Бесплатный автореферат и диссертация по сельскому хозяйству на тему

Усовершенствование мер борьбы с бруцеллезом мелкого рогатого скота в Республике Таджикистан

ВАК РФ 06.02.02, Кормление сельскохозяйственных животных и технология кормов

Автореферат диссертации по теме "Усовершенствование мер борьбы с бруцеллезом мелкого рогатого скота в Республике Таджикистан"

На правах рукописи

ТУРДИЕВ ШАМСУЛЛО АБДУЛЛОЕВИЧ

УСОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ МЕР БОРЬБЫ С БРУЦЕЛЛЕЗОМ МЕЛКОГО РОГАТОГО СКОТА В РЕСПУБЛИКЕ ТАДЖИКИСТАН

06.02.02 - ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук

6 ИЮН 2013

Казань-2013

005061231

005061231

Работа выполнена в Ветеринарном институте Таджикской академии сельскохозяйственных наук (ВИ ТАСХН) и в Таджикском аграрном университете им. Ш. Шотемура (ТАУ).

Научный консультант:

Официальные оппоненты:

доктор ветеринарных наук, профессор, академик Саттори И.

- Гильмутдинов Р.Я. - доктор биологических наук, профессор, заслуженный деятель науки РТ, заведующий кафедрой патологической физиологии Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана

- Салмаков К.М. - доктор ветеринарных наук, профессор, заслуженный деятель науки РФ, заслуженный ветеринарный врач РФ, заведующий лабораторией бруцеллеза Федерального центра токсикологической, радиационной и биологической безопасности

- Девришов Д.А. - заслуженный ветеринарный врач РФ, член-корреспондент РАСХН, доктор биологических наук, профессор проректор по инновационным технологиям, заведующий кафедрой иммунологии ФГОУ ВПО МГАВМиБ им. К.И. Скрябина,

ГНУ «Всероссийский научно-

исследовательский институт экспериментальной ветеринарии» - (ГНУ «ВИЭВ»)

Защита диссертации состоится 02 июля 2013 г. в 1000 ч на заседании диссертационного совета Д-220.012.01 при ФГБУ «Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности» (420075, Казань, Научный городок-2, ФГБУ «ФЦГРБ-ВНИВИ»).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГБУ «ФЦТРБ-ВНИВИ» (Казань).

Ведущая организация:

Автореферат разослан «

2013 г. и размещен на официальном

сайте ФГБУ «ФЦГРБ-ВНИВИ» www.vnivi.ru и на официальном сайте ВАК РФ www.vak2.ed.gov.ru.

Ученый секретарь диссертационного совет; кандидат ветеринарных наук

Степанов В.И.

1 ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность работы. Бруцеллез сельскохозяйственных животных, несмотря на достигнутые успехи в его ликвидации в Таджикистане, все еще представляет серьезную эпизоотологическую и, следовательно, эпидемиологическую проблему. На современном этапе в условиях рыночной экономики при интенсивном развитии мелких товарных, дехканских (фермерских) хозяйств опасность распространения бруцеллеза резко возрастает.

Усовершенствование системы противобруцелезных мероприятий является главной задачей при ликвидации бруцеллезной инфекции среди сельскохозяйственных животных, которая причиняет не только огромный экономический ущерб животноводческим хозяйствам, но имеет большое социальное значение. Опыт борьбы с бруцеллезом свидетельствует, что в зонах значительного распространения бруцеллеза невозможно достичь успеха оздоровительных мер без применения- средств специфической профилактики (Уласевич П.С., 1966; Сту-денцов К.П., 1975; Косилов И.А., Ошепков В.Г.,1976.; Салмаков K.M., 1976; Сайдулдин Т.С., 1981; Муминов A.M., 1983; Шумилов К.В., Касьянов А.Н., 1984; Юсупов О.Ю., 1986; Иванов A.B., 2009; Фомин A.M., 2011).

Введение в систему мероприятий борьбы с бруцеллезом средств специфической профилактики позволило резко повысить эффективность оздоровления животноводства от этой болезни, снизить эпизоотическую напряженность за счет купирования клинических форм проявления инфекции и тем самым улучшить эпидемиологические показатели. Однако широкое применение вакцин в условиях значительного распространения бруцеллеза повлекло за собой возникновение новой проблемы, связанной с поствакцинальной диагностикой: общепринятые методы серологического исследования (РБП, РА, РСК, РДСК) не позволяют дифференцировать вакцинированных животных от больных, что определяет необходимость разработки соответствующих методов (Султонов A.A. и др., 1986; Ягудин Р.Г. и др., 1995).

Одним из основных звеньев в общем комплексе противобруцеллезных мероприятий является специфическая профилактика. При этом непременным условием эффективности применения противобруцеллезных вакцин должно быть создание перманентного и достаточно напряженного иммунитета на весь период возможного заражения животных (Косилов И.А., 1999).

Для специфической профилактики бруцеллеза мелкого рогатого скота (MPC) в настоящее время наиболее эффективной является вакцина из штамма Рев-1, которая более иммуногенна, чем вакцинные препараты из других штаммов. Однократные прививки молодняка MPC вакциной из штамма Рев-1 обеспечивают напряженный и длительный иммунитет (срок наблюдения 5 лет), в связи с чем отпадает необходимость ревакцинации взрослых животных (Юсупов О.Ю., 1971; Уласевич П.С. и др., 1975; Иванов Н.П., и др., 1981; Alton G.G., 1987).

Эпизоотическая обстановка по бруцеллезу MPC, сложившая в овцеводческих хозяйствах Республики Таджикистан (РТ), свидетельствует о том, что при однократной иммунизации вакциной из штамма Рев-1 через 2,5 - 3 года появ-

ляются случаи заболевания животных бруцеллезом. Поэтому возникает необходимость проведения мероприятий, повышающих иммунный статус организма животных (Хасанов Н.Х., Муминов A.M., 1985 - 1990).

В экспериментальных и производственных условиях доказана возможность создания специфического иммунитета у животных при иммунизации их живой противобруцеллезной вакциной различными методами: накожным, внутрикожным, подкожным, пероральным, конъюнктивальным, аэрозольным (Муминов A.M., 1983; Иванов Н.П., 2003; Аракелян П.К., 2005; Бондарева О.В., 2006).

Известно, что через слизистую оболочку конъюнктивы глаза в организм могут поступать различные вещества, в том числе и антигены. Кроме того, наличие в ней развитой сети лимфатических сосудов и рецепторов создает благоприятные условия для быстрой мобилизации и активации функций моно-нуклеарнофагоцитарной системы. При конъюнктивальном методе иммунизации благодаря проникновению антигена по слезно-носовому каналу в носовую полость площадь всасывания резко увеличивается (Муминов A.M., 2002).

Важность исследования этих проблем с учетом особенностей системы ведения животноводства в Таджикистане обусловливает актуальность наших исследований, целью которых явилось усовершенствование мер борьбы с бруцеллезом сельскохозяйственных животных в Республике Таджикистан.

Для достижения поставленной цели решены следующие задачка:

1. Провести эпизоотологический мониторинг бруцеллеза мелкого и крупного рогатого скота в животноводческих хозяйствах Таджикистана.

2. Определить возможность выявления специфических антител в молоке коров с помощью роз бенгал пробы.

3. Разработать оптимальную схему подкожной и конъюнктивальной иммунизации MPC вакциной из штамма Рев-1.

4. Разработать способ комплексной иммунизации MPC против бруцеллеза, сальмонеллеза и пастереллеза.

5. Определить эффективность препарата Бровадез-плюс при дезинфекции животноводческих помещений.

6. Разработать систему профилактических и оздоровительных мероприятий против бруцеллеза MPC и инфекционного эпидидимита баранов с применением вакцины из штамма Рев-1 в хозяйствах Республики Таджикистан.

Научная новизна. Установлено, что заболеваемость бруцеллезом MPC в частных хозяйствах Таджикистана достигает 5,6%, тогда как в общественных хозяйствах составляет 0,56%. Бруцеллез овец и коз диагностируется как в отдельности, так и в сочетании с сальмонеллезом и пастереллезом.

Совершенствованы методы диагностики и специфической профилактики бруцеллеза животных. Разработаны методика исследования молока коров РБП, которая является простой и экономичной в лабораторных и производственных условиях.

Отработана эффективная схема подкожной иммунизации MPC вакциной из штамма Рев-1 в 3 - 5-месячном возрасте, не исследуя на бруцеллез, в полной

дозе (2 млрд м.к.) и реиммунизации через 2 года в малой дозе (2 млн м.к.) с последующей ежегодной ревакцинацией в малой дозе (2 млн м.к.)

Разработан эффективный конъюнктивальный метод иммунизации MPC вакциной из штамма Рев-1 в 3 - 5-месячном возрасте, не исследуя на бруцеллез, в полной дозе (2 млрд м.к.) и реиммунизации через 2 года в малой дозе (50 млн м.к.) с последующей ежегодной реиммунизацией в малой дозе (50 млн м.к.).

Изучена возможность комплексной иммунизация MPC - вакциной из штамма Рев-1 и ассоциированной гидроокисьалюминиевой формолвакциной против сальмонеллеза и пастереллеза сельскохозяйственных животных, которая является безвредной, не оказывает отрицательного влияния на естественные факторы резистентности организма и способствует формированию клеточного и гуморального иммунитета у привитых животных.

Показано, что препарат Бровадез-плюс является эффективным дезинфицирующим средством для животноводческих помещений при инфекционных патологиях животных.

Научная новизна полученных результатов подтверждена 7 патентами РТ.

Практическая ценность работы. Предложена и внедрена в хозяйствах Таджикистана система профилактических и оздоровительных мероприятий против бруцеллеза мелкого рогатого скота и инфекционного эпидидимита баранов с подкожным и конъюнктивальным методами применения вакцины из штамма Br. melitensis Рев-1 в отдельности и при комплексной иммунизации против сальмонеллеза и пастереллеза.

Разработанный диагностикум и способ исследования молока коров на бруцеллез используются в ветеринарных лабораториях республики.

Материалы исследований включены в 14 систем, инструкций, рекомендаций, наставлений, утвержденных Службой государственного ветеринарного надзора (СГВН) Министерства сельского хозяйства (МСХ) РТ, и в учебные программы ветеринарного факультета Таджикского аграрного университета им. Ш. Шотемура.

Основные положения диссертационной работы, выносимые на защиту:

1. Результаты эпизоотологического мониторинга бруцеллеза мелкого и крупного рогатого скота в животноводческих хозяйствах Таджикистана.

2. Способ выявления специфических антител в молоке коров с помощью

РБП.

3. Оптимальная схема подкожной и конъюнктивальной иммунизации MPC вакциной из штамма Рев-1.

4. Способ комплексной иммунизации MPC против бруцеллеза, сальмонеллеза и пастереллеза.

5. Результаты определения эффективности препарата Бровадез-плюс при дезинфекции животноводческих помещений.

6. Система профилактических и оздоровительных мероприятий против бруцеллеза MPC и инфекционного эпидидимита баранов с применением вакцины из штамма Рев-1 в хозяйствах РТ.

Апробация работы. Основные положения диссертационной работы доложены на заседаниях ученого совета ТаджНИВИ (1998 - 2006); республиканских конференциях и семинарах-совещаниях (Душанбе, 1998 — 2006); Международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы болезней молодняка в современных условиях» (Воронеж, 2002); Международной научной конференции «Состояние и перспективы развития ветеринарной науки и практики», посвященной государственной программе «Аул» (Алматы, 2003); Международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы болезней животных в современных условиях», посвященной 60-летию ТаджНИВИ (Душанбе, 2003); II Международной конференции «Актуальные вопросы диагностики болезней животных» (Алматы, 2005); III Международной конференции «Состояние и перспективы развития производства ветеринарных биопрепаратов» (Алматы, 2006); Международной научно-практической конференции «Научное и клиническое применение традиционной медицины в Синзяне и соседних странах» (Урумчи, 2011), Международной научно-практической конференции «Ветеринарные проблемы в Центральной Азии -Продовольственная безопасность: Использование современных методов диагностики и профилактики инфекционных болезней животных» (Душанбе, 2011).

Публикации. По результатам исследований опубликовано 39 научных работ, в том числе 10-в журналах, рекомедованных ВАК РФ, получены 7 патентов РТ.

Структура и объем диссертации. Работа состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения результатов, выводов, практических предложений, списка литературы и приложения.

Диссертация изложена на 371 странице текста, иллюстрирована 60 таблицами и 25 рисунками. Список литературы включает 463 наименований. В приложение включены материалы, подтверждающие внедрение результатов исследования в практику.

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Работа выполнена в 2000 - 2010 гг. в лаборатории по изучению бруцеллеза сельскохозяйственных животных Ветеринарного института Таджикской академии сельскохозяйственных наук и в лаборатории микробиотехнологии Таджикского аграрного университета им. Ш. Шотемура в соответствии с республиканскими научно-техническими программами «Разработать и внедрить усовершенствованную систему иммунизации и реиммунизации ярок вакциной из штамма Рев-1 против бруцеллеза» на 1996 - 2000 гг., зарегистрированной в Национальном патентно-информационном центре (НПИЦентр) РТ (№ госрегистрации 000000370Р), «Разработать и внедрить научно-обоснованную систему мероприятий по оздоровлению животноводческих хозяйств от бруцеллеза животных с учетом новых методов хозяйствования» на 2001 - 2005 гг., зарегистрированной в НПИЦентре РТ (№ госрегистрации 000000966), «Разработка и

внедрение эффективных биологических средств профилактики и терапии бактериозов и микоплазмозов животных» на 2005 — 2010 гг., зарегистрированной в НПИЦентр РТ (№ госрегистрации 0105 ТД 236).

Научно-производственные опыты и апробация полученных результатов проведены в 15 животноводческих хозяйствах Хатлонской области и районов республиканского подчинения (РРП) РТ.

Исследование распространения бруцеллеза, сальмонеллеза и пастереллеза MPC осуществляли путем анализа и обобщения данных лабораторий по изучению бруцеллеза сельскохозяйственных животных и вирусологии ВИ ТАСХН, статистических материалов Службы государственного ветеринарного надзора (СГВН) Министерства сельского хозяйства (МСХ) РТ.

Бруцеллез диагностировали на основании результатов эпизоотологиче-ских, серологических и бактериологических исследований, руководствуясь «Наставлением по диагностике бруцеллеза животных» (утв. ГУВ МСХ РТ 26.12.2006 г-.); сальмонеллез и пастереллез — общепринятыми методами.

Серологические и бактериологические исследования проводили на базе Гиссарской ветеринарной лаборатории, лабораторий по изучению бруцеллеза сельскохозяйственных животных и вирусологии ВИ ТАСХН, микробиотехнологии ТАУ.

Иммунологическую реактивность животных и антигенную активность культур бруцелл вакцинного штамма определяли в РБП, реакциях агглютинации (РА), связывания комплемента (РСК), а антитела к антигенам возбудителей сальмонеллеза и пастереллеза в сыворотках крови овец - РА.

Бактериологические посевы из подчелюстных, шейных, аксиллярных, паховых, парааортального лимфатических узлов, печени, селезенки и костного мозга проводили в две пробирки с мясопептонным печеночно-глюкозно-глицериновым агаром (МППГГА) и соевым агаром и одну пробирку с мясопептонным печеночно-глюкозно-глицериновым бульоном (МППГТБ). Посевы инкубировали при температуре 37°С в течение 30 сут.

Индекс инфицированности (ИИ) определяли по формуле:

„,. Квк -100

ИИ =-,

Кою -Ко

где Квк - количество выделенных культур,

Кж - количество животных в опыте,

Ко - количество объектов, из которых проводили высевы.

В работе использовали:

1) сухую живую вакцину из штамма Br. melitensis Рев-1 (далее вакцина из штамма Рев-1 ), производства НЛП «Антиген» (Республика Казахстан); ;

2) бруцеллин ВИЭВ, производства НЛП «Антиген» (Республика Казахстан); -

3) ассоциированную вакцину против сальмонеллеза и пастереллеза сельскохозяйственных животных (далее - ассоциированная вакцина против сальмонеллеза и пастереллеза), изготовленную в ВИ ТАСХН.

Перед применением вакцины культуры бруцелл вакцинного штамма изучали на диссоциацию и определяли количество живых микробных клеток (м.к.)

в препарате. Для этого взвесь культуры засевали в чашки Петри на соевый агар с таким расчетом, чтобы получить большое количество изолированных друг от друга колоний.

Жизнеспособность бруцелл в каждой серии вакцины, которую разводили до концентрации 10 м.к./мл, определяли путем посева на поверхность агара в чашки Петри. После определения количества жизнеспособных бруцелл в растворе каждой ампулы вычисляли средний арифметический показатель данной серии препарата.

Эксперименты проводили на 240 морских свинках (массой 350 — 400 г), 44 кроликах породы шиншилла (массой 2,0 - 2,3 кг), 4100 ярках (в возрасте 2-5 месяцев, гиссарской породы); производственные испытания - на 15000 овцах (гиссарской породы) разного возраста.

Для оценки напряженности иммунитета морских свинок (через 90 сут после вакцинации) и кроликов (через 30 дней после прививки) подкожно в область паха заражали вирулентной культурой Br. melitensis в объеме 1 мл (100 м.к. - 10 инфицирующая доза). За подопытными и контрольными животными проводили клиническое наблюдение с измерением температуры тела в течение 10 дней. Через 35 сут после заражения лабораторных животных обескровливали и проводили серологические, патологоанатомические и бактериологические исследования.

У подопытных ярок до и после вакцинации на 5-, 15-, 20- и 30-ый дни определяли количество общего белка (биуретовым методом), бактерицидную (фотонефелометрически) и фагоцитарную активность крови (методом А.И. Иванова и Б.А. Чухлова, 1987).

Экономическую эффективность научных разработок рассчитывали согласно «Методике определения экономической эффективности ветеринарных мероприятий» (утв. ГУВ МСХ СССР, 1982 г.), а также в соответствии с «Методикой определения экономической эффективности использования в сельском хозяйстве результатов научно-исследовательских и опытно-конструкторских работ, новой техники, изобретений и рационализаторских предложений» (утв. МСХ СССР, 1983 г.).

Методики отдельных экспериментов изложены в соответствующих разделах диссертационной работы.

Цифровой материал диссертации обработан статистически по критерию Стьюдента для проверки достоверности различий. Разница между сравниваемыми величинами считалась достоверной при р<0,05 (Лакин Г.Ф., 1990).

За основу выводов и практических предложений взяты результаты контролируемых опытов в лабораторных и производственных условиях.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

3 ЭПИЗООТОЛОГИЯ БРУЦЕЛЛЕЗА MPC В РЕСПУБЛИКЕ ТАДЖИКИСТАН 3.1 Ретроспективный анализ распространения бруцеллеза овец и коз в общественных и частных хозяйствах Таджикистана

В бывшем Советском Союзе наибольшее количество больных бруцеллезом животных регистрировали в республиках Центральной Азии, Казахстане, в регионах Сибири, Урала, Поволжья, Кавказа и некоторых других (Муминов A.M., 2000). Бруцеллезная инфекция в 1974 - 1975 гг. была распространена в 53% овцеводческих хозяйств РТ, а к концу 1970-х гг. выявлено повсеместное поражение баранов бруцеллами вида ovis (Абдуллоев У.А., 1978).

В связи со значительным ущербом, наносимым овцеводческим хозяйствам Таджикистана заболеваниями репродуктивных органов животных, возбудителями которых в основном являются бруцеллы, сальмонеллы, хламидии, кампилобактерии и пастереллы, нами осуществлен ретроспективный анализ распространения бруцеллеза овец и коз в общественных и частных хозяйствах РТ, что также обусловлено особой социальной значимостью в условиях Таджикистана проблемы передачи бруцеллеза от MPC людям.

По данным СГВН МСХ Таджикистана, в 1999 - 2010 гг. серологически исследованы 9,85% (2008 г.) - 29,32% (2002 г.) животных общего поголовья. За этот период отмечены четыре пика увеличения исследованных проб — 21,84% в 2000 г., 29,32% в 2002 г., 23,14% в 2005 г. и 13,51% общего поголовья овец и коз в 2009 г.

В регионах РТ количество исследованных животных в 1999 - 2010 гг. было различным и не соотносилось с соответствующим поголовьем: в ГБАО: 0,20% (2003 г.) - 6,72% исследованного поголовья Таджикистана (2008 г.); Согдийской области: 38,36 (1999 г.) - 70,55% (2007 г.); Хатлонской области: 22,61% (2006 г.) - 58,39% (1999 г.);'РРП: 1,07% (1999 г.) - 10,27% исследованного поголовья РТ (2008 г.).

Установлено, что в 1999 - 2010 гг. количество выявленного больного бруцеллезом MPC составляло 0,14 - 0,56% исследованного поголовья. Установлены 3 пика роста (0,40% в 2000 г., 0,56% в 2004 г., 0,29% в 2008 г.) и 2 пика уменьшения числа зараженных животных (в'2002 г. 0,31%, 2007 г. 0,14%) (рис. 1). Заболеваемость общественных животных была выше (0,21% в 2009 г. — 0,80% исследованного общественного поголовья в 2004 г.), чем частных (в 2010 г. 0,08% - 2000 г. 0,62% исследованного частного поголовья).

0.60 O.JO

ом а ли : o.io , . 0.10 о.оо

/

u>

о ;

. -m ■:/ ■ \ ; »

i «Л У V ^ Cv

^ ©

« /

ч о /

V

/V .

/ s

1999 2000 2001 2002 200.1 200-1 200? 200« 2007 200S 2009 2010 j —^сиссчедовянногопоголовья

Рис. 1. Количество больного бруцеллезом MPC в РТ.

Заболеваемость овец и коз бруцеллезом в регионах Таджикистана также имела динамичных характер и колебалась от 0,01% (ГБАО, 2010 г.) до 3,38% исследованных в регионе животных (РРП, 1999 г.). В ГБАО минимальное число больных животных выявлено в 2010 г. (0,01% исследованных в регионе) и максимальное в 1999 г. (1,40%), соответствующие показатели в Согдийской области составили 0,04% (2010 г.) и 0,44% (1999 г.), Хатлонской области - 0,16% (2007 г.) и 0,70% (2003 г.), РРП - 0,76% (2009 г.) и 3,38% исследованных в регионе животных (1999 г.).

Распространению бруцеллеза MPC в РТ способствовали неполный охват животных иммунизацией против бруцеллеза; непроведение комплексных серологических исследований в полном объеме в связи с условиями отгонно-пастбтцного овцеводства и изменением формы собственности хозяйств; неэффективность проводимых мероприятий по уничтожению возбудителя болезни во внешней среде, невыполнение своевременно и в полном объеме работ по санитарному ремонту загонов и близлежащей территории; смешивание различных в эпизоотическом отношении групп животных; контакт различных в эпизоотическом отношении групп животных при перегоне; использование молодняка, полученного от больных бруцеллезом овец и коз, для воспроизводства стада; торговля больными бруцеллезом животными и перемещение их из одного региона в другой.

Высокая заболеваемость MPC бруцеллезом в Таджикистане позволяет оценить риск распространения болезни и определить приоритетные районы для реализации интенсивных программ контроля над распространением бруцеллеза не только среди сельскохозяйственных животных, но и населения.

Ретроспективный, анализ распространения бруцеллеза овец и коз в Таджикистане выявил регионы - Хатлонская область и РРП, - в которых эта проблема вызывает особую озабоченность в связи с высоким уровнем заболеваемости животных, неполным охватом диагностическими исследованиями и иммунизацией поголовья MPC, значительным риском передачи бруцеллеза от

овец и коз людям, что определило направление наших дальнейших эпизоотоло-гических исследований и усовершенствования системы специфической профилактики MPC против бруцеллеза, мероприятий по борьбе с болезнью.

В 2001 - 2005 гг. нами на бруцеллез исследованы сыворотки крови, паренхиматозные органы (347 проб) и абортированные плоды (136) из овцеводческих хозяйств РРП. В результате установлено, что бруцеллез протекает в сочетании с сальмонеллезом и пастереллезом (3,17%), сальмонеллезом (3,46%) и пастереллезом (10,66%). При исследовании абортированных плодов изолированы культуры бруцелл (3,26%), сальмонелл (25%) и хламидий (13,97%), а также ассоциации бруцелл и сальмонелл (11,0%). При бактериологическом исследовании выделены культуры полевого штамма Br. melitensis первого биотипа.

Распространение сальмонеллеза и пастереллеза в овцеводческих хозяйствах РРП обусловлено непроведением прививок против этих болезней, которые протекали как в виде моноинфекций, так и ассоциаций, что определяет необходимость применения ассоциированной вакцины против сальмонеллеза и пастереллеза, разработанной ТаджНИВИ (Сатгоров И.Т., Турдиев Ш.А. и др., 1999).

Таким образом, проведенный анализ и результаты собственных исследований свидетельствуют о широком распространении бруцеллеза, сальмонеллеза и пастереллеза в овцеводческих хозяйствах РРП, причем в частном секторе эти инфекции диагностировались чаще, чем в общественном. Эпизоотическая ситуация по вышеназванным болезням осложняется их ассоциированным течением, что определяет необходимость разработки метода одновременного применения средств специфической профилактики бруцеллеза, сальмонеллеза и пастереллеза.

3.2 Эпизоотологический мониторинг бруцеллеза MPC и КРС в индивидуальных и дехканских хозяйствах Хатлонской области и РРП

В 2003 г. в Хатлонской области и РРП на бруцеллез исследовали 13625 животных, в том числе 6238 овец, 6767 коз и 620 коров, из 3513 домашних хозяйств 176 кишлаков.

Распространенность бруцеллеза среди овец и коз, а также коров (в пригородных кишлаках) составила соответственно 6,73; 6,18 и 2,26% (в целом -6,25%) и вообще по КРС и MPC в РРП была выше (в целом - 7,7%: овцы - 9,24, козы - 7,29 и коровы - 3,68%), чем в Хатлонской области (в целом - 5,46%, овцы - 5,62, козы - 5,60 и коровы - 0,37%) (рис. 2).

Распространенность бруцеллеза среди всего домашнего скота в кишлаках колебалась от 0 до 40%: для овец - от 0 до 54; для коз - от 0 до 45 и для КРС -от 0 до 23%. Признаки инфекции обнаружили в 122 из 172 кишлаков (в целом -70,1%: Хатлонская обл. - 64,1, РРП - 77,7%). Между наивысшей распространенностью болезни на уровне кишлаков в Хатлонской области (в целом -69,8%: овцы - 61,1, козы - 78,6%) и РРП (в целом 72,73%: овцы - 62,0, козы -83,5%) статистически достоверных различий не отмечено.

Нами исследованы сыворотки крови коров на 5 общественных фермах в Хатлонской области и 6 - РРП и установлено, что больных бруцеллезом живот-

иых в Хатлонской области больше (13,2%), чем в РРП (3,2%), кроме того, отмечены значительные различия в распространенности инфекции на.конкретных фермах, Наибольшее количество больного бруцеллезом КРС приходилось на животных в возрасте от 4 до 7 лет.

Исследование На бруцеллез овец, коз и коров 4 пригородных кишлаков Курган-Тюбе и 13 - Душанбе выявило 4 серопозитивных овцы/козы (в целом -6%: овец - 2, коз — 13%) из 70 проверенных в Курган-Тюбе, и 2 серопозитивных овец/коз (в целом — 2%: овец - 0,5, коз - 7%) среди 96 исследованных в Душанбе. У 13 (в целом - 2,1%, Душанбе - 3,7%) из 353 особей КРС диагностирован бруцеллез в пригородных кишлаках Душанбе и у одной коровы (в целом 0,2%, Курган-Тюбе - 0,4%) из 267 - В Курган-Тюбе.

Распространенность бруцеллеза MPC на уровне районов колебалась от меньше 1 до 14,24%. Хотя на показатели распространенности инфекции в районах, возможно, до некоторой степени повлиял выбор исследованных кишлаков, однако полученные данные в целом позволяют определить приоритетные районы для более интенсивных программ по контролю болезни.

OfHB.l

В «го

в Хатынская область нРРПА'ЕП) аХатиноа*'ойгасгь пррп (ELISA)

Омы сто Всего I | овцы

■Хгомнояяп&жт irtBi «Каптмтавют (Elisai ;

Рис. 2. Заболеваемость МРСТКРС бруц^ллсз^м'^а^юкскоГг област

Beert.

i'PniPBITl 0№И,ЕША1

Результаты эпизоотологического мониторинга, проведенного в 2003 г. в Хатлонской области и РРП, свидетельствуют о широком распространении бруцеллеза MPC и КРС в указанных регионах и подтверждают статистические данные СГВН МСХ РТ, хотя в разы превосходят их. Географически фрагментарное распространение инфекции обусловлено ухудшением надзора, сопровождаемым бесконтрольным передвижением домашнего скота и влиянием факторов среды, связанных с местными методами животноводства.

Выявленная у овец и коз высокая распространенность болезни указывает на присутствие среди MPC Br. melitensis, а среди КРС возможно присутствие как Br. melitensis, так и Br. abortus.

4 ДИАГНОСТИКА БРУЦЕЛЛЕЗА КРС

4.1 Роз бенгал проба с молоком

Ветеринарная служба не располагает практически простыми и достаточно быстрыми методами исследования на бруцеллез, в том числе молока, беспорядочная продажа которого (и молочных продуктов) имеет определенное эпидемиологическое значение. Разработанная нами методика РБП с молоком (РБПМ) является наиболее простым, пригодным для широкого практического применения, в том числе и в полевых условиях, не требующим особых лабораторных условий и оборудования методом диагностики бруцеллеза у коров.

Реакцию проводили на чистой, сухой металлической эмалированной пластинке с лунками или на предметном стекле с лункой. Исследуемую пробу молока в количестве 0,05 мл помещали на дно лунки глазной пипеткой, затем в каждую лунку с молоком пипеткой вносили 0,03 мл 6,8%-ного раствора гидрокарбоната натрия, смешивали, добавляли 0,05 мл антигена для РБП, в течение 1 - 2 мин тщательно перемешивали до получения однородной смеси, покачивая осторожными вращательными движениями.

В начале определения ставили контроль антигена с негативной и позитивной агглютинирующей сыворотками в тех же дозах, а также контроль антигена на спонтанную агглютинацию (к 0,05 мл антигена добавляли 0,05 мл физиологического раствора).

Реакцию оценивали визуально в течение 4 мин после смешивания молока с антигеном. Агглютинацию, которая наступает позже, не учитывали. Реакцию считали положительной при выраженной агглютинации в виде мелких или крупных хлопьев розового цвета, четко выделявшихся на белом фоне лунки. При отсутствии агглютинации (смесь гомогенна, равномерно окрашена) реакцию считали отрицательной.

В соответствии с разработанной нами методикой РБПМ в 2003 г. в хозяйствах Хатлонской области и РРП исследовали пробы молока от 899 (соответственно 333 и 566) дойных коров. Установлено, что наряду с другими (кольцевая реакция) способами исследования молока на бруцеллез РБПМ, диагностическая эффективность которой составляет 59,1%, является специфичной и высоко чувствительной, а в отличие от этих методов не требует особых лабораторных условий и оборудования, пригодна для широкого практического приме-

нения, в том числе и в полевых условиях. Кроме того, применение РБПМ делает возможным своевременное выявление первых случаев заболевания коров бруцеллезом, обнаружение источников их заражения, путей передачи инфекции, в том числе людям, предупреждение распространения заболевания.

5 СОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ СИСТЕМЫ СПЕЦИФИЧЕСКОЙ ПРОФИЛАКТИКИ БРУЦЕЛЛЕЗА MPC ВАКЦИНОЙ ИЗ ШТАММА РЕВ-1 В ТАДЖИКИСТАНЕ

5.1 ПОДКОЖНЫЙ МЕТОД 5.1.1 Вакцинация молодняка и взрослых животных

5.1.1.1 Зависимость серологических реакций у ярок от дозы вакцины из штамма Рев-1

Динамику серологических реакций при подкожной иммунизации ярок (3 — 5 мес., гиссарская порода) различными дозами вакцины из штамма Рев-1 в экспериментальных условиях изучали на 120 животных, которым препарат вводили в дозах 2 млрд м.к. (1-я группа, п=40), 2 млн (2-я, п=40) и 1 млн м.к. (3-я группа, п=40). Контрольных животных (4-я группа, п=20) не вакцинировали. Через 7, 14, 30, затем каждые 30 сут по 480-й день после иммунизации в сыворотках крови опытных животных определяли титр агглютинирующих (РА) и комплементсвязывающих антител (РСК).

Агглютинины и КСА (комплементсвязывающие антитела) наиболее активно продуцировались у ярок, иммунизированных полной дозой (2 млрд м.к.) вакцины из штамма Рев-1, у части которых на 360-е сут в крови регистрировали низкие титры в РА и РСК. Не достигая показателей животных 1-й группы, реакции ярок 2-й группы (доза вакцины из штамма Рев-1 — 2 млн м.к.) были более выраженными по сравнению с таковыми у ярок 3-й группы (доза - 1 млн м.к.), у которых титры РА пропадали на 60-й, а РСК - 90-й день, в последнем случае восстанавливаясь на 120-е сут (у отдельных животных 2 и 3-й групп наблюдали два подъема уровня КСА), после чего исчезали окончательно.

Таким образом, полученные нами результаты свидетельствуют о более активной иммунологической перестройке организма у ярок, первично иммунизированных полной дозой (2 млрд м.к.) вакцины из штамма Рев-1.

5.1.1.2 Влияние дозы вакцины из штамма Рев-1на напряженность иммунитета у ярок

При изучении зависимости напряженности иммунитета от дозы вакцины из штамма Рев-1 животных трех опытных групп (п=12), каждую из которых разделили на 2 подгруппы, иммунизировали в дозах 2 млрд м.к. (1-я группа), 2 млн (2-я) и 1 млн м.к. (3-я группа), через 1,5 (1-я подгруппа, п=4) и 2 года (2-я подгруппа, п=8) заражая ярок 10-кратной дозой вирулентного штамма бруцелл. Контрольных животных (4-я группа, состоящая из 2-х подгрупп по 3 гол.) не вакцинировали и инфицировали одновременно с опытными в той же дозе.

В результате исследования через 30 дней после заражения в РА и РСК в сыворотках крови опытных (заразившихся) и контрольных животных отмечены

высокие титры соответственно 650 ME и 1:5, 1:10. Патологический материал от опытных и контрольных животных, забитых через 35 сут после заражения, подвергли бактериологическому изучению. -

Наибольшее количество иммунных ярок было в 1-й группе (доза вакцины из штамма Рев-1 - 2 млрд м.к.) - 100%, или 4 гол. (1-я подгруппа - заражены через 1,5 года) и 87,5%, или 7 гол. (2-я подгруппа - заражены через 2 года), причем у одного животнго 2-й подгруппы наблюдали регионарную инфекцию: выделены 2 культуры (0,25/гол.). ИИ в этой подгруппе 1-й группы составил 4,2.

Из 4 ярок 1-й подгруппы (заражены через 1,5 года) и 8 животных 2-й подгруппы (заражены через 2 года) 2-й группы иммунными оказались соответственно 2 (50%) и 3 гол. (37,5%), у которых отмечены в 2 случаях (2-я подгруппа) регионарная и соответственно 2 и 3 - генерализованная инфекции. От ярок этой группы выделено 5 (1,25/гол. - 1-я подгруппа) и 6 культур (0,75/гол. - 2-я подгруппа), а ИИ составил соответственно 7,1 и 7,7.

В 3-й группе животных, вакцинированных в дозе 1 млн м.к., количество иммунных было наименьшим — по 1 гол. в подгруппе (соответственно 25 н 12,5%). В 1-й подгруппе, зараженной через 1,5 года, у одной ярки наблюдали регионарную и у двух генерализованную инфекции, а во 2-й подгруппе (заражены через 2 года) — соответственно 1 и 6, причем 5 культур (1,25/гол.) выделено от животных 1-й подгруппы (ИИ - 7,7) и 13 (1,63/гол.) - 2-й подгруппы (ИИ -8,1).

От 6 зараженных контрольных ярок, у которых отмечена генерализованная инфекция, выделили 26 (8,67/гол.) культур в 1-й и 23 (7,67/гол.) культуры во 2-й подгруппе при ИИ соответственно 72,2 и 63,9.

Таким образом, прививка вакциной из штамма Рев-1 в дозе 2 млрд м.к. вызывала у животных иммунитет, напряженность которого была выше, чем у вакцинированных в дозах 2 и 1 млн. м.к. Поэтому первая иммунизирующая доза должна обладать необходимой силой, а недостаточная доза антигена, не вызывая нужной иммунной реакции, обусловливает слабый ответ организма на ревакцинацию.

5.1.1.3 Динамика сероаллергических реакций у овцематок, иммунизированных полной и малой дозами вакцины из штамма Рев-1

Определение динамики поствакцинальных реакций у овцематок, иммунизированных полной (2 млрд м.к., 1-я группа - п=20) и малой (2 млн м.к., 2-я группа — п=20) дозами вакцины из штамма Рев-1 осуществляли в РА, РСК через 14, 21, 28, 42, 56, 90, затем каждые 30 сут по 360-й день и постановкой АП спустя 28 и 42 сут после иммунизации.

У вакцинированных животных максимальные титры агглютининов (700 ME - 1-я группа, 150 ME - 2-я группа) выявляли на 14-й день, а соответствующие показатели КСА наблюдали на 28-е сут после иммунизации - 100 ЕД (1-я группа) и 50 ЕД (2-я группа). Затем титры поствакцинальных антител снижались в 1-й группе соответственно до 7,5 ME и 1 ЕД на 360-й день, а во 2-й группе — до 2,5 ME и 2 ЕД на 120-е сут, в которой в последующие сроки иссле-

дования серологические реакции не отмечали, хотя в 1-й группе они сохранялись в течение всего эксперимента.

При постановке АП на 28-й день в 1-й группе реагировало 19 животных, или 95%, во 2-й - 17 гол., или 85%, на 42 сут - соответственно 20 (100%) и 19 (95%) овцематок.

Таким образом, активные поствакцинальные сероаллергические реакции у животных 2-й группы, продолжавшиеся в сравнении с 1-й группой в течение меньшего времени, определяют целесообразность применения для специфической профилактики бруцеллеза у не имеющих иммунного фона овцематок вакцину из штамма Рев-1 в малой дозе (2 млн м.к.) и позволяют проводить диагностические исследования в более ранние сроки после иммунизации, чем при использовании этого препарата в полной дозе (2 млрд м.к.).

5.1.2 Ревакцинация

5.1.2.1 Определение оптимальнойреиммунизирующей дозы для овцематок

На привитых в 3 — 5-месячном возрасте в дозе 2 млрд м.к. овцематках определяли оптимальную реиммунизирующую дозу вакцины из штамма Рев-1, которую через 2 года подкожно вводили в дозах 2 млрд м.к. (1-я группа, п=10), 250 млн м.к. (2-я группа, п=10) и 2 млн м.к. (3-я группа, п=10). Контрольную группу животных (п=10) составили вакцинированные в том же возрасте овцематки, которых не реиммунизировали. Через 7, 14, 21, 28, 42, 56, 90, затем каждые 30 сут по 540-й день изучали динамику поствакцинальных серологических реакций.

На 7-е сут после реиммунизации в 1 и 2-й группах животных средний титр агглютининов составил соответственно 600 и 150 МЕ, на 14 день в 3-й группе овцематок - 100 МЕ, который постепенно снижался до 2,5 МЕ соответственно до 540- (в течение всего опыта), 180- и 120-х сут. Во 2 и 3-й группах эту серологическую реакцию не отмечали соответственно с 210- и 150-го дней. В РА с 7-х по 56-е сут реагировали сыворотки крови 100% животных, реимму-низированных в дозе 2 млрд м.к., а с 7-го по 21-й день - в дозе 250 млн м.к. Максимальное количество (100%) реагировавших в РА овцематок, повторно вакцинированных в дозе 2 млн м.к., наблюдали на 14-е сут.

Наибольшие средние титры КСА во всех группах отмечены на 21-й день, составившие в 1-й группе - 50 ЕД (реагировало 100% животных), во 2- и 3-й -30 ЕД (реагировало по 70% овцематок). В 1-й группе все животные реагировали на 14-, 21 - и 28-е сут (средний титр РСК - соответственно 40, 50, 30 ЕД), во 2-й группе - на 28-й день (средний титр РСК - 20 ЕД) и в 3-й группе - на 14-е сут (средний титр РСК - 10 ЕД). На 180-й день после ревакцинации в 1-й группе, 150-й - во 2-й и 90-й - в 3-й группе реакцию, как и в последующие сроки исследования не отмечали.

За время эксперимента окоты у опытных и контрольных животных прошли нормально, поствакцинальных абортов не отмечено.

Таким образом, динамика серологических реакций овцематок, привитых в возрасте 3-5 мес., на повторную (через 2 года) реиммунизацию различными дозами вакцины из штамма Рев-1 свидетельствует, что даже на введение препа-

рата в малой дозе (2 млн м.к.) организм животных реагирует активными поствакцинальными серологическими реакциями, которые в отличие от вызываемых реиммунизацией в дозах 2 млрд и 250 млн м.к. менее продолжительны и которые не мешают последующей диагностике в ранние сроки после реимму-низации.

5.1.2.2 Приживаемость бруцелл вакцинного штамма Рев-1в организме ре-иммунизированных малой дозой овцематок

Способность бруцелл вакцинного штамма приживаться в организме и ге-нерализованно распространяться в органах привитых животных является одним из показателей иммуногенности живой бруцеллезной вакцины.

Длительность персистирования бруцелл вакцинного штамма Рев-1 в организме овцематок определяли после вакцинации полной дозой (2 млрд м.к.) в 3 -5-месячном возрасте, через 2 года ревакцинируя малой дозой (2 млн м.к.) двухсуточной агаровой культуры 1-ю (п=21), через год после первой реиммуниза-ции малой дозой (2 млн м.к.) - 2-ю группу животных (п=21). На 3, 7, 15, 30, 45, 60 и 90-е сут после введения вакцинной культуры забивали по три животных, патологический материал от которых исследовали бактериологически.

На 3-й день после ревакцинации малой дозой (2 млн м.к.) вакцинного штамма Рев-1 в организме животных 1-й группы происходило расселение бруцелл вакцинного штамма, которые (7 культур) были выделены из патологического материала всех забитых овцематок (2,3 культуры / гол.). У одного животного наблюдали регионарную, у двух - генерализованную инфекцию. В этот срок ИИ составил 16,6. Аналогичные результаты получены на 7-е сут после ревакцинации. У двух животных из забитых через 15 дней отмечали генерализованную инфекцию: выделены 8 (2,6/гол.) культур (ИИ - 19,04). Спустя 30 дней после реиммунизации из патологического материала двух из трех забитых животных, у которых выявлены регионарная и генерализованная инфекции, изолировали 4 (1,3/гол.) культуры (ИИ - 9,5). В последующие сроки инфицированность животных этой группы не установлена.

После повторной реиммунизации малой дозой (2 млн м.к.) вакцинного штамма Рев-1 из патологического материала от животных 2-й группы, у которых на -7-е сут наблюдали генерализованную инфекцию, выделены 9 (3/гол.) культур при ИИ 23,07. От такого же количества опытных животных с генерализованной инфекцией на 15-й день изолировали 21 (7/гол.) культуру, причем ИИ составил 53,8. На 30-е сут 3 (1/гол.) культуры вакцинного штамма Рев-1 выделены от 2 животных с регионарной и генерализованной инфекцией (ИИ - 7,7). В последующие сроки эксперимента инфекцию у животных 2-й группы не наблюдали.

Таким образом, наиболее высокая степень обсемененности культурами бруцелл вакцинного штамма организма через 15 дней после ревакцинации и повторной реиммунизации свидетельствует о высокой иммуногенности вакцины из штамма Рев-1 в дозе 2 млн м.к. при ревакцинации, в том числе повторной, овцематок.

5.1.2.3 Реактогенность вакцины из штамма Рев-1для суягных овцематок

При иммунизации, в том числе повторной, абортогенные свойства вакцины из штамма Рев-1 изучены на 60 суягных овцематках, 1-ю группу которых, ранее не иммунизируя, привили полной (2 млрд м.к., 1-я подгруппа - п=15) и малой (2 млн м.к., 2-я подгруппа — п=15) дозами, а 2-ю — ревакцинировали теми же дозами после иммунизации полной дозой (2 года назад). Контрольных животных (п=15) не вакцинировали.

Аборты произошли только в подгруппах ранее непривитых овцематок, иммунизированных (1-я подгруппа 1-й группы) полной дозой (2 млрд м.к.) вакцины из штамма Рев-1, и ревакцинированных той же дозой (1-я подгруппа 2-й группы). В других опытных подгруппах, привитых (2-я подгруппа 1-й группы) и реиммунизированных (2-я подгруппа 2-й группы) этой вакциной в малой дозе (2 млн м.к.), а также невакцинированной контрольной группе аборты у животных не отмечены.

Таким- образом, первичная вакцинация и реиммунизация суягных овец полной дозой (2 млрд м.к.) вакцины из штамма Рев-1, в отличие от иммунизации и ревакцинации малой дозой (2 млн м.к.), может обусловливать прерывание беременности. Поэтому вакцинация и реиммунизация взрослых животных, в том числе суягных овцематок, должна осуществляться малой дозой.

5.1.3 Производственная проверка эффективности разных доз вакцины из штамма Рев-1 при иммунизации и ревакцинации овец

Производственные испытания эффективности подкожной иммунизации овец вакциной из штамма Рев-1 провели в 2003 г. в ФХ «Фарух» Гиссарского р-на, в. котором серологические исследования на бруцеллез животных (РБП, РА и РСК) проводили раз в год, зараженность которых в 1999 - 2002 гг. составляла 1,31-4,88%.

В этом хозяйстве 3 - 5-месячных овец иммунизировали вакциной из штамма Рев-1 в дозе 2 млрд м.к. (полная доза), однако подкожная иммунизация этим препаратом по такой схеме не привела к улучшению эпизоотического положения в хозяйстве, в котором через 2 - 2,5 года после однократной иммунизации вакциной из штамма Рев-1 нами выявлены положительно реагирующие на бруцеллез животные, что свидетельствует об угасании у них иммунитета к этому сроку.

Поэтому нами изучена возможность реиммунизации овцематок вакциной из штамма Рев-1, которой не исследуя на бруцеллез сначала привили 620 ярок 3 - 5-месячного возраста в дозах 2 млрд м.к. (1-я группа, п=155), 1 млрд (2-я группа, п=155), 500 млн (3-я группа, п=155), 250 млн м.к. (4-я группа, п=155), через 12 мес. опытных и контрольных (неиммунных) животных (п=60) объединили в одну маточную отару, всех здоровых животных которой еще через 12 мес. реиммунизировали / привили первый раз (контрольных) малой дозой (2 млнм.к.).

В результате последующих серологических исследований (табл.) через 12 мес. в группе животных, привитых в дозе 2 млрд. м.к., положительно реагировало одно (0,64%), 1 млрд - 3 гол. (1,93%), 500 млн - 4 гол. (2,58%), 250 млн

м.к. - 3 гол. (1,93%). При постановке сероаллергических реакций в этот срок исследования в контрольной группе положительно реагировали 6 (10,0%) овец. В соответствующих группах спустя 2 года положительно реагировали 0,65%; 1,32; 2,65; 1,97 и 15,38% животных.

Таблица

Результаты сероаллергических исследований овец, иммунизированных разными дозами вакцины из штамма Рев-1

Группа животных Доза вакцины, м.к. Срок исследования, мес. после вакцинации

12 | 24

Кол-во животных, гол.

исслед. полож. исслед. полож. серологич.

серологич. аллергич.

1-я 2 млрд 155 1 (0,64) - 154 1 (0,65)

2-я 1 млрд 155 3 (1,93) 1 152 2 (1,32)

3-я 500 млн 155 4(2,58) 1 151 4(2,65)

4-я 250 млн 155 3 (1,93) 2 152 3 (1,97)

5-я (контроль) 60 6(10,0) 3 52 8(15,38)

Примечание. В скобках указано процентное значение.

Таким образом, животные, привитые полной дозой вакцины из штамма Рев-1 и реиммунизированные, а также вакцинированные (овцематки) малой дозой (2 млн м.к.) быстро утрачивают серопозитивность, а при контакте с больными не заражаются бруцеллезом. Производственная эффективность предложенной нами схемы специфической профилактики бруцеллеза MPC вакциной из штамма Рев-1 подкожным методом (иммунизация без диагностики в 3 - 5-месячном возрасте в дозе 2 млрд м.к. и ревакцинация здоровых через 2 года в дозе 2 млн м.к. -1-я группа; иммунизация после диагностики взрослых животных в дозе 2 млн м.к. - контрольная группа) составила 100%, тогда как в группах вакцинированных в дозах 1 млрд м.к. (2-я группа), 500 млн (3-я) и 250 млн м.к. (4-я группа) и реиммунизированных малой дозой - соответственно 99,34; 99,32 и 99, 33%.

5.1.4 Производственная апробация схемы подкожной вакцинации полной и малой и реиммунизации MPC малой дозами вакцины из штамма Рев-1

С учетом результатов экспериментальных и производственных испытаний в ПК им. А. Юсупова, ДХ «20-летие независимости Таджикистана», и ДХ «Ёвар» Гиссарского р-на, в течение ряда лет неблагополучных по бруцеллезу MPC (овцы гиссарской породы), проведена производственная апробация разработанной нами схемы подкожной вакцинации полной (2 млрд м.к.) и малой (2 млн м.к.) и реиммунизации MPC малой дозами вакцины из штамма Рев-1.

В этих хозяйствах 3 - 5-месячный MPC до апробации прививали вакциной из штамма Рев-1 в дозе 2 млрд м.к., однако улучшения эпизоотического положения не наблюдали. Поэтому после комплексного серологического иссле-

дования всего взрослого поголовья положительно реагировавших животных сдали на убой, а нереагировавших взрослых животных иммунизировали вакциной из штамма Рев-1 в дозе 2 млн м.к. (3 - 5-месячный молодняк, не исследуя на бруцеллез, привили полной дозой — 2 млрд м.к.) препарата.

В 2006 г. на бруцеллез исследовали (РБП, РА, РСК) 3232 гол. взрослого MPC (ПК им. А. Юсупова - 1190 гол., ДХ «20-летие независимости Таджикистана» - 1076, ДХ «Ёвар» Гиссарского р-на - 966 гол.), среди которого выявили 68 (2,1%) больных животных (ПК им. А. Юсупова-28 гол., или 2,35%; ДХ «20-летие независимости Таджикистана» — 22 гол., или 2,04%; ДХ «Ёвар» Гиссарского р-на - 18 гол., или 1,86%). Здоровых животных вакцинировали малой дозой (2 млн м.к.) вакцины из штамма Рев-1.

В июле 2006 г. на летних пастбищах весь (2030 гол.) молодняк MPC ПК им. А. Юсупова (810 гол.), ДХ «20-летие независимости Таджикистана» (640 гол.), ДХ «Ёвар» (580 гол.) Гиссарского р-на без предварительного серологического исследования на бруцеллез иммунизировали полной дозой вакцины из штамма Рев-1. В августе этого года из привитого молодняка сформировали отдельные отары.

В июле 2007 г. (через 1 год после вакцинации) овцепоголовье хозяйств, привитое вакциной из штамма Рев-1 в дозе 2 млн м.к., серологически исследовали на бруцеллез, заболеваемость которым по сравнению с 2006 г. значительно снизилась с 2,1 до 0,9%: из 3104 исследованных гол. MPC положительно реагировали 28 животных, которых сдали на убой. После повторного серологического исследования через 30 сут положительно реагирующих на бруцеллез овец не выявили, и всех животных реиммунизировали малой дозой. Результаты очередных (2008 г.) серологических исследований среди вакцинированного (2006 г.) и реиммунизированного (2007 г.) вакциной Рев-1 в дозе 2 млн м.к. взрослого MPC показали, что эпизоотическая ситуация по бруцеллезу в хозяйствах Гиссарского р-на, в которых нами проведена производственная апробация, стабилизировалась (заболеваемость составила 0,43%: исследовано - 2812, положительно реагировали - 12 животных).

Через 1 (2007 г.) и 2 года (2008 г.) после иммунизации молодняка вакциной из штамма Рев-1 полной дозой (2 млрд м.к.) при серологическом исследовании на бруцеллез (РБП, РА, РСК) из соответственно 1835 и 1521 гол. MPC в этих хозяйствах положительно реагировали соответственно 4 (0,22%) и 8 (0,53%) гол., которых сдали на убой, а здоровых животных реиммунизировали малой дозой (2 млн м.к.) вакцины из штамма Рев-1. Эпизоотическое положение по бруцеллезу в 2009 г. среди поголовья, иммунизированного полной и ревак-цинированного малой дозой, исследованных хозяйств соответствовало таковому среди овец, вакцинированных и ревакцинированных малой дозой: заболеваемость составила 0,14% (соответственно из 1480 серологически исследованных животных положительно реагировали 2 и из 2780 - 4), что подтверждает результаты экспериментальных и производственных испытаний схемы подкожной иммунизации молодняка MPC полной и ревакцинации малой дозами вакцины из штамма Рев 1.

Также изучена (ПК им. А. Юсупова, ДХ «20-летие независимости Таджикистана», ДХ «Ёвар» Гиссарского р-на - 2006 г.) эффективность иммунизации по разработанной нами схеме вакциной из штамма Рев-1 баранов (244 гол.; контроль - 20 неиммунных животных) против инфекционного эпидидимита.

В течение 1 года среди привитых в 3 - 5-месячном возрасте полной дозой (2 млрд м.к.) вакцины из штамма Рев-1 животных не наблюдали клинических признаков эпидидимита (орхита). Однако через 1 год после иммунизации при серологическом исследовании в опытной группе один (0,4%) баран положительно реагировал на инфекционный эпидидимит, бруцеллез серологически не диагностировали. В контрольной группе бруцеллезом и инфекционным эпиди-димитом заболели соответственно 1 (5%) и 2 (10%) животных. Полученные нами результаты свидетельствуют о высокой производственной эффективности вакцины из штамма Рев-1 в полной дозе (2 млрд м.к.) не только против бруцеллеза (100%), но и против инфекционного эпидидимита баранов (99,6%).

Нами разработана система профилактических и оздоровительных мероприятий от бруцеллеза MPC и инфекционного эпидидимита баранов с применением вакцины из штамма Рев-1 в хозяйствах Таджикистана (утв. СГВН МСХ РТ 17.09.2011 г.), которая включает подкожную иммунизацию 3 - 5-месячного молодняка (без диагностических исследований на бруцеллез) полной дозой (2 млрд м.к.), ревакцинацию (первую — через 2 года после иммунизации, последующие, через 1 год) и вакцинацию неиммунизированных ярок старших возрастов, переярок и взрослые животных малой дозой (2 млн м.к.).

В связи с тем, что эпизоотическая ситуация по бруцеллезу MPC в Таджикистане находится под угрозой из-за неполного охвата диагностическими исследованиями и специфической профилактикой поголовья индивидуальных и дехканских хозяйств, составляющего большую часть общего поголовья этих видов сельскохозяйственных животных, и увеличивает риск передачи бруцеллеза от MPC людям, актуальная ветеринарная проблема приобретает особый социальный характер и обусловливает важность совершенствования мероприятий По борьбе с бруцеллезом и специфической профилактики бруцеллеза MPC в индивидуальных и дехканских хозяйствах.

5.2 КОНЪЮНКТИВАЛЬНЫЙ МЕТОД 5.2.1 Безвредность и иммунологическая эффективность конъюнктиваль-ного метода вакцинации лабораторных животных

Морских свинок иммунизировали двухсуточной культурой, полученной из вакцины штамма Рев-1, конъюнктивально (глазной пипеткой) в дозе 1 млрд м.к. в объеме 0,03 мл (1-я группа, п=32) и подкожно в такой же дозе в объеме 1 мл (2-я группа, п=32). Лабораторных животных контрольной группы (п=10) не вакцинировали.

У морских свинок, иммунизированных конъюнктивальным методом, в течение 2 сут после вакцинации отмечали местную реакцию, выражавшуюся в слезотечении и покраснении слизистой оболочки глаза; при подкожной иммунизации наблюдали непродолжительное угнетение общего состояния лабора-

торных животных, у которых на месте введения препарата прощупывались маленькие инфильтраты, рассасывавшиеся через 3 - 4 дня.

Степень обсемененности внутренних органов морских свинок двух опытных групп (п=12) бруделлами вакцинного штамма изучали серологическими (через 30 сут после иммунизации), патологоанатомическим и бактериологическими методами исследуя по 3 лабораторных животных на 30, 60, 90 и 120-й дни после иммунизации.

В РА и РСК через 30 сут давали положительный результат сыворотки крови всех конъюнктивально иммунизированных морских свинок. При патоло-гоанатомическом исследовании в органах привитых лабораторных животных выявлены изменения, характерные для вакцинального процесса: гиперплазия лимфатических узлов, небольшое увеличение селезенки, наличие на поверхности печени участков серовато-бурого цвета.

Через 30 дней после конъюнктивальной вакцинации при бактериологическом исследовании от морских свинок выделили 18 культур бруцелл (3 гол.), спустя 60 — 8 (2 гол.), через 90 дней — 3 культуры от 2 лабораторных животных; на 120-е сут результаты бактериологического исследования были отрицательными.

Через 30 дней после иммунизации в РА реагировали положительно все вакцинированные подкожно лабораторные животные, при бактериологическом исследовании внутренних органов и лимфатических узлов которых спустя 30 сут выделили 17 культур бруцелл (3 гол.), 60-11 культур (2 гол.), 90 сут - 4 культуры (1 гол.); через 120 дней от морских свинок культур бруцелл не выделили.

Результаты бактериологических исследований патологического материала от лабораторных животных, привитых вакциной из штамма Рев-1 конъюнкти-вальным и подкожным методами, свидетельствуют, что на 90-е сут ИИ значительно снижался соответственно с 50 (на 30-й день) до 8,3 и с 47,2 (на 30-й день) до 11,1, а спустя 120 сут морские свинки были свободными от бруцелл вакцинного штамма.

Таким образом, нами не выявлено существенных различий по степени обсемененности и срокам нахождения бруцелл в организме морских свинок, привитых вакциной из штамма Рев-1 конъюнктивальным и подкожным методами.

Через 4,5 месяца привитых конъюнктивально (1-я группа, п=15) и подкожно (2-я группа, п=15), а также контрольных (п=10) морских свинок заразили , культурой вирулентного штамма Вг. те1кегшз 16М в дозе 100 м.к. (10 ИД), а спустя 35 дней после заражения сыворотки крови всех морских свинок исследовали серологическими, лабораторных животных - патологоанатомическим, патологический материал - бактериологическими методами

Во внутренних органах у иммунизированных морских свинок патолого-анатомических изменений, обусловленных заражением не обнаружено. При па-тологоанатомическом исследовании контрольных (неиммунных) лабораторных животных отмечали изменения, характерные для бруцеллеза: гиперплазия й увеличение лимфатических узлов, некротические серовато-желтые очажки на печени, увеличение селезенки, закругленность ее краев, дряблость пульпы.

Из. 15 привитых конъюнктивальным методом лабораторых животных заразилось одно, от которого выделили 5 культур (наблюдали регионарную инфекцию) при ИИ 2,8, из 15 вакцинированных подкожно - одно, из подчелюстных, шейных, аксиллярных, паховых лимфатических узлов и селезенки которых изолировали 7 культур (отмечали генерализованную инфекции) при ИИ 3,6.

При бактериологическом исследование от всех морских свинок контрольной группы выделены 34 культуры вирулентного штамма Вг. теШег^з 16М (наблюдали генерализованную инфекцию); ИИ в этой группе составил 28,3.

Лабораторные животные, иммунизированные конъюнктивальным и подкожным методами, в 93,3% случаев противостояли заражению культурой вирулентного штамма Вг. тЫкег^э 16М в дозе 100 м.к. (10 ИД).

Таким образом, результаты проведенных нами исследований свидетельствуют, что иммунитет, выработавшийся от введения вакцины из штамма Рев-1 через конъюнктиву, по своей напряженности не уступает таковому при подкожной иммунизации.

5.2.2 Эффективность конъюнктивальной иммунизации овец вакциной из штамма Рев-1 в экспериментальных условиях

Динамику выработки поствакцинальных антител после введения вакцины из штамма Рев-1 изучили на:

- 5-месячных ярках (п=50) и переярках (17 мес., п=50), которых прививали в дозах 2 млрд м,к. (1-я группа, п=10), 500 млн (2-я группа, п=10), 100 млн (3-я группа, п=10), 50 млн (4-я группа, п=10), 20 млн м.к. (5-я группа, п=10) конъ-юнктивально (1-я подгруппа, п=5) и подкожно (2-я подгруппа, п=5);

- овцах, которых иммунизировали и ревакцинировали (вакцинированные в 5 мес. возрасте дозе 2 млрд м.к.) по той же схеме.

Животных контрольных групп (ярки — п=10, переярки - п=10, овцы -п= 10) не иммунизировали.

За привитыми опытными и контрольными животными вели клиническое наблюдение. Серологические реакции ставили на 15, 30, 45, 60, 90, 120 и 180-е сут после вакцинации. ■ /

У ярок, переярок и овец опытных групп, иммунизированных конъюнктивальным методом, в течение 2 дней после вакцинации отмечали незначительные слезотечение и покраснение слизистой оболочки глаза, повышение температуры тела на 0,01 - 0,05°С, соответствующий показатель в группе подкожно иммунизированных животных, у которых наблюдали незначительное угнетение общего состояния, составил 1,0 — 1,5°С. Реактогеные свойства у вакцинированных и реиммунизированных конъюнктивальным и подкожным методами овцематок, соответствовали таковым у ярок и переярок.

Следовательно, вакцина из штамма Рев-1 при конъюнктивальной вакцинации и реиммунизации в объеме 0,03 мл в в вышеуказанных дозах не обладает выраженными реактогенными свойствами.

Поствакцинальные антитела у ярок переярок, вакцинированных подкожно нарастают быстрее и сохраняются дольше, нежели у аналогичных животных, иммунизированных конъюнктивально.

Большой практический интерес представляют данные по изучению динамики антител после введения вакцины (иммунизация и ревакцинация) у взрослых животных.

По результатом серологических исследований наиболее приемлемой для практического применения при конъюнктивальном методе введения вакцины из штамма Рев-1 является доза, содержащая 50 млн м.к.: поствакцинальные антитела даже у ранее вакцинированных овцематок исчезают через 60 дней после реиммунизации.

Однако окончательный выбор дозы вакцины определяет напряженность иммунитета у привитых животных. В этой связи нами подвергнуто заражению 5-кратной ИД вирулентной культуры Br. melitensis 565 по 3 животных из каждой группы {через 12 мес. после иммунизации и ревакцинации).

По истечению 28 сут после заражения патматериал от животных подвергнут бактериологическому исследованию, в результате которого установлено, что наиболее иммуногенной и поэтому оптимальной для применения как при подкожном, так и при конъюнктивальном методе введения при вакцинации для ярок и переярок является доза, содержащая 2 млрд. м.к., а при иммунизации и ревакцинации овец - 50 млн. м.к.

Таким образом, полученные нами результаты свидетельствуют об обоснованности применения в комплексе профилактических и оздоровительных мероприятий конъюнктивального метода иммунизации MPC против бруцеллеза вакциной из штамма Рев-1 : ярок и переярок (иммунизация) - в дозе 2 млрд м.к., овец (вакцинация и реиммунизация) — в дозе 50 млн м.к.

5.2.3 Реактогенность вакцины из штамма Рев-1 при конъюнктивалыгой иммунизации суягных овцематок

Абортогенные свойства вакцины из штамма Рев-1 изучены на 80 овцематках в различной стадии суягности, которых разделили на 2 группы, включающие 4 подгруппы (п=10). Животных 1-й группы иммунизировали путем закапывания в конъюнктивальный мешок по 0,03 мл взвеси бруцелл вакцинного штамма Рев-1 в дозах 10, 25, 50 и 100 млн м.к., 2-ю группу овцематок прививали такими же дозами, но подкожно в объеме 1 мл.

Взятый в опыт MPC перед вакцинацией в РА и РСК на бруцеллез реагировал отрицательно.

В течение 2 дней после конъюнктивальной вакцинации у овцематок отмечали незначительные слезотечение и покраснение слизистой оболочки глаза, повышение температуры тела на 0,01 - 0,05°С, соответствующий показатель в группе подкожно иммунизированных животных, у которых наблюдали незначительное угнетение общего состояния, составил 1,0- 1,5°С.

Из 40 овцематок, подкожно привитых в различной стадии суягности и не имеющих иммунного фона против бруцеллеза, абортировали 6 (15%).

В группе животных, привитых конъюнктивальным методом, аборты наблюдали только в 4-й подгруппе (100 млн м.к.), в других же подгруппах поствакцинальных осложнений не отмечали, окоты проходили нормально.

5.2.4 Производственная проверка эффективности конъюнктивальной иммунизации овец вакциной из штамма Рев-1

С учетом результатов экспериментальных испытаний в 2004 г. в ПК им. Л. Муродова, ДХ «Рамазони», и ДОС «Чорвопарвар» Гиссарского р-на, бывших в течение ряда лет неблагополучными по бруцеллезу MPC (овцы гиссарской породы), проведены производственные испытания разработанной нами схемы конъюнктивальной вакцинации полной (2 млрд м.к. в объеме 0,03 мл) и малой (50 млн м.к. в объеме 0,03 мл) и реиммунизации MPC малой дозами вакцины из штамма Рев-1.

В этих хозяйствах 3 - 5-месячный MPC прививали вакциной из штамма Рев-1 подкожно в дозе 2 млрд м.к., однако улучшения эпизоотического положения не наблюдали. Поэтому после комплексного серологического исследования всего взрослого поголовья положительно реагировавших животных сдали на убой, а нереагировавших взрослых животных иммунизировали конъюнкти-вально вакциной из штамма Рев-1 в дозе 50 млн м.к. (3 - 5-месячный молодняк, не исследуя на бруцеллез, привили полной дозой - 2 млрд м.к.).

В 2004 г. на бруцеллез исследовали (РБП, РА, РСК) 3933 гол. взрослого MPC (ПК им. Л. Муродова - 1450 гол., ДХ «Рамазони» - 1859 гол;, ДХ «Чорвопарвар» - 624 гол.), среди которого выявили 102 (2,6%) больных животных (ПК им. Л. Муродова - 18 гол., или 1,24%; ДХ «Рамазони» - 62 гол., или 3,34%; ДХ «Чорвопарвар» Гиссарского р-на - 22 гол., или 3,53%). Положительно реагирующих животных сдали на мясо, а здоровых вакцинировали конъюнктивальным методом малой дозой (50 млн м.к.) вакцины из штамма Рев-1 не позднее, чем за 2 месяца до осеменения.

В июне 2004 г. на летних пастбищах весь (2064 гол.) молодняк MPC ПК им. Л. Муродова (648 гол.), ДХ «Рамазони» (1090 гол.), ДХ «Чорвопарвар» (326 гол.) Гиссарского р-на без предварительного серологического исследования на бруцеллез иммунизировали конъюнктивальным методом полной дозой (2 млрд м.к.) вакцины из штамма Рев-1. В августе этого года из привитого молодняка сформировали отдельные отары.

В июне 2005 г. (через 1 год после вакцинации) овцепоголовье хозяйств, привитое конъюнктивально вакциной из штамма Рев-1 в дозе 50 млн м.к., серологически исследовали на бруцеллез, заболеваемость которым по сравнению с 2004 г. значительно снизилась с 2,6 до 0,78%: из 3734 исследованных гол. MPC положительно реагировали 29 животных, которых сдали на убой. После повторного серологического исследования через 30 сут положительно реагирующих на бруцеллез овец не выявили, и всех животных реиммунизировали конъюнктивально малой дозой (50 млн м.к.). Результаты очередных (2006) серологических исследований среди вакцинированного (2004 г.) и реиммунизирован-ного (2005 г.) вакциной Рев-1 конъюнктивально в дозе 50 млн м.к. взрослого MPC показали, что эпизоотическая ситуация по бруцеллезу в хозяйствах Гис-

сарского р-на, в которых нами проведена производственная проверка, стабилизировалась (заболеваемость составила 0,3%: исследовано - 3620, положительно реагировали - 11 животных).

Через 1 (2005 г.) и 2 года (2006 г.) после конъюнктивальной иммунизации молодняка вакциной из штамма Рев-1 полной дозой (2 млрд м.к.) при серологическом исследовании на бруцеллез (РБП, РА, РСК) из соответственно 1914'и 1720 гол. MPC в этих хозяйствах положительно реагировали соответственно 3 (0,16%) и 8 (0,47%) гол., которых сдали на убой, а здоровых животных реимму-низировали конъюнктивально малой дозой (50 млн м.к.) вакцины из штамма Рев-1. Эпизоотическое положение по бруцеллезу в 2007 г. среди поголовья конъюнктивально иммунизированного полной (2 млрд м.к.) и ревакцинирован-ного малой дозой (50 млн м.к.) исследованных хозяйств соответствовало таковому среди овец, конъюнктивально иммунизированных и ревакцинированных малой дозой (50 млн м.к.): заболеваемость составила 0,18% (из 1640 гол. серологически исследованных животных положительно реагировали 3), что подтверждает результаты экспериментальных испытаний схемы конъюнктивальной прививки молодняка MPC полной (2 млрд м.к.) и реиммунизации малой дозами (50 млн м.к.) вакцины из штамма Рев 1.

Таким образом, испытанный нами метод вакцинации является практически наиболее приемлемым при специфической профилактике бруцеллеза MPC в индивидуальных и дехканских хозяйствах в связи с бесконтрольным перемещением в них животных, неполным их охватом диагностическими и профилактическими мероприятиями.

На оснавании полученных экспериментальных и производственных ре-зултатов нами разработана система профилактических и оздоровительных мероприятий против бруцеллеза MPC и инфекционного эпидидимита баранов с применением вакцины из штамма Br. melitensis Рев-1 (утв. СГВН МСХ.РТ

25.05.2005 г.), которая включает конъюнктивальную иммунизацию 3 — 5-месячного молодняка (без диагностических исследований на бруцеллез) полной дозой (2 млрд м.к.), ревакцинацию (первую - через 2 года после иммунизации, последующие - через 1 год) и вакцинацию (реиммунизации через 1 год) неим-мунизированных ярок старших возрастов, переярок и взрослые животных налой дозой (50 млн м.к.) в индивидуальных и дехканских хозяйствах;

В соответствии с составленной нами Инструкцией о мероприятиях по профилактике и ликвидации бруцеллеза животных (утв. СГВН МСХ РТ

26.12.2006 г.) в благополучных по бруцеллезу MPC населенных пунктах (распространенность болезни - до 1%) восприимчивое поголовье, не исследуя на бруцеллез, иммунизируют вакциной из штамма Рев-1 конъюнктивальным методом.

6 КОМПЛЕКСНАЯ ИММУНИЗАЦИЯ ПРОТИВ БРУЦЕЛЛЕЗА, САЛЬМОНЕЛЛЕЗА И ПАСТЕРЕЛЛЕЗА 6.1 Одновременная вакцинация ярок

Результаты изучения эффективности комплексной иммунизации морских свинок и кроликов против бруцеллеза, сальмонеллеза и пастереллеза послужи-

ли основанием для проведения трех опытов на 2 — 5-месячных ярках гиссарской породы в ДХ «Таджикистан» (Варзобский р-н), в котором выделяли больной бруцеллезом, сальмонеллезом и пастереллезом МРС.

Первый опыт, целью которого явилось изучение эффективности одновременной вакцинации против бруцеллеза, сальмонеллеза и пастереллеза, проводили в отаре, состоявшей из 200 овцематок и 98 ярок.

Здоровых в отношении бруцеллеза, сальмонеллеза и пастреллеза ярок разделили на 3 группы (п=15). Животных 1-й группы подкожно прививали вакциной из штамма Рев-1, 2-й — ассоциированной вакциной против сальмонеллеза и пастереллеза в дозе 2 см3 двукратно с интервалом 10 дней и 3-й группы -комплексно вышеназванными препаратами в тех же дозах. Контрольных ярок (п=53) не иммунизировали.

Эффективность вакцинации оценивали по заболеваемости и сохранности подопытных животных.

У привитых ярок на 2 - 4-е сут незначительно повышалась температура тела (на 0,6 - 0,8°С). Местная реакция выражалась в появлении на месте инъекции горячей болезненной припухлости, которая через 4 дня исчезала.

При клиническом осмотре вакцинированных животных, кроме кратковременного повышения температуры тела, других видимых отклонений от физиологической нормы не отмечали. Общее состояние и аппетит у всех привитых ярок были удовлетворительными.

Динамику антигенной активности вакцины из штамма Рев-1 исследовали через 7, 14, 30, 60, 90, 120 и 150 сут после иммунизации в РА и РСК, а ассоциированной вакцины против сальмонеллеза и пастереллеза - РА.

Максимальное количество агглютининов (450 МЕ) у ярок 1-й группы (вакцина из шт. Рев-1) наблюдали на 14-й день. У комплексно иммунизированных животных (3-я группа) соответствующий показатель в этот срок составил 455 МЕ. В дальнейшем у животных обеих групп титры агглютининов в крови снижались до 30 МЕ на 150-е сут после прививки.

В РСК наиболее высокие титры (80 ЕД) в 1-й и 3-й группах отмечены на 30-й день после вакцинации, затем у животных обеих групп количество КС А в крови уменьшалось до 10 ЕД на 150-е су* после иммунизации.

В сыворотках крови животных 2-й (ассоциированная вакцина против сальмонеллеза и пастереллеза) и 3-й (одновременная иммунизация) групп агглютинины в диагностических титрах были обнаружены на 7-й (сальмонеллез -1:600, пастереллез - 1:400), а в максимальном количестве — на 14-й день после прививки (соответственно сальмонеллез — 1:800 и 1:900, пастереллез — 1:600, 1:550). На 150-е сут после вакцинации этот показатель составил 1:100 МЕ.

В течение 12 мес после иммунизации (срок наблюдения) в 1-й группе одно животное заболело пастереллезом, во 2-й — бруцеллезом. В контрольной группе из 53 непривитых овец у 8 (15,1%) диагностировали сальмонеллез, 18 (33,96%) - пастереллез и 4 ,(7,5%) животных положительно реагировали на бруцеллез.

Полученные результаты свидетельствуют о высокой эффективности комплексной вакцинации против бруцеллеза, сальмонеллеза и пастереллеза, кото-

рая предупреждает заболеваемость и обеспечивает сохранность 100% животных.

Способность бруцелл вакцинного штамма приживаться в организме й ге-нералйзованно распространяться в органах привитых животных изучена на 16 ярках, здоровых в отношении бруцеллеза, сальмонеллеза и пастереллеза.

Животных 1-й группы (п=8) подкожно прививали вакциной из Штамма Рев-1 в объеме 2 см3 (доза - 2 млрд м.к.), 2-й (п=8) - одновременно вышеназванным препаратом в той же дозе и ассоциированной вакциной против сальмонеллеза и пастереллеза в дозе 2 см3 двукратно с интервалом 10 сут.

Степень обсеменения и сроки нахождения бруцелл вакцинного штамма в организме ярок определяли на 15, 30, 60 и 90-й дни после иммунизации, когда для бактериологического исследования забивали по 2 животных из каждой группы. "

Через 15 дней после прививки только вакциной из штамма Рев-1 у ярок 1-й группы выделили 8 культур, ИИ - 33,3. Из проб патологического материала от комплексно иммунизированных животных (2-я группа) изолировали 7 культур, ИИ — 29,2. На 30-е сут исследования эти показатели составили'соответственно 10; 41,7 и 12; 50,0, через 60 дней после прививки - в обеих группах соответственно - 3 и 12,5. На 90-е сут при бактериологическом исследований культуры вакцинного штамма в обеих группах не выделены.

Установлено, что штамм Рев-1 в одинаковой степени приживается в организме как ярок, привитых только вакциной из этого штамма, так и в организме животных, иммунизированных данным препаратом одновременно с ассоциированной вакциной против сальмонеллеза и пастереллеза, которая не оказывает существенного влияния на приживаемость бруцелл.

Безвредность и иммуногенность комплексной вакцинации против бруцеллеза, сальмонеллеза и пастереллеза изучали в третьем опыте, который провели на 30 серонегативных ярках, разделенных на 3 группы (п=10). '

В 1-й подопытной группе применяли подкожно вакцину из штамма Рев-1 в дозе 2 см3 (2 млрд м.к.), во 2-ой - ассоциированную вакцину против сальмонеллеза и пастереллеза в дозе 2 см3 двукратно с интервалом 10 сут, в 3-й - комплексно вышеназванные препараты в соответствующих дозах.

В течение 10 дней после иммунизации у подопытных ярок утром и вечером измеряли температуру тела. У 90% животных 1-й группы на 2-е сут после прививки отмечали повышение температуры тела против исходной на 0,6°С при утреннем измерении. Кратковременное повышение температуры тела на 0,'Г-0,8°С у ярок 2-й группы наблюдали на 2 - 4-й дни после вакцинации. На 2-е сут после вакцинации у 70% животных 3-й группы регистрировали повышение температуры тела на 0,1 - 1,2°С, которое продолжалось 5 дней. Необходимо отметить, что температурная реакция у комплексно и ассоциировано Иммунизированных ярок была более выраженной, чем у привитых только вакциной из штамма Рев-1.

При клиническом осмотре подопытных животных каких-либо отклонений от физиологической нормы не отмечали. Общее состояние и аппетит у всех иммунизированных ярок оставались без изменений.

Установлено, что количество общего белка в сыворотках крови животных 1-й группы (вакцина из штамма Рев-1) на 5, 15, 20 и 30-е сут после прививки существенно не изменялось.

У животных 1-й (вакцина из штамма Рев-1) и 2-й групп (ассоциированная вакцина против сальмонеллеза и пастереллеза) на 5-й день после прививки регистрировали повышение количества общего белка по сравнению с соответствующим показателем до иммунизации (Р<0,5). Увеличение количества общего белка статистически достоверным (Р>0,5) было у ярок 3-й группы (вакцина из штамма Рев-1 + ассоциированная вакцина против сальмонеллеза и пастереллеза) на 5, 15 и 20-е сут, а на 30-й день наблюдали снижение этого показателя до исходного уровня.

При определении бактерицидной активности сыврроток крови животных 1-й группы (вакцина из штамма Рев-1) установили незначительное повышение ее на 5 и 15-е сут после прививки, а на 20 и 30-й дни этот показатель снижался.

Бактерицидная активность сыворотки крови животных, вакцинированных ассоциировано против сальмонеллеза и пастереллеза (2-я группа) и одновременно против бруцеллеза, сальмонеллеза и пастереллеза (3-я группа), была значительно выше, чем у иммунизированных только против бруцеллеза (1-я группа).

У ярок, привитых ассоциировано (ассоциированная вакцина против сальмонеллеза и пастереллеза) и комплексно (вакцина из штамма Рев-1 + ассоциированная вакцина против сальмонеллеза и пастереллеза) фагоцитарная активность лейкоцитов крови также была выше, чем у животных, иммунизированных только против бруцеллеза.

Сыворотки крови животных, привитых раздельно и одновременно, активно реагировали в серологических реакциях.

На 14-е сут после иммунизации в сыворотках крови ярок 1-й (вакцина из штамма Рев-1) и 3-й групп (вакцина из штамма Рев-1 + ассоциированная вакцина против сальмонеллеза и пастереллеза) обнаруживали противобруцеллезные агглютинины в средних титрах соответственно 415 и 420 МЕ, а на 30-й день -КСА в среднем титре 80 ЕД. Через 90 сут после прививки титры агглютининов и КСА у животных 1-й и 3-й групп начали снижаться.

Животные 2-й (ассоциированно против сальмонеллеза и пастереллеза) и 3-й (комплексно против бруцеллеза, сальмонеллеза и пастереллеза) групп одинаково реагировали на введение ассоциированной вакцины против сальмонеллеза и пастереллеза. Агглютинины обнаруживали на 7-е сут в средних титрах соответственно сальмонеллез — 1:200 и 1:300, пастереллез - 1:150 и 1:200 МЕ, которые начали снижаться в обеих группах через 90 дней после прививки.

Таким образом, при одновременном применении вакцины из штамма Рев-1 и ассоциированной вакцины против сальмонеллеза и пастереллеза бруцеллы вакцинного штамма быстро и широко расселяются в организме ярок. Использование комплексного метода безвредно и эффективно стимулирует выработку клеточного и гуморального иммунитета. При одновременном введении указанных препаратов между ними не происходит отрицательного взаимодействия: выработка и угасание специфических поствакцинальных антител происходят

так же, как и при применении только вакцины из штамма Рев-1 (различий в напряженности иммунитета не выявлено). В экспериментальных условиях комплексная вакцинация обеспечивает защиту от бруцеллеза, сальмонеллеза и па-стереллеза 100% животных.

6.2 Производственная проверка эффективности комплексной вакцинации овец против бруцеллеза, сальмонеллеза и пастереллеза

Положительные результаты, полученные нами в лабораторных и экспериментальных условиях, послужили основанием для изучения эффективности .одновременной иммунизации MPC против бруцеллеза, сальмонеллеза и пастереллеза в производственных условиях (Д/Х Ходжи Фарход Гиссарского р — на).

Установлено, что одновременная иммунизация ярок (вакциной из штамма Рев-1 в дозе 2 см3 (2 млрд м.к.) и ассоциированной вакциной против саяьмойел-леза и пастереллеза в дозе 2 см3 двукратно с интервалом 10 сут) и овцематок (вакциной из штамма Рев-1 в дозе 1 см3 (2 млн м.к.) и ассоциированной вакциной против сальмонеллеза и пастереллеза в дозе 3 см3 двукратно с интервалом 10 дней) против бруцеллеза, сальмонеллеза и пастереллеза по эффективности не уступает иммунизации только против бруцеллеза и ассоциированной прививке против сальмонеллеза и пастереллеза и формирует одновременно иммунитет против указанных инфекций.

Разработанный метод комплексной вакцинации MPC против бруцеллеза, сальмонеллеза и пастереллеза сокращает материальные и трудовые затраты, сроки между прививками, что крайне важно в условиях отгонно-пастбищного ведения овцеводства.

7 ЭФФЕКТИВНОСТЬ ПРЕПАРАТА БРОВАДЕЗ-ПЛЮС

ПРИ ДЕЗИНФЕКЦИИ ЖИВОТНОВОДЧЕСКИХ ПОМЕЩЕНИЙ

Нами совместно со специалистами Сумского национального аграрного университета (Республика Украина) изучены бактерицидные свойства нового дезинфектанта Бровадез-плюс (НПФ «Бровафарма», Республика Украина) в отношении возбудителей бруцеллеза.

Препарат содержит синерпгческую композицию из четвертичных аммонийных соединений в виде солей алкил диметил-бензил аммония хлорида -10%, дидецил-диметил аммония хлорида - 5%, этилендиамин-тетра-уксусной -кислоты - 7%, вспомогательные компоненты для эмульгирования, пенообразо-вания, стабилизации, расцветки и деминерализированную воду - до 100%.

Для проведения исследований смесь культуры бруцелл (Br. melitensis и Br. abortus) стерильной пипеткой по 0,2 см3 помещали в 2 флакона (1 - опытный, 1 - контрольный) объемом 20 см3. Затем в опытный флакон добавляли 10 см 1% препарата Бровадез-плюс, в контрольный флакон вместо дезинфектанта вносили 10 см3 стерильного изотонического раствора. Содержимое флаконов перемешивали и выдерживали 24 ч, после этого переносили в центрифужные пробирки, которые центрифугировали при 1500 об/мин в течение 30 мин. Для прекращения действия дезинфицирующего эффекта препарата в опытной про-

бе, осадок, который образовался при центрифугировании, а также контрольную пробу два раза отмывали стерильным изотоническим раствором на центрифуге. Полученный осадок опытной и контрольной проб ресуспензировали в 5 см3 стерильного изотонического раствора и стерильной пипеткой высевали в пробирки с питательной средой для культивирования бруцелл. Пробирки с высевами выдерживали в термостате при температуре 37°С, через 24, 48 и 72 ч проводя осмотр наличия роста культур. Отсутствие роста колоний бруцелл указывало на наличие бактерицидного действия дезинфектанта. Паралельно аналогично исследовали 1,5 и 2% концентрации дезинфектанта.

Кроме того, исследования проводили на тест-обьектах, в качестве которых использовали оцинкованное железо, дерево, штукатурку и кирпич размером 10x10 см. Перед нанесением тест-культур осуществляли полную дезинфекцию поверхности. После подсыхания тест-обьекты раскладывали горизонтально и наносили 2-млрд взвесь изучаемых культур из расчета 0,5 см3 на 100 см2. Культуры бруцелл равномерно распределяли по поверхности стеклянным шпателем, подсушивали при комнатной температуре (18 - 20°С) и относительной влажности 50 — 60%.

Затем тест-обьекты раскладывали горизонтально и вертикально и пипеткой обрабатывали дезинфицирующим 1,5% препаратом Бровадез-плюс в количестве 200 см3/м2. После орошения оставляли тест-обьекты до полного высыхания. Контрольные тест-объекты орошали стерильной водопроводной водой в том же количестве. Контроль качества дезинфекции проводили с помощью стерильного влажного тампона, который отмывали в 10 мл воды с бусами на протяжении 10 мин. Смывы, которые получали с опытных пластинок, вносили в чашки Петри и заливали бруцелл-агаром при температуре 40 - 50°С. Смывы с контрольных пластинок перед посевом разводили в 100 см3 стерильного изотонического раствора для равномерного распределения микроорганизмов в агаре. Посевы выдерживали в термостате при 37°С, а потом подсчитывали количество колоний, которые выросли на чашках Петри. Определяли плотность контаминации на 100 см2 и процент обезвреживания.

При исследовании бактерицидных свойств препарата Бровадез-плюс на тест-обьектах установлена высокая степень его бактерицидной активности в отношении бруцелл в концентрации 1,5% при экспозиции 24 ч из расчета рабочего раствора препарата 1 л на м2.

Таким образом, нами установлена высокая бактерицидная активность 1,5%-ного раствора препарата Бровадез-плюс в отношении возбудителей бруцеллеза.

ВЫВОДЫ

1. Установлено, что бруцеллез MPC в животноводческих хозяйствах Таджикистана распространен повсеместно. Нашими исследованиями показано, что заболеваемость овец и коз бруцеллезом в частном секторе составляет 5,6%, тогда как в общественном - 0,56%.

2. Показано, что бруцеллез MPC в животноводческих хозяйствах районов республиканского подчинения диагностируется как в отдельности (3,26%), так и в ассоциации с сальмонеллезом и пастереллезом (3,17%).

3. Комплексное изучение эпизоотолого-эпидемиологической обстановки по бруцеллезу показывает, что климато-географические условия Таджикистана способствуют длительной циркуляции возбудителя в неблагополучных пунктах и по маршруту перегона скота на сезонные пастбища. Совокупность этих факторов способствует заражению и распространению бруцеллеза среди животных и людей.

4. Разработана методика исследования молока животных РБП, которая является специфическим и доступным способом для диагностики бруцеллеза в лабораторных и полевых условиях.

5. Подкожная иммунизация MPC вакциной из штамма Рев-1 в 3 - 5-месячном возрасте, не исследуя на бруцеллез, полной дозой (2 млрд м.к.) и ре-иммунизация через 2 года малой дозой (2 млн м.к.) с последующей ежегодной реиммунизацией в этой же дозе значительно улучшила эпизоотическую ситуацию по бруцеллезу и сократила количество неблагополучных пунктов в Гис-сарском районе.

6. Разработанный конъюнктивальный метод иммунизации MPC вакциной из штамма Рев-1 в 3 - 5-месячном возрасте, не исследуя на бруцеллез, полной !' дозой (2 млрд м.к.) и реиммунизации через 2 года малой дозой (50 млн м.к.) с последующей ежегодной реиммунизацией малой дозой (50 млн м.к.) способствовал оздоровлению частных и дехканских хозяйств Гиссарского района.

7. Конъюнктивальный способ иммунизации MPC вакциной из штамма Рев-1 полной и малой дозами безвреден и обеспечивает быстрое расселение1^ бруцелл вакцинного штамма.

Приживаемость бруцелл вакцинного штамма Рев-1 при конъюнктиваль-ном методе иммунизации практически такая же, как при подкожном.

8. Комплексная иммунизация MPC против бруцеллеза, сальмонеллеза и пастереллеза не повышает реактогенность используемых вакцин и у животных формируется напряженный иммунитет против этих болезней.

9. Одновременная иммунизация в хозяйствах, неблагополучных по бруцеллезу, сальмонеллезу и пастереллезу MPC, способствует улучшению эпизоотической ситуации, снижению заболеваемости и смертности молодняка.

10. В эксперименте установлено, что 1,5%-ный раствор дезинфицирующего средства Бровадез-плюс из расчета 1 л/м2 обрабатываемой поверхности оказывает бактерицидное действие на бруцеллы.

11. Разработанная система профилактических и оздоровительных мероприятий против бруцеллеза MPC и инфекционного эпидидимита баранов с применением вакцины из штамма Рев-1 подкожным и конъюнктивальным методами способствуют профилактике указанных инфекции в частных и дехканских хозяйствах РТ.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. Система профилактических и оздоровительных мероприятий против бруцеллеза мелкого рогатого скота и инфекционного эпидидимита баранов с применением вакцины из штамма Рев-1 в хозяйствах РТ (утв. ГУВ МСХ РТ 02.04.1999 г.).

2. Наставление по применению ассоциированной гидроокисьалюминие-вой формолвакцины против сальмонеллеза и пастереллеза сельскохозяйственных животных (утв. ГУВ МСХ РТ 17.12.1999 г.).

3. .Методические указания по серологической диагностике бруцеллеза крупного и мелкого рогатого скота (утв. ГУВ МСХ РТ 10.06.2003 г.).

4. Система профилактических и оздоровительных мероприятий против бруцеллеза мелкого рогатого скота и инфекционного эпидидимита баранов с применением вакцины из штамма Вг. теШепБ^ Рев-1 (утв. ГУВ МСХ РТ 25,05.2005 г.).

5. Инструкция по изготовлению и контролю антигена цветного для роз бенгал пробы (РБП) при диагностике бруцеллеза у животных (утв. ГУВ МСХ РТ 02.06.2005 г.).

: 6. Технические условия на антиген цветной для роз бенгал пробы (РБП) при диагностике бруцеллеза у животных (утв. ГУВ МСХ РТ 02.06.2005 г.).

7. Наставление по применению антигена цветного для роз бенгал пробы (РБП) при диагностике бруцеллеза у животных (утв. ГУВ МСХ РТ 02.06.2005 г.).

8. Инструкция по изготовлению и контролю единого антигена для РА, РСК, РДСК при диагностике бруцеллеза сельскохозяйственных животных (утв. ГУВ МСХ РТ 02.06.2005 г.).

9. Технические условия на единый антиген для РА, РСК, РДСК при диагностике бруцеллеза сельскохозяйственных животных (утв. ГУВ МСХ РТ

02.06.2005 г.).

10. Наставление по применению единого антигена для РА, РСК, РДСК при диагностике бруцеллеза сельскохозяйственных животных (утв. ГУВ МСХ РТ 02.06.2005 г.).

11. Рекомендации по применению комплексной иммунизации мелкого рогатого скота против бруцеллеза, сальмонеллеза и пастерелеза (утв. ГУВ МСХ РТ 28.11.2006 г.).

12. Наставление по диагностике бруцеллеза животных (утв. ГУВ МСХ РТ

26.12.2006 г.).

13. Инструкция о мероприятиях по профилактике и ликвидации бруцеллеза животных (утв. ГУВ МСХ РТ 26.12.2006 г.).

14. Система профилактических и оздоровительных мероприятий от бруцеллеза мелкого рогатого скота и инфекционного эпидидимита баранов с применением вакцины из штамма Рев-1 в хозяйствах РТ (утв. СГВН МСХ РТ 17.09.2011 г.).

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

Статьи в журналах, рекомендованных ВАК РФ

1. Турдиев Ш.А. Эффективность системы профилактических и оздоровительных мероприятий от бруцеллеза мелкого рогатого скота и инфекционного эпйдидимита баранов с применением вакцины из штамма Рев-1 в хозяйствах Республики Таджикистан / Ш.А. Турдиев // Докл. ТАСХН, посвящ. 1100-летию государства Сомонидов. - Душанбе, 1999. - С. 48 - 49.

2. Турдиев Ш.А. Эпизоотологические особенности распространения бруцеллеза животных в Таджикистане / Ш.А. Турдиев // Докл. ТАСХН, посвящ.

~ 80-летию города Душанбе. - Душанбе, 2004. - С. 80 - 82.

3. Турдиев Ш.А. Ассоциированное течение у овец бруцеллеза, сальмонеллеза и пастереллеза и комплексный метод их специфической профилактики / Ш.А. Турдиев, К.У. Идиев // Кишоварз / ТАУ. - Душанбе, 2006. - ЖЗ. - С. 20 -21.

4. Влияние витаминной обеспеченности на сохранность молодняка и послеродовые осложнения у коров / Ш.А. Турдиев, К.У. Идиев, З.Н. Абдуллоев, В.А. Сидоркин//Кишоварз / ТАУ. - Душанбе, 2008. - №2. - С. 20 - 21.

5. Комплексные антибактериальные препараты и их эффективность при болезнях животных / И. Саттори, Н.Р. Хасанов, Ш.А. Турдиев, Н.Р. Сатторов // Докл. ТАСХН. - Душанбе, 2009. - №1. - С. 40 - 44.

6. Муминов А. Специфическая профилактика бруцеллеза мелкого рогатого скота в Таджикистане / А. Муминов, Ш.А. Турдиев // Докл. ТАСХН. - Душанбе, 2010. - С. 48 - 51.

7. Турдиев Ш.А. Определение бактерицидных свойств препарата «Брова-дез-плюс» в отношении возбудителей бруцеллеза / Ш.А. Турдиев, С.М. Мухид-динов, A.A. Фотина // Кишоварз / ТАУ. - Душанбе, 2010. - №4. - С. 30 - 35.

8. Турдиев Ш.А. Эпизоотологический мониторинг и методы специфической профилактики бруцеллеза мелкого рогатого скота / Ш.А. Турдиев, А.Р. Мухидинов // Кишоварз / ТАУ. - Душанбе, 2010. - №3. - С. 32 - 33.

9. Турдиев Ш.А. Эффективность Лактовита при лечении мастита коров в сухостойном периоде / Ш.А. Турдиев, К.У. Идиев // Кишоварз / ТАУ. - Душанбе, 2010,- №1,- С. 19-20.

10. Турдиев Ш.А. Производственные испытания вакцины из штамма Рев-1 в малых дозах / Ш.А. Турдиев, А. Муминов // Кишоварз / ТАУ. - Душанбе, 2012. №3. - С. 20-22.

Патенты

11. Пат. TJ 42 Республика Таджикистан, А 61 К 39/00, 39/02, 39/10. Способ дифференциации поствакцинальных реакций от реакции при естественном бруцеллезе / Турдиев Ш.А., Муминов А., Идиев К.У., Махмудов А.Х. // Бюл. 43.-2006.-С. 4.

12. Пат. TJ 50 Республика Таджикистан, С 12 N 1/00, А 61 К 39/00. Комплексная иммунизация овец против бруцеллеза, сальмонеллеза и пастереллеза /

Сатторов И.Т., Турдиев Ш.А., Муминов А., Идиев К.У. // Бюл. 43. - 2006. - С. 33.

13. Пат. TJ 395 Республика Таджикистан, МПК 7 А 61 К 33/06, 33/12, 31/243, 31/345, 31/375, 31/65, 31/732, А 61 Р 1/14. Препарат Шодмон для лечения инфекционных энтеритов телят / Сатторов И.Т., Махмудов К.Б., Турдиев Ш., Саидов Ш., Салимов Т., Сатторов Н., Носиров С.; заявитель и патентообладатель - Сатторов И.Т.; заявл. 18.07.2003; опубл. 2004, Бюл. №35.

14. Пат. TJ 403 Республика Таджикистан, МПК 7 С 07 D 235/06, С 07 F 15/02, А 61 К 31/295, 31/4184, А 61 Р 31/34. Дибаферол, проявляющий противо-микробную активность / Рачабов У., Юсупов З.Н., Сатторов И.Т., Махмудов К.Б., Турдиев Ш.А., Сатторов Н.Р., Имомов Р.Б., Болтаев С.П.; заявитель и патентообладатель - Таджикский государственный национальный университет, Таджикский научно-исследовательский ветеринарный институт; заявл. 04.04.2003; опубл. 2005, Бюл. №37.

15. Пат. TJ 404 Республика Таджикистан, МПК 7 С 07 D 235/08, А 61 К 31/ 4184, А 61 Р 31/04, 31/10, С 07 F 1/08. Дибакупрол, проявляющий антибактериальную и антигрибковую активность / Юсупов З.Н., Рачабов У., Сатторов И.Т., Имомов Р.Б., Турдиев Ш.А., Махмудов К.Б., Сатторов Н., Давлатмуродов Т., Зухуров А.; заявитель и патентообладатель - Таджикский государственный национальный университет, Таджикский научно-исследовательский ветеринарный институт; заявл. 12.03.2004; опубл. 2005, Бюл. №37.

16. Пат. TJ 405 Республика Таджикистан. Препарат Витагин для лечения эндометритов у коров / Сатторов И.Т., Мирзахметов Ш.Р., Юсупов З.Н., Турдиев Ш., Сатторов Н., Давлатмуродов Т., Раджабов У., Хасанов Н.Р.; заявитель и патентообладатель - Сатторов И.Т.; заявл. 13.08.2004; опубл. 2005, Бюл. №38.

17. Пат. TJ 406 Республика Таджикистан. Препарат Лактовит для лечения маститов у коров / Сатторов И.Т., Мирзахметов Ш.Р., Юсупов З.Н., Турдиев Ш., Давлатмуродов Т., Раджабов У., Хасанов Н.Р.; заявитель и патентообладатель - Сатторов И.Т.; заявл. 13.08.2004; опубл. 2005, Бюл. №37.

Статьи в других изданиях

18. Турдиев Ш.А. Влияние иммунопептида - тимоцина на антигенную активность вакцины из штамма Рев-1 / Ш.А. Турдиев, У .А. Абдуллоев // Научное обеспечение ветеринарного благополучия животноводства: матер. Междунар. конф., посвящ. 75-летию УзНИВИ. - Самарканд, 2001. - С. 54 - 55.

19. Турдиев Ш.А. Возможность применения комплексной иммунизации против бруцеллеза, сальмонеллеза и пастереллеза в экспериментальных условиях / Ш.А. Турдиев, У.А. Абдуллоев, К.И. Идиев // Актуальные проблемы болезней молодняка в современных условиях: матер. Междунар. науч.-практ. конф. - Воронеж, 2002. - С. 618 - 619.

20. Эффективность Витагина-1 при эндометрите у коров / И.Т. Сатторов, Ш.А. Турдиев, Ш.Р. Мирзахметов, П. Асоев // Актуальные проблемы болезней молодняка в современных условиях: матер. Междунар, науч.-практ. конф. - Воронеж, 2002. - С. 510 - 511.

21. Результаты иммунизации лабораторных животных живой вакциной из штамма Рев-1 конъюнктивальным способом / Ш.А. Турдиев, А. Муминов, К.У. Идиев, А.Х. Махмудов // Актуальные проблемы болезней животных в современных условиях: матер. Междунар. науч-практ. конф., посвящ. 60-летию Та-джНИВИ. - Душанбе, 2003. - С. 45 - 46.

22. Турдиев Ш.А. Исследование и применение координационных соединений железа с дибазолом / Ш.А. Турдиев, У.Р. Раджабов, З.Ю. Юсупов // Актуальные проблемы болезней животных в современных условиях: матер. Междунар. науч.-практ. конф., посвящ. 60-летию ТаджНИВИ. - Душанбе, 2003. - С.

^143 - 144.

23. Турдиев Ш.А. Комплексобразование в системе Си (О) Си (II) имидазол - вода / Ш.А. Турдиев, У.Р. Раджабов, З.Ю. Юсупов // Состояние и преспекти-вы развития ветеринарной науки и практики: матер. Междунар. науч. конф., посвящ. госпрограмме «Аул» / КазНИВИ. — Алматы, 2003. - С. 192 - 193.

24. Турдиев Ш.А. Конъюнктивальный метод иммунизации лабораторных животных и мелкого рогатого скота против бруцеллеза вакциной из штамма Рев-1 / Ш.А. Турдиев, А. Муминов, А.Х. Махмудов // Актуальные проблемы инфекционной патологии животных: матер. Междунар. науч. конф., посвящ. 45-летию ФГУП ВНИИЗЖ. - Владимир, 2003. - С. 244 - 249.

25. Турдиев Ш.А. Конъюнктивальный метод иммунизации мелкого рогатого скота против бруцеллеза живой вакциной из штамма Рев-1 / Ш.А. Турдиев, А. Муминов, А.Х. Махмудов // Информ. листок / НПИЦентр РТ. - Душанбе, 2003.-№11.-2 с.

26. Турдиев Ш.А. Координационные соединения, образующиеся в системе Ре (II) и Ре (III) бензимидазол - вода / Ш.А. Турдиев, У.Р. Раджабов, З.Ю. Юсупов // Актуальные проблемы болезней животных в современных условиях: матер. Междунар. науч.-практ. конф., посвящ. 60-летию ТаджНИВИ. - Душанбе, 2003.-С. 145-147.

27. Турдиев Ш.А. Опыт оздоровления совхоза «Тебалай» Хатлонской области Республики Таджикистан от бруцеллеза мелкого рогатого скота / Ш.А.. Турдиев, А. Муминов, К.У. Идиев // Состояние и преспективы развития ветери- ; нарной науки и практики: матер. Междунар. науч. конф., посвящ. госпрограмме «Аул» / КазНИВИ. - Алматы, 2003. - С. 245 - 247. .,

28. Турдиев Ш.А. Распространение бруцеллеза коз в частном секторе Республики Таджикистан / Ш.А. Турдиев, А. Махмадшоев // Современное состояние и перспективы оздоровления хозяйств от инфекционных и инвазионных болезней животных и человека: матер. Междунар. науч.-практ. конф. — Бишкек, 2003.-С. 288-289.

29. Турдиев Ш.А. Эффективность Рев-1 в оздоровлении животноводческих хозяйств от бруцеллеза / Ш.А. Турдиев, А. Муминов, К.У. Идиев И Актуальные проблемы болезней животных в современных условиях: матер. Междунар. науч-практ. конф., посвящ 60-летию ТаджНИВИ. - Душанбе, 2003. - С. 78 -79.

30. Физико-химические и биологические особенности координационного соединения дибаферол / И.Т. Сатгоров, Ш.А. Турдиев, К.Б. Махмудов, Н.Р.

Сатторов, З.Н. Юсупов, У.Р. Раджабов, Р.Б. Имомов // Актуальные проблемы болезней животных в современных условиях: матер. Междунар. науч.-практ. конф., посвящ. 60-летию ТаджНИВИ - Душанбе, 2003. - С. 145 - 146.

31. Эффективность РБПМ в диагностике бруцеллеза у коров / Ш.А. Тур-диев, А. Махмадшоев, З.С. Кельдибекова, Ж.Б. Касымбеков И Современное состояние и перспективы оздоровления хозяйств от инфекционных и инвазионных болезней животных и человека: матер. Междунар. науч.-практ. конф. -Бишкек, 2003. - С. 287 - 288.

32. Координационные соединения Fe (II) и Fe (III), обладающие противо-микробной активностью / И.Т. Сатторов, Ш.А. Турдиев, У.Р. Раджабов, З.Ю. Юсупов // Мониторинг распространения и предотвращения особо опасных болезней животных: матер. II Междунар. науч. конф. - Самарканд, 2004. - С. 159 -161.

33. Способ определения состава и получения противомикробных препаратов / И.Т. Сатторов, Н.Р. Сатторов, Ш.А. Турдиев, З.Н. Юсупов, У. Раджабов // Мониторинг распространения и предотвращения особо опасных болезней животных: матер. II Междунар. науч. конф. - Самарканд, 2004. - С. 200 - 201.

34. Турдиев Ш.А. Методы диагностики бруцеллеза животных в Таджикистане / Ш.А. Турдиев, А. Муминов, К.У. Идиев II Актуальные проблемы диагностики болезней животных: матер. II Междунар. конф. - Алматы, 2005. - С. 304-305.

35. Турдиев Ш.А. Сравнительное изучение эффективности роз бенгал антигенов, производимых в отдельных странах / Ш.А. Турдиев, А. Муминов, К.У. Идиев // Актуальные проблемы диагностики болезней животных: матер. II Междунар. конф. - Алматы, 2005. - С. 218 - 219.

36. Турдиев Ш.А. Бруселлези чорвои хурди шохдор - пешгири ва мубори-заи зидди он / Ш.А. Турдиев // Ветеринария. - Душанбе, 2006. - №3. - С. 24 -26.

37. Турдиев Ш.А. Система профилактики бруцеллеза мелкого рогатого скота в Таджикистане с применением вакцины из штамма Рев-1 / Ш.А. Турдиев, A.M. Муминов // Ветеринария. - Душанбе, 2006. - №3. - С. 20 - 23.

38. Турдиев Ш.А. Специфичность рЬз бенгал теста при диагностике бруцеллеза животных / Ш.А. Турдиев // Состояние и преспективы развития ветеринарных биопрепаратов: матер. III Междунар. конф. - Алматы, 2006. - С. 240 -242.

39. Турдиев Ш.А. Экспресс-метод диагностики бруцеллеза у коров / Ш.А. Турдиев II Ветеринария. - Душанбе, 2006. - №3. - С. 18.

40. Турдиев Ш.А. Эффективность комплексной иммунизации овец против бруцеллеза, сальмонеллеза и пастереллеза / Ш.А. Турдиев, К.У. Идиев // Состояние и преспективы развития ветеринарных биопрепаратов: матер. III Междунар. конф. - Алматы, 2006. - С. 243 - 244.

41. Турдиев Ш.А. Бруцеллез мелкого рогатого скота в частном секторе Таджикистана / Ш.А. Турдиев, А.Х. Махмудов // Науч.-техн. бюлл. - Львов, 2009.-№10.-С. 315-318.

42. Турдиев Ш.А. Лечение эндометрита коров / Ш.А. Турдиев, К.У. Идиев // Ветеринария. - Душанбе, 2010. - №4. - С. 25 - 27.

43. Турдиев Ш.А. Совершенствование профилактики бруцеллеза мелкого рогатого скота в Таджикистане / Ш.А. Турдиев // Науч. вестн. вет. медицины: сб. науч. тр. Белоцерковского Национального аграрного университета. - Белая Церковь, 2010. - Вып. №6 (79). - С. 118 - 120.

44. Комплексное лечение острого послеродового эрдометрита коров / Ш.А. Турдиев, К.У. Идиев, Т.М. Давлатмуродов, З.Н. Абдуллоев // Ветеринарные проблемы в Центральной Азии - Продовольственная безопасность: Использование современных методов диагностики и профилактики инфекционных болезней животных: Междунарю науч.-практ. конф. — Душанбе 2011. - С. 25-27.

45. Turdiev Sh.A. Brucellosis of small ruminants in Tadjikistan / Sh.A. Turdiev // International Scientific-Practical Conference «Veterinary Problems of Central Asia - Food Security: The Use of Modern Ways of Diagnostics and Prophylaxis of Infectious Diseases of Animals», devoted to the 20 anniversary of the Independence of the Republic of Tajikistan and the 80th anniversary of Tajik Agrarian University named after Shirinsho Shotemur. - Dushanbe, 2011. - P. 42 - 43.

46. Turdiev Sh.A. Determination bactericidal properties of the preparation "Brovadez plus" against brucellosis / Sh.A. Turdiev // Research and Clinical Application of Traditional Medicine in Xinjiang and Neighboring Countries in Past and Present: Material Conference: abstracts. — Xinjiang, 2011. — P. 39 — 44.

Учебно - методические пособие и рекомендации

47. Турдиев Ш.А. Диагностика, профилактика и ликвидация бруцеллеза сельскохозяйственных животных в Республике Таджикистан: сб. науч. тр./ Турдиев Ш.А. [и др.]. - Душанбе: Эчод, 2007. - 160 с.

48. Турдиев Ш.А. Схема клинических диагностики животных: метод, указания / Турдиев Ш.А., Ходжаев М.Д., Каримов М.М. / ТАУ. - Душанбе, 2009. -30 с.

49. Турдиев Ш.А. Диагностики, лечении и профилактики эндометрита коров: метод, указания / Турдиев Ш.А., Идиев К.У., Абдуллоев З.Н. / ТАУ. -Душанбе, 2011.-15 с.

Учебники для ВУЗов

50. Саттори И. Внутренние незаразные болезни сельскохозяйственных животных : учеб. // Саттори И., Турдиев Ш.А., Сафаров Г. / ТАУ. - Душанбе, 2008.-192 с.

51. Мирзоахметов Ш.Р. Акушерство и гинекология сельскохозяйственных животных: учеб. // Мирзоахметов Ш.Р., Саттори И., Турдиев Ш.А., Идиев К. У. / ТАУ. - Душанбе, 2011. - 208 с.

Формат издания 60x84 1/16, V 2,0п.л, тир.100 экз, заказ А47 Отпечатано в типографии И.П.Чермяниной А.П.

Текст научной работыДиссертация по сельскому хозяйству, доктора биологических наук, Турдиев, Шамсулло Абдуллоевич, Казань

ТАДЖИКСКИЙ АГРАРНЫЙ УНИВЕРСИТЕТ им. Ш. ШОТЕМУРА

05201351296

ТУРДИЕВ ШАМСУЛЛО АБДУЛЛОЕВИЧ

УСОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ МЕР БОРЬБЫ С БРУЦЕЛЛЕЗОМ МЕЛКОГО РОГАТОГО СКОТА В РЕСПУБЛИКЕ ТАДЖИКИСТАН

06.02.02 - ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология,

микология с микотоксикологией и иммунология

На правах рукописи

ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени доктора биологических наук

Научный консультант:

доктор ветеринарных наук, профессор, академик И. Саттори

Душанбе - 2013

ОГЛАВЛЕНИЕ

СОКРАЩЕНИЯ, ПРИНЯТЫЕ В РАБОТЕ 5

ВВЕДЕНИЕ 7

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 13

1.1. Эпизоотология и патогенез бруцеллеза 13

1.2. Диагностика бруцеллеза, дифференциация поствакцинальных и постинфекционных антител 24

1.3. Иммунитет при бруцеллезе, факторы, определяющие его формирование и напряженность 31

1.4. Эффективность специфической профилактики бруцеллеза

MPC 37

1.5. Вакцинация и реиммунизация против бруцеллеза: методы,

дозы и сроки 44

1.6. Одновременная вакцинация несколькими антигенами 54 СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 59

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ 59 РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ 69

3. ЭПИЗООТОЛОГИЯ БРУЦЕЛЛЕЗА MPC В РЕСПУБЛИКЕ ТАДЖИКИСТАН 69

3.1. Ретроспективный анализ распространения бруцеллеза MPC

в общественных и частных хозяйствах Таджикистана 69

3.2. Эпизоотологический мониторинг бруцеллеза MPC и КРС в индивидуальных и фермерских хозяйствах РРП и Хатлонской области 101

3.3. Полевое исследование MPC на бруцеллез в Шахринавском районе РТ 111

4. ДИАГНОСТИКА БРУЦЕЛЛЕЗА КРС 132 Роз бенгал проба с молоком 132

5. СОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ СИСТЕМЫ СПЕЦИФИЧЕСКОЙ ПРОФИЛАКТИКИ БРУЦЕЛЛЕЗА MPC ВАКЦИНОЙ ИЗ ШТАММА РЕВ-1 В РЕСПУБЛИКЕ ТАДЖИКИСТАН 139

5.1. ПОДКОЖНЫЙ МЕТОД 139

5.1.1. Вакцинация молодняка и взрослых животных 140

5.1.1.1. Зависимость серологических реакций у ярок от дозы вакцины из штамма Рев-1 140

5.1.1.2. Влияние дозы вакцины из штамма Рев-1 на напряженность иммунитета у ярок 144

5.1.1.3. Динамика сероаллергическихреакций у овцематок, иммунизированных полной и малой дозами вакцины из штамма Рев-1 147

5.1.2. Ревакцинация 150

5.1.2.1. Определение оптимальной реиммунизирующей дозы для овцематок 150

5.1.2.2. Приживаемость бруцелл вакцинного штамма Рев-1 в организме реиммунизированных малой дозой овцематок 154

5.1.2.3. Реактогенность вакцины из штамма Рев-1 для суягных овцематок 156

5.1.3. Производственная проверка эффективности разных доз вакцины из штамма Рев-1 при иммунизации и ревакцинации

овец 157

5.1.4. Производственная апробация схемы подкожной вакцинации полной и малой и реиммунизации MPC малой дозами вакцины из штамма Рев-1 162

5.2. КОНЪЮНКТИВАЛЬНЫЙ МЕТОД 169

5.2.1. Безвредность и иммунологическая эффективность конъ-юнктивального метода иммунизации лабораторных животных 170

5.2.2. Эффективность конъюнктивальной иммунизации овец вакциной из штамма Рев-1 в экспериментальных условиях 174

5.2.3. Реактогенность вакцины из штамма Рев-1 при конъюнкти-вальной иммунизации суягных овцематок 189

5.2.4. Производственная проверка эффективности конъюнкти-вальной иммунизации овец вакциной из штамма Рев-1 190

6. КОМПЛЕКСНАЯ ИММУНИЗАЦИЯ ПРОТИВ БРУЦЕЛЛЕЗА, САЛЬМОНЕЛЛЕЗА И ПАСТЕРЕЛЛЕЗА 195

6.1. Одновременная вакцинация ярок 195

6.2. Производственная проверка эффективности комплексной вакцинации овец против бруцеллеза, сальмонеллеза и пастерел-

леза 212

7. ЭФФЕКТИВНОСТЬ ПРЕПАРАТА БРОВАДЕЗ ПЛЮС ПРИ ДЕЗИНФЕКЦИИ ЖИВОТНОВОДЧЕСКИХ ПОМЕЩЕНИЙ 217 ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ 222 ВЫВОДЫ 239 ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ 241 ЛИТЕРАТУРА 243 ПРИЛОЖЕНИЕ 284

СОКРАЩЕНИЯ, ПРИНЯТЫЕ В РАБОТЕ

АП - аллергическая проба ВИ - Ветеринарный институт

ВИЭВ - Всероссийский институт экспериментальной ветеринарии

ВОЗ - Всемирная Организация Здравоохранения

ГБАО - Горно-Бадахшанская Автономная область

ГУВ - Главное управление ветеринарии

ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота

ДХ - дехканское хозяйство

д/х - домохозяйство

ИИ - индекс инфицированности

ИФА (ELISA) - иммуноферментный анализ

KP - кольцевая реакция

КРС - крупный рогатый скот

КСА - комплементсвязывающие антитела

м.к. - микробная клетка

МПА - мясопептонный агар

МПБ - мясопептонный бульон

МППБ - мясопептонный печеночный бульон

МППГГА - мясопептонный печеночно-глюкозно-глицериновый агар МППГГБ - мясопептонный печеночно-глюкозно-глицериновый бульон

МРС - мелкий рогатый скот

МСХ - Министерство сельского хозяйства

МТФ - молочно-товарная ферма

МЭБ - Международное эпизоотическое бюро

НПА - научно-производственная ассоциация

НПИЦентр - Национальный патентно-информационный центр

НЛП - научно-производственное предприятие

НПФ - научно-производственная фирма

НЦВД - Национальный центр ветеринарной диагностики

ОАО - открытое акционерное общество

ОХ - общественное хозяйство

ПК - производственный кооператив

ПХ - племенное хозяйство

ПЦР - полимеразо-цепная реакция

РА - реакция агглютинации

РБП - роз бенгал проба

РБПМ - роз бенгал проба с молоком

РДСК - реакция длительного связывания комплемента

РИД - реакция иммунодиффузии

РПГА - реакция прямой гемагглютинации

РРП - районы республиканского подчинения

РСК - реакция связывания комплемента

РТ - Республика Таджикистан

СГВН - Служба государственного ветеринарного надзора ТаджНИВИ - Таджикский научно-исследовательский ветеринарный институт

ТАСХН - Таджикская академия сельскохозяйственных наук ТАУ - Таджикский аграрный университет им. Ш. Шотемура ФАО - Продовольственная и Сельскохозяйственная Организация (ООН)

ФХ - фермерское хозяйство

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность работы. Бруцеллез сельскохозяйственных животных, несмотря на достигнутые успехи в его ликвидации в Таджикистане, все еще представляет серьезную эпизоотологическую и, следовательно, эпидемиологическую проблему. На современном этапе в условиях рыночной экономики при интенсивном развитии мелких товарных, дехканских (фермерских) хозяйств опасность распространения бруцеллеза резко возрастает.

Усовершенствование системы противобруцеллезных мероприятий является главной задачей при ликвидации бруцеллезной инфекции среди сельскохозяйственных животных, которая причиняет не только огромный экономический ущерб животноводческим хозяйствам, но имеет большое социальное значение. Опыт борьбы с бруцеллезом свидетельствует, что в зонах значительного распространения болезни невозможно достичь успеха оздоровительных мер без применения средств специфической профилактики [71, 91, 178, 234, 237, 260, 287, 322].

Введение в систему мероприятий борьбы с бруцеллезом средств специфической профилактики позволило резко повысить эффективность оздоровления животноводства от этой болезни, снизить эпизоотическую напряженность за счет купирования клинических форм проявления инфекции и тем самым улучшить эпидемиологические показатели. Однако широкое применение вакцин в условиях значительного распространения бруцеллеза повлекло за собой возникновение новой проблемы, связанной с поствакцинальной диагностикой: общепринятые методы серологического исследования (РБП, РА, РСК, РДСК) не позволяют дифференцировать вакцинированных животных от больных, что определяет необходимость разработки соответствующих методов [80, 84, 89, 263, 337].

Одним из основных звеньев в общем комплексе противобруцеллезных мероприятий является специфическая профилактика. При этом непре-

менным условием эффективности применения противобруцеллезных вакцин должно быть создание перманентного и достаточно напряженного иммунитета на весь период возможного заражения животных [137].

Для специфической профилактики бруцеллеза мелкого рогатого скота (MPC) в настоящее время наиболее эффективной является вакцина из штамма Рев-1, которая более иммуногенна, чем вакцинные препараты из других штаммов. Однократные прививки молодняка MPC вакциной из штамма Рев-1 обеспечивают напряженный и длительный иммунитет (срок наблюдения - 5 лет), в связи с чем отпадает необходимость ревакцинации взрослых животных [90, 281, 323, 333].

Эпизоотическая обстановка по бруцеллезу MPC, сложившая в овцеводческих хозяйствах Республики Таджикистан (РТ), свидетельствует о том, что при однократной иммунизации вакциной из штамма Рев-1 через 2,5 - 3 года появляются случаи заболевания животных бруцеллезом. Поэтому возникает необходимость проведения мероприятий, повышающих иммунный статус организма животных [177, 179, 298].

В экспериментальных и производственных условиях доказана возможность создания специфического иммунитета у животных при иммунизации их живой противобруцеллезной вакциной различными методами: накожным, внутрикожным, подкожным, пероральным, конъюнктиваль-ным, аэрозольным [11, 77, 178, 181].

Известно, что через слизистую оболочку конъюнктивы глаза в организм могут поступать различные вещества, в том числе и антигены. Кроме того, наличие в ней развитой сети лимфатических сосудов и рецепторов создает благоприятные условия для быстрой мобилизации и активации функций мононуклеарнофагоцитарной системы. При конъюнктивальном методе вакцинации благодаря проникновению антигена по слезно-носовому каналу в носовую полость площадь всасывания резко увеличивается [181].

Важность исследования этих проблем с учетом особенностей системы ведения животноводства в Таджикистане обусловливает актуальность наших исследований, целью которых явилось усовершенствование мер борьбы с бруцеллезом мелкого рогатого скота в Республике Таджикистан.

Для достижения поставленной цели решены следующие задачи:

1. Провести эпизоотологический мониторинг бруцеллеза мелкого и крупного рогатого скота в животноводческих хозяйствах Таджикистана.

2. Определить возможность выявления специфических антител в молоке коров с помощью роз бенгал пробы.

3. Разработать оптимальную схему подкожной и конъюнктивальной иммунизации MPC вакциной из штамма Рев-1.

4. Разработать способ комплексной иммунизации MPC против бруцеллеза, сальмонеллеза и пастереллеза.

5. Определить эффективность препарата Бровадез-плюс при дезинфекции животноводческих помещений.

6. Разработать систему профилактических и оздоровительных мероприятий против бруцеллеза MPC и инфекционного эпидидимита баранов с применением вакцины из штамма Рев-1 в хозяйствах Республики Таджикистан.

Научная новизна. Установлено, что заболеваемость бруцеллезом MPC в частных хозяйствах Таджикистана достигает 5,6%, тогда как в общественных хозяйствах составляет 0,56%. Бруцеллез овец и коз диагностируется как в отдельности, так и в сочетании с сальмонеллезом и пасте-реллезом.

Совершенствованы методы диагностики и специфической профилактики бруцеллеза животных. Разработаны методика исследования молока коров РБП, которая является простой и экономичной в лабораторных и производственных условиях.

Отработана эффективная схема подкожной иммунизации MPC вакциной из штамма Рев-1 в 3 - 5-месячном возрасте, не исследуя на бруцел-

лез, в полной дозе (2 млрд м.к.) и реиммунизации через 2 года в малой дозе (2 млн м.к.) с последующей ежегодной ревакцинацией в малой дозе (2 млн

M.K.).

Разработан эффективный конъюнктивальный метод иммунизации MPC вакциной из штамма Рев-1 в 3 - 5-месячном возрасте, не исследуя на бруцеллез, в полной дозе (2 млрд м.к.) и реиммунизации через 2 года в малой дозе (50 млн м.к.) с последующей ежегодной реиммунизацией в малой дозе (50 млн м.к.).

Изучена возможность комплексной иммунизация MPC - вакциной из штамма Рев-1 и ассоциированной гидроокисьалюминиевой формолвакци-ной против сальмонеллеза и пастереллеза сельскохозяйственных животных, которая является безвредной, не оказывает отрицательного влияния на естественные факторы резистентности организма и способствует формированию клеточного и гуморального иммунитета у привитых животных.

Показано, что препарат Бровадез-плюс является эффективным дезинфицирующим средством для животноводческих помещений при инфекционных патологиях животных.

Научная новизна полученных результатов подтверждена 7 патентами

РТ.

Практическая ценность работы. Предложена и внедрена в хозяйствах Таджикистана система профилактических и оздоровительных мероприятий против бруцеллеза мелкого рогатого скота и инфекционного эпи-дидимита баранов с подкожным и конъюнктивальным методами применения вакцины из штамма Br. melitensis Рев-1 в отдельности и при комплексной иммунизации против сальмонеллеза и пастереллеза.

Разработанный диагностикум и способ исследования молока коров на бруцеллез используются в ветеринарных лабораториях республики.

Материалы исследований включены в 14 систем, инструкций, рекомендаций, наставлений, утвержденных Службой государственного ветеринарного надзора (СГВН) Министерства сельского хозяйства (МСХ) РТ, и в

учебные программы ветеринарного факультета Таджикского аграрного университета им. Ш. Шотемура.

Основные положения диссертационной работы,

выносимые на защиту:

1. Результаты эпизоотологического мониторинга бруцеллеза мелкого и крупного рогатого скота в животноводческих хозяйствах Таджикистана.

2. Способ выявления специфических антител в молоке коров с помощью РБП.

3. Оптимальная схема подкожной и конъюнктивальной иммунизации MPC вакциной из штамма Рев-1.

4. Способ комплексной иммунизации MPC против бруцеллеза, саль-монеллеза и пастереллеза.

5. Результаты определения эффективности препарата Бровадез-плюс при дезинфекции животноводческих помещений.

6. Система профилактических и оздоровительных мероприятий против бруцеллеза MPC и инфекционного эпидидимита баранов с применением вакцины из штамма Рев-1 в хозяйствах РТ.

Апробация работы. Основные положения диссертационной работы доложены на заседаниях ученого совета ТаджНИВИ (1998 - 2006); республиканских конференциях и семинарах-совещаниях (Душанбе, 1998 - 2006); Международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы болезней молодняка в современных условиях» (Воронеж, 2002); Международной научной конференции «Состояние и перспективы развития ветеринарной науки и практики», посвященной государственной программе «Аул» (Алматы, 2003); Международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы болезней животных в современных условиях», посвященной 60-летию ТаджНИВИ (Душанбе, 2003); II Международной конференции «Актуальные вопросы диагностики болезней животных» (Алматы, 2005); III Международной конференции «Состояние и перспективы развития производства ветеринарных биопрепаратов» (Алматы,

2006); Международной научно-практической конференции «Научное и клиническое применение традиционной медицины в Синзяне и соседних странах» (Урумчи, 2011), Международной научно-практической конференции «Ветеринарные проблемы в Центральной Азии - Продовольственная безопасность: Использование современных методов диагностики и профилактики инфекционных болезней животных» (Душанбе, 2011).

Публикации. По результатам исследований опубликовано 39 научных работ, в том числе 1 О-в журналах, рекомедованных ВАК РФ, получены 7 патентов РТ.

Структура и объем диссертации. Работа состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения результатов, выводов, практических предложений, списка литературы и приложения.

Диссертация изложена на 284 странице текста, иллюстрирована 53 таблицами и 47 рисунками. Список литературы включает 373 наименования. В приложение включены материалы, подтверждающие внедрение результатов исследования в практику.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Эпизоотология и патогенез бруцеллеза

Бруцеллез (Brucellosis) - хроническая инфекционная болезнь, протекающая часто с обострениями и выраженными клиническими признаками: аборты, задержания последов, эндометриты, орхиты, эпидидимиты, расстройства воспроизводительной способности животных, поражения опорно-двигательного аппарата [36, 54].

Бруцеллез животных и человека вызывают микроорганизмы, объединенные в род Brucella [354]. По эпизоотологическим и эпидемиологическим признакам (различиям некоторых биологических свойств и способности паразитировать преимущественно в организме определенных видов животных) род Brucella представлен видами: Br. melitensis, Br. abortus, Br. suis (разделены на биотипы - биовары), Br. neotome, Br. ovis, Br. canis, Br. ceti, Br. pinnipedialis, Br. microti, Br. inopinata.

В большинстве зон Казахстана имеет место миграция Br. melitensis на КРС. При типировании 945 штаммов бруцелл, выделенных из абортированных плодов коров в 1965 - 1969 гг., 27,4% отнесено к Br. melitensis, из них к I биотипу - 9,1% [258].

Br. melitensis при миграции на КРС трансформируется в разные биотипы Br. abortus. Процент изменчивости зависит от благополучия стад по бруцеллезу до их заражения. Организм КРС, постоянно изменяя биологические свойства Br. melitensis, не останавливает развития инфекции в стаде и из абортированных плодов коров в одном и том же хозяйстве неограниченное время могут выделяться различные биотипы бруцелл вида abortus [258].

В эпизоотологии бруцеллеза в Грузии козы представляют собой фактор, способствующий распространению инфекции среди КРС