный препарат (АГИ) синтетического происхождения - ДГТ (2,4-диок-

сагексагидро-І,3,5-триазин). Ми выражаем исиреннкю'благодарность профессору Г.ІІустеру-(Университет им.К.Маряса,: Лейпциг, ГДР) за предоставление препарата и консультацию по его применению. .

Оздоровление • подопытного • материала .проводили с доухфаз'їіим - •• воздействием АВП. - ■ -•■"■ - - ■ - • • • . -

I фаза - выращивание растений из верхусек ростков и побегов -размером 5-6 км на питательной среде с добавлением ДГГ о концентрации 0,1 г/л в течение 30 суток;- • *■:..■ г .....

• '.г П фаза - выделение эксплантатов размером 0,5-1,0 мм и перенос их на питательную среду с тем же ингибитором.',Через 20-25 ; і дней,- перенос регенерантов на среду без АШ и вмра^вшше растений,, пригодных для'Черенкования. і •. Выбранный размер вычленяемых эксплантатов (0,5-1,0 мм) обусловлен тем, что при обычном*их размере (0,1-0,15, мм) очень велики случайные колебания выхода здоровых регенерантов и довольно . высок процент гибели эксплантатов. Эксплантаты размером 0,5-1,0 -мм без применения ингибиторов или сочетания АНІ-с термотерапией ■ вообще не дают здоровых регенерантов, поэтому любой положительной результат опыта является достовершм. " • * _

, V-' Для культуры картофеля "ин вотро"1 использовали питательнке среды с минеральной основой по Мурасиге-С«угу;(1557) в модемна- -ции НИИКХ (Трофимец Л.Я. и др/,1978), а такяе-среду Мурасиге- . Сяуга с повышенным содержанием регуляторов роста: кинетин •..•;. 1,0 мг/л, гиббереллин -*1,0 мг/л,"'аценин - 1,0 мг/л ..феруловая кислота - 0,5 мг/л.' " *

*.*," ї ; ■. Приготовление питательных сред, вычленение меристем, шра'ди-вание растений "ин витро", проводилось по общепринятым методикам ; (Трофимец Л.Н. и-др., 1976; иуыгля В. А.Лолсчх-.ш ПЛ., К63Г. .: •• ' Растения :в'.'пробирках-1» среде - с .ингибиторо'л.'культквирэм.-.я- .

о-течение 4-6.недель'.при освещении 5-б тыс.лк,•.16-часовом фото- ; периоде- £ - 22-25°С и относительной влаязюстью 70-75%. Затем' растения в пробирках подвергали [термообработке в течение трех ' недель'в климокамере с oceeqeiaieM при температуре 33-39°С "в верхней части пробирок, 33-35°С в нижней части'(питательная среда,' корни). ■ - _ .... - . . ' - - '

• Ускоренное размножение-растений картофеля "¡ш витро" осуществляли методом черенкования по методике.Г.Н.Винклер и Р.Г.Бутен-ко-(1978). Пробирочные растения ьиращивались'на стеллажах,'оборудованных люмшшецектшши лашюшГ типа~ЛЗР-150 розового цвета и,; лампами ДЛ5-400*, при температуре 23-25°С, освещенности 5-6 тыс. лк при 16-часовом светопериэде, относительной влажности воздуха . 75-60;?'. •

Растения, развиввиесяна питательной среда, выдерживали пе- .' ред высадкой в течение 1,5-2 "суток в открытых пробирках для.адаптации к нормальной относительной вла»лостивоздуха и лучшей при- • живаемости в грунте. Растения.вместё с оставшейся питательной средой пересаживали в хоропо увлажненную питатель^» смесь, состоящую из торфо-дерновой земли и песка в равных долях." Для проверки регенерантных клонов на отсутствие вирусных¡инфекций;использовали ■ капельный серологический метод (Ю) по Дунину и Кувшиновой (IS58) < и ими^уноферментный анализ (ИФА) по Кларку и Адамсу.( Clark м;, • Adams А., 1977). ! .

.Для капельного серологического метода использовали антисыво- • 'poTKjt.к вирусам X, S ,М,,У -.производства ТСХА и НИИКХ. Для иммуно- .' ферментного анализа применяли диагностические препараты производ- ' 'ст'ва НИИКХ. Первый анализ КСМ начинали через 20-30 дней после высадки растений из пробирок в почву. За вегетацию серодиагности-, ? к.- лампы ДЛФ установлены в IS88 году. -

ку.проводили не менее"3'раз, в последний раз - в начале отмирания нижних листьев. Иммуноферментшй анализ проводили в возрасте растений 60-70 дней, после второго капельного анализа. - ^ :

о- При размножении- безвирусных растений методом черенкования-"ин витро" использовали соединение с цитокишшовой активностью дропп- /\/ -фенил- N -(1,2,3-тиадиазо-5-ил)-мочевлна. Дропп в концентрации 10 мг/л -добавляли к модифицированной среде ^расиге-'-Скуга, содержащей 1,0 мг/л кинетина, 1,0 мг/л -ПУК, 0,5 мг/л -

-НУК и 0,02 мг/л феруловой кислоты. При испытании метода "листовых черенков" использовали клубни и пробирочные растений, -вы-саленше в теплице с-дополнительным освещением, шра'.циволи при 20-часовом световом дне. В этот период обеспечивали высокую интенсивность освещения - не менее 12.000 лк. Впериод вегетации 'проводили трехкратную минеральную подкормку. Для подкормки использовали полное удобрение марки "Б". В период вегетации растений температуру поддерживали днем в пределах 21-23°С, ночью - -18-20°С. Хорошо развитые растения во.время цветения проверяли на отсутствие вирусных инфекций-с помощью И5А.1 Затем из основных' стеблей нарезали одноузловые черенки с одним листом и высаживали во влажный перлит, оставляя лист снаружи". Ящики с черенками оставляли при слабом свете и температуре не выше 20°С.

.'-■ При выращивании в теплице' растений картофеля для борьбы с. сорняками и с сортовым засорением материала,- что недопустимо в • элитном семеноводстве, использовали черную полиэтиленовую пленку следующим образом: на поверхности влажной почвы в грунтовой теплице нарезали гребни высотой около 15 см, расстояние между их осями 25,, 30, 40,-50 см, затем.на.почве расстилали черную полиэтиленовую пленку,: в которой по оси гребней проделывали отверстия диаметром 20-30.им¿грасстояние между которыми соответствовало сагу.

посадки (20, 25 ti 30 см). В междурядьях (бороздах) в пленке прокалывали отверстия для полива. . , ...

Математическую обработку данных учета осуществляли методом дисперсионного анализа по Б.А'.Доспехову (1955).,.

Температура воздуха в теплице в.период вегетации растений была в пределах 15-30°С, почвы на глубине 10 см - Ю-18°С. '

РЕЗУЛЬТАТУ РАБОТЫ

Глава 3. Влияние термотерапии, химиотерапии и культуры ano к сов в оздоровлении картофеля от вирусов.

В.результате проведенных исследований установлено, что соче тание антивирусного препарата ДГТ в концентрации-0,1 г/л до и по еле выделения эксплантатов и термотерапии позволило получить ; 16,9% растений по сорту Бирюза,и-12,3£ по сорту Невский (таблица I), свободных от комплекса вирусов (X,S , М, У), что'в 3-6 раз ' •больше, чем в вариантах с применением только :ДГТ или термотерапии. При таких же размерах-эксплантатов в контроле (без применения АВ1Ги термотерапии) здоровых растений не было получено. -

." •'Эти результаты дают основание считать,' что совместное приме нение АВП и термотерапии увеличивает свободную от вирусов зону в верхушечной почке до I мм, возможно и более.,Приживаемость эксплантатов составила в среднем 93Х, что значительно выше, чем при выделении меристем размером 100'мкм,. а длительность периода от ■ выделения экспланта/гов до развития растений, пригодных для*черен кования, примерно на 30-40 дней короче. Растения,оздоровленные' с использованием термотерапии и химиотерапии, оценивали по нутационной изменчивости комплекса морфологических^и хозяйственно-ценных признаков в условиях теплицы.-Заметных отклонений от ис-• ходиых форм при этом на обнаружено.

. ' ; Таблица I -

Влияние термотерапии, химиотерапии и их сочетания на- •.. -результаты оздоровления'картофеля от Еирусов методом ; V .культуры алексов (размер эксплантатов-0,5-1,0"мм; культиви-■ ¡рование на:среде с АШ до"и;после выделения эксплантатов, .1986-1587 гг;,- средние данные за два года) - -.7,

■ Варианты

Количество анализирован-, ных реге-нерантов-

Выход растений,! свободных от' вирусов, в /О

X " У л' х, а ,

s. | • м ; "М,- У

Бирюза

46- "о о;" о1 : о ' р -ео / " 15,0 11,3 45,0-'35',О 2,5'.

112 ' 37,5 34,8, 42,7 50,0 6,3-. 106 - 50,0 42,5 „ 52,8 • 58,5 • 16,9 *

Контроль без АШ и термотерапии

Термотерапия без АШ; - : •

АШ (ДГТ, 0,1 г/л) без ' - термотерапии

Термотерапия+АЕП ;: . <

Контроль без АШ и тер-- ■" • ' - . - -

мотерапии ■ ' - - 49 0 0, "- 0, О . О '

Термотерапия без 'АШ 1 '85 . ' 21,2 8,2 " 36,5 ■ 29,4 0 4 ;

АШ (ДГТ, 0,1 г/л)лбез V *" , ,

•термотерапии " . ' - 10131,7 42,6 .35,6.40,6 3,9

Термотерапия+АШ ' ' 114 37,7 44,7 41,4 45,6' 12,3,

1:..Результата показываютчто применение термотерапии, в сочетании с АШ в наибольшей степени.повыаает вероятность элиминирования из эксплантатов .-В ВК,. также установлено,-что в процессе оздоровления происходит снижение концентрации ХВК." В варианте« -термотерапия+АЕП концентрация -вируса.через; 30 дней.после гысядки, растений из пробирок »-(на парных листьях Осярйг'оаа с^оЬоза ) ; *

■■■снизилась"на 47-52^. Снижение .концентрации ХШ-в растениях карто--'■ феля -^однэ из проявлений антивирусах свойств АШ' и термотера-. ■ ' ПИИ при совместном их пр/уенении. . < , ,, ^ ,

, „ Глава 4. Ускоренное размножение оздоровленного исходного . ^

■ . - ; • ■ ... г ^ • _ - 1 *< * . , 1 •материала-картофеля. ' ' , :

4:1. Применение регулятора роста дроота -при, размножении кар-

Тгофеля.в культуре, "ин витро".

. л ¡Известно, что важную' роль, при ускоренном• размножении!безви—<•

> '.'ррешх;растений картофеля "ин витро". играют физиологически актив-.

• ше\ вещества- (5АВ), добавление которых .в питательную среду может

■ значительно ускорить рост и развитие растений. Мы испытывали ре- . гулятор роста цитокининовой активностью .--дрогагв концентрации -г

■ 10 мг/л. Результаты показали . (таблица-2), что добавление.дроппа, •

V * ' 1 ' Таблица 2 ,

- - Влияние дроппа" на развитие ¡растений-.картофеля из5черенков • V.на .питательнойсреде..(средние данные из;-16 повторений поч ;,--»••

; 40 черенковав'варианте,'*1585^1568:гг.).,. , ,*■ ^Г-,- *

Сорт,:

' Вариант,,, *'

__; На_15-_й ¿ень_П£сяе_черенковгиадя _'

число V, главных корней, шт.

■высота' СТеб-': ЛЯ,

см -

число-; листьев, • '

ШТ. ..,«.-

количество ¡. I растений,4 готовых^ пересадке в почву.или к дальнейшему черенкованию'

Дропп 10 мг/л

». • I *

; Неве- ' -Среда без-дроппа, . кий •./(контроль)

> ' * * Дропп 10 *мг/л ' '

3.1 4,6'./ з.*,-: к

5,5** 6,6. ц ' 30

>з,2* ; з;і: 19

Б,4 ' 5,7 , ^ л2 32

Мм

в среду в указанной концентрации увеличивает количество растений^ готовых к черенкованию через 15 дней после предшествующего черенкования в среднем.в 2 раза.-.Это позволяет .сократить общие затраты-•времени на. получеш:е -заданного-'количества пробирочшх растений- ■ : примерно на 25-30$,.: что-дает существенный.выигриз^ времени, око-*: ■ номии электроэнергии, повышение производительности труда -и о^-ек-. тиености использования вегетационных установок. Метод черенкова- -гая "ин витро"-с,применением дроппа позволяет. повысить^ биологичо-гский.коэффициент размножения до 10 ООО.в течение б месяцев.' -; •/.

; ' -.В итоге эффективность размножения картофеля в'пробирочной'г культуре монет быть увеличена примерно на 40%. , ; ■. .

■1.: . 4.2. Размножение - картофеля одноузловымн листовыми ^черенками. '.-. Принцип метода:состоит^не;в регенерации целых растений из5.-частей исходного куста или клубней," а.в образовании клубней непо-'средственно на фрагментах:физиологически зрелых стеблей за счет • ассимиляторов, имеющихся в стебле и а листе, а такяе образующие-; ся-влисте после .отделения черенка.от куста;■ ' . . - - Ч.1 ; . - Метод листовых черенков использует-потенциальную возмо:хность образования столонов и клубней:на. всех частях стебля картофельного растения в определенном;возрастно-физиологическом состоянии^ -

- При испытании: метода * листовых черенков получены. следующие у . количественные результаты (таблица 3).. Один нормально:разРк'тыЯ. -стебель с 13-14 узлат дал"8-9 одноузловых.черенков (нижний ¡узел .и верхушки отбрасывали); Один куст.в среднем.с 5.стеблями.дал в г: среднем по 2 клубенька."Таким¡образом от одного,куста получилипо^ с.Бирюза^в среднеы-98 черенковых.клубней, кроме.того, по Ю;б ; _ обычных,кдубней (в;лочвё),. а;по с.Невский - 71,0 черенковых клубней и 9,8 обычных клубней; В: итоге, суммарный козфф:щиент:размно- . жения.картофеля составил 108. и ВО 'соответственно по сортам, т.е.,'.

может быть увеличен по с.Бирюза примерно в 10 раз.и по с.Неве- . кий в О раз по сравнению с"полевой культурой. ?;, _

" , 'Таблица 3

•!••.'и Результаты размножения картофеля методом листовых ■ - черенков (средние данные из четырех повторений• опыта,*'." *,;

1985-1588 гг.)

Средние показатели

с.Бирюза

пробирочные растения

растения из клубней 1. • 70-80 г

с.Невский

пробирочные рас. тения ■

растения из клубней 70-80 г

Среднее'количество ■.■•'■.■. • ■,: . ■■■ ч" ч ;

стеблей на куст : . . 1,0 ч'Ч' "4,9 -V. 0 4,4"ч

Среднееколичество . ■

узлов на I стебель 13,8 "И,1 13,3- .'13,9

Среднее количество - . V

•одноузловых черенков ' "

от I растения 8,6 ' 49,0 " * 8,2' - 37,4

: Среднее. количество ■■.. ■ ■•■■.■• . - л А! •

клубней от одноузло- ■

вого черенка - 1,7 . 2,0 1,8 - 1,9"

Среднее• количество . •"■• - . V- « ' ► 1 V;

.черенковых клубней ОТ - • . - .'/ . :

I растения " 14,6 *" "98,0 14*,8 ' ,71,0

"Среднее-количество :--,-••■.•'/ ■ •-■.••■■•■'. :■:!-; •-..■■:'■

.обычных клубней от. .

I растения 3,4 . 10,6,, 3,6 ' ,; 9,8

^Суммарное.количество , ' - < -

клубней-от-одного ра- / ■.,..■ ' ; . ■■ ■ V'

".стения * ' . ' 18,0 ' - ■ 108,6 18,4 ~ ,80,8

■„--.ч- Полученные данные показывают,-.что показатели ускоренно'го размножения при,выращивании:оздоровленного-исходного материала

картофеля могут быть'улучшены ■ как за счет посинения эффективности давно известных методов, например черенкования в пробирочной _, культуре, 'так и за счет использования сравнительно новых,.-в частности,- получения клубней'на листовых черенках. Сочетание различных методов в одной технологической цепочке'повыааст их эффективность. Так, например, комбинация черенкования в пробирках .. и метода листовых черенков позволяет достигнуть коэффициента размножения 1:4000 за отрезок,времени, соответствующий.вегетаци-'-о иному периоду среднеспелых'сортов. ' : . :■ -

4.3. Применение черной полиэтиленовой пленки при ускоренном размножении оздоровленного исходного материала в защищенном грунте • .При-ускоренном размножении в закрытом грунте исходного мате--риала картофеля, оздоровленного методом апикальной меристемы, некоторое количество мелких клубней остается в почве, перезимовыва-.' ют.и дают всходы.в следующем.обороте. Кроме того, борьба с сорня-ками-в защищенном грунте'требует значительных'затрат труда и уве-. личивает?вероятность-перезаражения растений. В связи с этим была тч испытана технология-выращивания первой клубневой репродукции из -пробирочных_ растений • с: »мульчированием почвы черной полиэтиленовой '• пленкой.-,В результате проведенных исследований были получены лучшие ,чем в контроле.показатели развития растений, по урожайности" и коэффициенту размножения (таблица 4). Разница урожайности одного < растения по массе с контролем существенна.

-¡■.»Продуктивность в последующих репродукциях' (таблица 5) была ■.■■',; . несколько выше в варианте с использованием клубней', полученных о -' применением черной полиэтиленовой пленки;'Установлено, что с при- • менением черной полиэтиленовой пленки полностью ликвидируются затраты труда на прополку и втрое снижаются;затраты на полив. '

, - Таблица 4~ . '

: Объективность• применения• черной' полиэтиленовой 'пленки «в' ■ '• '- ' ■

.. ускоренном размножении пробирочного материала картофеля ¿•■•••■г-: • зацищешом .грунте .(средние данные эа 3 .года, по СОрастенйй : ■ • '■.•■■• I; в варианте-1965-1560'-:гг.) -

' * Сорт Высота Урожайность одного • .растения ' ■

Варианты . - растений-в фазу* • цветения, , см

1 « ■ ■•'а*'' * * г - , 1 ' * ^ * масса,, .г , , количество клубней, , ЕТ.

с^п-.«', , Посадка без пленки (конт-' < -влр:оза роль) . . . . : • • 61

: • Посадка- с использованием

■ ■ пленки

' " , : исроз . Невский ^ольГа-беЭ пленки- (конт~:

' Посадка с■использованием пленки ' -

86

57 62

НСР,

05

109,2

:190,4 * 8,3

.87,4

131,67,2 "

3,1

5,4 .

ГГ.**- . .

3,4, . 5,6

...... - - ' " 1 ' . ' ¡Таблица-5,

• Влияние черной полиэтиленовой пленки ,на"продуктивность' картофеля в: последействии.(80 растений в-варианте, ' ^ ' ' 1986-1987 гг.) ' ' .

Сорт

Варианты. »" - -.г

. Урожайности с .куста

масса ч г

а, кол-во*

клуб-■ • ¿ней^шц.-!

последействие I

масса, кол-во -г клубней, I тт. -

последействие П

Клубни, выращенные без ■ ' . * ' * '

Бирюза __ пленки .(контроль) 812,2- -12,4 ' 844,8 6

Клубни,-выращенные с,- . < , • . - '•■>-«'■'•

л • применением черной •• ■ :

/ ; - пленки,. .-917,3 14,2.- -1057,0,18,5. .

, • - Клубни, выращенные без " • ■-1"

Невский пленки,(контроль) 8н;2 • 15,6 1030,2 20,2

, Клубни, выращенные с ..... ' .

■ ■ ' применением черной пленки 936,6 16,5 . ¡-1146,5 -. 21,4 ■ : • ,

j ) 4.4. Влияние площади литания' на коэффициент)размножения при"; -размножении пробирочных растений.в заученном.труктс. • " ¿-Л--.'•''* При 'размножении- безвирусного картофеля ? о ['различной площадью i питания било выявлено,*/что вырацивание" растений'; с оградичсшой,*;" .'¡площадью питания 8 х В см позволяет получить'-с • единица .плсярди ;:<:!• : примерно D 10 раз; бОЛЬЕв!клубней, 'чем при.посадке". с,площадью.ПИ-:" .тания. 50x25 см, хотя коэффициент размножения- снижается при загу- ,

.ценной посадке "на 25-30%. ; Поэтому загущенная посадка, может • бить . ; - - - «

, рекомендована для повышения эффективности : использования сооруже-.' -j

t ~ . ^. > *î т " ■ ".л. а* < i. ^ . - .* Т . •. ., - -, ■ . .'.л;

ний защищенного грунта,; посадка с увеличенной площадью, питания - ; ' при'| необходимости максимального использования' биологического по--: -.тенциала размножения-имеющегося исходного - материала (таблица 6).

4.5. .Сравнительная оценка различных, методов размножения'картофеля в закрытомгрунте. > „' , : * • ' -.Эффективность. изучаемых, методов ускоренного размножения по- -, ; каэывает,: что использование черной полиэтиленовой'пленки и мето-: -да листовых черенков.весьма эффективно. Выход клубней с I м^-в;. ; 6.раз больше, чем'в варианте без пленки (таблица 7). Себестои- , : мость получения;тепличных-клубней в варианте ;с применением черной пленки иг метода листовых черенков снижается в 3 раза. ■ . - '

• -i-vv Глава 5. Сравнительная оценка клубневого; материала, получен-<ного : с применением различных^методов ускоренного размножения наг- '

л.зараженность вирусными'болезнями. „ , ' ' >

...^<.; -гВ' результате ■ исследований установлено,, что. в целом процент ,

* положительных результатов невысок (таблица >8), однако, растения,

- которые получены.от клубеньков листовых черенков,» были получены :

i •• ' * > ' » - * ч ,» , •'-

.. без >симптомов:заболеваний. Это объясняется тем, ;.что метод ли сто--

вых черенков дает возможность проверить маточные растени * до от-Г

, - 4 .. „v . .

-, бора одноузловых .черенков и, создать оптимальные условия • в период '

" .j- • ' v

' . . • '.ч' ; "-* ' ■ * *' , • Таблица б.

•Влияние .-площади1 питания.на' коэффициент, размноженияфракционный1 состав1 ; .клубней при.размножении пробирочных .растений-.в..теплице '(с.Невский,; по-.- > :: -- - ,-> . . 160 растений в варианте, 1988 г.) - - . .. . .

Варианты: (схема : посадки) ,

-см

К-во растений, на . •

1м2'

Общее

к-во' клубней

Сред- ; нее ' колич. клуб-., ней- от 1-раст

К-БЭ-клубней

I мй

Средний вес-, клубня, г

"до TCJr

к-во клубней

-¿пакционнкй-состав-.

10-25 г.

в % к-во

к 0614 клуб-

КОЛИЧ, ней .

в % к обц. ч колич;

25-50 г._ _ I 50-80 г._

к-во-" ' в'% к. Iколич. :в.%к. ■ клуб- обд. "клуб- 'обд. ней- колич.-ней колич;

8x8 ,:'15бг' 496 ' зд;

•15x15 . 44 512 - 3,2

НСРоб^ Г 5 "

20x20 25 672 ' 4,2

'30x30 II ■ 656 4,1

50x25 . 8 . 688 4,3

483 140 -14", 2

■105 45 '34.

. Стеллажная теплица •

14;3 163 32,9' '.226 _ 45Í6 ; 107,.' 21,6 - . f-. •

16.5 144 28,1 - 241 47,1 * 127 . 24,8* -

» * i í ' ' í , » ^^ /

' J. /"-■»•» • а Ч* .г-".- ',1.', , -, >-..-.,. ч . - i

Грунтовая теплица '

"25,3 .156 23,2, 233 " 34,7 / 225 ; • 33j5>' "58 г, 8,6;

31.6 108 16,5 ' 193 29,4 1 272 ¡ 41,5 - 83 ,12,7 40,8 '37- 5,4' I5S 23,1 379 ' 54,9,' /114 ,16,6

, • ' ■ ' , * Таблица 7

Сравнительная эффективность методов ускоренного разложения исходного _ . : ■ материала картофеля (с.Невский, 1568 г.)

ДО 5 Г | 5-Ю;Г | более 10 г

п/п

Варианты

код ,клубней;

-с I м^.шт

Себестоимость 1000 клубней, руб.,коп.

1. Высадка растений в теплице ..■<■;.. .

80x25 см- ' . 25 3

2. Вариант I с применением черной

пленки 40 6

3. Вариант П + размножение верхуш- •

ками побегов • 51 II

■ 4. Вариант Л + применение метода - .

листов«* черенйов 147 . 33

7 16 19 " 76

15: 18 21 38

893-65 505-95 402-18 ; . 275-92

' ' • • ' . • . • Таблица 8

-.'Влияние методов ускоренного размножения'картофеля на результат .диагнэскгеи. мозаичных вирусов (последействие, анализ по.60.растениям в .варианте,, ... ■ ■• 1586 г., теплица) - ■••

Процент положительных результатов •.■••••

Сорт • ' Материал. , • кем ,> цветение , ш, начало отмирания штате, > листьев ' * ■

всего 1 X 1 В. 1 М ' 1 у всего I X 5 и . ,, 1 у

Бирыза 1-я клубневая репродукция пробирочных растений (контроль) ., ' 0 0 0 0 0 ' 2,5 0 2,5 0 " 0

То;же от растений, выращенных с применением дроппа 0 ' 0 0 0 0 _ 0 0 0 - 0- 0

Клубеньки;от листовых черенков ' ' . :-'■■.-. 0. • 0 0 0 ■ 0; о: 0 - 0 " 0 0

Невский' 1-я:клубневая репродук ция;. пробирочных расте ни.1 (контроль) ' 0 1,3 0 0 ■ . 5МГ 1,3 2,5 0 .

То же ,■ от ■ растени й, выращенных с применением дроппа ■, - 0 0 0,' 1 0 1 •о 2,5 2,5 0 0 0

Клубеньки от,листовых черенков • . 0 'о 0 0 0 0 0 0 0 0

образования клубеньков.

-.' " БУВОДД . ' • > \ ;

• ... I. Показана возможность повышения эффективности оздоровления ; картофеля от мозаичных вирусов методом культуры.апикальной мери- -стемы путем совместного применения термотерапии и синтетического ингибитора вирусов ДГТ при добавлении его "в питательную среду:до . и после выделения эксплантатов. Эффективность применения термотерапии и ингибитора"достигалась за счет повышения шхода здоровых;, регенерантов от числа,прижившихся эксплантатов, повысения"процеН7 та приживаемости эксплантатов и сокращения сроков работы,' в.сред-. нем'на-2555.' -: '. ■ "-У;" .'•

- • .2; Применение, ингибитора вирусов ДГТ путем добавления его в питательную среду и термотерапия позволяют увеличить размеры;эксплантатов до Г мм и более, при сохранении достаточно высокого'V. ; процента здоровых регенерантов,' повышают, процент .-вшивания и ре-: -генерации апексов,-сокращают время Их регенерации ка 2-2,5 месяца.

3. аффективность, черенкования растений" в пробирках может быть повьшена добавлением дроппа в питательную среду, при этом рост и"" развитие-черенков ускоряются в среднем в-2 раза по сравнению с-:-.; контролем. В результате "действия дроппа общая потребность времени; на размножение;пробирочного материала сокращает ся примерно на 25-. 30%,ччто дает существенный выигрыш времени, экономию электроэнергии; повышение производительности - труда и эффективности использования-вегетационных установок. .';": ,'//-■• ■•'.,.'?."•'■•. : V '.,.'• У" ; - 4. Применение.метода-листовых черенков позволяет увеличить коэффициент размножения примерно в 8-10 раз по сравнению с полевой культурой. Способ размножения картофеля листовыми черенками

позволяет создать оптимальные условия образования и созревания-клубней. ' ...

ч 5.*.Результаты ускоренного размножения при выращивании, оздо-., ропленного материала картофеля могут существенно улучшены как за, .СИСТ ПОТСШеННЯ эффеКТИВНОСТИ ранее известных методов, например," , черенкования в * пробирочной культуре, так и за.счет использования метода листовых черенков.-Сочетание различных методов в одной тех нологической цепочке повышает их эффективность.. Так; например,-комбинация черенкования.в пробирках н метода листовых черенков позволяет достигнуть коэффициента размножения'не менее 1:4000 аа ■.отрезок времени, соответствующий;вегетационному периоду среднеспелых сортов. - „ . , - - ". ; „: ■ -6. Применение черной полиэтиленовой пленки для мульчирования почвы в грунтовых теплицах и вегетационных домиках позволяет:.:. --V ';Л)-полностьго ликвидировать затраты труда на прополку; :■:',.

• 2) втрое сократить.затратына полив;. / ■ ■ ^

- " 3) устранить: потери мелких* клубней при уборке■ и;их- прорастание последующем обороте. . - '

7. При размножении пробирочного материала в защищенном грунте 'наибольший выход.клубней, 'пригодных для высадки в' поле, с единицы .площади вегетационных сооружений получен при схеме посадки 8x8 см. •

-*■..' . 8,- Себестоимость получения-клубней от пробирочных растенийл в защищ5ннэм грунте: может быть снижена в 2-3, раза за счет приме-: нен/ш метода листоеых' черенков и'черной полиэтиленовой пленки,-В сочетании. ' " , * •

: ^ РЕШЩЦАЦІЇИ ПРОИЗВОДСТВУ ' V - V; :;'

• На основании проведенных исследований .рскоисцт^втся ікіучно-исследовательсккм учреждениям, лабораториям .-и хозяйства«, спрашивающим исходный 'материал ^ля порвичного • семгноводстза карто-Тоад:','

; - использовать в оздоровлении, картофеля от • мозаичных спру сов методом культуры апексов.сочетание термотерапии с •применением 'ДОТ в концентрации ¡0,-1,г/л п^'тем добавления его -в :пктательнуга среду до и после .выделения эксплантатов;

• - размер.вычленяемых эксплантатов при этом может Сыть увеличен до I мм в целях сокращзния отхода, затрат .труда и времена/на"' получение здоровых растений* ' "'■■

Для ускоренного размножения новых, районированных сортов іг ! размножения безвирусного картофеля,:полученного в результате оздоровления, рекомеццуется использовать следутоїцие приемы: ■ - метод черенкования растений в пробирках.при ускореішом .;> размножении-первых здоровых растений с добавлением.в.питательную сроду Цурасиге-Скуга дроппа (10 мг/л); : ; ■■

■ - с.целью.увеличения выхода клубней-В' закрытом грунте применять метод листовых, черенков, обеспечивтфій увеличение коэффи- '. циента размножения в 8-Ю раз по сравнению с полевой культурой; ^ . . . •:- для получения наибольшего.'.биологического коэффициента - ;:• размножения применять.комбинацию черенкования растений в пробирках и метода листовых черенков;

■ .'..■■ с целью снижения^затрат труда на полив и на-прополку при/ размножении оздоровленного исходного материала картофеля в 'зак-'.'••. рытом грунте целесообразно применять черную.полнэтиленову.-э плен- '

- - :По материалам диссертации опубликованы следуйте работы:

I. Окгля В.А., Кинякин Н.Зг.; Большакова.Л.В.- О методах про-■ изводства оздоровленного от вирусов исходного "материала для первичного .семеноводства картофеля. - Семеноводство картофеля. Науч. .■ тр. 19С6, с.45-50.

.2. Кннлкин Н.З., И\ыгля В.А., Цустер.Г.,'Большакова Л.В. Оздоровление картофеля от .мозаичных : вирусов. при сочетании. термоте-;рал;ш, химиотерапии- и культуры.апексов.- Московская .сельскохозяй-■ , ■• «венная• академия' им; К.Л.Тимирязева.' М., 1987, с.8. .(Рукопись -.-•депонирована'-во ККЕ5Т5И-агропрома'.21.09; 1687, г. №;419 ВС,г-87с.у' •Деп.). -

3. ЛЬшякин Н.й:, -Пмыгля В.А.,..-Большакова-Л.8.•-.Совершенство-..;.'. : ванне - технологии. выращивания оздоровленного .'исходного - материала-,.'-. ч для первичного.семеноводства:картофеля, московская сельскохозяйственная академия им. -К.А.Тимирязева. Л.!;, ' -1987, . 9с;-(Рукопись депонирована во БНШТЗИ:агропрома 21.09.1987 г. № 418 ВС - 87-Деп.); :. '■•. -.4. Имыгля В.А./.Кинякин Н;®.-,. БольпаковаЛ.В.,-; Николаева.О.И. Выращивание оздоровленного от вирусов исходного материала для,пер-вичного■■семеноводства картофеля. Интенсификация производства картофеля на Дальнем Востоке, 1987, с.36-42.

5. Имыгля.В.А'.; Кинякин Н.Ф., Большакова Л.В.. Рекомендации.- ., по выращиванию безвирусного исходного'материала для первичного „ семеноводства картофеля. М., ТСХА, 1987, 21 с.

Л.40083 17.04.89 г. Объем 1'/г н. л. Заказ 1023. Тираж 100

Типография Московской с.-х. академии им. К- А. Тимирязева 127550, Москва И-550, Тимирязевская ул., 44

Бесплатно